DK173310B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre, mikroorganismestammer og -kulturer hertil og en fremgangsmåde til fre - Google Patents
Fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre, mikroorganismestammer og -kulturer hertil og en fremgangsmåde til fre Download PDFInfo
- Publication number
- DK173310B1 DK173310B1 DK198800597A DK59788A DK173310B1 DK 173310 B1 DK173310 B1 DK 173310B1 DK 198800597 A DK198800597 A DK 198800597A DK 59788 A DK59788 A DK 59788A DK 173310 B1 DK173310 B1 DK 173310B1
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- keto
- acid
- culture
- sorbose
- microorganism
- Prior art date
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims description 44
- VBUYCZFBVCCYFD-NUNKFHFFSA-N 2-dehydro-L-idonic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)C(O)=O VBUYCZFBVCCYFD-NUNKFHFFSA-N 0.000 title claims description 28
- VBUYCZFBVCCYFD-UHFFFAOYSA-N D-arabino-2-Hexulosonic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(=O)C(O)=O VBUYCZFBVCCYFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 claims description 38
- 241000589232 Gluconobacter oxydans Species 0.000 claims description 20
- 241000194107 Bacillus megaterium Species 0.000 claims description 19
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 7
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 7
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 7
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 7
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 7
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 7
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 7
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 6
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 claims description 6
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 5
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- VBUYCZFBVCCYFD-JJYYJPOSSA-N 2-dehydro-D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)C(O)=O VBUYCZFBVCCYFD-JJYYJPOSSA-N 0.000 claims description 4
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 4
- 229950006191 gluconic acid Drugs 0.000 claims description 4
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 241000589236 Gluconobacter Species 0.000 claims description 3
- 239000001058 brown pigment Substances 0.000 claims description 3
- 238000005837 enolization reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000032050 esterification Effects 0.000 claims description 3
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 3
- 210000003495 flagella Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 claims description 3
- 238000007273 lactonization reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 3
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 claims description 3
- DSLZVSRJTYRBFB-LLEIAEIESA-N D-glucaric acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O DSLZVSRJTYRBFB-LLEIAEIESA-N 0.000 claims description 2
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 claims 2
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 claims 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 10
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 4
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 4
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 4
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 3
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 3
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 3
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 2
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N D-Arabitol Natural products OC[C@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N Fe2+ Chemical compound [Fe+2] CWYNVVGOOAEACU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000589776 Pseudomonas putida Species 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 150000003841 chloride salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/58—Aldonic, ketoaldonic or saccharic acids
- C12P7/60—2-Ketogulonic acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P39/00—Processes involving microorganisms of different genera in the same process, simultaneously
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/832—Bacillus
- Y10S435/837—Bacillus megaterium
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
DK 173310 B1 „ Den foreliggende opfindelse angår en fermenteringsfremgangsmåde, dvs. en fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre ved fermentering. Opfindelsen angår endvidere en blandet * mikroorganismekultur, som er ejendommelig ved, at den er i stand til at fremstille 2-keto-L- gulonsyre ud fra L-sorbose med et udbytte på mindst 40 g/i, hvilken mikroorganismekultur består 5 af mikroorganismer af arterne Gluconobacter oxydans og Bacillus megaterium, en blandet mikroorganismekultursom er ejendommelig ved, at den er i stand til at fremstille 2-keto-L-guIon-syre ud fra L-sorbose med et udbytte på mindst 40 g/l, hvilken kultur er kultur nr. 2980 (DSM nr.
4027) eller subkulturer, mutanter eller varianter deraf, Gluconobacter oxydans-stamme DSM nr.
4025, Bacillus megaterium-stamme DSM nr. 4026 samt en fremgangsmåde til fremstilling af 10 ascorbinsyre, som er ejendommelig ved, at L-sorbose omdannes til 2-keto-L-gulonsyre ved hjælp af en mikroorganismekultur, som består af mikroorganismer af arterne Gluconobacter oxydans og Bacillus megaterium, og hvorved den opnåede 2-keto-L-gulonsyre efterfølgende omdannes til ascorbinsyre på en velkendt måde, som omfatter esteriflcering, efterfulgt af enolisering og lactonisering.
15 2-Keto-L-gulonsyre er et vigtigt mellemprodukt til fremstilling af ascorbinsyre, hvortil den kan omdannes ved den velkendte Reichstein-metode.
Den fermentative fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre ud fra D-sorbito! eller L-sorbose er kendt.
