ES2246155B1 - Nuevas espiropiperidilrifamicinas. - Google Patents

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Abstract

Nuevas espiropiperidilrifamicinas.
Objeto
Nuevos derivados de rifamicina de la familia de las espiropiperidilrifamicinas que exhiben una alta actividad antibiótica.
Descripción
Los derivados de espiropiperidilrifamicinas descritos se obtienen por reacción de condensación entre N-sustituidas-4-piperidonas y 3-amino-4-deoxo-4-iminorifamicina S en condiciones suaves y con buenos rendimientos.
Las espiropiperidil rifamicinas objeto preparadas se caracterizan por presentar los siguientes grupos funcionales
R^{1} es hidrógeno ó alquilo
R^{2} es hidroxialquilo, fenilo ó arilo sustituido
R^{3} es fenilo ó arilo sustituido
R^{4} es hidrógeno, alquilo, alilo u homo alilo.
Las nuevas espiropiperidilrifamicinas presentan in vitro una potente actividad antimicobacteriana general superior a rifampicina-rifabutina en la cepa de referencia Mycobacterium tuberculosis ATCC 37837. Del mismo modo destaca el comportamiento in vitro de las espiropiperidilrifamicinas frente cepas de Mycobacterium avium-intracellulare complex analizadas

Description

Nuevas espiropiperidilrifamicinas.
Campo temático
La presente invención está relacionada con unos nuevos derivados de rifamicina de la familia de las espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1) que exhiben una alta actividad antibiótica.
1
Los derivados de espiropiperidilrifamicinas descritos en la presente invención se obtienen por reacción de condensación entre N-sustituidas-4-piperidonas de fórmula (2) y 3-amino-4-deoxo-4-iminorifamicina S de fórmula (3). en un procedimiento que tiene lugar en condiciones suaves y con buenos rendimientos.
Estado de la técnica previo
Las rifamicinas se aislaron por primera vez en 1959 de cultivos de Nocardia Mediterranei como una mezcla compleja de rifamicinas A-E (P. Sensi, P. Margalith, M. Timbal, II Fármaco, Ed. Sc. 1959, 14, 146-147). Pertenecen a la familia de las ansamicinas, antibióticos de gran interés frente a bacterias como Gram-positivas y micobacterias como M. tuberculosis, también poseen actividad frente a la DNA-dependiente RNA polimerasa bacteriana [(a) C. Bartolucci, L. Cellai, P. Di Fillipo, A. Segre, M. Brufani, L. Filocamo, A. Bianco, M. Guiso, V. Brizzi, A. Benedetto, A. Di Caro, G. Elia, Fármaco 1992, 47, 1367. (b) C. Bartolucci, L. Cellai, P. Di Fillipo, M.A. Iannelli, A. Segre, M. Brufani, L. Filocamo, A. Bianco, M. Guiso, V. Brizzi, A. Benedetto, A. Di Caro, Pharm. Pharmacol. Lett, 1993, 3,1.].
La estructura de las rifamicinas fue determinada por degradación química de la rifamicina S, por estudios espectroscópicos de RMN [(a) R. Cricchio, P. Antonini, G. C. Lancini, G. Tamborín, R. J. White, E. Martinelli, Tetrahedron 1980, 36, 1415; (b) M. Taguchi, Y. Yamane, N. Aikawa, G. Tsukamoto, Chem. Pharm. Bull. 1988, 36 4157; (c) L. Santos, M.A. Medeiros, S. Santos, M.C. Costa, R. Tavares, M.J.M. Curto, J. Mol. Structure 2001, 61, 563-564] y por estudios cristalográficos de rayos X [(a) J-C. Colleter, M. Gadret, M. Goursolle, J-M. Leger, C. R. Acad. Sc. Paris Ser. C 1974, 279, 1115; (b)L. Cellai, S. Cerrini, A. Segre, M. Brufani, W. Fedeli, A. Vaciago, J. Org. Chem. 1982, 47, 2652; (c) C. Bartolucci, L. Cellai, S. Cerrini, D. Lamba, A. Segre, V. Brizzi, M. Brufani, Helv Chim. Acta 1990, 73 185]. Presentan como característica estructural común una cadena alifática de 17 átomos de carbono, llamada ansa, que conecta dos posiciones no adyacentes de un núcleo aromático plano cromóforo de naftohidroquinona, unido por un grupo amida.
La potente actividad de estos compuestos es consecuencia de la inhibición específica de la RNA polimerasa bacteriana mediante la formación de un complejo 1:1 muy estable entre el fármaco y el enzima, como se ha puesto de manifiesto en una investigación sobre la rifampicina. Se ha propuesto un modelo en el cuál el enzima envuelve al fármaco por la cara hidrófila y por debajo del núcleo aromático, de tal forma que las posiciones C_{3} y C_{4} no participan en la unión. Los estudios de relación estructura-actividad llevados a cabo con distintas rifamicinas concluyen que para poder mantener la actividad inhibitoria son necesarios los siguientes elementos estructurales: grupo hidroxilo o cetona en C_{1} y C_{8}, grupos hidroxilos en posición C_{21} y C_{23}, una relación espacial determinada entre los grupos funcionales y un puente ansa (P. Sensi, P. Appl. Chem. 1975, 41 15-29).
