ES2201805T3 - Nuevos gliceril-nucleotidos, su procedimiento de preparacion y las composiciones farmaceuticas que los contienen. - Google Patents
Nuevos gliceril-nucleotidos, su procedimiento de preparacion y las composiciones farmaceuticas que los contienen.Info
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Abstract
Nucleótidos de glicerilo de la fórmula Ia en la que a) uno de los restos A1, A2 y A3 representa un átomo de hidrógeno o un resto seleccionado entre hidroxilo, mercapto, alquilo, alquenilo, polioxi- alquenilo, arilo, acilo, alquil-oxilo, alquilén- oxilo, polioxi-alquenil-oxilo, acil-oxilo, aril- oxilo, tioalquilo, tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo; y b1) dos de los otros restos A1, A2 y A3 representan dos grupos nucleósido diferentes entre sí, cada uno de los cuales está unido al átomo de carbono de la cadena de glicerilo a través de un grupo puente con contenido de fósforo disociable fisiológicamente; o b2) uno de los otros restos A1, A2 y A3 representa un grupo nucleósido y el otro resto representa un grupo hidroxi-carbonilo, cada uno de los cuales está unido al átomo de carbono de la cadena de glicerilo a través de un grupo puente con contenido de fósforo disociable fisiológicamente; siendo como mínimo uno de los grupos nucleósido un grupo nucleósido no natural, que en caso dado está sustituido en su parte de base por uno o más restos seleccionados entre hidroxilo, amino, halógeno, alquilo, alquenilo, polioxi-alquenilo, arilo, acilo, alquil-oxilo, alquenil-oxilo, polioxi-alquenil-oxilo, acil-oxilo, aril-oxilo, tioalquilo, tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo o átomos halógenos; y que en caso dado está sustituido una o varias veces en su parte de hidrato de carbono por sustituyentes seleccionados entre hidrógeno, halógeno, hidroxilo, etinilo o azido, que dado el caso presenta un heteroátomo seleccionado entre S, N u O en lugar de un átomo de carbono, y que en caso dado contiene dos enlaces dobles C=C no colindantes; en forma racémica o enantiómera pura así como las sales farmacéuticamente compatibles de estos compuestos.
Description
Nuevos gliceril-nucleótidos, su
procedimiento de preparación y las composiciones farmacéuticas que
los contienen.
La presente invención se refiere a nuevos
nucleótidos de glicerilo, en caso dado anfifílicos, a la producción
de los mismos y a productos para el tratamiento de enfermedades
cancerosas y enfermedades infecciosas.
Existen análogos de nucleósidos que presentan
determinadas características estructurales y son medicamentos
acreditados en la quimioterapia de enfermedades cancerosas y
enfermedades infecciosas provocadas por virus (Advanced Drug
Delivery Review (1996) 19, 287). Sin embargo, el efecto terapéutico
de los análogos de nucleósido sólo se produce cuando los análogos de
nucleósido, inactivos de por sí, son absorbidos por la célula en
forma de profármacos y después son anabolizados en los principios
activos propiamente dichos, los derivados de
5'-trifosfato de los análogos de nucleósido. Estos
nucleótidos detienen la replicación de ADN y/o bloquean la
transcriptasa inversa. Los análogos de nucleósido como por ejemplo
la
1-\beta-D-arabino-furanosil-citosina
(araC) y
5-fluoro-2'-desoxi-uridina
(5FdU), que impiden la replicación de ADN, actúan contra
enfermedades malignas de las células hematopoyéticas y contra
tumores sólidos. Para la terapia de la infección por el VIH son
especialmente adecuados análogos de didesoxinucleósido, como por
ejemplo
3'-azido-2'3'-didesoxi-timidina
(AZT), 2',3'-didesoxi-citidina
(ddC), 2',3'-didesoxi-inosina (ddI),
3'-tia-2',3'-didesoxi-citidina
(3TC) y
2',3'-didehidro-2',3'-didesoxi-timidina
(d4T).
Un principio activo antiviral no nucleotídico
como por ejemplo la sal trisódica del ácido
fosfono-fórmico (Foscarnet) bloquea el lado de unión
de pirofosfato de la polimerasa viral. De este modo se impide la
replicación por ejemplo en los casos de los virus herpes simplex,
VIH y citomegalovirus humanos. Los derivados de glicerilo
anfifílicos de Foscarnet, que presentan un paso de membrana
mejorado, contribuyen a la optimización de la terapia viral
(Antivir. Chem. & Chemother. (1998) 9, 33).
Debido al desarrollo de resistencia en el curso
de la quimioterapia, que sobre todo en el caso del tratamiento del
VIH aparece de forma especialmente rápida, la progresión de la
enfermedad sólo se puede retardar de forma duradera mediante una
terapia combinada. Para ello se administran conjuntamente varios
principios activos antivirales (Schweiz. Med. Wochenschr. (1997)
127, 436). Debido al estricto reglamento terapéutico que se ha de
imponer a los pacientes en la terapia combinada, el cumplimiento del
mismo por parte de los pacientes es escaso. Por ello, el éxito
terapéutico es muy inferior a las posibilidades que entraña el alto
potencial de los medicamentos disponibles (AIDS 1998 Diagnostik und
Therapie, Steinhauser Verlag).
La administración de una presentación de
medicamento que incluye por ejemplos los dos profármacos
nucleotídicos (AZT, 3TC) en una mezcla, como es el caso del
Combivir, hace que la terapia combinada sea a lo sumo practicable
para los pacientes. Sin embargo, con estas mezclas apenas se puede
lograr un mejor efecto, dado que no se aumenta la absorción del
profármaco por la célula ni se optimiza su anabolismo en el
principio activo.
En cambio, la terapia combinada se puede
optimizar de forma decisiva con preparados combinados anfifílicos en
los que dos análogos de nucleósido antivirales están acoplados
químicamente a través de un enlace de fosfodiéster (EP 0 642 527
B1). Una desventaja concreta de estos análogos de fosfato de
dinucleósido anfifílicos consiste en que, con una disociación
enzimática deseada del enlace de fosfodiéster, en cada caso sólo se
puede liberar una unidad monomérica como análogo de nucleótido
activo, mientras que la segunda unidad monomérica del preparado
combinado permanece forzosamente como análogo de nucleósido inactivo
en sí. Si la célula de este análogo de nucleósido no se anaboliza en
un análogo de nucleótido activo, hasta un 50% de los dímeros
administrados no son útiles terapéuticamente y, por consiguiente,
son inactivos. Otra desventaja de estos preparados combinados
anfifílicos consiste en que como mínimo uno de los dos análogos de
nucleósido acoplados ha de presentar un resto lipófilo para que el
dímero resultante sea anfifílico. Por consiguiente, dos análogos de
nucleósido adecuados para la terapia combinada, cuando ninguno de
los dos son lipofilizables, no se pueden transformar en dímeros
anfifílicos ni utilizar terapéuticamente como preparado
combinado.
El objetivo de la invención consiste en poner a
disposición nuevos preparados combinados con los que se pueda luchar
con mayor eficacia contra enfermedades cancerosas e infecciones.
Este objetivo se resuelve mediante nuevos nucleótidos de glicerilo
que con el metabolismo pueden liberar simultáneamente dos principios
activos en cada caso, de modo que se aprovechan de forma ilimitada
las ventajas de la combinación de dos principios activos arriba
mencionada. Para la obtención de los nucleótidos de glicerilo según
la invención preferentemente se unen de forma covalente a través de
una estructura lipídica de glicerina dos derivados de nucleósido
terapéuticamente activos entre sí o un derivado de nucleósido con el
ácido fosfono-fórmico o su sal (Foscarnet).
Un primer objeto de la invención se refiere a
nucleótidos de glicerilo de la fórmula Ia
(Ia)A^{2}
\melm{\delm{\para}{\hskip-0.4cm
A ^{3} CH _{2} }}{C}{\uelm{\para}{\hskip-0.4cmA ^{1} CH _{2} }}H
en la
que
- a)
- uno de los restos A^{1}, A^{2} y A^{3} representa un átomo de hidrógeno o un resto seleccionado entre hidroxilo, mercapto, alquilo, alquenilo, polioxi-alquenilo, arilo, acilo, alquil-oxilo, alquilén-oxilo, polioxi-alquenil-oxilo, acil-oxilo, aril-oxilo, tioalquilo, tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo; y
- b1)
- dos de los otros restos A^{1}, A^{2} y A^{3} representan dos grupos nucleósido diferentes entre sí, cada uno de los cuales está unido al átomo de carbono de la cadena de glicerilo a través de un grupo puente con contenido de fósforo disociable fisiológicamente; o
- b2)
- uno de los otros restos A^{1}, A^{2} y A^{3} representa un grupo nucleósido y el otro resto representa un grupo hidroxi-carbonilo, cada uno de los cuales está unido al átomo de carbono de la cadena de glicerilo a través de un grupo puente con contenido de fósforo disociable fisiológicamente;
siendo como mínimo uno de los grupos nucleósido
un grupo nucleósido no natural, que en caso dado está sustituido en
su parte de base, en uno o más átomos cíclicos y/o en uno o más
grupos laterales, como por ejemplo grupos laterales amino, por uno o
más restos seleccionados entre hidroxilo, amino, halógeno, alquilo,
alquenilo, polioxi-alquenilo, arilo, acilo,
alquil-oxilo, alquenil-oxilo,
polioxi-alquenil-oxilo,
acil-oxilo, aril-oxilo, tioalquilo,
tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado
los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo o
átomos halógenos; y que en caso dado está sustituido una o varias
veces en su parte de hidrato de carbono por sustituyentes
seleccionados entre hidrógeno, halógeno, como F, Cl, Br y I,
hidroxilo, etinilo o azido, que dado el caso presenta un heteroátomo
seleccionado entre S, N u O en lugar de un átomo de carbono, y que
en caso dado contiene dos enlaces dobles C=C no colindantes; en
forma racémica o enantiómera pura así como las sales
farmacéuticamente compatibles de estos
compuestos.
Los grupos nucleósido no naturales contenidos en
los compuestos según la invención se derivan de nucleósidos
(derivados de nucleósido) que incluyen un resto heterocíclico (parte
de base) que está unido por N-glicósido u
O-glicósido con un resto de azúcar (parte de hidrato
de carbono). Se diferencian de los nucleósidos naturales adenosina,
guanosina, citidina, uridina y timidina y los correspondientes
desoxinucleósidos en la parte de hidrato de carbono y/o en la parte
de base.
El resto de azúcar del nucleósido no natural o
derivado de nucleósido se deriva de una hexosa o heptosa,
preferentemente de una pentosa, como por ejemplo desoxirribosa o
ribosa. En caso dado, en el resto de azúcar puede haber uno o más
protones o grupos hidroxilo sustituidos o eliminados. Los
sustituyentes adecuados se seleccionan entre los sustituyentes
arriba mencionados; hidrógeno, halógeno como F, Cl, Br y I,
hidroxilo, etinilo y azido. En caso dado, en lugar de un átomo de
carbono puede contener un heteroátomo seleccionado entre S, N u O y,
dado el caso, el resto de azúcar puede contener uno o dos enlaces
dobles C=C no colindantes.
