ES2243037T3

ES2243037T3 - Inhibidores de la pde 5 de gmpc pirazolopirimidinona para el tratamiento de la disfuncion sexual.

Info

Publication number: ES2243037T3
Application number: ES99308158T
Authority: ES
Inventors: Mark Edward Pfizer Central Research Bunnage; Stephen Derek Albert Pfizer Central Res. Street; John Paul Pfizer Central Research Mathias; Anthony Pfizer Central Research Wood
Original assignee: PFIZER; Pfizer Inc
Current assignee: PFIZER; Pfizer Inc
Priority date: 1998-10-23
Filing date: 1999-10-15
Publication date: 2005-11-16
Anticipated expiration: 2019-10-15
Also published as: BR9905109A; EP0995751A2; ATE298753T1; DE69925970T2; JP3670908B2; JP2000128884A; EP0995751A3; US6407114B1; GB9823103D0; CA2287562A1; EP0995751B1; DE69925970D1

Abstract

Se proporcionan compuestos de fórmula IA y IB, en las que R{sup,1}, R{sup,2}, R{sup,3}, R{sup,4} y A tienen los significados dados en la memoria, que son útiles en el tratamiento curativo y profiláctico de una afección médica para la que se desea la inhibición de una guanosina cíclica 3'',5''-monofosfato fosfodiesterasa (por ejemplo GMPc PDE5).

Description

Inhibidores de la PDE 5 de GMPc pirazolopirimidinona para el tratamiento de la disfunción sexual.

Campo de la invención

Esta invención se refiere a compuestos útiles farmacéuticamente, en particular compuestos que son útiles en la inhibición de las fosfodiesterasas de guanosin 3',5'-monofosfato cíclico (PDEs de GMPc), tales como la fosfodiesterasa de tipo 5 de guanosin 3',5'-monofosfato cíclico (PDE 5 de GMPc). Los compuestos por tanto tienen utilidad en una variedad de áreas terapéuticas, incluyendo la disfunción eréctil masculina (DEM).

Técnica anterior

La solicitud de patente internacional WO 93/07149 desvela ciertos compuestos pirazolo[3,4-d]pirimidinona como agentes anti-anginales. La solicitud de patente internacional WO 96/16657 desvela el uso de estos compuestos (entre otros) en el tratamiento de la MED. La solicitud de patente internacional WO 94/28902 desvela el uso de ciertos compuestos pirazolopirimidinona en el tratamiento de la impotencia. Un procedimiento para la preparación de tales compuestos se desvela en el documento EP 0 812 845. Las solicitudes de patente internacional WO 98/49166 y WO 99/54333, publicadas el 5 de noviembre de 1998 y el 28 de octubre de 1999, respectivamente, desvelan el uso de ciertos compuestos pirazolo[3,4-d]pirimidinona en el tratamiento de la impotencia. Las de solicitudes de patente números EP 0 636 626, WO 96/28448, WO 96/28429, y JP 08253484, así como los artículos de revista J. Med. Chem. 19, 1635 (1996) y Bioorg. Med. Chem. Lett. 6, 1819 (1996), desvelan compuestos pirazolo[3,4-d]pirimidinona que actúan como inhibidores de las PDEs de GMPc. Los compuestos purinona que inhiben las PDEs de GMPc se desvelan en el documento WO 94/00453.

Descripción de la invención

Según la invención se proporciona compuestos de fórmulas IA y IB:

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en las que:

R^{1} representa alquilo C_{2-5} lineal o cíclico, Het o Hetalquilo C_{1-3}, en los que en los dos últimos casos, Het representa un anillo aromático de seis miembros que contiene uno o dos átomos de nitrógeno;

R^{2} representa un alquilo C_{1-4} cíclico, acíclico o cíclico en parte, lineal o ramificado (cuyo grupo alquilo está opcionalmente terminado en OH), Hetalquilo C_{1-3} (en el cual Het representa un grupo heterocíclico de seis miembros que contiene uno o dos átomos de nitrógeno), arilalquilo C_{1-3} (cuyo grupo alquilo está opcionalmente interrumpido por un átomo de O), arilo o Het (en el cual Het representa un grupo heterocíclico de seis miembros que contiene uno o dos átomos de nitrógeno);

R^{3} representa un alquilo C_{1-6} lineal o ramificado, opcionalmente terminado en OH u O-metilo;

R^{4} representa SO_{2}NR^{12}R^{13};

R^{12} y R^{13}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, representan 4-R^{14}-piperacinilo, en la cual R^{14} representa alquilo C_{1-6}, opcionalmente terminado en OH; y

R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, R^{9}, R^{10a}, R^{10b}, R^{11a} y R^{11b} representan independientemente H o alquilo C_{1-6}; y

el término "arilo" significa un grupo aromático carbocíclico de seis a diez miembros, el cual está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados entre arilo, alquilo C_{1-6}, Het, halo, ciano, nitro, OR^{5}, C(O)R^{6}, C(O)OR^{7}, C(O)NR^{8}R^{9}, NR^{10a}R^{10b}, SO_{2}NR^{11a}R^{11b} y N(H)SO_{2}R^{11a};

o una de sus sales o solvatos farmacéutica, o veterinariamente, aceptables.

Los grupos "Het" pueden estar en forma de un N-óxido.

Para evitar dudas, el átomo de nitrógeno al cual están unidos R^{12} y R^{13} es el átomo de nitrógeno que debe estar presente en el grupo piperacinilo pertinente.

Los grupos alquilo que pueden representar R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, R^{9}, R^{10a}, R^{10b}, R^{11a}, R^{11b} y R^{14} pueden, cuando hay un número suficiente de átomos de carbono, ser lineales o ramificados, ser saturados o insaturados, ser acíclicos o cíclicos/acíclicos en parte, estar interrumpidos por oxígeno y/o estar sustituidos por uno o más átomos de halógeno.

Los grupos alquilo de Hetalquilo y arilalquilo pueden, cuando hay un número suficiente de átomos de carbono, ser lineales o ramificados, ser saturados o insaturados, y/o estar interrumpidos por oxígeno. Cuando se usan en este contexto, los términos "Het" y "arilo" son como se ha definido anteriormente.

Los grupos halo con los que pueden estar sustituidos o terminados los grupos arilo y alquilo anteriormente mencionados incluyen flúor, cloro, bromo y yodo.

Los derivados farmacéutica, y veterinariamente, aceptables incluyen sales y solvatos. Las sales que se pueden mencionar incluyen: sales de adición ácida, por ejemplo, sales formadas con ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico y fosfórico, con ácidos carboxílicos o con ácidos organo-sulfónicos; sales de adición básica; sales metálicas formadas con bases, por ejemplo, sales de sodio y potasio. Los derivados farmacéuticamente aceptables también incluyen sales de alquilamonio C_{1} a C_{4}.

Compuestos preferidos adicionales de la invención incluyen aquellos en los que R^{1} representa un alquilo C_{2-5} lineal o cíclico y R^{2} representa alquilo C_{1-4}, Het, Hetalquilo C_{1-3}, arilo o arilalquilo C_{1-3}.

Los compuestos preferidos de la invención incluyen aquellos en los que:

R^{3} representa un alquilo C_{1-4} lineal o ramificado, opcionalmente terminado en OH u -O-metilo.

Compuestos particularmente preferidos de la invención incluyen aquellos en los que:

R^{1} representa etilo, n-propilo o ciclopentilo, -CH_{2}-Het (en la que Het representa piridin-2-ilo) o pirimidin-2-ilo;

R^{2} representa metilo, hidroximetileno, etilo, propilo o ciclopropilmetilo, -CH_{2}-Het (en la que Het es piridin-2-ilo, pirimidin-2-ilo, morfolinilo o piracin-2-ilo), bencilo, -CH_{2}OCH_{2}-fenilo, fenilo o piracin-2-ilo;

R^{3} representa un alquilo C_{2-3} lineal o ramificado, opcionalmente terminado en OCH_{3};

R^{12} y R^{13}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, representan 4-R^{14}-piperacinilo, en la cual R^{14} representa alquilo C_{1-3} opcionalmente terminado en OH.

Los compuestos más preferidos de la invención incluyen los compuestos de los Ejemplos 18 a 25 descritos más adelante.

Los compuestos de la invención pueden presentar tautomerismo. Todas las formas tautoméricas de los compuestos de fórmulas IA y IB, y sus mezclas, están incluidos dentro del alcance de la invención.

Los compuestos de la invención también pueden contener uno o más átomos de carbono asimétricos y por tanto pueden presentar isomerismo óptico y/o diasteroisomerismo. Los diasteroisómeros se pueden separar usando técnicas convencionales, por ejemplo, por cristalización fraccionada o cromatografía. Los diversos esteroisómeros se pueden aislar por separación de una mezcla racémica u otra mezcla de los compuestos usando técnicas convencionales, por ejemplo, cristalización fraccionada o HPLC. Los isómeros ópticos deseados se pueden preparar mediante la reacción de los materiales de partida ópticamente activos apropiados bajo las condiciones que no provocarán la racemización o epimerización. Alternativamente, los isómeros ópticos deseados se pueden preparar por resolución, cualquiera de los dos por HPLC del racemato usando un soporte quiral adecuado o, cuando sea apropiado, por cristalización fraccionada de las sales diasteroisoméricas formadas mediante la reacción del racemato con un ácido o base ópticamente activo adecuado. Todos los esteroisómeros están incluidos dentro del alcance de la invención.

Los derivados radiomarcados de los compuestos de fórmulas IA y IB que son adecuados para estudios biológicos también están incluidos dentro del alcance de la invención.

Preparación

Según un aspecto adicional de la invención se proporcionan procedimientos para la preparación de los compuestos de la invención, como se ilustra a continuación.

Los siguientes procedimientos son ilustrativos de los procedimientos sintéticos generales que se pueden adoptar para obtener los compuestos de la invención:

1. Los compuestos de fórmulas IA y IB se pueden preparar mediante la ciclación de los compuestos correspondientes de fórmulas IIA y IIB, respectivamente:

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en las que R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas IA y IB.

Esta ciclación se puede conseguir en condiciones básicas, neutras o ácidas usando procedimientos conocidos para la formación de anillos pirimidona. Preferentemente, la ciclación se realiza en condiciones básicas usando una sal de metal alcalino de un alcohol o una amina, tal como etóxido sódico, terc-butóxido potásico o bis(trimetilsilil)amiduro potásico, en presencia de un disolvente adecuado, por ejemplo a temperatura de reflujo (o, si se realiza en un recipiente sellado, a una temperatura superior a la de reflujo). La persona experta apreciará que, cuando se selecciona un alcohol como disolvente, se puede usar un alcohol apropiado de fórmula R^{3}OH, o un alcohol estéricamente impedido, por ejemplo, 3-metil-pentan-3-ol, si se pretende mitigar el intercambio del alcóxido en cualquiera de las dos posiciones 2 del sustituyente piridin-3-ilo.

Los compuestos de fórmulas IIA y IIB se pueden preparar mediante la reacción de los compuestos correspondientes de fórmulas IIIA y IIIB, respectivamente:

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en las que R^{1} y R^{2} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas IIA y IIB, con un compuesto de fórmula IV o uno de sus derivados ácido carboxílico:

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en la que R^{3} y R^{4} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas IIA y IIB.

Esta reacción de acoplamiento se puede conseguir mediante técnicas de formación de enlaces amida convencionales que son muy conocidas por aquellos expertos en la materia. Por ejemplo, se puede hacer reaccionar un derivado haluro de acilo (por ejemplo cloruro) de un compuesto de fórmula IV con un compuesto de fórmula IIIA o IIIB en presencia de un exceso de una amina terciaria, tal como trietilamina o piridina, opcionalmente en presencia de un catalizador adecuado, tal como 4-dimetil aminopiridina, en un disolvente adecuado tal como diclorometano, a una temperatura de 0ºC a temperatura ambiente aproximadamente.

Se puede usar una variedad de otras metodologías de acoplamiento de aminoácidos para acoplar los compuestos de fórmulas IIIA y IIIB con el compuesto de fórmula IV. Por ejemplo, el ácido de fórmula IV o una de sus sales adecuadas (por ejemplo sal sódica) se puede activar con un reactivo activante apropiado, por ejemplo una carbodiimida, tal como 1,3-diciclocarbodiimida o clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida opcionalmente en presencia de 1-hidroxibenzotriazol hidratado y/o un catalizador tal como 4-dimetilaminopiridina; una sal de halotrisaminofosfonio tal como hexafluorofosfato de bromotris(pirrolidinil)fosfonio; o una sal de piridinio adecuada tal como cloruro de 2-cloro-1-metil piridinio. Se puede llevar a cabo cualquier tipo de reacción de acoplamiento en un disolvente adecuado tal como diclorometano o tetrahidrofurano, opcionalmente en presencia de una amina terciaria tal como N-metilmorfolina o N-etildiisopropilamina (por ejemplo cuando cualquiera de los dos compuestos de fórmula IIIA o IIIB, o el agente activante se presenta en forma de una sal de adición ácida), de 0ºC aproximadamente a temperatura ambiente aproximadamente. Preferentemente, se pueden emplear de 1 a 2 equivalentes moleculares de reactivo activante aproximadamente y de 1 a 3 equivalentes moleculares de cualquier amina terciaria presente.

Alternativamente, la función ácido carboxílico de IV se puede activar usando un exceso de un reactivo tal como N,N'-carbonildiimidazol en un disolvente apropiado, por ejemplo acetato de etilo, diclorometano o butan-2-ona, de temperatura ambiente aproximadamente a 80ºC aproximadamente, seguido de la reacción del intermedio imidazolida con cualquiera de los dos de un compuesto de fórmula IIIA o IIIB de 20ºC aproximadamente a 90ºC aproximadamente.

En una variación adicional, un compuesto de fórmula IA o IB, como se ha definido previamente, se puede formar en un procedimiento en un único reactor acoplando un compuesto de fórmula IIIA o IIIB con el derivado cloruro de acilo de fórmula IV y ciclando el compuesto intermedio resultante de fórmula IIA o IIB, usando los procedimientos como se ha descrito previamente. El procedimiento en un único reactor puede involucrar adicionalmente un acoplamiento in situ y una reacción de ciclación para formar un compuesto de fórmula IA o IB. Preferentemente, la piridina puede servir como agente limpiador ácido y como disolvente para el acoplamiento in situ y la reacción de ciclación.

2. Los compuestos de fórmulas IA y IB se pueden preparar mediante la ciclación de los compuestos correspondientes de fórmulas VA y VB, respectivamente:

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en las que R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmula IA y IB.

Preferiblemente, la ciclación se lleva a cabo mediante hidrólisis, más preferiblemente en presencia de una base adecuada tal como hidróxido de potasio y un disolvente adecuado, tal como un alcohol impedido estéricamente, tal como 3-metil-3-pentanol, por ejemplo a temperatura de reflujo.

Los compuestos de fórmulas VA y VB se pueden preparar mediante la reacción de los compuestos correspondientes de fórmulas VIA y VIB, respectivamente:

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en las que R^{1} y R^{2} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmula VA y VB, con un compuesto de fórmula IV o uno de sus derivados ácido carboxílico como se ha definido previamente, usando técnicas de formación de enlaces amida habituales, por ejemplo como se ha descrito anteriormente con respecto al acoplamiento de un compuesto de fórmula IIIA o IIIB con un compuesto de fórmula IV.

3. Los compuestos de fórmulas IA y IB se pueden preparar mediante la reacción de los compuestos correspondientes de fórmulas VIIA y VIIB, respectivamente:

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en las que Y es halo, preferiblemente cloro, bromo o yodo, R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas IA y IB, con un compuesto de fórmula VIII:

VIIIR^{12}R^{13}NH

en la que R^{12} y R^{13} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas IA y IB.

