DK169178B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af 3-(heterocyclyl eller aryl)-methylthio-2-phenyl-1-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)-2-propanol-forbindelser eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf - Google Patents

Description

DK 169178 B1

Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 3-(heterocyclyl eller aryl)methylthio-2-phenyl-l-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-2-propanolforbindel-ser med den i krav l'a indledning angiv/ne almene formel (I) eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte der-5 af, hvilke forbindelser er meget effektive sotn orale og topiske midler til behandling af svampesygdomme hos mennesker og dyr.

Fra dansk patentansøgning nr. 5729/61 kendes en række •jø im i dazo 1 y lpropano 1 f orb i nde 1 ser , heriblandt nogle med formlen

N

I)

^ N ^OH

1 1 1 15 CH2-C-CH2-S-R

Ph hvori Ph betyder phenyl eller halogensubstitueret phenyl, og R ^ betyder C^_^^alkyl, phenyl, phenyl substitueret med mindst én substituent valgt blandt C^_galkyl, C^_galk-20 oxy og halogen, benzyl eller pyridyl. Disse forbindelser angives at have antifungal virkning, og der er anført in vitro prøvningsresultater for nogle af disse forbindelser, heriblandt én hvori R^ er benzyl, og Ph er dichlor-phenyl. Derimod er der ikke medtaget in vivo prøvnings-2^ resultater for disse forbindelser, som det er tilfældet for en række andre forbindelser ifølge ansøgningen, og dette kunne tyde på at de ikke er tilstrækkeligt aktive til at være værd at inkludere. Endvidere er der ikke noget entydigt struktur-aktivitets-forhold mellem imidazolrækken ^ af antifungale midler og triazolforbindelserne, selv om der godt kan drages visse sammenligninger.

EP offentliggørelsesskrift nr. U061835 angiver en bred klasse af triazol- og imidazolforbindelser med den almene ^ formel DK 169178 Bl 2 R6 OR3 R4 III 2 ____(A)

Az — C-C- C- X-R

17 11 Ϊ5

_ R R R

O

1 2 hvori R og R kan være ens eller forskellige og betyder hydrogen, alkyl, eventuelt substitueret cycloalkyl, cycloalkylmethyl, alkenyl, heterocycly1, aryl eller aral- 10 kyl, som eventuelt er substitueret med halogen, nitro, alkyl, halogenalkyl, alkoxy, phenyl, phenoxy, benzyl_, benzyloxy, halogenpheny1 eller ha logenaIkoxy , R^ betyder hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, aralkyl eller acyl, 4 5 R og R kan være ens eller forskellige og betyder hy- 15 drogen, alkyl, alkenyl eller eventuelt substitueret aryl, 6 7 R og R kan være ens eller forskellige og betyder hydrogen, alkyl, alkenyl eller eventuelt substitueret aryl, X betyder 0, S, SO eller SO^, og Az betyder en 1,2,4-eller 1,3,4-triazol- eller -imidazolring, og isomere, 20 syreadditionssalte og metalkomplekser deraf.

Forbindelserne angives at have fungicid aktivitet, hovedsageligt som plantefungicider, og også at være plante-vækstregulatorer. Der er også en kort henvisning til, at 25 forbindelserne er nyttige til behandling af candidiasis og humane dermatophyt-infektioner.

Det harnu vist sig, at en bestemt klasse af ikke-eksem- plificerede forbindelser omfattet af formlen (A), hvori 30 r\ R4, R5, R6 og R^ er Η, X er S eller SO, og R^ er aryl- methyl, er overraskende effektive som humane antifungale midler ved oral indgivning, og at denne egenskab ikke 2 deles af de tilsvarende forbindelser, hvori R er aryl, som er de eneste forbindelser, hvor X er S, der er eksem— 35 plificeret i EP patentansøgningen. Tilsvarende forbindelser, hvori arylmethylgruppen er erstattet med visse heterocyclylmethylgrupper, har tilsvarende virkning. Den- 3 DK 169178 B1 ne særlige virkning kunne ikke forudses på baggrund af den ovennævnte kendte teknik.

Ued fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstilles således 5 forbindelser med den almene formel

OH

i 10 N M2-C-C^-S(0)n-CH2-R — (I) '=N Ar hvori

Ar betyder phenyl med 1-3 substituenter, der hver for sig 15 er valgt blandt halogen og CF^, n er 0 eller 1, og R betyder phenyl, som eventuelt har 1-3 substituenter, der hver for sig er valgt blandt halogen, CF^, ^alkoxy, 20 ^2 5alkoxycarbonyl °9 Cj ^alkylthio, eller en 5- eller 6-leddet aromatisk heterocyclisk gruppe, som er forbundet via et ringcarbonatom og eventuelt har en eller flere substituenter valgt blandt halogen, CF^, ^alkyl, C^_^alk-oxy, amino, mono- eller di(C^_^alkyl)amino, C2_5alkanoyl-amino, hydroxy eller thio, og farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf.

