ES2236500T3

ES2236500T3 - Inhibidores no nucleosidos de la transcriptasa inversa.

Info

Publication number: ES2236500T3
Application number: ES02716563T
Authority: ES
Inventors: William W. Ogilvie; Robert D Ziel; Julie Naud; Jeffrey O'meara; R. Cameron Dale
Original assignee: Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd
Current assignee: Boehringer Ingelheim (Canada) Ltd
Priority date: 2001-03-22
Filing date: 2002-03-21
Publication date: 2005-07-16
Anticipated expiration: 2022-03-21
Also published as: MXPA03007966A; US6716836B2; JP2004523590A; CA2441996C; WO2002076982A2; EP1373267B1; ATE288434T1; AU2002247573A1; JP4148780B2; EP1373267A2; PT1373267E; DE60202853T2; US20030069226A1; DE60202853D1; CA2441996A1; WO2002076982A3

Abstract

Un compuesto de **fórmula** en donde A es una cadena de conexión de alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; B es O ó S; R1 es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo, CF3 ó OR1a en donde R1a es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; R2 es H ó Me; R3 es H ó Me; R4 se selecciona del grupo formado por: H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono; W se selecciona de en donde a) un Y es SO2 y el otro Y es NR5, con la condición de que ambos no sean los mismos, en donde R5 se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por: (i) cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono; (ii)heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 hetero-átomos seleccionados entre O, N y S estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1a 6 átomos de carbono; (iii) NR5aR5b, en donde R5a y R5b son ambos H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

Description

Inhibidores no nucleósidos de la transcriptasa inversa.

La invención se refiere a nuevos compuestos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, su empleo, bien solos o en combinación con otros agentes terapéuticos, en el tratamiento o profilaxis de la infección por HIV, y a las composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos que son activos contra los mutantes resistentes a los NNRTI.

Antecedentes de la invención

La enfermedad conocida como el síndrome de deficiencia inmunológica adquirida (SIDA) está causada por el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV), en particular la cepa conocida como HIV-1. Con el fin de que el HIV sea replicado por una célula anfitriona, la información del genoma vírico debe estar integrada dentro del ADN de la célula anfitriona. Sin embargo, el HIV es un retrovirus, lo cual significa que su información genética está en forma de ARN. El ciclo de replicación del HIV por lo tanto necesita un paso de transcripción del genoma vírico (ARN) en ADN, que sea el inverso de la cadena normal correspondiente. Una enzima transcriptasa inversa (RT) que ha sido adecuadamente copiada efectúa la transcripción del ARN vírico en ADN. El virus HIV incluye una copia de la RT junto con el ARN vírico.

La transcriptasa inversa tiene tres funciones enzimáticas conocidas; actúa como una ADN polimerasa ARN dependiente, como una ribonucleasa y como una ADN polimerasa ADN dependiente. Cuando actúa como una ADN polimerasa dependiente de ARN, la RT transcribe una copia de ADN monocatenario del ARN vírico. Cuando actúa como una ribonucleasa, la RT destruye el ARN vírico original, y libera el ADN justo producido a partir del ARN original. Finalmente, cuando actúa como una ADN polimerasa ADN dependiente, la RT genera una segunda cadena de ADN complementaria, empleando la primera cadena de ADN como molde. Las dos cadenas forman un ADN de doble cadena, el cual se integra dentro del genoma de la célula del anfitrión, mediante otra enzima llamada integrasa.

Compuestos que inhiben las funciones enzimáticas de la transcriptasa inversa del HIV-1 inhibirán la replicación del HIV-1 en las células infectadas. Estos compuestos son de utilidad en la prevención o tratamiento de la infección por HIV-1 en sujetos humanos, como se ha demostrado mediante conocidos inhibidores de la RT tales como el 3'-azido-3'-desoxitimidina (AZT), 2',3'-didesoxinosina (ddI), 2',3'-didesoxicitidina (ddC), d4T, 3TC, Nevirapina, Delavirdina, Efavirenz y Abacavir, los principales fármacos aprobados hasta ahora para el empleo en el tratamiento del SIDA.

Como en cualquier terapia antivírica, el empleo de inhibidores de la RT en el tratamiento del SIDA conduce eventualmente a un virus que es menos sensible al fármaco en cuestión. La resistencia (sensibilidad reducida) a estos fármacos es el resultado de mutaciones que ocurren en el segmento de transcriptasa inversa del gen pol. Han sido caracterizadas varias cepas mutantes de HIV y la resistencia a reconocer los agentes terapéuticos se cree que es debida a mutaciones en el gen de la RT. Uno de los mutantes más comúnmente observado clínicamente es el mutante Y181C en el cual una tirosina (Y) en el codon 181, ha sido mutada en un radical cisteína (C). Otros mutantes que emergen con creciente frecuencia durante el tratamiento empleando nuevos antivíricos, incluyen los mutantes simples K103N, V106A, G190A, Y188C y P236L, y los dobles mutantes K103N/Y181C, K103N/P225H, K103N/V108I y K103N/L 100I.

Como el empleo antivírico en la terapia y prevención de la infección por HIV continúa, la emergencia de nuevas cepas resistentes se espera que aumente. Existe por lo tanto una creciente necesidad de nuevos inhibidores de la RT que tengan diferentes modelos de eficacia contra los varios mutantes resistentes.

En la patente U.S. nº 5.366.972 se describen compuestos que tienen estructuras cíclicas, que son inhibidores del HIV-1. Otros inhibidores de la transcriptasa de HIV-1 se describen en Hargrave et al., J. Med. Chemn 34, 2231 (1991), Cywin et al., J. Med. Chem., 41, 2972 (1998) y Klunder et al., J, Med. Chem., 41, 2960 (1998).

La patente U.S. nº 5.705.499 propone las 8-arilalquil- y 8-arilhetroalquil-5,11-dihidro-6H-dipirido[3,2-B:2',3'-E][1,4] diazepinas como inhibidores de la RT. Se dan a conocer compuestos ejemplificados, que tienen cierta actividad contra la transcriptas inversa del HIV WT.

La patente WO 01/96338A1 describe estructuras de benzodiazepina que tienen substituyentes quinoleína y quinoleína-N-óxido, como inhibidores de la RT. Los compuestos ejemplificados tienen actividad contra la HIV WT, cepas mutantes simples y dobles.

Resumen de la invención

La invención proporciona nuevos compuestos que contienen sultam, que son potentes inhibidores de las cepas tipo salvaje (WT) y de las cepas doble mutantes de HIV-1 RT, particularmente la doble mutación K103N/Y181C.

De acuerdo con un primer aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula I:

1

en donde

A es una cadena de conexión de alquilo de 1 a 3 átomos de carbono;

B es O ó S;

R^{1} es H, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, halo, CF_{3} ó OR^{1a} en donde R^{1a} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

R^{2} es H ó Me;

R^{3} es H ó Me;

R^{4} se selecciona del grupo formado por: H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono;

W se selecciona de

2

en donde

a): un Y es SO_{2} y el otro Y es NR^{5}, con la condición de que ambos no sean los mismos, en donde R^{5} se selección del grupo formado por: H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono,

estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

(ii): heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iii): NR^{5a}R^{5b}, en donde R^{5a} y R^{5b} son ambos H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros, con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iv): OR^{5c} en donde R^{5c} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S;

(v): OCONR^{5d}R^{5e}, en donde R^{5d} y R^{5e} son ambos H; ó R^{5d} es H y R^{5e} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vi): COOR^{5f}, en donde R^{5f} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vii): CONR^{5g}R^{5h}, en donde R^{5g} y R^{5h} son H; ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó R^{5g} es H y R^{h} es cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono, estando dicho alquilo y dicho cicloalquilo opcionalmente substituidos con COOR^{5i} en donde R^{5i} se selecciona del grupo formado por

: H y alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: ó CONHNH_{2}; ó OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó arilo de 6 a 10 átomos de carbono; ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono ó disubstituído con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: ó R^{5h} es NR^{5j}R^{5k} en donde cuando R^{5j} y R^{5k} son ambos H; ó R^{5j} es H y R^{5k} es CH_{2}CF_{3};

: ó R^{5h} es heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S;

(viii): COR^{5l} en donde R^{5l} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, siendo dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(ix): SO_{2}R^{5m}, en donde R^{5m} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó NH_{2}; y

(x): SO_{3}H;

: ó R^{5} es COR^{5n} en donde R^{5n} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} son H, OH, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

: COCH_{2}NR^{5r}R^{5s} en donde R^{5r} y R^{5s} son H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituído con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

y cada R^{8} es independientemente H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono ó alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

b): E es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono ó alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono; y J es CH_{2}; ó J es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son como se ha definido más arriba y E es CH_{2}, en donde la línea de puntos representa un enlace simple; o

c): E es C(O) y J es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son como se ha descrito aquí; ó

: J es C(O) y E es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son como se ha descrito aquí, en donde la línea de puntos representa un enlace simple; o

d): tanto E como J son CR^{8} en donde R^{8} es como se ha descrito aquí, en donde la línea de puntos representa un doble enlace;

o una sal de los mismos.

Alternativamente, de acuerdo con un primer aspecto de la invención R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono y cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono,

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

(iii): NR^{5a}R^{5b}, en donde R^{5a} y R^{5b} son ambos H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, siendo dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con un heteroátomo seleccionado de O, N, y S, siendo dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituído con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iv): OR^{5c} en donde R^{5c} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vii): CONR^{5g}R^{5h}, en donde R^{5g} y R^{5h} son H; ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó R^{5g} es H y R^{5h} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono ó disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: ó R^{5} es COR^{5n} en donde cuando R^{5n} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} son H, OH, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

COCH_{2}NR^{5r}R^{5s} en donde R^{5r} y R^{5s} son H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituído con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

De acuerdo con un segundo aspecto de la inversión, se da a conocer el empleo de un compuesto de fórmula I, como ya se ha descrito aquí, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento o prevención de la infección por HIV.

De acuerdo con un tercer aspecto de la invención, se da a conocer el empleo de un compuesto de fórmula I. como ya se ha descrito aquí, como un anti-HIV infeccioso.

De acuerdo con un cuarto aspecto de la invención, se da a conocer una composición farmacéutica para el tratamiento o prevención de la infección por HIV, que comprende un compuesto de fórmula I como ya se ha descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un soporte farmacéuticamente aceptable.