Esta reacción normalmente se realiza de 0ºC a temperatura ambiente, preferiblemente en presencia de un disolvente apropiado tal como un alcohol C_{1} a C_{3} o diclorometano, opcionalmente usando un exceso del compuesto de fórmula VIII y, opcionalmente, en presencia de otra base adecuada, tal como trietilamina.

Los compuestos de fórmula VIIA y VIIB se pueden preparar a partir de los compuestos correspondientes de fórmulas XVA y XVB, respectivamente:

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en las que R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas VIIA y VIIB, por ejemplo usando procedimientos conocidos por aquellos expertos en la materia para convertir un grupo amino a un grupo SO_{2}Y (en la que Y es como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas VIIA y VIIB). Por ejemplo, los compuestos de fórmulas VIIA y VIIB en las que Y es cloro se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto correspondiente de fórmula XVA o XVB con aproximadamente dos veces en exceso de nitrito sódico en una mezcla de ácido clorhídrico concentrado y ácido acético glacial, de -25ºC aproximadamente a 0ºC aproximadamente, seguido del tratamiento con un exceso de dióxido de azufre líquido y una disolución de aproximadamente tres veces en exceso de cloruro cúprico en ácido acético acuoso, de -15ºC aproximadamente a temperatura ambiente aproximadamente.

Los compuestos de fórmulas XVA y XVB se pueden preparar mediante la ciclación de un compuesto correspondiente de fórmula XVC o XVD (según sea apropiado):

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en las que R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se ha definido anteriormente para los compuestos de fórmulas XVA y XVB, por ejemplo en condiciones similares a aquellas descritas anteriormente para la preparación de los compuestos de fórmulas IA y IB.

Los compuestos de fórmulas XVA y XVB se pueden preparar alternativamente mediante la reducción del compuesto de nitropiridina correspondiente en condiciones que son muy conocidas por aquellos expertos la materia. Tales nitrocompuestos se pueden preparar mediante la ciclación de precursores apropiados, por ejemplo como se ha descrito anteriormente.

4. Los compuestos de fórmulas IA y IB, en las que R^{2} representa un alquilo C_{1-4}, Hetalquilo C_{1-3} o arilalquilo C_{1-3}, se pueden preparar alternativamente mediante la reducción de los compuestos correspondientes de fórmula XVIA y fórmula XVIB, respectivamente:

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en las que R^{1}, R^{3} y R^{4} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas IA y IB, con cualquiera de los dos de un compuesto organometálico de fórmula R^{2a}M como se ha definido anteriormente, seguido de la desoxigenación del alcohol secundario resultante, usando procedimientos que son muy conocidos por aquellos expertos en la materia, o mediante la aminación reductora usando un compuesto básico que proporciona un grupo R^{2} tras la reacción con el grupo -C=O que está unido al anillo pirazol (por ejemplo un grupo que proporciona (R^{2a})^{-}, antes de la reacción con el carbonilo, tal como morfolinilo), usando procedimientos que son muy conocidos por aquellos expertos en la materia.

Los compuestos de fórmulas XVIA y XVIB se pueden preparar mediante la oxidación de los compuestos correspondientes de fórmulas IA o IB, en las que R^{2} representa CH_{2}OH usando procedimientos que son muy conocidos por aquellos expertos en la materia.

5. Los compuestos de fórmulas IA y IB en las que R^{2} representa CH_{2}OH se pueden preparar mediante la desprotección de los compuestos correspondientes de fórmulas XVIIA y XVIIB, respectivamente:

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en las que R^{1}, R^{3} y R^{4} son como se ha definido previamente para los compuestos de fórmulas IA y IB y R^{15} representa un grupo protector alcohol, por ejemplo un grupo bencilo, usando procedimientos que son muy conocidos por aquellos expertos en la materia.

6. Los compuestos de fórmulas IA y IB en las que R^{1} representa un alquilo C_{2-5} o Hetalquilo C_{1-3}, se pueden preparar mediante la alquilación de los compuestos correspondientes de fórmula IA y IB, respectivamente, en las que R^{1} representa H, por ejemplo como se ha descrito anteriormente para la preparación de compuestos de fórmulas IXA y IXB.

Los compuestos de fórmulas IIIA y IIIB, IV, VIA y VIB, VIII, y XVC y XVD, y sus derivados, cuando no están disponibles comercialmente o no se describen posteriormente, se pueden obtener por cualquiera de los dos por analogía con los procedimientos descritos en el presente documento, o mediante procedimientos sintéticos convencionales, de acuerdo con las técnicas habituales, a partir de materiales de partida fácilmente accesibles usando las condiciones de reacción y los reactivos apropiados.

Los sustituyentes sobre los grupos arilo y Het en los compuestos anteriormente mencionados se pueden introducir, e interconvertir, usando técnicas que son muy conocidas por aquellos expertos en la materia.

La persona experta también apreciará que diversas transformaciones e interconversiones de grupos funcionales o sustituyentes habituales dentro de ciertos compuestos de fórmulas IA y IB proporcionarán otros compuestos de fórmulas IA y IB. Los ejemplos incluyen el intercambio del alcóxido en la posición 2 de los sustituyentes piridin-3-ilo, y para los compuestos en los que R^{2} o R^{3} representa un grupo alquilo que está terminado en OH, la desprotección de un étercompuesto correspondiente de fórmula IA o IB (véase los Ejemplos a continuación). Además, ciertos compuestos de fórmulas IA y IB, por ejemplo aquellos en los que R^{12} y R^{13}, junto con el nitrógeno al cual están unidos forman un grupo 4-R^{14}-piperacinilo, se pueden preparar directamente a partir de los análogos de piperacina correspondientes en los que R^{14} se sustituye por hidrógeno, usando procedimientos habituales (por ejemplo alquilación).

Los compuestos de la invención se pueden aislar a partir de sus mezclas de reacción usando técnicas convencionales.

Aquellos expertos en la materia apreciarán que, en el transcurso de la realización de los procedimientos anteriores descritos anteriormente, los grupos funcionales de los compuestos intermedios pueden necesitar protección mediante grupos protectores.

Los grupos funcionales que es deseable proteger incluyen hidroxilo, amino y ácido carboxílico. Los grupos protectores adecuados para el hidroxilo incluyen grupos trialquilsililo y diarilalquilsililo (por ejemplo terc-butildimetilsililo, terc-butildifenilsililo o trimetilsililo) y tetrahidropiranilo. Los grupos protectores adecuados para el amino incluyen terc-butiloxicarbonilo, 9-fluorenilmetoxicarbonilo o benciloxicarbonilo. Los grupos protectores adecuados para el ácido carboxílico incluyen ésteres bencílicos o alquílicos C_{1-6}.

La protección o desprotección de grupos funcionales puede tener lugar antes o después de cualquier etapa de reacción descrita anteriormente.

Los grupos protectores se pueden eliminar de acuerdo con técnicas que son muy conocidas por aquellos expertos en la materia.

El uso de grupos protectores está descrito con detalle en "Protective Groups in Organic Chemistry", editado por JWF McOmie, Plenum Press (1973), y "Protective Groups in Organic Synthesis", 2ª edición, TW Greene & PGM Wutz, Wiley-Interscience (1991).

Las personas expertas en la materia también apreciarán que, para obtener los compuestos de fórmula I de una manera alternativa, y, en algunas ocasiones, más conveniente, las etapas individuales del procedimiento mencionadas anteriormente se pueden realizar en un orden diferente, y/o las reacciones individuales se pueden realizar en una fase diferente en la vía global (es decir, los sustituyentes se pueden añadir a y/o las transformaciones químicas se pueden realizar sobre, compuestos intermedios diferentes a aquellos mencionados anteriormente junto con una reacción particular). Esto dependerá, entre otros, de factores tales como la naturaleza de los otros grupos funcionales presentes en un sustrato particular, la disponibilidad de compuestos intermedios claves y la estrategia de grupos protectores (si la hubiese) a adoptar. Claramente, el tipo de química involucrada influirá en la elección del reactivo que se usa en dichas etapas sintéticas, la necesidad, y el tipo, de grupos protectores que se emplean, y la secuencia para conseguir la síntesis.

Las sales de adición ácida farmacéuticamente aceptables de los compuestos de fórmulas IA y IB que contienen un centro básico se pueden preparar de una manera convencional. Por ejemplo, una disolución de la base libre se puede tratar con el ácido apropiado, cualquiera de los dos neto o en un disolvente adecuado, y a continuación la sal resultante se puede aislar mediante cualquiera de las dos filtración o evaporación sobre vacío del disolvente de reacción. Las sales de adición básica farmacéuticamente aceptables se pueden obtener de una manera análoga tratando una disolución de un compuesto de fórmula IA o IB con una base apropiada. Ambos tipos de sales se puede formar o interconvertir usando técnicas de resina de intercambio iónico.

Aquellos expertos en la materia apreciarán que ciertos derivados protegidos de los compuestos de fórmula I, que se pueden preparar antes de una fase de desprotección final, pueden no poseer actividad farmacológica como tales, pero pueden, en ciertos casos, ser administrados oral o por vía parental y después de eso ser metabolizados en el cuerpo para formar los compuestos de la invención que son farmacológicamente activos. Tales derivados por tanto se pueden describir como "profármacos". Adicionalmente, ciertos compuestos de fórmula I pueden actuar como profármacos de otros compuestos de fórmula I.

Uso médico

Los compuestos de la invención son útiles debido a que poseen actividad farmacológica en animales, especialmente en mamíferos, incluyendo humanos. Por tanto están indicados como productos farmacéuticos, así como para su uso como medicamentos para animales.

Según un aspecto adicional de la invención los compuestos de la invención se proporcionan para su uso como productos farmacéuticos, y para su uso como medicamentos para animales.

En particular, los compuestos de la invención se ha encontrado que son inhibidores potentes y selectivos de las PDEs de GMPc, tal como la PDE 5 de GMPc, por ejemplo como se demuestra en las pruebas descritas a continuación, y así son útiles en el tratamiento de dolencias médicas en humanos, y en animales, en las que están indicadas las PDEs de GMPc, tales como la PDE 5 de GMPc, y en las que es deseable la inhibición de las PDEs de GMPc, tal como la PDE 5 de GMPc.

Por el término "tratamiento", incluimos ambos tratamientos terapéutico (curativo) o profiláctico.

Así, según un aspecto adicional de la invención se proporciona el uso de los compuestos de la invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una dolencia médica en la que está indicada una PDE de GMPc (por ejemplo la PDE 5 de GMPc). Adicionalmente se proporciona el uso de los compuestos de la invención en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una dolencia médica en la que es deseable la inhibición de una PDE de GMPc (por ejemplo la PDE 5 de GMPc).

Los compuestos de la invención así se espera que sean útiles para el tratamiento curativo o profiláctico de la disfunción eréctil masculina (MED), disfunción sexual femenina (FSD), parto prematuro, dismenorrea, hiperplasia prostática benigna (BPH), obstrucción de la salida de la vejiga, incontinencia, angina variante estable e inestable (Prinzmetal), hipertensión, hipertensión pulmonar, insuficiencia cardiaca congestiva, ateroesclerosis, apoplejía, enfermedad vascular periférica, dolencias de apertura reducida de los vasos sanguíneos (por ejemplo angioplastia coronaria post transluminal (post-PTCA)), asma crónica, bronquitis, asma alérgica, rinitis alérgica, glaucoma y enfermedades caracterizadas por trastornos de la motilidad del intestino (por ejemplo síndrome del intestino irritable (IBS)). Otras dolencias que se pueden mencionar incluyen pre-eclampsia, síndrome de Kawasaki, tolerancia al nitrato, esclerosis múltiple, neuropatía diabética periférica, apoplejía, enfermedad de Alzheimer, insuficiencia respiratoria aguda, psoriasis, necrosis de la piel, metástasis cancerosa, calvicie, esófago en cascanueces, fisura anal y vasoconstricción hipóxica. Las dolencias particularmente preferidas incluyen la MED y la FSD.

Así, la invención proporciona el uso de los compuestos de la invención en un procedimiento para el tratamiento o prevención de una dolencia médica para la cual está indicada el inhibidor de la PDE 5 de GMPc, en un animal (por ejemplo un mamífero, incluyendo un ser humano), que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención a un mamífero en necesidad de tal tratamiento.

Preparaciones farmacéuticas

Los compuestos de la invención normalmente se administraron por vía oralo por cualquier vía parenteral, en forma de preparaciones farmacéuticas que comprenden el principio activo, opcionalmente en forma de una sal de adición básica o ácida, orgánica o inorgánica no tóxica, en una forma de dosificación farmacéuticamente aceptable. Dependiendo del trastorno y del paciente a tratar, así como la vía de administración, las composiciones se pueden administrar en dosis variables.

Los compuestos de la invención también se pueden combinar con cualquier otro fármaco útil en la inhibición de las PDEs de GMPc, tal como la PDE 5 de GMPc.

En terapia en humanos, los compuestos de la invención se pueden administrar solos, pero generalmente se administrarán en mezcla con un excipiente, diluyente o vehículo farmacéuticamente adecuado seleccionado en relación a la vía de administración prevista y la práctica farmacéutica habitual.

Por ejemplo, los compuestos de la invención se pueden administrar oral, bucal o por vía sublingual en forma de comprimidos, cápsulas, óvulos, elixires, disoluciones o suspensiones, que pueden contener agentes colorantes o aromatizantes, para aplicaciones de liberación inmediata, retardada o controlada. Los compuestos de la invención también se pueden administrar mediante inyección intracavervenosa.

Tales comprimidos pueden contener excipientes tales como celulosa microcristalina, lactosa, citrato sódico, carbonato de calcio, fosfato de calcio dibásico y glicina, desagregantes tales como fécula (preferiblemente fécula de maíz, de patata o de tapioca), glicolato de fécula sódica, croscarmelosa sódica y ciertos silicatos complejos, y aglutinantes de granulación tales como polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC), hidroxipropilcelulosa (HPC), sacarosa, gelatina y goma arábiga. Adicionalmente, se pueden incluir agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, ácido esteárico, behenato de glicerilo y talco.

También se pueden emplear como agentes de carga composiciones sólidas de un tipo similar en cápsulas de gelatina. Los excipientes preferidos en relación a esto incluyen lactosa, fécula, celulosa, azúcar de la leche o polietilen glicoles de elevado peso molecular. Para suspensiones acuosas y/o elixires, los compuestos de la invención se pueden combinar con diversos agentes edulcorantes o aromatizantes, colorantes o tintes, con emulsionantes y/o agentes suspensores y con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol y glicerina, y sus combinaciones.

Los compuestos de la invención también se pueden administrar por vía parental, por ejemplo, intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intraesternal, intracraneal, intramuscular o subcutáneamente, o se pueden administrar mediante técnicas de infusión. Mejor se usan en forma de una disolución acuosa estéril que puede contener otras sustancias, por ejemplo, glucosa o sales suficientes para que la disolución sea isotónica con la sangre. Las disoluciones acuosas se deberían tamponar convenientemente (preferiblemente a un pH entre 3 y 9), si fuese necesario. La preparación de formulaciones parenterales adecuadas en condiciones estériles se consigue fácilmente mediante técnicas farmacéuticas habituales muy conocidas por aquellos expertos en la materia.

Para la administración por vía oral y parenteral a pacientes humanos, el nivel de dosificación diario de los compuestos de la invención normalmente estará entre 10 y 500 mg/kg (en dosis individuales o divididas).

