DK165546B

DK165546B - Farmaceutisk praeparat til behandling af peptisk ulcus paa enhedsdosisform

Info

Publication number: DK165546B
Application number: DK010784A
Authority: DK
Inventors: Joseph P Buyniski; Robert L Cavanagh; Maxwell Gordon
Original assignee: Squibb Bristol Myers Co
Priority date: 1982-07-12
Filing date: 1984-01-10
Publication date: 1992-12-14
Also published as: DK10784D0; DK165546C; DK10784A; DK318783D0; CA1216238A

Description

i

DK 165546 B

Ved behandlingen af peptisk ulcus i varmblodede dyr har det vist sig, at den samtidige administrering af det pepsin-kompleksdannende middel pepstatin og en histamin H2-receptorantagonist med formlen 5 /R1 _/N ϊ

X

M

10 1 2 hvor A, m, Z, n, R og R har de nedenfor anførte betydninger, bevirker forhøjet anti-ulcus-aktivitet, reducerer mængden af forbindelser med formel (I), som er nødvendig til effektiv behandling, og herved reducerer bivirkningstilbøjeligheden af forbindelsen med formel (I). Opfin-15 delsen tilvejebringer et farmaceutisk præparat indeholdende pepstatin og mindst én forbindelse med formel (I) til samtidig administrering af de to bestanddele for behandling af peptisk ulcus hos varmblodede dyr.

Den nøjagtige årsag til peptisk ulceration hos mennesker er ukendt, selvom mavesyre dog antages at være en af de essentielle faktorer i 20 denne sygdoms ætiologi. Det blev fornylig opdaget, at mavesyresekretion medieres, i det mindste delvis, af histamin H2-receptorer, som er lokaliseret på parietale celler i den gastriske slimhinde, og at mavesyreaf-givelse induceret af alle sekretagoger kunne antagoniseres ved hjælp af specifikke antagonister af disse receptorer [Black, J.W. et al., Nature, 25 236, 385-390 (1972); Brimblecombe, R.W. et al., J. Int. Med. Res., 3, 86-92 (1975)]. Den første succesfulde kommercielle histamin Hg-receptor-antagonist, cimetidin (II),

NCN

30 /CH.,SCH_CH0NHcNHCH,

- / Δ Δ Δ J

i 11

H

35 er nu i udstrakt anvendelse som et anti-ulcusmiddel. En nyere indført histamin H-receptorantagonist, ranitidin (III),

DK 165546 B

2 CH3 , I CHN02 111 />CH2 o '^XvCH2 SCH2CH2CNHCH3 CH3 5 forhandles nu og bruges i adskillige lande i verden.

Rollen af det proteolytiske enzym pepsin i ætiologien af ulceration forstås ikke fuldtud. Pepsin er blevet vist at spille en væsentlig rolle i udviklingen af eksperimentelt inducerede ulcera i dyr, men dette kan 10 skyldes læsionsforøgelse ved hjælp af pepsinfordøjelse af nekrotisk væv, snarere end ved forårsagelse af den initiale skade. Det er også muligt, at pepsin er fuldt ansvarlig for erosionerne, og at syren bevirker smerte og hæmmer heling.

Nedenfor gives en oversigt over kendt teknik inden for området.

15 1) H. Umezawa et al. omhandler i J. Antibiotics, 23, 259-262 (1970) pentapeptidet, pepstatin, som har strukturen CK3 /CH3 CH3 /¾ CH CH3

|H CIi3 /«3 CH.3 /CH3 Y Y

f2 W ]*H CR2 OH . CS3 έκ2 OH

CO-NH—CH— CO-NH— CH—CO-NH—CH—CK-C^-CO-NH-CH-CO-NH-CH—CH-CH2-COOH (L) (L) (L) og som er et specifikt kompleksdannende middel for enzymet pepsin.

25 Pepstatin blev fundet at hindre dannelsen af maveulcera i den pylorus-afsnørede (Shay)-rotte.

2) Miyawaki, et al. rapporterer i Nagano-ken Noygo Sogo Shikenjo Chikusan Shikenjo Kenkyu Hokoku, 14, 14-25 (1977) (som rapporteret i Chemical Abstracts, 90, 34373X (1979)), at tilsætningen af pepstatin til 30 foderet i >50 dpm inhiberede pepsinaktivitet i mavesaften hos svin og hindrede forekomsten af ulcera.

3) 0. Bonnevie et al. rapporterer i Gut, 20, 624-628 (1979) resultaterne af et dobbelt-blindforsøg med vilkårlig klinisk afprøvning af pepstatin i forhold til placebo i patienter med duodenale ulcera.

35 Pepstatin administreredes i 100 mg doser én gang indgivet syv gange om dagen, hvilken dosis var tilstrækkelig til at inhibere den peptiske aktivitet af mavesaft i 18 timer om dagen. De fandt ingen signifikant forskel mellem pepstatin og placebo i helingen eller symptomatologien af

DK 165546 B

3 duodenal-ulcus.

4) L.B. Svendsen et al. rapporterer i Scand. J. Gastroent., 14, 929-932 (1979) resultaterne af et dobbelt-blindforsøg med vilkårlig klinisk afprøvning af pepstatin over for placebo i patienter med 5 gastrisk ulcus. Pepstatin administreredes i 100 mg doser syv gange om dagen. De var ikke i stand til at påvise nogen indflydelse af pepstatin, hverken på helingen eller på symptomatologien af gastrisk ulcus.

5) R.J. Strauss et al. beskriver i Surg. Forum, 28, 361-363 (1977), at to eller flere dages forbehandling med enten cimetidin eller carbe- 10 noxolon ved stress-ulcerationstests i rotter signifikant formindskede ulcusdannelse. Når de to midler blev indgivet sammen, fandtes signifikant ulcusreduktion efter kun en halv dags fordosering. Carbenoxolon er ikke et antisekretorisk eller antipepsinmiddel, men virker ved at stimulere maveslimsyntese.

15 6) E.Z. Dajani et al. beskriver i J. Pharmacol. Exp. Ther., 210, 373-377 (1979), at en kombination af cimetidin og propanthelin-bromid ved stress-ulcerationstests i rotter frembragte synergistisk anti-ulcusaktivitet, og at en kombination af cimetidin og thiopropazat,hydro-chlorid bevirkede additiv anti-ulcusaktivitet. Propanthel inbromid (et 20 anticholinergi sk middel) og thiopropazat,hydrochlorid (et psyko-seda-tivt middel) virker begge ved at inhibere gastrisk sekretion.

7) British Medical Journal, 95-96 (1980) giver en oversigt over resultater opnået i et stort antal studier med forskellige nye anti-ulcusmidler. Med hensyn til pepsi nantagonister anføres (i dansk over- 25 sættelse): "Resultaterne ved anvendelse af pepsi nantagonister har været ensartet skuffende. Amylopectin viste ingen signifikant fordel i patienter med duodenal ulcus, og sucralfat viste ingen i sådanne 30 med gastrisk ulcus. Selv pepstatin, som er den mest kraftige in vitro og in vivo pepsinantagonist, var ineffektiv i en formel kontrolleret undersøgelse til heling af duodenal ulcus og til forhindring af genopstået blødning hos patienter, som lider af hæmatemesis og melæna." 35 8) USA-patentskrift nr. 4.101.650 beskriver langtidsvirkende pepstatin flydnings-minikapsler omfattende central parti kl er af natrium-bicarbonat overtrukket med et vandopløseligt filmovertrækkende middel,

DK 165546 B

4 som yderligere er overtrukket med pepstatin, og et vandopløseligt film-overtrækkende middel. På grund af frigørelsen af carbondioxid i mavesaft flyder disse minikapsler i maven og bevirker peps i nundertrykkelse i 3-5 timer sammenlignet med ca. 1 time for almindelig pepstatin.

5 9) USA-patentskrift nr. 4.062.863 omhandler histamin ^-antago nister med formlen HET-CH2Z (CH2) 2NH. _^NHR ‘ 11 /λ hvori R er hydrogen, (lavere)alkyl eller (CH2)2Z/CH2-HET#, Z og V hver er svovl eller methylen, og HET og HET' hver er en imidazolring, der 15 eventuelt er substitueret med methyl eller brom, en pyridinring, der eventuelt er substitueret med hydroxy, methoxy, chlor eller brom, en thiazolring eller en isothiazolring og farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf. USA-patentskrifter nr. 4.120.968, 4.120.973 og 4.166.857 er afdelte deraf og har i det væsentlige samme indhold.

20 10) Offentliggjort europæisk patenansøgning nr. 30.092 omhandler histamin Hg-antagonister med formlen R2/ \=N--(CH2)n-Y-(CH2)n-NH-R3 25 / v h2n . · 1 2 hvori R og R er hydrogen eller eventuelt halogen-substitueret al kyl, cycloalkyl eller cycloalkylalkyl under den forudsætning, at mindst den 1 2 ene af R og R er halogen-substitueret alkyl, cycloalkyl eller 30 cycloalkylalkyl, X er en phenylring med 1 eller 2 valgfrie substituenter eller en 5- eller 6-leddet heterocyclisk aromatisk ring indeholdende 1, 2 eller 3 heteroatomer udvalgt blandt 0, N og S, idet den heterocycliske ring om muligt har 1 valgfri substituent, hvilke valgfrie substituenter er 35 halogen, al kyl, alkoxy, alkylthio, trifluormethyl, hydroxy og amino, Y er 0, S, en direkte binding, methylen, cis- eller trans-vinylen, 4 4 sulfinyl eller NR , hvori R er H eller al kyl, m er 0 til 4, og n er 1 til 5, 3

DK 165546 B

5 R er inter alia AB, hvori A inter alia er en 3,4-dioxocyclobuten-l,2- 7 8 7 8 diyl-gruppe, og B inter alia er gruppen NR R , hvori R og R inter alia er hydrogen, al kyl, halogenal kyl, alkoxycarbonyl, alkenyl, alkynyl, (primær hydroxy)alkyl eller (primær amino)alkyl, eller R og R sammen 5 med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, danner en 5- eller 6-leddet 9 9 ring, som eventuelt indeholder 0 eller NR , hvori R er H eller al kyl.

De under 9) og 10) ovenfor anførte patentskrifter fremdrages som illustrative for sådanne, der omhandler histamin Hg-receptorantagonister indeholdende en 1,2-di(eventuelt substitueret)aminocyclobuten-3,4-dion-10 kerne. Andre sådanne patentskrifter findes, men ingen omhandler, at de pågældende forbindelser tilvejebringer forbedret anti-ulcus-aktivitet, når de administreres med pepstatin, og ingen omhandler de her anvendte forbindelser med formel (I).

Den foreliggende opfindelse vedrører et farmaceutisk præparat 15 omfattende en blanding af det pepsin-inhiberende middel pepstatin og mindst én histamin ^-receptorantagonist med formlen /r1

A- (CH~) Z (CH-) Nxk^ /N T

20 Z TR Z n ^v- r v 2 1

R

r\ 1 7 hvor R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydrogen 2 1 25 eller (lavere)al kyl, og hvor R endvidere, når R betegner hydrogen, kan være allyl, propargyl, cyclo(lavere)al kyl(lavere)alkyl, cyclo(lavere)-alkyl, cyano(lavere)alkyl, 2-fluormethyl, 2,2,2-trifluorethyl, hydroxy, 2,3-di hydropropyl, 30 ) ^Ci32^p"· eller r5--“I ^CH2^q~ hvori p er et helt tal fra 1 til 6, inklusive, q er et helt tal fra 1

Λ J

35 til 6, inklusive, RJ og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydrogen, (lavere)al kyl, hydroxy, (lavere)alkoxy eller halogen, og hvor R^ endvidere, når R·3 betegner hydrogen, kan være trifluormethyl, eller 3 4 5 R og R tilsammen betegner methylendioxy, R betegner hydrogen,

DK 165546 B

6 (lavere)al kyl, (lavere)alkoxy, hydroxy, amino eller halogen, m er et helt tal fra 0 til 2, inklusive, n er et helt tal fra 2 til 5, inklusive, Z er svovl, oxygen eller methyl en, og 5 A betegner K8 f 8 K6 '/(CH-) -If- -ih R\ i-!-1 r9/ *Xojt ' R9/(cH2)r_m_.

