ES2198409T3 - Utilizacion del interferon-beta humano para la preparacion de composiciones farmaceuticas para el tratamiento de la leucemia mieloide cronica. - Google Patents
Utilizacion del interferon-beta humano para la preparacion de composiciones farmaceuticas para el tratamiento de la leucemia mieloide cronica.Info
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Abstract
LA INVENCION SE REFIERE AL USO DE INTERFERON-BETA HUMANO EN LA PREPARACION DE COMPOSICIONES FARMACEUTICAS PARA TRATAMIENTO DE LA LEUCEMIA MIELOIDE CRONICA (CML).
Description
Utilización del interferón-beta
humano para la preparación de composiciones farmacéuticas para el
tratamiento de la leucemia mieloide crónica.
La presente invención se refiere al uso del
interferón \beta humano para la preparación de composiciones
farmacéuticas para el tratamiento de la leucemia mieloide crónica
(CML, abreviadamente en inglés ``chronic myeolid leukemia'').
Todas las células de la sangre periférica surgen
de un progenitor celular común conocido como célula madre
hematopoyética pluripotente. Una propiedad importante de las
células madre es la autorrenovación, que asegura un abastecimiento
continuo a lo largo de la vida del individuo. Cuando se requiera,
una célula pluripotente puede empezar a diferenciarse, tras
sucesivas divisiones, pierde la capacidad de autorrenovación y su
progenie queda comprometida con una particular línea de desarrollo.
Seguidamente, estos progenitores darán lugar a todas las células
sanguíneas capaces de finalidades funcionales.
La formación de las células sanguíneas maduras
sucede al final de un proceso que comprende la proliferación y
maduración de células progenitoras específicamente comprometidas de
cada línea. De este modo, las células pluripotentes son capaces de
producir un clon que consiste en un cierto número de eritrocitos,
granulocitos, trombocitos y linfocitos, junto con sus células
progenitoras intermedias.
En circunstancias normales, la médula ósea es
capaz de responder rápidamente a un incremento de la demanda de un
tipo particular de célula. Cómo llega a hacerlo es el objeto de
muchas de las investigaciones actuales. Se sabe que el proceso de
proliferación y diferenciación de las células progenitoras está
controlado por diversos factores de crecimiento conocidos como
hormonas hematopoyéticas, por ejemplo, eritropoyetina y diversos
factores estimuladores de colonias.
La eritropoyesis consiste en un proceso que
empieza en el estadio de la formación de las tempranas unidades
formadoras de brotes eritroides (BFU-E,
abreviadamente en inglés ``burst-forming
unit-erythroid'', el precursor de eritrocitos más
temprano), controlada principalmente mediante la
interleuquina-3 (IL-3) y,
subsecuentemente, su maduración adicional dando unidades formadoras
de colonias eritroides (CFU-E, abreviadamente en
inglés ``colony-forming
unit-erythroid'') y normoblastos, mediante la
eritropoyetina. Los normoblastos maduran dando reticulocitos y,
seguidamente, eritrocitos, las células sanguíneas maduras.
Se sabe que puede haber diferencias en la edad de
las células progenitoras de la médula ósea y de las circulantes.
Varios grupos de investigación han estudiado los efectos de los
tres tipos de interferón - alfa, beta y gamma - sobre las células
progenitoras normales de la médula ósea. Se ha encontrado que los
tres tipos de interferón ejercen un efecto supresor del crecimiento
de las células formadoras de colonias de la médula ósea normal
(Broxmeyer, Hal E. y col. (1983), Comparative análisis of the
influence of human gamma, alpha and beta interferons on human
multipotential (CFU-GEMM), erythroid
(BFU-E) and granulocyte-macrophage
(CFU-GM) progenitor cells, J. Immunol. 131:
1300-1305). De este modo, han sido implicados en la
supresión in vitro de la formación de colonias por células
progenitoras multipotenciales (CFU-GEMM, unidad
formadora de colonias de granulocitos, eritroides, macrófagos y
megacariocitos - abreviadamente en inglés
``colony-forming unit-granulocyte,
erythroid, macrophage, megakaryocyte''), células progenitoras
eritroides (CFU-E) y células progenitoras de
granulocitos y macrófagos (CFU-GM).
Antecedentes: Neumann, H.A. y A.A. Fauser (1982),
Effect of interferon on pluripotential hemopoietic progenitors
(CFU-GEMM) derived from human bone marrow, Exp.
Hematol. 10: 587; Gidali, J. y col. (1981), Proliferation
inhibition of murine pluripotent haemopoietic stem cell by
interferon on poly I:C. Cell Tissue Kinet. 14: 1; Van't
Hull, E. y col. (1978), Influence of interferon preparations on the
proliferative capacity of human and mouse bone marrow cells in
vitro, Cancer Res. 38: 911;
Galleen-Lartigue, O. y col. (1980), Strain
dependence of the antiproliferative action of interferon on murine
erythroid precursors, Science 209:292; McNeill, T.A. y W.A. Fleming
(1971), The relationships between serum interferon and an inhibitor
of mouse haemopoietic colonies in vitro, Immunology
21: 761; Fleming, W.A. y col. (1972), The effect of an
inhibiting factor (interferon) on the in vitro growth of
granulocyte-macrophage colonies, Immunology
23: 429; Greenberg, P.L. y S.A. Mosny (1977), Cytotoxic
effects of interferon in vitro on granulocytic progenitor
cells, Cancer Res. 37: 1794.
Se ha mostrado que los interferones regulan la
diferenciación in vitro de las células madre de líneas
múltiples linfo-mieloides, que circulan en la
leucemia de células pilosas (HCL, abreviadamente en inglés ``hairy
cell leukemia'') (Michalevicz, R. y M. Revel (1987), Interferons
regulate the in vitro differentiation of multilineage
lympho-myeloid stem cells in hairy cell leukemia,
Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 84, págs.
2307-2311). A través del efecto modulador de los
interferones, se estimularon las células madre para dar lugar a más
progenies, sin conducir a la formación superior de ninguna progenie
en particular.
Ahora, al contrario que en los hallazgos
anteriores, se ha encontrado que el IFN-\beta
(también conocido como IFN-\beta1) tiene un efecto
eritropoyético sobre el crecimiento de las células progenitoras de
los individuos que sufren diversas enfermedades con una muy escasa
producción de eritrocitos. También se ha encontrado, que el
IFN-\beta incrementa la formación de brotes así
como promueve una maduración más rápida hacia los normoblastos e
incluso hacia reticulocitos tardíos. Esto no podía ser inferido a
partir del estudio anterior de la leucemia de células pilosas, que
es una transformación maligna de una célula madre que conduce hacia
la linfopoyesis y a la reducción de otras líneas, causando, de este
modo, pancitopenia y acumulación de células pilosas (células
preplásmicas) en la médula ósea.