La parte de base del nucleósido no natural o
derivado de nucleósido es el resto de una base heterocíclica
mononuclear o binuclear compuesta por uno o dos anillos de cuatro a
siete miembros, que contienen conjuntamente como mínimo un
heteroátomo cíclico, como por ejemplo de uno a seis heteroátomos
seleccionados entre N, S y O, principalmente N y O. Como ejemplos de
bases de este tipo se mencionan: bases de purina y pirimidina,
adenina, guanina, citosina, uracilo y timina. Otros ejemplos de
bases utilizables son: pirrol, pirazol, imidazol,
amino-pirazol, 1,2,3-triazol,
1,2,4-triazol, tetrazol, pentazol, piridona,
piperidina, piridina, indol, isoindol, pirazina, indoxilo, isatina,
pirazina, piperazina, gramina, triptófano, ácido quimurénico,
triptamina, ácido 3-indoil-acético,
carbazol, indazol, 1,3,5-triazina,
1,2,4-triazina, 1,2,3-triazina y
tetrazina. Las bases preferentes son adenina, guanina, citosina,
uracilo y timina; así como 1,2,3-triazol,
1,2,4-triazol y tetrazol. En caso dado, las bases
mencionadas pueden estar sustituidas una o varias veces, por ejemplo
entre una y cuatro veces, en particular una o dos veces, mediante
los restos arriba indicados hidroxilo, amino, halógeno, alquilo,
alquenilo, polioxi-alquenilo, arilo, acilo,
alquil-oxilo, alquenil-oxilo,
polioxi-alquenil-oxilo,
acil-oxilo, aril-oxilo, tioalquilo,
tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado
los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo o
átomos halógenos. Esta sustitución puede tener lugar en un
heteroátomo cíclico o preferentemente en un átomo de carbono cíclico
o un grupo lateral, como por ejemplo un grupo lateral amino de la
base.
En los compuestos según la invención de la
fórmula (Ia), los grupos puente con contenido de fósforo disociables
fisiológicamente se derivan preferentemente de grupos fosfodiéster y
sus análogos con contenido de azufre. Por consiguiente, en una forma
de realización preferente se preparan compuestos de la fórmula Ia en
los que los grupos nucleósido están unidos independientemente entre
sí con el resto glicerilo a través de un grupo puente seleccionado
entre -OP(OZ)(O)O-, -SP(OZ)(O)O-,
-OP(OZ)(S)O- o -SP(OZ)(S)O-, y el grupo
hidroxi-carbonilo está unido con el resto glicerilo
a través de un grupo puente seleccionado entre -OP(OZ)(O)-,
-SP(OZ)(O)- o -SO(OZ)(S)-, siendo Z un protón o un
catiónfarmacéuticamente compatible.
Son especialmente preferentes los compuestos de
la fórmula Ia en los que A^{1}, A^{2} y A^{3} se seleccionan
de tal modo que se otorgue a la molécula un carácter anfifílico.
Esto se logra sustituyendo el resto glicerilo o el (los)
resto(s) de derivado de nucleósido por un sustituyente
lipófilo. En este caso, el resto de derivado de nucleósido porta el
resto lipófilo preferentemente en la parte de base. Como ejemplos de
restos lipófilos de este tipo se mencionan: alquilo, alquenilo,
polioxi-alquenilo, arilo, acilo,
alquil-oxilo, alquenil-oxilo,
polioxi-alquenil-oxilo,
acil-oxilo, aril-oxilo, tioalquilo,
tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado
los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo o
átomos halógenos.
El resto lipófilo debería incluir preferentemente
más de 6, por ejemplo de 7 a 30 o de 10 a 24, átomos de carbono.
Como ejemplos de restos arilo adecuados se
mencionan: fenilo, naftilo y bencilo.
Como ejemplos de restos alquilo adecuados se
mencionan: restos de cadena lineal o ramificados con 1 a 24 átomos
de C, como metilo, etilo, i- o n-propilo, n-, i-,
sec.- o terc.-butilo, n- o i-pentilo; también
n-hexilo, n-heptilo,
n-octilo, n-nonilo,
n-decilo, n-undecilo,
n-tridecilo, n-tetradecilo,
n-pentadecilo y n-hexadecilo,
octadecilo, docosanilo así como los análogos ramificados de forma
simple o múltiple.
Los restos alquenilo adecuados son, por ejemplo,
los análogos insaturados de forma simple o múltiple, preferentemente
de forma simple o doble, de los restos alquilo con 2 a 24 átomos de
carbono arriba mencionados, pudiendo encontrarse el enlace doble en
cualquier posición de la cadena de carbono.
Los restos polioxi-alquenilo
adecuados se derivan por ejemplo de óxidos de
C_{2}-C_{4}-alquileno que pueden
incluir de 2 a 12 unidades de óxido de alquileno recurrentes.
Los restos acilo adecuados se derivan por ejemplo
de ácidos
C_{1}-C_{24}-monocarboxílicos de
cadena lineal o ramificada, dado el caso sustituidos y dado el caso
insaturados de forma simple o múltiple. Por ejemplo, se pueden
utilizar restos acilo derivados de los siguientes ácidos
carboxílicos: ácidos saturados, como ácido fórmico, acético,
propiónico y n- e i-butírico, ácido n- e
i-valeriánico, ácido caproico, ácido enántico, ácido
caprílico, ácido pelargónico, ácido cáprico, ácido undecánico, ácido
láurico, ácido tridecánico, ácido mirístico, ácido pentadecánico,
ácido palmítico, ácido margárico, ácido esteárico, ácido
nonadecánico, ácido araquídico, ácido behénico, ácido lignocérico,
ácido cerótico y ácido melísico; ácidos insaturados de forma simple,
como ácido acrílico, ácido crotónico, ácido palmitoleínico, ácido
oleico y ácido erúcico; y ácidos insaturados de forma doble, como
ácido sórbico y ácido linólico. Si los ácidos grasos contienen
enlaces dobles, éstos se pueden encontrar tanto en forma cis como en
forma trans.
Los restos alquil-oxilo,
acil-oxilo, aril-oxilo,
alquenil-oxilo y
polioxi-alquilén-oxilo adecuados
son, por ejemplo, los análogos terminados en oxígeno de los restos
alquilo, acilo, arilo, alquenilo y polioxi-alquileno
arriba mencionados.
Los restos tioalquilo, tioalquenilo, tioacilo o
tioarilo adecuados son, por ejemplo, los análogos terminados en
azufre correspondientes de los restos alquil-oxilo,
alquenil-oxilo, acil-oxilo y
aril-oxilo arriba mencionados.
El objeto de la invención consiste principalmente
en nucleótidos de glicerilo, preferentemente anfifílicos, de la
fórmula I
en forma racémica y enantiómera pura, en la que
el resto A y los dos restos de ácido fosfórico pueden estar unidos
en cualquier orden con los átomos C^{1}, C^{2} y C^{3} de la
estructura de
glicerina;
X^{1}, X^{2}, X^{3} y X^{4} son iguales o
diferentes y significan oxígeno y azufre;
A representa alquilo, hidroxilo, tiol o un grupo
alcoxilo, tioalquilo, alquil-carboxilo o
tioalquil-carboxilo, y los restos alquilo son
lineales o ramificados, presentan 1-24 átomos C y
hasta 2 enlaces dobles y pueden estar sustituidos por 1 a 4 restos
aromáticos;
Z representa hidrógeno o la sal correspondiente
de la forma ácida de este compuesto;
uno de los restos N^{1} o N^{2} representa
hidroxi-carbonilo o su sal
y el otro de los restos N^{1} y N^{2}
significa un derivado de nucleósido con configuración D o L de la
fórmulas II, III y IV, y los dos restos N^{1} y N^{2} son
diferentes cuando ambos representan un derivado de nucleósido con
configuración D o L de las fórmulas II, III y IV,
en las
que
Y representa oxígeno o azufre;
R^{1} representa un grupo hidroxilo, amino o un
grupo amino acilado, alquilado o sustituido por polioxietileno, cuyo
resto acilo o alquilo es lineal o ramificado, presenta
1-24 átomos de C y hasta 2 enlaces dobles y puede
estar sustituido por un resto aromático;
R^{2} representa hidrógeno, halógeno, un grupo
amino o hidroxilo, un resto bromo-vinilo, un resto
alquilo C_{1} a C_{24} lineal o ramificado;
R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, R^{7} y
R^{8} son iguales o diferentes y representan hidrógeno, halógeno,
hidroxilo, etinilo y azido;
y uno de los restos R^{3} a R^{8} significa
oxígeno y a través del mismo el derivado de nucleósido está unido
con el fosfato de glicerilo, y dos de los restos R^{3} a R^{6}
se suprimen cuando "a" representa un enlace doble C=C.
Los restos A, R^{1} y R^{2} de la fórmula I
se seleccionan preferentemente de tal modo que se obtenga un
compuesto con carácter anfifílico.
Si A es un resto alcoxilo, son preferentes los
restos con 12 a 24 átomos de C, como los restos
hexadecil-oxilo, octadecil-oxilo o
docosanil-oxilo.
Si A es un resto de ácido carboxílico, son
preferentes los restos con 12 a 24 átomos de C, como los restos de
ácido palmítico, esteárico o behénico.
Si A es un resto alquilo, son preferentes los
restos con 12 a 24 átomos de C, como los restos hexadecilo,
9-octadecenilo, octadecilo o docosanilo.
9-octadecenilo, octadecilo o docosanilo.
Si R^{1} es un grupo amino alquilado, su resto
alquilo es preferentemente un resto con 12 a 24 átomos de C, como un
resto hexadecilo u octadecilo; si R^{1} es un grupo amino acilado,
su resto acilo es preferentemente un resto con 12 a 24 átomos de C,
como un resto palmitoílo, oleoílo y behenoílo.
R^{2} representa preferentemente hidrógeno,
halógeno, metilo o etilo; R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6} y
R^{7} representan preferiblemente azido, hidrógeno, flúor,
etinilo o hidroxilo; y R^{8} es preferentemente un grupo
hidroxilo. No obstante, R^{8} representa de forma especialmente
preferente un átomo de oxígeno a través del cual el resto de
nucleósido está unido al átomo de P del grupopuente.
Si uno de los dos restos N^{1} y N^{2} es un
resto hidroxi-carbonilo, el otro resto es
preferentemente un derivado de nucleósido de la fórmula II o IV.