10 R8 J>(CH-) __v g R6v hvori R6 betegner hydrogen, (lavere)al kyl, (lavere)alkoxy eller halogen, r er et helt tal fra 1 til 4, inklusive, 8 9 20 R og R , som kan vare ens eller forskellige, betegner hydrogen, (lavere)al kyl, ally!, propargyl, (lavere)alkoxy(lavere)al kyl, hvori (lavere)alkoxy-delen er mindst to carbonatomer væk fra nitrogenatomet, cycl o(lavere)al kyl eller phenyl(lavere)al kyl, under den forudsætning, at R og R ikke begge kan være cyclo(lavere)alkyl eller at R og R sammen 25 med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrol idino, methyl-pyrrolidino, dimethylpyrrolidino, morpholino, thiomorpholino, piperi-dino, methyl piperidino, dimethyl piperidino, hydroxypiperidino, N-methyl-piperazino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, 3-pyrrolino, homopiperidino, heptamethylenimino, octamethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]nonan, 30 eller et ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller sol vat deraf.

Forbindelserne med formel (I) er ikke vor opfindelse, men er opfindelsen af vore kollegaer, Aldo A. Algieri og Ronnie R. Crenshaw.

Forbindelserne med formel (I) er relativt non-toxiske stoffer, som 35 påvist ved farmakologiske studier i dyr for nogle af disse forbindelser.

Disse studier viste en toxicitetsprofil, som var i det væsentlige den samme som for den kommercielle Hg-antagonist cimetidin. Selvom udstrakt human brug af cimetidin har vist, at det er et relativt sikkert læge-

DK 165546 B

7 middel med en lav forekomst af bivirkninger, ville det naturligvis være ønskeligt at reducere sådanne bivirkninger endnu mere. Forbindelserne med formel (I) er i forskellige dyrestudier blevet påvist at være fra ca. ligeså kraftige til ca. 150 gange kraftigere end cimetidin som inhi-5 bitorer af mavesyresekretion, afhængig af dyremodellen og administreringsmåden, idet de foretrukne forbindelser ifølge eksempel 1 og 9 var 20-25 gange kraftigere end cimetidin ved oral administrering. Baseret på styrkeforskellen ville den orale dosering af forbindelserne ifølge eksempel 1 og 9 være ca. 1/20 til 1/25 af doseringen af cimetidin, hvor-10 ved man ville reducere den forventede forekomst af bivirkninger. Den sædvanlige orale dosis af cimetidin er 300 mg indgivet fire gange daglig, mens den sædvanlige dosis af forbindelserne ifølge eksempel 1 og 9 er ca. 12-15 mg indgivet fire gange daglig. Det var et formål med den foreliggende opfindelse yderligere at reducere den nødvendige dosis af 15 forbindelsen med formel (I) ved den samtidige administrering af en peptisk aktivitetsinhiberende mængde pepstatin. Som det vil blive vist nedenfor, bevirker en sådan samtidig administrering en ca. tredobbelt forøgelse i styrke sammenlignet med administreringen af samme mængde af forbindelsen med formel (I) alene, hvorved der muliggøres en yderligere 20 tredobbelt reduktion i doseringen af forbindelsen med formel (I).

Pepstatin er også ved farmakologiske studier i dyr blevet påvist at være et relativt non-toxisk stof. Dets LDgg-værdi oversteg 3000 mg/kg i alle studerede dyrearter [Svendsen, L.B. et al., Scand. J. Gastroent., 11, 459-463 (1976)]. Det absorberes i det væsentlige ikke ved oral admi-25 nistrering, ingen bivirkninger iagttoges i humane patienter med ulcus-dyspepsi, som modtog daglige orale doser på 700 mg pepstatin i indtil tre måneder [Svendsen, L.B. et al. (1976) supra]. Pepstatin inhiberer ikke produktionen af pepsin, men inhiberer peptisk aktivitet ved at danne et 1:1 pepsin-pepstatinkompleks, som er uden proteolytisk akti-30 vitet.

1 patienter med ulcus dyspepsi er det blevet påvist, at pepstatin inhiberer gastrisk peptisk aktivitet, men ikke har nogen virkning på den gastriske aciditet [Svendsen, L.B. et al. Scand. J. Gastroent., 11, 459-463 (1976)]. I modsætning hertil er det påvist, at histamin Hg-receptor-35 antagonisten cimitidin antagoniserer både basal og stimuleret mavesyresekretion hos normale frivillige [Burland, W.L. et al., Brit. J. Cl i n. Pharmacol., 2, 481-486 (1975)] og i patienter med duodenal ulcus [Longstreth, G.F. et al., New England J. Med., 294, 801-804 (1976)], men

DK 165546 B

8 dets virkning på pepsinsekretion er mindre udpræget [Binder, H.J. og Donaldson Jr., R.M., Gastroenterology, 74, 371-375 (1978)]. Resultaterne af disse studier indicerer, at pepstatin og cimetidin virker ved hjælp af forskellige mekanismer. Den inhibitoriske virkning af forbin-5 delsen med formel (I) på mavesyresekretion er også signifikant højere end på pepsin-aktivitet, og i denne henseende svarer den farmakologiske profil til cimetidins.

I de nedenfor beskrevne tests blev gastriske erosioner, frembragt i rotter ved oral inddrypning af 1,0 ml 0,75 N HC1, sammenlignet med 10 erosioner fremkaldt hos rotter, som var blevet forbehandlet med den mest foretrukne forbindelse med formel (I) (ifølge eksempel 1) eller med denne forbindelse og pepstatin. Der er også vist sammenligningsforsøg, hvor der anvendes forbehandling med det nyere kommercielle produkt, ranitidin, og med ranitidin og pepstatin. Ranitidin er ca. 4 og 6 gange 15 kraftigere end cimetidin til inhibering af mavesyresekretion ved oral administrering i hhv. rotter og hunde.

I det følgende beskrives de anvendte eksperimentelle metoder.

En modifikation af metoden ifølge Robert et al. [Gastroenterology, 77, 433-443 (1979)] anvendtes til at frembringe gastriske erosioner.

20 Voksne Long Evans rotter af hankøn, som vejede 280-300 g (Blue Spruce Farms, Alton, New York) anvendtes. Dyrene anbragtes individuelt i bure, og foder og vand fjernedes hhv. 24 og 18 timer før testning. Den efterfølgende dag administreredes testforbindelsen oralt til dyrene 30 minutter før 1,0 ml 0,75 N HCl inddryppedes i maven med sonde. Dyrene, som 25 behandledes med kombinationen af testforbindelsen og pepstatin, modtog testforbindelsen 30 minutter før og en fikseret mængde pepstatin (20 mg/kg p.o.) 10 minutter før saltsyren administreredes. Forudgående labo-ratoriestudier havde vist, at denne dosis pepstatin (20 mg/kg p.o.) fuldstændigt inhiberede pepsinaktivitet og antagoniserede ulcusdannelse 30 i den 18 timer pylorus-afsnørede rotte. En time efter modtagelse af HCl-opløsningen dræbtes dyrene med en intraperitoneal injektion af 0,2 ml T-61®, en euthanasia-opløsning (National Laboratories Corp.).

Maverne fjernedes fra dyrene, blev opskåret langs den større curva-tur, åbnedes, skylledes med saltvand og udtrukket fladt i en standard 35 position for makroskopisk undersøgelse og opregning af erosioner. Maverne fotograferedes med et Polaroid® Close Up kamera (Polaroid Corporation), og opregningen bestemtes ud fra fotografierne. Med henblik på opregningen toges kun læsioner med en minimallængde på 1 mm i betragt-

DK 165546 B

9 ning. Alvoren af gastrisk ulceration defineredes for hvert dyr som summen af de maksimale kontinuerte længder (i mm) af erosionerne, som tilfredsstillede de ovennævnte kriterier. Procentuel inhibering af issionsdannelse defineredes som 5 (mm erosion, vehi kel kontrol) - (mm erosion, testmiddel) χ j0q (mm erosion, vehi kel kontrol)

Resultaterne analyseredes under anvendelse af t-testen for uparrede 10 data, og ED^-værdier beregnedes ud fra dosisreaktionsdata under anvendelse af probit-analyse [Finney, Probit Analysis, 3. udgave, University Press, Cambridge, England (1971)].

Forbindelsen ifølge eksempel 1 og ranitidin (syntetiseret af Medicinal Chemistry Research Department of Bristol Laboratories, 15 Divison of Bristol-Myers Company) opløstes i et ækvivalent HC1 og pH-værdien indstilledes på 5,5 med NaOH. En suspension af pepstatin (Banyu Pharmaceutical Co. Ltd.) i vand fremstilledes ved at homogenisere forbindelsen med nogle få dråber Tween-80® (Atlas Chemical Industries).

Hver af disse forbindelser administreredes oralt med sonde i et volumen 20 på 2 ml/kg.

Testresultater

Inddrypningen af HC1 i ubehandlede rotter bevirkede voldsomme gastriske erosioner bestående af forlængede bånd af en længde på 1-10 mm 25 og en bredde på 1-3 mm. Disse erosioner var primært lokaliseret i corpus (den del af maven, som udskiller syre og pepsin), mens antrum ikke var så alvorligt angrebet, og ingen læsion iagttoges i formaven (den non-sekretoriske del). Disse resultater svarer til de af Robert et al. rapporterede i deres oprindelige beskrivelse af denne procedure.

30 Forbehandling af rotterne med en 25, 50 eller 75 mg/kg dosis af forbindelsen ifølge eksempel 1 før inddrypning af HC1 formindskede dannelsen af gastriske erosioner på en dosis-relateret måde. Forbehandling af rotter med forbindelsen ifølge eksempel 1 plus 20 mg/kg pepstatin forbedrede signifikant den inhibitoriske virkning af forbindelsen ifølge 35 eksempel 1 ved doser på 50 og 75 mg/kg. En forbedring blev også iagttaget ved 25 mg/kg, men forskellen var ikke statistisk signifikant (0,05 < p < 0,10). Figur 1 viser på grafisk form den procentuelle reduktion i gastriske erosioner i forhold til kontrol rotterne (ingen

DK 165546 B

10 forbehandling), som opnåedes ved hvert af dosisniveauerne for forbindelsen ifølge eksempel 1 alene og forbindelsen ifølge eksempel 1 plus pepstatin. Når de i figur 1 viste resultater analyseredes ved probit-analyse ifølge Finney, blev det påvist, at reaktionen på forbindelsen 5 ifølge eksempel 1 var lineær med hensyn til den administrerede logaritmiske dosis, og at tilsætningen af pepstatin ændrede dosisreaktionen mod venstre på parallel måde. Disse resultater er vist i figur 2. Det kan ses af figur 2, at EDgg-værdi erne for forbindelsen ifølge eksempel 1 alene og forbindelsen ifølge eksempel 1 plus pepstatin-kombinationen 10 blev fundet at være hhv. 115 og 33 mg/kg, hvilket viser, at kombinationen havde mere end tre gange styrken af forbindelsen ifølge eksempel 1 alene.

Forbehandling af rotter med en 25, 50, 75 eller 100 mg/kg dosis af ranitidin før inddrypning af HC1 formindskede på tilsvarende måde dan-15 nelsen af gastriske erosioner på en dos is-relateret måde. Ingen forbedring af den inhibitoriske virkning i forhold til den for ranitidin alene forekom, når pepstatin blev indgivet sammen med ranitidin. Figur 3 viser på grafisk form den procentuelle reduktion i gastriske erosioner i forhold til kontrol rotterne (ingen forbehandling), som opnåedes ved hvert 20 af dosisniveauerne for ranitidin alene og ranitidin plus pepstatin. Når de i figur 3 viste data analyseredes ved probitanalyse ifølge Finney, blev det vist, at reaktionen på ranitidin var liniær med hensyn til den logaritmiske dosis af forbindelsen og at tilsætningen af pepstatin ændrede dosisreaktionen til venstre på parallel måde. Disse data er vist 25 i figur 4. Det kan ses af figur 4, at EDgg-værdierne for ranitidin alene og for kombinationen af ranitidin-pepstatin blev fundet at være hhv. 123 og 104 mg/kg. Styrkeforholdet mellem kombinationen og ranitidin alene var 1,18, hvilket statistisk ikke var forskelligt fra én.

Resultaterne af disse forsøg er sammenfattet i tabel 1. Det kan 30 ses, at EDgg-værdierne for forbindelsen ifølge eksempel 1 og ranitidin, indgivet alene, var i det væsentlige de samme. Når hver af disse forbindelser imidlertid administreredes med pepstatin, viste forbindelsen ifølge eksempel 1 en forbedring i beskyttelsen mod ulcus-dannelse (med en faktor på 3,5), mens ranitidin ikke viste nogen signifikant beskyt-35 telsesforbedring. Styrken af forbindelsen ifølge eksempel 1 plus pepstatin var således ca. 3 gange styrken af ranitidin plus pepstatin.