Así, por ejemplo, los comprimidos o cápsulas del compuesto de la invención pueden contener de 5 mg a 250 mg de compuesto activo para la administración por separado o dos o más a la vez, según sea apropiado. En cualquier caso el facultativo determinará la dosificación real que será la más adecuada para cualquier paciente individual y variará con la edad, el peso y la respuesta del paciente particular. Las dosificaciones anteriores son ejemplos del caso promedio. Por supuesto, puede haber ejemplos individuales en los que se requieran intervalos de dosificación superiores o inferiores y los cuales están dentro del alcance de esta invención.

Los compuestos de la invención también se pueden administrar por vía intranasal o por inhalación y se administran convenientemente en forma de un inhalador en polvo seco o una presentación de pulverizador en aerosol en un contenedor, bomba, pulverizador o nebulizador presurizado con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, un hidrofluoroalcano tal como 1,1,1,2-trifluoroetano (HFA 134™ o 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano (HFA 227EA™), dióxido de carbono u otro gas adecuado. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosificación se puede determinar suministrando una válvula para administrar una cantidad medida. El contenedor, bomba, pulverizador o nebulizador presurizado puede contener una disolución o suspensión del compuesto activo, por ejemplo usando una mezcla de etanol y el propulsor como disolvente, que adicionalmente puede contener un lubricante, por ejemplo trioleato de sorbitán. Las cápsulas y cartuchos (preparados, por ejemplo, de gelatina) para su uso en un inhalador o insuflador se pueden formular para que contengan una mezcla en polvo de un compuesto de la invención y una base en polvo adecuada tal como lactosa o fécula.

Las formulaciones en polvo seco o aerosol preferiblemente se disponen de manera que cada dosis medida o "descarga" contiene de 1 a 50 mg de un compuesto de la invención para su administración al paciente. La dosis diaria global con un aerosol estará en el intervalo de 1 a 50 mg, que se puede administrar en una única dosis o, más usualmente, en dosis divididas a lo largo del día.

Alternativamente, los compuestos de la invención se pueden administrar en forma de supositorio o pesario, o se pueden aplicar tópicamente en forma de loción, disolución, crema, pomada o polvo fino. Los compuestos de la invención también se pueden administrar transdérmicamente, por ejemplo, mediante el uso de un parche para la piel. También se pueden administrar por vía ocular, particularmente para el tratamiento de enfermedades del ojo.

Para uso oftálmico, los compuestos de la invención se pueden formular como suspensiones micronizadas en solución salina isotónica, ajustada a un pH, estéril, o, preferiblemente, como disoluciones en solución salina isotónica, ajustada a un pH, estéril, opcionalmente en combinación con un preservante tal como cloruro de bencilalconio. Alternativamente, se pueden formular en una pomada tal como vaselina.

Para su aplicación tópica sobre la piel, los compuestos de la invención se pueden formular como una pomada adecuada que contiene el compuesto activo suspendido o disuelto en, por ejemplo, una mezcla con uno o más de lo siguiente: aceite mineral, vaselina líquida, vaselina blanca, propilenglicol, compuesto de polioxietileno polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Alternativamente, se pueden formular como una crema o loción adecuada, suspendida o disuelta en, por ejemplo, una mezcla de uno o más de lo siguiente: aceite mineral, monoestearato de sorbitán, un polietilen glicol, parafina líquida, polisorbato 60, cera de ésteres cetílicos, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua.

La persona experta en la materia también apreciará que, en el tratamiento de ciertas dolencias (incluyendo la MED y la FSD), los compuestos de la invención se pueden tomar como una única dosis con respecto a "lo requerido" (es decir según se necesite o se desee).

Generalmente, en humanos, la administración por vía oral de los compuestos de la invención es la vía preferida, siendo la más conveniente y, por ejemplo en la MED, evitando las desventajas bien conocidas asociadas a la administración intracavernosa (i.c.).

Un régimen de dosificación oral preferido en la MED para un humano típico está entre 25 y 250 mg de compuesto cuando se requiera.

En circunstancias en las que el receptor sufre de un trastorno de deglución o de una discapacidad en la absorción de fármacos después de la administración oral, el fármaco se puede administrar por vía parental, por ejemplo, sublingual o bucalmente.

Para uso veterinario, un compuesto de la invención se administra como una formulación adecuadamente aceptable de acuerdo con la práctica veterinaria normal y el veterinario determinará el régimen de dosificación y la vía de administración que será la más apropiada para un animal particular.

Así, según un aspecto adicional de la invención se proporciona una formulación farmacéutica que incluye un compuesto de la invención en mezcla con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéutica o veterinariamente acepta-
ble.

Además del hecho de que los compuestos de la invención inhiben las fosfodiesterasas de guanosin 3',5'-monofosfato cíclico (PDEs de GMPc) y en particular, son inhibidores potentes y selectivos de la PDE 5 de GMPc, los compuestos de la invención también pueden tener la ventaja de que pueden ser más eficaces que, menos tóxicos que, tener un intervalo de actividad más amplio que, ser más potentes que, producir menos efectos secundarios que, absorberse más fácilmente que, o pueden tener otras propiedades farmacológicas útiles sobre, compuestos conocidos en la técnica anterior.

Las actividades biológicas los compuestos de la presente invención se determinan mediante los siguientes procedimientos de prueba.

Pruebas biológicas Actividad inhibidora de la fosfodiesterasa (PDE)

Las actividades inhibidoras in vitro de la PDE frente a las fosfodiesterasas de guanosin 3',5'-monofosfato cíclico (GMPc) y adenosin 3',5'-monofosfato cíclico se determinaron midiendo sus valores de CI_{50} (la concentración de compuesto necesaria para la inhibición del 50% de la actividad enzimática).

Las enzimas PDE necesarias se aislaron de una variedad de fuentes, incluyendo el cuerpo cavernoso humano, plaquetas humanas y de conejo, ventrículo cardiaco humano, músculo esquelético humano y retina bovina, esencialmente por el método de W. J. Thompson y M. M. Appleman (Biochem., 1971, 10, 311). En particular, la PDE específica de GMPc (PDE 5) y la PDE de AMPc inhibida por GMPc (PDE 3) se obtuvieron de tejido del cuerpo cavernoso humano, plaquetas humanas o plaquetas de conejo; la PDE estimulada por GMPc (PDE 2) se obtuvo de cuerpo cavernoso humano; la PDE dependiente de calcio/calmodulina (Ca/CAM) (PDE 1) de ventrículo cardiaco humano; la PDE específica para el AMPc (PDE 4) de músculo esquelético humano; y la PDE fotorreceptora (PDE 6) de retina bovina.

Los experimentos se llevaron a cabo usando una modificación del método "en lote" de W. J. Thompson y col. (Biochem., 1979, 18, 5228). Los resultados de estas pruebas muestran que los compuestos de la presente invención son inhibidores potentes y selectivos de la PDE específica de GMPc.

Actividad funcional

Ésta se evaluó in vitro determinando la capacidad de un compuesto de la invención para potenciar la relajación de fibras de tejido del cuerpo cavernoso de conejo precontraída inducida por nitroprusiato sódico, como describe S. A. Ballard y col. (Brit. J. Pharmacol., 1996, 118 (supl.), resumen 153P).

Actividad in vivo

Los compuestos se pueden seleccionar en perros anestesiados para determinar su capacidad, después de la administración i.v., para potenciar el aumento de presión en los cuerpos cavernosos del pene inducido por inyección intracavernosa de nitroprusiato sódico, usando un procedimiento basado en aquel descrito por Trigo-Rocha y col. (Neurourol. and Urodyn., 1994, 13, 71).

Perfil de seguridad

Los compuestos de la invención se pueden probar a dosis i.v. y p.o. variables en animales tales como ratón y perro, observando cualquier efecto adverso.

Ejemplos y preparaciones

La síntesis de los compuestos de la invención y de los compuestos intermedios para su uso en ella se ilustra mediante los siguientes Ejemplos y Preparaciones.

El espectro de resonancia magnética nuclear de ^{1}H (RMN) se tomó usando cualquiera de los dos de un espectrómetro Varian Unity 300 o un Varian Inova 400 y en todos los casos fue coherente con las estructuras propuestas. Los desplazamientos químicos característicos (\delta) se dan en partes por millón campo abajo del tetrametilsilano usando las abreviaturas convencionales para la designación de los picos principales: por ejemplo s, singlete; d, doblete; t, triplete; c, cuartete; m, multiplete; a, ancho.

El espectro de masas (m/z) se tomó usando un espectrómetro de masas Fisons Instruments Trio en el modo de ionización por termopulverización.

La temperatura ambiente incluye de 20 a 25ºC.

Cuando cualquiera de los siguientes ejemplos no caiga dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas, se debe entender que se describen con el propósito de comprender la invención, y así se proporcionan en un sentido ilustrativo.

Síntesis de compuestos intermedios

Preparación 1

2-(1-hidroxi-2-feniletiliden)malononitrilo

Una disolución de malononitrilo (4,0 g, 60 mmol) en tetrahidrofurano (25 ml), se añadió gota a gota durante una hora a una suspensión enfriada en hielo de hidruro sódico (4,80 g, 60%, 120 mmol) en tetrahidrofurano (75 ml), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una hora, y a continuación se volvió a enfriar a 0ºC. Una disolución de cloruro de fenilacetilo (8,0 ml, 60 mmol) en tetrahidrofurano (20 ml) se añadió gota a gota durante una hora, manteniendo la temperatura por debajo de 10ºC, y a continuación la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 36 horas. Se añadió agua (10 ml), la mezcla se concentró a presión reducida, el residuo se repartió entre éter (50 ml), y ácido clorhídrico 1 N (50 ml) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con éter (2 x 50 ml), las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 ml), se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se disolvió en acetonitrilo (100 ml), se filtró para eliminar el aceite de silicio residual, y el filtrado se evaporó a presión reducida, para dar el compuesto del título en forma de un aceite pardo
(11,20 g).

\delta (CDCl_{3}): 3,93 (2H, s), 7,30 (2H, m), 7,40 (3H, m).

Preparación 2

2-[2-(benciloxi)-1-hidroxietiliden]malononitrilo

Obtenido como un sólido beige (33%), después de la recristalización en diisopropil éter, a partir de cloruro de benciloxiacetilo y malononitrilo, usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 1.

\delta (CDCl_{3}): 4,46 (2H, s), 4,72 (2H, s), 7,34 (2H, m), 7,41 (3H, m).

Preparación 3

2-(1-hidroxi-2-metilpropiliden)malononitrilo

Obtenido como un sólido beige (88%) a partir de cloruro de isobutirilo y malononitrilo usando el procedimiento de la Preparación 1.

\delta (CDCl_{3}): 1,23 (6H, d), 3,16 (1H, m).

Preparación 4

2-(2-ciclopropil-1-hidroxietiliden)malononitrilo

Obtenido como un aceite pardo (100%) a partir de cloruro de ciclopropilacetilo (J. Med. Chem. 1984, 27, 1291) y malononitrilo, usando el procedimiento de la Preparación 1.

\delta (CDCl_{3}): 0,34 (2H, m), 0,63 (2H, m), 1,05 (1H, m), 2,53 (2H, d), 9,72 (1H, s).

LRMS: m/z 166 (M+18)^{+}.

Preparación 5

2-(1-metoxi-2-feniletiliden)malononitrilo

Una disolución del compuesto del título de la preparación 1 (11,20 g, 62 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml) se añadió gota a gota a una disolución enfriada en hielo de hidruro sódico (5,86 g, 60%, 62 mmol) en tetrahidrofurano (40 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos, y a continuación se volvió a enfriar a 0ºC en un baño de hielo. Una disolución de dimetil sulfato (2,48 g, 62 mmol) en tetrahidrofurano (40 ml) se añadió gota a gota durante una hora y una vez completada la adición la reacción se calentó a reflujo durante 3 horas, y a continuación se agitó durante 18 horas más a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, el residuo se repartió entre acetato de etilo (100 ml) y una disolución de hidrogenocarbonato sódico enfriada en hielo (50 ml), y las fases se separaron. La fase orgánica se lavó con agua (25 ml), salmuera (25 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El aceite residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de éter:pentano (95:5 a 50:50) para dar el compuesto del título en forma de un aceite naranja
(7,47 g).

\delta (CDCl_{3}): 4,02 (5H, m), 7,22-7,42 (5H, m).

\newpage

Preparación 6

2-[2-(benciloxi)-1-metoxietiliden]malononitrilo

Obtenido como un aceite pardo (78%) a partir del compuesto del título de la Preparación 2, usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 5.

\delta (CDCl_{3}): 3,98 (3H, s), 4,20 (2H, s), 4,43 (2H, s), 7,38 (5H, m).

Preparación 7

2-(1-metoxi-2-metilpropiliden)malononitrilo

Una disolución del compuesto del título de la Preparación 3 (3,37 g, 24,8 mmol) en dioxano (25 ml) se añadió a una suspensión de hidruro sódico (780 mg, 26 mmol) en dioxano (40 ml), la mezcla se agitó durante 10 minutos, y se añadió dimetil sulfato (2,5 ml, 26 mmol) gota a gota. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 horas, se enfrió y se concentró a presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo (100 ml) y agua (50 ml), las fases se separaron, y la fase orgánica se lavó con salmuera (25 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El producto en bruto se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando diclorometano como eluyente para dar el compuesto del título en forma de un aceite amarillo pálido (2,62 g).

\delta (CDCl_{3}): 1,20 (6H, d), 3,19 (1H, m), 4,38 (3H, s).

LRMS: m/z 168 (M+18)^{+}.

Preparación 8

2-(2-ciclopropil-1-metoxietiliden)malononitrilo

Obtenido como un aceite (45%) a partir del compuesto del título de la Preparación 4, usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 5.

\delta (CDCl_{3}): 0,38 (2H, m), 0,62 (2H, m), 0,98 (1H, m), 2,58 (2H, d), 4,17 (3H, s).

LRMS: m/z 180 (M+18)^{+}.

Preparación 9

5-amino-3-bencil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Se añadió gota a gota una mezcla de oxalato de propil hidracina (5,0 g, 30 mmol) y metóxido sódico (3,46 g, 60 mmol) en metanol (50 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Una disolución del compuesto del título de la Preparación 5 (6,03 g, 30 mmol) en metanol (10 ml), y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 4 horas. La mezcla enfriada se concentró a presión reducida, el residuo se suspendió en una disolución de diclorometano:metanol (90:10) (100 ml) y se filtró. El filtrado se evaporó a presión reducida y el producto en bruto se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 95:5) para dar el compuesto del título en forma de un sólido amarillo (5,13 g).

\delta (CDCl_{3}): 0,95 (3H, t), 1,80 (2H, m), 3,78 (2H, t), 4,20 (2H, s), 7,18-7,34 (5H, m).

LRMS: m/z 241 (M+1)^{+}.

Preparación 10

5-amino-3-(benciloxi)metil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Se añadió de forma fraccionada metóxido sódico (7,2 g, 132 mmol) a una suspensión de clorhidrato de propil hidracina (7,3 g, 66 mmol) en metanol (100 ml) y la mezcla se agitó durante 10 minutos. Se añadió gota a gota una disolución del compuesto del título de la Preparación 6 (15,0 g, 66 mmol) en metanol (50 ml) durante una hora, y una vez completada la adición, la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 4 horas, y 18 horas más a temperatura ambiente. Se añadió agua (2 ml), la mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo (100 ml), y salmuera (100 ml), y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml), las fases orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El producto en bruto se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (98:2 a 94:6) para dar el compuesto del título (3,7 g).

\delta (CDCl_{3}): 0,88 (3H, t), 1,80 (2H, m), 3,88 (2H, t), 4,50 (2H, s), 4,55 (2H, s), 7,36 (5H, m).