"Halogen" betyder F, Cl, Br eller I.

Særlige eksempler på R som heterocyclisk gruppe inkluderer 30 2-imidazoly1, 4-thiazolyl, 3-thienyl, 2-furyl, 3-(1,2,4- triazolyl), 5-tetrazoly1, 2-(1,3,4-thiadiazo 1y1) , 2-, 3- og 4-pyridyl og 2- og 4-pyrimidinyl. Den heterocycliske ring kan have en eller flere substituenter valgt blandt halogen, CF^, C^_^alkyl, ^alkoxy, amino, mono- eller 35 di(Ci_4alkyl) amino , C2^alkanoylamino, hydroxy eller thio.

4 DK 169178 B1

Alkyl-, alkoxy- og alkanoylgrupper kan være ligekædede eller forgrenede.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede for-5 bindeiser kan anvendes i farmaceutiske præparater indeholdende en forbindelse med formlen (I) eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf sammen med et farmaceutisk acceptabelt fortyndingsmiddel eller bærer.

^ En foretrukken substitueret phenylgruppe for Ar er halogen- eller dihalogenpheny1, især 2,4-dichlorpheny1.

n er fortrinsvis 0.

^ R er fortrinsvis en heterocyclisk gruppe, især 2-pyridyl, l-methyl-2-imidazolyl, 2-amino-4-thiazolyl eller 1-methyl- 5-tetrazolyl.

Særligt foretrukne individuelle forbindelser fremstillet ^ ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er: l-ij2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(2-pyridylmethyl- thio)propylJl,2,4-triazol, 25 l-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(l-methyl-2-imida-zolylmethylthio)propyl]l,2,4-triazol, l-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(2-amino-4-thiazolylmethylthio)propyl]l,2,4-triazol og l-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(l-methyl-5-30 tetrazolylmethylthio)propyl]l,2,4-triazol.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

35 5 DK 169178 B1

Ifølge variant (a) fremstilles forbindelserne med formlen (I), hvori n er 0, ved omsætning af en oxiran med formlen 0.

/\ N N-CEL-C- CH„ ---(II) \_/ 2 I 2 '—~N Ar med en thiol med formlen r-ch2-sh (III) 5 i hvilke formler Ar og R har den ovenstående betydning.

Reaktionen kan gennemføres under en række forskellige betingelser, som i nogen grad afhænger af reaktanternes nøjagtige art. Almindeligvis er det muligt at gennemføre reaktionen på hensigtsmæssig måde ved simpelthen 10 at opvarme oxiranen (II) som den frie base med overskud af thiolen (III) i et organisk opløsningsmiddel, f.eks. dioxan. Et tidsrum på op til 3 dage ved tilbagesvalingstemperatur er almindeligvis tilstrækkeligt, men tilsætning af en katalytisk mængde fortyndet natriumhydroxid-13 opløsning giver ofte forbedrede udbytter og reducerer reaktionstiderne. Produktet kan isoleres og renses ved konventionelle procedurer, f.eks. ved afdampning af opløsningsmidlet, optagelse af produktet i et med vand ublandbart organisk opløsningsmiddel, ekstrak-20 tion af opløsningen med fortyndet natriumhydroxid- eller kaliumcarbonatopløsning for at fjerne ureageret thiol, tørring og afdampning af opløsningsmidlet. Produktet kan, om ønsket, yderligere renses ved krystallisation eller ved chromatografi.

6 DK 169178 B1

Som en alternativ procedure opvarmes oxiranen i form af dens methansulfonatsalt og thiolen sammen i et organisk opløsningsmiddel, f.eks. N,N-dimethylformamid eller tetrahydrofuran, i nærvær af en base, f.eks.

^ kaliumcarbonat eller natriumhydrid. Almindeligvis anvendes en temperatur på 60-80 °C, og under disse betingelser fuldføres reaktionen almindeligvis i hovedsagen inden for nogle få timer. Produktet isoleres og renses som tidligere beskrevet.

10 Som en yderligere variation opvarmes oxiranen i form af dens methansulfonatsalt med overskud af den hetero-cycliske thiol under tilbagesvaling i iseddike i nogle timer.

