ES2198863T3

ES2198863T3 - Nuevos derivados de acido hidroxamico, su procedimiento de preparacion y las composiciones farmaceuticas que los contienen.

Info

Publication number: ES2198863T3
Application number: ES99402016T
Authority: ES
Inventors: Stephen Hanessian; Ghanem Atassi; Gordon Tucker; Daniel-Henri Caignard; Pierre Renard
Original assignee: Les Laboratoires Servier SAS
Current assignee: Les Laboratoires Servier SAS
Priority date: 1998-08-10
Filing date: 1999-08-09
Publication date: 2004-02-01
Anticipated expiration: 2019-08-09
Also published as: NO313516B1; ZA995091B; NZ337142A; BR9903568A; NO993829D0; AU4346699A; EP0979816B1; JP2000086618A; US6063816A; DK0979816T3; PL334831A1; NO993829L; HUP9902700A2; CN1166632C; FR2782080B1; ATE238985T1; HUP9902700A3; CN1245798A; DE69907337D1; EP0979816A1

Abstract

Nuevos derivados de ácido hidroxámico útiles como inhibidores de metaloproteinasas para el tratamiento, por ejemplo, de cáncer y artritis reumatoide. Los derivados de ácido hidroxámico (I) son nuevos. Los derivados de ácido hidroxámico de fórmula (I) y sus sales de adición de ácidos o bases son nuevos. R1 = alquilo C1-6 (opcionalmente sustituido con al menos un OH, halo, alcoxi C1-6, mercapto, alquiltio C1-6, arilo, acilo C1-6 o amino (opcionalmente sustituido con uno o dos alquilo C1-6, cicloalquilo o arilo)), acilo C1-6, cicloalquilo, arilo, un grupo heterocíclico o aminocarbonilo-alquilo C1-6 (con amino opcionalmente sustituido con un alquilo C1-6 (opcionalmente sustituido con al menos un arilo, arilalquilo C1-6, cicloalquilo o alquil C1-6-aminocarbonilo; R2 = alquileno C1-4; R3 = X o T-U''-V''-X = alquilo C1-6, acilo C1-6, alcoxi C1-6-carbonilo, aminoalquilo C1-6 (amino opcionalmente sustituido con uno o dos alquilo C1-6), hidroxialquilo C1-6, carboxialquilo C1-6, aminocarbonilalquilo C1-6, mercaptoalquilo C1-6, cicloalquilo, arilo o heterociclilo; T =arilo o heterociclilo; U'' = un enlace sencillo, S, O, NH, carbonilo, -R8O-, -R8S-, R8NH-, -R8OR9-, -R8-NH-R9, -R8-CO- R9 o -R9- (con R8 unido a T y R9 unido a V''); R8 = alquileno C1-6; R9 = arileno o heteroarileno; V'' = alquileno C1-6; R4 = biarilo, arilheteroarilo, heteroarilarilo, alquilo C1-6 (opcionalmente sustituido con un grupo heterociclilo), cicloalquilo, arilo, aril C1-6-alquilo, cicloalquil-alquilo C1-6 o heterociclilo; y con la condición de que R4 sea alquilo C1-6 (opcionalmente sustituido con un grupo heterociclilo), cicloalquilo, arilo, arilalquilo, cicloalquil-alquilo C1-6 o heterociclilo, cuando R3 es T-U''-V''-. También se incluye una reivindicación independiente para la preparación de (I).

Description

Nuevos derivados de ácido hidroxámico, su procedimiento de preparación y las composiciones farmacéuticas que los contienen.

La presente invención se refiere a nuevos derivados de ácido hidroxámico, su procedimiento de preparación y las composiciones farmacéuticas que los contienen. Estos nuevos compuestos constituyen nuevos inhibidores de las metaloproteasas.

La remodelación de la matriz extracelular está implicada en numerosos procesos fisiológicos y patológicos: desarrollo embrionario, cicatrización, angiogénesis normal y patológica, degeneración de los tejidos conjuntivos y articulares, cánceres invasivos y metastáticos, por ejemplo.

Las metaloproteinasas de la matriz extracelular (``matrix metalloproteinases'' o MMPs), enzimas descritas inicialmente como implicadas en la regulación de la formación y destrucción de material extracelular, son sobreexpresadas en el transcurso de dichos acontecimientos y se asocian a la progresión patológica. Esta familia de proteasas con cinc comprende al menos catorce miembros. Los principales miembros cuyos substratos se conocen son: las colagenasas (MMP-1 intersticial, MMP-8 neutrofílica y la colagenasa-3 o MMP-13), las gelatinasas (colagenasas de tipo IV

\hbox{MMP-2}

y MMP-9, o gelatinasas A y B), la metaloelastasa MMP-12, las estromelisinas (entre las cuales la estromelisina-1 o MMP-3) y los activadores de la gelatinasa A (MT-MMPs, solamente las MMPs poseen un dominio transmembrana).