De acuerdo con un quinto aspecto de la invención, se da a conocer el empleo de un compuesto de fórmula I, en combinación con un fármaco antiretroviral para el tratamiento o prevención de la infección por HIV.

De acuerdo con un sexto aspecto de la invención, se da a conocer el empleo de un compuesto de fórmula I para la prevención de la transmisión perinatal del HIV-1 de la madre al bebé, mediante la administración de dicho compuesto a la madre antes de dar a luz.

De acuerdo con un séptimo aspecto de la invención, se da a conocer un procedimiento para la obtención de un compuesto de fórmula 1:

3

en donde A, R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} y W son como se ha descrito anteriormente,

el cual comprende:

a): la eliminación, en una mezcla de una base acuosa o un ácido acuoso en un co-disolvente, del grupo protector (PG) de

4

5

\vskip1.000000\baselineskip

6

en donde un Y es SO_{2} y el otro Y es N-PG, en donde PG es un grupo protector de amino, eliminable en condiciones suavemente ácidas, alcalinas o reductoras,

para la obtención de compuestos de fórmula I, en donde E, J y R^{8} son como se ha descrito anteriormente.

De acuerdo con octavo aspecto de la invención, se da a conocer un procedimiento para la obtención de un compuesto de fórmula I:

7

el cual comprende:

a): la copulación de un compuesto de fórmula 2

8

en donde A, R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se ha descrito anteriormente,

con un sulfam o una sacarina seleccionado de

9

10

en donde PG es un grupo de protección del nitrógeno, eliminable en condiciones ligeramente ácidas, alcalinas o reductoras; y R^{5} y R^{6} son como se ha descrito anteriormente,

para obtener compuestos de fórmula I.

Descripción detallada de la invención

Son de aplicación las siguientes definiciones, a no ser que se indique otra cosa:

Como se emplea en la presente, los términos "alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono" bien sea solos o en combinación con otro radical, significan radicales alquílicos acíclicos que contienen hasta tres, cuatro y seis átomos de carbono respectivamente. Ejemplos de tales radicales incluyen el metilo, etilo, propilo, butilo, hexilo, 1-metiletilo, 1-metilpropilo, 2-metilpropilo, 1,1-dimetiletilo.

Como se emplea en la presente, el término "cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono", bien sea solo o en combinación con otro radical, significa un radical cicloalquilo que contiene de tres a siete átomos de carbono e incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.

Como se emplea en la presente, el término arilo de 1 a 8 átomos de carbono, bien sea solo o en combinación con otro radical significa un radical aromático que contiene de seis a diez átomos de carbono, por ejemplo fenilo.

Como se emplea en la presente, el término "alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono" bien sea solo o en combinación con otro radical, se refiere al radical -O(alquilo de 1 a 6 átomos de carbono) en donde alquilo es como se ha definido más arriba y contiene hasta seis átomos de carbono. Ejemplos del mismo son el metoxilo, etoxilo, propoxilo, 1-metil-etoxilo, butoxilo y 1,1-dimetiletoxilo.

Como se emplea en la presente, el término "heterociclo" ó "Het", bien sea solo o en combinación con otro radical, significa un radical monovalente derivado mediante la eliminación de un hidrógeno de un heterociclo de cinco, seis o siete miembros, saturado o sin saturar (incluyendo los aromáticos), que contiene de uno a cuatro heteroátomos seleccionados entre el nitrógeno, oxígeno y azufre. Además, "Het" como se emplea en la presente significa un heterociclo como se define más arriba, fusionado a uno o mas ciclos distintos dando un heterociclo o cualquier otro ciclo. El heterociclo puede estar substituido. Ejemplos de estos substituyentes incluyen, pero no están limitados a, halógeno, aminas, hidracinas y N-óxidos. Ejemplos de heterociclos adecuados son: la pirrolidina, tetrahidrofurano, tiazolidina, pirrol, tiofeno, diazepina, 1H-imidazol, isoxazol, tiazol, tetrazol, piperidina, 1,4-dioxano, 4-morfolina, piridina, pirimidina, tiazolo[4,5-b]-piridina, quinoleína o indol, o los siguientes heterociclos:

11

Como se emplea en la presente, el término "halo" significa un átomo de halógeno e incluye flúor, cloro, bromo y yodo.

Como se emplea en la presente, el término "inhibidor de la replicación del HIV" significa que la capacidad de la transcriptasa inversa de HIV-1 para replicar una copia de ADN a partir de un molde de ARN, está substancialmente reducida o esencialmente eliminada.

Como se emplea en la presente, el término "cepas mutantes simples o dobles" significa que o bien uno o bien dos radicales aminoácidos presentes en la cepa HIV-1 WT han sido reemplazados por radicales que no se encuentran en la cepa WT. Por ejemplo, el mutante simple Y181C se prepara por mutagénesis directa en el sitio en el cual la tirosina en el radical 181 ha sido reemplazada por un radical cisteína. De manera similar, para el mutante doble K103N/Y181C, un radical asparagina ha reemplazado la lisina del radical 103 y un radical cisteína ha reemplazado la tirosina en el radical 181.

Como se emplea en la presente, el término "sal farmacéuticamente aceptable" incluye aquellas sales derivadas de bases farmacéuticamente aceptables y que no son tóxicas. Ejemplos de bases adecuadas incluyen la colina, etanolamina y etilendiamina. Las sales Na^{+}, K^{+} y Ca^{++} se consideran también dentro del ámbito de la invención (ver también Pharmaceutical salts ("sales farmacéuticas"), Birge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., (1977), 66, 1-9.

Como se emplea en la presente, el término "grupo protector del nitrógeno" significa un grupo capaz de proteger un átomo de nitrógeno contra reacciones indeseables durante procedimientos de síntesis (ver "Protective Groups in Organic Synthesis" ("Grupos protectores en síntesis orgánicas"), Teodora W. Greene y Peter G.M. Wuts, 3ª edición, 1999).

Como se emplea en la presente, el término "profármaco" se refiere a derivados farmacológicamente aceptables, de forma que el producto biotransformado resultante del derivado, es el fármaco activo, como se define en los compuestos de fórmula I. Ejemplos de estos derivados incluyen, aunque no están limitados a, ésteres y amidas (ver Goodman y Gilman en The Pharmacological Basis of Therapeutics ("Bases farmacológicas de los productos terapéuticos"), 9ª ed., McGraw-Hill, Int. Ed. 1995, "Biotransformation of Drugs" ("Biotransformación de fármacos"), p 11-16.

Versiones preferidas

De acuerdo con la primera versión de la invención, los compuestos preferidos tienen la siguiente fórmula:

12

De preferencia, R^{1} es H, alquilo de 1 a 6 alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, halo ó CF_{3}. Con mayor preferencia R^{1} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó F. Todavía con mayor preferencia, R^{1} es H, metilo ó F. Con la mayor preferencia, R^{1} es H ó F.

De preferencia, R^{2} es H ó Me. Con mayor preferencia, R^{2} es H.

De preferencia, R^{3} es H ó Me. Con mayor preferencia, R^{3} es CH_{3}.

De preferencia R^{4} se selecciona de H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono y cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono. Con más preferencia, R^{4} es alquilo de 1 a 4 átomos de carbono y cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono. Todavía con mayor preferencia, R^{4} es Et ó ciclopropilo. Con la mayor preferencia R^{4} es Et,

De preferencia W es

13

De preferencia, un Y es SO_{2} y el otro Y es NR^{5}, con la condición de que ambos no sean los mismos.

De preferencia, E es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono o alquilo de 1 a 4 átomos de carbono- cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, y J es CH_{2}; ó J es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son como se ha definido más arriba y E es CH_{2}, en donde la línea de puntos representa un enlace sencillo.

De preferencia, tanto E y J son CR^{8} en donde R^{8} es como se ha descrito anteriormente, en donde la línea de puntos representa un enlace doble.

De preferencia, R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmnmete substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono

(ii): heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iii): NR^{5a}R^{5b}, en donde R^{5a} y R^{5b} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iv): OR^{5c} en donde R^{5c} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S;

(v): OCONR^{5d}R^{5e}, en donde R^{5d} y R^{5e} son ambos H; o R^{5d} es H y R^{5e} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vii): CONR^{5g}R^{5h}, en donde R^{5g} y R^{5h} son H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó R^{5g} es H y R^{5h} es cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono,

: estando dicho alquilo y dicho cicloalquilo opcionalmente substituido con COOR^{5i} en donde R^{5i} se selecciona del grupo formado por:

: H y alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó CONHNH_{2};

: ó R^{5h} es NH_{2} ó NHCH_{2}CF_{3};

: ó R^{5h} es heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N y S;

(viii): COR^{5i} en donde R^{5i} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(x): SO_{3}H;

ó R^{5} es COR^{5n} en donde R^{5n} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono.

Con mayor preferencia, R^{5} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

(ii): heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iv): OH;

(vii): CONR^{5g}R^{5h}, en donde R^{5g} y R^{5h} son ambos H; ó R^{5g} es H y R^{5h} es NH_{2}; y

(viii): COR^{5i} en donde R^{5i} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos;

COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} son alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono.

Con mayor preferencia, R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, en donde dicho alquilo está opcionalmente substituido con COOH.

De preferencia, cada R^{8} es, independientemente entre sí, H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono. Con más preferencia cada R^{8} es H ó CH_{3}. Con la mayor preferencia cada R^{8} es H.

De preferencia W es:

14

\vskip1.000000\baselineskip

en donde R^{5} está seleccionado de preferencia del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono

(iv): OH; y

y COOR^{50} en donde R^{50} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

Con mayor preferencia, R^{5} se selecciona del grupo formado por H, CH_{3}, CH_{3}CH_{2},

15

Con la mayor preferencia R^{5} se selecciona del grupo formado por H, CH_{3}, CH_{3}CH_{2},

16

De preferencia R^{5f} es H.

De preferencia R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Con más preferencia R^{50} es etilo.

De preferencia W es:

17

en donde R^{5} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono y de preferencia, cada R^{8} es H ó CH_{3}. Con la mayor preferencia R^{5} es H ó CH_{3}.