Oxiranerne (II) kan fremstilles ved konventionelle meto-15 der, typisk ud fra de tilsvarende ketoner (IV):

O

II

« N-CH2-C ---(IV) \=/ ir hvori Ar har den tidligere angivne betydning, ved omsætning med dimethyloxosulfoniummethylid fremstillet ud fra trimethylsulfoxoniumiodid og enten natriumhydrid i dimethylsulfoxid eller under anvendelse af cetrimid og 20 natriumhydroxid i en blanding af vand og toluen.

Reaktionen under anvendelse af natriumhydrid gennemføres typisk ved tilsætning af tørt pulveriseret trimethylsulfoxoniumiodid til en suspension af natriumhydrid i dimethylsulfoxid. Efter omrøring i 30 minutter 7 DK 169178 B1 ved stuetemperatur tilsættes ketonen (IV) i en tilnærmelsesvis ækvimolær mængde i dimethylsulf oxid. Reaktionsblandingen kan opvarmes for at fremskynde reaktionen, og efter nogle timer ved 50-80 °C kan pro-5 duktet isoleres ved konventionelle procedurer.

Reaktionen under anvendelse af cetrimid gennemføres typisk ved omrøring af ketonen (XV), trimethylsulfoxo-niumiodid og cetrimid kraftigt sammen i en blanding af toluen og natriumhydroxidopløsning i omkring 1 time 10 ved op til ca. 100 °C. Oxiranproduktet kan derpå isoleres ved konventionelle procedurer.

Når Ar er en phenylgruppe, der ikke indeholder nogen ortho-substituent, bør cetrimid-reaktionsvejen anvendes.

Ketonerne (IV) er enten kendte forbindelser eller kan 15 fremstilles ved procedurer, som er analoge med den kendte teknik. Fremstillingen af 2-(1H-1,2,4-triazol-1-yl)-2 ' ,-4 '-dichloracetophenon ud fra 2-brom-2 ' ,4 ' -dichloracetophenon, 1,2,4-triazol og kaliumcarbonat er f.eks. beskrevet i eksempel 1 i GB patentskrift nr.

20 1 512 918, hvor der anvendes acetonitril som opløsnings middel under tilbagesvaling i 20 timer. Det har vist sig, at denne type reaktion almindeligvis bedst udføres i acetone ved 0-20 °C, hvorved den almindeligvis fuldføres på kortere tid, f.eks. 4 timer eller mindre.

25 Thiolerne med formlen (111) er almindeligvis kendte forbindelser, eller de kan fremstilles ud fra let tilgængelige udgangsmaterialer ved konventionelle reaktioner.

8 DK 169178 B1

Ifølge variant (b) i krav 1 fremstilles forbindelserne med formlen (I), hvori n er 0, ud fra en thiol med formlen

OH

-C-CH„ -Sri ---(V) \ / 2 I 2 V=N Ar ved omsætning med et halogenid med formlen x-ch2-r (VI) 5 i hvilke formler Ar og R har den tidligere angivne betydning, og X betyder chlor, brom eller iod. Reaktionen gennemføres almindeligvis ved omrøring af reaktanterne sammen i et inert organisk opløsningsmiddel, f.eks. N,N-dimethylformamid, i nærvær af en base, f.eks.

10 NaOH eller I^CO^· Et tidsrum på nogle få timer ved stuetemperatur er almindeligvis tilstrækkeligt, men om nødvendigt kan reaktionsblandingen opvarmes for at fremskynde reaktionen. Produktet kan isoleres og renses ved konventionelle procedurer.

15 Thiolerne med formlen (V) kan fremstilles ud fra oxira-nerne med formlen (II) ved at disse først omsættes med thioleddikesyre, og det resulterende produkt derpå de-acyleres, f.eks. ved anvendelse af natriumethoxid i ethanol efterfulgt af syrning med saltsyre.

20 Halogeniderne med formlen (VI) er almindeligvis kendte forbindelser, eller de kan fremstilles ved konventionelle procedurer i overensstemmelse med litteraturforlæg .

9 DK 169178 B1

Forbindelserne med formlen (I), hvori n er 1, (sulfo-xider) kan fremstilles ved kontrolleret oxidation af de tilsvarende forbindelser, hvori n er 0.

Det foretrukne oxidationsmiddel er m-chlorperbenzoesyre, 5 hvoraf der skal anvendes omkring et ækvivalent til at fremstille sulfoxiderne.