Se han preparado cientos de rifamicinas semisintéticas en un intento de obtener sustancias con mejores actividades biológicas; la mayor parte de ellas presentan modificaciones en las posiciones C_{4} (rifamida) y C_{3} (rifampicina). Estos cambios estructurales no afectan a la acción de la sustancia sobre el enzima de una forma critica, sino que modifican otros parámetros importantes como la permeabilidad de las membranas celulares, propiedades farmacocinéticas y resorción (S. Lancini, W. Zanichelli, D. Perlmann, Ed. Academia Press, N.Y. 1977, 531-600).
Las espiropiperidilrifamicinas [4-deoxo-3,4-(2-espiro(4-piperidil)rifamicina S], de fórmula general 1, son una clase de antibióticos semisintéticos derivados de las rifamicinas en los cuales los carbonos C_{3} y C_{4} están incorporados a un anillo de imidazol que a su vez posee una piperidina espirocíclica [(a) A. Sanfilippo, C. Della Bruna, L. Marsili, E. Morvillo, C.R. Pasqualucci, G. Schioppacasi, D. Ungheri, J. Antib. 1980, 33, 1193; (b) L. Marsili, E. Morvillo, C.R. Pasqualucci, A. Vigevani, B. Gioia, G. Schioppacasi, G. Orondo, J. Antib. 1981, 34, 1033]. El átomo de nitrógeno del anillo de la piperidina puede poseer diversos sustituyentes (R^{4}= restos alquilo lineales y ramificados, alquilos funcionalizados, bencilo, acetilo y etoxicarbonilo) [(a) L. Marsili, V. Rosetti, C.R. Pasqualucci, U.S. Patent 4,086,225, 1978; (b) L. Marsili, V. Rosetti, C.R. Pasqualucci, German Patent Appl. 2,825,445, 1979.]. Entre éstas espiropiperidilrifamicinas, la rifabutina (R{1}=R^{2}=R^{3}=H y R^{4}= ^{i}Bu) (L. Marsili, V. Rosetti, C.R. Pasqualucci, U.S. Patent 4,219,478, 1980); se ha empleado con fines terapéuticos como una multidroga para el tratamiento de la tuberculosis y contra las infecciones MAC (Mycobacterium Avium-Mycobacterium intracellulare Complex) en pacientes del SIDA.
De acuerdo con todo lo anterior el objetivo de ésta invención es la síntesis de nuevos derivados estructurales de espiropiperidilrifamicinas que posean mayor actividad biológica que los existentes en la actualidad.
Descripción detallada de la invención
La figura 1 representa el objeto de la presente invención que consiste en la obtención en un paso de las espiropiperidilrifamicinas (RFA), de fórmula general (1), por una reacción de condensación entre las N-sustituidas-4-piperidonas, de formula general (2), [(a) J. Barluenga, F. Aznar, M-P. Cabal, C. Valdés, J. Org. Chem. 1993, 58, 3391; (b) J. Barluenga, F. Aznar, C. Valdés, C. Ribas, J. Org. Chem. 1998, 63, 3918; (c) A-B. García, C. Valdés, M-P. Cabal, Tetrah. Letter 2004, 45, 4357] y el intermedio 3-amino-4-deoxo-4-iminorifamicina S de fórmula (3).
2
La síntesis del intermedio de fórmula (3) a partir de la Rifamycin S se ha descrito previamente por diferentes procedimientos: L. Marsili, V. Rosseti, C.R. Pasqualucci; U.S. Patent 4,017,481, 1977 and German Patent Apl. 2,825, 445, 1979.
Las 4-piperidonas de fórmula 2, empleadas en ésta invención, son compuestos disustituidos o trisustituidos de acuerdo con la siguiente tabla
TABLA 1 4-piperidonas de fórmula (2), empleadas en ésta invención
3
4
Los derivados de espiropiperidil rifamicinas (1) objeto de la presente invención se caracterizan por presentar los siguientes grupos funcionales
R^{1} es hidrógeno ó alquilo
R^{2} es hidroxialquilo, fenilo ó arilo sustituido en las posiciones 2 ó 3, ó 4 o disustituido 3,4
R^{3} es fenilo ó arilo sustituido en las posiciones 2 o 3, ó 4 ó disustituido 3,4
R^{4} es hidrógeno, alquilo, alilo u horno alilo.
Las espiropiperidilrifamicinas de fórmula 1, objeto de ésta invención, se representan en la siguiente tabla
5
TABLA 2 Las espiropiperidilrifamicinas (RFA) de fórmula (1), objeto de esta invención
6
El procedimiento de síntesis de los derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), objeto de la presente invención, se caracteriza por la reacción entre el intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S y las 4-piperidonas disustituidas ó trisustituidas en un disolvente no halogenado, y en presencia de una base La reacción que se lleva a cabo preferentemente a reflujo, se monitoriza hasta la desaparición del intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S.
El procedimiento de síntesis de derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), objeto de la presente invención, se caracteriza por la reacción entre el intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S y las 4-piperidonas disustituidas ó trisustituidas utilizando de forma preferente en un éter cíclico (THF) como disolvente.