Otros grupos preferentes de compuestos son:
a) Compuestos de la fórmula (I), en los que
- X^{1}, X^{2}, X^{3} y X^{4} representan
un átomo de oxígeno;
- el átomo C^{1} de la estructura de glicerina
de la fórmula I está unido con el resto A, siendo A hidroxilo,
octadecilo, octadecil-oxilo,
docosil-oxilo o behenoil-oxilo,
palmitoílo u oleoílo;
- el átomo C^{2} de la estructura de glicerina
de la fórmula I está unido con N^{2} a través de un puente de
fosfodiéster, siendo N^{2} un resto de derivado de nucleósido de
las fórmulas II, III o IV, en las que
Y representa un átomo de oxígeno;
R^{1} representa un grupo hidroxilo, amino,
octadecil-amino, docosil-amino,
palmitoíl-amino, oleoíl-amino o
behenoíl-amino;
R^{2} representa metilo, etilo, hidrógeno o
halógeno;
R^{3} a R^{8} tienen los significados arriba
indicados, siendo uno de los restos R^{3}, R^{4}, R^{5},
R^{6} y R^{8} un átomo de oxígeno a través del cual el resto de
derivado de nucleósido N^{2} está unido con el átomo de fósforo;
y
- el átomo C^{3} de la estructura de glicerina
de la fórmula I está unido con el resto de fosfonato de
hidroxi-carbonilo en su forma libre o en forma de
sal.
b) Compuestos de la fórmula I según el grupo a),
en los que principalmente
N^{2} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula II o IV, en la que
R^{1} significa un grupo amino,
palmitoíl-amino o hidroxilo;
R^{2} significa hidrógeno, metilo o etilo;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} significa hidrógeno, flúor o azido, y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{2} está unido con el átomo de fósforo.
c) Compuestos de la fórmula I, en los que
X^{1}, X^{2}, X^{3} y X^{4} significan un
átomo de oxígeno;
A representa palmitoil-oxilo,
oleoil-oxilo y octadecil-oxilo y
está unido con el átomo C^{2} de la estructura de glicerina de la
fórmula I; y
N^{1} y N^{2} son diferentes y representan un
resto de derivado de nucleósido de las fórmulas II, III y IV.
d) Compuestos de la fórmula I según el grupo c,
en los que principalmente
N^{1} representa un resto de derivado de
nucleósido, preferentemente con configuración L, de la fórmula
II,
en la que
R^{1} significa un grupo amino o
palmitoíl-amino;
R^{2}, R^{3} y R^{4} representan hidrógeno;
y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{1} está unido con el átomo de fósforo en la posición
C^{1} o C^{3} de la estructura de difosfato de glicerilo de la
fórmula I; y
N^{2} representa un resto de derivado de
nucloeósido de la fórmula III o IV.
e) Compuestos de la fórmula I según el grupo c,
en los que principalmente
N^{2} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula IV, en la que
R^{1} representa un grupo amino,
palmitoíl-amino o hidroxilo;
R^{2} representa hidrógeno o metilo;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} representa hidrógeno, flúor o azido;
y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{2} está unido con el átomo de fósforo en la posición
C^{1} o C^{3} de la estructura de difosfato de glicerilo de la
fórmula I.
f) Compuestos de la fórmula I según el grupo c,
en los que principalmente
N^{1} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula II o IV y
N^{2} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula III,
fórmulas en las que
R^{1} representa hidroxilo;
R^{2} a R^{7} representan hidrógeno; y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{1} o N^{2} están unidos con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato de la fórmula
I.
g) Compuestos de la fórmula I según el grupo c,
en los que principalmente N^{1} y N^{2} representan un resto de
derivado de nucleósido de la fórmula IV, en la que en N^{1}
R^{1} representa un grupo amino,
palmitoíl-amino o un grupo
octadecil-amino;
R^{2}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{3}, R^{4} y R^{6} son iguales o
diferentes y representan
hidrógeno, hidroxilo o flúor;
y en la que en N^{2}
R^{1} representa un grupo hidroxilo;
R^{2} representa metilo o halógeno;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno, pudiendo suprimirse en caso dado dos restos vicinales de
éstos si en la posición "a" hay un enlace doble;
R^{6} representa hidrógeno, flúor, azido o
hidroxilo; y R^{8} representa tanto en N^{1} como en N^{2} un
átomo de oxígeno a través del cual N^{1} y N^{2} están unidos
con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato.
h) Compuestos de la fórmula I según el grupo g,
en los que principalmente en N^{1} y N^{2}
R^{1} es igual o diferente y representa un
grupo hidroxilo o amino;
R^{2} es igual o diferente y representa
hidrógeno o metilo;
R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} representa azido en N^{1} y flúor en
N^{2}; y
R^{8} significa el átomo de oxígeno a través
del cual N^{1} y N^{2} están unidos con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato.
i) Compuestos de la fórmula I según el grupo g,
en los que principalmente en N^{1}
R^{1} representa un grupo amino o
palmitoíl-amino;
R^{2} y R^{7} representan hidrógeno;
R^{3} y R^{4} representan flúor, hidrógeno o
hidroxilo;
R^{5} representa hidrógeno o un resto
etinilo;
R^{6} representa hidroxilo;
y en N^{2}
R^{1} representa hidroxilo;
R^{2} representa flúor;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} representa hidroxilo;
y R^{8} representa tanto en N^{1} como en
N^{2} un átomo de oxígeno a través del cual N^{1} y N^{2}
están unidos con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato.
Los nuevos nucleótidos de glicerilo
preferentemente anfifílicos de la fórmula Ia se pueden producir a
partir de un compuesto de la fórmula Ib
(Ib)A^{2B}
\melm{\delm{\para}{\hskip-0.5cmA ^{3B} CH _{2} }}{C}{\uelm{\para}{\hskip-0.5cmA ^{1B} CH _{2} }}H
en la que uno de los restos A^{1B}, A^{2B} y
A^{3B} representa un grupo hidroxilo, mercapto,
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato, y los otros dos restos
tienen los significados indicados más arriba para A^{1}, A^{2} y
A^{3}, representando como mínimo uno de los dos restos un grupo
nucleósido según la definición arriba
indicada,
- a)
- condensándolo en presencia de un cloruro de ácido con un nucleósido o derivado de nucleósido según la definición arriba indicada, portando el derivado de nucleósido adicionalmente un grupo hidrógeno-fosfonato o tiohidrógeno-fosfonato cuando uno de los restos A^{1B}, A^{2B} y A^{3B} representa un grupo hidroxilo o mercapto; y oxidando el producto obtenido; o
- b)
- sometiéndolo a reacción con (etoxi-carbonil)-dicloro-fosfonato e hidrolizando a continuación de forma alcalina los grupos de cloruro de ácido y los grupos etoxilo.
\newpage
Los nucleótidos de glicerilo preferentemente
anfifílicos según la invención de la fórmula I, en los que N^{1} y
N^{2} representan un derivado de nucleósido con configuración D o
L, se pueden producir a partir de un compuesto de la fórmula V
en la que los restos A, X^{2}B y el resto del
ácido fosfórico pueden estar unidos en cualquier orden con los
átomos C^{1}, C^{2} y C^{3} de la estructura de glicerina; los
restos A, X^{2}, X^{3}, X^{4}, N^{2} y Z tienen los
significados arriba indicados; y X^{2}B representa un grupo
hidroxilo, tiol, hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato;
condensándolo en presencia de un cloruro de
ácido con un derivado de nucleósido de las fórmulas II, III o IV
arriba indicadas, en las que los restos R^{1} a R^{8} tienen los
significados indicados y adicionalmente R^{8} también puede
representar 4-mono-,
4,4'-dimetoxi-trifenil-metoxilo,
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato; R^{3}, R^{4}, R^{5} y
R^{6} pueden representar adicionalmente un resto carboxilo lineal
o ramificado que presenta 1-24 átomos de C y puede
estar sustituido por un resto fenilo; y siempre uno de los restos
R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6} y R^{8} representa
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato cuando X2B representa
hidroxilo o tiol en un compuesto de la fórmula V, y en cambio
ninguno de estos restos significa
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato cuando X^{2}B representa
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato;
y oxidando a continuación el producto
obtenido.
La condensación se desarrolla especialmente bien
en presencia de anhídridos de ácido o halogenuros de ácido,
principalmente cloruro del ácido pivalínico, a una temperatura de
-80ºC a +100ºC, por ejemplo de aproximadamente
0-20ºC. La oxidación se desarrolla especialmente
bien a una temperatura de -80ºC a +100ºC, por ejemplo de
aproximadamente 0-20ºC, a) oxidando el enlace
P-H con yodo en disolventes orgánicos acuosos para
obtener un enlace P=O, o b) oxidando el enlace P-H
con S_{8} en trietil-amina/CS_{2} para obtener
un enlace P=S.
Después de la oxidación y la elaboración
cromatográfica, el grupo 4-mono- o
4,4'-dimetoxi-trifenil-metilo
se sustituye por hidroxilo. En caso necesario, los restos acilo se
transforman hidrolíticamente en grupos mercapto, hidroxilo y/o
amino.
Los nuevos compuestos, preferiblemente
anfifílicos, de la fórmula I en la que N^{1} representa un resto
hidroxi-carbonilo que está unido en su forma de
ácido o sal, se pueden preparar sometiendo a reacción de forma
conocida en sí un compuesto de la fórmula V, en la que B representa
hidrógeno, con dicloruro del ácido
(etoxi-carbonil)-fosfórico. La
reacción se desarrolla especialmente bien en mezclas con
hidrocarburos halogenados tales como, principalmente,
piridina/cloroformo, aceto-nitrilo/cloroformo o
piridina/cloruro de metileno y aceto-nitrilo/cloruro
de metileno, y ésteres trimelíticos del ácido fosfórico a una
temperatura de -10ºC a +80ºC, por ejemplo a una temperatura de
0-10ºC. Después de la reacción y el tratamiento
cromatográfico, los grupos de cloruro ácido y etoxilo se sustituyen
por grupos hidroxilo o las formas de sal correspondientes mediante
hidrólisis alcalina subsiguiente (J. Med. Chem. (1986) 29,
1389).
Los compuestos de la fórmula V utilizados como
material de partida se pueden preparar de forma conocida en sí
mediante condensación de un compuesto de la fórmula VI
(VI),A
\melm{\delm{\para}{C ^{3} H _{2} -X ^{3} B}}{C ^{2} }{\uelm{\para}{C ^{1} H _{2} -X ^{2} R ^{9} }}H
en la
que
- los restos A, X^{2}R^{9} y X^{3}B pueden
estar unidos en cualquier orden con los átomos C^{1}, C^{2} y
C^{3} de la estructura de glicerina;
- A y X^{2} tienen los significados arriba
indicados;
- R^{9} representa 4-mono- o
4,4'-dimetoxi-trifenil-metilo
o un resto acilo lineal o ramificado, que presenta
1-24 átomos de C y puede estar sustituido por un
resto aromático;
- el resto X^{3}B representa un grupo
hidroxilo, tiol, hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato;
con un derivado de nucleósido de las fórmulas II,
III o IV, teniendo los restos R^{1}-R^{8} los
significados arriba indicados, y siempre uno de los restos R^{3},
R^{4}, R^{5}, R^{6} y R^{8} también representa
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato cuando el resto X^{3}B
representa hidroxilo o tiol en un compuesto de la fórmula VI, y en
cambio ninguno de estos restos significa
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato cuando X^{3}B representa
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato en un compuesto de la fórmula
VI; en presencia de un cloruro de ácido y oxidándolo a continuación
con yodo o azufre (Tetrahedron Lett, (1986) 27, 469: ibid
5575).
Después del tratamiento cromatográfico, el resto
4-mono- o
4',4'-dimetoxi-trifenil-metilo
se sustituye por hidrógeno en condiciones ácidas y el resto acilo se
sustituye por hidrógeno en condiciones alcalinas.
Los materiales de partida necesarios para las
reacciones son sustancias conocidas o se pueden producir de forma
análoga a procedimientos conocidos (Hel. Chim. Acta (1982) 65, 1059;
Liebigs Ann. Chem. (1991) 765; ibid (1996) 365; Antivir. Chem. &
Chemother. (1998) 9, 33. J.C.S. Perkin I (1982) 11 71; Makromol.
