DK165181B - Heterocycliske disulfider fremgangsmaade til deres fremstilling og farmaceutiske midler, der indeholdr disse forbindelser. - Google Patents
Heterocycliske disulfider fremgangsmaade til deres fremstilling og farmaceutiske midler, der indeholdr disse forbindelser. Download PDFInfo
- Publication number
- DK165181B DK165181B DK108786A DK108786A DK165181B DK 165181 B DK165181 B DK 165181B DK 108786 A DK108786 A DK 108786A DK 108786 A DK108786 A DK 108786A DK 165181 B DK165181 B DK 165181B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- het
- carboxy
- substituted
- general formula
- compound
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
- C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
- C07D213/79—Acids; Esters
- C07D213/80—Acids; Esters in position 3
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D235/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings
- C07D235/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, condensed with other rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D235/04—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles
- C07D235/24—Benzimidazoles; Hydrogenated benzimidazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 2
- C07D235/28—Sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
- C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
- C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
- C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
- C07D239/56—One oxygen atom and one sulfur atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
- C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
- C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D249/12—Oxygen or sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
- C07D253/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 not condensed with other rings
- C07D253/06—1,2,4-Triazines
- C07D253/065—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D253/07—1,2,4-Triazines having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms, or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D277/36—Sulfur atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D277/38—Nitrogen atoms
- C07D277/44—Acylated amino or imino radicals
- C07D277/46—Acylated amino or imino radicals by carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
- C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
- C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
- C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
- C07D285/01—Five-membered rings
- C07D285/02—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles
- C07D285/04—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles not condensed with other rings
- C07D285/12—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles
- C07D285/125—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyridine Compounds (AREA)
- Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
DK 165181 B
Den foreliggende opfindelse angår heterocycliske disulfider, en fremgangsmåde til deres fremstilling og farmaceutiske midler, der indeholder disse forbindelser.
Det er kendt,, at den levende organismes af-5 værgemekanismer, der kort betegnes som humoral immunitet og cellulær immunitet, arbejder sammen om at neutralisere fremmedlegemer, der kan fremkalde patogenetiske ændringer og være skadelige, samt at eliminere dem, fortrinsvis mikroorganismer eller neoplastiske 10 celler.
Immunologiske undersøgelser viser, at der findes sammenhæng mellem den på grund af indre eller på grund af ydre faktorer fremkaldte nedgang i immunologisk aktivitet og stigningen i infektions- eller tumor-15 sygdomme. Desuden opstår der andre sygdomme på grund af ændringer af immunsystemets funktioner. Hertil hører f.eks. autoimmunsygdomme eller sygdomme fremkaldt af immunkomplekser. Man har derfor i lang tid søgt efter immunstimulanser, dvs. stoffer, som er i stand til at 20 ændre modtagerens immunologiske aktivitet, fortrinsvis forøge denne, og som på grund af deres høje effektivitet og gode forligelighed tillader en bred anvendelse til understøttelse af kroppens forsvarskræfter. Eksempler herpå, som er blevet afprøvet med hensyn til sti-25 mulering af immuniteten, er BCG og C. Parvum, endvidere ekstrakter af M. tuberculosis og af bruceller.
Disse stoffer giver dog i de koncentrationer, hvori de anvendes, tydelige bivirkninger, såsom f.eks. lokale granulomer i forskelligt omfang. Manglende kend-30 skab til stoffernes nøjagtige art vanskeliggør en systematisk undersøgelse med god reproducerbarhed for de kliniske resultater. Det er derfor ønskeligt i denne sammenhæng at tilvejebringe nye immunstimulanser, som udgør . kemisk definerede stoffer og har ringe toksicitet, som 35 f.eks. "Bestatin”, som for øjeblikket er en intensivt undersøgt lavmolekulær immunstimulans og alment udgør
DK 165181 B
2 et videnskabeligt referencestof.
I US patentskrift nr. 4.378.364 beskrives bestemte bis(h^tero)disulfider, hvis heterocycliske ring også kan være substitueret med carboxylgrupper. Indgivelsen af disse 5 forbindelser til cancerpatienter efter operation skal føre til en forbedring af velbefindendet, aktiviteten, appetitten, vægtstigningen og en mindskning af smerte. Dette vises i forskellige eksempler med 6,61-dithionicotinsyre (CPDS).
Det har nu overraskende vist sig, at forbin- lo delserne ifølge den foreliggende opfindelse har høj im-munstimulerende og immungenopbyggende virkning, således som denne f.eks. kommer til udtryk i DTH-reaktionen på fåreerythrocytter, i aktivering af mononucleære fagocytter og i udpræget CSF-aktivitet. Disse immunstimu-15 lerende virkninger kan f.eks. også iagttages i. en forøgelse af modstandskraften mod infektioner. Desuden har forbindelserne ifølge opfindelsen overraskende cytosta-tisk virkning, f.eks. mod B16-melanom på mus.
Den foreliggende opfindelse angår således en 20 klasse af immunpharmakologisk og cytostatisk effektive stoffer, som er kemisk definerede, har ringe toksicitet og i sig selv eller kombineret med andre aktive stoffer udgør værdifulde lægemidler. Forbindelserne ifølge opfindelsen har en LD^-værdi på mere end 1000 mg/kg ved 25 intravenøs injektion hos mus. Den effektive immunmodu-latoriske og cytostatiske mængde ligger hos hvirveldyr, fortrinsvis varmblodede pattedyr, i intervallet fra ca. 0,5 til ca. 100 mg/kg legemsvægt ved parenteral eller oral indgift, uden at der derved opstår toksiske bivirkninger, og 30 er således særdeles velegnede til behandling af sygdomme i immunsystemet.
Opfindelsen angår således disulfider med den almene formel I'
Het»-S-S-Het' (I·) 35 hvori Het' betyder 1,3-thiazolyl, som er substitueret med Cj.g-alkyl, carboxy-
DK 165181 B
3
Cj-g-alkyl, carboxy eller C2_5-acylamino, hvor acyl betyder en rest af en aliphatisk dicarboxylsyre, 1,2,4rtriazolyl, som er substitueret med hydroxy og phenyl, 1,3,4-thiadiazolyl, som er substitueret med carboxy-C^_4~ 5 alkylthio, dihydro-l,2,4-triazinyl, som er substitueret, med C^g-alkyl, halogeno-C2_4-alkenyl, oxo eller hydroxy, eller benzimidazolyl, som er substitueret med carboxy, idet Het' er substitueret med mindst én direkte eller til 10 en substituent bundet carboxygruppe eller en direkte bundet hydroxygruppe, hvorved disse grupper også kan foreligge i form af et fysiologisk acceptabelt salt.
I betragtning som C^g-alkylsubstituenter kommer ligekædede eller forgrenede alkylgrupper med 1-6, fortrinsvis 15 1-3 carbonatomer, f.eks. methyl, ethyl, n- eller isopropyl, n- eller tert.butyl, fortrinsvis methyl, der eventuelt på sin side kan være substitueret med carboxy.
Som C2_5-acylaminogrupper, hvori acyl betyder en rest af en aliphatisk dicarboxylsyre, kan der f.eks. nævnes 20 3-carboxy-propionyl og 4-carboxy-butyryl.