El procedimiento de síntesis de derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), objeto de la presente invención, se caracteriza por la reacción entre el intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S y las 4-piperidonas disustituidas ó trisustituidas en presencia de acetato amónico como base preferida. La reacción que se lleva a cabo preferentemente a reflujo, se monitoriza hasta la desaparición del intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S.
El procedimiento de síntesis de derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), objeto de la presente invención, se caracteriza por la reacción entre el intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S y las 4-piperidonas disustituidas ó trisustituidas se lleva a cabo preferentemente a reflujo. se monitoriza hasta la desaparición del intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S.
El procedimiento de síntesis de derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), objeto de la presente invención, se caracteriza por la reacción entre el intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S y las 4-piperidonas disustituidas ó trisustituidas se monitoriza por HPLC hasta la desaparición del intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S.
Los derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), objeto de la presente invención, se purifican del crudo de reacción obtenido y se aislan mediante técnica como cristalización ó liofilización.
La naturaleza básica de los derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), objeto de la presente invención permite su aislamiento en forma de sus sales galénicamente aceptables.
El procedimiento de síntesis de derivados de espiropiperidilrifamicinas, de fórmula general (1), da lugar a la formación de un nuevo centro estereogénico en el átomo de carbono espiránico C-1'. Los nuevos análogos preparados de ésta forma constituyen el primer ejemplo conocido hasta el momento, en el que se emplean 4-aminopiperidonas enantiomericamente puras en la reacción de condensación con el intermedio 3-amino-4-iminorifamicina S, así como piperidonas sustituidas en las posiciones 2,3 y 6 del anillo de la piperidina.
La reacción de condensación se llevó a cabo con las enantiomericamente trisustituídas 4-piperidonas (-)-(2R,3S,
6S)-2-hidroximetil-3-metil-6-fenil-4-piperidona (2a) y (-)-(2R,3S,6S)-2-hidroximetil-3-metil-6-p-metoxifenil-4-piperidona) (2b) y con las meso-2,6-disustituidas-4-piperidonas (2e-q). En todos los casos se obtienen las correspondientes espiropiperidilrifamicinas (1) o RFA como una mezcla de diastereoisómeros en proporciones que varían de (80:20) a (90:10), según se ha determinado por HPLC. La mezcla de diastereoisómeros se han podido separar y aislar mediante TLC preparativa. Los productos aislados presenta un aspecto de sólidos de un color rojo burdeos a violeta, solubles en la mayoría de los disolventes orgánicos e insolubles en agua.
Figura 2
Estructura de los dos diastereoisómeros de fórmula general 1
7
8
Estudios exhaustivos 2D de ^{1}H y ^{13}C-RMN, basado en sus espectros de gHSQC y gHMBC, han sido necesarios para poder asignar todas las señales de la molécula, así como la configuración del nuevo centro estereogénico, el carbono espiránico C-1' (E. Rubio, I. Merino, A-B. García, M-P. Cabal, C. Ribas, M. Bayod-Jasanada, trabajo en preparación).
Los derivados de espiropiperidilrifamicinas descritos en la presente invención, presentan una notable actividad biológica.
La tuberculosis multirresistente se define como aquella tuberculosis que está ocasionada por cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes simultáneamente al menos a isoniacida y rifampicina. Su incidencia se ha incrementado en los últimos años de manera alarmante en numerosas regiones a lo largo del mundo. La importancia de este problema queda patente en la decisión tomada por la OMS en 1994 de poner en marcha el plan, actualmente vigente (Guidelines for surveillance of drug resistance in tuberculosis WHO/TB/2003.320-WHO/CDS/RMD/2003.3), para el control y vigilancia a nivel mundial de la tuberculosis multirresistente. Se han planteado diferentes estrategias para hacer frente a este grave problema que amenaza la salud mundial. Entre ellas está el desarrollo de nuevos fármacos que permitan combatir con eficacia este tipo de cepas. Conviene recordar que los fármacos para el tratamiento de la tuberculosis se dividen en "drogas de primera línea" y "drogas de segunda línea" términos que aluden indirectamente a la mayor efectividad de los primeros, y que resultan imprescindibles en cualquier régimen terapéutico para garantizar la curación de la tuberculosis. Solamente 4 fármacos integran este grupo (isoniacida, rifampicina, pirazinamida, etambutol) el resto de fármacos con actividad antimicobacteriana actualmente disponibles se engloban dentro de las "drogas de segunda línea". Resulta pues vital desarrollar nuevos fármacos que permitan reforzar o mejorar esa "primera línea" terapéutica. Para el tratamiento de la tuberculosis son necesarias las combinaciones de fármacos durante largos periodos de tiempo. Actualmente, el tratamiento de elección tiene una duración de 6 meses y contempla la asociación de isoniacida + rifampicina + pirazinamida durante 2 meses seguidos de isoniacida + rifampicina 4 meses más.
En el estudio llevado a cabo destaca el comportamiento de los análogos analizados que evidenciaron in vitro una potente actividad antimicobacteriana general (CIM < 0,1 \mug/ml), incluso superior a rifampicina-rifabutina en la cepa de referencia Mycobacterium tuberculosis ATCC 37837 que acredita un alto grado de resistencia a la rifampicina.