Chem. (1986) 187, 809; Tetrahedron Lett. (1986) 27, 2661).
Los compuestos según la invención pueden tener
carácter tanto anfifílico como no anfifílico. No obstante, son
especialmente preferentes los compuestos anfifílicos.
La transformación según la invención de Foscarnet
y los análogos de nucleósido terapéuticamente eficaces en
nucleótidos de glicerilo anfifílicos requiere un comportamiento
farmacocinético fuertemente modificado. De este modo, la dosis
administrable se puede aumentar sorprendentemente en comparación con
el monómero correspondiente, sin que al mismo tiempo se produzca una
intensificación de todos los efectos secundarios tóxicos de estos
medicamentos de alta potencia. Además, los nucleótidos de glicerilo
anfifílicos tienen efecto incluso en caso de resistencia contra los
análogos de nucleósido monoméricos correspondientes.
El carácter anfifílico de nucleótidos de
glicerilo anfifílicos según la invención posibilita diferentes
esquemas de administración. El área lipófila de los nucleótidos de
glicerilo permite la incorporación estable de los principios activos
junto con lípidos de matriz en liposomas, favorece la absorción
celular de los nucleótidos de glicerilo anfifílicos disueltos en
agua y al mismo tiempo los protege de una hidrólisis enzimática
demasiado rápida. El área hidrófila permite que los principios
activos también sean solubles en agua, presumiblemente a través de
una formación de micelas. La posibilidad de administración
alternativa de los nucleótidos de glicerilo anfifílicos tiene la
ventaja de que el efecto de depósito deseado de los dímeros no sólo
se logra en una dispersión de liposomas, sino también en soluciones
acuosas, de modo que no se depende exclusivamente de la tecnología
de liposomas, pero ésta se puede emplear en caso necesario, lo que a
su vez no es posible sin problemas en caso de principios activos
únicamente solubles en agua.
Otra ventaja de los nucleótidos de glicerilo
anfifílicos según la invención consiste en que se pueden incorporar
en liposomas junto con uno o más principios activos adicionales en
diferentes cantidades, con lo que se obtienen efectos sinérgicos. La
terapia de enfermedades cancerosas y enfermedades infecciosas
provocadas por virus se puede optimizar con estos nucleótidos de
glicerilo anfifílicos y/o en composición con un soporte
biológicamente compatible y/o con productos que contienen los
compuestos según la invención como mínimo en una o más de las
composiciones.
Los compuestos según la invención se utilizan en
general en forma de productos farmacéuticos para el tratamiento de
un individuo, preferentemente un mamífero, en particular un ser
humano. Así, los compuestos se administran habitualmente en forma de
composiciones farmacéuticas que incluyen un excipiente
farmacéuticamente compatible con como mínimo un analogón de fosfato
de nucleósido según la invención, dado el caso también una mezcla de
varios compuestos según la invención, y en caso dado otros
principios activos útiles para el efecto tarapéutico deseado
correspondiente. Estas composiciones se pueden administrar por
ejemplo por vía oral, rectal, transdérmica, subcutánea, intravenosa,
intramuscular o intranasal.
Como ejemplos de formulaciones farmacéuticas
adecuadas se mencionan: medicamentos sólidos, como polvo,
granulados, tabletas, pastillas, saquitos, sellos, grageas, cápsulas
como cápsulas de gelatina dura y gelatina blanda, supositorios o
medicamentos vaginales; medicamentos semisólidos, como pomadas,
cremas, hidrogeles, pastas o emplastos; y medicamentos líquidos,
como soluciones, emulsiones, en particular emulsiones de aceite en
agua, suspensiones, por ejemplos lociones, preparados para inyección
e infusión, gotas para los ojos y gotas para los oídos. También se
pueden emplear dispositivos de suministro implantados para
administrar compuestos según la invención. Además se pueden utilizar
liposomas, microesferas o matrices poliméricas.
En la preparación de las composiciones, los
compuestos según la invención habitualmente se mezclan o diluyen con
un excipiente. Los excipientes pueden ser materiales sólidos,
semisólidos o líquidos, que sirven como vehículo, soporte o medio
para el principio activo.
Entre los excipientes adecuados se encuentran por
ejemplo la lactosa, dextrosa, sacarosa, sorbitol, manitol,
almidones, goma arábiga, fosfato cálcico, alginatos, goma de
tragacanto, gelatinas, silicato cálcico, celulosa microcristalina,
polivinil-pirrolidona, celulosa, agua, jarabe y
metil-celulosa. Las formulaciones pueden incluir
además soportes farmacéuticamente aceptables o sustancias auxiliares
habituales, como lubricantes, por ejemplo sebo, estearato magnésico
y aceite mineral; humectantes; agentes emulsionantes y de
suspensión; conservantes, como hidroxi-benzoato de
metilo y propilo; antioxidantes; sustancias antiirritación;
formadores de quelatos; agentes auxiliares para la formación de
grageas; estabilizadores de emulsión; formadores de película;
formadores de gel; agentes enmascaradores del olor; correctores del
sabor; resinas; hidrocoloides; disolventes; solubilizadores; agentes
neutralizantes; aceleradores de permeación; pigmentos; compuestos
amónicos cuaternarios; agentes reengrasadores y sobreengrasadores;
sustancias básicas de pomadas, cremas o aceites; derivados de
silicona; agentes auxiliares de difusión; estabilizadores;
esterilizantes; bases para supositorios; sustancias auxiliares para
tabletas, como ligantes, materiales de carga, lubricantes,
explosivos o revestimientos; propelentes; secantes; opacificantes;
espesantes; ceras; plastificantes; aceites blancos. Una
configuración a este respecto se basa en conocimientos
especializados, tal como se describe por ejemplo en Fiedler, H. P.,
Lexicon der Hilfsstoffe für Pharmazie, Kosmetik und angrenzende
Gebiete, 4ª edición, Aulendorf:
ECV-Editio-Kantor-Verlag,
1996.
Para una administración lo más eficaz posible de
los compuestos según la invención se preparan composiciones de
diferente tipo. Todas estas composiciones tienen en común que los
compuestos según la invención se encuentran en combinación con un
soporte orgánico.
Una forma de realización preferente de
composiciones de este tipo prevé la asociación de los compuestos
según la invención en forma de liposomas de unilaminares a
oligolaminares con un diámetro de como máximo 0,4 \mum. Para la
formación de liposomas se pueden utilizar todos los procedimientos
conocidos en sí de la síntesis de liposomas, como por ejemplo
ultrasonidos, cromatografía en gel, análisis de detergente,
filtración a alta presión. Los restos lipófilos incorporados en cada
caso influyen de forma decisiva en el tamaño y la estabilidad de los
liposomas formados a partir de los nucleótidos de glicerilo
correspondientes junto con otros componentes lipídicos (véase
también Liposomes: From Physical Structure to Therapeutic
Applications en: Research monographs in cell and tissue physiology
Tomo 7, G. G. Knight Edit., Elsevier (1981)).
Otra posibilidad preferente para unir los
compuestos según la invención con un soporte orgánico consiste en la
inclusión de los compuestos en nanopartículas biológicamente
compatibles. El término nanopartículas indica polímeros
orgánicos-químicos a los que se les añaden los
compuestos según la invención durante la polimerización, de modo que
éstos se incluyen en la nanopartícula con una eficacia determinada
(véase Bender et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy (1996),
40 (6) 1467-1471).
En una forma de realización preferente, la
composición se lleva a cabo con componentes que se acumulan
específicamente en las células y/u órganos que se han de someter a
terapia. La composición de los liposomas se puede elegir por ejemplo
de tal modo que los liposomas se doten adicionalmente de moléculas
como por ejemplo anticuerpos, lípidos cargados, lípidos modificados
con grupos de cabeza hidrófilos, para que la composición se acumule
preferentemente en las células y/u órganos que se han de someter a
terapia. Una composición de este tipo con moléculas dirigidas
específicamente contra células tumorales, células y/u órganos
infectados por virus aumenta la eficacia terapéutica del medicamento
y reduce al mismo tiempo la toxicidad para el tejido no
infectado.
Las composiciones se pueden procesar en un
producto que, además de los compuestos según la invención y dado el
caso el soporte orgánico, también contiene agentes de soporte y/o
diluyentes y/o sustancias auxiliares habituales. Los materiales de
soporte habituales son, por ejemplo, manita, glucosa, dextrosa,
albúmina o similares, mientras que como diluyentes esencialmente se
utilizan soluciones de cloruro sódico fisiológicas o una solución de
glucosa al 5%. También es habitual tamponar las soluciones con
reactivos adecuados, por ejemplo fosfatos. También se pueden añadir
todos los demás productos habituales para la preparación de
productos farmacéuticos, siempre que no afecten a la composición
consistente en el soporte orgánico y los compuestos según la
invención. El producto se puede administrar en forma de solución de
infusión, pero también por vía oral.
Sin embargo, mediante la transformación en
nucleótidos de glicerilo anfifílicos no sólo se puede aumentar la
resistencia a la hidrólisis enzimática y ampliar claramente las
formas de administración, sino que sorprendentemente también se
pueden optimizar los efectos citostáticos y virustáticos.
Los nucleótidos de glicerilo anfifílicos se
pueden utilizar contra enfermedades malignas de las células
hematopoyéticas y tumores sólidos. Mediante el efecto citostático
mejorado se producen muchos menos efectos secundarios agravantes. Se
pueden utilizar dosis mayores de los compuestos citostáticamente
eficaces según la invención y la terapia se puede llevar a cabo a
intervalos temporales.
Sorprendentemente, los análogos de fosfato de
nucleósido según la invención también presentan efectos
virustáticos, de modo que se pueden emplear en la quimioterapia de
infecciones provocadas por virus y para superar resistencias a
medicamentos por ejemplo para herpes, hepatitis y SIDA.
Por consiguiente, otro objeto de la invención se
refiere a la utilización de compuestos según la invención para el
tratamiento de enfermedades cancerosas, como leucemia, cáncer de
pulmón, cáncer intestinal, cáncer del sistema nervioso central,
melanomas, cáncer de ovario, cáncer de riñón, cáncer de próstata y
cáncer de mama; así como para el tratamiento de enfermedades virales
como SIDA, hepatitis A, B y C y herpes.
Los siguientes ejemplos ilustran la invención sin
limitarla.