DK 165546 B

11

Tabel I

Sammenligning af forbindelsen ifølge eksempel 1 og ranitidin til inhibering af HC1-induceret dannelse af gastriske læsioner, alene eller i kombination med pepstatin 5 EDgo (mg/kg) for inhibering af ulcusdannelse

Forbindelse Alene med Pepstatin Styrkeforhold3 10 -.............................................-......................

Forbindelse ifølge eksempel 1 115 33 3,5

Ranitidin 123 104 1,18 15 a Forhold mellem styrke (forbindelse alene) og styrke af kombination (forbindelse plus pepstatin).

Antagonisme af l^-receptorer og den efterfølgende antisekretoriske virkning er formentlig ikke mekanismen for anti-ulcusvirkning i denne 20 test, eftersom den tilføjes eksogent HC1. Pepstatin absorberes kun dårligt efter oral administrering, idet dyreforsøg har vist, at mere end 90% af forbindelsen udskilles i fæces inden for 72 timer. Derfor skyldes inhiberingen af proteolytisk aktivitet efter oral administrering af pepstatin primært en lokal virkning af denne forbindelse.

25 For at opnå den største fordel er det ønskeligt, at doseringen af pepstatin er en sådan, at der er i det væsentlige fuldstændig inhibering af gastrisk pepsinaktivitet i så langt et tidsrum af dagen som praktisk.

Mår pepstatin administreredes til ulcuspatienter i 100 mg-doser syv gange daglig (med måltider, to timer efter måltider og ved sengetid), 30 inhiberedes pepsinaktivitet i 18 timer om dagen.

Doseringen af forbindelserne med formel (I), som skal administreres samtidigt med pepstatin, vil ikke blot afhænge af faktorer såsom patientens vægt, men også af den ønskede grad af mavesyreinhibering samt styrken af den bestemte forbindelse, som anvendes. Afgørelsen med hensyn til 35 den bestemte dosis, som anvendes, er lægelig. I den nedenfor beskrevne "Heidenhain Pouch Dog"-test har cimetidin en oral EDgg-værdi på ca. 3,3 /imol/kg. Den sædvanlige orale dosis af cimitidin til en voksen person er 300 mg indgivet 4 gange daglig. De sædvanlige orale begyndelsesdoser for

DK 165546 B

12 voksne personer af forbindelserne med formel (I) (uden pepstatin) bestemmes let ud fra deres orale ED^-værdi i samme test. Såfremt den orale EDgg-værdi af en bestemt forbindelse med formel (I) er 0,33 /imol/kg, vil den sædvanlige begyndelsesdosis (uden pepstatin) derfor 5 være ca. 30 mg indgivet 4 gange daglig, etc. Når forbindelsen administreres samtidig med pepstatin, vil den sædvanlige begyndelsesdosis være ca. 15 mg indgivet 4 gange daglig. Tilsvarende beregninger kan foretages for parenterale doseringer. Disse begyndelsesdoser (og antallet af administrerede gange per dag) kan naturligvis ændres ved titrering af dosen 10 efter de særlige omstændigheder hos den specifikke patient.

En fremgangsmåde til behandling af peptisk ulcus hos et varmblodet dyr med behov for sådan behandling, omfatter samtidig administrering til dyret af en peptisk aktivitetsinhiberende mængde pepstatin og en effektiv anti-ulcerogen mængde af mindst én forbindelse med formel (I) eller 15 et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf. Hos mennesker er den sædvanlige dosis af de foretrukne forbindelser med formel (I) fra ca. 2 til ca. 100 mg (og mest foretrukket fra ca.

4 til ca. 50 mg) indgivet tre eller fire gange (og mest foretrukket fire gange) daglig. Doseringen af den mest foretrukne forbindelse med formel 20 (I) (forbindelsen ifølge eksempel 1) er fra ca. 2 til ca. 15 mg, og fortrinsvis fra ca. 4 til ca. 10 mg. Den foretrukne dosis af pepstatin til mennesker er fra ca. 100 mg, når den administreres ca. syv gange daglig, til ca. 175 mg, når den administreres ca. 4 gange daglig. Den foretrukne dosis pepstatin, når pepstatinen er i form af pepstatin-25 flydnings-mini kapsl er, er den mængde minikapsler, som indeholder ca. 100 mg pepstatin, administreret ca. fire gange daglig.

En forbedret fremgangsmåde til behandling af peptisk ulcus i varmblodede dyr, består i at der til dyret administreres en effektiv anti-ulcerogen mængde af mindst én forbindelse med formel (I) eller et farma-30 ceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller sol vat deraf, idet den forbedrede fremgangsmåde omfatter en reduktion af den mængde af forbindelsen med formel (I), som er nødvendig til effektiv behandling ved samtidig administrering af en peptisk aktivitetsinhiberende mængde pepstatin. Den foretrukne dosis pepstatin og pepstatin-flydnings-mini-35 kapsler til mennesker er den i det foregående afsnit beskrevne.

Der tilvejebringes ved den foreliggende opfindelse et farmaceutisk præparat, som er nyttigt ved behandlingen af peptiske ulcera, i en enhedsdosisform, som omfatter en peptisk aktivitetsinhiberende mængde

DK 165546B

13 pepstatin og en effektiv antiulcerogen mængde af mindst én forbindelse med formel (I), eller et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller sol vat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer. Ved en foretrukket udførelsesform indeholder enhedsdosisformen fra ca. 2 til 5 ca. 100 mg (og mest foretrukket fra ca. 4 til ca. 50 mg) af én af de foretrukne forbindelser med formel (I) og fra ca. 100 til ca. 175 mg pepstatin. Ved den mest foretrukne udførelsesform indeholder præparatet fra ca. 2 til ca. 15 (og mest foretrukket fra ca. 4 til ca. 10) mg af forbindelsen ifølge eksempel 1 plus fra ca. 100 til ca. 175 mg pep-10 statin.

Som her anvendt betyder henvisning til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt af en forbindelse med formel (I) mono- eller di-saltet med en non-toxisk farmaceutisk acceptabel organisk eller uorganisk syre. Sådanne syrer er velkendte og omfatter saltsyre, hydrogenbromidsyre, 15 svovlsyre, sulfamsyre, phosphorsyre, salpetersyre, maleinsyre, fumar-syre, ravsyre, oxalsyre, benzoesyre, methansulfonsyre, ethandisul fonsyre, benzensul fonsyre, eddikesyre, propionsyre, vinsyre, citronsyre, kamfersul fonsyre, levulinsyre og lignende. Saltene fremstilles ved hjælp af kendte metoder.

20 Såfremt en fast bærer anvendes, kan præparaterne tabletteres, anbringes i en hård gelatinekapsel på pulver- eller pelletform eller i form af en troche eller pastil. Såfremt en flydende bærer anvendes, kan præparaterne være i form af en blød gelatinekapsel, sirup, emulsion, vandig eller ikke-vandig suspension, eller i tilfælde af forbindelserne 25 med formel (I) en steril opløsning eller suspension til injektion.

Disse farmaceutiske dosisformer fremstilles ved hjælp af konventionel teknik.

Forbindelserne med formel (I) kan fremstilles ved hjælp af forskellige alternative fremgangsmåder, hvor der som udgangsmateriale 30 anvendes en forbindelse med formlen R12 R12

\__/R

- Ά 12 hvori R betegner en let fraspaltelig gruppe, såsom halogen, phenoxy,

DK 165546 B

14 substitueret phenoxy, alkoxy eller lignende. Egnede fraspaltelige grupper er velkendte for fagmanden. Fortrinsvis er R (lavere)alkoxy, og især methoxy og ethoxy.

Forbindelserne med formel (I) kan fremstilles ud fra en forbindelse 5 med formel (IV) ved hjælp af forskellige alternative reaktionsskemaer som vist nedenfor i reaktionsskemaerne 1 og 2.

Reaktionsskema 1

Forbindelse AiCH2 }raZ iCH2 }nNH2 A (CH2}mz /R12 IV --—> J= r1 ,nh Ah

ψ . V

R- s* /

x==f Ά2 A<CH2>mZ<CH2>nNH2 A'CH2)m2(CH2>nN\_A

> A"

. I

Reaktionerne udføres i et inert organisk opløsningsmiddel, methanol er et hensigtsmæssigt og let tilgængeligt opløsningsmiddel. Reaktions-30 temperaturen er ikke kritisk. De fleste udgangsmaterialer er temmelig reaktive og det foretrækkes at udføre reaktionen ved en temperatur under stuetemperatur, f.eks. 0-10°C. Med visse mindre reaktive forbindelser er det hensigtsmæssigt at udføre reaktionen ved stuetemperatur. Undertiden er det ønskeligt efterfølgende at hæve temperaturen for reaktionsbian-35 dingen (f.eks. til 50-60°C) for at fuldende reaktionen.

IV

DK 165546 B

15

Reaktionsskema 2

Forbindelse // R'\ \ y/ r2/ \^HS(CH2)nNH2 R12 \=/ \r2 Hs (CH2)pNH\| yZ12

i_ VI VII

\ M(c%>n”2 / R2 \ / Nh \ / ^ /r1

A(CH2)mX

V

/r1 A(CH2)mZ (CH2)dNHn ^ =] XR2 Ϊ /Λ

DK 165546 B

16 I reaktionsskema 2 er X en konventionel fraspaltelig gruppe såsom fluor, chlor, brom, iod, -O^SR , hvori R er (lavere)alkyl (fx. metharisulfonat), aryl eller substitueret aryl (fx. benzensulfo-nat, p-brombenzensuifonat eller p-toluensulfonat), -O^SF, acetoxy 05 eller 2,4-dinitrophenoxy. Af hensigtsmæssige og økonomiske grunde foretrækkes det at anvende en forbindelse, hvori X er chlor. Reaktionsbetingelserne for fremstillingen af forbindelserne med formel (VI), (VII) og (VIII) er som beskrevet for reaktionsskema 1. Omsætningen af forbindelsen med formel (VIII) med AiCH^^X kan udføres 10 i ethvert inert organisk opløsningsmiddel såsom en alkanoi, aceto-nitril, dimethylformamid, dimethylsulfoxid, acetone eller lignende.

Det foretrækkes at udføre reaktionen i en alkanoi såsom methanol, ethanol eller isopropanol. Reaktionstemperaturen er ikke kritisk; reaktionen kan udføres ved temperaturer fra ca. 0° til ca. 200°C. Ved 15 lave temperaturer er reaktionen langsom, mens høje temperaturer normalt fører til mindre rene produkter som følge af dekomponering og dannelse af biprodukter. Det foretrækkes normalt at udføre reaktionen ved stuetemperatur. Omsætningen af forbindelsen med formel (VIII) med AiCH^^X til fremstilling af forbindelsen med formel (I) 20 udføres fortrinsvis i nærværelse af en base, som letter reaktionen ved at virke som en syeacceptor. Egnede baser omfatter fx. NaOH, KOH, LiOH, triethylamin, dimethyianilin, natriumethoxid o.l.

I en foretrukket udførelsesform af opfindelsen fremstilles forbindelser med formel (I) med strukturen 25

*1 ,_L

ti (CH,)--+- -j--(CH,) Z (CH-) NH-,-—NHR2 Ia o / 2 r i i 2 m 2 n - ao r\ 2 hvori R betegner hydrogen, (lavere)alkyl, allyl, propargyl, 3-pyri-dylmethyl eller 6-methyl-3-pyridylmethyl, m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, 35 n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, 0 R er hydrogen eller (lavere)alkyl,

DK 165546B

17 r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 8 9 gen eller (lavere)alkyl, eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor-05 pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methylpiper-azino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethylenimi-no, octamethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan, eller et ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

10 Ifølge en anden foretrukket udførelsesform af opfindelsen frem stilles forbindelser med formel (I) med strukturen R6 R1 ' « N)(CH2)r—U-l -jj_ (CH2)BZ(CH2)nKH-=-NHR2 Ib 2 hvori R betegner hydrogen, (lavere)alkyl, allyl, propargyl, 3-pyri- 20 dylmethyl eller 6-methyl-3-pyridylmethyl, m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, 6 R er hydrogen eller (lavere)alkyl, 25 r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 9 gen eller (lavere)alkyl, eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor-pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methylpiper-30 azino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethylenimi-no, octamethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan, eller et ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

Ifølge en anden foretrukket udførelsesform af opfindelsen frem-35 stilles forbindelser med formel (I) med strukturen

DK 165546B

18 ./“z'rsR 2 Ic

Rs/ (Γ, (CH2) mZ (CH2) nNH

M'.