En la patología tumoral, estas enzimas, segregadas por las células cancerosas y las células normales del estroma peritumoral, participan directamente en la apertura de las vías de migración en el tejido intersticial para las células endoteliales y tumorales, e indirectamente en la liberación y en la maduración de los factores de membrana o factores secuestrados en la matriz extracelular (factores angiogénicos o de crecimiento, mediadores de la inflamación tal y como el factor de necrosis tumoral alfa ``tumour necrosis factor''-alpha o TNF-alpha,....), contribuyendo de este modo a todas las etapas de la progresión tumoral (crecimiento del tumor primario, angiogénesis, invasión local y establecimiento de las metástasis).

Inhibidores de MMPs serían por tanto particularmente eficaces como nuevas entidades farmacológicas susceptibles de detener la progresión de numerosas patologías, entre las cuales se encuentra el cáncer.

Diferentes inhibidores de metaloproteasas han sido ya descritos en la literatura al respecto. Más en particular, este el caso de los compuestos descritos en las solicitudes de patente EP 606 046, WO 96/40101, WO 96/00214 o WO 97/27174, así como en el artículo J. Med. Chem. 1998, 41, 640-649.

Los compuestos de la presente invención, además de ser nuevos, han demostrado ser, como inhibidores de metaloproteasas, más potentes que los descritos en la literatura, lo que los hace por tanto potencialmente útiles en el tratamiento de los cánceres, de las enfermedades reumáticas como la artrosis y la artritis reumatoide, etc...

Más específicamente, la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I):

1

en la cual:

R_{1} representa:

-: un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, lineal o ramificado (eventualmente sustituido por uno o varios grupos, idénticos o diferentes independientemente el uno del otro, elegidos de entre hidroxilo, halógeno, alcoxilo C_{1}-C_{6}, lineal o ramificado, mercapto, alquiltio C_{1}-C_{6}, lineal o ramificado, arilo, acilo C_{1}-C_{6}, lineal o ramificado, o amino eventualmente sustituido a su vez por uno o dos grupos, idénticos o diferentes, alquilo C_{1}-C_{6}, lineal o ramificado, cicloalquilo o arilo),

-: un grupo acilo C_{1}-C_{6}, lineal o ramificado,

-: un grupo cicloalquilo,

-: un grupo arilo,

-: un heterociclo,

-: un grupo aminocarbonil(C_{1}-C_{4})-alquilo, siendo la parte amino eventualmente sustituida por un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, dicho grupo alquilo C_{1}-C_{6} puede estar a su vez eventualmente sustituido por uno o varios grupos, idénticos o diferentes, elegidos entre arilo, arilalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, cicloalquilo y alquilaminocarbonilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado,

R_{2} representa un grupo alquileno C_{1}-C_{4} lineal o ramificado,

R_{3} representa un grupo X o Y donde:

\bullet

X representa un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, acilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, alcoxicarbonilo

\hbox{C _{1} -C _{6} }

lineal o ramificado, aminoalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado (siendo la parte amino a su vez eventualmente sustituida por uno o dos grupos, idénticos o diferentes, de tipo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado), hidroxialquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, carboxialquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, aminocarbonilalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, mercaptoalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, cicloalquilo, arilo o un heterociclo,

\bullet: Y representa un grupo de fórmula T-U-V- (estando unida la parte V al átomo de azufre) en la cual:

-: T representa un grupo arilo o un heterociclo,

-: U representa un enlace simple, un átomo de azufre, de oxígeno, un grupo NH o C=O, o un grupo de fórmulas -R_{8}O-, -R_{8}S-, -R_{8}NH-, -R_{8}OR_{9}-, -R_{8}SR_{9}-, -R_{8}-NH-R_{9}-, -R_{8}-CO-R_{9}-, -R_{9}-, en las cuales R_{8} representa un grupo alquileno C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, y R_{9} representa un grupo arileno o heteroarileno, entendiendo que en dichos grupos, R_{8} está unido a la parte T del grupo Y y R_{9} o el heteroátomo está unido a la parte V del grupo Y,

-: V representa un grupo alquileno C_{1}-C_{6} lineal o ramificado,

R_{4} representa:

-

cuando R_{3} representa un grupo Y, un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, cicloalquilo, arilo, arilalquilo

\hbox{C _{1} -C _{6} }

lineal o ramificado, cicloalquilalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado sustituido por un heterociclo, o un heterociclo,

-: cuando R_{3} representa un grupo X o Y, un grupo biarilo, arilheteroarilo, o heteroarilarilo,

sus isómeros así como sus sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptable.

Estando claro que:

-: por grupo cicloalquilo, se entiende un sistema mono o bicíclico que comprende de 3 a 10 átomos de carbono,

-: por grupo arilo, se entiende un grupo fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, dihidronaftilo, indeno o dihidroindeno, cada uno de los cuales puede ser eventualmente sustituido por uno o varios sustituyentes idénticos o diferentes elegidos entre átomos de halógeno, grupos hidroxilo, ciano, nitrilo, alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, trihalogenoalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, alcoxilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, acilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, carboxilo, alcoxicarbonilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, amino siendo este último eventualmente sustituido por uno o dos grupos, idénticos o diferentes, alquilo C_{1}-C_{6} lineales o ramificados,

-: por grupo biarilo, se entiende un grupo arilo en el cual uno de los carbonos del ciclo se sustituye por un segundo grupo arilo,

-: por heterociclo, se entiende un grupo mono o bicíclico, saturado o insaturado, de 4 a 12 eslabones, que contienen uno, dos o tres heteroátomos, idénticos o diferentes, elegidos entre oxígeno, nitrógeno o azufre, entendiéndose que el heterociclo puede ser eventualmente sustituido por uno o varios grupos idénticos o diferentes elegidos entre átomos de hálogeno, grupos hidroxilo, alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, trihalogenoalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, alcoxilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, amino sustituido opcionalmente por uno o varios grupos alquilo C_{1}-C_{6} lineales o ramificados,

-: por heteroarilo, se entiende un heterociclo insaturado de carácter aromático.

