EA030384B1 - Терапия легочной формы высотной болезни - Google Patents
Терапия легочной формы высотной болезни Download PDFInfo
- Publication number
- EA030384B1 EA030384B1 EA201500061A EA201500061A EA030384B1 EA 030384 B1 EA030384 B1 EA 030384B1 EA 201500061 A EA201500061 A EA 201500061A EA 201500061 A EA201500061 A EA 201500061A EA 030384 B1 EA030384 B1 EA 030384B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- peptide
- present
- pulmonary
- use according
- altitude sickness
- Prior art date
Links
- 208000008445 altitude sickness Diseases 0.000 title claims abstract description 63
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 title claims abstract description 59
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 title abstract description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 212
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 claims abstract description 70
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 32
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 30
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 7
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 7
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 45
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 25
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 12
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 8
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims description 6
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 4
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 3
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 3
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 3
- 108010008488 Glycylglycine Proteins 0.000 claims description 3
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 claims description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 3
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 3
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 3
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 3
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 3
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 claims description 3
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 claims description 3
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 claims description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 3
- 229940043257 glycylglycine Drugs 0.000 claims description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 claims description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 claims description 3
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 claims description 3
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 3
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 claims description 3
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 3
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 3
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 claims description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 34
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 abstract description 34
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 abstract description 34
- 230000027455 binding Effects 0.000 abstract description 8
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 abstract 1
- 238000012961 medicinal therapy Methods 0.000 abstract 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 62
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 62
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 60
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 58
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 38
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 35
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 31
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 28
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 28
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 28
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 27
- XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N amiloride Chemical compound NC(=N)NC(=O)C1=NC(Cl)=C(N)N=C1N XSDQTOBWRPYKKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 229960002576 amiloride Drugs 0.000 description 24
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 19
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 19
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 16
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 15
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 14
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 13
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 13
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 13
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 13
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 11
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 11
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 11
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 11
- 210000002821 alveolar epithelial cell Anatomy 0.000 description 10
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 9
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical compound NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 9
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 9
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 229940000635 beta-alanine Drugs 0.000 description 8
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 7
- AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N Orn-delta-NH2 Natural products NCCCC(N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N Ornithine Natural products OC(=O)C(C)CCCN UTJLXEIPEHZYQJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 206010037423 Pulmonary oedema Diseases 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Substances CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 7
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 7
- 229960003692 gamma aminobutyric acid Drugs 0.000 description 7
- 229960003104 ornithine Drugs 0.000 description 7
- 208000005333 pulmonary edema Diseases 0.000 description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 7
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 6
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 6
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 6
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 6
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 6
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 6
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 6
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 6
- 102000003837 Epithelial Sodium Channels Human genes 0.000 description 5
- 108090000140 Epithelial Sodium Channels Proteins 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 5
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 5
- 238000009640 blood culture Methods 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 5
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 5
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 5
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 5
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 5
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 5
- 125000004042 4-aminobutyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 4
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 4
- 108010052164 Sodium Channels Proteins 0.000 description 4
- 102000018674 Sodium Channels Human genes 0.000 description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- 238000002651 drug therapy Methods 0.000 description 4
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 4
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 4
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 4
- 230000037351 starvation Effects 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 3
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 3
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 3
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 3
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010047139 Vasoconstriction Diseases 0.000 description 3
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000013160 medical therapy Methods 0.000 description 3
- 230000007310 pathophysiology Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000037081 physical activity Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 230000025033 vasoconstriction Effects 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical group CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000024188 Andala Species 0.000 description 2
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- 241001503987 Clematis vitalba Species 0.000 description 2
- 206010013647 Drowning Diseases 0.000 description 2
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 2
- 206010020952 Hypocapnia Diseases 0.000 description 2
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 2
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- 208000004221 Multiple Trauma Diseases 0.000 description 2
- 208000023637 Multiple injury Diseases 0.000 description 2
- 125000001429 N-terminal alpha-amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000007123 Pulmonary Atelectasis Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 206010069351 acute lung injury Diseases 0.000 description 2
- 206010001053 acute respiratory failure Diseases 0.000 description 2
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 2
- 125000003158 alcohol group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 239000012876 carrier material Substances 0.000 description 2
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 235000019504 cigarettes Nutrition 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N dimethylformamide Substances CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 125000005519 fluorenylmethyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 2
- 208000035474 group of disease Diseases 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000008706 hypoxic vasoconstriction Effects 0.000 description 2
- 230000037427 ion transport Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000008741 proinflammatory signaling process Effects 0.000 description 2
- 210000001147 pulmonary artery Anatomy 0.000 description 2
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 2
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- LKVFMOMQYXIFRK-KSVAIKAXSA-N (3S,6S,9S,12S,18S,21S,27S,30S,33S,36S,42R,47R,50S,53S,56S)-42-amino-3-(4-aminobutyl)-36-(3-amino-3-oxopropyl)-33-(3-carbamimidamidopropyl)-9,18,30-tris(2-carboxyethyl)-27-[(1R)-1-hydroxyethyl]-50-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-53-(1H-indol-3-ylmethyl)-6,12-dimethyl-2,5,8,11,14,17,20,26,29,32,35,38,41,49,52,55-hexadecaoxo-44,45-dithia-1,4,7,10,13,16,19,25,28,31,34,37,40,48,51,54-hexadecazatricyclo[54.3.0.021,25]nonapentacontane-47-carboxylic acid Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H]1NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](Cc2ccc(O)cc2)NC(=O)[C@H](Cc2c[nH]c3ccccc23)NC(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]2CCCN2C1=O)C(O)=O LKVFMOMQYXIFRK-KSVAIKAXSA-N 0.000 description 1
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-2-[chloro(diphenyl)methyl]benzene Chemical compound ClC1=CC=CC=C1C(Cl)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 JFLSOKIMYBSASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIOSHTLNZVXJOF-UHFFFAOYSA-N 2,5-bis(3-oxobutanoylamino)benzenesulfonic acid Chemical group CC(=O)CC(=O)NC1=CC=C(NC(=O)CC(C)=O)C(S(O)(=O)=O)=C1 DIOSHTLNZVXJOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010049501 AP301 peptide Proteins 0.000 description 1
- WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N Ala-Pro Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O WPWUFUBLGADILS-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 201000001178 Bacterial Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 1
- 208000034656 Contusions Diseases 0.000 description 1
- 240000006890 Erythroxylum coca Species 0.000 description 1
- 208000004248 Familial Primary Pulmonary Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 208000003241 Fat Embolism Diseases 0.000 description 1
- 235000011201 Ginkgo Nutrition 0.000 description 1
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 description 1
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 description 1
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 1
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020591 Hypercapnia Diseases 0.000 description 1
- 206010021133 Hypoventilation Diseases 0.000 description 1
- 206010022773 Intracranial pressure increased Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 208000004852 Lung Injury Diseases 0.000 description 1
- 238000003820 Medium-pressure liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000034388 Mountain sickness acute Diseases 0.000 description 1
- 206010035737 Pneumonia viral Diseases 0.000 description 1
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 1
- 206010064911 Pulmonary arterial hypertension Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700023707 TUG1 Proteins 0.000 description 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical group [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- YSLMFVXKNNRMIG-UHFFFAOYSA-N [C].NCC(O)=O Chemical compound [C].NCC(O)=O YSLMFVXKNNRMIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006022 acute inflammation Effects 0.000 description 1
- 208000038016 acute inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 108010087924 alanylproline Proteins 0.000 description 1
- 230000008382 alveolar damage Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004872 arterial blood pressure Effects 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000000233 bronchiolar non-ciliated Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 230000003683 cardiac damage Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000008957 cocaer Nutrition 0.000 description 1
- ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N cocaine Chemical compound O([C@H]1C[C@@H]2CC[C@@H](N2C)[C@H]1C(=O)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N 0.000 description 1
- 230000009519 contusion Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000006059 cover glass Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 1
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N diisopropylcarbodiimide Natural products CC(C)NC(=O)NC(C)C BGRWYRAHAFMIBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003989 endothelium vascular Anatomy 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005081 epithelial layer Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000010437 erythropoiesis Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 230000002102 hyperpolarization Effects 0.000 description 1
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000006749 inflammatory damage Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 1
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 1
- 238000003402 intramolecular cyclocondensation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 210000005246 left atrium Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 231100000515 lung injury Toxicity 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000028161 membrane depolarization Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000001272 neurogenic effect Effects 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229940000673 orphan drug Drugs 0.000 description 1
- 239000002859 orphan drug Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000037074 physically active Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 231100000572 poisoning Toxicity 0.000 description 1
- 230000000607 poisoning effect Effects 0.000 description 1
- 230000007096 poisonous effect Effects 0.000 description 1
- XWIJIXWOZCRYEL-UHFFFAOYSA-M potassium;methanesulfonate Chemical compound [K+].CS([O-])(=O)=O XWIJIXWOZCRYEL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 201000008312 primary pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 1
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000007114 proinflammatory cascade Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 1
- 230000000241 respiratory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000020874 response to hypoxia Effects 0.000 description 1
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000037812 secondary pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- KKVTYAVXTDIPAP-UHFFFAOYSA-M sodium;methanesulfonate Chemical compound [Na+].CS([O-])(=O)=O KKVTYAVXTDIPAP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002889 sympathetic effect Effects 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000009421 viral pneumonia Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- A61K38/191—Tumor necrosis factors [TNF], e.g. lymphotoxin [LT], i.e. TNF-beta
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Public Health (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, и в частности оно относится к терапии легочной формы высотной болезни, вызванной кислородным голоданием и пониженным атмосферным давлением. Для терапии и предотвращения легочной формы высотной болезни предложено применять циклизованный пептид, который состоит из 7-20 смежных аминокислот и содержит в своем составе гексамер TPEGAE, где этот пептид не обладает способностью связываться с рецептором TNF. Изобретение также относится к применению фармацевтической композиции, содержащей данный пептид и фармацевтически приемлемый носитель, где композиция подходит для введения людям, в терапии и предотвращении легочной формы высотной болезни. С помощью настоящего изобретения впервые стало возможно сделать доступной медикаментозную терапию легочной формы высотной болезни.
Description
Изобретение относится к области медицины, и в частности оно относится к терапии легочной формы высотной болезни, вызванной кислородным голоданием и пониженным атмосферным давлением. Для терапии и предотвращения легочной формы высотной болезни предложено применять циклизованный пептид, который состоит из 7-20 смежных аминокислот и содержит в своем составе гексамер ТРЕСАЕ, где этот пептид не обладает способностью связываться с рецептором ΤΝΡ. Изобретение также относится к применению фармацевтической композиции, содержащей данный пептид и фармацевтически приемлемый носитель, где композиция подходит для введения людям, в терапии и предотвращении легочной формы высотной болезни. С помощью настоящего изобретения впервые стало возможно сделать доступной медикаментозную терапию легочной формы высотной болезни.
030384
Настоящее изобретение относится к терапии легочной формы высотной болезни, вызванной кислородным голоданием и пониженным атмосферным давлением.
Высотная болезнь может проявляться у людей на высоте более 2500 м над уровнем моря. На высоте более 2500 м концентрация кислорода и атмосферное давление значительно понижаются. Различают церебральную и легочную формы острой высотной болезни. Острая высотная болезнь, таким образом, происходит в мозге и также в легком. Первое подробное клиническое описание высотной болезни было сделано во время экспедиции на Монблан в 1891 г. Как минимум четыре участника экспедиции пострадали от высотной болезни, и один участник умер 2-го сентября 1891 г. на высоте в 4000 м. Начиная с этих случаев, высотная болезнь расценивается как индивидуальное опасное для жизни клиническое состояние.
В отсутствие лечения легочная форма высотной болезни может привести к смерти менее чем через 24 ч, где смерть часто проявляется через вторичную эмболию легких.
Наиболее эффективная терапия всех форм острой высотной болезни - подача кислорода, например, при быстром спуске пострадавшего на меньшие высоты или с помощью бутилированного кислорода, или с помощью портативной гипербарической барокамеры. Однако в горных районах быстрый спуск часто невозможен. Кислородная вентиляция с помощью, например, бутилированного кислорода действительно понижает повышенное артериальное давление в легких, однако не нормализует его. Также в случае портативной гипербарической барокамеры благоприятный эффект является только временным. Эффективность терапии исчезает у пациентов сразу же после того, как они покидают гипербарическую барокамеру, когда они опять становятся физически активными.
Медикаментозная терапия высотной болезни в настоящее время ограничена и противоречива: так, дексаметазон рекомендуется при тяжелой острой высотной болезни и особенно при церебральной форме высотной болезни. Далее обсуждалось, можно ли использовать ингибиторы ΡΌΕ-5, которые используются для терапии первичной легочной гипертензии (классификация в единицах Баиа 1), для вторичной легочной гипертензии, вызванной кислородным голоданием на высоте (классификация в единицах Бапа 3).
Также была предложена терапия (и предупреждение) высотной болезни встречающимися в природе средствами (настой из листьев кокаинового куста; настой масла яка; препараты, которые содержат гинкго в качестве действующего вещества).
Однако следует отметить, что в настоящее время возможности для медикаментозной терапии легочной формы высотной болезни все еще очень ограничены. Далее известно, что рассчитывать на организованную спасательную операцию возможно лишь в Европейском регионе и частично также в Североамериканском регионе. В удаленных горах мира и на экстремальных высотах спасательные операции и медицинская помощь в чрезвычайных ситуациях (с помощью бутилированного кислорода или портативной гипербарической барокамера) едва ли возможны. Следовательно, существует острая необходимость в обеспечении эффективной медикаментозной терапии высотной болезни, в том числе в качестве компонента аварийного комплекта для альпинистов, у которых есть риск развития высотной болезни.
