ES2246064T3 - Caja de cultivo de pocillos multiples. - Google Patents

Caja de cultivo de pocillos multiples.

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ES2246064T3
ES2246064T3 ES98306971T ES98306971T ES2246064T3 ES 2246064 T3 ES2246064 T3 ES 2246064T3 ES 98306971 T ES98306971 T ES 98306971T ES 98306971 T ES98306971 T ES 98306971T ES 2246064 T3 ES2246064 T3 ES 2246064T3
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Douglas P. Henderson
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Becton Dickinson and Co
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Becton Dickinson and Co
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    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
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    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02—Form or structure of the vessel
    • C12M23/12—Well or multiwell plates
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Abstract

SE PROPORCIONA UN CONJUNTO DE BANDEJA PARA CULTIVO DE POCILLOS MULTIPLES, QUE INCLUYE UN INSERTO QUE TIENE UNAS FILAS DE RECINTOS FRUSTOCONICOS Y UNA PLACA DE POCILLOS EN DONDE SE ENCUENTRAN SUSPENDIDOS LOS RECINTOS. EL INSERTO INCLUYE UNA PARED SUPERIOR CON UNA BRIDA PERIFERICA, SIENDO LOS RECINTOS INTEGRALES CON LA PARED SUPERIOR, Y EXTENDIENDOSE HACIA ABAJO A PARTIR DE LA MISMA. CADA RECINTO INCLUYE UNA ABERTURA RADIAL QUE SE EXTIENDE DENTRO DE LA PORCION SUPERIOR DEL RECINTO. EN LA PARED SUPERIOR DEL INSERTO SE FORMAN FILAS DE ABERTURAS, QUE SE UNEN RESPECTIVAMENTE A LAS ABERTURAS RADIALES DE LOS RECINTOS. LAS ABERTURAS PARA PIPETAS RELATIVAMENTE GRANDES SE FORMAN POR MEDIO DE LAS ABERTURAS ADJUNTAS. LA BANDEJA DE POCILLOS PUEDE INCLUIR FILAS DE POCILLOS CILINDRICOS. LOS RECINTOS SE COLOCAN DENTRO DE LOS POCILLOS Y SE ENCUENTRAN RADIALMENTE DESVIADOS CON RELACION A LOS MISMOS. LAS ABERTURAS SITUADAS EN EL INTERIOR DE LA PARED SUPERIOR DEL INSERTO COINCIDEN CON LOS POCILLOS CUANDO EL INSERTO SE MONTA SOBRE LA BANDEJA DE POCILLOS.

Description

Caja de cultivo de pocillos múltiples.
Antecedentes de la invención Campo de la invención
La invención se refiere a un aparato que es útil para cultivar y/o analizar materiales biológicos mediante la utilización de insertos incluyendo membranas microporosas y cavidades en las que están suspendidos dichos insertos.
Descripción de la técnica relacionada
Se han desarrollado conjuntos de varios tipos que incluyen insertos que tienen membranas microporosas y cavidades en las que están suspendidas las membranas. Tales conjuntos se han usado para cultivar células y/o analizar otros materiales biológicos. Las composiciones de las membranas microporosas se seleccionan según el uso previsto de los conjuntos de este tipo.
Los insertos de tales conjuntos se pueden construir individualmente, definiendo un recinto único que tiene una pared lateral sustancialmente impermeable y una pared inferior semipermeable. Las Patentes de Estados Unidos números 4.686.190, 4.871.674, 5.026.649, 5.366.893 y 5.534.227 describen insertos que cumplen esta descripción. Otros insertos incluyen una pluralidad de recintos unidos en o cerca de sus agujeros por una pared de conexión. Las Patentes de Estados Unidos números 4.407.943, 5.462.874 y 5.554.536 describen ejemplos de este tipo de inserto, así como la Publicación Internacional número WO 94/28111. La Patente de Estados Unidos número 5.487.872 describe una placa de cavidades incluyendo filas de cavidades cilíndricas.
Se reconoce desde hace mucho la necesidad de añadir o quitar fluido de las cavidades en las que se colocan los insertos antes descritos. Por consiguiente, muchas de las patentes describen características para que la pipeta pueda acceder a las cavidades sin desplazar los insertos.
Resumen de la invención
La invención se refiere a un conjunto de disco de cultivo y un inserto para uso en dicho conjunto. El conjunto incluye características que facilitan el acceso con pipeta a porciones seleccionadas del mismo, minimizando la posibilidad de contaminación, y permiten el uso de robótica al manejar componentes del conjunto.