Gori y col. (Recenti Progressi in Medicina
80, pág. 14-15, 1989) describen una
experiencia clínica de un caso de CML en fase acelerada, tratado con
interferón-\beta a lo largo de un periodo de 29
semanas.
De acuerdo con esto, el objeto de la presente
invención es el uso del IFN-\beta humano para la
preparación de composiciones farmacéuticas para la estimulación de
la eritropoyesis en trastornos caracterizados por la pérdida de la
maduración de las células sanguíneas progenitoras de los
eritrocitos, particularmente para el tratamiento de la leucemia
mieloide crónica (CML).
El objeto se consigue mediante el uso del
interferón-\beta humano para la preparación de
composiciones farmacéuticas, en las que las composiciones
comprenden de 1 a 3 MU (millones de unidades) de
interferón-\beta en una unidad de dosificación
diaria.
El IFN-\beta usado de acuerdo
con la invención puede ser el IFN-\beta natural,
producido en fibroblastos inducidos, o el
IFN-\beta recombinante
(rIFN-\beta), producido mediante técnicas de
ingeniería genética. El rIFN-\beta puede
producirse en procariotas, por ejemplo, células de E. coli,
o en eucariotas, por ejemplo, células del ovario del hamster
chino (células CHO). Preferentemente, se usa el
rIFN-\beta producido en células CHO, de acuerdo
con la invención.
Las composiciones farmacéuticas preparadas de
acuerdo con la invención que usan el
interferón-\beta, comprenden el
IFN-\beta junto con un vehículo farmacéuticamente
aceptable. El término ``farmacéuticamente aceptable'' incluye
cualquier vehículo que no interfiera con la eficacia de la actividad
biológica del IFN-\beta y que no sea tóxico para
el hospedador al que se le administra.
Las composiciones pueden ser administradas por
vía parenteral, tal como subcutánea o preferentemente,
intramuscular. Para este propósito, se prepara una solución
inyectable adecuada mediante cualquier medio convencional conocido
en la técnica farmacéutica que sea compatible con la administración
del interferón humano. Por ejemplo, la solución inyectable puede
contener solución salina isotónica estéril; conservantes, tales
como el metilparaben o el propilparaben; estabilizantes, tales como
la seroalbúmina humana; ajustadores de pH; tampones y similares. En
el libro ``Remington's Pharmaceutical Sciences'' (17ª edición,
1985) ahí expuestos una amplia variedad de vehículos parenterales
adecuados.
En una realización de la invención, las
composiciones se preparan usando IFN-\beta
natural estabilizado con seroalbúmina humana. Para este propósito,
se purifica Frone® (Inter-Lab, Israel y Serono,
Italia), una preparación de IFN-\beta humano
obtenido de cultivos superinducidos de células diploides de
prepucio humanas, hasta 10^{7} unidades por mg de proteína y,
seguidamente, se liofiliza con seroalbúmina humana en viales que
contienen 10^{6} UI (1 MU) de IFN-\beta.
En una realización preferida, el
IFN-\beta recombinante producido en células CHO,
se purifica hasta homogeneidad y se formula en formas inyectables,
junto con los vehículos y los estabilizantes adecuados, tales como
seroalbúmina humana, manitol y tampón, por ejemplo, tampón
acetato.
De acuerdo con la invención, las composiciones
son para administrarse en cantidades de 1 a 3 MU (millones de
unidades) diariamente, preferentemente, 2 MU diariamente, en
pacientes con aproximadamente 60 kilogramos de peso. Para comparar,
se trataron diariamente pacientes que sufren enfermedades virales
agudas con 500.000 U de IFN-\alpha o
IFN-\beta por kg de peso (30 MU/ 60 kg) y
enfermedades virales crónicas con 3-10 MU/ 60 Kg de
peso. La dosis baja de 1-2 MU puede usarse
diariamente durante meses o, si la dolencia del paciente mejora
después de un mes, puede darse la dosis de 1-2 MU
dos veces o tres veces a la semana durante otros 3 meses o más.
En el tratamiento con las composiciones
preparadas de acuerdo con la invención usando
interferón-\beta, las dosis dependerán de la
gravedad de la enfermedad y de la dolencia del paciente. La
composición puede inyectarse intramuscular o subcutáneamente.
En otra realización de la invención, el
IFN-\beta se administra con
interleuquina-3 (IL-3), cuando el
paciente carece de esta interleuquina. La IL-3
puede administrarse antes, junto con o después de la administración
del IFN-\beta la dosis diaria de
IL-3 dependerá de la dolencia del paciente, por
ejemplo, 50 \mug por kg de peso. Puede administrarse mediante
infusión intravenosa.
Las composiciones que contienen
IFN-\beta humano son para uso en trastornos donde
hay una pérdida de la maduración de las células sanguíneas
progenitoras de los eritrocitos y, el IFN-\beta
actúa de este modo como factor de maduración eritropoyético
auxiliar, específicamente para el tratamiento de la leucemia
mieloide crónica (CML).
Los síndromes mielodisplásicos pueden
subclasificarse en 5 tipos: anemia resistente al tratamiento (RA,
abreviadamente en inglés ``refractory anemia''), anemia resistente
al tratamiento con sideroblastos en anillo (RARS, abreviadamente en
inglés ``refractory anemia with ringed sideroblasts''), leucemia
mielomonocítica crónica (CMML, abreviadamente en inglés ``chronic
myelomonocytic leukemia''), anemia resistente al tratamiento con
exceso de blastos (RAEB, abreviadamente en inglés ``refractory
anemia with excess blasts'') y RAEB con exceso de blastos en
transformación.
En algunos de estos síndromes los pacientes
pueden ser asintomáticos y sólo la anemia macrocítica débil conduce
a un diagnóstico correcto. En otros, la pancitopenia y la necesidad
de transfusiones de sangre pueden constituir un problema médico
principal o la pancitopenia grave puede evolucionar a leucemia. En
muchos casos, los pacientes con síndromes mielodisplásicos nunca
desarrollarán leucemia aguda durante muchos años (más de 10), tras
el diagnóstico de hematopoyesis ineficaz.
Diversos estudios han demostrado que este grupo
de anomalías hematológicas representa un trastorno que afecta a las
células madre. En general, es característico de los pacientes el
pobre crecimiento en cultivo de las células progenitoras. Desde
luego existen publicaciones contradictorias, pero pueden deberse,
probablemente, a la falta de homogeneidad en las técnicas de
cultivo. También se ha sugerido que las células formadoras de
colonias (células progenitoras) de estos pacientes son sensibles a
los factores estimuladores de colonias (CSF, abreviadamente en
inglés ``colony-stimulating factors'').