20 Således beskrives i japansk offentliggørelsesskrift nr. 40154/I976 fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre ud fra et D-sorbitol ved hjælp af mikroorganismer af slægten Acetobacter, Bacterium eller Pseudomonas, hvilke mikroorganismer er i stand til at oxidere D-sorbitol under aerobe betingelser, hvorved der dannes 2-keto-L-gulonsyre. Udbyttet ved denne kendte fremgangsmåde er 25 imidlertid ret lavt, nemlig under 6 g/l.
Ifølge en anden kendt fremgangsmåde, der er beskrevet i "Acta Microbiologica Sinica" 21(2), 185-191, (1981), kan 2-keto-L-gulonsyre fremstilles ud fra L-sorbose ved hjælp af en blandet kultur af mikroorganismer, som omfatter Pseudomonas striata og Gluconobacter oxydans, idet udbyttet er 30 30 g/l, når man går ud fra en koncentration på 70 g/l sorbose, og 37 g/l, når man går ud fra en koncentration på 100 g/l sorbose.
Ifølge opfindelsen er det muligt at fremstille 2-keto-L-gu lonsyre ud fra L-sorbose i et meget højere udbytte, nemlig et udbytte på over 40 g/l og endog over 50 g/l, når man går ud fra en 35 sorbosekoncentration på 70 g/I og i højere udbytte, når man går ud fra højere koncentrationer.
5 2 DK 173310 B1 ▼
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen til fremstilling af 2-keto-L-guIonsyre ved omdannelse af L-sorbose ved hjælp af mikroorganismer er ejendommelig ved, at der anvendes en blandet kultur af mikroorganismer, som omfatter Gluconobacter oxydans og Bacillus megaterium.
Den første af disse to mikroorganismer er betegnet og klassificeret som Gluconobacter oxydans under henvisning til Bergers Manual of Determinative Bacteriology, 8. udgave, 1974, navnlig i betragtning af det forhold, at den udviser følgende egenskaben 10 a) 2-Keto-L-gulonsyre dannes ud fra sorbose, b) ethanol oxideres til eddikesyre, c) D-glucose oxideres til D-gluconsyre og 2-keto-D-gluconsyre, d) ketogenese af polyalkoholer, e) pellicle- og ringvækst i mannitolvæske (24 timers dyrkning) ved pH 4 og S, og 15 pelliclevækst i glucosevæske ved pH 4,5.
Ud over ovenstående har den følgende egenskaben f) glycerol oxideres i det væsentlige ikke til dihydrooxyacetone, 20 g) 2-keto-D-glucarsyre dannes ud fra sorbitol og glucarsyre, men ikke ud fra glucose, fructose, gluconsyre, mannitol eller 2-keto-D-gluconsyre, h) polymorf, tilsyneladende ingen flageller, i) brunt pigment dannes ud fra fructose, j) god vækst, når den dyrkes i nærværelse af Bacillus megaterium eller en celleekstrakt 25 deraf, k) streptomycinfølsom.
Den anden af disse to mikroorganismer blev klassificeret i betragtning af, at den udviser morfologiske, fysiologiske, kulturelle og andre egenskaber, som ertypiske for Bacillus 30 megaterium.
Enhver stamme, som tilhører arten Gluconobacter oxydans på den ene side og Bacillus megaterium på den anden side, isoleret fra naturlige kilder eller skaffet fra offentligt tilgængelige kultursamlinger kan være nyttig til anvendelse til det foreliggende formål, forudsat at de i form af v 3 DK 173310 B1 en blandet kultur er i stand til at omdanne L-sorbose til 2-keto-L-guIonsyre i et tilfredsstillende udbytte, dvs. et udbytte på over 40 g/l, især mindst 50 g/l og navnlig mindst 80 g/l.
En foretrukken blandet kultur til anvendelse ved den foreliggende fremgangsmåde til fremstilling 5 af 2-keto-L-gulonsyre er kultur nr. 2980 eller en subkultur, mutant eller variant deraf. Kultur nr.
2980 blev den 17. marts 1987 deponeret i Deutsche Sammlung von Mikroorganismen i Gottingen (der har skiftet adresse til Mascheroder Weg lb, D-3300 Braunschweig, Forbundsrepublikken Tyskland) med deponeringsnummeret DSM 4027.
10 Denne blandede kultur består af en Gluconobacter oxydans-stamme, som har de ovenfor under a)-k) anførte egenskaber, og en Bacillus megaterium-stamme.
En specifik og foretrukken Gluconobacter oxydans-stamme (international betegnelse i Academia Sinica = AS. 1.945) er deponeret i Center for General Microbiological Culture Collection, Institute 15 of Microbiology, Zhong Guan Cun, Beijing, Kina, under nummeret CGMCC 0119 den 7. februar 1987. En subkultur af denne stamme er den 17. marts 1987 deponeret i Deutsche Sammlung von Mikroorganismen med nummeret DSM nr. 4025.