LRMS: m/z 271 (M+1)^{+}.

Preparación 11

5-amino-3-(benciloxi)metil-1-etil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Obtenido como un aceite amarillo pálido (37%) a partir del compuesto del título de la Preparación 6, y oxalato de etil hidracina usando el procedimiento de la Preparación 10.

LRMS: m/z 258 (M+1)^{+}.

Preparación 12

5-amino-3-isopropil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Obtenido como un polvo amarillo (6%) a partir del compuesto del título de la Preparación 7 y clorhidrato de propil hidracina, usando el procedimiento de la Preparación 10.

\delta (CDCl_{3}): 0,97 (3H, t), 1,32 (6H, d), 1,82 (2H, m), 2,98 (1H, m), 3,80 (2H, t), 4,10 (2H, s).

Preparación 13

5-amino-3-ciclopropilmetil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Obtenido como un sólido amarillo (40%) a partir del compuesto del título de la Preparación 8 y oxalato de propil hidracina, usando el procedimiento de la Preparación 9.

\delta (CDCl_{3}): 0,22 (2H, m), 0,50 (2H, m), 0,92 (3H, t), 1,02 (1H, m), 1,80 (2H, m), 2,47 (2H, d), 3,78 (2H, t), 4,10 (2H, s).

LRMS: m/z 205 (M+1)^{+}.

Preparación 14

5-amino-1-etil-3-(2-piracinil)-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Se añadió de forma fraccionada hidruro sódico (9,72 g, 60%, 243 mmol) a una disolución enfriada (5ºC) de malononitrilo (7,9 g, 120 mmol) en tetrahidrofurano (75 ml), y la mezcla se agitó durante 20 minutos. Se añadió gota a gota una disolución de cloruro de 2-piracincarbonilo (J. Med. Chem. 1992, 35, 1214) (17,1 g, 120 mmol) en tetrahidrofurano (250 ml) para así mantener la temperatura interna por debajo de 10ºC, y a continuación la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante una hora. Se añadió dimetil sulfato (18,16 g, 144 mmol), la mezcla se calentó a reflujo durante 3 horas, se dejó enfriar, se añadió trietilamina (58,5 ml, 420 mmol) y oxalato de etil hidracina (18 g, 120 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 18 horas. El disolvente se decantó de la mezcla de reacción enfriada y la goma parda residual se extrajo con diclorometano (2 x 150 ml). Las disoluciones orgánicas combinadas se evaporaron a presión reducida y el producto en bruto se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando acetato de etilo:hexano (50:50) como eluyente para dar el compuesto del título (1,2 g).

\delta (CDCl_{3}): 1,48 (3H, t), 4,03 (2H, c), 4,35 (2H, s), 8,50 (1H, s), 8,61 (1H, s), 9,17 (1H, s).

LRMS: m/z 215 (M+1)^{+}.

Preparación 15

5-amino-1-n-propil-3-(2-piracinil)-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Obtenido como un sólido (5%) a partir de malononitrilo, clorhidrato de propil hidracina y cloruro de 2-piracincarbonilo, usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 14.

\delta (CDCl_{3}): 1,02 (3H, t), 1,94 (2H, m), 3,97 (2H, t), 4,37 (2H, s), 8,55 (1H, s), 8,65 (1H, s), 9,20 (1H, s).

LRMS: m/z 229 (M+1)^{+}.

Preparación 16

5-amino-1-etil-3-fenil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Obtenido (23%) a partir de cloruro de benzoilo, malononitrilo y oxalato de etil hidracina usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 14.

\delta (CDCl_{3}): 1,42 (3H, t), 3,98 (2H, c), 4,22 (2H, s), 7,37 (3H, m), 7,87 (2H, d).

LRMS: m/z 213 (M+1)^{+}.

Preparación 17

5-amino-3-bencil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 9 (1,80 g, 7,50 mmol) e hidróxido sódico (900 mg, 22,5 mmol) en etanol (15 ml) y agua (15 ml), se calentó a reflujo durante 24 horas. La mezcla de reacción enfriada se filtró y el sólido se secó por succión para dar el compuesto del título como un sólido blanco (1,18 g).

\delta (DMSO-d_{6}): 0,86 (3H, t), 1,68 (2H, m), 3,80 (2H, t), 4,02 (2H, s), 6,18 (2H, s), 6,33 (2H, s), 7,18 (3H, m), 7,26 (2H, m).

LRMS: m/z 259 (M+1)^{+}.

Preparación 18

5-amino-3-(benciloxi)metil-1-etil-1H-pirazol-4-carboxamida

Obtenida como un sólido (77%) a partir del compuesto del título de la Preparación 11, usando el procedimiento de la Preparación 17.

LRMS: m/z 275 (M+1)^{+}.

Preparación 19

5-amino-3-(benciloxi)metil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carboxamida

Obtenida como cristales blancos (90%) a partir del compuesto del título de la Preparación 10, usando el procedimiento de la Preparación 17.

\delta (CDCl_{3}): 0,84 (3H, t), 1,75 (2H, m), 3,80 (2H, t), 4,58 (2H, s), 4,63 (2H, s), 4,85 (2H, s), 7,34 (5H, m).

Preparación 20

5-amino-3-isopropil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carboxamida

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 12 (834 mg, 4,3 mmol) e hidróxido sódico acuoso (13 ml, 1 N, 13 mmol) en etanol (15 ml) se calentó a reflujo durante 72 horas. La mezcla de reacción enfriada se repartió entre acetato de etilo (20 ml) y agua (15 ml) y las fases se separaron. La fase acuosa se acidificó a pH 6 con ácido clorhídrico 2 N y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Estos extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El aceite amarillo residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de éter:hexano (35:65 a 100:0) para dar el compuesto del título como un sólido amarillo pálido (260 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,98 (3H, t), 1,37 (6H, d), 1,81 (2H, m), 2,99 (1H, m), 3,80 (2H, t), 5,29 (2H, s), 5,37 (2H, s).

LRMS: m/z 211 (M+1)^{+}.

Preparación 21

5-amino-3-ciclobutilmetil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carboxamida

Obtenida como un sólido (42%) a partir del compuesto del título de la Preparación 13, usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 20, pero usando un gradiente de elución de diclorometano:isopropanol (100:0 a 90:10).

\delta (CDCl_{3}): 0,21 (2H, m), 0,50 (2H, m), 0,92 (3H, t), 1,04 (1H, m), 1,78 (2H, m), 2,70 (2H, d), 3,77 (2H, t), 5,23 (2H, s), 5,50 (2H, s).

LRMS: m/z 223 (M+1)^{+}.

\newpage

Preparación 22

5-amino-1-etil-3-(2-piracinil)-1H-pirazol-4-carboxamida

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 14 (1,1 g, 5,1 mmol) e hidróxido sódico (617 mg, 15,4 mmol) en agua (10 ml) y etanol (10 ml) se calentó a reflujo durante 24 horas y la mezcla de reacción enfriada se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de acetato de etilo:hexano:etanol (50:50:0 a 90:0:10) para dar el compuesto del título como un sólido blanco (695 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,49 (3H, t), 4,02 (2H, c), 5,44 (1H, s), 5,74 (2H, s), 8,42 (1H, s), 8,55 (1H, s), 9,50 (1H, s), 10,43 (1H, s).

LRMS: m/z 233 (M+1)^{+}.

Preparación 23

5-amino-1-n-propil-3-(2-piracinil)-1H-pirazol-4-carboxamida

Obtenida como un sólido (38%) a partir del compuesto del título de la Preparación 15, usando el procedimiento de la Preparación 22.

\delta (CDCl_{3}): 1,01 (3H, t), 1,94 (2H, m), 3,96 (2H, t), 5,42 (1H, s), 5,70 (2H, s), 8,42 (1H, s), 8,55 (1H, s), 9,48 (1H, s), 10,44 (1H, s).

LRMS: m/z 247 (M+1)^{+}.

Preparación 24

5-amino-1-etil-3-fenil-1H-pirazol-4-carboxamida

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 16 (1,75 g, 8,3 mmol) e hidróxido sódico (990 mg, 24,8 mmol) en agua (25 ml) y etanol (25 ml) se calentó a reflujo durante 24 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró a presión reducida para eliminar el etanol, y la disolución acuosa residual se extrajo con diclorometano (3 x 25 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de acetato de etilo:hexano (50:50 a 100:0) para dar el compuesto del título (460 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,40 (3H, t), 3,96 (2H, c), 5,15 (2H, s), 5,37 (2H, s), 7,41 (3H, m), 7,52 (2H, d).

LRMS: m/z 231 (M+1)^{+}.

Preparación 25

3-[(benciloxi)metil]-5-(2-n-propoxibenzamido)-1-n-propil-1H-pirazol-4-carboxamida

Una disolución de cloruro de 2-n-propoxibenzoilo (1,98 g, 10 mmol) en diclorometano (30 ml) se añadió a una disolución enfriada del compuesto del título de la Preparación 19 (2,88 g, 10 mmol) y trietilamina (2,02 g, 20 mmol) en diclorometano (30 ml) y la reacción se agitó durante 90 minutos. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, el residuo se suspendió en acetato de etilo (200 ml), se lavó consecutivamente con agua (50 ml), una disolución de hidróxido sódico 2 N (50 ml), ácido clorhídrico 2 N (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de hexano:acetato de etilo (100:0 a 0:100) para dar el compuesto del título como un sólido blanco
(3,17 g).

\delta (CDCl_{3}): 0,84 (3H, t), 1,00 (3H, t), 1,80 (2H, m), 1,94 (2H, m), 4,00 (2H, t), 4,19 (2H, t), 4,58 (2H, s), 4,75 (2H, s), 6,98 (1H, d), 7,02 (1H, m), 7,32 (5H, m), 7,41 (1H, m), 8,21 (1H, d), 10,87 (1H, s).

Preparación 26

3-[(benciloxi)metil]-6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 25 (2,93 g, 6,5 mmol) y t-butóxido potásico (900 mg, 8,0 mmol) en isopropanol (50 ml) se calentó a reflujo durante 5 horas, y a continuación se enfrió. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (100 ml), se lavó con una disolución de cloruro amónico (50 ml) y salmuera (50 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El residuo se recristalizó en éter, para dar el compuesto del título (2,90 g).

\delta (CDCl_{3}): 0,92 (3H, t), 1,16 (3H, t), 1,98 (4H, m), 4,17 (2H, t), 4,22 (2H, t), 4,58 (2H, s), 5,01 (2H, s), 7,00 (1H, d), 7,10 (1H, m), 7,29 (5H, m), 7,44 (1H, m), 8,60 (1H, d), 10,96 (1H, s).

Preparación 27

3-metil-6-(2-n-propoxifenil)-1H-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió lentamente cloruro de 2-n-propoxibenzoilo (12,2 g, 61 mmol) a una suspensión enfriada en hielo de 5-amino-4-ciano-3-metil-1H-pirazol (J. Med. Chem. 1996, 39, 1639) (5,0 g, 41 mmol) en piridina (20 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante una hora. Se añadió agua (3 ml), la mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre agua (20 ml) y acetato de etilo (50 ml). Las fases se separaron, la fase orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó a presión reducida y se formó el azeótropo con tolueno para dar un sólido amarillo. Se añadió lentamente una disolución de peróxido sódico al 30% (32 ml) a una mezcla de la amida intermedia, y una disolución de hidróxido sódico (400 ml, 1 N, 400 mmol) en etanol (300 ml) y la reacción se calentó a reflujo durante 18 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró a presión reducida, la disolución acuosa residual se acidificó a pH 6 usando ácido clorhídrico, y el precipitado resultante se filtró, se lavó con agua y éter y se secó por succión. Este sólido beige se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de acetato de etilo:hexano (20:80 a 50:50) y se recristalizó en metanol para dar el compuesto del título
(2,0 g).

\delta (CDCl_{3}): 1,18 (3H, t), 2,02 (2H, m), 2,64 (3H, s), 4,20 (2H, t), 7,06 (1H, d), 7,26 (1H, m), 7,52 (1H, m), 8,43 (1H, d), 10,06 (1H, s), 11,08 (1H, s).

LRMS: m/z 285 (M+1)^{+}.

Preparación 28

3-metil-6-(2-n-propoxifenil)-1-(piridin-2-il)metil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

y

Preparación 29

3-metil-6-(2-n-propoxifenil)-2-(piridin-2-il)metil-2,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió hidruro sódico (78 mg, 60%, 2,6 mmol) a una disolución enfriada en hielo del compuesto del título de la Preparación 27 (205 mg, 0,7 mmol) en tetrahidrofurano (15 ml) y la mezcla se agitó durante 30 minutos. Se añadió 2-clorometil piridina (preparada a partir de 576 mg, 2,2 mmol del clorhidrato) en tetrahidrofurano (5 ml) y la reacción se agitó a 50ºC durante 48 horas y 72 horas más a temperatura ambiente. Se añadió metanol (2 ml) y la mezcla de reacción se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de hexano:isopropanol:amoniaco 0,88 (90:10:0,75 a 80:20:1,5) y se repitió usando acetato de etilo:hexano (80:20 a 100:0) para dar el compuesto del título de la Preparación 28 (85 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,20 (3H, t), 2,02 (2H, m), 2,63 (3H, s), 4,20 (2H, t), 5,70 (2H, s), 6,99-7,20 (4H, m), 7,48 (1H, m), 7,60 (1H, m), 8,46 (1H, d), 8,60 (1H, s), 11,10 (1H, s).

LRMS: m/z 376 (M+1)^{+}

seguido del compuesto del título de la Preparación 29 (210 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,14 (3H, t), 1,98 (2H, m), 2,69 (3H, s), 4,16 (2H, t), 5,50 (2H, s), 6,99-7,20 (4H, m), 7,42 (1H, m), 7,60 (1H, m), 8,54 (1H, d), 8,58 (1H, d), 10,85 (1H, d).

LRMS: m/z 376 (M+1)^{+}.

Preparación 30

3-metil-6-(2-n-propoxifenil)-2-(pirimidin-2-il)-2,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenida como un sólido (39%) a partir del compuesto del título de la Preparación 27 y 2-bromopiridina, usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 29, pero usando acetato de etilo:hexano:etanol (50:50:0 a 95:0:5) como eluyente cromatográfico.

\delta (CDCl_{3}): 1,18 (3H, t), 2,00 (2H, m), 3,13 (3H, s), 4,18 (2H, t), 7,02 (1H, d), 7,12 (1H, m), 7,30 (1H, m), 7,46 (1H, m), 8,62 (1H, d), 8,85 (2H, d), 10,91 (1H, s).

LRMS: m/z 363 (M+1)^{+}.

Preparación 31

3-hidroximetil-6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 26 (1,19 g, 2,75 mmol) y paladio sobre carbono al 10% (1,0 g) en alcoholes metilados industriales (IMS; 40 ml) se hidrogenó a 344,7 kPa y 50ºC durante 72 horas. La mezcla de reacción se filtró, el lecho del filtro se lavó bien con IMS y el filtrado combinado se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de acetato de etilo:hexano (0:100 a 100:0) para dar el compuesto del título como un sólido blanco (615 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,94 (3H, t), 1,16 (3H, t), 1,98 (4H, m), 4,16 (4H, m), 4,94 (2H, d), 5,62 (1H, m), 7,02 (1H, d), 7,12 (1H, m), 7,45 (1H, m), 8,60 (1H, d), 11,14 (1H, s).