Por otro lado, relacionado con la epidemia del SIDA y debido al uso generalizado en la medicina moderna de fármacos antitumorales e inmunosupresores, se han incrementado de las infecciones producidas por las denominadas "micobacterias atípicas" (también conocidas como "micobacterias ambientales oportunistas" o como "micobacterias no-tuberculosas"). Este término engloba a un buen número de especies diferentes de las que se desconoce tanto su modo de transmisión como sus mecanismos de resistencia a los antimicrobianos. El hecho patente es que se comportan como microorganismos habitualmente resistentes a los fármacos con actividad antimicobacteriana y suponen una seria amenaza para el tipo de pacientes comentado previamente. De las numerosas especies aisladas destacan por su frecuencia: Mycobacterium avium-intracellulare complex que produce serias infecciones diseminadas y que produce patología pulmonar indistinguible de la que produce M tuberculosis. Mycobacterium avium-intracellulare complex se comporta como multirresistente a fármacos de "primera" y "segunda línea"; en todos los regímenes terapéuticos se contempla la rifabutina como tratamiento de elección, asociado a un macrólido y a una quinolona. La elevada toxicidad in vivo representa un inconveniente habitual para la rifabutina. Mycobacterium kansasii suele tener un patrón de sensibilidad mucho más variable, si bien suele exhibir resistencia a isoniacida y etambutol.
En el estudio realizado destaca el comportamiento in vitro de los análogos frente a las 5 cepas de Mycobacterium avium-intracellulare complex analizadas, siendo las cinco cepas sensibles al menos a 3 de los análogos estudiados, por el contrario todas ellas manifestaron resistencia a rifampicina-rifabutina (CIM >1 \mu g/ml). En cuanto a las 4 cepas de Mycobacterium kansasii todos los análogos tuvieron un comportamiento similar a rifampicina-rifabutina.
En la Tabla 3 de la página siguiente se representan los resultados obtenido en el estudio de actividad biológica de las nuevas espiropiperidinilrifamicinas (RFA)
Las entradas 1-5 muestran los resultados obtenidos obtenidos frente a: cepas de colección (cada una resistente a uno de los fármacos comerciales ensayados: pirazinamida 1 isoniazida IZ, etambutol EB, rifampicina RI y 2 thiophene carboxylic acid hydrazide TCH, este último se utiliza como control al ser todos los Mycobacterium resistentes a él.
Las entradas 6-10: muestran los resultados obtenidos obtenidos frente 52 cepas ensayadas, clasificaras e función de la resistencia observada frente a los fármacos comerciales.
Las entradas 11 y 12 muestran los resultados obtenidos obtenidos frente: 9 cepas Mycobacterium atípicas.
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(Tabla pasa a página siguiente)
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Ejemplos Espectroscopia de RMN
Los espectros de resonancia magnética nuclear y los estudios de correlación bidimensionales se llevaron a cabo en un Bruker AV-400 operando a una frecuencia de 400.13 y 100.61 MHz para ^{1}H y ^{13}C respectivamente, empleando una sonda reversa QXI ^{1}H/^{13}C/^{15}N/^{31}P de 5 mm incluyendo un z-gradient coil. Las muestras preparadas contenían entre 30-50 mg de compuesto, se empleó benceno deuterado (C_{6}D_{6}), excepto en el caso del compuesto 1 RFA-1m en el que se ha empleado cloroformo deuterado (CDCl_{13}) como disolvente. Los desplazamientos químicos están expresados en ppm (partes por millón) y están referidos a la señal residual del disolvente (\delta 7,16 para ^{1}H y de 128,39 para ^{13}C).
Espectrometría de masas
Los espectros de masas de alta resolución se llevaron a cabo en un Finnigan-Matt 95, utilizando procedimientos de impacto electrónico, electro spray positivo (ES pos.) y FAB^{+}.
Puntos de fusión
Los puntos de fusión no han sido corregidos y se midieron en un aparato Büchi-Tottoli.
TLC
La cromatografía de capa fina se realizó sobre placas de silica gel (Merck 60 G). Para la cromatografía en columna se empleó gel de sílice 60 (230-240 mesh) como fase estacionaria. La cromatografía preparativa se llevó a cabo utilizando placas de vidrio (20 x 20 cm) de gel de sílice (Merck 60 F_{254}).
HPLC
En el caso de los productos 1 RFA-1 y 1 RFA-2, los crudos de las reacciones se purificaron mediante ésta técnica empleando un aparato Waters LC Module I plus, a temperatura ambiente, utilizando un detector V-UV Photodiode-Array y una columna de fase reversa (Kromasil 100 C8 5 \mum 25x 1.0). La fase móvil empleada fue una mezcla 1:1 de acetonitrilo : tampón de fosfatos, (NH_{4})H_{2}PO_{4} (0,05 M) a pH 6,8 y flujo de 5,5 ml/min.
