ES2273902T3 - Derivados de 1-metilcarbapenem. - Google Patents

Derivados de 1-metilcarbapenem. Download PDF

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ES2273902T3 ES01983800T ES01983800T ES2273902T3 ES 2273902 T3 ES2273902 T3 ES 2273902T3 ES 01983800 T ES01983800 T ES 01983800T ES 01983800 T ES01983800 T ES 01983800T ES 2273902 T3 ES2273902 T3 ES 2273902T3
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methylcarbapen
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Yoshiyuki Kobayashi
Tsuyoshi Shinozuka
Osamu Kanno
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    • C07D477/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
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Abstract

Un compuesto de 1-metilcarbapenem representado por la fórmula (I): en la que: R1 representa (1) a un grupo representado por la fórmula COOR3 [en la que R3 representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C1-C6 o un grupo cicloalquilo de C3-C6], (2) a un grupo representado por la fórmula CONR4R5 [en la que R4 y R5 pueden ser iguales o distintos y representan cada uno a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C1-C6 (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente A que se indica más adelante), un grupo cicloalquilo de C3-C6, un grupo heterocíclico de 3 a 6 miembros o un grupo arilo de C6-C10 (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B que se indica más adelante), o R4 y R5, junto con el átomo de nitrógeno al cual están enlazados, representan a un heterociclo de 3 a 6 miembros con contenido de nitrógeno (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B que se indica más adelante)], (3) a un grupo ciano.

Description

Derivados de 1-metilcarbapenem.
La presente invención se refiere un compuestos de 1-metilcarbapenem que tienen una excelente actividad antibacteriana, ésteres o sales de los mismos farmacológicamente aceptables, composiciones farmacéuticas (particularmente agentes antibacterianos) que los contengan como ingrediente activo, uso de dichos compuestos, derivados tipo éster o sales para la fabricación de dichas composiciones farmacéuticas, o un método para la prevención o el tratamiento de enfermedades (de forma particular infecciones bacterianas) que comprenden la administración de una cantidad farmacológicamente efectiva de dichos compuestos, de los derivados éster o las sales a animales de sangre caliente (de forma particular a seres vivos).
Antecedentes de la invención
Hay una necesidad de desarrollo de derivados de carbapenem que tengan una gran y equilibrada actividad antibacteriana frente a un amplio rango de bacterias patogénicas. Los compuestos de 1-metilcarbapenem que tienen una estructura análoga a los de la presente invención han sido descritos en la solicitud de patente japonesa (Kokai) No. Hei 8-53453 (US 5534510).
Los presentes inventores han llevado a cabo, durante largo tiempo, investigaciones relativas a compuestos de 1-metilcarbapenem. Como resultado, se ha encontrado que los compuestos de fórmula (I) de la presente invención, cuando se comparan con los derivados de 1-metilcarbapenem convencionales, tienen un mayor poder antibacteriano y son efectivos como agentes antibacterianos para el tratamiento o la prevención (particularmente para el tratamiento) de infecciones bacterianas, particularmente infecciones del sistema respiratorio, constituyendo la presente invención.
Descripción detallada de la invención
La presente invención se refiere a compuestos de 1-metilcarbapenem representados por la fórmula (I):
1
o a sales o a ésteres farmacológicamente aceptables de los mismos.
En la fórmula, R^{1} representa
(1) un grupo representado por la fórmula COOR^{3}
[en donde R^{3} representa un átomo de hidrógeno, un grupo acilo de C_{1}-C_{6} o un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}],
(2) un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5}
[en donde R^{4} y R^{5} pueden ser iguales o diferentes y cada uno de ellos representa un átomo de hidrógeno, un grupo acilo de C_{1}-C_{6} (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes A que se describen a continuación), un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6} o un grupo heterocíclico de 3- a 6- miembros o un grupo arilo de C_{6}-C_{10} (que puede estar sustituido por uno o dos grupos, que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B que se describen a continuación), o, junto con al átomo de nitrógeno al que están unidos, representan un heterociclo de 3- a 6- miembros conteniendo nitrógeno (que puede estar sustituido por uno o dos grupos, que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre grupo de sustituyentes B que se describen a continuación)],
(3) un grupo ciano,
(4) un grupo representado por la fórmula CH_{2}OR^{6}
[en donde R^{6} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} o un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}] o
(5) un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8}
[en donde R^{7} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} o un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, y R^{8} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}, un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{6}, un grupo (arilo de C_{6}-C_{10})carbonilo (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B que se describen a continuación), un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{6})carbonilo, un grupo heterociclilcarbonilo aromático de 5- o 6- miembros, un grupo alquilsulfonilo de C_{1}-C_{6} o un grupo arilsulfonilo de C_{6}-C_{10}, o R^{7} y R^{8}, junto con al átomo de nitrógeno al que están unidos, representan un grupo succinimida (que puede estar condensado con un grupo fenilo)];
R^{2} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{6};
n representa 1, 2 o 3;
X representa un átomo de azufre o un átomo de oxígeno;
el grupo de sustituyentes A comprende un grupo hidroxilo, un grupo amino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carbamoilo (cuya mitad amino puede estar sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carboxilo, un grupo ciano y un grupo alcoxi de C_{1}-C_{6}; y
el grupo de sustituyentes B comprende un grupo hidroxi-alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo amino-alquilo de C_{1}-C_{4} (cuya mitad amino puede estar sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carbamoilo (cuya mitad amino puede estar sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carboxilo, un grupo hidroxilo, un grupo amino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo alcoxi de C_{1}-C_{6} y un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}].
En la descripción anterior, el "grupo alquilo de C_{1}-C_{6}" en las definiciones de R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, el grupo de sustituyentes A y el grupo de sustituyentes B en un grupo hidrocarbonato saturado lineal o ramificado que tiene entre 1 y 6 átomos de carbono. Ejemplos de dicho grupo incluyen los grupos metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, tert-butilo, n-pentilo, isopentilo, 2-metilbutilo, neopentilo, 1-etilpropilo, n-hexilo, isohexilo, 4-metilpentilo, 3-metilpentilo, 2-metilpentilo, 1-metilpentilo, 3,3-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 1,1-dimetilbutilo, 1,2-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo, 2-etilbutilo y 1-metil-2-metilpropilo. En las definiciones de R^{2}, R^{3}, R^{6}, R^{7}, R^{8}, el grupo de sustituyentes A y el grupo de sustituyentes B, se prefiere un grupo alquilo de C_{1}-C_{3} y se prefiere de forma particular un grupo metilo. En la definición de R^{4}, se prefiere un grupo alquilo de C_{1}-C_{3} y se prefiere de forma particular un grupo metilo o isopropilo. En la definición de R^{5}, se prefiere un grupo alquilo de C_{2}-C_{6} y es más preferido un grupo 1-metil-2-metilpropilo.
El "grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}" en las definiciones de R^{3}, R^{4}, R^{5}, R^{6}, R^{7} y R^{8}, es un grupo hidrocarbonado cíclico de entre 3 y 6 átomos de carbono. Ejemplos de dicho grupo incluyen los grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo, de los que se prefiere un grupo ciclopropilo.
El "grupo heterocíclico de 3- a 6- miembros" en las definiciones de R^{4} y R^{5} es un grupo heterocíclico saturado que incluye uno o dos átomos de oxígeno, nitrógeno y azufre. Ejemplos de dicho grupo incluyen los grupos aziridinilo, azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxiranilo, oxetanilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotienilo, morfolinilo, piperazinilo y tiomorfolinilo, de los que se prefiere un grupo heterocíclico de 4- a 6- miembros conteniendo nitrógeno y es más preferido un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
Ejemplos del "grupo arilo de C_{6}-C_{10}" en las definiciones de R^{4} y R^{5} y de la mitad "arilo de C_{6}-C_{10}" del "grupo (arilo de C_{6}-C_{10})carbonilo" y del "grupo arilsulfonilo de C_{6}-C_{10}" en la definición de R^{8} incluyen los grupos fenilo, indenilo y naftilo, de los que el grupo fenilo es el preferido.
El "heterociclo conteniendo nitrógeno" del "heterociclo conteniendo nitrógeno de 3- a 6- miembros" en las definiciones del grupo formado por R^{4} y R^{5}, junto con al átomo de nitrógeno al que están unidos, es un grupo heterocíclico saturado conteniendo uno o dos átomos de nitrógeno y que puede contener un átomo de oxígeno o de azufre. Ejemplos de dicho grupo incluyen los grupos aziridino, azetidino, pirrolidino, piperidino, morfolino, piperazino y tiomorfolino, de los que se prefiere un heterociclo de 4- a 6- miembros conteniendo nitrógeno y siendo los más preferidos los grupos azetidino, piperazino, morfolino o tiomorfolino.
El "grupo alcanoilo de C_{1}-C_{6}" en la definición de R^{8} es un grupo alcanoilo lineal o ramificado de entre 1 y 6 átomos de carbono. Ejemplos de dicho grupo incluyen los grupos formilo, acetilo, propionilo, butirilo, isobutirilo, valerilo, isovalerilo, pivaloilo y hexanoilo, de los que el preferido es un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{3} y el más preferido es un grupo acetilo.
La mitad "alcoxi de C_{1}-C_{6}" del "grupo (alcoxi de C_{1}-C_{6})carbonilo" en la definición de R^{8} y el "grupo alcoxi de C_{1}-C_{6}" en las definiciones de los grupos sustituyentes es un grupo alcoxi lineal o ramificado de entre 1 y 6 átomos de carbono. Ejemplos de dicho grupo incluyen los grupos metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, pentiloxi y hexiloxi, de los que el preferido es un grupo alcoxi de C_{1}-C_{3} y el más preferido es un grupo metoxi.
La mitad "heterocíclica aromática de 5- o 6- miembros" del "grupo heterociclilcarbonilo aromático de 5- o 6- miembros" en la definición de R^{8} es un heterociclo aromático heterociclo conteniendo entre uno y tres átomos de oxígeno, nitrógeno y azufre. Ejemplos de dichos heterociclos incluyen pirrol, imidazol, tiazol, oxazol, isoxazol, furano, tiofeno, triazol, tiadiazol, piridina, pirimidina, piridazina y triazina, de los que los preferidos son el furano, el tiofeno o la piridina.
Ejemplos del "grupo hidroxi-alquilo de C_{1}-C_{4}-alquilo" en el grupo de sustituyentes B incluyen los grupos hidroximetilo, hidroxietilo, hidroxipropilo y hidroxibutilo, de los que el preferido es un grupo hidroxi-alquilo de C_{1}-C_{2} y el más preferido es un grupo hidroximetilo.
Ejemplos del "grupo amino-alquilo de C_{1}-C_{4}" en el grupo de sustituyentes B incluyen los grupos aminometilo, aminoetilo, aminopropilo y aminobutilo, de los que el preferido es un grupo amino-alquilo de C_{1}-C_{2} y el más preferido es un grupo aminometilo.
Preferiblemente el grupo de sustituyentes A comprende un grupo hidroxilo, un grupo amino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{3}) y un grupo carbamoilo, de los que el más preferido es un grupo amino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos metilo o etilo).
Preferiblemente el grupo de sustituyentes B comprende un grupo hidroxi-alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo amino-alquilo de C_{1}-C_{4} (cuya mitad amino puede estar sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{3}), un grupo carbamoilo (cuya mitad amino puede estar sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{3}), un grupo hidroxilo y un grupo amino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{3}), de los que los más preferidos son un grupo que comprende un grupo hidroximetilo, un grupo aminometilo (cuya mitad amino puede estar sustituida por uno o dos grupos metilo o etilo), un grupo carbamoilo (cuya mitad amino puede estar sustituida por uno o dos grupos metilo o etilo), un grupo hidroxilo y un grupo amino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos metilo o etilo), siendo todavía más preferidos un grupo aminometilo y un grupo amino.
El "éster farmacológicamente aceptable" del compuesto (I) es un éster en el que algunos de los grupos carboxilo o hidroxilo del compuesto (I) están protegidos por un grupo que puede ser hidrolizado en el cuerpo de un ser vivo o de un animal por un método químico o biológico tal como la hidrólisis para proporcionar el compuesto (I) original o una sal del mismo. El que un derivado sea o no sea un éster de dicho tipo puede ser determinado por la administración oral o intravenosa del derivado a un animal de experimentación tal como una rata o ratón, estudiando el fluido corporal del animal y detectando el compuesto original (I) o la sal del mismo.
Ejemplos del grupo protector que forma un éster de un grupo carboxilo incluyen un grupo alquilo de C_{1}-C_{10}, un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6} alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo alcanoiloxi de C_{2}-C_{10} alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{10})carboniloxi-alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo fenilo (dicho grupo fenilo puede estar sustituido por uno o dos grupos seleccionados entre un átomo de halógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{4}, un grupo alcoxi de C_{1}-C_{4}, un grupo metilenedioxi y un grupo alcanoiloxi de C_{1}-C_{6}), un grupo alcanoiloxibencilo de C_{1}-C_{10}, un grupo ftalidilo y un grupo 5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-ilmetilo.
Ejemplos del grupo protector que forma un éster de un grupo hidroxilo incluyen un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{10}, un grupo (arilo de C_{6}-C_{10})carbonilo, un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{10})carbonilo y un grupo aminoacilo.
Ejemplos del anterior "grupo alquilo de C_{1}-C_{10}" incluyen los grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, s-butilo, t-butilo, pentilo, 2-pentilo, 3-pentilo, isopentilo, hexilo, 2-hexilo, 3-hexilo, isohexilo, heptilo, octilo, nonilo y decilo, de los que es preferido un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}, es más preferido un grupo alquilo de C_{2}-C_{4} y es aún más preferido un grupo etilo.
Ejemplos del "grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}" incluyen los grupos ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo, de los que es preferido un grupo ciclopentilo o ciclohexilo.
Ejemplos del "grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6} alquilo de C_{1}-C_{4}" incluyen los grupos ciclopropilmetilo, ciclopropiletilo, ciclopropilpropilo, ciclopropilbutilo, ciclobutilmetilo, ciclobutiletilo, ciclobutilpropilo, ciclopentilmetilo, ciclopentiletilo, ciclopentilpropilo, ciclohexilmetilo y ciclohexiletilo, de los que es preferido el grupo ciclopropilmetilo.
Ejemplos del "grupo alcanoiloxi de C_{2}-C_{10} alquilo de C_{1}-C_{4}" incluyen los grupos acetoximetilo, 1-(acetoxi)etilo, 1-
(acetoxi)propilo, 1-(acetoxi)butilo, propioniloximetilo, 1-(propioniloxi)etilo, isopropioniloximetilo, 1-(isopropio-
niloxi)etilo, butiriloximetilo, 1-(butiriloxi)etilo, isobutiriloximetilo, 1-(isobutiriloxi)etilo, pivaloiloximetilo, 1-(pivaloiloxi)etilo, valeriloximetilo, 1-(valeriloxi)etilo, isovaleriloximetilo, 1-(isovaleriloxi)etilo, hexanoiloximetilo, 1-(hexanoiloxi)etilo, octanoiloximetilo, 1-(octanoiloxi)etilo, decanoiloximetilo, ciclopentilcarboniloximetilo, 1-metilciclopentilcarboniloximetilo, ciclohexilcarboniloximetilo y 1-metilciclohexilcarboniloximetilo, de los es preferido un grupo alcanoiloximetilo de C_{2}-C_{6} o un grupo 1-(alcanoiloxi de C_{2}-C_{6})etilo.
Ejemplos del "grupo (alcoxi de C_{1}-C_{10})carboniloxi-alquilo de C_{1}-C_{4}" incluyen los grupos metoxicarboniloxi-
metilo, 1-(metoxicarboniloxi)etilo, etoxicarboniloximetilo, 1-(etoxicarboniloxi)etilo, 1-(etoxicarboniloxi)propilo, 1-(etoxicarboniloxi)butilo, propoxicarboniloximetilo, 1-(propoxicarboniloxi)etilo, isopropoxicarboniloximetilo, 1-(isopropoxicarboniloxi)etilo, butoxicarboniloximetilo, 1-(butoxicarboniloxi)etilo, isobutoxicarboniloximetilo, 1-(isobutoxicarboniloxi)etilo, s-butoxicarboniloximetilo, 1-(s-butoxicarboniloxi)etilo, t-butoxicarboniloximetilo, 1-(t-butoxicarboniloxi)etilo, pentiloxicarboniloximetilo, 1-(pentiloxicarboniloxi)etilo, (1-metilbutiloxicarboniloxi)metilo, 1-(1-metilbutiloxicarboniloxi)etilo, (2-metilbutiloxicarboniloxi)metilo, 1-(2-metilbutiloxicarboniloxi)etilo, (3-metilbutiloxicarboniloxi)metilo, 1-(3-metilbutiloxicarboniloxi)etilo, (1-etilpropiloxicarboniloxi)metilo, 1-(1-etilpropiloxicarboniloxi)etilo, hexiloxicarboniloximetilo, 1-(hexiloxicarboniloxi)etilo, (1-metilpentiloxicarboniloxi)metilo, 1-(1-metilpentiloxicarboniloxi)etilo, octiloxicarboniloximetilo, 1-(octiloxicarboniloxi)etilo, deciloxicarboniloximetilo, 1-(deciloxicarboniloxi)etilo, ciclopentilcarboniloximetilo, 1-(ciclopentiloxicarboniloxi)etilo, ciclohexilcarboniloximetilo y 1-(ciclohexiloxicarboniloxi)etilo, de los que es preferido un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{6})carboniloximetilo o 1-((alcoxi de C_{1}-C_{6})carboniloxi)etilo.
Ejemplos del "grupo fenilo que puede estar sustituido" incluyen los grupos fenilo, 3-fluorofenilo, 4-fluorofenilo, 3,4-difluorofenilo, 3-metilfenilo, 4-metilfenilo, 3-metoxifenilo, 4-metoxifenilo, 3,4-dimetoxifenilo, 3,4-metilenedioxifenilo, 3-acetoxifenilo y 4-acetoxifenilo, de los que es preferido un grupo fenilo.
Ejemplos del "grupo alcanoiloxibencilo de C_{2}-C_{10}" incluyen los grupos 2-acetoxibencilo, 3-acetoxibencilo, 4-acetoxibencilo, 3-propioniloxibencilo, 4-propioniloxibencilo, 4-butiriloxibencilo, 4-valeriloxibencilo, 4-hexanoiloxibencilo, 4-octanoiloxibencilo y 4-decanoiloxibencilo, de los que es preferido el grupo 3- o 4-(alcanoiloxi de C_{2}-C_{4})bencilo.
Ejemplos del "grupo alcanoilo de C_{1}-C_{10}" incluyen los grupos formilo, acetilo, propionilo, butirilo, pentanoilo, hexanoilo, octanoilo y decanoilo, de los que es preferido un grupo alcanoilo de C_{2}-C_{6}.
Ejemplos del "grupo (arilo de C_{6}-C_{10})carbonilo" incluyen los grupos benzoilo, 1-naftoilo y 2-naftoilo, de los que se prefiere el grupo benzoilo.
Ejemplos del "grupo (alcoxi de C_{1}-C_{10})carbonilo" incluyen los grupos metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, butoxicarbonilo, pentiloxicarbonilo, hexiloxicarbonilo, octiloxicarbonilo y deciloxicarbonilo, de los que es preferido un grupo alcoxicarbonilo de C_{2}-C_{6}.
Ejemplos del "grupo aminoacilo" incluyen un grupo amino ácido tal como glicilo, alanilo, \beta-alanilo, leucilo, isoleucilo, fenilalanilo, histidilo, asparagilo, prolilo y lisilo, de los que es preferido un grupo glicilo.
Los compuestos (I) y los ésteres farmacológicamente aceptables de los mismos de la presente invención pueden formar sales farmacológicamente aceptables en el caso en que sea necesario.
La "sal farmacológicamente aceptable del mismo" es una sal en la que puede convertirse el compuesto (I) de la presente invención. Ejemplos preferidos de dichas sales incluyen sales de metales alcalinos tales como una sal de sodio, una sal de potasio y una sal de litio; sales de metales alcalinotérreos tales como una sal de calcio y una sal de magnesio; sales de metales tales como una sal de aluminio, una sal de hierro, una sal de zinc, una sal de cobre, una sal de níquel y una sal de cobalto; sales de amina tales como sales inorgánicas tales como una sal de amonio y sales orgánicas tales como una sal de t-octilamina, una sal de dibencilamina, una sal de morfolina, una sal de glucosamina, una sal de un éster de alquilo de fenilglicina, una sal de etilenediamina, una sal de N-metilglucamina, una sal de guanidina, una sal de dietilamina, una sal de trietilamina, una sal de diciclohexilamina, una sal de N,N’-dibenciletilenediamina, una sal de cloroprocaína, una sal de procaina, una sal de dietanolamina, una sal de N-bencil-fenetilamina, una sal de piperacina, una sal de tetrametilamonio y una sal de tris(hidroximetil)aminometano; sales de ácidos inorgánicos tales como sales de ácidos hidrohalicos tales como un hidrofluoruro, un hidrocloruro, un hidrobromuro o un hidroyoduro, un nitrato, un perclorato, un sulfato o un fosfato; alcanosulfonatos inferiores tales como un metanosulfonato, trifluorometanosulfonato o un etanosulfonato; arilsulfonatos tales como un bencenosulfonato o un p-toluenosulfonato; y sales de ácidos orgánicos tales como un acetato, un malato, un fumarato, un succinato, un citrato, un tartrato, un oxalato o un maleato; y sales de amino ácidos tales como una sal de glicina, una sal de lisina, una sal de arginina, una sal de ornitina, un glutamato o un aspartato.
Los compuestos (I), las sales farmacéuticamente aceptables y los derivados éster de los mismos de la presente invención incluyen hidratos o solvatos de los mismos.
En los compuestos de la fórmula (I), se prefieren los siguientes compuestos.
\vskip1.000000\baselineskip
(1) Respecto a R^{1}:
(1-1) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5}, un grupo ciano o un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8};
(1-2) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} o un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8};
(1-3) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5}.
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(2) Respecto a R^{2}:
(2-1) compuestos en donde R^{2} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3} alquilo;
(2-2) compuestos en donde R^{2} representa un átomo de hidrógeno.
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(3) Respecto a R^{3}:
(3-1) compuestos en donde R^{3} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3};
(3-2) compuestos en donde R^{3} representa un átomo de hidrógeno, un grupo metilo o un grupo etilo.
\vskip1.000000\baselineskip
(4) Respecto a R^{4}:
(4-1) compuestos en donde R^{4} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3};
(4-2) compuestos en donde R^{4} representa un átomo de hidrógeno, un grupo metilo o un grupo isopropilo.
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(5) Respecto a R^{5}:
(5-1) compuestos en que R^{5} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes A) o un grupo heterocíclico de 4- a 6- miembros conteniendo nitrógeno;
(5-2) compuestos en donde R^{5} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes A), o un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
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(6) Respecto a R^{4} y R^{5}:
(6-1) compuestos en donde R^{4} y R^{5}, junto con al átomo de nitrógeno al que están unidos, representan un heterociclo de 4- a 6- miembros conteniendo nitrógeno (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B);
(6-2) compuestos en donde R^{4} y R^{5}, junto con al átomo de nitrógeno al que están unidos, representa un grupo azetidino, piperazino, morfolino o tiomorfolino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B).
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(7) Respecto a R^{6}:
(7-1) compuestos en donde R^{6} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3};
(7-2) compuestos en donde R^{6} representa un átomo de hidrógeno.
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(8) Respecto a R^{7}:
(8-1) compuestos en donde R^{7} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3};
(8-2) compuestos en donde R^{7} representa un átomo de hidrógeno o un grupo metilo;
(8-3) compuestos en donde R^{7} representa un átomo de hidrógeno.
\vskip1.000000\baselineskip
(9) Respecto a R^{8}:
(9-1) compuestos en donde R^{8} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}, un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{3}, un grupo benzoilo (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B), un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{3})carbonilo, un grupo tienilcarbonilo, un grupo furilcarbonilo o un grupo piridilcarbonilo;
(9-2) compuestos en donde R^{8} representa un átomo de hidrógeno, un grupo benzoilo (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B), un grupo (2-tienil)carbonilo, un grupo (2-furil)carbonilo o un grupo (3-piridil)carbonilo.
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(10) Respecto a n:
(10-1) compuestos en donde n representa 1.
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(11) Respecto a X:
(11-1) compuestos en donde X representa un átomo de oxígeno.
Los compuestos obtenidos por la combinación arbitraria de 2 o más de los sustituyentes preferidos listados anteriormente son los más preferidos. Los ejemplos más preferidos entre estos compuestos incluyen los siguiente compuestos:
(12) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en donde R^{4} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}; y R^{5} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes A) o grupo heterocíclico de 4- a 6- miembros conteniendo nitrógeno); R^{2} representa un átomo de hidrógeno; n representa 1; y X representa un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
(13) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en donde R^{4} representa un átomo de hidrógeno, un grupo metilo o un grupo isopropilo; y R^{5} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes A), o un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo); n representa 1; y X representa un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
(14) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en donde R^{4} y R^{5}, junto con al átomo de nitrógeno al que están unidos, representan un heterociclo de 4- a 6- miembros conteniendo nitrógeno (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B); R^{2} representa un átomo de hidrógeno; n representa 1; y X representa un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
(15) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en donde R^{4} y R^{5}, junto con al átomo de nitrógeno al que están unidos, representa un grupo azetidino, piperazino, morfolino o tiomorfolino (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B)); R^{2} representa un átomo de hidrógeno; n representa 1; y X representa un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
(16) compuestos en donde R^{1} representa un grupo ciano; R^{2} representa un átomo de hidrógeno; n representa 1; y X representa un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
(17) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8} (en donde R^{7} representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}; y R^{8} representa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}, un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{3}, un grupo benzoilo (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B), un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{3})carbonilo, un grupo tienilcarbonilo, un grupo furilcarbonilo o un grupo piridilcarbonilo); R^{2} representa un átomo de hidrógeno; n representa 1; y X representa un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
(18) compuestos en donde R^{1} representa un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8} (en donde R^{7} representa un átomo de hidrógeno o un grupo metilo; y R^{8} representa un átomo de hidrógeno, un grupo benzoilo (que puede estar sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o diferentes y están seleccionados entre el grupo de sustituyentes B), un grupo (2-tienil)-carbonilo, un grupo (2-furil)-carbonilo o un grupo (3-piridil)-carbonilo); R^{2} representa un átomo de hidrógeno; n representa 1, y X representa un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
Ciertos compuestos (I) de la presente invención son ejemplificados de forma específica en las Tablas 1 a 5. Debe hacerse notar que los compuestos (I) de la presente invención no están limitados a estos compuestos ejemplificados.
En las Tablas 1 a 5, Me representa un grupo metilo, Et un grupo etilo, Pr un grupo propilo, iPr un grupo isopropilo, Bu un grupo butilo, Pen un grupo pentilo, Hex un grupo hexilo, cPr un grupo ciclopropilo, cBu un grupo ciclobutilo, cPen un grupo ciclopentilo, cHex un grupo ciclohexilo, Azt un grupo azetidinilo, Pir un grupo pirrolidinilo, Pip un grupo piperidinilo, y Ph un grupo fenilo. El término "posición" significa la posición de unión del átomo de azufre.
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TABLA 1
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TABLA 2
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TABLA 3
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TABLA 4
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TABLA 5
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Entre los compuestos ejemplificados en las tablas anteriores, los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 2, 3, 13, 14, 15, 26, 27, 28, 38, 39, 40, 51, 52, 53, 63, 64, 65, 76, 77, 78, 88, 89, 90, 101, 102, 103, 113, 114, 115, 126, 127, 128, 138, 139 y 140 en la Tabla 1 con los preferidos,
Se prefieren los compuestos de números de compuesto de Ejemplificación: 1, 2, 7, 22, 26, 31, 32, 34, 35, 39, 40, 44, 49, 50, 51, 52, 59, 62, 63, 64, 65, 89, 90, 95, 110, 114, 119, 120, 122, 123, 127, 128, 132, 137, 138, 139, 140, 147, 150, 151, 152, 153, 177, 178, 183, 198, 202, 207, 208, 210, 211, 215, 216, 220, 225, 226, 227, 228, 235, 238, 239, 240, 241, 265, 266, 271, 286, 290, 295, 296, 298, 299, 303, 304, 308, 313, 314, 315, 316, 323, 326, 327, 328, 329, 353, 354, 359, 374, 378, 383, 384, 386, 387, 391, 392, 396, 401, 402, 403, 404, 411, 414, 415, 416, 417, 441, 442, 447, 462, 466, 471, 472, 474, 475, 479, 480, 484, 489, 490, 491, 492, 499, 502, 503, 504, 505, 529, 530, 535, 550, 554, 559, 560, 562, 563, 567, 568, 572, 577, 578, 579, 580, 587, 590, 591, 592, 593, 617, 618, 623, 638, 640, 647, 648, 650, 651, 655, 656, 660, 665, 666, 675, 678, 679, 680, 681, 705, 706, 711, 726, 730, 735, 753, 754, 755, 756, 763, 766, 767, 768, 769, 793, 794, 799, 814, 818, 823, 824, 826, 827, 831, 832, 836, 841, 851, 854, 855, 856, 857, 881, 882, 887, 902, 906, 911, 912, 914, 915, 919, 920, 924, 929, 930, 931, 932, 939, 942, 943, 944, 945, 969, 970, 975, 990, 994, 999, 1000, 1002, 1003, 1007, 1008, 1012, 1017, 1018, 1019, 1020, 1027, 1030, 1031, 1032, 1033, 1057, 1058, 1059, 1060, 1063, 1064, 1065, 1066, 1067, 1068, 1069, 1070, 1071, 1072, 1073, 1074, 1075, 1076, 1077, 1078, 1081, 1082, 1083, 1084, 1085, 1086, 1087, 1088, 1089, 1090, 1091, 1092, 1093, 1094, 1095, 1096, 1099, 1100, 1101, 1102, 1103, 1104, 1105, 1106, 1107, 1108, 1109, 1110, 1111, 1112, 1113, 1114, 1117, 1118, 1119, 1120, 1121, 1122, 1123, 1124, 1125, 1126, 1127, 1128, 1129, 1130, 1131, 1132, 1135, 1136, 1137, 1138, 1139, 1140, 1141, 1142, 1143, 1144, 1145, 1146, 1147, 1148, 1149, 1150, 1153, 1154, 1155, 1156, 1157, 1158, 1159, 1160, 1161, 1162, 1163 y 1164 en la Tabla 2 son preferidos,
los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 3, 5, 7, 9 y 11 en la Tabla 3 son preferidos,
los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 2, 11, 12, 21, 22, 31, 32, 41, 42, 51, 52, 61, 62, 71, 72, 81, 82, 91, 92, 101, 102, 111 y 112 en la Tabla 4 son preferidos, y
los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 2, 4, 7, 8, 10, 12, 13, 14, 16, 17, 19, 22, 23, 25, 27, 28, 29, 31, 32, 34, 37, 38, 40, 42, 43, 44, 46, 47, 49, 52, 53, 55, 57, 58, 59, 61, 62, 64, 67, 68, 70, 72, 73, 74, 76, 77, 79, 82, 83, 85, 87, 88, 89, 91, 92, 94, 97, 98, 100, 102, 103, 104, 106, 107, 109, 112, 113, 115, 117, 118, 119, 121, 122, 124, 127, 128, 130, 132, 133, 134, 136, 137, 139, 142, 143, 145, 147, 148, 149, 151, 152, 154, 157, 158, 160, 162, 163, 164, 167, 168, 170, 173, 174, 176, 178, 179, 180, 182, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325 y 326 en la Tabla 5 son preferidos.
De estos, los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 3, 28, 53, 78, 103 y 128 en la Tabla 1 son los más preferidos,
los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 2, 7, 26, 31, 32, 34, 35, 39, 40, 44, 49, 50, 51, 52, 59, 62, 63, 64, 65, 529, 530, 535, 554, 559, 560, 562, 563, 567, 568, 572, 577, 578, 579, 580, 587, 590, 591, 592, 593, 1057, 1058, 1059, 1060, 1063, 1069, 1070, 1071, 1072, 1073, 1074, 1111, 1112, 1113, 1114, 1117, 1123, 1124, 1125, 1126, 1127 y 1128 en la Tabla 2 son más preferidos,
los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 3, 7 y 11 en la Tabla 3 son más preferidos,
los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 2, 21, 22, 41, 42, 61, 62, 81, 82, 101 y 102 en la Tabla 4 son más preferidos, y
los compuestos de número de compuesto de Ejemplificación: 1, 2, 4, 7, 8, 91, 92, 94, 97, 98, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 314, 315, 320 y 321 en la Tabla 5 son más preferidos.
Los compuestos más preferidos se listan a continuación:
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperacina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperacina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-amino-etilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-amino-etilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-aminometil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-aminometil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-amino-etil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-amino-etil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxi-etil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxi-etil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofene-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofene-2-carbonilamino)metil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico, y
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxílico.
Modos de llevar a cabo la invención
Los derivados de 1-metilcarbapenem representados por la fórmula (I) de la presente invención pueden ser preparados por los métodos descritos en el Procedimiento A y en el Procedimiento B que se describen a continuación.
Procedimiento A
El Procedimiento A es un método para la preparación de un compuesto de fórmula (I) por reacción de un derivado de carbapenem de fórmula (II) con un compuesto mercapto de fórmula (III) y subsecuentemente llevar a cabo una reacción de desprotección.
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En las fórmulas anteriores, R^{1}, R^{2}, X y n tienen los mismos significados que se han definido anteriormente; L^{1} representa un grupo que debe ser eliminado; P^{1} representa un grupo protector de un grupo carboxilo; y R^{1}p representa R^{1} que puede tener un grupo protector.
Ejemplos del "grupo protector de un grupo carboxilo" adecuado como P^{1} incluyen un grupo bencilo que puede tener un sustituyente (el sustituyente es nitro, metilo, cloro o metoxi) tal como bencilo, 4-metoxibencilo, 4-nitrobencilo o 2-nitrobencilo; un grupo bencidrilo; un grupo alilo que puede tener un sustituyente en la posición 2- (el sustituyente es cloro o metilo) tal como alilo, 2-cloroalilo o 2-metilalilo; y un grupo que forme el anterior éster farmacológicamente aceptable, de los que se prefiere un grupo bencilo que puede tener un sustituyente (de forma particular un grupo 4-nitrobencilo).
Ejemplos del "grupo que debe ser eliminado" como L^{1} incluyen un grupo de fórmula-OR^{11} o -S(O)R^{12}.
Ejemplos del grupo R^{11} incluyen a grupo alcansulfonilo de C_{1}-C_{4} tal como un grupo metanosulfonilo, trifluorometanosulfonilo, etanosulfonilo, propanesulfonilo, isopropanesulfonilo o butanesulfonilo; un grupo arilsulfonilo de C_{6}-C_{10} tal como fenilsulfonilo, tolilsulfonilo o naftilsulfonilo; un grupo di-alquilo de C_{1}-C_{6} fosforilo tal como dimetilfosforilo, dietilfosforilo, dipropilfosforilo, diisopropilfosforilo, dibutilfosforilo, dipentilfosforilo o dihexilfosforilo; o un grupo di-arilo de C_{6}-C_{10} fosforilo tal como difenilfosforilo o ditolilfosforilo, de los que se prefiere un grupo difenilfosforilo.
Ejemplos del grupo R^{12} incluyen un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} tal como metilo, etilo, propilo o isopropilo; un grupo halogeno alquilo de C_{1}-C_{4} tal como fluorometilo, clorometilo, fluoroetilo, cloroetilo, fluoropropilo, difluorometilo, difluoroetilo, dicloroetilo, trifluorometilo o trifluoroetilo; un grupo 2-acetilaminoetilo; un grupo 2-acetilaminovinilo; o un grupo arilo de C_{6}-C_{10} (el grupo arilo puede tener entre 1 y 3 sustituyentes, que pueden ser iguales o diferentes, y el sustituyentes puede comprender un átomo de halógeno tal como flúor, cloro o bromo; un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} tal como metilo, etilo, propilo o isopropilo; un grupo alcoxi de C_{1}-C_{4} tal como metoxi, etoxi, propoxi o isopropoxi; un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{4})carbonilo tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o t-butoxicarbonilo; carbamoilo, un grupo mono- o di-(alquilo de C_{1}-C_{4})carbamoilo; un grupo nitro; un grupo hidroxilo; o un grupo ciano) tal como fenilo o naftilo que puede tener sustituyentes; o un grupo heteroarilo que puede tener uno o dos átomos de nitrógeno (el grupo heteroarilo puede tener entre uno y tres sustituyentes, que pueden ser iguales o diferentes, y los sustituyentes pueden comprender un átomo de halógeno tal como flúor, cloro o bromo; un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} tal como metilo, etilo, propilo o isopropilo; un grupo alcoxi de C_{1}-C_{4} tal como metoxi, etoxi, propoxi o isopropoxi; un grupo (alcoxi de C_{1}-C_{4})carbonilo tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o t-butoxicarbonilo; carbamoilo o un grupo mono- o di-(alquilo de C_{1}-C_{4})carbamoilo; un grupo nitro; un grupo hidroxilo; o un grupo ciano) tal como piridilo o pirimidinilo que puede tener sustituyentes.
Ejemplos del "grupo protector de un grupo hidroxilo" incluidos en la definición de R^{1}p incluyen un grupo benciloxicarbonilo que puede estar sustituido (el sustituyente puede comprender nitro, metilo, cloro o metoxi) tal como benciloxicarbonilo, 4-nitrobenciloxicarbonilo, 4-clorobenciloxicarbonilo o 4-metoxibenciloxicarbonilo; un grupo aliloxicarbonilo que puede estar sustituido en la posición 2- (el sustituyente puede comprender cloro o metilo) tal como aliloxicarbonilo, 2-cloroaliloxicarbonilo y 2-metilaliloxicarbonilo; un grupo tri-(alquilo de C_{1}-C_{4})sililo tal como trimetilsililo, trietilsililo o t-butildimetilsililo; y un grupo que forme el anterior éster farmacológicamente aceptable, de los que se prefiere un grupo tri-(alquilo de C_{1}-C_{4})sililo (de forma particular un grupo t-butildimetilsililo).
Ejemplos del "grupo protector de un grupo amino" incluidos en R^{1}p incluyen un grupo aliloxicarbonilo que puede estar sustituido en la posición 2- (el sustituyente puede comprender cloro o metilo) tal como aliloxicarbonilo, 2-cloroaliloxicarbonilo y 2-metilaliloxicarbonilo; y un grupo benciloxicarbonilo que puede estar sustituido (el sustituyente puede comprender metilo, metoxi, cloro o nitro) tal como benciloxicarbonilo, 4-metilbenciloxicarbonilo, 4-metoxibenciloxicarbonilo, 4-clorobenciloxicarbonilo o 4-nitrobenciloxicarbonilo, de los que se prefiere un grupo aliloxicarbonilo o un grupo 4-nitrobenciloxicarbonilo y es más preferido un grupo 4-nitrobenciloxicarbonilo.
El grupo protector utilizado como el anterior P^{1} puede ser utilizado como el "grupo protector de un grupo carboxilo" incluido en R^{1}p.