Som C^-4-alkylthiogrupper substitueret med carboxy kan der f.eks. nævnes methylthio og ethylthio og som haloge-no-C2_4-alkenylgrupper f.eks. vinyl eller allyl, der f.eks. er substitueret med chlor eller brom.
25 Den heterocydiske gruppe Het' kan være substitueret en eller flere gange, fortrinsvis 1 til 3 gange. Der foretrækkes dog sådanne forbindelser, der i den heterocycliske ring eller i den tilkondenserede carbocycliske ring bærer 1 eller 2 substituenter. Af disse substituenter skal mindst 30 én have en sur funktion. Således kan en substituent enten bære en carboxygruppe, eller den kan som carboxy- eller hydroxygruppe også være bundet direkte til den heterocycliske gruppe Het'.
Ifølge opfindelsen er sådanne forbindelser særlig 35 foretrukket, hvor Het· er en thiazolrest, som er substitueret med mindst én carboxyl- eller én carboxymethylgruppe.
DK 165181 B
4
Da forbindelserne med den almene formel 1' bærer sure funktioner, især en carboxygruppe, kan de også foreligge i fonji af deres fysiologisk acceptable salte, f.eks. som alkali- eller jordalkalimetalsalte, fortrinsvis Na-, K-, 5 Ca-, Mg-salte eller f.eks. ammoniumsalte eller substituerede ammoniumsalte, f.eks. NH4+, ethanolammonium,. diethanolam-monium, trialkylammonium, f.eks. triethylammonium, tetrakyl-ammonium, salte med basiske aminosyrer, f.eks. lysin og arginin.
10 Opfindelsen angår endvidere en fremgangsmåde til fremstilling af forbindelserne ifølge opfindelsen med formlen I·.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at en forbindelse med den almene formel II 15
Het *-SH (II) hvor Het' har den ovenfor anførte betydning, ved omsætning med et oxidationsmiddel omdannes til forbindelserne ifølge opfindelsen.
20 Som oxidationsmidler kan f.eks. nævnes oxygen,· brintoverilte, undertiden med tilsætning af jernsalte, som f.eks. Mohr'sk salt eller ved tilsætning af baser, som f.eks. natriumhydroxid, kaliumhydroxid, natriumhy-drogencarbonat eller kaliumhydrogencarbonat, organiske 25 persyrer, som f.eks. pereddikesyre, perbenzoesyre eller m-chlorbenzoesyre, jod eller brom i form af grundstof, undertiden med tilsætning af baser, som f.eks. natriumhydroxid eller kaliumhydroxid, FeCl^ eller K^tFeiCNjg].
Som oxidationsmidler kan fortrinsvis nævnes 30 oxygen, brintoverilte, organiske persyrer, som feks. pereddikesyre, perbenzoesyre og m-chlorperbenzoesyre og jod i grundstofform. Oxidationen foregår fortrinsvis i vand eller et organiske opløsningsmiddel, f.eks. methanol, ethanol, iso-propanol, eddikesyreester og halogene-35 rede carbonhydrider, f.eks. dichlormethan og chloroform.·
Det kan også anvendes en blanding af disse opløsnings-
O
5
DK 166181 B
midler. Når der arbejdes med ilt, brintoverilte og persyrer, bør anvendelse af opløsningsmidler, der som be-kend^ kan danne eksplosive peroxider, f.eks. ether, te-trahydrofuran, dioxan, acetone, methylethylketon, iso-5 propanol osv., undgås.
Forbindelserne ifølge opfindelsen kan også fremstilles ved, at en forbindelse med den almene formel III
Het'-X (III) 10 hvor Het' har den ovenfor anførte betydning, og X er en reaktiv fraspaltningsgruppe, såsom halogen, fortrinsvis chlor eller brom, såsom -0S02R, hvor R fortrinsvis er methyl, trifluormethyl, phenyl, tolyl eller naphthyl, 15 såsom -0P0(0R'2)/ hvor R' fortrinsvis er phenyl, omsættes med Me2S2, hvor Me er et alkalimetal, fortrinsvis natrium.
Desuden kan forbindelserne ifølge opfindelsen fremstilles ved, at en forbindelse med den almene formel 20
Het'SS02Me (IV) hvor Het' og Me har de ovenfor anførte betydninger, omsættes med jod i et vandigt medium.
25
Omsætningen kan ske véd en temperatur mellem ca. -40°C og opløsningsmidlets eller opløsningsmiddelblandingens kogepunkt, fortrinsvis mellem ca. -10 og ca.
+40°C.
30 Det aktive stof kan indgives alene eller kom bineret med et eller flere, fortrinsvis et andet lægemiddel, som på gunstig måde påvirker infektioner, som f.eks. er opstået på grund af bakterier, svampe eller vira, samt tinnor lidelser. De aktive stoffer ifølge opfindelsen kan 35 indgives både parenteralt og oralt. Til parenteral indgift anvendes opløsninger eller suspensioner af det aktive stof i et pharmaceutisk acceptabel bærer, fortrins-
DK 165181 B
6 vis planteolie, såsom jordnøddeolie eller sesamolie, samt alkoholiske opløsninger af det aktive stof, f.eks. ethanol, pjropandiol eller glycerol eller i blandinger af de ovennævnte opløsningsmidler. Til fremstilling af vandi-5 ge opløsninger anvendes det aktive stof fortrinsvis i form af vandopløselige, fysiologisk acceptable salte. Præparaterne kan indeholde de gængse hjælpe- og bærestoffer. Disse er f.eks. fyldstoffer, emulgatorer, glide- og pufferstoffer og smagskorrigende stoffer.
10 Opfindelsen angår derfor ligeledes farmaceutiske midler, som er ejendommelige ved, at de indeholder en forbindelse med den almene formel I', og som er anvendelige til immunstimulation, immungenopbygning og cytostatisk behandling.
15 Nedenfor vil forbindelsernes indvirkning på immunreaktionen hos mus og deres immunstimulerende virkninger ved forskellige in-vivo-standardmetoder eksempelvis blive belyst. De fremdragne forskellige prøvemetoder er, som bekendt, særlig velegnede til bedømmelse af 20 immunstimulerende stoffer og deres virkeevne.
Forsøg 1
Virkning på den cellulære immunologiske reaktion af den forsinkede type mod fåreerythrocytter (delayed type hy-25 persensitivity, DTH)
Grupper på 5 NMRI-hunmus med en vægt på 18-20 g 6 9 får intravenøst enten 10 eller 10 røde blodlegemer fra får pr. dyr. Fåreerythrocytter regnes inden for immunologien for en standardprøvesubstans (antigen) til udløs-30 ning af cellulære og humorale immunreaktioner. Især giver denne prøve oplysning om T-celle-afhængige komponenters (T-hjælperceller) funktionsdygtighed i immunsyste-, met. Den ifølge udførelseseksempel 8 opnåede prøvesubstans [bis-(5-carboxymethyl-4-methyl-thiazol-2-yl)-di-35 sulfid] indgives to gange dagligt intraperitonealt på dagene -3, -2, -1 og 0 i koncentrationer på 20, 30 og 40 mg/kg i
DK 165181 B
7 fysiologisk kogsaltopløsning. Efter 5 dage injiceres alle dyrene hver med 2 x 108 fåreerythrocytter i fodsålen, og 24 tiper senere måles fodens opsvulmen. Fodopsvulmnin-gen udløses ved hjælp af en hudreaktion af den forsin-5 kede type (delayed type hypersensitivity, DTH) og er, som fagmanden vil vide, et mål for den cellulære immunreaktion [F.M. Collins, og G.B. Mackaness, J. Immunol.