Preparación 32

4-oxo-6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-carbaldehído

Se añadió óxido de N-metilmorfolina (390 mg, 3,33 mmol), seguido de perrutenato de tetrapropilamonio (30 mg, 0,090 mmol) a una mezcla del compuesto del título de la Preparación 31 (569 mg, 1,66 mmol) y tamices moleculares de 4 \ring{A} (750 mg) en acetonitrilo (10 ml) y diclorometano (10 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se filtró, el filtrado se diluyó con acetato de etilo (50 ml), se lavó con ácido clorhídrico 0,5 N (20 ml), a continuación con salmuera (20 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando acetato de etilo como eluyente, para dar el compuesto del título como un sólido cristalino blanco (367 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,98 (3H, t), 1,20 (3H, t), 2,00 (4H, m), 4,22 (2H, t), 4,70 (2H, t), 7,06 (1H, d), 7,18 (1H, m), 7,51 (1H, m), 8,62 (1H, d), 10,48 (1H, s), 11,30 (1H, s).

Preparación 33

3-[hidroxi-(piridin-2-il)metil]-6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió gota a gota n-butil litio (2,5 ml, 1,6 M en hexano, 4 mmol) a una disolución enfriada (-78ºC) de 2-bromopiridina (632 mg, 4 mmol) en tetrahidrofurano y la mezcla se agitó durante 10 minutos. Se añadió una disolución del compuesto del título de la Preparación 32 (340 mg, 1 mmol) en tetrahidrofurano (5 ml) y la reacción se agitó durante 30 minutos. Se añadió ácido clorhídrico 2 N (4 ml), la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente, se basificó con una disolución de hidróxido sódico 2 N, y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de hexano:acetato de etilo (100:0 a 0:100) para dar el compuesto del título como un aceite (246 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,93 (3H, t), 1,14 (3H, t), 1,21 (1H, d), 1,98 (4H, m), 4,13 (2H, m), 4,34 (1H, m), 4,49 (1H, m), 6,18 (1H, d), 6,97-7,24 (3H, m), 7,41 (1H, m), 7,64 (2H, m), 8,41 (1H, s), 8,59 (1H, m), 11,15 (1H, s).

LRMS: m/z 420 (M+1)^{+}.

Preparación 34

3-[hidroxi-(pirimidin-2-il)metil]-6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió gota a gota n-butil litio (6,6 ml, 2,5 M en hexano, 16,5 mmol) a una disolución enfriada (-78ºC) de tri-n-butil-estannil-2-pirimidina (Tetrahedron, 1994, 50, 275) (6,06 g, 16,4 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml), para así mantener la temperatura interna por debajo de -68ºC, y la mezcla se agitó durante 15 minutos. Se añadió gota a gota una disolución del compuesto del título de la Preparación 32 (1,86 g, 5,47 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml) durante 20 minutos, y la reacción se agitó durante 30 minutos más. Se añadió una disolución de cloruro amónico saturado (50 ml), la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente, y se diluyó con acetato de etilo (100 ml). Las fases se separaron, la fase orgánica se lavó con salmuera (50 ml), se secó (MgSO_{4}), y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 95:5) y se trituró con éter, para dar el compuesto del título como un sólido cristalino (450
mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,92 (3H, t), 1,14 (3H, t), 1,98 (4H, m), 4,16 (2H, t), 4,28 (1H, m), 4,45 (1H, m), 6,21 (1H, d), 7,00 (1H, d), 7,08 (1H, m), 7,18 (1H, m), 7,32 (1H, d), 7,43 (1H, m), 8,60 (1H, d), 8,70 (1H, s), 11,14 (1H, s).

LRMS: m/z 421 (M+1)^{+}.

\newpage

Preparación 35

O-[[4-oxo-6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il](2-piridinil)metil]-1H-imi- dazol-1-carbotioato

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 33 (210 mg, 0,5 mmol), y tiocarbonildiimidazol (534 mg, 3 mmol) en diclorometano (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 5 días. La mezcla de reacción se purificó directamente por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de hexano:acetato de etilo (100:0 a 0:100) para dar el compuesto del título (180 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,00 (3H, t), 1,16 (3H, t), 1,95-2,16 (4H, m), 4,18 (2H, t), 4,60 (2H, m), 7,07 (4H, m), 7,46 (1H, m), 7,77 (1H, m), 7,93 (1H, s), 7,99 (1H, d), 8,10 (1H, s), 8,52-8,68 (3H, m), 10,98 (1H, s).

Preparación 36

O-[[4-oxo-6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-il](2-pirimidinil)metil]-1H- imidazol-1-carbotioato

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 34 (420 mg, 1,0 mmol), y tiocarbonildiimidazol (890 mg, 5,0 mmol) en diclorometano (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla de reacción se echó en agua (20 ml), las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 40 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de hexano:acetato de etilo (100:0 a 0: 100) para dar el compuesto del título como un aceite amarillo (469 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,84 (3H, t), 1,12 (3H, t), 1,97 (4H, m), 4,11 (2H, t), 4,38 (2H, t), 6,99-7,10 (4H, m), 7,25 (1H, m), 7,42 (1H, m), 7,78 (1H, s), 8,37 (1H, s), 8,60 (1H, d), 8,72 (2H, m), 10,99 (1H, s).

LRMS: m/z 531 (M+1)^{+}.

Preparación 37

6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-3-(piridin-2-il)metil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió gota a gota una disolución del compuesto del título de la Preparación 35 (180 mg, 0,34 mmol) en tolueno (10 ml) a una disolución de hidruro de tri-n-butilestaño (291 mg, 1 mmol) en tolueno (10 ml) a reflujo, durante 30 minutos y la reacción se calentó durante 3 horas más a reflujo. La mezcla de reacción enfriada se purificó directamente por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de hexano:acetato de etilo (100:0 a 0: 100) para dar el compuesto del título como una goma amarilla (32 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,84 (3H, t), 1,14 (3H,t), 1,84 (2H, m), 1,98 (2H, m), 4,15 (2H, t), 4,25 (2H, t), 4,63 (2H, s), 7,00 (1H, d), 7,10 (2H, m), 7,40 (2H, m), 7,57 (1H, m), 8,45 (1H, d), 8,60 (1H, d), 10,98 (1H, s).

LRMS: m/z 404 (M+1)^{+}.

Preparación 38

6-(2-n-propoxifenil)-1-n-propil-3-(pirimidin-2-il)metil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenido (32%) a partir del compuesto del título de la Preparación 36, usando un procedimiento similar a aquel descrito en la Preparación 37, excepto que se usó un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 96:4) como eluyente cromatográfico.

\delta (CDCl_{3}): 0,81 (3H, t), 1,12 (3H, t), 1,84 (2H, m), 1,94 (2H, m), 4,12 (4H, m), 4,83 (2H, s), 6,99 (1H, d), 7,06 (1H, m), 7,13 (1H, m), 7,40 (1H, m), 8,59 (1H, d), 8,62 (2H, m), 10,85 (1H, s).

LRMS: m/z 405 (M+1)^{+}.

Preparación 39

Ácido 2-etoxi-5-[4-(2-hidroximetil)piperacin-1-ilsulfonil]benzoico

Se añadió N-(2-hidroxietil)piperacina (3,40 ml, 28,0 mmol) a una disolución de ácido 2-etoxi-5-clorosulfonil-benzoico (EP 812845 A1) (3,67 g, 14,0 mmol) en etanol (25 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, el residuo se suspendió en agua, se acidificó a pH 6, y se extrajo con diclorometano (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El aceite pardo residual se purificó por columna cromatográfica en resina de poliestireno de fase inversa usando un gradiente de elución de agua:acetonitrilo (100:0 a 80:20) y a continuación se trituró con acetonitrilo para dar el compuesto del título como un sólido blanco (1,10 g).

\delta (DMSO-d_{6}): 1,37 (3H, t), 2,38 (2H, t), 2,48 (4H, m), 2,84 (4H, m), 3,42 (2H, t), 4,20 (2H, c), 7,35 (1H, d), 7,80 (1H, d), 7,88 (1H, s).

LRMS: m/z 359 (M+1)^{+}.

Preparación 40

Clorhidrato del cloruro del ácido 2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)benzoico

Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (11,7 ml, 134 mmol) a una suspensión enfriada en hielo de ácido 2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)benzoico (EP 812845 A1) (20,0 g, 60,9 mmol) y dimetilformamida (2 gotas) en diclorometano (200 ml) durante 15 minutos, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se concentró a presión reducida, el residuo se trituró con éter y a continuación con acetato de etilo y se secó a 40ºC durante 16 horas, para dar el compuesto del título (19,6 g).

\delta (DMSO-d_{6}): 1,35 (3H, t), 2,70 (5H, m), 3,12 (2H, m), 3,41 (2H, m), 3,75 (2H, m), 4,21 (2H, c), 7,38 (1H, d), 7,83 (1H, d), 7,94 (1H, s), 11,26 (1H, s).

Preparación 41

Clorhidrato del cloruro del ácido 2-etoxi-5-[4-(2-hidroxietil)piperacin-1-ilsulfonil]benzoico

Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (340 ml, 2,79 mmol) a una suspensión enfriada en hielo del compuesto del título de la Preparación 39 (500 mg, 1,40 mmol) y dimetilformamida (2 gotas) en diclorometano (5 ml), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y se formó el azeótropo con tolueno para dar el compuesto del título como una espuma blanca (500
mg).

LRMS: m/z 373 (M-Cl+OMe)^{+}.

Preparación 42

3-bencil-5-[5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-etoxifenil]-carbonilamino-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbonitrilo

El compuesto del título de la Preparación 40 (1,14 g, 3,32 mmol) se añadió a una suspensión del compuesto del título de la Preparación 9 (360 mg, 1,50 mmol) en piridina (5 ml) y la reacción se agitó a 70ºC durante 20 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró a presión reducida, se formó el azeótropo con tolueno, y el aceite residual se repartió entre diclorometano (10 ml) y una disolución de bicarbonato sódico (20 ml). Las fases se separaron, la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 15 ml), y las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El producto en bruto se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de acetato de etilo:metanol (100:0 a 90:10) para dar el compuesto del título como un sólido grisáceo (460 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,94 (3H, t), 1,62 (3H, t), 1,90 (2H, m), 2,25 (3H, s), 2,46 (4H, m), 3,05 (4H, m), 3,98 (2H, t), 4,04 (2H, s), 4,40 (2H, c), 7,17 (1H, d), 7,20-7,38 (5H, m), 7,92 (1H, d), 8,59 (1H, s), 9,59 (1H, s).

LRMS: m/z 551 (M+1)^{+}.

Preparación 43

3-bencil-5-{5-[4-(2-hidroxietil)piperacin-1-ilsulfonil]-(2-etoxi)fenil}-carbonilamino-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbo- xamida

Una mezcla de los compuestos del título de las Preparaciones 17 (361 mg, 1,40 mmol) y 41 (527 mg, 1,40 mmol) en piridina (5 ml) se calentó a 70ºC durante 20 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró a presión reducida, se formó el azeótropo con tolueno y el aceite residual se repartió entre diclorometano (10 ml) y una disolución de bicarbonato sódico (20 ml). Las fases se separaron, la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 20 ml), las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El producto en bruto se trituró con éter para dar el compuesto del título como un sólido pardo claro (477 mg).

LRMS: m/z 599 (M+1)^{+}.

\newpage

Preparación 44

5-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil-carbonilamino-1-etil-3-fenil-1H-pirazol-4-carboxamida

El compuesto del título de la Preparación 24 (230 mg, 1,0 mmol) se añadió al compuesto del título de la Preparación 40 (383 mg, 1,0 mmol) en piridina (6 ml), y la reacción se agitó a 60ºC durante 18 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró a presión reducida y se formó el azeótropo con tolueno. La espuma amarilla residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (95:5 a 92:8) para dar el compuesto del título (180 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,52 (3H, t), 1,64 (3H, t), 2,22 (3H, s), 2,43 (4H, m), 3,02 (4H, m), 4,18 (2H, c), 4,42 (2H, c), 5,17 (1H, s), 5,43 (1H, s), 7,15 (1H, d), 7,42 (3H, m), 7,60 (2H, m), 7,87 (1H, d), 8,61 (1H, s), 10,72 (1H, s).

Preparación 45

3-[(benciloxi)metil]-5-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]carbonilamino-1-n-propil-1H-pirazol-4-carbo- xamida

Obtenida como un sólido cristalino (47%) a partir de los compuestos del título de las Preparaciones 19 y 40, usando el procedimiento de la Preparación 43.

\delta (CDCl_{3}): 0,86 (3H, t), 1,57 (3H, t), 1,81 (2H, m), 2,24 (3H, s), 2,44 (4H, m), 3,05 (4H, m), 4,01 (2H, t), 4,44 (2H, c), 4,59 (2H, s), 4,70 (2H, s), 7,08 (1H, d), 7,36 (5H, m), 7,82 (1H, d), 8,63 (1H, s), 11,32 (1H, s).

Preparación 46

5-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-carbonilamino-3-metil-1-n-propil-1H-pirazol-4-carboxamida

Obtenida como una espuma parda, a partir del compuesto del título de la Preparación 40 y 5-amino-3-metil-1-n-propil-3-pirazol carboxamida (WO 9307149 A1), usando el procedimiento descrito en la Preparación 44.

\delta (CDCl_{3}): 0,93 (3H, t), 1,62 (2H, m), 1,90 (2H, m), 2,26 (3H, s), 2,45 (4H, m), 3,07 (4H, m), 4,00 (2H, t), 4,41 (2H, c), 7,15 (1H, d), 7,90 (1H, d), 8,61 (1H, s), 10,44 (1H, s).

LRMS: m/z 493 (M+1)^{+}.

Preparación 47

Ácido piridin-2-amino-5-sulfónico

Se añadió de forma fraccionada 2-aminopiridina (80 g, 0,85 mol) durante 30 minutos a ácido sulfúrico fumante (320 g) y la disolución resultante se calentó a 140ºC durante 4 horas. Al enfriarse, la reacción se echó en hielo (200 g) y la mezcla se agitó en un baño de hielo/sal durante 2 horas más. La suspensión resultante se filtró, el sólido se lavó con agua helada (200 ml) e IMS frío (200 ml) y se secó por succión para dar el compuesto del título como un sólido (111,3 g).

LRMS: m/z 175 (M+1)^{+}.

Preparación 48

Ácido piridin-2-amino-3-bromo-5-sulfónico

Se añadió bromo (99 g, 0,62 mol) gota a gota durante una hora, a una disolución caliente del compuesto del título de la Preparación 47 (108 g, 0,62 mol) en agua (600 ml) para así mantener un reflujo constante. Una vez completada la adición la reacción se enfrió y la mezcla resultante se filtró. El sólido se lavó con agua y se secó por succión para dar el compuesto del título (53,4 g).

\delta (DMSO-d_{6}): 8,08 (1H, s), 8,14 (1H, s).

LRMS: m/z 253 (M+1)^{+}.

Preparación 49

Cloruro de piridin-3-bromo-2-cloro-5-sulfonilo

Se añadió gota a gota una disolución de nitrito sódico (7,6 g, 110 mmol) en agua (30 ml) a una disolución enfriada en hielo del compuesto del título de la Preparación 48 (25,3 g, 100 mmol) en ácido clorhídrico acuoso (115 ml, 20%), para así mantener la temperatura por debajo de 6ºC. La reacción se agitó durante 30 minutos a 0ºC y durante una hora más a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se evaporó a presión reducida y el residuo se secó sobre vacío a 70ºC durante 72 horas. Una mezcla de este sólido, pentacloruro de fósforo (30 g, 144 mmol) y oxicloruro de fósforo (1 ml) se calentó a 125ºC durante 3 horas, y a continuación se enfrió. La mezcla de reacción se echó en hielo (100 g) y el sólido resultante se filtró, y se lavó con agua. El producto se disolvió en diclorometano, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se evaporó a presión reducida para dar el compuesto del título como un sólido amarillo (26,6 g).

