ES2202939T3 - Microemulsiones aceite/agua con un contenido en una o varias sales de alquiltiouronio y/o alfa-omega-alquilenditiouronio como sustancias activas microbicidas y su empleo para la desinfeccion manual y/o automatizada de instrumentos. - Google Patents

Microemulsiones aceite/agua con un contenido en una o varias sales de alquiltiouronio y/o alfa-omega-alquilenditiouronio como sustancias activas microbicidas y su empleo para la desinfeccion manual y/o automatizada de instrumentos.

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ES2202939T3 ES99103770T ES99103770T ES2202939T3 ES 2202939 T3 ES2202939 T3 ES 2202939T3 ES 99103770 T ES99103770 T ES 99103770T ES 99103770 T ES99103770 T ES 99103770T ES 2202939 T3 ES2202939 T3 ES 2202939T3
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Wolf-Dieter Dr. Julich
Horst Dr. Seibt
Hanns Dr. Pietsch
Exel Prof. Kramer
Roland Dr. Ohme
Detlef Dr. Ballschuh
Roland Dr. Knieler
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Abstract

MICROEMULSIONES DE ACEITE EN AGUA CARACTERIZADAS POR UN CONTENIDO MINIMO DE UNA SAL DE ALQUILTIOURONIO Y/O AL , OE A LQUILENDITIOURONIO.

Description

Microemulsiones aceite/agua con un contenido en una o varias sales de alquiltiouronio y/o \alpha-\omega-alquilenditiouronio como sustancias activas microbicidas y su empleo para la desinfección manual y/o automatizada de instrumentos.
La presente invención hace referencia a microemulsiones aceite/agua (Ac/Ag)con un contenido en una o varias sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenditiouronio, su utilización como sustancias activas microbicidas así como para la desinfección manual y/o automatizada de instrumentos.
Como medio desinfectante para la desinfección de instrumentos y ropa se conocen una multitud de sustancias químicas eficaces microbicidas o bien de mezclas de estas sustancias. Las sustancias microbicidas son en general más o menos eficaces contra el espectro habitual de bacterias, como por ejemplo, las bacterias grampositivas, las bacterias gramnegativas, micobacterias, hongos, levaduras, virus y similares, de manera que en general puede lograrse una desinfección satisfactoria mediante las combinaciones apropiadas de sustancias activas.
La técnica actual dispone de una serie de sustancias activas para la desinfección de instrumentos médico-quirúrgicos, en especial de aldehídos, como por ejemplo el formaldehído o el glutaraldehído, los compuestos de amonio cuaternario y las aminas de cadena larga así como los fenoles. En general, los compuestos conocidos presentan algunas desventajas:
Los aldehídos fijan los restos de sangre y albúmina por reacción química en los objetos que van a ser desinfectados, de manera que éstos son difíciles de limpiar después de la desinfección. Además, los aldehídos tienen un potencial alérgeno comparativamente elevado, de manera que solamente pueden tenerse en cuenta las aplicaciones en combinación con otras sustancias activas para poder mantenerse por debajo del umbral de sensibilización necesario. Los campos de aplicación de los aldehídos están limitados además por una discutida potencia carcinógena así como por la mutagenicidad de esta clase de sustancias. Además, los aldehídos tienen un olor desagradable, penetrante y pueden producir lesiones en las mucosas.
Los compuestos de amonio cuaternario y las aminas de cadena larga se emplean frecuentemente en la desinfección manual de instrumentos. En comparación con los aldehídos, el olor de estos compuestos es claramente menos desagradable. No se produce una reacción química con la albúmina, pero se produce una precipitación física de las albúminas, que en parte puede ser compensada por una combinación hábil con los tensoactivos. Para la desinfección automatizada de los instrumentos en general no son adecuados los compuestos de amonio cuaternarios, porque se produce una formación de espuma intensa e inesperada a consecuencia de las turbulencias en la máquina de lavar. Otro inconveniente decisivo es el reducido espectro de acción de los compuestos de amonio cuaternario, ya que estos no actúan ni de forma esporicida ni contra virus.
Los fenoles tienden a desaparecer debido sobre todo, a su olor, su escasa actividad contra los potiovirus, su mala capacidad de desintegración y su elevada solubilidad en lípidos, una fuerte penetración a través de la piel así como riesgos tóxicos y mutágenos en casi todos los campos de aplicación para medios desinfectantes.