В патенте ΕΡ 2009023 А1 предлагаются новые пептиды для терапии отечности. В этом документе эти пептиды оценивались с помощью исследования "ΤΕΕΚ." ("Трансэпителиальное сопротивление электрическому току") с использованием клеток Са1и-3, которое не представляет собой достоверную модель для проведения испытаний по выведению жидкостей при легочной отечности (легочно-отечное выведение жидкостей). Клетки Са1и-3 на самом деле являются бронхиальными клетками, которые составляют всего лишь примерно 1% поверхности легкого, служащей для газообмена. Наоборот, клетки альвеол составляют 99% поверхности легкого, служащей для газообмена (Но11еийог81 е! а1., 1. Вюшей. Вю1ееЬио1. 2011 (2011), άοί: 10.1155/2011/174306). В отличие от ΤΕΕΚ исследования линия человеческих альвеолярных эпителиальных клеток А549 в качестве модели альвеолярных эпителиальных клеток является признанным и доказанным экспериментальным стандартом (Ба/гак е! а1., Ат. 1. РЬу8ю1. Биид Се11. Мо1. РЬу8ю1. 278 (2000), Б848-57).
Таким образом, целью настоящего изобретения является значительное улучшение возможностей для медикаментозной терапия пациентов с легочной формой высотной болезни и предоставление способов, с помощью которых данное заболевание может эффективно лечиться, а также предотвращаться.
Соответственно настоящее изобретение относится к пептиду, который состоит из 7-20, в особенности 7-17 смежных аминокислот и содержит в своем составе гексамер ТХ!ЕХ2Х3Е, где Х1, Х2 и Х3 могут быть любыми природными или неприродными аминокислотами, где пептид не имеет способности связываться с рецептором ΤΝΕ и является циклизованным, для терапии и предотвращения легочной формы высотной болезни.
С помощью настоящего изобретения впервые стало возможно сделать доступной медикаментозную терапию легочной формы высотной болезни. Таким образом, настоящему изобретению был сразу присвоен "статус орфанного препарата" как ЕМА (ΕΜΑ/ΟΌ/144/12), а также υδ-ΡΌΑ (12-3829). Это является свидетельством наличия острой необходимости возможности лечения этого заболевания, чему отвечает настоящее изобретение.
Пептиды, предназначенные для применения в соответствии с настоящим изобретением уже были хорошо известны в течение длительного времени, например из Европейского патента ΕΡ 1264599 В1,
- 1 030384
патентов И8 2007/299003 А, АО 94/18325 А1, АО 00/09149 А1, АО 2006/013183 А1 или АО 2008/148545 А1. Во время проведения экспериментов для настоящего изобретения стало ясно, что названные пептиды удивительным образом также подходят для терапии легочной формы высотной болезни, так что, таким образом, простая и эффективная медикаментозная терапия впервые может быть сделана доступной для данных показаний.
Названные пептиды, которые являются хорошо известными и которые предлагают к применению в соответствии с настоящим изобретением, не обладают активностью связывания с рецептором ΤΝΡ (ΗτίЬат е! а1., Еиг. 1. 1ттипо1. 1999; ЕПа е! а1., А1КССМ 2003; см. также раздел "Примеры" ниже) и они циклизованы. Предпочтительные варианты названных пептидов состоят из 7-17 смежных аминокислот и содержат в своем составе гексамер ТРЕОАЕ (8Е0 ГО NО: 2).
Острая высотная болезнь всегда начинается с подострой гипоксии. Далее, аноксемия и гиперкапния приводят к вазодилатации, гипокапния к вазоконстрикции. На высоте различные эффекты происходят от аноксемии и гипокапнии: в легком преобладает вазоконстрикция и в мозге вазодилатация.
Причина острой высотной болезни заключается в неудачной адаптации, в основном в увеличении газообмена, которое индивидуально слишком мало (относительная гиповентиляция). Последствиями являются более выраженная аноксемия, повышенное артериальное давление в легких, повышенное внутричерепное давление, задержка жидкости и сниженный эритропоэз.
Легочная форма высотной болезни вызывается кислородным голоданием и пониженным атмосферным давлением и является опасным для жизни изменением в функционировании легких и происходит в основном на высоте 2500 до 6000 м. Две трети всех случаев происходят на высоте от 3000 до 4500 м над уровнем моря. Легочная форма высотной болезни является наиболее распространенной причиной смерти от острой высотной болезни.
Как правило, легочная форма высотной болезни часто начинается после преодоления пороговой высоты в приблизительно 2500 м.
Излишняя негомогенная, гипоксическая вазоконстрикция в легком приводит к чрезмерной перфузии областей легкого с острыми инфильтратами. Значительно повышенная легочная гипертензия в результате негомогенной гипоксической вазоконстрикции является проявлением в основном в периферических областях легкого, значительно повышенной гипоксической легочной сосудистой реакции (НРУК) у ранее полностью здоровых людей. Повышение артериального давления в легких действительно является физиологическим во время гипоксии, но значительно более сильно выражено в легочной форме высотной болезни. Однако проницаемость легочных капилляров не повышается во время гипоксии.
Это находится в очевидной противоположности к другим острым заболеваниям легких, таким как, например, острое повреждение легких (АЫ), синдром острой дыхательной недостаточности (АКЭ8) или отечность, связанная с повышенной проницаемостью, которая может проявляться либо в первичной форме через прямое воздействие повреждающих факторов или во вторичной форме как последствие других заболеваний. Наиболее частыми повреждениями легкого при АЫ, ΛΡΌ8 и отечности, связанной с повышенной проницаемостью, являются бактериальная и вирусная пневмония, ушиб легочной паренхимы, аспирация желудочного сока, ингаляционная травма, интоксикация при курении, повреждения при утоплении, массивная трансфузия крови, сепсис, политравма, сердечно-легочное шунтирование или масштабные ожоги. В названных заболеваниях легких воспалительная реакция с сопутствующим повреждением альвеолярных перегородок выходит на первый план. Названное состояние приводит к комплексной активации про- и противовоспалительных иммунных процессов, которые приводят к воспалительному повреждению альвеолярного эпителия и эндотелия сосудов. Последствиями являются потеря альвеолоцитов и сурфактанта, возникновение утечки в капиллярах с выделением белков плазмы и образованием интерстициальной отечности. Воспалительные изменения обычно проявляются в определенных очагах и распределены неравномерно по всему легкому. Инфильтрация, интерстициальная и альвеолярная отечность в конце концов ведут к коллапсу легкого и клиническим признакам артериальной аноксемии и легочной гипертензии. Такие воспалительные реакции не имеют патологической значимости в высотной болезни.
Заболеваемость клинически явной легочной формой высотной болезни на высоте более 3500 м составляет приблизительно 15%, смертность составляет приблизительно 44% пациентов, не получивших лечения.
Заболеваемость высотной болезнью не коррелирует с УО2тах, тренировочным состоянием, артерильным давлением, питанием, курением сигарет или возрастом (в отличие от острого повреждения легких (АЬ1/АКО8), для которого, более всего остального, курение сигарет и пожилой возраст представляют собой значимые факторы риска), но точно частично коррелирует с индивидуальной реакцией дыхания на гипоксию (ΗΥΚ.) и с пунктом назначения в горах или соответственно скоростью подъема.
Различия между терапией легочной формы высотной болезни с одной стороны и АЕ1/АКЭ8 с другой стороны были также приняты во внимание медицинскими учреждениями ЕМА и и8-ЕОА во время разрешения настоящего изобретения в качестве "орфанного показания" непосредственно в качестве основания. Названное решение происходит, с одной стороны, исключительно из международной системы классификации диагнозов (!СИ) Всемирной Ассоциации Здравоохранения (АНО): легочная форма вы- 2 030384
сотной болезни классифицируется в главе XIX (травмы, отравления и некоторые другие последствия внешних причин), группа заболеваний Т66-Т78 (другие и неуточненные эффекты внешних причин), класс заболеваний Т70 (эффекты атмосферного давления и давления воды), подкатегория Т70.2 (другие и неуточненные эффекты большой высоты), тогда как АЫ/АКОЗ классифицируется в совершенно другой главе (глава X (заболевания респираторной системы), группа заболеваний 180-184 (другие респираторные заболевания, в основном поражающие интерстиций), класс заболеваний 180 (синдром острой дыхательной недостаточности у взрослых [АКОЗ])). Клинические области являются разными (медицина, связанная с окружающей средой, медицина труда и спортивная медицина в случае легочной формы высотной болезни; анестезия и интенсивная медицина в случае АЫ/АКОЗ). Этиология является фундаментально различной. Легочная форма высотной болезни развивается у в остальном здоровых людей, не имеющих лежащих в основе или уже существующих клинических заболеваний после быстрого неакклиматизированного подъема здоровых горных туристов до высот более 3000 м или соответственно изменениями в условиях окружающей среды, тогда как АЫ/АКОЗ вызывается предшествующими клиническими заболеваниями и являются последствиями лежащей в основе патофизиологии (пациент уже страдает от другого определяемого клинического заболевания), такой как тяжелая инфекция или воспаление, которое является локальным или системным (например, в случае сепсиса), аспирация (например, желудочного сока), вдыхание горячих или ядовитых газов, множественные переливания крови, повреждения, вызванные утоплением, коллапс легкого, политравмы, ожоги, жировая эмболия и т.д.); также патофизиология. В легочной форме высотной болезни недостаточная реакция легочной вентиляции и необычно сильная реакция вазоконстрикции ведут к гипоксии, посредством которых далее (также из-за (нейрогенной) симпатической гиперактивности) происходят повышенное легочное давление, эндотелиальный стресс и капиллярный выход; в АЫ/АКОЗ, альвеолярное повреждение, выход богатой белком жидкости в интрестициальную и альвеолярную области и экстенсивный выброс цитокинов и иммиграция нейтрофилов приводят к пониженному газообмену в легком.
Главным образом, однако легочная форма высотной болезни и АЫ/АКОЗ также различаются по роли, которую воспалительные процессы играют в этих заболеваниях. Воспалительные процессы всегда предшествуют АЫ/АКОЗ; эти воспалительные процессы играют важную роль в патофизиологии. Наоборот, воспалительные процессы не играют никакой роли в легочной форме высотной болезни; если они и происходят, то только как вторичные проявления, но не как причина заболевания. В свою очередь, по этой причине в АЫ/АКОЗ повышенная секреция провоспалительных модуляторов эндотелием и нейтрофилами, воспалительная реакция через активацию нейтрофилов и выброс цитокинов, высокое содержание цитокинов и белков в жидкости бронхоальвеолярного лаважа (ВАЬР), присутствие нейтрофилов и макрофагов в ВАЬР и повышенная капиллярная проницаемость легких, вызванные острым воспалением, отображают очевидные признаки воспаления, перечисленные признаки полностью отсутствуют в начальной фазе легочной формы высотной болезни. Исследования ВАЬР показывают, в легочной форме высотной болезни отсутствие увеличения содержания лейкоцитов или провоспалительных модуляторов и отсутствие изменений в белке А сурфактанта и белке клеток Клара.
Наконец, совершенно различно диагностирование легочной формы высотной болезни и АЫ/АКОЗ: легочная форма высотной болезни проявляется у здоровых, неакклиматизированных горных туристов и развивается в течение от двух до пяти дней после прибытия на большую высоту. В данном случае давление в легочные артерии аномально повышено, но давление заклинивания легочных капилляров остается нормальным. В АЫ/АКОЗ, как упоминалось, всегда присутствует инициирующее клиническое заболевание (например, сепсис). Давление заклинивания легочных капилляров <18 мм рт.ст., вдобавок, обычно отсутствуют клинические показания повышенного давления в левом предсердии (отсутствует повышенное давление в легочной артерии); Ра02/РЮ2 соотношение <300 (АЫ) в стабильном состоянии.
Легочная форма высотной болезни и АЫ/АКОЗ являются, таким образом, двумя совершенно отличными друг от друга заболеваниями (Реасоск, Еиг. Ксхрй. ί. 8 (1995), 1819-1821).
Предпочтительно настоящее изобретение относится к пептиду, который состоит из 7-20, в особенности 7-17 смежных аминокислот и содержит в своем составе гексамер ТРЕСАЕ (ЗЕф ГО N0: 2), где названный пептид не обладает активностью по связыванию ΤΝΡ и циклизован, для терапии легочной формы высотной болезни.
Особенно предпочтительный вариант воплощения настоящего изобретения относится к циклизованному пептиду, состоящему из непрерывной последовательности аминокислот, отобранных из группы, содержащей в своем составе
(ЗЕС) ГО N0: 3),
РКОТРЕСАЕЕКРАУ (ЗЕС) ГО N0: 4),
СС^КЕΤРЕСΛЕΛКРΑΥС (ЗЕС) ГО N0: 1),
ССРКОТРЕСАЕЕКРАУС (ЗЕС) ГО N0: 5),
ССРКЕТРЕСАЕАКРАУС (ЗЕС) ГО N0: 6),
СС^КЕΤРЕСΛЕАКРΑΥС (ЗЕС) ГО N0: 7),
СС^КЕΤРЕСΛЕΛКРС (ЗЕС) ГО N0: 8),
- 3 030384
СОКЕТРЕСАЕАКРАУС (9ЕО ΙΌ N0: 9),
ССОРЕТРЕСАЕАКРАУС (9ЕО ΙΌ N0: 10),
К8РС0КЕТРЕСАЕАКРАУЕ (9ЕО ΙΌ N0: 11),
КСОКЕТРЕСАЕЛКРАУС (9ЕО ΙΌ N0: 12),
Орнитин - СОКЕТРЕСАЕАКРАУС (9ЕО ΙΌ N0: 13),
4-аминомасляная кислота - СОКЕТРЕСАЕАКРАУО (8Е0 ГО N0: 14), β-аланин - СРКЕТРЕСАЕАКРАУЕ (9ЕО ГО N0: 15)
и фрагменты не менее 7 аминокислот названных последовательностей, которые содержат гексамер ТРЕСАЕ, для применения или соответственно для изготовления лекарственного средства для терапии легочной формы высотной болезни.