\delta (CDCl_{3}): 8,46 (1H, s), 8,92 (1H, s).

Preparación 50

2-cloruro de piridin-3-bromo-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonilo)

Se añadió gota a gota una disolución de 1-etil piperacina (11,3 ml, 89 mmol) y trietilamina (12,5 ml, 89 mmol) en diclorometano (150 ml) a una disolución enfriada en hielo del compuesto del título de la Preparación 49 (23 g, 79 mmol) en diclorometano (150 ml) y la reacción se agitó a 0ºC durante una hora. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el aceite pardo residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (99:1 a 97:3) para dar el compuesto del título como un sólido naranja
(14,5 g).

\delta (CDCl_{3}): 1,05 (3H, t), 2,42 (2H, c), 2,55 (4H, m), 3,12 (4H, m), 8,24 (1H, s), 8,67 (1H, s).

Preparación 51

3-bromo-2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridina

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 50 (6,60 g, 17,9 mmol) y etóxido sódico (6,09 g, 89,55 mmol) en etanol (100 ml) se calentó a reflujo durante 18 horas, y a continuación se enfrió. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, el residuo se repartió entre agua (100 ml) y acetato de etilo (100 ml), y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 ml), las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida para dar el compuesto del título como un sólido pardo
(6,41 g).

Hallado: C, 41,27; H, 5,33; N, 11,11. C_{13}H_{20}BrN_{3}O_{3}S requiere C, 41,35; H, 5,28; N, 10,99%.

\delta (CDCl_{3}): 1,06 (3H, t), 1,48 (2H, m), 2,42 (2H, c), 2,56 (4H, m), 3,09 (4H, m), 4,54 (2H, c), 8,10 (1H, s), 8,46 (1H, s).

LRMS: m/z 380 (M+2)^{+}.

Preparación 52

Éster etílico del ácido piridin-2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-3-carboxílico

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 51 (6,40 g, 16,92 mmol), trietilamina (12 ml), y tris(trifenilfosfina) de paladio (0) en etanol (60 ml) se calentó a 100ºC y 1378,9 kPa, en atmósfera de monóxido de carbono, durante 18 horas, y a continuación se enfrió. La mezcla de reacción se evaporó a presión reducida y el residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 97:3) para dar el compuesto del título como un aceite naranja (6,2 g).

\delta (CDCl_{3}): 1,02 (3H, t), 1,39 (3H, t), 1,45 (3H, t), 2,40 (2H, c), 2,54 (4H, m), 3,08 (4H, m), 4,38 (2H, c), 4,55 (2H, c), 8,37 (1H, s), 8,62 (1H, s).

LRMS: m/z 372 (M+1)^{+}.

Preparación 53

Ácido piridin-2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-3-carboxílico

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 52 (4,96 g, 13,35 mmol) y una disolución acuosa de hidróxido sódico (25 ml, 2 N) en etanol (25 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida hasta la mitad de su volumen, se lavó con éter y se acidificó a pH 5 usando ácido clorhídrico 4 N. La disolución acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 30 ml), los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida para dar el compuesto del título como un sólido de color tostado (4,02 g).

\delta (DMSO-d_{6}): 1,18 (3H, t), 1,37 (3H, t), 3,08 (2H, c), 3,17-3,35 (8H, m), 4,52 (2H, c), 8,30 (1H, s), 8,70 (1H, s).

Preparación 54

Clorhidrato del cloruro del ácido piridin-2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-3-carboxílico

Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (0,77 ml, 8,85 mmol) a una disolución enfriada en hielo del compuesto del título de la Preparación 53 (1,52 g, 4,42 mmol) y dimetilformamida (2 gotas) en diclorometano (30 ml) y la reacción se agitó durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla se concentró a presión reducida y el residuo se trituró con acetato de etilo. El sólido resultante se filtró, se lavó con éter y se secó por succión para dar el compuesto del título (1,68 g).

Hallado: C, 41,51; H, 5,27; N, 10,32. C_{14}H_{21}Cl_{2}N_{3}O_{4}S\cdot0,10CH_{2}Cl_{2} requiere C, 41,73; H, 5,02; N, 10,36%.

\delta (CDCl_{3}): 1,46 (6H, m), 2,95 (2H, c), 3,11 (2H, m), 3,48 (2H, m), 3,55 (2H, m), 3,92 (2H, m), 4,60 (2H, c), 8,58 (1H, s), 8,66 (1H, s), 13,16 (1H, s).

Preparación 55

5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]carbonilamino-1-etil-3-(piracin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxamida

El compuesto del título de la Preparación 22 (174 mg, 0,75 mmol) se añadió al compuesto del título de la Preparación 54 (300 mg, 0,75 mmol) en piridina (6 ml), y la reacción se agitó a 60ºC durante 18 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró a presión reducida y se formó el azeótropo con tolueno. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de metanol:acetato de etilo:diclorometano (5:95:0 a 10:90:0 a 10:0:90) para dar el compuesto del título (170 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,04 (3H, t), 1,60 (6H, m), 2,41 (2H, c), 2,57 (4H, m), 3,14 (4H, m), 4,24 (2H, c), 4,80 (2H, c), 5,60 (1H, s), 8,45 (1H, s), 8,60 (1H, s), 8,72 (1H, s), 8,82 (1H, s), 9,57 (1H, s), 10,57 (1H, s), 11,48 (1H, s).

LRMS: m/z 558 (M+1)^{+}.

Preparación 56

5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]carbonilamino-1-n-propil-3-(piracin-2-il)-1H-pirazol-4-carboxamida

Obtenida (34%) a partir de los compuestos del título de las Preparaciones 23 y 54, usando el procedimiento descrito en la Preparación 55.

\delta (CDCl_{3}): 1,00 (6H, m), 1,60 (3H, t), 2,02 (2H, m), 2,41 (2H, c), 2,55 (4H, m), 3,10 (4H, m), 4,18 (2H, t), 4,80 (2H, c), 5,60 (1H, s), 8,46 (1H, s), 8,60 (1H, s), 8,75 (1H, s), 8,83 (1H, s), 9,55 (1H, s), 10,56 (1H, s), 11,45 (1H, s).

LRMS: m/z 572 (M+1)^{+}.

Preparación 57

5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]carbonilamino-1-etil-3-fenil-1H-pirazol-4-carboxamida

El compuesto del título de la Preparación 24 (200 mg, 0,9 mmol) se añadió a una suspensión del compuesto del título de la Preparación 54 (346 mg, 0,9 mmol) en piridina (6 ml) y la reacción se agitó a 60ºC durante 72 horas. La mezcla de reacción enfriada se concentró a presión reducida, se formó el azeótropo con tolueno, y el residuo se repartió entre acetato de etilo (30 ml) y agua (15 ml). Las fases se separaron, la fase orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de acetato de etilo:metanol (98:2 a 90:10) para dar el compuesto del título (70 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,01 (3H, t), 1,56 (6H, m), 2,40 (2H, m), 2,55 (4H, m), 3,13 (4H, m), 4,48 (2H, c), 4,75 (2H, c), 7,38 (1H, m), 7,43 (2H, m), 8,39 (2H, d), 8,66 (1H, s), 9,07 (1H, s), 10,78 (1H, s).

LRMS m/z: 556 (M+1)^{+}.

Preparación 58

3-[(benciloxi)metil]-5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]carbonilamino-1-etil-1H-pirazol-4-carbo- xamida

Una disolución del compuesto del título de la Preparación 54 (4,14 g, 10 mmol) en diclorometano (50 ml) se añadió gota a gota a una disolución enfriada en hielo del compuesto del título de la Preparación 18 (2,74 g, 10 mmol) y trietilamina (2,02 g, 20 mmol) en diclorometano (50 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, el residuo se repartió entre éter (50 ml) y una disolución de ácido cítrico 1 N (20 ml), y las fases se separaron. La fase orgánica se extrajo con ácido cítrico 1 N (2 x 20 ml) y las disoluciones acuosas se extrajeron con diclorometano (3 x 60 ml). Los extractos combinados de diclorometano se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 95:5), y a continuación se repitió usando acetato de etilo:metanol (100:0 a 85:15), para dar el compuesto del título como una goma clara (944 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,00 (3H, t), 1,46 (3H, t), 1,58 (3H, t), 2,39 (2H, c), 2,50 (4H, m), 3,04 (4H, m), 4,10 (2H, c), 4,53 (2H, s), 4,70 (2H, s), 4,78 (2H, c), 5,22 (1H, s), 7,29 (5H, m), 7,79 (1H, s), 8,65 (1H, s), 8,80 (1H, s), 11,04 (1H, s).

LRMS m/z: 600 (M+1)^{+}.

Preparación 59

6-{2-etoxi-5-[(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil]fenil}-3-(hidroximetil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimi- din-4-ona

Se añadió de forma fraccionada paladio sobre carbono al 10% (1,7 g) a una suspensión enfriada en hielo del compuesto del título del Ejemplo 9 (1,20 g, 2,07 mmol) en metanol (50 ml) y a continuación se añadió gota a gota ácido fórmico (5 ml). La mezcla se calentó a reflujo durante 6 horas, en atmósfera de nitrógeno, y a continuación se enfrió. Se añadió acetato de paladio (200 mg, 0,89 mmol), trifenilfosfina (460 mg, 1,7 mmol) y ácido fórmico (5 ml) y la mezcla se calentó a reflujo durante 8 horas más. La mezcla de reacción enfriada se filtró, el filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (40 ml) y una disolución de bicarbonato sódico saturado (15 ml). Las fases se separaron, la fase orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}), se evaporó a presión reducida y el residuo se trituró con éter, para dar el compuesto del título (240 mg).

Hallado: C, 53,66; H, 6,16; N, 16,79. C_{22}H_{30}N_{6}O_{5}S requiere C, 53,86; H, 6,17; N, 17,13%.

\delta (CDCl_{3}): 1,00 (3H, t), 1,65 (3H, t), 2,00 (2H, m), 2,25 (3H, s), 2,48 (4H, m), 3,10 (4H, m), 4,20 (2H, t), 4,40 (2H, c), 5,00 (2H, s), 5,50 (1H, s), 7,18 (1H, d), 7,86 (1H, d), 8,99 (1H, s), 10,82 (1H, s).

LRMS: m/z 491 (M+1)^{+}.

Preparación 60

6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-4-oxo-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-carbaldehído

Se añadió perrutenato de tetrapropilamonio (5 mg, 0,014 mmol) a una suspensión del compuesto del título de la Preparación 59 (130 mg, 0,26 mmol), tamices moleculares de 4 \ring{A} (150 mg) y N-óxido de N-metilmorfolina (50 mg, 0,4 mmol) en diclorometano (5 ml) y acetonitrilo (2 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas en atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se purificó directamente por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (99:1 a 94:6), para dar el compuesto del título (70 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,99 (3H, t), 1,66 (3H, t), 2,00 (2H, m), 2,25 (3H, s), 2,48 (4H, m), 3,10 (4H, m), 4,40 (2H, c), 4,73 (2H, t), 7,18 (1H, d), 7,88 (1H, d), 8,98 (1H, s), 10,46 (1H, s), 10,98 (1H, s).

LRMS: m/z 489 (M+1)^{+}.

Preparación 61

1-ciclopentil-5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]carbonilamino-3-etil-1H-pirazol-4-carboxamida

Se añadió N-etildiisopropilamina (410 mg, 3,16 mmol) a una suspensión del compuesto del título de la Preparación 53 (400 mg, 1,05 mmol) y 5-amino-1-ciclopentil-3-etil-4-pirazolcarboxamida (WO 9628448) (210 mg, 0,95 mmol) y cloruro de 2-cloro-1-metil piridinio (403 mg, 1,58 mmol) en diclorometano (5 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 horas. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (30 ml), se lavó consecutivamente con agua (10 ml), una disolución de bicarbonato sódico saturado (10 ml), y salmuera (10 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El aceite residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol:amoniaco 0,88 (90:10:0 a 90:10:1) y se repitió usando diclorometano:metanol:amoniaco 0,88 (100:0:1 a 94:4:1) para dar el compuesto del título (263 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,04 (3H, t), 1,33 (3H, t), 1,58 (3H, t), 1,65 (2H, m), 1,94 (2H, m), 2,10 (4H, m), 2,41 (2H, c), 2,54 (4H, m), 2,81 (2H, c), 3,10 (4H, m), 4,52 (1H, m), 4,79 (2H, c), 5,58 (2H, s), 8,69 (1H, s), 8,82 (1H, s), 10,45 (1H, s).

LRMS: m/z 548 (M+1)^{+}.

Síntesis de los compuestos de Fórmulas IA y IB

Ejemplo de referencia 1

6-[5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-1-n-propil-3-(piridin-2-il)metil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d] pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 37 (32 mg, 0,08 mmol), ácido clorosulfónico (140 mg, 1,2 mmol) y cloruro de tionilo (48 mg, 0,40 mmol) en diclorometano (0,5 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. Se añadió hielo (2 g), seguido de una disolución de N-etilpiperacina (570 mg, 5 mmol) en diclorometano (20 ml) y la reacción se agitó durante una hora más. La mezcla se echó en agua (20 ml), las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 20 ml). Las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 95:5) para dar el compuesto del título (42 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,84 (3H, t), 0,98 (3H, t), 1,16 (3H, t), 1,83 (2H, m), 2,00 (2H, m), 2,36 (2H, c), 2,48 (4H, m), 3,02 (4H, m), 4,20 (2H, t), 4,26 (2H, t), 4,63 (2H, s), 7,12 (2H, m), 7,38 (1H, d), 7,57 (1H, m), 7,80 (1H, d), 8,45 (1H, d), 8,93 (1H, s), 10,60 (1H, s).

LRMS: m/z 580 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 2

6-[5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-1-n-propil-3-(pirimidin-2-il)metil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenida como un sólido blanco (38%) a partir del compuesto del título de la Preparación 38 y N-metilpiperacina, usando un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 1, excepto que la purificación se llevó a cabo por trituración con éter.

Hallado: C, 54,14; H, 5,83; N, 18,61. C_{27}H_{34}N_{8}O_{4}S\cdot0,5CH_{2}Cl_{2} requiere C, 54,22; H, 5,79; N, 18,39%.

\delta (CDCl_{3}): 0,84 (3H, t), 1,14 (3H, t), 1,86 (2H, m), 1,99 (2H, m), 2,22 (3H, s), 2,45 (4H, m), 3,04 (4H, m), 4,15 (2H, t), 4,20 (2H, t), 4,84 (2H, s), 7,12 (2H, m), 7,80 (1H, d), 8,62 (2H, d), 8,96 (1H, s), 10,55 (1H, s).

LRMS: m/z 567 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 3

6-[5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-1-n-propil-3-(pirimidin-2-il)metil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4- d]pirimidin-4-ona

Obtenida como un sólido rosa pálido (45%) a partir del compuesto del título de la Preparación 38 y N-etilpiperacina, usando un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 1, excepto que la purificación se llevó a cabo por trituración con dietil éter.

Hallado: C, 55,26; H, 6,37; N, 18,46. C_{28}H_{36}N_{8}O_{4}S\cdot1,5H_{2}O requiere C, 55,34; H, 6,47; N, 18,44%.