2,5 g (3,8 mmol) de
3-O-(4-monometoxi-tritil)-1-O-octadecil-rac-glicerol-2-hidrógeno-fosfonato
se disuelven junto con 1g (3,8 mmol) de
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina
en 15 ml de piridina anhidra. La solución enfriada a
aproximadamente 10ºC se mezcla en condiciones de exclusión de
humedad con 2,3 ml (19 mmol) de cloruro de pivaloílo y se agita
durante 7 minutos a temperatura ambiente. Acto seguido, a la mezcla
de reacción enfriada a 0ºC se le añaden sucesivamente 1 ml de agua y
20 ml de una solución 0,2 M de yodo en THF, que a continuación se
agita durante 1 h sin refrigeración. El yodo en exceso se reduce
mediante adición de bisulfito sódico sólido antes de concentrar la
carga de reacción en el evaporador rotativo para obtener un jarabe
que se recoge en 80 ml de dicloro-metano y se extrae
tres veces por agitación con 50 ml de agua/metanol 1:1 (v:v). La
fase orgánica se concentran en el evaporador rotativo hasta obtener
un jarabe que se coevapora tres veces con tolueno. Para sustituir el
grupo 4-monometoxi-tritilo por
hidrógeno, el jarabe se disuelve en 50 ml de ácido acético/agua 4:1
(v:v), se calienta durante 5 minutos a 40ºC y a continuación se
concentra de nuevo en el evaporador rotativo hasta obtener un
jarabe, que se coevapora de nuevo dos veces con tolueno, después se
disuelve en 25 ml de cloroformo/metanol 98:2 (v:v) y se fracciona en
una columna de gel de sílice con un gradiente de cloroformo/metanol.
Las fracciones con contenido de producto se transforman en el
evaporador rotativo en 2 g (3 mmol) de una espuma que presenta un
valor Rf de 0,48 en el sistema eluyente cloroformo/metanol 7:3
(v:v).
La espuma obtenida en el paso a) se añade en
porciones con agitación a una solución enfriada a 0ºC de 1 g de
dicloruro del ácido
etoxi-carbonil-fosfónico en 12 ml de
éster trimelítico del ácido fosfórico. La mezcla de reacción se
agita durante otras 4 h a 0ºC, a continuación se mezcla con
enfriamiento con 50 ml de éter y 50 ml de agua y se agitan bien a
fondo. La fase acuosa se separa y la fase orgánica se extrae de
nuevo por agitación con agua. Las fases acuosas combinadas se
neutralizan con sosa cáustica 2 M con enfriamiento con hielo y se
concentran hasta obtener un jarabe que se recoge en éter y se
cristaliza con ultrasonidos. El precipitado obtenido se extrae por
centrifugación, se seca, se disuelve en 10 ml de agua, se mezcla con
10 ml de sosa cáustica 2 N y se agita durante 1 h a temperatura
ambiente. La solución de reacción se neutraliza con ácido
clorhídrico 2 N, se concentra en vacío y se desala en una columna
Sephadex-G_{10}. Las fracciones con contenido de
producto se liofilizan, con lo que se obtienen 2,1 g de
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidilil-(5’\rightarrow2)-1-O-octadecil-rac-glicerol-
3-(hidroxi-carbonil)-hidrógeno-fosfonato
en forma de un polvo incoloro que presenta un valor R_{f} de 0,1
en la placa de capa fina de gel de sílice en el sistema eluyente
cloroformo/metanol 6:4 (v:v). La masa molecular calculada (769,77)
se confirma en el espectro de masas por pulverización iónica
mediante el pico molecular (768,5).
4,8 g (7 mmol) de
1-O-(4-monometoxi-tritil)-2-O-octadecil-rac-glicerol-3-
hidrógeno-fosfonato se condensan junto con 2 g (7
mmol) de
3'-O-acetil-5-fluoro-2'-desoxi-uridina
en 50 ml de piridina anhidra añadiendo 4,3 ml de cloruro de
pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1, y se oxidan con 32
ml de una solución 0,2 M de yodo en THF. Para sustituir el grupo
4-monometoxi-tritilo por hidrógeno,
el jarabe obtenido después de la condensación se disuelve en 70 ml
de ácido acético/agua 4:1 (v:v) y se calienta durante 30 minutos en
condiciones de reflujo. La solución enfriada se concentra en el
evaporador rotativo hasta obtener un jarabe que se coevapora dos
veces con tolueno, a continuación se recoge en 35 ml de
dicloro-metano/metanol 9:1 (v:v) y se fracciona en
una columna de gel de sílice con un gradiente de
dicloro-metano/metanol. Las fracciones con contenido
de producto se transforman en vacío en 3,0 g de espuma que presenta
un valor R_{f} de 0,32 en la placa de capa fina de gel de sílice
en el sistema eluyente cloroformo/metanol 7:3 (v:v).
La espuma obtenida en el paso a) y 2,8 g (4,3
mmol) de
2',3'-di-O-acetil-
N^{4}-estearoíl-arabino-citidina-5'-hidrógeno-fosfonato
se condensan en 35 ml de piridina anhidra añadiendo3 ml de cloruro
de pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1. Después de
añadir 2 ml de agua, la carga se oxida mediante adición de 20 ml de
una solución 0,2 M de yodo en THF. Después de concentrarla en el
evaporador rotativo, al mezcla de reacción se recoge en
dicloro-metano y se extrae tres veces por agitación
con una solución de NaCl acuoso saturado/agua/metanol 1:1:2 (v:v:v).
La fase orgánica se concentra en vacío hasta obtener un jarabe, que
se coevapora otras tres veces con tolueno. A continuación, el jarabe
se recoge en dicloro-metano/metanol 9:1 (v:v) y se
fracciona en una columna de gel de sílice con un gradiente de
dicloro-metano/metanol. Las fracciones con
contenido de producto se concentran en vacío hasta obtener un jarabe
que, disuelto en acetato de etilo caliente, cristaliza a 0ºC. Para
sustituir los grupos protectores de acilo por hidrógeno, el
precipitado se disuelve en un poco de
dicloro-metano/metanol 1:1 (v:v). La solución se
mezcla con metanol, que previamente ha sido saturado con amoníaco a
temperatura ambiente, se deja reposar cerrada durante 36 h a
temperatura ambiente y después se concentra en el evaporador
rotativo hasta que comienza la cristalización. Después de 12 h de
reposo a 0ºC, la
arabino-citidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-glicerilil-
(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'-desoxi-uridina
resultante se aspira, selava con éter y, después de secarla, se
obtienen 2,3 g de un polvo blanco que presenta un valor R_{f} de
0,10 en la placa de capa fina de gel de sílice en el sistema
eluyente cloroformo/metanol/NH_{3} 10:10:3 (v:v:v). La masa
molecular calculada (957,93) se confirma en el espectro de masas por
pulverización iónica mediante el pico molecular (957,0).
2,4 g (5,3 mmol) de
1-O-acetil-2-O-octadecil-rac-glicerol-3-hidrógeno-fosfonato
y 1,4 g (5,3 mmol) de
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina
se condensan en 30 ml de piridina anhidra añadiendo 3,5 ml (28,4
mmol) de cloruro de pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1.
Después de añadir 2 ml de agua, la mezcla se oxida con 25 ml de una
solución 0,2 M de yodo en THF. La mezcla de reacción se concentra en
el evaporador rotativo, se recoge en 85 ml de cloroformo y se extrae
por agitación tres veces con 40 ml de una solución de NaCl acuoso
saturado/agua/metanol 1:1:2 (v:v:v) en cada caso. La fase orgánica
se concentra después hasta obtener un jarabe que, para sustituir el
grupo acetilo por hidrógeno, se trata durante 12 h con metanol que
previamente ha sido saturado con amoníaco a temperatura ambiente.
Después de la concentración subsiguiente en vacío, el jarabe se
recoge en dicloro-metano y se fracciona en una
columna de gel de sílice con un gradiente de
dicloro-metano/metanol. Las fracciones con contenido
de producto se concentran en vacío hasta obtener un jarabe que,
disuelto en etanol, forma a -25ºC 3,0 g de cristales incoloros que
presentan un valor R_{f} de 0,26 en el sistema eluyente
cloroformo/metanol 7:3 (v:v).
Los cristales obtenidos en el paso a) y 2,4 g
(4,5 mmol) de
N^{4}-palmitoíl-3'-tia-2',3'-didesoxi-citidina-5'-hidrógeno-fosfonato
se condensan en 40 ml de piridina anhidra añadiendo 3,0 ml de
cloruro de pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1, y se
oxidan con 20 ml de una solución 0,2 M de yodo en THF. El jarabe así
obtenido se disuelve en 100 ml de cloroformo/metanol 9:1 (v:v) y se
fracciona en una columna de gel de sílice con un gradiente de
cloroformo/metanol. Las fracciones con contenido de producto se
concentran en vacío hasta obtener un jarabe del que, después de
añadir metanol, cristalizan 2,5 g de
N^{4}-palmitoíl-3'-tia-2',3'-didesoxi-citidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-
octadecil-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina
en forma de un polvo blanco quepresenta un valor R_{f} de 0,20
en la placa de capa fina de gel de sílice en el sistema eluyente
cloroformo/metanol 7:3 (v:v). La masa molecular calculada (1.203,5)
se confirma en el espectro de masas por pulverización iónica
mediante el pico molecular (1.202,5).
Los cristales obtenidos en el paso a) del Ejemplo
3 y 2,3 g (4,5 mmol) de
N^{4}-palmitoíl-2',3'-didesoxi-citidina-5'-hidrógeno-fosfonato
se condensan en 40 ml de piridina anhidra añadiendo 3,0 ml (24,4
mmol) de cloruro de pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1,
y se oxidan con 20 ml de una solución 0,2 M de yodo en THF. El
jarabe obtenido después de la condensación se disuelve en 130 ml de
etanol caliente y se filtra, y a -25ºC cristalizan 5,1 g de
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-
glicerilil-(3\rightarrow5')-N^{4}-palmitoíl-2',3'-didesoxi-citidina
en forma de cristales incoloros que presentan un valor R_{f} de
0,26 en la placa de gel de sílice en el sistema eluyente
cloroformo/metanol 6:4 (v:v). La masa molecular calculada
(1.185,40) se confirma en el espectro de masas por pulverización
iónica mediante el pico molecular (1.184,0).
3,2 g (7,2 mmol) de
1-O-acetil-2-O-palmitoíl-rac-glicerol-3-hidrógeno-fosfonato
y 2,0 g (7,2 mmol) de
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina
se condensan en 60 ml de piridina anhidra añadiendo 4,5 ml (36,6
mmol) de cloruro de pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1,
y se oxidan con 32 ml de una solución 0,2 M de yodo en THF. El
jarabe obtenido después de la condensación se recoge en 75 ml de
cloroformo/metanol 9:1 (v:v) y se fracciona en una columna de gel de
sílice con un gradiente de cloroformo/metanol. Las fracciones con
contenido de producto se concentran en vacío, se recogen en 15 ml de
cloroformo, se mezclan con 120 ml de metanol, que previamente ha
sido saturado a temperatura ambiente con amoníaco, y se dejan
reposar durante 90 minutos a temperatura ambiente. A continuación,
la mezcla de reacción se concentra en vacío y se coevapora con
tolueno hasta sequedad. El residuo se recoge en cloroformo/metanol
9:1 (v:v) y se fracciona en una columna de gel de sílice con un
gradiente de cloroformo/metanol. Las fracciones con contenido de
producto se concentran en vacío hasta obtener 2,7 g de una espuma
que presenta un valor R_{f} de 0,24 en el sistema eluyente
cloroformo/metanol 7:3 (v:v).