El cometido de la invención consiste en hallar una sustancia activa o una combinación de sustancias activas, que presente o manifieste una elevada acción o efecto microbicida y esporicida, y al mismo tiempo no presente los inconvenientes de la técnica actual, es decir, que presente especialmente una buena potencia de limpieza para una toxicidad mínima, que no fije ni albúmina ni sangre en los objetos que vaya a desinfectar, que no tenga un olor desagradable y que en los aparatos de lavado y desinfección de instrumentos quirúrgicos no presente una engorrosa formación de espuma.
La elevada actividad antimicrobiana del cloruro de dodeciltiouronio es conocida (Zbl. Bakt.Hyg.,1 Orig. A 237, 117-123, 1997). En general, este compuesto -así como otras sales de tiouronio- son inestables en solución acuosa, tienden por ejemplo a separarse en flóculos en presencia de metales, y por tanto solamente se incorporan difícilmente a formulas desinfectantes. Para la desinfección de instrumentos (tanto para el método manual como mecánico) son apropiadas las sales de tiouronio.
Como sales de tiouronio se indican a continuación las sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenditiouronio . La sales de alquiltiouronio se caracterizan por la estructura química siguiente
1
Donde R^{1} se elige del grupo formado por los grupos alquilo ramificados o no ramificados con 1 hasta 20 átomos de carbono y X^{-} equivale a un anión cualquiera, preferiblemente un ión halógeno.
Las sales \alpha,\omega-alquilenditiouronio se caracterizan por la estructura siguiente
2
Donde R^{2} se elige del grupo formado por los grupos alquilo ramificados y no ramificados con 1 hasta 20 átomos de carbono y X^{-} equivale a cualquier anión, preferiblemente un ión halógeno.
Debido a su parte alifática de la molécula, las sales de tiouronio presentan un marcado caracter tensoactivo, que permite esperar una elevada acción de limpieza. A ello está unido generalmente una fuerte formación de espuma, de manera que las soluciones a base de sal de tiouronio no se han podido emplear hasta el momento para la desinfección de instrumentos automatizados.
Son conocidas las estructuras supramoleculares, por ejemplo, en forma de microemulsiones.
En las emulsiones simples, en una fase finamente dispersa se presentan gotitas rodeadas de una envuelta de emulgente de la segunda fase (gotitas de agua en emulsiones Ag/Ac o vesículas lipídicas en emulsiones de Ac/Ag). Los diámetros de las gotitas de las emulsiones corrientes se sitúan entre 1\mum hasta 50\mum. Dichas "macroemulsiones" son de un color blanco lechoso y son opacas sin aditivos coloreados. Las "macroemulsiones" más finas, en las cuales el diámetro de las gotitas oscila entre 10^{-1} \mum hasta aproximadamente 1\mum, de nuevo sin aditivos coloreados, presentan un color blanco azulado y son opacas.
Por el contrario, el diámetro de las gotas de las microemulsiones se encuentra entre 10 nm y 100 nm. Son claras y transparentes cuando el diámetro de las partículas es inferior a 100 nm. Las microemulsiones son mayoritariamente poco viscosas. La viscosidad de muchas microemulsiones del tipo Ac/Ag es comparable a la del agua.
La ventaja de las microemulsiones es que en la fase dispersa las sustancias activas pueden presentarse más finamente dispersas que en la fase dispersa de las "macroemulsiones". Otra ventaja es que debido a su baja viscosidad son pulverizables.
Fue realmente una sorpresa para los especialistas descubrir que las microemulsiones Ac/Ag, caracterizadas por un contenido de como mínimo una sal de alquiltiouronio y /o \alpha,\omega-alquilenditiouronio, pudieran solucionar las desventajas de la tecnología actual.
Las microemulsiones Ac/Ag en el sentido de la presente invención son especialmente apropiadas para desinfectar instrumentos, en especial para el tratamiento automatizado de instrumentos. Se caracterizan sorprendentemente por que su utilización no conduce al conocido fenómeno de la fijación inesperada o bien de la precipitación de la albúmina en los objetos que se van a desinfectar.
Esto no era realmente lo esperado porque las sales de tiouronio presentan una similitud estructural muy elevada a los compuestos de amonio cuaternario, que se caracterizan por una conocida precipitación física de la albúmina.