Como no hay un tratamiento eficaz específico para
estos síndromes descritos, la terapia de apoyo constituye la tarea
principal del hematólogo. Las transfusiones de sangre ayudan a
aliviar la sintomatología debida a la anemia grave, pero conlleva
riesgos de sobrecarga de hierro y hemocromatosis, además de otras
complicaciones tales como infecciones virales y reacciones adversas
debidas a las transfusiones de sangre. Las transfusiones de
trombocitos y granulocitos rara vez son eficaces y la terapia
profiláctica no tiene ningún papel. Se han descrito respuestas
raras a los corticosteroides y respuestas más raras a los
andrógenos. La quimioterapia citotóxica no está indicada durante las
fases benignas y su papel no es seguro cuando se desarrolla la
leucemia. El grupo de edad relativamente avanzada junto con los
efectos secundarios esperados de la quimioterapia hacen esta
aproximación no atractiva. Alternativamente, se han usado,
recientemente, dosis bajas de arabinósido de citosina y, en algunos
estudios, se obtuvieron algunas respuestas (Frisch, B. y B. Bartl
(1986), Bone marrow histology in myelodysplastic síndromes, Scan.
J. Hematol. 36, Supp. 45: 21-37;
Michalevicz, R. y col. (1984), Cell differentiation and Therapeutic
effect of low doses of cytosine arabinoside in human myeloid
leukaemia, Leuk. Res. 8: 783-790), pero con
ocurrencia de pancitopenia grave en algunos casos (Wisch, J.S. y
col. (1983), Response of preleukaemic síndrome to continuous
infusión of low dose cytosine arabinoside, N. Eng. J. Med.
309: 1599-1602).
En el pasado se han intentado otros enfoques de
investigación que incluían estudios abiertos con vitamina D_{3}
(1,25-dihidroxi-Vit D_{3}) y ácido
retinoico (13-cis) sin efectos beneficiosos (Mehta,
A. B. y col. (1984), Treatment of advanced myelodysplastic síndrome
with alfacalidol, Lancet 2:761). Los estudios recientes que
se centran en los síndromes mielodisplásicos han mostrado que el
factor estimulador de colonias de granulocitos y macrófagos humano
recombinante puede promover la mejora hematológica a corto plazo de
observación (Vadhan Raj S. y col. (1987), Effects of recombinant
human granulocyte-macrophage colony stimulating
factor in patients with myelodysplastic síndromes, N. Eng. J. Med.
317: 1545-1552). Sin embargo, otros grupos
de investigación han publicado observaciones contradictorias por lo
que aún se debe ser cauto cuando se administra
GM-CSF en el grupo de pacientes de preleucemia, ya
que el crecimiento de los blastos leucémicos puede estimularse en
presencia de GM-CSF (Vellenga, E. y col. (1987),
The effects of GM-CSF and G-CSF in
promoting growth of clonogenic cells in acute myeloblastic
leukemia, Blood, 69: 1771-1776).
La mielofibrosis idiopática es un trastorno
mieloproliferativo crónico relacionado con la expansión clonal de
una célula progenitora hematopoyética pluripotente y está asociada
con la fibrosis de médula ósea secundaria. Aún no se ha concebido
un tratamiento definitivo para esta enfermedad. Hay una
variabilidad muy marcada en la gravedad clínica y en la
supervivencia. Como en los síndromes mielodisplásicos y como en la
policitemia verdadera y la leucemia mieloide crónica, la
mielofibrosis es una enfermedad que afecta a las células madre
multipotentes. El trastorno muestra, además de proliferación
excesiva de células madre normales, defectos en la maduración de
las células madre. Una característica normalmente constante de esta
enfermedad es la anemia y un gran bazo.
Se estudiaron los efectos del
IFN-\alpha solo y con IFN-gamma
sobre el crecimiento in vitro de las células formadoras de
colonias de pacientes con mielofibrosis y parece que se obtuvo un
efecto supresor (Carlo-Stella, C.E. y col. (1987),
Effects of recombinant alpha and gamma interferons on the in
vitro growth of circulating hematopoietic progenitor cells
(CFU-GEMM, CFU-Mk,
BFU-E and CFU-GM) from patients with
myelofibrosis with myeloid metaplasia, Blood 70:
1014-1019). Puesto que en este grupo de pacientes
hay un incremento del número de células formadoras de colonias
(CFU-GM, CFU-Mix,
BFU-E) parece que los pacientes pueden beneficiarse
de la reducción del número de células progenitoras. Se ha publicado
el tratamiento in vivo tanto de casos individuales como de
pequeños grupos con IFN-\alpha y los resultados no
fueron muy alentadores - o bien sin respuesta o bien algo de
reducción en el tamaño del bazo, pero se observó mielosupresión
(Wickramasinghe, S.N. y col. (1987), Alpha interferon in primary
idiopathic myelofibrosis, Lancet pág. 1524; Gastl, G. y col.
(1988), Interferon-alpha for idiopathic
myelofibrosis, Lancet, págs. 765-766).
Para determinar mejor si el efecto hematopoyético
en general y el eritropoyético en particular son característicos de
algunos estados de la enfermedad que implican hematopoyesis o si
representan una actividad eritropoyética universal, se comprobaron
los efectos del IFN-\beta sobre las células
progenitoras de la médula ósea y las circulantes. Se sometieron a
ensayo muestras no empobrecidas y empobrecidas en monocitos. Se
prestó atención a las diferencias que, posiblemente, pudieran
ocurrir entre los progenitores de la médula ósea frente a los
circulantes, o bien en las células madre en sí mismas o bien
debidas a un ambiente diferente (entorno).
Se ha demostrado que el
IFN-\beta, en cantidades de 1 a 3 MU, tiene un
efecto eritropoyético sobre el crecimiento de las células
progenitoras obtenidas de pacientes con anemia sideroblástica y
resistente al tratamiento y con mielofibrosis. Esta es una
observación anormal ya que, como se ha dicho anteriormente, varios
autores han mostrado que los interferones suprimen la hematopoyesis
normal in vitro.
Usando el análisis de formación de colonias, se
analizaron los efectos del rIFN-\beta sobre el
crecimiento de los progenitores eritroides in vitro. El
análisis consiste en crecer células en un medio semisólido
(metilcelulosa) durante dos semanas. En este análisis, para hacer
crecer a los progenitores eritroides, se usa, como fuente de
factores de crecimiento hematopoyéticos, un medio condicionado que
consiste en linfocitos tratados con fitohemaglutinina
(PHA-LCM). Se puede sustituir casi completamente el
efecto de los PHA-LCM sobre el crecimiento
eritroide cuando se usa rIL-3. Se debe poner el
acento en que la hormona eritropoyetina es esencial para el
crecimiento de los progenitores de eritrocitos maduros y, por
tanto, se usó en todos los cultivos de este estudio.