De preferencia W es

18

en donde de preferencia cada R^{8} es H ó CH_{3}

De preferencia, W es:

19

Alternativamente, de preferencia W es:

20

en donde de preferencia R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(iv): OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vi): COOR^{5f}, en donde R^{5f} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó

(vii): CONH_{2}; y

(viii): COR^{5i} en donde R^{5i} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

ó R^{5} es COR^{5n} en donde R^{5n} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

De preferencia, R^{5} se selecciona del grupo formado por:

21

Alternativamente, de preferencia R^{5} se selecciona del grupo formado por:

22

De preferencia tanto R^{5a} como R^{5b} son ambos alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Con mayor preferencia tanto R^{5a} como R^{5b} son ambos etilo.

De preferencia, R^{5} es OH.

De preferencia R^{5f} es H o metilo.

De preferencia R^{5l} es

23

de preferencia R^{5p} y R^{5q} son ambos alquilo de 1 a 6 átomos de carbono. Con mayor preferencia tanto R^{5p} como R^{5q} son ambos etilo.

Alternativamente, de preferencia cuando R^{5p} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, entonces R^{5q} es OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono. Con mayor preferencia R^{5p} es metilo y R^{5q} es alcoxilo de 1 a 8 átomos de carbono.

De preferencia, R^{5q} es OCH_{3}.

De preferencia, W es:

24

en donde de preferencia R^{5} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, en donde dicho alquilo está substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por

(vi): COOR^{5f}, en donde R^{5f} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

(vii): CONHNH_{2}.

De preferencia, R^{5} es (CH_{2})_{3}COOH y (CH_{2})_{3}CONHNH_{2}.

De preferencia W es

25

en donde de preferencia R^{5} se selecciona del grupo formado por: H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, y (CH_{2})_{3}
COOH.

Con mayor preferencia R^{5} es H ó CH_{3}.

De preferencia, los compuestos de la invención tienen la fórmula:

26

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} y R^{5} son como se ha descrito anteriormente.

Alternativamente, de preferencia los compuestos de la invención tienen la fórmula:

27

28

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{8} son como se ha descrito anteriormente.

29

Alternativamente, de preferencia, los compuestos de la invención tienen la fórmula:

30

Versiones específicas

Incluidos dentro del ámbito de esta invención están todos los compuestos de fórmula I que figuran en las tablas 1 a 8.

Los compuestos de fórmula I son eficaces inhibidores del HIV tipo salvaje, así como inhiben la enzima de doble mutación K103N/Y181C. Los compuestos de la invención pueden también inhibir las enzimas de mutación simple V106A, Y188L, K103N, Y181C, P236L y G190A. Los compuestos pueden también inhibir otras enzimas de mutación doble, incluyendo las K103N/P225H, K103N/V108I y K103N/L100I.

Los compuestos de fórmula I poseen actividad inhibidora contra la replicación del HIV-1. Cuando se administran en formas de dosificación adecuadas, son útiles en el tratamiento del SIDA, ARC y transtornos afines asociados con la infección por HIV-1. Otro aspecto de la invención, en consecuencia, es un método para el tratamiento de la infección por HIV-1 que comprende la administración a un humano que está infectado por el HIV-1, de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto nuevo de fórmula I, como se ha descrito anteriormente. Tanto si se califica de tratamiento como de profilaxis, los compuestos pueden emplearse también para prevenir la transmisión perinatal del HIV-1 de la madre al bebé, mediante la administración a la madre antes de dar a luz.

Los compuestos de la fórmula I pueden administrarse en dosis únicas o divididas mediante las vías oral, parenteral o tópica. Una dosificación oral adecuada para un compuesto de fórmula I estaría en el margen de aproximadamente 0,5 mg a 1 g por día. Una dosificación oral preferida para un compuesto de fórmula I sería en el margen de aproximadamente 100 mg a 800 mg por día para un paciente que pesa 70 kg. En formulaciones parenterales una unidad de dosificación adecuada contiene de 0,1 a 250 mg de dichos compuestos, de preferencia 1 mg a 200 mg, mientras que para la administración tópica, se prefieren las formulaciones que contienen 0,01 a 1% de ingrediente activo. Debe comprenderse sin embargo, que la administración de la dosificación puede variar de un paciente a otro. La dosificación para cualquier paciente particular dependerá del criterio del médico, que empleará como base para fijar la dosificación correcta el peso y condición del paciente así como la respuesta del cliente al fármaco. Cuando los compuestos de la presente invención deban administrarse por vía oral, pueden ser administrados como medicamentos en forma de preparaciones farmacéuticas que los contienen en asociación con un material de soporte farmacéuticamente compatible. Este material de soporte puede ser un material de soporte inerte orgánico o inorgánico adecuado para administración oral. Ejemplos de dichos materiales de soporte son el agua, gelatina, talco, almidón, estearato de magnesio, goma arábiga, aceites vegetales, poli-alquilenglicoles, vaselina y similares.

Los compuestos de fórmula I pueden emplearse en combinación con un fármaco antiretroviral ya conocido por los expertos en la técnica, como una combinación preparada de utilidad para la administración simultánea, separadamente o secuencialmente, para el tratamiento o prevención de la infección por HIV en un individuo. Ejemplos de fármacos antiretrovirales que pueden emplearse en una terapia de combinación con compuestos de fórmula I, incluyen, pero no están limitados, a los NRTIs (como p. ej., el AZT), NNRTIs (como p. ej., Nevirapine), compuestos de TIBO (del tipo tetrahidro-imidazo[4,5,1-jk][1,4]-benzodiazepina-2(1H)-ona y tiona), compuestos del tipo \alpha-APA (\alpha-anilino fenil acetamida), inhibidores TAT, inhibidores de proteasa (como p. ej., el Ritanovir) y agentes inmunomoduladores (como p. ej., el Levamisole). Además, puede emplearse un compuesto de fórmula I con otro compuesto de
fórmula I.

Las preparaciones farmacéuticas pueden prepararse de una manera convencional y las formas de dosificación acabadas pueden ser formas de dosificación sólida, por ejemplo, comprimidos, grageas, cápsulas y similares, o formas de dosificación líquida, por ejemplo soluciones, suspensiones, emulsiones y similares. Las preparaciones farmacéuticas pueden estar sometidas a operaciones farmacéuticas convencionales tales como la esterilización. Además, las preparaciones farmacéuticas pueden contener coadyuvantes convencionales tales como conservantes, estabilizantes, emulsionantes, agentes para mejorar el sabor, agentes humectantes, tampones, sales para variar la presión osmótica y similares. Puede emplearse material de soporte sólido como por ejemplo, el almidón, lactosa, manitol, metilcelulosa, celulosa micro-cristalina, talco, sílice, fosfato de calcio dibásico y polímeros de alto peso molecular (como por ejemplo el polietilenglicol).

Para el uso parenteral, puede administrarse un compuesto de fórmula I en una solución acuosa o no acuosa, una suspensión o una emulsión en un aceite farmacéuticamente aceptable o en una mezcla de líquidos, que pueden contener agentes bacteriostáticos, antioxidantes, conservantes, tampones u otros solutos para hacer la solución isotónica con la sangre, agentes espesantes, agentes para la suspensión u otros aditivos farmacéuticamente aceptables. Aditivos de este tipo incluyen por ejemplo tampones de tartrato, citrato y acetato, etanol, propilenglicol, polietilenglicol, formadores de complejos (como por ejemplo, EDTA), antioxidantes (como por ejemplo, bisulfito de sodio, metabisulfito de sodio y ácido ascórbico), polímeros de alto peso molecular (como por ejemplo óxidos de polietileno líquidos) para regular la viscosidad y derivados de polietileno de anhídridos de sorbitol. Si es necesario, pueden añadirse también conservantes, por ejemplo ácido benzoico, metil o propil paraben, cloruro de benzalconio y otros compuestos de amonio cuaternario.

Los compuestos de esta invención pueden también administrarse como soluciones para la aplicación nasal y pueden contener además de los compuestos de esta invención, tampones adecuados, reguladores de la tonicidad, conservantes microbianos, antioxidantes y agentes para aumentar la viscosidad en un vehículo acuoso. Ejemplos de agentes empleados para aumentar la viscosidad son el alcohol polivinílico, derivados de la celulosa, polivinilpirrolidona, polisorbatos o glicerina. Los conservantes microbianos añadidos pueden incluir cloruro de benzalconio, timerosal, clorobutanol o feniletilalcohol.

Adicionalmente, los compuestos proporcionados por la invención pueden administrarse mediante supositorios.

Metodología y síntesis

Los compuestos de la presente invención fueron sintetizados de acuerdo con un procedimiento general como está ilustrado en el esquema I (en donde PG es un grupo protector del nitrógeno, R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se ha definido previamente).

Esquema 1

Introducción del sultam

31

Brevemente, la condensación de la 8-bromo-benzodiazepina 1(i), sintetizada como se describe más adelante, mediante una copulación cruzada mediada por paladio, con reactivo de alilestaño 1(ii) en un disolvente aprótico (p. ej., DMF) y en presencia de un catalizador, forma substituyentes en el C-8 1(iii). La oxidación del doble enlace (p. ej., mediante ozonolisis para producir un ozónido), seguido de una reducción, produce el substituyente hidroxietilo en C-8 1(iv). La condensación de un sultam convenientemente protegido 1(v) con 1(iv) produce un producto intermedio protegido (vii). El grupo de protección (PG) de 1(vii) puede a continuación eliminarse en condiciones ligeramente ácidas o ligeramente alcalinas dando compuestos de fórmula I. Alternativamente, después de que el grupo protector ha sido eliminado, puede introducirse R^{5} empleando una base seguida por la reacción con R^{5}-X en el cual X es halógeno o algún otro grupo lábil adecuado. Puede emplearse otra ruta alternativa, en la cual se condensa un sultam 1(vi) que contiene R^{5}, con 1(iv) para dar compuestos de fórmula I.

Otros métodos para la introducción de substituyentes en C-8 son conocidos por los expertos en la técnica. Ejemplos de dichos métodos incluyen la vinilación de la posición C-8 seguida de la hidroboración para dar la C-8 hidroxi-etilbenzodiazepina. Otro ejemplo sería una reacción de S_{N}AR con un sultam aromático apropiadamente substituido.

Esquema 2

Introducción alternativa del sultam

32

El método químico ilustrado en el esquema 2 es esencialmente el mismo que se ha descrito en el esquema 1 anterior. La diferencia estriba en el empleo del reactivo viniloestaño 2(i) para dar el producto vinilado intermedio
2(ii).

Síntesis del sultam

La síntesis de los anillos del sultam de 5 y 6 miembros de la presente invención, emplea métodos químicos ya conocidos por la técnica. Los esquemas 3 a 5 a continuación ilustran los métodos empleados para preparar los anillos del sultam de la presente invención.