Предпочтительно пептид содержит в своем составе аминокислотную последовательность ССОКЕТРЕСАЕАКРАУС (8Е0 ГО N0: 1) и циклизован через С остатки. Названный особенно предпочтительный пептид, таким образом, имеет следующую аминокислотную последовательность (8Е0 ГО N0:
Циклизация пептидов в соответствии с настоящим изобретением может быть достигнута в настоящем документе, например, либо с помощью прямой циклизации через дисульфидный мостик между двумя С остатками на N и С- концах, или еще с помощью соединения пептида через оба цистеина с веществом-носителем. В настоящем документе в пептидах в соответствии с настоящим изобретением остатки цистеина предпочтительно вводятся в начале и в конце молекулы. Другие функциональные группы, с помощью которых можно добиться циклизации пептида, также могут быть использованы, например, с помощью кислотной группы с аминогруппой или спиртовой группой, приводящей к замыканию амидного или сложноэфирного цикла или (в настоящем документе, например, аминокислоты аспарагиновая кислота и глутаминовая кислота могут быть циклизованы серином, треонином, тирозином, аспарагином, глутамином или лизином, предпочтительно внутримолекулярно). Циклизация пептида предпочтительно осуществляется с помощью дисульфидного мостика между С-остатками пептида (если присутствуют). Однако остатки цистеина или другие функциональные группы также могут быть предусмотрены в веществе-носителе, в частности на носителе-белке, который связывается с Ц-концом или соответственно С-концом пептидов в соответствии с настоящим изобретением и обеспечивает циклическую природу пептидов в соответствии с настоящим изобретением.
В этой связи, конечно, также любая ссылка на пептид "в соответствии с настоящим изобретением" в настоящем документе является ссылкой на циклизованный пептид.
Циклизация через остатки цистеина является особенно предпочтительной в соответствии с настоящим изобретением, в частности через остатки цистеина, предусмотренные в начале и в конце пептидов в соответствии с настоящим изобретением, или дополнительно введенные, и/или связанные через остатки цистеина с носителем, на N и С-концах пептида в соответствии с настоящим изобретением. Интрамолекулярная циклизация пептидов в соответствии с настоящим изобретением через предусмотренные или дополнительно введенные остатки цистеина на N и С-концах является особенно предпочтительной.
Также предпочтительными пептидами в соответствии с настоящим изобретением являются, таким образом, например, ССОКЕТРЕСАЕАКРАУС (9ЕО ГО N0: 6), ССОКЕТРЕСАЕАКРАУС (9ЕО ГО N0: 7), ССОКЕТРЕСАЕАКРС (9ЕО ГО N0: 8), СОКЕТРЕСАЕАКРАУС (9ЕО ГО N0: 9) или СС.ОКЕТРЕСАЕАКЕАУС (9ЕО ГО N0: 10).
Следующей группой предпочтительных пептидов в соответствии с настоящим изобретением являются циклические пептиды с последовательностью Х1-СОКЕТРЕСАЕАКРАУ-Х2, где Х1 обозначает от 1 до 4 аминокислот, в частности 1 или 3 аминокислоты, названные аминокислоты - природные или неприродные аминокислоты, в частности Х1 обозначает аминокислоту С, К, орнитин, 4-аминомасляную кислоту, β-аланин или последовательность К8Р. Х2 может быть природной или неприродной аминокислотой, где Х2 является, в частности, аминокислотой С, Ό, С или Е, и где Х1 является ^концевой аминокислотой и Х2 является С-концевой аминокислотой (СОКЕТРЕСАЕАКРАУ соответствует 8Е0 ГО N0: 18). Особенно предпочтительными примерами этой последовательности Х1-СрКЕТРЕСАЕАКРА¥-Х2 являются циклические пептиды К8РСрКЕТРЕСАЕАКРАУЕ, КСОКЕТРЕСАЕАКРАУС, орнитинСОКЕТРЕСАЕАКРАУС, 4-аминомасляная кислота-СОКЕТРЕСАЕАКРАУО, β-аланинСОКЕТРЕСАЕАКРАУЕ.
В циклическом пептиде К§РСрКЕТРЕСАЕАКРАУЕ аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аминокислоты глутаминовой кислотой (Е) и до ^концевой аминокислоты лизина (К), тогда как ^концевая аминокислота лизин (К) связана с С-концевой аминокислотой глутаминовой кислотой (Е) через амидную связь между азотом эпсилон аминогруппы боковой цепи лизина и гамма углеродом боковой группы глутаминовой кислоты.
В циклическом пептиде КСОКЕТРЕСАЕАКРАУ С аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аминокислоты глицина (С) и до ^концевой аминокислоты лизина (К), тогда как ^концевая аминокислота лизин (К) связана с С-концевой аминокислотой глицином (С) через амидную связь между азотом эпсилон аминогруппы боковой цепи лизина и углеродом карбоксильной группы глицина.
- 4 030384
В циклическом пептиде орнитин-СрРЕТРЕСАЕАКРХУУС аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аминокислоты глицина (С) и до Ν-концеврй аминокислоты орнитина (Огп), тогда как Ν-концевая аминокислота орнитин (Огп) связана с С-концевой аминокислотой глицином (С) через амидную связь между азотом дельта аминогруппы боковой цепи орнитина и углеродом карбоксильной группы глицина.
В циклическом пептиде 4-аминомасляная кислота-СрРЕТРЕСАЕАКРХУУО аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аспарагиновой кислоты (Ό) до Ν-концевой аминокислоты глицина (С), тогда как С-концевая аспарагиновая кислота (Ό) связана с Ν-концевой аминокислотой глицином через амидную связь между азотом аминогруппы Ν-концевого глицина и С1 углеродом карбоксильной группы 4-аминомасляной кислоты с одной стороны и через амидную связь между азотом аминогруппы 4-аминомасляной кислоты и углеродом карбоксильной группы боковой цепи С-концевой аспарагиновой кислоты с другой стороны.
В циклическом пептиде β-аланин - СРРЕТРЕСАЕАКРХУУЕ аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой глутаминовой кислоты (Е) до Ν-концевой аминокислоты глицина (С), тогда как Сконцевая глутаминовая кислота (Е) связана с Ν-концевой аминокислотой глицином через амидную связь между азотом аминогруппы Ν-концевого глицина и С1 углеродом карбоксильной группы β-аланина с одной стороны, через амидную связь между азотом аминогруппы β-аланина и углеродом карбоксильной группы боковой цепи С-концевой глутаминовой кислоты с другой стороны.
Циклизация пептидов в соответствии с настоящим изобретением может проводиться так как описано, но также и с помощью связывания пептида с веществами-носителями. Рассматриваемые для такой циклизации вещества-носители все являются признанными веществами, которые могут быть использованы фармацевтически, которые способны, например, образовывать ковалентную связь с 8Н-группами цистеинов (или с другими, естественным образом присутствующими или искусственно введенными химически-активными группами пептида), где признанные носители-белки, такие как гемоцианин лимфы улитки (КЕН), столбнячный токсин и т.д., являются особенно подходящими. Также смежные бифункциональные остатки могут быть введены в носитель (например, кислотная группа, смежная с амино- или спиртовой группой). В этом отношении важно, что"циклизация" включает в себя как интрамолекулярное замыкание цикла, так и связывание с носителем (из которого выступает связанный пептид (при помощи Ν- и С-концов пептида, связанных с носителем), где пептид, который циклизован данным образом, имеет циклическую пространственную структура и стабилизирован соответствующим образом.
Группа особенно предпочтительных пептидов в соответствии с настоящим изобретением, таким образом, - группа с 5>ЕР ГО ΝΟ: 1 и 5 до 15.
Пептиды в соответствии с настоящим изобретением обладают, в частности, активирующим эффектом на амилоридчувствительный эпителиальный натриевый канал (Е№С). Эта характеристика может быть исследована предпочтительно способом в соответствии с Еа!оп с! а1. (Реб. Ргос. 45 (1986), 2707) и НатЛ1 е! а1. (Рйидет Атсй. 391 (1981), 85-100), как представлено в разделе "Примеры".
Предпочтительно пептид в соответствии с настоящим изобретением предоставляется для терапии легочной формы высотной болезни в фармацевтической композиции, которая содержит в своем составе фармацевтически приемлемый носитель. Фармацевтическая композиция предпочтительно в настоящем документе изготовляется в форме, которая подходит для введения людям.
Словосочетание "фармацевтическая композиция" относится к любой композиции, которая содержит в своем составе пептид, как определено выше (естественным образом также подходящие (то есть не взаимно влияющие негативным образом один с другим), смеси пептидов в соответствии с настоящим изобретением с дальнейшими действующими веществами; однако предпочтительно предоставлять пептид в соответствии с настоящим изобретением как единственное действующее вещество, которое препятствует, улучшает или излечивает состояния, описанные в настоящем документе. В частности, словосочетание "фармацевтическая композиция" относится к композиции, которая содержит пептид, как описано выше, и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент (оба понятия можно использовать взаимозаменяемо). Подходящие примеры носителей или эксципиентов, которые известны специалисту в данной области - это вода, физиологический раствор, фосфат натрия, ацетат натрия, карбонат натрия, цитрат, глицин, глицилглицин, гистидин, лизин, аргинин, ТРИС и цитрат натрия или смеси названных веществ. Конечно, раствор Рингера, раствор декстрозы или растворы невосстанавливающих сахаров также могут быть использованы; соответственно маннитол, трегалоза, сахароза, сорбитол, фруктоза, мальтоза, лактоза или декстран, раствор Ханка, нелетучие масла, этилолеат, 5% декстроза в физиологическом растворе, вещества, которые улучшают изотонию и химическую стабильность, буферы и консерванты также подходят как в качестве таких носителей. Другие подходящие носители включают в себя любые носители, которые сами по себе не индуцируют выработку антител, которые вредны для индивидуума, принимающего композицию, такие как белки, полисахариды, полимолочные кислоты, полигликолиевые кислоты, полимерные аминокислоты и сополимеры аминокислот. В технологии приготовления фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением конечно нужно следовать соответствующим правилам (например, фармакопии (Европейской или США). В настоящем документе
- 5 030384
пептид, предоставляемый в композиции, в соответствии с настоящим изобретением, как упоминалось, может также быть циклизован прямым ковалентным связыванием с носителями.
Фармацевтическая композиция в соответствии с настоящим изобретением может вводиться (как лекарство) любым подходящим способом, известным специалисту в данной области техники, в частности предпочтительно вводить пептид для использования в соответствии с настоящим изобретением, или соответственно композицию в соответствии с настоящим изобретением - в легкое. Предпочтительным путем введения является ингаляция (с помощью аэрозолей), но также интравенозное введение, инсталляция, пероральное введение или комбинации таковых. В случае ингаляционного, парэнтерального или перорального введения лекарственное средство настоящего изобретения изготовляется в виде формы с унифицированной дозой, такой как раствор, суспензия или эмульсия, в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом, как определено выше. Дозирование и способ введения могут однако также, конечно, зависеть от частных случаев у соответствующих индивидов.
В настоящем документе соответственно необходимое эффективное количество вводится индивидууму, которому необходимо это введение. "Эффективное количество" в настоящем документе следует понимать как такое количество, которое действует достаточным образом для достижения предполагаемого терапевтического или профилактического эффекта, то есть, например, для предотвращения дальнейшего ухудшения заболевания или для его эффективной терапии. Обычно в расчет берется средний пациент, однако действительные эффективные количества компонентов композиции могут быть так сформулированы, что тип введения и возраст, вес, состояние пациента, протяженность и прогресс заболевания также учитываются (например, с помощью подходящего общепринятого фармакологического протокола).
Предпочтительно вследствие этого, что фармацевтически приемлемый носитель в композиции в соответствии с настоящим изобретением отбирается из воды (особенно предпочтительно воды для инъекций), поваренной соли, фосфата натрия, ацетата натрия, карбоната натрия, цитрата, глицина, глицилглицина, гистидина, лизина, аргинина, ТРИС, цитрата натрия, раствора Рингера, декстрозы, маннитола, трегалозы, сахарозы, сорбитола, фруктозы, мальтозы, лактозы или декстрана, раствора Ханка, нелетучих масел, этилолеата, веществ, которые улучшают изотонию и химическую стабильность, консервантов, фармацевтически приемлемых белков, полисахаридов, полимолочных кислот, полигликолиевых кислот, полимерных аминокислот и сополимеров аминокислот.
Лекарственное средство в соответствии с настоящим изобретением может вводиться, например, так, что пептид настоящего изобретения предоставляется в дозировке от 1 мкг/кг до 10 мг/кг, более предпочтительно от 10 мкг/кг до 5 мг/кг, наиболее предпочтительно от 0.1 до 2 мг/кг. Предпочтительно он предоставляется в болюсной дозе. Однако непрерывная аспирация или инфузия или введение с помощью повторяемых введений также могут использоваться.
Особенно предпочтительные композиции в соответствии с настоящим изобретением содержат пептид в количестве от 1 мкг до 10 г, предпочтительно от 10 мкг до 1 г, в частности от 1 до 100 мг.
Особенно предпочтительные композиции в жидком виде в соответствии с настоящим изобретением содержат пептид в количестве от 1 мкг до 10 г, предпочтительно от 10 мкг до 1 г, в частности от 1 до 100 мг, и представлены в объеме от 0,5 до 10 мл, в частности в объеме от 1 до 5 мл.