Es particularmente ventajoso que los compuestos elegidos para la invención sean aquellos en los cuales R_{1} representa un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado y especialmente si R_{1} representa un grupo isobutilo.

\newpage

Según una variante especialmente ventajosa de la invención, los compuestos preferidos son aquellos en los cuales R_{3} representa un grupo X tal y como está definido anteriormente y R_{4} representa un grupo biarilo, arilheteroarilo o heteroarilarilo.

Según otra variante ventajosa de la invención, los compuestos preferidos son aquellos en los cuales R_{3} representa un grupo Y tal y como está definido anteriormente y R_{4} representa un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, cicloalquilo, arilo, arilalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, cicloalquilalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, heterocicloalquileno C_{1}-C_{6} lineal o ramificado o un heterociclo.

Según una tercera variante particularmente ventajosa, los compuestos preferidos de la invención son aquellos en los cuales R_{3} representa un grupo Y tal y como está definido anteriormente y R_{4} representa un grupo biarilo, arilheteroarilo o heteroarilarilo.

Los compuestos preferidos de la invención son los de fórmula (I), y se trata de los siguientes:

-: ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil[(4-metoxifenil)sulfonil]amino} butanhidroxámico,

-: ácido 4-{[4-(fenil)bencil]sulfanil}-2-{isobutil[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanhidroxámico,

-: ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil[(4-bifenil)sulfonil]amino} butanhidroxámico,

-: ácido 4-{[4-(benciloxi)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanhidroxámico,

-: ácido 2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino}-4-(metilsulfanil)butanhidroxámico,

-: y ácido 2-{[(2-benzhidrilamino)-2-oxoetil]-[(4-metoxifenil)sulfonil]amino}-4- (bencilsulfanil)butanhidroxámico.

Sus isómeros así como las sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptables, son parte integrante de los compuestos preferidos de la invención.

Entre los ácidos farmacéuticamente aceptables se pueden citar a título no limitativo los ácidos clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, fosfónico, acético, trifluoroacético, láctico, pirúvico, malónico, succínico, glutárico, fumárico, tártarico, maleico, cítrico, ascórbico, oxálico, metano sulfónico, canfórico, etc...

Entre las bases farmacéuticamente aceptables se pueden citar a título no limitativo el hidróxido de sodio, el hidróxido de potasio, la trietilamina, la t-butilamina, etc...

La invención se extiende igualmente al procedimiento de preparación de los compuestos de fórmula (I), caracterizado porque se utiliza como producto de partida, un compuesto de fórmula (II):

2

en la cual R_{2} es tal y como se ha definido en la fórmula (I) y, o bien Ra y Rb forman un enlace simple que une el grupo carbonilo al átomo de azufre, o bien Ra representa un grupo alcoxilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, y Rb representa un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado,

compuestos de fórmula (II) en los cuales se sustituye, según condiciones clásicas de síntesis orgánica, la función amino primaria, por un compuesto de fórmula (II'):

R_{1} -- Z(II')

en la cual R_{1} es tal y como está definido en la fórmula (I) y Z representa un grupo saliente habitual en química orgánica,

para conducir a los compuestos de fórmula (III),

3

en la cual R_{1} y R_{2} tienen el mismo significado que en la fórmula (I) y, Ra y Rb son tales y como se han definido anteriormente,

compuestos de fórmula (III), que se tratan en medio básico, con un compuesto de fórmula (IV):

R_{4} -- SO_{2} -- Cl(IV)

en la cual R_{4} es tal y como se define en la fórmula (I),

para conducir a los compuestos de fórmula (V),

4

en la cual R_{1}, R_{2}, R_{4}, Ra y Rb son tales y como están definidos anteriormente, compuestos de fórmula (V) que se tratan, en el caso de que Ra y Rb formen un enlace simple, en presencia de metanol y de sodio, con un compuesto de fórmula (VI):

R_{3} -- Hal(VI)

en la cual R_{3} es tal y como está definido en la fórmula (I) y Hal representa un átomo de halógeno, para conducir a los compuestos de fórmula (VII):

5

en la cual R_{1}, R_{2}, R_{3}, y R_{4} son tales y como están definidos en la fórmula (I), el conjunto de los compuestos de fórmula (VII) y (V) forman los compuestos de fórmula (IX):

6

en la cual R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4} y Ra son tales y como están definidos anteriormente, compuestos de fórmula (IX) cuya función éster se hidroliza, según condiciones clásicas, para conducir a los compuestos de fórmula (X):

7

en la cual R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4} son tales y como están definidos anteriormente,

compuestos de fórmula (X) que se tratan, bien sea directamente mediante hidrocloruro de hidroxilamina, o bien sea mediante una hidroxilamina-O-sustituida que a continuación se desprotege mediante métodos operativos clásicos, para conducir a los compuestos de fórmula (I) tales y como están definidos anteriormente,

compuesto de fórmula (I) que se purifica, llegado el caso, según una técnica clásica de purificación, de la cual se separan eventualmente los isómeros mediante técnicas clásicas de separación y que se transforma, si así se desea, en sus sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptables.