Esquema 3

Preparación de sultams de cinco miembros

\vskip1.000000\baselineskip

33

Brevemente, se sulfonila el compuesto de bromo 3(i) comercialmente adquirible, y se reduce el grupo nitro (p. ej., por hidrogenación) para dar la anilida intermedia 3(ii). La ciclación en condiciones alcalinas da lugar al sultam 3(iii). La protección del grupo sulfonamido en el sultam 3(iii) da el sultam 3(iv), después de lo cual el desbloqueo del grupo OH produce el sultam 3(v) que se emplea para sintetizar compuestos de fórmula I. Alternativamente, R^{5} puede introducirse en el 3(iii) mediante una reacción de adición inducida por una base para dar el 3(vi) el cual después de desbloquear el grupo OH, puede emplearse para producir compuestos de la invención.

Esquema 4

Preparación alternativa de sultams de cinco miembros

34

En general, se reduce la sacarina 4(i) (Lombardino, J.G. J. Org. Chem. 1971, 1843) para dar sultam 4(ii). Desbloqueando el grupo OH como previamente se ha descrito en el esquema 3, se obtiene el 4(iii), después de lo cual se añade el grupo R^{5} para dar 4(iv). Alternativamente, la sacarina 4(i) puede alquilarse para dar el sultam 4(vii) seguido del desbloqueo del grupo OH para dar 4(viii), ó para los compuestos en los cuales R^{5} no es H, entonces R^{5} puede introducirse para dar el 4(viii). Además, el grupo OH en 4(i) puede desbloquearse seguido por la introducción de R^{5} para dar el 4(vi). Los sultams 4(iv), 4(vi) y 4(viii) pueden emplearse a continuación para sintetizar compuestos de fórmula I.

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

(Esquema pasa a página siguiente)

\newpage

Esquema 5

Ruta de síntesis para los sultams de 6 miembros

35

El esquema de la síntesis anterior es una adaptación del descrito por Blondet, D.; Pascal, J.-C. Tetrahedron Lett. 1994, 35, 2911.

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

(Esquema pasa a página siguiente)

\newpage

Esquema 6

Preparación de productos intermedios en los cuales R^{2} es Me

36

\vskip1.000000\baselineskip

Esquema 7

Preparación de productos intermedios en los cuales R^{3} es Me

37

La secuencia del esquema 7 es análoga a la descrita por V.M.Klunder et al.; J. Med. Chem. 1998, 41, 2960-71 y C.L. Cywin et al.; J. Med. Chem. 1998, 41, 2972-84.

Esquema 8

Ruta alternativa para compuestos en los cuales R^{2} es Me

38

\vskip1.000000\baselineskip

Esquema 9

Preparación de productos intermedios en los cuales R^{1} es Me

39

Como se ha indicado anteriormente, los compuestos proporcionados por la invención inhiben la actividad enzimática de la HIV-1 RT. En base al ensayo de estos compuestos como se describe más adelante, es conocido que inhiben la actividad ADN polimerasa dependiente de ARN de la HIV-1 RT. Un experto en la técnica reconocerá también que los compuestos de la invención pueden inhibir también la actividad ADN polimerasa dependiente de ADN de la HIV-1 RT. Empleando el ensayo de la transcriptas inversa (RT) descrito más adelante, los compuestos pueden ser analizados para determinar su capacidad para inhibir la actividad ADN polimerasa dependiente de ARN de la HIV-1 RT. Los compuestos específicos descritos en los ejemplos, que figuran más adelante fueron ensayados así. Los resultados de estos ensayos aparecen en la tabla 9 como IC_{50}(nM) y EC_{50} (nM).

Ejemplos

La presente invención se ilustra con más detalle mediante los siguientes ejemplos no limitativos. Todas las reacciones se efectuaron en atmósfera de nitrógeno o argón. Las temperaturas están expresadas en grados Celsius. Los porcentajes de solución o los ratios, expresan una relación volumen a volumen, a no ser que se indique otra cosa.

Las abreviaturas o símbolos empleados en la presente incluyen:

\newpage

DEAD:	azodicarboxilato de dietilo;
DIAD:	azodicarboxilato de diisopropilo;
DIEA:	diisopropiletilamina;
DMAP:	4-(dimetilamino)piridina;
DMSO:	sulfóxido de dimetilo
DMF:	dimetilformamida
ES MS:	espectrometría de masas por difusión de electrones
Et:	etilo;
EtOAc:	acetato de etilo;
Et_{2}O:	éter dietílico;
HPLC:	cromatografía líquida de alta resolución;
iPr:	isopropilo;
Me:	metilo;
MeOH:	metano;
MeCN:	acetonitrilo;
NBS:	N-bromosuccinimida;
Ph:	fenilo;
TBE:	tris-borato-EDTA;
TBTU:	tetrafluorborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio;
TFA:	ácido trifluoracético;
THF:	tetrahidrofurano;
MS (ES):	espectrometría de masas por difusión de electrones;
MS (FAB) ó FAB/MS:	espectrometría de masa por bombardeo con átomos rápidos;
HRMS:	espectrometría de masas de alta resolución;
PFU:	unidades formadoras de placas;
DEPC:	pirocarbonato de dietilo;
DMSO:	sulfóxido de dimetilo;
DTT:	ditiotreitol;
EDTA:	tetraacetato de etilendiamina;
UMP:	5'-monofosfato de uridina;
UTP:	5'-trifosfato de uridina;

Síntesis

Los siguientes ejemplos ilustran diversos métodos para la preparación de compuestos de la invención.

Ejemplo 1

(Compuesto 122 y 101)

\vskip1.000000\baselineskip

40

a) (2-amino-6-metoxifenil)-metansulfonato de sodio (1b)

Una solución de sulfito de sodio (0,36 g, 3,36 mmoles) en agua (10 ml), se añadió a una solución de 2-bromometil-1-metoxi-3-nitrobenceno (1)(Beckett, A.H.; Daisley, R.W.; Walker, J. Tetrahedron 1968, 24, 6093)(750 mg, 3,05 mmoles) en acetona (5 ml). La solución fue a continuación agitada a reflujo durante 16 horas, enfriada a temperatura ambiente y concentrada al vacío. La pasta resultante se disolvió en etanol caliente y se filtró en caliente. El líquido madre se enfrió en un baño de hielo y el sólido que precipitó se recogió mediante filtración por succión y se secó al vacío para dar un sólido de cloro blanco (1,10 g) que contenía el producto deseado y NaBr. Una porción de este sólido (100 mg, 0,41 mmoles) se disolvió en EtOH al 50% en H_{2}O (5 ml). Se añadió paladio al 10% sobre carbón (10 mg) y la mezcla resultante se agitó en atmósfera de hidrógeno hasta que la reacción se dio por terminada mediante HPLC (90 minutos). La mezcla se diluyó con H_{2}O (5 ml), se filtró y se concentró para dar anilina 1b (86 mg, 97% de rendimiento).

b) 2,2-dioxo-2,3-dihidro-1H-2\lambda^{6}-benzo[c]isotiazol-4-ol (1c)

Se calentó anilina 1b (35 mg, 0,16 mmoles) a reflujo en POCl_{3} (3,0 ml) durante dos horas. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró al vacío. Se añadió cuidadosamente una mezcla de hielo y agua, y la solución se alcalinizó mediante NaOH 2N. La mezcla se calentó a 70ºC durante 10 minutos y se filtró en caliente. El filtrado se acidificó con HCl concentrado mientras se enfriaba en un baño de hielo. El producto que precipitó se recogió mediante filtración por succión para dar el sultam deseado (19 mg, 60%).

Una solución de este producto (0,8 g 4,0 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (15 ml) se enfrió a -78ºC. Una solución 3,3M de BBr_{3} en CH_{2}Cl_{2} (7,9 ml, 32,3 mmoles) se añadió a continuación lentamente durante 15 minutos. Una vez finalizada la adición, se dejó que la mezcla de reacción se calentara a temperatura ambiente durante 4 horas, a continuación se vertió sobre una mezcla de hielo y agua. La mezcla se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con H_{2}O y sal muera y se secaron con MgSO_{4}, se filtró y se concentró al vacío. El sólido resultante se purificó además mediante cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) para dar el sultam fenol 1c (0,55 g, 74%).

c) Éster etílico del ácido 4-hidroxi-2,2-dioxo-2,3-dihidro-2\lambda^{6}-benzo[c]isotiazol-1-carboxílico (1d)

Se disolvió sultam 1c (100 mg, 0,54 mmoles) en piridina (2,5 ml) y se enfrió a 0ºC. Se añadió cloroformiato de etilo (62 \mul, 0,65 mmoles) y la solución se calentó a temperatura ambiente y se dejó en reposo durante 16 horas. La piridina se eliminó al vacío y la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó dos veces con HCl 1,0N, una vez con agua y una vez con sal muera. La solución se secó a continuación con MgSO_{4}se filtró y el disolvente se eliminó al vacío. La purificación mediante cromatografía flash dió el producto deseado 1d (37 mg, 27%).

Alternativamente, una solución de sultam 1c (1,75 g, 9,45 mmoles) y Et_{3}N (5,27 ml, 37,8 mmoles) en THF (60 ml), se trató con cloroformiato de etilo (2,71 ml, 28,3 mmoles) durante 10 minutos a 0ºC. La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante dos horas. A continuación se incorporó agua y la mezcla se extrajo con EtOAc. Siguió un lavado de la fase orgánica con HCl 1,0N, NaHCO_{3} y sal muera y a continuación se secó con MgSO_{4}. Se obtuvo un sólido de color beige (2,54 g, 86%) después de eliminar el disolvente. A este sólido (2,52 g, 8,04 mmoles) en EtOH al 25% en THF (80 ml), se añadió NH_{4}OH (23 ml de solución al 28%, 150 mmoles), y la solución resultante se agitó durante 90 minutos. El disolvente se eliminó al vacío y el producto se purificó mediante cromatografía flash (30% de EtOAc en hexanos) para dar 1d (1,41 g, 68%).

d) Compuesto 122

A una solución de fenol 1d (36 mg, 0,14mmoles), PPh_{3} (74 mg, 0,28 mmoles) y 5,11-dihidro-1-etil-8-(2-hidroxietil)-5-metil-6H-dipirido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona (42 mg, 0,14 mmoles) en THF (2,5 ml), se añadió lentamente DEAD (44 \mul, 0,28 mmoles) gota a gota durante 10 minutos. La solución resultante se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró y purificó mediante cromatografía flash (60 a 80% de EtOAc en hexanos) para dar el compuesto 122 (36 mg, 48%).

e) Compuesto 101

A una solución del compuesto 122 (25 mg, 0,047 mmoles) en THF (1,5 ml) se añadió una solución 2M de amoníaco en EtOH (3,0 ml). La reacción se agitó durante 16 horas y se concentró al vacío. La mezcla se diluyó con EtOAc, se lavó dos veces con HCl 1,0N, una vez con agua, una vez con sal muera y se secó con MgSO_{4}. La filtración y la eliminación del disolvente fue seguida por la cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) para dar el compuesto 101 (8 mg, 37%).