Ved en typisk procedure opløses thioforbindelsen i en blanding af isopropylalkohol og chloroform (volumen-forhold 1:1), og opløsningen afkøles til under 5 °C i 10 et isbad. Der tilsættes lidt mindre end et ækvivalent m-chlorperbenzoesyre i portioner i løbet af nogle få minutter. Blandingen omrøres derpå i omkring 2 timer.

Hvis tyndtlagschromatografi viser ureageret udgangsmateriale, tilsættes yderligere en lille mængde m-15 chlorperbenzoesyre (op til ialt et ækvivalent). Sul- foxiderne har to asymmetriske centre og forekommer således i to diastereoisom^re former. Således vil sulfo-xidproduktet af oxidationen, som kan isoleres ved konventionelle procedurer, være en blanding af de to dia-20 stereoisomere. Om ønsket kan de diastereoisomere adskil les ved søjlechromatografi, f.eks. på siliciumdioxid, da de sædvanligvis har forskellig polaritet.

Når den heterocycliske ring indeholder substituent-grupper, kan konventionelle kemiske omdannelsesreak-25 tioner anvendes til at fremstille simple derivater og beslægtede forbindelser.

Således kan der, når den heterocycliske ring indeholder en aminogruppe, anvendes en konventionel acetyleringsreaktion (f.eks. under anvendelse af 10 DK 169178 B1 eddikesyreanhydrid i pyridin) til at fremstille N-acetylderivatet. Andre omdannelsesreaktioner og de nødvendige reagenser og betingelser til deres gennemførelse vil være velkendte for fagfolk.

5 Alle de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser indeholder mindst ét chiralt center, og opfindelsen inkluderer fremstilling af både adskilte og ikke-adskilte former.

Til farmaceutisk brug inkluderer acceptable syread-10 ditionssalte af forbindelserne med formlen (I) dem, der dannes ud fra stærke syrer, som danner ikke-toxiske syreadditionssalte, såsom saltsyre, hydrogenbromidsyre, svovlsyre, salpetersyre, saltsyre og methansulfonsyre.

Saltene kan fremstilles ved konventionelle procedurer, 15 f.eks. ved blanding af opløsninger indeholdende ækvi- molære mængder af den frie base og den ønskede syre, og det dannede salt opsamles ved filtrering, hvis det er uopløseligt, eller ved afdampning af opløsningsmidlet.

20 Forbindelserne med formlen (I) og deres farmaceutisk acceptable salte er antifungale midler, der er nyttige til bekæmpelse af svampeinfektioner hos dyr, herunder mennesker. F.eks. er de nyttige til behandling af topiske svampeinfektioner hos mennesker forårsaget af 25 blandt andet arter af Candida, Trichophyton, Microsporum eller Epidermophyton eller til behandling af slimhinde-infektioner forårsaget af Candida albicans (f.eks. trøske og vaginal candidiasis). De kan også anvendes til behandling af systemiske svampeinfektioner forårsaget 11 DK 169178 B1 af f.eks. Candida albicans, Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus, Coccidioides, Paracoccidioides, Histoplasma eller Blastomyces.

In vitro bedømmelsen af forbindelsernes antifungale 5 aktivitet kan gennemføres ved bestemmelse af den minimale inhiberende koncentration (MIC) af prøveforbindelserne i et egnet medium, ved hvilken der ikke sker vækst af den bestemte mikroorganisme. I praksis podes en række agarplader, som hver har prøveforbindelsen 10 inkorporeret i en bestemt koncentration, med en standardkultur af f.eks. Candida albicans, og hver plade inkuberes derpå i 48 timer ved 37 °C. Pladerne undersøges derpå for forekomst af vækst af svampen, og den pågældende MIC-værdi noteres. Andre mikroorganismer, 13 som kan anvendes ved sådanne prøvninger, inkluderer Cryptococcus neoformans, Aspergillus fumigatus, Trichophyton spp, Microsporum spp, Epidermophyton floccosum, Coccidioides immitis og Torulopsis glabrata.

In vivo bedømmelsen af forbindelserne kan udføres ved 20 en række dosisniveauer ved intraperitoneal eller intravenøs injektion eller ved oral indgivning til mus, som er podet med en stamme af Candida albicans. Aktiviteten baseres på overlevelsen af en behandlet gruppe af mus efter døden af en ubehandlet gruppe af mus efter 25 48 timers iagttagelse. Det dosisniveau, hvorved for bindelsen yder 50% beskyttelse over for infektionens dødelige virkning, noteres.