Los compuestos de fórmula (II), (II'), (IV) y (VI) son o bien compuestos comerciales, o bien se obtienen según los métodos clásicos de síntesis orgánica.

La presente invención tiene igualmente como objeto las composiciones farmacéuticas que tienen como principio activo al menos un compuesto de fórmula (I), sus isómeros ópticos o una de sus sales de adición a una base o un ácido farmacéuticamente aceptables, sola o en combinación con uno o varios excipientes o vehículos inertes, no tóxicos, farmacéuticamente aceptables.

Entre las composiciones farmacéuticas según la invención, se citará particularmente aquéllas que convienen para la administración oral, parenteral (intravenosa, intramuscular o subcutánea), per o transcutánea, nasal, rectal, sublingual, ocular o respiratoria, y principalmente los comprimidos simples o en grageas, los comprimidos sublinguales, las perlas, las cápsulas, los supositorios, las cremas, las pomadas, los geles dérmicos, las preparaciones inyectables o bebibles, los aerosoles, las gotas oculares o nasales, etc...

La posología útil varía según la edad y el peso del paciente, la vía de administración, la naturaleza y la severidad de la afección, y la toma de tratamientos eventuales asociados y se distribuye de 1 a 500 mg en una o varias tomas al día.

Los ejemplos siguientes ilustran la invención pero no la limitan de ningún modo.

Los productos de partida utilizados son productos conocidos o preparados según métodos operativos conocidos.

Las diferentes fases de la síntesis conducen a intermediarios de síntesis, útiles para la preparación de los compuestos de la invención.

Las estructuras de los compuestos descritos en los ejemplos y las fases de síntesis han sido determinadas según las técnicas espectrofotométricas usuales (infrarrojo, RMN, espectómetro de masas...).

Ejemplo 1 Ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanhidroxámico

Fase A

3-(isobutilamino)tetrahidro-2-tiofenona

A una solución de 4,23 mmol de hidrocloruro de D-homocisteína tiolactona y 8,46 mmol de isobutiraldehído en 20 ml de metanol, se añaden, a 0ºC y bajo atmósfera inerte, 4,6 mmol de trietilamina. Después de 4 horas de agitación a temperatura ambiente, la reacción se enfría a 0ºC y se añaden 8,8 mmol de NaCNBH_{3} lentamente durante 40 minutos. Después de 30 minutos de agitación a 0ºC, se hidroliza la reacción y a continuación se extrae con éter. Las fases orgánicas agrupadas se lavan con una disolución saturada de NaCl, se secan en sulfato de sodio, se filtran y se concentran a baja presión. Una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 99/1) permite aislar el producto esperado en forma de jarabe.

\newpage

Fase B

N1-isobutil-N1-(2-oxotetrahidro-3-tiofenil)-4-metoxi-1-bencenosulfonamida

A una solución de 2,5 mmol del compuesto obtenido en la Fase A en 15 ml de diclorometano se añaden, a 0ºC, 5 mmol de N-metilmorfolina y 2,5 mmol de cloruro de 4-metoxifenilsulfonilo. Después de 12 horas de agitación a temperatura ambiente, se echa el medio reactivo en agua y se extrae con diclorometano. Las fases orgánicas agrupadas se lavan con una disolución de ácido clorhídrico 2N, y con una disolución al 5% de NaHCO_{3}, y a continuación con agua. Después del secado en sulfato de sodio, se filtran y se evaporan, una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 20/1) permite aislar el producto esperado.

Punto de fusión: 92ºC

Fase C

4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil[(4-metoxifenil)sulfonil]amino}butanoato de metilo

A una disolución de 1,26 mmol de sodio en 3 ml de metanol se añaden, a temperatura ambiente, 1,1 mmol del compuesto obtenido en la Fase B. Al cabo de 15 minutos de agitación, se añaden 1,1 mmol de bromuro de bencilo y se mantiene la agitación durante dos horas. Después de la evaporación del metanol, se obtiene un sólido que se tritura en acetato de etilo y se filtra. Una evaporación del filtrado permite obtener un residuo que se purifica por cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 20/1) lo que permite aislar el producto esperado en forma de jarabe.

Espectro de masa: FAB^{+}:[M^{+} + 1]: m/z = 466

Fase D

Ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil[(4-metoxifenil)sulfonil]amino}butanoico

A 0,95 mmol del compuesto obtenido en la Fase C en una mezcla dioxano/agua 3/1 se añaden 1,77 mmol de hidróxido de potasio. Después de 3 horas de agitación a 50ºC, el dioxano se evapora, la fase acuosa residual se diluye con agua, se acidifica hasta pH = 2 por adición de una disolución de ácido clorhídrico al 5% y se extrae a continuación con acetato de etilo. Las fases orgánicas agrupadas se lavan, se secan, se filtran y se evaporan a baja presión. Una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 93/7) permite aislar el producto esperado en forma de jarabe.

