ES2269456T3

ES2269456T3 - Derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno y composiciones medicinales que contienen los mismos.

Info

Publication number: ES2269456T3
Application number: ES01970186T
Authority: ES
Inventors: Hideki Fujikura; Nobuhiko Fushimi; Toshihiro Nishimura; Kazuya Tatani; Masayuki Isaji
Original assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Kissei Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2000-09-29
Filing date: 2001-09-21
Publication date: 2007-04-01
Anticipated expiration: 2021-09-21
Also published as: ZA200302283B; SK287811B6; CZ303544B6; NO20031407L; US20040018998A1; PE20020476A1; HUP0301178A2; DE60122193T2; EP1329456A1; MXPA03002779A; NO327182B1; ATE335753T1; WO2002028872A1; AU9025701A; SK3342003A3; EP1329456B1; SI1329456T1; MY129023A; JP3798375B2; PL205607B1

Abstract

Un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la **fórmula**, donde P representa un grupo acilo inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi(inferior)carbonilo, un grupo alcoxi(inferior)carbonilo y un grupo alcoxi(inferior)carbonilo sustituido con alcoxi inferior; y R representa un grupo alquilo inferior, un grupo alcoxi inferior, un grupo alquil(inferior)tio, un grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo alcoxi inferior sustituido con alcoxi inferior o un grupo alquil(inferior)tio sustituido con alcoxi inferior donde el término "grupo alquilo inferior" representa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo alcoxi inferior" representa un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo alquil(inferior)tio representa un grupo alquiltio de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6átomos de carbono; el término "grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior" representa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono sustituido con un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono.

Description

Derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno y composiciones medicinales que contienen los mismos.

Campo técnico

La presente invención se refiere a derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno que son útiles como medicamentos y a composiciones farmacéuticas que los comprenden.

Más concretamente, la presente invención hace referencia a derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno, que son útiles como agentes para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia tales como la diabetes, las complicaciones diabéticas o la obesidad, representados por la fórmula general:

1

donde P representa un grupo que forma un profármaco: y R representa un grupo alquilo inferior, un grupo alcoxi inferior, un grupo alquil(inferior)tio, un grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo alcoxi inferior sustituido con alcoxi inferior o un grupo alquil(inferior)tio sustituido con alcoxi inferior, cuyos derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno, que tienen una actividad inhibidora de SGLT2 humano, representados por la fórmula general:

2

donde R representa un grupo alquilo inferior, un grupo alcoxi inferior, un grupo alquil(inferior)tio, un grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo alcoxi inferior sustituido con alcoxi inferior o un grupo alquil(inferior)tio sustituido con alcoxi inferior, son formas activas, y hace referencia a las composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos.

Técnica antecedente

La diabetes es una de las enfermedades relacionadas con el estilo de vida con el antecedente del cambio en los hábitos de alimentación y la carencia de ejercicio. Por tanto, se realizan terapias de dieta y ejercicio en pacientes con diabetes. Además, cuando su control suficiente y su funcionamiento continuo son difíciles, se realiza simultáneamente el tratamiento con fármacos. En la actualidad, se han empleado biguanidas, sulfonilureas y agentes para reducir la resistencia a la insulina como agentes anti-diabéticos. No obstante, las biguanidas y las sulfonilureas muestran ocasionalmente efectos adversos tales como acidosis láctica e hipoglucemia, respectivamente. En caso de utilizar agentes para reducir la resistencia a la insulina, se observan ocasionalmente efectos adversos tales como el edema, y esto también está relacionado con el fomento de la obesidad. Por lo tanto, con el fin de resolver estos problemas, se ha deseado desarrollar agentes antidiabéticos que tengan un nuevo mecanismo.

En los últimos años, ha ido progresando el desarrollo de un nuevo tipo de agentes anti-diabéticos, que promueven la excreción de glucosa en la orina y disminuyen el nivel de glucosa en sangre evitando el exceso de reabsorción de glucosa en el riñón (J. Clin. Invest., Vol. 79, págs. 1510-1515 (1987)). Además, se ha informado de que SGLT2 (cotransportador de Na^{+}/glucosa 2) está presente en el segmento S1 del túbulo proximal del riñón y participa principalmente en la reabsorción de glucosa filtrada a través de los glomérulos (J. Clin. Invest., Vol. 93, págs. 397-404 (1994)). Por consiguiente, inhibiendo la actividad de SGLT2 humano se evita la reabsorción del exceso de glucosa en el riñón, con posterioridad se promueve la excreción del exceso de glucosa a través de la orina, y se normaliza el nivel de glucosa en sangre. Por lo tanto, se desea el rápido desarrollo de agentes antidiabéticos que tengan una potente actividad inhibidora en SGLT2 humano y tengan un nuevo mecanismo. Además, puesto que tales agentes promueven la excreción de exceso de glucosa a través de la orina y por consiguiente disminuye la acumulación de glucosa en el organismo, también se espera que tengan un efecto de prevención de la obesidad.

Descripción de la invención

Los autores de la presente invención han estudiado con la mayor seriedad para descubrir compuestos que tengan una actividad inhibidora en SGLT2 humano. Como resultado, se encontró que los compuestos representados por la fórmula general (I) anterior son convertidos in vivo en sus formas activas, derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno representados por la fórmula general (II) anterior, y muestran una excelente actividad inhibidora de SGLT2 humano como se menciona más abajo, formando de ese modo la base de la presente invención.

La presente invención es para proporcionar los siguientes derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno que ejercen una actividad inhibidora de SGLT2 humano in vivo y muestran un excelente efecto hipoglucémico excretando la glucosa en exceso en la orina por medio de la prevención de la reabsorción de la glucosa en el riñón, y las composiciones farmacéuticas que los comprenden.

De este modo, la presente invención hace referencia a un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general:

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donde P representa un grupo acilo inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi(inferior)carbonilo, un grupo alcoxi(inferior)carbonilo y un grupo alcoxi(inferior)carbonilo sustituido con alcoxi inferior; y R representa un grupo alquilo inferior, un grupo alcoxi inferior, un grupo alquil(inferior)tio, un grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo alcoxi inferior sustituido con alcoxi inferior o un grupo alquil(inferior)tio sustituido con alcoxi inferior donde el término "grupo alquilo inferior" representa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo alcoxi inferior" representa un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término ``grupo alquil(inferior)tio representa un grupo alquiltio de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior" representa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono sustituido con un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo alcoxi inferior sustituido con alcoxi inferior" representa un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono sustituido con un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo alquil(inferior)tio sustituido con alcoxi inferior" representa un grupo alquiltio de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono sustituido con un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo acilo inferior" representa un grupo acilo de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 2 a 7 átomos de carbono; el término "grupo acilo inferior sustituido con alcoxi inferior" representa un grupo acilo de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 2 a 7 átomos de carbono sustituido con un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificado que tiene de 1 a 6 átomos de carbono; el término "grupo alcoxi(inferior)carbonilo" representa un grupo alcoxicarbonilo de cadena lineal, ramificada o cíclica; el término "grupo acilo inferior sustituido con alcoxi(inferior)carbonilo" representa un grupo acilo de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 2 a 7 átomos de carbono sustituido con un grupo alcoxicarbonilo de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 2 a 7 átomos de carbono; y el término "grupo alcoxi(inferior)carbonilo sustituido con alcoxi inferior" representa un grupo alcoxicarbonilo de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 2 a 7 átomos de carbono sustituido con un grupo alcoxi de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 1 a 6 átomos de
carbono.

La presente invención hace referencia a una composición farmacéutica que comprende como ingrediente activo un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (I) anterior.

La presente invención hace referencia a un inhibidor de SGLT2 humano que comprende como ingrediente activo un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (I) anterior.

La presente invención se refiere a un agente para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia, que comprende como ingrediente activo un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (I) anterior.

La presente invención se refiere a un método para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia, que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (I) anterior.

La presente invención se refiere al uso de un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (I) anterior para la fabricación de una composición farmacéutica para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia.

En la presente invención, el término "profármaco" representa un compuesto que es convertido en un derivado de glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (II) anterior como forma activa del mismo in vivo. Como ejemplos de los grupos que forman profármacos, se ilustran un grupo protector de hidroxi utilizado generalmente como profármaco, tal como un grupo acilo inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi(inferior)carbonilo, un grupo alcoxi(inferior)-carbonilo y un grupo alcoxi(inferior)carbonilo sustituido con alcoxi inferior.