Ejemplo 2

(Compuesto 402)

Este compuesto se preparó a partir del 5,11-dihidro-11-dihidro-11-etil-8-(2-hidroxietil)-5-metil-6H-dipirido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona y éster etílico del ácido 5-hidroxi-2,2-dioxo-2,3-dihidro-2\lambda^{6}-benzo[c]isotiazol-1-carbo-xílico (preparado a partir del 2-bromometil-4-metoxi-1-nitro-benceno (Beckett, A.H.; Daisley, R.W:; Walker, J. Tetrahedron 1968, 24, 6093) empleando un procedimiento similar al descrito para 1d), empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 101.

Compuestos 103, 104, 105, 106, 109, 110, 404 y 120: se prepararon a partir del 5,11-dihidro-11-etil-8-(2-hidroxietil)-4-metil-6H-dipirido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona y fenol 1d empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 101.

Ejemplo 3

(Compuestos 107 y 108)

Una solución 1M de NaHMDS en THF (55 \mul, 0,055 mmoles) se añadió a una solución del compuesto 104 (25 mg, 0,053 mmoles) en DMF (1 ml). La solución resultante se agitó brevemente, a continuación se añadió un exceso de MeI y la agitación se continuó durante 30 minutos adicionales. Se añadió agua y la mezcla se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y sal muera y se secaron con MgSO_{4}. La cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) seguida por la HPLC preparativa empleando un gradiente de MeCN/H_{2}O conteniendo TFA (0,06%) (CombiPrep ODS-AQ 50x20 mm, 5\mu, 120 \ring{A}) dió el compuesto 107 (4,7 mg, 18%) y el compuesto 108 (2,9 mg, 11%).

Ejemplo 4

(Compuesto 111)

Una mezcla del compuesto 103 (18 mg, 0,037 mmoles), K_{2}CO_{3} (57 mg, 0,41 mmoles) y MeI (0,1 ml), en DMF (0,5 ml), se agitó durante 48 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc y se lavó dos veces con agua, una vez con sal muera y se secó con MgSO_{4}. La cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) dio el compuesto 111, el cual se liofilizó a partir de una mezcla de CH_{3}CN y agua obteniéndose un sólido de color blanco (10 mg, 54%).

Compuestos 112, 116, 117, 118, 119 y 121: se prepararon empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 111.

Ejemplo 5

(Compuestos 301 y 303)

41

a) 1,1-dioxo-2,3-dihidro-1H-1\lambda^{6}-benzo[d]isotiazol-5-ol (5b)

Se disolvió 5-metoxi-1,1-dioxo-1,2-dihidro-1\lambda^{6}-benzo [d]isotiazol-3-ona 5a (Lomardino, J.G. J. Org. Chem. 1971, 1843)(1,50 g, 7,04 mmoles), en THF (75 ml) y se añadió LiAlH_{4} (35,2 ml de una solución 1,0M en THF, 35,2 mmoles). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se interrumpió con cuidado con una solución saturada de sal de Rochelle, se diluyó con EtOAc y se agitó vigorosamente durante 20 minutos. La filtración a través de Celite® continuó mediante la concentración al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc del 70 al 80% en hexanos), para dar un sólido de color blanco (0,46 g, 33%). Este sólido (0,38 g, 1,91 mmoles) se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) y la solución se enfrió a -78ºC. Se añadió BBr_{3} (5,46 ml de una solución 3,5M en CH_{2}Cl_{2}, 19,1 mmoles), el baño frío se retiró y la mezcla resultante se dejó en reposo durante 16 horas. La reacción se interrumpió mediante la adición cuidadosa de H_{2}O, se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos se secaron con MgSO_{4}. La purificación mediante cromatografía flash (70 a 80% de EtOAc en hexanos) proporcionó el material deseado 5b (135 mg, 38%).

b) Éster etílico del ácido 5-hidroxi-1,1-dioxo-1,3-dihidro-1\lambda^{6}-benzo[d]isotiazol-2-carboxílico (5c)

Al sultam 5b (0,10, 0,54 mmoles) disuelto en piridina (5.0 ml) se añadió cloroformiato de etilo (0,51 ml, 5,38 mmoles). La reacción se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente y a continuación se concentró al vacío. La mezcla se extrajo con EtOAc, se lavó dos veces con HCl 1,0N, una vez con agua, una vez con NaHCO_{3} saturado, una vez con sal muera y se secó con MgSO_{4}. La purificación con cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) dio el bis carbamato (96 mg, 54%). Este material (63 mg, 0,19 mmoles) se disolvió en EtOH al 10% en EtOAc (10 ml), se añadió una solución 2,0M de NH_{3} en EtOH (1,91 ml, 3,83 mmoles), y la solución se agitó durante una hora a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) para dar carbamato 5c (42 mg, 68%).

c) Compuesto 301

El carbamato 5c (36 mg, 0,14 mmoles). PPh_{3} (72 mg, 0,27 mmoles) y la 5,11-dihidro-11-etil-8-(2-hidroxietil)-5-metil-6H-dipirido [3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona (41 mg, 0,14 mmoles) se disolvieron en THF (2,5 ml). Se añadió DEAD (43 \mul, 0,27 mmoles) lentamente y la solución resultante se dejó en reposo durante 18 horas. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó dos veces con agua, se secó con MgSO_{4}, se filtró y se concentró al vacío. La mezcla resultante se purificó parcialmente mediante cromatografía flash (70 a 80% de EtOAc en hexanos) para dar 132 mg de aducto 5d (contaminado con óxido de trifenilfosfina). Este material se disolvió en 5:1 EtOH:THF (6 ml) y se añadió una solución 2,0M de NH_{3} en EtOH (6,15 ml, 12,2 mmoles). Después de agitar durante 16 horas, la reacción se diluyó con EtOAc y se extrajo tres veces con NaOH 1,0N. La fase acuosa se acidificó con HCl concentrado y se extrajo tres veces con EtOAc. Después de secar con MgSO_{4} el residuo concentrado se purificó con cromatografía flash (70 a 80% de EtOAc en hexanos) para dar el derivado compuesto 301 (18 mg, 16%).

d) Compuesto 303

Una mezcla del compuesto 301 (8,7 mg, 0,02 mmoles), K_{2}CO_{3} (10 mg, 0,07 mmoles) y MeI (3,5 \mul, 0,06 mmoles) en DMF se agitó a temperatura ambiente. Después de 2 días adicionales, se añadieron K_{2}CO_{3} (20 mg) y MeI (50 \mul) y la agitación continuó durante la noche. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró. La TLC preparativa (60% de EtOAc en hexanos) dio el material deseado (6,2 mg, 60%) el cual se liofilizó a partir de una mezcla de CH_{3}CN y agua.

Los compuestos 202, 310 y 223 se prepararon empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 301.

Ejemplo 6

(Compuestos 306 y 307)

42

a) 3,3-dimetil-1,1-dioxo-2,3-dihidro-1H-1\lambda^{6}-benzo[d]iso-tiazol-5-ol (6a)

Se disolvió sacarina 5a (290 mg, 4,08 mmoles) en xilenos (10 ml) que contenían una pequeña cantidad de carbón activado (50 mg). Se añadieron DMF (2 gotas) y SOCl_{2} recién destilado (0,30 ml, 4,08 mmoles), y la mezcla resultante se calentó a reflujo durante 15 horas. A continuación, se enfrió la solución a temperatura ambiente y se concentró al vacío para dar una pasta. La pasta se disolvió en THF y la solución resultante se añadió a continuación gota a gota a una solución de MeMgCl (1,36 ml de una solución 3,0M en THF, 4,08 mmoles) en THF (7 ml). La solución resultante se agitó a 40ºC durante 24 horas. Después de eliminar el disolvente, se obtuvo el compuesto deseado (124 mg, 40%) mediante cromatografía flash (40 a 60% de EtOAc en hexanos). A una solución de este material (100 mg, 0,44 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (50 ml) a -78ºC se añadió una solución 1,0M de BBr_{3} (2,64 ml, 2,64 mmoles) en CH_{2}Cl_{2}. La mezcla resultante se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. A una cuidadosa interrupción mediante adición de H_{2}O siguió una extracción con EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y sal muera y a continuación se secaron con MgSO_{4}. Después de la cromatografía flash (40 a 60% de EtOAc en hexanos) se obtuvo el compuesto 6a (54 mg, 58%).

b) Compuesto 306

A una solución de sultam 6a (50 mg, 0,24 mmoles), PPh_{3} (123 mg, 0,47 mmoles) y 5,11-dihidro-11-etil-8-(2-hidroxietil)-5-metil-6H-dipirido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona (70 mg, 0,24 mmoles) en THF (2,5 ml), se añadió lentamente DEAD (0,074 ml, 0,470 mmoles). Después de agitar durante tres horas, se eliminó el disolvente al vacío y el producto se purificó mediante cromatografía flash (60 a 80% de EtOAc en hexanos). La liofilización a partir de CH_{3}CN/H_{2}O dio el aducto deseado compuesto 306 (67 mg, 58%) en forma de un sólido de color blanco.

c) Compuesto 307

Una mezcla del compuesto 306 (10 mg, 0,02 mmoles), K_{2}CO_{3} (100 mg, 0,72 mmoles) y MeI (0,10 ml, 1,13 mmoles) en THF (1,0 ml), se agitó vigorosamente durante 96 horas. Después de diluir con EtOAc, la mezcla se lavó con agua y se secó con MgSO_{4}. La cromatografía flash (80% de EtOAc en hexanos) dio el compuesto 307 (9 mg, 89%).

Los compuestos 409 y 311 se prepararon empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 306.