Fase E

N-t-butoxi-4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil[(4-metoxifenil)sulfonil]amino} butanamida

0,6 mmol del compuesto obtenido en la Fase D, 0,6 mmol de 1-hidroxibenzotriazol, 3 mmol de N-metilmorfolina y 1,2 mmol de hidrocloruro de O-t-butilhidroxilamina se disuelven en 9 ml de diclorometano. A esta solución se añaden 0,78 mmol de hidrocloruro de N-[(dimetilamino)propil]-N-etilcarbodiimida a continuación y se agita la reacción a temperatura ambiente durante 12 horas. El medio reactivo se diluye entonces por adición de agua, y se extrae con diclorometano. Las fases orgánicas agrupadas se lavan con una disolución saturada en NaCl, se secan con sulfato de sodio, se filtran y se concentran a baja presión. Una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 99/1) permite aislar el producto en forma de jarabe.

Espectro de masa: FAB^{+}:(M^{+} + 1): m/z = 523

Fase F

Ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil [(4-metoxifenil)sulfonil]amino}butanhidroxámico

Se agita una solución que contiene 0,31 mmol del compuesto obtenido en la Fase E en 2 ml de diclorometano y 2 ml de ácido trifluoroacético durante 6 horas a temperatura ambiente, a continuación se concentra a baja presión y se realiza una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 98/2). Se obtiene un residuo en forma de jarabe que se disuelve entonces en acetato de etilo. A continuación la solución se filtra en celite y se concentra a baja presión, lo que permite aislar el producto esperado en forma de jarabe.

Espectro de masa: FAB^{+}:(M^{+} + 1): m/z = 467(M^{+}-CONHOH): m/z = 406

Ejemplo 2 Ácido 4-{[4-(fenil)bencil]sulfanil}-2-{isobutil [(4-metoxifenil)sulfonil]amino}butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1 y utilizando como reactivo en la Fase C bromuro de 4-(fenil)bencilo.

Fase C

4-{[4-(fenil)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil)sulfonil] amino}butanoato de metilo

\newpage

Fase D

Ácido 4-{[4-(fenil)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanoico

Fase E

N-t-butoxi-4-{[4-(fenil)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanamida

Fase F

Ácido 4-{[4-(fenil)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanhidroxámico Ejemplo 3 Ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil] amino}butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1 y se utiliza como reactivo en la Fase B cloruro de 4-bifenilsulfonilo.

Fase B

N1-isobutil-N1-(2-oxotetrahidro-3-tiofenil)-4-fenil-1 -bencenosulfonamida

Fase C

4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino}butanoato de metilo

Fase D

Ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino} butanoico

Fase E

N-t-butoxi-4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil] amino}butanamida

Fase F

Ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino} butanhidroxámico Ejemplo 4 Ácido 4-{[4-(benciloxi)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[ (4-metoxifenil)sulfonil]amino}butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fases A a D, y se utiliza de reactivo en la fase C el bromuro de 4-(benciloxi)bencilo y se efectúa una Fase G descrita a continuación.

Fase C

4-{[4-(benciloxi)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanoato de metilo

Fase D

Ácido 4-{[4-(benciloxi)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanoico

Fase G

Ácido 4-{[4-(benciloxi)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil)sulfonil] amino}butanhidroxámico

1 mmol del compuesto obtenido en la Fase D, 1 mmol de 1-hidroxibenzotriazol, 5 mmol de N-metilmorfolina y 2 mmol de hidrocloruro de hidroxilamina se disuelven en 15 ml de diclorometano. Se añaden a continuación 1,2 mmol de hidrocloruro de N-[(dimetilamino)propil]-N-etilcarbodiimida y la reacción se agita a temperatura ambiente durante 12 horas. Seguidamente el medio reactivo se hidroliza por adición de agua y la fase acuosa se extrae con diclorometano. Las fases orgánicas agrupadas se lavan con una disolución saturada de NaCl, se secan en sulfato de sodio, se filtran y se concentran a baja presión. Una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 98/2) permite aislar el producto esperado.

Ejemplo 5 Ácido 2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino}-4-(metilsulfanil) butanhidroxámico

Fase H

hidrocloruro de 2-amino-4-(metilsulfanil)butanoato de metilo

A 15 ml de metanol se añaden, a -10ºC, 16,5 mmol de cloruro de tionilo, a continuación y en pequeñas fracciones, se añaden 11 mmol de D-metionina. Después de la adición, el medio reactivo se lleva nuevamente a temperatura ambiente. Al cabo de 12 horas, la reacción se concentra a baja presión. Se obtienen cristales que se recristalizan en una mezcla éter/metanol, lo que permite aislar el producto esperado.