101, 830-845 (1968)]. Resultaterne i tabel I viser, at der ved indgift af det ifølge opfindelsen opnåede g 10 stof f.eks. efter immunisering med 10 fåreerythrocytter kommer en forøgelse af den cellulære immunreaktion.
Et maksimum for stimuleringen kan i denne forsøgsrække iagttages ved indgift af 30 mg/kg prøvestof.
15 Tabel I
Immunisering af mus med fåreerythrocyt-virkning på den cellulære immunreaktion (DTH-reaktion) 2 x daglig i.p. indgift % fodopsvulmning ved på dag -3, -2, -1, 0 af_10** erythrocytter 20 pbs1 24,3 + 1,3 20 mg/kg 28,3 + 6,7
Prøvestof 30 mg/kg 36,5 + 6,5 40 mg/kg 31,4 + 8,7 25 1 PBS = phosphatpufret kogsaltopløsning (NaCl : 8000 mg/1, KC1 : 200 mg/1, Na2HPC>4.2H20: 1440 mg/1, KH2P04: 200 mg/1.
Forsøg 2 30 Indflydelse på stimuleringen af uspecifik immunitet -aktivering af mononucleære fagocytter
Her undersøges indflydelsen af den ifølge udførelseseksempel 8 opnåede prøveforbindelse på stimuleringen af peritonealmakrofager på 6-8 uger gamle NMRI- 35 -mus. Unge hunmus får ad parenteral eller oral vej prø- · veforbindelsen i en dosis på 25, 50, 100 og 200 mg/kg.
o 8
DK 165181 B
Kontrolgruppen får pufret kogsaltopløsning. Tre dage efter injektionerne aflives musene, og dyrenes perito-nealmakrofager undersøges med henblik på deres aktiveringstilstand. Som mål for makrofagaktiveringen bestem-5 mes sekretionen af de lyosomale enzymer (β-galactosi-dase, β-glucuronidase, N-acetyl-3-D-glucosaminidase).
På den anden side kan man i sammenlignelige makro- fagkulturer undersøge pinocytose ved optagelse af kol-198 loidt guld ( Au) - som det vil være fagmanden bekendt.
10 Størrelsen af det oxidative stofskifte ved makrofagerne gælder som et yderligere mål for deres aktiveringstilstand. Denne aktivitet måles ved hjælp af biolumater ved bestemmelse af kemoluminescensen.
Hertil dyrkes enten i petriskåle med en diameter 15 på 30 mm . 3 x 10^ makrofager med 1 ml TC 199-dyrknings- g medium eller 10 makrofager med lOO^uliter i rundbuede polyethylenglas (til bestemmelse af kemoluminesens) ved 5% C02 og 37°C.
Efter 1 times inkubering vaskes kul-20 turerne for at fjerne svømmende celler. Kemoluminescensen (reagensglaskultur) bestemmes så direkte, medens petriskålene på ny inkuberes i 24 timer ved 37°C, og derefter bestemmes enzym- og pinocytoseaktiviteten i kulturerne.
Der fås nedenstående resultater.
25
Tabel II
Virkning på det oxidative stofskifte ved muse-peritoneal-makrofager (kemoluminescens i RLE /15 minutter) .
1 x indgift 30 af _intraperitonealt_oralt_ PBS 2,97 + 0,28 x 105 3,65 + 0,81 x 105
Prøve- 25 mg/kg 7,87 + 0,28 x 105 6,41 + 0,42 x 105 forbin-50 mg/kg 9,72 +0,82 x 105 8,99 +0,39 x 105 delse 100 mg/kg 12,85 + 2,37 x 105 11,85 + 0,92 x 105 35 c c 200 mg/kg 24,40 + 3,39 x 10° 15,60 + 1,98 x 10° 1 RLE = relative lysenheder 9
DK 165181 B
O
Den parenterale’ og den orale behandling af NMRI-mus med den ifølge eksempel 8 fremstillede prøveforbindelse stimulerer makrofagaktiviteten og har dermed *en immunitetsstimulerende virkning. Således forhø-5 jes det oxidative stofskifte ved makrofager med dannelsen af iltradikaler og det dermed forbundne målelige lys tydeligt. Ved doseringer på 25 mg/kg og opad fremkommer en dosisafhængig stigning af makrofagaktiviteten både ved parenteral og ved oral indgift.
10 Af tabel IH fremgår, at majcrofager fra kon trolmus kun afgiver ringe mængder af lysosomale enzymer (β-glucuronidase, β-galactosidase, N-acetyl-3-D-glu-cosaminidase) i kulturoverfasen. Mononucleære fagocytter fra mus, der behandles parenteral eller oralt med 15 prøveforbindelsen i 72 timer, udsondrer klart mere af de ovenfor anførte sure hydrolaser (β-Glu, β-Gal, N-Ac-Glu) og udviser en dosisvirkningskurve, som ved alle målte enzymer er kontrollerne overlegne. Det fremgår, at prøveforbindelsen har en stimulerende virkning på makrofagakti-20 viteten og bidrager til en forøgelse af enzymfrigivelsen.
Tabel III
Prøveforbindelsens indflydelse på lysosomale hydrolasers enzymfrigørelse fra muse-peritonealmakrofager 25 1 x i»p./p»o. β-Glu β-Gal N-Ac-Glu indgift_._mU/ml_mU/ml_mU/ml PBS 755/ 484 1306/1702 1238/1168
Prøve- 25 mg/kg 1001/ 897 2584/4917 2786/1947 for- 50 mg/kg 1370/1133 11058/9179 3315/2862 30 bin- 100/mg/kg 1791/1593 17596/13195 4305/3676 delse 200 mg/kg 2136/1886 22351/17357 6548/5621
Den kvantitative bestemmelse af pinocytoseak- tiviteten ved mononucleære fagocytter sker ved hjælp af
Davies m.fl.'s metode [P. Davies, A.C. Allison og A.D.
Haswell, Biochem. Biophys. Res. Com. 52, 627 (1973)].
35 198
DK 165181 B
o 10
Hertil anvendes radioaktivt kolloidt guld ( Au) med en partikelstørrelse på 20 nm og en specifik aktivitet på 4-12 mCi/mg Au. Resultaterne i tabel IV viser virknin-* gen af den ifølge eksempel 8 opnåede prøveforbindelse på 198 5 endocytoseydelsen. Pinocytosen fra kolloidt guld ( Au) ved hjælp af muse-peritonealmakrofager fra dyr behandlet med forbindelsen ifølge opfindelsen er i sammenligning med makrofager fra ubehandlede dyr signifikant og dosisafhængigt forhøjet.