En specifik og foretrukken Bacillus megaterium-stamme (international betegnelse i Academia 20 Sinica AS. 1.1484) er deponeret i the Center for Central Microbiological Culture Collection,
Institute of Microbiology, Zhong Guan Cun, Beijing, Kina, under nummeret CGMCC 0120 den 7. februar 1987. En subkultur af denne stamme er den 17. marts 1987 deponeret i Deutsche Sammlung von Mikroorganismen med nummeret DSM 4026.
25 Cellerne af såvel Gluconobacter oxydans-stammen og Bacillus megaterium-stammen er stavformede med afrundede ender. Diameteren af en celle af Gluconobacter oxydans-stammen er i gennemsnit ca. 0,3-0,6 pm, dens længde ca. 0,9-1,6 μπι, især 1-1,5 μτη. Diameteren af en celle af Bacillus megaterium-stammen er i gennemsnit ca. 1-1,5 pm og dens længde er ca. 2,0-5,0 pm, især 4 pm. De to stammetyper kan let skelnes fra hinanden som følge af de ovennævnte 30 dimensioner.
De kvantitative forhold mellem Bacillus-kolonier og Gluconobacter-kolonier i begyndelsen af fermenteringsprocessen er ikke kritisk. Dette forhold kan fx være i området mellem 1:10 og 1:300 (Bacillus:GIuconobacter). Dette forhold indstiller sig automatisk i løbet af fermenteringsprocessen 35 til en optimal værdi.
DK 173310 B1 4
Fremstillingen af 2-keto-L-gulonsyre ifølge opfindelsen udføres ved dyrkning af den blandede mikroorganismekultur, der er beskrevet ovenfor, i et medium, som indeholder L-sorbose samt passende næringsstoffer. Alternativt kan fremgangsmåden ifølge opfindelsen udføres ved at dyrke 5 de ovenfor omtalte blandede mikroorganismer og derefter bringe de hele celler eller en cellefri ekstrakt, som er indsamlet fra kulturen, i kontakt med L-sorbose.
Når de blandede mikroorganismer dyrkes i et medium, som indeholder L-sorbose samt passende næringsstoffer, dyrkes mikroorganismerne hensigtsmæssigt i et vandigt medium under aerobe 10 betingelser.
Fermenteringsfremgangsmåden ifølge opfindelsen kan udføres ved en pH mellem ca. S og 8, fortrinsvis mellem ca. 6 og 8.
15 Et foretrukket temperaturområde til udførelse af fermenteringsfremgangsmåden ifølge opfindelsen er mellem ca. 25 og 35°C. Fermenteringsfremgangsmåden ifølge opfindelsen udføres fortrinsvis ved 30±1°C.
Medens fermenteringsperioden kan variere afhængig af den anvendte pH, temperatur og 20 næringsmedium, giver 1/2 til 10 dage sædvanligvis fordelagtige resultater.
Den koncentration af L-sorbosesubstrat, der anvendes som udgangsmateriale ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan variere mellem ca. 20 og 200 g/1, især mellem ca. 50 og ca. 100 g/l.
25 Det dyrkningsmedium, som anvendes ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, indeholder sædvanligvis sådanne næringsstoffer for mikroorganismerne som assimilerbare carbonkilder, fordøjelige nitrogenkilder og uorganiske stoffer, vitaminer, sporstoffer og andre vækstfremmende faktorer. Ud over det L-sorbose, der anvendes som udgangsmateriale i fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan der også tilsættes andre stoffer, som er carbonkilder såsom glycerol, glucose, 30 mannitol, fructose, D-arabitol og lignende.
1 fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan der som nitrogenkilder anvendes forskellige organiske og uorganiske stoffer såsom gærekstrakt, kødekstrakt, pepton, casein, majsstøbevand, urinstof, aminosyrer, nitrater, ammoniumsalte og lignende. Som uorganiske stoffer kan der anvendes 35 magnesiumsulfat, kaliumphosphat, ferro- og ferrichlorider, calciumcarbonat og lignende.
f 5 DK 173310 B1 I tilfælde, hvor der anvendes forud dyrkede hele celler indsamlet fra kulturen, udfores dyrkningen af mikroorganismerne under de samme eller tilsvarende betingelser som beskrevet ovenfor. Disse hele celler anvendes i et vandigt medium under aerobe betingelser, og ingen yderligere nærings-5 stoffer (ud over den som udgangsmateriale anvendte L-sorbose) er nødvendige.