\delta (CDCl_{3}): 0,84 (3H, t), 0,99 (3H, t), 1,14 (3H, t), 1,86 (2H, m), 1,98 (2H, m), 2,38 (2H, c), 2,48 (4H, m), 3,03 (4H, m), 4,14 (2H, t), 4,20 (2H, t), 4,84 (2H, s), 7,12 (2H, m), 7,81 (1H, d), 8,63 (2H, d), 8,94 (1H, s), 10,54 (1H,
s).

LRMS: m/z 581 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 4

3-bencil-6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió hidróxido potásico pulverizado (78 mg, 1,38 mmol) a una suspensión del compuesto del título de la Preparación 42 (254 mg, 0,46 mmol) en 3-metil-3-pentanol (5 ml), y la reacción se calentó a 110ºC durante 18 horas. La mezcla de reacción enfriada se repartió entre acetato de etilo (10 ml) y agua (10 ml), las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo adicional (2 x 10 ml). Las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}), y se evaporaron a presión reducida. El aceite residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol:amoniaco 0,88 (100:0:0 a 85:15:1) para dar el compuesto del título como una espuma blanca (23 mg).

Hallado: C, 60,44; H, 6,15; N, 14,92. C_{28}H_{34}N_{6}O_{4}S requiere C, 61,05; H, 6,18; N, 15,26%.

\delta (CDCl_{3}): 0,94 (3H, t), 1,65 (3H, t), 1,97 (2H, m), 2,26 (3H, s), 2,48 (4H, m), 3,08 (4H, m), 4,35 (6H, m), 7,18 (2H, m), 7,26 (2H, m), 7,47 (2H, m), 7,86 (1H, d), 8,82 (1H, s), 10,70 (1H, s).

LRMS: m/z 551 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 5

3-bencil-6-{2-etoxi-5-[4-(2-hidroxietil)piperacin-1-ilsulfonil]fenil}-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 43 (477 mg, 0,80 mmol) y t-butóxido potásico (313 mg, 2,79 mmol) en isopropanol (25 ml), se calentó a reflujo durante 18 horas, y a continuación se enfrió. Se añadió agua (50 ml), la mezcla se neutralizó con ácido clorhídrico 2 N y se concentró a presión reducida. Esta disolución se repartió entre acetato de etilo (50 ml) y una disolución de bicarbonato sódico (25 ml), las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 25 ml). Las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El aceite pardo residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 95:5), y se trituró con éter para dar el compuesto del título
(112 mg).

Hallado: C, 59,63; H, 6,22; N, 14,34. C_{29}H_{36}N_{6}O_{5}S requiere C, 59,98; H, 6,20; N, 14,49%.

\delta (CDCl_{3}): 0,95 (3H, t), 1,63 (3H, t), 1,96 (2H, m), 2,26 (1H, s), 2,55 (2H, t), 2,60 (4H, m), 3,09 (4H, m), 3,58 (2H, m), 4,35 (6H, m), 7,18 (2H, d), 7,26 (2H, m), 7,46 (2H, m), 7,87 (1H, d), 8,83 (1H, s), 10,70 (1H, s).

LRMS: m/z 581 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 6

6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-1-etil-3-fenil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 44 (180 mg, 0,34 mmol) y t-butóxido potásico (116 mg, 1,0 mmol) en etanol (10 ml) se calentó a reflujo durante 4 horas. La mezcla de reacción enfriada se evaporó a presión reducida y el residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 95:5) para dar el compuesto del título (110 mg).

Hallado: C, 58,74; H, 5,88; N, 15,66. C_{26}H_{30}N_{6}O_{4}S requiere C, 58,74; H, 5,88; N, 15,81%.

\delta (CDCl_{3}): 1,58 (3H, t), 1,69 (3H, t), 2,27 (3H, s), 2,52 (4H, m), 3,14 (4H, m), 4,40 (2H, c), 4,51 (4H, c), 7,19 (1H, d), 7,39 (1H, m), 7,45 (1H, m), 7,90 (1H, d), 8,42 (1H, s), 8,90 (1H, s), 10,88 (1H, s).

LRMS: m/z 523 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 7

1-etil-6-[5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-3-fenil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió una suspensión de sodio (25 mg, 1,1 mmol) en n-propanol (1 ml) al compuesto del título del Ejemplo 6 (80 mg, 0,15 mmol) en n-propanol (1 ml), y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 72 horas. Se añadió sodio (100 mg, 4,34 mmol) y n-propanol (5 ml) adicional de forma fraccionada durante 48 horas más, y a continuación la mezcla se enfrió y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía de capa fina preparativa en gel de sílice, usando diclorometano:metanol:amoniaco 0,88 (95:5:0,5) como eluyente para dar el compuesto del título (8 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,19 (3H, t), 1,58 (3H, t), 2,02 (2H, m), 2,28 (3H, s), 2,52 (4H, m), 3,13 (4H, m), 4,24 (2H, t), 4,48 (2H, c), 7,18 (1H, d), 7,37 (1H, m), 7,43 (2H, m), 7,86 (1H, d), 8,40 (2H, d), 8,86 (1H, s), 10,90 (1H, s).

LRMS: m/z 536 (M+1)^{+}.

\newpage

Ejemplo de referencia 8

3-(benciloxi)metil-6-[2-isopropoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d] pirimidin-4-ona

y

Ejemplo de referencia 9

3-(benciloxi)metil-6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 45 (1,80 g, 3,1 mmol) y t-butóxido potásico (1,4 g, 12,4 mmol) en isopropanol (40 ml) se calentó a reflujo durante 10 horas y se agitó durante 16 horas más a temperatura ambiente. Se añadió agua (5 ml), la mezcla se acidificó a pH 6 con ácido clorhídrico 2 N, y se concentró a presión reducida para eliminar el isopropanol y el precipitado resultante se filtró y se secó. Este sólido se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (99:1 a 92:8) y se repitió usando un gradiente de elución de diclorometano:isopropanol:amoniaco 0,88 (98:2:0,1 a 90:10:0,5) para dar, después de trituración con acetato de etilo, el compuesto del título del Ejemplo 8 (15 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,96 (3H, t), 1,59 (6H, d), 2,03 (2H, m), 2,48 (3H, s), 2,50 (4H, m), 3,10 (4H, m), 4,30 (2H, t), 4,62 (2H, s), 4,92 (1H, m), 5,05 (2H, s), 7,17 (1H, d), 7,34 (5H, m), 7,84 (1H, d), 9,00 (1H, s), 10,76 (1H, s).

LRMS: m/z 595 (M+1)^{+}.

y el compuesto del título del Ejemplo 9 (320 mg).

Hallado: C, 59,78; H, 6,21; N, 14,37. C_{29}H_{36}N_{6}O_{5}S requiere C, 59,98; H, 6,25; N, 14,47%.

\delta (CDCl_{3}): 0,97 (3H, t), 1,64 (3H, t), 2,02 (2H, m), 2,26 (3H, s), 2,48 (4H, m), 3,10 (4H, m), 4,30 (2H, t), 4,39 (2H, c), 4,61 (2H, s), 5,05 (2H, s), 7,17 (1H, d), 7,34 (5H, m), 7,82 (1H, d), 8,98 (1H, s), 10,64 (1H, s).

LRMS: m/z 581 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 10

6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-3-metil-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenida como un sólido grisáceo (43%) a partir del compuesto del título de la Preparación 46, usando un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 5, excepto que el compuesto del título se aisló por trituración con dietil éter.

\delta (CDCl_{3}): 0,95 (3H, t), 1,64 (3H, t), 1,97 (2H, m), 2,27 (3H, s), 2,50 (4H, m), 2,62 (3H, s), 3,12 (4H, m), 4,30 (2H, t), 4,40 (2H, c), 7,19 (1H, d), 7,89 (1H, d), 8,82 (1H, s), 10,68 (1H, s).

LRMS: m/z 475 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 11

6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-3-isopropil-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4- ona

Se añadió gota a gota una disolución del compuesto del título de la Preparación 40 (730 mg, 1,4 mmol) en diclorometano (3 ml) a una disolución del compuesto del título de la Preparación 20 (243 mg, 1,2 mmol) en piridina (10 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 5 días. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y se formó el azeótropo con tolueno. El sólido naranja residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (99:1 a 90:10), el producto se suspendió en diclorometano y la suspensión se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se repartió entre acetato de etilo (25 ml) y agua (10 ml), las fases se separaron, la fase orgánica se lavó con salmuera (10 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida, para dar el compuesto del título como una espuma color crema
(48 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,90 (3H, t), 1,38 (6H, d), 1,62 (3H, t), 1,89 (2H, m), 2,26 (3H, s), 2,48 (4H, m), 3,05 (4H, m), 3,26 (1H, m), 4,00 (2H, t), 4,42 (2H, c), 7,18 (1H, d), 7,92 (1H, d), 8,62 (1H, s), 10,22 (1H, s).

LRMS: m/z 521 (M+18)^{+}.

\newpage

Ejemplo de referencia 12

3-(ciclopropil)metil-6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió el compuesto del título de la Preparación 40 (490 mg, 1,4 mmol) a una disolución del compuesto del título de la Preparación 21 (250 mg, 1,13 mmol) en piridina (6 ml), y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, se formó el azeótropo con tolueno y el residuo se repartió entre diclorometano (40 ml) y una disolución de bicarbonato sódico (20 ml). Las fases se separaron, la fase orgánica se lavó con salmuera (20 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida para dar un aceite amarillo. Una mezcla de este intermedio carboxamida, y t-butóxido potásico (380 mg, 3,38 mmol) en isopropanol (5 ml) se calentó a reflujo durante 18 horas, y a continuación se enfrió. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, el residuo se repartió entre acetato de etilo (15 ml) y agua (15 ml) y las fases se separaron. La fase acuosa se neutralizó con ácido clorhídrico 2 N, se extrajo con acetato de etilo (3 x 15 ml), y estos extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 ml), se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El producto en bruto se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:isopropanol (99:1 a 90:10) para dar el compuesto del título (60 mg).

\delta (CDCl_{3}): 0,34 (2H, m), 0,46 (2H, m), 0,95 (3H, t), 1,30 (1H, m), 1,65 (3H, t), 1,98 (2H, m), 2,28 (3H, s), 2,51 (4H, m), 2,90 (2H, d), 3,10 (4H, m), 4,38 (4H, m), 7,18 (1H, d), 7,86 (1H, d), 8,83 (1H, s), 10,70 (1H, s).

LRMS: m/z 515 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 13

6-[2-etoxi-5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)fenil]-3-(morfolinometil)-1-n-propil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]piri- midin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 60 (70 mg, 0,14 mmol), morfolina (15 ml, 0,17 mmol), triacetoxiborohidruro sódico (43 mg, 0,20 mmol) y ácido acético (10 ml, 0,17 mmol) en diclorometano (2 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla de reacción se repartió entre diclorometano (10 ml) y una disolución de bicarbonato sódico diluido (10 ml), las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 10 ml). Las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (99:1 a 94:6) y se recristalizó en acetato de etilo, para dar el compuesto del título (30 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,00 (3H, t), 1,63 (3H, t), 2,05 (2H, m), 2,26 (3H, s), 2,48 (4H, m), 2,58 (4H, t), 3,09 (4H, m), 3,67 (4H, t), 4,00 (2H, s), 4,36 (4H, m), 7,16 (1H, d), 7,84 (1H, d), 9,00 (1H, s), 10,62 (1H, s).

LRMS: m/z 560 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 14

3-metil-6-[5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-1-(piridin-2-il)metil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 28 (85 mg, 0,23 mmol) en ácido clorosulfónico (264 mg, 2,3 mmol) y cloruro de tionilo (81 mg, 0,68 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La mezcla se enfrió en un baño de hielo, se añadió hielo (1 g), seguido de etanol (5 ml) y N-metilpiperacina (340 mg, 3,4 mmol) y la reacción se agitó durante 15 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se evaporó a presión reducida y el residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (98:2 a 92:8) para dar el compuesto del título (89 mg).

Hallado: C, 57,13; H, 5,81; N, 17,79. C_{26}H_{31}N_{7}O_{4}S\cdot0,5H_{2}O requiere C, 57,13; H, 5,90; N, 17,94%.

\delta (CDCl_{3}): 1,17 (3H, t), 2,02 (2H, m), 2,21 (3H, s), 2,42 (4H, m), 2,60 (3H, s), 3,02 (4H, m), 4,23 (2H, t), 5,62 (2H, s), 7,03 (1H, d), 7,16 (2H, m), 7,60 (1H, m), 7,82 (1H, d), 8,57 (1H, d), 8,75 (1H, s), 10,73 (1H, s).

LRMS: m/z 538 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 15

1-ciclopentil-3-etil-6-[5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4- ona

Se añadió de forma fraccionada 1-ciclopentil-3-etil-6-(2-n-propoxifenil)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona (WO 96/28448) (500 mg, 1,36 mmol) a ácido clorosulfónico (1,6 g, 13,6 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas. La reacción se echó en una mezcla de agua helada (30 ml) y diclorometano
(30 ml) con agitación, las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 30 ml). Las disoluciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 ml), se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron a presión reducida, para dar una espuma. Se añadió gota a gota N-etilpiperacina (108 mg, 0,95 mmol) a una disolución enfriada en hielo de este cloruro de sulfonilo intermedio en diclorometano (3 ml) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se diluyó con diclorometano (10 ml), se lavó consecutivamente con agua (5 ml), una disolución saturada de bicarbonato sódico (5 ml) y salmuera (5 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano:metanol (100:0 a 96:4) para dar el compuesto del título (81 mg).

Hallado: C, 59,30; H, 7,06; N, 15,48. C_{27}H_{38}N_{6}O_{4}S requiere C, 59,75; H, 7,06; N, 15,48%.

\delta (CDCl_{3}): 1,02 (3H, t), 1,19 (3H, t), 1,38 (3H, t), 1,75 (2H, m), 2,02 (4H, m), 2,16 (4H, m), 2,40 (2H, c), 2,54 (4H, m), 2,98 (2H, c), 3,10 (4H, m), 5,25 (2H, t), 5,18 (1H, m), 7,18 (1H, d), 7,86 (1H, d), 8,84 (1H, s), 10,70 (1H, s).

LRMS: m/z 543 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 16

3-metil-6-[5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-2-(piridin-2-il)metil-2,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenida (19%) a partir del compuesto del título de la Preparación 29, usando el procedimiento del Ejemplo 14.

\delta (CDCl_{3}): 1,14 (3H, t), 2,00 (2H, m), 2,22 (3H, s), 2,44 (4H, m), 2,72 (3H, s), 3,02 (4H, m), 4,22 (2H, t), 5,54 (2H, s), 7,11 (1H, d), 7,20 (2H, m), 7,62 (1H, m), 7,82 (1H, d), 8,55 (1H, d), 8,94 (1H, s), 10,52 (1H, s).

LRMS: m/z 538 (M+1)^{+}.

Ejemplo de referencia 17

3-metil-6-[5-(4-metilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-n-propoxifenil]-2-(pirimidin-2-il)metil-2,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenida (59%) a partir del compuesto del título de la Preparación 30, usando el procedimiento del Ejemplo 14.

Hallado: C, 53,65; H, 5,48; N, 20,63. C_{24}H_{28}N_{8}O_{4}S\cdot0,8H_{2}O requiere C, 53,48; H, 5,54; N, 20,79%.

\delta (CDCl_{3}): 1,22 (3H, t), 2,06 (2H, m), 2,27 (3H, s), 2,50 (4H, m), 3,10 (4H, m), 3,19 (3H, s), 4,30 (2H, t), 7,18 (1H, d), 7,38 (1H, m), 7,88 (1H, d), 8,90 (2H, d), 9,05 (1H, s).

LRMS: m/z 525 (M+1)^{+}.