Композиция в соответствии с настоящим изобретением может также предпочтительно вводиться в сухой форме с помощью порошкового ингалятора. Примеры таких порошковых ингаляторов, которые могут быть использованы для настоящего изобретения, описаны в патентах США 4995385 и 4069819; уже доступными товарами являются δΡΙΝΗΑΤΕΚ®, КОТАНАЬЕК®, РЬО^СЛР§®, ΙΝΗΑΕΑΤΟΚ®, И18КНАЕЕК® и ΑΕΚΟΕ1ΖΕΚ®.
Композиция в соответствии с настоящим изобретением может также предпочтительно вводиться в виде аэрозоля с помощью жидкостного распылителя. Примерами таких жидкостных распылителей являются доступные препараты, такие как АегоиеЬ® и Рап®.
В соответствии с предпочтительным вариантом воплощения композиция в соответствии с настоящим изобретением отличается тем, что пептид представлен в виде лекарственной формы распыляемого порошка или в виде лекарственной формы распыляемой жидкости.
Настоящее изобретение подробно описывается с помощью последующих примеров и фигур графического материала, которыми однако оно, конечно, не ограничивается.
Изображено:
Фиг. 1. Определяли степень выраженности легочной формы высотной болезни у крыс через 4 ч после интратрахеального введения физиологического раствора или соответственно пептида 8ЕЦ ΙΌ ΝΟ: 1. Контроль: контрольная интенсивность в условиях нормальных значений давления кислорода и атмосферного давления. РВ8: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения физиологического раствора. Пептид 8ЕО ГО ΝΟ: 1 100 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 100 мкг пептида 8ЕО ГО ΝΟ: 1. Пептид 8ЕО ГО ΝΟ: 1 300 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 300 мкг пептида
- 6 030384
8ЕО ΙΌ N0: 1. Пептид 8ЕЦ ΙΌ N0: 1 600 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 600 мкг пептида 8ЕЦ ГО N0: 1.
Фиг. 2. Определяли содержание белка в легочной жидкости крыс через 4 ч после интратрахеального введения физиологического раствора или соответственно пептида 8Е0 ГО N0: 1. Контроль: контрольные крысы в условиях нормальных значений давления кислорода и атмосферного давления. РВ8: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения физиологического раствора. Пептид 8Е0 ГО N0: 1 100 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 100 мкг пептида 8Е0 ГО N0: 1. Пептид 8Е0 ГО N0: 1 300 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 300 мкг пептида 8Е0 ГО N0: 1. Пептид 8Е0 ГО N0: 1 600 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 600 мкг пептида 8Е0 ГО N0: 1.
Фиг. 3. Г истологическое проявление ткани легких крысы через 4 ч после интратрахеального введения физиологического раствора или соответственно пептида 8Е0 ГО N0: 1. Контроль: контрольные крысы в условиях нормальных значений давления кислорода и атмосферного давления. РВ8: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения физиологического раствора. Пептид 8Е0 ГО N0: 1 100 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 100 мкг пептида 8Е0 ГО N0: 1. Пептид 8Е0 ГО N0: 1 300 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 300 мкг пептида 8Е0 ГО N0: 1. Пептид 8Е0 ГО N0: 1 600 мкг: крысы в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления и интратрахеального введения 600 мкг пептида 8Е0 ГО N0: 1.
Фиг. 4. Средние значения направленных внутрь №Б токов в клетках А549, в тесте локальной фиксации потенциала на целой клетке во время контрольной фазы при фиксированных -100 мВ, после добавления пептида 8Е0 ГО N0: 1 ("АР301") (240 нМ) и после добавления амилорида (100 мМ) к омывающей жидкости. Значения являются средними значениями ±8Е.
Фиг. 5. Влияние синтетического пептида ОВЕТРЕСЛЕЛКРХУУ (8Е0 ГО N0: 3, описанный на известном уровне техники, как подходящий для терапии отечностей, являющийся, однако, в отличие от формы в соответствии с настоящим изобретением не циклизованным в настоящем эксперименте) на №Е ток в клетке А549, фиксированной в режиме целой клетки. Типичный представитель исходной регистрации клетки, фиксированной при исходном потенциале -100 мВ, во время контрольной фазы и после добавления пептида ОВЕТРЕСЛЕЛКРХУУ (300 нМ) в омывающую жидкость.
Фиг. 6. Влияние синтетического пептида ТКР1ЕЬОРНЕРКАУ (8Е0 ГО N0: 16; описанный на известном уровне техники, как подходящий для терапии отечностей, являющийся, однако, в отличие от пептидов в соответствии с настоящим изобретением не циклизованным и не содержащий коровую последовательность ТРЕОАЕ) на №' ток в клетке А549, фиксированной в режиме целой клетки. Типичный представитель исходной регистрации клетки, фиксированной при исходном потенциале -100 мВ, во время контрольной фазы и после добавления пептид ТКРГЕЬОРПЕРКАУ (300 нМ) в омывающую жидкость.
Фиг. 7. Влияние синтетического циклического пептида СОТКР1ЕЬОРПЕРКАУС (8Е0 ГО N0: 17; описанный на известном уровне техники, как подходящий для терапии отечностей, однако, в отличие от пептидов в соответствии с настоящим изобретением, не содержащим коровую последовательность ТРЕОАЕ) на №Е ток в клетке А549, фиксированной в режиме целой клетки. Типичный представитель исходной регистрации клетки, фиксированной при исходном потенциале -100 мВ, во время контрольной фазы и после добавления циклический пептид СОТКР1ЕЬОРОЕРКАУС (300 нМ) в омывающую жидкость.
Фиг. 8: Влияние циклических пептидов 8Е0 ГО N0: 1 и от 11 до 15 как функция концентрации. На оси X отложена концентрация в логарифмической шкале в нМ; на оси Υ отложен ток ионов натрия (в %).
Пример 1. Применение пептида с 8Е0 N0: 1 в соответствии с настоящим изобретением для терапии легочной формы высотной болезни.
С помощью настоящего примера в экспериментальной модели высотной болезни на крысах показано, что цель в соответствии с настоящим изобретением была достигнута синтетическим пептидом в соответствии с настоящим изобретением (8Е0 ГО N0: 1), вводимым крысам, страдающим от легочной формы высотной болезни. Физические нагрузки в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления, как те, которые имеют место на больших высотах, являются 2 основными факторами, приводящими к развитию легочной формы высотной болезни. Следовательно, выбранная модель на крысах, в которой крысы выполняли физическую активность в условиях пониженного давления кислорода и пониженного атмосферного давления, симулирует физически напряженный подъем на большую высоту. Это происходит без проведения предшествующей акклиматизации. Это соответствует сценарию, каковой обнаруживается в случае альпинистов, который страдают от легочной формы высотной болезни на больших высотах. В модели, которая была использована, у крыс развивались типичные для легочной формы высотной болезни симптомы, как можно увидеть в "степени выраженности легочной формы высотной болезни", повышенной концентрации белка в легочной жидкости и гистологическом
- 7 030384
проявлении ткани легкого. Далее следует отметить, что повреждение легкого в этой модели не является вызванным введением эндотоксинов, микробов или других агентов, повреждающих легкое. Не возникало обостренного воспаления легкого. Также неспецифическая линия крыс была использована для настоящего эксперимента. Таким образом, настоящая модель на крысах хорошо подходит для изучения лекарственного средства для терапии легочной формы высотной болезни.
Способ.
Лабораторные крысы (Зргадие ИаМеу крысы) выполняли физическую активность с помощью внешней стимуляции в течение 48 ч в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления. В настоящем эксперименте атмосферное давление было понижено до значений менее 430 торр, таким образом, симулировалась высота более 4500 м. Предварительная акклиматизация крыс к высоте более 4500 м не проводилась. На протяжении этого времени крысы могли предпринимать 15-20минутные паузы каждые 4 ч для того, чтобы принять внутрь воду и пищу. После 48 ч физической активности на симулированной высоте более 4500 м крыс обрабатывали интратрахеально 300 мкл/животное пептида ЗЕО ΙΌ N0: 1 (100, 300 и 600 мкг) или 300 мкл физиологического раствора. Затем крысы проводили еще 4 ч в условиях пониженных значений давления кислорода и атмосферного давления на симулированной высоте более 4500 м. Далее удаляли легкие и определяли степень выраженности легочной формы высотной болезни (фиг. 1), содержание белка в легочной жидкости (фиг. 2) и гистологическое проявление ткани легкого (фиг. 3).
Результат.
Исследование показало, что интратрахеальное введение пептида ЗЕО ГО N0: 1 лабораторным крысам, которые были подвержены условиям пониженного атмосферного давления и пониженной концентрации кислорода, привело к понижению степени выраженности легочной формы высотной болезни (фиг. 1). Настоящий результат проявлялся при концентрации пептида ЗЕО ГО N0: 1, равной 100 мкг/лабораторная крыса и 600 мкг/лабораторная крыса, и в особенности при концентрации, равной 300 мкг/лабораторная крыса.
Исследование показало, далее, что интратрахеальное введение пептида ЗЕО ГО N0: 1 лабораторным крысам, которые были подвержены условиям пониженного атмосферное давление и пониженной концентрации кислорода, привело к понижению концентрации белка в легочной жидкости (фиг. 2). Настоящий результат проявлялся при концентрации пептида ЗЕО ГО N0: 1, равной 100 мкг/лабораторная крыса и 600 мкг/лабораторная крыса, и в особенности при концентрации, равной 300 мкг/лабораторная крыса.
Гистологическое обследование показало, что крысы, обработанные физиологическим раствором, имели отекшую ткань легких с эритроцитами, тогда как ткань легких у крыс после введения пептида ЗЕО ГО N0: 1 была сравнимой со здоровой тканью легких контрольных крыс, которые не были подвержены условиям пониженного атмосферного давления и пониженной концентрации кислорода.
Пример 2. Ех νίνο обследование провоспалительных характеристик пептида в соответствии с настоящим изобретением с ЗЕО ГО N0: 1 в цельной человеческой крови.
Фармакологическое ех νίνο исследование безопасности было проведено в отношении пептида ЗЕО ГО N0: 1 в соответствии с настоящим изобретением в цельной человеческой крови, для того чтобы определить, приводит ли пептид ЗЕО ГО N0: 1 к выбросу провоспалительного маркера интерлейкина-6 (ГО-6) в свежей цельной крови (то есть проявляет или нет пептид ЗЕО ГО N0: 1 ТИТ-специфическую воспалительную активность (то есть способность связываться с рецептором ТМР)). В настоящем исследовании была использована свежая цельная кровь; это общепризнанная модель для прогнозирования и исследования воспалительной реакции ίη νίνο.
Краткое изложение методологии.
Целью настоящего исследования было определение провоспалительной сигнальной функциональной активности пептида ЗЕО ГО N0: 1. В настоящем эксперименте были использованы культуры цельной крови, и секреция интерлейкина-6 (ГО-6), очень чувствительного маркера провоспалительной стимуляции, была количественно определена с помощью ЕЫЗА.
Система для проведения испытаний: 25 мл гепаринизированной крови, свежезабранной у 5 испытаний здоровых пациентов (НЗ), были использованы в исследованиях.
Объект исследования.
Обозначение: пептид ЗЕО ГО N0: 1 (дозировка от 1 нг/мл до 10 мкг/мл; единичное введение в виде раствора).
Описание: белый порошок, чистота 96%.
Культуры цельной крови.
Культуры цельной крови (ТВ) были приготовлены раскапыванием 1 мл ТВ в лунки 24-луночных планшетов. В каждый эксперимент были включены нестимулированные и стимулированные контрольные культуры.
При возможности исследованные вещества и стимуляторы всегда добавляли в каждую лунку в одном эксперименте в одинаковом объеме, который составлял не более 10% суммарного объема в лунке. Нестимулированные контроли делали с помощью РВЗ. Согласование объемов и разведений для различ- 8 030384
ных обработок также проводили с помощью РВ8.
Содержимое каждой лунки перемешивали, и планшеты инкубировали при 37°С и 5% СО2 в течение 24 ч. После инкубации содержимое каждой лунки переносили в чистые 1,5 мл микропробирки и центрифугировали при от 8000 до 9000 д в течение 15 мин. Супернатанты каждого образца разделяли на две индивидуальные 1,5 мл реакционные емкости и хранили при -20°С до использования.
Исследование интерлейкина-6.
Интерлейкин-6 количественно определяли с помощью специфической ЕЫЗЛ (человеческий 1Ь-6 ЕЫ8А-8е,, ВИ Вюзшепсез, Са£ Νο. 555220) с использованием античеловеческого-1Х-6 антитела в качестве антитела подложки, биотинилированное античеловеческое-1Е-6 детектирующее антитело, конъюгат авидина с пероксидазой хрена в качестве ферментативного реагента и рекомбинантный РБ-6 в качестве стандарта. Измерение оптического поглощения при 450 нМ проводили с помощью Раскагй Еизюп устройства для считывания.
Анализ данных.
Результаты каждого планшета хранили и оценивали с помощью программного обеспечения для анализа интегрированных данных.
Краткое изложение результатов исследования.
Целью настоящего исследования было определение провоспалительной сигнальной способности пептида 8Е^ ΙΌ ΝΟ: 1. Были использованы культуры цельной крови, и секреция 1Б-6, очень чувствительного маркера воспалительной простимуляции, была количественно определена с помощью ЕБ18А.