Método general para la preparación de los derivados 1 RFA-1 y 1 RFA-2
Se disuelven 100 mg de piperidona (2a-b), en 15 ml de tetrahidrofurano (THF) a temperatura ambiente, a continuación se adicionan 2 equivalentes de acetato amónico y un equivalente del intermedio 3A-4I-rifamicina S (3). La mezcla de reacción se agita a reflujo durante 24 horas. Transcurrido ese tiempo se deja que alcance la temperatura ambiente y se adicionan 0.5 equivalentes más del intermedio 3A-4I-rifamicina S (3) y la mezcla se deja agitar a reflujo durante 24 horas más. Transcurrido ese tiempo se deja que la mezcla alcance temperatura ambiente y se adiciona dietil éter (30 ml), se filtra sobre celita y se lava de nuevo con dietil éter (2 x 15 ml). La fase orgánica se lava con una disolución tampón (pH 7,6), de (NH_{4})H_{2}PO_{4} 0.05 M (3 x 15 ml), se seca con sulfato sódico anhidro y se concentra a sequedad. El sólido obtenido es una mezcla formada principalmente por el exceso del intermedio 3A-4I-rifamicina S (3) y los nuevos derivados, los cuales al lavar con ácido acético al 4% (se lava tantas veces como sea necesario, de modo que por TLC no aparezcan productos violetas) pasan a la fase acuosa en forma de acetatos mientras que el precursor se mantiene en la fase etérea. La fase acuosa violeta se extrae con cloroformo, dejando tiempos de decantación largos. La capa orgánica así obtenida, se lava con la disolución tampón mencionada anteriormente (porciones de 30 ml) hasta que las aguas de lavado tengan un pH neutro. La fase orgánica se seca con sulfato de sodio anhidro y se filtra. Los disolventes se evaporan a presión reducida y se obtiene un residuo que corresponde principalmente a la mezcla de diastereoisómeros (90:10), los cuales se separan mediante HPLC empleando como eluyente una mezcla tampón fosfatos: acetonitrilo 1:1 a pH 6,8. Los productos se aislan por extracción con cloroformo (CHCl_{3}), secado sobre sulfato de sodio anhidro, filtrado y evaporación de las fracciones cromatográficas seleccionadas. Los productos se presentan como sólidos violetas.
El producto se aisla por liofilización , extracción y evaporación o cristalización de las fracciones cromatográficas seleccionadas
Ejemplo 1 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-espiro(6-fenil-2-hidroximetil-3-metil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1 RFA-1M)
P.f.: 152-55ºC
UV (\lambda = 254 nm): 243,1; 278,1; 321,1.
HRMS (EI): 910,4371 (calculado para C_{50}H_{62}N_{4}O_{12}: 910, 4364)
TLC: Rf: 0,20 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1). 
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Ejemplo 2 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-espiro(6-fenil-2-hidroximetil-3-metil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1 RFA-1m)
P.f.: 159-62ºC
UV (\lambda, = 254 mn): 240,1; 278,1; 317,1.
HRMS (EI): 910,4388 (calculado para C_{50}H_{62}N_{4}O_{12}: 910, 4364)
TLC: Rf: 0,39 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1). 
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Ejemplo 3 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-espiro(2-hidroximetil-3-metil-6-p-metoxifenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-2M)
P.f.: 171-74ºC
UV (\lambda, = 254 nm): 242,1; 278,1; 320,1.
HRMS (EI): 940,4474 (calculado para C_{51}H_{64}N_{4}O_{13}: 940, 4470)
TLC: Rf: 0,33 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 4 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-espiro(2-hidroximetil-3-metil-6-p-metoxifenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-2m)
P.f.: 168-72ºC
UV (\lambda = 254 nm): 241,1; 278,1; 319,1.
HRMS (FAB^{+}): 940,4469 (calculado para C_{51}H_{64}N_{4}O_{13}: 940, 4470)
TLC: Rf: 0,35 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1).
Método general para la preparación de los derivados 1RFA(3-17)
Se disuelven 100 mg de 4-piperidona (2c-q) en 15 ml de THF. Se adiciona 1 equivalente del intermedio 3A-4I-rifamicina S (3), seguido de 2 equivalentes de acetato amónico. La reacción se calienta a reflujo y se monitoriza por TLC y HPLC hasta la desaparición de los productos de partida (1-6 horas). Se deja que la mezcla alcance temperatura ambiente y se añaden 30 ml de éter, dejando que la disolución agite 15 min. La mezcla de reacción se extrae, lavando la capa orgánica tres veces con una disolución tampón de (NH_{4})H_{2}PO_{4} (pH 7.6). La capa orgánica se seca con Na_{2}SO_{4} anhidro, se filtra y los disolventes se eliminan a presión reducida obteniéndose un sólido de color rosa-violeta formado principalmente por la mezcla de los dos diastereoisómeros buscados, cuya proporción se obtiene por HPLC (mezclas de acetonitrilo-agua) en fase reversa. La purificación de los dos diastereoisómeros se lleva a cabo por TLC preparativa empleando como eluyentes mezclas de: tolueno:acetato de étilo:metanol/6:1:1. Los dos diastereoisómeros (compuestos violetas) separados en la placa se desprenden del soporte de vidrio con la ayuda de una espátula y se disuelven en cloroformo, la gel de sílice se filtra y los disolventes se elimina a presión reducida, obteniéndose los dos diastereoisómeros (M/m) como sólidos violetas. En el caso de que los diastereoisómeros no se separen bien es necesario una segunda purificación por TLC preparativa empleando como eluyente mezclas de hexano:THF:trietilamina/5:4:1.