El procedimiento presente es un procedimiento en el que se prepara un compuesto de fórmula (IV) por reacción de un compuesto de fórmula (II) con un compuesto de fórmula (III) en presencia de una base (Etapa A1) y un compuesto de fórmula (I) es preparado de forma subsiguiente por eliminación de cualquiera de los grupos protectores (Etapa A2). En el caso en que L^{1} representa un grupo representado por la fórmula: -OR^{11}, el compuesto de fórmula (II) que es utilizado como producto de partida es preparado por un método descrito en D.H. Shih y col., Heterocycles 21, 29 (1984) o por un método análogo al mismo. En el caso en que L^{1} representa un grupo representado por la fórmula: -S(O)R^{12}, el compuesto de partida (II) es preparado por un método descrito en la solicitud de patente japonesa (Kokai) No. Sho 62-30781 o un método análogo al mismo. Cada una de dichas etapas se describirá a continuación.
Etapa A1
La Etapa A1 es una etapa para preparar un compuesto de fórmula (IV), que se lleva a cabo por reacción de un compuesto de fórmula (II) con un derivado de mercaptano de fórmula (III) en presencia de una base en un disolvente inerte.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos de los disolventes adecuados incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, 1,2-dicloroetano o cloroformo; nitrilos tales como acetonitrilo; amidas tales como N,N-dimetilformamida o N,N-dimetilacetamida; ésteres tales como acetato de etilo o acetato de metilo; y éteres tales como dietil éter, tetrahidrofurano o dioxano, de los que se prefieren acetonitrilo, N,N-dimetilformamida o tetrahidrofurano y el acetonitrilo es preferido de forma particular.
Ejemplos preferidos de la base a utilizar incluyen aminas orgánicas tales como trietilamina, diisopropiletilamina, piridina o dimetilaminopiridina; o bases inorgánicas tales como carbonato potásico, carbonato sódico o bicarbonato sódico, de los que las preferidas son las aminas orgánicas (de forma particular la diisopropiletilamina).
La reacción se lleva normalmente a cabo a una temperatura comprendida entre -20ºC y 40ºC (preferiblemente entre -10ºC y 20ºC). El tiempo de reacción está comprendido entre 30 minutos y 108 horas (preferiblemente entre una hora y 18 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de fórmula (IV), que es el producto de la presente etapa, de la mezcla de reacción por medios conocidos; por ejemplo, por adición, a la mezcla de reacción o al residuo obtenido por eliminación por destilación del disolvente de la mezcla de reacción, de un disolvente orgánico que no sea miscible con el agua, seguido por lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. En el caso en que sea necesario, puede purificarse el compuesto obtenido de este modo por medios conocidos, por ejemplo, por recristalización, reprecipitación o cromatografía. También es posible, en el caso en que se desee, someter el compuesto deseado de fórmula (IV) a la siguiente etapa sin aislamiento.
Etapa A2
La Etapa A2 es una etapa para convertir un compuesto de fórmula (IV) en un compuesto de fórmula (I), que se lleva a cabo por eliminación de cualquiera de los grupos protectores contenidos en el compuesto de fórmula (IV).
Aunque el método para la eliminación de un grupo protector depende del tipo de grupo protector, ésta se lleva a cabo por un método utilizado de forma ordinaria en el campo de la química sintética orgánica (por ejemplo, un método descrito en Protective Groups in Organic Synthesis, Segunda Edición, John Wiley & Sons, Inc. 1991 escrito por T.W. Greene y P.G.M. Wuts).
(1) Cuando el grupo protector es un grupo bencilo que puede tener un sustituyente, un grupo bencidrilo o un grupo benciloxicarbonilo grupo que puede tener un sustituyente, estos grupos protectores pueden ser eliminados por reacción con hidrógeno en presencia de un agente reductor catalítico en un disolvente.
Ejemplos del agente reductor catalítico a utilizar incluyen un catalizador de paladio sobre carbón, un catalizador de platino o un catalizador de rodio sobre carbón, de los que se prefiere un catalizador de paladio sobre carbón.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos preferidos de los disolventes adecuados incluyen alcoholes tales como metanol o etanol; éteres tales como tetrahidrofurano dioxano; y una mezcla de estos disolventes orgánicos y agua, de los que se prefiere una mezcla de tetrahidrofurano y agua.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre 0ºC y 50ºC (preferiblemente entre 10ºC y 40ºC). Aunque el tiempo de reacción depende del compuesto de partida y de la naturaleza del catalizador, normalmente está comprendido entre 5 minutos y 12 horas (preferiblemente entre 30 minutos y 4 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, puede obtenerse el compuesto deseado por separación de los insolubles por filtración, tal como el catalizador, de la mezcla de reacción y a continuación eliminación del disolvente por destilación. En el caso en que sea necesario, el compuesto así obtenido puede ser purificado por procedimientos convencionales tales como recristalización, cromatografía preparativa de capa fina o cromatografía de columna.
(2) Cuando el grupo protector es un grupo alilo que puede estar sustituido o un grupo aliloxicarbonilo que puede estar sustituido, pueden eliminarse estos grupos protectores por reacción de con un hidruro de tri-(alquilo de C_{1}-C_{6}) estaño y una sal de metal alcalino de un ácido carboxílico orgánico en presencia de un compuesto de paladio en un disolvente. Pueden añadirse bases orgánicas o sustancias orgánicas para capturar los grupos alilo.
El compuesto de paladio puede comprender de forma preferible cloruro de bis(trifenilfosfina) paladio o tetraquis(trifenilfosfina) paladio. El hidruro de trialquilestaño puede comprender de forma preferible hidruro de tributilestaño. La sal de metal alcalino y ácido carboxílico orgánico puede comprender de forma preferible 2-etilhexanoato de potasio o 2-etilhexanoato de sodio. La base orgánica para capturar los grupos alilo puede comprender de forma preferible morfolina y la sustancia orgánica para capturar los grupos alilo puede comprender de forma preferible dimedona.
Las combinaciones preferibles de agentes de desprotección pueden incluir una combinación de cloruro de bis(trifenilfosfina) paladio e hidruro de tributilestaño o una combinación de tetra-quis(trifenilfosfina) paladio y 2-etilhexanoato de potasio.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos de los disolventes adecuados incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, cloroformo o 1,2-dicloroetano; ésteres tales como acetato de etilo; éteres tales como tetrahidrofurano, dioxano o 1,2-dimetoxietano; nitrilos tales como acetonitrilo; alcoholes tales como metanol, etanol o propanol; agua; o una mezcla de estos disolventes, de los que se prefiere el cloruro de metileno, el acetato de etilo o un disolvente mezcla de los mismos.
Aunque no hay ninguna limitación particular en la temperatura de reacción, la reacción se lleva normalmente a cabo a una temperatura comprendida entre -20ºC y 100ºC (preferiblemente entre 0ºC y 60ºC). El tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 30 minutos y 48 horas (preferiblemente entre 30 minutos y 12 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, puede obtenerse el compuesto deseado por eliminación por filtración de los insolubles precipitados de la mezcla de reacción y a continuación eliminación del disolvente por destilación. En el caso en que sea necesario, el compuesto así obtenido puede ser purificado por procedimientos convencionales tales como recristalización, cromatografía preparativa de capa fina o cromatografía de columna.
(3) Cuando el grupo protector es grupo protector de base sililo, este grupo protector puede ser eliminado por tratamiento con una fuente de anión fluoruro tal como fluoruro de tetrabutilamonio, ácido fluorhídrico, ácido fluorhídrico-piridina o fluoruro potásico, o tratamiento con un ácido orgánico tal como ácido acético, ácido metanosulfónico, ácido para-toluenosulfónico, ácido trifluoroacético o ácido trifluorometanosulfónico, o ácido inorgánico tal como ácido clorhídrico, en un disolvente.
Cuando el grupo protector es eliminado por un anión fluoruro, la reacción evoluciona algunas veces en condiciones suaves por la adición de un ácido orgánico tal como ácido fórmico, ácido acético o ácido propiónico.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos preferidos de los disolventes adecuados incluyen éteres tales como dietil éter, diisopropil éter, tetrahidrofurano, dioxano, dimetoxietano o dietilen glicol dimetil éter; nitrilos tales como acetonitrilo o isobutironitrilo; agua; ácidos orgánicos tales como ácido acético; y una mezcla de estos disolventes.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre 0ºC y 100ºC (preferiblemente entre 10ºC y 30ºC). Aunque no hay ninguna limitación particular en el tiempo de reacción, éste está normalmente comprendido entre una hora y 24 horas (preferiblemente entre una hora y 4 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos, por ejemplo, por adición a la mezcla de reacción, o al residuo obtenido por eliminación por destilación del disolvente de la mezcla de reacción, de un disolvente orgánico que no sea miscible con agua, seguido por lavado con agua y eliminación del disolvente por destilación. En el caso en que sea necesario, puede purificarse el compuesto obtenido de este modo por medios conocidos, por ejemplo, recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(4) Cuando el grupo protector es un grupo que forma un éster farmacológicamente aceptable de un grupo carboxilo o de un grupo hidroxilo, estos grupos protectores son eliminados por reacción de una hidrolasa de los mismos en agua o en una mezcla de agua y disolvente orgánico.
Ejemplos preferidos del disolvente orgánico mezclado con agua incluyen un éter o un alcohol miscible con agua tal como tetrahidrofurano, dioxano, metanol, etanol o propanol.
Se prefiere que la sal de metal alcalino tal como fosfato sódico, acetato sódico o bicarbonato sódico se añada al agua o a una mezcla de agua y un disolvente orgánico o que el pH se mantenga en el intervalo comprendido entre 6 y 8 utilizando una solución de tampón de pH tal como una solución de tampón de ácido fosfórico.
No hay ninguna limitación en la naturaleza del hidrolasa siempre que ésta pueda hidrolizar un enlace éster. Ejemplos de dichas hidrolasas incluyen estearasas derivadas del hígado de cerdo.
El tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 8 horas (preferiblemente entre 30 minutos y 2 horas) y la temperatura de reacción entre 10ºC y 50ºC (preferiblemente entre 30ºC y 40ºC).
Después de que la reacción sea completa, puede aislarse el compuesto deseado y purificarse por cromatografía de intercambio iónico, cromatografía de columna de fase reversa, reprecipitación, recristalización, etc.
Cuando el compuesto de fórmula (IV) contiene dos o más clases de grupos protectores, el compuesto deseado de fórmula (I) puede ser obtenido llevando a cabo de forma sucesiva las anteriores reacciones de desprotección en combinación. Cuando se desee el éster farmacológicamente aceptable del compuesto de fórmula (I), no es necesario eliminar el grupo formador del éster farmacológicamente aceptable como grupo protector.
El compuesto de fórmula (I) así obtenido puede ser convertido en una sal o éster farmacológicamente aceptable, en el caso en que sea necesario, de acuerdo con un método o una tecnología conocida en el campo de la química médica, de forma particular el de los antibióticos con una base de \beta-lactama.
Los ésteres farmacológicamente aceptables del grupo carboxilo del compuesto de fórmula (I) pueden ser preparados por reacción de un compuesto halogenado correspondiente al residuo éster deseado del compuesto de fórmula (I) en presencia de una base en un disolvente.
Ejemplos del compuesto halogenado a utilizar incluyen un cloruro, un bromuro o un yoduro, de los que se prefiere un yoduro. Cuando se utiliza un cloruro o un bromuro, la reacción puede ser favorecida por adición de una cantidad catalítica de yoduro sódico a la solución de la reacción.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen aminas orgánicas tales como trietilamina, diisopropiletilamina, 4-dimetilaminopiridina o piridina; y carbonatos de metales alcalinos tales como carbonato potásico, carbonato sódico o bicarbonato sódico, de los que las preferidas son las aminas orgánicas (de forma particular la 4-dimetilaminopiridina).
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen nitrilos tales como acetonitrilo; amidas tales como N,N-dimetilformamida; y hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, de los que los preferidos son las amidas (de forma particular la dimetilacetamida) o los nitrilos (de forma particular el acetonitrilo).
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 50ºC (preferiblemente entre -10ºC y 20ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 horas y 108 horas (preferiblemente entre una hora y 24 horas).
El compuesto previamente aislado como una sal por reacción del compuesto de fórmula (I) con una base también puede hacerse reaccionar con haluros tal como se ha mencionado anteriormente.
De forma alternativa, los compuestos de fórmula (I) pueden ser preparados por reacción de un alcohol correspondiente al residuo éster deseado en el compuesto de fórmula (I) en presencia de un agente de condensación y una base.
Ejemplos del agentes de condensación incluyen reactivos de Mitsunobu tales como azodicarboxilato de dietilo; agentes de condensación con una base de éster fosfórico tales como difenilfosforilazida; agentes de condensación con una base de carbodiimida tales como diciclohexilcarbodiimida o 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida; y agentes de condensación con una base de onio tales como el yoduro de 2-cloro-1-metilpiridinio.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen aminas orgánicas tales como trietilamina, tributilamina, diisopropiletilamina o 4-dimetilaminopiridina.
Ejemplos de otros aditivos incluyen fosfinas tales como trifenilfosfina y tributilfosfina; y alcoholes por formación de un éster activo tal como el 1-hidroxibenzotriazol.
Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; amidas tales como N,N-dimetilformamida; nitrilos tales como acetonitrilo; y éteres tales como tetrahidrofurano.
Ejemplos de una combinación preferible de éstos incluyen azodicarboxilato de dietilo y trifenilfosfina; yoduro de 2-cloro-1-metilpiridinio y tributilamina o trietilamina; 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida y 4-dimetilaminopiridina o 1-hidroxibenzotriazol.
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos, por ejemplo, por adición a la mezcla de reacción, o al residuo obtenido por eliminación por destilación del disolvente de la mezcla de reacción, un disolvente orgánico que no sea miscible con agua, seguido por lavado con agua y eliminación del disolvente por destilación. En el caso en que sea necesario, puede purificarse el compuesto obtenido de este modo por medios conocidos, por ejemplo, recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Procedimiento B
El Procedimiento B es un método para preparar un compuesto de fórmula (III) utilizado como producto de partida en el Procedimiento A.
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En el esquema anterior:
R^{1}p, R^{2}, X y n tienen los mismos significados que se han definido anteriormente;
P^{2} representa un grupo protector de un grupo carboxilo; ejemplos de P^{2} incluyen un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} tal como metilo, etilo, propilo o butilo; y un grupo bencilo que puede estar sustituido tal como bencilo o 4-metoxibencilo, de los que se prefiere un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} y de forma particular se prefiere un grupo etilo;
P^{3} representa un grupo protector de un grupo hidroxilo; ejemplos de P^{3} incluyen un grupo protector con una base de sililo tal como trimetilsililo, trietilsililo, t-butildimetilsililo o t-butildifenilsililo, de que los que se prefiere un grupo t-butildifenilsililo;
L^{2} representa un grupo saliente; ejemplos de L^{2} incluyen un átomo de halógeno tal como un átomo de cloro, un átomo de bromo o un átomo de yodo; un grupo alquilsulfoniloxi de C_{1}-C_{4} que puede estar sustituido por flúor o un grupo bencenosulfoniloxi que puede estar sustituido por alquilo tal como metanosulfoniloxi, etanosulfoniloxi, trifluorometanosulfoniloxi, bencenosulfoniloxi o toluenosulfoniloxi, de los que se prefiere un grupo alquilsulfoniloxi de C_{1}-C_{4} que puede estar sustituido por flúor; y
P^{4} representa un grupo protector de un grupo mercapto; ejemplos de P^{4} incluyen un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{4} tal como formilo, acetilo, propionilo o butirilo y un grupo benzoilo que puede estar sustituido tal como benzoilo, toluoilo o anisoilo, de los que se prefiere un agrupo alcanoilo de C_{1}-C_{4} (de forma particular un grupo acetilo).
Etapa B1
La Etapa B1 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (VI) por introducción de un grupo amida representado por la fórmula C(=X)NH_{2} al átomo de nitrógeno de un compuesto de fórmula (V).
(1) Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un cianato o tiocianato con el compuesto de fórmula (V) en un disolvente.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; y una mezcla de estos disolventes y agua, de los que se prefiere una mezcla de un éter y agua (de forma particular una mezcla de tetrahidrofurano y agua).
Ejemplos de la sal de ácido ciánico o del ácido tiociánico incluyen sales de metales alcalinos tales como una sal de sodio o una sal de potasio; una sal de amonio; o sales orgánicas de amonio tales como una sal de trietilamonio, de las que las preferidas son las sales de metales alcalinos (de forma particular una sal de potasio).
También pueden utilizarse ácidos con el fin de convertir un cianato o un tiocianato en el correspondiente ácido en el sistema. Ejemplos de dichos ácidos incluyen ácidos orgánicos tales como ácido acético y ácidos minerales tales como ácido clorhídrico, de los que se prefiere el ácido acético o el ácido clorhídrico.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 150ºC (preferiblemente entre -10ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre 1 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(2) De forma alternativa, esta etapa puede ser conseguida por el siguiente procedimiento. El método presente comprende una reacción para la preparación el siguiente compuesto de fórmula (XIII) a partir de un compuesto de fórmula (V) y una reacción para la preparación de un compuesto de fórmula (VI) a partir del compuesto de fórmula (XIII).
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En la fórmula anterior, X y n tienen los mismos significados que se han definido anteriormente y R^{9} representa un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} (preferiblemente un grupo etilo).
La etapa para la preparación de un compuesto (XIII) a partir de un compuesto (V) se lleva a cabo por reacción de un compuesto representado por la fórmula X=C=N-COOR^{9} (en donde X y R^{9} tienen los mismos significados que se han definido anteriormente) en el compuesto de fórmula (V) en un disolvente.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; y una mezcla de estos disolventes y agua, de los que se prefiere un éter o una mezcla de un éter y agua (de forma particular tetrahidrofurano o una mezcla de tetrahidrofurano y agua) es preferido.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 150ºC (preferiblemente entre -10ºC y 50ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
La etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (VI) a partir de un compuesto de fórmula (XIII) se lleva a cabo por reacción de una base con el compuesto (XIII) en un disolvente.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen alcoholes tales como metanol o etanol; éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; y una mezcla de estos disolventes y agua, de los que se prefiere un alcohol o una mezcla de un alcohol y agua (de forma particular etanol o una mezcla de etanol y agua).
Ejemplos de la base a utilizar incluyen bases inorgánicas tales como hidróxido sódico, hidróxido potásico, bicarbonato sódico, carbonato sódico y carbonato potásico; y bases orgánicas tales como metóxido sódico y etóxido sódico, de los que el preferido es el hidróxido sódico.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 15ºC (preferiblemente entre -10ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa B2
La Etapa B2 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (VII) sometiendo un grupo amida de un compuesto de fórmula (VI) a una reacción de cierre de anillo.
Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un compuesto representado por la fórmula R^{2}CHL^{3}COCOOP^{2} (en donde R^{2} y P^{2} tienen los mismos significados que se han definido anteriormente y L^{3} representa un grupo saliente) con el compuesto de fórmula (VI) en presencia de una base en un disolvente. Ejemplos preferidos del grupo saliente L^{3} incluyen un átomo de halógeno, de los que un átomo de bromo es el que se prefiere de forma particular.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen alcoholes tales como metanol o etanol; éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; y amidas tales como N,N-dimetilformamida, de los que los alcoholes (de forma particular el etanol) son los preferidos.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen bases orgánicas tales como trietilamina y diisopropilamina; y bases inorgánicas tales como carbonato de sodio, carbonato de potasio y bicarbonato de sodio, de las que las bases orgánicas (de forma particular la trietilamina) son las preferidas.
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La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 150ºC (preferiblemente entre -10ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa B3
La Etapa B3 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (VIII) por introducción de un grupo protector P^{3} a un grupo hidroxilo de un compuesto de fórmula (VII).
Esta etapa ser llevada a cabo por un método normalmente utilizado en el campo de la química orgánica sintética (por ejemplo, un método descrito en Protective Groups in Organic Synthesis, Segunda Edición, John Wiley & Sons, Inc. 1991, autores T.W. Greene y P.G.M. Wuts).
La introducción de un grupo protector de base sililo se lleva a cabo por reacción de un haluro de sililo o de un triflato de sililo que tenga un sustituyente deseado con un compuesto de fórmula (VII) en presencia de una base en un disolvente.
Ejemplos del haluro de sililo incluyen cloruro de trimetilsililo, cloruro de trietilsililo, cloruro de t-butildimetilsililo y cloruro de t-butildifenilsililo, de los que el cloruro de t-butildifenilsililo es el preferido.
Ejemplos del triflato de sililo incluyen triflato de trimetilsililo, triflato de trietilsililo, triflato de t-butildimetilsililo y triflato de t-butildifenilsililo, de los que el preferido es el triflato de t-butildifenilsililo.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen amidas tales como dimetilformamida; hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de los que las amidas (de forma particular la dimetilformamida) o los hidrocarburos halogenados (de forma particular el cloruro de metileno) son los preferidos.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen bases orgánicas tales como imidazol, trietilamina, lutidina, piridina o dimetilaminopiridina, de los que se prefiere el imidazol o la 2,6-lutidina.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 50ºC (preferiblemente entre -10ºC y 40ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre 1 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa B4
La Etapa B4 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (IX) por conversión de un grupo representado por la fórmula COOP^{2} en un compuesto (VIII) a un grupo deseado R^{1}p.
Esta etapa ser llevada a cabo por aplicación a un grupo funcional de una reacción de conversión normalmente utilizada en el campo de la química orgánica sintética. Detalles de la misma se encuentran descritos en el Procedimiento C hasta el Procedimiento H, que se describen a continuación.
Etapa B5
La Etapa B5 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (X) por eliminación del grupo protector P^{3} de un grupo hidroxilo del compuesto de fórmula (IX).
Esta etapa ser llevada a cabo por un método normalmente utilizado en el campo de la química orgánica sintética (por ejemplo, un método descrito en Protective Groups in Organic Synthesis, Segunda edición, John Wiley & Sons, Inc. 1991, autores T.W. Greene y P.G.M. Wuts).
Cuando el grupo protector P^{3} de un grupo hidroxilo es un grupo protector de base sililo, se lleva a cabo la eliminación del mismo de un modo similar al método descrito en la Etapa A2 (3).
Etapa B6
La Etapa B6 es una etapa para preparar un compuesto (XI) por conversión del grupo hidroxilo de un compuesto de fórmula (X) en un grupo saliente L^{2}.
(1) Cuando el grupo saliente L^{2} representa un tipo de grupo sulfoniloxi, esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente de sulfonilación con un compuesto de fórmula (X) en presencia de una base en un disolvente.
Ejemplos del agente de sulfonilación a utilizar incluyen cloruro de metanosulfonilo, cloruro de etanosulfonilo, cloruro de trifluorometanosulfonilo, cloruro de bencenosulfonilo o cloruro de toluenosulfonilo, de los que el cloruro de metanosulfonilo es el preferido.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno, dicloroetano o cloroformo; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de los que los hidrocarburos halogenados (de forma particular el cloruro de metileno) son los preferidos.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen bases orgánicas tales como trietilamina, diisopropiletilamina, piridina o dimetilaminopiridina, de las que la trietilamina es la preferida.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 80ºC (preferiblemente entre -10ºC y 40ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre 1 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(2) Cuando el grupo saliente L^{2} es un átomo de halógeno, esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente de halogenación con un compuesto de fórmula (X) en un disolvente.
Ejemplos del agente de halogenación a utilizar incluyen pentacloruro de fósforo, cloruro de tionilo, oxicloruro de fósforo, yodo, tetrabromuro de carbono, tetracloruro de carbono, N-clorosuccinimida, N-bromosuccinimida o trifluoruro de dietilaminoazufre, de que los que el tetrabromuro de carbono es el preferido.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de los que los hidrocarburos halogenados (de forma particular el cloruro de metileno) son los preferidos.
Ejemplos de los aditivos a utilizar incluyen fosfinas tales como trifenilfosfina y tributilfosfina, de los que la trifenilfosfina es la preferida.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 100ºC (preferiblemente entre -10ºC y 50ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 108 horas (preferiblemente entre 0,5 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa B7
La Etapa B7 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XII) por conversión del grupo saliente L^{2} del compuesto de fórmula (XI) en un grupo mercapto protegido.
Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente formador de mercapto con un compuesto de fórmula (XI) en un disolvente.
Ejemplos del agente formador de mercapto a utilizar incluyen sales de metales alcalinas de ácidos tiocarboxílicos tales como tioacetato de sodio, tioacetato de potasio, tiopropionato de sodio o tiobenzoato de sodio; o sales de metales alcalinos de 4-metoxibencil mercaptano, de que los que el preferido es el tioacetato de potasio.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen éteres tales como tetrahidrofurano dioxano; acetatos tales como acetato de etilo o acetato de metilo; nitrilos tales como acetonitrilo; y amidas tales como dimetilformamida o dimetilacetamida, de que una amida (de forma particular la dimetilformamida) es la preferida.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 150ºC (preferiblemente entre 0ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa B8
La Etapa B8 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (III) por eliminación de un grupo protector P^{4} del grupo mercapto del compuesto de fórmula (XII).
(1) Cuando el grupo protector P^{4} es un grupo alcanoilo o un grupo arilcarbonilo, esta etapa se lleva a cabo por reacción de una sal de un compuesto de hidracina con un compuesto (XII) en un disolvente.
Ejemplos de la sal del compuesto de hidracina incluyen hidracina/ácido acético o N,N-dimetilhidracina/ácido acético, de los que se prefiere la hidracina/ácido acético.
Como el disolvente a utilizar, pueden utilizarse los disolventes utilizados en al anterior primera etapa.
La temperatura de reacción no está limitada de forma particular y está normalmente comprendida entre -10ºC y 40ºC (preferiblemente entre 10ºC y 30ºC). Aunque el tiempo de reacción depende del disolvente, la temperatura de reacción y de la naturaleza del reactivo, éste está normalmente comprendido entre 30 minutos y 24 horas (preferiblemente entre una hora y 8 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Cuando se utiliza una sal de hidracina como agente de desprotección, el compuesto de fórmula (III) puede ser utilizado como producto de partida de la anterior Etapa A1 sin aislamiento del mismo a partir de la solución de la reacción.
El presente etapa también puede llevarse a cabo por reacción de una base con el compuesto de fórmula (XII) en un disolvente.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen sales de un metal alcalino tal como hidróxido sódico, hidróxido potásico, carbonato potásico, carbonato de sodio, metóxido sódico o etóxido sódico, de que los que el preferido es el metóxido sódico.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen alcoholes tales como metanol o etanol; éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; amidas tales como dimetilformamida; y hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano, de que alcoholes (de forma particular metanol) son preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 100ºC (preferiblemente entre -10ºC y 40ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 108 horas (preferiblemente entre 0,5 y 24 horas).
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Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(2) Cuando P^{4} es un grupo 4-metoxibencilo, esta etapa se lleva a cabo por reacción de un ácido con el compuesto de fórmula (XII) en un disolvente.
Ejemplos del ácido a utilizar incluyen ácidos sulfónicos tales como ácido metanosulfónico o ácido trifluoro metanosulfónico, de los que se prefiere el ácido trifluoro metanosulfónico. La reacción puede ser acelerada por co-existencia de anisol o tioanisol.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; y ácidos acéticos opcionalmente sustituidos tales como ácido acético y ácido trifluoro acético, de que los que los ácidos acéticos opcionalmente sustituidos (de forma particular el ácido trifluoro acético) son los preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 100ºC (preferiblemente entre -10ºC y 80ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 108 horas (preferiblemente entre 0,5 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Procedimiento C
El Procedimiento C es un método para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-1) que tiene un grupo éster como residuo deseado por conversión de un grupo carboxilo protegido de un compuesto de fórmula (VIII).
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En el esquema anterior, R^{2}, X, n, P^{2} y P^{3} tienen los mismos significados que se han definido anteriormente, y R^{3p} representa R^{3} que puede estar protegido.
Etapa C1
La Etapa C1 es una etapa para la preparación de un compuesto (XIV) por reducción del grupo éster carboxílico de un compuesto de fórmula (VIII) a un grupo hidroximetilo. Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente de reducción con el compuesto de fórmula (VIII) en un disolvente.
El agente de reducción a utilizar no está limitado de forma particular en tanto en cuanto pueda convertir un grupo éster carboxílico en un grupo hidroximetilo por reducción. Ejemplos del agente de reducción incluyen hidruros de aluminio y metales alcalinos tales como hidruro de litio y aluminio; e hidruros de boro y metales alcalinos tales como el borohidruro de litio o el borohidruro de sodio, de que los que el preferido es el hidruro de litio y aluminio.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de los que el tetrahidrofurano es el preferido.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 100ºC (preferiblemente entre -10ºC y 40ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 24 horas (preferiblemente entre 0,5 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa C2
La Etapa C2 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XV) por oxidación de un grupo hidroximetilo de un compuesto de fórmula (XIV).
Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente de oxidación con el compuesto de fórmula (XIV) en un disolvente y comprende una etapa de oxidación de un grupo hidroximetilo a un grupo aldehído y una etapa de oxidación del grupo aldehído a un grupo carboxilo.
(1) Etapa de oxidación de un grupo hidroximetilo a un grupo aldehído
El agente de oxidación a utilizar no está limitado de forma particular en tanto en cuanto pueda oxidar un grupo hidroximetilo para convertirlo en un grupo aldehído. Ejemplos incluyen el clorocromato de piridinio, cloruro de oxalilo-dimetil sulfóxido, ácido trifluoro acético anhidro-dimetil sulfóxido, dióxido de manganeso activo o el reactivo de Dess-Martin, de que los el dióxido de manganeso activo es el preferido.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano, de los que cloruro de metileno es preferido.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -100ºC y 100ºC (preferiblemente entre -100ºC y 50ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 30 minutos y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(2) Etapa de oxidación del grupo aldehído a un grupo carboxilo
El agente de oxidación a utilizar no está limitado de forma particular en tanto en cuanto pueda oxidar un grupo aldehído para convertirlo en un grupo carboxilo. Ejemplos del agente de oxidación incluyen permanganato potásico, tetróxido de rutenio, clorito de sodio-dihidrógenofosfato-2-metil-2-buteno de sodio (o de potasio), de los que el clorito de sodio-dihidrógenofosfato-2-metil-2-buteno de sodio es el preferido.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; alcoholes tales como t-butanol; y una mezcla de estos disolventes y agua, de los que una mezcla de tetrahidrofurano-cloruro de metileno-agua-t-butanol es el preferido.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 50ºC (preferiblemente entre -10ºC y 40ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 108 horas (preferiblemente entre 0,5 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa C3
La Etapa C3 es una etapa para la preparación un compuesto carboxílico de fórmula (XV) de un modo alternativo y se lleva a cabo por eliminación del grupo protector de un compuesto (VIII). Esta etapa puede ser llevada a cabo de un modo similar a la Etapa A2 del Procedimiento A.
Etapa C4
La Etapa C4 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-1) por esterificación del grupo carboxilo del compuesto de fórmula (XV).
(1) Esta etapa se lleva a cabo por reacción de compuesto alcohol deseado representado por la fórmula R^{3p}OH con un compuesto de fórmula (XV) en presencia de un agente de condensación en un disolvente.
Como agente de condensación a utilizar, pueden usarse los descritos en la sección de formación del éster descritos en la Etapa A2 del Procedimiento A. La condensación también puede llevarse a cabo vía un cloruro de ácido cloruro utilizando cloruro de oxalilo.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; amidas tales como dimetilformamida; y nitrilos tales como acetonitrilo, de los que los hidrocarburos halogenados (de forma particular el cloruro de metileno) son preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -50ºC y 100ºC (preferiblemente entre -20ºC y 50ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre 1 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(2) La presente etapa también puede llevarse a cabo por reacción de un compuesto deseado representado por la fórmula R^{3p}L^{3} con un compuesto de fórmula (XV) en presencia de una base en un disolvente. L^{3} representa un grupo saliente, preferiblemente un átomo de halógeno (de forma particular un átomo de yodo o un átomo de bromo).
Como la base a utilizar, pueden utilizarse bases inorgánicas o bases orgánicas. La base inorgánica puede comprender un carbonato tal como carbonato de sodio, carbonato de potasio o carbonato de cesio o un bicarbonato tal como bicarbonato de sodio o bicarbonato de potasio, preferiblemente carbonato de cesio. La base orgánica puede comprender una amina terciaria tal como trietilamina o diisopropiletilamina; o una base orgánica bicíclica tal como DBU o DBN, preferiblemente diisopropiletilamina.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; amidas tales como dimetilformamida; y nitrilos tales como acetonitrilo, de los que las amidas (de forma particular la dimetilformamida) son las preferidas.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -50ºC y 100ºC (preferiblemente entre -20ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua, y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Procedimiento D
El Procedimiento D es un método para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-2) que tiene un residuo amida deseado por conversión del grupo carboxilo de un compuesto (XV).
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En el esquema anterior, R^{2}, X, n y P^{3} tienen los mismos significados que se han definido anteriormente, y R^{4p} y R^{5p} representan R^{4} y R^{5} que pueden estar protegidos.
Etapa D1
Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un compuesto deseado que tiene la fórmula HNR^{4p}R^{5p} con un compuesto de fórmula (XV) en presencia de un agente de condensación en un disolvente.
La presente etapa puede ser llevada a cabo utilizando un compuesto amino de fórmula HNR^{4p}R^{5p} en lugar de un compuesto alcohol de fórmula R^{3p}OH en la anterior Etapa C4 del Procedimiento C.
Ejemplos del agente de condensación incluyen un agente de condensación con una base de éster de ácido fosfórico tal como el cianuro de dietilfosforilo; y un agente de condensación con una base de carbonato tal como el carbonildiimidazol, de los que el cianuro de dietilfosforilo o el carbonildiimidazol son los preferidos.
Procedimiento E
El Procedimiento E es un método para la preparación un compuesto deseado de fórmula (IX-2) que tiene un grupo residuo de amida por conversión de un grupo éster carboxílico de un compuesto (VIII).
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En el esquema anterior, R^{2}, X, n, P^{3}, R^{4p} y R^{5p} tienen los mismos significados que se han definido anteriormente, y P^{2a} representa un grupo alquilo de C_{1}-C_{4} como un grupo protector P^{2} del grupo carboxilo anterior.
Etapa E1
Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un compuesto de amino deseado representado por la fórmula HNR^{4p}R^{5p} con un compuesto de fórmula (VIII) en presencia de un catalizador en un disolvente.
Ejemplos del catalizador a utilizar incluyen tri-alquilos de C_{1}-C_{4} y aluminio tales como el trimetilaluminio, de los que el trimetilaluminio es el preferido.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen disolventes aromáticos tales como benceno, tolueno o mesitileno; e hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano, de los que los disolventes aromáticos (de forma particular benceno o tolueno) son los preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 150ºC (preferiblemente entre -10ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Procedimiento F
El Procedimiento F es un método para la preparación de un compuesto ciano de fórmula (IX-3) por conversión de un grupo éster carboxílico de un compuesto de fórmula (VIII).
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En el esquema anterior, R^{2}, X, n, P^{3} y P^{2a} tienen los mismos significados que se han definido anteriormente.
Etapa F1
Esta etapa se lleva a cabo por utilización de una sal de amonio en lugar del compuesto amino en la anterior Etapa E1 del Procedimiento E y reacción de la misma a mayor temperatura de reacción.
El cloruro de amonio es preferiblemente utilizado como la sal de amonio y la temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 150ºC (preferiblemente entre -10ºC y 100ºC).
Procedimiento G
El Procedimiento G es un método para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-4) por introducción del sustituyente deseado R^{6} a un grupo hidroxilo de un compuesto de fórmula (XIV).
80
Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente alquilante con un compuesto de fórmula (XIV) en presencia de una base en un disolvente o por reacción de un agente de reducción y un compuesto de carbonilo deseado con el compuesto de fórmula (XIV) en presencia de un catalizador ácido en un disolvente.
(1) Método de alquilación bajo condiciones básicas
Ejemplos del disolvente a utilizar incluyen amidas tales como N,N-dimetilformamida; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de los que las amidas (de forma particular la N,N-dimetilformamida) son las preferidas.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen hidruros de metales alcalinos tales como hidruro de sodio o hidruro de potasio; bases inorgánicas tales como hidróxido sódico o hidróxido potásico; y bases orgánicas tales como trietilamina o diisopropilamina, de las que los hidruros de metales alcalinos (de forma particular el hidruro sódico) son los preferidos.
Ejemplos del agente de alquilación a utilizar incluyen haluros de alquilo tales como yoduro de metilo o yoduro de etilo; y sulfatos de dialquilo tales como sulfato de dimetilo y sulfato de dietilo, de los que los haluros de alquilo (de forma particular el yoduro de alquilo) son los preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -50ºC y 100ºC (preferiblemente entre -10ºC y 40ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 108 horas (preferiblemente entre 0,5 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(2) Método de alquilación bajo condiciones ácidas
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de que hidrocarburos halogenados (de forma particular cloruro de metileno) son preferidos.
Ejemplos del catalizador ácido incluyen triflatos de trialquilsililo tales como triflato de trimetilsililo, triflato de trietilsililo o triflato de t-butildimetilsililo, de los que el triflato de trimetilsililo es el preferido.
Ejemplos del compuesto de carbonilo deseado incluyen cetonas tales como acetona, metil etil cetona y ciclohexil cetona; y alquil aldehídos tales como acetaldehído y propionaldehído, de los que las cetonas son los preferidos.
Ejemplos del agente de reducción incluyen trialquilsilanos tales como trietilsilano y difenilmetilsilano, de los que los trialquilsilanos (de forma particular el trietilsilano) son los preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -50ºC y 100ºC (preferiblemente entre -10ºC y 40ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 10 minutos y 108 horas (preferiblemente entre 0,5 y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Procedimiento H
El Procedimiento H es un método para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-5) por conversión un grupo hidroxilo de un compuesto de fórmula (XIV) en un grupo deseado representado por la fórmula NR^{7p}R^{8p}.
81
Etapa H1
La Etapa H1 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XV) por introducción de un grupo saliente L^{3} a un compuesto de fórmula (XIV) y se lleva a cabo de un modo similar a la Etapa B6 del anterior Procedimiento B.
Etapa H2
La Etapa H2 es una etapa para la preparación de un compuesto de amina de fórmula (IX-5a) a partir de un compuesto de fórmula (XV) y para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-5b), en el caso en que sea necesario, por introducción de un un sustituyente.
(A) Preparación de un compuesto de amina de fórmula (IX-5a)
Esta etapa ser llevada a cabo por reacción de un agente de aminación con el compuesto de fórmula (XV) en un disolvente. Esta etapa también puede ser llevada a cabo por preparación de un compuesto de azida por reacción de un agente de azidación con un compuesto de fórmula (XV) en un disolvente, seguido por reacción con un agente de reducción.
(1) Método en el que se utiliza un agente de aminación
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen amidas tales como dimetilformamida; alcoholes tales como metanol o etanol; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, preferiblemente las amidas (de forma particular dimetilformamida).
Ejemplos del agente de aminación a utilizar incluyen alquilaminas primarias que pueden estar sustituidas tales como metilamina o etilamina; aminas aromáticas que pueden estar sustituidas tales como anilina o aminotiazol; alquilaminas secundarias que puede estar sustituidas tales como metiletilamina o dimetilamina; y sales de estas aminas (por ejemplo, clorhidrato), de las que las alquilaminas primarias o secundarias que pueden estar sustituidas y las sales de las mismas (de forma particular el clorhidrato de la metilamina o el clorhidrato de la dimetilamina) son las preferidas.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre 0ºC y 150ºC (preferiblemente entre 10ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(2) Método en el que se utiliza un agente de azidación y un agente de reducción
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen amidas tales como dimetilformamida; alcoholes tales como metanol o etanol; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de que amidas (de forma particular dimetilformamida) son preferidos.