Un conjunto de disco de cultivo según la invención incluye una placa de cavidades y un inserto. La placa de cavidades define una o varias cavidades. El inserto incluye una pared superior y una pluralidad de recintos acoplados a la pared superior. Cada recinto incluye un extremo superior que define un agujero superior, un extremo inferior que define un agujero inferior, una pared lateral que conecta los extremos superior e inferior, y una membrana semipermeable montada en el extremo inferior y cubriendo el agujero inferior. Se han previsto una pluralidad de agujeros de pared en la pared superior. Cada agujero de pared está contiguo a uno de los recintos. Cada recinto incluye un agujero radial que se extiende a través de la pared lateral y su extremo superior y es contiguo a uno de los agujeros de pared. Las porciones de las paredes laterales contiguas a los agujeros radiales son sustancialmente verticales con respecto a la pared superior del inserto. Los agujeros contiguos y las porciones laterales verticales de los recintos crean un espacio relativamente grande capaz de recibir una pipeta. El extremo de la pipeta evita preferiblemente el enganche de cualquier porción de las cavidades o recintos cuando se introduce a través de los agujeros contiguos.
La invención también facilita un inserto para un conjunto de disco de cultivo. El inserto incluye una pared superior que tiene al menos una fila de agujeros de pared. Una pluralidad de recintos están acoplados a la pared superior y contiguos respectivamente a los agujeros de pared. Cada uno de los recintos incluye un extremo superior que define un agujero superior, un extremo inferior que define un agujero inferior, y una pared lateral que conecta los extremos superior e inferior. Un agujero radial se extiende a través de cada pared lateral y una porción del extremo superior de cada recinto. Los agujeros radiales están contiguos a los respectivos agujeros de pared, definiendo por ello agujeros de pipeta relativamente grandes. Cada una de las paredes laterales de recinto incluye una porción sustancialmente vertical contigua al agujero radial y que se extiende hacia su extremo inferior. Cada una de las paredes laterales de recinto es preferiblemente generalmente frustocónica, y sus porciones sustancialmente verticales incluyen preferiblemente superficies exteriores sustancialmente planas.
Se facilita un conjunto de disco de cultivo que incluye una placa de cavidades, inserto y tapa. La placa de cavidades del conjunto incluye una pluralidad de cavidades, que son preferiblemente cilíndricas. El inserto incluye una pared superior, una pestaña periférica que se extiende hacia abajo de la pared superior, y una pluralidad de recintos acoplados a la pared superior. Cada uno de los recintos incluye un extremo superior que define un agujero superior, un extremo inferior que define un agujero inferior, una pared lateral que conecta los extremos superior e inferior, una membrana semipermeable montada en el extremo inferior y que cubre el agujero inferior, y un agujero radial que se extiende a través de la pared lateral y el extremo superior. Los agujeros radiales están contiguos a agujeros que se extienden a través de la pared superior del inserto, definiendo agujeros de pipeta relativamente grandes. Cada una de las paredes laterales incluye una porción sustancialmente vertical contigua al agujero radial y que se extiende hacia su extremo inferior. El inserto se puede montar en la placa de cavidades de tal manera que el recinto se coloque dentro de las cavidades, y preferiblemente en posiciones radialmente desviadas. La tapa incluye una pared superior y una pestaña periférica que cuelga hacia abajo. Se puede montar en el inserto de tal manera que la pared superior de la tapa enganche los extremos superiores de los recintos. La pestaña periférica de la tapa recubre la porción superior de la pestaña periférica del inserto cuando la tapa se aplica al inserto. La porción inferior de la pestaña periférica del inserto permanece expuesta y por lo tanto es accesible debajo de la pestaña periférica de la tapa. Por consiguiente, el inserto y la tapa se pueden manejar como una unidad, minimizando por ello la posibilidad de contaminar el contenido de los
recintos.
Breve descripción de los dibujos
La figura 1 es una vista en perspectiva desde arriba, despiezada, de un conjunto de disco de cultivo según la invención.
La figura 2 es una vista en perspectiva ampliada, desde arriba, de una porción de esquina del conjunto de disco de cultivo.
La figura 3 es una vista despiezada en sección del conjunto de disco de cultivo.
La figura 4 es una vista en alzado en sección del conjunto de disco de cultivo.