Se controló el crecimiento de los precursores
eritroides denominados BFU-E (unidades formadoras
de brotes eritroides) mediante la identificación y el recuento de
las colonias en un microscopio invertido así como mediante la
eliminación y la tinción apropiada de las colonias donde y cuando
sea necesario. El número de colonias mixtas (que contienen células
eritroides así como células de otra u otras líneas) representa el
número de las células progenitoras más tempranas; también se
valoraron las colonias de granulocitos y macrófagos en los
cultivos.
Ahora, se ilustrará la invención mediante los
siguientes ejemplos:
Esencialmente, las células se cultivaron mediante
el siguiente procedimiento: mediante centrifugación en
Ficoll/Hypaque (Pharmacia) se separaron las células mononucleares
sanguíneas periféricas (PBMC) de la sangre con heparina y se
lavaron. Las células que no se adhirieron a las placas de plástico
después de dos horas (empobrecidas en monocitos) se sembraron, a una
concentración de 4 x 10^{5} células por ml, en medio de Dulbecco
modificado por Iscobe (IMDM Gibco), con plasma humano fresco (de un
único donante) al 20% (vol./vol.), metilcelulosa 0,9%,
2-mercaptoetanol 20 \muM, eritropoyetina 0,5 U/ml
(etapa III, Connaught Laboratories, Willowdale, ON), y suero fetal
de ternera 10% (vol./vol.) complementado con medio
PHA-LCM condicionado de leucocitos estimulados con
fitohemaglutinina al 7,5% (vol./vol.) (sobrenadante de las PBMC de
donantes sanos después de 7 días de cultivo, a una concentración de
10^{6} células por ml, con fitohemaglutinina al 1% en IMDM y suero
fetal de ternera 10% (vol./vol.)), como fuente de factores de
crecimiento estimuladores de colonias múltiples. La formación de
colonias se siguió de 14 días a 37ºC en aire 95%/CO_{2} 5%
humidificado. Donde se indique se añadieron diversos interferones
el día cero. El recombinante (r)
IFN-\alpha-c se produjo en E.
coli y se purificó hasta homogeneidad (10^{9} unidades
internacionales/mg). Tanto el
\hbox{rIFN- \beta } como el
rIFN-gamma se produjeron en células CHO y se
purificaron hasta homogeneidad. El empobrecimiento en linfocitos T
se realizó mediante la técnica E rosette y centrifugación de nuevo
en Ficoll. Se analizó la homogeneidad de los monocitos que quedaban
y/o de los linfocitos T eliminados, lográndose una pureza de más
del 95%.
Las colonias se clasifican como
CFU-GEMM (unidades formadoras de colonias de
granulocitos, eritroides, macrófagos y megacariocitos) o
CFU-Mix, CFU-GM (unidades
formadoras de colonias de granulocitos y macrófagos) y
BFU-E (unidades formadoras de brotes eritroides).
Las colonias mixtas pueden contener una o más líneas y no
necesariamente todos los tipos.
Cuando fue necesario, las colonias refringentes
de líneas múltiples se eliminaron con una micropipeta fina para su
identificación, se extendieron sobre portaobjetos y se tiñeron
apropiadamente con Wright-Giemsa, mediante
histoquímica o con anticuerpos monoclonales. Brevemente, después de
la fijación con paraformaldehído, se añaden los anticuerpos
monoclonales específicos durante 30 minutos y tras 3 lavados con
PBS, se añade el anticuerpo secundario (FITC) apropiado.
Seguidamente, se cuentan las células usando un microscopio de
inmunofluorescencia Zeiss.
Se usaron los anticuerpos monoclonales contra la
glucoproteína IIb/IIIa para la identificación de los
megacariocitos. Las colonias agrupadas se lavaron y se tiñeron
vivas con el anticuerpo monoclonal B1 (CD20, Coulter) o se fijaron
y se tiñeron con el anticuerpo monoclonal RFB7 (CD20\mu) y con la
IgG o IgMFab de cabra anti-ratón con fluoresceína
conjugada, tal como se describe en E.L. Raefsky y col. (1985), J.
Immunol. 135: 2507-2512. otros anticuerpos
usados fueron el anticuerpo RFT-2 (CD7\tau2) del
``Royal Free Hospital'' y el anticuerpo monoclonal
anti-TAC del ``National Institute of Health''. La
tinción de la fosfatasa ácida resistente a tartrato fue tal como se
describe en B. Torok-Storb y col. (1987), Blood
69: 629-633.
Se analizaron las muestras de sangre y los
aspirados de médula ósea de diversos pacientes, que incluían cinco
pacientes con anemia sideroblástica, cinco pacientes con anemia
resistente al tratamiento sin ninguna evidencia de leucemia
incipiente, ocho pacientes con mielofibrosis y controles normales
(tanto médula ósea como sangre periférica).
Se cultivaron in vitro células
mononucleares sanguíneas periféricas de individuos normales y de
pacientes con linfoma, leucemia mieloide crónica (CML) y leucemia
de células pilosas (HCL), durante 14 días tal como se describe
anteriormente. El interferón se añadió el día cero y las dosis de
los interferones alfa, beta y gamma usadas en estos experimentos
fueron 100 U/ml. Algunos experimentos también se hicieron con 500
U/ml de interferón. Los resultados se muestran en la tabla I.
Incluso a 100 U/ml, el IFN-\beta no suprimía la
hematopoyesis como lo hacía el
IFN-\alpha-c y, tanto en la CML
como en la HCL hubo un efecto promotor sobre el crecimiento de las
BFU-E (50% y 25%, respectivamente). De este modo,
el IFN-\beta tiene un efecto supresor menor sobre
la hematopoyesis que el de los interferones
\alpha-c y gamma, incluso cuando se usa a 100
U/ml.
| Normal | Linfoma | CML | HCL | |||||
| GEMM | BFU-E | GEMM | BFU-E | GEMM | BFU-E | LGEMM | BFU-E | |
| Adición al LCM | + GM | + GM | + GM | + LGM | ||||
| % | % | % | ||||||
| Nada | 100(104) | 100(78) | 100(27) | 100(9) | 100(40) | 100(22) | 100(23) | 100(14) |
| IFN-\alpha_{c} 10 U/ml | 76 | 77 | 40 | 47 | 99 | 107 | ||
| IFN-\alpha_{c} 100 U/ml | 57 | 27 | 62 | 41 | 39 | 59 | 124 | 124 |
| IFN-\beta 100 U/ml | 87 | 74 | 66 | 42 | 90 | 150 | 165 | 125 |
| IFN-\beta 500 U/ml | 160 | 125 | ||||||
| IFN-\tau 100 U/ml | 60 | 38 | 99 | 64 | 136 | 106 | ||
| IFN-\tau 500 U/ml | 53 | 21 | 89 | 42 |
El número total de colonias está entre
paréntesis.