Ejemplos del agente de azidación incluyen azidas de metales alcalinos tales como azida de sodio o azida de litio, de los que las azidas de metales alcalinos (de forma particular la azida de sodio) son los preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre 0ºC y 150ºC (preferiblemente entre 10ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
La azida así obtenida es convertida en una amina de fórmula (IX-5a) por una reacción de reducción.
Ejemplos del agente de reducción a utilizar incluyen hidruros de aluminio y metales alcalinos tales como hidruro de litio y aluminio; fosfinas tales como trifenilfosfina; e hidrogenación catalítica utilizando catalizadores de metales tales como paladio sobre carbón o catalizador de platino, de los que la hidrogenación catalítica (de forma particular en el caso en que se utilice como catalizador el paladio sobre carbón) es el preferido.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; y alcoholes tales como metanol o etanol, de que los éteres (de forma particular tetrahidrofurano) son los preferidos.
Ejemplos del disolvente a utilizar en la hidrogenación catalítica incluyen alcoholes tales como metanol o etanol, de los que el metanol es el preferido.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -10ºC y 150ºC (preferiblemente entre 0ºC y 100ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
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(B) Preparación de un compuesto (IX-5b)
Esta etapa es una etapa que se lleva a cabo en el caso en que sea necesaria con el fin de preparar un compuesto de fórmula (IX-5b) por introducción de un sustituyente a un compuesto amino de fórmula (IX-5a).
La presente etapa se lleva a cabo por reacción de un agente de acilación deseado, un agente de sulfonilación, un agente de fosforilación o un éster de ácido clorofórmico con compuesto amino de fórmula (IX-5a) en presencia de una base en un disolvente.
Ejemplos del agente de acilación incluyen anhidruros ácidos tales como anhidruro acético o anhidruro benzoico; y cloruros de ácido tales como cloruro de acetilo o cloruro de benzoilo, de los que los cloruros de ácido (de forma particular el cloruro de acetilo) son los preferidos.
Ejemplos del agente de sulfonilación incluyen cloruros de ácido tales como cloruro de metanosulfonilo o cloruro de p-toluenosulfonilo; y anhidruros de ácidos tales como anhidruro de ácido metanosulfónico o anhidruro de ácido p-toluenosulfónico, de los que los cloruros de ácido (de forma particular el cloruro de metanosulfonilo) son los preferidos.
Ejemplos del agente de fosforilación incluyen cloruros de ácido tales como el cloruro de dietilfosforilo o el cloruro de dimetilfosforilo, de los que el cloruro de dietilfosforilo es el preferido.
Ejemplos del éster del ácido clorofórmico incluyen compuestos de tipo éster tales como cloroformiato de metilo, cloroformiato de etilo o cloroformiato de bencilo, de los que los ésteres de ácidos clorofórmicos (de forma particular el cloroformiato de metilo) son los preferidos.
Ejemplos de la base a utilizar incluyen bases orgánicas tales como trietilamina, diisopropiletilamina o piridina; y bases inorgánicas tales como carbonato de sodio, carbonato de potasio o bicarbonato de sodio, de los que las bases orgánicas (de forma particular la trietilamina) son las preferidas.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter; y hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano, de que éteres (de forma particular tetrahidrofuran) son preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre 0ºC y 100ºC (preferiblemente entre 10ºC y 50ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa H3
La Etapa H3 es una etapa para la preparación un compuesto de amino de fórmula (IX-5a) a partir de un compuesto de fórmula (XIV) vía un compuesto de azida y para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-5b) por introducción de un sustituyente en el caso en que sea necesario.
(A) Preparación de un compuesto de azida
La presente etapa se lleva a cabo por reacción de un compuesto de azidación (de forma particular difenilfosforil azida), azodicarboxilato de dietilo y trifenilfosfina con un compuesto de fórmula (XIV) en un disolvente.
No hay ninguna limitación particular en la naturaleza del disolvente a utilizar, siempre que éste no tenga un efecto adverso en la reacción y disuelva los productos de partida hasta una cierta extensión. Ejemplos del disolvente incluyen amidas tales como dimetilformamida; y éteres tales como tetrahidrofurano o dietil éter, de los que los éteres (de forma particular el tetrahidrofurano) son los preferidos.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre 0ºC y 50ºC (preferiblemente entre 10ºC y 30ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 108 horas (preferiblemente entre una y 24
horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
(B) Preparación de compuesto amino
Estas es una etapa para la preparación una amina de fórmula (IX-5a) por reducción de un compuesto de azida y puede ser llevada a cabo de un modo similar a la reducción descrita en la Etapa H2 (A)(2).
(C) Preparación de un compuesto (IX-5b)
Esta etapa, llevada a cabo en el caso en que sea necesario, es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-5b) por introducción de un sustituyente a la amina de fórmula (IX-5a) y puede ser llevada a cabo de un modo similar a la anterior Etapa H2 (B).
Los compuestos de fórmula (IX-1) a (IX-5) obtenidos en el Procedimiento C hasta el Procedimiento H pueden ser convertidos en un compuesto de fórmula (III) que es utilizado como producto de partida de una cadena lateral en la posición 2 de un compuesto de fórmula (I) de acuerdo con las etapas posteriores a la Etapa B5 del Procedimiento B.
Procedimiento I
El Procedimiento I es un método diferente para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-6) que es un compuesto de fórmula (IX), en intermedio en la ruta sintética del Procedimiento B, en donde X es un átomo de oxígeno.
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82
En el esquema anterior, R^{1}p, R^{2}, P^{3} y n tienen los mismos significados que se han definido anteriormente; Z representa un grupo protector de un grupo amino, preferiblemente un grupo benciloxicarbonilo; y P^{5} representa un grupo protector de un grupo hidroxilo, preferiblemente grupo protector con una base acilo tal como acetilo, benzoilo o pivaloilo, y más preferiblemente un grupo benzoilo.
Etapa I-1
La Etapa I-1 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XVI) por conversión un grupo carboxilo de un compuesto amino ácido (XVIa) en el que el grupo amino está protegido en el deseado R^{1}p.
Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con un método seleccionado a partir de los anteriores Procedimientos C a H. Debe hacerse notar que en el compuesto de fórmula (XVIa) que forma el producto de partida, puede preparase un compuesto en donde R^{2} es un átomo de hidrógeno a partir de serina y puede prepararse un compuesto en donde R^{2} es un grupo metilo a partir de treonina. Los compuestos en donde R^{2} es un grupo distinto de un átomo de hidrógeno o de un grupo metilo también pueden ser preparados por un método conocido por un experto en la materia.
Etapa I-2
La Etapa I-2 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XVII) por introducción de un grupo protector de un grupo hidroxilo en un compuesto de fórmula (XVI).
Esta etapa puede ser llevada a cabo de un modo similar a la Etapa B3 del Procedimiento B. Ejemplos preferidos del grupo protector adecuado con una base de sililo como P^{3} incluyen un grupo t-butildimetilsililo.
Etapa I-3
La Etapa I-3 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XVIII) por eliminación del grupo protector a partir del grupo amino del compuesto de fórmula (XVII).
Esta etapa puede ser llevada a cabo de un modo similar a un método de la Etapa A2 (1) del Procedimiento A. El disolvente preferido es metanol.
Etapa I-4
La Etapa I-4 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XIX) por conversión del grupo amino del compuesto de fórmula (XVIII) en un grupo isotiocianato.
Esta etapa se lleva a cabo por reacción del disulfuro de carbono y un agente de dehidrosulfidación con el compuesto de fórmula (XVIII) en presencia de una base en un disolvente.
Ejemplos preferidos del disolvente incluyen hidrocarburos halogenados (de forma particular cloruro de metileno).
Ejemplos preferidos del agente de dehidrosulfidación incluyen ésteres halogenados de ácido fórmico (de forma particular cloroformiato de etilo) o reactivos conteniendo nitrógeno cuaternario (de forma particular yoduro de 2-cloro-1-metilpiridinio o tetrafluoroborato de 2-cloro-1-etilbenzoxazolio).
Ejemplos preferidos de la base incluyen aminas terciarias tales como trietilamina, diisopropiletilamina o tributilamina (de forma particular trietilamina).
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 100ºC (preferiblemente entre 0ºC y 60ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 48 horas (preferiblemente entre una y 12 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa I-5
La Etapa I-5 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XX) por reacción de la amina cíclica deseada con el compuesto de fórmula (XIX). Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa B1 del Procedimiento B.
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Etapa I-6
La Etapa I-6 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XXI) por introducción de grupo protector con una base acilo P^{5} sobre un grupo hidroxilo de un compuesto (XX) y subsecuentemente eliminación grupo protector con base sililo P^{3}.
(1) Introducción de grupo protector con una base acilo P^{5}
Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa H2 (B) del Procedimiento H.
(2) Etapa de eliminación de grupo protector con una base de sililo P^{3}
Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa A2 del Procedimiento A.
Etapa I-7
La Etapa I-7 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XXII) que consiste en someter un compuesto de fórmula (XXI) a una reacción de cierre de anillo. Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente de ciclación (agente de dehidrosulfidación) con el compuesto de fórmula (XXI) en presencia de una base en un disolven-
te.
Ejemplos del disolvente incluyen amidas tales como dimetilformamida o dimetilacetamida; hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno; y nitrilos tales como acetonitrilo; de los que el acetonitrilo es el preferido.
Ejemplos preferidos de la base incluyen aminas terciarias tales como trietilamina, diisopropiletilamina o tributilamina (de forma particular trietilamina).
Ejemplos preferidos del agente de ciclación (dehidrosulfidación) incluyen sales de mercurio tales como óxido de mercurio y cloruro de mercurio; o reactivos conteniendo nitrógeno cuaternario (de forma particular yoduro de 2-cloro-1-metilpiridinio o tetrafluoroborato de 2-cloro-1-etilbenzoxazolio).
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre -20ºC y 100ºC (preferiblemente entre 0ºC y 60ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 48 horas (preferiblemente entre una y 12 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, neutralización, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
Etapa I-8
La Etapa I-8 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (XXIII) por deshidrogenación del compuesto de fórmula (XXII).
Esta etapa se lleva a cabo por reacción de un agente deshidrogenante con el compuesto de fórmula (XXII) en un disolvente.
Ejemplos del disolvente incluyen hidrocarburos aromáticos tales como benceno o tolueno; y hidrocarburos halogenados tales como cloruro de metileno o dicloroetano.
Ejemplos del agente deshidrogenante incluyen agentes de oxidación tales como dióxido de manganeso.
La temperatura de reacción está normalmente comprendida entre 0ºC y 100ºC (preferiblemente entre 0ºC y 60ºC) y el tiempo de reacción está normalmente comprendido entre 0,5 y 48 horas (preferiblemente entre una y 12 horas).
Después de que la reacción sea completa, se obtiene el compuesto deseado de la mezcla de reacción por medios conocidos. Por ejemplo, el compuesto deseado puede ser obtenido por adición de un disolvente orgánico inmiscible en agua a un residuo obtenido por eliminación por destilación de la mezcla de reacción del disolvente en la mezcla de reacción, eliminación de los insolubles por filtración, lavado con agua y eliminación por destilación del disolvente. El compuesto deseado así obtenido puede ser purificado de forma adicional, en el caso en que sea necesario, por procedimientos convencionales tales como recristalización, reprecipitación o cromatografía.
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Etapa I-9
La Etapa I-9 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (IX-6) por eliminación del grupo protector con una base acilo P^{5} del compuesto de fórmula (XXIII) y subsecuentemente introducción de grupo protector con una base de sililo P^{3}.
(1) Eliminación del grupo protector con una base acilo P^{5}
Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con un método para la preparación el compuesto de fórmula (VI) a partir del compuesto de fórmula (XIII) en la Etapa B1 (2) del Procedimiento B.
(2) Introducción del grupo protector de base sililo P^{3}
Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa B3 del Procedimiento B.
Procedimiento J
El compuesto de fórmula (I) también puede ser preparado de un modo diferente a partir del Procedimiento A por el siguiente Procedimiento J. El Procedimiento J puede ser aplicado para la preparación del compuesto de fórmula (I-1) o (I-2) en donde R^{1} está representado por la fórmula COOR^{3} o la fórmula CONR^{4}R^{5}.
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(Esquema pasa a página siguiente)
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En el esquema anterior, R^{1}, R^{1}p, R^{2}, P^{1}, P^{3}, X, L^{1} y n tienen los mismos significados que se han definido anteriormente. Un ejemplo preferido de P^{3} es un grupo t-butildimetilsililo.
Etapa J1
La Etapa J1 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (IV-1) por condensación de un compuesto de fórmula (II-1) que está protegido por un grupo protector de base sililo P^{3} y un compuesto de fórmula (III-1) en el que R^{1}p es un grupo carboxilo protegido por un grupo alilo.
Esta etapa puede ser llevada a cabo de un modo similar a la Etapa A1 del Procedimiento A. El compuesto de fórmula (II-1) utilizado como producto de partida puede ser preparado por reacción de un agente sililante con un compuesto de fórmula (II) y esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa B3 del Procedimiento B. El compuesto de fórmula (III-1) puede ser preparado por el Procedimiento B.
Etapa J2
La Etapa J2 es una etapa para la preparación del compuesto de fórmula (IV-2) por eliminación del grupo protector de alilo a partir del compuesto de fórmula (IV-1). Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa A2 (2) del Procedimiento A.
Etapa J3
La Etapa J3 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (IV-3) por modificación de un grupo carboxilo del compuesto de fórmula (IV-2). Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa B4 del Procedimiento B (de forma particular del Procedimiento C y del Procedimiento D).
Etapa J4
La Etapa J4 es una etapa para la preparación de un compuesto de fórmula (I) por eliminación de los grupos protectores P^{3} y P^{1} a partir del compuesto de fórmula (IV-3).
(1) Eliminación del grupo protector P^{3}
Esta etapa puede ser llevada a cabo de acuerdo con la Etapa A2 (3) del Procedimiento A.
(2) Eliminación del grupo protector P^{1}
Esta etapa puede ser llevada a cabo de un modo similar a la Etapa A2 del Procedimiento A.
Los compuestos de fórmula (I) o las sales farmacológicamente aceptables de los mismos de la presente invención muestran una fuerte y amplia actividad antibacteriana frente a varias bacterias patogénicas incluyendo bacterias Gram-positivas tales como Staphilococcus y Bacillus subtilis, bacterias Gram-negativas bacteria tales como Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Shigella, Proteus vulgaris, Serratia, Enterobacter y Pseudomonas aerginosa, y bacterias anaeróbicas tales como Bacteroides fragilis, y, en particular, tienen una fuerte actividad antibacteriana frente Streptococcus pneumoniae (incluyendo bacterias resistentes a la penicilina) y Haemophilus influenzae (incluyendo bacterias productoras de \beta-lactamasa), que causan infecciones del aparato respiratorio. Los compuestos de fórmula (I) de la presente invención tienen una elevada estabilidad frente a \beta-lactamasas incluyendo metalo \beta-lactamasas. Los compuestos de fórmula (I) de la presente invención muestran buenas farmacocinéticas tales como una alta concentración máxima en suero y una larga vida media en suero cuando se administran tanto de forma oral como no oral. Por consiguiente, es de esperar que los compuestos de fórmula (I) de la presente invención tengan un potente efecto terapéutico incluso cuando sean administrados menos frecuentemente o con dosis menores en comparación con los fármacos existentes. Los compuestos de fórmula (I) de la presente invención tienen una baja débil toxicidad para el riñón. De acuerdo con ello, los compuestos de fórmula (I) o las sales o ésteres farmacológicamente aceptables de los mismos de la presente invención, son útiles, por ejemplo, como fármacos y, de forma particular, son especialmente útiles como agentes antibacterianos para el tratamiento o la prevención (preferiblemente el tratamiento) de infecciones bacterianas causadas por varios tipos de bacterias patogénicas, de forma particular bacterias que causan infección del aparato respiratorio.
Cuando se utilizan como fármacos los compuestos de fórmula (I), los ésteres o las sales farmacológicamente aceptables de los mismos, de forma particular los agentes antibacterianos, pueden ser administrados de forma oral en la forma de comprimidos, de cápsulas, de gránulos, de polvos o de jarabes para uso de los mismos tal cual o mezclados con aditivos farmacológicamente aceptables tales como excipientes o diluyentes, o administrados de forma parenteral en la forma de inyecciones.
Estas formulaciones pueden ser preparadas de un modo conocido mediante la utilización de aditivos. Ejemplos de aditivos incluyen excipientes (por ej., derivados de azúcar tales como lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y sorbitol; derivados de almidón tales como almidón de maíz, almidón de patata, \alpha-almidón, dextrina y carboximetil almidón; derivados de celulosa tales como celulosa cristalina, hidroxipropil celulosa de baja sustitución, hidroxipropilmetil celulosa, carboximetil celulosa, carboximetil celulosa de calcio y carboximetil celulosa de sodio internamente reticulada; goma arábica; dextrano; y pululano; derivados de silicio tales como anhidruro silícico ligero, silicato de aluminio sintético y aluminometasilicato de magnesio; derivados de fosfato tales como fosfato de calcio; derivados de carbonato tales como carbonato de calcio; o derivados de sulfato tales como sulfato de calcio), aglutinantes (por ej. los excipientes anteriormente ejemplificados; gelatina; polivinil pirrolidona; o Macrogol); disintegradores (por ej. los excipientes anteriormente ejemplificados; o almidón químicamente modificado o derivados de celulosa tales como croscarmelosa de sodio o carboximetil almidón de sodio; polivinilpirrolidona reticulada); lubricantes (por ej. talco; ácido esteárico; sales metálicas de ácido esteárico tales como estearato de calcio o estearato de magnesio; sílice coloidal; veegum; ceras tales como cera de abejas o esperma de ballena; ácido bórico; glicol; ácidos carboxílicos tales como ácido fumárico o ácido adípico; carboxilatos de sodio tales como benzoato de sodio; sulfatos tales como sulfato de sodio; leucina; lauril sulfatos tales como lauril sulfato de sodio o lauril sulfato de magnesio; ácidos silícicos tales como anhidruro silícico o hidrato silícico; o derivados de almidón ejemplificados anteriormente como excipientes), estabilizantes (por ej. ésteres de ácidos p-hidroxi benzoico tales como metil paraben o propil paraben; alcoholes tales como clorobutanol, bencil alcohol o feniletil alcohol; cloruro de benzalconio; fenoles tales como fenol y cresol; timerosal; anhidruro de ácido acético; o ácido sórbico), correctores (por ej. edulcorantes utilizados de forma ordinaria, agentes acidificantes o aromas), agentes de suspensión (por ej. Polisorbato 80 o carboximetil celulosa de sodio), diluyentes y disolventes para formulación (por ej. agua, etanol o glicerina).
La dosis de los compuestos de fórmula (I) variará dependiendo del estado y edad del paciente. De forma oral, son administrados en una cantidad de 10 mg (preferiblemente de 50 mg) como límite inferior para una dosis única y de 2000 mg (preferiblemente 1000 mg) como límite superior de una dosis única, mientras que cuando se administran de forma intravenosa, son administrados en una cantidad de 10 mg (preferiblemente de 100 mg) como límite inferior para una dosis única y de 3000 mg (preferiblemente de 2000 mg) como límite superior de una dosis única. Es deseable que el compuesto sea administrado a un adulto en una dosis única o en dosis divididas (sextas partes) por día dependiendo del estado del paciente.
Mejor modo de llevar a cabo la invención
La presente invención se ilustrará a continuación en mayor detalle por los siguientes Ejemplos, Ejemplos de Referencia, Ejemplos de Ensayo y Ejemplos de Formulación. El alcance de la presente invención no está limitado por estos Ejemplos. En los espectros de resonancia magnética nuclear en los Ejemplos y en los Ejemplos de Referencia, se utilizó el trimetilsililpropionato-d_{4} de sodio como estándar interno para la medición en agua deuterada, mientras que se utilizó el tetrametilsilano como estándar interno en los demás disolventes. De forma incidental, cuando no se utilizó un estándar interno en la medición en agua deuterada, la medición se llevó a cabo en la base de que la señal del HOD en el agua deuterada aparece a 4,65 ppm.
Ejemplo 1 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
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(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (468 mg, 1,71 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 1) en dimetilformamida (15 ml) se añadió acetato de hidrazina (171,0 mg, 1,86 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,02 g, 1,72 mmol) en acetonitrilo (30 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,5 ml, 8,61 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió sobre la mezcla de reacción acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo) para proporcionar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (752 mg, rendimiento 75%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6Hz), 7,50 (1H, s), 5,50 (1H, d, J=13,7Hz), 5,25 (1H, d, J=13,7Hz), 4,55 (2H, dd, J=14,4, 8,0Hz), 4,36 (2H, q, J=7,1Hz), 4,35-4,20 (3H, m), 4,20-4,05 (2H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,7, 2,4Hz), 3,20 (1H, dq, J=10,3, 8,3Hz), 1,82 (1H, señal ancha), 1,42 (3H, d, J=6,3Hz), 1,40 (3H, t, J=7,1Hz), 1,26 (3H, t, J=7,5Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 589 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (744 mg, 1,26 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 1(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (46 ml) y agua destilada (23 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (736 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (106 mg), una mezcla de acetato de etilo y una mezcla de tetrahidrofurano y agua destilada (1:1). Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 5% acetonitrilo; agua destilada - 7% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado el ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (376 mg, rendimiento 63%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,68 (1H, s), 4,50 (2H, t, J=12,6Hz), 4,40-4,10 (5H, m incluyendo c a 4,30 ppm, J=8,4Hz), 4,10-3,95 (2H, m), 3,45-3,35 (1H, m), 3,30-3,25 (1H, m), 1,30 (3H, t, J=8,4Hz), 1,25 (3H, d, J=6,7Hz), 1,15 (3H, d, J=9,2Hz).
IR (KBr): 1749, 1720, 1602, 1544, 1395, 1316 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 476 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{19}H_{23}O_{6}N_{3}S_{2}Na: 476,0912, Encontrado: 476,0938 [M+H]^{+}
Ejemplo 2 Sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
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(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-p-nitrobencilcarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (380 mg, 1,0 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 2) en dimetilformamida (15 ml) se añadió acetato de hidracina (115 mg, 1,25 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de p-nitrobencil (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (695 mg, 1,17 mmol) en acetonitrilo (30 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,84 ml, 4,82 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió a la mezcla de reacción acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo) para proporcionar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (752 mg, rendimiento 75%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6Hz), 7,50 (1H, s), 5,50 (1H, d, J=13,7Hz), 5,25 (1H, d, J=13,7Hz), 4,55 (2H, dd, J=14,4, 8,0Hz), 4,36 (2H, q, J=7,1Hz), 4,35-4,20 (3H, m), 4,20-4,05 (2H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,7, 2,4Hz), 3,20 (1H, dq, J=10,3, 8,3Hz), 1,82 (1H, señal ancha), 1,42 (3H, d, J=6,3Hz), 1,40 (3H, t, J=7,1Hz), 1,26 (3H, t, J=7,5Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 589 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (744 mg, 1,26 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 1(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (46 ml) y agua destilada (23 ml) en presencia de 20% hidróxido de paladio (736 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (106 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 5% acetonitrilo; agua destilada - 7% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (376 mg, rendimiento 63%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,68 (1H, s), 4,50 (2H, t, J=12,6Hz), 4,40-4,10 (5H, m incluyendo c a 4,30 ppm, J=8,4Hz), 4,10-3,95 (2H, m), 3,45-3,35 (1H, m), 3,30-3,25 (1H, m), 1,30 (3H, t, J=8,4Hz), 1,25 (3H, d, J=6,7Hz), 1,15 (3H, d, J=9,2Hz).
IR (KBr): 1749, 1720, 1602, 1544, 1395, 1316 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 476 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{19}H_{23}O_{6}N_{3}S_{2}Na: 476,0912, Encontrado: 476,0938 [M+H]^{+}
Ejemplo 2 Sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
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(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (380 mg, 1,0 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 2) en dimetilformamida (15 ml) se añadió acetato de hidracina (115 mg, 1,25 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (695 mg, 1,17 mmol) en acetonitrilo (30 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,84 ml, 4,82 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió a la mezcla de reacción acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido espumoso de color marrón (336 mg, rendimiento 50%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6Hz), 8,22 (2H, d, J=8,6Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6Hz), 7,59 (2H, d, J=8,6Hz), 7,57 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,7Hz), 5,43 (2H, s), 5,25 (1H, d, J=13,7Hz), 4,56 (2H, dd, J=15,7, 8,7Hz), 4,31-4,20 (3H, m), 4,19-4,05 (3H, m), 3,29 (1H, dd, J=7,1, 2,9Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,2, 7,4Hz), 1,38 (3H, d, J=6,5Hz), 1,27 (3H, d, J=7,2Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 696 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (2,2 g, 3,93 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 3(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (110 ml) y agua destilada (110 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (2,2 g) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (330 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 2% acetonitrilo; agua destilada - 4% acetonitrilo; agua destilada - 6% acetonitrilo; agua destilada - 8% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (1,12 g, rendimiento 64%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,54 (1H, s), 4,56 (2H, t, J=8,6Hz), 4,40-4,30 (1H, m), 4,52 (1H, quinteto, J=6,2Hz), 4,21 (1H, dd, J=9,1, 2,5Hz), 4,07 (2H, m), 3,44 (1H, dd, J=6,2, 2,5Hz), 4,07 (2H, dt, J=8,6, 4,2Hz), 3,44 (1H, dd, J=6,2, 2,5Hz), 3,26 (1H, dd, J=9,1, 7,2Hz), 1,30 (3H, d, J=6,2Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1749, 1671, 1598, 1546, 1394, 1287 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 447 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{17}H_{20}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 447,0773, Encontrado: 447,0734 [M+H]^{+}
Ejemplo 4 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
87 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina (760 mg, 3,18 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 4) en dimetilformamida (38 ml) se añadió acetato de hidracina (351 mg, 3,81 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,89 g, 3,18 mmol) en acetonitrilo (95 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (2,21 ml, 12,7 mmol). Se agitó la mezcla durante 4 horas mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió a la mezcla de reacción acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con una solución acuosa de cloruro sódico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente hexano : acetato de etilo (1 : 4) y acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (1,65 g, rendimiento 96%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8Hz), 7,29 (1H, s), 5,51 (1H, d, 13,9Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9Hz), 4,54 (2H, dd, J=16,0, 8,0Hz), 4,36-4,24 (3H, m), 4,12-4,04 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J=6,6, 2,9Hz), 3,20 (1H, dq, J=9,4, 7,3Hz), 1,80 (1H, señal ancha), 1,38 (3H, d, J=5,9Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 542 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (600 mg, 1,11 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 4(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (600 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (93 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 6% acetonitrilo; agua destilada - 9% acetonitrilo; agua destilada - 12% acetonitrilo; agua destilada - 15% acetonitrilo; agua destilada - 18% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (285 mg, rendimiento 60%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,68 (1H, s), 4,57 (2H, t, J=8,2Hz), 4,44-4,32 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,2Hz), 4,21 (1H, dd, J=9,0, 2,3Hz), 4,07 (2H, dt, 8,2, 4,7Hz), 3,44 (1H, dd, J=6,2, 2,3Hz), 3,25 (1H, dq, J=9,0, 7,2Hz), 1,31 (3H, d, J=6,2Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 2231. 1750, 1599, 1549, 1470, 1397, 1307 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 429 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{17}H_{18}O_{4}N_{4}S_{2}Na: 429,0668, Encontrado: 429,0662 [M+H]^{+}
Ejemplo 5 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
88 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (570 mg, 2,10 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 5) en dimetilformamida (28 ml) se añadió acetato de hidracina (291 mg, 3,16 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,25 g, 2,10 mmol) en acetonitrilo (25 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,83 ml, 10,5 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió a la mezcla de reacción acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente tolueno : acetonitrilo (2 : 3) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (774 mg, rendimiento 64%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,8Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8Hz), 7,43 (1H, s), 7,14 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,8Hz), 5,25 (1H, d, J=13,8Hz), 4,48 (2H, dd, J=17,2, 8,9Hz), 4,35-4,20 (3H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 3,35-3,15 (2H, m), 2,96 (3H, d, J=5,1Hz), 1,70 (1H, señal ancha), 1,38 (3H, d, J=6,2Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 574 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (768 mg, 1,34 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 5(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (38 ml) y agua destilada (19 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (757 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (115 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se lavó la capa acuosa con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1), se separó y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 5% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (392 mg, rendimiento 64%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,30 (1H, s), 4,40 (2H, t, J=8,0Hz), 4,30-4,18 (1H, m), 4,18-4,00 (2H, m), 3,90-3,85 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J=6,3, 3,8 Hz), 3,20-3,05 (1H, m), 1,18 (3H, d, J=6,4Hz), 1,06 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1749, 1650, 1599, 1552, 1397, 1316 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}) 461 [M+H]^{+}
Ejemplo 6 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
89
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (563 mg, 1,49 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 6) en dimetilformamida (28 ml) se añadió acetato de hidracina (264 mg, 2,87 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,15 g, 1,94 mmol) en acetonitrilo (23 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,7 ml, 9,76 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió a la mezcla de reacción acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente tolueno : acetonitrilo (2 : 3) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (777 mg, rendimiento 68%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,2Hz), 7,66 (2H, d, J=8,2Hz), 7,09 (1H, s), 5,50 (1H, d, J=13,5Hz), 5,25 (1H, d, J=13,5Hz), 4,60-4,40 (2H, m), 4,35-4,20 (3H, m), 4,20-4,00 (2H, m), 3,32-3,25 (1H, m), 3,25-3,12 (4H, m), 3,05 (3H, señal ancha), 1,57 (1H, señal ancha), 1,38 (3H, d, J=6,2Hz), 1,25 (3H, d, J=7,1Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 588 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (772 mg, 1,31 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 6(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (38 ml) y agua destilada (19 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (768 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (112 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (375 mg, rendimiento 60%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,00 (1H, s), 4,56-4,36 (2H, m), 4,31-4,21 (1H, m), 4,21-4,06 (2H, m), 4,01-3,91 (2H, m), 3,41-3,32 (1H, m), 3,21-3,11 (1H, m), 3,00 (3H, s), 2,91 (3H, s), 1,21 (3H, d, J=6,4Hz), 1,11 (3H, d, J=7,1Hz).
IR (KBr): 1750, 1610, 1540, 1397, 1305 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 475 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{19}H_{24}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 475,1087, Encontrado: 475,1085 [M+H]^{+}
Ejemplo 7 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-etilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
90
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-etilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-etilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (450 mg, 1,58 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 7) en dimetilformamida (23 ml) se añadió acetato de hidracina (174 mg, 1,89 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (939 mg, 1,58 mmol) en acetonitrilo (47 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,10 ml, 6,31 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: acetato de etilo - 10% metanol y acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-etilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (753 mg, rendimiento 81%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8Hz), 7,43 (1H, s), 7,12 (1H, t, J=5,1Hz), 5,51 (1H, d, J=13,9Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9Hz), 4,49 (2H, dd, J=16,1, 8,1Hz), 4,32-4,20 (3H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 3,44 (2H, dq, J=7,3, 5,0Hz), 3,29 (1H, dd, J=7,3, 2,9Hz), 3,21 (1H, dq, J=8,9, 7,3Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3Hz), 1,23 (3H, t, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 588 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Etilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-etilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (750 mg, 1,23 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 7(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (38 ml) y agua destilada (38 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (750 mg) a temperatura ambiente durante 1,7 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (103 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 6% acetonitrilo; agua destilada - 9% acetonitrilo; agua destilada - 12% acetonitrilo; agua destilada - 15% acetonitrilo; agua destilada - 18% acetonitrilo; agua destilada - 21% acetonitrilo; y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-etilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (384 mg, rendimiento 66%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,45 (1H, s), 4,60-4,48 (2H, m), 4,40-4,29 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,2Hz), 4,20 (1H, dd, J=9,1, 2,3Hz), 4,12-4,00 (2H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,2, 2,3Hz), 3,37 (3H, q, J=7,2Hz), 3,32-3,18 (1H, m), 1,30 (3H, d, J=6,2Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2Hz), 1,19 (3H, t, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1750, 1659, 1604, 1548, 1394, 1315 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 475 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{19}H_{24}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 475,1086, Encontrado: 475,1070 [M+H]^{+}
Ejemplo 8 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
91
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (460 mg, 1,65 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 8) en dimetilformamida (23 ml) se añadió acetato de hidracina (182 mg, 1,98 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (981 mg, 1,65 mmol) en acetonitrilo (49 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,15 ml, 6,60 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio a la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: n-hexano : acetato de etilo (1 : 2); acetato de etilo - 5% metanol y acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (790 mg, rendimiento 80%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8Hz), 7,42 (1H, s), 6,95 (1H, d, J=8,1Hz), 5,51 (1H, d, J=13,6Hz), 5,25 (1H, d, J=13,6Hz), 4,49 (2H, dd, J=14,6, 8,1Hz), 4,32-3,40 (5H, m), 3,30 (1H, dd, J=7,3, 2,9Hz), 3,21 (1H, dq, J=8,8, 7,3Hz), 1,60 (1H, señal ancha), 1,38 (1H, d, J=6,6Hz), 1,30-1,20 (9H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 602 [M+H]
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (790 mg, 1,31 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 7(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (40 ml) y agua destilada (40 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (790 mg) a temperatura ambiente durante 1,7 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (110 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 4% acetonitrilo; agua destilada - 8% acetonitrilo; agua destilada - 12% acetonitrilo; agua destilada -
16% acetonitrilo; agua destilada - 20% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (389 mg, rendimiento 61%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,45 (1H, s), 4,55 (2H, t, J=8,4Hz), 4,40-4,30 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,3Hz), 4,19 (1H, dd, J=9,0, 2,4Hz), 4,14-4,03 (3H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,4Hz), 3,25 (1H, dq, J=9,0, 7,2Hz), 1,30 (3H, d, J=6,3Hz), 1,23 (6H, d, J=6,7Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1751, 1657, 1548, 1492, 1469, 1393, 1303, 1263 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 489 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{20}H_{26}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 489,1242, Encontrado: 489,1234 [M+H]^{+}
Ejemplo 9 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
92
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (550 mg, 1,67 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 9) en dimetilformamida (28 ml) se añadió acetato de hidracina (187 mg, 2,03 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (993 mg, 1,67 mmol) en acetonitrilo (50 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,16 ml, 6,68 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (346 mg, rendimiento 33%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,24 (2H, d, J=8,0Hz), 7,66 (2H, d, J=8,0Hz), 7,42 (1H, s), 7,05 (1H, bd, J=8,0Hz), 5,51 (1H, d, J=13,6Hz), 5,26 (1H, d, J=13,6Hz), 4,49 (2H, dd, J=15,6, 8,1Hz), 4,38-4,24 (3H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J=6,2, 2,1Hz), 3,22 (1H, dq, J=9,4, 8,3Hz), 2,12-2,00 (2H, m), 1,81 (1H, señal ancha), 1,78-1,44 (6H, m), 1,38 (3H, d, J=5,8Hz), 1,28 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 628 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (790 mg, 1,31 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 8(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (40 ml) y agua destilada (40 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (790 mg) a temperatura ambiente durante 1,7 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (110 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 4% acetonitrilo; agua destilada - 8% acetonitrilo; agua destilada - 12% acetonitrilo; agua destilada -
16% acetonitrilo; agua destilada - 20% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-isopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (389 mg, rendimiento 61%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,45 (1H, s), 4,55 (2H, t, J=8,4Hz), 4,40-4,30 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,3Hz), 4,19 (1H, dd, J=9,0, 2,4Hz), 4,14-4,03 (3H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,4Hz), 3,25 (1H, dq, J=9,0, 7,2Hz), 1,30 (3H, d, J=6,3Hz), 1,23 (6H, d, J=6,7Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1751, 1657, 1548, 1492, 1469, 1393, 1303, 1263 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 489 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{20}H_{26}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 489,1242, Encontrado: 489,1234 [M+H]^{+}
Ejemplo 9 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
93
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-ciclohexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (121 mg, 1,09 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 10) en dimetilformamida (19 ml) se añadió acetato de hidracina (121 mg, 1,31 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (648 mg, 1,09 mmol) en acetonitrilo (32 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,759 ml, 4,36 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió a la mezcla de reacción acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: n-hexano : acetato de etilo (1 : 4); acetato de etilo - 5% metanol y acetato de etilo, para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclohexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (598 mg, rendimiento 86%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8Hz), 7,42 (1H, s), 7,00 (1H, d, J=8,8Hz), 5,51 (1H, d, J=13,5Hz), 5,25 (1H, d, J=13,5Hz), 4,49 (2H, dd, J=15,4, 8,8Hz), 4,32-4,20 (3H, m), 4,11-4,00 (2H, m), 3,96-3,80 (1H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,6, 2,2Hz), 3,21 (1H, dq, J=8,8, 7,3Hz), 2,01-1,18 (16H, m incluyendo 3H, d a 1,38, J=5,9Hz y 3H, d a 1,28, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 642 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclohexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclohexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (590 mg, 0,919 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 10(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (590 mg) a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (77 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 4% acetonitrilo; agua destilada - 8% acetonitrilo; agua destilada - 12% acetonitrilo; agua destilada - 16% acetonitrilo; agua destilada - 20% acetonitrilo; agua destilada - 24% acetonitrilo; agua destilada - 28% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclohexilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (318 mg, rendimiento 66%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,45 (1H, s), 4,55 (2H, dt, J=8,5, 1,9Hz), 4,40-4,30 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,3Hz), 4,19 (1H, dd, J=9,0, 2,4Hz), 4,10-4,00 (2H, m), 3,80-3,70 (1H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,4Hz), 3,24 (1H, dq, J=9,0, 7,1Hz), 1,96-1,84 (2H, m), 1,83-1,70 (2H, m), 1,69-1,58 (1H, m), 1,46-1,10 (11H, m incluyendo 3H, d, a 1,30, J=6,3Hz, y 3H, d, a 1,19, J=7,1Hz).
IR (KBr): 1751, 1660, 1605, 1545, 1492, 1393, 1310, 1296 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 529 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{23}H_{30}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 529,1555, Encontrado: 529,1575 [M+H]^{+}
Ejemplo 11 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
94
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (410 mg, 1,50 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 11) en dimetilformamida (20 ml) se añadió acetato de hidracina (138 mg, 1,50 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de p-nitrobencil (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (743 mg, 1,25 mmol) en acetonitrilo (37 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,873 ml, 5,01 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: acetato de etilo - 10% metanol y acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (485 mg, rendimiento 62%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8Hz), 7,19 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,9Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9Hz), 4,50 (2H, ddd, J=13,9, 8,1, 2,2Hz), 4,35-4,20 (3H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 3,95-3,60 (8H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,6, 2,2Hz), 3,20 (1H, dq, J=8,8, 7,3Hz), 1,38 (3H, d, J=6,6Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 630 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (480 mg, 0,762 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 11(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (24 ml) y agua destilada (24 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (480 mg) a temperatura ambiente durante 1,3 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (64 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 6% acetonitrilo; agua destilada - 9% acetonitrilo; agua destilada -
12% acetonitrilo; agua destilada - 15% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (236 mg, rendimiento 60%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,15 (1H, s), 4,56 (2H, dt, J=8,4, 0,9Hz), 4,42-4,32 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,3Hz), 4,21 (1H, dd, J=9,0, 2,3Hz), 4,05 (2H, m), 3,90-3,60 (8H, m), 3,44 (1H, dd, J=6,3, 2,3Hz), 3,25 (1H, dq, J=9,0, 7,3Hz), 1,30 (3H, d, J=6,3Hz), 1,20 (3H, d, J=7,3Hz).