La espuma obtenida en el paso a) y 2,1 g (4,1
mmol) de
N^{4}-palmitoíl-2',3'-didesoxi-citidina-5'-hidrógeno-fosfonato
se condensan en 35 ml de piridina anhidra añadiendo 25 ml (20,3
mmol) de cloruro de pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1,
y se oxidan con 20 ml de una solución 0,2 M de yodo en THF. El
jarabe obtenido después de la condensación se disuelve en 50 ml de
cloroformo/metanol 95:5 (v:v) y se fracciona en una columna de gel
de sílice con un gradiente de cloroformo/metanol. Las fracciones con
contenido de producto se concentran en vacío hasta obtener un jarabe
del que, después de añadir metanol, cristalizan 2,3 g de
N^{4}-palmitoíl-2',3'-didesoxi-citidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-palmitoíl-rac-
glicerilil-(3\rightarrow5')-3'-azido-2',3'-didesoxitimidina
en forma de un polvo blanco que presenta un valor R_{f} de 0,25
en la placa de capa fina de gel de sílice en el sistema eluyente
cloroformo/metanol 6:4 (v:v). La masa molecular calculada (1.171,0)
se confirma en el espectro de masas por pulverización iónica
mediante el pico molecular (1.170,0).
El material del paso a) del Ejemplo 3 se disuelve
en una mezcla de 10 ml de piridina y 40 ml de dioxano anhidros, se
mezcla con 1,1 g (5,3 mmol) de cloro-fosfito
salicílico y se agita 1 h a temperatura ambiente. Se enfría la
mezcla de reacción a 0ºC, se mezcla con 2 ml de agua, se agita
durante 15 minutos a temperatura ambiente y se concentra en vacío
hasta obtener un jarabe que se recoge en 120 ml de agua y se extrae
tres veces por agitación con 40 ml de acetato de etilo cada una. La
fase acuosa se concentra en vacío y se liofiliza. Se obtienen 2,5 g
de un polvo blanco con R_{f} de 0,15 en placa de gel de sílice
eluyendo con cloroformo/metanol 7:3 vol/vol.
El liofilizado obtenido en el paso a) se condensa
con 0,8 g (3,4 mmol) de
2',3'-didesoxi-inosina en 25 ml de
piridina añadiendo 2,0 ml (16,3 mmol) de cloruro de pivaloílo como
en el paso a) del Ejemplo 1, y se oxida con 16 ml de una solución
0,2 M de yodo en THF. El jarabe obtenido después de la condensación
se recoge en 50 ml de cloroformo/metanol 9:1 (v:v) y se fracciona en
una columna de gel de sílice con un gradiente de cloroformo/metanol.
Las fracciones con contenido de producto se concentran en vacío
hasta obtener un jarabe del cual, después de añadir éter,
cristalizan 1,1 g de
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-
glicerilil-(3\rightarrow5')-2',3'-didesoxi-inosina
en forma de cristales blancos que presentan un valor R_{f} de
0,21 en la placa de gel de sílice en el sistema eluyente
cloroformo/metano 1:1 (v:v). La masa molecular calculada (971,99) se
confirma en el espectro de masas por pulverización iónica mediante
el pico molecular (970,5).
4,3 g (9,5 mmol) de
1-O-acetil-2-O-octadecil-rac-glicerol-3-hidrógeno-fosfonato
se condensan junto con 2,3 g (9,5 mmol) de
3'-fluoro-2',3'-didesoxi-timidina
en 25 ml de piridina añadiendo 5,7 ml de cloruro de pivaloílo
análogamente al paso a) del Ejemplo 1, y se oxidan con 45 ml de una
solución 0,2 M de yodo en THF. El jarabe obtenido después de la
condensación se recoge en un poco de cloroformo, se mezcla con 200
ml de metanol, que previamente ha sido saturado a temperatura
ambiente, se agita enérgicamente y se deja durante la noche a
temperatura ambiente. A continuación, la mezcla de reacción se
concentra en vacío hasta que comienza la cristalización. El
precipitado obtenido después de 12 h de reposo a -25ºC se aspira y
se seca. Se obtienen 3,4 g de un polvo blanco que presenta un valor
R_{f} de 0,71 en la placa de capa fina de gel de sílice en el
sistema eluyente cloroformo/metanol 6:4 (v:v).
3,4 g (5,2 mmol) del polvo obtenido en el paso a)
y 1,7 g (2,3 mmol) de
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina-5'-hidrógeno-fosfonato
se condensan en 45 ml de piridina anhidra añadiendo 3,5 ml de
cloruro de pivaloílo análogamente al paso a) del Ejemplo 1, y se
oxidan con 25 ml de una solución 0,2 M de yodo en THF. El jarabe
obtenido después de la condensación se disuelve en 100 ml de
cloroformo/metanol 9:1 (v:v) y se fracciona en una columna de gel de
sílice con un gradiente de cloroformo/metanol. Las fracciones con
contenido de producto se concentran en vacío hasta obtener un jarabe
a partir del cual, después de añadir metanol, se obtienen 2,7 g de
3'-fluoro-2',3'-didesoxi-timidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-
glicerilil-(3\rightarrow5')-3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina
en forma de cristales blancos que presentan un valor R_{f} de 0,45
en la placa de capa fina de gel de sílice en el sistema eluyente
cloroformo/metanol 6:4 (v:v). La masa molecular calculada (979,91)
se confirma en el espectro de masas por pulverización iónica
mediante el pico molecular (979,0).
Liposomas con 10 mg del compuesto según la
invención por ml.
1 ml de liposomas contiene: 100 mg de
fosfatidil-colina, 10 mg de colesterol y 10 mg del
compuesto según la invención dispersado en solución de cloruro
sódico al 0,9% que, en caso necesario, está ajustada a un valor pH
deseado por ejemplo con tampón de fosfato. En lugar de la solución
de cloruro sódico dado el caso tamponada también se puede utilizar
un tampón de fosfato fisiológico 67 nM o una solución de glucosa al
5%.
Producción de 2,5 ml de dispersión de liposomas
que contienen 10 mg del compuesto según la invención por ml.
En un matraz redondo de 100 ml se disuelven 250
mg de soja-fosfatidil-colina en 5
ml de t-butanol y se mezclan con 25 mg de
colesterol, que se disuelve con calentamiento (50ºC). A esta
solución se le añaden 25 mg del compuesto según la invención
disueltos en una cantidad adecuada de DMSO (0,25
ml-1 ml). La solución resultante se concentra a la
mitad en el evaporador rotativo y a continuación se liofiliza. El
producto liofilizado obtenido se mezcla con 2,5 ml de agua y se
transforma mediante ultrasonidos en una suspensión que a
continuación se liofiliza de nuevo. El producto liofilizado se
suspende en 2,5 ml de una solución de NaCl al 0,9% y se sonorizan
durante 1 h con enfriamiento en un vaso de centrifugadora de pared
gruesa con el pico ultrasónico (3 mm) de un Branson Sonifier 250. Se
obtiene una dispersión de liposomas opalescente con siguiente
composición: 100 mg SPC, 10 mg colesterol y 10 mg del compuesto
según la invención por ml.
El efecto virustático (anti-VIH)
in vitro del compuesto según la invención
N^{4}-palmitoíl-2',3'-didesoxi-citidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-
palmitoíl-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina
(NSC 704532-F/1) se puede observar mediante el modo
de experimentación descrito a continuación. Como sistemas de ensayo
se utilizan linfocitos T4 (línea celular: CEM-SS)
que se matan mediante VIH en el curso de dos ciclos de replicación.
Se detecta la inhibición de la muerte celular. El compuesto según la
invención se disuelve en DMSO y esta solución se diluye con medio de
cultivo celular en una proporción 1:100. A continuación se preparan
diluciones semilogarítmicas (log_{10}). A estas soluciones se les
añaden linfocitos T4 y después de un intervalo de tiempo determinado
virus de IH. Se obtiene una dilución de como mínimo 1:200 con
respecto a la solución original del compuesto según la invención en
DMSO. Como controles de toxicidad se utilizan linfocitos T4 no
infectados, que se incuban únicamente con el compuesto según la
invención. Otros controles patrón consisten en células T4 infectadas
y no infectadas sin el compuesto según la invención. Los cultivos
celulares se incuban durante 6 días a 37ºC en una atmósfera de
CO_{2} al 5%, después se añade sal de tetrazolio (XTT) a todos los
cultivos celulares y en las células viables se produce la reacción
cromática Formazan. Todos los cultivos celulares se analizan por
espectrofotometría para cuantificar la producción de Formazan.
También se analizan microscópicamente cultivos individuales para
confirmar la actividad anti-VIH. Las células
infectadas por virus tratadas con el compuesto según la invención se
comparan con el patrón en la misma placa. La siguiente tabla muestra
los datos de actividad anti-VIH in vitro
determinada en el marco de un National Cancer Institute
Developmental Therapeutics Program. De los datos se desprende que el
crecimiento celular hasta un 50% (IC_{50}) se encuentra en
>1,00x10^{-6} mol del compuesto según la invención, la
protección contra infección en un 50% (EC_{50}) en 1,79x10^{-8}
mol y la amplitud terapéutica TI_{50} (IC/EC) en
<5,59x10^{+1}.