La acción bactericida y fungicida de las fórmulas conforme a la invención es marcadamente buena. Sorprendentemente, existe adicionalmente un efecto esporicida, aunque cada uno de los componentes no es activo como esporicida. Una ventaja en su aplicación en el campo del tratamiento automatizado de instrumentos es especialmente su acción inactivante en el virus de la hepatitis B. El antígeno superficial de la hepatitis B resulta alterado después de un tiempo de acción de 5 minutos.
Sorprendentemente, las fórmulas conforme a la invención forman en presencia de cada sustancia activa incluso con una fuerte turbulencia solamente una cantidad de espuma muy pequeña y ocasionan a su alrededor una corrosión mínima o inexistente. Esto es naturalmente una ventaja para la desinfección de instrumentos, puesto que tanto los objetos que se van a desinfectar como los aparatos empleados para el lavado y la desinfección son generalmente metálicos o contienen piezas metálicas.
Es posible según la invención, incrementar considerablemente las cantidades de sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenditiouronio frente a las habitualmente empleadas en la técnica actual. Es preferible elegir un contenido de una sal o varias sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenditiouronio en la microemulsión entre 0,05 y 30% en peso, en particular entre un 5 y un 20% en peso respecto al peso total de la microemulsión.
Las microemulsiones Ac/Ag conforme a la invención se emplearán como tales, es decir, en forma de "concentrados", o bien tras su dilución con agua - en forma de una denominada "solución de uso" como medio desinfectante. Es preferible que el contenido en sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenditiouronio en la solución de uso, que se producirá al diluir con agua, se encuentre entre un 0,01 y un 30% en peso respecto al peso total de la solución de uso.
Las microemulsiones Ac/Ag conforme a la invención presentes como concentrado son preferiblemente casi monodispersas con un tamaño de gota de menos de 20 nm, en especial inferior a 10 nm.
Lo más preferible en el sentido de la presente invención consiste en diluir las microemulsiones Ac/Ag, conforme a la invención, existentes como concentrados -según el contenido en sustancia activa- con agua en una relación de por ejemplo 1:50 hasta 1:200 para tener una solución de uso.
Se prefieren las microemulsiones Ac/Ag, que contienen además de una o varias sustancias activas conforme a la invención otras sustancias antimicrobianas. Las sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenditiouronio son apropiados compañeros de combinación para casi todas las sustancias conocidas. (Una excepción lo constituyen los aldehídos, que reaccionan con el grupo NH_{2}). Una pareja especialmente preferida en el sentido de la presente invención es el ácido salicílico.
Las microemulsiones Ac/Ag conforme a la invención contienen uno o varios emulgentes.
Son preferibles el o los emulgentes del grupo de los emulgentes no iónicos, especialmente los alcoholes de cadena lineal oxietilados (los denominados alquilpolioxi-alquilenos grasos) como por ejemplo, el etoxilato de ácido graso, etoxilato/propoxilato de ácido graso o bien etoxilato/propoxilato/butilato de ácido graso. Son preferibles por ejemplo, los alquilpolioxibutilenpolioxietilenos grasos que se obtienen en la BASG AG bajo la denominación comercial de Plurafac®;. Son preferibles en el sentido de la presente invención además los alquilpolioxietilenos grasos, por ejemplo, los que tienen 2 hasta 6 unidades EO, como por ejemplo el dodecildioxietileno.
Se prefiere que el contenido total en emulgentes se mantenga entre un 0,5 y un 2,0% en peso, respecto al peso total de la microemulsión aceite/agua conforme a la invención.
Las sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenditiouronio tienden a una intensa formación de espuma como tensoactivos catiónicos, por lo que resulta preferible añadir a los preparados conforme a la invención sustancias activas superficialmente, que tengan una tendencia mínima a formar espuma o bien un efecto amortiguador de la espuma. Como tales sustancias adicionales se han previsto los llamados alquilpolioxialquilenos grasos.
Las sustancias adicionales preferibles con una tendencia mínima a formar espuma o bien con un efecto amortiguador se denominan en el sentido de la presente invención alquilpolioxialquilenos "de grupo terminal cerrado", es decir se trata de aquellos alcoholes oxietilados, cuyo grupo OH terminal está eterificado o esterificado, de manera que en general disminuye la hidrofilia de la sustancia. Los alquilpolixoxialquilenos "de grupo terminal cerrado" preferidos se obtienen en BASF AG bajo el nombre comercial de Plurafac® LF 131, Plurafac® LF 132, Plurafac® LF 231, Plurafac® LF 431.