Образцы цельной крови пяти здоровых пациентов либо оставляли нестимулированными (негативный контроль), либо стимулировали с помощью высоких и низких доз БР8 (положительные контроли) или инкубировали с пептидом в девяти полулогарифмических разведениях от 10 мкг/мл до 1 нг/мл. Полученные результаты представлены в следующей таблице:
Высвобождение итерлейкина-6 из свежей цельной крови с добавлением пептида 8Е^ ΙΌ ΝΟ: 1 и БР8.
Пептид 8Е^ ΙΌ ΝΟ: 1. Положительный контроль (БР8).
Концентрация Концентрация ο£ ΙΙ.-6 (пг/мл, п=5)
0 (негативный
| контроль) | менее чем 0.5 | менее чем 0.5 |
| 10 мг/мл | менее чем 0.5 | 195.640 |
| 1 мг/мл | менее чем 0.5 | 108.370 |
| 3 нг/мл | менее чем 0.5 | 34.867 |
| 1 нг/мл | менее чем 0.5 | не определяли |
Полученные результаты очевидным образом показывают, что пептид 8Е^ ΙΌ ΝΟ: 1 не индуцировал никакой детектируемой секреции 1Б-6 в любой из проверенных концентраций. Положительные контроли (БР8) приводили к интенсивной индукции секреции 1Б-6.
Обсуждение.
Были проведены эксперименты для того, чтобы определить, вызывает ли пептид 8Е^ ΙΌ ΝΟ: 1 индукцию провоспалительного каскада. Считываемым параметром была индуцированная секреция ΙΙ.-6 в культурах цельной крови пяти здоровых доноров. Полученные результаты очевидным образом показали, что пептид 8Е^ ΙΌ ΝΟ: 1 не индуцировал никакого детектируемого уровня ΙΕ-6 в культурах доноров. Таким образом, было показано, что пептид 8Е^ ΙΌ ΝΟ: 1 не индуцировал провоспалительную реакцию в выбранной ех νΐνο модели и, следовательно, не имеет способности связываться с рецептором ΤΝΕ. Настоящий тест может быть проведен для любых вариантов пептидов в соответствии с настоящим изобретением, для того чтобы определить степень отсутствия способности связываться с рецептором ΤΝΕ.
Пример 3. Количественная оценка биоактивности пептида в соответствии с настоящим изобретением, по сравнению с нециклизованной (и, следовательно, не в соответствии с настоящим изобретением) формой пептида и другими синтетическими пептидами, которые предлагались на предыдущем уровне техники для терапии отечностей, в тесте локальной фиксация потенциала с использованием клеток А540.
Краткое изложение.
В настоящем примере биологическая активность пептида в соответствии с настоящим изобретением была количественно оценена по сравнению с тремя другими синтетическими пептидами в отношении способности к индуцированию натриевого тока. Синтетические сравнительные пептиды были также предложены в заявке на Европейский патент ЕР 2009023 А1 как пептиды для терапии отечности. В отношении названных пептидов в заявке ЕР 2009023 А1 предполагалось, что они будут способны ингибировать или уменьшить накопление излишней жидкости в тканях. В заявке 2009023 А1 это свойство было исследовано с помощью ТЕЕК теста; в настоящем примере эта биологическая активность исследована с помощью теста локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549.
Принцип настоящего измерения (тест локальной фиксации потенциала на целой клетке) отражает водный баланс в легком человека значительно лучше и является, следовательно, общепризнанной системой для проведения испытаний в отношении рассматриваемого вопроса. Водный баланс в легком здоро- 9 030384
вого взрослого человека зависит от механизмов транспорта ионов, которые проходят через легочный эпителий с участием №£ транспортера в клиренсе альвеолярной жидкости, которое было задокументировано в некотором количестве исследований. В частности, в настоящем исследовании амилоридчувствительный эпителиальный натриевый канал (ЕШС) типа II клеток альвеол был идентифицирован как основной регулятор клиренса альвеолярной жидкости.
Для того чтобы количественно оценить активность амилоридчувствительного эпителиального натриевого канала (ЕШС) и определить его активацию и биологическими, и химическими веществами, прием локальной фиксации потенциала на целой клетке был показан как предпочтительная экспериментальная методология для измерения движений ионов натрия через апикальную мембрану клеток альвеол с целью предсказания клиренса альвеолярной жидкости.
Соответствующим образом в настоящем примере биологическая активность пептида в соответствии с настоящим изобретением и трех синтетических пептидов, СКЕТРЕСЛЕЛКРХУУ (8ЕЦ ГО N0: 3, описанный на известном уровне техники, как подходящий для терапии отечностей, являющийся, однако, в отличие от формы в соответствии с настоящим изобретением, нециклизованным в настоящем эксперименте), ΤΚΡΙΕΕΟΡΌΕΡΚΑν (§ЕЦ ГО N0: 16; описанный на известном уровне техники, как подходящий для терапии отечностей, являющийся, однако, в отличие от пептидов в соответствии с настоящим изобретением, нециклизованным и не содержащим коровую последовательность ТРЕСАЕ) и ССТКΡΙΕΕΟΡΟΕΡΚΑνί'.' (§ЕЦ ГО N0: 17; описанный на известном уровне техники, как подходящий для терапии отечностей, однако, в отличие от пептидов в соответствии с настоящим изобретением, не содержащим коровую последовательность ΤΡЕСΑЕ) была определена с помощью измерений локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549 -непрерывной клеточной линии человеческих альвеолярных клеток типа II.
В настоящем исследовании было показано, что никакой из пептидов ^КЕΤΡЕСΑЕΑI<Ρ\VΥ. ΤΚΡΕ^ΡΌΕΡΚΑν и ССΤΚΡIЕ^СΡ^ЕΡΚΑVС, хоть и родственных, на основании их первичной последовательности, пептидам, предлагаемым в соответствии с настоящим изобретением, не имел никаких эффектов на натриевый ток и, следовательно, также не имел активирующего эффекта на амилоридчувствительный эпителиальный натриевый канал (Е№С), тогда как пептид в соответствии с настоящим изобретением индуцировал увеличение натриевого тока выше соответствующих контрольных значений, когда его добавляли к омывающей жидкости в тесте локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549. Тогда как три сравнительных пептида показали отсутствие эффектов на амилоридчувствительный эпителиальный натриевый канал (Е№С) по сравнению с положительным контролем (пептид в соответствии с настоящим изобретением с §ЕЦ ГО N0: 1; СС^КЕΤΡЕСΑЕΑΚΡVΥС) в тесте локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549, клиренс альвеолярной жидкости является, тем не менее, последствием этих передвижений ионов натрия в альвеолярных эпителиальных клетках, то можно сделать вывод, что эти пептиды в соответствии с предыдущим уровнем техники - в отличие от пептида в соответствии с настоящим изобретением - не способны уменьшать легочные отечности, несмотря на то что соответственно особенно предпочтительные варианты как линейных, так и циклических пептидов, которые описаны в ΕΡ 2009023 А1, были исследованы в настоящем примере (ΟΚΕΊΤΚ(.,ΑΚΑΚΡ\\Ύ. ΤΚΡΕ^ΡΌΕΡΚΑν и ^ΤΚΡΕ^ΡΌΕΡΚΑν^ которые указаны как пептиды §ЕЦ ГО N0: 18, 76 и §ЕЦ ГО N0: 2 в ΕΡ 2009023 А1). Вышеописанное тем более замечательно, что активность в борьбе с отечностями приписывалась сравнительным пептидам в ΕΡ 2009023 Α1.
Это служит свидетельством того, что, с одной стороны, отличительные признаки, предложенные в соответствии с настоящим изобретением, в частности циклизация и коровая последовательность ΤΡЕСΑЕ, являются необходимыми отличительными признаками настоящего изобретения. С другой стороны, авторы настоящего исследования также подтвердили научно-подкрепленные сомнения относительно предположения, что названные пептиды сами по себе подходят для терапии отечности, как предлагалось на предыдущем уровне техники. Настоящий пример, который проводился с использованием системы для проведения испытаний - теста локальной фиксации потенциала на целой клетке, который является общепризнанным в сообществе научных специалистов, показал, что, в частности, система для проведения испытаний (ТЕЕК тест), использованная в ΕΡ 2009023 Α1 доказанным образом, не подходит для определения этой активности.
Введение.
Водный баланс в легком здорового взрослого человека зависит от механизмов транспорта ионов в легочном эпителии, при этом участие №Е транспортеров в клиренсе альвеолярной жидкости хорошо известно. В частности, в данном случае амилоридчувствительный эпителиальный №£ канал (Е№С) отображает лимитирующий этап для приема №Е со всего альвеолярного эпителия и играет ключевую роль в реадсорбции жидкости в легком. Так как повышенный отток альвеолярной жидкости напрямую ведет к лучшему прогнозу и восстановлению в случае легочной отечности, улучшение активности ЕШС представляет собой подающий надежды терапевтический вариант для терапии легочной отечности.
Европейская заявка на патент ЕΡ 2009023 Α1 предлагает в названных целях пептиды, такие как ^КЕΤΡЕСΑЕΑΚΡVΥ, ΤΚΡIЕ^СΡ^ЕΡΚΑV и ССΤΚΡIЕ^СΡ^ЕΡΚΑVС (описаны в том документе как пептиды §ЕЦ ГО N0: 18, §ЕЦ ГО N0: 76 и §ЕЦ ГО N0: 2) в качестве новых молекул, которые ингибиру- 10 030384
ют или уменьшают накопление излишней жидкости в тканях.
В соответствии с заявкой на патент ЕР 2009023 А1, так называемый тест трансэпителиального сопротивления электрическому току (ТЕЕК) был использован для скрининга кандидатов в действующие против легочной отечности вещества. "ТЕЕК тест" не является доказанным тестом для предсказания выведения жидкостей в легочных отечностях (этот тест не может быть обнаружен в относящейся к делу научной литературе и также не относится к делу, учитывая использованные клетки (Клетки Са1и-3) в модели газообмена в легком человека). В настоящем примере в дополнение к пептиду в соответствии с настоящим изобретением пептиды ОРЕТРЕХЗАЕАКРХУУ. ТКР1ЕЬОРБЕРКАУ и (циклизованный) СОТКРГЕЬОРБЕРКАУС были исследованы с помощью теста локальной фиксации потенциала на целой клетке, доказанной методологии для измерения движения ионов через клеточные мембраны и в особенности для измерения транспорта натрия через клеточную мембрану альвеолярных эпителиальных клеток (Еа!оп е! а1., Реб. Ргос. 45 (1986), 2707; НатШ е! а1., Рйидеге Атсй. 391 (1981) 85-100). В настоящем эксперименте должно было быть изучено могут ли пептиды активировать амилоридчувствительный эпителиальный натриевый ток в клетках легких или нет.
В "ТЕЕК тесте", как был описан в ЕР 2009023 А1, использовали слои клеток Са1и-3. Однако клетки Са1и-3 являются бронхиальными клетками. Бронхиальные клетки составляют приблизительно 1% поверхности легкого человека, участвующей в газообмене, и, таким образом, не представляют собой подходящую модель альвеолярных эпителиальных клеток, которые составляют приблизительно 99% поверхности легкого человека, участвущей в газообмене. В настоящем примере линия человеческих альвеолярных эпителиальных клеток А549 была использована, потому что эта клеточная линия устанавливает общепринятый экспериментальный стандарт и рассматривается в литературе как предпочтительная модель альвеолярных эпителиальных клеток (Ба/гак е! а1., Ат. 1. РЬу8ю1. Ьиид Се11. то1. РЬу8ю1. 278 (2000), 848-857).
Методика эксперимента.
Исследованные пептиды.
Пептид "АР301" (пептид в соответствии с настоящим изобретением):
Цикло-Н-Су8-О1у-О1и-Агд-О1и-ТЬг-Рго-О1и-О1у-А1а-О1и-А1а-Еу8-Рго-Тгр-Туг-Су8-ОН (8ЕО ГО N0:
1).
Синтетический пептид ОКЕТРЕСАЕАКРХУУ:
Н-О1п-Агд-О1и-ТЬг-Рго-О1и-О1у-А1а-О1и-А1а-Еу8-Рго-Тгр-Туг-ОН
(БЕО ГО N0: 3, описанный на известном уровне техники как подходящий для терапии отечностей, являющийся, однако, в отличие от формы в соответствии с настоящим изобретением, нециклизованным в настоящем эксперименте).
Синтетический пептид ТКРШЬОРБЕРКАУ:
Н-ТЬг-Еу8-Рго-11е-О1и-Ееи-О1у-Рго-А8р-О1и-Рго-Ьу8-А1а-Уа1-ОН
(БЕО ГО N0: 16; описанный на известном уровне техники как подходящий для терапии отечностей, являющийся, однако, в отличие от пептиды в соответствии с настоящим изобретением нециклизованным и не содержащим коровую последовательность ТРЕОАЕ).
Синтетический пептид СОТКР1ЕЕОРБЕРКАУС:
Цикло-Н-Су8-О1у-ТЬг-Еу8-Рго-11е-О1и-Ееи-О1у-Рго-А8р-О1и-Рго-Еу8-А1а-Уа1-Су8-ОН
(5Е0 ГО NО: 17; описанный на известном уровне техники как подходящий для терапии отечностей, однако, в отличие от пептидов в соответствии с настоящим изобретением, не содержащим коровую последовательность ТРЕОАЕ).
Синтез пептидов.
Все пептиды, использованные в настоящем примере, были изготовлены с помощью твердофазного пептидного синтеза в соответствии со стратегией защиты флуоренилметилоксикарбонил/т-бутилом на 2хлортритилхлоридной смоле. Диизопропилкарбодиимид и Ν-гидросксибензотриазол были использованы в качестве связующих реагентов. Все этапы связывания проводили в Ν-Ν-диметилформамиде. Защищенные аминокислоты связывали с пептидной цепью по порядку, начиная с С-концевой аминокислоты. Снятие защиты флуоренилметилоксикарбонила проводили в 20%-ном пиперидине в Ν-Νдиметилформамиде. Отщепление завершенных частично защищенных пептидов от смолы проводили в 1:1 смеси уксусной кислоты и дихлорометана.
