ES2197946T3 - Metodo para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides. - Google Patents

Metodo para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides.

Info

Publication number
ES2197946T3
ES2197946T3 ES96921256T ES96921256T ES2197946T3 ES 2197946 T3 ES2197946 T3 ES 2197946T3 ES 96921256 T ES96921256 T ES 96921256T ES 96921256 T ES96921256 T ES 96921256T ES 2197946 T3 ES2197946 T3 ES 2197946T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
leu
baselineskip
glu
arg
lys
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES96921256T
Other languages
English (en)
Inventor
Brian H. Vickery
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Roche Palo Alto LLC
Original Assignee
Roche Palo Alto LLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Roche Palo Alto LLC filed Critical Roche Palo Alto LLC
Application granted granted Critical
Publication of ES2197946T3 publication Critical patent/ES2197946T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0043—Nose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/635—Parathyroid hormone, i.e. parathormone; Parathyroid hormone-related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/28—Steroids, e.g. cholesterol, bile acids or glycyrrhetinic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

SE DESCUBREN ANALOGOS POLIPEPTIDICOS SINTETICOS DE LA HORMONA PARATIROIDEA PTH, PEPTIDO RELACIONADO CON LA HORMONA PARATIROIDEA PTHRP, Y DE LOS HOMOLOGOS TRUNCADOS FISIOLOGICAMENTE ACTIVOS DE PTH Y PTHRP, EN LOS QUE LOS RESIDUOS AMINOACIDICOS (22-31) FORMAN UNA HELICE AL} ANFIPATICA, ESTANDO SELECCIONADOS DICHOS RESIDUOS (22-31) DE AMINOACIDOS HIDROFILOS (HAA) Y AMINOACIDOS LIPOFILOS (LAA) ORDENADOS EN LA SECUENCIA: HAA(LAA LAA HAA HAA) SUB,2}LAA Y SUS SALES FARMACEUTICAMENTE ACEPTABLES, UTILES PARA LA PROFILAXIS Y TRATAMIENTO DE OSTEOPENIA INDUCIDA POR CORTICOSTEROIDES EN MAMIFEROS.