La fase oleica (o mejor: fase orgánica - no soluble en agua) de las microemulsiones Ac/Ag conforme a la invención se elige preferiblemente del grupo de ésteres de ácidos alcanocarboxílicos saturados y/o insaturados, ramificados y/o no ramificados de cadena larga de 3 hasta 30 átomos de carbono y alcoholes saturados y/o insaturados, ramificados y/o no ramificados de cadena larga de 3 hasta 30 átomos de carbono, del grupo de ésteres de ácidos carboxílicos aromáticos y de alcoholes saturados y/o insaturados, ramificados y/o no ramificados de una cadena larga de 3 hasta 30 átomos de carbono. Dichos esteroles pueden elegirse preferiblemente del grupo formado por el isopropilmiristato, isopropilpalmitato, isopropilestearato, isopropiloleato, n-butilestearato, n-hexillaurato, n-deciloleato, isooctilestearato, isononilestearato, isononilisononanoato, 2-etilhexilpalmitato, 2-etilexillaurato, 2-hexildecilestearato, 2-octildodecilpalmitato, oleiloleato, oleilerucato, eruciloleato, erucilerucato así como mezclas sintéticas, semisintéticas y naturales de dichos ésteres.
Es preferible conforme a la invención, la proporción de fase oleica de las microemulsiones conforme a la invención elegirla en el campo de un 5 hasta un 40% en peso, especialmente de un 10 hasta un 30% en peso, respecto al peso total de la microemulsión.
También puede ser ventajoso añadir a los preparados conforme a la invención, coadyuvantes de disolución, por ejemplo aquellos que habitualmente se encuentran en los medios desinfectantes. Los coadyuvantes de disolución preferidos son, por ejemplo, los alcoholes alifáticos-aromáticos, como por ejemplo, el fenoxietanol, fenoxipropanol, y/o los alcoholes bencílicos, así como los alcoholes alifáticos, como por ejemplo, el n-propanol, iso-propanol, butanol-2, butanol-1 y/o iso-butanol. Resulta preferible elegir un contenido en uno o varios coadyuvantes de disolución entre un 3 y un 10%, en especial entre un 5 y un 10% en peso, respecto al peso total de la microemulsión.
Son favorables también las microemulsiones Ac/Ag, que contienen además de agua y aceites otros disolventes, por ejemplo, alcoholes grasos, como por ejemplo, el decanol, dodecanol, tetradecanol y/o hexadecanol, y/o éster etílico del ácido hidroxicarboxílico, como por ejemplo, el lactato de etilo y/o el citrato de etilo. Se prefiere mantener el contenido total en otros disolventes entre un 0,5 y un 8,0% en peso, especialmente entre un 2 y un 5% en peso respecto al peso total de la microemulsión.
Las microemulsiones Ac/Ag conforme a la invención pueden contener preferiblemente otros tensoactivos, como los que se encuentran habitualmente en los desinfectantes, por ejemplo, sulfobetainas tensoactivas. El contenido en tensoactivos adicionales se elige preferiblemente entre un 0,1 y un 0,6%, respecto al peso total de la microemulsión.
Además, las microemulsiones Ac/Ag conforme a la invención pueden contener adicionalmente los habituales inhibidores de la corrosión, como por ejemplo el benzotriazol, especialmente cuando se utilizan en contacto con superficies metálicas, en especial con aceros refinados o materiales a base de aleaciones metálicas no férricas. Es preferible elegir el contenido en uno o varios inhibidores de la corrosión entre un 0,1 y un 0,5% en peso respecto al peso total de la microemulsión.
Adicionalmente a los componentes mencionados las microemulsiones Ac/Ag conforme a la invención pueden contener para preparados de este tipo conservantes, colorantes, materias olorosas corrientes y/o las sustancias auxiliares habituales. Estos no influyen generalmente en la acción desinfectante, sino que sirven para fines de estabilidad y estética. Sin embargo, también es posible emplear dichos componentes para desarrollar un efecto (conservante, de cuidado etc.) y a la vez para un determinado color y/o olor agradable.
Las cantidades que se van a emplear de cada una de las sustancias y perfumes, respectivamente, pueden averiguarse fácilmente dependiendo del tipo de producto mediante un ensayo simple por parte del experto.