| Dosis (molar) | Protección porcentual | Porcentaje del control | |
| Infectado | No infectado | ||
| 3,17 * 10^{-10} | 1,88 | 5,80 | 105,43 |
| 1,00 * 10^{-9} | 0,22 | 4,21 | 105,03 |
| 3,17 * 10^{-9} | 10,68 | 14,25 | 101,22 |
| 1,00 * 10^{-8} | 20,44 | 23,62 | 99,64 |
| 3,16 * 10^{-8} | 79,40 | 80,22 | 104,96 |
| 1,00 * 10^{-7} | 106,32 | 106,07 | 112,26 |
| 3,16 * 10^{-7} | 104,33 | 104,16 | 112,02 |
| 1,00 * 10^{-6} | 114,05 | 113,49 | 119,96 |
Como sistemas de ensayo se utilizan líneas
celulares tumorales cuya inhibición del crecimiento en un 50% (GI50)
o en un 100% (TGI) por el compuesto según la invención se determina
en diferentes concentraciones. También se determina la toxicidad
(LC_{50}) del compuesto sobre dichas células. Una serie de placas
de microtitulación se vacuna el día 0 con las células tumorales y se
preincuba durante 24 h. A continuación, el compuesto según la
invención se añade a las células en cinco concentraciones diluidas
en un factor 10 en cada caso. A continuación tiene lugar una
incubación durante 48 horas y al final de la misma las células se
fijan, lavan y secan in situ. A continuación se añade
Sulforhodamine B (SRB), un colorante rosa que se une a las células
fijadas, y las células se lavan de nuevo. El colorante restante
refleja la masa celular adherente y se determina
espectrométricamente. Los datos recopilados automáticamente se
evalúan por computadora y conducen a los siguientes resultados:
| Resultados de ensayo in vitro de arabino-citidilil- (5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'- | |||
| desoxi-uridina(NSC 698688-A/1) | |||
| Línea celular | GI_{50} en mol/1 | TGI en mol/1 | LC_{50} en mol/1 |
| Leucemia | |||
| CCRF-CEM | 1.28E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HL-60(TB) | 3.66E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| K-562 | 3.35E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MOLT-4 | 4.67E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| RPMI-8226 | 1.65E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
(Continuación)
| Resultados de ensayo in vitro de arabino-citidilil- (5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'- | |||
| desoxi-uridina(NSC 698688-A/1) | |||
| Línea celular | GI_{50} en mol/1 | TGI en mol/1 | LC_{50} en mol/1 |
| Leucemia | |||
| SR | >1.00E-04 | >1.00E-04 | |
| Cáncer de pulmón | |||
| A549/ATCC | 3.46E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| EKVX | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HOP-62 | 6.99E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HOP-92 | 8.02E-08 | 8.99E-05 | >1.00E-04 |
| NCI-H226 | 7.59E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H23 | 7.23E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H322M | 3.56E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H460 | 4.66E-08 | 2.79E-05 | >1.00E-04 |
| NCI-H522 | 1.62E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer intestinal | |||
| COLO205 | 1.05E-05 | 3.88E-05 | >1.00E-04 |
| HCC-2998 | 5.88E-08 | 3.50E-05 | >1.00E-04 |
| HCT-116 | 4.90E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HCT-15 | 1.44E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HT-29 | 1.25E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| KM12 | 7.47E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SW-620 | 6.28E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer del sistema nervioso central | |||
| SF-268 | 7.45E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SF-295 | 7.99E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SF-539 | 4.88E-07 | 1.03E-05 | 8.03E-05 |
| SNB-19 | 9.19E-07 | 2.37E-05 | 6.41E-05 |
| SNB-75 | 2.04E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| U251 | 3.14E-06 | 2.48E-05 | 7.38E-05 |
| Melanoma | |||
| LOX IMVI | 1.40E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MALME-3M | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
(Continuación)
| Resultados de ensayo in vitro de arabino-citidilil- (5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'- | |||
| desoxi-uridina(NSC 698688-A/1) | |||
| Línea celular | GI_{50} en mol/1 | TGI en mol/1 | LC_{50} en mol/1 |
| Melanoma | |||
| M14 | 3.53E-06 | 8.62E-05 | >1.00E-04 |
| SK-MEL-2 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SK-MEL-28 | 5.78E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SK-MEL-5 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| UACC-257 | 4.98E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| UACC-62 | 1.77E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de ovario | |||
| IGROV1 | 1.36E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-3 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-4 | 5.85E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-5 | 8.96E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-8 | 9.68E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SK-OV-3 | 3.63E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de riñón | |||
| 768-0 | 8.54E-07 | 1.34E-05 | 4.44E-05 |
| A498 | 3.19E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| ACHN | 4.66E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| CAKI-1 | 1.04E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| RXF 393 | 1.02E-05 | 2.86E-05 | 8.00E-05 |
| SN12C | 1.33E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| TK-10 | 2.29E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| UO-31 | 2.13E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de próstata | |||
| PC-3 | 1.15E-05 | 8.64E-05 | >1.00E-04 |
| DU-145 | 2.68E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de mama | |||
| MCF7 | 1.70E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI/ADR-RES | . | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MDA-MB-231/ATCC | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
(Continuación)
| Resultados de ensayo in vitro de arabino-citidilil- (5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'- | |||
| desoxi-uridina(NSC 698688-A/1) | |||
| Línea celular | GI_{50} en mol/1 | TGI en mol/1 | LC_{50} en mol/1 |
| Cáncer de mama | |||
| HS 578T | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MDA-MB-435 | 3.38E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MDA-N | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| BT-549 | 1.45E-05 | 8.69E-05 | >1.00E-04 |
| T-47D | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
De acuerdo con los resultados de ensayo in
vitro arriba mostrados, este principio activo es adecuado
preferentemente para la terapia de tumores de pulmón, el intestino,
el sistema nervioso central y los riñones.
| Resultados de ensayo in vitro de 2',3'-didesoxi-citidilil- (5'\rightarrow1)-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'- | |||
| desoxi-uridina (NSC 704533) | |||
| Línea celular | GI_{50} en mol/1 | TGI en mol/1 | LC_{50} en mol/1 |
| Leucemia | |||
| CCRF-CEM | . | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HL-60(TB) | 7.15E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| K-562 | 2.57E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MOLT-4 | 1.04E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| RPMI-8226 | 1.10E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SR | >1.00E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de pulmón | |||
| A549/ATCC | 4.77E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| EKVX | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HOP-62 | 9.02E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H226 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H23 | 9.79E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H322M | 1.95E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H460 | >1.00E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| NCI-H522 | 7.46E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
(Continuación)
| Resultados de ensayo in vitro de 2',3'-didesoxi-citidilil- (5'\rightarrow1)-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'- | |||
| desoxi-uridina (NSC 704533) | |||
| Línea celular | GI_{50} en mol/1 | TGI en mol/1 | LC_{50} en mol/1 |
| Cáncer intestinal | |||
| COLO205 | 1.77E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HCT-116 | 3.74E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HCT-15 | 1.79E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HT-29 | 1.88E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| KM12 | 1.45E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SW-620 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer del sistema nervioso central | |||
| SF-268 | >1.00E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SF-295 | 3.45E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SF-539 | 2.16E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SNB-19 | 2.50E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SNB-75 | 1.59E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| U251 | 1.26E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Melanoma | |||
| LOX IMVI | 1.01E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MALME-3M | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| M14 | 2.03E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SK-MEL-2 | 7.94E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SK-MEL-28 | 3.79E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SK-MEL-5 | 6.89E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| UACC-257 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| UACC-62 | 5.50E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de ovario | |||
| IGROV1 | 6.80E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-3 | 6.54E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-4 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-5 | 1.26E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| OVCAR-8 | 1.41E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SK-OV-3 | 4.43E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
(Continuación)
| Resultados de ensayo in vitro de 2',3'-didesoxi-citidilil- (5'\rightarrow1)-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'- | |||
| desoxi-uridina (NSC 704533) | |||
| Línea celular | GI_{50} en mol/1 | TGI en mol/1 | LC_{50} en mol/1 |
| Cáncer de riñón | |||
| 768-0 | >1.00E-04 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| ACHN | >1.00E-08 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| CAKI-1 | 1.44E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| RXF 393 | 5.12E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| SN12C | 1.73E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| TK-10 | 6.25E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de próstata | |||
| PC-3 | 2.28E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| DU-145 | 1.58E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| Cáncer de mama | |||
| NCI/ADR-RES | 6.95E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MDA-MB-231/ATCC | 9.55E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| HS 578T | 7.32E-07 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MDA-MB-435 | 4.76E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| MDA-N | 2.54E-05 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| BT-549 | 4.15E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
| T-47D | 1.42E-06 | >1.00E-04 | >1.00E-04 |
De acuerdo con los resultados de ensayo in
vitro arriba mostrados, este principio activo es adecuado
preferentemente para la terapia de tumores del pulmón, el sistema
nervioso central, los riñones y las mamas, así como para el
tratamiento de melanomas.
Claims (19)
1. Nucleótidos de glicerilo de la fórmula Ia
(Ia)A^{2}
\melm{\delm{\para}{\hskip-0.4cm
A ^{3} CH _{2} }}{C}{\uelm{\para}{\hskip-0.4cmA ^{1} CH _{2} }}Hen la
que
- a)
- uno de los restos A^{1}, A^{2} y A^{3} representa un átomo de hidrógeno o un resto seleccionado entre hidroxilo, mercapto, alquilo, alquenilo, polioxi-alquenilo, arilo, acilo, alquil-oxilo, alquilén-oxilo, polioxi-alquenil-oxilo, acil-oxilo, aril-oxilo, tioalquilo, tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo; y
- b1)
- dos de los otros restos A^{1}, A^{2} y A^{3} representan dos grupos nucleósido diferentes entre sí, cada uno de los cuales está unido al átomo de carbono de la cadena de glicerilo a través de un grupo puente con contenido de fósforo disociable fisiológicamente; o
- b2)
- uno de los otros restos A^{1}, A^{2} y A^{3} representa un grupo nucleósido y el otro resto representa un grupo hidroxi-carbonilo, cada uno de los cuales está unido al átomo de carbono de la cadena de glicerilo a través de un grupo puente con contenido de fósforo disociable fisiológicamente;
siendo como mínimo uno de los grupos nucleósido
un grupo nucleósido no natural, que en caso dado está sustituido en
su parte de base por uno o más restos seleccionados entre hidroxilo,
amino, halógeno, alquilo, alquenilo,
polioxi-alquenilo, arilo, acilo,
alquil-oxilo, alquenil-oxilo,
polioxi-alquenil-oxilo,
acil-oxilo, aril-oxilo, tioalquilo,
tioalquenilo, tioacilo o tioarilo, estando sustituidos en caso dado
los restos alquilo, alquenilo y acilo por 1 a 3 restos arilo o
átomos halógenos; y que en caso dado está sustituido una o varias
veces en su parte de hidrato de carbono por sustituyentes
seleccionados entre hidrógeno, halógeno, hidroxilo, etinilo o azido,
que dado el caso presenta un heteroátomo seleccionado entre S, N u O
en lugar de un átomo de carbono, y que en caso dado contiene dos
enlaces dobles C=C no
colindantes;
en forma racémica o enantiómera pura así como las
sales farmacéuticamente compatibles de estos
compuestos.
2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que
los grupos nucleósido están unidos independientemente entre sí con
el resto glicerilo a través de un grupo puente seleccionado entre
-OP(OZ)(O)O-, -SP(OZ)(O)O-,
-OP(OZ)(S)O- o -SP(OZ)(S)O-, y el grupo
hidroxi-carbonilo está unido con el resto glicerilo
a través de un grupo puente seleccionado entre -OP(OZ)(O)-,
-SP(OZ)(O)- o -SO(OZ)(S)-, siendo Z un protón o un
catiónfarmacéuticamente compatible.
3. Compuestos según la reivindicación 1 ó 2, en
los que A^{1}, A^{2} y A^{3} se seleccionan de tal modo que se
otorga a la molécula un carácter anfifílico.
4. Compuestos según una de las reivindicaciones
anteriores de la fórmula I
en forma racémica y enantiómera pura, en la
que
- el resto A y los dos restos con contenido de
fósforo están unidos en cualquier orden con los átomos C^{1},
C^{2} y C^{3} de la estructura de glicerina;
- X^{1}, X^{2}, X^{3} y X^{4} son iguales
o diferentes y significanindependientemente entre sí oxígeno o
azufre;
- A representa alquilo, hidroxilo, mercapto,
hidroxilo o mercapto sustituidos por alquilo o acilo, y los restos
alquilo son lineales o ramificados, presentan de 1 a 24 átomos C y
en caso dado hasta 2 enlaces dobles y dado el caso están sustituidos
por 1 a 4 restos aromáticos;
- Z representa hidrógeno o la sal correspondiente
de la forma ácida de este compuesto;
- uno de los restos N^{1} o N^{2} representa
hidroxi-carbonilo o su sal y el otro de los
restosrepresenta un derivado de nucleósido con configuración D o L;
o los dos restos N^{1} y N^{2} son diferentes entre sí y
representan en cada caso un resto de un derivado de nucleósido con
configuración D o L, seleccionándose los restos de nucleósido entre
los restos de las fórmulas generales II, III y IV,
o las formas tautómeras correspondientes, en las
que
Y representa oxígeno o azufre;
R^{1} representa un grupo hidroxilo, amino o un
grupo amino acilado, alquilado o sustituido por polioxietileno, cuyo
resto acilo o alquilo es lineal o ramificado, presenta de 1 a 24
átomos de C y en caso dado hasta 2 enlaces dobles y puede estar
sustituido por un resto aromático;
R^{2} representa hidrógeno, halógeno, un grupo
amino o hidroxilo, un resto bromo-vinilo, un resto
alquilo C_{1}-C_{24} lineal o ramificado; y
R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, R^{7} y
R^{8} son iguales o diferentes yrepresentan hidrógeno, halógeno,
hidroxilo, etinilo y azido; con la reserva de que uno de los restos
R^{3} a R^{8} represente un átomo de oxígeno a través del cual
el resto de derivado de nucleósido está unido con el átomo de
fósforo, pudiendo suprimirse dos restos vicinales R^{3} a R^{6}
si en la posición "a" hay un enlace doble C=C.