Description

Método para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides.
Antecedentes de la invención a) Campo de la invención
Esta invención se refiere al uso de un análogo polipeptídico sintético de la hormona paratiroidea (PHT), del péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrp), o a un homólogo o análogo truncado, fisiológicamente activo, de PTH o PTHrp, o de una sal de los mismos, en los que los restos de aminoácidos (22-21) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose dichos restos (22-31) de aminoácidos hidrófilos (Haa) y aminoácidos lipófilos (Laa), ordenados en la secuencia:
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
Haa (Laa Laa Haa Haa) _{2} 
Laa\cr}
para la preparación de un medicamento para tratar la osteopenia inducida por corticosteroides.
b) Descripción de la técnica relacionada
La osteoporosis es la forma más común de enfermedad ósea metabólica y puede considerarse la fase sintomática y de fractura de la pérdida ósea (osteopenia). Aunque la osteoporosis puede producirse como consecuencia de varias enfermedades subyacentes, el 90% de todos los casos parecen ser idiopáticos. Las mujeres posmenopáusicas están particularmente en riesgo de padecer osteoporosis idiopática (osteoporosis posmenopáusica o de Tipo I). Otro grupo de alto riesgo para padecer la osteoporosis idiopática son los ancianos de ambos sexos (osteoporosis senil o de Tipo II). La osteoporosis también se ha relacionado con el uso de corticosteorides, la inmovilización o el reposo prolongado en cama, el alcoholismo, la diabetes, la quimioterapia gonadotóxica, la hiperprolactinemia, la anorexia nerviosa, la amenorrea primaria y secundaria y la ovariectomía.
En las diversas formas de osteoporosis, frecuentemente se producen fracturas de huesos, que son el resultado de la pérdida ósea que ha alcanzado el punto del fallo mecánico. La osteoporosis posmenopáusica se caracteriza por fracturas de la muñeca y de la columna vertebral, mientras que las fracturas del cuello femoral parecen ser la característica dominante de la osteoporosis senil.
Se cree que el mecanismo por el que se pierde hueso en los osteoporóticos implica un desequilibrio en el proceso por el que el esqueleto se renueva. Este proceso se ha denominado remodelación ósea. Se produce en una serie de focos diferenciados de actividad. Estos focos aparecen espontáneamente dentro de la matriz ósea en una superficie ósea dada como un sitio de reabsorción ósea. Los osteoclastos (células óseas que se disuelven o se reabsorben) son responsables de la reabsorción de una parte del hueso de dimensión generalmente constante. Este proceso de reabsorción va seguido por la aparición de osteoblastos (células formadoras del hueso) que después rellenan con nuevo hueso la cavidad que han dejado los osteoclastos.
En un sujeto adulto sano, la velocidad a la que se forman los osteoclastos y los osteoblastos es tal que la formación del hueso y la reabsorción del hueso están en equilibrio. Sin embargo, en los osteoporóticos se desarrolla un desequilibrio en el proceso de remodelación ósea, que da como resultado que se pierda hueso a una velocidad mayor de a la que se forma. Aunque este desequilibrio se produce en cierto grado en la mayoría de los individuos a medida que se hacen mayores, es mucho más grave y se produce a una edad más temprana en las mujeres osteoporóticas posmenopáusicas o tras la ovariectomía.
Adachi, et al., en Seminars in Arthritis and Rheumatism, 22:6, 375-84 (junio de 1993) informan de que, a pesar de los muchos datos contradictorios referentes a la patofisiología de la osteoporosis inducida por corticosteroides, generalmente se admite que hay una disminución relativa en la formación del hueso y un aumento relativo en la reabsorción ósea. La pérdida ósea con fracturas y osteonecrosis resultantes es una consecuencia frecuente del tratamiento con corticosteroides. Hay pruebas de que la pérdida ósea se produce rápidamente dentro de los primeros 6 a 12 meses del tratamiento con corticosteroides; también parece haber una estrecha relación entre la velocidad de la pérdida ósea y la dosis de corticosteroides. Los hombres son igualmente susceptibles al efecto de los corticosteroides. La incidencia calculada de fracturas y osteonecrosis oscila desde el 30 hasta el 50%.
Ha habido muchos intentos para tratar la osteoporosis con el objetivo de ralentizar la pérdida ósea adicional o, más deseablemente, producir un aumento neto en la masa ósea. Ciertos agentes, tales como el estrógeno y los bifosfonatos, parecen ralentizar la pérdida ósea adicional en los osteoporóticos. Puede parecer que los agentes que ralentizan la pérdida ósea aumentan la masa ósea (en el orden del 3 al 7%), debido a las diferentes duraciones de la reabsorción y formación del hueso. Sin embargo, este aumento aparente está limitado en el tiempo, no es progresivo y se debe a una disminución en el ``espacio de remodelación''. Además, debido al estrecho acoplamiento entre la reabsorción y la formación, los tratamientos que impiden la reabsorción ósea también impiden en última instancia la formación ósea.
Se ha sugerido que el tratamiento con la hormona paratiroidea (PTH) conduciría a un aumento del recambio óseo y a un equilibrio positivo del calcio. Sin embargo, los ensayos clínicos con seres humanos han demostrado que cualquier aumento en el hueso trabecular está compensado por una disminución en el hueso cortical, de manera que no hay aumento neto en el hueso total.
Hefti, et al., en Clinical Science 62, 389-396 (1982) han informado de que dosis subcutáneas diarias de bPTH(1-84) o hPTH(1-34) aumentaron la cantidad total de calcio en el organismo y el peso de las cenizas de los huesos individuales en ratas hembra adultas, tanto normales como osteoporóticas.
Liu, et al., en J. Bone Miner. Res. 6:10, 1071-1080 (1991) han observado que la ovariectomía de las ratas hembra adultas indujo una pérdida del 47% en el porcentaje del hueso trabecular en la metáfisis tibial proximal, acompañado por un aumento significativo en el número de osteoblastos y de osteoclastos trabeculares. Las inyecciones subcutáneas diarias de hPTH(1-34) revertieron completamente la pérdida de hueso trabecular y dieron como resultado cantidades de hueso trabecular que sobrepasaron las de los controles operados simulados. El número de osteoblastos aumentó y el número de osteoclastos disminuyó.
Hock et al., en J. Bone Min. Res. 7:1, 65-71 (1992) han informado de que inyecciones subcutáneas diarias de hPTH(1-34) a ratas macho adultas sanas durante 12 días aumentaron el calcio y el peso en seco del hueso trabecular y cortical. Aumentó la masa ósea total, el volumen óseo trabecular, el espesor y el número trabecular y las superficies osteoblásticas.
Las hormonas paratiroideas de mamíferos, por ejemplo, humana (hPTH), bovina (bPTH) y porcina (pPTH), son cadenas polipeptídicas únicas de 84 restos de aminoácidos, con pesos moleculares de aproximadamente 9500. La actividad biológica se asocia con el extremo N-terminal, siendo aparentemente los restos (1-34) los mínimos requeridos.
El segmento N-terminal de la PTH humana difiere del segmento N-terminal de las hormonas bovina y porcina en sólo tres y dos restos de aminoácidos, respectivamente:
hPTH (1-34):
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Asn Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Phe (SEQ ID NO: 1);
bPTH(1-34):
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Met His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Phe (SEQ ID NO: 2);
pPTH(1-34):
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Phe (SEQ ID NO: 3)
La principal función de la PTH es provocar cambios adaptativos que sirvan para mantener una concentración constante de Ca^{2+} en el fluido extracelular. La PTH actúa sobre los riñones para aumentar la reabsorción tubular del Ca^{2+} de la orina, así como para estimular la conversión de calcifediol en calcitriol, que es el responsable de la absorción del Ca^{2+} de los intestinos. Un efecto destacado es estimular la movilización del Ca^{2+} del hueso. La PTH actúa sobre el hueso para aumentar la tasa de reabsorción del Ca^{2+} y del fosfato. La PTH estimula la tasa de la reabsorción ósea por los osteoclastos, aumenta la tasa de la diferenciación de las células mesenquimáticas a osteoclastos y prolonga la semivida de estas últimas células. Con la acción prolongada de la PTH, el número de osteoblastos que forman el hueso también aumenta; por tanto, la tasa del recambio y la remodelación óseos se mejora. Sin embargo, los osteoblastos individuales parecen ser menos activos de lo normal.
Rosenblatt, et al., en las patentes de los EE.UU. números 4.423.037, 4.968.669 y 5.001.223 han descrito antagonistas de la PTH obtenidos mediante la supresión de los aminoácidos (1-6) del extremo N-terminal y la sustitución selectiva de Phe^{7}, Met^{8,18}, y Gly^{12}. La Tyr^{34}-NH_{2} aumentó, según se informa, la actividad y la estabilidad de estos compuestos.
El péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrp), una proteína de más de 140 aminoácidos, y fragmentos de la misma, reproducen las acciones biológicas principales de la PTH. El PTHrp es sintetizado por varios tumores humanos y animales y otros tejidos y puede desempeñar un papel en la hipercalcemia del cáncer. La secuencia del hPTHrp (1-34) es tal como sigue:
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu Ile Ala Glu}
Ile His Thr Ala (SEQ ID NO: 4).
La homología de la secuencia entre hPTH y hPTHrp está en gran medida limitada a los 13 restos del extremo N-terminal, 8 de los cuales son idénticos; sólo 1 de los 10 aminoácidos en la región de unión al receptor (25-34) de hPTH se conserva en hPTHrp. La similitud conformacional puede subyacer a la actividad común. Cohen, et al., en J. Biol. Chem. 266:3, 1997-2004 (1991) han sugerido que la mayor parte de la secuencia de PTH(1-34) y PTHrp(1-34), en particular las regiones (5-18) y (21-34), adopta una configuración de hélice \alpha, mientras que se observa que hay alguna duda sobre si esta configuración predomina para el extremo carboxilo terminal en condiciones fisiológicas. Tal estructura secundaria puede ser importante para la interacción con lípidos, la interacción con el receptor y/o la estabilización estructural.
Se han sintetizado análogos de PTH y de PTHrp con el objetivo de desarrollar agentes terapéuticos mejorados para la restauración de la masa ósea en los sujetos mamíferos, incluyendo los afectados con osteoporosis.
Los documentos WO-A-94/01460 (Syntex U.S.A. INC.) y WO-A-95/02610 (Syntex U.S.A. INC.) se refieren a polipéptidos sintéticos según la presente invención. El uso de estos polipéptidos para la fabricación de un medicamento para tratar la osteopenia inducida por corticosteroides no se describe ni se indica en estos documentos.
Sumario de la invención
Esta invención se refiere al uso de un análogo polipeptídico sintético de la hormona paratiroidea (PHT), al péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrp), o a un homólogo o análogo truncado, fisiológicamente activo, de PTH o PTHrp, o de una sal de los mismos, en el que los restos de aminoácidos (22-21) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose dichos restos (22-31) de aminoácidos hidrófilos (Haa) y aminoácidos lipófilos (Laa), ordenados en la secuencia:
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
Haa (Laa Laa Haa Haa) _{2} 
Laa\cr}
para la preparación de un medicamento para tratar la osteopenia inducida por corticosteroides.
En una realización, la secuencia de restos de aminoácidos (22-31) se selecciona de (SEQ ID NOS: 85, 86, 26, 27, 28, 29 y 30). La cantidad eficaz de polipéptido es desde aproximadamente 0,002 \mug de polipéptido/kg de masa corporal del paciente/día hasta aproximadamente 10 \mug de polipéptido/kg de masa corporal del paciente/día.
También se proporcionan composiciones farmacéuticas para evitar o tratar la osteopenia inducida por corticosteroides, que comprenden una cantidad eficaz de análogo polipeptídico sintético de la hormona paratiroidea (PTH), del péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrp), o de un homólogo o análogo truncado, fisiológicamente activo, de PTH o PTHrp, o de una sal de los mismos, en las que los restos de aminoácidos (22-31) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose dichos restos (22-31) de aminoácidos hidrófilos (Haa) y aminoácidos lipófilos (Laa), ordenados en la secuencia:
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
Haa (Laa Laa Haa Haa) _{2} 
Laa,\cr}
y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
En una realización, las composiciones farmacéuticas se proporcionan en formas farmacéuticas unitarias para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides, que comprenden desde aproximadamente 1 \mug hasta aproximadamente 1000 \mug del análogo polipeptídico sintético de la hormona paratiroidea (PTH), del péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrp), o de un homólogo o análogo truncado, fisiológicamente activo, de PTH o PTHrp, o de una sal de los mismos, en las que los restos de aminoácidos (22-31) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose dichos restos (22-31) de aminoácidos hidrófilos (Haa) y aminoácidos lipófilos (Laa), ordenados en la secuencia:
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
Haa (Laa Laa Haa Haa) _{2} 
Laa,\cr}
y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
Cuando las realizaciones ilustrativas específicas de este tipo de secuencia se insertan en PTH, PTHrp y los análogos y homólogos truncados, fisiológicamente activos, de PTH y PTHrp, los polipéptidos resultantes son agentes eficaces de la remodelación ósea.
En un aspecto, entonces, esta invención proporciona métodos para tratar la osteopenia inducida por corticosteroides con análogos de PTH, PTHrp y los análogos y homólogos truncados, fisiológicamente activos, de PTH y PTHrp, o las sales de los mismos, en los que los restos de aminoácidos (22-31) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose la secuencia de dichos restos (22-31) de:
a) \sa{Xaa^{1} Xaa^{2} Leu Xaa^{4} Xaa^{5} Leu Xaa^{7} Xaa^{8} Xaa^{9} Xaa^{10}}, en la que
Xaa^{1} y Xaa^{4} son independientemente Glu, Glu(OCH_{3}), His o Phe; Xaa^{2} es Leu o Phe; Xaa^{5} es Lys o His; Xaa^{7} y Xaa^{10} son independientemente Leu o Ile; Xaa^{8} es Ala, Arg o Glu; y Xaa^{9} es Lys o Glu (SEQ ID NO: 85); preferiblemente
\sa{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu}, en la que
Xaa es Glu o Arg (SEQ ID NO: 26);
b) \sa{Xaa^{1} Xaa^{2} Leu Xaa^{4} Arg Leu Leu Xaa^{8} Arg Leu}, en la que
Xaa^{1} y Xaa^{4} son independientemente Glu, Glu(OCH_{3}), His o Phe; Xaa^{2} es Leu o Phe; Xaa^{8} es Glu, Lys o Lys(COCH_{2}PEGX) y PEGX es un radical poli-(etilén glicol metil éter) de peso molecular de 100 a 10.000 (SEQ ID NO: 86); preferiblemente,
\sa{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu}, en la que
Xaa es Glu, Lys o Lys(COCH_{2}PEGX) y PEGX es un radical poli-(etilén glicol metil éter) de peso molecular de 100 a 10.000 (SEQ ID NO: 27);
c) \sa{Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu} (SEQ ID NO: 28);
d) \sa{Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu} (SEQ ID NO: 29);
e) \sa{Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu} (SEQ ID NO: 30).
En otro aspecto, esta invención proporciona composiciones farmacéuticas de análogos de PTH, PTHrp y de análogos y homólogos truncados, fisiológicamente activos, de PTH y PTHrp, o las sales de los mismos, en los que los restos de aminoácidos (22-31) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose la secuencia de dichos restos (22-31) de:
a) \sa{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu}, en la que
Xaa es Glu o Arg (SEQ ID NO: 26);
b) \sa{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu}, en la que
Xaa es Glu, Lys o Lys(COCH_{2}PEGX) y PEGX es un radical poli-(etilén glicol metil éter) de peso molecular de 100 a 10.000 (SEQ ID NO: 27);
c) \sa{Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu} (SEQ ID NO: 28);
d) \sa{Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu} (SEQ ID NO: 29);
e) \sa{Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu} (SEQ ID NO: 30).
También se proporcionan los procedimientos para preparar composiciones farmacéuticas, que comprenden mezclar los compuestos descritos anteriormente con un vehículo farmacéuticamente aceptable.
Breve descripción de los dibujos
La figura 1 presenta la secuencia de ADN y los sitios de restricción enzimática de un gen sintético que codifica para un análogo de PTHrp(1-34) de esta invención.
La figura 2 da una idea general de la preparación de un plásmido que incorpora un gen análogo de PTHrp(1-34).
La figura 3 da una idea general de la preparación de un plásmido que incorpora dos copias de un gen análogo de PTHrp(1-34).
La figura 4 da una idea general de la preparación de un plásmido que incorpora cuatro copias de un gen análogo de PTHrp(1-34).
Descripción detallada de la invención Abreviaturas y definiciones
Las abreviaturas de una y tres letras para las diversas bases de nucleótidos y aminoácidos comunes son las recomendadas en Pure Appl. Chem. 31, 639-345 (1972) y 40, 277-290 (1974) y la Comisión de Nomenclatura Bioquímica de la IUPAC-IUB. Las abreviaturas de una y tres letras son tal como sigue:
Abreviaturas de los aminoácidos
Aminoácido Símbolo de tres Símbolo de una
letras letra
Alanina Ala A
Arginina Arg R
Asparagina Asn N
Ácido aspártico Asp D
Asn + Asp Asx B
Cisteína Cys C
Glutamina Gln Q
Ácido glutámico Glu E
Gln + Glu Glx Z
Glicina Gly G
Histidina His H
Isoleucina Ile I
Leucina Leu L
Lisina Lys K
Metionina Met M
Fenilalanina Phe F
Prolina Pro P
Serina Ser S
Treonina Thr T
Triptófano Trp W
Tirosina Tyr Y
Valina Val V
Otros aminoácidos Xaa X 
\newpage
Las abreviaturas representan L-aminoácidos, a menos que se designen, en caso contrario, como D-o D,L-. Ciertos aminoácidos, tanto naturales como no naturales, son aquirales, por ejemplo, la glicina. Todas las secuencias peptídicas se presentan con el aminoácido del extremo N-terminal en la izquierda y el aminoácido del extremo C-terminal en la derecha.
Otras abreviaturas para otros aminoácidos y compuestos usados en el presente documento son:
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 hSer \+ homoserina\cr  hSerlac \+ homoserina lactona\cr  Nle \+
norleucina\cr  PEG2 \+ radical de dietilén glicol metil éter,\cr  \+
también conocido como metoxidi(etilenoxi),\cr  \+
CH _{3} O(CH _{2} CH _{2} O) _{2} -,\cr  \+ (PM =
119)\cr  PEG5000 \+ radical de poli(etilén glicol metil
éter),\cr  \+ también conocido como metoxipoli(etilenoxi),\cr
 \+ CH _{3} O(CH _{2} CH _{2} O)  _{110} -,\cr  \+ (PM medio
= 5000)\cr  PEGX \+ radical de poli(etilén glicol metil
éter),\cr  \+ CH _{3} O(CH _{2} CH _{2} O) _{n} -, n =
2-225,\cr  \+ (PM medio = 100 a
10.000)\cr}
``Aminoácido hidrófilo (Haa)'' se refiere a un aminoácido que tiene al menos un grupo funcional hidrófilo, además de los requeridos para la formación del enlace peptídico, tal como arginina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutámico, glutamina, histidina, lisina, serina, treonina y sus homólogos.
``Aminoácido lipófilo (Laa)'' se refiere a un aminoácido no cargado, alifático o aromático, tal como isoleucina, leucina, metionina, fenilalanina, triptófano, tirosina, valina y sus homólogos.
Para los propósitos de esta invención, la alanina se clasifica como ``anfifílica'', es decir, capaz de actuar como hidrófila o lipófila.
``Homólogo o análogo truncado, fisiológicamente activo, de PTH o PTHrp'' se refiere a un polipéptido que tiene una secuencia que comprende menos del complemento completo de aminoácidos encontrado en PTH o PTHrp que, sin embargo, provoca una respuesta fisiológica similar. No es necesario que los PTH o PTHrp truncados sean completamente homólogos a PTH o PTHrp para provocar una respuesta fisiológica similar. PTH(1-34) y PTHrp(1-34) son representantes preferidos, pero no exclusivos, de este grupo.
``Hélice \alpha anfipática'' se refiere a la estructura secundaria mostrada por ciertos polipéptidos en los que los aminoácidos adquieren una configuración de hélice \alpha que tiene caras opuestas polares y no polares orientadas a lo largo del eje largo de la hélice. La posibilidad de la estructura de hélice \alpha en el polipéptido de interés puede investigarse hasta cierto punto mediante la construcción de una ``rueda de Schiffer-Edmundson'' (M. Schiffer y A.B. Edmundson, Biophys. J. 7, 121 (1967)), del grado de inclinación apropiado y observando la segregación de los restos hidrófilos y lipófilos en las caras opuestas del cilindro que circunscribe la hélice. Alternativamente, pueden estar disponibles pruebas empíricas, tales como los datos de dicroísmo circular o difracción de rayos x, lo que indica la presencia de una región de hélice \alpha en un polipéptido dado. Una hélice \alpha ideal tiene 3,6 restos de aminoácidos por vuelta con cadenas laterales adyacentes separadas por 100º de arco. Eisenberg et al., en Nature 299:371-374 (1982) y Proc. Nat. Acad. Sci. USA 81:140-144 (1984) han combinado una escala de hidrofobicidad con la rueda helicoidal para cuantificar el concepto de hélices anfipáticas. El momento hidrófobo medio se define como el vector suma de las hidrofobicidades de los aminoácidos componentes que constituyen la hélice. Las hidrofobicidades siguientes para los aminoácidos son las notificadas por Eisenberg (1984) como la escala ``consenso'':
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Ile 0,73; Phe 0,61; Val 0,54; Leu 0,53;  Trp 0,37;\cr  Met 0,26;
Ala 0,25;  Gly 0,16;  Cys 0,04; Tyr 0,02;\cr  Pro   -0,07;
Thr   -0,18; Ser   -0,26; His   -0,40;
Glu   -0,62;\cr  Asn   -0,64; Gln
  -0,69; Asp   -0,72; Lys   -1,10; Arg
  -1,76.\cr}
El momento hidrófobo, \mu_{H}, para una hélice \alpha ideal que tiene 3,6 restos por vuelta (o un arco de 100º (= 360º/3,6) entre las cadenas laterales), puede calcularse a partir de:
\mu_{H} = [(\Sigma H_{N}sen\delta(N-1))^{2} - [((\Sigma H_{N}cos\delta (N-1))^{2}]^{1/2},
en la que H_{N} es el valor de hidrofobicidad del aminoácido Nº y las sumas se toman sobre los N aminoácidos en la secuencia con periodicidad \delta=100º. El momento hidrófobo puede expresarse como el momento hidrófobo medio por resto, dividiendo \mu_{H} por N para obtener <\mu_{H}>. Un valor de <\mu_{H}> a 100º \pm 20º de aproximadamente 0,20 o mayor sugiere la formación de la hélice anfipática. Los valores de <\mu_{H}> a 100º para hPTHrp (22-31) y hPTH (22-31) son de 0,19 y 0,37, respectivamente.
Cornett, et al., en J. Mol. Biol., 195:659-685 (1987) han ampliado adicionalmente el estudio de las hélices \alpha anfipáticas introduciendo el ``índice anfipático'' como un factor de predicción de la anfipaticidad. Concluyeron que aproximadamente la mitad de todas las hélices \alpha conocidas son anfipáticas y que la frecuencia dominante es de 97,5º, en lugar de 100º, siendo el número de restos por vuelta más próximo a 3,7 que a 3,6. Aunque tales refinamientos son científicamente interesantes, el enfoque básico de Eisenberg, et al. es suficiente para clasificar una secuencia dada como anfipática, particularmente cuando se está diseñando una secuencia desde el principio para formar una hélice \alpha anfipática.
Una secuencia de aminoácidos en hélice \alpha anfipática sustituida puede carecer de homología con la secuencia de un segmento dado de un polipéptido que se produce naturalmente, pero provoca una estructura secundaria similar, es decir, una hélice \alpha que tiene caras opuestas polar y no polar, en el entorno fisiológico. La sustitución de la secuencia de aminoácidos que se produce naturalmente con una secuencia alternativa, puede afectar beneficiosamente a la actividad fisiológica, a la estabilidad, o a otras propiedades del polipéptido parental alterado. Una guía sobre como diseñar y seleccionar tales secuencias se facilita en J. L. Krstenansky, et al., FEBS Letters 242:2, 409-413 (1989), y J. P. Segrest, et al., Proteins: Structure, Function and Genetics 8:103-117 (1990), entre otros.
La hélice \alpha anfipática de diez aminoácidos de esta invención tiene la fórmula:
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Haa (Laa Laa Haa Haa) _{2} 
Laa\cr}
en la que los Haa se seleccionan del grupo de aminoácidos hidrófilos y los Laa se seleccionan del grupo de aminoácidos lipófilos, tal como se definió anteriormente. Suponiendo una hélice \alpha idealizada, los restos 1, 4, 5, 8 y 9 se distribuyen a lo largo de una cara (A) de la hélice dentro de aproximadamente un arco de 140º entre ellos, mientras que los restos 2, 3, 6, 7 y 10 ocupan un arco opuesto de 140º en la otra cara (B) de la hélice. Preferiblemente, todos los restos en una cara son de la misma polaridad, mientras que todos los de la otra cara son de la polaridad opuesta, es decir, si la cara A es toda hidrófila, la cara B es toda lipófila y viceversa. El experto en la técnica reconocerá que, mientras que las hélices de esta invención se describen mediante
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Haa (Laa Laa Haa Haa) _{2} 
Laa\cr}
la secuencia inversa,
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Laa (Haa Haa Laa Laa) _{2} 
Haa\cr}
también cumplirá los criterios de distribución del resto y es un descriptor equivalente de las hélices de esta invención.
La alanina puede sustituirse por cualquier aminoácido hidrófilo o lipófilo, puesto que la Ala puede residir fácilmente en cualquiera de las caras de una hélice \alpha anfipática, aunque la Ala_{10} no forma una hélice \alpha anfipática. Generalmente, la prolina, la cisteína y la tirosina no se usan; sin embargo, puede tolerarse su presencia y otros errores aleatorios en la secuencia, por ejemplo, un resto hidrófilo en la cara lipófila, siempre que los aminoácidos restantes en el segmento se formen conjuntamente de manera sustancial a la división de la cara hidrófila - cara lipófila. Un método conveniente para determinar si una secuencia es lo suficientemente anfipática para que sea una secuencia de esta invención es calcular el momento hidrófobo medio, tal como se definió anteriormente. Si el momento máximo medio por resto a 100º \pm 20º supera aproximadamente 0,20, entonces la secuencia formará una hélice anfipática y es una secuencia de esta invención.
Por ejemplo, el momento hidrófobo medio por resto a 100º para (SEQ ID NO: 26), Xaa = Glu, se calcula tal como sigue:
(Tabla pasa a la página siguiente)
\newpage
A.A. H_{N} \delta (N-1) H sen \delta (N-1) H cos \delta (N-1)
E -0,62 0 0 -0,62
L 0,53 100 0,52 -0,17
L 0,53 200 -0,18 -0,50
E -0,62 300 0,34 -0,31
K -1,1 400 -0,70 -0,85
L 0,53 500 0,34 -0,41
L 0,53 600 -0,46 -0,27
E -0,62 700 0,21 -0,58
K -1,1 800 -1,08 -0,19
L 0,53 900 0 -0,53
\Sigma = 0,81 \Sigma = -4,43
\mu_{H} = [(0,81)^{2} + (-4,43)^{2}]^{1/2} = 4,50
<\mu_{H}> = 4,50/10 = 0,45
Para esta secuencia, el momento hidrófobo máximo medio se produce a 92º y tiene un valor de 0,48.
Al aplicar este concepto a la hormona paratiroidea y al péptido relacionado con la hormona paratiroidea, se hizo la hipótesis de que cualquiera o ambas regiones (7-16) y (22-31) puede mostrar una estructura secundaria en hélice \alpha y podría sustituirse con una secuencia no homóloga que tenga tendencias estructurales similares, sin pérdida de actividad biológica o inducción de inmunorreacción.
Realizaciones preferidas
En un aspecto, esta invención proporciona análogos de PTH, de PTHrp y de los análogos y homólogos truncados, fisiológicamente activos, de PTH y PTHrp, o las sales de los mismos, en que los restos de aminoácidos (22-31) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose la secuencia de dichos restos (22-31) de:
a) \sa{Xaa^{1} Xaa^{2} Leu Xaa^{4} Xaa^{5} Leu Xaa^{7} Xaa^{8} Xaa^{9} Xaa^{10}}, en la que
Xaa^{1} y Xaa^{4} son independientemente Glu, Glu(OCH_{3}), His o Phe; Xaa^{2} es Leu o Phe; Xaa^{5} es Lys o His; Xaa^{7} y Xaa^{10} son independientemente Leu o Ile; Xaa^{8} es Ala, Arg o Glu; y Xaa^{9} es Lys o Glu (SEQ ID NO: 85); preferiblemente
\sa{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu}, en la que
Xaa es Glu o Arg (SEQ ID NO: 26);
b) \sa{Xaa^1 Xaa^2 Leu Xaa^4 Arg Leu Leu Xaa^8 Arg Leu}, en la que
Xaa^{1} y Xaa^{4} son independientemente Glu, Glu(OCH_{3}), His o Phe; Xaa^{2} es Leu o Phe; Xaa^{8} es Glu, Lys o Lys(COCH_{2}PEGX) y PEGX es un radical poli-(etilén glicol metil éter) de peso molecular de 100 a 10.000 (SEQ ID NO: 86); preferiblemente,
\sa{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu}, en la que
Xaa es Glu, Lys o Lys(COCH_{2}PEGX) y PEGX es un radical poli-(etilén glicol metil éter) de peso molecular de 100 a 10.000 (SEQ ID NO: 27);
c) \sa{Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu} (SEQ ID NO: 28);
d) \sa{Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu} (SEQ ID NO: 29);
e) \sa{Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu} (SEQ ID NO: 30).
En otro aspecto, esta invención proporciona análogos de PTH, PTHrp y los análogos y homólogos truncados, fisiológicamente activos, de PTH y PTHrp, o las sales de los mismos, de la fórmula:
Xaa^{1} Xaa^{2} Xaa^{3} Xaa^{4} Xaa^{5} Xaa^{6} Xaa^{7} Leu His Xaa^{10} Xaa^{11} Gly Xaa^{13} Ser Ile Gln Xaa^{17} Leu Xaa^{19} Xaa^{20} Xaa^{21} Xaa^{22-31} Xaa^{32} Xaa^{33} Xaa^{34} Xaa^{35} Xaa^{36} Xaa^{37} Xaa^{38} Término, en la que
Xaa^{1} está ausente o es Ala;
Xaa^{2} está ausente o es Val;
Xaa^{3} está ausente o es Ser;
Xaa^{4} está ausente o es Glu o Glu(OCH_{3});
Xaa^{5} está ausente o es His o Ala;
Xaa^{6} está ausente o es Gln;
Xaa^{7} está ausente o es Leu;
Xaa^{10} y Xaa^{17} son independientemente Asp o Asp(OCH_{3});
Xaa^{11} es Lys, Arg o Leu;
Xaa^{13} es Lys, Arg, Tyr, Cys, Leu, Cys(CH_{2}CONH(CH_{2})_{2}NH(biotinilo)), Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetilo), o Lys(dihidrocinamoílo);
Xaa^{20} es Arg o Leu;
Xaa^{19} y Xaa^{21} son independientemente Lys, Ala o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona de (SEQ ID NOS: 26, 27, 28, 29 ó 30);
Xaa^{32} es His, Pro o Lys;
Xaa^{33} está ausente o es Pro, Thr, Glu o Ala;
Xaa^{34} está ausente o es Pro, Arg, Met, Ala, hSer, hSer lactona, Tyr, Leu o 1,4-diaminobutiril lactama;