Los ejemplos siguientes sirven para describir las invenciones y queda claro que éstas no se limitan a estos ejemplos. Todas las cantidades, proporciones y porcentajes se refieren, siempre que no se indique lo contrario, al peso y a la cantidad total o bien al peso total del preparado.
Ejemplos 1-4
Fórmulas apropiadas para la desinfección automatizada de instrumentos
Se han investigado fórmulas de composición ME 1, ME 2, ME 3 y ME 4 de acción bacteriostática.
ME 1 ME 2 ME 3 ME 4
10% peso de bromuro Alquilo = Alquilo = Alquilo = Alquilo =
de alquiltiouronio decilo dodecilo decilo dodecilo
Fenoxietanol 5% en peso 5% en peso 5% en peso 5% en peso
Alcohol bajo 7,5% en peso 7,5% en peso 7,5% en peso 7,5% en peso
Propanol-2 Propanol-2 Propanol-1 Propanol-1
Butandiol-2 3% en peso 3% en peso 3% en peso 3% en peso
Tensoactivo(1) 4% en peso 4% en peso 4% en peso 4% en peso
Tensoactivo(2) 1% en peso 1% en peso 1% en peso 1% en peso
Benzotriazol 0,3% en peso 0,3% en peso 0,3% en peso 0,3% en peso
2-butildo-decanol-2 0,3% en peso 0,3% en peso 0,3% en peso 0,3% en peso
Agua Hasta 100 Hasta 100 Hasta 100 Hasta 100
(1) alquilpolioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 41º
(2) alcohol graso oxetilado con 3 unidades EO
Metódica de la prueba de incorporación de agar para averiguar la eficacia bacteriostática
Las sustancias que van a ser analizadas se disuelven en agua de una dureza estandarizada, si fuera preciso calentándolas en un baño de agua a 45 o bien 75ºC. Las concentración de las sustancias de prueba en el agar de cultivo se escalonó en una serie geométrica sobre una base de 2. Para inocular las placas de ensayo se cultivaron las cepas de bacterias durante 6 h en una solución de caseína peptona-peptona de harina de soja y así se aplicó una fase de crecimiento logarítmico. Después, se sumergieron las placas de agar en forma de estrella a modo de sectores con un "corchete o anillo marcado". El sector del Proteus mirabilis se separó por conductos para evitar su dispersión. Al cabo de 24 horas de cultivo a 36ºC se realizó la valoración del crecimiento de las bacterias en comparación con placas de control sin sustancia, según el esquema siguiente:
++++ crecimiento impedido
+++ inhibición mínima del crecimiento(máximo ¾ del crecimiento del control)
++ inhibición moderada del crecimiento (máximo ½ del crecimiento del control)
+ fuerte inhibición del crecimiento (máximo ¼ del crecimiento del control) El llamado "crecimiento reducido" engloba los sectores + hasta +++
0 inhibición total
Resultados TABLA
Estudio de 4 fórmulas de tiouronio de eficacia bacteriostática y fungiestática
Fórmula Concentración de inhibición mínima en % KbW_{3}*
Staphyloc. Enterococcos Pseudomonas Candida
Aureus faecium aeruginosa albicans
ME 1 0,012 0,006 0,4 0,006 12,0
ME 2 0,025 0,012 0,4 0,006 11,4
ME 3 0,006 0,003 0,1 0,003 13,2
ME 4 0,006 0,003 0,1 0,0015 13,4
*índice de la eficacia bacteriostática según Woffen y cols.
Un ensayo práctico en una máquina de lavar automática para instrumentos quirúrgicos, "Belimed 2000", no indicaba ninguna alteración del programa por la formación de espuma.
Ejemplo 5 Acción bactericida de una fórmula de microemulsión con un 5% de sal de deciltiouronio
Germen de prueba: Staphylococcus aureus
Composición de la fórmula de microemulsión:
Porcentaje en peso
15,0% Bromuro de deciltiouronio
5,0% Plufarac LF 223(3)
5,0% Propandiol-1,2
5,0% Butandiol-1,3
5,0% Propanol-2
8,0% Solución builder(12,5% ácido cítrico/12,5% ácido fosfocarboxílico pH 3,5)
0,3% Benzotriazol
0,3% 2-octildodecanol-2 como cotensoactivo
Agua hasta el 100%
(3) Polioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 33ºC
Metódica
Prueba de suspensión cuantitativa que corresponde a las directrices para el análisis y la evaluación del proceso químico de desinfección de la Sociedad Alemana para Higiene y Microbiología. Realización de la prueba a 50ºC.