IR (KBr): 1799, 1608, 1536, 1392, 1311, 1236, 1113 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 517 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{21}H_{26}O_{6}N_{4}S_{2}Na: 517,1192, Encontrado: 517,1186 [M+H]^{+}
Ejemplo 12 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
95
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 4-acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (400 mg, 1,27 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 13) en dimetilformamida (12 ml) se añadió acetato de hidracina (152 mg, 1,65 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 2,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (755 mg, 1,27 mmol) en acetonitrilo (21 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,11 ml, 6,37 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio a la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) y acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (296 mg, rendimiento 38%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,27 (2H, d, J=8,7Hz), 7,71 (2H, d, J=8,7Hz), 7,51 (1H, s), 5,56 (1H, d, J=13,7Hz), 5,28 (1H, d, J=13,7Hz), 4,40 (2H, q, J=7,1Hz), 4,39-4,30 (2H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 3,60-3,20 (5H, m), 2,20-2,00 (2H, m), 1,90-1,70 (3H, m), 1,43 (3H, d, J=6,5Hz), 1,41 (3H, t, J=7,1Hz), 1,36 (7,2Hz).
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (291 mg, 0,578 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 12(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (14 ml) y agua destilada (7 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (291 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (42 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 5% acetonitrilo; agua destilada - 7% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (69 mg, rendimiento 29%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,69 (1H, s), 4,35 (2H, q, J=7,1Hz), 4,30-4,20 (2H, m incluyendo dd a 4,23, J=9,2, 2,5Hz), 4,00-3,85 (2H, m), 3,55-3,20 (5H,m), 2,20-2,05 (2H, m), 1,75-1,60 (2H, m), 1,36 (3H, t, J=7,1Hz), 1,31 (3H, d, J=6,4Hz), 1,23 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1750, 1729, 1603, 1540, 1448, 1385, 1337, 1265, 1223, 1210 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 504 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{21}H_{27}O_{6}N_{3}S_{2}Na: 504,1239, Encontrado: 504,1246 [M+H]^{+}
Ejemplo 13 Sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
96
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 4-acetiltio-1-(4-p-nitrobencilcarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (150 mg, 0,353 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 14) en dimetilformamida (7,5 ml) se añadió acetato de hidracina (46 mg, 0,49 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (200 mg, 0,353 mmol) en acetonitrilo (3,0 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,09 ml, 0,517 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (220 mg, rendimiento 89%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,6Hz), 8,22 (2H, d, J=8,6Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6Hz), 7,59 (2H, d, J=8,6Hz), 7,53 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,8Hz), 5,43 (2H, s), 5,22 (1H, d, J=13,8Hz), 4,35-4,20 (2H, m), 4,05-3,90 (2H, m), 3,50-3,10 (6H, m), 2,20-1,95 (2H, m), 1,90-1,50 (3H, m), 1,38 (3H, d, J=6,2Hz), 1,31 (3H, d, J=7,2Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 724 [M+H]^{+}
(2) Sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (570 mg, 0,788 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 13(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (38 ml) y agua destilada (19 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (572 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (132 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (285 mg, rendimiento 76%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,22 (1H, s), 4,30-4,10 (2H, m), 4,00-3,78 (2H, m), 3,60-3,05 (5H, m), 2,15-2,00 (2H, m), 1,80-1,55 (2H, m), 1,26 (3H, d, J=6,4Hz), 1,18 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1747, 1597, 1532, 1397, 1289 cm^{-1}
Ejemplo 14 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
97
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 4-acetiltio-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (400 mg, 1,40 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 15) en dimetilformamida (20 ml) se añadió acetato de hidracina (142 mg, 1,54 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,25 g, 2,10 mmol) en acetonitrilo (37 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,61 ml, 3,50 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (10 : 1) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (348 mg, rendimiento 42%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,6Hz), 7,66 (2H, d, J=8,6Hz), 7,44 (1H, s), 6,99 (1H, señal ancha), 5,56 (1H, señal ancha), 5,51 (1H, d, J=13,8Hz), 5,24 (1H, d, J=13,8Hz), 4,35-4,20 (2H, m incluyendo dd a 4,28, J=9,7, 2,9Hz), 4,04-3,85 (3H, m), 3,50-3,10 (6H, m), 2,20-2,00 (2H, m), 1,95-1,70 (3H, m), 1,39 (3H, d, J=6,3Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB+): 587 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (493 mg, 0,839 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 14(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (15 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (0,50 g) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (71 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 5% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (127 mg, rendimiento 32%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,70 (1H, s), 4,50-4,35 (2H, m incluyendo dd a 4,18, J=9,2, 2,8Hz), 4,00-3,80 (2H, m), 3,50-3,10 (5H, m), 2,15-1,95 (2H, m), 1,75-1,55 (2H, m), 1,26 (3H, d, J=6,5Hz), 1,19 (3H, d, J=9,0Hz).
IR (KBr): 1749, 1667, 1594, 1547, 1386 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 475 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{19}H_{24}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 475,1086, Encontrado: 475,1070 [M+H]^{+}
Ejemplo 15 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
98
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 4-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,21 g, 4,04 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 16) en dimetilformamida (36 ml) se añadió acetato de hidracina (408 mg, 4,43 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (3,12 g, 5,25 mmol) en acetonitrilo (72 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,76 ml, 10,1 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente acetato de etilo : metanol (20 : 1) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (1,336 g, rendimiento 55%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,0Hz), 7,64 (2H, d, J=8,0Hz), 7,40 (1H, s), 7,19 (1H, señal ancha), 5,50 (1H, d, J=12,8Hz), 5,22 (1H, d, J=12,8Hz), 4,40-4,20 (2H, m), 4,00-3,80 (2H, m), 3,50-3,10 (5H, m), 2,95 (3H, d, J=6,4Hz), 2,15-1,90 (3H, m), 1,90-1,70 (2H, m), 1,39 (3H, d, J=6,4Hz), 1,20 (3H, d, J=9,6Hz).
Espectro de masas (FAB+): 587 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (493 mg, 0,839 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 14(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (15 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (0,50 g) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (71 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 5% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (127 mg, rendimiento 32%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,70 (1H, s), 4,50-4,35 (2H, m incluyendo dd a 4,18, J=9,2, 2,8Hz), 4,00-3,80 (2H, m), 3,50-3,10 (5H, m), 2,15-1,95 (2H, m), 1,75-1,55 (2H, m), 1,26 (3H, d, J=6,5Hz), 1,19 (3H, d, J=9,0Hz).
IR (KBr): 1749, 1667, 1594, 1547, 1386 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 475 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{19}H_{24}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 475,1086, Encontrado: 475,1070 [M+H]^{+}
Ejemplo 15 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
99
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 4-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1,21 g, 4,04 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 16) en dimetilformamida (36 ml) se añadió acetato de hidracina (408 mg, 4,43 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (3,12 g, 5,25 mmol) en acetonitrilo (72 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,76 ml, 10,1 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: acetato de etilo : metanol (20 : 1) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (1,336 g, rendimiento 55%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,21 (2H, d, J=8,0Hz), 7,64 (2H, d, J=8,0Hz), 7,40 (1H, s), 7,19 (1H, señal ancha), 5,50 (1H, d, J=12,8Hz), 5,22 (1H, d, J=12,8Hz), 4,40-4,20 (2H, m), 4,00-3,80 (2H, m), 3,50-3,10 (5H, m), 2,95 (3H, d, J=6,4Hz), 2,15-1,90 (3H, m), 1,90-1,70 (2H, m), 1,39 (3H, d, J=6,4Hz), 1,20 (3H, d, J=9,6Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 602 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (857 mg, 1,424 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 15(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (40 ml) y agua destilada (20 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (853 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (120 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa, se lavó con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 5% acetonitrilo; agua destilada - 7% acetonitrilo; agua destilada - 9% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (317 mg, rendimiento 46%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,34 (1H, s), 4,25-4,10 (2H, m incluyendo dd a 4,16, J=9,2, 2,2Hz), 3,95-3,80 (2H, m), 3,50-3,10 (5H, m), 2,84 (3H, s), 2,15-1,95 (2H, m), 1,75-1,50 (2H, m), 1,24 (3H, d, J=6,3Hz), 1,17 (3H, d, J=7,3Hz).
IR (KBr): 1750, 1654, 1602, 1553, 1385, 1266 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 489 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{20}H_{26}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 489,1242, Encontrado: 489,1255 [M+H]^{+}
Ejemplo 16 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
100
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidin-4-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 4-acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (620 mg, 1,98 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 17) en dimetilformamida (35 ml) se añadió acetato de hidracina (201 mg, 2,18 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (2,35 g, 3,96 mmol) en acetonitrilo (65 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,40 ml, 8,04 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente cloruro de metileno - 10% metanol y cloruro de metileno para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (412 mg, rendimiento 100%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8Hz), 7,65 (2H, d, J=8,8Hz), 7,40 (1H, s), 7,03 (1H, señal ancha), 5,50 (1H, d, J=13,6Hz), 5,48 (1H, señal ancha), 5,22 (1H, d, J=13,6Hz), 4,36-4,25 (2H, m incluyendo dd a 4,32, J=9,5, 2,2Hz), 3,71-3,60 (1H, m), 3,60-3,49 (2H, m), 3,40 (1H, dq, J=9,5, 7,3Hz), 3,30 (1H, dd, J=6,6, 2,2Hz), 2,60-2,45 (1H, m), 2,40-2,05 (1H, m), 1,77 (1H, d, J=4,4Hz), 1,39 (3H, d, J=6,6Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 574 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (410 mg, 0,715 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 17(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (15 ml) y agua destilada (15 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (410 mg) a temperatura ambiente durante 1,7 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (60 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 6% acetonitrilo; agua destilada - 9% acetonitrilo; agua destilada -
12% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (150 mg, rendimiento 46%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,41 (1H, s), 4,35-4,20 (2H, m), 4,05 (1H, quinteto, J=5,2Hz), 3,90 (1H, dd, J=10,8, 5,9Hz), 3,75-3,65 (1H, m), 3,60-3,40 (4H, m), 2,60-2,45 (1H, m), 2,20-2,15 (1H, m), 1,31 (3H, d, J=6,4Hz), 1,25 (3H, d, J=8,9Hz).
IR (KBr): 1749, 1669, 1599, 1557, 1391, 1289 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 461 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{18}H_{22}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 461,0929, Encontrado: 461,0926 [M+H]^{+}
Ejemplo 18 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
101
(1) (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de (3S)-3-acetiltio-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (137 mg, 0,541 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 19) en dimetilformamida (7 ml) se añadió acetato de hidracina (60 mg, 0,649 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (322 mg, 0,541 mmol) en acetonitrilo (16 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,376 ml, 2,16 mmol). Se agitó la mezcla durante 2 horas mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) y acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (251 mg, rendimiento 84%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8Hz), 7,65 (2H, d, J=8,8Hz), 7,21 (1H, s), 5,50 (1H, d, J=13,6Hz), 5,22 (1H, d, J=13,9Hz), 4,35-4,24 (2H, m), 3,90 (2H, m), 3,74-3,45 (3H, m), 3,38 (1H, dq, J=9,4, 4,7Hz), 3,30 (1H, dd, J=7,3, 2,9Hz), 2,60-2,48 (1H, m), 2,24-2,10 (1H, m), 1,62-1,50 (1H, señal ancha), 1,38 (3H, d, J=5,9Hz), 1,31 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 556 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (250 mg, 0,450 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 18(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (12 ml) y agua destilada (12 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (250 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (38 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - 6% acetonitrilo; agua destilada - 9% acetonitrilo; agua destilada -
12% acetonitrilo; agua destilada - 15% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3S)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (128 mg, rendimiento 64%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,56 (1H, s), 4,32-4,22 (2H, m), 4,10-4,00 (1H, m), 3,88 (1H, dd, J=10,8, 5,9Hz), 3,74-3,62 (1H, m), 3,62-3,53 (1H, m), 3,52-3,38 (3H, m), 2,60-2,48 (1H, m), 2,19-2,08 (1H, m), 1,31 (3H, d, J=6,4Hz), 1,24 (3H, d, J=7,3Hz).
IR (KBr): 2229, 1751, 1604, 1560, 1391, 1310 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 443 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{18}H_{20}O_{4}N_{4}S_{2}Na: 443,0824, Encontrado: 443,0799 [M+H]^{+}
Ejemplo 19 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
102
(1) (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de (3R)-3-acetiltio-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (500 mg, 1,84 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 20) en dimetilformamida (25 ml) se añadió acetato de hidracina (204 mg, 2,21 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,09 g, 1,84 mmol) en acetonitrilo (55 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,28 ml, 7,36 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: cloruro de metileno - 9% metanol y cloruro de metileno como eluyente para proporcionar (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un sólido de color amarillo pálido (917 mg, rendimiento 87%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,2Hz), 7,66 (2H, d, J=8,2Hz), 7,40 (1H, s), 7,05 (1H, señal ancha), 5,55 (1H, señal ancha), 5,51 (1H, d, J=14,1Hz), 5,24 (1H, d, J=14,1Hz), 4,35-4,25 (2H, m), 4,05-3,90 (2H, m), 3,70-3,60 (1H, m), 3,60-3,40 (4H, m), 3,31 (1H, dd, J=6,9, 2,9Hz), 2,60-2,40 (1H, m), 2,20-2,05 (1H, m), 1,95 (1H, señal ancha), 1,39 (3H, d, J=5,9Hz), 1,33 (3H, d, J=6,8Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 574 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (917 mg, 1,60 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 19(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (45 ml) y agua destilada (45 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (917 mg) a temperatura ambiente durante 1,7 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (134 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 2% acetonitrilo; agua destilada - 4% acetonitrilo; agua destilada - 6% acetonitrilo; agua destilada - 8% acetonitrilo; agua destilada - 10% acetonitrilo; agua destilada - 12% acetonitrilo; agua destilada -
14% acetonitrilo; agua destilada - 16% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[(3R)-1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (338 mg, rendimiento 46%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,41 (1H, s), 4,35-4,20 (2H, m), 4,10-4,00 (1H, m), 3,89 (1H, dd, J=11,2, 6,7Hz), 3,70-3,60 (1H, m), 3,58-3,40 (4H, m), 2,60-2,45 (1H, m), 2,20-2,10 (1H, m), 1,31 (3H, d, J=6,3Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3Hz).
IR (KBr): 1748, 1608, 1597, 1559, 1391, 1289 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 461 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{18}H_{22}O_{5}N_{4}S_{2}Na: 461,0929 Encontrado: 461,0938 [M+H]^{+}
Ejemplo 20 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
103
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (415 mg, 1,16 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 12) en dimetilformamida (20,8 ml) se añadió acetato de hidracina (137,0 mg, 1,39 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (690 mg, 1,16 mmol) en acetonitrilo (34,4 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (1,34 ml, 7,69 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo como eluyente para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo como un jarabe de color amarillo pálido (719 mg, rendimiento 94%).
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,3Hz), 7,66 (2H, d, J=8,8Hz), 6,48 (1H, s), 5,50 (1H, d, J=13,9Hz), 5,25 (1H, d, J=13,9Hz), 4,66 (2H, s), 4,46 (2H, dd, J=15,4, 8,1Hz), 4,32-4,20 (3H, m), 4,08-4,00 (2H, m), 3,28 (1H, dd, J=6,6, 2,2Hz), 3,21 (1H, d, dq, J=9,1, 7,3Hz), 1,95 (1H, señal ancha), 1,37 (3H, d, J=5,9Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3Hz), 0,94 (9H, s), 0,10 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (719 mg, 1,09 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 20(1)) en tetrahidrofurano anhidro (36 ml) se añadió de forma secuencial ácido acético (0,19 ml, 3,3 mmol) y una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano (3,3 ml, 3,3 mmol) en un baño de hielo. Se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente toda la noche. Después de comprobar que la reacción era completa, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y la capa acuosa se extrajo además con acetato de etilo. Se lavaron las capas orgánicas con solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y el filtrado se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: acetato de etilo : metanol (15 : 1) para proporcionar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (426,2 mg, rendimiento 72%) como un jarabe amarillo.
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,20 (2H, d, J=8,1Hz), 7,66 (2H, d, J=8,1Hz), 6,50 (1H, s), 5,54 (1H, d, J=13,6Hz), 5,27 (1H, d, J=13,6Hz), 4,56 (1H, d, J=13,6Hz), 4,53 (1H, d, J=13,6Hz), 4,47 (1H, t, J=8,5Hz), 4,41 (1H, t, J=8,5Hz), 4,32 (1H, quinteto, J=6,4Hz), 4,28-4,20 (2H, m), 4,08 (1H, dd, J=8,5, 5,4Hz), 3,88 (1H, dd, J=5,4, 8,5Hz), 3,304 (1H, dd, 6,2, 2,7Hz), 3,204 (1H, dq, J=9,2, 7,3Hz), 1,35 (3H, d, J=6,2Hz), 1,25 (3H, d, J=7,3Hz).
(3) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (426,2 mg, 0,78 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 20(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (10 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (530 mg) a temperatura ambiente durante 1,5 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (65,5 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 3% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (156 mg, rendimiento 46%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 6,50 (1H, s), 4,36-4,28 (4H, m), 4,19-4,10 (1H, m), 4,10-3,98 (2H, m incluyendo 1H, dd a 4,01, J=8,0, 3,0Hz), 3,88-3,68 (2H ,m), 3,24 (1H, dd, J=6,6, 2,9Hz), 3,12-3,00 (1H, m), 1,11 (3H, d, J=5,9Hz), 1,00 (3H, d, J=7,3Hz).
IR (KBr): 3357, 1748, 1600, 1528, 1470, 1396, 1311 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 434 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{17}H_{21}O_{5}N_{3}S_{2}Na: 434,0820, Encontrado: 434,0796 [M+H]^{+}
Ejemplo 21 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
104
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (142 mg, 0,56 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 21) en dimetilformamida (7 ml) se añadió acetato de hidracina (62 mg, 0,67 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (333 mg, 0,56 mmol) en acetonitrilo (7 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,39 ml, 2,24 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: acetato de etilo : metanol (10 : 1) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (274 mg, rendimiento 88%) como un sólido de color amarillo pálido.
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,77 (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 6,78 (1H, brs), 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,2 Hz), 4,51 (2H, q, J=8,1 Hz), 4,30-4,21 (3H, m), 4,08 (2H, dd, J=5,9, 8,1 Hz), 3,30 (1H, dd, J=2,9, 7,3 Hz), 3,24-3,16 (1H, m), 2,94 (3H, d, J=5,1 Hz), 1,38 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,4 Hz).
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (344 mg, 0,62 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 21(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (17 ml) y agua destilada (9 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (344 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (52 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se lavó la capa acuosa con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1), se separó y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 5% acetonitrilo. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-metilcarbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (166 mg, rendimiento 60%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,73 (1H, s), 4,44 (2H, t, J=8,1 Hz), 4,20-4,13 (1H, m), 4,10 (1H, t, J=6,6 Hz), 4,05 (1H, d, J=9,5 Hz), 3,94 (2H, quint., J=4,4 Hz), 3,28 (1H, dd, J=2,2, 5,9 Hz), 3,09 (1H, quint., J=7,3 Hz), 2,73 (3H, s), 1,15 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,04 (3H, d, J=7,3 Hz).
IR (KBr): 3415, 1750, 1625, 1531, 1388 cm^{-1}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{18}H_{22}O_{6}N_{4}SNa: 445,1157, Encontrado: 445,1162[M+H]^{+}
Ejemplo 22 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
105
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (275 mg, 1,14 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 22) en dimetilformamida (14 ml) se añadió acetato de hidracina (126 mg, 1,37 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (677 mg, 1,14 mmol) en acetonitrilo (14 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,79 ml, 4,56 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: tolueno : acetonitrilo : metanol (10 : 10 : 1) para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (313 mg, rendimiento 51%) como un sólido de color amarillo pálido.
RMN-H^{1} (400 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 8,08 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,77 (1H, s), 7,55 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,32 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,14 (1H, d, J=13,9 Hz), 4,43 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,28-4,20 (1H, m), 4,13 (1H, dd, J=2,9, 9,5 Hz), 4,00 (1H, t, J=6,6 Hz), 3,90 (2H, dt, J=4,4, 9,5 Hz), 3,23-3,18 (2H, m), 1,18 (3H, d, J=5,9 Hz), 1,09 (3H, d, J=7,3 Hz).
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (313 mg, 0,582 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 22(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (16 ml) y agua destilada (8 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (313 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (49 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se lavó la capa acuosa con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1), se separó y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 5% acetonitrilo. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (110 mg, rendimiento 44%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,79 (1H, s), 4,46 (2H, t, J=8,1 Hz), 4,20-4,16 (1H, m), 4,10 (1H, t, J=5,9 Hz), 4,06 (1H, dd, J=2,9, 9,5 Hz), 3,95 (2H, quint., J=4,4 Hz), 3,28 (1H, dd, J=2,9, 5,9 Hz), 3,12-3,08 (1H, m), 1,15 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,05 (3H, d, J=7,3 Hz).
IR (KBr): 3360, 1749, 1671, 1625, 1384, 1275 cm^{-1}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado: 431,0992, Encontrado: 431,1008[M+H]^{+}
Ejemplo 23 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 
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106 
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(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina (156 mg, 0,70 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 23) en dimetilformamida (8 ml) se añadió acetato de hidracina (77 mg, 0,84 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (416 mg, 0,70 mmol) en acetonitrilo (8 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,49 ml, 2,80 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo como eluyente para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (309 mg, rendimiento 84%) como un sólido de color amarillo pálido.
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,22 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,74 (1H, s), 7,66 (2H, d, J=8,8 Hz), 5,51 (1H, d, J=13,9 Hz), 5,25 (1H, d, J=13,2 Hz), 4,56 (2H, q, J=8,1 Hz), 4,29-4,22 (3H, m), 4,15-4,10 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J=2,9, 7,3 Hz), 3,19 (1H, dt, J=7,3, 9,5 Hz), 1,37 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3 Hz).
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (309 mg, 0,59 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 23(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (16 ml) y agua destilada (8 ml) en presencia de hidróxido de paladio al 20% (309 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (50 mg), una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se lavó la capa acuosa con una mezcla de acetato de etilo y tetrahidrofurano (1:1), se separó y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 5% acetonitrilo. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado, la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (150 mg, rendimiento 60%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7,92 (1H, s), 4,45 (2H, t, J=8,8 Hz), 4,20-4,16 (1H, m), 4,09 (1H, t, J=6,6 Hz), 4,05 (1H, d, J=8,8 Hz), 3,95 (2H, quint., J=4,4 Hz), 3,28 (1H, d, J=6,6 Hz), 3,08 (1H, quint., J=8,1 Hz), 1,14 (3H, d, J=6,6 Hz), 1,03 (3H, d, J=7,3 Hz).
IR (KBr): 3372, 1750, 1628, 1394, 1283 cm^{-1}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado: 413,0860, Encontrado: 413,0921[M+H]^{+}
Ejemplo 24 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 
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107
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (247 mg, 0,83 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 24) en dimetilformamida (12 ml) se añadió acetato de hidracina (92 mg, 1,0 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (493 mg, 0,83 mmol) en acetonitrilo (25 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,58 ml, 3,32 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: 10% metanol-acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (321 mg, rendimiento 65%) como un sólido de color amarillo pálido.
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7Hz), 7,66 (2H, d, J=8,7Hz), 7,41 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,7Hz), 5,25 (1H, d, J=13,7Hz), 4,56 (2H, t, J=7,4Hz), 4,50-4,40 (2H, m), 4,35-4,10 (5H, m incluyendo 2H, t a 4,17, J=7,4Hz), 4,04 (1H, t, J=5,4Hz), 4,02 (1H, t, J=5,4Hz), 3,29 (1H, dd, J=7,0, 2,5Hz), 3,18 (1H, dq, J=8,9, 7,3Hz), 2,30 (2H, quinteto, J=7,4Hz), 1,95-1,50 (s ancho incluyendo 1H de OH grupo), 1,38 (3H, d, J=6,3Hz), 1,26 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 600 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (321 mg, 0,54 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 24(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (15 ml) y agua destilada (15 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (321 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (45 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se lavó la capa acuosa con la mezcla de disolventes descrita anteriormente, se separó y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 5% acetonitrilo; agua destilada - 10% acetonitrilo; agua destilada - 15% acetonitrilo y agua destilada como eluyente. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (162 mg, rendimiento 65%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,34 (1H, s), 4,95-4,65 (4H, m), 4,40-4,30 (1H, m), 4,30-4,13 (4H, m incluyendo 1H, quinteto a 4,25, J=6,3Hz, y 1H, dd, a 4,19, J=14,4, 7,2Hz), 4,10-4,00 (2H, m), 3,43 (1H, dd, J=6,3, 2,5Hz), 3,26 (1H, quinteto, J=7,2Hz), 2,37 (2H, quinteto, J=7,9Hz), 1,30 (3H, d, J=6,4Hz), 1,20 (3H, d, J=7,2Hz).
IR (KBr): 1750, 1607, 1538, 1455, 1435, 1393, 1308, 1292 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 487 [M+H]^{+}
Ejemplo 25 Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
108
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Sobre una solución de 3-acetiltio-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (207 mg, 0,62 mmol) (obtenida tal como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 25) en dimetilformamida (8 ml) se añadió acetato de hidracina (68,4 mg, 0,74 mmol) a 0ºC bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó la mezcla durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-difenilfosforiloxi-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (370,5 mg, 0,62 mmol) en acetonitrilo (16 ml) sobre la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido por la adición de diisopropiletilamina (0,43 ml, 2,48 mmol). Se agitó la mezcla toda la noche mientras se dejaba aumentar gradualmente la temperatura hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción era completa, se añadió acetato de etilo y solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio sobre la mezcla de reacción. Se agitó la mezcla resultante en un embudo de decantación y se separó la capa de acetato de etilo, se lavó con ácido clorhídrico 0,5 M, solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato magnésico anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando como eluyente: 5% metanol-acetato de etilo para proporcionar el (1R,5S,6S)-2-[1-(1-(1,3-tiazol-4-tiomorfolinocarbonil-2-il)azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (246 mg, rendimiento 61%) como un sólido de color amarillo pálido.
RMN-H^{1} (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8,23 (2H, d, J=8,7Hz), 7,67 (2H, d, J=8,7Hz), 7,12 (1H, s), 5,51 (1H, d, J=13,8Hz), 5,25 (1H, d, J=13,8Hz), 4,60-4,40 (2H, m), 4,35-4,22 (3H, m), 4,10-4,00 (2H, m), 4,00-3,90 (4H, m), 3,29 (1H, dd, J=6,4, 2,6Hz), 3,21 (1H, dq, J=9,2, 7,3Hz), 2,80-2,60 (4H, m), 1,80-1,50 (s ancho incluyendo 1H de OH grupo), 1,38 (3H, d, J=6,4Hz), 1,27 (3H, d, J=7,3Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 646 [M+H]^{+}
(2) Sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió a hidrogenación catalítica el (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (543 mg, 0,84 mmol) (obtenido tal como se ha descrito en el Ejemplo 25(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) en presencia de paladio sobre carbón al 10% (543 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción era completa, se filtró la mezcla de reacción y sobre el filtrado se añadió bicarbonato de sodio (70,6 mg), acetato de etilo y agua destilada. Se agitó la mezcla en un embudo de decantación. Se separó la capa acuosa y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía en una columna de Cosmosil utilizando como eluyente: agua destilada - 5% acetonitrilo; agua destilada - 10% acetonitrilo; agua destilada - 15% acetonitrilo; agua destilada -
20% acetonitrilo y agua destilada. Se liofilizó el eluido para proporcionar el compuesto deseado la sal sódica del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (277 mg, rendimiento 62%) como un sólido blanco.
RMN-H^{1} (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7,10 (1H, s), 4,56 (2H, t, J=8,0Hz), 4,42-4,30 (1H, m), 4,25 (1H, quinteto, J=6,3Hz), 4,21 (2H, dd, J=7,8, 2,4Hz), 4,12-4,02 (2H, m), 3,96-3,85 (2H, m), 3,85-3,75 (2H, m), 3,44 (1H, dd, J=6,3, 2,4Hz), 3,26 (1H, dq, J=8,9, 7,8Hz), 2,86-2,70 (2H, m), 2,70-2,60 (2H, m), 1,30 (3H, d, J=6,3Hz), 1,20 (3H, d, J=7,8Hz).
IR (KBr): 1749, 1608, 1535, 1454 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 533 [M+H]^{+}
Ejemplo 26 (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de etilo
109
A una solución de la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (357 mg, 0.80 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 3) en dimetilformamida (5 ml) se añadió yoduro de etilo (357 mg, 2.40 mmol) a 0ºC bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla se agitó de forma adicional durante 2 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Una vez finalizado este periodo de tiempo, se añadió acetato de etilo a la mezcla de reacción y la capa orgánica se lavó secuencialmente con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%, una solución de tiosulfato de sodio acuosa al 10% solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio, y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo - acetonitrilo 20%; acetato de etilo - 40% acetonitrilo; acetato de etilo - 60% acetonitrilo y acetato de etilo para dar un producto purificado, que se disolvió en cloruro de metileno y se añadieron secuencialmente dietil éter y hexano a la solución para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de etilo (387 mg, rendimiento 95%) en la forma de un polvo incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.48 (1H, s), 6.99 (1H, br s), 5.61 (1H, br s), 4.48 (2H, q, J=8.5Hz), 4.19-4.43 (4H, m), 4.02-4.13 (2H, m), 3.26 (2H, dd, J=7.1, 2.7Hz), 3.10 (1H, dq, J=9.0, 7.3Hz), 2.07 (1H, d, J=4.8Hz), 1.37 (3H, d, J=6.9Hz), 1.36 (3H, t, J=7.5Hz), 1.25 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1770, 1669, 1602, 1543, 1324, 1283 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 453 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{19}H_{25}O_{5}N_{4}S_{2} 453.1267, Encontrado 453.1235 [M+H]^{+}
Ejemplo 27 (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de fenilo
110
A una solución de la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (162 mg, 0.36 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 3) en una mezcla de agua (1 ml) y tetrahidrofurano (1 ml) se añadió ácido clorhídrico 1 M (0.33 ml, 0.36 mmol) a 0ºC. La mezcla se concentró bajo presión reducida. A una solución del residuo en acetonitrilo (10 ml) se añadieron fenol (102 mg, 1.1 mmol), dimetilaminopiridina (22 mg, 0.18 mmol) e hidrocloruro de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (139 mg, 0.73 mmol) a temperatura ambiente. Después de agitar la mezcla durante 30 minutos, se le añadió más hidrocloruro de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (139 mg, 0.73 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 30 minutos. Una vez finalizado este periodo de tiempo, se añadió acetato de etilo a la mezcla de reacción y la capa orgánica se lavó secuencialmente con ácido clorhídrico diluído, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo - acetonitrilo 20%; acetato de etilo - 40% acetonitrilo; acetato de etilo -
60% acetonitrilo y acetato de etilo para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de fenilo (66 mg, rendimiento 36%) en la forma de un polvo incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.48 (1H, s), 7.38-7.43 (2H, m), 7.23-7.28 (3H, m), 6.99 (1H, br s), 5.60 (1H, br s), 4.40-4.55 (2H, m), 4.24-4.36 (3H, m), 4.03-4.13 (2H, m), 3.32 (1H, dd, J=7.0, 2.6Hz), 3.25 (1H, dq, J=9.2, 7.3Hz), 2.09 (1H, br), 1.39 (3H, d, J=6.4Hz), 1.30 (3H, d, J=7.3Hz).
IR (KBr): 1771, 1668, 1542, 1195 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 501 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{23}H_{25}O_{5}N_{4}S_{2} 501.1266, Encontrado 501.1266 [M+H]^{+}
Ejemplo 28 (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de pivaloíloximetilo
111
A una solución de la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (402 mg, 0.90 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 3) en dimetilacetamida (5 ml) se añadió pivalato de yodometilo (261 mg, 1.08 mmol) a 0ºC bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Una vez finalizado este periodo de tiempo, a la mezcla de reacción se añadió acetato de etilo y la capa orgánica se lavó secuencialmente con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%, una solución de tiosulfato de sodio acuosa al 10%, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se añadió al residuo dietil éter para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de pivaloíloximetilo (450 mg, rendimiento 93%) en la forma de un polvo incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 7.47 (1H, s), 7.43 (1H, br s), 7.32 (1H, br s), 5.89 (1H, d, J=5.9Hz), 5.74 (1H, d, J=5.9Hz), 5.09 (1H, d, J=5.2Hz), 4.42-4.58 (3H, m), 4.20 (1H, dd, J=9.4, 2.4Hz), 3.89-4.02 (3H, m), 3.37 (1H, dq, J=9.1, 7.4Hz), 3.26 (1H, dd, J=6.3, 2.6Hz), 1.14 (3H, d, J=7.4Hz), 1.13 (9H, s), 1.11 (3H, d, J=6.5Hz).
IR (KBr): 1778, 1754, 1602, 1545, 1282, 1118 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 539 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{23}H_{31}O_{7}N_{4}S_{2} 539.1634, Encontrado 539.1634 [M+H]^{+}
Ejemplo 29 (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 1-(isopropoxicarboniloxi)etilo
112
A una solución de la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (245 mg, 0.55 mmol), obtenido tal como se describe en el Ejemplo 3, en dimetilacetamida (5 ml), se añadió carbonato de 1-yodoetil isopropilo (317 mg, 1.21 mmol) a 0ºC bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1.5 horas. La mezcla resultante se agitó de forma adicional durante 1.5 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Una vez finalizado este periodo de tiempo, se añadió acetato de etilo a la mezcla de reacción y la capa orgánica se lavó secuencialmente con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%, ácido clorhídrico 0.1 M, una solución de tiosulfato de sodio acuosa al 10%, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo - acetonitrilo 20%; acetato de etilo - 40% acetonitrilo; acetato de etilo - 60% acetonitrilo y acetato de etilo para dar un producto purificado, que se disolvió en cloruro de metileno, y a continuación se añadieron secuencialmente dietil éter y hexano a la solución para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 1-(isopropoxicarboniloxi)etilo (266 mg, rendimiento 88%) en la forma de un polvo incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.48 (1H, s), 7.00 (1H, br s), 6.82-6.92 (1H, m), 5.65 (1H, br s), 4.84-4.97 (1H, m), 4.43-4.52 (2H, m), 4.18-4.39 (3H, m), 4.02-4.07 (2H, m), 3.25 (1H, dd, J=7.0, 2.5Hz), 3.17 (1H, dq, J=9.3, 7.3Hz), 2.16 (1H, br s), 1.61 (^{3}/_{2}H, d, J=5.5Hz), 1.59 (^{3}/_{2}H, d, J=5.5Hz), 1.18-1.39 (12H, m).
IR(KBr): 1763, 1669, 1542, 1276, 1074 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 555 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{23}H_{31}O_{8}N_{4}S_{2} 555.1584, Encontrado 555.1570 [M+H]^{+}
Ejemplo 30 (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 1-(3-pentiloxicarboniloxi)etilo
113
1.1
A una solución de la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (402 mg, 0.90 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 3) en dimetilacetamida (8 ml) se añadió carbonato de 1-yodoetil 3-pentilo (568 mg, 1.98 mmol) a 0ºC bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. La mezcla resultante se agitó de forma adicional durante 2 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Una vez finalizado este periodo de tiempo, se añadió acetato de etilo a la mezcla de reacción y la capa orgánica se lavó secuencialmente con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%, ácido clorhídrico 0.1 M, una solución de tiosulfato de sodio acuosa al 10%, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo - acetonitrilo 20%; acetato de etilo - 40% acetonitrilo; acetato de etilo - 60% acetonitrilo y acetato de etilo para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de 1-(3-pentiloxicarboniloxi)etilo (506 mg, rendimiento 96%) en la forma de un compuesto amorfo incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.48 (1H, s), 7.00 (1H, br s), 6.85-6.93 (1H, m), 5.58 (1H, br s), 4.57-4.66 (1H, m), 4.42-4.52 (2H, m), 4.15-4.32 (3H, m), 4.02-4.10 (2H, m), 3.24 (1H, dd, J=7.1, 2.6Hz), 3.17 (1H, dq, J=9.3, 7.4Hz), 2.00 (1H, br), 1.50-1.72 (7H, m), 1.34, 1.36 (3H, d*2, J=6.5Hz), 1.24, 1.25 (3H, d*2, J=7.3Hz), 0.84-0.98 (6H, m).
IR (KBr): 1761, 1671, 1542, 1268, 1074 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 583 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{25}H_{35}O_{8}N_{4}S_{2} 583.1896, Encontrado 583.1907 [M+H]^{+}
Ejemplo 31 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
114
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (235 mg, 0.84 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 26) en dimetilformamida (12 ml) se añadió acetato de hidrazina (103 mg, 110 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (499 mg, 0.84 mmol) en acetonitrilo (25 ml) a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.56 ml, 3.36 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (9:1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (240 mg, rendimiento 46%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.28 (1H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.8 Hz), 4.49 (2H, dd, J= 14.6, 8.5 Hz), 4.35-4.20 (3H, m), 4.05 (1H, t, J= 6.1 Hz), 4.04 (1H, t, J= 6.1 Hz), 3.78 (2H, t, J= 6.5 Hz), 3.62 (2H, t, J= 6.5 Hz), 3.29 (1H, dd, J= 7.2, 2.5 Hz), 3.20 (1H, dq, J = 9.0, 7.3 Hz), 1.82-1.98 (4H, m), 1.38 (3H, d, J= 6.1 Hz),1.27 (3H, d, J= 7.2 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (240 mg, 0.39 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 31(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (12 ml) y agua destilada (12 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (240 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (33 mg), ácido acético y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada - 3% acetonitrilo; agua destilada - acetonitrilo 6% y agua destilada como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (113 mg, rendimiento 60%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.40 (1H, s), 4.56 (2H, t, J= 8.6 Hz), 4.43-4.30 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.4 Hz), 4.20 (1H, dd, J= 8.9, 2.4 Hz), 4.10-3.98 (2H, m), 3.62 (2H, t, J= 6.6 Hz), 3.54 (2H, t, J= 6.6 Hz), 3.26 (1H, dq, J= 8.9, 7.4 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 8.9, 2.4 Hz), 2.05-1.85 (4H, m), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz),1.27 (3H, d, J= 7.4 Hz).