Xaa^{35} está ausente o es Pro, Glu, Ser, Ala o Gly;
Xaa^{36} está ausente o es Ala, Arg o Ile;
Xaa^{37} está ausente o es Arg, Trp o 3-(-2-naftil)-L-alanina;
Xaa^{38} está ausente o es Ala o hSer o Xaa^{38-42} es Thr Arg Ser Ala Trp;
y Término es OR o NR_{2}, donde cada R es independientemente H, alquilo(C_{1}-C_{4}) o fenilalquilo(C_{1}-C_{4}); y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Todavía otro aspecto de esta invención incluye análogos polipeptídicos del homólogo truncado, fisiológicamente activo, hPTHrp(1-34), tal como se muestra en la fórmula (I):
Ala Val Ser Glu Xaa^{5} Gln Leu Leu His Asp Xaa^{11} Gly Xaa^{13} Ser Ile Gln Asp Leu Xaa^{19} Arg Xaa^{21} Xaa^{22-31} Xaa^{32} Xaa^{33} Xaa^{34} Término, en la que
Xaa^{5} es His o Ala;
Xaa^{11} y Xaa^{13} son independientemente Lys, Arg o Leu;
Xaa^{19} y Xaa^{21} son independientemente Ala o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona de:
a) \sa{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu}, en la que
Xaa es Glu o Arg (SEQ ID NO: 26);
b) \sa{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu}, en la que
Xaa es Glu, Lys o Lys(COCH_{2}PEGX) y PEGX es un radical poli-(etilén glicol metil éter) de peso molecular de 100 a 10.000 (SEQ ID NO: 27);
c) \sa{Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu} (SEQ ID NO: 28);
d) \sa{Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu} (SEQ ID NO: 29);
e) \sa{Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu} (SEQ ID NO: 30);
Xaa^{32} es His o Lys;
Xaa^{33} es Thr, Glu o Ala;
Xaa^{34} es Ala, hSer, Tyr o Leu;
y Término es Gly Arg Arg, lactona, OH o NR_{2}, en la que cada R es H o alquilo(C_{1}-C_{4}); y sus sales farmacéuticamente aceptables. (Fórmula I).
Un aspecto más específico de la invención incluye aquellos polipéptidos de la fórmula (I) en la que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 26), para los que <\mu_{H}> a 100º supera 0,45. Un aspecto todavía más específico de la invención incluye aquellos polipéptidos de fórmula (I) en los que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 26); Xaa^{11} y Xaa^{18} son ambos Lys; y Xaa^{19} y Xaa^{21} son ambos Arg.
Polipéptidos representativos incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Arg Lys}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 5);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 6);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 7);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr hSer NH_{2} (SEQ ID NO: 8);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr hSerlac (SEQ ID NO: 9);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala Gly Arg Arg OH (SEQ ID NO: 10); y
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu Lys Glu Leu NH_{2} (SEQ ID NO: 11).
Otro aspecto de esta invención incluye aquellos polipéptidos de fórmula (I) en los que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 26); Xaa^{11} y Xaa^{13} son ambos Lys; y uno de Xaa^{19} y Xaa^{21} es Arg y el otro es Ala. Polipéptidos representativos de este subgénero incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 12) y
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Ala Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 13).
En otro aspecto, esta invención incluye aquellos polipéptidos de fórmula (I) en los que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 26); uno de Xaa^{11} y Xaa^{13} es Leu y el otro es Lys; y Xaa^{19} y Xaa^{21} son ambos Arg. Polipéptidos representativos de este subgénero incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu Ala Gln Leu Leu His Asp Leu Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Ala Leu OH (SEQ ID NO: 14).
En otro aspecto, esta invención incluye aquellos polipéptidos de fórmula (I) en los que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 27), para los que <\mu_{H}> a 100º supera 0,50. Un aspecto adicional de esta invención incluye aquellos polipéptidos de fórmula (I) en los que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 27); Xaa^{11} y Xaa^{13} son ambos Lys o ambos Arg; y Xaa^{19} y Xaa^{21} son ambos Arg. Polipéptidos representativos de este subgénero incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 15);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 16);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Lys Arg}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 17);
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu}
\sac{Lys(COCH_2PEG2) Arg} Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 18); y
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu}
\sac{Lys(COCH_{2}PEG5000) Arg} Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 19).
En otro aspecto, esta invención incluye polipéptidos de fórmula (I) en la que Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 28), para los que <\muH> a 100º es de aproximadamente 0,25. Polipéptidos representativos de este subgénero incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 20).
En otro aspecto, esta invención incluye polipéptidos de fórmula (I) en la que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 29), para los que <\muH> a 100º es de aproximadamente 0,28. Polipéptidos representativos de este subgénero incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 21).
En otro aspecto, esta invención incluye polipéptidos de fórmula (I) en la que Xaa^{22-31 }es (SEQ ID NO: 30), para los que <\muH> a 100º es de aproximadamente 0,29. Polipéptidos representativos de este subgénero incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 22).
Todavía otro aspecto de esta invención incluye análogos polipeptídicos del homólogo truncado, fisiológicamente activo, bPTH(1-34), tal como se muestra en la fórmula (II).
Xaa^{1} Val Ser Glu Ile Gln Xaa^{7} Xaa^{8} His Asn Leu Gly Lys His Leu Xaa^{16} Ser Xaa^{18} Xaa^{19} Arg Xaa^{21} Xaa^{22-31} His Asn Xaa^{34} Término, en la que
Xaa^{1} es Ser o Ala;
Xaa^{7} es Leu o Phe;
Xaa^{8} es Met o Nle;
Xaa^{16} es Asn o Ser;
Xaa^{18} es Leu, Met o Nle;
Xaa^{19} es Glu o Arg;
Xaa^{21} es Val o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona de (SEQ ID NOS: 26, 27, 28, 29 y 30);
Xaa^{34} es Phe o Tyr;
Término es OH o NR_{2}, donde cada R es H o alquilo(C_{1}-C_{4}); y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. (Fórmula II). Polipéptidos representativos incluyen, pero no se limitan a:
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Nle Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 23) y
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Nle Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 24).
Todavía en otro aspecto de esta invención, se ha encontrado sorprendentemente que los homólogos y los análogos de PTH y PTHrp que tienen menos de 34 aminoácidos son también potentes agentes de la remodelación ósea. Estos compuestos son de la fórmula general:
Ala Val Ser Glu Xaa^{5} Gln Leu Leu His Asp Xaa^{11} Gly Xaa^{13} Ser Ile Gln Asp Leu Xaa^{19} Arg Xaa^{21} Xaa^{22-31} Xaa^{32} Xaa^{33} Xaa^{34} Término.
Polipéptidos representativos incluyen, pero no se limitan a:
Compuesto 41: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHP-NH_{2} (SEQ ID NO: 55).
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Glu Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Pro NH_{2} (SEQ ID NO: 55).
Datos físicos
p.f. 142,8-166,1ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-53,80 (c 0,38, H_{2}O)
FAB(C_{173}H_{295}N_{55}O_{49}): [M+H]^{+} 3929
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\+#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx 2,0 (2) \+ Glx 5,7 (6) \+ Ser 1,8 (2)\cr  \+ His 3,0
(3) \+ Gly 1,1 (1) \+ Ala 0,9 (1)\cr  \+ Arg  2,8 (3) \+ Val 1,2 (1)
\+ Ile 0,9 (1)\cr  \+ Leu 7,4 (8) \+ Lys  4,4 (4) \+ Pro 0,9
(1)\cr}
Compuesto 42: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LP-NH_{2} (SEQ ID NO: 56).
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Glu Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu Pro NH_{2} (SEQ ID NO: 56).
Datos físicos
p.f. 161,0-177,0ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-61,97 (c 0,19, H_{2}O)
FAB(C_{167}H_{288}N_{52}O_{48}): [M+H]^{+} 3792,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\+#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx 2,2 (2) \+ Glx 5,9 (6) \+ Ser 1,9 (2)\cr  \+ His 2,1
(2) \+ Gly 1,1 (1) \+ Ala 1,0 (1)\cr  \+ Arg  3,0 (3) \+ Val 1,1 (1)
\+ Ile 1,0 (1)\cr  \+ Leu 7,9 (8) \+ Lys  4,3 (4) \+ Pro 0,9
(1)\cr}
El experto en la técnica apreciará que pueden sintetizarse numerosas permutaciones de los análogos polipeptídicos que tendrán los atributos deseables de aquéllos descritos en el presente documento, siempre que la secuencia de aminoácidos que tenga un momento hidrófobo medio por resto a 100º \pm 20º mayor que aproximadamente 0,20 se inserte en las posiciones (22-31).
Síntesis clásica de los polipéptidos
Los polipéptidos de la invención inmediata pueden sintetizarse por métodos tales como los explicados en J.M. Stewart y J.D. Young, Solid Phase Peptide Synthesis, 2ª ed.-, Pierce Chemical Co., Rockford, Illinois (1984) y J. Meienhofer, Hormonal Proteins and Peptides, Vol. 2, Academic Press, Nueva York, (1973) para la síntesis en fase sólida y E. Schroder y K. Lubke, The Peptides, Vol. 1, Academic Press, Nueva York, (1965) para la síntesis en disolución.
En general, estos métodos implican la adición secuencial de aminoácidos protegidos a una cadena peptídica en crecimiento. Normalmente se protegen, o bien el grupo amino o bien el grupo carboxilo del primer aminoácido y cualquier grupo reactivo de cadena lateral. Este aminoácido protegido entonces, o bien se une a un soporte sólido inerte, o bien se utiliza en disolución, y se añade el siguiente aminoácido en la secuencia, también idóneamente protegido, en condiciones favorables para la formación del enlace amida. Una vez que todos los aminoácidos deseados se han unido en la secuencia apropiada, se eliminan los grupos protectores y cualquier soporte sólido, para obtener el polipéptido sin purificar. El polipéptido se desaliniza y se purifica, preferiblemente mediante cromatografía, para dar el producto final.
Un método preferido de preparación de los análogos polipeptídicos truncados, fisiológicamente activos, que tienen menos de aproximadamente cuarenta aminoácidos, implica la síntesis del péptido en fase sólida. En este método, las funciones del \alpha-amino (N^{\alpha}) y de cualquier cadena lateral reactiva, se protegen mediante grupos sensibles a ácidos o bases. El grupo protector debe ser estable a las condiciones de la formación del enlace peptídico, mientras que debe ser fácilmente eliminable sin afectar a la cadena polipeptídica existente. Los grupos protectores de \alpha-amino adecuados incluyen, pero no se limitan a, t-butoxicarbonilo (Boc), benciloxicarbonilo (Cbz), o-clorobenciloxicarbonilo, bifenilisopropiloxicarbonilo, t-amiloxicarbonilo (Amoc), isoborniloxicarbonilo, \alpha,\alpha-dimetil-3,5-dimetoxibenciloxi-carbonilo, o-nitrofenilsulfenilo, 2-ciano-t-butoxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc) y similares, preferiblemente t-butoxicarbonilo (Boc). Los grupos protectores de las cadenas laterales adecuados incluyen, pero no se limitan a: acetilo, bencilo (Bzl), benciloximetilo (Bom), o-bromobenciloxicarbonilo, t-butilo, t-butildimetilsililo, 2-clorobencilo (Cl-z), 2,6-diclorobencilo, ciclohexilo, ciclopentilo, isopropilo, pivalilo, tetrahidropiran-2-ilo, tosilo (Tos), trimetilsililo y tritilo.
En la síntesis en fase sólida, el aminoácido C-terminal se une primero a un soporte de resina adecuado. Los soportes de resina adecuados son aquellos materiales que son inertes a los reactivos y condiciones de reacción de las reacciones paso a paso de condensación y desprotección, así como insolubles en los medios usados. Ejemplos de resinas comercialmente disponibles incluyen resinas de estireno/divinilbenceno modificadas con un grupo reactivo, por ejemplo, co-poli-(estireno-divinilbenceno) clorometilado, co-poli-(estireno-divinilbenceno) hidroximetilado, y similares. Se prefiere la resina de fenilacetamidometilo (PAM) hidroximetilado y bencilado. Cuando el extremo C-terminal del compuesto es una amida, una resina preferida es la resina de p-metilbenzohidrilamino-co-poli(estireno-divinil-benceno).
La unión a la resina de PAM puede llevarse a cabo mediante la reacción del aminoácido protegido en N^{\alpha}, preferiblemente el Boc-aminoácido, como su sal de amomio, cesio, trietilamonio, 1,5-diazabiciclo-[5.4.0]undec-5-eno, tetrametilamonio, o similar, en etanol, acetonitrilo, N,N-dimetilformamida (DMF), y similares, preferiblemente la sal de cesio en DMF, con la resina a una temperatura elevada, por ejemplo, entre aproximadamente 40º y 60ºC, preferiblemente de aproximadamente 50ºC, durante desde aproximadamente 12 hasta 72 horas, preferiblemente aproximadamente 48 horas.
El N^{\alpha}-Boc-aminoácido puede unirse a la resina de benzohidrilamina por medio de, por ejemplo, un acoplamiento mediado por N,N'-diisopropilcarbodiimida (DIC) / 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) durante desde aproximadamente 2 hasta aproximadamente 24 horas, preferiblemente aproximadamente 2 horas a una temperatura de entre aproximadamente 10º y 50ºC, preferiblemente de 25ºC en un disolvente tal como diclorometano o dimetilformamida, preferiblemente diclorometano.
El acoplamiento sucesivo de los aminoácidos protegidos puede llevarse a cabo mediante métodos bien conocidos en la técnica, normalmente en un sintetizador de péptidos automatizado. Tras la neutralización con trietilamina o una base similar, cada aminoácido protegido se introduce preferiblemente en aproximadamente de 1,5 a 2,5 veces de exceso molar y el acoplamiento se lleva a cabo en un disolvente inerte, no acuoso y polar, tal como diclorometano, DMF, o mezclas de los mismos, preferiblemente en diclorometano a temperatura ambiente. Agentes de acoplamiento representativos son N,N'-diciclohexilcarbodiimida (DCC), N,N'-diisopropil-carbodiimida (DIC) u otra carbodiimida, o bien sola o en presencia de 1-hidroxibenzotriazol (HOBt), O-acil ureas, hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitris(pirrolidino)fosfonio (PyBop), N-hidroxisuccinimida, otras N-hidroxiimidas u oximas. Alternativamente, pueden usarse ésteres activos de aminoácidos protegidos (por ejemplo, p-nitrofenilo, pentafluorofenilo y similares) o anhídridos simétricos.
Al final de la síntesis en fase sólida, la totalidad del péptido protegido se elimina de la resina. Cuando la unión al soporte de resina es del tipo éster bencílico, la escisión puede realizarse mediante aminolisis con una alquilamina o fluoroalquilamina para los péptidos con un extremo C-terminal alquilamida, o mediante aminolisis con, por ejemplo, amoniaco/metanol o amoniaco/etanol para los péptidos con un extremo C-terminal amida no sustituido, a una temperatura de entre aproximadamente-10º y 50ºC, preferiblemente de aproximadamente 25ºC, durante entre aproximadamente 12 y 24 horas, preferiblemente aproximadamente 18 horas. Los péptidos con un extremo C-terminal hidroxilo pueden escindirse mediante HF u otro régimen de desprotección fuertemente ácido o mediante saponificación. Alternativamente, el péptido puede eliminarse de la resina mediante transesterificación, por ejemplo, con metanol, seguido por aminolisis o saponificación. El péptido protegido puede purificarse mediante cromatografía en gel de sílice.
Los grupos protectores de las cadenas laterales pueden eliminarse del péptido tratando el producto de la aminolisis con, por ejemplo, fluoruro de hidrógeno líquido anhidro en presencia de anisol u otro agente eliminador del ión carbonio, tratamiento con el complejo de fluoruro de hidrógeno /piridina, tratamiento con tris(trifluoroacetil)boro y ácido trifluoroacético, mediante reducción con hidrógeno y paladio sobre carbono o polivinilpirrolidona, o mediante reducción con sodio en amoniaco líquido, preferiblemente con fluoruro de hidrógeno líquido y anisol a una temperatura de entre aproximadamente -10º y +10ºC, preferiblemente a aproximadamente 0ºC, durante entre aproximadamente 15 minutos y 2 horas, preferiblemente aproximadamente 1,5 horas.
Para los péptidos en la resina de benzohidrilamina, las etapas de escisión de la resina y desprotección pueden combinarse en una única etapa utilizando fluoruro de hidrógeno líquido y anisol, tal como se describió anteriormente.
La disolución puede desalinizarse (por ejemplo, con la resina de intercambio aniónico BioRad AG-3®) y el péptido puede purificarse mediante una secuencia de etapas cromatográficas que emplean cualquiera o todos los tipos siguientes: intercambio iónico sobre una resina débilmente básica en la forma de acetato; cromatografía de adsorción hidrófoba sobre co-poli(estireno-divinilbenceno) no derivado, por ejemplo, Amberlite® XAD; cromatografía de adsorción en gel de sílice; cromatografía de intercambio iónico sobre carboximetilcelulosa; cromatografía de partición, por ejemplo, sobre Sephadex® G-25; distribución a contracorriente; o cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), especialmente HPCL en fase inversa sobre empaquetamiento en columna en fase de unión a octil-u octadecilsililsílice (ODS).
Por tanto, otro aspecto de la presente invención se refiere a procedimientos para preparar polipéptidos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, procedimientos que comprenden condensar secuencialmente los aminoácidos protegidos sobre un soporte de resina adecuado, eliminar los grupos protectores y el soporte de resina y purificar el producto, para dar análogos de homólogos y análogos truncados, fisiológicamente activos, de PTH y PTHrp, preferiblemente de PTH(1-34) y PTHrp(1-34), en los que los aminoácidos en las posiciones (22-31) forman una secuencia peptídica en hélice \alpha anfipática, tal como se definió anteriormente.
Síntesis recombinante de los polipéptidos
Alternativamente, los polipéptidos de esta invención pueden prepararse mediante la clonación y expresión de un gen que codifica para el polipéptido deseado. En este procedimiento, se prepara un plásmido que contiene la secuencia de ADN deseada y se inserta en un microorganismo huésped apropiado, normalmente una bacteria, tal como E. coli, o una levadura, tal como Saccharomyces cerevisiae, lo que induce al microorganismo huésped a producir múltiples copias del plásmido y, por tanto, del ADNc que codifica para los análogos polipeptídicos de esta invención.
En primer lugar, se diseña un gen sintético que codifica para el análogo seleccionado de PTH o PTHrp con sitios de escisión para la enzima de restricción conveniente para facilitar las modificaciones posteriores. Puede usarse la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), tal como enseña Mullis en las patentes de los EE.UU. números 4.683.195 y 4.683.202, para amplificar la secuencia.
El gen sintético amplificado puede aislarse y ligarse a un plásmido adecuado, tal como un plásmido Trp LE, en el que pueden insertarse en tandem cuatro copias del gen. La preparación de los plásmidos Trp LE se describe en la patente de los EE.UU. número 4.738.921 y en la patente europea con número de publicación 0212532. Los plásmidos Trp LE generalmente producen de 8 a 10 veces más proteína que los plásmidos Trp E. Pueden expresarse entonces genes de múltiples copias en un huésped apropiado, tal como E. coli o S. cerevisiae.
El vector de expresión específico usado en el presente documento fue Trp LE 18 Prot (Ile^{3}, Pro^{5}) que contiene los elementos siguientes: un fragmento pBR322 (EcoRI-BamHI) que contiene el gen de resistencia a la ampicilina y el origen de replicación del plásmido; un fragmento EcoRI-SacII que contiene el promotor de trp y el gen trpE; un fragmento del gen de la proteasa del VIH (Ile^{3}, Pro^{5}) (SacII-HindIII); un fragmento del gen bGRF (HindIII-BamHI); y un terminador de la transcripción del gen rpoc de E. coli. Los fragmentos del gen bGRF y de la proteasa del VIH no son críticos y pueden sustituirse con otras secuencias codificantes, si se desea.
Las proteínas de fusión multiméricas expresadas se acumulan intracelularmente en cuerpos de inclusión estables y pueden separarse mediante centrifugación del resto de la proteína celular. La proteína de fusión aislada se convierte en el análogo monomérico de PTH o PTHrp y puede purificarse mediante intercambio catiónico y/o HPLC en fase inversa.
Métodos alternativos de clonación, amplificación, expresión y purificación serán evidentes para el experto en la técnica. Métodos representativos se describen en Maniatis, et al., Molecular Cloning, a Laboratory Manual, 2ª Ed., Cold Spring Harbor Laboratory (1989).
Utilidad y administración
Los polipéptidos de esta invención son útiles para evitar y tratar una variedad de estados en mamíferos manifestados por la pérdida de masa ósea. En particular, los compuestos de esta invención están indicados para la profilaxis y el tratamiento terapéutico de la osteoporosis y la osteopenia en seres humanos.
En general, los polipéptidos de esta invención, o las sales de los mismos, se administran en cantidades de entre aproximadamente 0,002 y 10 \mug/kg de peso corporal por día, preferiblemente desde aproximadamente 0,04 hasta aproximadamente 0,2 \mug/kg de peso corporal por día. Para una mujer de 50 kg, la dosis diaria del principio activo es desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 500 \mug, preferiblemente desde aproximadamente 2,0 hasta aproximadamente 100 \mug. En otros mamíferos, tales como caballos, perros y el ganado, pueden requerirse dosis más elevadas. Esta dosificación puede suministrarse en una composición farmacéutica convencional mediante una administración única, mediante administraciones múltiples o mediante liberación sostenida, según sea necesario para lograr los resultados más eficaces, preferiblemente una o más veces al día mediante inyección.
La selección de la composición y la dosis exactas y del régimen de administración más apropiado estará influido por, entre otros, las propiedades farmacológicas del polipéptido seleccionado, la naturaleza y la gravedad del estado que se está tratando y el estado físico y la agudeza mental del receptor.
En el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides, se espera que la dosis requerida de polipéptido sea mayor para las dosis más elevadas de corticosteroides.
Regímenes de administración representativos incluyen los orales, parenterales (incluyendo los subcutáneos, intramusculares e intravenosos), rectales, bucales (incluyendo los sublinguales), pulmonares, transdérmicos e intranasales.
Las sales farmacéuticamente aceptables mantienen la actividad biológica deseada del polipéptido parental sin efectos secundarios tóxicos. Ejemplos de tales sales son (a) sales de adición de ácidos formadas con ácidos inorgánicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico y similares; y las sales formadas con ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido glucónico, ácido cítrico, ácido málico, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido tánico, ácido pamoico, ácido algínico, ácido poliglutámico, ácidos naftalenosulfónicos, ácidos naftaleno disulfónicos, ácido poligalacturónico y similares; (b) sales de adición de bases formadas con cationes metálicos polivalentes tales como cinc, calcio, bismuto, bario, magnesio, aluminio, cobre, cobalto, níquel, cadmio y similares; o con un catión orgánico formado de N,N'-dibenciletilendiamina o etilendiamina; o (c) combinaciones de (a) y (b), por ejemplo, una sal de tanato de cinc y similares.
Un aspecto adicional de la presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden como principio activo un polipéptido de la presente invención, o las sales farmacéuticamente aceptables del mismo, en adición con un vehículo no tóxico, farmacéuticamente aceptable. Tal como se ha mencionado anteriormente, tales composiciones pueden prepararse para la administración parenteral (subcutánea, intramuscular o intravenosa), particularmente en la forma de suspensiones o disoluciones líquidas; para la administración oral o bucal, particularmente en la forma de comprimidos o cápsulas; para la administración pulmonar o intranasal, particularmente en la forma de polvos, gotas nasales o aerosoles; y para la administración rectal o transdérmica.
Las composiciones pueden administrarse convenientemente en una forma farmacéutica unitaria y pueden prepararse mediante cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica farmacéutica, por ejemplo, tal como se describe en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17ª ed., Mack Publishing Company, Easton, PA., (1985). Las formulaciones para la administración parenteral pueden contener como excipientes agua o disolución salina estériles, alquilén glicoles tales como el propilén glicol, polialquién glicoles tales como el polietilén glicol, aceites de origen vegetal, naftalenos hidrogenados y similares. Para la administración oral, la formulación puede intensificarse por la adición de sales biliares o acilcarnitinas. Las formulaciones para la administración nasal pueden ser sólidas y pueden contener excipientes, por ejemplo, lactosa o dextrano, o pueden ser disoluciones acuosas o aceitosas para su uso en forma de gotas nasales o mediante pulverizador dosificador. Para la administración bucal, los excipientes normales incluyen azúcares, estearato de calcio, estearato de magnesio, almidón pregelatinizado y similares.
Cuando se formula para la administración nasal, la absorción a través de la membrana mucosa nasal puede intensificarse mediante ácidos tensioactivos, tales como por ejemplo, ácido glicocólico, ácido cólico, ácido taurocólico, ácido etocólico, ácido desoxicólico, ácido quenodesoxicólico, ácido dehidrocólico, ácido glicodesoxicólico, ciclodextrinas y similares, en una cantidad en el intervalo de entre aproximadamente el 0,2 y el 15 por ciento en peso, preferiblemente de entre aproximadamente el 0,5 y el 4 por ciento en peso, más preferiblemente de aproximadamente el 2 por ciento en peso.
La administración de los compuestos de la presente invención al sujeto durante periodos prolongados de tiempo, por ejemplo, durante periodos de una semana a un año, puede llevarse a cabo mediante una administración única de un sistema de liberación sostenida que contenga suficiente principio activo para el periodo de liberación deseado. Para este propósito pueden utilizarse varios sistemas de liberación sostenida, tal como microcápsulas de tipo monolítico o depósito, implantes de liberación sostenida, bombas osmóticas, vesículas, micelas, liposomas, parches transdérmicos, dispositivos iontoforéticos y formas farmacéuticas inyectables alternativas. La localización del lugar al que se desea administrar el principio activo es una característica adicional de algunos dispositivos de liberación controlada, que pueden demostrar ser beneficiosos en el tratamiento de ciertos trastornos.
Una forma de formulación de liberación sostenida contiene el polipéptido o su sal dispersos o encapsulados en un polímero no antigénico, no tóxico, que se degrada lentamente, tal como el ácido copoli(láctico/glicólico), tal como se describe en el trabajo pionero de Kent, Lewis, Sanders y Tice, EE.UU. número 4.675.189. Los compuestos o, preferiblemente, sus sales relativamente insolubles, también pueden formularse en colesterol u otros gránulos de matriz lipídica, o implantes de matriz desilastómero. Implantes de liberación lenta, sostenida o formulaciones inyectables adicionales de liberación lenta serán evidentes para el experto en la técnica. Véase, por ejemplo, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson ed., Marcel Dekker, Inc., Nueva York, 1978, y R. W. Baker, Controlled Release of Biologically Active Agents, John Wiley & Sons, Nueva York, 1987.
Los siguientes ejemplos específicos están dirigidos a ilustrar la síntesis y a probar los compuestos representativos de la invención y no deben considerarse como limitativos del alcance de las reivindicaciones. En los ejemplos, ``p.f.'' es el punto de fusión; ``[\alpha]_{D}^{25} '' es la actividad óptica a 25ºC a la concentración dada en el disolvente indicado, ``FAB'' es espectrometría de masas por bombardeo rápido con átomos y ``AAA'' es análisis de aminoácidos, con los valores esperados entre paréntesis tras los valores observados. Los análisis de los aminoácidos se realizaron en un Analizador AminoQuant de Hewlett-Packard siguiendo los protocolos recomendados del fabricante. Los aminoácidos primarios se derivatizaron con o-ftalaldehído; los aminoácidos secundarios con Fmoc. Se usó la detección fluorescente de los aminoácidos derivatizados para su cuantificación. Los aminoácidos protegidos se obtuvieron de Applied Biosystems Inc. (Foster City, CA).
Ejemplo I
El compuesto 1 (SEQ ID NO: 7) se preparó en una escala de 0,5 mmoles por el método en fase sólida sobre resina de 4-metilbenzohidrilamina, usando un sintetizador de péptidos automatizado de Applied Biosystems Modelo 430A. Los grupos \alpha-amino se protegieron con t-butoxicarbonilo (Boc). Los grupos protectores de las cadenas laterales fueron: bencilo (Bzl) para Asp, Glu y Ser; tosilo (Tos) para Arg; benciloximetilo (Bom) para His; y 2-clorobencilo (Cl-z) para Lys. Los aminoácidos se acoplaron secuencialmente usando N,N-diciclohexilcarbodiimida / 1-hidroxibenzotriazol (DCC/HOBt) siguiendo a Stewart y Young (véase anteriormente). Tras cada acoplamiento de aminoácido, el péptido se acetiló usando una mezcla de anhídrido acético y diisopropiletilamina en N-metilpirrolidona. El péptido completo se escindió de la resina con desprotección simultánea de los grupos protectores de las cadenas laterales usando HF anhidro (25 ml) en presencia de anisol (2,5 ml) a -10ºC durante 30 minutos y a 0ºC durante 60 minutos. Tras la evaporación de HF al vacío, el resto se lavó con éter anhidro y el péptido sin purificar se extrajo con ácido acético al 10%. La liofilización del extracto de ácido acético al 10% dio 900 mg de producto sin purificar. El péptido se purificó mediante cromatografía en columna en fase inversa en medio ODS a presión usando un gradiente de CH_{3}CN al 22-45% en TFA al 0,1%. El producto eluyó en tres fracciones, que se concentraron y liofilizaron para dar 130 mg de sólido blanco de >98% de pureza.