2 hvori R betegner hydrogen eller (lavere)alkyl/ allyl, propargyi, 3-pyridylmethyl eller 6-methyl-3-pyridylmethyl, 10 m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, g R er hydrogen eller (lavere)alkyl, r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 15 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 8 9 gen eller (lavere)alkyl, eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor-pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methyl piper-azino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethylenimi-20 no, octamethylenimino eller 3-azabicyc!o[3.2.2]-nonan, eller et ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

Ifølge en anden foretrukket udførelsesform af opfindelsen fremstilles forbindelser med formel (I) med strukturen 25 E^K(CH,).-|—il·- (CH2)m2(CH2)nNH-p=r-NHR2 Id

. *,κ A

2 hvori R betegner hydrogen eller (lavere)alkyl, allyl, propargyl, 3-pyridylmethyl eller 6-methy I -3-pyridylmethyl, m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, 35 n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, g R er hydrogen eller (lavere)alkyl, 19 r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og o g R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 8 9 gen eller (lavere)a I kyl, eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor- 05 pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methylpiper-azino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethylenimi-no, octamethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan, eller et ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

10 Efter den nuværende opfattelse er særligt foretrukne forbindel ser med formel (I) a) 1-amino-2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]cyclo-buten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

15 b) 1-amino-2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]cyclo- buten-3,4-dion-hydrochlorid.

c) 1-amino-2-{2-[(5-dimethylaminomethyl-2-furyl)methylthio]-ethylamino}cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

20 d) 1-amino-2-{2-[(5-dimethylaminomethyl-3-thienyl)methylthio]- ethylamino}cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

e) 1-amino-2-{2-[(5-piperidinomethyl-3-thienyl)methylthio]ethyl-amino}cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssait, hydrat eller sol vat deraf.

f) 1 -amino-2- [3-(3-dimethylaminomethylphenoxy)propylamino] -cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

g) 1 -amino-2- [3-(3-pyrrolidinomethylphenoxy)propylamino] -cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

h) 1 -amino-2- {3- [3-(3-methylpyrrolidino)methylphenoxy ] pro-pylamino}cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

i) 1-methylamino-2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylami-no]cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

DK 165546B

20 j) 2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]-1-(2-propynyl-amino)cyclobuten-3,4-dion eller et Fkke-toxlsk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

k) 2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)prppylamino]-1-(3-pyridyl)-05 methylaminocyc!obuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

l) 1-amino-2-[3-(3-hexamethyleniminomethylylphenoxy)propyl-amino]cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

10 m) 1-amino-2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylaminoJcyclo- buten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syre-additionssalt, hydrat eller solvat deraf.

n ) 1 -amino-2- [3- (3- heptamethy leniminomethy I phenoxy )p ropy I -amino]cyclobuten-3,4-dion eller et ikke-toxisk farmaceutisk accepta-15 belt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

o) 1-amino-2-[3-(3-octamethyleniminomethylphenoxy)propylami-no]cyclobuten-3,4-d!on eller et ikke-toxisk farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf.

Udgangsmaterialerne med formel (II), som anvendes til frem-20 stilling af de omhandlede forbindelser, er enten kendte eller kan fremstifles på i og for sig kendt mide. Se fx. den grundige oversigtsartikel af A.H. Schmidt i Synthesis, side 961-994 (december 1980) og de der anførte referencer.

Histamin Hg-receptor antagonister er blevet pivist at være ef-25 fektive inhibitorer af mavesyresekretion hos dyr og mennesker,

Brimblecombe et al., J. Int. Med. Res., 3, 86 (1975). Klinisk vurdering af histamin H^-receptor antagonisten cimetidin har vist, at den er et effektivt terapeutisk middel ved behandlingen af sygelig peptisk ulcus, Gray et al., Lancet, 1, 8001 (1977). To af standard-30 dyremodellerne til bestemmelse af gastrisk antisekretorisk aktivitet af histamin Hg-antagonister er "Gastric Fistula Rat" og "Heidenhain Pouch Dog". EDgQ-værdierne for nogle af forbindelserne med formel (I) i disse to dyremodeller er givet i tabel II og III nedenfor.

35 Bestemmelse af gastrisk antisekretorisk aktivitet i "Gastric Fistula Rat"

Long Evans hanrotter, der vejer ca. 240-260 g pi kanyleimplantationstidspunktet, anvendes. Udformningen og implantationen af den 21 rustfrie stil kanyle i den forreste væg af for-maven foretages i det væentlige som beskrevet af Pare et al. (Laboratory Animal Science, 27, 244 (1977)). Fistel-komponenterne udformes og den operative procedure udføres nøjagtigt som beskrevet i ovennænvte reference. 05 Post-operativt anbringes dyrene individuelt i bure med fast bund med savsmuld og får adgang til foder og vand ad libitum under hele genvindingsperioden. Dyr anvendes ikke til testformål før mindst 15 dage efter operationen.

Dyrene fastes med adgang til vand ad libitum i 20 timer før 10 testningsproceduren begynder. Umiddelbart før opsamling åbnes kanylen og maven vaskes mildt med 30-40 ml varmt saltvand eller destilleret vand til fjernelse af eventuelt residual-indhold. Kateteret skrues dernæst i kanylen i stedet for lukkeskruen og rotten anbringes i et klart rektangulært formstofbur, som måler 40 cm i læng-15 den, 15 cm i bredden og 13 cm i højden. Bunden af buret har en slids af ca. 1,5 cm bredde og 25 cm længde, som forløber ned mod centret for at optage det derigennem hængende kateter. På denne måde begrænses rotten ikke og den kan bevæge sig frit omkring i buret under opsamlingsperioder. Den øvrige del af prøven udføres 20 som beskrevet af Ridley et al. (Research Comm. Chem. Path.

Pharm., 17 , 365 (1977)).

De i den første time efter vaskning af maven opsamlede mave-sekretioner kasseres, da de kan være forurenede. Til oral vurdering fjernes kateteret dernæst fra kanylen og erstattes af lukke-25 skruen. Vand (2 ml/kg) administreres oralt via gastrisk intubation og dyret returneres til buret i 45 minutter. Efter dette tidsrum fjernes lukkeskruen og erstattes af et kateter, hvortil et lille formstof-hætteglas er blevet fastgjort til opsamling af mavesekretionerne. En to timers prøve opsamles (dette repræsenterer kontrolsekretionen), 30 kateteret fjernes og erstattes af lukkeskruen. Forbindelsen, som skal testes, administreres nu oralt i et volumen på 2 ml/kg via gastrisk intubation. 45 minutter senere fjernes lukkeskruen igen, erstattes af kateteret fastgjort til et lille formstof-hætteglas og en yderligere 2 timers prøve opsamles. Sekretionerne i den anden prøve sammen-35 lignes med de fra kontrolprøven for at bestemme virkningerne af testforbindelsen.

DK 165546 B

22 Når testforbindelser skal vurderes parenteralt, injiceres dyret i.p. eller s.c. med testforbindelses-vehiklen i et volumen pi 2 ml/kg umiddelbart efter kassering af den initiale 60 minutters opsamling.

En to timers prøve opsamles (kontrolsekretion) og dyrene injiceres 05 enten i.p. eller s.c. med testforbindelsen i et volumen pi 2 ml/kg.

En yderligere 2 timers prøve opsamles og dens sekretioner sammenlignes med de for kontrolperioden til bestemmelse af forbindelsernes virkninger.

Prøverne centrifugeres og anbringes i et gradueret rør til vo-10 I umen bestemmelse. Titrerbar surhed måles ved at titrere en 1 ml prøve til pH 7,0 med 0,02 N NaOH under anvendelse af en autoburette og et elektrometrisk pH-meter (radiometer). Titrerbar syreafgivelse beregnes i mi kroækvivalenter ved at multiplicere volumenet i milliliter med syrekoncentrationen i mi 11 {ækvivalenter per liter.

15 Resultaterne udtrykkes som procentuel inhibering i forhold til kontrolaflæsninger. Dosis-reaktionskurver konstrueres og ED5Q-vær-dier beregnes ved regressionsanalyse. Mindst tre rotter anvendes ved hver dosisniveau og et minimum af tre dosisniveauer anvendes til bestemmelse af én dosis reaktion s kurve.

20

Bestemmelse af gastrisk antisekretorisk aktivitet i "Heidenhain Pouch Dog” Før kirurgi opnås hæmatologi- og blod kemi-profiler og en vurdering foretages med hensyn til den almene helbredstilstand af ud-25 valgte hunhunde. Hundene vaccineres med "Tissue Vax 5 (DHLP -Pitman-Moore) og anbringes i almene dyrekvarterer til 4 ugers observation, siledes at spirende sygdomme kan træde frem. Hundene fastes med vand ad libitum 24 timer før kirurgi.

Anæstesi induceres med natriumpentothal (Abbott), 25-30 mg/kg 30 i.v. Efterfølgende anæstesi opretholdes med methoxyfluran (Pitman-Moore). Et midterlinie linea alba indsnit fra xipoid til umbilicus giver god eksponering og lukkeligthed. Maven trækkes op i det operative område, den større krumning strækkes ud på flere steder og klemmer anbringes langs den valgte indsnitslinie. Posen laves fra mavens 35 korpus, således at sand parietal cellesaft opnås. Ca. 30% af korpusvolumenet resekteres. Kanylen fremstilles af letvægts-, biologisk inert materiale såsom nylon eller Delrin med dimensioner og fastgø-

DK 165546 B

23 reiser efter DeVito og Harkins (J. Appl. Physiol., 14, 138 (1959)). Post-operativt behandles hundene med antibiotika og et analgetikum.

De får 2 til 3 måneder til rekonstituering. Forsøg udføres på følgende måde: Hundene fastes natten over (~18 timer) med vand ad libi-05 turn før hvert forsøg. Hundene anbringes i en slynge og en saphenøs vene kanyleforbindes til administrering af en aktiv forbindelse.

Histamin som basen (100 pg/kg/hr) og chlorpheniraminmaleat (0,25 mg/kg/hr) infuseres kontinuert (i et volumen på 6 ml/hr) med en Harvard infusionspumpe.

10 90 minutters infusion forløber, således at hundene når en stabil tilstand for syreafgivelse. På dette tidspunkt administreres den aktive forbindelse eller normalt saltvand (kontrol) samtidig med sekreta-gogen i et volumen på 0,5 ml/kg over et tidsrum af 30 sekunder.

Når orale studier skal udføres, administreres den aktive forbindelse 15 via gastrisk strubesonde i et volumen på 5 ml/kg. Infusion af sekre-tagogen fortsættes og 15 minutters prøver af mavesaften udtages i 4,5 timer. Hver prøve males til nærmeste 0,5 ml og titrerbar surhed bestemmes ved titrering af en 1 ml prøve til pH-værdi 7,0 med 0,2 N NaOH under anvendelse af en autoburette og et elektrisk pH-me-20 ter (radiometer). Titrerbar syreafgang beregnes i mikroækvivalenter ved at multiplicere volumenet i milliliter med syrekoncentrationen i milliækvivalenter per liter.

Resultaterne udtrykkes som procentuel inhibering i forhold til kontrolaflæsninger. Dos i s reaktion s kurver konstrueres og ED^Q-vær-25 dier beregnes ved regressionsanalyse. Fra 3 til 5 hunde anvendes ved hver dosisniveau og et minimum af tre dosisniveauer anvendes til bestemmelse af en dosisreaktionskurve.

30 35

DK 165546 B

24

Tabel II

Gastrisk antisekretorisk aktivitet af forbindelser med formel (I) f "Gastric Fistula Rat11 05 Forbindelse EDjjq s'c* Styrkeforhold (pmol/kg) (cimetidin = 1,0)

Cimetidin 3,8 (2,3-5,5) 1,0

Forbindelse i eksempel 1 0,023 (0,011-0,037) 162 (77-328) 10 Forbindelse i eksempel 2 <1 >4

Forbindelse i eksempel 3 ~4 Ά

Forbindelse i eksempel 9 0,055 (0,016-0,14) 61 (20-204)

Forbindelse i eksempel 10i 0,08 (0,04-0,16) 48 (21-97)

Forbindelse i eksempel 10j 0,044 (0,019-0,09) 88 (36-211) 15 Forbindelse i eksempel 10m 0,7 (0,36-1,4) 5,4 (2,1-12)

Forbindelse i eksempel 11 0,067 (0,02-0,18) 50 (15-169)

Forbindelse i eksempel 12 0,094 (0,046-0,17) 44 (22-90)

Forbindelse i eksempel 14d 0,031 (0,016-0,056) 124 (62-243) 20 * Antal i parentes er 95% sandsynlighedsgrænser 25 30 35 25

Tabel III .