Ejemplo 7

(Compuesto 803)

\vskip1.000000\baselineskip

43

a) N-(3-metoxi-2-metilfenil)-N-metilmetansulfonamida (7b)

Una suspensión de N-(3-metoxi-2-metilfenil)metansulfo-namida 7a (Blondet, D.; Pascal.J-C. Tetrahedron Lett. 1994, 35, 2911)(4,5 g, 20,9 mmoles), K_{2}CO_{3} (4,33 g, 31,4 mmoles) y MeI (6,52 ml, 105 mmoles) en DMF (100 ml) se agitó vigorosamente durante 5 días. La reacción se vertió sobre H_{2}O (250 ml), se agitó durante 10 minutos y a continuación se extrajo con éter. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y sal muera y se secaron con MgSO_{4} para dar el 7b (5,10 g) después de eliminar el disolvente.

b) N-(2-formil-3-metoxifenil)-N-metilmetansulfonamida (7c)

Una solución de 7b (1,0 g, 4,37 mmoles) en CH_{3}CN (15 ml) se añadió a una solución de K_{2}S_{2}O_{8} (2,35 g, 8,73 mmoles) y CuSO_{4} (219 mg, 0,87 mmoles) en H_{2}O (15 ml). Se añadió piridina (0,71 ml, 8,73 mmoles) y la mezcla resultante se agitó vigorosamente a reflujo durante dos horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la suspensión se filtró. El filtrado se extrajo con EtOAc y los extractos se lavaron con NaOH 1,0N, HCl 1,0N, agua y sal muera, y a continuación se secaron con MgSO_{4}. Se obtuvo un jarabe (731 mg) después de eliminar el disolvente. Este jarabe (731 mg) se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (15 ml) que contenía agua (dos gotas). Se añadió periodinane Dess-Martin (1,69 g, 3,83 mmoles), y la solución resultante se agitó durante 90 minutos. Se añadió una mezcla a partes iguales de una solución al 10% de Na_{2}S_{2}O_{3} y una solución saturada de NaHCO_{3}, y la mezcla de dos fases resultante, se agitó hasta que ambas capas se volvieron transparentes.

La mezcla se extrajo con EtOAc y los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHCO_{3}, agua y sal muera y a continuación se secó con MgSO_{4}. Después de eliminar el disolvente, se obtuvo el compuesto 7c (432 mg, 56%) mediante cromatografía flash (40 a 70% de EtOAc en hexanos).

c) 1-metil-2,2-dioxo-1,2-dihidro-2\lambda^{6}-benzo[c][1,2]tiazin-5-ol (7f)

Una solución de aldehido 7c (400 mg, 1,65 mmoles) en THF (200 ml) se trató con NaHMDS (2,88 ml de una solución 1,0M en THF, 2,88 mmoles) a 0ºC durante 10 minutos. La solución resultante se agitó durante una hora a dicha temperatura. La reacción se interrumpió mediante adición de NH_{4}Cl saturado y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua y sal muera y a continuación se secaron con MgSO_{4}. La purificación con cromatografía flash (40-60% de EtOAc en hexanos) dio el 7d (172 mg, 43%). A una solución de dicho material (120 mg, 0,49 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (15 ml) se añadió BBr_{3} (3,95 ml de una solución 1,0M en CH_{2}Cl_{2}, 3,95 mmoles) a 0ºC. El baño frío se apartó a continuación y la solución resultante se agitó durante 16 horas a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió cuidadosamente mediante adición de H_{2}O y se extrajo con EtOAc. Los extractos combinados se lavaron con agua y sal muera y a continuación se secaron con MgSO_{4}. Se obtuvo el compuesto 7f (76 mg, 73%) después de la cromatografía flash (30 a 100% de EtOAc en hexanos).

Alternativamente el KOtBu (1,92 g., 17,1 mmoles) se añadió en dos porciones a una solución de aldehido 7c (3,80 g, 15,6 mmoles) en THF (300 ml) durante 10 minutos. La reacción se mantuvo en agitación durante 10 minutos a temperatura ambiente y a continuación se interrumpió mediante la adición de H_{2}O. La extracción con CH_{2}Cl_{2} fue seguida de un lavado con agua y sal muera. Después de secar con MgSO_{4}, se filtró la solución y el producto se separó del disolvente. La purificación mediante cromatografía flash (70 a 80% de EtOAc en hexanos) dio el 7e (2,97 g, 85%). Este compuesto se convirtió en el 7f empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el 7d.

d) Compuesto 803

A una solución de sultam 7f (49 mg, 0,23 mmoles)). PPh_{3} (122 mg, 0,46 mmoles) y 5,11-dihidro-11-etil-8-(2-hidroxietil)-5-metil-6H-dipirido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona (70 mg, 0,23 mmoles) en THF (3,0 ml) se añadió lentamente DEAD (73 \mul, 0,46 mmoles) a 0ºC. La solución resultante se dejó en reposo durante 15 minutos a 0ºC y durante 30 minutos a temperatura ambiente. La cromatografía flash (60 a 100% de EtOAc en hexanos) dio el compuesto 803 (24 mg, 17%).

El compuesto 804 se preparó empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 803.

Ejemplo 8

(Compuesto 113)

44

a) Una mezcla de bromuro 8a (Cywin, C.L.; Klunder, J.M.; Hoermann, M.; Brickwood, J.R; David, E.; Grob, P.M.; Schwartz, R.; Pauletti, D.; Barringer, K.J.; Shih, C.-K.; Sorge, P.M.; Erickson, D.A.; Joseph, D.P.; Hattox, S.E. J. Med. Chem, 1998, 41, 2972) (3,5 g 10 mmoles), aliltributil-estaño (3,72 ml, 12 mmoles) y Pd(PPh_{3})_{4} (1,16 g 1 mmoles) en DMF (30 ml) se agitó a 80ºC durante 2,5 horas. Se eliminó el DMF al vacío y el residuo se sometió a cromatografía flash (20% de EtOAc en hexanos) para dar el 8b (2,32 g, 75%).

b) Se disolvió alil aducto 8b (2,32 g, 7,52 mmoles), en una mezcla a partes iguales de CH_{2}Cl_{2} y metanol (200 ml) y la solución resultante se enfrió a -78ºC. Se borboteó ozono por la solución durante 30 minutos, oxígeno durante 10 minutos y nitrógeno durante 15 minutos. A continuación se añadió NaBH_{4} (567 mg, 15 mmoles) a -78ºC y la solución resultante se agitó a dicha temperatura durante 15 minutos y a temperatura ambiente durante 3 horas. A continuación se añadió una solución saturada de NH_{4}Cl (100 ml) y se continuó la agitación por breve tiempo. Los disolventes orgánicos se eliminaron a presión reducida y el residuo se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua y sal muera y a continuación se secaron con MgSO_{4}. La purificación mediante cromatografía flash (80% de EtOAc en hexanos), dio el alcohol deseado (1,90 g, 81%).

d) A una solución de 8c (100 mg, 0,32 mmoles), PPh_{3} (1,26 mg, 0,48 mmoles) y fenol 1d (123 mg, 0,48 mmoles) en THF (1 ml) se añadió DIAD (94 \mul, 0,48 mmoles) durante un período de una hora. Después de dos horas más de agitación, se eliminó el disolvente y el residuo se sometió a cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) para dar el aducto 8d (162 mg, 92%).

e) Compuesto 113

Se disolvió carbamato 8d (162 mg, 0,29 mmoles) en una mezcla 3:1 de THF y EtOH a la cual se añadió NH_{4}OH (1.5 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 horas y a continuación se concentró. El residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con HCl 1N. El tratamiento con MgSO_{4} fue seguido por cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) obteniéndose el compuesto 113 (125 mg, 90%).

Ejemplo 9

(Compuesto 114)

Este compuesto se preparó a partir del compuesto 113, empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 303.

Ejemplo 10

(Compuesto 115)

Este compuesto se preparó a partir del compuesto 113, empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 111 empleando EtI en lugar de MeI.

Ejemplo 11

(Compuesto 601)

A una solución de 5,11-dihidro-11-etil-8-(2-hidroxietil)-5-metil-6H-dipirido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona (30 mg, 0,10 mmoles), 1-bencil-2,2-dioxo-1,2,3,4-tetrahidro-2\lambda^{6}-benzo[c][1,2]tiazin-5-ol (Blondet, D.; Pascal, J.-C. Tetrahedron Lett. 1994, 35, 2911)(38 mg, 0,13 mmoles) y PPh_{3} (39 mg, 0,15 mmoles) en THF (2 ml), se añadió lentamente DEAD (0,03 ml, 0,15 mmoles). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas a cuyo término se consideró que la reacción era completa mediante análisis TLC. La evaporación del disolvente seguida de cromatografía flash dio el deseado aducto (29,9 mg, 41%). Este compuesto se disolvió en EtOAc (1 ml) y EtOH (1 ml). Se añadió Pd(OH)_{2}y la suspensión resultante se agitó en atmósfera de hidrógeno durante 5 días. El catalizador se separó mediante filtración a través de microfibra de vidrio y el filtrado se concentró al vacío. La cromatografía flash (50% de EtOAc en hexanos) seguida de una TLC preparativa (60% de EtOAc en hexanos, elución 2X) dio el compuesto 601 (9,6 mg, 38%) el cual se liofilizó a partir de CH_{3}CN y agua.

El compuesto 602 se preparó empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 601.

El compuesto 223 se preparó empleando un procedimiento similar al descrito más arriba para el compuesto 301.

\newpage

Ejemplo 12

(Compuestos 505 y 508)

45

a) 2-bencil-5-hidroxi-1,1-dioxo-1,2-dihidro-1\lambda^{6}-benzo[d]isotiazol-3-ona

(12a): Una suspensión de sacarina 5a (290 mg, 1,36 mmoles)) en CH_{2}Cl_{2} (25 ml) se enfrió a -78ºC y se añadió una solución 1,0M de BBr_{3} en CH_{2}Cl_{2} (8,17 ml, 8,17 mmoles).Se retiró el baño frío y la reacción se dejó en reposo durante 16 horas durante cuyo tiempo la reacción se calentó a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió cuidadosamente con H_{2}O y se extrajo tres veces con EtOAc. Los extractos combinados se secaron con MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron para dar un sólido de color blanco (273 mg, 100%). Este material (500 mg, 2,51 mmoles) se disolvió en 10:3 THF:DMF (13 ml) y se añadió NaH (63 mg, 2,63 mmoles). La mezcla resultante se agitó durante 15 minutos transcurridos los cuales, se añadió bromuro de bencilo (0,30 ml, 2,51 mmoles) y la mezcla resultante se agitó además durante 16 horas. La solución se vertió cuidadosamente en HCl 1,0N y se extrajo con Et_{2}O. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua y sal muera y se secaron con MgSO_{4}. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía flash (30 a 50% de EtOAc en hexanos) para dar el deseado 12a (140 mg, 20%).