10
Tabel IV
Prøveforbindelsens virkning på musemakrofagers pinocytose- ydelse 1 x indgift af_intrapsritonealt_oralt_ 15 PBS 0/286 x 10^ cpm 0,198 x 10^ cpm
Prøve- 25 mg/kg 0,341 " " 0,272 for- 50 mg/kg 0,396 " " 0,358 bin- 100 mg/kg 0,462 " * 0,416 " " delse 200 mg/kg 0,587 " " 0,506 20
Forsøg 3
Forøgelse af modstandskraften hos Balb/c-mus mod infektion med Candida albicans (a) Profylaktisk behandling: 25 Balb/c-mus behandles i 4 dage med en dosering på 2 x 60 mg/kg/dag intraperitonealt med prøveforbindelsen (forbindelsen ifølge udførelseseksempel 8). 24 timer efter sidste indgift med prøveforbindelsen inficeres disse dyr og kontroldyrene, som har fået fysiologisk kog-30 saltopløsning i samme mængder og med samme intervallet, intravenøst med Candida albicans (5 x 10^ CFU/mus). Ud fra dødeligheden efter infektionen kan tilsvarende den gennemsnitlige overlevelsestid beregnes. Af dyrene i kontrolgruppen dør 50% efter 9,7 dage, og gruppen der er 35 behandlet med prøveforbindelsen har en gennemsnitlig o-verlevelsestid på 16,1 dage. Inden for det valgte ind- o 11
DK 165181 B
giftsskema med de tilsvarende doseringer (profylaktisk indgift) medfører prøveforbindelsen en signifikant forhøjelse af Balb/c-mus' resistens mod Candida albicans.
5 Tabel V
Gennemsnitlige overlevelsestider efter infektion med 5 x 10J CFU C. albicans Forbindelse Gen.sn. over- 2x60 mg/kg/ levelsestid Konfidensområde 10 dag i.p._(dage)_95%_99% .
PBS 9,7 8,4-10,6 7,8-10,9
Prøveforbindelse 16,1 14,8-17,4 14,4-17,8 (b) Terapeutisk behandling 15 Ved den terapeutiske behandling af en kronisk infektion med Candia albicans inficeres Balb/c-hunmus (15/gruppe) på dag 0 intravenøst med Candida albicans 5 (1 x 10 CFU/mus). Efter gennemført infektion behandles dyrene 8 på hinanden følgende dage (dag 3-10) hver 20 med 60 mg/kg af prøveforbindelsen (forbindelsen ifølge udførelseseksempel 8). Kontroldyrene får injektion med fysiologisk kogsaltopløsning. På dagene 8, 14 og 21 tages der urinprøver fra dyrene, og kimtallet bestemmes.
På dag 30 aflives dyrene, og kimtallet og nekrosedannel-25 se i nyrerne bestemmes. I tabel VI ses, at prøveforbindelsen ved terapeutisk indgift tydeligt reducerer alle den kroniske Candida albicans-infektions parametre (kimtal i urin og nyrer og nekrosedannelse) og dermed påvirker sygdommen terapeutisk. Medens der hos kontrol-30 dyrene kan påvises en høj procent bakterier i urinen, sænkes bakterietallet signifikant hos de behandlede dyr.
Også bakteriekolonidannelsen i nyrerne reduceres ved hjælp af terapien fra 63 til 27%, og samtidig forringes nekrosedannelsen fra 87 til 10%.
35
O
12
DK 165181 B
Tabel VI
Terapeutisk behandling af en kronisk Candida albicans- infektion (1 x 10 CFU) *
Forbindelse Nyrer m. Nekro- 5 60 mg/kg Dyr pos. bak- tiske i.p. med positivt resultat terieres. nyrer
Dag 3-10 Dag 8 Dag 14 Dag 21_Dag *30 Dag 30 PBS 4/15 8/15 10/15 19/30 26/30 (27%) (53%) (67%) (63%) (87%) 10 Prøvefor- 1/15 1/15 4/15 8/30 3/30 bindeIse (7%) (7%) (27%) (27%) (10%)
Forsøg 4
Stimulering af DTH-reaktionen med forbindelserne iføl-15 ge opfindelsen NMRI-Mus behandles med forbindelserne ifølge opfindelsen som i forsøg 1.
Som prøve til konstatering af immunstimulationen afprøves DTH-reaktionen.
20
Tabel VII viser prøveforbindelsens relative funktion i forhold til forbindelsen ifølge eksempel 8f hvis maksimale aktivering svarer til 100%.(difference mellem kontrol og stimulation) . Det fremgår af tabellen, at DTH-reaktionen hos de med prøveforbindelserne forud 25 behandlede dyr er klart kraftigere end hos de tilsvarende kontroldyr.
30 35
O
13
DK 165181 B
Tabel VII
Forbindelse Dosis DTH-reaktion iflq. eks._(mq/kq) Indgift_(SRBC)_ 2 20 1 x i.p. dag 0 88% 5 5 200 " 61% 6 100 " 100% 8 100 " * 100% 10 10 " 112% 12 100 " 96% 10 13 200 " 147% 14 100 " 118%
Forsøg 5
Stimulering af makrofagaktivitet med forbindelser ifølge 15 opfindelsen NMRI-Mus behandles med forbindelserne ifølge opfindelsen som beskrevet i forsøg 2.
Som prøve til konstatering af immunstimulationen afprøves makrofagernes funktion (kemoluminescens og 20 enzymakti'vitet) .
Tabel VIII viser prøveforbindeIsernes relative aktivitet i forhold til forbindelsen ifølge eksempel 8, hvis maksimale aktivering (difference mellem kontrol og strimulation) svarer til 100%. Af tabellen fremgår, at 25 i sammenligning med makrofager fra ubehandlede dyr, er disse celler også kraftigt stimulerede med alle prøveforbindelser med hensyn til kemoluminescensreaktion og deres indhold af lysosomale enzymer.
30 35
O
DK 165181 B
14
Tabel VIII
Forbindelse - iflg. eks. Makrofaqaktivitet Λ (100 mg/kq i.p.)_Kemoluminescens Exocytose 5 1 30% 48% 2 72% 53% 5 37% * 45% 6 26% 33% 8 100% 100% 10 10 66% 21% 12 39% 54% 13 81% 77% 14 97% 93% 15 Forsøg 6
Stimulering af infektionsforsvar mod Candida albicans-in-fektioner ved profylaktisk indgift af forbindelserne i-følge opfindelsen
Balb/c-Mus behandles med forbindelserne ifølge 20 opfindelsen som beskrevet i forsøg 3a.
Som vist i tabel IX stiger den gennemsnitlige overlevelsestid for musene efter C. albicans-infektion signifikant i sammenligning med en ubehandlet kontrolgruppe .
25 Tabel IX
Dosis
Eks. (mg/kg) Relativ forlængelse af gen.sn.
& nr. 1 x i.p. dag_overlevelsestider efter infektion 1 1 144 30 2 1 123 5 10 142 6 10 145 8 1 130 10 10 135 35 12 10 205 14 10 107
O
DK 165181 B
15 * = Gennemsnitlig overlevelsestid for kontrolgruppen = 100.
