ES2255538T3 - Utilizacion de una fraccion de leche de equido seleccionada entre leche descremada, lactoruero y caseinato de sodio que presenta una actividad antiinflamatoria. - Google Patents
Utilizacion de una fraccion de leche de equido seleccionada entre leche descremada, lactoruero y caseinato de sodio que presenta una actividad antiinflamatoria.Info
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Abstract
Utilización de una fracción de leche de équido seleccionada de entre la leche descremada, el lactosuero y el caseinato de sodio para la fabricación de una composición que posea actividad antiinflamatoria.
Description
Utilización de una fracción de leche de équido
seleccionada de entre leche descremada, lactosuero y caseinato de
sodio que presenta una actividad antiinflamtoria.
La presente invención se refiere a la utilización
de una fracción de leche de équido seleccionada de entre la leche
descremada, el lactosuero y el caseinato de sodio para la
fabricación de una composición que posea actividad
antiinflamatoria.
La invención se refiere también a unas
composiciones que comprenden una fracción de leche de équido
seleccionada de entre la leche descremada, el lactosuero y el
caseinato de sodio tal como una composición farmacéutica, una
composición cosmética o incluso una composición destinada a la
alimentación del hombre o del animal.
Las leches de équidos, tales como la yegua o la
burra tienen una composición en materias orgánicas y minerales
original. Son consideradas generalmente como unas leches que tienen
la composición en sustancias orgánica y mineral más cercana a la de
la leche de mujer.
Así, el contenido de lactosa es de
aproximadamente 60 g/kg par la leche de burra y de aproximadamente
73 g/kg para la leche de yegua, para un contenido de proteínas
respectivamente de aproximadamente 16 g/kg y 20,3 g/kg. La leche de
équido posee además un contenido medio de materia mineral de
aproximadamente 5 g/kg, un contenido de caseína de aproximadamente
8 a 10 g/kg y un contenido de proteínas del lactosuero de 8 a 9
g/kg. Los datos de análisis de la composición de las leches de
burra y de yegua se pueden encontrar por ejemplo en las
publicaciones de El Salam et al. (1992, Proc. 5th Egyptian
Conf. Dairy Sci. & Techn., PP. 281-287),
KUDRYASHOV et al. (1965, Dairy. Sci. Abstr., Volumen 28:
2299) y OCHIRKHUYAG (1999, "Caracterización de las caseínas de
leche de yegua. Propiedades biológicas de la leche de equino
fermentada (Koumiss)" Universidad de Nantes,
pp.1-95 (tesis de doctorado de ciencias).
En su globalidad, la composición de la leche de
burra es por lo tanto comparable a la de la leche de yegua. En
particular, debido a su bajo contenido de materia grasa y materia
nitrogenada, las leches de équidos tienen un contenido de materia
seca relativamente bajo comparado con las leches de vaca o de mujer
(de media 90 g/kg contra 120 g/kg).
Por lo tanto, su valor calórico está
considerablemente rebajado con respecto a las leches de otros
mamíferos, siendo la lactosa el principal componente energético en
la leche de équido.
Las leches de équidos, tales como la leche de
yegua o de burra, han sido menos estudiadas que las leches de vaca,
cabra, oveja y mujer.
Los primeros estudios sobre la composición de la
leche de burra se remontan a finales del siglo 19. Estos estudios
han mostrado que la leche de burra es una leche cercana a la de la
mujer. Además, la leche de burra sería fácilmente asimilable debido
a que tiene un contenido de vitamina C elevado
(6-8,5 mg/100 ml) y que las proteínas de la leche
de burra serían más fáciles de digerir por la tripsina que las de la
leche de vaca.
La utilización de leche de équidos con fines
medicinales ha sido sugerida desde la antigüedad. En particular se
ha propuesto, en el estado de la técnica, la utilización de la leche
de burra para los cuidados de la piel, como se describe por ejemplo
en la solicitud de patente francesa nº 93 08375, que divulga un
procedimiento de conservación de la leche de burra. Así mismo, la
solicitud de patente francesa publicada con el nº 2.783.172 sugiere
la utilización de leche de équido, en particular leche de yegua o de
burra, para tratar las afecciones bucodentales.