I tilfælde, hvor der anvendes cellefri ekstrakter fra kulturen, sættes disse ekstrakter til substratet i et vandigt medium og anvendes ved omdannelsen af L-sorbose til 2-keto-L-gulonsyre under aerobe betingelser på tilsvarende måde som beskrevet ovenfor, idet der heller ikke i dette tilfælde kræves 10 yderligere næringsstoffer.
Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er det muligt at danne 2-keto-L-gulonsyre i et udbytte på mindst 40 g/I, fortrinsvis mindst 50 g/l, især mindst 80 g/1.
15 Den ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede 2-keto-L-gulonsyre kan isoleres fra reaktionsblandingen, fx ved dannelse af et salt eller ved at udnytte forskelle i egenskaber mellem produktet og de omgivende urenheder såsom opløselighed, absorberbarhed og fordelingskoefficient mellem opløsningsmidlerne. Adsorption, fx på ionbytterharpikser, udgør en hensigtsmæssig metode til isolering af produktet. Det således vundne produkt kan yderligere 20 oprenses på sædvanlig måde, fx ved omkrystallisation eller chromatografi.
Alternativt kan reaktionsblandingen anvendes direkte til omdannelse til L-ascorbinsyre ved forestring efterfulgt af enolisering og lactonisering.
Den foreliggende opfindelse angår også en blandet mikroorganismekultur, som kan anvendes i 25 ovennævnte fremgangsmåde, og som er ejendommelig ved, at den omfatter mikroorganismer af arterne Gluconobacter oxydans og Bacillus megaterium, og at den er i stand til at fremstille 2-keto-L-gulonsyre ud fra L-sorbose med et udbytte på mindst 40 g/l.
For at være anvendelige i ovennævnte fremgangsmåde er det nødvendigt, at de ovennævnte arter 30 anvendes i form af en blandet kultur.
En foretrukken blandet mikroorganismekultur ifølge opfindelsen er kultur nr. 2980 eller en subkultur, mutant eller variant deraf. Kultur nr. 2980 blev den 17. marts 1987 deponeret i Deutsche Sammlung von Mikroorganismen med nummeret DSM 4027.
35 6 DK 173310 B1
Den blandede mikroorganismekultur ifølge opfindelsen er ejendommelig ved evnen til at danne 2-keto-L-gulonsyre ud fra L-sorbose i et udbytte på mindst 40 g/l, fortrinsvis mindst 50 g/l, især mindst 80 g/l.
5 Subkulturer, mutanter eller varianter af kultur nr. 2980 (DSM 4027), er således kulturer, der er i stand til at danne 2-keto-L-gulonsyre ud fra L-sorbose i et udbytte på over 40 g/l, især mindst 50 g/l, fortrinsvis mindst 80 g/l.
Den foreliggende opfindelse angår også de enkelte bestanddele i den blandede 10 mikroorganismekultur, dvs. Gluconobacter oxydans-kulturer på den ene side og Bacillus megaterium-kulturer på den anden side, der i kombination er i stand til at opfylde de krav til blandede kulturer, som er angivet ovenfor, dvs. som er i stand til at omdanne L-sorbose til 2-keto-L-gulonsyre i et udbytte på over 40 g/l, især mindst 50 g/l, fortrinsvis mindst 80 g/l.
15
Repræsentanter for sådanne kulturer en 1. Gluconobacter oxydans kultur AS. 1.945 (Academia Sinica's interne betegnelse), deponeret i the Center for General Microbiological Culture Collection, Institute of Microbiology, Zhong Guan 20 Cun, Beijing, Kina, under CGMCC nr. Of 19 den 7. februar 1987, hvoraf en subkultur blev
deponeret den 17. marts 1987 i Deutsche Sammlung von Mikroorganismen med nummeret DSM
4025.
2. Bacillus megaterium-kultur AS. 1.1484 (Academia Sinica's interne betegnelse), deponeret i the 25 Center for General Microbiological Culture Collection, Institute of Microbiology, Zhong Guan
Cun, Beijing, Kina, under CGMCC nr. 0120 den 7. februar 1987, hvoraf en subkultur blev deponeret den 17. marts 1987 i Deutsche Sammlung von Mikroorganismen med nummeret DSM
4026.
30 Yderligere repræsentanter for sådanne kulturer er subkulturer, mutanter og varianter deraf.
Mutanter kan afiedes fra forældrestammeme på konventionel måde, fx bestråling med UV-, røntgen- og gammastråler eller ved behandling med egnede mutagener.