Asimismo, en la presente invención, el término "grupo alquilo inferior" representa un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono tal como un grupo metilo, un grupo etilo, un grupo propilo, un grupo isopropilo, un grupo butilo, un grupo isobutilo, un grupo sec-butilo, un grupo t-butilo, un grupo pentilo, un grupo isopentilo, un grupo neopentilo, un grupo t-pentilo, un grupo hexilo o similar. El término "grupo alcoxi inferior" representa un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono tal como un grupo metoxi, un grupo etoxi, un grupo propoxi, un grupo isopropoxi, un grupo butoxi, un grupo isobutoxi, un grupo sec-butoxi, un grupo t-butoxi, un grupo pentiloxi, un grupo isopentiloxi, un grupo neopentiloxi, un grupo t-pentiloxi, un grupo hexiloxi o similar. El término ``grupo alquil(inferior)tio representa un grupo alquiltio de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 6 átomos de carbono tal como un grupo metiltio, un grupo etiltio, un grupo propiltio, un grupo isopropiltio, un grupo butiltio, un grupo isobutiltio, un grupo sec-butiltio, un grupo t-butiltio, un grupo pentiltio, un grupo isopentiltio, un grupo neopentiltio, un grupo t-pentiltio, un grupo hexiltio o similar. El término "grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior" representa el grupo alquilo inferior anterior sustituido con el grupo alcoxi inferior anterior; el término "grupo alcoxi inferior sustituido con alcoxi inferior" representa el grupo alcoxi inferior anterior sustituido con el grupo alcoxi inferior anterior; y el término "grupo alquil(inferior)tio sustituido con alcoxi inferior" representa el grupo alquil(inferior)tio anterior sustituido con el grupo alcoxi inferior anterior. El término "grupo acilo inferior" representa un grupo acilo de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 2 a 7 átomos de carbono tal como un grupo acetilo, un grupo propionilo, un grupo butirilo, un grupo isobutirilo, un grupo pivaloilo, un grupo hexanoilo y un grupo ciclohexilcarbonilo; y el término "grupo acilo inferior sustituido con alcoxi inferior" representa el grupo acilo inferior anterior sustituido con el grupo alcoxi inferior anterior. El término "grupo alcoxi(inferior)carbonilo" representa un grupo alcoxicarbonilo de cadena lineal, ramificada o cíclica que tiene de 2 a 7 átomos de carbono tal como un grupo metoxicarbonilo, un grupo etoxicarbonilo, un grupo isopropiloxicarbonilo, un grupo isobutiloxicarbonilo y un grupo ciclohexiloxicarbonilo; el término "grupo acilo inferior sustituido con alcoxi(inferior)carbonilo" representa el grupo acilo inferior anterior sustituido con el grupo alcoxicarbonilo inferior anterior tal como un grupo 3-(etoxicarbonil)propionilo; y el término "grupo alcoxi(inferior)carbonilo sustituido con alcoxi inferior" representa el grupo alcoxi(inferior)carbonilo anterior sustituido con el grupo alcoxi anterior tal como un grupo 2-metoxietoxicarbonilo.

En el sustituyente R, son preferibles un grupo alquilo inferior y un grupo alcoxi inferior, son más preferibles un grupo alquilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 4 átomos de carbono y un grupo alcoxi de cadena lineal o ramificada que tiene de 1 a 3 átomos de carbono, y son muy preferibles un grupo etilo y un grupo metoxi. En el sustituyente P, son preferibles un grupo acilo inferior y un grupo alcoxi-(inferior)carbonilo. En cuanto al grupo acilo inferior, es preferible un grupo acilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 4 a 6 átomos de carbono, y son más preferibles un grupo butirilo y un grupo hexanoilo. En cuanto al grupo alcoxi(inferior)carbonilo, es preferible un grupo alcoxicarbonilo de cadena lineal o ramificada que tiene de 2 a 5 átomos de carbono, y son más preferibles un grupo metoxicarbonilo y un grupo etoxicarbonilo.

Los compuestos de la presente invención pueden ser preparados introduciendo un grupo protector de hidroxi que sea susceptible de ser utilizado comúnmente en profármacos en el grupo hidroxi de un derivado de glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (II) anterior de la manera habitual. Por ejemplo, los compuestos representados por la fórmula general (I) anterior de la presente invención pueden ser preparados utilizando un derivado de glucopiranosiloxi-bencilbenceno representado por la fórmula general (II) anterior según el siguiente procedimiento:

4

donde X representa un grupo eliminable tal como un átomo de bromo y un átomo de cloro; y R y P tienen los mismos significados definidos antes.

Un profármaco representado por la fórmula general (I) anterior puede ser preparado protegiendo el grupo hidroxi de un derivado de glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (II) anterior con un reactivo de protección representado por la fórmula general (III) anterior en presencia de una base tal como piridina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina, picolina, lutidina, colidina, quinuclidina, 1,2,2,6,6-pentametilpiperidina o 1,4-diazabiciclo[2,2,2]octano en un disolvente inerte o sin disolvente. En cuanto al disolvente utilizado se pueden ilustrar diclorometano, acetonitrilo, acetato de etilo, éter diisopropílico, cloroformo, tetrahidrofurano, 1,2-dimetoxietano, 1,4-dioxano, acetona, t-butanol, una mezcla disolvente de los mismos y similares. La temperatura de reacción es normalmente de -40ºC a la temperatura de reflujo, y el tiempo de reacción es normalmente de 30 minutos a 2 días, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de reacción.

Por ejemplo, los compuestos representados por la fórmula general (II) anterior de la presente invención que se utilizan como sustancias de partida en el procedimiento de producción antes mencionado pueden ser preparados según el siguiente procedimiento:

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(Esquema pasa a página siguiente)

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donde M representa un grupo protector de hidroxi; X^{1} representa un grupo eliminable tal como un grupo tricloroacetimidoiloxi, un grupo acetoxi, un átomo de bromo o un átomo de flúor; uno de Y y Z representa MgBr, MgCl, MgI o un átomo de litio, mientras el otro representa un grupo formilo; y R tiene el mismo significado definido antes.

Procedimiento 1

Un compuesto representado por la fórmula general (VI) anterior puede ser preparado condensando un derivado benzaldehído representado por la fórmula general (IV) anterior con un reactivo de Grignard o un reactivo de litio representado por la fórmula general (V) anterior, o condensando un reactivo de Grignard o un reactivo de litio representado por la fórmula general (IV) anterior con un derivado benzaldehído representado por la fórmula general (V) anterior en un disolvente inerte. En cuanto al disolvente utilizado, se ilustran tetrahidrofurano, éter dietílico, y una mezcla disolvente de los mismos y similares. La temperatura de reacción es normalmente de -78ºC a la temperatura de reflujo, y el tiempo de reacción es normalmente de 10 minutos a 1 día, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de reacción.

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Procedimiento 2

Un compuesto representado por la fórmula general (VII) anterior puede ser preparado sometiendo un compuesto representado por la fórmula general (VI) anterior a oxidación utilizando un reactivo Dess-Martin en un disolvente inerte. En cuanto al disolvente utilizado, se pueden ilustrar diclorometano, cloroformo, acetonitrilo, una mezcla disolvente de los mismos y similares. La temperatura de reacción es normalmente de 0ºC a la temperatura de reflujo, y el tiempo de reacción es normalmente de 1 hora a 1 día, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de reacción.

Procedimiento 3

Un compuesto representado por la fórmula general (VIII) anterior puede ser preparado sometiendo un compuesto representado por la fórmula general (VI) anterior a hidrogenación catalítica utilizando un catalizador de paladio tal como polvo de paladio-carbono en presencia o ausencia de un ácido tal como ácido clorhídrico en un disolvente inerte, y separando un grupo protector de la manera habitual según demande la ocasión. En cuanto al disolvente utilizado en la hidrogenación catalítica, se pueden ilustrar metanol, etanol, tetrahidrofurano, acetato de etilo, ácido acético, isopropanol, una mezcla disolvente de los mismos y similares. La temperatura de reacción es normalmente de la temperatura ambiente a la temperatura de reflujo, y el tiempo de reacción es normalmente de 30 minutos a 1 día, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de reacción. El compuesto de fórmula general (VIII) anterior puede ser convertido en una sal del mismo tal como una sal de sodio o una sal de potasio de la manera habitual.