(b) Se disolvieron fenol 12a (100 mg, 0,35 mmoles), PPh_{3} (182 mg, 0,69 mmoles) y 5,11-dihidro-11-etil-8-(2-hidroxietil)-5-metil-6H-dipirido[3,2-b:2',3'-e][1,4]diazepin-6-ona (103 mg, 0,35 mmoles), en THF (5,0 ml). A esta solución se añadió DEAD (110 \mul, 0,69 mmoles) gota a gota durante 15 minutos. La solución resultante se mantuvo en reposo durante tres horas. El disolvente se eliminó al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía flash (70 a 100% de EtOAc en hexanos) para dar el aducto 12b (154 mg, 78%).

c) Compuesto 505

Se disolvió bencil sacarina 12b (50 mg, 0,09 mmoles) en 2:1 THF:EtOH (3,0 ml) que contenía paladio al 10% sobre carbón (35 mg) y la mezcla resultante se agitó en atmósfera de hidrógeno durante 16 horas. La suspensión se filtró, y el filtrado se concentró. El sólido así obtenido se purificó mediante trituración con EtOAc para dar el producto compuesto 505 (9 mg, 21%).

d) Compuesto 508

A una suspensión del compuesto 505 (20 mg, 0,042 mmoles) en THF (5,0 ml) se añadió una solución 0,8M de CH_{2}N_{2} en Et_{2}O (1,5 ml). La solución se agitó a continuación durante una hora durante cuyo tiempo tuvo lugar la disolución. Después de eliminar el disolvente, el compuesto se purificó mediante cromatografía flash (50 al 70% de EtOAc en hexanos) y el residuo así obtenido se liofilizó a partir de CH_{3}CN/H_{2}O para dar el compuesto 508 (14,4 mg, 70%).

Ensayos de transcriptasa inversa (RT) Teoría del ensayo

Entre las enzimas que codifica el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1) está la transcriptasa inversa (1), así llamada porque transcribe una copia de ADN a partir de un molde de ARN. Esta actividad puede ser medida cuantitativamente en un ensayo enzimático exento de células, el cual ya ha sido anteriormente descrito (2) y se basa en la observación de que la transcriptasa inversa es capaz de usar un molde sintético poli r(C) cebado con oligo d(G) para transcribir una cadena de ADN marcado radiactivamente, precipitable con ácidos, utilizando ^{3}H-dGTP como un substrato. El ensayo descrito más adelante utiliza la enzima tipo salvaje (WT) la cual es la forma predominante de la enzima observada en pacientes infectados con el HIV-1. La utilización de enzimas RT mutantes (por ejemplo, la Y181C, preparadas mediante mutagénesis dirigida al sitio, en la cual el radical tirosina del codon 181 ha sido reemplazada mediante un radical cisteína, o los mutantes K103N, V106A y Y188C) y condiciones de ensayo análogas, permite que los compuestos sean evaluados en cuanto a su efectividad en inhibir las enzimas mutantes.

Materiales Preparación de la enzima

El clon de expresión de la RT del HIV-1, pKRT2, se obtuvo de la Universidad de Yale (3). Se empleó un cultivo durante la noche, crecido en medio 2xYT (37ºC, 225 rpm) (4) suplementado con 100 \mug/ml de ampicilina para la selección positiva, para inocular el medio 2xYT. El cultivo se incubó (37ºC, 225 rpm) hasta que alcanzó una OD600 de 0,6 a 0,9. En este momento, el inhibidor represor IPTG (isopropil \beta-D-tiogalactopiranosido) se añadió a 0,5 mM, y la mezcla de incubó durante 2 horas más.

Purificación de la enzima

La purificación de la transcriptasa inversa recombinante se realizó empleando una combinación de métodos anteriormente descritos (5). Este procedimiento se resume brevemente como sigue: Se suspendieron E. coli conteniendo RT-1 wt ó RT-1 (Y181C), en 50 mM de MES, pH 6,0, conteniendo 10% de glicerina, se lisaron en una prensa French, se centrifugaron, y se descartó el sobrenadante. Las bolitas del sedimento del lisado se extrajeron con un tampón A (50 mM de MES, pH 6,0, 100 mM de KCl, 50 mM de KPi, 10% de glicerina, 0,02% de hexil-\beta-glucósido), y se recentrifugó; el ácido nucleico del sobrenadante se precipitó con 0,1% de polietilenimina. Los extractos clarificados se cromatografiaron sobre hidroxil-apatita (BioRad BioGel HT) empleando un gradiente de 0-0,25M KPi en tampón A. Las fracciones que contenían la RT se reunieron, se diluyeron con un volumen igual de tampón B (50 mM bis-tris propano, pH 7,0, 100 mM de (NH_{4})_{2}SO_{4}, 10% de glicerina) y se cargaron sobre una columna de heparina-sefarosa CL-6B (Pharmacia). La RT fijada se eluyó con un gradiente de 0 a 1,0M de (NH_{4})_{2}SO_{4} en tampón B. Se concentraron las fracciones de heparina sefarosa que contenían RT (membrana Amicon YM-30), se combinaron con volúmenes iguales de (NH_{4})_{2}SO_{4} 2,0M en tampón B, y se inyectaron sobre una columna de HPLC, 150 mm TSK Phenyl-5PW HIC, 21,5 veces (Phenomenex). La RT heterodimérica se eluyó empleando un gradiente decreciente de (NH_{4})_{2}SO_{4} de 1,0M a OM, en tampón B, se concentró, y se almacenó a 4ºC.

Los productos se purificaron hasta un 98% mediante SDS-PAGE y presentaron actividades específicas casi equivalentes, de aproximadamente 20 nmoles de dGTP/mg/minuto a 25ºC.

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

(Tabla pasa a página siguiente)

\newpage

Composición del stock y mezcla de reacción

46

Procedimiento de ensayo

La mezcla de reacción concentrada 2,4x en stock, se dividió en partes alícuotas y se almacenó a -20ºC. La mezcla es estable y puede descongelarse para ser empleada en cada ensayo. Este ensayo enzimático ha sido adaptado a un sistema de placa de microtitulación de 96 pocillos, y ha sido descrito anteriormente (6). Se añadieron, tampón tris (50 mM, pH 7,8), vehículo (disolvente diluido para igualar la dilución del compuesto), o compuestos en el vehículo, a los 96 pocillos de las placas de microtitulación (10 \mul/pocillo; 3 pocillos/compuesto). Se descongeló la enzima HIV-1 RT, se diluyó en Tris 50 mM de pH 7,8 conteniendo 0,05% de Chaps para dar una enzima 1,5 nM y se añadieron 25 \mul por pocillo. Se añadieron diez \mul de EDTA 0,5M a los tres primeros pocillos de la placa de microtitulación. EDTA forma un quelato con el Mg^{2+} presente e impide la transcripción inversa. Este grupo sirve como polimerización de base, la cual se restó de todos los otros grupos. Se añadieron veinticinco \mul de la mezcla de reacción 2,4x a todos los pocillos y el ensayo se incubó a temperatura ambiente durante 30 minutos. El ensayo terminó precipitando el ADN de cada pocillo con 60 \mul de pirofosfato de sodio (p/v 2%) en ácido tricloroacético (TCA) al 10% (p/v 10%). La placa de microtitulación se incubó durante 15 minutos a 4ºC y el precipitado se recogió sobre papel de fibra de vidrio #30 (Scleicher & Schoell) empleando un recogedor Tomtech de 96 pocillos. Los filtros se secaron, se colocaron en bolsitas de plástico con un cóctel de centelleo Betaplate (Pharmacia/LKB) y se contaron en el contador Betaplate (Pharmacia/LKB).

El cálculo del tanto por ciento de inhibición es como sigue:

% de inhibición = \frac{[\text{valor medio del ensayo CPM -valor de control medio de CPM}]}{[\text{valor de control medio de CPM}]} x 100

Empleando el ensayo anterior, se ensayaron los compuestos de la invención para determinar la inhibición de la RT tipo salvaje (WT), y de las enzimas mutantes. Los resultados están resumidos en la tabla 9 como IC_{50} (nM).

Se empleó un ensayo similar, en el cual el cebador oligo d(G) está biotinado. Después de la incubación con la enzima, se recogió el ADN biotinado empleando perlas de estreptavidina SPA. Las perlas fueron contadas para determinar la radiactividad como se ha detallado más arriba.

Con el fin de confirmar que los compuestos que son activos en el ensayo de la RT, tienen también la capacidad de inhibir la replicación del HIV en un sistema vivo, los compuestos de acuerdo con la invención fueron también ensayados en el ensayo de cultivo de células T (Syncytia) humanas descrito más adelante.

Ensayo ELISA para valorar la actividad en cultivos celulares

Los compuestos de la invención se ensayaron para determinar su capacidad de inhibir la replicación del HIV en cultivos celulares. Se emplearon los virus que codifican el tipo salvaje y las enzimas mutantes. Se infectaron linfocitos T con el virus, las células infectadas se incubaron en presencia de cantidades variables de compuestos de la invención, y se empleó un ensayo ELISA para la proteína vírica p24 para cuantificar la replicación vírica. La tabla 9 resume los resultados como EC_{50} (nM).

Referencias

1.: Benn, S. et al. Science 230:949, 1985.

2.: Farmerie, W. G. et al. Science 236:305, 1987.

3.: D'Aquila, R. T. and Summers, W. C. J. Acq. Imm. def. Syn. 2:579, 1989.

4.: Maniatis, T, Fritsch, E. F., and J. Sambrook, Eds. Molecular Cloning: A Laboratory manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1982.

5.: a) Warren, T. C. et al. Protein Expression & Purification 3:479, 1992; b) Kohlstaedt, L. A. Science 256(5065): 1783, 1992.

6.: Spira, T. et al. J. Clinical Microbiology, 25:97,198.

