DK167225B1 - Fremgangsmaade til fremstilling af en hel saccharomyces cerevisiae cellekultur - Google Patents

Description

i DK 167225 B1

Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af en hel Saccharomyces Cerevisiae cellekultur indeholdende cellelegemerne og alle de produkter, der dannes under celleformeringsprocessen.

5

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i krav l’s kendetegnende del anførte. Specielt anvendes der en høj arbejdstemperatur og en forholdsvis høj koncentration af NaCl i det vandige dyrkningsmedium.

10

Det er kendt at sætte forskellige additiver og stabiliseringsmidler til gær, bl.a. natriumchlorid, mælkesyre, as-corbinsyre og/eller naturgummi, se CA, 92, 92718r, CA, 81, 36465, FR 1271640, US 3617306 og US 3407702. Tilsæt-15 ningen og den efterfølgende behandling sker dog ved forholdsvis lav temperatur.

Fra US 2940910 er det kendt at stabilisere gær ved tilsætning af ascorbinsyre eller mælkesyre i nærværelse af 20 naturligt forekommende sukkerarter og efterfølgende behandling med C02· Derimod tilsættes der ikke natriumchlo-rid. Disse kendte processer, der klart adskiller sig fra fremgangsmåden ifølge opfindelsen, giver ikke det Ønskede produkt.

25

Det produkt, der opnås ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, er en vandig suspension med en meget høj koncentration af Saccharomyces Cerevisiae celler, som er stabiliseret ved behandling med specielle stabiliseringsmidler 30 under et driftstrin, som følger efter formeringstrinnet.

Virkningen af stabiliseringen er at undgå eller i høj grad sænke ældningen af cellerne og at holde deres integritet eller helhed og biologiske aktivitet intakt i lang 35 tid, hvorved man forhindrer produktnedbrydning.

DK 167225 B1 2

Det opnåede produkt indeholder en stor mængde enzymer, co-enzymer, skæringsstoffer eller fermenter, gruppe B vitaminer, nucleotider, nucleosider, frie aminosyrer og RNA. Særligt nyttige produkter opnås ud fra Saccharomyces 5 Cerevisiae stammer, som har høj resistens i et surt miljø (f.eks. mavesaft) og mod antibiotika. Disse produktegenskaber gør produktet særligt egnet og effektivt som additiv til dyrefoder, som vægtfaktor og regulator for den bakterielle tarmflora. Produktets virkning er både profy-10 laktisk og kurativt ved mange sygdomme hos mennesker og dyr på grund af enzymatisk og bakteriel ubalance i tarmene.

Det hidtil ukendte produkt har også givet overraskende 15 resultater inden for kosmetikområdet som et yderst aktivt proteinadditiv.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen udføres celleformeringsprocessen ved at sætte følgende bestanddele til en 20 vandig suspension af frisk gær bestående af udvalgte stammer af Saccharomyces Cerevisiae.

- natriumchlorid i en mængde på 0,2-2,5 vægt-% af hele præparatet, 25 - procesaktivatorer valgt blandt: mono- og disaccharider (dextrose, lactose etc.) fortrinsvis i en mængde på 0,5-5 vægt-% af hele præparatet, inositol og magnesiumsulfat, fortrinsvis i en mængde på 0,04-0,1%, lithium-, 30 calcium- og magnesiumchlorid, fortrinsvis i en mængde på 0,2-1,5%, calcium- og magnesiumnitrat, calcium- og natriumsalte af eddikesyre, mælkesyre, gluconsyre og pantothensyre, natriumpyruvat og glutathion, fortrinsvis i en mængde på 0,01-2%, 35 - suspensionsstabilisatorer valgt blandt mikrogranulær cellulose, carboxymethylcellulose, gummi arabicum og DK 167225 B1 3 andre naturligt forekommende stoffer, der er i stand til at danne kolloider, hydratiseret siliciumoxid og silicat.

5 Suspensionen holdes ved en temperatur på mellem 45 °C og 70 °C under bevægelse i et tidsrum på 0,5-5 timer.

Den førnævnte cellekultur stabiliseres ifølge opfindelsen ved at sætte et eller flere af de i det følgende angivne 10 stabiliserende additiver til kulturen og atter holde den vandige opløsning under bevægelse ved 45-70 °C i et tidsrum på 20-40 minutter.

Stabilisatorerne vælges blandt: 15 - benzoesyre, sorbinsyre, propionsyre, myresyre, eddikesyre, vinsyre, ascorbinsyre og mælkesyre samt mælkefermenter (mælkegærstoffer) 20 - ammoniumformiat - phenoler, hydroguinoner eller derivater deraf, benzyl-alkohol og derivater deraf og 25 - alkylestere af p-hydroxybenzoesyre.