Procedimiento 4

Un compuesto representado por la fórmula general (VIII) anterior puede ser preparado separando el grupo protector M de un compuesto representado por la fórmula general (VII) anterior de la manera habitual, condensando el compuesto resultante con cloroformiato de etilo en presencia de una base tal como trietilamina, diisopropiletilamina o 4-(N,N-dimetilamino)piridina en un disolvente inerte y sometiendo el compuesto carbonato resultante a reducción utilizando un agente reductor tal como borohidruro de sodio. En cuanto al disolvente utilizado en la reacción de condensación, se ilustran tetrahidrofurano, diclorometano, acetonitrilo, acetato de etilo, éter dietílico, una mezcla disolvente de los mismos y similares. La temperatura de reacción es normalmente de 0ºC a la temperatura de reflujo, y el tiempo de reacción es normalmente de 30 minutos a 1 día, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de reacción. En cuanto al disolvente utilizado en la reacción, se ilustran una mezcla disolvente con tetrahidrofurano y agua, y similares. La temperatura de reacción es normalmente de 0ºC a la temperatura de reflujo, y el tiempo de reacción es normalmente de 1 hora a 1 día, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de reacción. El compuesto de fórmula general (VIII) anterior puede ser convertido en una sal del mismo tal como una sal de sodio o una sal de potasio de la manera habitual.

Procedimiento 5

Un glucósido representado por la fórmula general (X) anterior puede ser preparado sometiendo un derivado bencilfenólico representado por la fórmula general (VIII) anterior o una sal del mismo a glicosilación utilizando un donador de glicosilo representado por la fórmula general (IX) anterior tal como 2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-O-tricloroacetimidoil-\alpha-D-glucopiranosa, 1,2,3,4,6-penta-O-acetil-\beta-D-glucopiranosa, bromuro de 2,3,4,6-tetra-O-acetil-\alpha-D-glucopiranosilo y fluoruro de 2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranosilo en presencia de un reactivo activador tal como complejo de trifluoruro de boro-éter dietílico, trifluorometanosulfonato de plata, cloruro de estaño (IV) o trifluorometanosulfonato de trimetilsililo en un disolvente inerte. En cuanto al disolvente utilizado, se ilustran diclorometano, tolueno, acetonitrilo, nitrometano, acetato de etilo, éter dietílico, cloroformo, una mezcla disolvente de los mismos y similares. La temperatura de reacción es normalmente de -30ºC a la temperatura de reflujo, y el tiempo de reacción es normalmente de 10 minutos a 1 día, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de reacción.

Procedimiento 6

Se puede preparar un derivado de glucopiranosil-oxibencilbenceno representado por la fórmula general (II) anterior sometiendo un glucósido representado por la fórmula general (X) anterior a hidrólisis alcalina para separar los grupos protectores de hidroxi. En cuanto al disolvente utilizado, se ilustran agua, metanol, etanol, tetrahidrofurano, una mezcla disolvente de los mismos y similares, y como sustancias alcalinas se pueden emplear, hidróxido de sodio, metóxido de sodio, etóxido de sodio o similar. La temperatura de tratamiento es normalmente de 0ºC a la temperatura de reflujo, y el tiempo de tratamiento es normalmente de 30 minutos a 6 horas, variando basándose en la sustancia de partida utilizada, el disolvente y la temperatura de tratamiento.

Los compuestos de la presente invención obtenidos mediante el procedimiento de producción anterior pueden ser aislados y purificados mediante medios de separación convencionales tales como la recristalización fraccionada, la purificación utilizando la cromatografía, la extracción con disolvente y la extracción en fase sólida.

Entre los profármacos representados por la fórmula general (I) anterior de la presente invención se incluyen sus hidratos y sus solvatos con disolventes farmacéuticamente aceptables tales como etanol.

El profármaco representado por la fórmula general (I) anterior de la presente invención es convertido en un derivado de glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general (II) anterior como forma activa del mismo in vivo y puede ejercer una excelente actividad inhibidora en SGLT2 humano. Además, los profármacos representados por la fórmula general (I) anterior de la presente invención tienen una absorción oral mejorada, y las composiciones farmacéuticas que comprenden como ingrediente activo el profármaco tienen una elevada utilidad como formulaciones orales. Por lo tanto, los profármacos de la presente invención son extremadamente útiles como agentes para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia tal como la diabetes, las complicaciones diabéticas, la obesidad o similar.

Cuando las composiciones farmacéuticas de la presente invención se emplean en el tratamiento práctico, se utilizan diversas formas de dosificación dependiendo de sus usos. Como ejemplos de las formas de dosificación, se ilustran polvos, gránulos, gránulos finos, jarabes secos, tabletas, cápsulas, inyectables, soluciones, pomadas, supositorios, cataplasmas y similares, que se administran oralmente o parenteralmente.

Estas composiciones farmacéuticas pueden ser preparadas mezclando o diluyendo y disolviendo con un aditivo farmacéutico apropiado tal como excipientes, disgregantes, aglutinantes, lubricantes, diluyentes, tampones, agentes para conferir isotonicidad, antisépticos, agentes humectantes, emulsionantes, agentes dispersantes, agentes estabilizantes, coadyuvantes de disolución y similares, y formulando la mezcla según los métodos farmacéuticamente convencionales dependiendo de sus formas de dosificación.

Cuando las composiciones farmacéuticas de la presente invención se emplean en el tratamiento práctico, la dosificación de un compuesto de la presente invención como ingrediente activo es decidida apropiadamente dependiendo de la edad, el sexo, el peso corporal y los grados de los síntomas y el tratamiento de cada paciente, que está aproximadamente en el intervalo de 0,1 a 1.000 mg por día por adulto humano en caso de la administración oral y aproximadamente en el intervalo de 0,01 a 300 mg por día por humano adulto en el caso de la administración parenteral, y la dosis diaria puede ser dividida en una a varias dosis por día y administrada adecuadamente.

Ejemplos

La presente invención se ilustra adicionalmente con más detalle por medio de los siguientes Ejemplos de Referencia, Ejemplos y Ejemplos de Ensayo. No obstante, la presente invención no está limitada a estos.

Ejemplo de Referencia 1

2-(4-Isobutilbencil)fenol

Se preparó un reactivo de Grignard a partir de 2-benciloxi-1-bromobenceno (0,20 g), magnesio (0,026 g), una cantidad catalítica de yodo y tetrahidrofurano (1 ml) de la manera habitual. El reactivo de Grignard fue añadido a una solución de 4-isobutilbenzaldehído (0,16 g) en tetrahidrofurano (2 ml), y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: tetrahidrofurano) para dar un compuesto difenilmetanólico (0,23 g). El compuesto difenilmetanólico obtenido fue disuelto en etanol (3 ml) y ácido clorhídrico concentrado (0,1 ml). A la solución se añadió una cantidad catalítica de polvo de paladio-carbón al 10%, y la mezcla se agitó a presión de hidrógeno a la temperatura ambiente durante la noche. El catalizador fue separado por filtración, y el producto filtrado fue concentrado a presión reducida. El residuo fue purificado mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/hexano = 1/1) para dar 2-(4-isobutilbencil)fenol (0,10 g).

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

0,89 (6H, d, J=6,6 Hz), 1,75-1,90 (1H, m), 2,43 (2H, d, J=7,2 Hz), 3,97 (2H, s), 4,66 (1H, s), 6,75-6,85 (1H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 7,00-7,20 (6H, m).

Ejemplo de Referencia 2

2-(4-Isopropoxibencil)fenol

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 1 utilizando 4-isopropoxibenzaldehído en lugar de 4-isobutilbenzaldehído.