\newpage
Resultados
Tras un tiempo de acción de 10 minutos, se obtuvo un efecto satisfactorio mediante una solución al 0,5%.
TABLA
Eficacia bactericida de las fórmulas acuosas con bromuro de deciltiouronio a 50ºC; germen de prueba:
Staphylococcus aureus factores de reducción logarítmicos
Concentración (% en peso) Tiempo de acción(min)
5 10 15 30
0,25 2,9 3,9 4,57 >5,2
0,5 3,64 >5,2 >5,2 >5,2
1 3,8 >5,2 >5,2 >5,2
Controles en agua de dureza estandarizada: 6,2
Un ensayo práctico en una máquina de lavar automática para instrumentos quirúrgicos "Belimed 2000", no indicaba ninguna alteración del programa por la formación de espuma.
Ejemplos 6 y 7
Acción bactericida de las microemulsiones a 50ºC
Se han investigado dos fórmulas con la composición siguiente:
Fórmula de microemulsión ME 6: 10% de bromuro de deciltiouronio; 5% de fenoxietanol; 5% de propanol-2; 0,15% de benzotriazol; 3% butandiol-1,3; 4% alquilpolioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 41ºC; 3% de dietilenglicol; resto agua.
Fórmula de microemulsión ME 7: 10% de bromuro de deciltiouronio; 5% de fenoxietanol; 5% de propanol-2; 0,15% de benzotriazol; 3% de butandiol-1,3; 4% de alquilpolioxi-butilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 41ºC; 4-propandiol-1,3; resto agua.
Factores de reducción log.: Germen de prueba: Staphylococcus aureus
Microemulsión Concentración Tiempo de acción en min
5 10 15 30
ME 6 0,5% 4,17 4,94 >5,5 5,5
1% >5,5 >5,5 >5,5 5,5
ME 7 0,5% 4,94 >5,5 >5,5 >5,5
1% 5,5 >5,5 >5,5 >5,5
Controles en agua de dureza estandarizada: 6,51
Un ensayo práctico en una máquina de lavar automática para instrumentos quirúrgicos "Belimed 2000", no indicaba ninguna alteración del programa por la formación de espuma.
\newpage
Ejemplo 8 Influencia de las microemulsiones con sales de tiouronio para la desinfección automatizada de instrumentos en la precipitación de la albúmina
Se ha investigado una fórmula con la composición siguiente ME8: 10% de bromuro de deciltiouronio; 5% de fenoxietanol; 7,5% de butanol-2; 0,15% de benzotriazol; 5% de lactato de etilo; 4% de alquilpolioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 33ºC; 3% de hexadecano; 0,3% de linalool; 0,4% de alquilsulfobetaina graso oxietilado; resto agua.
Tabla de precipitación de la albúmina de la ovoalbúmina
Sustancia de prueba Adición Dilución de ovalbúmina
\mul 1:16 1:32 1:64
Bromuro de deciltiouronio sol. 150 ++ ++ ++
acuosa al 0,2%
Microemulsión ME 8,2% 150 (+) (+) (+)
Tabla de precipitación de la albúmina del suero humano
Sustancia de prueba Adición Dilución de suero
\mul 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
Bromuro de deciltiouronio, sol. 150 + (+) ++ ++ ++
Acuosa al 0,2% 200 ++ ++ ++ ++ ++
300 ++ ++ ++ ++ ++
400 ++ ++ ++ ++ ++
Microemulsión ME 8 2%
150 0 (+) 0 0 0
200 0 + (+) (+) (+)
300 (+) + + + +
400 (+) + + + +
Ejemplos 9 y 10
Influencia en el suero positivo por antígeno superficial de la hepatitis B(HbsAg)
Se han investigado dos fórmulas con la composición ME 9 y ME 10 siguiente:
ME 9 consta de 10% de bromuro de deciltiouronio; 6% de fenoxietanol; 8% butanol-2; 5% de lactato de etilo; 1% de alquilpolioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 41ºC; 0,3% de citronelol; 3% de tetradecanol; 7% de miristato de isopropilo; 0,3% de benzotriazol; 0,4% de alquildimetilamoniopropanosulfonato graso; resto agua.