Los resultados muestran el porcentaje de
crecimiento. Se muestran en la tabla cinco casos de sangre
periférica normal, con linfoma, CML y
HCL.
Cuando se estudia el efecto diferencial de los
interferones sobre la hematopoyesis normal, se encuentra que, a 10
U/ml, el IFN-\beta no suprime la hematopoyesis y,
en algunos casos, hay un incremento en las BFU-E de
las médulas óseas (BM, abreviadamente inglés ``bone marrows''). Se
muestran en la tabla IIa los resultados del crecimiento de las
células BM y se muestran en la tabla IIb los resultados del
crecimiento de las células progenitoras de la sangre periférica
(PB, abreviadamente en inglés ``peripheral blood''). El incremento
en el crecimiento eritroide fue más notable en la médula ósea
empobrecida en monocitos (tabla III).
| Colonias hematopoyéticas | ||||||
| Células | IFN | U/ml | MIX | GM | BFU-E | Meg |
| Normal | - | 13 | 117 | 78 | 7 | |
| BM | ||||||
| alfa-c | 100 | 8 | 47 | 21 | 7 | |
| beta | 10 | 12 | 100 | 64 | 7 | |
| beta | 100 | 15 | 99 | 58 | 8 | |
| gamma | 100 | 14 | 64 | 30 | 12 | |
| Normal | - | 33 | 128 | 121 | 25 | |
| BM | ||||||
| alfa-c | 100 | 22 | 88 | 42 | 12 | |
| beta | 10 | 30 | 131 | 120 | 17 | |
| beta | 100 | 23 | 149 | 104 | 12 | |
| gamma | 100 | 35 | 153 | 90 | 20 |
| Colonias hematopoyéticas | ||||||
| Células | IFN | U/ml | MIX | GM | BFU-E | Meg |
| Normal | - | 12 | 75 | 45 | 5 | |
| BM | ||||||
| alfa-c | 100 | 6 | 49 | 27 | 3 | |
| beta | 10 | 11 | 72 | 45 | 4 | |
| beta | 100 | 8 | 59 | 43 | 3 | |
| gamma | 100 | 7 | 67 | 34 | 2 |
| Células | IFN | U/ml | MIX | GM | BFU-E | Meg |
| Normal | - | 17 | 86 | 53 | 7 | |
| PB | ||||||
| alfa-c | 100 | 9 | 55 | 29 | 6 | |
| beta | 10 | 15 | 82 | 66 | 6 | |
| beta | 100 | 14 | 78 | 49 | 8 | |
| gamma | 100 | 12 | 83 | 40 | 11 | |
| Normal | - | 24 | 113 | 67 | 19 | |
| PB | ||||||
| alfa-c | 100 | 11 | 71 | 38 | 13 | |
| beta | 10 | 22 | 115 | 66 | 16 | |
| beta | 100 | 18 | 100 | 55 | 10 | |
| gamma | 100 | |||||
| Normal | - | 10 | 92 | 47 | 15 | |
| PB | ||||||
| alfa-c | 100 | 6 | 36 | 21 | 8 | |
| beta | 10 | 13 | 120 | 56 | 14 | |
| beta | 100 | 9 | 80 | 40 | 12 | |
| gamma | 100 | 8 | 91 | 28 | 15 | |
| Normal | - | 31 | 122 | 73 | 26 | |
| PB | ||||||
| alfa-c | 100 | 25 | 85 | 30 | 17 | |
| beta | 10 | 31 | 126 | 105 | 24 | |
| beta | 100 | 26 | 89 | 70 | 27 | |
| gamma | 100 | 30 | 136 | 70 | 12 |
Cultivos de 14 días en metilcelulosa con
PHA-LCM
En el experimento mostrado en la tabla III,
también se muestra que el incremento en eritropoyetina (epo) no
produce un incremento en las BFU-E. También se
analizaron los efectos de la IL-3 en la médula ósea
normal y se compararon con los obtenidos con
IFN-\beta y con la combinación de ambos. Cuando
los cultivos se crecieron en presencia de PHA-LCM,
la adición del rIFN-\beta (10 U/ml) y de
IL-3 (10 U/ml) produjo una intensificación de tres
veces en el crecimiento del progenitor eritroide. Sin embargo,
cuando los cultivos se crecieron en ausencia de
PHA-LCM (que contiene muchos factores), el
IFN-\beta solo no tuvo ningún efecto, mientras que
la adición tanto de IL-3 como de
IFN-\beta produjo un incremento de dos a tres
veces en el crecimiento de las BFU-E en comparación
con la IL-3 sola.
| – monocitos | + monocitos | |||||
| MIX | GM | BFU-E | MIX | GM | BFU-E | |
| + LCM | 43 | 5 | 61 | 54 | 5 | 173 |
| 2 U epo + LCM | 34 | 11 | 59 | 57 | 6 | 122 |
| Control | 16 | 5 | 20 | 6 | 4 | 2 |
| + LCM + IFN-\beta | 38 | 16 | 161 | 40 | 9 | 145 |
| 2 U epo + LCM + IFN-\beta | 23 | 15 | 50 | 19 | 7 | 37 |
| + LCM + IL-3 | 75 | 53 | 318 | 27 | 28 | 103 |
| + LCM + IFN-\beta + IL-3 | 63 | 33 | 284 | 35 | 18 | 95 |
| IFN-\beta | 10 | 6 | 5 | 8 | 2 | 0 |
| IL-3 | 32 | 3 | 70 | 44 | 12 | 61 |
| IFN-\beta + IL-3 | 30 | 10 | 184 | 13 | 10 | 31 |
IFN-\beta (10
unidades)
IL-3 (10
unidades)
Se estudiaron las células progenitoras de la
sangre periférica de cinco pacientes con anemia sideroblástica. Los
resultados se muestran en la tabla IV. El
rIFN-\beta a 10 U/ml tuvo un efecto promotor del
crecimiento significativo sobre las BFU-E y
CFU-Mix. El incremento en las BFU-E
es de una magnitud de seis veces y en las CFU-Mix
incluso mayor. Se observó un efecto estimulador menos notable en
las CFU-GM. Seguidamente, se estudiaron los efectos
del IFN-\beta a 10 U/ml, de la
IL-3 a 10 U/ml y de la combinación de ambos. La
tabla IV muestra que ocurre una intensificación del crecimiento de
las BFU-E cuando se presentaron juntos ambos
factores.
| MIX | GM | BFU-E | |
| PHA-LCM | 5 \pm 2 | 32 \pm 10 | 3 \pm 1 |
| + IFN-\beta 10 U | 62 \pm 6 | 48 \pm 6 | 18 \pm 3 |
| + IL-3 10 U | 18 \pm 2 | 40 \pm 8 | 20 \pm 5 |
| + IFN-\beta 10 U + IL-3 10 U | 26 \pm 4 | 60 \pm 4 | 35 \pm 8 |
Los resultados son de duplicados de placas de
cultivo crecidos en presencia de PHA-LCM. Se añaden
el IFN-\beta y la IL-3 el día
cero.