35 * 7 DK 173310 B1
Opfindelsen belyses nærmere ved nedenstående eksempler: EKSEMPEL I 5
Fermentering i en 15 liters laboratoriefermentor
En blandet kultur af Gluconobacter oxidans og Bacillus megaterium blev udstrøget på en agar·
Petri-skål, som indeholdt bestanddelene i podningskulturmediet (nedenfor) med 2% agar.
10
Efter 4 dages inkubation ved 30°C blev der dannet en cellesuspension på agaroverfladen, som blev anvendt til at inokulere 4 rystekolber på 2 liter, der hver især indeholdt 400 ml af det nedenstående medium: 15 0,3% gærekstrakt 0,02% MgS04-7H20 0,3% oksekødekstrakt 0,1 % urinstof efter sterilisation 0,3% majsstøbevand 0,1 % CaC03 pH 6,5 1,0% pepton 2,0% L-sorbose 0,1% KH2P04 ad I I med deioniseret vand.
20
Efter inkubation ved 30°C i 21 timerunder anvendelse af200 rpm blev kolbernes indhold samlet i pulje. 1,4 liter af disse i pulje samlede væsker blev anvendt til at inokulere en krukkefermenter, der indeholdt 9 liter medium med følgende sammensætning: 25 Produktionsmedium 1% majsstøbevand 0,1% KH2P04 0,01% MgS04-7H20 0,5% CaC03 30 8% L-sorbose 1,5% urinstof ad 1 liter med deioniseret vand.
Efter sterilisation er pH i området 7,6-8,0.
35 DK 173310 B1 8
Beluftningen under fermenteringen blev sat til I wm; agitation til 500 rpm og temperaturer til 30°C.
Efler 46 timer havde L-sorbosekoncentrationen, som oprindeligt var 70 g/l (efter inokulering), nået 5 0, hvorimod 2-KGA-koncentrationen nåede 60 g/l.
Når der gås ud fra en højere L-sorbosekoncentration, kan der opnås højere udbytter.
10 EKSEMPEL 2
Den i eksempel 1 beskrevne fremgangsmåde modificeres ved, at der anvendes et produktionsmedium med følgende sammensætning, en beluftningshastighed på 0,5 wm, agitation ved 800 rpm og pH 7,0 (reguleret med Na2C03) i en 3 liters (arbejdsvolumen 2 liter) 15 krukkefermenter ved 3 0°C: 12,0 % L-sorbose 1,85 % majsstøbevand 0,0086 % MgS04-7H20 20 0,086 % KH2P04 0,086 % urinstof 0,15 % antiskummiddelCA-115
Efter 50 timer var L-sorbosekoncentrationen på oprindeligt 110 g/120 g/I, hvorimod 2-KGA-25 koncentrationen var 81 g/l.
Claims (16)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-guIonsyre ved omdannelse af L-eorbose ved hjælp af blandede kulturer af mikroorganismer, kendetegnet ved, at der anvendes en blandet kultur af Gluconobacter oxydans og Bacillus megaterium, idet det blandede kultursystem er i stand til at omdanne L-sorbose til 2-keto-L-gulonsyre i et udbytte på mindst 40 g/l.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den anvendte Gluconobacter oxydans-mikroorganisme har følgende egenskaber: a) 2-keto-L-gulonsyre dannes ud fra sorbose, 5 b) ethanol oxideres til eddikesyre, c) D-glucose oxideres til D-gluconsyre og 2-keto-D-gluconsyre, d) ketogenese af polyalkoholer, e) pellikel- og ringvækst i mannitolvæske (24 timers dyrkning) ved pH 4 og 5, og pellikevækst i glucosevsske ved pH 4,5. 10
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1 eller 2, kendetegnet ved, at den anvendte Gluconobacter oxydans-mikroorganisme har følgende yderligere egenskaber: f) glycerol oxideres i det væsentlige ikke til dihydrooxyacetone, 15 g) 2-keto-L-glucarsyre dannes ud fra sorbitol og glucarsyre, men ikke ud fra glucose, fructose, gluconsyre, mannitol eller 2-keto-D-gluconsyre, h) polymorf, tilsyneladende ingen flageller, i) brunt pigment dannes ud fra fructose, j) god vækst, når den dyrkes i nærværelse af Bacillus megaterium eller en celleekstrakt deraf, 20 k) streptomycinfølsom.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 1,2 eller 3, kendetegnet ved,at der anvendes kultur nr. 2980 (DSM nr. 4027) eller en subkultur, mutant eller variant deraf.
5. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-4, kendetegnet ved, at der anvendes et sorbosesubstrat med en koncentration på fra ca. 20 til ca. 200 g/l, fortrinsvis fra ca. 50 til ca. 100 8/1.