В случае пептида 8Е0 ГО NО: 1 после отщепления от смолы снятие защиты боковой цепи проводили в 95%-ной трифторуксусной кислоте, 5% воде, за которым следовала циклизация линейного сырьевого пептида окислением концевых остатков цистеина с помощью подачи кислорода (О2 при 1.2 бар) при рН 8,5 в течение приблизительно 100 ч.
Продукт сырьевого пептида очищали с помощью обращенно-фазовой жидкостной хроматографии при среднем давлении (КР-МРЬС) на колонке с КР-С18 силикагелем градиентом 5-40% ацетонитрила. В конце противоион трифлуороацетата заменяли на ацетат на колонке с Ье^аШ тР64 (ацетатная форма). После заключительного этапа промывки в воде очищенный пептид лиофилизировали в виде ацетатной соли и получали порошок от белого до кремового цвета. В случае пептида 2 интрамолекулярный дисульфидный мостик вызвал трудности в отделении от Ее\\аШ колонки, таким образом, этот циклический
- 11 030384
пептид был использован в трифлуороацетатной форме вместо ацетатной формы.
Определение параметров пептидов.
Молекулярные массы пептидов подтверждали с помощью масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением или ΜΆΣΌΙ-ΤΟΡ-Μδ; чистоту определяли с помощью аналитической высокоэффективной жидкостной хроматографии.
Пептиды хранили при -20°С.
Протокол локальной фиксации потенциала.
Тест локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549 проводили так, как описано в На/спи е! а1. (1. Меб. СЬет. 53 (2010), 8021-8029). Растворы пептидов добавляли к внешней (омывающей) жидкости в тесте локальной фиксации потенциала, так, что конечная концентрация в 300 нМ была достигнута. В случаях, когда наблюдали повышение тока после добавления данного пептида, добавляли раствор амилорида (до конечной концентрации 100 мМ) к омывающей жидкости, после того как ток достигал стационарного состояния, для того чтобы различить амилоридчувствительный ток от амилориднечувствительного тока. Амилоридчувствительный ток далее рассчитывали вычитанием значения тока после добавления амилорида (амилориднечувствительный ток) из значения тока в стационарном состоянии до добавления амилорида. Для каждого пептида проводили три эксперимента в различных А549 клетках (п=3).
Результаты.
Пептид в соответствии с настоящим изобретением, δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 1 ("АР301"), положительный контрольный пептид, приводил при добавлении к омывающей жидкости в тест локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549 в конечной концентрации 240 нМ к повышению активного Να' тока от контрольного значения в 86±5 пА (до добавления АР301) до максимального значения в 1073±15 пА (после добавления АР301). Последующее добавление амилорида вызывало возвращение тока до 36±5 пА. Этот факт говорил о том, что ток, который был повышен с помощью АР301, является амилоридчувствительным Να' током (фиг. 4).
Когда три синтетических сравнительных пептида: ОРЕТРЕСАЕАКРАУ. ΤΚΡΙΕΤΟΡΌΕΡΚΑν и СОТКРГЕЬОРПЕРКАУС были добавлены в отдельных экспериментах по локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549 к омывающей жидкости в конечной концентрации в 300 нМ, не удалось обнаружить никакого эффекта на ток: значения остались в пределах контрольного значения (фиг. 5-7).
Обсуждение результатов.
В настоящем примере была продемонстрирована способность пептида в соответствии с настоящим изобретением ("АР301") в качестве положительного контроля увеличивать амилоридчувствительный Να' ток в тесте локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549. Добавление АР301 к омывающей жидкости приводило к повышению тока, изменяясь от контрольного значения в 86±5 пА (до добавления АР301) до максимального значения в 1073±15 пА (после добавления АР301). Последующее добавление амилорида вызывало возвращение тока до 36 ±5пА. Этот эксперимент показал, что АР301 увеличивал амилоридчувствительный Να' ток с 50 до 1037 пА и, следовательно, подтвердил активирующий эффект АР301 на амилоридчувствительный эпителиальный Να' канал (Е№С) (см. также Τζοΐζοδ е! α1., Ри1т. ΡΙιαηηααοΕ ТЬег. 26 (2013), 356-363), который размещается в легком апикально в альвеолярных эпителиальных клетках. Активация ΕΝαί'.' приводит к повышению принятия Να+ из альвеолярной жидкости в эпителиальном слое, так, что увеличивается осмотическая движущая сила, что лежит в основе клиренса альвеолярной жидкости и приводит к току воды из альвеол в интерстициальный слой под эпителием. Механизм, который создает основу для наблюдаемого эффекта клиренса альвеолярной жидкости с помощью АР301, вводимого прямо в легкое, может быть связан с полученным результатом.
Каждый из трех других синтетических сравнительных пептидов, ΟΡΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡνΥ, ΤΚΡΙΕΤΟΡΌΕΡΚΑν и СΟΤΚΡIΕ^ΟΡ^ΕΡΚΑVС, был таким же образом исследован в отношении способности к влиянию на Να' ток при добавлении к омывающей жидкости в тесте локальной фиксации потенциала на целой клетке с использованием клеток А549. Однако в отличие от АР301, который демонстрировал моментальный интенсифицирующий эффект, никакие из трех других пептидов не оказывали влияния на ток в этих клетках, даже в немного большей использованной концентрации, чем пептид АР301 в соответствии с настоящим изобретением (300 нМ для трех пептидов, 240 нМ для АР301).
Пример 4. Активация амилоридчувствительного натриевого канала (Б№С) с помощью пептидов в соответствии с настоящим изобретением.
Пептиды δΕΟ ГО №δ: 1 и от 11 до 15 в соответствии с настоящим изобретением были подробно описаны в исследованиях с использованием клеток. Эти циклические пептиды δΕΟ ГО №δ: 1 и от 11 до 15 активируют амилоридчувствительный натриевый канал (ΕΝαί'.') в клетках легких. Таким образом, прояснена эквивалентность этих пептидов с ранее исследованным АР301 в эффекте в соответствии с настоящим изобретением.
Последовательности пептидов.
δΕΟ ΙΌ ΝΟ: 1: СΟ^ΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡVΥС - циклизация пептида была достигнута с помощью окис- 12 030384
ления концевых цистеинов (С) с образованием серного мостика.
8ЕЦ ГО N0: 11: 1<8РС0РЕТРЕСАЕАКР\УУЕ - в циклическом пептиде 8ЕЦ ΙΌ N0: 11 аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аминокислоты глутаминовой кислоты (Е) до Ν-концевой аминокислоты лизина (К), тогда как Ν-концевая аминокислота лизин (К) связана с С-концевой аминокислотой глутаминовой кислотой (Е) амидной связью между азотом эпсилон аминогруппы боковой цепи лизина и гамма углеродом боковой группы глутаминовой кислоты.
8ЕЦ ГО N0: 12: КСЦРЕТРЕСАЕАКР^УС - в циклическом пептиде 8ЕЦ ΙΌ N0: 12 аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аминокислоты глицина (С) до ^концевой аминокислоты лизина (К), тогда как ^концевая аминокислота лизин (К) связана с С-концевой аминокислотой глицином (С) амидной связью между азотом эпсилон аминогруппы боковой цепи лизина и углеродом карбоксильной группы глицина.
8ЕЦ ГО N0: 13: орнитин-СЦРЕТРЕСАЕАКР^УС - в циклическом пептиде 8ЕЦ ΙΌ N0: 13 аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аминокислоты глицина (С) до ^концевой аминокислоты орнитина (0т), тогда как ^концевая аминокислота орнитин (0т) связана с С-концевой аминокислотой глицина (С) амидной связью между азотом дельта аминогруппы боковой цепи орнитина и углеродом карбоксильной группы глицина.
8ЕЦ ГО N0: 14: 4-аминомасляная кислота-СЦКЕТРЕСАЕАКР^УО - в циклическом пептиде 8ЕЦ ГО N0: 14 аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой аспарагиновой кислоты (Ό) до N концевой аминокислоты глицина (С), тогда как С-концевая аспарагиновая кислота (Ό) связана с N концевой аминокислотой глициной амидной связью между азотом аминогруппы ^концевого глицина и С1 углерода карбоксильной группы 4-аминомасляной кислоты с одной стороны и амидной связью между азотом аминогруппы 4-аминомасляной кислоты и углеродом карбоксильной группы боковой цепи Сконцевой аспарагиновой кислоты с другой стороны.
8ЕЦ ГО N0: 15: β-аланин-СОРЕТРЕСАЕАКР^УЕ - в циклическом пептиде 8ЕЦ ΙΌ N0: 15 аминокислоты соединены пептидной связью от С-концевой глутаминовой кислоты (Е) до ^концевой аминокислоты глицина (С), тогда как С-концевая глутаминовая кислота (Е) связана с ^концевой аминокислотой глицином амидной связью между азотом аминогруппы ^концевого глицина и С1 углеродом карбоксильной группы β-аланина с одной стороны и амидной связью между азотом аминогруппы β-аланина и углеродом карбоксильной группы боковой цепи С-концевой глутаминовой кислоты с другой стороны.
8ЕЦ ГО N0: 19: ССЦРЕАРАСАААКР^УС (не в соответствии с настоящим изобретением) - циклизация пептида была достигнута с помощью окисления концевых цистеинов (С) с образованием серного мостика.
Синтез пептидов.
Циклические пептиды 8ЕЦ ГО №8: 1, от 11 до 15 и 19 изготовляли с помощью Ртос твердофазного синтеза полностью автоматически, с помощью строгого соблюдения следующих этапов: последовательного связывания аминокислот; селективного отщепления от твердой фазы; очищения и лиофилизации, селективной циклизации; отщепления защитных групп; очищения и лиофилизации; аналитического исследования.
Циклические пептиды 8ЕЦ ГО №8: 1 и от 11 до 15 (в соответствии с настоящим изобретением) и 19 (не в соответствии с настоящим изобретением) были исследованы в отношении чистоты и массы с помощью обратно-фазовой НРЬС.
Чистота циклического пептида 8ЕЦ ГО N0: 1 была 96,3%, т/ζ (Ε8Ι) 1924.2 (М++1). Чистота циклического пептида 8ЕЦ ГО N0: 11 была 96,3%, т/ζ (Ε8Ι) 1924.1 (М++1). Чистота циклического пептида 8ЕЦ ГО N0: 12 была 98,8%, т/ζ (Ε8Ι) 1888,2 (М++1). Чистота циклического пептида 8ЕЦ ГО N0: 13 была 97,4%, т/ζ (Ε8Ι) 1873,4 (М++1). Чистота циклического пептида 8ЕЦ ГО N0: 14 была 99%, т/ζ (МАЙОР Т0Р) 1901,6 (М++1). Чистота циклического белка 8ЕЦ ГО N0: 15 была 99%, т/ζ (МАЕЭ!-Т0Р) 1902,7 (М++1). Чистота циклического пептида 8ЕЦ ГО N0: 19 была 95%, т/ζ (МАЕЭ!-Т0Р) 1778,02 (М++1).
Все пептиды в соответствии с настоящим изобретением 8ЕЦ ГО №8: 1 и от 11 до 15 имели следующую структурную особенность:
Последовательность: Х1 -СЦРЕТРЕСАЕАКР^У -Х2,
где Х1 отображает аминокислоту или от 1 до 4 аминокислот, в частности 1 или 3 аминокислоты, где аминокислоты являлись природными или неприродными аминокислотами,
где Х1 обозначает аминокислоту С, К, орнитин, 4-аминомасляную кислоту, β-аланин или последовательность К8Р,
где Х2 может быть природной или неприродной аминокислотой, где Х2 может быть аминокислотой С, Ό, С или Е,
и где Х1 является ^концевой аминокислотой и Х2 является С-концевой аминокислотой.
Электрофизиологические исследования амилоридчувствительного натриевого канала (Е№С).
Макроскопические токи ионов натрия производились эпителиальными клетками А549 легкого человека с помощью конфигурации "целых клеток" с помощью приема "локальной фиксации потенциала" (НатЛ1 ек а1., Рйидегк АгсЬ. 391 (1981), 85-100). Для произведения тока конфигурации "целых клеток"
- 13 030384
следующие омывающая жидкость и электродный раствор были использованы:
омывающая жидкость: 135 мМ метансульфонат натрия, 10 мМ №С1, 2,7 мМ КС1, 1,8 мМ СаС12, 2
мМ МдС12, 5,5 мМ глюкоза и 10 мМ ΗΕΡΕδ, рН 7,4.
Электродный раствор: 120 мМ метансульфонат калия, 15 мМ КС1, 6 мМ №С1, 1 мМ Мд2АТР, 2 мМ Х'а,.\ТР. 10 мМ ΗΕΡΕδ и 0,5 мМ ЕОТА (рН 7,2).
Покровные стекла с культивированными на них клетками переносили в экспериментальную камеру, заполненную 1 мл, фиксировали на микроскопном столе (АхюуеН 100, 400х увеличение), и клетки заливали омывающей жидкостью, как описано выше. Далее ток отводили от подходящей клетки (которая прикреплялась к покровному стеклу). Для этого капиллярный микроэлектрод (стеклянный капилляр с определенным термически отполированным отверстием на кончике, приблизительно 1-3 мкм, соответствующим сопротивлению кончика в 3-5 ΜΩ), заполненный электродным раствором, помещали на клетку и подсасывали к мембране так, что между мембраной и электродом формировалась "гигаомная изоляция", для того чтобы минимизировать утечку эликтрического тока. В "конфигурации целой клетки" мембрану пронизывали под кончиком электрода так, что ток, который течет через все ионные каналы клетки, мог быть измерен. По получении "гигаомной изоляции" определенный мембранный потенциал покоя подавали с помощью предварительного усилителя (СУ-4 Неабз1аде, Ахоп 1п81гишеп1з) и усилителя (Ахора!сй 1Ό, Ахоп ΙηδΐΓ.), и измеряли ток, который течет через все ионные каналы.