Gastrisk antisekretorisk aktivitet af forbindelser med formel (I) i "Heidenhain Pouch Dog” 05 Forbindelse ED^q Styrkeforhold (pmol/kg) (cimetidin = 1,0) (INTRAVENØS)

Cimetidin 2,18 (1,48-2,95) 1,0 10 Forbindelse i eksempel 1 0,024 (0,019-0,029) 87 (62-117)

Forbindelse i eksempel 2 ~20

Forbindelse i eksempel 9 ~40

Forbindelse i eksempel 10i >40 15 (ORAL)

Cimetidin 3,29 (1,05-5,19) 1,0

Forbindelse i eksempel 1 0,16 (0,10-0,22) 25 (14-40)

Forbindelse i eksempel 9 ~20 20 * Antal i parentes er 95% sandsynlighedsgrænser

Som anvendt heri og i kravene, betyder udtrykkene "(lavere) alkyl" og "(lavere)alkoxy" ligekædede eller forgrenede alkyl- eller 25 alkoxygrupper indeholdende fra 1 til 6 carbonatomer. Fortrinsvis indeholder disse grupper fra 1 til 4 carbonatomer og mest foretruk ket indeholder de 1 eller 2 carbonatomer. Betegnelsen "cyclo(lavere) alkyl" som anvendt heri og i kravene betyder en cycloalkylring indeholdende fra 3 til 7 carbonatomer og fortrinsvis fra 3 til 6 carbon- 30 atomer.

CELITE er et registreret varemærke for Johns-Manvifle Products Corporation for diatoméjord.

I de efterfølgende eksempler er alle temperaturer angivet i grader Celsius.

35

DK 165546 B

26

Eksempel 1 1-amino-2- r3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylaminolcyclobuten- 3,4-dion

En opløsning af 3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamin (fra 05 dihydrochloridet, 4,46 g, 13,9 mmol) (fremstillet iht. offentliggjort britisk patentansøgning nr. 2.023.133) i 40 ml methanol sattes på én gang til en opløsning af 1,2-dimethoxycyc!obuten-3,4-dion (1,97 g, 13,9 mmol) i 40 ml methanol, som var blevet afkølet til 5° i et isvandbad. Efter 2 timer ved omgivelsernes temperatur afkøledes op-10 løsningen til 5° og overskydende vandfri ammoniak bobledes til opløsningen i 5 minutter. Blandingen omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer og filtreredes dernæst til opnåelse af 4,35 g produkt.

Produktet (4,20 g, 12,2 mmol) suspenderedes i 40 ml 95% van-15 dig ethanol og 6,11 ml (12,2 mmol) vandig 2,0 N HCI tilsattes under omrøring. Opløsningen filtreredes gennem CELITE, afkøledes til 0° i 17 timer og filtreredes dernæst til opnåelse af 4,33 g af titelforbindelsen som dens hydrochloridsalt, smp. 254-257°.

20 Analyse beregnet for C^gHggCINgO^: C, 60,08; H, 6,90; N, 11,06;

Cl, 9,33.

Fundet (korr. for 0,28% H20): C, 59,73; H, 6,97; N, 11,14;

Cl, 9,36.

25 Ekempel 2 1-amino-2-{2-f(5-dimethylaminomethyl-2-furyl)methylthio]-ethyl- amino}cyclobuten-3,4-dion

En opløsning af 2-[(5-dimethylaminomethyl-2-furyl)methylthio]-ethylamin (2,89 g, 13,5 mmol) (fremstillet iht. til fremgangsmåden, 30 som er beskrevet i belgisk patentskrift nr. 857.388) i 30 ml methanol sattes dråbevis over et tidsrum på 30 minutter til en kold (5°) omrørt opløsning af 1,2-dimethoxycyclobuten-3,4-dion (1,92 g, 13,5 mmol) i 50 ml methanol. Efter 3 timer ved omgivelsernes temperatur afkøledes opløsningen til 5° og overskydende vandfri ammoniak bob-35 27 ledes i opløsningen i 5 minutter. Blandingen omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer og filtreredes dernæst til opnåelse af 2,48 g af titel forbindelsen, smp. 227-230° (dek.).

En analytisk prøve fremstilledes ved omkrystallisation fra 95% 05 vandig ethanol og dernæst fra methanol og tørredes i vakuum over PgOg i 18 timer til opnåelse af titelforbindelsen som et usprødt, klæbende fast stof; NMR-spektret (100 MHz) i dg-dimethylsulfoxid viste tilstedeværelsen af ca. 0,2 mol methanol.

10 Analyse beregnet for ci4HigN3°3S·0'2 CH^O: C, 54,01; H, 6,32; N, 13,31; S, 10,15.

Fundet (korr. for 0,54% H2O): C, 53,72; H, 6,07; N, 14,01; S, 10,51.

15 Ekempel 3 1-amino-2-{2-r(5-d?methylaminomethyl-2-thienyi)methylthio]-ethyl-amino}cyclobuten-3,4-dion

En opløsning af 2-[(5-dimethylaminomethyl-2-thienyl)methylthio]-ethylamin (2,06 g, 8,94 mmol) (fremstillet iht. til fremgangsmåden, 20 som er beskrevet i belgisk patentskrift nr. 867.105) i 20 ml methanol sattes på én gang til en kold (5°) opløsning af 1,2-dimethoxy-cyclobuten-3,4-dion (1,27 g, 8,94 mmol) ί 20 ml methanol. Efter 3½ timer ved omgivelsernes temperatur afkøledes opløsningen til 5° og overskydende vandfri ammoniak bobledes i opløsningen i 5 minutter.

25 Blandingen omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer og filtreredes dernæst til opnåelse af 2,66 g produkt. Omkrystallisation fra 95% vandig ethanol gav titelforbindelsen, smp. 240-243° (dek.).

Analyse beregnet for C^H^gNgO^: C/ 51'67i H/ 5/88/ 30 N, 12,91; S, 19,70.

Fundet: C, 51,60; H, 5,76; N, 12,97; S, 19,69.

Ekempel 4 35 2-{2-r(5-dimethylaminomethyl-2-furyl)methylthio1-ethvlamino}-1-methylaminocyclobuten-3,4-dion

En opløsning af 2-[(5-dimethyiaminomethyl-2-furyl)methylthio]-

DK 165546 B

28 ethylamin (2,89 g, 13,5 mmol) i 30 ml methanol sattes på én gang til en kold (5°) opløsning af 1,2-dimethoxycyclobuten-3,4-dion (1,92 g, 13,5 mmol) i 50 ml methanol. Efter 3 timer ved omgivelsernes temperatur afkøledes opløsningen til 5° og overskydende vandfri ammoniak 05 bobledes i opløsningen i 5 minutter. Blandingen omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer, inddampedes under reduceret tryk, tritureredes dernæst med acetonitril og filtreredes til opnåelse af 2,9 g råt produkt. Produktet anbragtes på 40 g silicagel (230-400 mesh) og kromatograferedes ved flash-kromatografi under anvendelse 10 af en gradient-elution af methanol-acetonitril. De passende fraktioner inddampedes, kombineredes dernæst i methanol, behandledes med trækul, filtreredes og inddampedes til næsten tørhed. Det faste stof tritureredes med acetonitril og filtreredes til opnåelse af titelforbindelsen, smp. 176-177,5°.

15

Analyse beregnet for C-]5H21N3°3S: C, 55,71*, H, 6,54; N, 12,99; S, 9,91.

Fundet (korr. for 1,86% HgO): C, 55,46; H, 6,39; N, 13,14; S, 10,30.

20

Ekempel 5 2-f2-r(5-dirnethylaminomethvI-2-thienyl)methylthiol-ethylamino}-1- methylaminocyclobuten-3,4-dion

En opløsning af 2-[(5-dimethylaminomethyl-2-thienyl)methylthio]-25 ethylamin (1,32 g, 5,73 mmol) i 20 ml methanol sattes til en kold (5°) opløsning af 1,2-dimethoxycyclobuten-3,4-dion (814 mg, 5,73 mmol) i 15 ml methanol. Efter 3% timer ved omgivelsernes temperatur afkøledes opløsningen til 5° og overskydende vandfri methylamin bobledes i opløsningen i 5 minutter. Blandingen omrørtes ved omgivel-30 sernes temperatur i 70 timer og filtreredes dernæst til opnåelse af 1,38 g produkt. Omkrystallisation fra ethanol gav titelforbindelsen, smp. 185-187°.

Analyse beregnet for C15H21N3°2S2: C/ 53'07/ H' 6/23; 35 N, 12,38; S, 18,89.

Fundet: C, 53,18; H, 6,21; N, 12,25; S, 16,94.

29

UK 100940D

Ekempel 6 1- amino-2-{2-[(5-dimethylaminomethyl-4-methyl-2“thienyl)methylthio]-ethylamino]cyclobuten-3,4-dion

En opløsning af 2-[(5-dimethylaminomethyl-4-methyl-2-thienyl)-05 methylthiojethylamin (3,0 g, 12,3 mmol) (fremstillet iht. fremgangs måden, som er beskrevet i offentliggjort britisk patentansøgning nr. 2.063.875) og 1-amino-2-methoxycyclobuten-3,4-dion (1,56 g, 12,3 mmol) i 50 ml methanol omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer og filtreredes dernæst til opnåelse af 3,72 g produkt. Omkry-10 stallisation fra 95% vandig ethanol gav 3,1 g af titelforbindelsen.

Produktet (3,1 g, 9,13 mmol) suspenderedes i 40 ml methanol og 1,52 ml vandig 6,0 N HCI tilsattes under omrøring. Blandingen filtreredes og det faste stof omkrystalliseredes fra vandig methanol til opnåelse af titelforbindelsen som dens hydrochloridsalt, smp.

15 202-205°.

Analyse beregnet for C^H^NgOgSgHCI: C, 47,93; H, 5,90; N, 11,18; S, 17,06,

Cl, 9,43.' 20 Fundet (korr. for 0,38% F^O): C, 47,74; H, 5,79; N, 11,41; S, 17,21,

Cl, 9,42.

Ekempel 7 25 1-amino-2-{2-f(5“piperidinomethyl-4-methyl“2-thienvl)methylthio1- ethylaminojcyclobuten-3,4-dion

Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 6 gentoges med undtagelse af, at den deri anvendte 2-[(5-dimethylaminomethyl-4-methyl- 2- thienyl)methylthio]ethylamin erstattedes af en ækvimolær mængde 30 af 2-[(5-piperidinomethyl-4-methyl-2-thienyl)methylthio]ethylamin (fremstillet iht. fremgangsmåden, som er beskrevet i offentliggjort britisk patentansøgning nr. 2.063.875). Produktet (3,64 g, 9,6 mmol) suspenderedes i 50 ml ethanol og 4,8 ml vandig 2,0 N HCI tilsattes under omrøring. Blandingen filtreredes og det faste stof 35 omkrystalliseredes fra vandig ethanol til opnåelse af titelforbindelsen som dens hydrochloridsalt, smp. 150-157°.

DK 165546B

30

Analyse beregnet for c-j8H25N3°3S2HCI : C, 51,97; H, 6,30; N, 10,10; S, 15,41,

Cl, 8,53.

Fundet (korr. for 1,58% H20): C, 52,05; H, 6,33;· 05 N, 10,37; S, 15,24,

Cl, 8,16.

Ekempel 8 1-amino-2-[3-(3-pipendinomethylphenoxv)propylamino'lcyclobuten-10 3,4-dion

En opløsning af 3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamin (fra dihyrochloridet, 43,37 g, 0,135 mol) i 250 ml methanol sattes til en suspension af 1-amino-2-methoxycyclobuten-3,4-dion (17,16 g, 0,135 mol) i 350 ml methanol og omrørtes ved omgivelsernes temperatur.