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

(Tabla pasa a página siguiente)

47

48

49

50

51

TABLA 2

52

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 3

53

TABLA 4

54

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 5

540

\vskip1.000000\baselineskip

55

TABLA 6

56

58

60

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 7

61

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 8

62

TABLA 9

63

64

65

66

En la tabla 9 de más arriba, se aplicaron los siguientes márgenes: A = > 1 \muM; B = < 1 \muM > 100 nM; C = < 100 nm. Los guiones de la tabla 9 significan que no están determinados.

Claims

1. Un compuesto de fórmula I:

67

en donde

A es una cadena de conexión de alquilo de 1 a 3 átomos de carbono;

B es O ó S;

R^{1} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halo, CF_{3} ó OR^{1a} en donde R^{1a} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

R^{2} es H ó Me;

R^{3} es H ó Me;

R^{4} se selecciona del grupo formado por: H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono;

W se selecciona de

68

en donde

a) un Y es SO_{2} y el otro Y es NR^{5}, con la condición de que ambos no sean los mismos, en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono,

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

(iii): NR^{5a}R^{5b}, en donde R^{5a} y R^{5b} son ambos H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vii): CONR^{5g}R^{5h}, en donde R^{5g} y R^{5h} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó R^{5g} es H y R^{5h} es cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono, estando dicho alquilo y dicho cicloalquilo opcionalmente substituidos con COOR^{5i}, en donde R^{5i} se selecciona del grupo formado por:

: H y alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: ó CONHNH_{2}; ó OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó arilo de 6 a 10 átomos de carbono; ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono ó disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: ó R^{5h} es NR^{5j}R^{5k}, en donde cuando R^{5j} y R^{5k} son ambos H; ó R^{5j} es H y R^{5k} es CH_{2}CF_{3};

(viii): COR^{51} en donde R^{51} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(x): SO_{3}H,

ó R^{5} es COR^{5n} en donde R^{5n} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} es H, OH, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

COCH_{2}NR^{5r}R^{5s} en donde R^{5r} y R^{5s} son H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

y cada R^{8} es, independientemente entre sí, H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono ó alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono; o

a): E es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8}a y R^{8b} son H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono ó alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono; y J es CH_{2}; ó J es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son como se ha definido más arriba y E es CH_{2}, en donde la línea de puntos representa un enlace simple; o

b): E es C(O) y J es CR^{8a}R^{8b} en donde ^{8a}a y R^{8b} son como se ha descrito aquí; ó J es C(O) y E es CR^{8a}R^{8b} en donde R^{8a} y R^{8b} son como ya se ha descrito, y en donde la línea de puntos representa un enlace simple; o

c): tanto E como J son CR^{8} en donde R^{8} es como ya se ha descrito, en donde la línea de puntos representa un doble enlace;

o una sal de los mismos.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el cual R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono y cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono,

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

(iii): NR^{5a}R^{5b}, en donde R^{5a} y R^{5b} son ambos H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iv): OR^{5c} en donde R^{5c} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vii): CONR^{5g}R^{5h}, en donde R^{5g} y R^{5h} es H; ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó R^{5g} es H y R^{5h} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono ó disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: ó R^{5} es COR^{5n} en donde R^{5n} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

: CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} es H, OH, alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, N, y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

: COCH_{2}NR^{5r}R^{5s} en donde R^{5r} y R^{5s} son H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono, arilo de 6 a 10 átomos de carbono, ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente mono o disubstituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

69

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} y W son como se ha definido en la reivindicación 1.

4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en donde R^{1} es H, Me ó F.

5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en donde R^{2} es H.

6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en donde R^{3} es CH_{3}.

7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 3, en donde R^{4} es Et ó ciclopropilo.

8. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde W es

70

en donde E, J, Y y R^{8} son como se ha definido en la reivindicación 1.

9. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por: H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

(vii): CONR^{5g}R^{5h}, en donde R^{5g} y R^{5h} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó R^{5g} es H y R^{5h} es cicloalquilo de 3 a 7 átomos de carbono,

: estando dicho alquilo y dicho cicloalquilo opcionalmente substituidos con COOR^{5i} en donde R^{5i} se selecciona del grupo formado por:

: H y alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó CONHNH_{2};

: ó R^{5h} es NH_{2} ó NHCH_{2}CF_{3};

(x): SO_{3}H;

COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} son H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono.

10. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R^{5} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

(iii): NR^{5a}R^{5b}, en donde R^{5a} y R^{5b} son H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iv): OH;

(viii): COR^{5i} en donde R^{5i} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

CONR^{5p}R^{5q} en donde R^{5p} y R^{5q} son alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono.

11. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 10, en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por: H y alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con COOH.

12. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en donde cada R^{8} es, independientemente entre sí, H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono.

13. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 12, en donde cada R^{8} es H ó CH_{3}.

14. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, en donde W es:

71

en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(i): cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono;

ó R^{5} es COOR^{5o} en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

15. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 14, en donde R^{5f} es H.

16. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 14, en donde R^{5o} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

17. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 14, en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por H, CH_{3}, CH_{3}CH_{2},

72

18. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 17, en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por H, CH_{3}, CH_{3}CH_{2},

\vskip1.000000\baselineskip

73

\newpage

19. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 8, en donde W es:

74

en donde R^{5} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, y cada R^{8} es H ó CH_{3}.

20. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 8, en donde W es:

75

en donde cada R^{8} es H ó CH_{3}.

21. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 8, en donde W es:

76

22. Un compuesto, de acuerdo con la reivindicación 8, en donde W es:

77

en donde R^{5} está seleccionado del grupo formado por: H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, estando dicho alquilo opcionalmente substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(ii): heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(iv): OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono;

(vi): COOR^{5f} en donde R^{5f} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; ó

(vii): CONH_{2}; y

(viii): COR^{5l} en donde R^{5l} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ó heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dicho heterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

ó R^{5} es COR^{5n} en donde R^{5n} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o heterociclo de 5 ó 6 miembros con 1 a 4 heteroátomos seleccionados entre O, N y S, estando dichoheterociclo opcionalmente substituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono: y

CONR^{5p}R^{5q}, en donde R^{5p} y R^{5q} son H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono.

23. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por:

78

24. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por:

79

25. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en donde R^{5a} y R^{5b} son ambos alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

26. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en donde R^{5f} es H ó metilo.

27. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en donde R^{5l} es

80

28. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en donde R^{5p} y R^{5q} son ambos alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

29. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 22, en donde cuando R^{5p} es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, entonces R^{5q} es OH ó alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono.

30. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 29, en donde R^{5p} es metilo y R^{5q} es alcoxilo de 1 a 6 átomos de carbono.

31. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, en donde W es:

81

en donde R^{5} es H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, en donde dicho alquilo está substituido con un substituyente seleccionado del grupo formado por:

(iv): COOR^{5f} en donde R^{5f} es H ó alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; y

(vii): CONHNH_{2}.

32. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 31, en el cual R^{5} es (CH_{2})_{3}COOH y (CH_{2})_{3}CONHNH_{2}.

33. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, en donde W es:

82

en donde R^{5} se selecciona del grupo formado por H, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono y (CH_{2})_{3}COOH.

34. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 33, en donde R^{5} es H ó CH_{3}.

35. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

83

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} y R^{5} son como se ha definido en la reivindicación 1.

36. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

84

37. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

85

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5} y R^{8} son como se ha definido en la reivindicación 1.

38. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

86

39. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

87

40. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

88

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{8a}, R^{8b} y A son como se definen a continuación:

89

90

91

41. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

92

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{8a} y R^{8b} son como se definen a continuación:

93

42. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

94

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{8a} y R^{8b} son como se definen a continuación:

95

43. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

96

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{8a}, R^{8b} y A son como se definen a continuación:

97

44. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

98

en donde R^{5} se define como sigue:

99

45. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

100

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{5} son como se define a continuación:

101

102

103

46. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

104

en donde R^{5} es como se define a continuación:

105

47. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, que tiene la siguiente fórmula:

106

en donde R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} y R^{5} son como se definen a continuación:

107

48. Empleo de un compuesto de fórmula I, como se reivindica en la reivindicación 1, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento o prevención de la infección por HIV.

49. Una composición farmacéutica para el tratamiento o prevención de la infección por HIV, que comprende un compuesto de fórmula I, como se ha reivindicado en la reivindicación 1, ó una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un soporte farmacéuticamente aceptable.

50. Empleo de un compuesto de fórmula I, como se ha reivindicado en la reivindicación 1, para la elaboración de un medicamento para el tratamiento o prevención de la infección por HIV en combinación con un fármaco antiretroviral.

51. Empleo de un compuesto de fórmula I, como se ha reivindicado en la reivindicación 1, para la elaboración de un medicamento para la prevención de la transmisión perinatal del HIV-1 de la madre al bebé, mediante la administración de dicho compuesto a la madre antes de dar a luz.

52. Un procedimiento para la producción de un compuesto de fórmula I:

109

en donde A, R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} y W son como se ha descrito en la reivindicación 1,

el cual comprende:

a) la eliminación, en una mezcla de una base acuosa o un ácido acuoso en un codisolvente, del grupo protector (PG) de:

110

111

112

en donde un Y es SO_{2} y el otro Y es N-PG, en donde PG es un grupo protector del nitrógeno, eliminable en condiciones suavemente ácidas, alcalinas o reductoras,

para la obtención de compuestos de fórmula I, en donde E, J y R^{8} son como se ha definido en la reivindicación 1.

53. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 52, para la producción de un compuesto de fórmula I, el cual comprende:

a) la alcalinización del producto de a).

54. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 53, para la producción de un compuesto de fórmula I, el cual comprende:

b) la adición de R^{5}-X al producto a partir del paso b) en donde R^{5} es como se ha descrito en la reivindicación 1 y X es un grupo lábil.

55. Un procedimiento para la producción de un compuesto de fórmula I:

113

el cual comprende:

a) la copulación de un compuesto de fórmula 2

114

en donde A, R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se ha descrito en la reivindicación 1,

con un sultam o una sacarina seleccionados de

115

116

en donde PG es un grupo protector de nitrógeno eliminable en condiciones débilmente ácidas, alcalinas o reductoras; y R^{5} y R^{8} son como se ha descrito en la reivindicación 1,

para producir compuestos de fórmula I.

56. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 55, para la producción de un compuesto de fórmula I,

el cual comprende:

b) la alcalinización del producto de a).