Compuesto 1: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 7)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 7)
Datos físicos
p.f. 150-159ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-34,88º (c 0,16, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{300}N_{56}O_{51}): [M+H]^{+} 4005,5
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA:  \+ Asp, 1,9(2); Glu, 5,6(6); Ser,
1,6(2); His, 2,7(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr,
0,9(1); Ala, 1,9(2); Arg, 2,8(3); Val,\cr  \+
1,0(1); Ile, 0,9(1); Leu, 7,3(8); Lys,
4,0(4).\cr}
De manera similar, los compuestos 2, 5-18, 21-27, 29-36, 38-48, 50-54, 58-64 y 66-70 se prepararon y se caracterizaron, sustituyendo la resina de PAM, según sea necesario, para la síntesis de polipéptidos hidroxi terminales.
Compuesto 2: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-OH (SEQ ID NO: 6)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 6)
\newpage
Datos físicos
p.f. 154-170ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-49,35º (c 0,46, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{301}N_{57}O_{50}): [M+H]^{+} 4005,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 5,9(6); Ser, 1,7(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 1,9(2); Arg, 3,0(3); Val,\cr  \+ 1,2(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 7,8(8); Lys,
4,2(4).\cr}
Compuesto 5: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH (SEQ ID NO: 15)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 15)
Datos físicos
p.f. 147-165ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-49,17º (c 0,66, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{299}N_{59}O_{52}): [M+H]^{+} 4061
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Gly, 6,1(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 5,0(5); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 7,8(8); Lys,
1,9(2).\cr}
Compuesto 6: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH (SEQ ID NO: 16)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 16)
Datos físicos
p.f. 150-170ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-48,65º (c 0,54, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{299}N_{63}O_{52}): [M+H]^{+} 4118,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 6,1(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,2(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 6,9(7); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,0(1); Leu,
7,8(8).\cr}
Compuesto 7: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (SEQ ID NO: 17)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Lys Arg}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 17)
Datos físicos
p.f. 177-182ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-46,17º (c 0,14, H_{2}O)
FAB(C_{176}H_{304}N_{64}O_{50}): [M+H]^{+} 4117
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,0(2); Glu, 4,8(5); Ser, 1,8(2);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 1,9(2); Arg, 6,7(7); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,0(1); Lys, 7,7(8); Lys,
0,9(1).\cr}
Compuesto 8: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLRKLHTA-OH (SEQ ID NO: 5)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Arg Lys}
Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 5)
Datos físicos
p.f. 147-165ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-49,17º (c 0,66, H_{2}O)
FAB(C_{176}H_{305}N_{59}O_{49}): [M+H]^{+} 4033,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,0(2); Glu, 4,8(5); Ser, 1,8(2);
His, 2,7(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,9(4); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 7,9(8); Lys,
4,0(4).\cr}
Compuesto 9: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTAGRR-OH (SEQ ID NO: 10)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Gly Arg Arg OH} (SEQ ID NO: 10)
Datos físicos
p.f. 158-160ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-44,76º (c 0,1, H_{2}O)
FAB(C_{189}H_{326}N_{64}O_{55}): [M+H]^{+} 4375,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,0(2); Glu, 5,9(6); Ser, 1,7(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 2,3(2); Thr, 1,0(1);
Ala, 1,9(2); Arg, 5,0(5); Val,\cr  \+ 1,2(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 7,8(8); Lys,
4,3(4).\cr}
Compuesto 10: AVSEAQLLHDLGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHAL-OH (SEQ ID NO: 14)
\sa{Ala Val Ser Glu Ala Gln Leu Leu His Asp Leu Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Ala Leu OH (SEQ ID NO: 14)
Datos físicos
p.f. 170-175ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-31,59º (c 0,54, H_{2}O)
FAB(C_{174}H_{300}N_{52}O_{51}): [M+H]^{+} 3936,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,0(2); Glu, 6,0(6); Ser, 1,8(2);
His, 2,0(2); Gly,\cr  \+ 1,2(1); Ala, 3,0(3);
Arg, 2,8(3); Val, 1,1(1); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 9,9(10); Lys,
3,0(3).\cr}
Compuesto 11: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLELLKEL-NH_{2} (SEQ ID NO: 11)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu Lys Glu Leu NH_{2} (SEQ ID NO: 11)
Datos físicos
p.f. 172-174ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-43,29º (c 0,2, H_{2}O)
FAB(C_{179}H_{311}N_{55}O_{52}): [M+H]^{+} 4065,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,2(2); Glu, 7,7(7); Ser, 1,7(2);
His, 2,0(2); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Ala, 1,0(1);
Arg, 3,0(3); Val, 1,1(1); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 9,3(9); Lys,
5,1(5).\cr}
Compuesto 12: AVSEIQFXHNLGKHLSSXERVELLEKLLEKLHNY-NH_{2} (X=Nle, SEQ ID NO: 23)
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Nle Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 23)
Datos físicos
p.f. 178ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-36,88º (c 0,4, H_{2}O)
FAB(C_{182}H_{295}N_{50}O_{51}): [M+H]^{+} 4001,6
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 6,5(6); Ser, 2,7(3);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 1,0(1);
Arg, 1,0(1); Tyr, 0,8(1); Val,\cr  \+ 2,0(2);
Phe, 1,0(1); Ile, 0,9(1); Leu+Nle, 8,5(7+2);\cr
 \+ Lys,
3,1(3).\cr}
Compuesto 13: AVSEIQFXHNLGKHLSSXRRRELLEKLLEKLHNY-NH_{2} (X=Nle, SEQ ID NO: 24)
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Nle Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 24)
Datos físicos
p.f. 260ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-37,02º (c 0,2, H_{2}O)
FAB(C_{184}H_{304}N_{56}O_{49}): [M+H]^{+} 4084
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 A: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 5,5(5); Ser, 2,6(3);
His, 3,1(3); Ala,\cr  \+ 1,0(1); Gly, 1,1(1);
Arg, 3,2(3); Tyr, 1,0(1); Val,\cr  \+
1,0(1);Phe, 1,0(1); Ile, 1,0(1); Leu,
9,0(9); Lys,\cr  \+
3,0(3).\cr}
Compuesto 14: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRALAEALAEALHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 20)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 20)
Datos físicos
p.f. 190-225ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-56,58º (c 0,36, H_{2}O)
FAB(C_{161}H_{272}N_{54}O_{49}): [M+H]^{+} 3747,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 4,9(5); Ser, 1,7(2);
His, 2,6(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 7,6(7); Arg, 2,8(3); Val,\cr  \+ 1,2(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 6,6(6); Lys,
1,9(2).\cr}
Compuesto 15: AVSEHQLLHDKGKSIQDLARRELLEKLLEKLHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 12)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 12)
Datos físicos
p.f. 170-180ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-48,19º (c 0,2, H_{2}O)
FAB(C_{172}H_{293}N_{53}O_{51}): [M+H]^{+} 3919,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 6,1(6); Ser, 1,7(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 3,0(3); Arg, 2,1(2); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,0(8); Lys,
4,4(4).\cr}
Compuesto 16: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRAELLEKLLEKLHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 13)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Ala Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 13)
Datos físicos
p.f. 190-195ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-50,50º (c 0,4, H_{2}O)
FAB(C_{172}H_{293}N_{53}O_{51}): [M+H]^{+} 3919,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 6,0(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 3,0(3); Arg, 2,1(2); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 7,5(8); Lys,
4,2(4).\cr}
Compuesto 17: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRSLLSSLLSSLHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 21)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 21)
Datos físicos
p.f. 195-204ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-67,11º (c 0,3, H_{2}O)
FAB(C_{163}H_{280}N_{54}O_{50}): [M+H]^{+} 3796,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 2,9(3); Ser, 6,8(7);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,2(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,0(3); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,2(8); Lys,
2,0(2).\cr}
Compuesto 18: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRAFYDKVAEKLHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 22)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 22)
\newpage
Datos físicos
p.f. 200-207ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-60,26º (c 0,6, H_{2}O)
FAB(C_{174}H_{284}N_{56}O_{50}): [M+H]^{+} 3960,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,9(3); Glu, 3,5(4); Ser, 1,4(2);
His, 2,6(3); Gly,\cr  \+ 0,9(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 4,0(4); Arg, 3,0(3); Tyr,\cr  \+ 0,9(1);
Val, 1,9(2); Phe, 1,1(1); Ile, 0,9(1); Leu,\cr 
\+ 3,6(4); Lys,
4,1(4).\cr}
Compuesto 21: AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNY-NH_{2} (SEQ ID NO: 35)
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 35)
Datos físicos
p.f. 148-155ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-45,97º (c 0,26, H_{2}O)
FAB(C_{184}H_{304}N_{56}O_{49}): [M+H]^{+} 4084
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 5,0(5); Ser, 2,7(3);
His, 3,0(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Ala, 0,9(1);
Arg, 3,1(3); Tyr, 0,9(1); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Phe, 0,9(1); Ile, 0,9(1); Leu, 9,3(9); Lys,\cr 
\+
3,2(3).\cr}
Compuesto 24: AVSEHQLLHD KGKSIQDLKL KELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 38)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Lys Leu Lys Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 38)
Datos físicos
p.f. 175-182ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-49,99º (c 0,47, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{299}N_{49}O_{51}): [M+H]^{+} 3906,5
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 6,5(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,1(2); Val, 1,1(1); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 9,1(9); Lys,
6,5(6).\cr}
\newpage
Compuesto 25: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 39)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala-NH_{2} (SEQ ID NO: 39)
Datos físicos
p.f. 136,5-153,5ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-32,57º (c 0,13, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{300}N_{60}O_{51}): [M+H]^{+} 4060,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 6,2(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,1(2); Arg, 5,2(5); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,1(1); Leu, 8,4(8); Lys,
2,2(2).\cr}
Compuesto 26: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAP-OH (SEQ ID NO: 40)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala Pro OH (SEQ ID NO: 40)
Datos físicos
p.f. 125,8-127,2ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-54,62º (c 0,23, H_{2}O)
FAB(C_{180}H_{306}N_{60}O_{53}): [M+H]^{+} 4158,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 6,2(6); Ser, 1,8(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 5,1(5); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,0(8); Lys, 2,1(2); Pro,\cr 
\+
1,1(1).\cr}
Compuesto 27: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRR-OH (SEQ ID NO: 41)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Ala Gly Arg Arg OH} (SEQ ID NO: 41)
\newpage
Datos físicos
p.f. 106-137,3ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-39,55º (c 0,67, H_{2}O)
FAB(C_{189}H_{326}N_{68}O_{55}): [M+H]^{+} 4430,5
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 5,9(6); Ser, 1,6(2);
His, 2,7(3); Gly,\cr  \+ 2,2(2); Thr, 1,0(1);
Ala, 1,8(2); Arg, 7,3(7); Val,\cr  \+ 0,8(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,1(8); Lys,
2,1(2).\cr}
Compuesto 29: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTY-NH_{2} (SEQ ID NO: 43)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 43)
Datos físicos
p.f. 160-172ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-49,85º (c 0,34, H_{2}O)
FAB(C_{181}H_{304}N_{56}O_{52}): [M+H]^{+} 4096,9
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,6(6); Ser, 1,7(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 0,9(1); Arg, 3,0(3); Tyr,\cr  \+ 0,9(1);
Val, 1,0(1); Ile, 1,0(1); Leu, 7,7(8); Lys,\cr 
\+
4,4(4).\cr}
Compuesto 30: AVSEHQLLHD KGYSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 44)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Tyr Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 44)
Datos físicos
p.f. 130-171ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-40,65º (c 0,34, H_{2}O)
FAB(C_{178}H_{297}N_{55}O_{52}): [M+H]^{+} 4039,4
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,5(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,4(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 2,9(3); Tyr,\cr  \+ 0,8(1);
Val, 1,0(1); Ile, 0,9(1); Leu, 7,9(8); Lys,\cr 
\+
3,4(3).\cr}
\newpage
Compuesto 31: AVSEHQLLHD KGCSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 45)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Cys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 45)
Datos físicos
p.f. 140-160ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-44,48º (c 0,25, H_{2}O)
FAB(C_{172}H_{293}N_{55}O_{51}S_{1}): [M+H]^{+} 3979
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx+Cys, 3,0(2+1); Glx, 5,6(6); Ser,
1,7(2); His,\cr  \+ 3,0(3); Gly, 1,0(1); Thr,
0,9(1); Ala, 1,9(2); Arg,\cr  \+ 2,5(3); Val,
1,0(1); Ile, 0,9(1); Leu, 7,5(8); Lys,\cr  \+
3,3(3).\cr}
Compuesto 32: AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 46) (X = Cys(CH_{2}CONH(CH_{2})_{2}NH(biotinilo)))
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (Xaa = Cys(CH_{2}CONH(CH_{2})_{2}NH(biotinilo))), (SEQ ID NO: 46)
Datos físicos
p.f. (no determinado) 
\
[\alpha]_{D}^{25} (no determinado)
FAB(C_{186}H_{316}N_{59}O_{54}S_{2}): [M+H]^{+} 4306,6
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 6,1(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,8(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,1(3); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,3(8); Lys,
3,3(3).\cr}
Compuesto 33: AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 47) (X = Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetilo))
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_{2} (Xaa = Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetilo), (SEQ ID NO: 47)
Datos físicos
p.f. 135-205ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-26,92 (c 0,104, HOAc ac. al 50%)
FAB(C_{188}H_{311}N_{57}O_{54}): [M+H]^{+} 4233
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 1,9(2); Glx, 6,3(6); Ser, 1,7(2);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 1,1(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,2(3); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,2(8); Lys,
4,5(4).\cr}
Compuesto 34: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAG-OH (SEQ ID NO: 48)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Gly OH} (SEQ ID NO: 48)
Datos físicos
p.f. 92,1-146,6ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-40,76º (c 0,34, H_{2}O)
FAB(C_{177}H_{302}N_{56}O_{53}): [M+H]^{+} 4062,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,7(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,0(3); Gly,\cr  \+ 2,2(2); Thr, 0,9(1);
Ala, 1,9(2); Arg, 2,8(3); Val,\cr  \+ 1,2(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 7,5(8); Lys,
4,2(4).\cr}
Compuesto 35: AVSX_{1}HQLLHX_{2} KGKSIQX_{2}LRR RX_{1}LLX_{1}KLLX_{1}K LHA-OH (SEQ ID NO: 49) (X_{1} = Glu(OCH_{3}); X_{2} = Asp(OCH_{3}))
\sa{Ala Val Ser Xaa_1 His Gln Leu Leu His Xaa_2 Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Xaa_2 Leu Arg Arg Arg Xaa_1 Leu Leu Xaa_1 Lys Leu Leu Xaa_1 Lys}
Leu His Ala OH (Xaa_1 = Glu(OCH_3); Xaa_2 = Asp(OCH_3)) (SEQ ID NO: 49)
Datos físicos
p.f. (no determinado) 
\
[\alpha]_{D}^{25}-21,96º (c 0,132, H_{2}O)
FAB(C_{181}H_{311}N_{55}O_{52}): [M+H]^{+} 4089,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 6,3(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,3(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,1(3); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,0(8); Lys,
4,2(4).\cr}
Compuesto 36: AVSX_{1}HQLLHX_{2} KGKSIQX_{2}LRR RX_{1}LLX_{1}KLLX_{1}K LHA-OCH_{3} (SEQ ID NO: 50) (X_{1} = Glu(OCH_{3}); X_{2} = Asp(OCH_{3}))
\sa{Ala Val Ser Xaa_1 His Gln Leu Leu His Xaa_2 Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Xaa_2 Leu Arg Arg Arg Xaa_1 Leu Leu Xaa_1 Lys Leu Leu Xaa_1 Lys}
Leu His Ala OCH_{3} (Xaa_{1} = Glu(OCH_{3}); Xaa_{2} = Asp(OCH_{3})) (SEQ ID NO: 50)
\newpage
Datos físicos
p.f. (no determinado) 
\
[\alpha]_{D}^{25}-46,80º (c 0,07, H_{2}O)
FAB(C_{182}H_{313}N_{55}O_{52}): [M+H]^{+} 4103
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 6,2(6); Ser, 1,4(2);
His, 3,0(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,1(1);
Ala, 1,7(2); Arg, 3,2(3); Val,\cr  \+ 0,6(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,0(8); Lys,
4,1(4).\cr}
Compuesto 38: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAP-OH (SEQ ID NO: 52)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Pro OH} (SEQ ID NO: 52)
Datos físicos
p.f. 152,1-186,5ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-55,91º (c 0,33, H_{2}O)
FAB(C_{180}H_{306}N_{56}O_{53}): [M+H]^{+} 4102,6
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,6(6); Ser, 1,7(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 1,9(2); Arg, 2,9(3); Val,\cr  \+ 1,2(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 7,7(8); Lys,
4,3(4).\cr}
Compuesto 39: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTP-OH (SEQ ID NO: 53)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Pro OH (SEQ ID NO: 53)
Datos físicos
p.f. 120-148,2ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-52,78º (c 0,47, H_{2}O)
FAB(C_{177}H_{301}N_{55}O_{52}): [M+H]^{+} 4031,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,5(6); Ser, 1,8(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 0,9(1); Arg, 2,9(3); Val,\cr  \+ 1,2(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 7,5(8); Lys, 3,6(3); Pro,\cr 
\+
0,9(1).\cr}
\newpage
Compuesto 40: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTP-NH_{2} (SEQ ID NO: 54)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Pro NH_{2} (SEQ ID NO: 54)
Datos físicos
p.f. 133,9-155,1ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-54,22º (c 0,37, H_{2}O)
FAB(C_{177}H_{302}N_{56}O_{51}): [M+H]^{+} 4030,7
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,6(6); Ser, 1,9(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 0,9(1); Arg, 2,8(3); Val,\cr  \+ 1,2(1);
Ile, 1,1(1); Leu, 7,8(8); Lys, 4,2(4); Pro,\cr 
\+
0,9(1).\cr}
Compuesto 41: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHP-NH_{2} (SEQ ID NO: 55)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Glu Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Pro NH_{2} (SEQ ID NO: 55)
Datos físicos
p.f. 142,8-166,1ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-53,80º (c 0,38, H_{2}O)
FAB(C_{173}H_{295}N_{55}O_{49}): [M+H]^{+} 3929
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,7(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,0(3);\cr  \+ Gly, 1,1(1); Ala, 0,9(1);
Arg, 2,8(3); Val, 1,2(1); Ile,\cr  \+ 0,9(1);
Leu, 7,4(8); Lys, 4,4(4); Pro,
0,9(1).\cr}
Compuesto 42: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LP-NH_{2} (SEQ ID NO: 56)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu Pro NH_{2} (SEQ ID NO: 56)
Datos físicos
p.f. 161,0-177,0ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-61,97º (c 0,19, H_{2}O)
FAB(C_{167}H_{288}N_{52}O_{48}): [M+H]^{+} 3792,0
\newpage
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 5,9(6); Ser, 1,9(2);
His, 2,1(2); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 1,0(1);
Arg, 3,0(3); Val, 1,1(1); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 7,9(8); Lys, 4,3(4); Pro,
0,9(1).\cr}
Compuesto 43: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAW-OH (SEQ ID NO: 57)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Arg Ser Ala Trp OH} (SEQ ID NO: 57)
Datos físicos
p.f. 181-202ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-45,14º (c 0,19, H_{2}O)
FAB(C_{195}H_{326}N_{62}O_{56}): [M+H]^{+} 4435,2
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,8(6); Ser, 2,8(3);
His, 2,8(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 1,9(2); Arg, 3,7(4); Ile,\cr  \+ 0,9(1);
Leu, 7,5(8); Lys, 4,3(4); Pro,
0,9(1).\cr}
Compuesto 44: AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-OH (SEQ ID NO: 58)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp OH} (SEQ ID NO: 58)
Datos físicos
p.f. 130-132,2ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-46,66º (c 0,195, H_{2}O)
FAB(C_{216}H_{365}N_{81}O_{62}): [M+H]^{+} 5088,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 6,0(6); Ser, 2,7(3);
His, 3,0(3); Gly,\cr  \+ 2,2(2); Thr, 2,1(2);
Ala, 3,0(3); Arg, 10,5(10); Val,\cr  \+ 0,9(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,2(8); Trp,
1,0(1).\cr}
Compuesto 45: AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-NH_{2} (SEQ ID NO: 59)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp NH_2} (SEQ ID NO: 59)
Datos físicos
p.f. 158-174ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-43,57º (c 0,53, H_{2}O)
FAB(C_{216}H_{366}N_{82}O_{61}): [M+H]^{+} 5087,4
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 1,9(2); Glx, 5,6(6); Ser, 2,6(3);
His, 3,3(3); Gly,\cr  \+ 2,1(2); Thr, 2,0(2);
Ala, 2,9(3); Arg, 10,1(10); Val,\cr  \+ 0,9(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,3(8); Trp,
1,1(1).\cr}
Compuesto 46: AVSEHQLLHD RGXSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRTRSAW-OH (SEQ ID NO: 60)
(X = Lys(dihidrocinamoílo))
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Xaa Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp OH} (Xaa =
Lys(dihidrocinamoílo)), (SEQ ID NO: 60)
Datos físicos
p.f. 165,4-175,2ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-40,43º (c 0,20, H_{2}O)
FAB(C_{225}H_{374}N_{80}O_{62}): [M+H]^{+} 5191
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 6,3(6); Ser, 2,8(3);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 2,1(2); Thr, 2,0(2);
Ala, 3,2(3); Arg, 9,9(9); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,6(8); Lys, 1,1(1); Trp,\cr 
\+
1,1(1).\cr}
Compuesto 47: AVSEIQFXHN LGKHLSSXTR SAWLRKKLOD VHNY-NH_{2} (SEQ ID NO: 61) (X= norleucina)
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Nle Thr Arg Ser Ala Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Tyr NH_2 (SEQ ID NO: 61)
Datos físicos
p.f. 140-160ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-56,88º (c 0,16, H_{2}O)
FAB(C_{180}H_{287}N_{55}O_{58}): [M+H]^{+} 3989,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 3,0(3); Glx, 2,9(3); Ser, 3,7(4);
His, 2,8(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 1,9(2); Arg, 2,0(2); Tyr,\cr  \+ 1,0(1);
Val, 1,7(2); Phe, 0,9(1); Ile, 0,9(1);
Leu+Nle,\cr  \+ 5,8(2+4); Lys, 3,4(3); Trp,
1,1(1).\cr}
Compuesto 48: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTMA-NH_{2} (SEQ ID NO: 62)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Met Ala NH_2} (SEQ ID NO: 62)
Datos físicos
p.f. 140-210ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-47,75º (c 0,178, H_{2}O)
FAB(C_{180}H_{309}N_{57}O_{52}S_{1}): [M+H]^{+} 4135,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,3(2); Glx, 6,6(6); Ser, 1,4(2);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,1(3); Val,\cr  \+ 0,9(1);
Met, 1,1(1); Ile, 1,0(1); Leu, 8,8(8); Lys,\cr 
\+
4,4(4).\cr}
Compuesto 50: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RFFLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 64)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala NH_2} (SEQ ID NO: 64)
Datos físicos
p.f. 136,5-156,8ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-49,89º (c 0,24, H_{2}O)
FAB(C_{182}H_{300}N_{56}O_{49}): [M+H]^{+} 4056,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 5,0(5); Ser, 1,9(2);
His, 3,3(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,1(2); Arg, 3,1(3); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Phe, 2,0(2); Ile, 0,9(1); Leu, 7,2(7); Lys,\cr 
\+
3,5(4).\cr}
Compuesto 51: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLHKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 65)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu His Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_2 (SEQ ID NO: 65)
Datos físicos
p.f. 80,7-141,0ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-55,38º (c 0,23, H_{2}O)
FAB(C_{176}H_{300}N_{58}O_{49}): [M+H]^{+} 4012,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 4,9(5); Ser, 1,8(2);
His, 4,3(4); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,1(3); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,1(8); Lys,
3,9(4).\cr}
Compuesto 52: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEHLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 66)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu His Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala NH_2 (SEQ ID NO: 66)
Datos físicos
p.f. 134,3-157,9ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-50,72º (c 0,45, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{295}N_{57}O_{51}): [M+H]^{+} 4012,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 5,9(6); Ser, 1,8(2);
His, 4,2(4); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,0(2); Arg, 3,0(3); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,1(8); Lys,
3,1(3).\cr}
Compuesto 53: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLIAK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 67)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Ile Ala Lys}
Leu His Thr Ala NH_2 (SEQ ID NO: 67)
Datos físicos
p.f. 142,7-159,8ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-54,01º (c 0,21, H_{2}O)
FAB(C_{173}H_{298}N_{56}O_{49}): [M+H]^{+} 3946,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 4,9(5); Ser, 1,8(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 3,1(3); Arg, 3,1(3); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,9(2); Leu, 7,0(7); Lys,
4,3(4).\cr}
Compuesto 54: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEE IHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 68)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Glu}
Ile His Thr Ala NH_2 (SEQ ID NO: 68)
Datos físicos
p.f. 138-185ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-50,17º (c 0,14, H_{2}O)
FAB(C_{174}H_{295}N_{55}O_{53}): [M+H]^{+} 4005
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 7,1(7); Ser, 1,7(2);
His, 2,8(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,1(2); Arg, 3,1(3); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,7(2); Leu, 7,1(7); Lys,
2,7(3).\cr}
Compuesto 58: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAW-NH_{2} (SEQ ID NO: 72)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Arg Ser Ala Trp NH_2} (SEQ ID NO: 72)
Datos físicos
p.f. 158-163ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-46,06º (c 0,17, H_{2}O)
FAB(C_{195}H_{327}N_{63}O_{55}): [M+H]^{+} 4434,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,5(6); Ser, 2,7(3);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Ala, 1,8(2);
Arg, 4,0(4); Thr, 0,9(1); Val,\cr  \+ 0,9(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 7,5(8); Lys, 3,9(4); Trp,\cr 
\+
1,0(1).\cr}
Compuesto 59: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTRSAX-OH (SEQ ID NO: 73) (X = Nal(2) = 3-(2-naftil)-L-alanina)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Arg Ser Ala 3-(2-naftil)-L-alanina-OH} (SEQ ID NO: 73)
Datos físicos
p.f. 156-162ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-44,44º (c 0,189, H_{2}O)
FAB(C_{197}H_{328}N_{62}O_{55}): [M+H]^{+} 4445,6
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 5,5(6); Ser, 2,8(3);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Ala, 2,0(2);
Arg, 4,0(4); Thr, 0,9(1); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 7,5(8); Lys, 4,2(4); Nal,\cr 
\+
1,1(1).\cr}
Compuesto 60: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTASAW-OH (SEQ ID NO: 74)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Ser Ala Trp OH} (SEQ ID NO: 74)
Datos físicos
p.f. 159-164ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-50,94º (c 0,29, H_{2}O)
FAB(C_{192}H_{320}N_{60}O_{55}): [M+H]^{+} 4349,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,6(6); Ser, 2,7(3);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Ala, 3,1(3);
Arg, 2,8(3); Thr, 1,0(1); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 7,6(8); Lys, 4,0(4); Trp,\cr 
\+
1,0(1).\cr}
Compuesto 61: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEIRA-OH (SEQ ID NO: 75)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu Ile Arg Ala OH} (SEQ ID NO: 75)
Datos físicos
p.f. 155-210ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-46,15º (c 0,12, H_{2}O)
FAB(C_{195}H_{334}N_{62}O_{58}): [M+H]^{+} 4475,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 6,9(7); Ser, 1,7(2);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 3,1(3);
Arg, 4,0(4); Thr, 0,9(1); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,9(2); Leu, 8,1(8); Lys,