15 Efter 22 timer filtreredes blandingen til opnåelse af 38,0 g produkt.

Produktet (38,0 g, 0,111 mol) suspenderedes i 375 ml vandig 95% ethanol og 55,3 ml vandig 2,0 N HCI tilsattes under omrøring. Blandingen filtreredes til opnåelse af 40,5 g af titelforbindelsen som dens hydrochloridsalt, hvilket er identisk med det i eksempel 1 20 fremstillede produkt.

Produktet rensedes yderligere ved opløsning i 30% vandig ethanol, filtreredes dernæst gennem en pude af silicagel og carbon, inddampedes, og det faste stof omkrystailiseredes fra vandig ethanol til opnåelse af et farveløst hydrochloridsalt af titelforbndelsen, smp.

25 257-259°.

Analyse beregnet for CTgH25N3^3HCi: C, 60,08; H, 6,90; N, 11,06; Cl, 9,33.

Fundet: C, 59,82; H, 7,10; 30 N, 10,87; Cl, 9,47.

Ekempel 9 1-amino-2-[3-(3-dimethvlaminomethylpenoxy)propylamino]cyclobuten- 3,4-dion 35 En blanding af 3-(3-dimethylaminomethylphenoxy)propylamin (1,41 g, 6,77 mmol) (fremstillet iht. fremgangsmåden, som er beskrevet i belgisk patentskrift nr. 867.106) og l-amino-2-methoxy-

DK 165546B

31 cyclobuten-3,4-dion (0,86 g, 6,77 mmol) i 40 ml methanol omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 20 timer og filtreredes dernæst til opnåelse af 1,95 g af titelforbindelsen.

Produktet (1,95 g, 6,43 mmol) suspenderedes I 35 ml ethanol 05 og 3,21 ml 2,0 N vandig HCI tilsattes under omrøring. Blandingen filtreredes og det faste stof om krysta I liseredes fra vandig ethanol til opnåelse af hydrochloridsaltet af titelforbindelsen, smp. 205-207°.

Analyse beregnet for C^gHg^N^OgHCI: C, 56,55; H, 6,52; 10 N, 12,37; Cl, 10,34.

Fundet: C, 56,25; H, 6,56; N, 12,36; Cl, 10,27.

Eksempel 10 15 Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 9 gentages med und tagelse af, at den deri anvendte 3-(3-dimethylaminomethylphenoxy)-propylamin erstattes af en ækvimolær mængde af hhv.

(a) 3-(3-pyrrolidinomethylphenoxy)propylamin, 20 (b) 3-[3-(2-methylpyrrolidino)methylphenoxy]propylamin, (c) 3-[3-(3-methylpyrrolidino)methylphenoxy]propylamin, (d) 3-i3-(4-methylpiperidino)methylphenoxy]propylamin, (e) 3-(3-morpholinomethylphenoxy)propylamin, (f) 3-[3-(4-hydroxypiperidino)methylphenoxy]propylamin, 25 (g) 3-[3-(N-methylpiperazino)methylphenoxy]propylamin, (h) 3-[3-(1,2,3,6-tetrahydro-1-pyridyl)methylphenoxy]propylamin, (i) 3-(3-hexamethyleniminomethylphenoxy)propylamin, (j) 3-(3-heptamethyleniminomethylphenoxy)propylamin, (k) 4-(3-piperidinomethylphenoxy)butylamin, 30 (I) 5-(3-piperidinomethylphenoxy)pentylamin, (m) 3-(3-octamethyleniminomethylphenoxy)propylamin, (n) 3-[3-(3-azabicyclo[3.2.2]non-3-yl)methylphenoxy]propylamin og (o) 3-[3-(3-pyrrolino)methylphenoxy)propylamin, 35 og der fremstilles derved hhv.

DK 165546B

32 (a) 1 -amino-2- [3-(3-pyrrolidinomethylphenoxy)propylamino]cyclo-buten-3,4-dion som dens hydrochloridsalt, smp. 192,5-195°.

Analyse beregnet for C-eHooNoO^HCI: C, 59,10; H, 6,61; 05 N, 11,49; Cl, 9,69.

Fundet (korr. for 0,55% H^O): C, 58,92; H, 6,73; N, 11,61; Cl, 9,41.

(b) 1-amino-2-3-[3-(2-methylpyrrolidino)methylphenoxy ] propylamino-10 cyclobuten-3,4-dion som dens hydrochloridsalt, smp. 210-212°.

Analyse beregnet for c<igH25N3°3HC{: C, 60,08; H, 6,90; N, 11,06; Cl, 9,33.

Fundet: C, 59,97; H, 6,92; 15 N, 10,88; Cl, 9,46.

(c) 1-amino-2-{3-[3-(3-methylpyrrolidino)methylphenoxy] propylamino}-cyclobuten-3,4-dion som dens hydrochloridsalt, smp. 184,5-187°.

20 Analyse beregnet for C^gH^NgOgHCI: C, 60,08; H, 6,90; N, 11,06; Cl, 9,33.

Fundet (korr. for 0,26% HgO): C, 60,43; H, 7,02; N, 11,03; Cl, 9,31.

25 (d) 1-amino-2-{3-[3-(4-methylpiperidino)methyiphenoxy]propylamino}- cyclobuten-3,4-dion, (e) 1-amIno-2-[3-(3-morpholinomethyiphenoxy)propyiamino]cyclobuten- 3,4-dion, (f) 1-amino-2-{3-[3-(4-hydroxypiperidino)methylphenoxy]propylamino}- 30 cyclobuten-3,4-dion, (g) 1-amino-2-{3-[3-(N-methylpiperazino)methylphenoxy]propylamino}-cyclobuten-3,4-dion, (h) 1-amino-2-{3- [3-(1,2,3,6-tetrahydro-1-pyridyl)methylphenoxy]-propylamino}cyclobuten-3,4-dion, smp. 213-215° (dek.), 35 (i) 1 -amino-2- [3-(3-hexamethyleniminomethylphenoxy)propylamino]- cyclobuten-3,4-dion som dens hydrochloridsalt, smp. 200-202°.

DK 165546B

33

Analyse beregnet for C9nH97N,(X,HCI: C, 60,98; H, 7,16; N, 10,67; Cl, 9,00.

Fundet (korr. for 0,28% HgO): C, 61,25; H, 7,14; N, 10,55; Cl, 8,61.

05 (j) 1-amino-2-[3-(3-heptamethyleniminomethylphenoxy)propylamino]-cyclobuten-3,4-dion, smp. ubestemt, gradvis dekomponering ~200-240°.

10 Analyse beregnet for Cg^HggNgOg.· C, 67,90; H, 7,87; N, 11,31.

Fundet: C, 66,44; H, 7,74; N, 11,33.

(k) 1-amino-2-[4-(3-piperidinomethylphenoxy)butylamino]cyclobuten- 3.4- dion, 15 (O 1-ammo-2-[5-(3-piperidinomethylphenoxy)pentylamlno]cyclobuten- 3.4- dion, (m) 1-amino-2-[3-(3-octamethyleniminomethylphenoxy)propylamino]-cyclobuten-3,4-dion, smp. ubestemt.

20 Analyse beregnet for C22H31N3°3: c' ^8,54; H, 8,11; N, 10,90.

Fundet: C, 68,42; H, 8,42; N, 11,10.

(n) 1-amino-2-{3-[3-(3-azabicyclo[3.2.2]non-3-yl)methylphenoxy]-propylamino)cyclobuten-3,4-dion som dens hydrochloridsalt, smp.

25 162-164°, og (o) 1-amino-2-{3-[3-(3-pyrrolino)methylphenoxy]propylamino}cyclo-buten-3,4-dion.

Eksempel 11 30 1-methylamino-2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]cyclo- buten-3,4-dion

En opløsning af 3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamin (fra dihydrochloridet, 3,21 g, 10,0 mmol) i 40 ml methanol sattes til en opløsning af 1,2-dimethoxycyclobuten-3,4-d?on (1,42 g, 10,0 mmol) i 35 40 ml methanol. Efter 1 time ved 10° og 30 minutter ved omgivelser nes temperatur afkøledes opløsningen til 5° og den overskydende vandfrie methylamin bobledes i opløsningen i 5 minutter. Blandingen

DK 165546 B

34 omrørtes f 17 timer ved omgivelsernes temperatur og filtreredes dernæst til opnåelse af 2/77 g produkt.

Produktet (2/77 g) suspenderedes I 40 ml ethanol og 4/07 ml (8/1 mmol) vandig 2,0 N HCI tilsattes under omrøring til opnåelse af 05 hydrochloridsaltet af titelforbindelsen, smp. 194-198°.

Analyse beregnet for C20H27N3°3*HC,: C, 60,99; H, 7,16; N, 10,67. Fundet (korr. for 1,35% HgO): C, 60,63; H, 6,96; N, 10,71.

10 Ekempel 12 2-i3-(3-piperidinomethylphenoxv)propvlam?no1-1-(3-pyridyl)methyl- aminocyclobuten-3,4-dion

Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 11 gentoges med undtagelse af, at den deri anvendte methylamin erstattedes af 1,08 15 g (10,0 mmol) 3-aminomethylpyridin. Det rå produkt anbragtes på 65 g silicagel (230-400 mesh) og kromatograferedes ved flash-kromatografi under anvendelse af en gradient-elution af methanol-methy-lenchlorid indeholdende 1% NH^OH. De passende fraktioner kombineredes, inddampedes og det faste stof omkrystalliseredes fra methanol 20 til opnåelse af titelforbindelsen, smp. 174-178,5°.

Analyse beregnet for C25H30N4°3: C/ 69Ί°> H, 6,96; N, 12,89.

Fundet (korr. for 0,52% HgO: C, 68,80; H, 7,03; N, 12,.74 25 Eksempel 13 2- r3-(3-piper?dinomethylphenoxy)propylamino1 -1 -propylaminocyclo-buten-3,4-dion

Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 11 gentoges med undtagelse af, at den deri anvendte methylamin erstattedes af 4,0 30 ml (48,7 mmol) propylamin. Det rå produkt anbragtes på 60 g silicagel (230-400 mesh) og kromatograferedes ved flash-kromatografi under anvendelse af en gradient-elution af methanol-methylenchlorid.

De passende fraktioner kombineredes og den faste remanens om krystalliseredes fra methanol til opnåelse af titelforbindelsen, smp. 158-35 160°.

Analyse beregnet for C22H31N3°3: c' 68'54ί 8/11j N, 10,90.

Fundet: C, 68,11; H, 8,25; N, 1T,21.

DK 165546 B

35

Eksempel 14

Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 12 gentages med undtagelse af, at den deri anvendte 3-aminomethylpyridin erstattes af en overskydende molær mængde af hhv.

05 (a) ethylamin, (b) n-butylamin, (c) allylamin, (d) propargylamin, 10 (e) benzylamin, og (f) 6-methyl-3-aminomethylpyridin, og der fremstilles derved hhv.

15 (a) 1 -ethylamino-2- [3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]cyclo- buten-3,4-dion, (b) 1-butylamino-2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]-cyclobuten-3,4-dion, (c) 1-allylamino-2-[3-(3’-piperidinomethylphenoxy)propylammo]- 20 cyclobuten-3,4-dion, smp. 158-159,5°.

Analyse beregnet for C22H29N3°3: C/ 68'90' H' 7/82/ N/ 10,96.

Fundet: C, 68,81; H, 7,70; N, 10,72.

25 (d) 2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]-1 -(2-propynyl- amino)cyclobuten-3,4-dion, smp. 158-160°.

Analyse beregnet for C22H27N303: C, 69,27; H, 7,13; N, 11,02.

Fundet: C, 69,26; H, 7,25; N, 10,78.

30 (e) 1-benzylamino-2-[3-(3-piperidinomethylphenoxy)propylamino]-cyclobuten-3,4-dion-hydrochlorid, smp. 136-140°.

Analyse beregnet for C^H^NgOgHCI: C, 66,44; H, 6,86; 35 N, 8,94; Cl, 7,54.

Fundet: C, 65,41; H, 7,08; N, 8,83; Cl, 7,67.

DK 165546B

36 og (f) 1 -(6-methyl-3-pyridyl )methyIamino-2- [3-(3-piperidinomethyIphen-oxy)-propylamino]cyclobuten-3,4-dion.