IR (KBr): 3375.7, 1605.9, 1537,4, 1468.9, 1423.6, 1396.6, 1298.2 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 501 [M+H]^{+}
Ejemplo 32 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
115
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (276 mg, 0.85 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 27) en dimetilformamida (20 ml) se añadió acetato de hidrazina (94 mg, 1.02 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (505 mg, 0.85 mmol) en acetonitrilo (20 ml) a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.59 ml, 3.40 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (9:1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (464 mg, rendimiento 87%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.02 (1H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.26 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.51 (1H, t, J= 8.1 Hz), 4.50 (1H, t, J= 8.1 Hz), 4.32-4.20 (3H, m que incluye 4.25 (1H, dd, J= 8.0, 2.5 Hz)), 4.07 (1H, t, J= 5.7 Hz), 4.05 (1H, t, J= 5.7 Hz), 3.72-3.58 (4H, m), 3.28 (1H, dd, J= 6.8, 2.5 Hz), 3.20 (1H, dq, J = 8.4, 7.3 Hz), 1.80-1.45 (6H, m), 1.38 (3H, d, J= 6.8 Hz), 1.26 (3H, d, J= 7.1 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (464 mg, 0.74 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 32(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (20 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (464 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (62 mg), ácido acético y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada - acetonitrilo 2%; agua destilada - acetonitrilo 5%; agua destilada - acetonitrilo 10%; agua destilada -
acetonitrilo 20%; agua destilada - acetonitrilo 30% y agua destilada como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (171 mg, rendimiento 45%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.04 (1H, s), 4.10-4.00 (2H, m), 4.42-4.30 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.2 Hz), 4.21 (1H, dd, J= 9.0, 2.4 Hz), 4.05 (2H, ddd, J= 8.3, 5.4, 2.7 Hz), 3.62 (2H, t, J= 5.3 Hz), 3.49 (2H, t, J= 5.3 Hz), 3.44 (1H, dd, J= 6.2, 2.4 Hz), 3.26 (1H, dq, J= 7.7, 7.4 Hz), 1.70-1.60 (4H, m), 1.60-1.50 (2H, m), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz),1.27 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3382.5, 1747.7, 1605.9, 1538.4, 1400.4, 1310.7, 1249.0 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 515 [M+H]^{+}
Ejemplo 33 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
116
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-ciclopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (342 mg, 1.15 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 28) en dimetilformamida (12 ml) se añadió acetato de hidrazina (127 mg, 1.38 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (684 mg, 1.15 mmol) en acetonitrilo (25 ml) a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.80 ml, 4.60 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (9:1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (606 mg, rendimiento 88%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.44 (1H, s), 7.23 (1H, br s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.49 (2H, dd, J= 14.3, 7.6 Hz), 4.37-4.19 (3H, m), 3.98-4.12 (3H, m), 3.30 (1H, dd, J= 9.2, 7.3 Hz), 3.20 (1H, dq, J = 9.2, 7.3 Hz), 2.80-2.94 (1H, m), 1.38 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.27 (3H, d, J= 7.3 Hz), 0.85 (1H, t, J = 5.5 Hz), 0.83 (1H, t, J = 5.5 Hz), 0.58-0.70 (2H, m).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (606 mg, 1.01 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 33(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (606 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se le añadieron hidrogenocarbonato de sodio (85 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada - acetonitrilo 5%; agua destilada - acetonitrilo 10% y agua destilada como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (275 mg, rendimiento 56%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.46 (1H, s), 4.54 (2H, t, J= 8.2 Hz), 4.38-4.30 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.19 (1H, dd, J= 8.9, 2.4 Hz), 4.10-4.19 (1H, dd, J= 8.9, 2.4 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 6.3, 2.4 Hz), 3.24 (1H, dq, J= 8.9, 7.3 Hz), 2.78-2.70 (1H, m), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.19 (3H, d, J= 7.2 Hz), 0.85 (1H, t, J= 5.2 Hz), 0.84 (1H, t, J= 5.2 Hz), 0.73-0.61 (2H, m).
IR (KBr): 3397.0, 1750.1, 1603.5, 1545.7, 1489.7, 1470.5, 1393.3, 1312.3 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 465 [M+H]^{+}
Ejemplo 34 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclobutilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
117
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclobutilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-N-ciclobutilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (398 mg, 1.28 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 29) en dimetilformamida (15 ml) se añadió acetato de hidrazina (141 mg, 1.53 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (761 mg, 1.28 mmol) en acetonitrilo (30 ml) a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de adición de diisopropiletilamina (0.88 ml, 5.12 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (9:1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-cyclbutilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (578 mg, rendimiento 74%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.41 (1H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.60-4.42 (3H, m que incluye 4.52 (2H, quint., J= 7.8 Hz)), 4.36-4.20 (3H, m), 3.30 (1H, dd, J= 6.9, 2.5 Hz), 3.21 (1H, dq, J= 9.2, 7.4 Hz), 2.47-2.33 (2H, m), 2.10-1.92 (2H, m),1.85-1.65 (2H, m), 1.39 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.28 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-Ciclobutilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
(1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclobutilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (578 mg, 0.94 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 34(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (578 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (79 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada -
acetonitrilo 5%; agua destilada - acetonitrilo 10% y agua destilada como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-ciclobutilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (322 mg, rendimiento 68%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.45 (1H, s), 4.56 (2H, t, J= 8.0 Hz), 4.44-4.29 (2H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.20 (1H, dd, J= 8.8, 2.4 Hz), 4.12-4.00 (2H, m), 3.44 (1H, dd, J= 6.3, 2.5 Hz), 3.26 (1H, dq, J= 8.8, 7.4 Hz), 2.41-2.28 (2H, m), 2.15-2.00 (2H, m), 1.87-1.72 (2H, m), 1.31 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.20 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3395.1, 1750.1, 1659.4, 1604.5, 1545.7, 1490.7, 1470.5, 1393.8, 1310.4, 1251.6 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 501 [M+H]^{+}
Ejemplo 35 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
118
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1.35 g, 3.97 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 30) en dimetilformamida (40 ml) se añadió acetato de hidrazina (438 mg, 4.76 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (2.36 g, 3.97 mmol) en acetonitrilo (40 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (2.77 ml, 15.9 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo :
metanol (1 : 5) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (828 mg, rendimiento 60%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.16 (1H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.8 Hz), 4.50 (1H, t, J= 4.9 Hz), 4.49 (1H, t, J= 4.9 Hz), 4.33-4.20 (3H, m), 4.06 (1H, t, J= 4.9 Hz), 4.05 (1H, t, J= 4.9 Hz) 3.99-3.73 (4H, m), 3.29 (1H, dd, J= 7.0, 2.5 Hz), 3.20 (1H, dq, J = 9.1, 7.3 Hz), 2.74-2.48 (4H, m), 1.38 (3H, d, J= 6.3 Hz), 1.27 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-Metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (500 mg, 0.78 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 35(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (25 ml) y agua destilada (25 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (500 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron ácido acético y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de disolventes descrita anteriormente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada - acetonitrilo 2%; agua destilada - acetonitrilo 4%; agua destilada - acetonitrilo 6%; agua destilada - acetonitrilo 8%; agua destilada - acetonitrilo 10%; agua destilada - acetonitrilo 12% y agua destilada como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (192 mg, rendimiento 49%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.24 (1H, s), 4.57 (2H, t, J= 8.4 Hz), 4.39-4.30 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.20 (1H, dd, J= 9.0, 2.4 Hz), 4.15-3.05 (12H, m que incluye 4.04 (2H, dd, J= 8.4, 4.9 Hz), 3.44 (1H, dd, J= 6.3, 2.6 Hz), 3.25 (1H, dq, J= 9.0, 7.0 Hz)), 2.88 (3H, s), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.20 (3H, d, J= 7.1 Hz).
IR (KBr): 3397.0, 1757.8, 1606.4, 1536.0, 1457.9, 1429.0, 1383.7, 1312.3 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 508 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FSI^{+}): calculado para C_{22}H_{30}O_{5}N_{5}S_{2}Na 508.1688, Encontrado 508.1688 [M+H]^{+}
Ejemplo 36 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-Metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
119
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (350 mg, 1.07 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 31) en dimetilformamida (18 ml) se añadió acetato de hidrazina (118 mg, 1.28 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (636 mg, 1.07 mmol) en acetonitrilo (32 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (746 \mul, 4.28 mmol). La mezcla se agitó durante 6 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (95 : 5 y 9 : 1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (636 mg, rendimiento 94%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.44 (1H, s), 5.51 (1H, d, J=13.9 Hz), 5.25 (1H, d, J=13.2 Hz), 4.75-4.69 (1H, m), 4.51-4.43 (2H, m), 4.42-4.37 (1H, m), 4.32-4.20 (5H, m), 4.04 (2H, dt, J=8.1, 5.1 Hz), 3.33 (3H, s), 3.29 (1H, dd, J=2.2, 6.6 Hz), 3.20 (1H, dq, J=9.2, 7.3Hz), 1.38 (3H, d, J=6.6 Hz), 1.27 (3H, d, J=7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-Metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (630 mg, 1.00 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 36(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (32 ml) y agua destilada (32 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (630 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (84 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada y agua destilada : acetonitrilo (92 : 8) como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (239 mg, rendimiento 46%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.39 (1H, s), 4.76-4.69 (1H, m), 4.56 (2H, d, J=8.1 Hz), 4.44-4.31 (4H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.1, 6.4 Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.1 Hz), 4.09-3.99 (3H, m), 3.43 (1H, dd, J=2.4, 6.1 Hz), 3.37 (3H, s), 3.26 (1H, dq, J=9.1, 7.2 Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4 Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2 Hz)
IR (KBr): 1750, 1607, 1538, 1449, 1395, 1306 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 539 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FSI^{+}): calculado para C_{21}H_{25}O_{6}N_{4}S_{2}Na_{2} 539.0111, Encontrado 539.1026 [M+Na]^{+}
Análisis elemental calculado para C_{21}H_{25}O_{6}N_{4}S_{2}Na.3/2H_{2}O
C:46.40%; H:5.19%; N:10.31%; S:11.80%
Encontrado C:46.48%; H:5.53%; N:10.60%; S:11.66%
Ejemplo 37 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Fenilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
120 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-fenilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-fenilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (893 mg, 2.68 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 32) en dimetilformamida (40 ml) se añadió acetato de hidrazina (296 mg, 3.21 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.59 g, 3.21 mmol) en acetonitrilo (53 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.87 ml, 10.7 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-fenilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.2 g, rendimiento 71%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.29-8.18 (2H, m), 7.73-7.62 (4H, m), 7.62-7.50 (1H, m), 7.42-7.82 (2H, m), 7.18-7.09 (1H, m), 5.51 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.8 Hz), 4.54 (2H, dd, J= 15.6, 7.8 Hz), 4.40-4.21 (3H, m), 4.21-4.08 (2H, m), 3.31 (1H, dd, J= 6.9, 2.5 Hz), 3.23 (1H, dq, J= 9.1, 7.3 Hz), 1.39 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.29 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Fenilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-fenilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (400 mg, 0.63 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 37(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (120 ml) y agua destilada (120 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (400 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (53 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada - acetonitrilo 4%; agua destilada - acetonitrilo 8%; agua destilada - acetonitrilo 12%; agua destilada -
acetonitrilo 16% y agua destilada como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-fenilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (211 mg, rendimiento 64%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.60-7.51 (3H, m), 7.54-7.42 (2H, m), 7.36-7.27 (1H, m), 4.63-4.52 (2H, m), 4.29-4.39 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.20 (1H, ddd, J= 9.0, 2.3 Hz), 4.09 (1H, t, J= 8.8 Hz), 4.08 (1H, t, J= 8.8 Hz), 3.44 (1H, ddd, J= 6.6, 1.9 Hz), 3.25 (1H, dq, J= 6.3, 5.9 Hz), 1.3 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.20 (3H, dd, J= 7.2, 2.4 Hz).
IR (KBr): 3368.1, 1750.1, 1676.8, 1598.7, 1538.9, 1506.1, 1470.5, 1440.6, 1394.3, 1324.9, 1295.9, 1245.8 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 501 [M+H]^{+}
Ejemplo 38 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-Hidroxietilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
121
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (398.2 mg, 0.96 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 33) en dimetilformamida (20 ml) se añadió acetato de hidrazina (110 mg, 1.19 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (561.4 mg, 0.94 mmol) en acetonitrilo (38 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.7 ml, 4.02 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (2 : 1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (605.3 mg, rendimiento 80%) en la forma de un jarabe de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.79 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.54 (1H, t, J=5.8Hz), 7.42 (1H, s), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.26 (1H, d, J=13.7Hz), 4.48 (1H, dd, J=8.3, 7.3Hz), 4.45 (1H, dd, J=8.3, 7.3Hz), 4.32-4.23 (3H, m), 4.06 (1H, dd, J=8.3, 5.9Hz), 4.03 (1H, dd, J=8.3, 5.9Hz), 3.76 (2H, t, J=5.8Hz), 3.52 (2H, q, J=5.8Hz), 3.30 (1H, dd, J=6.8, 2.0Hz), 3.208 (1H, dq, J=9.0, 7.4Hz), 1.95 (1H, br s), 1.38 (3H, d, J=5.7Hz), 1.27 (3H, d, J=6.8Hz), 0.91 (9H, s), 0.07 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (605.3 mg, 0.84 mmol) en tetrahidrofurano (30 ml) se añadieron ácido acético (0.15 ml, 2.6 mmol) y una solución de fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (2.5 ml, 2.5 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (2 : 3) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxietilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (383.7 mg, rendimiento 75%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=7.9Hz), 7.66 (2H, d, J=7.9Hz), 7.53 (1H, t, J=5.3Hz), 7.45 (1H, s), 5.508 (1H, d, J=13.7Hz), 5.255 (1H, d, J=13.7Hz), 4.50 (1H, t, J=8.6Hz), 4.48 (1H, t, J=8.6Hz), 4.32-4.24 (3H, m), 4.07 (1H, dd, J=8.6, 5.3Hz), 4.05 (1H, dd, J=8.6, 5.3Hz), 3.807 (2H, t, J=5.3Hz), 3.58 (2H, q, J=5.3Hz), 3.295 (1H, dd, J=7.6, 2.3Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.1, 7.6Hz), 2.78 (1H, br s), 1.92 (1H, br s), 1.38 (3H, d, J=6.3Hz), 1.24 (3H, d, J=7.6Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-Hidroxietilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxiletilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (383.7 mg, 0.64 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 38(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (9.6 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 20% sobre carbono (400 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (53.4 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada - acetonitrilo 3%; agua destilada - acetonitrilo 5%; agua destilada - acetonitrilo 10% y agua destilada como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxietilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (152.2 mg, rendimiento 49%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.29 (1H, s), 4.36 (2H, t, J=8.4Hz), 4.20-4.10 (1H, m), 4.05 (1H, quintet, J=6.6Hz), 4.00 (1H, dd, J=10.9, 2.2Hz), 3.90-3.83 (2H, m), 3.55 (2H, t, J=5.5Hz), 3.32 (2H, t, J=5.5Hz), 3.24 (1H, dd, J=6.6, 2.2Hz), 3.06 (1H, dq, J=10.9, 8.6Hz), 1.11 (3H, d, J=6.6Hz), 1.00 (3H, d, J=8.6Hz).
IR (KBr): 3396, 1748, 1649, 1599, 1551, 1395, 1315, 1265 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 491 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{19}H_{23}O_{6}N_{4}S_{2}Na 491.1035, Encontrado 491.1024 [M+H]^{+}
Ejemplo 39 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
122 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (610 mg, 1.37 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 34) en dimetilformamida (30 ml) se añadió acetato de hidrazina (152 mg, 1.65 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (814 mg, 1.37 mmol) en acetonitrilo (40 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (955 \mul, 5.48 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) y acetato de etilo como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (928 mg, rendimiento 89%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.42 (1H, s), 7.42-7.38 (1H, br d, J=9.5 Hz), 5.51 (1H, d, J=13.9 Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9 Hz), 4.50 (1H, t, J=8.1 Hz), 4.45 (1H, t, J=8.1 Hz), 4.31-4.23 (2H, m), 4.27 (1H, dd, J=8.8, 2.6 Hz), 4.07-4.01 (2H, m), 4.00-3.94 (1H, m), 3.72 (1H, dd, J=10.3, 2.6 Hz), 3.65 (1H, dd, J=10.3, 4.0 Hz), 3.30 (1H, dd, J=7.3, 2.6 Hz), 3.21 (1H, dq, J=8.8, 6.6 Hz), 1.72-1.56 (2H, m), 1.38 (3H, d, J=5.7 Hz), 1.27 (3H, d, J=6.6 Hz), 0.95 (3H, t, J=7.3 Hz), 0.90 (9H, s), 0.06 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (920 mg, 1.23 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 39(1)) en tetrahidrofurano (46 ml) se añadieron ácido acético (208 \mul,3.63mmol) y una solución de fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (3.63 ml, 3.63 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó durante 2 días a temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (437 mg, rendimiento 56%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.44 (1H, s), 7.24-7.19 (1H, br d, J=7.8 Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7 Hz), 5.26 (1H, d, J=13.7 Hz), 4.50 (2H, dt, J=8.8, 4.9 Hz), 4.32-4.24 (3H, m), 4.07 (2H, dt, J=8.8, 5.9 Hz), 4.01-3.93 (1H, m), 3.81-3.75 (1H, m), 3.71-3.64 (1H, m), 3.30 (1H, dd, J=6.8, 2.9 Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.0, 6.8 Hz), 1.75-1.66 (1H, m), 1.65-1.55 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=6.8Hz), 1.28 (3H, d, J=7.8Hz), 1.00 (3H, t, J=7.8 Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (430 mg, 0.681 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 39(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (22 ml) y agua destilada (22 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (430 mg) a temperatura ambiente durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (57 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada y agua destilada : acetonitrilo (94 : 6) como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (212 mg, rendimiento 60%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.49 (1H, s), 4.59-4.52 (2H, m), 4.39-4.31 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.8, 6.3 Hz), 4.21 (1H, dd, J=9.0, 2.4 Hz), 4.10-4.03 (2H, m), 4.01-3.93 (1H, m), 3.71 (1H, dd, J=11.7, 4.5 Hz), 3.64 (1H, dd, J=11.7, 6.8Hz), 3.43 (1H, dd, J=6.3, 2.4Hz), 3.26 (1H, dq, J=8.8, 7.2 Hz), 1.73-1.62 (1H, m), 1.57-1.44 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.4 Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2 Hz), 0.93 (3H, t, J=7.4 Hz).
IR (KBr): 1750, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 519 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado 519.1348, Encontrado 519.1339 [M+H]^{+}
Análisis elemental calculado para C_{21}H_{27}O_{6}N_{4}S_{2}Na.7/4H_{2}O
C:45.85%; H:5.79%; N:10.18%; S:11.66%
Encontrado C:46.07%; H:5.78%; N:10.29%; S:11.61%
Ejemplo 40 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
123
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-metil-etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metil-etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (645 mg, 1.50 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 35) en dimetilformamida (32 ml) se añadió acetato de hidrazina (166 mg, 1.80 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (892 mg, 1.50 mmol) en acetonitrilo (45 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.05 ml, 6.0 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) y acetato de etilo como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metil]-etilcarbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (949 mg, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.44-7.38 (1H, br d, J=5.9Hz), 7.42 (1H, s), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.52-4.42 (2H,m), 4.33-4.22 (3H, m), 4.22-4.14 (1H, m), 4.04 (2H, ddd, J=14.0, 5.9, 2.9Hz), 3.67 (1H, dd, J=10.3, 4.4Hz), 3.62 (1H, dd, J=10.3, 2.9Hz), 3.30 (1H, dd, J=6.6, 2.2Hz), 3.21 (1H, dq, J=7.3, 6.6Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.27 (3H, d, J=7.3Hz), 1.25 (3H, d, J=6.6Hz), 0.92 (9H, s), 0.07 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-hidroxi-1-metiletilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metil-etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (940 mg, 1.28 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 40(1)) en tetrahidrofurano (47 ml) se añadieron ácido acético (221 \mul, 3.85 mmol) y una solución de fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (3.85 ml, 3.85 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó durante 3 días a temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (99 : 1 y 9 : 1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-hidroxi-1-metiletilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (462 mg, rendimiento 58%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.44 (1H, s), 7.23-7.19 (1H, br d, J=7.3Hz), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.52-4.46 (2H, m), 4.31-4.24 (2H, m), 4.27 (1H, dd, J=9.5, 2.0Hz), 4.22-4.15 (1H, m), 4.06 (2H, dt, J=8.1, 5.1Hz), 3.79-3.71 (1H, m), 3.66-3.59 (1H, m), 3.30 (1H, dd, J=6.6, 2.2Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.5, 7.3Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.28 (6H, d, J=7.3Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-Hidroxi-1-metiletilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-hidroxi-1-metiletilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (460 mg, 0.745 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 40(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (23 ml) y agua destilada (23 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (460 mg) a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (63 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada y agua destilada : acetonitrilo (82 : 12) como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-hidroxi-1-metiletilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (179 mg, rendimiento 48%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.48 (1H, s), 4.56 (2H, dd, J=8.3, 8.3Hz), 4.39-4.32 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.3, 6.4Hz), 4.20 (1H, dd, J=9.1, 2.4Hz), 4.18-4.11 (1H, m), 4.10-4.03 (2H, m), 3.68 (1H, dd, J=11.6, 4.8Hz), 3.61 (1H, dd, J=11.6, 6.7Hz), 3.44 (1H, dd, J=6.3, 2.4Hz), 3.26 (1H, dq, J=9.1, 6.6Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.22 (3H, d, J=6.7Hz), 1.20 (3H, d, J=6.6Hz).
IR (KBr): 1749, 1650, 1602, 1547, 1393, 1313, 1295 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 505 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{20}H_{26}O_{6}N_{4}S_{2}Na 505.1191, Encontrado 505.1196 [M+H]^{+}
Análisis elemental calculado para C_{20}H_{25}O_{6}N_{4}S_{2}Na.4/3H_{2}O
C:45.45%; H:5.28%; N:10.60%; S:12.13%
Encontrado C:45.63%; H:5.35%; N:10.66%; S:11.91%
Ejemplo 41 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
124
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metil-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metil-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (500 mg, 1.09 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 36) en dimetilformamida (25 ml) se añadió acetato de hidrazina (121 mg, 1.31 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (648 mg, 1.09 mmol) en acetonitrilo (33 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (759 \mul, 4.36 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2
y 1 : 4) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metil-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (649 mg, rendimiento 84%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.47-7.52 (1H, br d, J=9.8Hz), 7.43 (1H, s), 5.52 (1H, d, J=13.7Hz), 5.25 (1H, d, J=13.7Hz), 4.51 (1H, t, J=7.8Hz), 4.45 (1H, t, J=7.8Hz), 4.28 (1H, dd, J=9.3, 2.0Hz), 4.31-4.25 (2H, m), 4.05 (2H, ddd, J=7.8, 5.6, 1.2Hz), 3.86-3.80 (2H, m), 3.62 (1H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 3.30 (1H, dd, J=6.8, 2.0Hz), 3.22 (1H, dq, J=9.3, 6.8Hz), 2.05-1.95 (1H, m), 1.39 (3H, d, J=5.9Hz), 1.28 (3H, d, J=6.8Hz), 0.99 (3H, d, J=6.8Hz), 0.97 (3H, d, J=6.8Hz), 0.91 (9H, s), 0.06 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (690 mg, 0.914 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 41(1)) en tetrahidrofurano (35 ml) se añadieron ácido acético (157 \mul, 2.74mmol) y una solución de fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (2.74 ml, 2.74 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó durante 2 días a temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (388 mg, rendimiento 66%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.44 (1H, s), 7.33-7.28 (1H, br d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.50 (2H, ddd, J=8.1, 8.1, 3.7Hz), 4.32-4.24 (2H, m), 4.27 (1H, dd, J=9.2, 2.5Hz), 3.88-3.76 (2H, m), 3.74 (1H, dd, J=11.0, 6.6Hz), 3.30 (1H, dd, J=7.0, 2.5Hz), 3.22 (1H, dq, J=7.2, 7.3Hz), 2.06-1.95 (1H,m), 1.38 (3H, d, J=6.6Hz), 1.28 (3H, d, J=7.3Hz), 1.02 (3H, d, J=7.3Hz), 0.99 (3H, d, J=6.6Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (380 mg, 0.588 mmol) obtenido tal como se describe en el Ejemplo 41(2) en una mezcla de tetrahidrofurano (19 ml) y agua destilada (19 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (380 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (49 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada y agua destilada : acetonitrilo (76 : 24) como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (164 mg, rendimiento 52%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.49 (1H, s), 4.61-4.53 (2H, m), 4.39-4.31 (1H,), 4.25 (1H, dq, J=6.2, 6.3Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.1Hz), 4.11-4.04 (2H, m), 3.87-3.83 (1H, m), 3.80 (1H, dd, J=3.8, 11.7Hz), 3.71 (1H, dd, J=7.5, 11.7Hz), 3.43 (1H, dd, J=2.4, 6.2Hz), 3.26 (1H, dq, J=9.1, 7.2Hz), 1.97-1.84 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.3Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz), 0.97 (3H, d, J=6.8Hz), 0.93 (3H, d, J=6.9Hz).
IR (KBr): 1749, 1651, 1600, 1547, 1493, 1470, 1393, 1315 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 555 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{22}H_{30}O_{6}N_{4}S_{2}Na 533.1505, Encontrado 533.1497 [M+H]^{+}
Análisis elemental calculado para C_{22}H_{29}O_{6}N_{4}S_{2}Na.5/3H_{2}O
C:46.96%; H:5.79%; N: 9.96%; S:11.40%
Encontrado C:46.89%; H:5.86%; N:10.41%; S:11.15%
Ejemplo 42 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-3-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
125
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-metil-butilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metil-butilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (450 mg, 0.954 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 37) en dimetilformamida (23 ml) se añadió acetato de hidrazina (105 mg, 1.14 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (567 mg, 0.954 mmol) en acetonitrilo (28 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (665 \mul, 3.82 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio acuosa al 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2 y 1 : 4) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoxi)-3-metilbutilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (645 mg, rendimiento 87%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H,d,J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.41 (1H, s), 7.35-7.30 (1H, br d, J=9.5Hz), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.50 (1H, dd, J=8.1Hz), 4.45 (1H, dd, J=8.1Hz), 4.31-4.24 (3H, m), 4.21-4.13 (1H, m), 4.06 (1H, dd, J=5.9, 2.9Hz), 4.03 (1H, dd, J=5.9, 2.2Hz), 3.66 (2H, d, J=2.9Hz), 3.30 (1H, dd, J=7.3, 2.9Hz), 3.21 (1H, dq, J=6.6, 7.3Hz), 1.68-1.57 (1H, m), 1.52 (1H, ddd, J=14.6, 8.8, 5.9Hz), 1.44 (1H, ddd, J=14.6, 8.8, 5.9Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.28 (3H, d, J=7.3Hz), 0.95 (6H, t, J=6.6Hz), 0.91 (9H, s), 0.05 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-3-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (640 mg, 0.827 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 42(1)) en tetrahidrofurano (32 ml) se añadieron ácido acético (142 \mul, 2.48mmol) y una solución de fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (2.48 ml, 2.48 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó durante 2 días a temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-3-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (302 mg, rendimiento 55%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.44 (1H, s), 7.18-7.14 (1H, br d, J=7.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.26 (1H, d, J=13.7Hz), 4.53-4.47 (2H, m), 4.31-4.25 (3H, m), 4.20-4.13 (1H, m), 4.07 (2H, ddd, J=8.8, 4.9, 4.9Hz), 3.80-3.74 (1H, m), 3.66-3.60 (1H, m), 3.30 (1H, dd, J=6.8, 2.9Hz), 3.22 (1H, dq, J=6.8, 6.8Hz), 2.79-2.74 (1H, bt, J=5.9Hz), 1.74-1.65 (1H, m), 1.51 (1H, ddd, J=14.7, 8.8, 5.9Hz), 1.43 (1H, ddd, J=14.7, 8.8, 5.9Hz), 1.38 (3H, d, J=6.8Hz), 1.28 (3H, d, J=6.8Hz), 0.96 (3H, d, J=4.9Hz), 0.95 (3H, d, J=4.9Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Hidroximetil-3-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-3-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (300 mg, 0.455 mmol) obtenido tal como se describe en el Ejemplo 42(2) en una mezcla de tetrahidrofurano (15 ml) y agua destilada (15 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (380 mg) a temperatura ambiente durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (38 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil utilizando agua destilada y agua destilada : acetonitrilo (76 : 24) como eluyente. El eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-hidroximetil-3-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (131 mg, rendimiento 53%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.45 (1H, s), 4.60-4.53 (2H, m), 4.39-4.31 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.0, 6.4Hz), 4.19 (1H, dd, J=2.0, 9.1Hz), 4.19-4.13 (1H, m), 4.06 (2H, dd, J=4.9, 8.4Hz), 3.68 (1H, dd, J=4.7, 11.6Hz), 3.59 (1H, dd, J=6.7, 11.6Hz), 3.43 (1H, dd, J=2.0, 6.0Hz), 3.26 (1H, dq, J=9.1, 7.2Hz), 1.69-1.57(1H, m), 1.50 (1H, ddd, J=4.5, 9.2, 14.1Hz), 1.39 (1H, ddd, J=4.5, 9.2, 14.1Hz), 1.39 (3H, d, J=6.4Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz), 0.91 (6H, t, J=6.2Hz).
IR (KBr): 1750, 1651, 1604, 1547, 1492, 1470, 1390, 1311 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 547 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{23}H_{32}O_{6}N_{4}S_{2}Na 547.1661, Encontrado 547.1674 [M+H]^{+}
Ejemplo 43 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
126
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (910 mg, 1.93 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 38) en dimetilformamida (46 ml) se añadió acetato de hidrazina (213 mg, 2.31 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.15g, 1.93mmol) en acetonitrilo (58 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.34 ml, 7.72 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con 10% cloruro de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: n-hexano: acetato de etilo (1:1 \rightarrow 1:4)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (765 mg, rendimiento 51%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50-7.45 (1H, br d, J=9.5Hz), 7.42 (1H, s), 5.66 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.50 (1H, t, J=8.1Hz), 4.44 (1H, t, J=8.1Hz), 4.32-4.24 (2H, m), 4.27 (1H, dd, J=2.6, 9.7Hz), 4.07-4.02 (2H, m), 3.91-3.85 (1H, m), 3.83 (1H, dd, J=2.9, 10.3Hz), 3.63 (1H, dd, J=3.7, 10.3Hz), 3.30 (1H, dd, J=2.6, 7.0Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.7, 6.6Hz), 1.88-1.84 (1H, br s), 1.80-1.70 (1H, m), 1.58-1.50 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=6.6Hz), 1.27 (3H, d, J=7.3Hz), 1.22-1.10 (1H, m), 0.95 (3H, d, J=7.3Hz), 0.90 (3H, t, J=7.4Hz), 0.91 (9H, s), 0.05 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Se añadió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metil-butilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (760 mg, 0.982 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 43(1)) en tetrahidrofurano (38ml) a una solución de ácido acético (169 \mul, 2.95 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (2.95 ml, 2.95 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y agua a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (390 mg, rendimiento 60%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.44 (1H,s), 7.33-7.29 (1H, br d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.8Hz), 5.25 (1H, d, J=13.8Hz), 4.53-4.46 (2H, m), 4.31-4.28 (2H, m), 4.28 (1H, dd, J=9.5, 2.2Hz), 4.10-4.03 (2H, m), 3.94-3.87 (1H, m), 3.85-3.79 (1H, m), 3.78-3.72 (1H, m), 3.30 (1H, dd, J=7.0, 2.2Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.5, 7.3Hz), 1.83-1.72 (1H, m), 1.61-1.48 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=6.6Hz), 1.28 (3H, d, J=7.3Hz), 1.26-1.14 (1H, m), 0.99 (3H, d, J=6.6Hz), 0.93 (3H, t, J=7.3Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (390 mg, 0.591 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 43(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (20 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (390 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (50 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (76:24)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S,2S)-1-hidroximetil-2-metilbutilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (136 mg, rendimiento 42%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.49 (1H, s), 4.61-4.53 (2H, m), 4.39-4.31 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.2, 6.3Hz), 4.20 (1H, dd, J=9.0, 2.3Hz), 4.11-4.04 (2H, m), 3.91 (1H, ddd, J=7.4, 3.6, 3.6Hz), 3.81 (1H, dd, J=11.8, 3.6Hz), 3.72 (1H, dd, J=11.8, 7.4Hz), 3.43 (1H, dd, J=6.2, 2.3Hz), 3.25 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.76-1.64 (1H, m), 1.55-1.44 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.3Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz), 1.22-1.11 (1H, m), 0.95 (3H, d, J=6.9Hz), 0.88 (3H, t, J=7.4Hz).
IR (KBr): 1750, 1651, 1602, 1547, 1493, 1470, 1394, 1311 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 547 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{23}H_{32}O_{6}N_{4}S_{2}Na 547.1661;
Encontrado: 547.1647 [M+H]^{+}
Ejemplo 44 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-1-(hidroximetil)etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
127 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-t-butildimetilsililoxi)-(1-t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze- tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(2-t-butildimetilsililoxi)-(1-t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (770 mg, 1.45 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 39) en dimetilformamida (39 ml) se añadió acetato de hidrazina (160 mg, 1.74 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (862 mg, 1.45 mmol) en acetonitrilo (43 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.01 ml, 5.79 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y acuoso hidrogenocarbonato de sodio saturado a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: n-hexano: acetato de etilo (1:2 \rightarrow 1:4)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-t-butildimetilsililoxi)-(1-t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (951 mg, rendimiento 76%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.57-7.52 (1H, br d, J=8.8Hz), 7.42 (1H, s), 5.52 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.47 (1H, t, J=8.1Hz), 4.44 (1H, t, J=8.1Hz), 4.26 (1H, dd, J=3.6, 9.2Hz), 4.31-4.23 (2H, m), 4.09-3.99 (3H, m), 3.86-3.81 (1H, m), 3.61 (1H, dd, J=6.6, 9.5Hz), 3.30 (1H, dd, J=2.6, 7.0Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.2, 6.6Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.27 (3H, d, J=6.6Hz), 0.91 (9H, s), 0.07 (6H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-1-hidroximetil)etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Se añadió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-t-butildimetilsililoxi)-(1-t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (950 mg, 1.10 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 44(1)) en tetrahidrofurano (48ml) a una solución de ácido acético (378 \mul, 6.60 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1M en tetrahidrofurano (6.60 ml, 6.60 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y agua a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo: metanol
(9:1 \rightarrow 85: 15)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-1-(hidroximetil)etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (499 mg, rendimiento 72%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.73 (2H, d, J=8.8Hz), 7.49 (1H, s), 7.45 (1H, d, J=8.1Hz), 5.46 (1H, d, J=13.9Hz), 5.31 (1H, d, J=13.9Hz), 5.09 (1H, d, J=4.4Hz), 4.85-4.77 (2H, m), 4.57-4.42 (3H, m), 4.22 (1H, dd, J=1.7, 8.8Hz), 4.01-3.95 (2H,m), 3.89-3.82 (1H, m), 3.56-3.50 (2H, m), 3.49-3.41 (2H, m), 3.41-3.27 (2H, m), 1.16 (3H, d, J=6.6Hz), 1.14 (3H, d, J=6.6Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-1-(hidroximetil)etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-1-(hidroximetil)etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (490 mg, 0.773 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 44(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (25 ml) y agua destilada (25 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (490 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (65 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente: agua destilada \rightarrow agua destilada: acetonitrilo (9:1), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-hidroxi-1-(hidroximetil)etilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (187 mg, rendimiento 47%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.51 (1H, s), 4.56 (2H, t, J=8.2Hz), 4.39-4.31 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.3, 6.4Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.0Hz), 4.19-4.14 (1H, m), 4.06 (2H, ddd, J=3.6, 4.9, 8.6Hz), 3.78 (2H, dd, J=5.1, 11.7Hz), 3.72 (2H, dd, J=6.6, 11.7Hz), 3.43 (1H, dd, J=2.4, 6.3Hz), 3.25 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1748, 1649, 1599, 1547, 1393, 1313 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 521 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{20}H_{26}N_{4}O_{7}S_{2}Na: 521.1141, Encontrado: 521.1155[M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{20}H_{25}N_{4}O_{7}S_{2}Na\cdot4/3H_{2}O
Calculado para: C,44.11% H,5.12% N,10.29% S,11.78%
Encontrado: C,44.21% H,5.12% N,10.31% S,11.46%
Ejemplo 45 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
128
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{2-[N-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-{2-[N-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (384 mg, 0.89 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 40) en dimetilformamida (11 ml) se añadió acetato de hidrazina (99 mg, 1.07 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (5.29 mg, 0.89 mmol) en acetonitrilo (22 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.62 ml, 3.56 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow
acetato de etilo: metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{2-[N-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (263 mg, rendimiento 50%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.63 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.14 (0.6H, s), 7.03 (0.4H, s), 5.48 (1H, d, J= 1.3 Hz), 5.25 (1H, d, J= 1.3 Hz), 4.50 (1H, t, J= 8.0 Hz), 4.23 (2H, t, J= 9.0 Hz), 4.31-4.18 (3H, m), 4.05 (1H, dd, J= 8.3, 5.4 Hz), 3.89-3.80 (1H, m), 3.80-3.72 (1H, m), 3.72-3.63 (1H, m), 3.63-3.51 (1H, m), 3.26 (1H, dd, J= 7.1, 2.5 Hz), 3.26 (1.8H, s), 3.18 (1H, dq, J= 8.3, 7.5 Hz), 3.07 (1.2H, s), 1.35 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.22 (3H, d, J= 6.9 Hz), 0.86 (9H, dd, J= 7.8, 1.4 Hz), 0.27 (6H, dd, J= 12.4, 3.2 Hz).
(2) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Se añadió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{2-[N-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (622 mg, 0.85 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 45(1)) en tetrahidrofurano (30 ml) se añadió a una solución de ácido acético (0.15 ml, 2.55 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (2.55 ml, 2.55 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (263 mg, rendimiento 50%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.25 (1H, s), 5.50 (1H, d, J= 1.4 Hz), 5.26 (1H, d, J= 1.4 Hz), 4.62-4.40 (2H, m), 4.36-4.20 (3H, m ), 4.08 (1H, t., J= 9.1 Hz), 4.06 (1H, t., J= 9.1 Hz), 3.84 (2H, t, J= 4.9 Hz), 3.63 (2H, dd., J= 4.9 Hz), 3.29 (1H, dd, J= 6.4, 2.6 Hz), 3.21 (1H, quint., J= 7.5 Hz),3.08 (3H, s), 1.38 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.26 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (401 mg, 0.65 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 45(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (20 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (401 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (5 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-hidroxietil)-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (134 mg, rendimiento 41%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.31 (0.6H, s), 7.11 (0.4H, s), 4.56 (2H, t, J= 8.2 Hz), 4.41-4.31 (2H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.2 Hz), 4.21 (1H, dd, J= 9.1, 2.4 Hz), 4.12-4.00 (2H, m), 3.85 (1H, t, J= 5.4 Hz), 3.74 (1H, t, J= 5.4 Hz), 3.70-3.60 (2H, m), 3.44 (1H, dd, J= 6.2, 2.4 Hz), 3.26 (1H, dq, J= 9.1, 7.4 Hz), 3.07 (1.2H, s), 3.08 (1.8H, s), 1.30 (3H, d, J= 6.5 Hz), 1.20 (3H, d, J= 7.3 Hz).