También se ha propuesto utilizar calostro de
équido para la preparación de composiciones dermocosméticas, como
por ejemplo en la solicitud PCT publicada con el nº WO 94/16.675. El
calostro es un líquido fisiológico secretado por las glándulas
mamarias de los mamíferos durante la primera semana posterior al
paro y que posee una composición muy diferente a la de la leche. El
calostro se caracteriza con respecto a la leche por un contenido
elevado de proteínas (50 a 150 g/kg) y sales minerales (10 a 12
g/kg). El incremento del contenido de proteínas es debido a la
presencia de una proporción elevada de inmunoglobulinas G que son
necesarias para la protección inmunitaria del joven. El calostro se
caracteriza también por un contenido de lactosa rebajado a un 60%
respecto al contenido de la leche madura (A
Paris-Ciencia de la leche 1984).
Por lo tanto, se ha demostrado según la
invención, que, de manera sorprendente, fracciones de leche de
équido seleccionadas de entre la leche descremada, el lactosuero y
el caseinato de sodio, son capaces de inhibir la producción por las
células de una citoquina proinflamatoria, y más específicamente la
producción de interleucina-1.
La interleucina-1 es una
citoquina denominada "inflamatoria". Se puede observar la
actividad proinflamatoria de la interleucina-1 en
concentraciones bajas de esta citoquina, del orden del picomolar e
incluso de fentomolar, observándose que los receptores específicos
de la interleucina-1 son expresados por la mayoría
de las células.
Se distinguen dos tipos de
interleucina-1, respectivamente la
interleucina-1\alpha y la
interleucina-1\beta. La
interleucina-1\alpha es producida de manera
constitutiva por diversas células epiteliales, los queratinocitos
de la piel y del cerebro, así como por unas células del sistema
inmunitario tales como los monocitos/macrófagos y ciertos
polinucleares tales como los polinucleares neutrófilos.
La interleucina-1 contribuye a
las funciones de crecimiento y de reparación de las células, en
particular de las células epiteliales y de los queratinocitos.
Durante el desarrollo de una respuesta inmunitaria, por ejemplo
después de una infección, se produce la
interleucina-1 y puede provocar una situación
inflamatoria.
Por ejemplo, se ha provocado experimentalmente
una respuesta inflamatoria excesiva de los queratinocitos mediante
una sobreexpresión de los receptores de la
interleucina-1 en unos ratones transgénicos,
caracterizándose dicha respuesta por una hiperplasia epidérmica y
unas infiltraciones celulares inflamatorias dérmicas agudas. (GROVES
et al., 1996, J.Clin. Invest., vol. 98 (2):
336-344). Así mismo, se ha demostrado que la
interleucina-1 es capaz de estimular la
proliferación de los queratinocitos de la piel comparable a la
observada en las diversas enfermedades de la piel tales como la
epidermitis hiperproliferativa encontrada en algunos tipos de
enfermedades inflamatorias de la piel (RISTOW 1987, Proc. Natl.
Acad. Sci. USA, vol. 84 (7): 1940-1944).
También se ha observado que la
interleucina-1\alpha era producida en un nivel muy
bajo por las células localizadas a nivel de un tejido en
cicatrización anormalmente lenta, por ejemplo en los pacientes
sometidos a un estrés psicológico (GLASER R. et al., 1999,
Arch. Gen Psychiatry, vol. 56 (5): 450-456).
La producción excesiva de
interleucina-1 y su liberación excesiva por los
queratinocitos parece estar implicada en el desarrollo de
enfermedades de la piel como la psoriasis, las enfermedades
productoras de ampollas y otras enfermedades de la piel (MIZUTANI
H., 1998, J. dermatol. Sci. Vol. 20 (1) : 63-71). Se
ha mostrado también una función importante de la
interleucina-1 en el desarrollo de la periodontitis
experimental (GRAVES DT, 1999, Clin. Infect. Dis., vol. 28 (3):
482-490).