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,31 (6H, d, J=6,1 Hz), 3,93 (2H, s), 4,50 (1H, heptete, J=6,1 Hz), 4,72 (1H, s), 6,75-6,85 (3H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

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Ejemplo de Referencia 3

2-(4-Etoxibencil)fenol

Se preparó un reactivo de Grignard a partir de 1-bromo-4-etoxibenceno (1,5 g), magnesio (1,19 g), una cantidad catalítica de yodo y tetrahidrofurano (2 ml) de la manera habitual. Al reactivo de Grignard obtenido se añadió gota a gota una solución de 2-benciloxibenzaldehído (1,1 g) en tetrahidrofurano (15 ml), y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 30 minutos. A la mezcla de reacción se añadieron una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (10 ml) y agua (20 ml), y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (100 ml). El extracto se lavó con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), y se secó sobre sulfato de sodio anhidro. Después de eso, el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexano/acetato de etilo = 5/1) para dar un compuesto difenilmetanólico (1,7 g). El compuesto difenilmetanólico obtenido (1,7 g) fue disuelto en etanol (25 ml). A la solución se añadieron ácido clorhídrico concentrado (0,42 ml) y una cantidad catalítica de polvo de paladio-carbón al 10%, y la mezcla se agitó a presión de hidrógeno a la temperatura ambiente durante 18 horas. El catalizador fue separado por filtración, y el producto filtrado fue concentrado a presión reducida. Al residuo se añadió acetato de etilo (100 ml), y la mezcla se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (30 ml) y salmuera (30 ml). La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexano/acetato de etilo = 8/1) para dar 2-(4-etoxibencil)fenol (0,85 g).

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,39 (3H, t, J=7,1 Hz), 3,93 (2H, s), 4,00 (2H, c, J=7,1 Hz), 4,72 (1H, s), 6,75-6,85 (3H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

Ejemplo de Referencia 4

2-(4-Etiltiobencil)fenol

Se preparó un reactivo de Grignard a partir de 1-bromo-4-etiltiobenceno (1,1 g), magnesio (0,12 g), una cantidad catalítica de yodo y tetrahidrofurano (5 ml) de la manera habitual. A la solución de reactivo de Grignard obtenida se añadió una solución de 2-(metoximetoxi)-benzaldehído (0,56 g) en tetrahidrofurano (12 ml), y la mezcla se agitó a 65ºC durante 10 minutos. Después de enfriar a la temperatura ambiente, se añadieron una solución acuosa saturada de cloruro de sodio (5 ml) y agua (20 ml) a la mezcla de reacción, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (80 ml). El extracto se lavó con agua (20 ml) y salmuera (20 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, después el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente:hexano/acetato de etilo = 4/1) para dar un compuesto difenilmetanólico (0,91 g). El compuesto difenilmetanólico obtenido (0,90 g) se disolvió en diclorometano (15 ml). A la solución se añadió un reactivo de Dess-Martin (1,1,1-tris(acetiloxi)-1,1-dihidro-1,2-benziodoxol-3-(1H)-ona) (1,5 g), y la mezcla se agitó a 25ºC durante 26 horas. A la mezcla de reacción se añadieron éter dietílico (75 ml) y 1 mol/litro de solución acuosa de hidróxido de sodio (30 ml), la mezcla se agitó vigorosamente, y la capa orgánica se separó. La capa orgánica se lavó con 1 mol/litro de solución de hidróxido de sodio acuosa (30 ml), agua (30 ml, 3 veces) y salmuera (30 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente:hexano/acetato de etilo = 15/1-9/1) para proporcionar un compuesto cetona (0,82 g). Se agitó una mezcla del compuesto cetona obtenido (0,81 g), monohidrato de ácido p-toluenosulfónico (0,10 g) y metanol (14 ml) a 60ºC durante 4 horas. Después de enfriar a la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo fue purificado mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexano/acetato de etilo = 15/1) para dar un compuesto desprotegido (0,69 g). El compuesto desprotegido obtenido (0,68 g) fue disuelto en tetrahidrofurano (11 ml), se añadieron a la solución trietilamina (0,41 ml) y cloroformiato de metilo (0,22 ml), y la mezcla se agitó a 25ºC durante 1 hora. Además, se añadieron a la reacción trietilamina (0,11 ml) y cloroformiato de metilo (0,061 ml), y la mezcla se agitó durante 30 minutos. La mezcla de reacción se filtró, y el producto filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en tetrahidrofurano (14 ml) y agua (7 ml), se añadió borohidruro de sodio (0,40 g) a la solución, y la mezcla se agitó a 25ºC durante 7 horas. A la mezcla de reacción se añadió gota a gota 1 mol/litro de ácido clorhídrico (15 ml), y la mezcla se extrajo con acetato de etilo (75 ml). El extracto se lavó con agua (20 ml), una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (20 ml) y salmuera (20 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (eluyente: hexano/acetato de etilo = 8/1) para dar 2-(4-etil-tiobencil)fenol (0,62 g).

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,29 (3H, t, J=7,3 Hz), 2,90 (2H, c, J=7,3 Hz), 3,96 (2H, s), 4,62 (1H, s), 6,75-6,80 (1H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 7,05-7,20 (4H, m), 7,20-7,30 (2H, m).

\newpage

Ejemplo de Referencia 5

2-(4-Metoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido

A una solución de 2-(4-metoxibencil)fenol (46 mg) y 2,3,4,6-tetra-O-acetil-1-O-tricloroacetoimidoil-\alpha-D-glucopiranosa (0,13 g) en diclorometano (2 ml) se añadió complejo de trifluoruro de boro-éter dietílico (0,033 ml), y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de aminopropilsílice (eluyente: diclorometano) para dar 2-(4-metoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido (0,11 g).

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,91 (3H, s), 2,03 (3H, s), 2,05 (3H, s), 2,08 (3H, s), 3,77 (3H, s), 3,80-3,95 (3H, m), 4,17 (1H, dd, J=2,5, 12,2 Hz), 4,29 (1H, dd, J=5,5,12,2 Hz), 5,11 (1H, d, J=7,5 Hz), 5,10-5,25 (1H, m), 5,25-5,40 (2H, m), 6,75-6,85 (2H, m), 6,95-7,10 (5H, m), 7,10-7,25 (1H, m).

Ejemplo de Referencia 6

2-(4-Metilbencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 5 utilizando 2-(4-metilbencil)fenol en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenol.

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,89 (3H, s), 2,03 (3H, s), 2,05 (3H, s), 2,07 (3H, s), 2,30 (3H, s), 3,80-3,95 (3H, m), 4,17 (1H, dd, J=2,5, 12,3 Hz), 4,28 (1H, dd, J=5,5, 12,3 Hz), 5,11 (1H, d, J=7,5 Hz), 5,10-5,25 (1H, m), 5,25-5,40 (2H, m), 6,90-7,20 (8H, m).

Ejemplo de Referencia 7

2-(4-Etilbencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 5 utilizando 2-(4-etilbencil)fenol en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenol.

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,20 (3H, t, J=7,6 Hz), 1,87 (3H, s), 2,03 (3H, s), 2,05 (3H, s), 2,08 (3H, s), 2,60 (2H, c, J=7,6 Hz), 3,80-4,00 (3H, m), 4,18 (1H, dd, J=2,3 Hz, 12,2 Hz), 4,28 (1H, dd, J=5,4, 12,2 Hz), 5,11 (1H, d, J=7,5 Hz), 5,10-5,25 (1H, m), 5,25-5,40 (2H, m), 6,90-7,25 (8H, m).

Ejemplo de Referencia 8

2-(4-Isobutilbencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 5 utilizando 2-(4-isobutilbencil)fenol en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenol.

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

0,88 (6H, d, J=6,6 Hz), 1,75-1,90 (1H, m), 1,87 (3H, s), 2,03 (3H, s), 2,05 (3H, s), 2,08 (3H, s), 2,42 (2H, d, J=7,2 Hz), 3,80-3,95 (3H, m), 4,18 (1H, dd, J=2,4, 12,3 Hz), 4,29 (1H, dd, J=5,5, 12,3 Hz), 5,11 (1H, d, J=7,6 Hz), 5,10-5,25 (1H, m), 5,25-5,40 (2H, m), 6,90-7,25 (8H, m).

Ejemplo de Referencia 9

2-(4-Etoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 5 utilizando 2-(4-etoxibencil)fenol en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenol.