Forsøg 7 5 Påvirkning af stimulationen af tumorforsvar mod B16-melanom Hos C57Bl/6-mus (10 dyr/gruppe) med en vægt på 5 18-20 g induceres med 2 x 10 levende B16-melanomceller vækst af en primærtumor. Efter udformning af en bestemt tujnorstørrelse (0,65 cm i diameter) fjernes primærtumoren.
10 De ubehandlede dyr dør derpå af metastaser i lungerne.
Efter tumorinduktionen behandles dyrene intraperitonealt på dagene 3, 5, 7, 9, 11 og 13 efter amputation af primærtumoren med 50, 100 og 200 mg/kg af den ifølge eksempel 8 opnåede prøveforbindelse. Ud fra dødeligheden efter 15 amputation af primærtumoren på grund af udvikling af lungerne tas taser kan tilsvarende den gennemsnitlige overlevelsestid beregnes. Derefter dør dyrene i kontrolgruppen med 50% efter 26 dage. Grupperne, der er behandlet med prøveforbindelsen udviser (jfr. tabel X) med tilsvarende 20 doseringer en forøgelse af den gennemsnitlige overlevelsestidsforlængelse på 43, 40 og 35 dage.
Tabel X
Terapeutisk tumorbehandlinq ved B16-melanom 25 Indgift 6 x i.p. (mg/kg) Gennemsnitlig overlevelsestid dag 3, 5, 7, 9, 11 og 13_(dage)_ PBS 26
Prøve- 50 43 forbin- 100 40 30 delse 200 35
Forsøg 8
Indflydelse på knoglemarv skolonidannelse
Her undersøges indflydelsen af den ifølge eksem-35 pel 8 opnåede prøveforbindelse på stimulationen af knoglemarvskolonier hos 6-8 uger gamle B2D2Fl-mus.
O
DK 165181 B
16
Små hunmus får prøveforbindelsen intraperito-nealt i doser på 2,5 og 5 mg/kg. En dag senere aflives dyrene/ knoglemarvscellerne isoleres og dyrkes efter al-mindelig kendte metoder [Metcalf, Immunology 21, 427 5 (1971), og Stanley m.fl., j. Exp. Med. 143, 631 (1979)].
Til udvikling af knoglemarvskolonierne anvendes der som MCSF“-kilde (Colony stimulating factor) som sædvanlig L-celle-væskeoverfase (15%) . Som det fremgår af tabel XI, fører en indgift én gang på 2,5 eller 5 mg af prøve-10 forbindelsen til en tydelige stigning i kolonidannelsen i knoglemarvsceller både med og uden tilsætning af CSF (Colony stimulating factor) in vitro.
Tabel XI
15 In-vivo-effekt på knoglemarvskolonidannelsen
Prøveforbindelse Antal knoglemarvskolonier (dag 8) 1 x i.p. (mg/kg)_med CSF (15%)_uden CSF (15%) PBS 41+6 0
Prøvefor- 2,5 94+11 24+2 20 bindelse 5,0 163 + 8 44 + 5
Opfindelsen vil i det følgende blive nærmere forklaret ved hjælp af eksempler .
25
Eksempel 1
Bis- (3-Hydroxy-l-phenyl-l, 2,4-triazol-5-yl) -disulf id 2,9 g (15 mmol) 3-hydroxy-l-phenyl-5-mercapto--1,2,4-triazol tilsættes til 100 ml methanol og tildryp-30 pes ved stuetemperatur 3,2 ml (33 mmol) 35%'s hydrogen-peroxid i methanol. Opløsningen bliver først gul, og efter 20 minutter udfældes forbindelsen langsomt.
Efter 4 timer frasuges bundfaldet, vaskes med methanol og tørres.
35 Udbytte: 2,1 g = 72% af det teoretiske.
Smeltepunkt: 232°C (dekomponering) .
O
DK 165181 B
17
NMR (dg-DMSO)/) : 11,58 ppm, s, 2H, OH
7,38 ppm, m, 10H aromat. H.
*
Eksempel 2 5 Bis- (5-carboxy-benzimidazol-2-yl) -disulfid
Fremstilling analogt med eksempel 1 ud fra 2--mercaptobenzimidazol-5-carboxylsyre.
Udbytte: 70% af det teoretiske.
Smeltepunkt: 235-238°C.
10 NMR (dg-DMSO)έ : 9,4 ppm, d, NH
7,4-8,4 ppm, m, aromatisk H.
Eksempel 3 15 Bis-[4-(2-chlorallyl)-6-hydroxy-5-oxo-4,5-dihydro-l,2,4--triazin-3-yl]-disulfid 2,2 g 4-(2-chlorallyl)-6-hydroxy-3-mercapto-5--oxo-4,5-dihydro-l,2,4-triazin opløses i 25 ml methanol, der tildryppes ved stuetemperatur 0,86 ml 35% H2O2# hvor-20 efter der omrøres en time, hvorved produktet udkrystalliseres. Det suges fra, vaskes med methanol og lufttørres. Udbytte: 1,2 g.
Smeltepunkt: 204-205°C (dekomponering).
NMR (d^-DMSO) b : 12,7 ppm (br. s, OH)
O
25 5,5 ppm (dd, = CH2) 4,8 ppm (s, CH2N).
Eksempel 4
Bis-(6-hydroxy-2-methy1-5-OXO-2,5-dihydro-l,2,4-triazin-30 -3-yl)-disulfid 1,59 g 6-hydroxy-3-mercapto-2-methyl-5-oxo-2,5--dihydro-1,2,4-triazin opløses i 30 ml methanol, der tildryppes ved stuetemperatur 0,43 ml 35% H2O2, hvorefter der omrøres i 30 minutter. Opløsningen klares med kul, 35 inddampes, og remanensen udrives med isvand. Bundfaldet filtreres fra, vaskes med isvand, lufttørres, suspen-
O
DK 165181 B
18 deres i methanol, 'filtreres fra, vaskes med lidt methanol og tørres i vakuum.
, Udbytte: 0,8 g-
Smeltepunkft: 220°C (dekomponering).
5 NMR (dg-DMSO) 6 : 3,87 ppm (s, CH.^) .
Eksempel 5
Bis-(6-hydroxy-4-methyl-5-oxo-4,5-dihydro-l,2,4-triazin--3-yl)-disulfid 10 3,7 g 6-hydroxy-3-mercapto-4-methyl-5-oxo-4,5- -dihydro-l,2,4-triazin opløses i 400 ml methanol og 38 ml vand. Ved stuetemperatur tildryppes 2,5 ml 35% H202.
Efter omrøring i 30 minutter inddampes til 100 ml, bundfaldet suges fra og tørres.
15 Udbytte: 1,5 g.
Smeltepunkt: 237°C.
NMR (CF3C02D) Ss 3,67 ppm s, 2H, OH
3,8 ppm s, 6H, CH^ 20 Eksempel 6
Bis-(5-carboxymethyl-4-methyl-l,3-thiazol-2-yl)-disulfid 23,62 g 5-carboxymethyl-4-methyl-2-mercapto-l,3-thiazol opløses i 250 ml methanol, filtreres, hvorefter der langsomt under afkøling i vandbad tilsættes 12,5 ml 25 35% H202. Derefter omrøres 30 minutter i vandbad og 2 timer ved stuetemperatur. Efter filtrering og vask med methanol isoleres 22,8 g af den i overskriften nævnte forbindelse.