Den mængde stabilisator, der skal tilsættes, varierer inden for vidde grænser alt efter det stof eller den blanding af stoffer, der anvendes. Nogle praktiske eksempler 30 på fremstillings- og stabiliseringsprocessen ifølge op findelsen er givet i det følgende.

Produktet, som opnås i form af en tæt brun homogen væske, kan i alle tilfælde anvendes enten som sådan eller kan 35 absorberes i hydratiseret siliciumoxid. Alternativt kan det tørres i et fluidiseret leje i nærværelse af amorft siliciumoxid.

DK 167225 B1 4 EKSEMPEL 1 1000 kg frisk gær anbringes som udgangsmateriale i en 5000 liter emaljeret reaktor, og den vandige suspension 5 opvarmes til 53 °C under bevægelse, hvorefter følgende additiver tilsættes: 25 kg rent natriumchlorid, 30 kg dextrose og 5 kg magnesiumsulfat.

Blandingen holdes under bevægelse i 60 minutter til opnå-10 else af en homogen vandig suspension, hvorefter 2 kg "Nipagin®" (indregistreret varemærke for methyl- eller ethylester af p-hydroxybenzoesyre) tilsættes.

Bevægelsen fortsættes i yderligere 30 minutter til opnå-15 else af et endeligt produkt i form af en homogen tæt væske, som kan anvendes enten som sådan eller absorberes i hydratiseret siliciumoxid, som tilsættes i en mængde på 25 kg.

20 EKSEMPEL 2 1000 kg frisk gær anbringes som udgangsmateriale i en emaljeret 5000 liter reaktor, og den vandige suspension opvarmes til 45 °C under bevægelse, hvorefter følgende 25 additiver tilsættes: 25 kg natriumchlorid, 20 kg calcium-gluconat, 2 kg magnesiumsulfat og 30 kg lactose Farmaco-pea Ufficiale (Italien).

Blandingen holdes i bevægelse i 4 timer og 30 minutter 30 til opnåelse af en homogen vandig suspension, hvorefter 15 kg mikrogranulær cellulose og 2 kg carboxymethylcellu-lose tilsættes.

Suspensionen holdes i bevægelse i yderligere 60 minutter, 35 hvorefter der tilsættes 30 kg sorbinsyre og 20 kg ascor-binsyre Farmacopea Ufficiale (Italien).

DK 167225 B1 5

Bevægelsen fortsættes i yderligere 30 minutter til opnåelse af et endeligt stabiliseret produkt, der kan anvendes enten som sådant eller tørret i nærværelse af siliciumoxid .

5 10 15 20 25 30 35

Claims (5)

1. Fremgangsmåde til fremstilling af en hel Saccharomyces 5 Cerevisiae cellekultur, som indeholder cellelegemerne og alle de produkter, der dannes under celleformeringsprocessen, og som er stabiliseret for at holde celleintegriteten og den biologiske aktivitet uændret i lang tid, kendetegnet ved, at man 10 a) i et celleformeringstrin til en vandig dispersion af frisk gær sætter: - natriumchlorid i en mængde svarende til 0,2-2,5 15 vægt-% baseret på hele præparatet, - procesaktivatorer valgt blandt mono- og disacchari-der, inositol, magnesiumsulfat, lithium-, calcium-og magnesiumchlorid, calcium- og magnesiumnitrat, 20 calcium- og natriumsalte af eddikesyre, mælkesyre, gluconsyre og pantothensyre, natriumpyruvat og glu-tathion, - suspensionsstabilisatorer valgt blandt mikrogranulær 25 cellulose, carboxymethylcellulose, gummi arabicum og andre naturstoffer, der er i stand til at danne kol-loider, hydratiseret siliciumoxid og silicater, og holder suspensionen i bevægelse ved en temperatur på 30 45-70 °C i 0,5-5 timer, og b) i et sterilisationstrin, i hvilket der til den vandige suspension, der holdes i bevægelse, ved samme temperatur som i trin a) sætter en stabilisator valgt blandt: 35 DK 167225 B1 7 - benzoesyre, sorbinsyre, propionsyre, myresyre, eddikesyre, vinsyre, ascorbinsyre, mælkesyre og mælkefermenter (mælkegæringsprodukter), 5. phenoler, hydroquinoner eller derivater deraf og benzylalkohol eller derivater deraf, - alkylestere af p-hydroxybenzoesyre, og 10. ammoniumformiat.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at procesaktivatorerne anvendes i en mængde på 0,01-5%. 15

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at calcium- eller natriumsaltene af den organiske syre vælges blandt calciumlactat, calciumacetat, calcium-gluconat, calciumpantothenat, natriumacetat og natriumpy- 20 ruvat.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den endelige stabiliserede homogene suspension yderligere absorberes i hydratiseret siliciumoxid. 25

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den endelige stabiliserede homogene suspension yderligere tørres i et fluidiseret leje i nærværelse af amorft siliciumoxid. 30 35