6. Fremgangsmåde ifølge krav 5, kendetegnet ved, at 2-keto-L-gulonsyre fremstilles i et udbytte på 30 mindst 50 g/l, fortrinsvis mindst 80 g/l.
7. Fremgangsmåde ifølge et hvilket som helst af kravene 1-6, kendetegnet ved, at den udføres ved en pH mellem ca. 5 og 8, fortrinsvis mellem ca. 6 og 8. DK 173310 B1
8. Fremgangsmåde ifolge et hvilket som helst af kravene 1-7, kendetegnet ved, at den udføres ved en temperatur mellem ca. 25 og 35°C, fortrinsvis ved 30°C ± 1°C.
9. Blandet mikroorganismekultur, kendetegnet ved, at den er i stand til at fremstille 2-keto-L- 5 gulonsyre ud fra L-sorbose med et udbytte på mindst 40 g/1, hvilken mikroorganismekultur består af mikroorganismer af arterne Gluconobacter oxydans og Bacillus megaterium.
10. Kultur ifølge krav 9, kendetegnet ved, at Gluconobacter oxydans-m ikroorganismen har følgende egenskaber: a) 2-keto-L-gu lonsyre dannes ud fra sorbose, b) ethanol oxideres til eddikesyre, c) D-glucose oxideres til D-gluconsyre og 2-keto-D-gluconsyre, d) ketogenese af polyalkoholer, 15 e) pellikel- og ringvækst i mannitolvæske (24 timers dyrkning) ved pH 4 og 5, og pellikelvækst i glucosevæske ved pH 4,5.
11. Kultur ifølge krav 9 eller 10, kendetegnet ved, at Gluconobacter oxydans-mikroorganismen har følgende, yderligere egenskaber: 20 f) glycerol oxideres i det væsentlige ikke til dihydrooxyacetone, g) 2-keto-L-glucarsyre dannes ud fra sorbitol og glucarsyre, men ikke ud fra glucose, fructose, gluconsyre, mannitol eller 2-keto-D-gluconsyre, h) polymorf, tilsyneladende ingen flageller, 25 i) brunt pigment dannes ud fra fructose, j) god vækst, når den dyrkes i nærværelse af Bacillus megaterium eller en celleekstrakt deraf, k) streptomycinfølsom.
12. Mikroorganismekultur ifølge et hvilket som helst af kravene 9-11, kendetegnet ved, at den er i 30 stand til at producere 2-keto-L-gulonsyre ud fra L-sorbose i et udbytte på mindst 50 g/1, fortrinsvis mindst 80 g/I.
13. Blandet mikroorganismekultur, kendetegnet ved, at den er i stand til at fremstille 2-keto-L-gulonsyre ud fra L-sorbose med et udbytte på mindst 40 g/1, hvilken kultur er kultur nr. 2980 (DSM 35 nr. 4027) eller subkulturer, mutanter eller varianter deraf. DK 173310 B1
14. Gluconobacter oxydans-stamme DSM nr. 4025 (CGMCC nr. 0119) og subkulturer, mutanter og varianter deraf, som er i stand til at fremstille 2-keto-L-gulonsyre ud fra L-sorbose med et udbytte på mindst 40 g/1 i en blandet mikroorganismekultur ifølge krav 9. 5
15. Bacillus megaterium-stamme DSM nr. 4026 (CGMCC nr. 0120) og subkulturer, mutanter og varianter deraf, som er i stand til at fremstille 2-keto-L-gulonsyre ud fra L-sorbose med et udbytte på mindst 40 g/1 i en blandet mikroorganismekultur ifølge krav 9.