Smeltepunkt: 16 2°C.
30 NMR (CF3<X>2D) S: 2,6 ppm, s, 6H, CH3 4,2 ppm, s, 4H, CH2
Eksempel 7
Bis-(5-carboxymethyl-l,3-thiazol-2-yl)-disulfid 35 0,88 g 2-mercapto-l,3-thiazol-5-yl-eddikesyre opløses i ca. 10 ml methanol og der tilsættes under omrø-
O
DK 165181 B
19 ring ved stuetemperatur 0,5 ml 33% E^C^opløsning. Efter en halv time afkøles krystalsuspensionen, filtreres, og filtferingsremanensen tørres. Udbytte: 0,6 g med et smeltepunkt på 150°C. Sammenligning ved tyndtlagschromato-5 grafi på Merck-silidagelplader viser fuldstændig omsæt ning. (Rf: 0,3, elueringsmiddel: eddikesyreester/ethanol/ vand/myresyre = 65:25:10:1).
Eksempel 8 10 Bis-(4-carboxymethyl-l,3-thiazol-2-yl)-disulfid Når 1,75 g 4-carboxymethyl-2-mercapto-l,3-thiazol omsættes analogt med eksempel 7, fås 0,95 g af den i overskriften nævnte forbindelse.
Smeltepunkt: 163-165°C.
15 NMR (DMSO-dg) 6 : 3,7 ppm, s, 4H, CH2
7,6 ppm, s, 2H, CH
9,4 ppm, s, 2H, CC^H
Eksempel 9 20
Bis-(2-carboxymethylthio-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-disulfid 1,4 g (2-mercapto-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-mer- captoeddikesyre opløses i 10 ml methanol, og der tildryp- pes under isafkøling 0,65 ml 35% H202. Der omrøres i en time ved stuetemperatur, hvorpå der filtreres. Krystal-25 lerne vaskes med lidt methanol og tørres i vakuum.
Udbytte: 1,3 g.
Smeltepunkt: 179°C (dekomponering).
NMR (DMSO-dg) 6 : 13 ppm, bred, C02 4,2 ppm, s, CEL·.
30 A
Eksempel 10
Bis-(5-carboxy-l,3-thiazol-2-yl)-disulfid 21 g 2-mercapto-l,3-thiazol-5-carboxylsyre opløses i 100 ml methanol under svag opvarmning. Under isafkø- .
35 ling tilsættes langsomt 10,7 ml 35% H202, hvorefter der
O
DK 165181 B
20 omrøres i 45 minutter ved stuetemperatur. Det frasuges, vaskes med methanol og tørres i vakuum.
4 Udbytte: 21,5 g
Smeltepunkt: 280°C (dekomponering) .
5 NMR(DMSO-d -) 6: 8,48 ppm, s, thiazol-H.
O
Eksempel H
Bis—(5-c^rboxy-4-methyl-lr3-thiazol-2-yl)-disulfid 1,75.g (10 mmol) 4-methyl-2-mercapto-lf3-thiazol-10 -5-carboxylsyre opslæmmes i 50 ml methanol, og der tilsættes under isafkøling 0,86 ml 35% H202, hvorefter der omrøres en time ved stuetemperatur. De dannede krystaller suges fra, vaskes med lidt methanol og tørres i vakuum.
15 Udbytte: 1,52 g.
Smeltepunkt: 240-241^C (dekomponering).
NMR (DMSO-dJ S * 2,6 ppm, s, CH,.
O 3
Eksempel 12 20 Bis- (4-carboxymethyl-5-methyl-l, 3-thiazol-2-yl) -disulfid
Trin 1: 4-brompropionyleddikesyremethylester 22 g propionyleddikesyrernethylester opløses i 60 g CH2C12, og der tildryppes 8,7 ml Br2 i 30 ml CH2C12, hvorefter der omrøres i 1,25 time ved stuetemperatur.
25 Herefter tilsættes endnu engang 0,66 ml Br„ i 5 ml CH.C1-, ' Δ 2. Δ og der røres i yderligere 1,25 time. Der vaskes med 3 x 50 ml H2o, 1 x med 20 ml mættet NaHC03 og 2 x med 50 ml H20, tørres over Na2SO^, hvorpå der inddampes. Herved fås 38,6 g olie.
30 Trin 2: (2-Mercapto-5-methyl-l,3-thiazol-4-yl)-eddikesyrerne thylester 30,1 g af olien fra trin 1 opløst i 80 ml ethanol tildryppes til en opløsning af 24 g frisk fremstillet ammoniumdithiocarbaminat i 200 ml ethanol/200 ml vand.
35 Der omrøres i 2,5 timer, hvorpå der tilsættes 7,5 ml trifluoreddikesyre. Efter en times omrøring inddampes
O
DK 165181 B
21 til tørhed, og der tilsættes 200 ml CHCl^/I^O (= 1:1) .
Der vaskes yderligere to gange med vand, tørres over natriumsulfat, hvorefter der koncentreres. Den faste re-$ manens opslæmmes i ether og frafiltreres.
5 Udbytte: 8,9 g.
Smeltepunkt: 149°C (dekomponering) *
NMR (dg-DNSO) 6 · 11/0 ppm, bred, SH
3.7 ppm, s, OCH^ 3,5 ppm, s, CH2 10 2,1 ppm, s, CH3·
Trin 3: (2-Mercapto-5-methyl- 1,3-thiazol-4-vl)-eddikesyre 1,98 g af forbindelsen fra trin 2 opløses under opvarmning i 20 ml methanol. Der omrøres i 40 minutter ved stuetemperatur, tilsættes 50 ml vand, hvorpå der 15 syrnes med koncentreret saltsyre til pH 1,0. Efter en times omrøring under isafkøling suges forbindelsen fra og vaskes chloridfri med isvand. Tørring i vakuum over P205 giver 1,67 g.
NMR (dg-DMSO) 6 : 13,9 ppm, bred, CC>2H 20 3,5 ppm, s, CH2 2.08 ppm, s CH3·
Trin 4: Bis- (4-carboxymethyl-5-methyl- 1,3-thiazol-2-yl) --disulfid 430 mg af forbindelsen ifølge trin 3 suspende-25 res i 20 ml methanol og opløses under opvarmning. Ved stuetemperatur tildryppes 0,25 ml 35%'s H202, hvorefter der omrøres i en time. Efter inddampning til ca. 5 ml filtreres blandingen og vaskes med lidt isafkølet methanol.
Udbytte: 280 mg.
30 NMR (dg-DMSO) £: 3,65 ppm, s, CH2 2,37 ppm, s, CH3
Eksempel 13
Bis-(5-Carboxymethyl-l,3-thiazol-2-yl)-disulfid 35 0,8 g 2-mercapto-5-carboxymethyl-l,3-thiazol opløses i 10 ml methanol, og under omrøring tildryppes
DK 165181 B
22 O .
0,5 ml 33%’s H202-opløsning. Der omrøres natten over, og det udkrystalliserede produkt filtreres fra.