Por otra parte, se ha observado que unas
agresiones a la piel, por ejemplo por unos contaminantes tales como
las partículas provenientes de la combustión de carburante diesel, o
incluso el formaldehido o el óxido nítrico eran capaces de aumentar
la producción de la Il-1 por unos queratinocitos
dérmicos humanos, que provocan de esta manera inflamaciones
cutáneas (USHIO H., et al., 1999, Toxicol. Lett., vol. 105
(1): 17-24; ANDREW PJ, 1999, biochem. Pharmacol.,
vol 57 (12): 1423-1429).
Otros tipos de agresiones de la piel o de las
células de la córnea del ojo, tal como una exposición a una
radiación ultravioleta, inducen también un aumento de la producción
de interleucina-1 por estos tejidos, provocando una
inflamación (KUPPER TS et al., 1987, J. Clin. Invest., vol.80
(2): 430-436; KENNEDY M. et al., Invest.
Ophtalmol vis Sci. Vol. 38 (12): 2483-2491).
De lo que precede destaca que un efecto de
inhibición de la producción de la interleucina-1 y
más particularmente de la interleucina-1\alpha
puede ser asimilado a un efecto antiinflamatorio, que puede ser
sistémico o por el contrario local, por ejemplo a nivel de la
piel.
La solicitante ha demostrado ahora que unas
fracciones de leche de équido seleccionadas de entre la leche
descremada, el lactosuero y el caseinato de sodio poseían actividad
inhibidora de la producción de interleucina-1, muy
particularmente de interleucina-1\alpha, por las
células.
Así según la invención, se han suministrado unos
medios que poseen una actividad antiinflamatoria y que han sido
obtenidos a partir de la leche de équido.
Un primer objeto de la invención se refiere a la
utilización de una fracción de leche de équido seleccionada de
entre la leche descremada, el lactosuero y el caseinato de sodio
para la fabricación de una composición que posea actividad
antiinflamatoria.
Por "leche de équido", se entiende, según la
invención, una leche producida por un mamífero del tipo
Equus, al que pertenecen la yegüa y la burra.
Por "fracción de leche" en el sentido de la
invención, se entiende cualquier producto derivado preparado a
partir de leche entera, por ejemplo por centrifugación, incluyendo
ultracentrifugación, filtración, incluyendo microfiltración y
ultrafiltración, o incluso separación de los diferentes
constituyentes, por ejemplo en unas columnas cromatográficas de
exclusión de tamaño, de intercambio de aniones o de cationes o
incluso unas columnas para cromatografía en fase inversa.
Entre las fracciones de leche, se pueden citar
muy en particular la leche descremada, el lactosuero o incluso el
caseinato tal como el caseinato de sodio.
La fracción de leche descremada puede ser
obtenida a partir de la leche entera de équido por cualquier técnica
conocida por el experto en la materia, por ejemplo por
centrifugación, microfiltración o ultrafiltración.
El lactosuero puede ser obtenido por ejemplo por
ultracentrifugación o por microfiltración tangencial sobre una
membrana que tenga unos poros de un diámetro del orden de 0,1
\mum.
El caseinato de sodio puede ser preparado por
acidificación de la leche entera o de la leche descremada, lo que
provocará una precipitación y por lo tanto una concentración de la
caseína que es, de esta manera, recuperada fácilmente, y en caso
necesario después de una diálisis contra agua destilada. La caseína
micelar puede ser obtenida por microfiltración y diafiltración.
Las diferentes fracciones de la leche de équido
mencionadas anteriormente pueden presentarse en forma de una
solución líquida.
Ventajosamente, la última etapa de preparación de
cada una de las fracciones de leche de équido consiste en un secado
o una liofilización, según técnicas bien conocidas por el experto en
la materia, con el objetivo de obtener dicha fracción de leche de
équido en forma de polvo.