05

Eksempel 15 1-amino-2-[3-(6-piperidinomethyl-2-pyridyloxv)propylamino'Icvclo- buten-3,4-d?on A. 2-chlor-6-piperidinomethylpyridin 10 ΤΪΙ 2-chlor-6-methylpyridin (50,0 g, 0,392 mol) i 393 ml carbon- tetrachlorid sattes N-bromsuccinimid (87,2 g, 0,49 mol) og 1,0 g benzoyl peroxid. Blandingen omrørtes under tilbagesvaling i 22 timer, afkøledes til 10° og filtreredes. Det afkølede filtrat behandledes dernæst langsomt med piperidin (83,5 g, 0,98 mol) og henstod under 15 omrøring ved omgivelsernes temperatur i 18 timer. Efter fjernelse af piperidinhydrobromidet ved filtrering koncentreredes filtratet til ca. halv volumen og ekstraheredes med 6 N HCI (65 ml) og 3 N HCI (40 ml). De sure ekstrakter gjordes basiske med 40% natriumhydroxid og produktet ekstraheredes i methylenchlorid. Opløsningsmidlet inddam-.

20 pedes og remanensen destilleredes til opnåelse af 41% af titelforbindelsen som en farveløs olie, kgp. 101-103°/ 0,45 mm Hg.

Analyse beregnet for C^^H^gCINg: C, 62,71; H, 7,18; N, 13,29;

Cl, 16,82.

25 Fundet: C, 61,71; H, 7,31; N, 13,63;

Cl, 17,20.

B. N-r3-(6-piperidinomethyl-2-pyridyloxy)propyl]formamid 3-aminopropanol (12,84 g, 0,171 mol) sattes til en suspension 30 af 50% natriumhydrid i mineralolie (7,96 g, 0,166 mol) i 180 ml tør DMP og blandingen opvarmedes til 80-83°. En opløsning af 2-chlor- 6-piperidinomethylpyridin (34,0 g, 0,161 mol) (fremstillet i trin A) i 180 ml tør DMF tilsattes dernæst dråbevis og efter endt tilsætning hævedes temperaturen til 125-128° i 3 timer efterfulgt af 17 timer 35 ved omgivelsernes temperatur. De udfældede salte fjernedes ved filtrering og opløsningsmidlet blev afdrevet under vakuum. Den olieag-tige remanens opløstes i methylenchlorid, vaskedes med vand, tørre-

DK 165546B

37 des og opløsningsmidlet inddampedes. Remanensen genopløstes i acetonitril og ekstraheredes med skelly B. Efter fjernelse af opløsningsmidlet rensedes den ri olie ved flash-kromatografi på 270 g silicagel (230-400 mesh) under anvendelse af en gradient-elution af 05 methanol-methylenchlorid og inddampedes til opnåelse af titelproduktet som en gul olie, 21,63 g (48,4%).

C. 3-(6-piperidinomethyl2-pyridyloxy)propylamin N-[3-(6-piperidinomethyl2-pyridyloxy)propyl]formamid (19,6 g, 10 70,7 mmol) (fremstillet i trin B) sattes til en opløsning af 85% kali umhydroxid-kugler (18,63 g, 0,332 mol) opløst i 180 ml methanol og opløsningen opvarmedes under svag tilbagesvaling i 20 timer. Opløsningsmidlet blev afdrevet i vakuum og remanensen rensedes delvis ved genopløsning i ca. 180 ml 20% methanol-methylenchlorid og pas- 15 seredes gennem en pude af 38 g silicagel. Silicaen vaskedes med yderligere 120 ml elueringsmiddel og de kombinerede filtrater inddampedes til en ravgul olie. Endelig rensning tilvejebragtes ved flash-kromatografi pi 120 g silicagel (230-400 mesh) under anvendelse af en gradient-elution af methanol-methylenchlorid indeholdende 20 0,5% NH^OH. Titelforbindelsen opnåedes som en gul olie med et ud bytte på 63%.

D. 1-amino-2-[3-(6-piperid?nomethyl-2-pyridyloxy)propylamino1-cyclobuten-3,4-dion 25 En blanding af 3-(6-piperidinomethyl-2-pyr?dyloxy)propylamin (2,5 g, 10 mmol) (fremstillet i trin C) og l-amino-2-methoxycyclo-buten-3,4-dion (1,27 g, 10 mmol) i 35 ml methanol omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer og filtreredes til opnåelse af 2,71 g produkt.

30 Produktet (2,71 g, 7,78 mmol) suspenderedes i 35 ml absolut ethanol og 7,87 ml vandig 6,0 N HCI tilsattes under omrøring. Efter 64 timer ved 0° opsamiedes saltet ved filtrering og omkrystalliseredes fra vandig ethanol til opnåelse af hydrochloridsaltet af titelforbindelsen, smp. 255-258°.

Analyse beregnet for C13H24N4°3HCI; C, 56,77; H, 6,61; N, 14,71; Cl, 9,31.

35 38

Fundet: C, 56,41; H, 6,80; N, 14,41; Cl, 9,98.

* Eksempel 16 05 1 -amino-2- f 3-(6-dimethvlaminomethyl2-pyridyloxy)propylamino1 - cyclobuten-3,4-dion

Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 15 gentoges med undtagelse af, at den i trin A anvendte piperidin erstattedes af et overskud af vandfri dimethylamin. Produktet (2,26 g, 7,43 mmol) 10 suspenderedes i 40 ml 95% ethanol og 7,43 ml vandig 2,0 N HCI tilsattes under omrøring. Efter inddampning af størstedelen af opløsningsmidlet tritureredes remanensen under isopropylalkohol og omkrystalliseredes fra vandig ethanol til opnåelse af hydrochloridsaltet af titeiforbindelsen, smp. 230-234° (dek.).

15

Analyse beregnet for C-]5H20N4°3HC,: C, 52,87; H, 6,21; N, 16,44; Cl, 10,40.

Fundet: C, 51,52; H, 5,98; N, 16,64; Cl, 10,88.

20

Ekempel 17 1-amino-2-r2-(3-piperidinomethylthiophenoxy)ethylamino]cyclobuten- 3,4-dion A. m-dithiobenzoylchlorid 25 En blanding af m-dithiobenzoesyre (20,8 g, 67,9 mmol) (frem stillet iht. til fremgangsmåden beskrevet i J. Chem. Soc., London, 119, 1792 (1921)) og thionylchlorid (200 ml) tilbagesvaledes i fire timer, filtreredes og den overskydende SOC^ fjernedes i vakuum.

30 B. Dieth?obis-3,3l-N,N-d?(p?peridino)benzencarboxamid

Det rå produkt fra trin A, opløst i 100 ml tetrahyd rof uran, sattes dråbevis ved 3° til en opløsning af piperidin (25,1 g, 0,29 mol) i 500 ml tetrahyd rof uran. Blandingen omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 76 timer og hældtes i 1500 ml fortyndet HCI (ca.

35 2N). Efter én time ekstraheredes produktet i ether og vaskedes i rækkefølge med vand, vandig 1N NaOH og vand. Opløsningsmidlet inddampedes til opnåelse af 26,4 g af titelforbindelsen.

DK 165546 B

35 C. 3-(piperidinomethyl )thiophenol

Til en suspension af lithiumaluminiumhydrid (45,3 g, 1,19 mol) i 2200 ml ether sattes drlbevis under nitrogen en opløsning af di-thiobis-3,3,-N,N-di(piperidino)benzencarboxamid (141,5 g, 0,32 mol) 05 (fremstillet i trin B) i 2200 ml ether og blandingen omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 20 timer. Blandingen dekomponeredes ved tilsætning af mættet natriumsulfatopløsning og filtreredes. Filterkagen omrørtes med 3000 ml vand og en opløsning af citronsyremono-hydrat (550 g, 2,62 mol) i 550 ml vand tilsattes. Opløsningens pH-10 værdi indstilledes til ca. 2 med 12 N HCI og dernæst til pH 8 med koncentreret ammoniumhydroxid. Opløsningen ekstraheredes grundigt med ether til opnåelse af 120 g produkt.

En portion af titelforbindelsen om krystal liseredes fra isopropyl-alkohol, smp. 121-123°; massespektrum 206 (M+).

15

Analyse beregnet for C^H^NS: C, 69,56; H, 8,21; N, 6,76; S, 15,46.

Fundet: C, 69,02; H, 8,21; N, 6,67; S, 15,06.

20 D. N-{2-f3-(piperidinomethyl)thiophenoxy]ethyl)phthalimid

En blanding af 3-(piperidinomethyl)thiophenol (2,07 g, 10 mmol) (fremstillet i trin C) og N-(2-bromethyl)phtha!imid (2,41 g, 9,5 mmol) i 10 ml tør DMF omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 84 25 timer. Opløsningsmidlet inddampedes under reduceret tryk og den ri olie flash-kromatograferedes på 100 g silicagel (230-400 mesh) under anvendelse af 2,5% methanol i methylenchlorid med 0,2% NH^OH som elueringsmiddel. De passende fraktioner kombineredes og inddampedes til opnåelse af en olie, der krystalliserede under 30 ether. Omkrystallisation fra acetonitril gav 1,2 g af hydrobromid-saltet af titelforbindelsen, smp. 180-181,5°.

Analyse beregnet for C??H?.N?0?SHBr: C, 57,26; H, 5,46; N, 6,07; Br, 17,32; 35 S, 6,95.

Fundet: C, 56,98; H, 5,43; N, 6,30; Br, 17,51; S, 7,10

DK 165546B

40 E. 2-(3-piperidinomethylthiophenoxy)ethylamin

Vandfrit hydrazin (1,79 g, 56,0 mmol) sattes til en suspension af N-{2-[3-piperidinomethyl)thiophenoxy]ethyl}phthalimidhydrobromid (5,17 g, 11,2 mmol) (fremstillet i trin D) i 200 ml 95% ethanol, om-05 rørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer og filtreredes. Filtratet blev afdrevet og den halvfaste remanens omrørtes med flere portioner ether. Inddampning af opløsningsmidlet gav 2,8 g af titelforbindelsen som en gul olie.

10 F. 1 -amino-2- f2“(3-piper?dinomethylthiophenoxy)ethylamino]cyclo-buten-3,4-dion

Den i trin E fremstillede rå amin (1,4 g, 4,05 mmol) i 40 ml methanol sattes til en suspension af 1-amino-2-methoxycyclobuten- 3,4-dion (0,515 g, 4,05 mmol) i 100 ml methanol. Blandingen omrør-15 tes i 20 timer ved omgivelsernes temperatur og filtreredes dernæst til opnåelse af 0,8136 g produkt. En anden portion opnåedes fra den koncentrerede modervæske og de kombinerede portioner omkrystalliseredes fra methanol til opnåelse af 0,786 g (56%) af titelforbindelsen, smp. 228-230° (dek.).

20

Analyse beregnet for c-j8H23N3°2S: C, 62,56; H, 6,71; N, 12,16; S, 9,28.

Fundet: C, 62,17; H, 6,36; N, 12,59; S, 9,60.

25

Ekempel 18 1-amino-2-r3-(3-piperidinomethylthiophenoxy)propvlamino1cvclo-buten3,4-dion A. N-{3-[3-( piperidinomethyl )thiophenoxy 1 propy Π phthalimid 30 Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 17, trin B, gentoges med undtagelse af, at det deri anvendte N-(2-bromethyl)-phthalimid erstattedes med en ækvimolær mængde af N-(3-brompropyl)-phthal-imid. Det kromatograferede produkt om krysta I li seredes fra isopropyl-al kohol til opnåelse af titelforbindelsen som dens hydrobromidsalt, 35 smp. 188-192°.

DK 165546 B

41

Analyse beregnet for C^gh^gNgOgSHBr: c, 58,10; H, 5,72; N, 5,89; Br, 16,81.

Fundet: C, 57,79; H, 5,41; N, 5,73; Br, 16,80.

05 B. 3-(3-piperidinomethylthiophenoxy)propylamin

Til en opløsning af N-{3-[3-(piperidinomethyl)thiophenoxy]-propyl}phthalimidhydrobromid (58,0 g, 0,12 mol) (fremstillet i trin A) i 1650 ml 95% ethanol sattes hydrazinhydrat (26,9 g, 0,54 mol) 10 og reaktionsblandingen opvarmedes til 45° i 4,5 timer. Blandingen fortyndedes med 500 ml ether, filtreredes og filtratet inddampedes til tørhed til opnåelse af titelforbindelsen som en ravgul olie (14,1 g). Én portion destilleredes til en farveløs olie, kgp. 154-155°/0,15 mm Hg.

15

Analyse beregnet for C^H^NgS: C, 68,13; H, 9,15; N, 10,59.

Fundet: C, 67,37; H, 9,07; N, 10,94.