Импульсный протокол состоял из гиперполяризации клеточной мембраны до -100 мВ в течение 5 с и последующей пошаговой деполяризации с шагом в 20 до +100 мВ.
Этот протокол выполняли перед (контроль) и после добавления циклических белков. Отведенные токи, которые были получены таким образом, хранили и анализировали с помощью программы РСБАМР 6,0. Для этого отведенные токи, полученные в присутствии амилорида, вычитали из ранее регистрированных токов, так что было возможно определить амилоридчувствительный натриевый ток через натриевые каналы.
Результаты описанных измерений кратко изложены в табл. 1. Активность индивидуальных пептидов указана как ЕС50 (в нМ). ЕС50 является эффективной концентрацией, при которой измеряется 50% максимальной активности (то есть максимального увеличения интенсивности тока I).
Таблица 1
Активность пептидов в соответствии с настоящим изобретением δΕΟ ГО 1 и δΕρ ΙΌ 11 - 15 и пептида δΕρ ΙΌ N0: 19 не в соответствии с настоящим изобретением на клеточный амилоридчувствительный ток ионов натрия. Активность указана как эффективная концентрация при 50% максимальной активности ^С50)
| Циклический пептид | ес50 (нМ) |
| 8Е<2> ГО №: 1 | 54 |
| ЗЕ<Э ГО №: 11 | 56 |
| ЗЕ(2 ГО№: 12 | 38 |
| 8Е<3 ГО№: 13 | 45 |
| ЗЕ(2 ГО№: 14 | 24 |
| ЗЕ(2 ГО№: 15 | 19 |
| 3Εζ) ГО№: 19 | Нет активности |
Активность циклических пептидов δΕΟ ГО №δ: 1 и 11 до 15 как функция их концентрации представлена на фиг. 8. Максимальная активность указана как 100%.
Описанные исследования показывают, что пептиды δΕΟ ГО №: 1 и от 11 до 15 в соответствии с настоящим изобретением являются биологически активными, тогда как пептид δΕΟ ГО №: 19 не в соответствии с настоящим изобретением не является активным. Различие между циклическими пептидами δΕΟ ГО №: 1 и от 11 до 15 и циклическим пептидом δΕρ ГО №: 19 состоит в том, что в первичной пептидной последовательности Χ|-ΟΟΡΕΤΡΕΟΛΕΛΚΡΥΥ-Χ: аминокислоту Т (в 5-м положении), аминокислоту Е (в 7-м положении)и аминокислоту Е (в 10-м положении) заменяли на аланин. Последовательность ΤΡΕΟАΕ, следовательно, является принципиально значимой. Структура Χ1 и Х2 не оказывает принципиально значимого влияния на активность.
Краткое описание последовательностей.
8Е<3 ГО №: 1 СООКЕТРЕОАЕАКРХУУС ЗЕ<3 ГО №: 2 ТРЕОАЕ
- 14 030384
3Ε() ΙΟ №: 3 ΟΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡΨΥ
ЗЕО ГО №: 4 ΡΚϋΤΡΕΟΑΕΕΚΡΨΥ
ЗЕО ГО №: 5 СОРКОТРЕОАЕЬКРАУУС
ЗЕО ГО №: 6 σΟΟΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡλνΥΟ
ЗЕО ГО №: 7 СООКЕТРЕСАЕАЕРХУ ΥΕ
ЗЕО ГО №: 8 ССОКЕТРЕСАЕАКРС
ЗЕО ГО №: 9 СОКЕТРЕОАЕАКР^С
ЗЕО ГО №: ΙΟΟΟΟΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΕΨΥε
ЗЕО ГО №: 11Κ8ΡΟ0ΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡΨΥΕ
ЗЕО ГО №: 12ΚΟΟΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡλΥΥΟ
ЗЕО ГО №: 13ΟΡηητηη-Ο0ΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡΨΥΟ
ЗЕО ГО №: 144-аминомасляная кислота-ΟΟΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡΨΥΟ ЗЕО ГО №: 15р-аланинЮ0КЕТРЕОАЕАКР\УУЕ ЗЕО ГО№: 16ТКР1ЕЬОРОЕРКАУ
ЗЕО ГО№: 17СОТКР1ЕЕСРОЕРКАУС
ЗЕО ГО№: 18Ο0ΚΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡΨΥ
ЗЕО ГОКе: 19СО0КЕАРАОАААКР\УУС
ЗЕО ГО №: 20ТХЕХХЕ
Список последовательностей
<110> АПЕПТИКО ФОРШУНГ УНД ЭНТВИКЛУНГ ГМБХ
<120> ТЕРАПИЯ ЛЕГОЧНОЙ ФОРМЫ ВЫСОТНОЙ БОЛЕЗНИ
<130> К 63872
<150> ЕР 12173983.3
<151> 2012-06-28
<160> 20
<170> РаТепТШ уегзтоп 3.5
<210> 1
<211> 17
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 1
суз с1у с1п Агд с1и ТНг Рго с1и с1у А1а с1и А1а Ьуз Рго Тгр Туг 15 10 15
суз
<210> 2
<211> 6
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> синтезированный пептид
<400> 2
ТНг Рго с1и с1у А1а с1и
1 5
<210> 3
<211> 14
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 3
с!п Агд с!и ТНг Рго с!и с!у А1а с!и А1а Ьуз Рго Тгр Туг
| 1 | 5 | 10 |
| <210> | 4 | |
| <211> | 14 | |
| <212> | РКТ | |
| <213> | Искусственная последовательность | |
| <220> | ||
| <223> | синтезированный пептид |
- 15 030384
<400> 4
| Рго ьуз Азр ТНг Рго с!и с!у А1а с!и ьеи | ьуз | Рго тгр туг | ||
| 1 | 5 | 10 | ||
| <210> | 5 | |||
| <211> | 17 | |||
| <212> | РКТ | |||
| <213> | Искусственная последовательность | |||
| <220> | ||||
| <223> | синтезированный пептид | |||
| <400> | 5 | |||
| суз с!у Рго ьуз Азр ТНг Рго с!и с!у | А1 а | 61 и | Ьеи Ьуз Рго Тгр Туг | |
| 1 | 5 | 10 | 15 | |
| суз | ||||
| <210> | 6 | |||
| <211> | 17 | |||
| <212> | РКТ | |||
| <213> | Искусственная последовательность | |||
| <220> | ||||
| <223> | синтезированный пептид | |||
| <400> | 6 | |||
| суз с!у с!п ьуз с!и ТНг Рго с!и с!у | А1 а | с!и | А1а Ьуз Рго тгр туг | |
| 1 | 5 | 10 | 15 | |
| суз |
<210> 7
<211> 17
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 7
суз с1у с1 η Агд с!и ТНг Рго с1и с!у А1а с1и А1а Агд Рго Тгр Туг 15 10 15
Суз
<210> 8
<211> 15
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 8
суз с1у с1п Агд с1и ТНг Рго с1и с1у А1а с1и А1а Ьуз Рго суз 15 10 15
<210> 9
<211> 16
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 9
суз с1п Агд с1и ТНг Рго с1и с1у А1а с1и А1а Ьуз Рго Тгр Туг суз 15 10 15
<210> 10
<211> 17
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 10
суз с1у с1п Агд с1и ТНг Рго с1и с1у А1а с1и А1а Ьуз РНе Тгр Туг 15 10 15
суз
| <210> <211> <212> <213> | 11 19 РКТ Искусственная последовательность |
| <220> <223> | синтезированный пептид |
| <400> | 11 |
| Ьуз 5ег Рго с1у с1п Агд с1и ТНг Рго с1и с1у А1а с1и А1а Ьуз Рго 15 10 15 |
Тгр Туг с!и
| <210> <211> <212> <213> | 12 17 РКТ Искусственная последовательность | ||
| <220> <223> | синтезированный пептид | ||
| <400> | 12 | ||
| Ьуз с!у с!п Агд с!и ТНг Рго с!и | с1у А1а с1и А1а Ьуз | Рго Тгр Туг | |
| 1 | 5 | 10 | 15 |
- 16 030384
| С1у ' " | |||
| <210> | 13 | ||
| <211> | 17 | ||
| <212> | РКТ | ||
| <213> | Искусственная последовательность | ||
| <220> | |||
| <223> | синтезированный пептид | ||
| <220> | |||
| <221> | М15С ЕЕАТиКЕ | ||
| <222> | ¢1) ¢1) | ||
| <223> | Огп | ||
| <400> | 13 | ||
| Хаа с!у с!п Агд с!и тНг Рго с!и | с1 у А1 а с1 и А1 а Ьуз | Рго Тгр Туг | |
| 1 | 5 | 10 | 15 |
| С1у |
| <210> | 14 |
| <211> | 17 |
| <212> | РКТ |
| <213> | Искусственная последовательность |
| <220> | |
| <223> | синтезированный пептид |
| <220> | |
| <221> | М15С_ЕЕАТиКЕ |
| <222> | ¢1) ¢1) |
| <223> | 4АЬи |
| <400> | 14 |
| Хаа с!у с!п Агд с!и тНг Рго с!и с!у А1а с!и А1а Ьуз Рго Тгр Туг |
15 10 15
Азр
<210> 15
<211> 17
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> синтезированный пептид
<220>
<221> М15С_ЕЕАТ11КЕ
<222> ¢1)..(1)
<223> ЬеТа-А1а
<400> 15
Хаа с1у с1п Агд с1и ТИг Рго с1и с1у А1а с1и А1а Ьуз Рго Тгр Туг 1 5 10 ’ 15
с! и
<210> 16
<211> 14
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 16
тНг Ьуз Рго IIе с1и Ьеи с1у Рго Азр с1и Рго Ьуз А1а Уа1 15 10
<210> 17
<211> 17
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 17
суз с1у тНг Ьуз Рго IIе с1и Ьеи с1у Рго Азр с1и Рго Ьуз А1а Уа1 15 10 15
суз
<210> 18
<211> 15
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 18
с1у с1п Агд с1и тНг Рго с1и с1у А1а с1и А1а Ьуз Рго Тгр Туг 15 10 15
<210> 19
<211> 17
<212> РКТ
<213> Искусственная последовательность
<220>
<223> синтезированный пептид
<400> 19
суз с1у с1п Агд с1и А1а Рго А1а с1у А1а А1а А1а Ьуз Рго Тгр Туг 15 10 15
суз
- 17 030384
<210> 20
<211> 6
<212> ΡΚΤ
<213> Искусственная последовательность <220>
<223> синтезированный пептид
<220>
<221> М15С_ЕЕАТ11КЕ <222> ¢2)..(5)
<223> неизвестно или прочие
<400> 20
тНг Хаа б1и Хаа Хаа 61 и 1 5
Claims (18)
1. Применение пептида, который состоит из 7-20 смежных аминокислот и содержит в своем составе гексамер ΤΡΕΘΑΕ, где пептид не обладает способностью связываться с рецептором ΤΝΕ и является циклизованным, для терапии и предотвращения легочной формы высотной болезни.
2. Применение по п.1, где пептид состоит из 7-17 смежных аминокислот.
3. Применение по любому из пп.1 и 2, где циклизованный пептид состоит из последовательности смежных аминокислот, выбранных из группы, состоящей из ΟΟΟΗΕΤΡΕΟΑΕΑΚΡΨΥΟ. ΟΘΡΚΌΤΡΕΘΑΕΕΚΡ^ΥΟ, ΟθρΚΕΤΡΕΘΑΕΑΚΡ^ΥΟ, ΟθρΚΕΤΡΕΘΑΕΑΚΡ^ΥΟ, СОрКЕТΡΕΘΑΕΑΚΡΟ, С^КΕΤΡΕΘΑΕΑΚΡ^ΥС, СΘ^КΕΤΡΕΘΑΕΑΚΓ^ΥС, ΚδΡθρΚΕΤΡΕΘΑΕΑΚΡ^ΥΕ, ΚθρΚΕΤΡΕΘΑΕΑΚΡ^ΥΘ, орнитин-θρΚΕΤΡΕΘΑΕΑΚΡ^ΥΘ, 4-аминомасляная кислотаΟΟΚΕΤΡΕΟΛΕΛΚΡΨΥΙλ β-аланин-Θ^КΕΤΡΕΘΑΕΑΚΡ^ΥΕ и фрагментов по меньшей мере из 7 аминокислот указанных последовательностей, где указанные фрагменты содержат гексамер ΤΡΕΟΑΕ.
4. Применение по любому из пп.1-3, отличающееся тем, что пептид состоит из аминокислотной последовательности СΟ^ИΕΤΡΕΟΛΕΛΚΡΨΥС и циклизован через С-остатки.
5. Применение по любому из пп.1, 2 или 4, отличающееся тем, что пептид циклизован через дисульфидный мостик между С-остатками.
6. Применение по любому из пп.1-5, отличающееся тем, что пептид представлен лекарственной формой распыляемого сухого порошка.
7. Применение по любому из пп.1-5, отличающееся тем, что пептид состоит из аминокислотной последовательности СΟ^ИΕΤΡΕΟΛΕΛΚΡΨΥС и представлен лекарственной формой распыляемого сухого порошка.