IR (KBr): 3397.0, 1749.1, 1606.4, 1538.9, 1469.5, 1398.1, 1311.4, 1266.0 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 505 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{20}H_{25}N_{4}O_{6}S_{2}Na_{2}: 505.1191, Encontrado: 505.1185 [M+Na]^{+}
Análisis elemental: C_{20}H_{25}N_{4}O_{7}S_{2}Na\cdot4/3H_{2}O
Calculado para: C,44.11% H,5.12% N,10.29% S,11.78%
Ejemplo 46 Sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carboximetilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
129
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilmetilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (209.7 mg, 0.24 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(10)) en tetrahidrofurano (10 ml) se añadió una solución de ácido acético (0.042 ml, 0.7 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (0.72 ml, 0.72 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : tolueno: acetonitrilo (2:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (94.5 mg, rendimiento 53%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=7.9Hz), 8.22 (2H, d, J=7.9Hz), 7.66 (2H, d, J=7.9Hz), 7.60 (1H, t, J=6.6Hz), 7.54 (2H, d, J=7.9Hz), 7.47 (1H, s), 5.505 (1H, d, J=13.8Hz), 5.30 (2H, s), 5.255 (1H, d, J=13.8Hz), 4.50 (1H, t, J=8.3Hz), 4.40 (1H, t, J=8.3Hz), 4.32-4.24 (4H, m), 4.06 (1H, dd, J=8.3, 6.2Hz), 4.05 (1H, dd, J=8.3, 6.2Hz), 3.30 (1H, dd, J=7.0, 3.1Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.0, 7.4Hz), 1.98 (1H, br s), 1.38 (3H, J=5.7Hz), 1.27 (3H, d, J=7.4Hz).
(2) Sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carboximetilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilmetilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (330.4 mg, 0.38 mmol) obtenido tal como se describe en el Ejemplo 46(1) en una mezcla de tetrahidrofurano (16.5 ml) y agua destilada (8.3 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio sobre carbono 20% (350 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (63.9 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carboximetilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (158.7 mg, rendimiento 79%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.83 (1H, s), 4.45 (1H, t, J=8.3Hz), 4.43 (1H, t, J=8.3Hz), 4.28-4.21 (1H, m), 4.124 (1H, quintet, J=5.8Hz), 4.08 (1H, dd, J=8.8, 2.0Hz), 3.99-3.92 (2H, m), 3.80 (2H, s), 3.31 (1H, dd, J=5.9, 2.0Hz), 3.14 (1H, dq, J=8.8, 6.8Hz), 1.18 (3H, d, J=5.9Hz), 1.08 (3H, d, J=6.8Hz).
IR (KBr): 3388, 1748, 1602, 1550, 1398, 1314, 1267 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 527 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{19}H_{21}N_{4}O_{7}S_{2}Na;
Encontrado: [M+H]^{+}
Ejemplo 47 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
130
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(t-butildifenilsililoxi)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (850 mg, 0.878 mmol) obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 42(2) en tetrahidrofurano (43 ml) se añadió una solución de ácido acético (301 \mul, 5.27 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (5.27 ml, 5.27 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 día. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y agua a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo: metanol (95:5) \rightarrow cloruro de metileno: metanol (9:1) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (355 mg, rendimiento 66%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.7Hz), 7.66 (2H, d, J=8.7Hz), 7.44 (1H, s), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.25 (1H, d, J=13.7Hz), 4.82-4.77 (1H, m), 4.71-4.65 (1H, m), 4.51-4.36 (4H, m), 4.31-4.23 (3H, m), 4.07-3.96 (3H, m), 3.29 (1H, dd, J=2.4, 7.0Hz), 3.20 (1H, dq, J=9.2, 7.1Hz), 1.38 (3H, d, J=6.3Hz), 1.27 (3H, d, J=7.1Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (350 mg, 0.568 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 47(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (18 ml) y agua destilada (18 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (350 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (48 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (9:1)), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (118 mg, rendimiento 42%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.33 (1H, s), 4.78-4.67 (2H, m), 4.56 (2H, t, J=8.0Hz), 4.45-4.31 (3H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.3, 6.3Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.3, 9.0Hz), 4.10-4.03 (2H, m), 3.97 (1H, dd, J=3.7, 11.5Hz), 3.44 (1H, dd, J=2.3, 6.3Hz), 3.25 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.30 (3H, d, J=6.3Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1749, 1603, 1540, 1452, 1394, 1306 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 503 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}):calculado para C_{20}H_{24}N_{4}O_{6}S_{2}Na: 503.1035, Encontrado: 503.1040 [M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{20}H_{23}N_{4}O_{6}S_{2}Na\cdot8/3H_{2}O
Calculado para: C,43.63% H,5.19% N,10.18% S,11.65%
Encontrado: C,44.04% H,4.93% N,9.86% S,11.30%
Ejemplo 48 Sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
131
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metil-N-p-nitrobenciloxicarbonilmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metil-p-N-nitrobenciloxicarbonilmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (997 mg, 1.15 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 43(3)) en tetrahidrofurano (50 ml) se añadió una solución de ácido acético (0.2 ml, 3.44 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (3.44 ml, 3.44 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y acuoso hidrogenocarbonato de sodio saturado a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (19:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metil-N-p-nitrobenciloxicarbonilmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (413 mg, rendimiento 47%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta(ppm) 8.32-8.10 (4H, m), 7.75-7.60 (2H, m), 7.60-7.45 (2H, m),7.75 (0.5H, s), 7.41 (0.5H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.6 Hz), 5.38-5.20 (3H, m que incluye 5.26 (1H, d, J= 13.6 Hz)), 4.75-3.71 (9H, m que incluye 4.36 (1H, s), 4.56-4.46 (1H. m), 3.93-3.83 (1H, m)), 3.45-3.05 (4H, m que incluye 3.36 (0.9H, s), 3.16 (2.1H, s)), 3.29 (1H, d, J= 6.3 Hz), 1.38 (3H, d, J= 6.1 Hz), 1.33-1.20 (3H, m).
(2) Sal de difsodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-metil-N-p-nitrobenciloxicarbonilmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (413 mg, 0.54 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 48(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (20 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (413 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (91 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal disódica del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (126 mg, rendimiento 43%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.18 (0.6H, s), 7.03 (0.4H, s), 4.41-4.32 (0.2H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.15-3.98 (4H, m), 3.43 (1H, dd, J= 6.3, 2.2 Hz), 3.26 (1H, quint., J= 8.2 Hz), 3.11 (1.2H, s), 3.06 (1.8H, s), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.20 (3H, d, 7.1 Hz).
IR (KBr): 3389.3, 1748.2, 1605.4, 1541.8, 1469.5, 1394.3 cm^{-1}
Espectro de masas (ESI^{+}): m/z: 519 [M-Na+2H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{20}H_{24}N_{4}O_{7}S_{2}Na: 519.0984, Encontrado: 519.0956 [M-Na+2H]^{+}
Ejemplo 49 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-N-carbamoílmetil-N-metil-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
132 
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(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (932 mg, 1.27 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 44(2)) en tetrahidrofurano (50 ml) se añadió una solución de ácido acético (0.22 ml, 3.81 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (3.81 ml, 3.81 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y acuoso hidrogenocarbonato de sodio saturado a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo \rightarrow
acetato de etilo: metanol (10:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (424 mg, rendimiento 53%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 7.8 Hz), 7.66 (2H, d, J= 7.8 Hz), 7.36 (0.2H, s), 7.24 (0.8H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.59-4.39 (2H, m), 4.39-3.94 (7H, m), 3.36 (0.6H, s), 3.29 (1H, dd, J= 6.9, 3.3 Hz), 3.25-3.14 (1H, m), 3.11 (2.4H, s), 1.38 (3H, d, J= 6.1 Hz), 1.26 (3H, d, J= 7.1 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (424 mg, 0.67 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 49(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (20 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (424 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (57 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (424 mg, rendimiento 53%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 7.8 Hz), 7.66 (2H, d, J= 7.8 Hz), 7.36 (0.2H, s), 7.24 (0.8H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.59-4.39 (2H, m), 4.39-3.94 (7H, m), 3.36 (0.6H, s), 3.29 (1H, dd, J= 6.9, 3.3 Hz), 3.25-3.14 (1H, m), 3.11 (2.4H, s), 1.38 (3H, d, J= 6.1 Hz), 1.26 (3H, d, J= 7.1 Hz).
(2) Sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (424 mg, 0.67 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 49(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (20 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (424 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (57 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-metil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (115 mg, rendimiento 33%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.22 (0.5H, s), 7.20 (0.5H, s), 4.55 (2H, dd, J= 17.4, 8.4 Hz), 4.41-4.32 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.23-4.18 (3H, m que incluye 4.22 (2H, s)), 4.05 (2H, ddd, J= 17.3, 8.8, 4.9 Hz), 3.44 (1H, dd, J= 6.2, 2.4 Hz), 3.31-3.20 (1H, m), 3.18 (1.5H, s), 3.09 (1.5H, s), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.20 (3H, d, 7.1 Hz).
IR (KBr): 3384.5, 1748.2, 1681.6, 1603.5, 1539.9, 1469.5, 1397 2, 1310.4 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 518 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}):calculado para C_{20}H_{25}N_{5}O_{6}S_{2}Na: 518.1144, Encontrado: 518.1168 [M+H]^{+}
Ejemplo 50 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
133
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (428.6 mg, 0.6 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 45(2)) en tetrahidrofurano (21 ml) se añadió una solución de ácido acético (0.11 ml, 1.9 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (1.8 ml, 1.8 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y acuoso hidrogenocarbonato de sodio saturado a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo: metanol (8:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (310.5 mg, rendimiento 85%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 8.24 (2H, d, J=8.8Hz), 7.96 (1H, t, J=5.7Hz), 7.72 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50 (1H, s), 7.40 (1H, br s), 7.08 (1H, br s), 5.46 (1H, d, J=13.9Hz), 5.32 (1H, d, J=13.9Hz), 5.09 (1H, d, J=5.1Hz), 4.58-4.40 (3H, m), 4.22 (1H, dd, J=9.2, 2.7Hz), 4.01-3.96 (3H, m), 3.81 (2H, d, J=5.7Hz), 3.44-3.30 (2H, m), 1.16 (3H, d, J=6.6Hz), 1.14 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (310.5 mg, 0.5 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 50(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (15.5 ml) y agua destilada (7.8 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio sobre carbono 20% (360 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (42.3 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoílmetil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (157 mg, rendimiento 62%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 4.45 (2H, t, J=7.8Hz), 4.28-4.18 (1H, m), 4.13 (1H, quintet, J=5.9Hz), 4.08 (1H, dd, J=9.3, 2.3Hz), 4.00-3.92 (4H, m), 3.31 (1H, dd, J=5.9, 2.3Hz), 3.14 (1H, dq, J=9.3, 7.8Hz), 1.13 (3H, d, J=5.9Hz), 1.08 (3H, d, J=7.8Hz).
IR (KBr): 3384, 1748, 1660, 1600, 1549, 1492, 1471, 1394, 1315, 1264 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 504 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{19}H_{23}O_{6}N_{5}S_{2}Na: 504.0988, Encontrado: 504.1018 [M+H]^{+}
Ejemplo 51 Sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carboxil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico 
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134 
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(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-metil-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-metil-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.15 g, 1.29 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 46(3)) en tetrahidrofurano (58 ml) se añadió una solución de ácido acético (222\mul, 3.87 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (3.87 ml, 3.87 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y saturado acuoso cloruro de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : n-hexano: acetato de etilo (1:2) \rightarrow acetato de etilo) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-metil-1-(p-nitrobenciloxicarboxil)propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (377 mg, rendimiento 37%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.58-7.55 (1H, br s), 7.54 (2H, d, J=8.8Hz), 7.45 (1H, s), 5.51 (1H, d, J=13.5Hz), 5.28 (2H, s), 5.26 (1H, d, J=13.5Hz), 4.74 (1H, dd, J=5.1, 8.8Hz), 4.53-4.47 (2H, m), 4.32-4.26 (3H, m), 4.10-4.05 (2H, m), 3.30 (1H, dd, J=2.9, 6.6Hz), 3.22 (1H, dq, J=9.5, 6.6Hz), 2.32-2.24 (1H, m), 1.39 (3H, d, J=5.8Hz), 1.28 (3H, d, J=6.6Hz), 1.00 (3H, d, J=7.3Hz), 0.97 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carboxil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(1S)-2-metil-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-propilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (370 mg, 0.465 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 51(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (19 ml) y agua destilada (19 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (370 mg) a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (80 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (96:4)), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carboxil-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (165 mg, rendimiento 63%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.51 (1H, s), 4.59 (2H, dt, J=8.0, 5.6Hz), 4.40-4.34 (1H, m), 4.29-4.23 (2H, m), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.0Hz), 4.10 (2H, dt, J=9.0, 5.2Hz), 3.44 (1H, dd, J=2.4, 6.4Hz), 3.27 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 2.28-2.16 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.2Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz), 0.98 (3H, d, J=6.8Hz), 0.95 (3H, d, J=6.8Hz).
IR (KBr): 1749, 1599, 1547, 1491, 1471, 1400, 1314, 1292, 1264 cm^{-1}
Espectro de masas (ESI^{+}): m/z: 591 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{22}H_{26}N_{4}O_{7}S_{2}Na_{2}: 591.0936, Encontrado: 591.0952 [M+Na]^{+}
Análisis elemental: C_{22}H_{26}N_{4}O_{7}S_{2}Na_{2}\cdot8/3H_{2}O
Calculado para: C,42.85% H,5.12% N,9.09% S,10.40%
Encontrado: C,42.78% H,5.33% N,9.14% S,10.12%
Ejemplo 52 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoíl-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
135
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoíl-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoíl-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (930 mg, 1.20 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 47(3)) en tetrahidrofurano (47 ml) se añadió una solución de ácido acético (206 \mul, 3.60 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (3.60 ml, 3.60 mmol) en un baño de hielo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y agua a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (95:5)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoíl-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (383 mg, rendimiento 48%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.61-7.56 (1H, br d, J=9.5Hz), 6.05-6.01 (1H, br s), 5.51 (1H, d, J=13.5Hz), 5.43-5.39 (1H, br s), 5.26 (1H, d, J=13.5Hz), 4.54-4.47 (2H, m), 4.38-4.33 (1H, m), 4.32-4.25 (2H, m), 4.10-4.04 (2H, m), 3.30 (1H, dd, J=6.6, 2.9Hz), 3.22 (1H, dq, J=9.5, 7.3Hz), 2.33-2.24 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.28 (3H, d, J=7.3Hz), 1.03 (3H, d, J=6.6Hz), 10.1 (3H, d, J=6.6Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoíl-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoíl-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (380 mg, 0.577 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 52(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (19 ml) y agua destilada (19 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (380 mg) a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (48 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (81:9)), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoíl-2-metil-propilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (170 mg, rendimiento 54%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.55 (1H, s), 4.58 (2H, t, J=8.2Hz), 4.40-4.34 (1H, m), 4.29 (1H, d, J=6.9Hz), 4.25 (1H, dq, J=6.2, 6.4Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.0Hz), 4.09 (2H, dt, J=9.0, 4.6Hz), 3.43 (1H, dd, J=2.4, 6.2Hz), 3.26 (1H, dq,J=9.0, 7.2Hz), 2.26-2.16 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 0.20 (3H, d, J=7.2Hz), 1.02 (6H, d, J=6.8Hz).
IR (KBr): 1749, 1662, 1603, 1545, 1490, 1471, 1394, 1316, 1293, 1260 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 546 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{22}H_{28}N_{5}O_{6}SNa_{2}: 568.1276, Encontrado: 568.1271 [M+Na]^{+}
Análisis elemental: C_{22}H_{28}N_{5}O_{6}SNa\cdot3H_{2}O
Calculado para: C,44.07% H,5.72% N,11.68% S,10.69%
Encontrado: C,44.17% H,6.18% N,11.84% S,10.67%
Ejemplo 53 Sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
136
(1) A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (312 mg, 0.63 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 48) en dimetilformamida (9 ml) se añadió acetato de hidrazina (70 mg, 0.76 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora.
Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (452 mg, 0.76 mmol) en acetonitrilo (20 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.44 ml, 2.52 mmol). La mezcla se agitó durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (20:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (193 mg, rendimiento 39%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (4H, d, J= 8.9 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.9 Hz), 7.56 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.43-7.32 (1.4H, m), 7.15 (0.6H, br s), 5.51 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.28 (1.2H, br s), 5.25 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.20 (0.8H, br s), 5.05-4.65 (0.4H, m), 4.85-4.65 (0.6H, m), 4.65-3.95 (8H, m que incluye 4.50 (2H, t, J= 7.4 Hz), 4.11 (2H, t, J= 7.4 Hz)), 3.93-3.75 (1H, m), 3.29 (1H, dd, J= 6.6, 2.0 Hz), 3.25-3.08 (1H, m), 1.38 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.35 (3H, d, J= 7.2 Hz), 1.20 (6H, br s).
(2) Sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (193 mg, 0.24 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 53(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (9 ml) y agua destilada (9 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (193 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (40 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de disolventes mencionada anteriormente, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de disodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carboximetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (63 mg, rendimiento 45%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.08 (0.6H, br s), 7.04 (0.4H, br s), 4.70-4.69 (0.2H. m), 4.53 (2H, d, J= 8.0 Hz), 4.42-4.31 (1H, m), 4.18-4.09 (0.8H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.4 Hz), 4.20 (1H, d, J= 9.1 Hz), 4.09-4.02 (2H, m), 3.95 (2H, d, J= 5.8 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 6.4, 0.8 Hz), 3.26 (1H, quint., J= 7.6 Hz), 1.31 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.26-1.10 (9H, m).
IR (KBr): 3398.0, 1749.1, 1603.5, 1539.9, 1467., 1453.1, 1392.4, 1310.4, 1277.6 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 569 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{22}H_{27}O_{7}N_{4}S_{2}Na_{2}: 569.1116, Encontrado: 569.1119 [M+H]^{+}
Ejemplo 54 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
137
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(N-carbamoílmetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (347 mg, 0.97 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 49) en dimetilformamida (10 ml) se añadió acetato de hidrazina (108 mg, 1.17 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (696 mg,1.17 mmol) en acetonitrilo (20 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.68 ml, 3.88 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo: metanol (10:1) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (359 mg, rendimiento 56%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J= 8.6 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.6 Hz), 7.05-6.72 (1H, m), 5.51 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.25 (11H, d, J= 13.8 Hz), 4.80-4.45 (1H, m), 4.45-4.35 (2H, m), 4.35-4.17 (3H, m), 4.03 (4H, m), 3.29 (1H, dd, J= 7.0, 2.5 Hz), 3.25-3.05 (1H, m), 1.38 (3H, d, J= 6.3 Hz), 1.33-0.98 (9H, m que incluye 1.25 (3H, d, J= 7.1 Hz)).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (359 mg, 0.55 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 54(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (12 ml) y agua destilada (12 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 7.5% (359 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (46 mg), ácido acético y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-carbamoílmetil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (195 mg, rendimiento 65%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.17 (0.2H, br s), 7.12 (0.8H, br s), 4.56 (2H, dd, J= 17.4, 9.0 Hz), 4.42-4.16 (4H, m que incluye 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.21 (1H, dd, J= 8.4, 2.3 Hz), 4.09-3.97 (2H, m), 3.44 (1H, dd, J=6.3, 2.5 Hz), 3.26 (1H, quint., J= 8.4 Hz), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.25-1.08 (9H, m que incluye 1.19 (3H, d, J= 6.7 Hz)).
IR (KBr): 3404.7, 1749.1, 1681.6, 1605.4, 1538.0, 1468.5, 1448.3, 1395.2, 1306.5, 1277.6 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 546 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{22}H_{29}N_{5}O_{6}S_{2}Na: 546.1457, Encontrado: 546.1458 [M+H]^{+}
Ejemplo 55 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
138
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (344 mg, 1.01 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 50) en dimetilformamida (10 ml) se añadió acetato de hidrazina (112 mg, 1.22 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora.
Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (725 mg,1.22 mmol) en acetonitrilo (20 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.70 ml, 4.04 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (10:1) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (245 mg, rendimiento 39%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.6 (2H,, J= 8.7 Hz), 7.48-7.15 (1H, m), 5.51 (1H, d, J= 14. 0 Hz), 5.26 (1H, d, J= 14. 0 Hz), 4.86 (1H, quint., J= 6.5 Hz), 4.72-3.76 (9H, m que incluye 4.52 (2H, t, J= 8.1 Hz), 4.27 (2H, dd, J= 6.6, 2.5 Hz)), 3.29 (1H, dd, J= 6.9, 2.5 Hz), 3.21 (1H, quint., J= 9.3, 7.3 Hz), 1.38 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.35-1.20 (9H, m que incluye 1.25 (3H, d, J= 7.3 Hz)).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (245 mg, 0.39 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 55(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (12 ml) y agua destilada (12 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (245 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (33 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de disolventes mencionada anteriormente, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 6% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (87 mg, rendimiento 42%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.20 (1H, br s), 4.58 (2H, t, J= 8.0 Hz), 4.49-4.31 (3H, m que incluye 4.41 (2H, s)), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.21 (1H, dd, J= 9.0, 2.3 Hz), 4.19-3.80 (3H, m que incluye 4.07 (2H, dd, J= 8.6, 4.9 Hz), 3.44 (1H, dd, J= 6.3, 2.4 Hz), 3.26 (1H, dq, J= 9.0, 7.2 Hz),1.43-1.25 (9H, m que incluye 1.31 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.20 (3H, d, J= 7.2 Hz)).
IR (KBr): 3398.0, 1750.1, 1606.4, 1537.0, 1468.5, 1426.1, 1401.0, 1373.1, 1332.6, 1311.4, 1274.7 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 550 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{22}H_{26}N_{5}O_{5}S_{2}Na_{2}: 550.1171, Encontrado: 550.1179 [M+Na]^{+}
Ejemplo 56 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperidin-4-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
139
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (260 mg, 0.500 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 51) en dimetilformamida (13 ml) se añadió acetato de hidrazina (55 mg, 0.600 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (297 mg, 0.500 mmol) en acetonitrilo (15 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (348 \mul, 2.00 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (9:1) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (348 mg, rendimiento 85%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (4H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (2H, d, J=8.8Hz), 7.43 (1H, s), 7.05-7.01 (1H, br d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.25 (1H, d, J=13.7Hz), 5.23 (2H, s), 4.52-4.46 (2H, m), 4.31-4.25 (3H, m), 4.23-4.04 (3H, m), 4.05 (2H, dt, J=8.8, 5.9Hz), 3.30 (1H, dd, J=2.4, 7.3Hz), 3.21 (1H, dq, J=6.8, 8.8Hz), 3.11-2.95 (2H, m), 2.07-2.00 (2H, m), 1.55-1.41 (2H, m), 1.38 (3H, d, J=6.8Hz), 1.28 (3H, d, J=5.9Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperidin-4-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (340 mg, 0.414 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 56(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (17 ml) y agua destilada (17 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (340 mg) a temperatura ambiente durante 4.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (8:2)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperidin-4-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (70 mg, rendimiento 33%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.50 (1H, s), 4.55 (2H, t, J=8.2Hz), 4.36-4.29 (1H, m), 4.24 (1H, dq, J=6.2, 6.4Hz), 4.17 (1H, dd, J=2.2, 9.1Hz), 4.17-4.08 (1H, m), 4.03 (1H, dd, J=5.0, 8.3Hz), 3.53 (2H, dt, J=13.3, 3.1Hz), 3.43 (1H, dd, J=2.2, 6.2Hz), 3.25 (1H, dq, J=9.1, 7.2Hz), 3.17 (2H, dt, J=12.8, 2.9Hz), 2.20 (1H, dd, J=2.9, 14.2Hz), 1.93-1.80 (2H, m), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1754, 1658, 1602, 1545, 1385, 1315 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 508 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{22}H_{30}N_{5}O_{5}S_{2}: 508.1688, Encontrado: 508.1693 [M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{22}H_{29}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot3H_{2}O
Calculado para: C,47.05% H,6.28% N,12.47% S,11.42%
Encontrado: C,47.07% H,6.38% N,12.37% S,11.14%
Ejemplo 57 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
140
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (280 mg, 0.554 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 52) en dimetilformamida (14 ml) se añadió acetato de hidrazina (61 mg, 0.665 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (329 mg, 0.554 mmol) en acetonitrilo (16 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (356 \mul, 2.22 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (399 mg, rendimiento 89%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 8.20 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53 (2H, dd, J=8.8, 13.7Hz), 7.45 (1H, s), 7.17-7.12 (1H, br t, J=7.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.25 (1H, d, J=13.7Hz), 5.30-5.18 (2H, m), 4.68-4.59 (1H, m), 4.54-4.46 (2H, m), 4.32-4.24 (3H, m), 4.09-4.00 (2H, m), 3.84-3.76 (1H, m), 3.65-3.53 (2H, m), 3.46-3.40 (1H, m), 3.30 (1H, dd, J=2.9, 6.8Hz), 3.22 (1H,dq,J=8.8,6.6Hz), 2.32-2.22 (1H,m), 2.09-1.94 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=6.8Hz), 1.28 (3H, d, J=6.8Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (390 mg, 0.483 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 57(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (20 ml) y agua destilada (20 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 20% (390 mg) a temperatura ambiente durante 4.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (76:24)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (90 mg, rendimiento 38%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.52 (1H,s), 4.69-4.62 (1H, m), 4.59-4.50 (2H, m), 4.37-4.39 (1H, m), 4.22 (1H, dq, J=6.4, 6.4Hz), 4.11 (1H, dd, J=2.4, 9.0Hz), 4.07-4.01 (2H, m), 3.65-3.55 (2H, m), 3.48-3.39 (3H, m), 3.21 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 2.50-2.40 (1H, m), 2.23-2.14 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.18 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1754, 1654, 1597, 1545, 1386, 1313 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 494 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}):calculado para C_{21}H_{28}N_{5}O_{5}S_{2}: 494.1532, Encontrado: 494.1529 [M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{21}H_{27}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot7/3H_{2}O
Calculado para: C,47.09% H,5.96% N,13.08% S,11.97%
Encontrado: C,47.04% H,5.95% N,13.04% S,11.83%
Ejemplo 58 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
141
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}-
azetidina (280 mg, 0.554 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 53) en dimetilformamida (14 ml) se añadió acetato de hidrazina (61 mg, 0.665 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (329 mg, 0.554 mmol) en acetonitrilo (16 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (386 \mul, 2.22 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (416 mg, rendimiento 93%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 8.19 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53 (2H, dd, J=8.8, 15.6Hz), 7.45 (1H, s), 7.17-7.11 (1H, br s), 5.51 (1H, d, J=13.8Hz), 5.30-5.18 (3H, m), 4.67-4.58 (1H, m), 4.53-4.47 (2H, m), 4.32-4.23 (3H, m), 4.06 (2H, dt, J=8.8, 5.9Hz), 3.81-3.76 (1H, m), 3.65-3.53 (2H, m), 3.47-3.40 (1H, m), 3.30 (1H, dd, J=2.9, 6.8Hz), 3.22 (1H, dq, J=8.8, 7.8Hz), 2.32-2.25 (1H, m), 2.09-1.95 (1H, m), 1.39 (3H, d, J=5.9Hz), 1.28 (3H, d, J=7.8Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (410 mg, 0.508 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 58(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (21 ml) y agua destilada (21 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 20% (410 mg) a temperatura ambiente durante 4.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de disolventes mencionada anteriormente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (76:24)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (101 mg, rendimiento 41%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.52 (1H, s), 4.69-4.62 (1H, m), 4.60-4.52 (2H, m), 4.38-4.30 (1H, m), 4.24 (1H, dq, J=6.3, 6.3Hz), 4.16 (1H, dd, J=2.3, 8.9Hz), 4.09-4.02 (2H, m), 3.67-3.54 (2H, m), 3.49-3.40 (3H, m), 3.24 (1H, dq, J=8.9, 7.2Hz), 2.49-2.40 (1H, m), 2.24-2.14 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.3Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1756, 1656, 1598, 1544, 1384, 1313 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 494 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{21}H_{28}N_{5}O_{5}S_{2}: 494.1532, Encontrado: 494.1519 [M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{21}H_{27}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot3H_{2}O
Calculado para: C,46.06% H,6.07% N,12.79% S,11.71%
Encontrado: C,46.35% H,5.75% N,12.82% S,11.68%
Ejemplo 59 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
142 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (400 mg, 0.814 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 54) en dimetilformamida (20 ml) se añadió acetato de hidrazina (90 mg, 0.977 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (484 mg, 0.814 mmol) en acetonitrilo (25 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (568 \mul, 3.26 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (496 mg, rendimiento 77%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.54 (1H, s), 8.23 (4H, d, J=8.8Hz), 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52-7.47 (1H, m), 7.45 (1H, s), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.90-4.80 (1H, m), 4.54-4.47 (2H, m), 4.47-4.38 (2H, m), 4.42 (2H, dd, J=8.8, 8.8Hz), 4.13-4.25 (2H, m), 4.27 (1H, dd, J=2.2, 9.5Hz), 4.09-3.96 (4H, m), 3.30 (1H, dd, J=2.2, 7.0Hz), 3.21 (1H, dq, J=9.5, 6.6Hz), 1.38 (3H, d, J=6.6Hz), 1.28 (3H, d, J=5.9Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (490 mg, 0.617 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 59(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (25 ml) y agua destilada (25 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 20% (490 mg) a temperatura ambiente durante 4.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (76:24)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (143 mg, rendimiento 49%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.54 (1H, s), 4.97-4.87 (1H, m), 4.60-4.54 (2H, m), 4.44 (2H, dd, J=11.9, 8.4Hz), 4.39-4.30 (3H, m), 4.23 (1H, qd, J=6.4, 6.2Hz), 4.15 (1H, dd, J=9.0, 2.4Hz), 4.10-4.03 (2H, m), 3.43 (1H, dd, J=6.3, 2.4Hz), 3.23 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1753, 1655, 1600, 1545, 1387, 1314 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 480 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{20}H_{26}N_{5}O_{5}S_{2}: 480.1375, Encontrado: 480.1391 [M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{20}H_{25}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot9/4H_{2}O
Calculado para: C,46.19% H,5.72% N,13.47% S,12.33%
Encontrado: C,46.06% H,5.38% N,13.70% S,12.33%
Ejemplo 60 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
143
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (546 mg, 1.07 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 55) en dimetilformamida (15 ml) se añadió acetato de hidrazina (118 mg, 1.29 mmol) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (636 mg, 1.07 mmol) en acetonitrilo(30 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.22 ml, 1.29 mmol). La mezcla se agitó durante 1 hora mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato
de etilo: metanol (1:20)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (215 mg, rendimiento 29%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (4H, dd, J= 8.5, 5.2 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.52 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.22 (1H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.25 (2H, s), 4.50 (1H, t, J= 8.0 Hz), 4.49 (1H, t, J= 8.0 Hz), 4.35-4.20 (3H, m), 4.04 (1H, t, J= 8.5 Hz), 4.31 (1H, t, J= 8.5 Hz), 3.98-3.69 (4H, m), 3.69-3.48 (4H, m), 3.29 (1H, dd, J= 6.8, 2.6 Hz), 3.20 (1H, dq, J = 9.2, 7.2 Hz), 1.36 (3H, d, J= 6.3 Hz), 1.26 (3H, d, J= 7.5 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (539 mg, 0.79 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 60(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (539 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 6% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 13% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 16% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 20% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (107 mg, rendimiento 27%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.23 (1H, s), 4.56 (2H, t, J= 8.4 Hz), 4.40-4.30 (1H, m), 4.24 (1H, quint., J= 6.2 Hz), 4.20 (1H, dd, J= 8.7, 2.2 Hz), 4.03 (2H, dd, J= 8.7, 2.2 Hz), 3.95 (4H, t, J= 5.2 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 6.2, 2.4 Hz), 3.40-3.29 (4H, m), 3.24 (1H, dq, J= 8.7, 7.3 Hz),1.29 (3H, d, J= 6.3 Hz), 1.19 (3H, d, J= 7.9 Hz).
IR (KBr): 3415.3, 1759.7, 1620.9, 1536.0, 1456.0, 1431.9, 1384.6, 1313.3, 1246.8 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 494 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{21}H_{28}N_{5}O_{5}S_{2}: 494.2532, Encontrado: 494.1529 [M+H]^{+}
Ejemplo 61 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((2-aminoetil)carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
144
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil)carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil)carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (330.6 mg, 0.68 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 56) en dimetilformamida (17 ml) se añadió acetato de hidrazina (82 mg, 0.89 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (426 mg, 0.72 mmol) en acetonitrilo (21 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.5 ml, 2.9 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: tolueno:acetonitrilo (1:2)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil)carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (348.1 mg, rendimiento 66%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=7.8Hz), 8.14 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=7.8Hz), 7.47 (2H, d, J=8.8Hz), 7.43 (1H, s), 7.38 (1H, t, J=6.3Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.51 (1H, t, J=6.3Hz), 5.25 (1H, d, J=13.7Hz), 5.18 (2H, s), 4.48 (1H, t, J=8.3Hz), 4.46 (1H, t, J=8.3Hz), 4.32-4.24 (3H, m), 4.05 (1H, dd, J=8.3, 5.6Hz), 4.03 (1H, dd, J=8.3, 5.6Hz), 3.55 (2H, d, 6.3Hz), 3.44 (2H, q, 6.3Hz), 3.30 (1H, dd, J=6.9, 1.9Hz), 3.22 (1H, dq, J=8.8, 6.5Hz), 1.73 (1H, br s), 1.38 (3H, d, J=6.5Hz), 1.28 (3H, d, J=6.5Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((2-aminoetil)carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil)carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (328.4 mg, 0.42 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 61(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (16.4 ml) y agua destilada (8.2 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 20% sobre carbono (328.4 mg) en un baño de agua (30ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo-tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de disolventes mencionada anteriormente, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((2-aminoetil)carbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (96.4 mg, rendimiento 49%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.37 (1H, s), 4.42 (1H, t, J=8.4Hz), 4.42 (1H, t, J=8.4Hz), 4.24-4.16 (1H, m), 4.10 (1H, quintet, J=6.6Hz), 4.00 (1H, dd, J=8.9, 2.4Hz), 3.94 (1H, dd, J=8.4, 4.8Hz), 3.90 (1H, dd, J=8.4, 4.8Hz), 3.57 (2H, t, J=5.9Hz), 3.26 (1H, dd, J=6.6, 2.4Hz), 3.12 (2H, t, J=5.9Hz), 3.08 (1H, dq, J=8.9, 7.3Hz), 1.16 (3H, d, J=6.6Hz), 1.05 (3H, d, J=7.3Hz).
IR (KBr): 3383, 1755, 1652, 1599, 1547, 1387, 1314 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 468 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}):calculado para C_{19}H_{26}O_{5}N_{5}S_{2}: 468.1366, Encontrado: 468.1365 [M+H]^{+}
Ejemplo 62 Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
145
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidina (390 mg, 0.793 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 57) en dimetilformamida (20 ml) se añadió acetato de hidrazina (88 mg, 0.952 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (471 mg, 0.793 mmol) en acetonitrilo (24 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (552 \mul, 3.17 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo: metanol (93:7)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (587 mg, rendimiento 93%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (4H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 7.46 (2H, s), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.40-5.37 (1H, m), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 5.21 (2H, s), 4.92-4.86 (1H, m), 4.59-4.42 (4H, m), 4.40-4.32 (1H, m), 4.30-4.23 (3H, m), 4.04-3.92 (3H, m), 3.30 (1H, dd, J=2.2, 6.6Hz), 3.21 (1H, dq, J=7.3, 9.0Hz), 1.38 (3H, d, J=6.6Hz), 1.27 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se añadió (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (580 mg, 0.731 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 62(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (580 mg) a temperatura ambiente durante 5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de solventes mencionada anteriormente, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (8:2)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (135 mg, rendimiento 39%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.45 (1H, s), 4.98-4.85 (1H, m), 4.64-4.49 (4H, m), 4.38-4.30 (1H, m), 4.31-4.17 (4H, m), 4.07-4.00 (2H, m), 3.44 (1H, dd, J=2.0, 5.9Hz), 3.24 (1H, qd, J=7.2, 8.5Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.20 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1756, 1607, 1537, 1449, 1387, 1309, 1291, 1261 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 502 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{20}H_{25}N_{5}O_{5}S_{2}Na: 502.1195, Encontrado: 502.1179 [M+Na]^{+}
Análisis elemental: C_{20}H_{25}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot3H_{2}O
Calculado para: C,45.02% H,5.86% N,13.12% S,12.02%
Encontrado: C,44.27% H,5.28% N,13.26% S,12.68%
Ejemplo 63 Ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
146
(1) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (348.9 mg, 0.71 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 58) en dimetilformamida (17.5 ml) se añadió acetato de hidrazina (85.2 mg, 0.93 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (420.3 mg, 0.71 mmol) en acetonitrilo (21 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.49 ml, 2.8 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: tolueno:acetonitrilo (1:2)) para dar p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (267.5 mg, rendimiento 47%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (4H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.56-7.46 (3H, m que incluye 2H, d, a 7.49 ppm, J=8.8Hz), 7.22 (0.7H, s), 7.21 (0.3H, s), 5.52 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 5.172 (2H, s), 4.52-4.38 (2H, m), 4.32-4.10 (3H, m), 4.10-3.98 (2H, m), 3.74-3.58 (2H, m), 3.56-3.40 (2H, m), 3.30-3.26 (1H, m), 3.16-3.06 (1H, m), 3.24 (0.9H, s), 3.04 (2.1H, s), 1.77 (1H, d, J=4.4Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.22 (3H, J=7.3Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid
p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (267.5 mg, 0.33 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 63(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (14 ml) y agua destilada (6.7 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 20% sobre carbono (300 mg) a 30ºC en un baño de agua durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo-tetrahidrofurano (1:1) y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de disolventes mencionada anteriormente, y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente :
agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-metil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid (81.6 mg, rendimiento 51%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.11 (0.4H, s), 7.05 (0.6H, s), 4.43 (2H, t, J=8.8Hz), 4.26-4.18 (1H, m), 4.12 (1H, quintet, J=5.9Hz), 4.08 (1H, dd, J=8.8, 2.3Hz), 3.91 (2H, dd, J=8.8, 4.9Hz), 3.70 (2H, t, 5.9Hz), 3.31 (1H, dd, J=5.9, 2.3Hz), 3.23-3.16 (2H, m), 3.12 (1H, dq, J=8.8, 7.8Hz), 3.00 (1.8H, s), 2.94 (1.2H, s), 1.17 (3H, d, J=5.9Hz), 1.07 (3H, d, J=7.8Hz).
IR (KBr): 3419, 2966, 1754, 1607, 1540, 1470, 1391, 1315 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 482 [M+H]^{+}
Ejemplo 64 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
147
(1) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (618 mg, 1.35 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 59) en dimetilformamida (30 ml) se añadió acetato de hidrazina (149 mg, 1.62 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (963 mg, 1.62 mmol) en acetonitrilo (60 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.94 ml, 5.40 mmol). La mezcla se agitó durante 8 horas gradually raising the temperature hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (10:1)) para dar p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-{[1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (310 mg, rendimiento 30%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J= 8.4 Hz), 7.64 (2H, d, J= 8.4 Hz), 7.12-6.90 (1H, m), 5.45 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.69-4.18 (6H, m que incluye 4.45 (2H, dd, J= 7.9, 6.5 Hz), 4.24 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.22 (1H, dd., J= 9.0, 2.5 Hz)), 3.89-3.72 (1H, m), 3.72-3.46 (2H, m), 3.46-3.32 (1H, m), 3.26 (1H, dd, J= 6.3, 2.5 Hz), 3.17 (1H, dq, J= 9.0, 7.3 Hz), 1.36 (3H, d, J= 6.3 Hz), 1.31-1.09 (9H, m que incluye 1.25 (3H, d, J= 7.2 Hz)), 0.87 (9H, s), 0.06 (6H, d, J= 2.9 Hz).