Punto de fusión: 143ºC

Fase I

2-(isobutilamino)-4-(metilsulfanil)butanoato de metilo

A una solución de 3,9 mmol del compuesto obtenido en la Fase H y 7,8 mmol de isobutiraldehído, se añaden, en 20 ml de metanol, a 0ºC y bajo atmósfera inerte, 4,3 mmol de trietilamina. Al cabo de 6 horas de reacción a temperatura ambiente, el medio se enfría a 0ºC y se añaden 7,8 mmol de NaBH_{4} durante un período de 40 minutos. Después de la adición completa, la agitación se mantiene 30 minutos a 0ºC, y se hidroliza la reacción mediante adición de una disolución acuosa de NaHCO_{3}. Después de extracción con éter, las fases orgánicas agrupadas se lavan con una disolución saturada de NaCl, se secan con sulfato de sodio y se concentran a baja presión. Una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 99/1) permite aislar el producto esperado.

Fase J

2-{isobutil-[(4-fenil)fenilsulfonil]amino}-4-(metilsulfanil)butanoato de metilo

A una solución de 1,8 mmol del compuesto obtenido en la Fase I en 15 ml de diclorometano se añaden, a 0ºC, 3,71 mmol de trietilamina y 1,8 mmol de cloruro de 4-bifenilsulfonilo. La reacción se vuelve a llevar a temperatura ambiente, y se agita durante 12 horas; se echa en agua y a continuación se extrae con diclorometano. Las fases orgánicas agrupadas se lavan con una disolución de ácido clorhídrico 2N, y a continuación con una disolución de NaHCO_{3}, se secan, se filtran y se concentran a baja presión. Una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 20/1) permite aislar el producto esperado en forma de jarabe.

Fase K

Ácido 2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino}-4-(metilsulfanil) butanhidroxámico

El producto obtenido en la Fase J se somete entonces al procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fase D a Fase F, lo que permite obtener el compuesto esperado.

Espectro de masa: FAB^{+}:(M^{+} + 1): m/z = 437; (M^{+}-CONHOH): m/z = 376

Ejemplo 6 Ácido 2-{[(2-benzhidrilamino)-2-oxoetil][(4-metoxifenil)sulfonil] amino}-4-(bencilsulfanil)butanhidroxámico Preparación 1 t-butil-2-[(2-oxotetrahidro-3-tiofenil)]aminoacetato

A una solución de 5 mmol de tiolactona en 10 ml de acetonitrilo se añaden a 0ºC, 5,5 mmol de diisopropiletilamina y a continuación 5,5 mmol de t-butilbromoacetato. Al cabo de 30 minutos de agitación, la reacción se vuelve a llevar a temperatura ambiente durante 12 horas. El medio reactivo se concentra entonces a baja presión y se realiza una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/etanol: 97/3) lo que permite aislar el producto esperado.

Fase B

t-butil-2-{[(4-metoxifenil)sulfonil](2-oxotetrahidro-3-tiofenil) amino}acetato

Se procede como en la Fase B del Ejemplo 1 y se utiliza de sustrato el producto obtenido en la Preparación 1.

Espectro de masa: FAB^{+}:[M^{+} + 1]: m/z = 402

\newpage

Fase C

4-(bencilsulfanil)-2-{[2-(t-butoxi)-2-oxoetil][(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanoato de metilo

Se procede como en la Fase C del Ejemplo 1 y se utiliza el producto obtenido en la fase anterior.

Espectro de masa: FAB^{+}:[M^{+} + 1]: m/z = 524

Fase L

Ácido 2-{[(3-bencilsulfanil)-1-(metoxicarbonil)propil] [(4-metoxifenil)sulfonil]amino}acético

Una solución de 0,8 mmol del compuesto obtenido en la Fase C en 2 ml de diclorometano y de 3 ml de ácido trifluoroacético se agita durante 2 horas a temperatura ambiente. A continuación el medio reactivo se concentra a baja presión y el residuo se cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 95/5) lo que permite aislar el producto esperado.

Espectro de masa: FAB^{+}:[M^{+} + 1]: m/z = 468

Fase M

2-{[(2-benzhidrilamino)-2-oxoetil][(4-metoxifenil)sulfonil]amino}-4 (bencilsulfanil)butanoato de metilo

A una solución de 1,5 mmol del compuesto obtenido en la Fase L, 1,6 mmol de aminodifenilmetano en 20 ml de acetonitrilo se añaden, a 0ºC, 1,8 mmol de hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfonio y 3 mmol de diisopropiletilamina. El medio reactivo se vuelve a llevar lentamente a temperatura ambiente. Al cabo de 6 horas de reacción, el acetonitrilo se evapora y se recoge el residuo con acetato de etilo, a continuación se lava con una disolución saturada de NaCl. Las fases orgánicas se secan en sulfato de sodio, se filtran y se concentran a baja presión. Una cromatografía en gel de sílice (diclorometano/metanol: 20/1) permite aislar el producto esperado.

Espectro de masa: FAB^{+}:[M^{+} + 1]: m/z = 633

Fase N

Ácido 2-{[2-benzhidrilamino)-2-oxoetil][(4-metoxifenil)sulfonil] amino}-4-(bencilsulfanil)butanhidroxámico

Se procede como en el Ejemplo 1 Fases D a F, y se utiliza de sustrato el producto obtenido en la Fase M anterior.