Se entiende por "microfiltración" una
filtración de la leche de équido mediante cualquier técnica conocida
por el experto en la materia empleando una membrana filtrante que
tenga un umbral de corte comprendido entre 0,05 \mum y 0,5
\mum.
Se entiende por "ultrafiltración" una
filtración de la leche de équido mediante cualquier técnica conocida
por el experto en la materia empleando una membrana filtrante que
tenga un umbral de corte comprendido entre 5 kDa y 150 kDa
(kDaltons).
Como ya se ha mencionado anteriormente, la
inhibición de la producción de interleucina-1 puede
tener un efecto benéfico en situaciones patológicas, en particular
de la piel tales como las epidermatitis, la psoriasis, los edemas o
incluso las inflamaciones sistémicas provocadas por una infección
bacteriana, fúngica o viral y por lo tanto un efecto preventivo o
curativo terapéutico de dichas patologías inflamatorias.
Además, la inhibición de la producción de
interleucina-1 provocada por la utilización de una
fracción de leche de équido de acuerdo con la invención permite
también una reducción de los efectos deletéreos, en particular
inflamatorios, provocados por la exposición de la piel a unos
agentes agresivos externos, como por ejemplo unos agentes químicos
o también a la radiación ultravioleta.
Además, la inhibición de la producción de
interleucina-1 gracias a la utilización de
fracciones de leche de équido de acuerdo con la invención puede
permitir estabilizar situaciones inflamatorias crónicas, por ejemplo
cuando la fracción de leche de équido es regularmente absorbida
oralmente, por ejemplo simultáneamente con la toma de alimentos o
incluso cuando esta fracción de leche de équido está incorporada en
los alimentos.
La invención trata por lo tanto también de la
utilización de una fracción de leche de équido seleccionada de
entre la leche descremada, el lactosuero y el caseinato de sodio
para la preparación de una composición farmacéutica, de una
composición cosmética o de una composición alimenticia funcional,
también denominada "alicamento" en el marco de la
"nutracéutica".
La invención tiene también por objeto una
composición caracterizada porque comprende una fracción de leche de
équido seleccionada de entre la leche descremada, el lactosuero y el
caseinato de sodio que posee actividad antiinflamatoria.
La fracción de leche de équido es seleccionada de
entre la leche descremada, el lactosuero y el caseinato de
sodio.
Según un primer aspecto, la composición anterior
es una composición farmacéutica.
Una composición farmacéutica de este tipo puede
contener la fracción de leche de équido a título de principio
activo único o por el contrario contener una asociación de
principios activos que incluya la leche de équido. Puede ser
ventajoso combinar, en una misma composición farmacéutica, un
principio activo del que se conocen las propiedades
proinflamatorias indeseables con una fracción de leche de équido de
la invención. Una composición farmacéutica de este tipo contiene
preferentemente de 1% a 80% en peso de la fracción rica de leche de
équido, respecto al peso total de la composición, preferentemente
de 5% a 50% en peso y de manera más preferida de 10% a 40% en peso,
respecto al peso de dicha composición.
Una composición farmacéutica según la invención
es producida ventajosamente formulando la fracción rica de la
leche, en general en forma de polvo, en una forma de dosificación
que comprende al menos un excipiente o vehículo farmacéuticamente
aceptable. Para preparar una composición farmacéutica según la
invención, los vehículos farmacéuticamente aceptables pueden ser
indiferentemente sólidos o líquidos.
Preferentemente, una composición farmacéutica
según la invención se caracteriza porque se trata de una formulación
para la administración oral.
Formas de dosificación sólida para administración
oral incluyen las cápsulas, los comprimidos, las píldoras, los
polvos y los gránulos.
De manera general, los vehículos útiles
farmacéuticamente aceptables para la preparación de una composición
farmacéutica según la invención pueden ser encontrados por el
experto en la materia en la siguiente obra "Remington's
Pharmaceutical Sciences, 17ª edición, Mack Publishing Company,
Easton, Pen, 1985)".