Se estudiaron las células progenitoras de la
sangre periférica de cinco pacientes con anemia resistente al
tratamiento sin evidencia de blastos o sin ningún signo de
preleucemia (tabla V). Se crecieron las células progenitoras PB tal
como en el grupo con anemia sideroblástica. Los resultados obtenidos
muestran, de nuevo, un efecto promotor del crecimiento sobre las
colonias de líneas múltiples y las BFU-E, cuando se
añade el IFN-\beta a 10 U/ml.
De nuevo, se nota un efecto casi aditivo en los
cultivos con IL-3 e IFN-\beta.
En este grupo de pacientes el incremento en las
BFU-E fue de menor grado que en los casos de anemia
sideroblástica (dos veces frente a seis). Se observó un incremento
menor en el número de CFU-GM. Esto sugiere que el
efecto es más sobre el estado de maduración de las células
progenitoras, principalmente aquellas relacionadas con la
eritropoyesis, y no sobre las ``células madre''. El incremento de
las CFU-Mix puede ser debido al componente eritroide
presente en estas colonias.
| MIX | GM | BFU-E | |
| PHA-LCM | 3 \pm 1 | 16 \pm 5 | 6 \pm 3 |
| + IFN-\beta 10 U | 5 \pm 2 | 18 \pm 5 | 11 \pm 3 |
| + IL-3 10 U | 5 \pm 1 | 17 \pm 4 | 12 \pm 4 |
| + IFN-\beta 10 U + IL-3 10 U | 8 \pm 2 | 21 \pm 3 | 26 \pm 5 |
Los resultados son la media \pm el error
estándar de la media de duplicados de
placas.
Todos los cultivos se crecieron con
PHA-LCM.
Se estudiaron las células de la sangre periférica
de ocho pacientes con mielofibrosis. Se compararon los cultivos con
y sin LCM y se estudiaron los efectos del
IFN-\beta, IL-3 y sus
combinaciones. Los resultados (tabla VI) muestran que el
IFN-\beta a 100 U/ml no es supresor del
crecimiento de las BFU-E obtenidas de la sangre
periférica. Se observa un leve (no significativo) efecto promotor
del crecimiento en presencia de LCM, mientras que en ausencia de
LCM hay un claro efecto intensificador con la combinación del
IFN-\beta y la IL-3.
| Colonias | ||||||||
| + LCM | – LCM | |||||||
| Factores | MIX | GM | BFU-E | Mg | MIX | GM | BFU-E | Mg |
| - | 106 | 110 | 131 | 10 | 26 | 19 | 26 | 0 |
| IFN-\beta 100 U | 160 | 93 | 131 | 5 | 74 | 16 | 30 | 0 |
| IL-3 | 157 | 98 | 209 | 6 | 106 | 22 | 77 | 0 |
| IFN-\beta + IL-3 | 218 | 90 | 209 | 1 | 170 | 46 | 106 | 1 |
| - | 88 | 72 | 90 | 5 | 41 | 37 | 31 | 2 |
| IFN-\beta 100 U | 112 | 66 | 91 | 3 | 123 | 35 | 33 | 5 |
| IL-3 | 130 | 71 | 158 | 3 | 150 | 39 | 87 | 5 |
| IFN-\beta + IL-3 | 285 | 70 | 169 | 2 | 162 | 48 | 112 | 6 |
| - | 54 | 48 | 78 | 12 | 32 | 30 | 41 | 0 |
| IFN-\beta 100 U | 122 | 48 | 84 | 7 | 107 | 32 | 48 | 7 |
| IL-3 | 107 | 44 | 219 | 11 | 128 | 40 | 103 | 6 |
| IFN-\beta + IL-3 | 208 | 49 | 235 | 9 | 157 | 65 | 134 | 9 |
| - | 120 | 123 | 147 | 19 | 20 | 11 | 29 | 1 |
| IFN-\beta 100 U | 133 | 102 | 158 | 17 | 81 | 16 | 30 | 9 |
| IL-3 | 141 | 96 | 196 | 3 | 93 | 28 | 85 | 9 |
| IFN-\beta + IL-3 | 197 | 204 | 204 | 11 | 121 | 50 | 97 | 12 |
| - | 75 | 82 | 103 | 8 | 24 | 23 | 19 | 0 |
| IFN-\beta 100 U | 98 | 73 | 109 | 9 | 79 | 31 | 21 | 0 |
| IL-3 | 109 | 69 | 177 | 7 | 181 | 42 | 57 | 1 |
| IFN-\beta + IL-3 | 156 | 79 | 184 | 5 | 143 | 52 | 76 | 3 |
| Colonias | ||||||||
| + LCM | – LCM | |||||||
| Factores | MIX | GM | BFU-E | Mg | MIX | GM | BFU-E | Mg |
| - | 93 | 88 | 113 | 19 | 29 | 19 | 24 | 0 |
| IFN-\beta 100 U | 116 | 71 | 125 | 7 | 87 | 37 | 26 | 1 |
| IL-3 | 134 | 70 | 191 | 3 | 112 | 45 | 73 | 2 |
| IFN-\beta + IL-3 | 171 | 99 | 198 | 12 | 126 | 48 | 99 | 2 |
| - | 117 | 94 | 129 | 20 | 49 | 35 | 42 | 2 |
| IFN-\beta 100 U | 128 | 89 | 138 | 21 | 153 | 51 | 45 | 2 |
| IL-3 | 149 | 95 | 222 | 6 | 161 | 63 | 121 | 4 |
| IFN-\beta + IL-3 | 207 | 106 | 242 | 15 | 199 | 84 | 158 | 7 |
| - | 69 | 55 | 80 | 13 | 16 | 14 | 17 | 0 |
| IFN-\beta 100 U | 86 | 61 | 86 | 13 | 66 | 27 | 27 | 3 |
| IL-3 | 101 | 67 | 144 | 16 | 85 | 31 | 48 | 3 |
| IFN-\beta + IL-3 | 150 | 92 | 201 | 18 | 104 | 45 | 62 | 10 |
Puesto que se ha implicado a la 1,
25-dihidroxi-Vit D_{3} en la
patogénesis de la mielofibrosis y algunos casos clínicos han
mostrado alguna mejoría, se usó la Vit-D_{3} para
valorar la respuesta hematopoyética medida mediante formación de
colonias. La tabla VII muestra los resultados obtenidos usando
IFN-\beta y Vit D3, usando condiciones idénticas
en el mismo caso.