16. Fremgangsmåde til fremstilling af ascorbinsyre, kendetegnet ved, at L-sorbose omdannes til 2-keto-L-gulonsyre ved hjælp af en blandet mikroorganismekultur ifølge krav 9, og hvorved den opnåede 2-keto-L-gulonsyre efterfølgende omdannes til ascorbinsyre på en velkendt måde, som omfatter esterificering, efterfulgt af enolisering og lactonisering. «r t
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN87100547 | 1987-02-07 | ||
| CN87100547 | 1987-02-07 | ||
| EP87810169 | 1987-03-23 | ||
| EP87810169 | 1987-03-23 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK59788D0 DK59788D0 (da) | 1988-02-05 |
| DK59788A DK59788A (da) | 1988-08-08 |
| DK173310B1 true DK173310B1 (da) | 2000-07-10 |
Family
ID=25742280
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK198800597A DK173310B1 (da) | 1987-02-07 | 1988-02-05 | Fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre, mikroorganismestammer og -kulturer hertil og en fremgangsmåde til fre |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4935359A (da) |
| EP (1) | EP0278447B1 (da) |
| JP (1) | JP2719340B2 (da) |
| DE (1) | DE3882242T2 (da) |
| DK (1) | DK173310B1 (da) |
| HK (1) | HK147796A (da) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK269987A (da) * | 1986-06-03 | 1987-12-04 | Hoffmann La Roche | Enzym og fremgangsmaade til fremstilling deraf |
| DK270087A (da) * | 1986-06-03 | 1987-12-04 | Hoffmann La Roche | Enzym og fremgangsmaade til fremstilling deraf |
| DK173507B1 (da) * | 1988-09-30 | 2001-01-15 | Hoffmann La Roche | Fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre |
| RU2102481C1 (ru) * | 1991-06-13 | 1998-01-20 | Ф.Хоффманн-Ля Рош, Аг | Способ получения 2-кето-l-гулоновой кислоты или ее соли |
| US5437989A (en) * | 1992-12-30 | 1995-08-01 | Hoffmann-La Roche Inc. | Alcohol/aldehyde dehydrogenase from Gluconobacter oxydans DSM 4025 FERM BP-3812 |
| US5599689A (en) * | 1995-05-12 | 1997-02-04 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Process for making 1,3-propanediol from carbohydrates using mixed microbial cultures |
| US6730503B1 (en) | 1996-09-19 | 2004-05-04 | Roche Vitamins Inc. | Alcohol/aldehyde dehydrogenase |
| EP1688499B1 (en) | 1996-09-19 | 2010-12-29 | DSM IP Assets B.V. | Alcohol-aldehyd-dehydrogenases |
| US5834231A (en) * | 1996-10-24 | 1998-11-10 | Archer Daniels Midland Co. | Bacterial strains and use thereof in fermentation process for 2-keto-L-gulonic acid production |
| DE69821326T2 (de) | 1997-12-01 | 2004-11-18 | Dsm Ip Assets B.V. | Aldehyd-Dehydrogenase |
| CA2342299A1 (en) | 1998-09-11 | 2000-03-23 | Archer-Daniels-Midland Company | Bacterial strains for the production of 2-keto-l-gulonic acid |
| US6204040B1 (en) | 1999-04-22 | 2001-03-20 | Korea Research Institute Of Bioscience And Biotechnology | Gluconobacter suboxydans sorbitol dehydrogenase, genes and methods of use thereof |
| US6153791A (en) * | 1999-08-02 | 2000-11-28 | Archer-Daniels-Midland Company | Process for purifying 2-keto-L-gulonic acid |
| US6902917B1 (en) * | 1999-08-03 | 2005-06-07 | Archer-Daniels-Midland Company | Process for recovery of organic acids from fermentration broths |
| AU2001253162A1 (en) | 2000-04-05 | 2001-10-23 | Archer-Daniels-Midland Company | Ketogulonigenium shuttle vectors |
| AU2001251342A1 (en) * | 2000-04-05 | 2001-10-23 | Archer-Daniels-Midland Company | Ketogulonigenium endogenous plasmids |
| WO2001077159A2 (en) * | 2000-04-05 | 2001-10-18 | Michigan State University | An endogenous ketogulonigenium plasmid |
| US6387654B1 (en) | 2000-05-04 | 2002-05-14 | Archer-Daniels-Midland Company | Bacterial strains and fermentation processes for the production of 2-keto-l-gulonic acid |
| FR2820973B1 (fr) * | 2001-02-19 | 2003-05-23 | Oreal | Composition comportant de la vitamine c preparee durant l'application, utilisation d'enzymes pour la formation de vitamine c a usage topique et procede de traitement cosmetique |
| GB0119864D0 (en) * | 2001-08-15 | 2001-10-10 | Cerestar Holding Bv | Process for the manufacture of 2-keto-L-gulonic acid |
| AU2003283253A1 (en) * | 2002-09-27 | 2004-04-19 | Dsm Ip Assets B.V. | Production of 2-kga |