(2) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato
p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (4.47 g, 5.88 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 64(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (220 ml) se añadió to ácido acético (0.40 ml, 7.06 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1M en tetrahidrofurano solución (7.06 ml, 7.06 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 día. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (10:1)) para dar p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-hidroxietil)-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (1.79 g, rendimiento 47%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta(ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.20 (0.6H, br s), 7.09 (0.4H, br s), 5.50 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.26 (1H, d, J= 13.8 Hz), 4.62-4.18 (6H, m que incluye 4.49 (2H, t., J= 8.4 Hz), 4.26 (1H, dd, J= 9.3, 2.6 Hz)), 4.04 (2H, dd, J= 8.4, 5.4 Hz), 3.80 (2H, br s), 3.56 (2H, br s), 3.28 (1H, dd, J= 7.5, 2.5 Hz), 3.19 (1H, br s),1.38 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.35 (3.6H, br s), 1.26 (3H, d, J= 7.3 Hz), 1.21 (2.4H, br s).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-hidroxietil)-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (1.79 g, 2.77 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 64(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (90 ml) y agua destilada (90 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (1.79 g) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (23 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla se agitó en un embudo de separación. La capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente :
agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(2-hidroxietil)-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico la sal de sodio del ácido (897 mg, rendimiento 61%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.08 (0.2H, s), 7.02 (0.8H, s), 4.56 (2H, t, J= 8.0 Hz), 4.50-4.40 (0.3H, m), 4.40-4.30 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.5 Hz), 4.21 (1H, dd, J= 8.4, 2.2 Hz), 4.16-4.06 (0.7H, m), 4.05 (2H, dd, J= 8.0, 4.8 Hz), 3.69-3.60 (0.5H, m), 3.60-3.52 (0.5H, m), 3.52 (2H, t, J= 6.3 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 6.5, 2.4 Hz), 3.25 (1H, quint., J= 8.4 Hz), 1.42-1.07 que incluye 1.30 (3H, d, J= 6.3 Hz), 1.20 (3H, d, J= 7.1 Hz)).
IR (KBr): 3382.5, 1750.1, 1603.5, 1537.0, 1468.5, 1452.1, 1396.2, 1312.3, 1284.4 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 533 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{22}H_{29}N_{4}O_{5}S_{2}Na: 533.1504, Encontrado: 533.1489 [M+H]^{+}
Ejemplo 65 Ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid
148 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (746 mg, 1.43 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 60) en dimetilformamida (22 ml) se añadió acetato de hidrazina (158 mg, 1.72 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (1.02 g, 1.72 mmol) en acetonitrilo (45 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.00 ml, 5.72 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (10:1)) para dar p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (610 mg, rendimiento 52%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (4H, dd, J= 11.0, 8.6 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.6Hz), 7.50 (2H, d, J= 8.6Hz), 7.25-6.95 (1H, m), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.19 (2H, s), 4.63-3.88 (8H, m), 3.91-3.35 (4H, m), 3.29 (1H, dd, J= 6.8, 2.2 Hz), 3.25-3.08 (1H, m), 1.38 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.31 (3H, br s), 1.25 (3H, d, J= 7.3 Hz), 1.21 (3H, br s).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid
p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (610 mg, 0.74 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 65(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (610 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, acetato de etilo y agua destilada se añadieron a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 6% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow 14% acetonitrilo en agua destilada \rightarrow 16% acetonitrilo en agua destilada \rightarrow 18% acetonitrilo en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropil-carbamoíl]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid (104 mg, rendimiento 28%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.06 (1H, s), 4.56 (2H, t, J= 8.4 Hz), 4.41-4.31 (1H, m), 4.29-4.09 (3H, m que incluye 4.24 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.20 (1H, dd, J= 8.9, 2.4 Hz)), 4.03 (2H, dd, J= 8.4, 4.8 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 6.3, 2.4 Hz), 3.37-3.16 (3H, m que incluye 3.25 (1H, dq, J= 8.9, 7.4 Hz)), 1.29 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.25-1.15 (9H, m que incluye 1.19 (3H, d, J= 7.0 Hz))
IR (KBr): 3381.6, 1759.7, 1597.7, 1537.0, 1469.5, 1424.2, 1388.5, 1371.1, 1314.3, 1282.4 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 510 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{22}H_{32}N_{5}O_{5}S_{2}Na: 510.1845, Encontrado: 510.1826 [M+H]^{+}
Ejemplo 66 Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-aminometil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid
149
(1) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (780 mg, 1.50 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 61) en dimetilformamida (40 ml) se añadió acetato de hidrazina (166 mg, 1.80 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (892 mg, 1.50 mmol) en acetonitrilo (45 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.05 ml, 6.00 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow
acetato de etilo: metanol (98:2)) para dar p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (950 mg, rendimiento 77%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 8.09 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.43 (1H, s), 7.40 (2H, d, J=8.8Hz), 7.12 (1H, br d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.2Hz), 5.25 (1H, d, J=13.2Hz), 5.23 (1H, d, J=13.2Hz), 5.05 (1H, d, J=13.2Hz), 4.51 (1H, t, J=8.1Hz), 4.44 (1H, t, J=8.1Hz), 4.32-4.25 (3H, m), 4.06-3.96 (3H, m), 3.45-3.32 (2H, m), 3.30 (1H, dd, J=2.2, 6.6Hz), 3.21 (1H, dq, J=7.3, 9.5Hz), 1.93-1.84 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.28 (3H, d, J=7.3Hz), 1.00 (3H, d, J=6.6Hz), 0.98 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-aminometil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid
p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-[1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoíl}-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (950 mg, 1.15 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 66(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (48 ml) y agua destilada (48 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (950 mg) a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó, se lavó con la mezcla de disolventes mencionada anteriormente y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (76:24)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-aminometil-2-metilpropilcarbamoíl)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid (103 mg, rendimiento 18%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 8.18-8.03 (1H, m), 7.51 (1H, s), 4.47 (2H, t, J=8.1Hz), 4.24-4.14 (1H, m), 3.99-3.85 (4H, m), 3.84-3.77 (1H, m), 3.09-2.88 (4H, m), 1.94-1.84 (1H, m), 1.14 (3H, d, J=6.2Hz), 1.03 (3H, d, J=7.0Hz), 0.89 (3H, d, J=6.6Hz), 0.84 (3H, d, J=6.6Hz).
IR (KBr): 1752, 1660, 1605, 1545, 1494, 1471 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 510 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{22}H_{32}N_{5}O_{6}S_{2}: 510.1845, Encontrado: 510.1846 [M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{22}H_{31}N_{5}O_{6}S_{2}\cdot13/7H_{2}O
Calculado para: C,48.65% H,6.44% N,12.90% S,11.81%
Encontrado: C,48.92% H,6.29% N,12.60% S,12.04%
Ejemplo 67 Ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid
150
(1) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobencilcarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(p-nitrobencilcarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (265.2 mg, 0.63 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 62) en dimetilformamida (14 ml) se añadió acetato de hidrazina (76.4 mg, 0.5 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 0.5 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (390 mg, 0.66 mmol) en acetonitrilo (19 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.44 ml, 2.5 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: tolueno:acetonitrilo (2:3)) para dar p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobencilcarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (268.4 mg, rendimiento 59%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (4H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 6.45 (1H, s), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.37 (1H, br s), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 5.21 (2H, s), 4.48 (1H, t, J=7.8Hz), 4.46 (1H, t, J=7.8Hz), 4.35-4.20 (5H, m), 4.03 (2H, dd, J=7.8, 4.9Hz), 3.29 (1H, dd, J=6.2, 2.5Hz), 3.22 (1H, dq, J=8.9, 7.3Hz), 1.80 (1H, d, J=4.4Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.27 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid
p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-1-[4-(p-nitrobencilcarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (660 mg, 0.89 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 67(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (606 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow
acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 6% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow 13% acetonitrilo en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico acid (123 mg, rendimiento 34%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 6.85 (1H, s), 4.54 (2H, t, J= 8.1 Hz), 4.38-4.30 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.25 (1H, dd, J= 8.9, 2.5 Hz), 4.07 (2H, s), 4.02 (2H, dd, J= 8.1, 4.0 Hz), 3.44 (1H, dd, J= 6.3, 2.5 Hz), 3.25 (1H, dq, J= 8.9, 7.3 Hz), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.20 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3362.3, 1756.8, 1589.1, 1527.3, 1469.5, 1386.6, 1309.4, 1286.3, 1259.3 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 411 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{17}H_{23}N_{4}O_{4}S_{2}: 411.4161, Encontrado: 411.1173 [M+H]^{+}
Ejemplo 68 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
151
(1) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (441 mg, 1.39 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 63) en dimetilformamida (13 ml) se añadió acetato de hidrazina (154 mg, 1.67 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (993 mg, 1.67 mmol) en acetonitrilo (26 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.97 ml, 5.56 mmol). La mezcla se agitó durante 30 minutos mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo) para dar p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (307 mg, rendimiento 53%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 6.45 (1H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.26 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.48 (2H, t, J= 8.0 Hz), 4.43-4.18 (5H, m), 4.09-3.99 (2H, m), 4.09-3.99 (2H, m), 3.69 (3H, s), 3.29 (1H, dd, J= 6.7, 2.7 Hz), 3.21 (1H, dq, J= 9.0, 7.3 Hz), 1.38 (3H, d, J= 6.1 Hz), 1.25 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (307 mg, 0.52 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 68(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (15 ml) y agua destilada (15 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (307 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (44 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 6% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico la sal de sodio del ácido (135 mg, rendimiento 53%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 6.59 (1H, s), 4.51 (2H, t, J= 8.1 Hz), 4.38-4.29 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.2 Hz), 4.20 (1H, dd, J= 9.1, 2.5 Hz), 4.19 (2H, s), 4.05-3.98 (2H, m), 3.68 (3H, s), 3.43 (1H, dd, J= 6.2, 2.4 Hz), 3.25 (1H, dq, J= 9.1, 7.4 Hz), 1.30 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.20 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3355.5, 1748.2, 1725.1, 1600.6, 1525.4, 1470.5, 1395.2, 1311.4, 1290.1, 1254.5 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 513 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{19}H_{23}N_{4}O_{5}S_{2}Na_{2}: 513.0855, Encontrado: 513.0850 [M+Na]^{+}
Ejemplo 69 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
152 
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(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (698 mg, 2.01 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 64) en dimetilformamida (20 ml) se añadió acetato de hidrazina (222 mg, 2.41 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.43 g, 2.41 mmol) en acetonitrilo (40 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.40 ml, 8.94 mmol). La mezcla se agitó durante 2.5 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (20:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (851 mg, rendimiento 65%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.81 (2H, d, J= 7.3 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.56-7.38 (3H, m), 6.79 (1H, bs), 6.52 (1H, s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.53 (2H, dd, J= 5.3, 2.9 Hz), 4.47 (2H, t, J= 8.3 Hz), 4.33-4.22 (3H, m), 4.10-3.95 (2H, m), 3.28 (1H, dd, J= 6.7, 2.6 Hz), 3.19 (1H, dq, J = 7.9, 6.4 Hz), 1.37 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.26 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (851 mg, 1.31 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 69(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (40 ml) y agua destilada (40 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (851 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (110 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow
acetonitrilo 6% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (144 mg, rendimiento 20%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.81 (2H, d, J= 7.4 Hz), 7.70-7.55 (3H, m), 6.62 (1H, d, J= 8.6 Hz), 4.52 (2H, t, J= 7.9 Hz), 4.47 (2H, s), 4.37-4.28 (1H, m), 4.24 (1H, quint., J= 6.2 Hz), 4.19 (1H, dd, J= 8.8, 2.2 Hz), 4.05-3.97 (2H, m), 3.43 (1H, dd, J= 6.2, 2.2 Hz), 3.26 (1H, dq, J= 8.8, 7.2 Hz), 1.29 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.19 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3336.2, 1750.2, 1645.9, 1601.6, 1526.4, 1488.8, 1470.5, 1396.2, 1308.5, 1294.0 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 537 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{24}H_{26}N_{4}O_{5}S_{2}Na: 537.1243, Encontrado: 537.1246 [M+H]^{+}
Ejemplo 70 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
153
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1.00 g, 2.68 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 65) en dimetilformamida (30 ml) se añadió acetato de hidrazina (296 mg, 3.21 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.75 g, 2.94 mmol) en acetonitrilo (60 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.87 ml, 10.7 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: hexano: acetato de etilo (1:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.13 g, rendimiento 61%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.83 (2H, d, J= 7.5 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.60-7.43 (3H, m), 6.33 (1H, s), 5.58 (1H, br s), 5.51 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.26 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.48 (2H, t, J= 7.8 Hz), 4.44 (2H, t, J= 7.8 Hz), 4.36-4.18 (3H, m), 4.13 (1H, quint., J= 7.2 Hz), 4.08 (1H, dd, J= 12.7, 6.0 Hz), 4.01 (1H, dd, J= 8.6, 5.6 Hz), 3.94 (1H, dd, J= 8.6, 5.6 Hz), 3.30 (1H, dd, J= 6.7, 2.6 Hz), 3.21 (1H, dq, J = 8.9, 7.4 Hz), 1.37 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.23 (3H, dd, J= 7.2, 1.2 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato (1.13 g, 1.65 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 70(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (55 ml) y agua destilada (55 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (1.13 g) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (139 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow 16% acetonitrilo en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 20% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico la sal de sodio del ácido (627 mg, rendimiento 66%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.71-7.68 (3H, m), 7.61-7.52 (2H, m), 6.52 (1H, s), 4.35-4.18 (5H, m que incluye 4.22 (1H, dd, J= 9.1, 2.4 Hz)), 4.12 (2H, s), 3.78-3.65 (2H, m), 3.36 (1H, dd, J= 6.2, 2.4 Hz), 3.23 (1H, dq, J= 8.8, 7.2 Hz), 1.31 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.21 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3293.8, 1748.2, 1597.7, 1528.3, 1470.5, 1447.3, 1397.2, 1314.3 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 573 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{23}H_{26}N_{4}O_{5}S_{2}Na: 573.0093, Encontrado: 573.0911 [M+H]^{+}
Ejemplo 71 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(Tiophene-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
154
(1) p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofen-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(tiofen-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (490 mg, 1.52 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 66) en dimetilformamida (15 ml) se añadió acetato de hidrazina (169 mg, 1.83 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de p-nitrobencilo (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.09 g, 1.83 mmol) en acetonitrilo (30 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.06 ml, 0.68 mmol). La mezcla se agitó durante 2.5 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofen-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (997 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J= 8.0 Hz), 8.02 (2H, s), 7.66 (2H, d, J= 8.0 Hz), 7.47 (1H, d, J= 5.2 Hz), 7.07 (1H, d, J= 4.2 Hz), 6.55 (1H, s), 5.50 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.26 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.67-4.55 (2H, m), 4.51 (2H, d, J= 5.3 Hz), 4.35-4.22 (2H, m), 4.22-4.03 (3H, m), 3.29 (1H, dd, J= 6.8, 2.6 Hz), 3.18 (1H, dq, J = 9.0, 7.5 Hz), 1.37 (3H, d, J= 6.3 Hz), 1.25 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofen-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofen-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (997 mg, 1.52 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 71(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (35 ml) y agua destilada (35 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (997 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (128 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 20% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofen-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico la sal de sodio del ácido (287 mg, rendimiento 35%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.73 (2H, d, J= 2.7 Hz), 7.19 (1H, t, J= 4.4 Hz), 6.59 (1H, d, J= 0.7 Hz), 4.49 (2H, t, J= 7.5 Hz), 4.43 (2H, s), 4.35-4.27 (1H, m), 4.24 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.18 (1H, dd, J= 8.3, 2.4 Hz), 3.99 (1H, t, J= 4.7 Hz), 3.97 (1H, t, J= 4.7 Hz), 3.42 (1H, dd, J= 6.3, 2.4 Hz), 3.22 (1H, quint., J= 8.3Hz), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.18 (3H, d, J= 7.1 Hz).
IR (KBr): 3324.7, 1749.1, 1599.7, 1530.2, 1469.5, 1418.4, 1396.2 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 521 [M-Na+2H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{22}H_{25}N_{4}O_{5}S_{3}: 521.0942, Encontrado: 521.0992 [M-Na+2H]^{+}
Ejemplo 72 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
155
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (341 mg, 1.12 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 67) en dimetilformamida (10 ml) se añadió acetato de hidrazina (123 mg, 1.34 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (797 mg, 1.34 mmol) en acetonitrilo (20 ml) se añadió gota a gota a la mezcla resultante en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.78 ml, 4.48 mmol). La mezcla se agitó durante 3 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (641 mg, rendimiento 89%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J= 7.8 Hz), 7.66 (2H, d, J= 7.8 Hz), 7.45 (1H, s), 7.13 (1H, d, J= 3.5 Hz), 6.53 (1H, s), 6.49 (1H, d, J= 5.1 Hz), 5.48 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.26 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.60-4.40 (4H, m que incluye 4.51 (2H, d, J= 5.6 Hz)), 4.35-4.20 (2H, m), 4.20-4.00 (3H, m), 3.29 (1H, dd, J= 6.9, 2.5 Hz), 3.19 (1H, dq, J = 9.3, 7.3 Hz), 1.37 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.26 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (640 mg, 1.00 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 72(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (32 ml) y agua destilada (32 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (640 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (84 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 6% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (218 mg, rendimiento 41%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.69 (1H, dd, J= 1.7, 0.8 Hz), 7.19 (1H, dd, J= 3.6, 0.7 Hz), 6.64 (1H, dd, J= 3.6, 1.7 Hz), 4.51 (2H, t, J= 8.2 Hz), 4.44 (2H, s), 4.38-4.28 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.19 (1H, dd, J= 8.9, 2.2 Hz), 4.02 (1H, dd, J= 5.0, 3.2 Hz), 4.00 (1H, dd, J= 5.0, 2.9 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 6.3, 2.5 Hz), 3.24 (1H, dq, J= 8.9, 7.1Hz),1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.19 (3H, d, J= 7.1 Hz).
IR (KBr): 3367.1, 1749.1, 1653.7, 1594.8, 1524.5, 1472.4, 1395.2 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 505 [M-Na+2H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{22}H_{25}N_{4}O_{6}S_{2}: 505.1216, Encontrado: 505.1208 [M-Na+2H]^{+}
Ejemplo 73 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
156
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (599 mg, 1.60 mmol) obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 68 en dimetilformamida (18 ml) se añadió acetato de hidrazina (177 mg, 1.92 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.14 g, 1.92 mmol) en acetonitrilo (36 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.11 ml, 6.40 mmol). La mezcla se agitó durante 30 minutos mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo) para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (640 mg, rendimiento 59%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.88 (2H, dd, J= 5.5, 3.1 Hz), 7.73 (2H, dd, J= 5.5, 3.1 Hz), 7.65 (2H, d, J= 8.7 Hz), 6.41 (1H, s), 5.49 (1H, d, J= 13.7 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.7 Hz), 4.80 (2H, s), 4.46 (1H, t, J= 8.1 Hz), 4.43 (1H, t, J= 8.1 Hz), 4.32-4.18 (3H, m, que incluye 4.24 (1H, dd, J= 9.2, 2.4 Hz)), 4.02 (1H, dd, J= 5.5, 2.8 Hz), 4.00 (1H, dd, J= 5.5, 2.8 Hz), 3.26 (1H, dd, J= 6.9, 2.5 Hz), 3.19 (1H, dq, J = 9.2, 7.3 Hz), 1.38 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.25 (3H, dd, J= 7.3, 2.1 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (640 mg, 0.95 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 73(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (32 ml) y agua destilada (32 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (640 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (80 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 6% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 8% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 10% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 5% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 20% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (202 mg, rendimiento 38%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.90-7.78 (4H, m), 6.56 (1H, d, J= 2.7 Hz), 4.70 (2H, s), 4.43 (1H, t, J= 7.9 Hz), 4.42 (1H, t, J= 7.9 Hz), 4.31-4.19 (2H, m que incluye 4.24 (1H, quint., J= 6.3 Hz)), 4.17 (1H, dd, J= 8.7, 2.0 Hz), 3.94 (1H, t, J = 7.9 Hz), 3.92 (1H, t, J = 7.9 Hz), 3.18 (1H, dq, J= 8.7, 7.2 Hz), 1.29 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.15 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3409.5, 1768.4, 1750.1, 1717.3, 1601.6, 1528.3, 1425.1, 1393.3, 1313.3 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 563 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{25}H_{23}N_{4}O_{6}S_{2}Na_{2}: 585.0864, Encontrado: 585.0865 [M+Na]^{+}
Ejemplo 74 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
157
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (238 mg, 0.73 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 69) en dimetilformamida (7 ml) se añadió acetato de hidrazina (81 mg, 0.88 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (523 mg, 0.88 mmol) en acetonitrilo (14 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (0.51 ml, 2.92 mmol). La mezcla se agitó durante 2 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con ácido clorhídrico 0.5 M, una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (20:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (211 mg, rendimiento 46%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.66 (2H, d, J= 8.7 Hz), 6.42 (1H, s), 5.50 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.25 (1H, d, J= 13.8 Hz), 4.61 (2H, s), 4.46 (1H, t, J= 8.0 Hz), 4.45 (1H, t, J= 8.0 Hz), 4.32-4.18 (3H, m, que incluye 4.25 (1H, dd, J= 9.1, 2.3 Hz)), 4.02 (1H, t, J= 4.8 Hz), 4.00 (1H, dd, J= 4.8, 3.7 Hz), 3.28 (1H, dd, J= 6.9, 2.5 Hz), 3.20 (1H, dq, J = 9.1, 7.3 Hz), 2.76 (4H, s), 1.38 (3H, d, J= 6.2 Hz), 1.27 (3H, d, J= 7.3 Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (211 mg, 0.34 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 74(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (10 ml) y agua destilada (10 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 7.5% (211 mg) en un baño de agua (35ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (29 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente :
agua destilada \rightarrow acetonitrilo 2% en agua destilada \rightarrow acetonitrilo 4% en agua destilada) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (115 mg, rendimiento 66%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 6.59 (1H, s), 4.57 (2H, s), 4.50 (2H, t, J= 8.1 Hz), 4.38-4.29 (1H, m), 4.25 (1H, quint., J= 6.3 Hz), 4.20 (1H, dd, J= 8.7, 2.3 Hz), 4.01 (1H, t, J = 4.2 Hz), 3.99 (1H, t, J = 4.2 Hz), 3.43 (1H, dd, J= 6.3, 2.4 Hz), 3.24 (1H, dq, J= 8.7, 7.4 Hz), 2.48 (4H, s), 1.30 (3H, d, J= 6.4 Hz), 1.19 (3H, d, J= 7.2 Hz).
IR (KBr): 3381.6, 1749.1, 1794.8, 1601.6, 1526.4, 1470.5, 1424.2, 1399.1, 1312.3, 1295.0, 1168.7 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 515 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{21}H_{24}N_{4}O_{6}S_{2}Na: 515.1035, Encontrado: 515.1034 [M+H]^{+}
Ejemplo 75 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
158
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (330 mg, 1.17 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 71) en dimetilformamida (17 ml) se añadió acetato de hidrazina (130 mg, 1.41 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (696 mg, 1.17 mmol) en acetonitrilo (35 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (815 \mul, 4.68 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo: metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (605 mg, rendimiento 89%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.71 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.9Hz), 5.25 (1H, d, J=13.9Hz), 4.54-4.47 (4H, m), 4.29-4.12 (2H, m), 4.26 (1H, dd, J=2.2, 9.5Hz), 4.09 (2H, t, J=8.8Hz), 4.07 (2H, t, J=8.8Hz), 3.29 (1H, dd, J=2.2, 6.6Hz), 3.19 (1H, dq, J=9.5, 7.3Hz), 2.37-2.27 (2H, m), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.26 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (600 mg, 1.03 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 75(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (30 ml) y agua destilada (30 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (600 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (86 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (9:1)), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (278 mg, rendimiento 58%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.80 (1H, s), 4.59 (2H, t, J=8.3Hz), 4.45 (2H, t, J=7.8Hz), 4.35-4.27 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.2, 6.4Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.1Hz), 4.16 (2H, t, J=7.8Hz), 4.08 (2H, dt, J=9.2, 4.6Hz), 3.43 (1H, dd, J=2.4, 6.2Hz), 3.24 (1H, dq, J=9.1, 7.2Hz), 2.39 (1H, quintet, J=7.8Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1750, 1619, 1468, 1443, 1383 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 493 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{20}H_{23}N_{4}O_{6}SNa_{2}: 493.1133, Encontrado: 493.1167 [M+Na]^{+}
Análisis elemental: C_{20}H_{23}N_{4}O_{6}SNa\cdotH_{2}O
Calculado para: C,49.18% H,5.16% N,11.47% S,6.56%
Encontrado: C,49.04% H,5.46% N,11.57% S,6.29%
Ejemplo 76 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
159
(1) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (260 mg, 0.835 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 72) en dimetilformamida (13 ml) se añadió acetato de hidrazina (92 mg, 1.00 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (496 mg, 0.835 mmol) en acetonitrilo (25 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (582 \mul, 3.34 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo:metanol (9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (552 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.73 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.2Hz), 5.25 (1H, d, J=13.2Hz), 4.52 (2H, q, J=8.1Hz), 4.31-4.20 (3H, m), 4.13-4.06 (2H, m), 3.76-3.65 (8H, br s), 3.29 (1H, dd, J2.5,7.0Hz), 3.19 (1H, dq, J=9.5, 7.3Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.26 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (550 mg, 0.835 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 76(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (28 ml) y agua destilada (28 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (550 mg) a temperatura ambiente durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (70 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (9:1)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (193 mg, rendimiento 46%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.77 (1H, s), 4.60 (2H, t, J=8.2Hz), 4.36-4.28 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.1, 6.3Hz), 4.21 (1H, dd, J=2.2, 9.0Hz), 4.09 (1H, dt, J=8.9, 4.5Hz), 3.90-3.66 (8H, m), 3.43 (1H, dd, J=2.2, 6.1Hz), 3.25 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.30 (3H, d, J=6.3Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1750, 1618, 1459, 1443, 1385, 1304 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 523 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{21}H_{25}N_{4}O_{7}SNa_{2}: 523.1240, Encontrado: 523.1238 [M+Na]^{+}
Análisis elemental: C_{21}H_{25}N_{4}O_{7}SNa/H_{2}O
Calculado para: C,48.64% H,5.25% N,10.81% S,6.18%
Encontrado: C,48.45% H,5.41% N,10.45% S,5.55%
Ejemplo 77 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
160
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il)azetidina (330 mg, 1.06 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 73) en dimetilformamida (17 ml) se añadió acetato de hidrazina (117 mg, 1.27 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (630 mg, 1.06 mmol) en acetonitrilo (32 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (739 \mul, 4.24 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo: metanol (95:5 \rightarrow 9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (550 mg, rendimiento 85%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.74 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 5.55 (1H, d, J=13.2Hz), 5.25 (1H, d, J=13.2Hz), 4.71-4.63 (1H, m), 4.51 (2H, q, J=8.1Hz), 4.38-4.20 (6H, m), 4.10-4.05 (2H, m), 4.04-3.98 (1H, m), 3.32 (3H, s), 3.29 (1H, dd, J=2.2, 6.6Hz), 3.20 (1H, dq, J=9.2, 7.3Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.26 (3H, d, J=7.3Hz).
(2) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (550 mg, 0.896 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 77(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (28 ml) y agua destilada (28 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (550 mg) a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (75 mg), ácido acético y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (92:8)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (276 mg, rendimiento 62%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.84 (1H, s), 4.66 (1H, dd, J=6.4, 10.3Hz), 4.60 (2H, t, J=8.3Hz), 4.46-4.30 (4H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.2, 6.4Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.0Hz), 4.09 (2H, quintet, J=4.5Hz), 4.04-3.98 (1H, m), 3.43 (1H, dd, J=2.4, 6.2Hz), 3.37 (3H, s), 3.25 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1750, 1622, 1457, 1385 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 523 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{21}H_{25}N_{4}O_{7}SNa_{2}: 523.1239, Encontrado: 523.1227 [M+Na]^{+}
Análisis elemental: C_{21}H_{25}N_{4}O_{7}SNa\cdot4/3H_{2}O
Calculado para: C,48.09% H,5.32% N,10.68% S,6.11%
Encontrado: C,48.07% H,5.61% N,10.78% S,6.03%
Ejemplo 78 Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
161
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(t-butildifenilsililoxi)-azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[3-(t-butildifenilsililoxi)-azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (860 mg, 1.61 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 74) en dimetilformamida (43 ml) se añadió acetato de hidrazina (178 mg, 1.93 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (957 mg, 1.61 mmol) en acetonitrilo (48 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (1.12 ml, 6.44 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (95:5)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(t-butildifenilsililoxi)-azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.20 g, rendimiento 89%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.69 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.64-7.59 (4H, m), 7.47-7.36 (6H, m), 5.51 (1H, d, J=13.5Hz), 5.25 (1H, d, J=13.5Hz), 4.65-4.59 (1H, m), 4.69-4.50 (1H, m), 4.50 (2H, q, J=8.1Hz), 4.39-4.32 (1H, m), 4.30-4.20 (2H, m), 4.26 (1H, dd, J=2.9, 9.5Hz), 4.18-3.99 (4H, m), 3.29 (1H, dd, J=2.9, 7.3Hz), 3.20 (1H, dq, J=9.5, 7.3Hz), 1.38 (3H, d, J=6.5Hz), 1.27 (3H, d, J=7.3Hz), 1.06 (9H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[3-(t-butildifenilsililoxi)-azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1.20 g, 1.43 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 78(1)) en tetrahidrofurano (60 ml) a una solución de ácido acético (240 \mul, 4.30 mmol) y fluoruro de tetrabutilamonio 1 M en tetrahidrofurano (4.30 ml, 4.30 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 días. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente : acetato de etilo: metanol(95:5 \rightarrow 9:1)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (325 mg, rendimiento 38%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.74 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.25 (1H, d, J=13.7Hz), 4.80-4.68 (2H, m), 4.50 (2H, q, J=8.0Hz), 4.43-4.29 (2H, m), 4.29-4.20 (3H, m), 4.13-4.05 (2H, m), 4.02-3.95 (1H, m), 3.29 (1H, dd, J=2.7, 6.9Hz), 3.20 (1H, dq, J=9.3, 7.3Hz), 1.38 (3H, d, J=6.3Hz), 1.26 (3H, d, J=7.3Hz).
(3) Sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (320 mg, 0.534 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 78(2)) en una mezcla de tetrahidrofurano (16 ml) y agua destilada (16 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (320 mg) a temperatura ambiente durante 5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (45 mg), acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (9:1)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, la sal de sodio del ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (144 mg, rendimiento 56%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O, TSP): \delta (ppm) 7.84 (1H, s), 4.75-4.66 (2H, m), 4.60 (2H, t, J=8.2Hz), 4.44-4.38 (1H, m), 4.35-4.23 (3H, m), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.0Hz), 4.09 (2H, dt, J=8.9, 4.5Hz), 3.98-3.93 (1H, m), 3.43 (1H, dd, J=2.4, 6.2Hz), 3.24 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1750, 1621, 1470, 1385, 1294, 1277 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 509 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para 509.1083, Encontrado: 509.1102 [M+Na]^{+}
Análisis elemental:
Calculado para: C,49.38% H,4.77% N,11.52% S,6.59%
Encontrado: C,46.25% H,6.23% N,11.07% S,5.90%
Ejemplo 79 Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
162
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (190 mg, 0.383 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 75) en dimetilformamida (10 ml) se añadió acetato de hidrazina (42 mg, 0.460 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (228 mg, 0.383 mmol) en acetonitrilo (11 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (268 \mul, 1.53 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo:metanol (93:7)) para dar (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (257 mg, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (4H, d, J=8.8Hz), 7.75 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.34-5.31 (1H, m), 5.25 (1H, d, J=13.7Hz), 5.21 (2H, s), 4.87-4.82 (1H, m), 4.60-4.42 (2H, m), 4.49 (2H, q, J=8.8Hz), 4.38-4.30 (1H, m), 4.28-4.20 (3H, m), 4.06 (2H, dt, J=8.8, 4.9Hz), 4.00-3.93 (1H, m), 3.29 (1H, dd, J=2.9, 6.8Hz), 3.18 (1H, dq, J=9.0, 6.8Hz), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.26 (3H, d, J=6.8Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidin-1-ilcarbonil]-1,3-oxazol-2-il}aze-
tidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (250 mg, 0.321 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 79(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (13 ml) y agua destilada (13 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (250 mg) a temperatura ambiente durante 3.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (82:18)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (68 mg, rendimiento 46%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.88 (1H, s), 4.60 (2H, t, J=8.2Hz), 4.57-4.49 (2H, m), 4.35-4.16 (6H, m), 4.08 (2H, dt, J=8.6, 4.5Hz), 3.44 (1H, dd, J=2.5, 6.2Hz), 3.24 (1H, dq, J=9.0, 7.2Hz), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1754, 1624, 1457, 1380 cm^{-1}
Espectro de masas (ESI^{+}): m/z: 486 [M+Na]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{20}H_{26}N_{5}O_{6}S: 464.1603, Encontrado: 464.1609
[M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{20}H_{25}N_{5}O_{6}S\cdot10/3H_{2}O
Calculado para: C,45.85% H,5.69% N,13.62% S,6.18%
Encontrado: C,45.88% H,6.10% N,13.38% S,6.12%
Ejemplo 80 Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
163
(1) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (530 mg, 1.08 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 76) en dimetilformamida (27 ml) se añadió acetato de hidrazina (120 mg, 1.30 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (642 mg, 1.08 mmol) en acetonitrilo (32 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (753 \mul, 4.32 mmol). La mezcla se agitó durante toda la noche mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (95:5)) para dar (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (652 mg, rendimiento 76%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (4H, d, J=8.8Hz), 7.77 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53 (2H, t, J=8.8Hz), 6.82-6.78 (1H, m), 5.51 (1H, d, J=13.6Hz), 5.25 (1H, d, J=13.6Hz), 5.30-5.18 (2H, m), 4.66-4.58 (1H, m), 4.57-4.46 (2H, m), 4.11-4.20 (2H, m), 4.26 (1H, dd, J=2.2, 8.8Hz), 4.14-4.04 (2H, m), 3.82-3.74 (1H, m), 3.64-3.55 (2H, m), 3.46-3.40 (1H, m), 3.29 (1H, dd, J=2.2, 6.6Hz), 3.20 (1H, dq, J=8.8, 7.2Hz), 2.30-2.20 (1H, m), 2.10-1.92 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=6.6Hz), 1.27 (3H, d, J=7.2Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl]-1,3-oxazol-2-il}aze-
tidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (650 mg, 0.821 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 80(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (33 ml) y agua destilada (33 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (650 mg) a temperatura ambiente durante 4.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (76:24)), y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (129 mg, rendimiento 33%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.94 (1H, s), 4.68-4.60 (1H, m), 4.60 (2H, t, J=8.2Hz), 4.35-4.28 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.2, 6.4Hz), 4.19 (1H, dd, J=2.4, 9.1Hz), 4.09 (2H, dt, J=8.9, 4.4Hz), 3.63 (1H, dd, J=7.0, 12.6Hz), 3.58 (1H, dt, J=12.0, 7.6Hz), 3.50-2.98 (3H, m), 3.24 (1H, dq, J=9.1, 7.2Hz), 2.49-2.39 (1H, m), 2.22-2.13 (1H, m), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1755, 1626, 1543, 1386 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 478 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): calculado para C_{21}H_{28}N_{5}O_{6}S: 478.1761, Encontrado: 478.1768 [M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{21}H_{27}N_{5}O_{6}S\cdot3H_{2}O
Calculado para: C,47.45% H,6.26% N,13.17% S,6.06%
Encontrado: C,47.33% H,5.52% N,12.9% S,5.97%
Ejemplo 81 Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
164
(1) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-[4-((3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (280 mg, 0.572 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 77) en dimetilformamida (14 ml) se añadió acetato de hidrazina (63 mg, 0.686 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió gota a gota a la mezcla resultante una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (340 mg, 0.572 mmol) en acetonitrilo (17 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, seguido de la adición de diisopropiletilamina (399 \mul, 2.29 mmol). La mezcla se agitó durante 4.5 horas mientras se hacía aumentar la temperatura de forma gradual hasta temperatura ambiente. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa de acetato de etilo se separó, se lavó con una solución de cloruro de sodio 10% y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice (eluyente: acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (95:5)) para dar (1R,5S,6S)-2-1-[4-((3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (323 mg, rendimiento 73%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 8.22 (2H, dd, J=8.8, 12.7Hz), 7.77 (1H, s), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (2H, dd, J=8.8, 12.7Hz), 6.82-6.78 (1H, bt, J=6.8Hz), 5.51 (1H, d, J=13.7Hz), 5.23 (1H, d, J=13.7Hz), 5.25-5.19 (2H, m), 4.66-4.58 (1H, m), 4.56-4.49 (2H, m), 4.30-4.21 (3H, m), 4.13-4.04 (2H, m), 3.80-3.74 (1H, m), 3.64-3.53 (2H, m), 3.44-3.39 (1H, m), 3.29 (1H, dd, J=2.9, 6.8Hz), 3.20 (1H, dq, J=7.8,7.8Hz), 2.30-2.20 (1H, m), 2.10-1.94 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=5.9Hz), 1.27 (3H, d, J=7.8Hz).
(2) Ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico
Se sometió (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (320 mg, 0.404 mmol) (obtenido tal como se describe en el Ejemplo 81(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (16 ml) y agua destilada (16 ml) a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (320 mg) a temperatura ambiente durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y al filtrado se añadieron acetato de etilo y agua destilada. La mezcla resultante se agitó en un embudo de separación y la capa acuosa se separó y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna Cosmosil (eluyente : agua destilada \rightarrow agua destilada:acetonitrilo (79:21)) y el eluato se liofilizó para dar el compuesto deseado, el ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoíl)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico (88 mg, rendimiento 46%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, D_{2}O): \delta (ppm) 7.94 (1H, s), 4.67-4.60 (1H, m), 4.60 (2H, t, J=8.3Hz), 4.35-4.28 (1H, m), 4.25 (1H, dq, J=6.2, 6.4Hz), 4.20 (1H, dd, J=2.4, 9.1Hz), 4.08 (2H, dt, J=8.8, 4.5Hz), 3.63 (1H, dd, J=7.0, 12.6Hz), 3.57 (1H, dt, J=12.0, 7.6Hz), 3.49-3.37 (3H, m), 3.24 (1H, dq, J=9.1, 7.2Hz), 2.49-2.38 (1H, m), 2.22-2.13 (1H,m), 1.30 (3H, d, J=6.4Hz), 1.19 (3H, d, J=7.2Hz).
IR (KBr): 1758, 1625, 1543, 1385 cm^{-1}
Espectro de masas (ESI^{+}): m/z: 478 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (ESI^{+}): calculado para C_{21}H_{28}N_{5}O_{6}S: 478.1760, Encontrado: 478.1739
[M+H]^{+}
Análisis elemental: C_{21}H_{27}N_{5}O_{6}S\cdot3H_{2}O
Calculado para: C,47.45% H,6.26% N,13.17% S,6.03%
Encontrado: C,47.30% H,5.88% N,13.14% S,6.01%
Ejemplo de Referencia 1
3-acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
165
(1) Éster etílico del ácido (3-hidroxiazetidina-1-carbotioil)carbámico
Una solución de N-benzhidril-3-hidroxiazetidina (20 g, 83.6 mmol) en metanol (600 ml) se sometió a hidrogenación catalítica en presencia de paladio sobre carbono 10% (20 g) en un baño de agua (50ºC) bajo una presión de hidrógeno de 1 atmósfera durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró para eliminar el catalizador y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua destilada. La capa orgánica se separó y se extrajo de forma adicional con agua destilada. Las capas acuosas se concentraron bajo presión reducida y se secaron al vacío para dar el producto en la forma de un aceite de color marrón. A una solución del producto en una mezcla de tetrahidrofurano (180 ml) y agua destilada (60 ml) se añadió isotiocianato de etoxicarbonilo (19.7 ml, 167 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla durante 10 minutos en el baño de hielo, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar el éster etílico del ácido (3-hidroxiazetidina-1-carbotioil)carbámico (7.4 g, rendimiento 43%) en la forma de un aceite de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7.63 (1H, br s), 4.80-4.50 (3H, m), 4.40-4.00 (4H, m que incluye 2H, q, a 4.18, J=7.3Hz), 2.28 (1H, br s), 1.29 (3H, t, 7.3Hz).