| BFU-E (colonias por 10^{5} células) | ||
| Factores | Con LCM | Sin LCM |
| 0 | 0 | 0 |
| IFN-\beta (100) | 0 | 50 |
| Vit D_{3} (10^{-9}M) | 12 | 21 |
*Sangre de un paciente con mielofibrosis grave,
anemia (6 g/dl de hemoglobina) y enfermedad pulmonar crónica con
necesidad de múltiples transfusiones de sangre. Los factores se
añadieron como se describe en los métodos. Los resultados son la
media de duplicados de
cultivos.
Las colonias de líneas múltiples también se
incrementaron mediante el IFN-\beta pero este
efecto solamente fue evidente en ausencia de
PHA-LCM. La razón por la que el efecto promotor del
crecimiento del IFN-\beta fue visto aquí,
principalmente, en ausencia de LCM no está clara, pero puede
asumirse que, o bien apunta a la presencia de producción de
inhibidores mediante células auxiliares en los pacientes con
mielofibrosis o bien apunta a un exceso de factores proporcionados
tanto por las células auxiliares como por el LCM.
Las colonias de líneas múltiples representan
células más tempranas que las células progenitoras de los
granulocitos y macrófagos y también fueron contadas. Se encontró
que, cuando se añadió IFN-\beta a los cultivos
empobrecidos en LCM, se promovió en seis veces el crecimiento de las
colonias de líneas múltiples (tabla VIII).
| CFU-MIX | ||
| Factores | Con LCM | Sin LCM |
| 0 | 28 | 30 |
| IFN-\beta (100) | 27 | 118 |
| Vit D_{3} (10^{-9}M) | 36 | No ensayado |
Las células se sembraron a una concentración de
10^{5} células por ml. Se identificaron las colonias y se
contaron. Las colonias de líneas múltiples se eliminaron con una
piqueta Pasteur fina y se tiñeron. Los resultados son la media de
duplicados.
Se seleccionaron para el tratamiento pacientes
con anemia sideroblástica, anemia resistente al tratamiento,
leucemia mieloide crónica o mielofibrosis, diagnosticados mediante
parámetros clínicos, hallazgos físicos tales como el bazo agrandado
en la mielofibrosis y hallazgos típicos en el frotis de sangre
periférica y los recuentos, confirmándose siempre el diagnóstico
mediante las características típicas encontradas en estos
trastornos en biopsias de hueso. Se realizaron rutinariamente
tinciones de los depósitos de hierro y de los sideroblastos en
anillo.
En los pacientes con anemia sideroblástica o
resistente al tratamiento o mielofibrosis, la ausencia de leucemia
evidente, la ausencia de deficiencia en B12 o folato y la ausencia
de terapia citotóxica en los seis meses anteriores son
requerimientos para su inclusión en el tratamiento y forman parte de
la trayectoria del diagnóstico. Los pacientes con diabetes sacarina
grave o hipersensibilidad conocida de alguna magnitud se excluyen.
Las marcas incluyen la hematopoyesis ineficaz, las citopenias de
sangre periférica y la médula ósea hipercelular.
La duración del tratamiento es de al menos
3-4 meses con, como protocolo preliminar,
inyecciones intramusculares de IFN-\beta a dosis
diarias de 2 millones de unidades (2 MU) durante el primer mes y,
seguidamente, dos veces a la semana. La continuación del
tratamiento dependerá de la respuesta de los pacientes. Será
interrumpido en los pacientes que desarrollen anomalías de
laboratorio significativas durante el tratamiento.
Se realiza una evaluación antes del tratamiento,
que incluye la anamnesis completa y la exploración física. Los
datos incluyen sus capacidades para realizar la rutina diaria, la
duración de la enfermedad, el tiempo del agravamiento, las
necesidades de transfusión de sangre, intervalo entre
transfusiones, respuesta a la quimioterapia y a los andrógenos
(suministrados para mejorar la anemia), tendencia a la hemorragia e
infecciones.
Durante el tratamiento, se realizan diversas
investigaciones de laboratorio que incluyen recuentos en sangre y
recuentos diferenciales realizados a intervalos diarios durante la
primera semana y, subsecuentemente, realizados semanalmente durante
cuatro meses; frotis de sangre y aspirados de médula ósea, biopsias
de trepanación de hueso al principio del tratamiento y después de
cuatro meses; pruebas bioquímicas de evaluación renal y funciones
hepáticas realizadas semanalmente y de función pulmonar y rayos X
antes y después de los cuatro meses de tratamiento, a no ser que
sea clínicamente necesario a lo largo de este periodo. El tamaño
del bazo se confirma mediante esplenogammagrafía y se realiza dos
veces al mes.
La gravedad de la enfermedad se ordena mediante
la frecuencia del requerimiento de transfusiones de sangre y los
niveles de hemoglobina. La capacidad cardiaca y pulmonar (ECG y
función pulmonar) se controlan antes de la puesta en marcha del
tratamiento y durante la primera semana (control de las arritmias
cardiacas).
Los pacientes son hospitalizados durante la
primera semana para su seguimiento por el médico a su cargo y se
controla su función cardiaca así como cualquier reacción adversa
posible. Diariamente se examinan los recuentos de reticulocitos
durante las primeras cuatro semanas así como las pruebas sanguíneas
mencionadas anteriormente que se realizan diariamente durante la
primera semana y, subsecuentemente, semanalmente durante las
primeras cuatro semanas y, seguidamente, mensualmente.
Antes del tratamiento y después de dos meses, se
estudian la sangre y la médula ósea tal como se hace anteriormente
en los estudios in vitro, es decir se evalúa la función
hematopoyética in vitro, que incluye la respuesta al
IFN-\beta y los resultados se relacionaron para
validar la predicción mediante análisis estadístico (prueba U de
Mann Whitney).
El tratamiento incluye inyecciones
intramusculares de IFN-\beta, 2 millones de
unidades dependiendo del área del cuerpo, administrado diariamente
durante el primer mes de tratamiento y, seguidamente, la dosis se
reduce a dos veces por semana.