La figura 5 es una vista en sección ampliada de una porción de extremo del conjunto de disco de cultivo.
La figura 6 es una vista en sección ampliada de una porción de extremo del conjunto de disco de cultivo mostrando la introducción de una pipeta en una porción seleccionada.
La figura 7 es una vista en planta desde arriba del conjunto de disco de cultivo.
La figura 8 es una vista en planta desde arriba, ampliada, de una porción de esquina.
Y la figura 9 es una vista en perspectiva desde arriba de un conjunto de disco de cultivo según una realización alternativa de la invención.
Descripción detallada de la invención
Se facilita un conjunto de disco de cultivo 10 que incluye un inserto de cavidades 12 y una placa de cavidades 14 capaz de recibir el inserto. La figura 1 proporciona una vista en perspectiva despiezada de tal conjunto además de una tapa 16 que se puede montar en el inserto de cavidades 12. Una realización alternativa se representa en la figura 9, donde la placa de cavidades 14' define una cavidad o canal grande en contraposición a una pluralidad de cavidades. Este tipo de placa de cavidades se puede denominar una bandeja de alimentación.
El inserto 12 incluye una pared superior sustancialmente plana 18 y una pestaña periférica 20 que se extiende hacia abajo de la pared superior. La pared superior es conforme en configuración a la superficie superior de la placa de cavidades, que es rectangular en la realización preferida de la invención. La pestaña 20 forma un ángulo ligeramente oblicuo con la pared superior 18 para facilitar la aplicación del inserto a la placa de cavidades. La pestaña 20 tiene una superficie interior 20a y un borde inferior 20b; en una realización preferida el borde inferior 20b está ligeramente achaflanado o biselado hacia la superficie interior 20a de la pestaña 20.
Una pluralidad de recintos 22 están acoplados a la pared superior 18 y se extienden hacia abajo de la misma. Los recintos están dispuestos preferiblemente en filas como se representa en las figuras. Aunque el inserto representado en los dibujos incluye veinticuatro recintos, se contemplan otros insertos incluyendo seis, doce, cuarenta y ocho y noventa y seis recintos, que son entre los números estándar de tales recintos utilizados en el mercado. La separación entre recintos también es conforme preferiblemente a las normas comerciales. En la realización preferida de la invención, los recintos están formados integralmente con la pared superior de un material transparente tal como poliestireno. En cualquier caso, están acoplados preferiblemente de forma permanente a la pared superior, aunque puede hacer casos en los que sería deseable que los recintos fuesen extraíbles de la pared superior.
Cada recinto incluye un extremo superior 24 que define un agujero superior y un extremo inferior 26 que define un agujero inferior. Una pared lateral 28, que es preferiblemente generalmente frustocónica, conecta los extremos superior e inferior. Un agujero radial 30 se extiende a través de la pared lateral y una porción del extremo superior de cada recinto. La pared lateral incluye una porción plana sustancialmente vertical 32 contigua al agujero radial y que se extiende hacia el extremo inferior del recinto. Como se explica a continuación, esta porción sustancialmente vertical de la pared lateral 28 del recinto da lugar a un espacio relativamente grande entre un lado del recinto y una pared de cavidad que esté enfrente de esta porción de pared lateral.
El extremo inferior de cada recinto incluye una cara de extremo anular 34, como se representa en la figura 3. Una membrana microporosa semipermeable 36 está fijada a esta cara de extremo, como se representa en las figuras 4-6. La composición y el tamaño de poro de la membrana se determinan en gran parte por el uso previsto del conjunto de disco de cultivo, puesto que se conocen muchas membranas y están disponibles en el mercado. Tales membranas pueden ser hidrófobas o hidrófilas, y hechas de materiales tales como película inerte perforada, gel hidratado, celulosa, PET atacado con traza, poliacrilonitrilo o politetrafluoroetileno. Se podría emplear otras membranas microporosas a discreción del usuario final. La membrana se aplica a la cara de extremo 34 usando técnicas conocidas tal como termosellado o unión adhesiva. El conjunto 10 se puede suministrar a usuarios finales sin membranas para que puedan fijar las membranas particulares que prefieran.