Til human brug kan de antifungale forbindelser med formlen (I) indgives alene, men de vil almindeligvis 30 blive indgivet i blanding med en farmaceutisk bærer udvalgt med henblik på den påtænkte indgivningsvej og farmaceutisk standardpraksis. F.eks. kan de indgives oralt i form af tabletter indeholdende sådanne excipienter DK 169178 Bl 12 som stivelse eller lactose eller i kapsler eller æg enten alene eller i blanding med excipienter eller i form af eliksirer eller suspensioner indeholdende aroma- eller farvemidler. De kan injiceres parente-5 ralt, f.eks. intravenøst, intramuskulært eller sub-cutant. Til parenteral indgivning anvendes de bedst i form af en steril vandig opløsning, som kan indeholde andre stoffer, f.eks. tilstrækkeligt salte eller glucose til at gøre opløsningen isotonisk med blod.

10 Til oral og parenteral indgivning hos mennesker er det daglige doseringsniveau af de antifungale forbindelser med formlen (I) fra 0,1 til 10 mg/kg (i opdelte doser). Således indeholder tabletter eller kapsler med forbindelserne fra 5 mg til 0,5 g aktiv forbin-15 delse til indgivning alene eller to eller flere ad gangen efter behov. I hvert tilfælde vil lægen bestemme den faktiske dosering, som vil være mest egnet for en individuel patient, og den vil variere med den bestemte patients alder, vægt og respons. De ovenstående 20 doseringer er eksempler på gennemsnitstilfælde, men der kan selvfølgelig være individuelle tilfælde, hvor højere eller lavere doseringsområder kan være af værdi.

Alternativt kan de antifungale forbindelser med formlen (I) indgives i form af et suppositorium eller pessar, 25 eller de kan påføres topisk i form af en lotion, opløsning eller creme, salve eller pudder. F.eks. kan de inkorporeres i en creme bestående af en vandig emulsion af polyethylenglycoler eller flydende paraffin, eller de kan inkorporeres i en koncentration mellem 1 og 10% i 30 en salve bestående af en hvid voks eller hvid blød paraffinbasis sammen med sådanne stabilisatorer og konserveringsmidler som måtte være nødvendige.

DK 169178 B1 1 3

De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser har også aktivitet over for en række forskellige plante-pathogene svampe, herunder f.eks. forskellige rust-arter, meldugarter og skimmelsvampe, og forbindel-5 serne er således nyttige til behandling af planter og frø for at udrydde eller forhindre sådanne sygdomme .

De følgende eksempler tjener til nærmere belysning af fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

10 EKSEMPEL 1 1- [3-(4-chlorbenzylthio)-2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxypropyl]-l,2,4-triazol 2- (2,4-dichlorphenyl)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)-oxiran-methansulfonat (0,336 g, 1 mmol), 4-chlorbenzyl- 13 mercaptan (0,139 g, 1 mmol) og vandfrit kaliumcarbonat (0,414 g, 3 mmol) blev omrørt i tørt N,N-dimethylformamid (15 ml) ved 70 °C i 72 timer. Reaktionsblandingen blev fortyndet med vand (70 ml) og ekstraheret med ethylacetat (2 x 70 ml). Ekstrakterne blev kombineret 20 og inddampet til opnåelse af en olie, som krystalliserede ved henstand. Qmkrystallisation fra en blanding af ethylacetat og n-hexan gav den i overskriften angivne forbindelse (0,23 g, 53¾) smp. 106-107 °C.

Analyse -%: 25 Fundet: C 50,74, H 3,56, N 10,14, C18H16C13N30S kræver: C 5CM2, H 3,76, N 9,80.

14 DK 169178 B1 EKSEMPEL 2 l-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(2-pyridylmethyl- thio)propyl]-l,2,4-triazol l-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-mercaptopropyl-5 1,2,4-triazol (0,5 g, 1,64 mmol) og vandfrit kalium- carbonat (0,69 g, 5 mmol) blev ojnrørt sammen i N,N-dimethylformamid (10 ml), og blandingen blev afkølet i is. Der tilsattes 2-chlormethylpyridin-hydrochlorid (0,3 g, 1,83 mmol), og omrøringen i is fortsattes i 10 yderligere 1 time. Reaktionsblandingen blev derpå hældt ud i en blanding af dichlormethan (50 ml) og vand (50 ml), og det organiske lag blev skilt fra. Det vandige lag blev ekstraheret yderligere fem gange med dichlormethan (50 ml ialt), og de kombinerede organiske 15 ekstrakter blev tørret over magnesiumsulfat og inddampet. Remanensen blev chromatograferet på siliciumdioxid under eluering med en blanding af dichlormethan og methanol (97:3) til opnåelse af den i overskriften angivne forbindelse som en farveløs gummi (0,58 g, 90%)· Be-20 handling af produktet med etherisk hydrogenchlorid gav dihydrochlorid-monohydratet som et hygroskopisk hvidt fast stof, smp. 136-141 °C.