Udbytte: 0,6 g med smeltepunkt 150°C (dekom-ponering), tyndtlagschromatografisk ensartet (Rf = 0,3, 5 kiselgel, elueringsmiddel: eddikesyreester/ethanol/vand/. myresyre = 60:25:15:1.
IR (KBr-tablet) $ : 1710 cm (COOH).
1H-NMR (dg-DMSO) £i 3,8 ppm (s, CH2»thiazol, 2H) 7,6 ppm (s, thiazol-4H, IH).
10
Eksempel 14
Bis-(4-Carboxy-l,3-thiazol-5-yl)-disulfid 5 g bis-(4-methoxycarbonyl-l,3-thiazol-5-yl)--disulfid suspenderes i 100 ml methanol. Dertil tilsæt-15 tes en opløsning af 1,5 g NaOH i 20 ml H20, hvorefter der opvarmes en time under tilbagesvaling. Efter at opløsningen er afkølet,afdampes methanol på rotationsfordamper, vandfasen ekstraheres en gang med lidt eddikesyreester, og der syrnes med 2N HC1. Produktet 20 filtreres fra, tørres og omkrystalliseres ud fra eddikesyreester. Der fås 2 g med smeltepunkt 154°C.
IR (KBr-tablet) ^ : 1680 cm”1 (COOH).
1H-NMR (dg-DMSO) S s 8,6 ppm (s, thiazol-2H) .
25 Eksemplerne 15-17 gennemføres som beskrevet i eksempel 1.
Eksempel 15 30 Bis-(5-glutarsyremonoamido-l,3-thiazol-2-yl)-disulfid 1H-NMR (dg-DMSO)£ · 1,6-2,6 ppm (m, 12H, seks CH2-grupper) 7,50 ppm (s, 2H, thiazol-4, 12,63 ppm (br s, 2H, -NH-), 35 13,05 ppm (br s, 2H, -C02H).
O
DK 165181 B
23
Eksempel 16
Bis-(5-ravsyremonoamido-l,3-thiazol-2-yl)-disulfid 1H-NMR (d.-DMSO)6 :
* O
2,4-2,7 ppm (m, 8H, -CH2), 5 7,50 ppm (s, 2H, thiazol-H), 12,66 ppm (br s, 2H, -NH-), 13,15 ppm (br s, 2H, -CC>2H) .
Eksempel 17 10 Bis-[5-(2-carboxyeth-l-yl)-4-methyl-l,3-thiazol-2-yl]disulfid 1H-NMR (dg-DMSO) S : 2,27 ppm (s, 6H, “CH^), 2,55 ppm (d, 4H, thiazol-CH2), 2,96 ppm (t, 4H, CH2-CC>2-) .
15 20 25 30 35
Claims (4)
1. Disulfider, kendetegnet ved, at de har den almene formel 1'
5 Het'-S-S-Het' (I·) 9 hvori Het' betyder 1.3- thiazolyl, som er substitueret med Ci-g-alkyl, carboxy-Ci_6-alkyl, carboxy eller C2-5-acylamino, hvor acyl betyder 10 en rest af en aliphatisk dicarboxylsyre, 1.2.4- triazolyl, som er substitueret med hydroxy og phenyl, 1.3.4- thiadiazolyl, som er substitueret med carboxy-C^_4-alkylthio, dihydro-l,2,4-triazinyl, som er substitueret med C^.g-alkyl, 15 halogeno-C2_4-alkenyl, oxo eller hydroxy, eller benzimidazolyl, som er substitueret med carboxy, idet Het' er substitueret med mindst én direkte eller til en substituent bundet carboxygruppe eller en direkte bundet hydroxygruppe, hvorved disse grupper også kan foreligge i 20 form af et fysiologisk acceptabelt salt.
2. Disulfider, kendetegnet ved, at de har den almene formel 1' Het'-S-S-Het' (I') 25 hvori Het' betyder 1.3- thiazolyl, der er substitueret 1 eller 2 gange med C1_3-alkyl, carboxy-C1_3-alkyl, carboxy eller C2-5-acylami-no, hvor acyl er en rest af en aliphatisk dicarboxylsyre, 30 idet Het' er substitueret med mindst én direkte eller til en substituent bundet carboxygruppe, der også kan foreligge i form af et fysiologisk acceptabelt salt.
3. Fremgangsmåde til fremstilling af disulfider med den almene formel I', kendetegnet ved, at 35 (a) en forbindelse med den almene formel II 4 DK Ί65Ί8Ί B Het'-SH (II) hvor Het’ har den ovenstående betydning, ved omsætning med 5 et oxidationsmiddel omdannes til en forbindelse med den almene formel I', eller (b) en forbindelse med den almene formel III Het'-X (III) 10 hvor Het' har ovenstående betydning, og X er en reaktiv, let fraspaltelig gruppe, omsættes med Me2S2, idet Me er et alkalimetal, eller (c) en forbindelse med den almene formel IV 15 Het'-S-S02Me (IV) hvor Het' og Me har de ovenstående betydninger, omsættes med jod i et vandigt medium.
4. Pharmaceutisk middel, kendetegnet ved, at det indeholder en forbindelse med den almene formel I'.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19853508666 DE3508666A1 (de) | 1985-03-12 | 1985-03-12 | Heterocyclische disulfide und ihre anwendung als immunmodulatoren |
| DE3508666 | 1985-03-12 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK108786D0 DK108786D0 (da) | 1986-03-10 |
| DK108786A DK108786A (da) | 1986-09-13 |
| DK165181B true DK165181B (da) | 1992-10-19 |
| DK165181C DK165181C (da) | 1993-03-01 |
Family
ID=6264871
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK108786A DK165181C (da) | 1985-03-12 | 1986-03-10 | Heterocycliske disulfider fremgangsmaade til deres fremstilling og farmaceutiske midler, der indeholdr disse forbindelser |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0194571B1 (da) |
| JP (1) | JPH0751572B2 (da) |
| KR (1) | KR940001773B1 (da) |
| AR (1) | AR245113A1 (da) |
| AT (1) | ATE58293T1 (da) |
| AU (1) | AU594943B2 (da) |
| DE (2) | DE3508666A1 (da) |
| DK (1) | DK165181C (da) |
| ES (3) | ES8801506A1 (da) |
| FI (1) | FI860980L (da) |
| GR (1) | GR860649B (da) |
| HU (1) | HU201742B (da) |
| IE (1) | IE58729B1 (da) |
| IL (1) | IL78091A (da) |
| NO (1) | NO168357C (da) |
| NZ (1) | NZ215424A (da) |
| PH (1) | PH22275A (da) |
| PT (1) | PT82166B (da) |
| ZA (1) | ZA861780B (da) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3915094A1 (de) | 1989-05-09 | 1991-01-10 | Hoechst Ag | Verfahren zur herstellung von 2-mercapto-4-methyl-1,3-thiazol-5-yl-essigsaeure und deren ester |
| TW252112B (da) * | 1993-08-19 | 1995-07-21 | Pfizer | |
| DE10055219A1 (de) | 2000-11-08 | 2002-05-29 | Bayer Ag | Verfahren zur Herstellung von Dithiazolyldisulfiden |
| WO2002055080A2 (en) * | 2001-01-10 | 2002-07-18 | Davide R Grassetti | Method of immunomodulation using thione-forming disulfides |
| DE102005004472A1 (de) * | 2005-01-31 | 2006-08-10 | Rhein Chemie Rheinau Gmbh | Verfahren zur Herstellung von Bis-DMTD |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR5680M (da) * | 1966-08-19 | 1968-01-08 | ||
| IL36587A (en) * | 1970-05-05 | 1977-10-31 | Grassetti D | Compositions containing pyridine derivatives and their use in a method of modifying cellular surface reactions |