4,1(4).\cr}
Compuesto 62: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEIR-OH (SEQ ID NO: 76)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu Ile Arg OH} (SEQ ID NO: 76)
Datos físicos
p.f. 186-218ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-52,73º (c 0,265, H_{2}O)
FAB(C_{192}H_{329}N_{61}O_{57}): [M+H]^{+} 4404,4
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 6,6(7); Ser, 1,9(2);
His, 3,4(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 2,0(2);
Arg, 3,8(4); Thr, 1,0(1); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,7(2); Leu, 7,9(8); Lys,
4,0(4).\cr}
Compuesto 63: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAEI-OH (SEQ ID NO: 77)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu Ile OH} (SEQ ID NO: 77)
Datos físicos
p.f. 169-205ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-50,78º (c 0,51, H_{2}O)
FAB(C_{186}H_{317}N_{57}O_{56}): [M+H]^{+} 4248,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 6,8(7); Ser, 1,8(2);
His, 3,3(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Ala, 2,0(2);
Arg, 3,0(3); Thr, 1,0(1); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,8(2); Leu, 7,8(8); Lys,
3,6(4).\cr}
Compuesto 64: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTAE-OH (SEQ ID NO: 78)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu OH} (SEQ ID NO: 78)
Datos físicos
p.f. 199-205ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-52,47º (c 0,41, H_{2}O)
FAB(C_{180}H_{306}N_{56}O_{55}): [M+H]^{+} 4135,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 6,6(7); Ser, 1,9(2);
His, 3,3(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 2,0(2);
Arg, 2,9(3); Thr, 1,0(1); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,2(8); Lys,
3,8(4).\cr}
Compuesto 66: SEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 80)
\sa{Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp}
\sac{Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His}
\sac{Thr Ala NH_2} (SEQ ID NO: 80)
Datos físicos
p.f. 134,2ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-48,12º (c 0,36, H_{2}O)
FAB(C_{167}H_{286}N_{54}O_{49}): [M+H]^{+} 3834,4
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,7(6); Ser, 1,7(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 1,0(1); Arg, 2,8(3); Ile,\cr  \+ 0,9(1);
Leu, 7,4(8); Lys,
4,3(4).\cr}
Compuesto 67: LLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 81)
\sa{Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg}
\sac{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala NH_2} (SEQ ID NO: 81)
Datos físicos
p.f. 128,5-184,5ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-6,53º (c 0,69, MeOH)
FAB(C_{148}H_{259}N_{47}O_{41}): [M+H]^{+} 3353
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 4,1(4); Ser, 0,9(1);
His, 2,1(2); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 0,9(1);
Ala, 1,0(1); Arg, 3,0(3); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 8,1(8); Lys,
4,2(4).\cr}
Compuesto 68: LHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 82)
\sa{Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala NH_2} (SEQ ID NO: 82)
Datos físicos
p.f. 165-210ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-36,05º (c 0,12, H_{2}O)
FAB(C_{142}H_{248}N_{46}O_{40}): [M+H]^{+} 3239,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 3,9(4); Ser, 0,9(1);
His, 1,9(2); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 1,0(1); Arg, 2,9(3); Ile,\cr  \+ 0,9(1);
Leu, 6,8(7); Lys,
4,2(4).\cr}
Compuesto 69: SEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHAGRRTRSAW-OH (SEQ ID NO: 83)
\sa{Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp}
\sac{Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His}
\sac{Leu His Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp} OH (SEQ ID NO: 83)
Datos físicos
p.f. 150-210ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-18,0º (c 0,64, H_{2}O)
FAB(C_{208}H_{351}N_{79}O_{60}): [M+H]^{+} 4918,6
\newpage
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 6,2(6); Ser, 2,8(3);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 2,2(2); Thr, 2,2(2);
Ala, 2,2(2); Arg, 10,4(10); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 8,0(8); Trp,
1,1(1).\cr}
Compuesto 70: LLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER LHAGRRTRSAW-OH (SEQ ID NO: 84)
\sa{Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg}
\sac{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His Leu His Arg Gly}
\sac{Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp OH} (SEQ ID NO: 84)
Datos físicos
p.f. 150-210ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-41,70º (c 0,36, H_{2}O)
FAB(C_{189}H_{324}N_{72}O_{52}): [M+H]^{+} 4437,14
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 4,1(4); Ser, 1,9(2);
His, 2,0(2); Gly,\cr  \+ 2,1(2); Thr, 2,0(2);
Ala, 2,1(2); Arg, 9,7(10); Ile,\cr  \+ 0,9(1);
Leu,
7,4(8).\cr}
El análogo ciclado en la cadena lateral (Compuesto 57) se sintetizó igual que anteriormente, excepto porque N^{\alpha}-Boc-N^{\epsilon}-Fmoc-Lys y N^{\alpha}-Boc-N^{\gamma}-Fmoc-Asp se colocaron en las posiciones 13 y 17, respectivamente. A la finalización de la síntesis del Boc-aminoácido, la resina se trató con piperidina al 20% en DMF a temperatura ambiente durante 30 minutos. La resina se filtró y se lavó con DMF, MeOH y CH_{2}Cl_{2}. La resina (1,1 g) se suspendió en 10 ml de DMF que contenían 250 mg de PyBOP. El pH se ajustó a 8-9 con DIEA y la resina se agitó durante 1 hora. La resina se filtró, se lavó con DMF y CH_{2}Cl_{2}, luego se resuspendió en DMF. El acoplamiento se repitió usando 125 mg de PyBOP. La resina se filtró, se lavó con DMF, MeOH y CH_{2}Cl_{2} y se secó. La resina se trató entonces con HF y el péptido se purificó tal como se ha mencionado anteriormente.
Compuesto 57: AVSEHQLLHD KGK
\angdcha
SIQ
\angizda
DLRR RELLEKLLEK LHTA-NH_{2} (SEQ ID NO: 71)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly}
\hskip1.1mm\angdcha
\hskip-1.1mm\sac{Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp}
\hskip-1.1mm\angizda
\hskip1.1mm\sac{Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala –NH_2 (SEQ ID NO: 71)
Datos físicos
p.f. 142,5-163,5ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-34,31º (c 0,17, H_{2}O)
FAB(C_{175}H_{298}N_{56}O_{50}): [M+H]^{+} 3986,4
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 1,9(2); Glx, 5,9(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,2(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 2,0(2);
Arg, 3,0(3); Thr, 1,0(1); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,0(8); Lys,
4,0(4).\cr}
Ejemplo II
El compuesto 1 con [Met^{34}, Ala^{35}], AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEK-LLEKLHTMA-NH_{2}, (SEQ ID NO: 25), se preparó y se purificó siguiendo los procedimientos del ejemplo 1. Este polipéptido se convirtió en homoserina lactona tal como sigue. El péptido purificado (160 mg) se disolvió en ácido fórmico al 44% (4 ml). Esta disolución se combinó con una disolución premezclada de bromuro de cianógeno (700 mg) y fenol (1,6 mg) en ácido fórmico al 44% (4 ml) a 0ºC. La disolución se agitó a 0ºC durante 2 h y a temperatura ambiente durante 2 h. La formación del producto se monitorizó por HPLC (Vydac® C-18, 300 \ring{A}, 4,6 x 250 mm, flujo de 1,2 ml/min, gradiente de acetonitrilo al 25-45% en TFA al 0,1% durante 10 min). La reacción se completó en un plazo de 4 h. La mitad de la muestra se concentró y se purificó mediante RP-HPLC preparativa (Vydac® C-18, gradiente de acetonitrilo al 25-45% en TFA al 0,1%). Las fracciones del péptido homoserina lactona se reunieron y se liofilizaron para dar 28 mg de sólido blanco a una pureza de >95%, compuesto 4.
Compuesto 4: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX (X=hSerlac, SEQ ID NO: 9)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr hSerlac (SEQ ID NO: 9)
Datos físicos
p.f. 138-142ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-50,66º (c 0,1, H_{2}O)
FAB(C_{176}H_{299}N_{55}O_{52}): [M+H]^{+} 4017,61
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 6,1(6); Ser, 1,8(2);
His, 3,0(3); Thr,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 1,1(1);
Arg, 2,7(3); Val, 1,0(1); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 8,2(8); Lys, 3,8(4); Gly 1,09(1); hSer,\cr
 \+
1,09(1).\cr}
Similarmente, se preparó el compuesto 65 según este procedimiento.
Compuesto 65: AVSEIQFX_{1}HN KGKHLSSX_{1}ER VEWLRKKLQD VHNX_{2} (SEQ ID NO: 79) (X_{1} = L-norleucina; X_{2} = homoserina lactona)
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Lys Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Nle Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn hSerlac (SEQ ID NO: 79)
Datos físicos
p.f. 166-176ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-52,22º (c 0,25, H_{2}O)
FAB(C_{180}H_{288}N_{54}O_{50}): [M+H]^{+} 4008,6
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 3,1(3); Glx, 4,8(5); Ser, 2,9(3);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Ala, 1,1(1);
Arg, 2,0(2); Val, 2,7(3); Phe,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 1,0(1); Leu + Nle, 5,9(4 + 2); Lys,
2,8(3).\cr}
Ejemplo III
Para preparar la amida de homoserina, el análogo sin purificar de hSerlactona, compuesto 4, se concentró y se trató con 25 ml de NH_{3} saturado en metanol. La disolución se agitó a 0ºC durante 2 h y a temperatura ambiente durante 16 h. La reacción se monitorizó por HPLC (Vydac® C-18, 300 \ring{A}, 4,6 x 250 mm, flujo de 1,2 ml/min, gradiente de acetonitrilo al 20-45% en TFA al 0,1%) y se completó en un plazo de 18 h. La disolución se concentró y se purificó mediante RP-HPLC preparativa (Vydac® C-18, gradiente de acetonitrilo al 25-45% en TFA al 0,1%). Las fracciones del péptido amida de homoserina se reunieron y se liofilizaron para dar 30 mg de sólido blanco a una pureza de >98%, compuesto 3.
Compuesto 3: AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX-NH_{2} (X=hSer, SEQ ID NO: 8)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr hSer NH_{2} (SEQ ID NO: 8).
Datos físicos
p.f. 138-142ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-45,97º (c 0,25, H_{2}O)
FAB(C_{176}H_{302}N_{56}O_{52}): [M+H]^{+} 4033,9
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 6,1(6); Ser, 1,6(2);
His, 2,8(3); Gly,\cr  \+ 0,97(1); hSer,
0,97(1); Thr, 1,0(1); Ala, 1,0(1); Arg,\cr  \+
2,9(3); Val, 1,0(1); Ile, 1,0(1); Leu,
7,6(8); Lys,\cr  \+
3,9(4).\cr}
De manera similar, los compuestos 22, 23 y 28 se prepararon siguiendo este procedimiento.
Compuesto 22: AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNX-NH_{2} (SEQ ID NO: 36) (X = homoserina)
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn hSer NH_{2} (SEQ ID NO: 36)
Datos físicos
p.f. 69,4-128ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-43,93º (c 0,15, H_{2}O)
FAB(C_{179}H_{302}N_{56}O_{49}): [M+H]^{+} 4022,9
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 4,9(5); Ser, 2,6(3);
His, 2,8(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); Ala, 1,0(1);
Arg, 3,0(3); Val, 1,0(1); Phe,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,8(9); Lys,
3,4(3).\cr}
Compuesto 23: AVSEIQFLHN KGKHLSSLRR RELLEKLLEK LHNX-NH_{2} (SEQ ID NO: 37) (X = homoserina)
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Lys Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn hSer NH_{2} (SEQ ID NO: 37)
Datos físicos
p.f. 87,1-142,1ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-52,14º (c 0,41, H_{2}O)
FAB(C_{179}H_{303}N_{57}O_{49}): [M+H]^{+} 4038
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 4,9(5); Ser, 2,7(3);
His, 2,8(3); Gly,\cr  \+ 1,0(1); hSer, 1,0(1);
Ala, 1,0(1); Arg, 3,0(3); Val,\cr  \+
1,1(1);Phe, 0,9(1); Ile, 0,9(1); Leu,
7,9(8); Lys,\cr  \+
3,7(4).\cr}
Compuesto 28: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER LHTAGRRX-NH_{2} (SEQ ID NO: 42) (X = homoserina)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Ala Gly Arg Arg hSer NH_2} (SEQ ID NO: 42)
Datos físicos
p.f. 80ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-48,64º (c 0,09, H_{2}O)
FAB(C_{193}H_{334}N_{70}O_{56}): [M+H]^{+} 4530,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,2(2); Glx, 6,1(6); Ser, 1,7(2);
His, 3,0(3); Gly,\cr  \+ 1,9(2); hSer, 1,0(1);
Thr, 1,0(1); Ala, 2,1(2); Arg,\cr  \+ 7,2(7);
Val, 0,8(1); Ile, 1,0(1); Leu, 8,4(8); Lys,\cr 
\+
2,1(2).\cr}
Las alquilamidas de homoserina se prepararon de manera similar a partir de la homoserina lactona disolviéndola en DMF que contenía un exceso de la alquilamina correspondiente. Tras agitar a temperatura ambiente durante varios días (la reacción se monitorizó mediante HPLC analítica), la mezcla se evaporó hasta la sequedad y el péptido se purificó mediante HPLC preparativa. Alquilamidas de homoserina representativas son los compuestos 55 y 56.
Compuesto 55: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-NHCH_{2}CH_{3} (SEQ ID NO: 69) (X = homoserina)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr hSer NHCH_{2}CH_{3} (SEQ ID NO: 69)
Datos físicos
p.f. (no determinado) 
\
[\alpha]_{D}^{25} (no determinado)
FAB(C_{178}H_{306}N_{56}O_{52}): [M+H]^{+} 4063,0
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 5,8(6); Ser, 1,7(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 0,9(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 0,9(1); Arg, 3,0(3); Val,\cr  \+ 1,1(1);
Ile, 1,0(1); Leu, 8,4(8); Lys, 3,7(4); hSer,\cr
 \+
0,9(1).\cr}
Compuesto 56: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-NHCH_{2}CH_{2}C_{6}H_{5} (SEQ ID NO: 70) (X = homoserina)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr hSer NHCH_{2}CH_{2}C_{6}H_{5} (SEQ ID NO: 70)
Datos físicos
p.f. (no determinado) 
\
[\alpha]_{D}^{25} (no determinado)
FAB(C_{184}H_{310}N_{56}O_{52}): [M+H]^{+} 4138,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,0(2); Glx, 5,9(6); Ser, 1,7(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 0,9(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 0,9(1); Arg, 3,0(3); Val,\cr  \+ 1,0(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,0(8); Lys, 4,1(4); hSer,\cr
 \+
0,9(1).\cr}
Ejemplo IV
La sal de cesio del ácido N^{\alpha}-Boc-N^{\gamma}-Fmoc-L-2,4-diaminobutírico se unió a la resina de Merrifield (DMF, 50ºC, 48 h) y se usó en una síntesis en fase sólida en lugar de la resina de Boc-Ala como en el ejemplo I. Tras la finalización de la síntesis, el péptido se trató con piperidina al 20% en DMF a temperatura ambiente durante 30 minutos para eliminar el grupo protector Fmoc de las cadenas laterales. El péptido protegido se cicló espontáneamente a lactama, escindiéndose así de la resina. La disolución se filtró de la resina y se evaporó al vacío para dar un aceite. El resto se trató con HF líquido como en el ejemplo I para dar el péptido no protegido sin purificar. El péptido se trató y se purificó como en el ejemplo I.
Compuesto 49: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX (SEQ ID NO: 63) (X = L-2,4-diaminobutiril lactama)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr L-2,4-diaminobutiril lactama (SEQ ID NO: 63)
Datos físicos
p.f. 161-181ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-48,38º (c 0,25, H_{2}O)
FAB(C_{176}H_{300}N_{56}O_{51}): [M+H]^{+} 4016,8
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 6,3(6); Ser, 1,7(2);
His, 3,3(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,0(1);
Ala, 2,1(2); Arg, 2,9(3); Val,\cr  \+ 0,9(1);
Ile, 0,9(1); Leu, 8,0(8); Lys,
3,8(4).\cr}
Ejemplo V
Una disolución acuosa del análogo de la homoserina lactona del ejemplo III se trató con esterasa hepática porcina (Sigma Chemical Company, St. Louis, MO). La hidrólisis de la lactona a homoserina C-terminal se monitorizó mediante HPLC analítica. Cuando se consideró que la hidrólisis estaba completa, el material se purificó mediante HPLC preparativa tal como en el ejemplo I.
Compuesto 37: AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK LHTX-OH (SEQ ID NO: 51) (X = homoserina)
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr hSer OH (SEQ ID NO: 51)
Datos físicos
p.f. (no determinado) 
\
[\alpha]_{D}^{25} (no determinado)
FAB(C_{176}H_{301}N_{55}O_{53}): [M+H]^{+} 4035,1
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asx, 2,1(2); Glx, 5,9(6); Ser, 2,0(2);
His, 3,1(3); Gly,\cr  \+ 0,8(1); hSer, 0,8(1);
Thr, 1,0(1); Ala, 1,0(1); Arg,\cr  \+ 3,0(3);
Val, 1,3(1); Ile, 1,0(1); Leu, 8,1(8); Lys,\cr 
\+
3,8(4).\cr}
Ejemplo VI
Tras el ejemplo I, el péptido protegido-resina BocAVS(Bzl)E(OBz)H(Bom)QLLHD(OBzl)R(Ts)GR(Ts)S(Bzl)IQD(OBz)-LR(Ts)R(Ts)E(OBz)LLE(OBzl)R(Ts)LLK(Fmoc)R(Ts)LH(Bom)T(Bzl)A-O-PAM se sintetizó en una escala de 0,35 mmoles. Todos los grupos N^{\alpha} se protegieron con t-butoxicarbonilo (Boc); los grupos protectores de las cadenas laterales fueron los indicados. Tras la finalización de la síntesis, la resina unida al péptido se trató con 50 ml de piperidina al 20% en dimetilformamida (DMF) a temperatura ambiente durante 30 minutos para eliminar el grupo protector fluorenilmetoxi-carbonilo (Fmoc) en la lisina. La resina se lavó sucesivamente con DMF, MeOH, CH_{2}Cl_{2} y se secó para dar 1,6 g de péptido parcialmente protegido. Se acilaron 0,8 g (0,175 mmoles) del péptido parcialmente protegido en la lisina con 0,44 g (0,3 mmoles) de ácido metoxidi(etilenoxi)acético [PEG(2) CH_{2}COOH] en presencia de 0,16 g (0,3 mmoles) de hexafluorofosfato de benzotriazoliloxi-tris(pirrolidino)fosfonio (PyBop) y 0,067 g (0,525 mmoles) de diisopropiletil amina (DIEA) en 20 ml de DMF a temperatura ambiente durante 5 h. Tras las 5 h, la resina se filtró y se lavó sucesivamente con DMF, MeOH y CH_{2}Cl_{2}. La etapa de acilación se repitió dos veces hasta que se obtuvo un resultado negativo con ninhidrina en la resina. El péptido final se escindió de la resina con la eliminación de los grupos protectores de las cadenas laterales y la purificación como en el ejemplo I; se obtuvieron 100 mg del compuesto 19.
Compuesto 19: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (SEQ ID NO: 18) CH_{3}O(CH_{2}CH_{2}O)_{2}CH_{2}C=0
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu}
Lys(COCH_{2}PEG2) Arg Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 18)
Datos físicos
p.f. 145-195ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-44,60º (c 0,2, H_{2}O)
FAB(C_{183}H_{316}N_{64}O_{54}): [M+H]^{+} 4276,2
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,1(2); Glu, 5,0(5); Ser, 1,6(2);
His, 2,9(3); Gly,\cr  \+ 0,9(1); Thr, 1,9(2);
Arg, 7,1(7); Val, 1,1(1); Ile,\cr  \+ 1,0(1);
Leu, 8,0(8); Lys,
0,9(1).\cr}
Ejemplo VII
El péptido se sintetizó, se escindió y se purificó de la misma forma que en el ejemplo IV, excepto porque se usó el ácido 2-metoxipoli(etilén-oxi)acético [PEG(5000)CH_{2}CO_{2}H] como el agente acilante. 0,8 g (0,175 mg) de péptido parcialmente protegido dieron 300 mg de compuesto 20 puro.
Compuesto 20: AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH (SEQ ID NO: 19) CH_{3}O(CH_{2}CH_{2}O)_{110}CH_{2}C=0
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu}
Lys(COCH_2PEG5000)\sac{Arg Leu His Thr Ala OH} (SEQ ID NO: 19)
Datos físicos
p.f. 105ºC 
\
[\alpha]_{D}^{25}-22,95º (c 0,11, HOAc ac. al 50%) 
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 AAA: \+ Asp, 2,0(2); Glu, 4,8(5); Ser, 1,6(2);
His, 2,6(3); Gly,\cr  \+ 1,1(1); Thr, 1,1(1);
Arg, 7,3(7); Val, 0,8(1); Ile,\cr  \+ 0,9(1);
Leu, 8,3(8); Lys, 1,1(1); Ala,
1,8(2).\cr}
Ejemplo VIII Síntesis del gen análogo de hPTHrp(1-34)
Se diseñó un gen sintético que codifica para el compuesto 4 (SEQ ID NO: 9) análogo de hPTHrp(1-34), teniendo la secuencia nucelotídica y los sitios de restricción enzimática mostrados en la figura 1. Los oligodesoxinucleótidos requeridos se prepararon con un sintetizador de ADN (Milligen/Biosearch) usando el proceso de la fosforamidita de Sinha, et al., Nucleic Acid Research 12, 4539-4557 (1984). Tras la desprotección, los oligonucleótidos sin purificar se purificaron mediante electroforesis en gel sobre geles preparativos de poliacrilamida al 15%. Los oligonucleótidos se localizaron con UV, se escindieron del gel, se desalinizaron sobre cartuchos Sep-pak® C18 de Waters y se liofilizaron.
Se llevó a cabo la amplificación mediante la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en un termociclador de Perkin-Elmer Cetus, con 25 ciclos de: 94ºC durante 1 minuto, 50ºC durante 2 minutos y 72ºC durante 3 minutos, usando reactivos, incluyendo la Taq polimerasa, del kit de amplificación de ADN ``GeneAmp'' (Perkin-Elmer Cetus).
Se prepararon dos oligonucleótidos solapantes, un 88mero (2 \mug), PTH3 (SEQ ID NO: 31):
CCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAGC ATG GCT GTT TCT GAA CAT CAG 45
\hskip5cm
Met Ala Val Ser Glu His Gln
\vskip0cm
\vskip-3mm\hskip6.43cm
1
\hskip2.15cm
5
CTG CTT CAT GAC AAA GGT AAA TCG ATT CAA GAT CTG AGA CGT C 88
Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg
\vskip0cm
\vskip-3mm\hskip1.9cm
10
\hskip2.65cm
15
\hskip2.65cm
20
y un 90mero antisentido (2 \mug), PTH4 (SEQ ID NO: 32):
CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATCTAGA CAT AGT ATG CAG CTT TTC 46
\hskip5cm
Met Thr His Leu Lys Glu
\vskip0cm
\vskip-3mm\hskip7.2cm
30
\hskip2.65cm
AAG CAG TTT CTC CAG CAG CTC GCG ACG TCT CAG ATC TTG AAT 88
Leu Leu Lys Glu Leu Leu Glu Arg Arg Arg Leu Asp Gln Ile
\vskip0cm
\vskip-3mm\hskip1.9cm
25
\hskip2.3cm
20
\hskip2.5cm
15
CG 90,
como secuencia de ADN molde para el gen análogo de hPTHrp(1-34). Utilizando los dos cebadores flanqueantes, PTHPCR1:
CCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAG (SEQ ID NO: 33)
y PTHPCR2: CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATC (SEQ ID NO: 34), se amplificó el gen completo por PCR. Los productos de ADN amplificados se purificaron mediante electroforesis en gel, sobre gel de agarosa NuSieve® al 4%. La banda que contenía el gen sintético análogo de hPTHrp(1-34), de aproximadamente 150 bases de longitud, se escindió del gel y se aislaron aproximadamente 200 ng de ADN por extracción de ADN en gel vítreo Elu-Quik® (Schleicher & Schuell, Keene, NH).
Ejemplo IX Clonación molecular de un gen análogo de hPTHrp(1-34)
Para subclonar el gen análogo de hPTHrp(1-34) del ejemplo VI, se aislaron 200 ng del ADN amplificado y se cortaron mediante las enzimas de restricción HinD III y Sac II. Tal como se muestra en la figura 2, el ADN se ligó a 2 \mug del plásmido TrpLE 18 Prot (Ile^{3},Pro^{5}), previamente escindido con Hind III y Sac II.
El plásmido resultante, TrpLE 18 hPTHrp(1-34)1, que contenía una copia del gen análogo de hPTHrp(1-34), se transformó entonces en células competentes de E. coli HB-101 (CLONTECH, Palo Alto, CA). Los transformantes se sometieron a análisis de PCR para verificar la inserción. Se seleccionaron las colonias de células transformadas y se hirvieron en 200 \mul de agua durante 5 minutos; 2 \mul se sometieron a PCR con dos cebadores que flanqueaban el inserto. El producto de la PCR se analizó entonces sobre gel de agarosa al 1% para confirmar la presencia de una copia del inserto génico hPTHrp(1-34). El constructo TrpLE 18 hPTHrp(1-34)1 se verificó entonces mediante secuenciación de ADN en un secuenciador automatizado de ADN (Applied Biosystems Modelo 373A, Foster City, CA) usando el kit Dye Deoxy Terminator Sequencing del vendedor.
Ejemplo X Construcción de un vector Trp LE 18 que contiene múltiples copias del gen análogo de hPTHrp(1-34)
Los sitios de restricción únicos Nhe I y Xba I se localizan cerca del comienzo y del final de la secuencia del gen análogo de hPTHrp(1-34). Estos dos sitios, que reconocen diferentes secuencias, pero producen idénticos extremos cohesivos de cadena sencilla, permiten la construcción de múltiples copias de genes hPTHrp(1-34) dentro del vector Trp LE 18.
La estrategia para la construcción de secuencias repetidas de hPTHrp(1-34) en tandem se representa en la figura 3. En reacciones separadas, se escindieron 5 \mug del plásmido Trp LE 18 hPTHrp(1-34)1 que contenía una única copia del gen, con Bam HI + Nhe I y Xba I + Bam HI. A partir de cada digesto se aislaron aproximadamente 300 ng del fragmento que contenía el gen análogo de hPTHrp(1-34). Estos dos fragmentos se mezclaron y se ligaron para formar el plásmido Trp LE 18 hPTHrp(1-34)2. Este plásmido se usó para transformar células competentes de E. coli HB 101. Se usó la medida del tamaño de los productos transformados de la PCR sobre gel de agarosa al 1% para determinar la presencia de dos copias del inserto génico hPTHrp(1-34). El TrpLE 18 hPTHrp(1-34)2 que contenía dos copias del gen se confirmó luego mediante secuenciación de ADN. La fusión correcta de los dos genes de hPTHrp(1-34) da como resultado la eliminación de los sitios Nhe I y Xba I en la unión. Esto hace únicos a los sitios Xba I y Nhe I restantes flanqueando los genes en tandem.
Mediante la repetición de este procedimiento, se construyó el plásmido final Trp LE 18 hPTHrp(1-34)4 que contenía cuatro copias del gen hPTHrp(1-34), tal como se muestra en la figura 4. Mediante el análisis de la secuencia del ADN se encontró que la secuencia de Trp LE 18 hPTHrp(1-34)4 era correcta.
Ejemplo XI Expresión y purificación de Trp LE 18 hPTHrp(1-34)4 Inducción de Trp LE 18 hPTHrp(1-34)4
Se inoculó un cultivo inicial de 50 ml de medio de cultivo LB, J,H. Miller, ``Experiments in Molecular Genetics,'' pág. 431 (1972), incorporado al presente documento mediante referencia, que contenía 50 \mug/ml de ampicilina y 100 \mug/ml de triptófano, con células de E. coli que contenían el plásmido Trp LE 18 hPTHrp(1-34)4, y se dejaron crecer durante la noche a 37ºC con agitación vigorosa hasta alcanzar una A_{550} de aproximadamente 6. Se precalentaron a 37ºC dos litros del medio de cultivo LB para producción y se sembraron con 20 ml del cultivo inicial para dar una A_{550} de aproximadamente 0,06. El cultivo se dejó crecer entonces con agitación vigorosa hasta alcanzar una A_{550} de entre 0,6 y 0,8, sobre el que se añadieron 2 ml de una disolución 10 mg/ml de ácido indol acrílico (IAA). El crecimiento continuó con buena aireación durante aproximadamente 16 h hasta alcanzar una A_{550} final de aproximadamente 6 (normalmente, de entre 4 y 10). Las células se concentraron mediante centrifugación y se resuspendieron en 500 ml de disolución tampón con Tris-HCl 50 mM, pH 7,5 y EDTA 0,1 mM (tampón Tris).
La suspensión se sometió a ultrasonidos usando un baño de ultrasonidos modelo 220F de Heat Systems-Ultrasonics, Inc. (equipado con una bocina acústica de ¾'') que se hizo funcionar al 50% de su capacidad total para evitar el sobrecalentamiento.
Para determinar el grado de inducción, se analizó la totalidad de las células mediante SDS-PAGE. Los productos génicos derivados del constructo TrpLE 18 hPTHrp(1-34)4 se observaron como una banda principal del PM pronosticado de aproximadamente 17.000. Esto representa hasta el 10% de la proteína celular total.
Aislamiento de la proteína de fusión
El lisado celular se centrifugó durante 15 minutos a aproximadamente 3600 x g hasta la sedimentación de la proteína de fusión Trp LE 18 hPTHrp(1-34)4; el sobrenadante se desechó. El sedimento se resuspendió en 200 ml de tampón Tris (normalmente, 40-80 A_{550}/ml).
Ejemplo XII Procesamiento de la proteína de fusión y purificación del péptido homo-Serlactona hPTHrp(1-34)
La escisión de los restos de metionina que flanquean la proteína de fusión multimérica hPTHrp(1-34) con CNBr libera el polipéptido deseado de homo-Serlactona hPTHrp(1-34), que se purificó tal como se describe a continuación.
Tratamiento con CNBr de la proteína de fusión
El sedimento lavado de la proteína de fusión TrpLE 18 hPTHrp(1-34)4 se resuspendió agitando suavemente en 60 ml de ácido fórmico al 70% (aproximadamente 20 mg/ml de la proteína total; normalmente el material procedente de las unidades de células a 1000 de A_{550} se disolvió en 3 ml). Se añadieron algunas gotas de octanol y se burbujeó N_{2} a través de la disolución durante 20 minutos antes de añadir 5,5 g de CNBr. Esta reacción se dejó proseguir durante 6 horas a 25ºC antes de mezclar un volumen igual de MeOH:H_{2} 50:50 con la muestra y posteriormente eliminarlo mediante evaporación por rotación. Tras de 2 a 4 repeticiones de este proceso, se eliminó esencialmente el volumen total del ácido fórmico y de CNBr. La muestra se evaporó entonces hasta sequedad, se redisolvió en 200 ml de agua y se liofilizó para el almacenamiento.
Purificación de homo-Serlactona hPTHrp(1-34)
El sobrenadante escindido por CNBr se dializó frente a KH_{2}PO_{4} 50 mM, pH 6,5, durante 24 horas con cambios múltiples. Durante la diálisis, el pH se mantuvo a 6,5. Tras la diálisis, los precipitados se eliminaron mediante centrifugación a alta velocidad. El sobrenadante se aclaró mediante un dispositivo de filtración Gelman de 0,45 \mu (Acrodisc 4184).
Cromatografía de intercambio catiónico
La purificación inicial se llevó a cabo mediante cromatografía de intercambio catiónico en una columna de HPLC de Bio-Gel TSK-SP-5PW (21,5 x 150 mm). Las condiciones cromatográficas para una velocidad de flujo de 8 ml/min y un rendimiento de aproximadamente 12 mg del péptido homo-Serlactona hPTHrp(1-34) sumamente purificado fueron:
1.
Equilibrar la columna en KH_{2}PO_{4} 50 mM, pH 6,5.
2.
Cargar 10 ml del sobrenadante aclarado (aproximadamente 1,5 l de caldo de cultivo o 2,4 g de inclusión).
3.
Lavar la columna con KH_{2}PO_{4} 50 mM, pH 6,5, que contiene NaCl 50 mM hasta que se estabiliza el nivel inicial.
4.
Eluir la columna con KH_{2}PO_{4} 50 mM, pH 6,5, que contiene NaCl 90 mM. Recoger las fracciones durante aproximadamente 45 minutos.
5.
Analizar las fracciones de NaCl 90 mM para determinar el contenido de homo-Serlactona hPTHrp(1-34) mediante HPLC C18 antes de la recogida y el almacenamiento.
Cromatografía de HPLC en fase inversa
Se usó una columna Poros R/H 4,6 x 100 mm de fase inversa (Perseptive Biosystems, Cambridge, MA) para la etapa de purificación final. Las condiciones cromatográficas fueron las siguientes:
\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Fase móvil \+ A: \+ ácido trifluoroacético al 0,1% (TFA)/agua\cr 
\+ B: \+ ácido trifluoroacético al 0,1%
(TFA)/CH _{3} CN\cr}
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\+\hfil#\hfil\+\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