Analyse-%:

Fundet: C 41,97, H 3,92, N 11,68, 25 C17H20C14N4°2S kræver: C 41,98, H 4,11, N 11,5.

EKSEMPEL 3-10

De følgende forbindelser blev fremstillet ved de almene procedurer, som er beskrevet i eksempel 1 og 2, under anvendelse af de passende udgangsmaterialer: 15 DK 169178 B1

/==N OH

i \ I

N v N-CHo-C-CH0S- CH„ -R

V 2 I 2 2 li"1

M

Cl 16 DK 169178 B1 /*N /^· no c\ c\ η n o co n co n o csoo no V A Λ A A A A A " coco γά γα o coco CO i—I i—1 rH i—1

CD +J

C

0 C-« r-4 I-a C\ C'ii-i O in

Ov W ο O η n VO O t—1 CXt

I G-Ο AA% A* ^ . A A A A

ω η n -a- -a· con -a- n co >a •-C oc CO CO C ·<—! <c-u oco eo mr-A o o 0 on· CM η · n n no O A ^ ^ »* »X ^ Λ q Om coco enen cn <τ\ λ, <ί* **C* 'C* >5* -3“ ^ ω V»/ >-✓ 'w' -p j — .. ... . ...... . -_i___ i i o o a v-' fA. A—· Ο I T-4 o ! . Ο I I -a-

n I I n r-J I

i-1- o r-ι η cm E n r-» r-i n " i __]_^_

OJ

aa r^o r=i „' V~M|

« Βγ*'·§ ζγ kJ

--- ---------- p, \ -.......—........... M .........

I—i 0 CL

e= · -i) c_i co a- in v>o w c

V

Ld ---------—i—————— — 17 DK 169178 B1 r ^ om o cn -<rm *3 Λ m o σ\Η m vein

-v " SS

I co enen cocn r-r- ^

CD

4-J

C

CD

m σ co <r tn o om _ p>, v^ *<j· en i-4 en co r- Ω-— „ ^ * - -v Λ Λ o?·" co en <· < <r en en en

I -H

CD

co OsC

1 en co

i—I -H

co-p or~- mm o cm o ccd ,π m -τη- f-to <=£ C-ί ej #» *> »\ ø> ^ ** ** O vCO Cn G"n C\ CC CSC·^ ω I 4-> I w ____ Γ ~ n /-* γ ^ CJ -a 3, o i m

o . o · I m rH

• i I il 1 Q. <r mt cm | m j E en m i O 2

_-i—I

n

m G

S <M

i *j 8 ! fY A, z= i. Y y y -γ*

-P

co fcj Ό >,

-C

O

___i__ c 0 <u E nj 1 *r4 i—i Ό i-1 ω Y ° 5- 0—0 m C ^ « =* 3 Sara CO C U 4rl _v^ o ό a lj 3 >> * -----· o o — C CO •HOC OSE' ,---, /-V ^v

« O O

V—' '—^ DK 169178 B1 J 8 EKSEMPEL 11 l-[3-(4-chlorbenzylsulfinyl)-2-(2,4-dichlorphenyl)-2- hydroxy-propyl]-l,2,4-triazol l-[3-(4-chlorbenzylthio-2-(2,4-dichlorphenyl)-2-5 hydroxypropyl]1,2,4-triazol (2,15 g, 5 mmol) blev opløst i en blanding af dichlormethan (30 ml) og iso-propylalkohol (30 ml). Opløsningen blev omrørt og afkølet i is. Til denne opløsning sattes m-chlorper-benzoesyre (85?ό ren; 1,02 g, 5 mmol) i tre portioner 10 i løbet af 5 minutter. Reaktionen fik lov at foregå i 24 timer ved stuetemperatur. Der tilsattes dichlormethan (100 ml), og det organiske lag blev skilt fra og vasket to gange med en opløsning af natriumcarbonat (2,5 g) og natriumdisulfit (2,5 g) i vand (100 ml), det 15 organiske lag blev derpå tørret over magnesiumsulfat og inddampet til opnåelse af en blanding af to sulfoxid-diastereomere som en olie, der krystalliserede ved henstand. Omkrystallisation fra ethylacetat gav den i overskriften angivne forbindelse som en enkelt ren 20 isomer (tic: Rf 0,30; siliciumdioxid; ethylacetat/me-thanol/ammoniumhydroxid 90:10:1) (0,34 g, 15%) smp.