\newpage
5. Compuestos según la reivindicación 4, en los
que
- X^{1}, X^{2}, X^{3} y X^{4} representan
un átomo de oxígeno;
- el átomo C^{1} de la estructura de glicerina
de la fórmula I está unido con el resto A, siendo A hidroxilo,
octadecilo, octadecil-oxilo,
docosil-oxilo o behenoil-oxilo,
palmitoílo u oleoílo;
- el átomo C^{2} de la estructura de glicerina
de la fórmula I está unido con N^{2} a través de un puente de
fosfodiéster, siendo N^{2} un resto de derivado de nucleósido de
las fórmulas II, III o IV, en las que
Y representa un átomo de oxígeno;
R^{1} representa un grupo hidroxilo, amino,
octadecil-amino, docosil-amino,
palmitoíl-amino, oleoíl-amino o
behenoíl-amino;
R^{2} representa metilo, etilo, hidrógeno o
halógeno;
R^{3} a R^{8} tienen los significados arriba
indicados, siendo uno de los restos R^{3}, R^{4}, R^{5},
R^{6} y R^{8} un átomo de oxígeno a través del cual el resto de
derivado de nucleósido N^{2} está unido con el átomo de
fósforo;
- y el átomo C^{3} de la estructura de
glicerina de la fórmula I está unido con el resto de fosfonato
dehidroxi-carbonilo en su forma libre o en forma de
sal.
6. Compuestos según la reivindicación 5, en los
que
N^{2} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula II o IV, en la que
R^{1} significa un grupo amino,
palmitoíl-amino o hidroxilo;
R^{2} significa hidrógeno, metilo o etilo;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} significa hidrógeno, flúor o azido, y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{2} está unido con el átomo de fósforo.
7. Compuestos según la reivindicación 4, en los
que
X^{1}, X^{2}, X^{3} y X^{4} significan un
átomo de oxígeno;
A representa palmitoil-oxilo,
oleoil-oxilo y octadecil-oxilo y
está unido con el átomo C^{2} de la estructura de glicerina de la
fórmula I; y
N^{1} y N^{2} son diferentes y representan un
resto de derivado de nucleósido de las fórmulas II, III y IV.
8. Compuestos según la reivindicación 7, en los
que
N^{1} representa un resto de derivado de
nucleósido con configuración L de la fórmula II,
en la que
R^{1} significa un grupo amino o
palmitoíl-amino;
R^{2}, R^{3} y R^{4} representan hidrógeno;
y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{1} está unido con el átomo de fósforo en la posición
C^{1} o C^{3} de la estructura de difosfato de glicerilo de la
fórmula I; y N^{2} representa un resto de derivado de nucloeósido
de la fórmula III o IV.
9. Compuestos según la reivindicación 7, en los
que
N^{2} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula IV, en la que
R^{1} representa un grupo amino,
palmitoíl-amino o hidroxilo;
R^{2} representa hidrógeno o metilo;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} representa hidrógeno, flúor o azido;
y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{2} está unido con el átomo de fósforo en la posición
C^{1} o C^{3} de la estructura de difosfato de glicerilo de la
fórmula I.
10. Compuestos según la reivindicación 7, en los
que principalmente
N^{1} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula II o IV y
N^{2} representa un resto de derivado de
nucleósido de la fórmula III,
fórmulas en las que
R^{1} representa hidroxilo;
R^{2} a R^{7} representan hidrógeno; y
R^{8} representa un átomo de oxígeno a través
del cual N^{1} o N^{2} están unidos con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato de la fórmula
I.
11. Compuestos según la reivindicación 7, en los
que
N^{1} y N^{2} representan un resto de
derivado de nucleósido de la fórmula IV, en la que en N^{1}
R^{1} representa un grupo amino,
palmitoíl-amino o un grupo
octadecil-amino;
R^{2}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{3}, R^{4} y R^{6} son iguales o
diferentes y representan hidrógeno, hidroxilo o flúor;
y en la que en N^{2}
R^{1} representa un grupo hidroxilo;
R^{2} representa metilo o halógeno;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno, pudiendosuprimirse en caso dado dos restos vicinales de
éstos si en la posición "a" hay un enlace doble;
R^{6} representa hidrógeno, flúor, azido o
hidroxilo; y
R^{8} representa tanto en N^{1} como en
N^{2} un átomo de oxígeno a través del cual N^{1} y N^{2}
están unidos con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato.
12. Compuestos según la reivindicación 11, en los
que en N^{1} y N^{2}
R^{1} es igual o diferente y representa un
grupo hidroxilo o amino;
R^{2} es igual o diferente y representa
hidrógeno o metilo;
R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} representa azido en N^{1} y flúor en
N^{2}; y
R^{8} significa el átomo de oxígeno a través
del cual N^{1} y N^{2} están unidos con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato.
13. Compuestos según la reivindicación 11, en los
que en N^{1}
R^{1} representa un grupo amino o
palmitoíl-amino;
R^{2} y R^{7} representan hidrógeno;
R^{3} y R^{4} representan flúor, hidrógeno o
hidroxilo;
R^{5} representa hidrógeno o un resto
etinilo;
R^{6} representa hidroxilo;
y en N^{2}
R^{1} representa hidroxilo;
R^{2} representa flúor;
R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{7} representan
hidrógeno;
R^{6} representa hidroxilo;
y R^{8} representa tanto en N^{1} como en
N^{2} un átomo de oxígeno a través del cual N^{1} y N^{2}
están unidos con la estructura de
glicerín-1,3-difosfato.
14. Compuestos según la reivindicación 1,
seleccionados entre
a)
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidilil-(5’\rightarrow2)-1-O-octadecil-rac-
glicerol-3-(hidroxi-carbonil)-fosfonato,
b)
arabino-citidilil-(5’\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-glicerilil-
(3\rightarrow5')-5-fluoro-2'-desoxi-uridina,
c)
N^{4}-palmitoíl-3'-tia-2',3'-didesoxi-citidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-
octadecil-rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina,
d)
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-
glicerilil-(3\rightarrow5')-N^{4}-palmitoíl-2',3'-didesoxi-citidina,
e)
N^{4}-palmitoíl-2',3'-didesoxi-citidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-palmitoíl-
rac-glicerilil-(3\rightarrow5')-3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina,
f)
3'-azido-2',3'-didesoxi-timidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-
glicerilil-(3\rightarrow5')-2',3'-didesoxi-inosina,
g)
3'-fluoro-2',3'-didesoxi-timidilil-(5'\rightarrow1)-2-O-octadecil-rac-
glicerilil-(3\rightarrow5')-3'-azido-2',3'-didesoxi-timidina,
h)
2',3'-didesoxi-citidilil-(5'\rightarrow1)-racglicerilil(3\rightarrow5')-
5-fluoro-2'-desoxi-uridina.
15. Producto farmacéutico que contiene como
mínimo un compuesto según una de las reivindicaciones anteriores en
un soporte o diluyente farmacéuticamente tolerable, dado el caso
junto con un agente de formulación farmacéuticamente tolerable o
incorporado en liposomas o nanopartículas.
16. Utilización de un compuesto según una de las
reivindicaciones 1 a 14 para preparar un producto farmacéutico para
el tratamiento de enfermedades infecciosas y/o enfermedades
cancerosas.
17. Procedimiento para la producción de un
compuesto de la fórmula Ia según la reivindicación 1,
caracterizado porque un compuesto de la fórmula Ib
(Ib)A^{2B}
\melm{\delm{\para}{\hskip-0.5cmA ^{3B} CH _{2} }}{C}{\uelm{\para}{\hskip-0.5cmA ^{1B} CH _{2} }}Hen la que uno de los restos A^{1B}, A^{2B} y
A^{3B} representa un grupo hidroxilo, mercapto,
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato, y los otros dos restos
tienen los significados indicados más arriba para A^{1}, A^{2} y
A^{3}, representando como mínimo uno de los dos restos un grupo
nucleósido según la definición arriba
indicada,
- a)
- se condensa en presencia de un cloruro de ácido con un derivado de nucleósido, portando el derivado de nucleósido adicionalmente un grupo hidrógeno-fosfonato o tiohidrógeno-fosfonato cuando uno de los restos A^{1B}, A^{2B} y A^{3B} representa un grupo hidroxilo o mercapto; y oxidando el producto obtenido; o
- b)
- se somete a reacción con (etoxi-carbonil)-dicloro-fosfonato y a continuación se hidrolizan de forma alcalina los grupos de cloruro de ácido y los grupos etoxilo.
\newpage
18. Procedimiento según la reivindicación 17,
caracterizado porque un compuesto de la fórmula V
en la que A, X^{3}, X^{4}, Z y N^{2} tienen
los significados indicados en las reivindicaciones 4 y 5 y X^{2}B
representa un grupo hidroxilo o
mercapto,
se somete a reacción con
(etoxi-carbonil)-dicloro-fosfonato,
la carga de reacción se purifica en caso dado por cromatografía y,
a continuación, el grupo cloruro y el grupo etoxilo se sustituyen
por un grupo hidroxilo o la sal
correspondiente.
19. Procedimiento según la reivindicación 17,
caracterizado porque un compuesto de la fórmula V
en la que los restos A, X^{3}, X^{4}, Z y
N^{2} tienen los significados indicados en las reivindicaciones
6-13 y X^{2}B representa un grupo hidroxilo,
mercapto, hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato,
se condensa en presencia de un cloruro de ácido
con un derivado de nucleósido de las fórmulas II, III o
IV,
en las
que
- R^{1} a R^{8} tienen los significados
indicados en las reivindicaciones 4-13 y
adicionalmente R^{8} también puede representar
4-mono-,
4,4'-dimetoxi-trifenil-metoxilo,
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato;
- R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{6} pueden
representar también un resto carboxilo lineal o ramificado que
presenta 1-24 átomos de C y puede estar sustituido
por un restofenilo; con la reserva de que uno de los restos R^{3},
R^{4}, R^{5}, R^{6} y R^{8} represente
hidrógeno-fosfonato o
tiohidrógeno-fosfonato cuando X^{2}B representa
hidroxilo o tiol en el compuesto de la fórmula V;
y oxidando a continuación el producto
obtenido;
dado el caso, la mezcla de reacción se procesa
por cromatografía, en caso dado los grupos 4-mono- o
4,4'-dimetoxi-trifenil-metilo
existentes se sustituyen por grupos hidroxilo y, si así se desea,
los restos acilo se transforman por hidrólisis en grupos mercapto,
hidroxilo y/o
amino.
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