El producto se aisla por liofilización , extracción y evaporación o cristalización de las fracciones cromatográficas seleccionadas.
Ejemplo 5 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-espiro(2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-3M)
P.f.: 164-66ºC (desc.)
UV (\lambda = 254 nm): 240; 280; 319.
HIRMS (ESI pos): 943,4469 (calculado para C_{54}H_{62}N_{4}O_{11}: 943, 4488)
Anal. Elemental: calculado (%) para C_{54}H_{62}N_{4}O_{11}: C 68,77; H 6,63; N 5,94;
encontrado: C 68,47; H 6,59; N 6,22.
HPLC: t = 11,2 min, (\diameter = 1 ml/min ; Acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,52 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,33 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 6 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-espiro(2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-3m)
UV (\lambda = 254 nm): 240; 281; 319.
HRMS (ESI pos): 943,4469 (calculado para C_{54}H_{62}N_{4}O_{11}: 943, 4488)
Anal. Elemental: calculado (%) para C_{54}H_{62}N_{4}O_{11}: C 68,77; H 6,63; N 5,94;
encontrado: C 68,63; H 6,69; N 5,99.
HPLC: t = 9,6 min,(\diameter = 1 ml/min ; Acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,56 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,23 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 7 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro[2,6-bis(4-metoxifenil)-4-piperidil]-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-4M)
P.f.: 166-68ºC (desc.).
HRMS (ESI pos): 1003,4706 (calculado para C_{56}H_{66}N_{4}O_{13}: 1003,4699)
Anal. Elemental: calculado (%) para C_{56}H_{66}N_{4}O_{13}: C 67,05; H 6,63; N 5,59;
encontrado: C 66,87; H 6,43; N 5,48.
HPLC: t = 8,2 min; (\diameter = 1 ml/min ; Acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,49 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,25 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 8 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro [2,6-bis(4-meto)dfenil)-4-piperidil]-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-4m)
P.f.: 173-75ºC (desc.).
HRMS (ESI pos): 1003,4691 (calculado para C_{56}H_{66}N_{4}O_{13}: 1003,4699)
Anal. Elemental: calculado (%) para C_{56}H_{66}N_{4}O_{13}: C 67,05; H 6,63; N 5,59;
encontrado: C 66,92; H 6,71; N 5,20.
HPLC: t = 7,2 min; (\diameter = 1 ml/min ; Acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,54 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,18 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 9 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro[2,6-bis(4-fluorofenil)-4-piperidil]-2,5-dihidro-1H-imidado]rifamicina S (1RFA-5M)
P.f.: 172-75ºC (desc.).
HRMS (ESI pos): 979,4292 (calculado para C_{54}H_{60}F_{2}N_{4}O_{11}: 979,4299)
Anal. Elemental: calculado (%) para C_{54}H_{60}F_{2}N_{4}O_{11}: C 66,24; H 6,18; N 5,72;
encontrado: C 66,15; H 6,16; N 5,47.
HPLC: t = 10 min; (\diameter = 1 ml/min; Acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,55 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,30 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1).
Ejemplo 10 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro[2,6-bis(4-fluorofenil)-4-piperidil]-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-5m)
P.f.: 145ºC (desc.).
HRMS (ESI pos): 979,4274 (calculado para C_{54}H_{60}F_{2}N_{4}O_{11}: 979,4299)
Anal. Elemental: calculado (%) para C_{54}H_{60}F_{2}N_{4}O_{11}: C 66,24; H 6,18; N 5,72;
encontrado: C 66,43; H 6,53; N 5,33.
HPLC: t = 10,9 min; (\diameter = 1 ml/min; Acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,59 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,19 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1).
Ejemplo 11 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro[2,6-bis(2-yodofenil)-4-piperidil]-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-6M)
P.f.: 137-39ºC.
UV (\lambda = 254 nm): 227, 278, 320.
HRMS (ESI pos): 1195,2430 (calculado para C_{54}H_{60}I_{2}N_{4}O_{11}:1195,2421)
Anal. elemental: calculado (%) para C_{54}H_{60}I_{2}N_{4}O_{11}: C 54,28; H 5,06; N 4,69;
encontrado: C 54,01; H 5,12; N 4,76.
HPLC: t = 20,1 min; (\diameter = 1 ml/min; Acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,55 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,30 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 12 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro[2,6-bis(2-yodofenil)-4-piperidil]-2,5-dihidro-1H-imidazo]-rifamicina S (1RFA-6m)
UV (\lambda = 254 nm): 225, 278, 321.
HPLC: t = 28,7 min; (\diameter = 1 ml/min; Acetonitrilo:agua/65:35). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 13 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-7M)
P.f: 175-77ºC.
UV (\lambda = 254 nm) 240; 280; 319.
HRMS (ESI pos): 983,4778 (calculado para C_{57}H_{66}N_{4}O_{11}: 983,4801)
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{66}N_{4}O_{11}. C 69,63; H 6,77; N 5,70;
encontrado: C 69,54; H 6,89; N 5,93.
HPLC: t = 42,7 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,55 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,32 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 14 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-alil-2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]-rifamicina S (1RFA-7m)
UV \lambda = 254 nm): 240; 280,5; 318,5.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{66}N_{4}O_{11}: C 69,63; H 6,77; N 5,70;
encontrado: C 69,32; H 7,09; N 6,08.