193-195 °C.

Analyse-%: fundet: C 48,58, H 3,63, N 9,44, 25 C, QH, -C1,N,0„S kræver: C 48,61, H 3,63, N 9,45.

i. o JL 6 j j L

Den resterende blanding opnået ved inddampning af modervæskerne blev chromatograferet på siliciumdioxid under eluering med en blanding af ethylacetat, methanol og koncentreret ammoniumhydroxid (90:10:1). De rele-30 vante fraktioner blev kombineret og inddampet til opnåelse af den anden isomer (tic: Rf 0,20; siliciumdioxid, ethylacetat/methanol/ammoniumhydroxid 90:10:1), som blev 19 DK 169178 B1 omkrystalliseret fra ethylacetat (0,25 g, 12¾) smp.

191-193 °C.

Analyse-%;

Fundet: C 48,75, H 3,70, N 9,44, 5 Ci8H16C13N3°2S kræver: C 48>61> H 3,63, N 9,45.

PRÆPARATION 1

Fremstilling af 2-(2,4-dichlorphenyl)-2-(1H-1,2,4-triazol-l-ylmethyl)-oxiran

Natriumhydrid (3,78 g, 0,079 mol som en 50¾ dispersion 10 i olie) blev under omrøring suspenderet i 20 ml tør diethylether. Etheren blev derpå fjernet ved dekantering, og natriumhydridet blev tørret i en strøm af tørt nitrogen. Der tilsattes 100 ml tørt dimethylsul-foxid efterfulgt af 17,34 g (0,079 mol) tørt pulveri-15 seret trimethylsulfoxoniumiodid i portioner i løbet af 15 minutter. Den resulterende blanding blev omrørt i 30 minutter ved stuetemperatur (20 °C). Derpå tilsattes 2-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-2',4'-dichloracetophenon (18,33 g, 0,072 mol) som en opløsning i 50 ml tørt di-20 methylsulfoxid. Blandingen blev opvarmet til 60 °C i 3 timer og fik derpå lov at stå ved stuetemperatur natten over. Reaktionsblandingen blev afkølet og udslukt i is, og produktet blev derpå ekstraheret i ethylacetat (600 ml). Ethylacetatlaget blev skilt fra, tørret over mag-25 nesiumsulfat og koncentreret til opnåelse af en rød gummi. Søjlechromatografi af gummien på siliciumdioxid under eluering med ether gav 6,62 g (34,4 %) af den i overskriften angivne forbindelse som en gummi.

20 DK 169178 B1 PRÆPARATION 2

Fremstilling af 1-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-mepcaptopropyl]-lH-l,2,4-triazol 2-(2,4-dichlorphenyl)-2-(lH-l,2,4-triazol-l-ylmethyl)-3 oxiran (5 g, 0,0185 mol) blev opvarmet under mild tilbagesvaling i thioleddikesyre (CH^COSH) (5 ml) i tre timer. Blandingen blev derpå afkølet og sat til en blanding af isafkølet mættet natriumhydrogen-carbonatopløsning (200 ml) og ethylacetat (200 ml), 10 og det vandige lag blev skilt fra. Det organiske lag blev vasket yderligere fire gange med isafkølet mættet natriumhydrogencarbonatopløsning (200 ml ialt), tørret over magnesiumsulfat og inddampet til opnåelse af en rød gummi, som blev opløst i ethanol (20 ml). Denne op-15 løsning sattes dråbevis i løbet af 15 minutter til en omrørt og isafkølet opløsning af natriumethoxid (3,78 g, 0,0556 mol) i ethanol (100 ml). Efter 1 time blev blandingen hældt ud i IN saltsyre (100 ml), og denne opløsning blev derpå neutraliseret ved tilsætning af fast na-20 triumhydrogencarbonat. Ekstraktion med dichlormethan (6 x 50 ml), tørring over magnesiumsulfat og inddamp-ning af de kombinerede ekstrakter gav en gummi, som blev chromatograferet på siliciumdioxid under eluering med ethylacetat, hvorved der efter en omkrystallisation 25 fra etHylacetat/hexan blev opnået den i overskriften angivne forbindelse, udbytte 2,3 g, smp. 139-142,5 °C.

Analyse-?0: fundet: C 43,3, H 3,7, N 14,0, beregnet for Cj^H-qC^N^OS : C 43,4, H 3,6, N 13,8.