Se registran los efectos secundarios, si los
hubiera, y se detiene el tratamiento si se percibiera un efecto
secundario importante atribuible al tratamiento. Si no hay efectos
secundarios importantes, la decisión de continuar o parar el
tratamiento se toma después de cuatro meses de tratamiento. Las
transfusiones de sangre, si fueran necesarias, se administran en
base a un juicio clínico, a saber, disnea y malestar debido a los
bajos niveles de hemoglobina. La tensión sanguínea y el pulso se
controlan automáticamente.
La eficacia del tratamiento se valora mediante
los siguientes parámetros:
- 1.
- incremento de los niveles de hemoglobina, recuento de eritrocitos y recuentos de reticulocitos, así como recuentos de leucocitos y trombocitos.
- 2.
- descenso de las necesidades de transfusiones de sangre.
- 3.
- acortamiento del periodo de transfusión de sangre.
- 4.
- mejora subjetiva de la sintomatología clínica, menor debilidad y mejora en la evolución.
- 5.
- la comparación de la hematopoyesis se valora mediante biopsias de hueso realizadas antes y después del tratamiento. Se comprueba la condición celular y el tipo de los precursores así como la eritropoyesis.
Caso
1
Un paciente de 57 años de edad con leucemia
mieloide crónica (CML) durante 6 años, en fase crónica, controlada
mediante quimioterapia convencional que incluye hidroxiurea
(hydrea) y busulfano (myleran), se volvió resistente a este
tratamiento y no respondió a otros agentes quimioterapéuticos tales
como la tioguanina y el cytosar. Debido al desarrollo de la
conocida fase agresiva de transición con la aparición de blastos
leucémicos y al aumento del malestar con incapacidad para caminar
debido a un enorme bazo, y debido a la necesidad de transfusiones
de sangre por la grave anemia, se trató, seguidamente, al paciente
con IFN-\beta (InterPharm Laboratories Ltd.,
Israel) en base a unos experimentos de laboratorio que mostraban
una respuesta eritropoyética. Su respuesta clínica fue excelente
con reducción en el número de leucocitos, desaparición de los
blastos leucémicos de la sangre periférica, aumento de la
hemoglobina hasta 10-11 g/dl, transfusiones de
sangre nunca más necesarias y una increíble reducción del tamaño
del bazo. El paciente pudo volver pronto a sus actividades normales
y continuó recibiendo intramuscularmente 2 MU de
IFN-\beta, cinco días a la semana, como único
tratamiento durante varios meses.
Los ensayos de laboratorio antes del tratamiento,
mostraron los siguientes resultados: hemoglobina 7 g/dl, recuento
de leucocitos: 81.000, blastos 8-10%, células
mieloides inmaduras; promielocitos 3%, mielocitos 10%,
metamielocitos 14%, neutrófilos segmentados 40%, cayados 10%,
eosinófilos 2%, basófilos 8%, monocitos 2%, linfocitos 4%. El
recuento de trombocitos alcanzó 700.000/mm^{3}. Su enfermedad
clínica se deterioró, el paciente fue incapaz de andar,
parcialmente, debido a su debilidad y parcialmente, por el
incremento en la dificultad de respirar tanto debido a la anemia
como al gran bazo.
El paciente comenzó a recibir
IFN-\beta (después de la aprobación por parte de
la comisión del hospital de Helsinki y del ministerio de sanidad) a
una dosis diaria de 2 millones de unidades (2 MU) al día, seis días
a la semana y
\hbox{2 mg/día} por vía oral de myleran
(busulfano). Dos meses más tarde, mejoró su sensación general, fue
capaz de caminar y realizar sus actividades diarias, desapareció la
necesidad de las transfusiones de sangre y no hubo signos de
toxicidad en absoluto. El único efecto secundario observado fue un
síndrome parecido a una gripe muy leve, común en la terapia con
interferón que se controló con vitaminas C y paracetamol durante
dos semanas. Los exámenes de laboratorio mostraron un incremento de
la hemoglobina que sucedió progresivamente hasta 11,4 g/dl, un
descenso de los leucocitos hasta 10.000/mm^{3}, recuento normal
de trombocitos, 160.000/mm^{3}, y ausencia de blastos en el
recuento diferencial de leucocitos. El recuento diferencial
permaneció siendo el típico de la fase crónica de la CML y no se
observaron basófilos. El hallazgo más sorprendente en la
exploración física fue la reducción del tamaño del bazo hasta 3 cm
(antes: 27 cm) y del hígado, 3 cm (antes: 14 cm).
Caso
2
Una paciente con 66 años de edad mostraba una
historia extremadamente inusual de ocho años de mielofibrosis
post-esplenectomía con metaplasia mieloide en el
hígado (una gran hepatomegalia), transformación megacarioblástica
(que es un suceso bastante raro) resistente a la hidroxiurea,
necesidad de una transfusión de sangre casi semanalmente, y con una
debilidad y disnea graves. El tratamiento con una combinación de 2
millones de unidades por día de IFN-\beta por vía
intramuscular junto con una dosis muy baja de myleran (busulfano),
2 mg en días alternos, mejoró su estado general, redujo de una
forma moderada el agrandamiento del hígado y ocasionó una
desaparición de los megacarioblastos. El incremento en el recuento
de los reticulocitos desde el 3% hasta el 8% indicó que ocurría
algo de maduración eritroide (ya que los niveles de LDH
disminuyeron y no había signos de hemólisis). La mejora fue
evidente y el tratamiento se continuó.
Se espera que tengan lugar numerosas
modificaciones y variaciones en la práctica de la invención por los
expertos en la técnica.
Claims (6)
1. Un método para preparar una composición
farmacéutica en el que se combinan de 1 a 3 MU de
interferón-\beta con un vehículo
farmacéuticamente aceptable para proporcionar una unidad de
dosificación diaria para el tratamiento de la leucemia mieloide
crónica (CML).
2. El método de la reivindicación 1, en el que el
interferón-\beta humano es un
interferón-\beta humano natural.
3. El método de la reivindicación 1 ó 2, en el
que el interferón-\beta humano es un
interferón-\beta recombinante.
4. El método de la reivindicación 3, en el que el
interferón-\beta recombinante se produce en las
células de ovario de hamster chino (células CHO).
5. El método de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en el que las composiciones
comprenden 2 MU de interferón-\beta.
6. El método de cualquiera de las
reivindicaciones precedentes, en el que se añade a la composición
farmacéutica interleuquina-3.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IL89662A IL89662A (en) | 1989-03-19 | 1989-03-19 | Pharmaceutical compositions comprising interferon-beta |
| IL8966289 | 1989-03-19 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
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