La invención tiene también por objeto una
composición cosmética, en particular para los cuidados de la piel,
que comprende una fracción de leche de équido seleccionada de entre
la leche descremada, el lactosuero y el caseinato de sodio que
posee actividad antiinflamatoria.
Una composición cosmética según la invención
comprenderá ventajosamente la fracción de leche de équido asociada
con un vehículo cosméticamente aceptable, tal como un agente
diluyente o un agente dispersante. El vehículo cosméticamente
aceptable puede ser acuoso, anhidro o en forma de emulsión.
Preferentemente, las composiciones están en forma
de una solución acuosa o incluso en forma de emulsión,
preferentemente una emulsión agua en aceite o aceite en agua. El
agua puede hallarse en cantidades que van de 5 a 99%,
preferentemente de 20 a 70% y de manera más preferida de 35 a 65%
en peso, con respecto al peso total de la composición cosmética.
Una composición cosmética de este tipo también
puede comprender unos solventes volátiles del tipo alcanoles
monohídricos con C_{1} a C_{3}, tales como el etanol, el metanol
o el alcohol isopropílico. La cantidad de alcanol monohídrico está
comprendida entre 1 y 70%, preferentemente entre 10 y 50% y de
manera más preferida entre 15 y 40% en peso, con respecto al peso
total de la composición cosmética.
Una composición cosmética de este tipo también
puede contener un material emoliente que puede ser utilizado como
vehículo cosméticamente aceptable, tal como unos aceites de silicona
y unos ésteres sintéticos. La cantidad de agente emoliente está
comprendida ventajosamente entre 0,1 y 50%, preferentemente entre 1
y 20% en peso, respecto al peso total de la composición
cosmética.
A título ilustrativo, una composición cosmética
que comprenda una fracción de leche de équido de acuerdo con la
invención puede ser utilizada como composición sedante después de
una exposición a los rayos ultravioletas, por ejemplo después de
una exposición al sol o a unos rayos ultravioletas de un dispositivo
de bronceado
artificial.
artificial.
La invención se refiere también a una composición
para la alimentación funcional de hombre o del animal que comprende
una fracción de una leche de équido seleccionada de entre la leche
descremada, el lactosuero y el caseinato de sodio que posee
actividad antiinflamatoria.
Un alimento funcional de este tipo comprenderá
ventajosamente de 5% a 80%, preferentemente de 10% a 60% y de
manera más preferida de 12% a 30% en peso de la fracción rica de una
leche de équido, respecto al peso total de la composición
alimenticia funcional o "alicamento". Se puede mezclar la
fracción rica de leche con cualquier tipo de producto alimenticio
según técnicas que son bien conocidas por el experto en la materia,
tal como una solución de azúcar (lactosa o sacarosa) o una solución
salina isotónica.
La invención es además ilustrada, sin por ello
ser limitada, por los siguientes ejemplos.
Ejemplo
1
El material de partida es una mezcla de leche de
siete burras.
Inicialmente se lleva la mezcla a la temperatura
de 30ºC durante 10 minutos y seguidamente se procede a la etapa de
descremado por centrifugación a 1000 g durante cinco minutos a 10ºC,
seguidamente se procede a mantener la mezcla a -20ºC durante un
periodo de 45 minutos con la finalidad de solidificar la crema que
ha sido separada de esta manera.
La leche descremada es seguidamente liofilizada
con ayuda de un liofilizador del tipo CS-10 de la
sociedad Lyofroid, según los siguientes parámetros:
- temperatura de congelación: -25ºC,
duración 1 h
- vacío medio: 0,2 bars
- duración de la sublimación: 40 h
para un espesor de la solución congelada de 1,5 cm.
El polvo es conservado en un entorno seco.
\newpage
Ejemplo
2
Una mezcla de leche de burra es sometida a
ultracentrifugación a 100.000 g durante una hora a 30ºC. La fracción
de lactosuero constituye el sobrenadante del producto obtenido de
la ultracentrifugación.
El lactosuero es seguidamente esterilizado por
filtración con ayuda de un dispositivo de filtración equipado con
una membrana de tamaño medio de poro de 0,22 \mum del tipo
"omega" comercializado por la sociedad FILTRON.