21 DK 169178 B1

Prøvningsresultater (a) De i eksemplerne fremstillede forbindelser blev prøvet in vivo ved indgivning til mus ifølge de tidligere beskrevne procedurer. Dosisniveauerne, som gav 5 50?ό beskyttelse (PD^q), var som følger:

Eksempel nr. ^50 ("O^g) 1 0,8 ( i . v . ) 2 0,4 (p·o . ) 3 2,2 (p.o. ) 4 0,2 ( p . o . ) 5 0,9 (p.o.) 6 1,3 ( p . o . ) 7 2,2 (p.o. ) 8 2,2 (p.o. ) 9 1,5 ( p . o . ) 10 0,6 (p.o. ) 11 4,4 (p.o . ) (b) Sammenlignende prøvninger blev udført med de følgende forbindelser:

OH

^ 1 1

1Γ N-CH0-C-CH0-X-R

\ / 2 2 σ

Cl 22 DK 169178 B1 " X R1 PD50 rag/kg —S— —^-ci y 10 (p.o.) -S- y~NHC02C2H5 > 10 (p.0.) -SO- -^"^-Cl > 10 (p.o.) -0- -CH^C! > 5 (p.o.)

I -0- -CH -/ 7 >20 (Ρ·ο.) I

! 2 \=/ ' !

I { I

Claims (6)

1. Fremgangsmåde til fremstilling af 3-(heterocyclyl eller ® aryl)methylthio-2-phenyl-l-(lH-l,2,4-triazol-l-yl)-2-pro-panol-forbindelser med den almene formel OH

10. N-CH -C-CH -S(O) -CH0—R .(I) \ / ·£ | z n2 ' 1 \=N Ar hvori Ar betyder phenyl med 1-3 substituenter, der hver for sig 15 er valgt blandt halogen og CF^, n er 0 eller 1, og R betyder phenyl, som eventuelt har 1-3 substituenter, der hver for sig er valgt blandt halogen, CF^, C^_^-alkoxy, C 7 t-alkoxycarbonyl eller C, -alkylthio, eller en 5- eller 20 1-4 6-leddet aromatisk heterocyclisk gruppe, som er forbundet via et ringcarbonatom og eventuelt har en eller flere substituenter valgt blandt halogen, CF^, C^_^alkyl, C-^_^alk-oxy, amino, mono- eller di(C1 ^alkyl)amino, C2 ^alkanoyl- amino, hydroxy eller thio, 25 eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf, kendetegnet ved, at (a) en forbindelse med formlen 0 30 /V / \ ΪΓ N-CH7-C-ch7 (II) \ / s \=N Ar omsættes med en thiol med formlen R-CH2-SH (III) DK 169178 B1 i hvilke formler Ar og R har den ovenstående betydning, til dannelse af en forbindelse med formlen (I), hvori n er 0, eller (b) en forbindelse med formlen OH xx I IT N-CH0-C-CH„-SH (V) \ / 2 I 2 \= N Ar 5 omsættes med et halogenid med formlen x-ch2-r (VI) i hvilke formler Ar og R har den ovenstående betydning, og X betyder chlor, brom eller iod, til dannelse af en forbindelse med formlen (I), hvori n er 0, hvorpå den under (a) eller (b) dannede forbindelse, om 10 ønsket, oxideres til dannelse af den tilsvarende forbindelse med formlen (I), hvori n er 1, og den dannede forbindelse, om ønsket, omdannes til et farmaceutisk acceptabelt syreadditionssalt deraf.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet 15 ved, at Ar er mono- eller dihalogenphenyl.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 2, kendetegnet ved, at Ar er 2,4-dichlorphenyl.

4. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 1-3, kendetegnet ved, at n er 0. DK 169178 B1

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, k e n d e t e g n e t ved, at R er 2-pyridyl, l-methyl-2-imidazolyl, 2-amino- 4-thiazolyl eller 1-methy1-5-tetrazoly1.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet 5 ved, at der fremstilles en af følgende forbindelser med formlen (I): l-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(2-pyridylmethyl- thio)propyOl,2,4-triazol, l-r2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(l-methyl-2-imidazo- lylmethylthio)propylJl,2,4-triazol, l-C2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(2-amino-4-thia-zolylmethylthio)propylJl,2,4-triazol eller l-[2-(2,4-dichlorphenyl)-2-hydroxy-3-(l-methyl-5-tetra-zolylmethylthio)propyljl,2,4-triazol. 15