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,39 (3H, t, J=7,0 Hz), 1,91 (3H, s), 2,03 (3H, s), 2,05 (3H, s), 2,07 (3H, s), 3,80-3,95 (3H, m), 3,99 (2H, c, J=7,0 Hz), 4,18 (1H, dd, J=2,5, 12,3 Hz), 4,28 (1H, dd, J=5,6, 12,3 Hz), 5,10 (1H, d, J=7,7 Hz), 5,15-5,25 (1H, m), 5,25-5,40 (2H, m), 6,75-6,85 (2H, m), 6,95-7,10 (5H, m), 7,10-7,20 (1H, m).

\newpage

Ejemplo de Referencia 10

2-(4-Isopropoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 5 utilizando 2-(4-isopropoxibencil)fenol en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenol.

RMN-H^{1} (CDCl_{3}) \delta ppm:

1,30 (6H, d, J=6,0 Hz), 1,90 (3H, s), 2,03 (3H, s), 2,05 (3H, s), 2,08 (3H, s), 3,80-3,90 (3H, m), 4,18 (1H, dd, J=2,3, 12,3 Hz), 4,28 (1H, dd, J=5,5, 12,3 Hz), 4,48 (1H, heptete, J=6,0 Hz), 5,10 (1H, d, J=7,7 Hz), 5,10-5,25 (1H, m), 5,25-5,40 (2H, m), 6,70-7,85 (2H, m), 6,90-7,10 (5H, m), 7,10-7,20 (1H, m).

Ejemplo de Referencia 11

2-(4-Metoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido

Se añadió metóxido de sodio (solución en metanol al 28%; 0,12 ml) a una solución de 2-(4-metoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido (0,11 g) en metanol (4 ml), y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 30 minutos. El disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol = 10/1) para dar 2-(4-metoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido (65 mg).

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

3,35-3,55 (4H, m), 3,69 (1H, dd, J=5,1, 12,1 Hz), 3,73 (3H, s), 3,80-4,00 (2H, m), 4,03 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,91 (1H, d, J=7,4 Hz), 6,75-6,85 (2H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 6,95-7,10 (1H, m), 7,10-7,20 (4H, m).

Ejemplo de Referencia 12

2-(4-Metilbencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 11 utilizando 2-(4-metilbencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenil 2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

2,27 (3H, s), 3,35-3,55 (4H, m), 3,69 (1H, dd, J=5,2, 12,0 Hz), 3,80-3,90 (1H, m), 3,94 (1H, d, J=15,0 Hz), 4,05 (1H, d, J=15,0 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 6,95-7,20 (7H, m).

Ejemplo de Referencia 13

2-(4-Etilbencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 11 utilizando 2-(4-etilbencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,15-1,25 (3H, m), 2,50-2,65 (2H, m), 3,35-3,55 (4H, m), 3,65-3,75 (1H, m), 3,80-4,00 (2H, m), 4,06 (1H, d, J=14,9 Hz), 4,85-5,00 (1H, m), 6,85-7,00 (1H, m), 7,00-7,20 (7H, m)

Ejemplo de Referencia 14

2-(4-Isobutilbencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 11 utilizando 2-(4-isobutilbencil)fenil 2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

0,80-0,95 (6H, m), 1,70-1,90 (1H, m), 2,41 (2H, d, J=7,1 Hz), 3,30-3,55 (4H, m), 3,60-3,75 (1H, m), 3,80-3,95 (1H, m), 3,95 (1H, d, J=15,0 Hz), 4,06 (1H, d, J=15,0 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,80-7,20 (8H, m)

\newpage

Ejemplo de Referencia 15

2-(4-Etoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 11 utilizando 2-(4-etoxilbencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,35 (3H, t, J=6,8 Hz), 3,35-3,55 (4H, m), 3,60-3,75 (1H, m), 3,80-4,10 (5H, m), 4,90 (1H,d, J=7,1 Hz), 6,70-6,85 (2H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 7,00-7,20 (5H, m).

Ejemplo de Referencia 16

2-(4-Isopropoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo de Referencia 11 utilizando 2-(4-isopropoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido en lugar de 2-(4-metoxibencil)fenil-2,3,4,6-tetra-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,27 (6H, d, J=6,0 Hz), 3,35-3,55 (4H, m), 3,69 (1H, dd, J=5,4, 12,1 Hz), 3,88 (1H, d, J=2,0, 12,1 Hz), 3,91 (1H, d, J=15,0 Hz), 4,02 (1H, d, J=15,0 Hz), 4,51 (1H, heptete, J=6,0 Hz), 4,91 (1H, d, J=7,7 Hz), 6,70-6,85 (2H, m), 6,85-6,95 (1H, m), 7,00-7,10 (1H, m), 7,10-7,20 (4H, m).

Ejemplo de Referencia 17

2-(4-Etiltiobencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido

A una solución de 2-(4-etiltiobencil)fenol (0,51 g) y 1,2,3,4,6-penta-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido (2,4 g) en tolueno (6,3 ml) y diclorometano (2,7 ml) se añadió complejo de trifluoruro de boro-éter dietílico (0,78 ml), y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 9 horas. A la mezcla de reacción se añadieron acetato de etilo (70 ml) y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (25 ml), y la capa orgánica se separó. La capa orgánica se lavó con salmuera (25 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se disolvió en metanol (10,5 ml), se añadió metóxido de sodio (solución en metanol al 28%; 0,08 ml) a la solución, y la mezcla se agitó a 25ºC durante 18 horas. A la mezcla de reacción se añadieron acetato de etilo (75 ml) y agua (20 ml), y la capa orgánica se separó. La capa orgánica se lavó con salmuera (20 ml), se secó sobre sulfato de sodio anhidro, y el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol = 10/1). El disolvente se separó a presión reducida, se añadió éter dietílico al residuo, y el producto precipitado resultante se recogió por filtración. El sólido incoloro obtenido se lavó con éter dietílico y se secó a presión reducida para dar 2-(4-etiltiobencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido (0,51 g).

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,24 (3H, t, J=7,3 Hz), 2,88 (2H, c, J=7,3 Hz), 3,35-3,55 (4H, m), 3,69 (1H, dd, J=5,0, 12,2 Hz), 3,88 (1H, dd, J=2,0, 12,2 Hz), 3,95 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,08 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,91 (1H, d, J=7,3 Hz), 6,85-7,00 (1H, m), 7,00-7,10 (1H,m), 7,10-7,30 (6H, m).

Ejemplo 1 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-etoxicarbonil-\beta-D-glucopiranósido

A una solución de 2-(4-metoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido (0,075 g) en 2,4,6-trimetilpiridina (2 ml) se añadió cloroformiato de etilo (0,04 ml) a la temperatura ambiente. Una vez que la mezcla se hubo agitado a la temperatura ambiente durante 16 horas, se añadió a la mezcla de reacción una solución acuosa saturada de ácido cítrico, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. El extracto se lavó con agua y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro. El residuo se purificó mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol = 10/1) para dar 2-(4-metoxibencil)fenil-6-O-etoxicarbonil-\beta-D-glucopiranósido amorfo (0,032 g).

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,23 (3H, t, J=7,1 Hz), 3,30-3,65 (4H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,02 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,05-4,20 (2H, m), 4,29 (1H, dd, J=6,4, 11,7 Hz), 4,45 (1H, dd, J=2,2, 11,7 Hz), 4,89 (1H, d, J=7,4 Hz), 6,75-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,2 (4H, m)

Ejemplo 2 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-metoxicarbonil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 utilizando cloroformiato de metilo en lugar de cloroformiato de etilo.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

3,30-3,65 (4H, m), 3,71 (3H, s), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,01 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,30 (1H, dd, J=6,4, 11,7 Hz), 4,45 (1H, dd, J=2,1, 11,7 Hz), 4,89 (1H, d, J=7,4 Hz), 6,76-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,20
(4H, m).