C. 1-amino-2-[3-(3-p?peridinomethylthiophenoxy)propylamino1- 20 cyclobuten-3,4-dion 1-amino-2-methoxycyclobuten-3,4-dion (1,20 g, 9,5 mmol) sattes til en opløsning af den i trin B fremstillede rå amin (2,50 g, 9,5 mmol) i 75 ml methanol og blandingen omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 16 timer. Bundfaldet filtreredes til opnåelse af 25 2,82 g råt produkt.

Det rå faste stof (2,82 g, 7,84 mmol) suspenderedes i 30 ml 95% ethanol og 4,0 ml vandig 2,0 n HCI tilsattes under omrøring.

Efter ca. 15 minutter tilsattes 40 ml acetone og blandingen henstod ved omgivelsernes temperatur i 16 timer. Bundfaldet omkrystallise-30 redes fra vandig ethanol til opnåelse af 1,64 g af hydrochloridsaltet af titelforbindelsen, smp. 236-237,5°.

Analyse beregnet for cigH25N3°3S*HC,: C, 57,64; H, 6,62; N, 10,61; S, 8,10; 35 Cl, 8,95.

Fundet: C, 57,72; H, 6,56; N, 10,66; S, 8,49;

Cl, 8,88.

42

DK 165546B

Ekempel 19 1-amino-2-{2-f(5dimethylaminomethyl-thienyl)methylthio1ethylamino}- cydobuten3/4-dion

En blanding af 2-[(5-dimethylaminomethyl-3-thienyl)methylthio]-05 ethylamin (2,11 g, 8,68 mmol) (fremstillet iht. til fremgangsmåden, som er beskrevet i offentliggjort europæisk patentansøgning nr.

27.744) og 1-amino-2-methoxycyclobuten-3,4-dion (1,10 g, 8,68 mmol) i methanol omrørtes ved omgivelsernes temperatur i 18 timer og filtreredes. Det rå produkt omkrystalliseredes fra 2-methoxy-10 ethanol til opnåelse af 1,30 g af titelforbindelsen som et farveløst fast stof, smp. 234-236°.

Analyse beregnet for C^H^gNgOgSg: C, 51,66; H, 5,88; N, 12,91; S, 19,71.

15 Fundet: C, 51,53; H, 5,64; N, 12,62; S, 19,91.

Eksempel 20 1- amino-2-f2-[(5-pipendinomethyl-3-thienyl)methylthio]ethylamino?- 20 cyclobuten-3,4-dion

Den generelle fremgangsmåde fra eksempel 19 gentoges med undtagelse af, at den deri anvendte 2-[(5-dimethylaminomethyl-3-thienyl)methylthio]ethylamin erstattedes af en ækvimolær mængde af 2- [(5-piperidinomethyl-3-thienyl)methylthio]ethylamin (fremstillet iht.

25 til fremgangsmåden, som er beskrevet i offentliggjort europæisk patentansøgning nr. 27.744). Det rå faste stof om krystal liseredes fra 2-methoxyethanol til opnåelse af titelforbindelsen (1,27 g), smp.

236-238°.

30 Analyse beregnet for c-j7H23N3°2S2: C, 55,86; H, 6,34; N, 11,50; S, 17,54.

Fundet: C, 55,59; H, 6,23; N, 11,75; S, 17,62.

35 43

DK 165546B

Eksempel 21 1 -amino-2- f3-(5-dimethylaminomethyl-3-thlenyloxy )propy laminol -cyclobuten-3,4-dion

En ækvlmolær blanding af 4-[3-(amino)propoxy]-N,N-dimethyl-05 2-thiophenmethanamin (fremstillet iht. til fremgangsmåden, som er beskrevet i offentliggjort europæisk patentansøgning nr. 27.744) og 1-amino-2-methoxycyclobuten-3,4-dion omsættes iht. den generelle fremgangsmåde i eksempel 19 til opnåelse af titelforbindelsen.

10 15 20 25 30 35

Claims

44 DK 165546 B

1. Farmaceutisk præparat til behandling af peptisk ulcus, pi enhedsdosisform, KENDETEGNET ved, at det omfatter en peptisk aktivitetsinhiberende mængde pepstatin og en effektiv anti-utcerogen 05 mængde af en forbindelse med formlen z*1 A- <CH2) mZ <CH2) nKH-F=ri< I __ Nt2 10 (/ ^ 1 2 hvori R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hy- 2 1 drogen eller (lavere)aikyl, og hvor R endvidere, når R betegner hydrogen, kan være allyl, propargyl, cyclo(lavere)alkyl(lavere)al-15 kyi, cyc1o(lavere)alkyJ, cyano(lavere)alkyl, 2-fluorethyl, 2,2,2-tri-fluorethyl, hydroxy, 2,3-dihydroxypropyl, 20 m-CVp- e"er R5 ' R3 " hvori p er et helt tal fra 1 til 6 inklusive, q er et helt taJ fra 1 til 3 4 6 inklusive, Rd og R , som kan være ens eller forskellige, betegner 25 hydrogen, (lavere)alkyl, hydroxy, (lavere)alkoxy eller halogen, og hvor R endvidere, når R betegner hydrogen, kan være trifluor- 3 4 5 methyl, eller R og R tilsammen betegner methyiendioxy, R betegner hydrogen, m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, 30. er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, pg A betegner 35 DK 165546 B 45 r6 . *6 r8 i r! __I—. ^(ch2^af Η H~ ' /"‘“ζ'γ'Ή Ί~ 05 Κ9/ -·9 ^ R\ r6 N(CH,)_ 8 • ' .,£)- - >-·ί> g hvori R betegner hydrogen, (lavere)alkyl, (lavere )alkoxy eller ha* 15 logen, r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydrogen, (lavere)alkyl, allyl, propargyl, (lavere)alkoxy(lavere)alkyl, hvori (favere)alkoxy-delen er mindst to carbonatomer væk fra nitro- 20 genatomet, cyclo(lavere)alkyl eller phenyl(lavere)alkyl, under den 8 9 forudsætning, at R og R ikke begge kan være cyclo(lavere)alkyl 8 9 eller at R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, dimethylpyrrolidino, mor-pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino. dimethylpiper-25 idino, hydroxypiperidino, N-methylpiperazino, 1,2,3,6-tetrahydro-pyridyl, 3-pyrrolino, homopiperidino, heptamethylenimino, octa-methylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan, eller et ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer.

2. Præparat ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at R1 og R2 hver for sig uafhængigt betegner hydrogen eller (lavere)alkyl, og at R , når R er hydrogen, endvidre kan betegne allyl, propargyl, cyclo( lavere)al kyl (lavere)al kyl,

35. N/J—\ ^VttVp- e"er Ε5-ζ DK 165546 B 46 . 3 hvori p og q hver for sig er et helt tal fra 1 til 6 inklusive, og R og R^, hver for sig betegner hydrogen, (lavere)alkyl eller (lavere)- alkoxy, m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, 05. er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, 1 er svovl, oxygen eller methylen, og A betegner ** · f < jL /(CH2>r-[f 4- , N(CH2,rXTl· , » y s/ 15 */ν(“2)αγα rn K9/ > \\ el)er +— r6 / v=y r9 20 g hvori R betegner hydrogen, (lavere)alkyi eller (lavere)alkoxy, r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R hver for sig betegner hydrogen eller (lavere)alkyl 8 9 eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, 25 kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, morpholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methylpiperazino, 1,2,3,6-tetrahydro-pyridyl, homopiperidino, heptamethylenimino, octamethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan eller et ikke-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller sol vat deraf, samt en farmaceu-30 tisk acceptabel bærer.

3. Præparat ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at forbindelsen med formel (I) har strukturen 8 f

35 R® -—I_ Ti (CH2 )r--j- -f - (CH2} mZ (CH2} nNH-=rpNHR2 la *’x A 2 47 DK 165546B hvori R betegner hydrogen, (lavere)alkyl, aliyi, propargyl, 3-pyri-dyimethyl eller 6-methyl-3-pyridylmethyl, m er et helt tal fra 0 tit 2 inklusive, n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, 05. er svovl, oxygen eller methylen, g R er hydrogen eller (lavere)alkyl, r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 8 9 gen eller (lavere)alkyl, eller R og R* sammen med nitrogenatomet, 10 hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor-pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methylpiper-azino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethylenimi-no, octamethylenimino eller 3*azabicyclo[3.2.2]-nonan eller et non-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller sol-15 vat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer.

4. Præparat ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, forbindelsen med formel (I) har strukturen

5. Præparat ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at forbindelsen med formel (I) har strukturen N(CH2)r^r—v y y >mZ (CH2) nNH-=j-SHR2 lc r6 x=j y4b 2 hvori R betegner hydrogen eller (lavere)alkyl, allyl, propargyl, 3-pyridylmethyl eller 6-methyl-3-pyridylmethyl, m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, C R er hydrogen eller (lavere)alkyl, r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 8 9 gen eller (lavere)alkyl, eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor-pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methyl-pipefazino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethy-Jenimino, octarnethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan eller et non-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer.

6. Præparat ifølge krav 1, KENDETEGNET ved, at forbindelsen med formel (I) har strukturen R6 ^N(CH,)-|- -j— (CH,) Z(CHj)nNH-prz—NHR Id »•7 ST A 2 hvori R betegner hydrogen eller (lavere)alkyl, allyl, propargyl, 3-pyridylmethyl eller 6-methyl-3-pyridylmethyl, 49 DK 165546 B m er et helt tal fra O til 2 inklusive, n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, g R er hydrogen eller (lavere)alkyl, 05. er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 8 9 gen eller (lavere)alkyl, eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor-pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methylpiper- 10 azino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethylenimi- no, octamethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan eller et non--toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer. 2

7. Præparat ifølge krav 5, KENDETEGNET ved, at R er hydro- 15 gen.

8. Prasparat ifølge krav 1-7, KENDETEGNET ved, at dosis af pepstatin er fra ca. 100 til ca. 175 mg, og at dosis af forbindelsen med formel (I) er fra ca. 2 til ca. 100 mg.

8. R6

20 R^ I TJ (CH2 )r--(- -j— (CH2 )mZ (CH2)nNH-p^z:i —NHR2 Ib RS/ L. &^ 2 25 hvori R betegner hydrogen, (lavere)alkyI, allyl, propargyl, 3-pyri-dylmethyf eller 6-methyl-3-pyridylmethyl, m er et helt tal fra 0 til 2 inklusive, n er et helt tal fra 2 til 5 inklusive, Z er svovl, oxygen eller methylen, C 30. er hydrogen eller (lavere)alkyl, r er et helt tal fra 1 til 4 inklusive, og 8 9 R og R , som kan være ens eller forskellige, betegner hydro- 8 9 gen eller (lavere)aikyl, eller R og R sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan være pyrrolidino, methylpyrrolidino, mor-35 pholino, thiomorpholino, piperidino, methylpiperidino, N-methylpiper-azino, 1,2,3,6-tetrahydropyridyl, homopiperidino, heptamethylenimi-no, octamethylenimino eller 3-azabicyclo[3.2.2]-nonan eller et non- DK 165546 B 48 taxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer.

9. Præparat ifølge krav 8, KENDETEGNET ved, at dosis af for- 20 bindelse (I) er fra ca, 4 til ca. 50 mg.

10. Præparat ifølge krav 8 eller 9, KENDETEGNET ved, at pep-statinet er i form af flydende pepstatin-minikapsler.

11. Farmaceutisk præparat til behandling af peptisk ulcus, på enhedsdosisform, KENDETEGNET ved, at det omfatter fra ca. 100 til 25 ca. 175 mg pepstatin og fra ca. 2 til ca. 15 mg 1-amino-2-[3-(3-pi-peridinomethylphenoxy)propylamino]cyc!obuten-3,4-dion eller et non--toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer.

12. Farmaceutisk præparat til behandling af peptisk ulcus, pi 30 enhedsdosisform, KENDETEGNET ved, at det omfatter fra ca. 100 til ca. 175 mg pepstatin og fra ca. 2 til ca. 15 mg 1-amino-2-[3-(3-di-methylaminomethylphenoxy)propylaminojcyclobuten-3,4-dion eller et non-toxisk, farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt, hydrat eller solvat deraf, samt en farmaceutisk acceptabel bærer. 35 5 50 DK 165546B

13. Farmaceutisk præparat ifølge krav 11 eller 12, KENDETEGNET ved, at pepstatinet er i form af flydende pepstatin-mini kapsl er. 10 15