| US4378364A (en) * | 1970-05-05 | 1983-03-29 | Grassetti Davide R | Postoperative treatment of carcinoma patients |
| GB1365943A (en) * | 1970-09-16 | 1974-09-04 | Gaf Corp | Metalworking additive and composition and process for making the same |
| GB1327467A (en) * | 1970-10-12 | 1973-08-22 | Merck & Co Inc | Pharmaceutical compositions for inhibiting indoleamine- n-methyl transferase |
| FR2403798A1 (fr) * | 1977-09-22 | 1979-04-20 | Rorer Inc William H | Compositions synergiques a base de disulfure de bis(2-pyridyl-1-oxyde et leur utilisation pour leur activite anti-inflammatoire |
| US4152439A (en) * | 1978-01-12 | 1979-05-01 | Davide R. Grassetti | Stimulant and antidepressant agents |
| DE2944225A1 (de) * | 1979-11-02 | 1981-05-07 | Akzo Gmbh, 5600 Wuppertal | Verfahren zur herstellung von dithiazoldisulfiden |
| US4451471A (en) * | 1981-03-18 | 1984-05-29 | Ciba-Geigy Corporation | Certain 2,4,5-tri-substituted thiazoles, pharmaceutical compositions containing same and methods of using same |
| DE3118128A1 (de) * | 1981-05-07 | 1982-12-02 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | Verwendung von disulfiden als lipoxygenasehemmer und diese enthaltende arzneimittel |
| DE3263149D1 (en) * | 1981-10-21 | 1985-05-23 | Beecham Group Plc | Topical antimicrobial compositions |
| HU193951B (en) * | 1985-03-11 | 1987-12-28 | Richter Gedeon Vegyeszet | Process for producing new sulfur-containing 5-substituted benzimidazol derivatives and pharmaceutical compositions containing them |
-
1985
- 1985-03-12 DE DE19853508666 patent/DE3508666A1/de not_active Withdrawn
-
1986
- 1986-03-05 DE DE8686102901T patent/DE3675561D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-03-05 EP EP86102901A patent/EP0194571B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-03-05 AT AT86102901T patent/ATE58293T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-03-07 AR AR86303344A patent/AR245113A1/es active
- 1986-03-10 FI FI860980A patent/FI860980L/fi not_active Application Discontinuation
- 1986-03-10 IL IL78091A patent/IL78091A/xx not_active IP Right Cessation
- 1986-03-10 NZ NZ215424A patent/NZ215424A/xx unknown
- 1986-03-10 HU HU861011A patent/HU201742B/hu not_active IP Right Cessation
- 1986-03-10 ES ES552840A patent/ES8801506A1/es not_active Expired
- 1986-03-10 GR GR860649A patent/GR860649B/el unknown
- 1986-03-10 PH PH33495A patent/PH22275A/en unknown
- 1986-03-10 DK DK108786A patent/DK165181C/da active
- 1986-03-11 AU AU54605/86A patent/AU594943B2/en not_active Ceased
- 1986-03-11 JP JP61051594A patent/JPH0751572B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1986-03-11 PT PT82166A patent/PT82166B/pt not_active IP Right Cessation
- 1986-03-11 IE IE63086A patent/IE58729B1/en not_active IP Right Cessation
- 1986-03-11 NO NO860908A patent/NO168357C/no unknown
- 1986-03-11 ZA ZA861780A patent/ZA861780B/xx unknown
- 1986-03-12 KR KR1019860001768A patent/KR940001773B1/ko not_active Expired - Fee Related
-
1987
- 1987-07-07 ES ES557614A patent/ES8801624A1/es not_active Expired
- 1987-07-07 ES ES557615A patent/ES8801625A1/es not_active Expired
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4873346A (en) | Substituted benzothiazoles, benzimidazoles, and benzoxazoles | |
| AU737038B2 (en) | Anti-viral pharmaceutical compositions containing saturated 1,2-dithiaheterocyclic compounds and uses thereof | |
| US20090306201A1 (en) | Selective inhibitors for transferases | |
| DK161253B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af syn-isomere alkyloximderivater af 7-aminothiazolylacetamidocephalosporansyre | |
| PL146070B1 (en) | Method of obtaining 2-/n-substituted guanidin/4-/1,2,4-triazol-5-il/-thiazoles | |
| TW200906825A (en) | Inhibitors of protein kinases | |
| US4749701A (en) | Aminostyryl compound, leukotriene antagonistic composition containing the same as effective ingredients and method of antagonizing SRS by employing the same | |
| KR20010108089A (ko) | 신규한 2-(ｎ-시아노이미노)티아졸리딘-4-온 유도체 | |
| US4762848A (en) | 1,3-thiazoles and their use as immunomodulators | |
| DK165181B (da) | Heterocycliske disulfider fremgangsmaade til deres fremstilling og farmaceutiske midler, der indeholdr disse forbindelser. | |
| US7834043B2 (en) | HIV protease inhibiting compounds | |
| HU181408B (en) | Process for preparing substituted furan derivatives | |
| US20230310481A1 (en) | Bi- and monocyclic nucleoside analogs for treatment of hepatitis e | |
| US3560483A (en) | 1,4-dialkyl-3,6-diphenylepi(thio,dithia or tetrathia)-2,5-piperazinediones | |
| US4237136A (en) | Pharmaceutical compositions and methods of using thiadiazolo pyrimidinone compounds | |
| CA1292990C (en) | Heterocyclic disulfides and their use as immunomodulators | |
| CN121085942B (zh) | 3，5-位取代的咪唑并噻二唑杂环衍生物及其制备方法与应用 | |
| US5599825A (en) | Water-soluble methine compound and pharmaceutical composition for treatment of cancer comprising the same | |
| DK142175B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af thiazolo- eller 1,3,4-thiadiazolo-(3,2-)-pyrimidin7-on-5-carboxylsyrederivater | |
| CN121085942A (zh) | 3，5-位取代的咪唑并噻二唑杂环衍生物及其制备方法与应用 | |
| HK40085931A (en) | Bi- and monocyclic nucleoside analogs for treatment of hepatitis e | |
| JPH07206822A (ja) | 新規な非対称チオ尿素化合物及びそれを有効成分とする抗ヒト免疫不全症ウイルス剤 | |
| US20060111405A1 (en) | O-pyridinequinone derivatives, the composition containing the derivatives, the process for preparation of the derivatives and the use of the derivatives | |
| JPH05503694A (ja) | チアゾール誘導体 | |
| EP0456843A1 (en) | Bornyl and isobornyl carboxylic esters of condensed tetrahydroquinoxalines as antiviral agents |