8. Применение фармацевтической композиции, содержащей пептид, охарактеризованный в любом из пп.1-7, и фармацевтически приемлемый носитель, где данная композиция подходит для введения людям, в терапии и предотвращении легочной формы высотной болезни человека.
9. Применение по п.8, отличающееся тем, что композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель, который выбран из воды, в частности воды для инъекций, хлорида натрия, фосфата натрия, ацетата натрия, карбоната натрия, цитрата, глицина, глицилглицина, гистидина, лизина, аргинина, ТРИС, цитрата натрия, раствора Рингера, декстрозы, маннитола, трегалозы, сахарозы, сорбитола, фруктозы, мальтозы, лактозы или декстрана, раствора Хенкса, нелетучих масел, этилолеата, веществ, которые улучшают изотонию и химическую стабильность, консервантов, фармацевтически приемлемых белков, полисахаридов, полимолочных кислот, полигликолиевых кислот, полимерных аминокислот и сополимеров аминокислот.
10. Применение по п.8 или 9, отличающееся тем, что композиция содержит пептид в количестве от 1 мкг до 10 г.
11. Применение по п.10, отличающееся тем, что композиция содержит пептид в количестве от 10 мкг до 1 г.
12. Применение по п.10 или 11, отличающееся тем, что композиция содержит пептид в количестве от 1 до 100 мг.
13. Применение по любому из пп.8-12, отличающееся тем, что композиция представлена в жидкой форме, содержит пептид в количестве от 1 мкг до 10 г и представлена в объеме от 0,5 до 10 мл.
14. Применение по п.13, отличающееся тем, что композиция содержит пептид в количестве от 10 мкг до 1 г.
15. Применение по п.13 или 14, отличающееся тем, что композиция содержит пептид в количестве от 1 до 100 мг.
16. Применение по любому из пп.13-15, отличающееся тем, что композиция представлена в объеме от 1 до 5 мл.
17. Применение по любому из пп.8-16, отличающееся тем, что композиция представлена лекарственной формой распыляемого порошка или лекарственной формой распыляемой жидкости.
- 18 030384
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP12173983.3A EP2679239A1 (de) | 2012-06-28 | 2012-06-28 | Pharmazeutische Zusammensetzung zur Behandlung der durch Sauerstoffarmut und verringerten Luftdruck vermittelten pulmonalen Form der Höhenkrankheit |
| PCT/EP2013/062777 WO2014001177A1 (de) | 2012-06-28 | 2013-06-19 | Pharmazeutische zusammensetzung zur behandlung der durch sauerstoffarmut und verringerten luftdruck vermittelten pulmonalen form der höhenkrankheit |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201500061A1 EA201500061A1 (ru) | 2015-06-30 |
| EA030384B1 true EA030384B1 (ru) | 2018-07-31 |
Family
ID=48672620
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201500061A EA030384B1 (ru) | 2012-06-28 | 2013-06-19 | Терапия легочной формы высотной болезни |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9802985B2 (ru) |
| EP (2) | EP2679239A1 (ru) |
| JP (1) | JP6113277B2 (ru) |
| KR (1) | KR102010793B1 (ru) |
| CN (1) | CN104427993B (ru) |
| AP (1) | AP2014008162A0 (ru) |
| AU (1) | AU2013283563B2 (ru) |
| CA (1) | CA2875749C (ru) |
| EA (1) | EA030384B1 (ru) |
| ES (1) | ES2602197T3 (ru) |
| IN (1) | IN2015DN00585A (ru) |
| MX (1) | MX354302B (ru) |
| PE (1) | PE20150198A1 (ru) |
| WO (1) | WO2014001177A1 (ru) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6644695B2 (ja) * | 2014-03-04 | 2020-02-12 | アペプティコ フオルシユング ウント アントウィクラング ゲーエムベーハー | 肺内炎症の減弱化 |
| WO2015140125A2 (en) * | 2014-03-18 | 2015-09-24 | Apeptico Forschung Und Entwicklung Gmbh | Dry-powder peptide medicament |
| US11111160B2 (en) | 2015-08-25 | 2021-09-07 | Bar-Ilan University | Asymmetric electrochemical cell apparatus, and operating methods thereof |
| WO2018211474A1 (en) | 2017-05-19 | 2018-11-22 | Trudell Medical International | Positive expiratory pressure device |
| USD874064S1 (en) | 2018-05-18 | 2020-01-28 | Trudell Medical International | Mask |
| USD903097S1 (en) | 2018-05-18 | 2020-11-24 | Trudell Medical International | Mask |
| USD893806S1 (en) | 2018-11-09 | 2020-08-18 | Trudell Medical Internationl | Mask and shroud |
| WO2021087037A1 (en) * | 2019-10-29 | 2021-05-06 | University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education | Lung-specific targeting-peptide (ltp), compositions, and uses thereof |
| EP4051307B1 (en) | 2020-05-08 | 2023-02-01 | APEPTICO Forschung und Entwicklung GmbH | Peptide for prevention or treatment of covid-19 |
| KR20250164550A (ko) | 2024-05-16 | 2025-11-25 | 장태현 | 고산병 예방을 위한 입술용 화장료 조성물 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000009149A1 (en) * | 1998-08-14 | 2000-02-24 | Innogenetics N.V. | Tnf-derived peptides for use in treating oedema |
| WO2006013183A1 (en) * | 2004-08-06 | 2006-02-09 | Altana Pharma Ag | Composition comprising a pulmonary surfactant and a tnf-derived peptide |
| EP2009023A1 (en) * | 2007-06-04 | 2008-12-31 | Rentschler Beteiligungs GmbH | Novel peptides and their use for the treatment of edema |
| WO2009073909A1 (de) * | 2007-12-12 | 2009-06-18 | Apeptico Forschung Und Entwicklung Gmbh | Zyklisches, cystein-freies protein |
| WO2011085423A1 (de) * | 2010-01-14 | 2011-07-21 | Apeptico Forschung Und Entwicklung Gmbh | Zyklische peptide zur regulierung von vektoriellen ionenkanälen |
| WO2012065201A1 (de) * | 2010-11-18 | 2012-05-24 | Apeptico Forschung Und Entwicklung Gmbh | Zusammensetzung umfassend ein peptid und ein hemmstoff der viralen neuraminidase |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4069819A (en) | 1973-04-13 | 1978-01-24 | Societa Farmaceutici S.P.A. | Inhalation device |
| IT1228459B (it) | 1989-02-23 | 1991-06-19 | Phidea S R L | Inalatore con svuotamento regolare e completo della capsula. |
| US5891679A (en) | 1993-02-03 | 1999-04-06 | N.V. Innogenetics S.A. | TNF-alpha muteins and a process for preparing them |
| MX2011009251A (es) * | 2009-03-04 | 2011-11-18 | Mannkind Corp | Sistema mejorado de suministro de farmaco en polvo seco. |
| AT507953B1 (de) * | 2009-03-05 | 2011-02-15 | Apeptico Forschung & Entwicklung Gmbh | Verfahren zur vermeidung und zur behandlung einer hyperpermeabilität |
-
2012
- 2012-06-28 EP EP12173983.3A patent/EP2679239A1/de not_active Withdrawn
-
2013
- 2013-06-19 CN CN201380033379.XA patent/CN104427993B/zh active Active
- 2013-06-19 EA EA201500061A patent/EA030384B1/ru unknown
- 2013-06-19 AP AP2014008162A patent/AP2014008162A0/xx unknown
- 2013-06-19 CA CA2875749A patent/CA2875749C/en active Active
- 2013-06-19 IN IN585DEN2015 patent/IN2015DN00585A/en unknown
- 2013-06-19 PE PE2014002486A patent/PE20150198A1/es not_active Application Discontinuation
- 2013-06-19 JP JP2015518983A patent/JP6113277B2/ja active Active
- 2013-06-19 EP EP13730877.1A patent/EP2866824B1/de active Active
- 2013-06-19 WO PCT/EP2013/062777 patent/WO2014001177A1/de not_active Ceased
- 2013-06-19 KR KR1020157000350A patent/KR102010793B1/ko active Active
- 2013-06-19 ES ES13730877.1T patent/ES2602197T3/es active Active
- 2013-06-19 AU AU2013283563A patent/AU2013283563B2/en not_active Ceased
- 2013-06-19 MX MX2014015048A patent/MX354302B/es active IP Right Grant
- 2013-06-19 US US14/410,642 patent/US9802985B2/en active Active
-
2017
- 2017-09-25 US US15/714,111 patent/US20190211061A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2000009149A1 (en) * | 1998-08-14 | 2000-02-24 | Innogenetics N.V. | Tnf-derived peptides for use in treating oedema |
| WO2006013183A1 (en) * | 2004-08-06 | 2006-02-09 | Altana Pharma Ag | Composition comprising a pulmonary surfactant and a tnf-derived peptide |
| EP2009023A1 (en) * | 2007-06-04 | 2008-12-31 | Rentschler Beteiligungs GmbH | Novel peptides and their use for the treatment of edema |
| WO2009073909A1 (de) * | 2007-12-12 | 2009-06-18 | Apeptico Forschung Und Entwicklung Gmbh | Zyklisches, cystein-freies protein |
| WO2011085423A1 (de) * | 2010-01-14 | 2011-07-21 | Apeptico Forschung Und Entwicklung Gmbh | Zyklische peptide zur regulierung von vektoriellen ionenkanälen |
| WO2012065201A1 (de) * | 2010-11-18 | 2012-05-24 | Apeptico Forschung Und Entwicklung Gmbh | Zusammensetzung umfassend ein peptid und ein hemmstoff der viralen neuraminidase |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| MAGGIORINI, M.: "High altitude-induced pulmonary oedema", CARDIOVASCULAR RESEARCH, OXFORD UNIVERSITY PRESS, GB, vol. 72, no. 1, 1 October 2006 (2006-10-01), GB, pages 41 - 50, XP025011558, ISSN: 0008-6363, DOI: 10.1016/j.cardiores.2006.07.004 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU2013283563B2 (en) | 2017-06-08 |
| CA2875749A1 (en) | 2014-01-03 |
| US20190211061A1 (en) | 2019-07-11 |
| MX2014015048A (es) | 2015-06-05 |
| ES2602197T3 (es) | 2017-02-20 |
| EP2866824B1 (de) | 2016-08-10 |
| US9802985B2 (en) | 2017-10-31 |
| MX354302B (es) | 2018-02-23 |
| AP2014008162A0 (en) | 2014-12-31 |
| CN104427993B (zh) | 2017-03-08 |
| US20150225460A1 (en) | 2015-08-13 |
| KR20150037815A (ko) | 2015-04-08 |
| JP6113277B2 (ja) | 2017-04-12 |
| JP2015526399A (ja) | 2015-09-10 |
| CN104427993A (zh) | 2015-03-18 |
| PE20150198A1 (es) | 2015-02-19 |
| EP2866824A1 (de) | 2015-05-06 |
| IN2015DN00585A (ru) | 2015-06-26 |
| EP2679239A1 (de) | 2014-01-01 |
| WO2014001177A1 (de) | 2014-01-03 |
| KR102010793B1 (ko) | 2019-08-14 |
| EA201500061A1 (ru) | 2015-06-30 |
| AU2013283563A1 (en) | 2015-01-15 |
| CA2875749C (en) | 2019-02-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA030384B1 (ru) | Терапия легочной формы высотной болезни | |
| Yamada et al. | Serum interleukin-6, interleukin-8, hepatocyte growth factor, and nitric oxide changes during thoracic surgery | |
| US11639368B2 (en) | Method for preventing and treating hyperpermeability | |
| Zhang et al. | Activation of CXCR7 alleviates cardiac insufficiency after myocardial infarction by promoting angiogenesis and reducing apoptosis | |
| Itoh et al. | Secretion of N-terminal fragment of gamma-human atrial natriuretic polypeptide. | |
| KR20220166809A (ko) | 급성 호흡곤란 증후군 및 바이러스 감염 치료를 위한 cxcr4 억제제 | |
| US20020128203A1 (en) | Methods of identifying inhibitory compounds and uses thereof | |
| Salo et al. | Urinary excretion of urodilatin in patients with cirrhosis | |
| EP4183793A1 (en) | Peptide with neutralizing activity against severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 | |
| US20240325496A1 (en) | Cxc chemokine agonists and antagonists in covid-19 disease and diagnostic assays | |
| Moriarty et al. | Effect of peptide histidine isoleucine on water and electrolyte transport in the human jejunum. | |
| US20100160230A1 (en) | Ubiquitin and ubiquitin related molecules for treatment and prevention of harmful activation of the immune system | |
| US20240002437A1 (en) | Compositions and methods of treating inflammatory lung diseases | |
| CA3218162A1 (en) | Mature adrenomedullin for therapy stratification of corticosteroids in critically ill patients | |
| CN108355133A (zh) | 靶向cxcr7的药物组合物和方法 | |
| CN112368014A (zh) | 抗分泌因子在治疗和/或预防急性呼吸衰竭中的用途 | |
| US20250114511A1 (en) | Blood perfusion device to reduce secondary infection in hospital | |
| US8372799B2 (en) | Reverse protein | |
| CN120965818A (zh) | 抑制TNFa蛋白活性的舒缓抗炎多肽 | |
| KR20240001620A (ko) | hsa-miR-4517 발현 촉진제를 포함하는 천식 예방, 치료, 또는 개선용 조성물 및 마이크로코커스 루테우스 유래 소포를 이용한 천식 진단방법 | |
| HK40065839A (zh) | 使用补体抑制剂治疗神经疾病 | |
| Kitamura et al. | Biochemistry of adrenomedullin and proadrenomedullin N-terminal 20 peptide (PAMP) |