Ejemplo 3 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-[2-(metoxi)etiloxi-carbonil]-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 utilizando cloroformiato de 2-(metoxi)etilo en lugar de cloroformiato de etilo.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

3,30-3,65 (9H, m), 3,74 (3H, s), 3,92 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,02 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,10-4,25 (2H, m), 4,30 (1H, dd, J=6,3, 11,7 Hz), 4,47 (1H, dd, J=2,1, 11,7 Hz), 4,89 (1H, d, J=7,4 Hz), 6,70-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

Ejemplo 4 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-hexanoil-\beta-D-glucopiranósido

A una solución de 2-(4-metoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido (0,10 g) en 2,4,6-trimetilpiridina (2 ml) se añadió cloruro de hexanoilo (0,072 g) a 0ºC, y la mezcla se agitó durante 3 horas. A la mezcla de reacción se añadió una solución acuosa de ácido cítrico al 10%, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución acuosa de ácido cítrico al 10% y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano/metanol = 10/1) para dar 2-(4-metoxibencil)fenil-6-O-hexanoil-\beta-D-glucopiranósido
(0,030 g)

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

0,80-0,95 (3H, m), 1,20-1,35 (4H, m), 1,50-1,65 (2H, m), 2,25-2,35 (2H, m), 3,30-3,65 (4H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,01 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,22 (1H, dd, J=6,7, 11,8 Hz), 4,42 (1H, dd, J=2,2, 11,8 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,75-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

Ejemplo 5 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-propionil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 4 utilizando cloruro de propionilo en lugar de cloruro de hexanoilo.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,08 (3H, t, J=7,6 Hz), 2,25-2,40 (2H, m), 3,30-3,55 (3H, m), 3,55-3,65 (1H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,01 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,23 (1H, dd, J=6,7, 11,8 Hz), 4,40 (1H, dd, J=2,1, 11,8 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,75-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

Ejemplo 6 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-butiril-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 4 utilizando cloruro de butirilo en lugar de cloruro de hexanoilo.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

\newpage

0,90 (3H, t, J=7,4 Hz), 1,50-1,70 (2H, m), 2,20-2,35 (2H, m), 3,30-3,65 (4H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,01 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,22 (1H, dd, J=6,7, 11,8 Hz), 4,42 (1H, dd, J=2,2, 11,8 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,75-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

Ejemplo 7 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-acetil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 4 utilizando cloruro de acetilo en lugar de cloruro de hexanoilo.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

2,02 (3H, s), 3,30-3,65 (4H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,01 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,24 (1H, dd, J=6,5, 11,9 Hz), 4,38 (1H, dd, J=2,2, 11,9 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,75-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

Ejemplo 8 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-isobutiril-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 4 utilizando cloruro de isobutirilo en lugar de cloruro de hexanoilo.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,11 (3H, d, J=7,0 Hz), 1,12 (3H, d, J=7,0 Hz), 2,45-2,60 (1H, m), 3,30-3,65 (4H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,00 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,19 (1H, dd, J=6,9, 11,8 Hz), 4,43 (1H, dd, J=2,1, 11,8 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,75-6,85 (2H, m), 6,85-7,05 (2H, m), 7,05-7,20 (4H, m).

Ejemplo 9 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-etilsuccinil-\beta-D-glucopiranósido

Se preparó el compuesto del título de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 4 utilizando cloruro de etilsuccinilo en lugar de cloruro de hexanoilo.

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,19 (3H, t, J=7,1 Hz), 2,50-2,70 (4H, m), 3,30-3,65 (4H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,02 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,08 (2H, c, J=7,1 Hz), 4,22 (1H, dd, J=6,7, 11,8 Hz), 4,44 (1H, dd, J=2,1, 11,8 Hz), 4,85-4,95 (1H, m), 6,75-7,25 (8H, m).

Ejemplo 10 2-(4-Metoxibencil)fenil-6-O-isopropiloxi-\beta-D-glucopiranósido

A una solución de isopropanol (0,12 g) en 2,4,6-trimetilpiridina (2 ml) se añadió trifosgeno (0,022 g) a 0ºC, y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de eso, se añadió a la mezcla de reacción 2-(4-metoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido (0,075 g), y la mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante la noche. A la mezcla de reacción se añadió una solución acuosa de ácido cítrico al 10%, y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa de ácido cítrico al 10%, y se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, y el disolvente se separó a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en capa fina preparativa sobre gel de sílice (eluyente: diclorometano:metanol = 10/1) para dar 2-(4-metoxi-bencil)fenil-6-O-isopropiloxicarbonil-\beta-D-glucopiranósido (0,024 g).

RMN-H^{1} (CD_{3}OD) \delta ppm:

1,21 (3H, d, J=6,3 Hz), 1,23 (3H, d, J=6,3 Hz), 3,30-3,65 (4H, m), 3,74 (3H, s), 3,93 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,02 (1H, d, J=15,1 Hz), 4,28 (1H, dd, J=6,4, 11,7 Hz), 4,43 (1H, dd, J=2,2, 11,7 Hz), 4,70-4,85 (1H, m), 4,85-4,95 (1H, m), 6,75-7,20 (8H, m).

Ejemplos 11-12

Los compuestos de la siguiente Tabla 1 fueron preparados de una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 o 2 utilizando un compuesto obtenido en los Ejemplos de Referencia 12-17.

6

TABLA 1

Ejemplo	R	P
11	Metilo	Etoxicarbonilo
12	Metilo	Metoxicarbonilo
13	Etilo	Etoxicarbonilo
14	Etilo	Metoxicarbonilo
15	Isobutilo	Etoxicarbonilo
16	Isobutilo	Metoxicarbonilo
17	Etoxi	Etoxicarbonilo
18	Etoxi	Metoxicarbonilo
19	Isopropilo	Etoxicarbonilo
20	Isopropilo	Metoxicarbonilo
21	Etiltio	Etoxicarbonilo
22	Etiltio	Metoxicarbonilo

Ejemplo de Ensayo 1

Análisis para el efecto inhibidor sobre la actividad de SGLT2 humano 1) Construcción del plásmido vector que expresa SGLT2 humano

La preparación del banco de ADNc para la amplificación fue realizada mediante transcripción inversa de un ARN total derivado de riñón humano (gen Ori) con oligo dT como cebador, utilizando SUPERSCRIPT Preamplification System (Gibco-BRL: LIFE TECHNOLOGIES). El fragmento de ADN que codificaba SGLT2 humano fue amplificado mediante una reacción de PCR utilizando ADN polimerasa Pfu (Stratagene), en la cual se utilizaba el banco de ADNc de riñón humano descrito antes como molde y se utilizaban los siguientes oligonucleótidos 0702F y 0712R, presentados en las Secuencias Números 1 y 2, respectivamente, como moldes. El fragmento de ADN amplificado fue ligado en pCR-Blunt (Invitrogen), un vector para la clonación, según el método normalizado del estuche. La célula competente, Escherichia coli HB101 (Toyobo), fue transformada según el método habitual y después se realizó la selección de los transformantes sobre medio de agar LB conteniendo 50 \mug/ml de kanamicina. Una vez que el ADN plasmídico fue extraído y purificado de uno de los transformantes, se realizó la amplificación del fragmento de ADN que codifica SGLT2 humano mediante reacción PCR utilizando ADN Polimerasa Pfu (Stratagene), en la cual se utilizaron los siguientes oligonucleótidos 0714F y 0715R, presentados en las Secuencias Números 3 y 4, respectivamente, como cebadores. El fragmento de ADN amplificado fue digerido con las enzimas de restricción, XhoI y HindIII, y después purificado con el Wizard Purification System (Promega). Este fragmento de ADN purificado fue insertado en los correspondientes sitios de multi-clonación de pcDNA3.1 (-) Myc/His-B (Invitrogen), un vector para la expresión de la proteína de fusión. La célula competente, Escherichia coli HB101 (Toyobo), fue transformada según el método habitual y después se realizó la selección del transformante sobre medio de agar LB conteniendo 100 \mug/ml de ampicilina. Después de extraer el ADN plasmídico y purificarlo a partir de este transformante, se analizó la secuencia de bases del fragmento de ADN insertado en los sitios de multiclonación de pcDNA3.1 (-) Myc/His-B. Este clon tenía una única sustitución de bases (ATC que codifica isoleucina-433 estaba sustituido por GTC) en comparación con el SGLT2 humano referido por Wells y col (Am. J. Physiol., Vol. 263, págs. 459-465 (1992)). Secuencialmente, se obtuvo un clon en el cual la valina era sustituida por isoleucina-433. Este vector plasmídico que expresaba SGLT2 humano en el cual el péptido presentado como Secuencia Número 5 estaba fusionado al resto alanina carboxi terminal fue denominado KL29.