El lactosuero estéril es seguidamente liofilizado
en un liofilizador CS-10 según los parámetros
idénticos a los del ejemplo 1.
Ejemplo
3
Se prepara leche descremada a partir de una
mezcla de leches de burra, de acuerdo con el ejemplo 1.
Se acidifica un volumen de 1,9 litros de leche
descremada con ayuda de ácido clorhídrico 1 N hasta obtener un pH
de 4,25 a la temperatura de 22ºC. La duración de esta operación es
de aproximadamente 30 minutos.
El caseinato de sodio se precipita en culote por
centrifugación a 8000 g durante treinta minutos a 22ºC. El culote
de caseína, decantado del sobrenadante, es solubilizado de nuevo en
doce veces su peso de una solución tampón de NaCl 0,05 M con la
finalidad de eliminar las trazas de lactosuero y seguidamente es
objeto de una segunda etapa de precipitación por acidificación con
ayuda de HCl 1 N y seguidamente una nueva centrifugación a 8000 g
durante 30 minutos a 22ºC.
El culote final es disuelto de nuevo en 1,9
litros de agua destilada ajustado a un pH de 7,6 con ayuda de una
solución de NaOH 1 N y mantenido a este pH durante 60 minutos a
35ºC.
La solución final de caseinato de sodio, de un
volumen de 1,49 litros, es seguidamente diafiltrada contra 4 veces
el volumen de la solución inicial.
La esterilización de la solución de caseinato de
sodio es realizada con ayuda de dos filtraciones consecutivas,
respectivamente:
- -
- una primera filtración con ayuda de un dispositivo de filtración equipado con una membrana filtrante con un poro de un diámetro medio de 0,45 \mum del tipo "omega" comercializado por la sociedad FILTRON, permitiendo esta filtración eliminar la materia grasa residual; y
- -
- una segunda filtración con ayuda de un dispositivo equipado con una membrana de un diámetro de poro medio de 0,22 \mum del tipo "omega" comercializado por la sociedad FILTRON.
Ejemplo
4
Se ha analizado la composición y la calidad
bacteriológica de las fracciones de una leche de un équido
preparadas según los ejemplos 1 a 3 anteriores. Los resultados se
representan en la tabla 1.
Se puede observar que la fracción de caseinato de
sodio contiene 4,65 g de proteína lactosérica por 100 g de polvo,
lo que representa aproximadamente 6% de las proteínas contenidas en
el producto final. Estas proteínas contaminantes han sido
identificadas por cromatografía de alta resolución en fase inversa.
Se trata de la lisozima (1,5% en peso), de la alfalactoalbúmina
(2,7% en peso) y de la betalactoglobulina (1,8% en peso).
Ejemplo
5
Se han aislado unos queratinocitos humanos a
partir de unas muestras de piel recogidas después de una operación
de plastia abdominal realizada a una mujer de 27 años, o bien a
partir de pieles de prepucios.
Los queratinocitos presentes en la muestra de
piel han sido separados en una solución de Hanks (GIBCO) una noche
a 4ºC. A la solución desprovista de Ca^{++} y de Mg^{++} se le
añade 1% de penicilina y de estreptomicina, y 0,05% de tripsina.
Los queratinocitos han sido cultivados en cultivo
primario en un medio del tipo MCK en un incubador en atmósfera
húmeda a 37ºC, que contiene 5% de CO_{2}.
Los queratinocitos utilizados para las pruebas de
producción de interleucina-1 son producto de un
tercer "repicado" o "pasada" por el medio MCK en las
condiciones citadas anteriormente.
En el momento de la prueba, el medio MCK es
reemplazado por un medio SFM completo, comercializado por la
sociedad GIBCO con la referencia KSFM y las células han sido
preincubadas en este medio durante 60 minutos a 37ºC en atmósfera
húmeda que contiene 5% de CO_{2} con los siguientes productos:
- -
- unas concentraciones crecientes de un polvo de lactosuero preparado de acuerdo con el ejemplo 2;
- -
- unas concentraciones crecientes de un polvo de caseinato de sodio preparado de acuerdo con el ejemplo 3;
- -
- unas concentraciones crecientes de un polvo de leche descremada preparada de acuerdo con el ejemplo 1.