HPLC: t = 45 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,54 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 15 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(4-metoxifenil)-4-piperidil)-2,5-) dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-8M)
UV (\lambda = 254 nm): 228, 277, 320
Anal. elemental: calculado (%) para C_{59}H_{70}N_{4}O_{13}: C 67,93; H 6,76; N 5,37;
encontrado: C 67,75; H 6,58; N 5,34.
HPLC: t = 9,3 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15)
Ejemplo 16 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(4-metoxifenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-8m).
UV (\lambda = 254 nm): 227; 277; 321.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{59}H_{70}N_{4}O_{13}: C 67,93; H 6,76; N 5,37;
encontrado: C 68,13; H 6,83; N 5,12.
HPLC t = 8,0 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 17 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(3,4-dimetoxifenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-9M)
HPLC: t = 4,9 min; (\diameter= 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 18 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(3,4-dimetoxifenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-9m)
HPLC: t = 3,2 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15) 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 19 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(4-fluorofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-10M)
P.f.: 139-41ºC.
UV (\lambda = 254 nm): 239; 279; 319.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}F_{2}N_{4}O_{11}: C 67,18; H 6,33; N 5,50;
encontrado: C 67,00; H 6,44; N 5,71.
HPLC: t = 5,7 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 20 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(4-fluorofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-10m)
UV (\lambda= 254 nm): 238; 279; 317.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}F_{2}N_{4}O_{11}: C 67,18; H 6,33; N 5,50;
encontrado: C 67,41; H 6,22; N 5,54.
HPLC: t = 4,9 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 21 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(4-clorofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-11M)
UV (\lambda = 254 nm): 220; 279; 319.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}Cl_{2}N_{4}O_{11}: C 65,07; H 6,13; N 5,33;
encontrado: C 65,37; H 6,04; N 5,28.
HPLC: t = 8,6 min, (\diameter = 1; acetonitrilo:agua/85:15)
Ejemplo 22 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(4-clorofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-11m)
UV (\lambda = 254 nm): 220; 279,5; 318,5.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}C_{12}N_{4}O_{11}: C 65,07; H 6,13; N 5,33;
encontrado: C 65,24; H 6,14; N 5,47.
HPLC: t = 7,4 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 23 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(2-bromofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-12M)
P.f.: 187-89ºC.
HRMS (ESI pos): 1139,3022 (calculado para C_{57}H_{64}Br_{2}N_{4}O_{11}: 1139,3011)
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}Br_{2}N_{4}O_{11}: C 60,00; H 5,65; N 4,91;
encontrado: C 60,34; H 5,33; N 4,80:
HPLC t = 7,8 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15) 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 24 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(2-bromofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-12m)
HRMS (ESI pos): 1139,2980 (calculado para C_{57}H_{64}Br_{2}N_{4}O_{11}: 1139,3011)
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}Br_{2}N_{4}O_{11}: C 60,00; H 5,65; N 4,91;
encontrado: C 60,24; H 5,65; N 4,79.
HPLC: t = 8,9 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15).
TLC: Rf: 0,60 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,29 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 25 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(3-bromofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]-rifamicina S (1RFA-13M).
UV (\lambda = 254 nm): 238; 277; 320.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}Br_{2}N_{4}O_{11}: C 60,00; H 5,65; N 4,91;
encontrado: C 60,15; H 5,58; N 4,93.
HPLC: t = 11,7 min; (0 = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 26 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(3-bromofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]-rifamicina S (1RFA-13m)
UV (\lambda, = 254 nm): 239; 277,5; 319.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}Br_{2}N{4}O_{11}: C 60,00; H 5,65; N 4,91;
encontrado: C 60,05; H 5,79; N 4,68.
HPLC t = 9,7 min, (\diameter= 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15).
Ejemplo 27 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(2-yodofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]-rifamicina S (1RFA-14M)
P.f.: 163-64ºC (dese.)
UV (\lambda = 254 nm): 215; 278; 318.
HRMS (ESI pos): 235,2716 (calculado para C_{57}H_{64}I_{2}N_{4}O_{11}: 1235,2734)
Anal. elemental: calculado (%) para C_{57}H_{64}I_{2}N_{4}O_{11}. C 55,44; H 5,22; N 4,54;
encontrado: C 55,05; H 5,19; N 4,15.
HPLC: t = 1.0,0 min; ( \diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15)
TLC: Rf: 0,53 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,28 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 28 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-alil-2,6-bis(2-yodofenil)-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-14m)
P.f.: 149-51ºC (desc.)
UV (\lambda254 nm): 214,5; 280; 320.
HRMS (ESI pos): 1235,2701 (calculado para C_{57}H_{64}I_{2}N_{4}O_{11}: 1235,2734)
Anal. elemental calculado (%) para C_{57}H_{64}N_{4}O_{11}: C 55,44; H 5,22; N 4,54;
encontrado: C 55,06; H 5,03; N 4,16.