\vskip1.000000\baselineskip

Secuencia Número 1	ATGGAGGAGCACACAGAGGC

Secuencia Número 2	GGCATAGAAGCCCCAGAGGA

Secuencia Número 3	AACCTCGAGATGGAGGAGCACACAGAGGC

Secuencia Número 4	AACAAGCTTGGCATAGAAGCCCCAGAGGA

Secuencia Número 5	KLGPEQKLISEEDLNSAVDHHHHHH

\vskip1.000000\baselineskip

2) Preparación de las células que expresan transitoriamente SGLT2 humano

KL29, el plásmido que codifica SGLT2 humano, fue transfectado en células COS-7 (RIKEN CELL BANK RCB
0539) mediante electroporación. La electroporación fue realizada con GENE PULSER II (Bio-Rad Laboratories) en las condiciones: 0,290 kV, 975 \muF, 2 x 10^{6} células de células COS-7 y 20 \mug de KL29 en 500 \mul de medio OPTI-MEM I (Gibco-BRL: LIFE TECHNOLOGIES) en la cubeta de tipo 0,4 cm. Tras la transferencia génica, las células fueron cosechadas mediante centrifugación y resuspendidas en medio OPTI-MEM I (1 ml/cubeta). A cada pocillo de la placa de 96 pocillos, se añadieron 125 \mul de esta suspensión celular. Tras cultivar durante la noche a 37ºC en CO_{2} al 5%, se añadieron a cada pocillo 125 \mul de medio DMEM que contenía 10% de suero bovino fetal (Sanko Jyunyaku), 100 unidades/ml de penicilina G sódica (Gibco-BRL: LIFE TECHNOLOGIES) y 100 \mug/ml de sulfato de estreptomicina (Gibco-BRL: LIFE TECHNOLOGIES). Después de cultivar hasta el día siguiente, estas células fueron utilizadas para la medida de la actividad inhibidora de la absorción de metil-\alpha-D-glucopiranósido.

3) Medida de la actividad inhibidora frente a la absorción de metil-\alpha-D-glucopiranósido

Una vez que el compuesto de ensayo se hubo disuelto en dimetilsulfóxido y diluido con el tampón de absorción (un tampón de pH 7,4 conteniendo cloruro de sodio 140 mM, cloruro de potasio 2 mM, cloruro de calcio 1 mM, cloruro de magnesio 1 mM, metil-\alpha-D-glucopiranósido 5 mM, ácido 2-[4-(2-hidroxietil)-1-piperazinil]etanosulfónico 10 mM y tris(hidroximetil)aminometano 5 mM, cada diluyente fue utilizado como muestra de ensayo para la medida de la actividad inhibidora. Tras la separación del medio de las células COS-7 que expresaban SGLT2 humano transitoriamente, se añadieron a cada pocillo 200 \mul del tampón de pretratamiento (un tampón a pH 7,4 conteniendo cloruro de colina 140 mM, cloruro de potasio 2 mM, cloruro de calcio 1 mM, cloruro de magnesio 1 mM, ácido 2-[4-(2-hidroxietil)-1-piperazinil]etanosulfónico 10 mM y tris(hidroximetil)aminometano 5 mM), y las células fueron incubadas a 37ºC durante 10 minutos. Tras separar el tampón de pretratamiento, se añadieron de nuevo 200 \mul del mismo tampón, y las células se incubaron a 37ºC durante 10 minutos. El tampón para la medida fue preparado añadiendo 7 \mul de metil-\alpha-D-(U-14C)glucopiranósido (Amersham Pharmacia Biotech) a 525 \mul de la muestra de ensayo preparada. Para el control, se preparó el tampón para la medida sin el compuesto de ensayo. Para estimar la absorción basal en ausencia de compuesto de ensayo y sodio, se preparó de un modo similar el tampón para la medida de la absorción basal, que contiene cloruro de colina 140 mM en lugar de cloruro de sodio. Una vez separado el tampón de pretratamiento, se añadieron a cada pocillo 75 \mul del tampón para la medida, y las células fueron incubadas a 37ºC durante 2 horas. Una vez separado el tampón para la medida, se añadieron a cada pocillo 200 \mul del tampón de lavado (un tampón a pH 7,4 conteniendo cloruro de colina 140 mM, cloruro de potasio 2 mM, cloruro de calcio 1 mM, cloruro de magnesio 1 mM, metil-\alpha-D-glucopiranósido 10 mM, ácido 2-[4-(2-hidroxietil)-1-piperazinil]etanosulfónico 10 mM y tris(hidroximetil)aminometano 5 mM) e inmediatamente se separaron. Tras dos lavados adicionales, las células fueron solubilizadas mediante la adición de 75 \mul de hidróxido de sodio 0,2 N a cada pocillo. Una vez que los productos de la lisis celular fueron transferidos a PicoPlate (Packard) y se hubieron añadido 150 \mul de MicroScint-40 (Packard), se midió la radiactividad con el contador de centelleo en microplaca TopCount (Packard). Se obtuvo la diferencia en la absorción como el 100% del valor restando la radiactividad en la absorción basal de la del control y después se calcularon las concentraciones a las cuales era inhibida el 50% de la absorción (valor CI_{50}) a partir de la curva concentración-inhibición mediante el método de mínimos cuadrados. Los resultados se muestran en la siguiente Tabla 2.

TABLA 2

Compuesto de Ensayo	Valor CI_{50} (nM)
Ejemplo de Referencia 11	350
Ejemplo de Referencia 12	450
Ejemplo de Referencia 13	140
Ejemplo de Referencia 14	500
Ejemplo de Referencia 15	330
Ejemplo de Referencia 16	370
Ejemplo de Referencia 17	110

Ejemplo de Ensayo 2

Análisis para la absorbabilidad oral 1) Preparación de las muestras para la medida de la concentración de fármaco tras la inyección intravenosa en la vena de la cola

Como animal experimental, se utilizaron ratas SD mantenidas en ayunas durante la noche (CLEA JAPAN, INC., macho, 5 semanas de edad, 140-170 g). Se suspendieron o se disolvieron 60 mg de un compuesto de ensayo en 1,8 ml de etanol y después se disolvieron añadiendo 7,2 ml de polietilenglicol 400 y 9 ml de solución salina para preparar una solución de 3,3 mg/ml. Los pesos corporales de las ratas fueron medidos y después la solución del compuesto de ensayo fue inyectada intravenosamente en la vena de la cola de las ratas no anestesiadas a una dosis de 3 ml/kg (10 mg/kg). La inyección intravenosa a la cola se realizó con una aguja para inyección 26G y una jeringa de 1 ml. Los tiempos de muestreo para la recogida de sangre fueron 2, 5, 10, 20, 30, 60 y 120 minutos después de la inyección intravenosa en la vena de la cola. La sangre fue centrifugada y el plasma fue utilizado como muestra para la medida de la concentración de fármaco en sangre.

2) Preparación de las muestras para la medida de la concentración de fármaco tras la administración oral

Como animal experimental, se utilizaron ratas SD mantenidas en ayunas durante la noche (CLEA JAPAN, INC., macho, 5 semanas de edad, 140-170 g). Se suspendió o disolvió un compuesto de ensayo en solución de carboximetilcelulosa de sodio al 0,5% a una concentración de 1 mg/ml de forma activa. Una vez que se hubieron medido los pesos corporales, el líquido que contenía el compuesto de ensayo descrito antes fue administrado oralmente a una dosis de 10 ml/kg (10 mg/kg como forma activa). La administración oral se realizó con tubo gástrico para rata y una jeringa de 2,5 ml. Los tiempos de muestreo para la recogida de sangre fueron 15, 30, 60, 120 y 240 minutos después de la administración oral. La sangre fue centrifugada y el plasma fue utilizado como muestra para la medida de la concentración de fármaco en sangre.

3) Medida de la concentración de fármaco

A 0,1 ml del plasma obtenido en 1) y 2) descritos antes, se añadió 1 \mug de 2-(4-etoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido descrito en el Ejemplo de Referencia 15 como patrón interno y después se realizó la desproteinización añadiendo 1 ml de metanol. Tras la centrifugación, se evaporó la fase de metanol hasta sequedad en corriente de nitrógeno. El residuo se disolvió en 300 \mul de la fase móvil y se inyecto una alícuota de 30 \mul de la solución en la HPLC. La concentración de fármaco en plasma fue analizada mediante el método de HPLC en las siguientes condiciones.