ME 10 con la composición 10% de bromuro de deciltiouronio; 6% de fenoxietanol; 8% butanol-2; 5% de lactato de etilo; 1% de alquilpolioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 33ºC; 0,3% de citronelol; 3% de tetradecanol; 7% de miristato de isopropilo; 0,3% de benzotriazol; 0,4% de alquildimetilamoniopropanosulfonato graso; resto agua.
Metódica
El suero que contiene HbsAg se mezcló en una proporción 1:19 con soluciones al 1, 1.5 y 2% de desinfectante.
A temperaturas de 45-60ºC el desinfectante actuó durante 5 min. Después se produjo una inactivación mediante una dilución en una proporción 1:100 con tampón MEIA enfriado (tampón micropartícula-inmunoensayo). La detección del HbsAg se realizó con el enzimoinmunoensayo de las micropartículas con el Imx (Abbott Dianostica GmbH, Wiesbaden).
Resultado
El HbsAg se inactivó mediante la microemulsión.
Tabla de inactivación del HbsAg
Detección a una temperatura de HbsAg
ºC 1% 1,5% 2%
ME 10 45 - - -
Control 45 + + +
ME 9 50 - - -
ME 10 50 - - -
Control 50 + + +
ME 10 55 - - -
Control 55 + + +
ME 10 60 - - -
Control 60 + + +
Ejemplo 11 Microemulsiones de sales de tiouronio con acción esporicida
Se ha investigado una fórmula ME 11 con la composición siguiente: 10% de bromuro de dodeciltiouronio, 5% de fenoxietanol; 5% de butandiol-1,3;5% de butandiol-2; 3% de alquilpolioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 39ºC; 2% de tetradecanol; resto agua.
Metódica
Tiras de ensayo comerciales con 10^{6} esporas de Bacillus subtilis variation niger ATCC 9372 (BAG-Bio Strips, sistema de análisis biológico GmbH Lich) se colocaron durante 3 días en una solución de una sustancia de análisis. Después se trasladaron las tiras a una solución de cultivo y se incubaron durante 7 días.
Resultado
Para una concentración >0,05% se mataron todas las esporas.
TABLA
Resultados de la prueba de esporicidas de la fórmula de microemulsión ME 11
Concentración n De ellas sin crecimiento
1,0 3 3
0,5 3 3
0,1 18 18
0,05 21 21
0,025 3 2
Ejemplo 12 Combinación de la sal de deciltiouronio con ésteres del ácido benzoico
Se analizó una microemulsión ME 12, que contenía un 10% en peso de bromuro de deciltiouronio, un 5% en peso de propil-4-hidroxibenzoato, 5% en peso de metil-4-hidroxibenzoato así como un 5% en peso de lactato de etilo, un 8% de butanol-2, un 6% en peso de miristato de isopropilo así como un 2% de alquilpolioxietileno graso en agua, en comparación con las soluciones acuosas de las sustancias puras (bromuro de deciltiouronio y éster del ácido p-hidroxibenzoico). La actividad fungiestática frente al Candida albicans se estimó en la prueba de dilución en serie (ver ejemplo 1).
Sustancia de prueba Concentración de inhibición mínima
Mezcla de metil- y propil-4-hidroxibenzoato 0,098%
Bromuro de decilisotiouronio 0,098%
Microemulsión ME 12 0,012%
Detección del sinergismo: q_{A+B}=0,0012/0,098 + 0,0012/0,098 = 0,024
Ejemplo 13 Reducción de la acción precipitante de la albúmina en combinación con las sales de tiouronio
Se analizó la precipitación de la albúmina en una microemulsión ME 12 del ejemplo 12 en comparación con una solución acuosa de bromuro de deciltiouronio al 0,2% en peso. El ensayo de precipitación de la albúmina se realizó con suero humano diluido así como con soluciones de ovoalbúmina. La reacción se observó durante 5 y 60 min tras mezclar 150 \mul de solución de sustancias de prueba con 1 ml de soluciones de albúmina diluidas y se estimó visualmente según el esquema siguiente:
0 ningún cambio
(+) enturbiamiento muy pequeño
+ ligero enturbiamiento
++ fuerte enturbiamiento
+++ precipitación
Resultados
En presencia de la sal de tiouronio como sustancia única la combinación con 4-hidroxibenzoato de metilo o propilo o una mezcla de ambos ésteres no produce precipitación de albúmina.