HPLC t = 13,0 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,60 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,32 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 29 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-homoalil-2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-15M)
HRMS (ESI pos): 997,4953 (calculado para C_{58}H_{68}N_{4}O_{11}: 997,4957)
Anal. elemental: calculado (%) para C_{58}H_{68}N_{4}O_{11}: C 69,86; H 6,87; N 5,62;
encontrado: C 69,73; H 6,92; N 5,71.
HPLC t = 29,3 min, (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/65:35).
TLC: Rf: 0,56 (tolueno:metanol:acetato de etilo 6:1:1); 0,36 (hexano:THF:trietilamina 5:4:1). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 30 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-homoalil-2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-15m)
HPLC t = 27,0 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/65:35). 
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 31 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2R)-2-spiro(N-butil-2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-16M)
UV (\lambda = 254 nm): 240, 278, 320.
Anal. elemental: calculado (%) para C_{58}H_{70}N_{4}O_{11}: C 69,72; H 7,06; N 5,61;
encontrado: C 69,76; H 7,36; N 5,47.
HPLC: t = 5,3 min, (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/85:15).
Ejemplo 32 Preparación de 4-deoxo-3,4-[(2S)-2-spiro(N-butil-2,6-difenil-4-piperidil)-2,5-dihidro-1H-imidazo]rifamicina S (1RFA-16m)
UV (\lambda = 254 nm): 239, 278, 320.
HPLC: t = 4,7 min; (\diameter = 1 ml/min; acetonitrilo:agua/65:35).
Los Datos de RMN de los derivado de espiropiperidilrifamicinas (RFA) sintetizados se resumen en las tablas 4 a 29.

Claims (30)

1. Un producto derivado de espiropiperidilrifamicinas,de fórmula general (1) donde
R^{1}
es hidrógeno o alquilo
R^{2}
es hidroxialquilo, fenilo o arilo sustituido en las posiciones 2 o 3, o 4 o disustituido 3,4
R^{3}
es fenilo o arilo sustituido en las posiciones 2 ó 3, o 4 ó disustituido 3,4
R^{4}
es hidrógeno, alquilo, alilo homo alilo o benzilo
10
2. Un producto, de acuerdo con la reivindicación 1, donde cuando R^{2} y R^{3} son aril sustituidos los radicales presentes comprenden halógeno o alcoxi.
3. Un producto, de acuerdo con la reivindicación 2, dónde el grupo alcoxi es metoxi.
4. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es metilo
R^{2}
es hidroximetilo
R^{3}
es fenilo
R^{4}
es hidrógeno
5. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es metilo
R^{2}
es hidroximetilo
R^{3}
es 4-metoxifenilo
R^{4}
es hidrógeno
6. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1} y R^{4} son hidrógeno
R^{2} y R^{3} son fenilo
7. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1} y R^{4} son hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 4-metoxifenilo
8. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1} y R^{4} son hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 4-fluorofenilo
9. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1} y R^{4} son hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 2-iodofenilo
10. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son fenilo
R^{4}
es alilo
11. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 4-metoxifenilo
R^{4}
es alilo
12. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 3,4-dimetoxifenilo
R^{4}
es alilo
13. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 4, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 4-fluorofenilo
R^{4}
es alilo
14. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 4-clorofenilo
R^{4}
es alilo
15. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 2-bromofenilo
R^{4}
es alilo
16. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 3-bromofenilo
R^{4}
es alilo
17. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son 2-iodofenilo
R^{4}
es alilo
18. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son fenilo
R^{4}
es homoalilo
19. Un producto, de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 3, donde
R^{1}
es hidrógeno
R^{2} y R^{3} son fenilo
R^{4}
es butilo
20. Los polimorfos hidratados cristalinos de los productos descritos en las reivindicaciones 1 a 19.
21. Las sales farmacéuticamente aceptables de los productos descritos en las reivindicaciones 1 a 19.
22. Un procedimiento para la preparación de los derivados de espiropiperidilrifamicina descritos en las reivindicaciones 1 a 19, caracterizado por la reacción entre la 3-Amino-4-iminorifamicina S y las 4-piperidonas disustituidas en un disolvente no halogenado y presencia de una base.
23. Un procedimiento para la preparación de los derivados de espiropiperidilrifamicina descritos en las reivindicaciones 1 a 19, caracterizado por la reacción entre la 3-Amino-4-iminorifamicina S y las 4-piperidonas trisustituidas en un disolvente no halogenado y presencia de una base.
24. Un procedimiento, según las reivindicaciones 22 y 23, donde el disolvente es un éter cíclico
25. Un procedimiento, según las reivindicaciones 22 y 23, donde el éter cíclico es Tetrahidrofurano (THF).
26. Un procedimiento según las reivindicaciones 22 y 23, donde la base es acetato amónico.
27. Un procedimiento, según las reivindicaciones 22 y 23, donde el proceso se realiza a reflujo.
28. Un procedimiento para la preparación de las sales farmacéuticamente aceptables y los hidratos de los derivados de espiropiperidilrifamicina descritos en las reivindicaciones 1 a 19.
29. Una composición farmacéutica comprendiendo a un derivado de espiropiperidilrifamicina descrito en las reivindicaciones 1 a 19 y uno o mas excipientes farmacéuticamente aceptables.
30. Uso de los productos definidos en la reivindicación 29 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de infecciones micobacterianas.
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