Las células preincubadas durante 60 minutos, con
cada uno de los productos mencionados anteriormente, han sido
irradiadas mediante radiación ultravioleta del tipo UVB a la dosis
de 0,1 J/cm^{2}. Se ha proseguido la incubación de las células
preincubadas con los productos a ensayar, e irradiada como se ha
indicado anteriormente, durante dieciocho horas a 37ºC en atmósfera
húmeda que contiene 5% de CO_{2}.
Por otra parte, se han realizado unos cultivos
celulares testigo, irradiados y no irradiados, en ausencia de
preincubación con uno cualquiera de los productos a ensayar.
Al final de la incubación, la cantidad de
interleucina-1\alpha presente en los medios de
cultivo ha sido medida con ayuda de un "kit" de diagnóstico
del tipo ELISA comercializado por la sociedad R & D SYSTEMS, con
la referencia "Human Il-1\alpha immuno assay
(catalog number DLA 50)".
Paralelamente, el contenido de proteínas ha sido
dosificado por el método con azul de Coomassie descrito por
BRADFORD (1966). A mol Biochemistry
1976-248-254.
Los resultados de producción de
interleucina-1 \alpha son expresados en pg de
Il-1\alpha por mg de proteínas celulares y se
presentan en la tabla II seguidamente.
A la vista de los resultados de producción de
interleucina-1\alpha, se ha observado que el polvo
de lactosuero inhibe la producción de
interleucina-1\alpha por los queratinocitos
humanos, siendo la actividad inhibidora función de la dosis añadida
de polvo del lactosuero. Así, se observa una inhibición de la
producción de interleucina-1\alpha del 71%
respecto a las células testigo para una dosis de lactosuero de 0,01%
en peso, respecto al volumen del cultivo celular y una inhibición
del 94% para una dosis de lactosuero de 0,1% en peso respecto al
volumen del cultivo celular.
Así mismo, se observa una inhibición del 93% de
la producción de interleucina-1\alpha con polvo de
caseinato de sodio cuando éste es utilizado a una dosis de 0.0001%
en peso respecto al volumen del cultivo celular.
A dosis superiores, el polvo de caseinato de
sodio se revela citotóxico; en efecto, se ha observado una
disminución del 77% y del 85% respectivamente en el contenido de
proteínas queratinocitarias para unas dosis de 0,1 y de 1% (p/v) de
caseinato de sodio.
Se ha observado una inhibición de la producción
de interleucina-1\alpha por los queratinocitos del
orden del 54%, con una dosis de 0,01% (p/v) de polvo de leche
descremada. A dosis superiores, el polvo de leche descremada es
citotóxico. En efecto, para una dosis de 1% (p/v) de polvo de leche
descremada, se observa una disminución del 89 % en el contenido de
proteínas queratinocitarias.
Los resultados obtenidos anteriormente muestran
claramente que las fracciones de leche de équido, debido a su
capacidad de inhibir la producción de
interleucina-1\alpha por las células, ejercen un
efecto antiinflamatorio.