Tabla precipitación de la albúmina del suero humano
Sustancia de prueba Adición Dilución del suero
\mul 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64
Bromuro de deciltiouronio, 0,2% 150 + (+) ++ ++ ++ (+)
160 ++ + ++ ++ ++ +
170 ++ + ++ ++ ++ +
180 ++ + ++ ++ ++ +
Microemulsión ME 12; 1% 150 0 0 0 0 0 0
160 0 (+) 0 0 0 0
170 0 (+) 0 0 0 0
180 0 (+) 0 0 0 0
Tabla precipitación de la albúmina de ovoalbúmina
Sustancia de prueba Adición Dilución de suero
\mul 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64
Bromuro de deciltiourionio 0,2% 150 +++ +++ +++ ++ ++ ++
Microemulsión ME 12, 1% 150 +++ +++ 0 0 0 0
Ejemplos 14 y 15
Combinaciones con compuestos de amonio cuaternario
Se analizaron microemulsiones ME 13 con un 10% de bromuro de deciltiouronio, un 10% de cloruro de benzalconio, un 0,5% de polioxibutilenpolioxietileno graso con un punto de enturbiamiento de 45ºC y agua así como una solución L14 formada por un 10% de bromuro de deciltiouronio, un 10% de cloruro de benzalconio, sin tensoactivos no iónicos en agua en comparación con las sustancias de partida. El análisis sobre la eficacia fungiestática contra Candida albicans se realizó según la metódica del ejemplo 1.
Resultados
Frente al Candida albicans se observa un sinergismo.
La tabla de la eficacia fungiestática de las combinaciones de sales de tiouronio y compuestos de amonio cuaternario.
Sustancia de prueba Concentración inhibidora
Cloruro de benzalconio 0,003%
Bromuro de deciltiouronio 0,098%
ME 13 0,012%
L 14 0,012%
Detección del sinergismo q_{A+B}=0,0012/0,003+0,0012/0,098=0,41
Ejemplo 16 Disminución de la precipitación de albúmina en la combinación de sales de tiouronio y compuestos de amonio cuaternario
Fórmulas ver ejemplos 14 y 15.
El ensayo y la precipitación de la albúmina se realizaron con suero humano diluido.
Metódica
Ver ejemplo 13.
Resultados
La precipitación de la albúmina se reduce claramente.
TABLA
Sustancia de prueba Dilución de suero
1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64
Cloruro de benzalconio 0,2% ++ + + ++ ++ ++
Bromuro de deciltiouronio 0,2% + (+) ++ ++ ++ (+)

Claims (9)

1. Microemulsiones Ac/Ag que se caracterizan por un contenido de como mínimo una sal de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenoditiouronio.
2. Microemulsiones Ac/Ag según la reivindicación 1, que se caracterizan por que contienen además otras sustancias activas microbicidas.
3. Microemulsiones Ac/Ag según la reivindicación 1, que se caracterizan por que contienen además tensoactivos y/o excipientes, aditivos y/o sustancias activas.
4. Microemulsiones Ac/Ag según una de las reivindicaciones anteriores, que se caracterizan por que el contenido de una o más sales de alquiltiouronio y/o \alpha,\omega-alquilenoditiouronio es del 0,05 al 30% en peso, en base al peso total de la microemulsión.
5. Microemulsiones Ac/Ag según una de las reivindicaciones anteriores, que se caracterizan por que el emulsionante o emulsionantes se eligen del grupo formado por emulsionantes no iónicos, en particular, los alcoholes etoxilados de cadena lineal.
6. Microemulsiones Ac/Ag según una de las reivindicaciones anteriores, que se caracterizan por que contienen sustancias que tienen una tendencia muy baja a la espumación o a la acción amortiguadora de la espuma, en particular polioxialquilenos alquílicos grasos.
7. Microemulsiones Ac/Ag según una de las reivindicaciones anteriores, que se caracterizan por que son concentrados que se diluyen con agua para dar una solución de uso antes de utilizarlas.
8. Uso de las microemulsiones Ac/Ag según la reivindicación 1, como desinfectantes para instrumentos y superficies médico/quirúrgicas.
9. Uso de las microemulsiones Ac/Ag según la reivindicación 1, como desinfectantes para instrumentos medico/quirúrgicos en las máquinas de lavado y/o desinfección.
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