  TIEMPO  \+  FLUJO  \+  %B \cr  0 min \+ 4 ml/min \+
15\cr  5,0 min \+ 4 ml/min \+ 40\cr  5,2 min \+ 4 ml/min \+ 100\cr 
6,8 min \+ 4 ml/min \+ 100\cr  7,0 min \+ 4 ml/min \+
15\cr}
El tiempo de retención de la homo-Serlactona hPTHrp(1-34), compuesto 4, fue de aproximadamente 2,943 minutos. El péptido purificado fue aproximadamente del 98% de pureza, tal como se determinó por espectroscopía de masas.
Ejemplo XIII
Los compuestos de esta invención se evaluaron para determinar su efecto sobre la masa ósea en ratas sometidas a ovariectomía, generalmente según los procedimientos de Gunness-Hey y Hock, Metab. Bone Dis. 5:177 181 (1984).
Se aclimataron ratas hembra adultas Sprague-Dawley, se agruparon por peso (n = 9, 10 ó 12) y se sometieron a ovariectomía bilateral (OVX) o cirugía simulada. La dosificación se inició 17 días después de la cirugía y se continuó durante 20 días. El compuesto de prueba se administró subcutáneamente una vez al día en vehículo al 2% de suero de rata / disolución salina.
Tras 20 días de dosificación, las ratas se sacrificaron y se les extirparon los fémures derechos. Los fémures se cortaron por la mitad y la mitad distal de los fémures (DHF) se separó adicionalmente en el hueso trabecular (TB) y el hueso cortical (CB) mediante perforación de la trabécula. Se extrajo el calcio y se midió mediante un analizador de calcio Calcette y se expresó como Ca óseo medio en mg/DHF/100 g de peso corporal.
Se usaron dos pruebas t de la muestra para comparar los grupos OVX y simulado. Se usó ANOVA de una vía para comparar los grupos OVX, seguido por la comparación múltiple de LSD (diferencia mínima significativa) de Fisher para comparar cada grupo de tratamiento con el vehículo.
La ovariectomía indujo pérdida de hueso total sustancial, principalmente procedente del hueso trabecular. El calcio óseo total fue del 47 al 54% inferior que para los controles operados simulados.
bPTH(1-34) y hPTHrp(1-34) a 80 \mug/kg/día proporcionaron aumentos estadísticamente significativos en el calcio óseo total para las ratas OVX tratadas, oscilando desde el 53 hasta el 95% y desde el 18 hasta el 40%, respectivamente; sin embargo, no hubo aumento significativo en el calcio óseo cortical.
Los compuestos de esta invención, dosificados a 80 \mug/kg/día, aumentaron el calcio óseo total en desde el 66 hasta el 138% y el calcio trabecular en desde el 87 hasta el 128%. El calcio óseo cortical, el espesor trabecular y el volumen óseo también aumentaron significativamente con respecto a los controles OVX no tratados.
En este ensayo, se probaron los compuestos siguientes:
Número de n Calcio óseo trabecular Calcio óseo total
compuesto (# de pruebas) (% de aumento (% de aumento
frente a OVX) frente a OVX)
Compuesto 1 (SEQ ID NO: 7) 6 101-128% 88-138%
Compuesto 2 (SEQ ID NO: 6) 3 87-102% 66-114%
Compuesto 4 (SEQ ID NO: 9) 3 - 88-114%
En estudios similares, a las ratas sometidas a ovariectomía se les administró la dosis durante 5, 10 y 20 días, a 40 ug/kg/día, con los resultados siguientes.
Número de n # de días (D) Calcio óseo total
compuesto (# de pruebas) de dosificación (% de aumento
frente a OVX)
Compuesto 1 (SEQ ID NO: 7) 3 20d 73-109%
Compuesto 4 (SEQ ID NO: 9) 5 20d 79-105%
Compuesto 4 (SEQ ID NO: 9) 1 10d 79%
Compuesto 49 (SEQ ID NO: 63) 1 10d 93%
Compuesto 4 (SEQ ID NO: 9) 1 5d 55%
Compuesto 42 (SEQ ID NO: 56) 1 5d 60%
Ejemplo XIV
A conejos hembra adultos blancos de Nueva Zelanda (Hazelton Research Products, Inc., 3,6 kg, n = 9-11/grupo de tratamiento) se les inyectó diariamente vehículo o 0,15 mg/kg de prednisona durante 13 meses. La densidad mineral ósea (BMD) se midió mediante absorciometría de rayos x de energía dual (Hologic Modelo QDR-1500W, Hologic, Inc., Waltham, MA) y se siguieron los marcadores bioquímicos del metabolismo óseo. Tras 9 meses, los subgrupos recibieron además 0,05, 0,15 ó 0,5 ug/kg/día sc del compuesto 1 (SEQ ID NO: 7). Dos meses después, las dosis se elevaron hasta 0,5, 3 y 10 ug/kg/día. El tratamiento con prednisona dio como resultado la rápida pérdida inicial (2-4 meses) seguido por BMD estable durante el resto del estudio. Se observaron pérdidas finales en BMD para los niveles iniciales de 12,4 \pm 1,3%, 18,1 \pm 1,9% y 11,8 \pm 2,5% en la vista A/P y la vista lateral de la columna lumbar y el fémur distal. Se observó una disminución menor (7,8 \pm 2,2%) en la diáfisis femoral. Las dosis iniciales inferiores no cambiaron estas cifras. Tras 30-60 días, 10 ug/kg del compuesto 1 en animales que continuaban tomando prednisona restablecieron la BMD en todos los sitios hasta valores no significativamente diferentes de los observados en los conejos control tratados con el vehículo solo durante los 12 meses. La osteocalcina sérica disminuyó 6,4 veces con respecto a un nivel inicial de 50 \pm 8 ng/ml en los conejos tratados con prednisona, pero volvió a ser normal con 
 \hbox{10 ug/kg}
concomitantes del compuesto 1.
(1) INFORMACIÓN GENERAL:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
SOLICITANTE: Syntex (EE.UU.) Inc.
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TÍTULO DE LA INVENCIÓN: MÉTODO PARA EL TRATAMIENTO DE LA OSTEOPENIA INDUCIDA POR CORTICOSTEROIDES
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
NÚMERO DE SECUENCIAS: 86
\vskip0.666000\baselineskip
(iv)
DIRECCIÓN DE CORRESPONDENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
DESTINATARIO: Heller Ehrman White & McAuliffe
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
CALLE: 525 University Ave.
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
CIUDAD: Palo Alto
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
ESTADO: CA
\vskip0.333000\baselineskip
(E)
PAÍS: EE.UU.
\vskip0.333000\baselineskip
(F)
CÓDIGO POSTAL: 94301
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
FORMA LEGIBLE EN ORDENADOR:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
TIPO DE MEDIO: Disquete
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
ORDENADOR: PC IBM compatible
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
SISTEMA OPERATIVO: PC-DOS/MS-DOS
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
SOFTWARE: PatentIn Release #1,0, Versión 1,25
\vskip0.666000\baselineskip
(vi)
DATOS ACTUALES DE LA SOLICITUD:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NÚMERO DE SOLICITUD:
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
FECHA DE PRESENTACIÓN:
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
CLASIFICACIÓN:
\vskip0.666000\baselineskip
(viii)
INFORMACIÓN DEL AGENTE:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE: Chow, Y. Ping
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
NÚMERO DE REGISTRO: 30.740
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
REFERENCIA/NÚMERO DE EXPEDIENTE: 27610-04
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
INFORMACIÓN SOBRE COMUNICACIONES TELEFÓNICAS:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
TELÉFONO: 415-324-7078
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
FAX: 415-324-0638
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 1:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 1:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Asn Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Phe
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 2:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 2:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Met His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Phe
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 3:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 3:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Phe
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 4:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 4:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu His His Leu Ile Ala Glu}
Ile His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 5:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 5:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Arg Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 6:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 6:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 7:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 7:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sa{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 8:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa34 = homoserina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 8:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 9:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa34 = homoserina lactona''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 9:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 10:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 10:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Gly Arg Arg}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 11:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 11:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu Lys Glu Leu
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 12:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 12:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 13:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 13:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Ala Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 14:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 14:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ala Gln Leu Leu His Asp Leu Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Ala Leu
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 15:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 15:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 16:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
0LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 16:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 17:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 17:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Lys Arg}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 18:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa29 = lisina- (OCCH_{2}(OCH_{2}CH_{2})_{2}OCH_{3})''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 18:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 19:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa29 = lisina- (OCCH_{2}(OCH_{2}CH_{2})_{110}OCH_{3})''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 19:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 20:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 20:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 21:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 21:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 22:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 22:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 23:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa8 = norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa18 = norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 23:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Xaa His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Xaa Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 24:
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iv)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa8 = norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa18 = norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 24:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Xaa His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Xaa Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 25:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 25:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Met Ala}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 26:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa8 = ácido glutámico o arginina''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Región
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``La secuencia 26 está embebida en las posiciones 22 a 31 de las secuencias 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 y 14.''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 26:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 27:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa8 = ácido glutámico, lisina o lisina-(OCCH2PEGX)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Región
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``La secuencia 27 está embebida en las posiciones 22 a 31 de las secuencias 15, 16, 17, 18 y 19.''
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 27:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 28:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Péptido
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``La secuencia 28 está embebida en las posiciones 22 a 31 de la secuencia 20.''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 28:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 29:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Péptido
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``La secuencia 29 está embebida en las posiciones 22 a 31 de la secuencia 21.''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 29:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 30:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Péptido
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``La secuencia 30 está embebida en las posiciones 22 a 31 de la secuencia 22.''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 30:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 31:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 88 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
TIPO DE CADENA: sencilla
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(iv)
ANTISENTIDO: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 31:
\vskip0.333000\baselineskip
\dddseqskip
CCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAGCATGGCT GTTTCTGAAC ATCAGCTGCT 
\hfill
\vskip0.333000\baselineskip
\dddseqskip
TCATGACAAA GGTAAATCGA TTCAAGATCT GAGACGTC 
\hfill
88 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 32:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 90 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
TIPO DE CADENA: sencilla
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(iv)
ANTISENTIDO: SÍ
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 32:
\vskip0.333000\baselineskip
\dddseqskip
CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATCTAGACA TAGTATGCAG CTTTTCAAGC 
\hfill
\vskip0.333000\baselineskip
\dddseqskip
AGTTTCTCCA GCAGCTCGCG ACGTCTCAGA TCTTGAATCG 
\hfill
90 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 33:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 23 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
TIPO DE CADENA: sencilla
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.333000\baselineskip
(iv)
ANTISENTIDO: NO
\vskip0.333000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 33:
\vskip0.333000\baselineskip
\dddseqskip
CCTCTAGATC TCCGCGCGCT AGC 
\hfill
23 
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 34:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 24 pares de bases
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: ácido nucleico
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
TIPO DE CADENA: sencilla
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: ADNc
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(iv)
ANTISENTIDO: SÍ
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 34:
\vskip0.333000\baselineskip
\dddseqskip
CCTCGAAGCT TATGCATCAT TATC 
\hfill
24 
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 35:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 35:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Tyr
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 36:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es homoserina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 36:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Xaa
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 37:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es homoserina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 37:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Lys Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Asn Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 38:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 38:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Lys Leu Lys Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 39:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 39:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 40:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 40:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Ala Pro}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 41:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 41:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Ala Gly Arg Arg}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 42:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 38 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 38
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es homoserina''
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 42:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Ala Gly Arg Arg Xaa}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 43:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 43:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Tyr
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 44:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 44:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Tyr Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 45:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 45:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Cys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 46:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 13
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es Cys(CH-2CONH(CH-2)-2NH(biotinilo))''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 46:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 47:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 13
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetilo)''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 47:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Xaa Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 48:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 48:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Gly}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 49:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 33 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 4
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa4 es Glu(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa10 es Asp(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 17
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa17 es Asp(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 22
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa22 es Glu(OCH3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 25
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa25 es Glu(OCH3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa29 es Glu(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 49:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Xaa His Gln Leu Leu His Xaa Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Xaa Leu Arg Arg Arg Xaa Leu Leu Xaa Lys Leu Leu Xaa Lys}
Leu His Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 50:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 33 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 4
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa4 es Glu(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa10 es Asp(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 17
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa17 es Asp(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 22
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa22 es Glu(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 25
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa25 es Glu(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa29 es Glu(OCH-3)''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 50:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Xaa His Gln Leu Leu His Xaa Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Xaa Leu Arg Arg Arg Xaa Leu Leu Xaa Lys Leu Leu Xaa Lys}
Leu His Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 51:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es homoserina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 51:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 52:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 52:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Pro}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 53:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 53:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Pro
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 54:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 54:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Pro
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 55:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 55:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Pro
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 56:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 32 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 56:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu Pro
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 57:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 57:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 58:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 58:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Ala Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 59:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LONGITUD: 42 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(C)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 59:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 60:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 42 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 13
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota = ``Xaa13 es Lys(dihidrocinamoílo)''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 60:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Xaa Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg}
\sac{Leu His Thr Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 61:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Leu8 es norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Leu18 es norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 61:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Thr Arg Ser Ala Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Tyr
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 62:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 62:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Met Ala}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 63:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 33 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 33
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es Thr 1,4-diaminobutiril lactama''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 63:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 64:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 64:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 65:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 65:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu His Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 66:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 66:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu His Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 67:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 67:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Ile Ala Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 68:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 68:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Glu}
Ile His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 69:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es homoserina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 69:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 70:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es homoserina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 70:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 71:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: ambas
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 71:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
Leu His Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 72:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 72:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 73:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 36 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 36
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es Ala 3-(2-naftil)-L-alanina''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 73:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Arg Ser Xaa}
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 74:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 74:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 75:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 38 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 75:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu Ile Arg Ala}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 76:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 76:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu Ile Arg}
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 77:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 36 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 77:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu Ile}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 78:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 78:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys}
\sac{Leu His Thr Ala Glu}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 79:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Leu8 es norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Leu18 es norleucina''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa es homoserina lactona''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 79:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Lys Gly Lys His Leu}
\sac{Ser Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu Arg Lys Lys Leu Gln Asp}
Val His Asn Xaa
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 80:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 32 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 80:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp}
\sac{Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His}
Thr Ala
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 81:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 28 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 81:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg}
\sac{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 82:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 27 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 82:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 83:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 41 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 83:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp}
\sac{Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His}
\sac{Leu His Arg Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 84:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 84:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg}
\sac{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg Leu His Ala Gly Arg Arg}
\sac{Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 85:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 1 y 4
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa1 y Xaa4 = Glu, Glu(OCH3), His o Phe''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 2
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa2 = Leu o Phe''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 5
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa5 = Lys o His''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 7 y 10
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa7 y Xaa10 = Leu o Ile''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa8 = Ala, Arg o Glu''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 9
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa9 = Lys o Glu''
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 85:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Xaa}
\vskip0.666000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA LA SEQ ID NO: 86:
\vskip0.666000\baselineskip
(i)
CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
TIPO: aminoácido
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.666000\baselineskip
(ii)
TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.666000\baselineskip
(iii)
HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.666000\baselineskip
(v)
TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 1 y 4
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa1 y Xaa4 = Glu, Glu(OCH3), His o Phe''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 2
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa2 = Leu o Phe''
\vskip0.666000\baselineskip
(ix)
CARACTERÍSTICA:
\vskip0.333000\baselineskip
(A)
NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.333000\baselineskip
(B)
LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.333000\baselineskip
(D)
OTRA INFORMACIÓN: /nota= ``Xaa8 = Glu, Lys o Lys(COCH2PEGX)''
\newpage
\vskip0.666000\baselineskip
(xi)
DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 86:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Xaa Xaa Leu Xaa Arg Leu Leu Xaa Arg Leu}