Espectro de masa: FAB^{+}:[M^{+} + 1]: m/z = 634

Ejemplo 7 Ácido 2-{[2-(benzhidrilamino)-2-oxoetil]-[(4-bifenil)sulfonil] amino}-4-(bencilsulfanil)butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 6, y se utiliza en la fase B el cloruro de

\hbox{4-bifenilsulfonilo}

como reactivo. Ejemplo 8 Ácido 4-{[(1-metil-3-piperidil)metil]sulfanil}-2-[isobutil-(4-bifenilsulfonil) amino]butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fases A a F, y se utiliza de reactivo en la Fase B el mismo reactivo utilizado en el Ejemplo 3, y en la Fase C 3-clorometil-1-metilpiperidina.

Ejemplo 9 Ácido 4-[(1-naftilmetil)sulfanil]-2-[isobutil-(4-metoxifenil)sulfonil] amino}butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fases A a F, y se utiliza de reactivo en la fase C 1-(clorometil)naftaleno.

Ejemplo 10 Ácido 4-{[(1-fenilsulfanil)metil]sulfanil]}-2-[isobutil-(4-bifenilsulfonil) amino]butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fases A a F, y se utiliza de reactivo en la fase B el utilizado en el Ejemplo 3, y en la Fase C el cloruro de metiltiofenilo.

Ejemplo 11 Ácido 4-[(3-piridilmetil)]sulfanil]-2-[isobutil-(4-bifenilsulfonil) amino]butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fases A a F, y se utiliza de reactivo en la fase B el utilizado en el Ejemplo 3, y en la fase C 3-clorometilpiridina.

Ejemplo 12 Ácido 4-{[2-(tetrahidro-2H-piranil)metil]sulfanil}-2-{isobutil-[4- (metoxifenil) sulfonil]amino} butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fases A a F, y se utiliza de reactivo en la fase C el 2-(clorometil)-tetrahidro-2H-pirano.

Ejemplo 13 Ácido 4-[(fenilsulfaniletil)sulfanil]-2-{isobutil-[4-(metoxifenil) sulfonil]amino}butanhidroxámico

El producto se obtiene según el procedimiento descrito en el Ejemplo 1, Fases A a F, y se utiliza de reactivo en la fase C el cloruro de etiltiofenilo.

Estudio farmacológico de los compuestos de la invención Ejemplo 14 Inhibición enzimática de las metaloproteasas

Los tests enzimáticos de cribado de los compuestos se realizan en solución en todas o en parte de las cuatro enzimas humanas purificadas siguientes: colagenasa intersticial MMP-1, gelatinasas MMP-2 y MMP-9,

\hbox{estromelisina-1}

MMP3. La actividad se comprueba mediante un método fluorométrico adaptado a un formato de placa de 96 pocillos. Activación de las MMPs

Esta etapa permite convertir las proformas de las metaloenzimas en formas activas capaces de partir los sustratos utilizados. Las enzimas comerciales, alícuotas y conservadas a -80ºC, se diluyen en un tampón 50 mM Tris, 200 mM NaCl, 5 mM CaCl_{2}, 0,1% Brij35, pH 7,7 a razón de 355 \mug/ml (MMP-1), 444 \mug/ml (MMP-2), 187 \mug/ml (MMP-3) y 500 \mug/ml (MMP-9) de enzima en presencia de 2 mM de APMA (4-aminofenilmercurioacetato) a 37ºC durante 30 minutos (MMP-2 y MMP-9) o una hora (MMP-1 y MMP-3).

Test fluorogénico

El principio se basa en la aparición de una fluorescencia después de producirse un corte de un péptido seudosustrato en presencia de la enzima activada. El péptido Dnp-Pro-\beta-ciclohexil-Ala-Gli-Cis(Me)-His-Ala-Lis (N-Me-Abz)-NH_{2} (Bachem, Suiza) se corta entre la glicina y la cisteína (Anal. Biochem. 1993, 212, 58-64) por las enzimas activadas MMP-1, MMP-2 y MMP-9. El péptido (7-metoxi-cumarina-4-il)-Arg-Pro-Lis-Pro-Tir-Ala-Nva-Trp-Met-Lis(Dnp)-NH_{2} (Bachem) se corta entre Ala y Nva (Anal. Biochem. 1993, 212, 58-64) por la enzima activada MMP-3 (Biochemistry 1992, 31, 12618- 2623). Los tests se realizan en el tampón 50 mM Tris, 200 mM NaCl, 5 mM CaCl_{2}, 0,1% Brij35, pH 7,7 que contiene las enzimas purificadas diluidas (en las concentraciones finales: 1,25, 2, 1,25 y 1 \mug/ml para las enzimas MMP-1, MMP-2, MMP-3 y MMP-9, respectivamente). Después de una pre-incubación de las enzimas con o sin los productos sometidos a test (mínimo cinco dosis por diluciones de diez en diez), las reacciones de corte se inician al añadir 20 \muM (concentración final) del péptido seudosustrato apropiado en un volumen final total de 100 \mul (formato de placas de 96 pocillos). Después de seis horas de incubación a 37ºC en atmósfera húmeda, las placas que contienen las muestras se leen en un citofluorímetro (Cytofluor 2350, Millipore PerSeptive Systems, France) equipado con una combinación de filtros de excitación y de emisión de 340 y 440 nm, respectivamente. Cada condición se realiza por triplicado. La concentración que inhibe el 50% de la reacción (IC_{50}) se determina entonces a partir de las curvas que representan la intensidad de fluorescencia de los productos de corte en función de las dosis sometidas a test. Cada prueba se realiza al menos dos veces.