Como se representa en las figuras 3-6, los extremos superiores de los recintos se extienden por encima de la superficie superior de la pared superior del inserto 12. Las caras de extremo superior de los recintos tienen sustancialmente forma de C debido a los agujeros radiales. Múltiples agujeros de pared 38 se extienden a través de la pared superior del inserto y respectivamente contiguos a los agujeros radiales 30 en los recintos. Los agujeros de pared son preferiblemente, aunque no necesariamente, rectangulares. Los agujeros de pared y agujeros radiales definen una pluralidad de agujeros de pipeta que permiten a la pipeta acceder a porciones seleccionadas de la placa de cavidades, como se representa en la figura 6.
La placa de cavidades 14 es de diseño convencional, y se hace preferiblemente de un material transparente tal como poliestireno. Incluye una pluralidad de cavidades 40 dispuestas en filas. Los números de cavidades y recintos en la placa de cavidades y el inserto no son críticos, pero son preferiblemente de igual número. Cada una de las cavidades es preferiblemente cilíndrica. Las cavidades se unen entre sí por porciones de nervio que se extienden entre sus paredes laterales. Además, cada una de las cavidades comparte una pared inferior común 42. La placa de cavidades 14 incluye además una pared superior 44 que es integral con las superficies externas de las cavidades situadas a lo largo de sus porciones periféricas. Una pared periférica 46 se extiende hacia abajo de la pared superior 44. Incluye una porción superior 46A y una porción inferior 46B, con un saliente o paso 48 que separa estas porciones. La porción superior de pared incluye un par de esquinas achaflanadas 50. Nervios 52 conectan porciones seleccionadas de las cavidades a la pared periférica 46. La placa de cavidades 14 y el inserto 12 se construyen de tal manera que el inserto solamente se pueda montar en la placa de cavidades en una dirección.
La tapa 16 es de construcción convencional, e incluye una pared superior rectangular 54 y una pestaña periférica 56 que cuelga hacia abajo y que se extiende a un ángulo ligeramente oblicuo con respecto a ella. Se hace de un material transparente tal como poliestireno. La superficie inferior de la pared superior de la tapa engancha los extremos superiores 24 de los recintos 22 cuando la tapa está aplicada al inserto 12.
Como se representa en la figura 9, el inserto 12 se puede montar en una placa 14' definiendo un canal o cavidad grande de manera que las membranas 36 se puedan sumergir en un baño común. La placa 14' incluye una pared periférica escalonada 58 y una pared inferior 60. Nervios 61 conectan las paredes inferior y periféricas, aumentando por lo tanto la resistencia de la placa. El número de nervios 61 se puede incrementar para aumentar la rigidez, como es conocido en la técnica. Además de proporcionar una rigidez añadida, la presencia de una pluralidad de nervios 61 proporciona un efecto deflector dentro de la placa 14', reduciendo el movimiento o la turbulencia producida dentro del medio como resultado del movimiento de la placa. La superficie superior de la pared periférica se puede enganchar con la superficie inferior de la pared superior 18 del inserto 12.
El conjunto 10 se puede suministrar a usuarios finales como se representa en las figuras 1-3 y 9. Alternativamente, los conjuntos se pueden fabricar y comercializar con membranas 36 ya fijadas a los recintos 22. Una vez que las membranas están fijadas, el inserto 12 está listo para uso. El inserto 12 se monta en la placa de cavidades 14 de tal manera que la superficie inferior de la pared superior 18 enganche las porciones de borde de las cavidades 40, y se hacen contactos puntuales entre la pared lateral 28 de cada recinto y el borde interno del borde superior de cada cavidad 40. Las membranas están suspendidas encima de las superficies inferiores de las cavidades, como se representa en las figuras 4-5, cuando el inserto está montado correctamente. Las membranas deberán estar de uno a tres milímetros encima de la superficie superior de la pared inferior 42. La pestaña periférica 20 del inserto 12 recubre la porción superior 46A de la pestaña de la placa de cavidades, y se suspende encima del paso 48. Cada recinto 22 está desviado radialmente con respecto a la cavidad en la que se coloca, produciendo espacio relativamente grandes entre los recintos y las porciones opuestas de las cavidades. Los agujeros radiales están contiguos a estos espacios relativamente grandes. Además, estos espacios se amplían más por las configuraciones irregulares de los recintos, en particular las superficies planas 32 que los bordean. Los agujeros de pared 38 en la pared superior 18 del inserto están colocados directamente encima de los espacios entre los recintos y las cavidades. Como se representa en la figura 6, las posiciones desviadas de las cavidades combinadas con las superficies planas de los recintos y los agujeros contiguos radiales y agujeros de pared facilitan en gran medida el acceso a las porciones inferiores de las cavidades 40 con una pipeta (representada en líneas de trazos). La tapa 16 está montada en el inserto 12 y engancha los rebordes en forma de C de los recintos. Por consiguiente, se minimiza la evaporación de las cavidades y la exposición a contaminantes soportados en el aire, como polvo o bacterias. Como se representa en la figura 4, la pestaña periférica 56 de la tapa se extiende solamente parcialmente sobre la pestaña periférica 20 del inserto 12. Esta característica es importante porque permite extraer la tapa y el inserto y volver a aplicarlos a la placa de cavidades como una unidad, reduciendo por ello la posibilidad de contaminación. Esto se puede llevar a cabo manualmente o con robots.