Claims (5)

1. Uso de un análogo polipeptídico sintético de la hormona paratiroidea (PHT), del péptido relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrp), o de un homólogo o análogo truncado, fisiológicamente activo, de PTH o PTHrp, o de una sal de los mismos, en el que los restos de aminoácidos (22-21) forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose dichos restos (22-31) entre aminoácidos hidrófilos (Haa) y aminoácidos lipófilos (Laa), ordenados en la secuencia:
\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Haa (Laa Laa Haa Haa) _{2} 
Laa\cr}
para la preparación de un medicamento para tratar la osteopenia inducida por corticosteroides.
2. El uso de la reivindicación 1, en el que la secuencia de restos de aminoácidos (22-31) se selecciona de (SEQ ID NOS: 85, 86, 26, 27, 28, 29 y 30).
3. El uso de la reivindicación 1, en donde el polipéptido tiene la SEQ ID NO: 7.
4. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la cantidad eficaz del polipéptido es desde aproximadamente 0,002 \mug de polipéptido/kg de masa corporal del paciente/día hasta aproximadamente 10 \mug de polipéptido/kg de masa corporal del paciente/día.
5. El uso de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dicho medicamento en la forma de dosificación unitaria comprende de aproximadamente 1 \mug hasta aproximadamente 1000 \mug de dicho polipéptido y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
ES96921256T 1995-06-07 1996-06-03 Metodo para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides. Expired - Lifetime ES2197946T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/477,022 US5821225A (en) 1992-07-14 1995-06-07 Method for the treatment of corticosteroid induced osteopenia comprising administration of modified PTH or PTHrp
US477022 1995-06-07