Columna: Inertsil ODS-2 (4,6 x 250 mm)

Fase Móvil: Acetonitrilo/tampón fosfato 10 mM (pH 3,0) = 25:75 (v/v)

Temperatura de la columna: 50ºC

Velocidad de flujo: 1,0 ml/minuto

Longitud de onda para la medida: UV 232 nm

\newpage

Tras la adición de 1 \mug de 2-(4-etoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido descrito en el Ejemplo de Referencia 15 como patrón interno y cada concentración (1,0, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05 y 0,02 \mug) de 2-(4-metoxibencil)fenil-\beta-D-glucopiranósido descrito en el Ejemplo de Referencia 11 a 0,1 ml del plasma blanco, se realizó una operación similar a la descrita antes y después se preparó una curva patrón.

Se estimó cada área bajo la curva de concentración de plasma-tiempo mediante inyección intravenosa en la vena de la cola y la administración oral de compuesto de ensayo con WinNonlin Standard elaborado por Pharsight Corporation a partir de concentraciones de plasma en cada momento obtenido a partir de la HPLC y después se calculó la biodisponibilidad (%) mediante la siguiente fórmula. Los resultados se muestran en la siguiente Tabla 3.

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+\hfil#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 \+  \begin{minipage}[t]{70mm}Área bajo la curva de
Concentración en Plasma -  {}\hskip0,8cm Tiempo mediante
Administración Oral\end{minipage} \+\cr  Biodisponibilidad (%)
= \+
------------------------------------------------------------------------------------
\+ x 100\cr  \+  \begin{minipage}[t]{87mm} {}\hskip0,8cm Área
bajo la curva de Concentración en Plasma - {}\hskip0,8cm  Tiempo
mediante Inyección Intravenosa en la Vena de la
Cola\end{minipage} \+\cr}

\vskip1.000000\baselineskip

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 3

Compuesto de Ensayo	Biodisponibilidad (%)
Ejemplo 1	46
Ejemplo 4	61
Ejemplo de Referencia 11	15

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Ejemplo de Ensayo 3

Análisis del efecto facilitador de la excreción de glucosa urinaria

Como animal experimental, se utilizaron ratas SD no mantenidas en ayunas (SLC. Inc., macho, 8 semanas de edad, 270-320 g). Se suspendió un compuesto de ensayo en solución de carboximetilcelulosa de sodio al 0,5% y se prepararon suspensiones de 0,3, 1 y 3 mg/ml. Una vez que se hubieron medido los pesos corporales de las ratas, se administró oralmente la suspensión de ensayo a una dosis de 10 ml/kg (3, 10 y 30 mg/kg). Para el control, se administró solamente oralmente solución de carboximetil-celulosa de sodio al 0,5% a una dosis de 10 ml/kg. La administración oral se realizó con tubo gástrico para rata y una jeringa de 2,5 ml. El recuento de cabezas por grupo era de 5 o 6. La recogida de la orina se realizó en una jaula metabólica una vez que la administración oral hubo terminado. El tiempo de muestreo para la recogida de orina fue de 24 horas tras la administración oral. Tras la recogida de la orina, se registró el volumen de orina y se midió la concentración de glucosa en la orina. La concentración de glucosa fue medida con un estuche para ensayo de laboratorio: Glucose B-Test WAKO (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). La cantidad de excreción de glucosa en orina en 24 horas por 200 g de peso corporal fue calculada a partir del volumen de orina, la concentración de glucosa urinaria y el peso corporal. Los resultados se muestran en la siguiente Tabla 4.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 4

Compuesto	Dosis	Cantidad de Excreción de Glucosa Urinaria
de Ensayo	(mg/kg)	(mg/24 horas\cdot200 g peso corporal)
Ejemplo 1	3	52
	10	239
	30	513

\newpage

Ejemplo de Ensayo 4

Ensayo de Toxicidad Aguda

Se mantuvieron en ayunas ratones ICR macho de cuatro semanas de edad (CLEA JAPAN, INC. 22-28 g, 5 animales en cada grupo) durante 4 horas, y se administraron oralmente 60 mg/ml de una suspensión de compuesto de ensayo en solución de carboximetilcelulosa de sodio al 0,5% a una dosis de 10 ml/kg (600 mg/kg). No se observó muerte alguna hasta las 24 horas después de la administración como se muestra en la siguiente Tabla 5.

\vskip1.000000\baselineskip

TABLA 5

Compuesto de Ensayo	Número de muertes
Ejemplo 1	0/5

\vskip1.000000\baselineskip

Aplicabilidad industrial

Los derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno representados por la fórmula general (I) anterior de la presente invención tienen una absorción oral mejorada y pueden ejercer una actividad inhibidora de SGLT2 humano excelente mediante la conversión en derivados de glucopiranosiloxibencilbenceno representados por la fórmula general (II) anterior como formas activas del mismo in vivo tras la administración oral. La presente invención puede proporcionar agentes para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia tales como la diabetes, las complicaciones diabéticas, la obesidad o similar, que también son adecuados como formulaciones orales.

Claims

1. Un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno representado por la fórmula general:

\vskip1.000000\baselineskip

7

2. Un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno como se reivindica en la reivindicación 1 representado por la fórmula general:

8

donde R^{1} representa un grupo alquilo inferior o un grupo alcoxi inferior; y P^{1} representa un grupo acilo inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo acilo inferior sustituido con alcoxi(inferior)carbonilo, alcoxi(inferior)carbonilo o un grupo alcoxi(inferior carbonilo sustituido con alcoxi inferior.

\newpage

3. Un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno como se reivindica en la reivindicación 1, representado por la fórmula general:

9

Donde R representa un grupo alquilo inferior, un grupo alcoxi inferior, un grupo alquil(inferior)tio, un grupo alquilo inferior sustituido con alcoxi inferior, un grupo alcoxi inferior sustituido con alcoxi inferior o un grupo alquil(inferior)tio sustituido con alcoxi inferior; y P^{2} representa un grupo acilo inferior o un grupo alcoxi(inferior)carbonilo.

4. Un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno como se reivindica en la reivindicación 2 o 3, representado por la fórmula general

10

donde R^{1} representa un grupo alquilo inferior o un grupo alcoxi inferior; y P^{2} representa un grupo acilo inferior o un grupo alcoxi(inferior)carbonilo.

5. El derivado glucopiranosiloxibencilbenceno como se reivindica en la reivindicación 4, representado por la fórmula:

11

6. El derivado glucopiranosiloxibencilbenceno como se reivindica en la reivindicación 4, representado por la fórmula:

12

7. Una composición farmacéutica que comprende como ingrediente activo un derivado glucopiranosiloxibencil-benceno como se reivindica en la reivindicación 1 a 6.

8. Una composición farmacéutica como se reivindica en la reivindicación 7, donde la composición es una formulación oral.

9. Un inhibidor de SGLT2 humano que comprende como ingrediente activo un derivado glucopiranosiloxibencil-benceno como se reivindica en las reivindicaciones 1 a 6.

10. Un inhibidor como se reivindica en la reivindicación 9, donde la composición es un agente para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia.

11. Un inhibidor como se reivindica en la reivindicación 10, donde la enfermedad asociada con la hiperglucemia es la diabetes o las complicaciones diabéticas.

12. Un inhibidor como se reivindica en la reivindicación 10, donde la enfermedad asociada con la hiperglucemia es la obesidad.

13. El uso de un derivado glucopiranosiloxibencil-benceno como se reivindica en la reivindicación 1 a 6 para la fabricación de una composición farmacéutica para la prevención o el tratamiento de una enfermedad asociada con la hiperglucemia.

14. Un derivado glucopiranosiloxibencilbenceno como se reivindica en la reivindicación 1 a 6 para su uso en el tratamiento o la prevención de una enfermedad asociada con la hiperglucemia.

15. El uso reivindicado en la reivindicación 13, donde la enfermedad asociada con la hiperglucemia es la diabetes o las complicaciones diabéticas.

16. El uso reivindicado en la reivindicación 13, donde la enfermedad asociada con la hiperglucemia es la obesidad.