Dado que cada recinto 22 del inserto 12 está desviado radialmente con respecto a la cavidad dentro de la placa de cavidades 14 en la que se coloca, se produce cierta acción de mecha entre la pared lateral 28 del recinto 22 y la cavidad 40 de la placa de cavidades 14; por lo tanto, se prefiere que la pared lateral exterior 28 cerca del extremo inferior 26 tenga una pluralidad de aros concéntricos 26a en la pared lateral 28; estos aros concéntricos 26a inhiben la acción mecha del medio entre la pared lateral 28 del inserto 12 y la cavidad 40 de la placa de cavidades 14, véase la figura 2.
El conjunto de la figura 9 se puede emplear Para los procedimientos o pruebas que requieran inmersión de las membranas en un baño común. Cuando están montadas en la placa de cavidades 14' representada en esta figura, las membranas fijadas a los recintos del inserto 12 estarán suspendidas encima de la pared inferior 60 de la placa de cavidades. En ambas realizaciones de la invención, se puede observar los experimentos sin quitar la tapa ni otros componentes puesto que todos son sustancialmente transparentes.
Aunque se ha descrito aquí realizaciones ilustrativas de la presente invención con referencia a los dibujos anexos, se ha de entender que la invención no se limita a las realizaciones exactas.

Claims (10)

1. Un conjunto de disco de cultivo incluyendo:
una placa de cavidades que define al menos una cavidad;
un inserto (12) incluyendo una pared superior (18) y una pluralidad de recintos (22) acoplados a dicha pared superior, incluyendo cada uno de dichos recintos un extremo superior (24) que define un agujero superior, un extremo inferior (26) que define un agujero inferior, una pared lateral (28) que conecta dichos extremos superior e inferior, una membrana semipermeable montada en dicho extremo inferior y cubriendo dicho agujero inferior, una pluralidad de agujeros de pared (38) en dicha pared superior, estando contiguo cada uno de dichos agujeros de pared a uno de dichos recintos, incluyendo cada uno de dichos recintos un agujero radial (30) que se extiende a través de dicha pared lateral y dicho extremo superior, incluyendo cada una de dichas paredes laterales una porción sustancialmente vertical (32) contigua a dicho agujero radial y que se extiende hacia dicho extremo inferior, estando contiguos dichos agujeros radiales a uno de dichos agujeros de pared y definiendo con ellos una pluralidad de agujeros de pipeta, pudiendo montarse dicho inserto en dicha placa de cavidades de tal manera que al menos uno de dichos recintos esté colocado dentro de dicha cavidad, y además, donde dicha placa de cavidades incluye una pluralidad de cavidades sustancialmente cilíndricas (40), pudiendo montarse dicho inserto en dicha placa de cavidades de tal manera que cada uno de dichos recintos esté colocado dentro de una de dichas cavidades y radialmente desviado con respecto a dicha cavidad, y dichos agujeros de pared están en correspondencia con dichas cavidades.
2. Un conjunto de disco de cultivo como se describe en la reivindicación 1, donde dichas paredes laterales de dichos recintos son generalmente frustocónicas, incluyendo dichas porciones verticales de dichas paredes laterales superficies exteriores sustancialmente planas.
3. Un conjunto de disco de cultivo como se describe en la reivindicación 1, incluyendo una tapa (16) montable en dicho inserto, incluyendo dicho inserto una pestaña periférica (56) que se extiende hacia abajo de dicha pared superior, incluyendo dicha tapa una pestaña periférica de menor altura que dicha pestaña periférica de dicho inserto, pudiendo colocarse dicha pestaña periférica de dicha tapa alrededor de una porción superior de dicha pestaña periférica de dicho inserto.