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2197946T3 true ES2197946T3 (es) 2004-01-16

Family

ID=23894185

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES96921256T Expired - Lifetime ES2197946T3 (es) 1995-06-07 1996-06-03 Metodo para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides.

Country Status (14)

Country Link
US (1) US5821225A (es)
EP (1) EP0835262B1 (es)
JP (2) JPH11508234A (es)
CN (1) CN1159341C (es)
AT (1) ATE233787T1 (es)
AU (1) AU6251596A (es)
BR (1) BR9608554A (es)
CA (1) CA2223832A1 (es)
DE (1) DE69626517T2 (es)
DK (1) DK0835262T3 (es)
ES (1) ES2197946T3 (es)
PT (1) PT835262E (es)
TR (1) TR199701546T1 (es)
WO (1) WO1996040775A1 (es)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5977070A (en) * 1992-07-14 1999-11-02 Piazza; Christin Teresa Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of compounds useful for the treatment of osteoporosis
US6544949B1 (en) * 1995-07-13 2003-04-08 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A.S. Analogs of parathyroid hormone
US5969095A (en) * 1995-07-13 1999-10-19 Biomeasure, Inc. Analogs of parathyroid hormone
US5955574A (en) * 1995-07-13 1999-09-21 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, S.A. Analogs of parathyroid hormone
US7410948B2 (en) 1995-07-13 2008-08-12 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifiques, Sas Analogs of parathyroid hormone
JP4142743B2 (ja) 1996-07-31 2008-09-03 ザ・ジェネラル・ホスピタル・コーポレイション 副甲状腺ホルモンに関連する新規ペプチド類似体
CN1210059C (zh) 1997-09-09 2005-07-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 使用PTHrP类似物的骨折愈合
EP1119251A4 (en) * 1998-10-07 2004-03-24 Univ Arkansas METHODS OF DETECTING APOPTOSIS REGULATING AGENTS FOR BONE ANABOLIZING THERAPY AND USES OF SUCH AGENTS
EP1123401A1 (en) * 1998-10-22 2001-08-16 The General Hospital Corporation BIOACTIVE PEPTIDES AND PEPTIDE DERIVATIVES OF PARATHYROID HORMONE (PTH) AND PARATHYROID HORMONE-RELATED PEPTIDE (PTHrP)
WO2001023521A2 (en) * 1999-09-29 2001-04-05 The General Hospital Corporation Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (pth)
AU2002339843B2 (en) * 2001-07-23 2007-12-06 The General Hospital Corporation Conformationally constrained parathyroid hormone (PTH) analogs
AU2003207512B2 (en) * 2002-01-10 2008-06-12 Osteotrophin Llc Treatment of bone disorders with skeletal anabolic drugs
AU2003220380A1 (en) * 2003-03-19 2004-11-19 Bristol-Myers Squibb Company CONFORMATIONALLY CONSTRAINED PARATHYROID HORMONES WITH Alpha-HELIX STABILIZERS
JP4871128B2 (ja) 2003-07-17 2012-02-08 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 高次構造的に制約された副甲状腺ホルモン（ｐｔｈ）アナログ
AU2006315132A1 (en) * 2005-11-10 2007-05-24 Board Of Control Of Michigan Technological University Black bear parathyroid hormone and methods of using black bear parathyroid hormone
WO2008019062A2 (en) * 2006-08-04 2008-02-14 The General Hospital Corporation Polypeptide derivatives of parathyroid hormone (pth)
US7803770B2 (en) 2006-10-03 2010-09-28 Radius Health, Inc. Method of treating osteoporosis comprising administration of PTHrP analog
DK2957278T3 (en) 2006-10-03 2017-07-31 Radius Health Inc STABLE COMPOSITION COMPREHENSIVE PTHRP AND APPLICATIONS THEREOF
USRE49444E1 (en) 2006-10-03 2023-03-07 Radius Health, Inc. Method of treating osteoporosis comprising administration of PTHrP analog
MX346714B (es) * 2007-08-01 2017-03-24 The General Hospital Corp * Metodos de analisis y seleccion usando receptores acoplados a proteina g y composiciones relacionadas.
JP2013512688A (ja) 2009-12-07 2013-04-18 ミシガン テクノロジカル ユニバーシティ クロクマの副甲状腺ホルモン及びクロクマの副甲状腺ホルモンを使用する方法
CN103002906B (zh) 2010-05-13 2017-12-29 总医院有限公司 甲状旁腺激素类似物及其应用
US20140088597A1 (en) * 2012-09-26 2014-03-27 Trustees Of Boston University Method of increasing bone density during surgery
RS64115B1 (sr) 2014-03-28 2023-04-28 Univ Duke Lečenje kancera dojke upotrebom selektivnih modulatora receptora estrogena
IL310069B2 (en) 2015-04-29 2025-08-01 Radius Pharmaceuticals Inc Rad1901 for use in the treatment of cancer
CN117417263A (zh) 2017-01-05 2024-01-19 雷迪厄斯制药公司 Rad1901-2hcl的多晶型形式
US10996208B2 (en) 2017-04-28 2021-05-04 Radius Health, Inc. Abaloparatide formulations and methods of testing, storing, modifying, and using same
KR102792490B1 (ko) 2018-07-04 2025-04-04 래디어스 파마슈티컬스, 인코포레이티드 Rad1901-2hcl의 다형 형태
JP7667083B2 (ja) 2019-02-12 2025-04-22 ラジウス ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 方法および化合物

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5171670A (en) * 1989-05-12 1992-12-15 The General Hospital Corporation Recombinant dna method for production of parathyroid hormone
CA2040264A1 (en) * 1990-04-12 1991-10-13 Tatsuhiko Kanmera Parathyroid hormone antagonists
JPH0532696A (ja) * 1990-09-28 1993-02-09 Takeda Chem Ind Ltd 副甲状腺ホルモン誘導体
WO1993006846A1 (en) * 1991-10-10 1993-04-15 Pang Peter K T Parathyroid hormone analogues and use in osteoporosis treatment
US5317010A (en) * 1991-10-10 1994-05-31 Peter K. T. Pang Parathyroid hormone analogues substituted at AA 25, 26, 27, and use in osteoporosis treatment
US5434246A (en) * 1992-03-19 1995-07-18 Takeda Chemical Industries, Ltd. Parathyroid hormone derivatives
US5382658A (en) * 1992-04-03 1995-01-17 Allelix Biopharmaceuticals Inc. Stability-enhanced variants of parathyroid hormone
US5589452A (en) * 1992-07-14 1996-12-31 Syntex (U.S.A.) Inc. Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis
CN1070500C (zh) * 1993-07-13 2001-09-05 森德克斯(美国)股份有限公司 甲状旁腺激素类似物和甲状旁腺激素相关肽：合成和治疗骨质疏松症的用途

Also Published As

Publication number Publication date
EP0835262B1 (en) 2003-03-05
BR9608554A (pt) 1999-07-06
PT835262E (pt) 2003-07-31
JP2008024709A (ja) 2008-02-07
EP0835262A1 (en) 1998-04-15
US5821225A (en) 1998-10-13
CN1159341C (zh) 2004-07-28
CA2223832A1 (en) 1996-12-19
DK0835262T3 (da) 2003-07-07
ATE233787T1 (de) 2003-03-15
HK1010376A1 (en) 1999-06-17
AU6251596A (en) 1996-12-30
TR199701546T1 (xx) 1998-02-21
JPH11508234A (ja) 1999-07-21
DE69626517D1 (de) 2003-04-10
DE69626517T2 (de) 2004-03-25
CN1187203A (zh) 1998-07-08
WO1996040775A1 (en) 1996-12-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2197946T3 (es) Metodo para el tratamiento de la osteopenia inducida por corticosteroides.
EP0651765B1 (en) Analogs of pth and pthrp, their synthesis and use for the treatment of osteoporosis
US5977070A (en) Pharmaceutical compositions for the nasal delivery of compounds useful for the treatment of osteoporosis
WO1995002610A1 (en) Analogs of parathyroid hormone and parathyroid hormone related peptide: synthesis and use for the treatment of osteoporosis
US7595294B2 (en) Vasoactive intestinal polypeptide pharmaceuticals
EP1804820A2 (en) Vasoactive intestinal polypeptide pharmaceuticals
HK1010376B (en) Method for the treatment of corticosteroid induced osteopenia
MXPA98001630A (es) Composiciones farmacéuticas de administración nasal de compuestos utiles para el tratamiento de osteoporosis
NO319848B1 (no) Syntetiske peptidanaloger til PTH og PTHrp, fremgangsmate for fastfasesyntese derav, farmasoytiske preparater som omfatter dem, og anvendelse derav til fremstilling av medikamenter til behandling av reduksjoner i benmasse.
Was Novel recombinant protein constructs for improved insulin-like growth factor-1 delivery