Durante este test, los compuestos de la invención han presentado IC_{50} comprendido entre 100 y 200 nM para la enzima MMP-1, entre 0,2 y 50 nM para las enzimas MMP-2, MMP-3 y MMP-9.

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Ejemplo 15 Composición farmacéutica: comprimidos

Fórmula de preparación para 1000 comprimidos en dosis de

\dotl

20 g

Compuesto del Ejemplo 2

\dotl

20 g

Hidroxipropilcelulosa

\dotl

2 g

Almidón de trigo

\dotl

10 g

Lactosa

\dotl

100 g

Estereato de magnesio

\dotl

3 g

Talco

\dotl

3 g

Claims

1. Compuestos de fórmula (I):

8

en la cual:

R_{1} representa:

-: un grupo acilo C_{1}-C_{6}, lineal o ramificado,

-: un grupo cicloalquilo,

-: un grupo arilo,

-: un heterociclo,

R_{2} representa un grupo alquileno C_{1}-C_{4} lineal o ramificado,

R_{3} representa un grupo X o Y donde:

\bullet

\hbox{C _{1} -C _{6} }

-: T representa un grupo arilo o un heterociclo,

-: V representa un grupo alquileno C_{1}-C_{6} lineal o ramificado,

R_{4} representa:

-

\hbox{C _{1} -C _{6} }

2. Compuestos de fórmula (I) según la reivindicación 1 caracterizados porque R_{3} representa un grupo X tal y como está definido anteriormente, y R_{4} representa un grupo biarilo, arilheteroarilo o heteroarilarilo, sus isómeros así como sus sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptables.

3. Compuestos de fórmula (I) según la reivindicación 1 caracterizados porque R_{3} representa un grupo Y tal y como está definido anteriormente, y R_{4} representa un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, cicloalquilo, arilo, arilalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, cicloalquilalquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, heterocicloalquileno C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, o un heterociclo, sus isómeros así como sus sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptables.

4. Compuestos de fórmula (I) según la reivindicación 1 caracterizados porque R_{3} representa un grupo Y, y R_{4} representa un grupo biarilo, arilheteroarilo o heteroarilarilo, sus isómeros así como sus sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptables.

5. Compuestos de fórmula (I) según la reivindicación 1 caracterizados porque R_{1} representa un grupo alquilo C_{1}-C_{6} lineal o ramificado, sus isómeros así como sus sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptables.

6. Compuestos de fórmula (I) según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 5 caracterizados porque R_{1} representa un grupo isobutilo, sus isómeros así como sus sales de adición a un ácido o a una base farmacéuticamente aceptables.

7. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 que es el ácido 4-(bencilsulfanil)-2-{isobutil-[(4-metoxifenil)sulfonil]amino}butanhidroxámico.

8. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 que es el ácido 4-{[4-(fenil)bencil]sulfanil}-2-{isobutil-[(4-metoxifenil)sulfonil]amino} butanhidroxámico.

9. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 que es el ácido 4-(bencilsulfanil)2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino}butanhidroxámico.

10. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 que es el ácido 4-{[4-(benciloxi)bencil]sulfanil}-2-{iso-butil-[(4-metoxifenil) sulfonil]amino}butanhidroxámico.

11. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 que es el ácido 2-{isobutil-[(4-bifenil)sulfonil]amino}-4-(metilsulfanil)butanhidroxámico.

12. Compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 1 que es el ácido 2-{[2-(benzhidrilamino)-2-oxoetil]-[(4-metoxifenil)sulfonil] amino}-4-(bencilsulfanil)butanhidroxámico.

13. Procedimiento de preparación de los compuestos de fórmula (I), según la reivindicación 1, caracterizado porque se utiliza como producto de partida, un compuesto de fórmula (II):

9

R_{1} -- Z(II')

para conducir a los compuestos de fórmula (III),

10

R_{4} -- SO_{2} -- Cl(IV)

en la cual R_{4} es tal y como se define en la fórmula (I),

para conducir a los compuestos de fórmula (V),

11

en la cual R_{1}, R_{2}, R_{4}, Ra y Rb son tales y como están definidos anteriormente,

compuestos de fórmula (V) que se tratan, en el caso de que Ra y Rb formen un enlace simple, en presencia de metanol y de sodio, con un compuesto de fórmula (VI):

R_{3} -- Hal(VI)

12

13

en la cual R_{1}, R_{2}, R_{3}, R_{4} y Ra son tales y como están definidos anteriormente,

compuestos de fórmula (IX) cuya función éster se hidroliza, según condiciones clásicas, para conducir a los compuestos de fórmula (X):

14

14. Composiciones farmacéuticas que contienen como principio activo al menos un compuesto de fórmula (I) según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, solo o en combinación con uno o varios excipientes o vehículos inertes, no tóxicos, farmacéuticamente aceptables.

15. Composiciones farmacéuticas según la reivindicación 14 que contienen al menos un principio activo según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, útiles como inhibidores de metaloproteasas.