| CN1914326B (zh) * | 2004-01-30 | 2012-04-18 | 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 | 维生素c的微生物生产方法 |
| CN1304583C (zh) * | 2005-03-30 | 2007-03-14 | 赵金红 | 二羟基丙酮的生产方法 |
| CN101603060B (zh) * | 2009-07-10 | 2011-06-01 | 天津大学 | 提高氧化葡糖杆菌产2-酮-l-古龙酸的方法 |
| CN103497895A (zh) * | 2013-09-26 | 2014-01-08 | 宁夏启元药业有限公司 | 一种维生素c混合菌的保藏方法 |
| CN112898982A (zh) * | 2019-12-03 | 2021-06-04 | 中国科学院沈阳应用生态研究所 | 一种土壤调理剂及其制备方法和应用 |
| CN113913354B (zh) * | 2021-12-03 | 2023-10-10 | 山东天力药业有限公司 | 一种促进生黑葡萄糖酸杆菌生长代谢的方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5021559B2 (da) * | 1973-03-22 | 1975-07-23 | ||
| JPS5135485A (en) * | 1974-09-20 | 1976-03-25 | Shionogi Seiyaku Kk | 22 keto ll guronsan no seizohoho |
| JPS5135486A (en) * | 1974-09-20 | 1976-03-25 | Shionogi Seiyaku Kk | 22 keto ll guronsan no seizohoho |
| DE3684533D1 (de) * | 1985-08-28 | 1992-04-30 | Hoffmann La Roche | Verfahren zur herstellung von ketogulonsaeure. |
| DK171869B1 (da) * | 1985-10-22 | 1997-07-21 | Takeda Chemical Industries Ltd | Fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre samt biologisk ren mikroorganismekultur til anvendelse ved fremgangsmåden |
-
1988
- 1988-02-03 US US07/146,276 patent/US4935359A/en not_active Expired - Lifetime
- 1988-02-05 DK DK198800597A patent/DK173310B1/da not_active IP Right Cessation
- 1988-02-08 JP JP63027374A patent/JP2719340B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1988-02-08 DE DE88101783T patent/DE3882242T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1988-02-08 EP EP88101783A patent/EP0278447B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-08-01 HK HK147796A patent/HK147796A/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0278447A2 (en) | 1988-08-17 |
| JP2719340B2 (ja) | 1998-02-25 |
| EP0278447B1 (en) | 1993-07-14 |
| DK59788A (da) | 1988-08-08 |
| DE3882242D1 (de) | 1993-08-19 |
| US4935359A (en) | 1990-06-19 |
| DK59788D0 (da) | 1988-02-05 |
| EP0278447A3 (en) | 1989-07-19 |
| JPS6434293A (en) | 1989-02-03 |
| DE3882242T2 (de) | 1994-04-07 |
| HK147796A (en) | 1996-08-09 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK173310B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af 2-keto-L-gulonsyre, mikroorganismestammer og -kulturer hertil og en fremgangsmåde til fre | |
| CN100357446C (zh) | 维生素c的微生物生产方法 | |
| KR950009199B1 (ko) | 2-케토-l-굴론산의 제조방법 | |
| US5312741A (en) | Process for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| AU600749B2 (en) | Novel aurebasidium sp. microorganisms, method for obtaining the same, and method for preparing erythritol with the same | |
| CA1168999A (en) | Method for preparing 2,5-diketo-d-gluconic acid | |
| US3998697A (en) | Process for preparing 2-keto-L-gulonic acid | |
| US4960695A (en) | Fermentation process to produce 2-keto-L-gluonic acid | |
| US3959076A (en) | Process for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| US3963574A (en) | Process for producing 2-keto-L-gulonic acid | |
| US5541108A (en) | Gluconobacter oxydans strains | |
| US3912592A (en) | Method for producing L-sorbosone | |
| US4595659A (en) | Fermentation production of ascorbic acid from L-galactonic substrate | |
| CS217986B2 (en) | Method of making the 2-keto-l-gulonic acid | |
| DK172133B1 (da) | Fremgangsmåde til fremstilling af L-sorbose | |
| CA1302931C (en) | Preparation of pyruvic acid | |
| US4430429A (en) | Production of vitamin B12 -activity substances | |
| US4217416A (en) | Biotransformation preparation of 2,3-dihydroxybenzoic acid | |
| KR100216996B1 (ko) | 6-히드록시니코틴산의 미생물학적 제조방법 | |
| WO2004029262A2 (en) | Production of 2 - keto - l - gulonic acd | |
| JPH0236201A (ja) | ラムノース含有多糖およびその製造方法 | |
| CZ279298B6 (cs) | Mikroorganismy Alcaligenes faecalis DSM 6335 a způsob mikrobiologické výroby kyseliny 6-hydroxypikolinové | |
| JPS5926273B2 (ja) | 発酵法によるコエンチ−ムｑ↓１↓０の製造法 | |
| HU220465B1 (hu) | Mikrobiológiai eljárás 6-hidroxi-nikotinsav előállítására |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B1 | Patent granted (law 1993) | ||
| PUP | Patent expired |