4. Un conjunto de disco de cultivo como se describe en la reivindicación 3, donde dicha placa de cavidades incluye una pared periférica (46) incluyendo una porción inferior (46B), una porción superior (46A), y un paso (48) formado entre dichas porciones superior e inferior, pudiendo montarse dicho inserto en dicha placa de cavidades de tal manera que dicha pestaña periférica de dicho inserto se suspenda encima de dicho paso.
5. Un conjunto de disco de cultivo como se describe en la reivindicación 1, donde dicha placa de cavidades incluye una pluralidad de filas de cavidades sustancialmente cilíndricas, pudiendo montarse dicho inserto en dicha placa de cavidades de tal manera que cada uno de dichos recintos esté colocado dentro de una de dichas cavidades y radialmente desviado con respecto a dicha cavidad, y dichos agujeros de pared están en correspondencia con dichas cavidades.
6. Un inserto (12) para un conjunto de disco de cultivo, incluyendo:
una pared superior incluyendo al menos una fila de agujeros de pared (38) y
una pluralidad de recintos acoplados a dicha pared superior y respectivamente contiguos a dichos agujeros de pared, incluyendo cada uno de dichos recintos un extremo superior que define un agujero superior, un extremo inferior que define un agujero inferior, una pared lateral que conecta dichos extremos superior e inferior, un agujero radial (30) que se extienden a través de dicha pared lateral y una porción de dicho extremo superior, estando contiguo cada uno de dichos agujeros radiales a uno de dichos agujeros de pared, incluyendo cada una de dichas paredes laterales de dichos recintos una porción sustancialmente vertical contigua a dicho agujero radial y que se extiende hacia dicho extremo inferior.
7. Un inserto como se describe en la reivindicación 6, donde cada una de dichas paredes laterales es generalmente frustocónica, y donde cada uno de dichos recintos incluye una membrana microporosa fijada a dicho extremo inferior de los mismos y cubriendo dicho agujero inferior.
8. Un inserto como se describe en la reivindicación 6, incluyendo una pestaña periférica que se extiende hacia abajo de dicha pared superior.
9. Un conjunto de disco de cultivo incluyendo:
una placa de cavidades que define una pluralidad de cavidades;
un inserto (12) incluyendo una pared superior (18), una pestaña periférica (20) que se extiende hacia abajo de dicha pared superior, incluyendo dicha pestaña periférica una porción superior y una porción inferior, y una pluralidad de recintos acoplados a dicha pared superior, incluyendo cada uno de dichos recintos un extremo superior (24) que define un agujero superior, un extremo inferior (26) que define un agujero inferior, una pared lateral que conecta dichos extremos superior e inferior, una membrana semipermeable montada en dicho extremo inferior y cubriendo dicho agujero inferior, una pluralidad de agujeros de pared (38) en dicha pared superior, estando contiguo cada uno de dichos agujeros de pared a uno de dichos recintos, incluyendo cada uno de dichos recintos un agujero radial (30) que se extiende a través de dicha pared lateral y dicho extremo superior, incluyendo cada una de dichas paredes laterales una porción sustancialmente vertical contigua a dicho agujero radial y que se extiende hacia dicho extremo inferior, estando contiguo cada uno de dichos agujeros radiales a uno de dichos agujeros de pared y definiendo con ellos una pluralidad de agujeros de pipeta, pudiendo montarse dicho inserto en dicha placa de cavidades de tal manera que dichos recintos estén colocados respectivamente dentro y desviados radialmente con respecto a dichas cavidades, y una tapa incluyendo una pared superior y una pestaña periférica que cuelga hacia abajo, pudiendo montarse dicha tapa en dicho inserto de tal manera que dicha pared superior de dicha tapa enganche dichos extremos superiores de dichos recintos, dicha pestaña periférica de dicha tapa recubre dicha porción superior de dicha pestaña periférica de dicho inserto y dicha porción inferior de dicha pestaña periférica de dicho inserto es accesible debajo de dicha pestaña periférica de dicha tapa, pudiendo por ello extraer dicho inserto y tapa o aplicarlo a dicha placa de cavidades como una unidad.
10. Un conjunto de disco de cultivo como se describe en la reivindicación 9, donde cada una de dichas cavidades es sustancialmente cilíndrica, cada uno de dichos recintos es sustancialmente frustocónico, cada una de dichas paredes laterales de dichos recintos incluye una porción vertical sustancialmente plana contigua a dicho agujero radial y que se extiende hacia dicho extremo inferior.
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