Ejemplo 18 6-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]-1-etil-3-(piracin-2-il)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió t-butóxido potásico (103 mg, 0,9 mmol) a una suspensión del compuesto del título de la Preparación 55 (170 mg, 0,3 mmol) en etanol (5 ml) y la reacción se agitó a 100ºC en un recipiente sellado durante 5 horas. La mezcla de reacción enfriada se evaporó a presión reducida y el residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando diclorometano:metanol (85:15) como eluyente, para dar el compuesto del título como un sólido pardo (130 mg).

Hallado: C, 51,32; H, 5,31; N, 21,90. C_{24}H_{29}N_{9}O_{4}S\cdot1,4H_{2}O requiere C, 51,04; H, 5,67; N, 22,32%.

\delta (CDCl_{3}): 1,04 (3H, t), 1,62 (6H, m), 2,42 (2H, c), 2,59 (4H, m), 3,18 (4H, m), 4,61 (2H, c), 4,80 (2H, c), 8,61 (1H, s), 8,75 (2H, m), 9,13 (1H, s), 10,00 (1H, s), 10,92 (1H, s).

LRMS: m/z 540 (M+1)^{+}.

Ejemplo 19 6-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]-1-n-propil-3-(piracin-2-il)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenida (45%) a partir del compuesto del título de la Preparación 56, usando un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 18, pero usando acetato de etilo:metanol (90:10) como eluyente cromatográfico.

\delta (CDCl_{3}): 1,01 (6H, m), 1,62 (3H, t), 2,08 (2H, m), 2,43 (2H, c), 2,58 (4H, m), 3,17 (4H, m), 4,55 (2H, t), 4,81 (2H, c), 8,61 (1H, s), 8,75 (2H, m), 9,14 (1H, s), 9,99 (1H, s), 10,90 (1H, s).

LRMS: m/z 554 (M+1)^{+}.

Ejemplo 20 1-etil-6-[5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-(isopropoxi)piridin-3-il]-3-(piracin-2-il)-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título del Ejemplo 18 (80 mg, 0,15 mmol) y t-butóxido potásico (50 mg, 0,44 mmol) en isopropanol (4 ml) se calentó a reflujo durante 48 horas. La mezcla de reacción enfriada se evaporó a presión reducida y el sólido pardo residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando acetato de etilo:metanol (90:10) como eluyente, para dar el compuesto del título (30 mg).

Hallado: C, 53,22; H, 5,77; N, 21,60. C_{25}H_{31}N_{9}O_{4}S\cdot0,5H_{2}O\cdot0,2C_{2}H_{5}O_{2} CH_{3} requiere C, 53,40; H, 5,84; N, 21,72%.

\delta (CDCl_{3}): 1,04 (3H, t), 1,60 (9H, m), 2,43 (2H, c), 2,59 (4H, m), 3,18 (4H, m), 4,60 (2H, c), 5,76 (1H, m), 8,61 (1H, s), 8,74 (2H, m), 9,14 (1H, s), 9,99 (1H, s), 11,01 (1H, s).

LRMS: m/z 554 (M+1)^{+}.

Ejemplo 21 6-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]-1-etil-3-fenil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Obtenida (38%) a partir del compuesto del título de la Preparación 57, usando un procedimiento similar a aquel descrito en el Ejemplo 18, pero usando acetato de etilo:metanol (95:5) como eluyente cromatográfico.

\delta (CDCl_{3}): 1,01 (3H, t), 1,56 (6H, m), 2,40 (2H, c), 2,56 (4H, m), 3,13 (4H, m), 4,46 (2H, c), 4,76 (2H, c), 7,38 (1H, m), 7,43 (2H, m), 8,39 (2H, d), 8,66 (1H, s), 9,07 (1H, s), 10,78 (1H, s).

LRMS: m/z 539 (M+2)^{+}.

Ejemplo 22 1-etil-6-[5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)-2-(2-metoxietoxi)piridin-3-il]-3-fenil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla de bis(trimetilsilil)amida de potasio (359 mg, 1,8 mmol) en 2-metoxietanol (20 ml) se calentó a 90ºC durante 30 minutos, y a continuación se enfrió a temperatura ambiente. Se añadió el compuesto del título del Ejemplo 21 (200 mg, 0,36 mmol) y la reacción se calentó a reflujo durante 18 horas y se dejó enfriar. La mezcla se concentró a presión reducida, el residuo se repartió entre acetato de etilo (20 ml) y agua (20 ml) y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 ml), las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (Na_{2}SO_{4}), y se evaporaron a presión reducida. El residuo se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando diclorometano:metanol (97:3) como eluyente, para dar el compuesto del título (105 mg).

Hallado: C, 56,83; H, 5,88; N, 16,99. C_{27}H_{33}N_{7}O_{5}S requiere C, 57,13; H, 5,86; N, 17,27%.

\delta (CDCl_{3}): 1,04 (3H, t), 1,59 (3H, t), 2,42 (2H, c), 2,58 (4H, m), 3,17 (4H, m), 3,59 (3H, s), 3,88 (2H, t), 4,51 (2H, c), 7,39 (1H, m), 7,45 (2H, m), 8,40 (2H, m), 8,70 (1H, s), 9,04 (1H, s), 10,92 (1H, s).

LRMS: m/z 568 (M+1)^{+}.

Ejemplo 23 3-(benciloxi)metil-6-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]-1-etil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 58 (940 mg, 1,57 mmol) y etóxido sódico (272 mg, 4,0 mmol) en etanol (25 ml) se calentó a reflujo durante 8 horas. La mezcla de reacción enfriada se diluyó con agua (25 ml), y la mezcla se extrajo con diclorometano (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida, para dar el compuesto del título (767 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,00 (3H, t), 1,55 (6H, m), 2,39 (2H, c), 3,12 (4H, m), 4,40 (2H, c), 4,75 (4H, m), 4,85 (2H, s), 7,30 (3H, m), 7,40 (2H, m), 8,64 (1H, s), 9,04 (1H, s), 10,69 (1H, s).

LRMS: m/z 582 (M+1)^{+}.

Ejemplo 24 6-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]-1-etil-3-hidroximetil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Se añadió ácido fórmico (1,5 ml) a una mezcla del compuesto del título del Ejemplo 23 (750 mg, 1,3 mmol) y paladio sobre carbono al 10% (750 mg) en acetato de etilo (15 ml), y la reacción se agitó en atmósfera de nitrógeno a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla de reacción se filtró a través de Arbocel, el lecho del filtro se lavó con agua (30 ml) y acetato de etilo (30 ml), y el filtrado se basificó usando una disolución de hidróxido sódico 2 N. Las fases se separaron, la fase acuosa se extrajo con diclorometano (3 x 100 ml), y las disoluciones orgánicas combinadas se secaron (MgSO_{4}) y se evaporaron a presión reducida. El residuo se trituró con éter, para dar el compuesto del título como un sólido blanco (375 mg).

\delta (CDCl_{3}): 1,02 (3H, t), 1,54 (3H, t), 1,60 (3H, t), 2,42 (2H, c), 2,57 (4H, m), 3,16 (4H, m), 4,42 (2H, c), 4,60 (1H, t), 4,79 (2H, c), 4,92 (2H, d), 8,70 (1H, s), 9,08 (1H, s), 10,88 (1H, s).

LRMS: m/z 492 (M+1)^{+}.

Ejemplo 25 1-ciclopentil-6-[2-etoxi-5-(4-etilpiperacin-1-ilsulfonil)piridin-3-il]-3-etil-1,5-dihidro-4H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-ona

Una mezcla del compuesto del título de la Preparación 61 (253 mg, 0,46 mmol) y bis(trimetilsilil)amiduro potásico (110 mg, 0,55 mmol) en etanol (10 ml) se calentó en un recipiente sellado a 110ºC durante 18 horas, y a continuación se enfrió. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida, el residuo se disolvió en diclorometano (30 ml), la disolución se lavó con agua (20 ml), y el pH de la mezcla se ajustó a 8 usando ácido clorhídrico. Las fases se separaron, la fase orgánica se lavó con salmuera (10 ml), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó a presión reducida. El aceite residual se purificó por columna cromatográfica en gel de sílice, usando un gradiente de elución de diclorometano saturado con amoniaco 0,88:metanol (100:0 a 96,4:0,4), para dar el compuesto del título como una espuma blanca (210 mg).

Hallado: C, 56,51; H, 6,71; N, 18,16. C_{25}H_{35}N_{7}O_{4}S requiere C, 56,69; H, 6,66; N, 18,51%.

\delta (CDCl_{3}): 1,03 (3H, t), 1,38 (3H, t), 1,59 (3H, t), 1,75 (2H, m), 2,00 (2H, m), 2,16 (4H, m), 2,42 (2H, c), 2,57 (4H, m), 2,99 (2H, c), 3,15 (4H, m), 4,77 (2H, c), 5,19 (1H, m), 8,68 (1H, s), 9,07 (1H, s), 10,62 (1H, s).

LRMS: m/z 530 (M+1)^{+}.

Actividad biológica

Se encontró que los compuestos de la invención tienen actividades in vitro como inhibidores de la PDE 5 de GMPc con valores de CI_{50} inferiores a 100 nM aproximadamente.

La Tabla siguiente ilustra las actividades in vitro para una gama de compuestos de la invención como inhibidores de la PDE 5 de GMPc.

\dotable{\tabskip\tabcolsep\hfil#\hfil\+\hfil#\hfil\+\hfil#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 Ejemplo \+  \hskip2.5cm  \+ CI _{50}  (nM)\cr  18 \+ \+
8,10\cr  19 \+ \+ 7,67\cr  21 \+ \+
4,60\cr}

Claims

1. Un compuesto de fórmula IA, o de fórmula IB:

12

en las que:

R^{4} representa SO_{2}NR^{12}R^{13};

o una de sus sales o solvatos farmacéutica, o veterinariamente, aceptables.

2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que R^{3} representa un alquilo C_{1-4} lineal o ramificado, opcionalmente terminado en OH u O-metilo.

3. Un compuesto según la reivindicación 1 o reivindicación 2, en el que R^{1} representa etilo, n-propilo o ciclopentilo, pirimidin-2-ilo o -CH_{2}-(piridin-2-ilo).

4. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicacionesprecedentes, en el que R^{2} representa metilo, hidroximetileno, etilo, propilo o ciclopropilmetilo, -CH_{2}-(piridin-2-ilo), -CH_{2}-(pirimidin-2-ilo), -CH_{2}-(morfolinilo), -CH_{2}-(piracin-2-ilo), bencilo, -CH_{2}OCH_{2}-fenilo, fenilo o piracin-2-ilo.

5. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que R^{3} representa un alquilo C_{2-3} lineal o ramificado, opcionalmente terminado en OCH_{3}.

6. Un compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que R^{12} y R^{13}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, representan 4-R^{14}-piperacinilo, en la que R^{14} representa alquilo C_{1-3} opcionalmente terminado en OH.

7. Un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso como sustancia farmacéutica.

8. Un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso como medicamento para animales.

9. Una formulación que comprende un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 mezclado con un adyuvante, diluyente o vehículo farmacéutica o veterinariamente aceptable.

10. Una formulación según la reivindicación 9, que es una formulación farmacéutica.

11. Una formulación según la reivindicación 9, que es una formulación veterinaria.

12. El uso de un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento curativo o profiláctico de una afección médica para la cual se desea la inhibición de la PDE 5 de GMPc.

13. Uso según la reivindicación 12, en el que la afección es la disfunción eréctil masculina, disfunción sexual femenina, parto prematuro, dismenorrea, hiperplasia prostática benigna (BPH), obstrucción de la salida de la vejiga, incontinencia, angina variante estable e inestable (Prinzmetal), hipertensión, hipertensión pulmonar, insuficiencia cardiaca congestiva, ateroesclerosis, apoplejía, enfermedad vascular periférica, afecciones de permeabilidad de los vasos sanguíneos, asma crónica, bronquitis, asma alérgica, rinitis alérgica, glaucoma, una enfermedad caracterizada por trastornos de la motilidad del intestino, pre-eclampsia, síndrome de Kawasaki, tolerancia al nitrato, esclerosis múltiple, neuropatía diabética periférica, apoplejía, enfermedad de Alzheimer, insuficiencia respiratoria aguda, psoriasis, necrosis de la piel, metástasis cancerosa o calvicie.

14. Un procedimiento para la preparación de un compuesto de fórmula IA, o de fórmula IB, como se define en la reivindicación 1, que comprende:

(a) la ciclación de un compuesto correspondiente de fórmula IIA, o de IIB, respectivamente:

13

en las que R^{1}, R^{2}, R^{3} y R^{4} son como se define en la reivindicación 1;

(b) la ciclación de un compuesto correspondiente de fórmula VA, o de VB, respectivamente:

14

(c) hacer reaccionar un compuesto correspondiente de fórmula VIIA, o de VIIB, respectivamente:

15

en las que Y es halo y R^{1}, R^{2} y R^{3} son como se define en la reivindicación 1 con un compuesto de fórmula VIII:

VIIIR^{12}R^{13}NH

en la que R^{12} y R^{13} son como se define en la reivindicación 1;

(d) para los compuestos de fórmulas IA y IB, en las que R^{2} representa alquilo C_{1-4}, Hetalquilo C_{1-3} o arilalquilo C_{1-3}, hacer reaccionar un compuesto correspondiente de fórmula XVIA, o de fórmula XVIB, respectivamente:

16

en las que R^{1}, R^{3} y R^{4} son como se define en la reivindicación 1, con o bien un compuesto organometálico de fórmula R^{2a}M, en la que M representa Li o MgHal, Hal representa halo y R^{2a} representa un grupo que proporciona el grupo R^{2} pertinente tras la reacción con el grupo -C=O que está unido al anillo pirazol, seguido de la desoxigenación del alcohol secundario resultante, o por aminación reductora usando un compuesto básico que proporciona un grupo R^{2} tras la reacción con el grupo -C=O que está unido al anillo pirazol;

(e) para los compuestos de fórmulas IA y IB en las que R^{2} representa CH_{2}OH, la desprotección de un compuesto correspondiente de fórmula XVIIA, o de fórmula XVIIB, respectivamente:

17

en las que R^{1}, R^{3} y R^{4} son como se define en la reivindicación 1 y R^{15} representa un grupo protector alcohol.

(f) para los compuestos de fórmula IA o IB en las que R^{1} representa alquilo C_{2-5}, o Hetalquilo C_{1-3}, la alquilación de un compuesto correspondiente de fórmula IA, o de fórmula IB, respectivamente, en las que R^{1} representa H;

(g) la conversión, eliminación o introducción de un sustituyente sobre un grupo arilo, o un Het, en, o sobre la unidad piridinilo, o pirazolo, de un compuesto de fórmula IA o IB;

(h) la conversión de un grupo R^{3} a otro por intercambio de alcóxido;

(i) para los compuestos de fórmula IA o IB en los que R^{12} y R^{13}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, forman un grupo 4-R^{14}-piperacinilo en el cual R^{14} representa alquilo C_{1-6}, la alquilación de un compuesto correspondiente de fórmula IA o IB en las que R^{14} representa hidrógeno; o

(j) la desprotección de un derivado protegido de un compuesto de fórmula IA o de fórmula IB.

15. Un compuesto de fórmula IIA, o de fórmula IIB, como se define en la reivindicación 14.

16. Un compuesto de fórmula VA, o de fórmula VB, como se define en la reivindicación 14.

17. Un compuesto de fórmula VIIA, o de fórmula VIIB, como se define en la reivindicación 14.

18. Un compuesto de fórmula XVIA, o de fórmula XVIB, como se define en la reivindicación 14.