| Leche descremada | Lactosuero | Caseinato de sodio | |
| Extracto seco | 94,98 \pm 0,13* | 87,30 \pm 0,10 | 86,68 \pm 0,05 |
| Materia grasa | 0,20 \pm 0,00 | No determinado | No determinado |
| Componentes | 26,65 \pm 0,10 | 12,60 \pm 0,37 | 78,89 \pm 1,30 |
| \bullet Caseína | 16,09 \pm 1,24 | -0,24 \pm 0,01 | 73,94 \pm 1,48 |
| \bullet NCN | 10,56 \pm 0,82 | 12,84 \pm 0,31 | 4,95 \pm 0,10 |
| \bullet Proteínas séricas | 7,91 \pm 0,61 | 9,92 \pm 0,24 | 4,65 \pm 1,55 |
| \bullet NPN | 2,65 \pm 0,00 | 2,92 \pm 0,00 | 0,30 \pm 0,10 |
| \bullet Lactosa | 65,97 \pm 2,77 | 71,32 \pm 4,11 | 0,06 \pm 0,01 |
| \bullet Minerales | |||
| \bullet Cenizas | 5,80 \pm 0,02 | 3,91 \pm 0,01 | 3,91 \pm 0,10 |
| \bullet Macroelementos (mg/100 g) | |||
| \bullet Ca | 1465,42 \pm 3,22 | 520,26 \pm 3,12 | 2,29 \pm 0,00 |
| \bullet Mg | 108,03 \pm 0,32 | 86,04 \pm 0,62 | 0,99 \pm 0,00 |
| \bullet Na | 147,56 \pm 0,49 | 163,52 \pm 0,31 | 1287,91 \pm 2,95 |
| \bullet K | 819,13 \pm 9,58 | 897,73 \pm 6,01 | 2,58 \pm 0,00 |
| \bullet P | 756,83 \pm 0,08 | 372,54 \pm 3,51 | 640,18 \pm 3,78 |
| \bullet Bacteriología | |||
| \bullet Flora mesófila | 2,10^{2} UFC/g | 0 UFC/0,1 g | 0 UFC/0,1 g |
| \bullet Flora coliforme | 0 UFC/0,1 g | 0 UFC/0,1 g | 0 UFC/0,1 g |
| \begin{minipage}[t]{158mm}* Los resultados son expresados en gramos de materia por 100 g de polvo lioflizado. También se ha indicado la separación respecto a la media, calculada a partir del porcentaje de error de la medición [(C x-med>/med) x 100].\end{minipage} |
| Producto | Concentración % (P/V) | IL-1\alpha (pg/mg proteínas) | % de Inhibición |
| Lactosuero (sobrenadante de | 0 | 259,5 +/-74,5 | 0 |
| ultracentrifugación) | |||
| 0.01 | 171,3 +/-15,2 | 71 | |
| 0.1 | 142.1 +/-13.3 | 94 | |
| 1 | 213.9 +/-30.1 | 37 | |
| Caseinato de sodio | 0 | 2532.5 +/-934.8 | 0 |
| 0.0001 | 725.5 +/-297 | 93 | |
| 0.001 | 1819.- +/-436.1 | 37 | |
| 0.01 | 1805.2 +/-572.5 | 38 | |
| Leche descremada | 0 | 259.5 +/-74.5 | 0 |
| 0.01 | 191.6 +/-9.3 | 54 | |
| 0.1 | 342.8 +/-50.7 | 0 |
Claims (9)
1. Utilización de una fracción de leche
de équido seleccionada de entre la leche descremada, el lactosuero
y el caseinato de sodio para la fabricación de una composición que
posea actividad antiinflamatoria.
2. Utilización según la reivindicación 1,
caracterizada porque se trata de leche descremada.
3. Utilización según la reivindicación 1,
caracterizada porque se trata de lactosuero, preferentemente
de un lactosuero dulce.
4. Utilización según la reivindicación 1,
caracterizada porque se trata de caseinato de sodio.
5. Utilización según una de las
reivindicaciones 1 a 4, caracterizada porque la composición
es una composición farmacéutica, una composición cosmética o una
composición alimenticia funcional.
6. Composición farmacéutica, cosmética o
destinada a la alimentación del hombre o del animal,
caracterizada porque comprende una fracción de leche de
équido seleccionada de entre la leche descremada, el lactosuero y
el caseinato de sodio y posee actividad antiinflamatoria.
7. Composición según la reivindicación 6,
caracterizada porque se trata de una composición
farmacéutica.
8. Composición según la reivindicación 6,
caracterizada porque se trata de una composición
cosmética.
9. Composición según la reivindicación 6,
caracterizada porque se trata de una composición para la
alimentación funcional del hombre y del animal.
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