(2) 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de éster etílico del ácido (3-hidroxiazetidina-1-carbotioil)carbámico (14.4 g, 70.5 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 1(1)) en una mezcla de etanol (72 ml) y agua destilada (72 ml) se añadió hidróxido de sodio (14.1 g, 353 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 16 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. Se añadió a la mezcla de reacción cloruro de hidrógeno gaseoso 4N en dioxano (88 ml) en un baño de hielo, seguido de la adición de 2-bromopiruvato de etilo (17.7 ml, 141 mmol) y trietilamina (19.8 ml, 141 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno :
acetonitrilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (8.5 g, rendimiento 53%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7.46 (1H, s), 4.88-4.78 (1H, m), 4.42-4.32 (4H, m), 4.02 (2H, ddd, J=10.3, 5.6, 1.5Hz), 2.05 (1H, br s), 1.37 (3H, t, 7.3Hz).
(3) 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (676 mg, 2.96 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 1(2)) en cloruro de metileno (20.5 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.28 ml, 3.63 mmol) y trietilamina (0.495 ml, 3.56 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol a la mezcla de reacción en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para dar 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (748 mg, rendimiento 82%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.52 (1H, s), 5.50-5.30 (1H, m), 4.51 (2H, dd, J=9.9, 6.7Hz), 4.37 (2H, q, J=7.1Hz), 4.32 (2H, dd, J=10.1, 3.7Hz), 3.09 (3H, s), 1.37 (3H, t, J=7.1Hz).
(4) 3-acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (742 mg, 2.42 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 1(3)) en dimetilformamida (37 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.11 g, 9.72 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 6 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1)
como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (494 mg, rendimiento 71%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.49 (1H, s), 4.58 (2H, t, J=8.3Hz), 4.50-4.30 (3H, m, que incluye 2H, q, a 4.36, J=7.2Hz), 4.03 (2H, dd, J=8.3, 5.7Hz), 2.36 (3H, s), 1.37 (3H, t, J=7.2Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 287 [M+H]^{+}
\newpage
Ejemplo de Referencia 2
3-Acetiltio-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina 
\vskip1.000000\baselineskip
166
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (8.5 g, 37.2 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 1(2)) en dimetilformamida (255 ml) se añadieron cloruro t-butildifenilsililo (19.4 ml, 74.5 mmol) e imidazol (5.07 g, 74.5 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en un baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol (2.59 ml) a la mezcla de reacción en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (14.85 g, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.64-7.58 (4H, m), 7.50-7.36 (6H, m), 7.43 (1H, s), 4.79-4.50 (1H, m), 4.35 (2H, q, J=7.3Hz), 4.13 (2H, dd, J=9.0, 6.6Hz), 4.06 (2H. dd, J=9.0, 5.1Hz), 1.36 (3H, t, J=7.1Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (5.0 g, 10.7 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml) se añadió gota a gota a una solución de hidruro de litio y aluminio (1.22 g, 32.1 mmol) en tetrahidrofurano anhidro (250 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla se agitó durante 1.5 horas bajo las mismas condiciones. Después de comprobar que la reacción se había completado, sulfato de magnesio decahidrato se añadió de forma gradual a la mezcla de reacción en un baño de hielo. Una vez hubo terminado la formación de espuma, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se añadió acetato de etilo de forma gradual a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3.88 g, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66-7.58 (4H, m), 7.50-7.38 (6H, m), 6.40 (1H, s), 4.78-4.70 (1H, m), 4.53 (2H, s), 4.10 (2H, dd, J=9.2, 6.6Hz), 4.01 (2H, ddd, J=9.2, 5.1, 1.3Hz), 2.24 (1H, br s), 1.06 (9H, s).
(3) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-formil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3.88 g, 9.15 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(2)) en cloruro de metileno anhidro (194 ml) se añadió dióxido de manganeso activado (19.4 g) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 7 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo
(3 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-formil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3.54 g, rendimiento 92%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 9.69 (1H, s), 7.64-7.59-(4H, m), 7.50-7.36 (7H, m), 4.80-4.72 (1H, m), 4.16 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.08 (2H, ddd, J=9.5, 5.1, 1.5Hz), 1.06 (9H, s).
(4) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-formil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3.5 g, 8.28 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(3)) en cloruro de metileno anhidro (21 ml) se añadieron t-butanol (105 ml) y una solución de 2-metil-2-buteno 2M en tetrahidrofurano (41.4 ml), seguido de la adición gota a gota de una solución de cloruro de sodio (1.88 g, 16.6 mmol) e dihidrogenofosfato de sodio (1.99 g, 16.6 mmol) en agua (21 ml) en un baño de hielo y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió a la mezcla de reacción ácido clorhídrico 1M a un pH entre 2 y 3. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se separó, se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo \rightarrow metanol en acetato de etilo 5% como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2.34 g, rendimiento 67%) en la forma de un jarabe de color marrón.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.62-7.56 (4H, m), 7.50 (1H, s), 7.49-7.36 (6H, m), 4.81-4.72 (1H, m), 4.16-4.08 (2H, m), 4.04 (2H, dd, J=9.5, 5.1Hz), 2.00 (1H, br s), 1.07 (9H, s).
(5) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (224.8 mg, 0.51 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en cloruro de metileno anhidro (11.2 ml) se añadieron cloruro de oxalilo (0.067 ml, 0.76 mmol) y una cantidad catalítica de dimetilformamida (0.022 ml) en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 2 horas y a continuación se concentró bajo presión reducida. El residuo se secó al vacío para dar el producto. A una solución del producto en diclorometano anhidro (11.2 ml) se añadieron alcohol p-nitrobencílico (157 mg, 1.0 mmol) y trietilamina (0.14 ml, 1.0 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (93 mg, rendimiento 32%) en la forma de un jarabe de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.64-7.56 (4H, m), 7.50 (1H, s), 7.48-7.36 (6H, m), 5.42 (2H, s), 4.79-4.72 (1H, m), 4.16 (2H, dd, J=8.8, 6.8Hz), 4.07 (2H, dd, J=8.8, 4.8Hz), 1.06 (9H, s).
(6) 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (93 mg, 0.16 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(5)) en tetrahidrofurano anhidro (4.7 ml) se añadieron ácido acético (0.028 ml, 0.49 mmol) y una solución de fluoruro de tetrabutilamonio 1M en tetrahidrofurano (0.48 ml, 0.48 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (2 : 1) como eluyente para dar 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (42.4 mg, rendimiento 81%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.59 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53 (1H, s), 5.40 (2H, s), 4.90-4.78 (1H, m), 4.39-(2H, dd, J=9.7, 7.2Hz), 4.03 (2H, dd, J=9.7, 5.1Hz), 2.28 (1H, d, J=6.2Hz).
(7) 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (648 mg, 1.93 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(6)) en cloruro de metileno (20 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.31 ml, 3.95 mmol) y trietilamina (0.55 ml, 3.95 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se recristalizó desde una mezcla de n-hexano y acetato de etilo para dar 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (789 mg, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.7Hz), 7.59 (1H, s), 7.59 (2H, d, J=8,7Hz), 5.50-5.40 (3H, m que incluye 1H, s a 5.44), 4.52 (2H, dd, J=10.3, 6.6Hz), 4.32 (2H, dd, J=10.3, 4.1Hz), 3.10 (3H, s).
(8) 3-Acetiltio-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (776 mg, 1.88 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(7)) en dimetilformamida (35 ml) se añadió tioacetato de potasio (860 mg, 7.53 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (90ºC) durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-p-ntrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (73.8 mg, rendimiento 11%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.6Hz), 7.59 (2H, d, J=8.6Hz), 7.55 (1H, s), 5.43 (2H, s), 4.59 (2H, t, J=8.5Hz), 4.50-4.40 (1H, m), 4.04 (2H, dd, J=8.5, 5.7Hz), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 3
3-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
167
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (5.85 g, 12.5 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (290 ml) se añadió una solución de cloruro de amonio-trimetilaluminio 0.67M en benceno (56.4 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó en un baño de agua (40ºC) durante 17 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (100 ml) y acetato de etilo (50 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de añadirle acetato de etilo, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (4.97 g, rendimiento 91%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66-7.58 (4H, m), 7.50-7.38 (7H, m), 6.99 (1H, bs), 5.48 (1H, br s), 4.80-4.72 (1H, m), 4.10 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.01 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 1.07 (9H, s).
(2) 1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (6.7 g, 15.3 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 3(1)) en tetrahidrofurano anhidro (200 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio 1.0 M en tetrahidrofurano (18.4 ml) en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo \rightarrow
metanol en acetato de etilo 10% como eluyente para dar 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2.78 g, rendimiento 91%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 7.05 (1H, br s), 5.47 (1H, br s), 4.90-4.80 (1H, m), 4.35 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 3.97 (2H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 2.31 (1H, d, J=9.6Hz).
(3) 1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (1.0 g, 5.02 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 3(2)) en una mezcla de cloruro de metileno (30 ml) y piridina (5 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.967 ml, 12.5 mmol) y trietilamina (1.75 ml, 12.5 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió metanol (0.405 ml) a la mezcla de reacción en un baño de hielo y a continuación se agitó la mezcla resultante a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se añadió al residuo éter de isopropilo, y la mezcla se filtró para dar 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (1.30 g, rendimiento 94%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.50 (1H, s), 6.99 (1H, br s), 5.60-5.40 (2H, m), 4.46 (2H, ddd, J=9.5, 6.6, 1.5Hz), 4.28 (2H, ddd, J=9.5, 4.4, 1.5Hz), 3.11 (1H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (3.04 g, 11.0 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 3(3)) en dimetilformamida (152 ml) se añadió tioacetato de potasio (7.5 g, 65.8 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 10 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo \rightarrow metanol en acetato de etilo 4% como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.97 g, rendimiento 70%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.46 (1H, s), 7.00 (1H, br s), 5.55 (1H, br s), 4.53 (2H, t, J=8.1Hz), 4.50-4.40 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J=8.1, 5.1Hz), 2.37 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 4
3-Acetiltio-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina
168
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (7.73 g, 16.6 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (370 ml) se añadió una solución de cloruro de amonio-trimetilaluminio 0.67M en benceno (75 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó en un baño de agua (50ºC) durante 17 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (100 ml) y acetato de etilo (50 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina (6.98 g, rendimiento 76%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7.64 (4H, m), 7.50-7.37 (6H, m), 7.20 (1H, s), 4.80-4.74 (1H, m), 4.13 (2H, dd, J=8.8, 6.8Hz), 4.04 (2H, dd, J=8.8, 4.9Hz), 1.07 (9H, s).
IR (KBr): 2230, 1535, 1465, 1310, 1114 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 420 [M+H]^{+}
(2) 1-(4-Ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2.36 g, 5.62 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 4(1)) en tetrahidrofurano anhidro (115 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio 1.0 M en tetrahidrofurano (6.7 ml, 6.7 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó en el baño de hielo durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para dar 1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (0.78 g, rendimiento 77%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.26 (1H, s), 4.92-4.86 (1H, m), 4.37 (2H, dd, J=9.8, 6.8Hz), 4.02 (2H, dd, J=9.8, 4.9Hz), 2.34 (1H, d, J=5.9Hz).
(3) 1-(4-Ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (0.78 g, 4.3 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 4(2)) en cloruro de metileno (40 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (1.0 ml, 12.9 mmol) y trietilamina (1.8 ml, 12.9 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol a la mezcla de reacción en un baño de hielo y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (1.12 g, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.31 (1H, s), 5.50-5.40 (1H, m), 4.50 (2H, dd, J=9.9, 6.6Hz), 4.31 (2H, dd, J=9.9, 4.4Hz), 3.11 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (1.12 g, 4.32 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 4(3)) en dimetilformamida (56 ml) se añadió tioacetato de potasio (3.89 g, 27.0 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidina (0.767 g, rendimiento 75%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.28 (1H, s), 4.57 (2H, t, J=8.3Hz), 4.50-4.40 (1H, m), 4.03 (2H, dd, J=8.3, 5.5Hz), 2.39 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 5
3-Acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
169
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1.07 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (25 ml) se añadió una solución de hidrocloruro de metilamina-trimetilaluminio en benceno 0.67M (3.21 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (25 ml) y acetato de etilo (50 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (479 mg, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.65-7.59 (4H, m), 7.50-7.34 (7H, m), 7.14 (1H, br s), 4.80-4.70 (1H, m), 4.09 (2H, t, J=8.8Hz), 4.00 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 2.95 (3H, d, J=5.1Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-N-Metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (4.74 g, 10.5 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 5(1)) en tetrahidrofurano anhidro (240 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio 1.0M en tetrahidrofurano (12.6 ml, 12.6 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2.10 g, rendimiento 96%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.34 (2H, s), 7.20 (1H, br s), 4.85-4.75 (1H, m), 4.31 (2H, dd, J=9.7, 6.4Hz), 3.94 (2H, dd, J=9.7, 5.5Hz), 3.10 (1H, br s), 2.96 (3H, d, J=5.1Hz).
Espectro de masas: 213 [M^{+}]
(3) 1-(4-N-Metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2.15 g, 10.1 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 5(2)) en cloruro de metileno (45 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (3.12 ml, 40.3 mmol) y trietilamina (7.04 ml, 50.5 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol a la mezcla de reacción en un baño de hielo y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (2.95 g, rendimiento 100%) en la forma de un sólido espumoso de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.44 (1H, s), 7.18 (1H, br s), 5.50-5.39 (1H, m), 4.45 (2H, dd, J=9.7, 6.6Hz), 4.26 (2H, dd, J=9.7, 4.3Hz), 3.11 (3H, s), 2.97 (3H, d, J=5.1Hz).
Espectro de masas (FAB^{+}): 292 [M+H]^{+}
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (3.0 g, 10.3 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 5(3)) en dimetilformamida (150 ml) se añadió tioacetato de potasio (7.07 g, 61.9 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo
(1 : 4 \rightarrow 1 : 10) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2.41 g, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.44 (1H, s), 7.18 (1H, br s), 4.53 (2H, t, J=8.0Hz), 4.50-4.40 (1H, m), 4.50-3.95 (2H, m), 2.95 (3H, d, J=6.0Hz), 2.38 (3H, s).
Espectro de masas (FAB^{+}): 272 [M+H]^{+}
Ejemplo de Referencia 6
3-Acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
170
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1.07 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (25 ml) se añadió una solución de hidrocloruro de dimetilamina - trimetilaluminio en benceno 0.67 M (3.21 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (50 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70-7.60 (4H, m), 7.52-7.40 (6H, m), 7.00 (1H, s), 4.79-4.70 (1H, m), 4.11 (2H, dd, J=9.5, 7.5Hz), 4.02 (2H, dd, J=9.5, 5.0Hz), 3.19 (3H, s), 3.05 (3H, s), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (5.13 g, 10.7 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 6(1)) en tetrahidrofurano anhidro (250 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0M (12.0 ml, 12.0 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2.42 g, rendimiento 100%) en la forma de un jarabe de color claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.03 (1H, s), 4.90-4.70 (1H, m), 4.32 (2H, t, J=8.2Hz), 3.95 (2H, dd, J=8.2, 4.5Hz), 3.20 (3H, br s), 3.05 (3H, br s), 2.85 (1H, br s).
Espectro de masas: 227 [M^{+}]
(3) 1-(4-N,N-Dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2.56 g, 10.7 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 6(2)) en cloruro de metileno (50 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (2.4 ml, 31.0 mmol) y trietilamina (7.4 ml, 53.1 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol a la mezcla de reacción en un baño de hielo y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (3.28 g, rendimiento 100%) en la forma de un aceite de color marrón.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.13 (1H, s), 5.50-5.38 (1H, m), 4.46 (2H, dd, J=9.7, 6.6Hz), 4.26 (2H, dd, J=9.7, 4.3Hz), 3.21 (3H, br s), 3.10 (3H, s), 3.07 (3H, br s).
Espectro de masas (FAB^{+}): 306 [M+H]^{+}
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (3.40 g, 11.1 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 6(3)) en dimetilformamida (170 ml) se añadió tioacetato de potasio (7.62 g, 66.7 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : n-hexano (4 : 1 \rightarrow 5 : 1 \rightarrow 7 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2.71 g, rendimiento 85%) en la forma de un jarabe de color marrón.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.09 (1H, s), 4.53 (2H, dd, J=9.0, 7.9Hz), 4.50-4.40 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J=9.0, 5.5Hz), 3.20 (3H, br s), 3.06 (3H, br s), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 7
3-Acetiltio-1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
171
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.0 g, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) se añadió una solución de hidrocloruro de etilamina - trimetilaluminio en benceno 0.67 M (6.42 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de añadirle acetato de etilo, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (5 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (997 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66-7.58 (4H, m), 7.50-7.37 (6H, m), 7.35 (1H, s), 7.14 (1H, br s), 4.80-4.76 (1H, m), 4.16-4.06 (2H, m), 4.01 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 3.43 (2H, dq, J=7.3, 5.6Hz), 1.22 (3H, t, J=7.3Hz), 1.07 (9H, s).
(2) 1-(4-N-Etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (990 mg, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 7(1)) en tetrahidrofurano anhidro (30 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (2.56 ml, 2.56 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó en el baño de hielo durante 1.3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se le añadió acetato de etilo y la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo \rightarrow metanol 5% en acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (461 mg, rendimiento 95%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 7.20 (1H, br s), 4.90-4.78 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=9.0, 7.3Hz), 3.96 (2H, dd, J=9.0, 4.3Hz), 3.44 (2H, dq, J=7.2, 5.4Hz), 2.61 (1H, d, J=6.6Hz), 1.22 (3H, t, J=7.2Hz).
(3) 1-(4-N-Etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (460 mg, 2.02 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 7(2)) en cloruro de metileno (23 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.469 ml, 6.06 mmol) y trietilamina (0.849 ml, 6.06 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos y se agitó durante 1.3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (598 mg, rendimiento 97%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.44 (1H, s), 7.13 (1H, br s), 5.48-5.38 (1H, m), 4.46 (2H, ddd, J=9.5, 6.6, 1.5Hz), 4.27 (2H, ddd, J=9.5, 4.4, 1.5Hz), 3.45 (2H, dq, J=7.3, 5.0Hz), 3.10 (3H, s), 1.24 (3H, t, J=7.3Hz).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfonilazetidina (590 mg, 1.93 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 7(3)) en dimetilformamida (30 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.32 g, 11.6 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-N-etilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (453 mg, rendimiento 82%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.40 (1H, s), 7.14 (1H, br s), 4.53 (2H, t, J=8.8Hz), 4.48-4.38 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J=8.8, 5.6Hz), 3.44 (2H, dq, J=7.3, 5.9Hz), 2.37 (3H,s), 1.23 (3H, t, J=7.3Hz).
Ejemplo de Referencia 8
3-Acetiltio-1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
172
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.0 g, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) se añadió una solución de hidrocloruro de isopropilamina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (6.42 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de añadirle acetato de etilo, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.01 g, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66-7.58 (4H, m), 7.50-7.36 (6H, m), 7.34 (1H, s), 6.98 (1H, br d, J=8.1Hz), 4.80-4.70 (1H, m), 4.26-4.16 (1H, m), 4.11 (2H, dd, J=8.8, 7.3Hz), 4.02 (2H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 1.24 (6H, d, J=6.6Hz), 1.07 (9H, s).
(2) 1-(4-N-Isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.01 g, 2.11 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 8(1)) en tetrahidrofurano anhidro (30 ml) se le añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio-tetrahidrofurano 1.0 M (2.53 ml) en un baño de hielo. La mezcla se agitó durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (681 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 7.00 (1H, br d, J=8.0Hz), 4.90-4.78 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=9.9, 8.7Hz), 3.97 (2H, ddd, J=9.9, 7.3, 1.7Hz), 2.55 (1H, d, J=8.0Hz), 1.25 (6H, d, J=6.6Hz).
(3) 1-(4-N-Isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (490 mg, 2.03 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 8(2)) en cloruro de metileno (15 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.471 ml, 6.09 mmol) y trietilamina (0.854 ml, 6.09 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos y se agitó durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (681 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.44 (1H, s), 7.00 (1H, br d, J=8.0Hz), 5.48-5.38 (1H, m), 4.46 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.32-4.18 (3H, m que incluye 2H, dd, a 4.28, J=9.5, 5.1Hz), 3.11 (3H, s), 1.25 (6H, d, J=6.6Hz).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (680 mg, 2.03 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 8(3)) en dimetilformamida (35 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.39 g, 12.2 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice para dar 3-acetiltio-1-(4-N-isopropilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (461 mg, rendimiento 81%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.40 (1H, s), 6.98 (1H, br s), 4.54 (2H, t, J=8.8Hz), 4.50-4.40 (1H, m), 4.26-4.16 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J=8.8, 5.9Hz), 2.37 (3H, s), 1.24 (6H, d, J=5.9Hz).
Ejemplo de Referencia 9
3-Acetiltio-1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina 
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173
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.0 g, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) se añadió una solución de ciclopentilamina-trimetilaluminio 0.67 M en benceno (6.42 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) en un baño de hielo, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de añadirle acetato de etilo, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.07 g, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66-7.60 (4H, m), 7.50-7.38 (6H, m), 7.34 (1H, s), 7.08 (1H, br d, J=8.1Hz), 4.80-4.70 (1H, m), 4.38-4.26 (1H, m), 4.11 (2H, dd, J=8.8, 5.6Hz), 4.02 (2H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 2.12-2.20 (2H, m), 1.80-1.40 (6H, m), 1.07 (9H, s).
(2) 1-(4-N-Ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclopentilcarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.07 g, 2.12 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 9(1)) en tetrahidrofurano anhidro (32 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (2.54 ml, 2.54 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó en el baño de hielo durante 40 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice para dar 1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (528 mg, rendimiento 93%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 7.11 (1H, d, J=4.4Hz), 4.88-4.78 (1H, m), 4.40-4.25 (3H, m), 3.96 (2H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 2.54 (1H, d, J=6.0Hz), 2.12-2.00 (2H, m), 1.80-1.44 (6H, m).
(3) 1-(4-N-Ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (520 mg, 1.95 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 9(2)) en cloruro de metileno (16 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.452 ml, 5.84 mmol) y trietilamina (0.818 ml, 5.84 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos y se agitó durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (691 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 7.07 (1H, br d, J=8.1Hz), 5.48-5.38 (1H, m), 4.46 (2H, ddd, J=9.9, 6.6, 1.5Hz), 4.40-4.20 (3H, m que incluye 2H, ddd, J=9.9, 4.9, 1.5Hz), 3.11 (3H, s), 2.15-1.98 (2H, m), 1.80-1.40 (6H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (670 mg, 1.95 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 9(3)) en dimetilformamida (34 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.34 g, 11.7 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-N-ciclopentilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (550 mg, rendimiento 87%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.40 (1H, s), 7.10 (1H, d, J=8.0Hz), 4.53 (2H, dd, J=9.2, 6.9Hz), 4.48-4.38 (1H, m), 4.38-4.26 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J=9.2, 4.6Hz), 2.36 (3H, s), 2.12-2.06 (2H, m), 1.80-1.40 (6H, m).
\newpage
Ejemplo de Referencia 10
3-Acetiltio-1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
174
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.0 g, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) se añadió una solución de ciclohexilamina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (6.42 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno y a continuación la mezcla se calentó a reflujo durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se añadió acetato de etilo de forma gradual a la mezcla de reacción, y la mezcla resultante se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (5 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.09 g, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66-7.58 (4H, m), 7.50-7.38 (6H, m), 7.34 (1H, s), 7.04 (1H, br d, J=8.8Hz), 4.80-4.70 (1H, m), 4.11 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.02 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 3.98-3.80 (1H, m), 2.02-1.94 (2H, m), 1.80-1.70 (2H, m), 1.70-1.10 (6H, m), 1.07 (9H, s).
(2) 1-(4-N-Ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclohexilcarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.09 g, 2.10 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 10(1)) en tetrahidrofurano anhidro (55 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (2.52 ml) en un baño de hielo y a continuación la mezcla se agitó en el baño de hielo durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (570 mg, rendimiento 97%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 7.07 (1H, d, J=8.1Hz), 4.99-4.78 (1H, m), 4.33 (2H, dd, J=9.0, 7.3Hz), 4.00-3.80 (3H, m que incluye 2H, dd, J=9.0, 4.4Hz), 2.56 (1H, d, J=8.3Hz), 2.02-1.92 (2H, m), 1.80-1.70 (2H, m), 1.70-1.10 (6H, m).
(3) 1-(4-N-Ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (570 mg, 2.03 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 10(2)) en cloruro de metileno (17 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.471 ml, 6.08 mmol) y trietilamina (0.852 ml, 6.08 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos, y a continuación se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Al residuo obtenido se añadió éter de isopropilo, y la mezcla resultante se filtró para dar 1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (739 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 7.02 (1H, br d, J=8.1Hz), 5.48-5.39 (1H, m), 4.46 (2H, ddd, J=9.5, 6.6, 1.5Hz), 4.27 (2H, dd, J=9.5, 5.1Hz), 3.98-3.84 (1H, m), 3.11 (3H, s), 2.01-1.94 (2H, m), 1.80-1.70 (2H, m), 1.70-1.10 (6H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (730 mg, 2.03 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 10(3)) en dimetilformamida (37 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.39 g, 12.2 mmol) a temperatura ambiente, y a continuación la mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 15 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-N-ciclohexilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina (372 mg, rendimiento 54%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.40 (1H, s), 7.06 (1H, br d, J=8.0Hz), 4.53 (1H, dd, J=9.5, 8.2Hz), 4.48-4.40 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J=9.5, 3.7Hz), 3.95-3.85 (1H, m), 2.37 (3H, s), 2.01-1.96 (2H, m), 1.80-1.10 (8H, m).
Ejemplo de Referencia 11
3-Acetiltio-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
175
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.0 g, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) se añadió una solución de morfolina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (6.42 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.05 g, rendimiento 97%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.64-7.58 (4H, m), 7.50-7.36 (6H, m), 7.12 (1H, s), 4.80-4.70 (1H, m), 4.10 (2H, dd, J=9.6, 8.0Hz), 4.00 (2H, dd, J=9.6, 4.8Hz), 3.96-3.60 (8H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-N-Morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.05 g, 2.07 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 11(1)) en tetrahidrofurano anhidro (32 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (2.48 ml, 2.48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo \rightarrow metanol en acetato de etilo 10% como eluyente para dar 1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (542 mg, rendimiento 97%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.15 (1H, s), 4.90 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=8.8, 7.3Hz), 3.95 (2H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 4.00-3.60 (8H, m), 2.45 (1H, br s).
(3) 1-(4-N-Morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (540 mg, 2.01 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 11(2)) en cloruro de metileno (27 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.467 ml, 6.03 mmol) y trietilamina (0.845 ml, 6.03 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos, y se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando metanol en acetato de etilo 5% como eluyente para dar 1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (688 mg, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.23 (1H, s), 5.45-5.40 (1H, m), 4.45 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.26 (2H, ddd, J=9.5, 4.4, 1.5Hz), 4.00-3.60 (8H, m), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (680 mg, 1.96 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 11(3)) en dimetilformamida (20 ml) se añadió tioacetato de potasio (671 mg, 5.87 mmol) a temperatura ambiente, y a continuación la mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 18 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (411 mg, rendimiento 64%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.20 (1H, s), 4.52 (2H, t, J=8.8Hz), 4.48-4.38 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 4.00-3.60 (8H, m), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 12
3-Acetiltio-1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
176
(1) 1-(4-Hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (548.5 mg, 1.29 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(2)) en tetrahidrofurano anhidro (28 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (1.56 ml, 1.56 mmol) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla se agitó en el baño de hielo durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (230 mg, rendimiento 96%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 6.54 (1H, s), 4.76-4.68 (1H, m), 4.46 (2H, s), 4.32-4.24 (2H, m), 3.88-3.82 (2H, m).
(2) 1-(4-t-Butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (226.5 mg, 1.22 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 12(1)) en dimetilformamida (11.5 ml) se añadieron cloruro de t-butildimetilsililo (220 mg, 1.46 mmol) e imidazol (120 mg, 1.76 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó entonces hasta temperatura ambiente en 10 minutos, y se agitó durante 5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se le añadió metanol (2 ml) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (300.4 mg, rendimiento 82%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.43 (1H, s), 4.86-4.78 (1H, m), 4.66 (2H, s), 4.30 (2H, dd, J=9.5, 7.0Hz), 3.93 (2H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 2.80 (1H, br s), 0.94 (9H, s), 0.10 (6H, s).
(3) 1-(4-t-Butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (300.4 mg, 1.00 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 12(2)) en cloruro de metileno (15 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.2 ml, 2.49 mmol) y trietilamina (0.35 ml, 2.51 mmol) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción se agitó entonces durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (326.5 mg, rendimiento 86%) en la forma de un jarabe de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.50 (1H, s), 5.44-5.38 (1H, m), 4.43 (2H, dd, J=9.9, 5.5Hz), 4.23 (2H, dd, J=9.9, 4.1Hz), 3.10 (3H, s), 0.90 (9H, s), 0.10 (6H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (326.5 mg, 0.86 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 12(3)) en dimetilformamida (16 ml) se añadió tioacetato de potasio (780 mg, 5.41 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó entonces en un baño de aceite (80ºC) durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-t-butildimetilsililoximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (191 mg, rendimiento 62%) en la forma de un jarabe de color marrón.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.45 (1H, s), 4.66 (2H, s), 4.50 (2H, t, J=8.6Hz), 3.95 (2H, dd, J=8.6, 5.1Hz), 2.35 (3H, s), 0.93 (9H, s), 0.10 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 13
4-Acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina
177
(1) Éster etílico del ácido (4-hidroxipiperidina-1-carbotioil)carbámico
A una solución de 3-hidroxipiperidina (1.0 g, 9.89 mmol) en tetrahidrofurano (50 ml) se añadió isotiocianato de etoxicarbonilo (1.4 ml, 11.9 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos y a continuación se agitó durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para dar el éster etílico del ácido (4-hidroxipiperidina-1-carbotioil)carbámico (2.3 g, rendimiento 100%) en la forma de un aceite de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 4.26 (1H, br s), 4.19 (2H, q, J=8.3Hz), 4.06 (1H, m), 4.0-3.4 (3H, dull s), 2.10 (2H, m), 1.80-1.60 (4H, m), 1.29 (3H, t, J=8.3Hz).
(2) 1-(4-Etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina
A una solución del éster etílico del ácido (4-hidroxipiperidina-1-carbotioil)carbámico (2.3 g, 9.89 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 13(1)) en etanol (23 ml) y agua destilada (23 ml) se añadió hidróxido de sodio (1.98 g, 49.5 mmol), y a continuación la mezcla se calentó a reflujo durante 15 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente y se añadió a la mezcla de reacción una solución de cloruro de hidrógeno en dioxano 4N (12.4 ml) en un baño de hielo, se añadieron 2-bromopiruvato de etilo (2.5 ml, 19.8 mmol) y trietilamina (2.8 ml, 20.1 mmol), y a continuación la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para dar 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (0.99 g, rendimiento 39%) en la forma de un jarabe de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.46 (1H, s), 4.35 (2H, q, J=7.8Hz), 3.96 (1H, m), 3.88 (2H, dt, J=13.5, 3.0Hz), 3.31 (2H, ddd, J=13.5, 9.0, 3.0Hz), 2.04-1.96 (2H,m), 1.74-1.56 (3H, m), 1.37 (3H, t, J=7.8Hz).
Espectro de masas: 256 [M^{+}]
(3) 1-(4-Etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina
A una solución de 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (128 mg, 0.50 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 13(2)) en cloruro de metileno (6.5 ml) se añadió cloruro de metanosulfonilo (0.043 ml, 0.56 mmol) y trietilamina (0.084 ml, 0.60 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos y a continuación se agitó durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol (1 ml) en un baño de hielo y a continuación la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se recristalizó desde una solución de acetato de etilo : n-hexano (5 : 1) para dar 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina (81.0 mg, rendimiento 49%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.49 (1H, s), 5.01-4.90 (1H, m), 4.45 (2H, q, J=8.0Hz), 3.80 (2H, ddd, J=12.6, 8.4, 4.2Hz), 3.52 (2H, ddd, J=12.6, 8.4, 4.2Hz), 3.05 (3H, s), 2.20-1.90 (4H, m), 1.36 (3H, t, J=8.0Hz).
Espectro de masas: 334 [M^{+}]
(4) 4-Acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina (76 mg, 0.23 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 13(3)) en dimetilformamida (4.0 ml) se añadió tioacetato de potasio (145 mg, 1.3 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó entonces en un baño de aceite (80ºC) durante 8 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 4-acetiltio-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (67 mg, rendimiento 94%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta(ppm) 7.45 (1H, s), 4.34 (2H, q, J=7.1Hz), 3.88 (2H, dt, J=13.4, 3.2Hz), 3.80-3.60 (1H, m), 3.33 (ddd, J=13.6, 8.5, 3.2Hz), 2.33 (3H, s), 2.15-1.95 (2H, m), 1.85-1.65 (2H, m), 1.37 (3H, t, J=7.1Hz).
Espectro de masas: 314 [M^{+}]
Ejemplo de Referencia 14
4-Acetiltio-1-(4-p-nitrobencilcarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina 
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178 
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(1) 4-t-Butildimetilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1.00 g, 3.90 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 13(2)) en dimetilformamida (50 ml) se añadieron cloruro de t-butildimetilsililo (1.2 g, 7.96 mmol) e imidazol (0.6 g, 8.8 mmol) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos y a continuación se agitó durante 18 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol thereto en un baño de hielo, y la mezcla de reacción se agitó entonces a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1) como eluyente para dar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.38 g, rendimiento 95%) en la forma de un aceite de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.42 (1H, s), 4.35 (2H, q, J=7.1Hz), 4.03-3.89 (1H, m), 3.70 (2H, ddd, J=12.4, 8.5, 3.7Hz), 3.46 (2H, ddd, 12.4, 8.5, 3.7Hz), 1.90-1.77 (2H, m), 1.71-1.59 (2H, m), 1.37 (3H, t, J=7.1Hz), 0.90 (9H, s), 0.08 (6H, s).
Espectro de masas: 370 [M^{+}]
(2) 4-t-Butildimetilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1.00 g, 2.7 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(1)) en etanol (20 ml) se añadió una solución acuosa de hidróxido de sodio 1 N (5.4 ml, 5.4 mmol) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción se agitó entonces a temperatura ambiente durante 3.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de ácido clorhídrico 2 N (1.8 ml) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se recristalizó desde una solución de metanol en acetato de etilo para dar un cristal blanco (471 mg) como cristal primario. A continuación, el residuo obtenido por concentración de las aguas madres se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : 2-propanol : agua (10 : 4 : 1 \rightarrow 5 : 2 : 1) como eluyente para dar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (440 mg, cantidad total 911 mg, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3} + D_{2}O): \delta (ppm) 7.35 (1H, s), 4.10-3.85 (1H, m), 3.75-3.50 (2H, m), 3.50-3.25 (2H, m), 1.90-1.70 (2H, m), 1.70-1.50 (2H, m), 0.90 (9H, s), 0.07 (6H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 343 [M+H]^{+}
(3) 4-t-Butildimetilsililoxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (902 mg, 2.63 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(2)) en cloruro de metileno anhidro (40 ml) se añadieron hidroxibenzotriazol (710 mg, 5.3 mmol), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida hidrocloruro (WSC) (1.254 g, 6.6 mmol) y alcohol p-nitrobencilo (788 mg, 5.2 mmol) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y a continuación la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (916 mg, rendimiento 73%) en la forma de un sólido de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.5Hz), 7.60 (2H, d, J=8.5Hz), 7.49 (1H, s), 5.42 (2H, s), 4.05-3.95 (1H, m), 3.70 (2H, ddd, J=12.6, 8.6, 3.9Hz), 3.48 (2H, ddd, J=12.6, 6.2, 4.2Hz), 1.92-1.76 (2H, m), 1.75-1.50 (2H, m), 0.90 (9H, s), 0.07 (6H, s).
Espectro de masas (FAB^{+}): 478 [M+H]^{+}
(4) 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (300 mg, 0.628 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(3)) en tetrahidrofurano anhidro (15 ml) se añadieron ácido acético (0.22 ml, 0.628 mmol) y una solución de fluoruro de tetrabutilamonio 1M en tetrahidrofurano (3.76 ml, 3.76 mmol) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 21 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (123 mg, rendimiento 54%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3} + D_{2}O): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.0Hz), 7.60 (2H, d, J=8.0Hz), 7.50 (1H, s), 5.42 (2H, s), 4.02-3.94 (1H, m), 3.89 (2H, dt, J=12.0, 4.0Hz), 3.33 (2H, ddd, J=12.0, 8.0, 4.0Hz), 2.05-1.94 (2H, m), 1.75-1.55 (2H, m).
Espectro de masas: 363 [M^{+}]
(5) 4-Metanosulfoniloxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (0.75 g, 2.06 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(4)) en cloruro de metileno anhidro (38 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.18 ml, 2.33 mmol) y trietilamina (0.35 ml, 2.51 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos, y a continuación se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para dar 4-metanosulfoniloxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (0.87 g, rendimiento 96%) en la forma de un sólido incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.5Hz), 7.59 (2H, d, J=8.5Hz), 7.54 (1H, s), 5.42 (2H, s), 5.05-4.95 (1H, m), 3.79 (2H, ddd, J=12.2, 7.6, 4.0Hz), 3.55 (2H, ddd, J=12.2, 7.2, 4.0Hz), 3.07 (3H, s), 2.18-2.06 (2H, m), 2.00-1.80 (2H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 441 [M+H]^{+}
(6) 4-Acetiltio-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 4-metanosulfoniloxi-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1.2 g, 2.72 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(5)) en dimetilformamida (60 ml) se añadió tioacetato de potasio (625 mg, 5.47 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (90ºC) durante 3.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 4-acetiltio-1-(4-p-nitrobenciloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (769 mg, rendimiento 88%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.4Hz), 7.59 (2H, d, J=8.4Hz), 7.51 (1H, s), 5.42 (2H, s), 3.95-3.80 (2H, m), 3.80-3.60 (1H, m), 3.34 (2H, ddd, J=13.1, 9.9, 3.1Hz), 2.34 (3H, s), 2.25-1.95 (2H, m), 1.85-1.65 (2H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 422 [M+H]^{+}
Ejemplo de Referencia 15
4-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina 
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179
(1) 4-t-Butildimetilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (4.99 g, 14.6 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(2)) en cloruro de metileno (150 ml) se añadió carbonildiimidazol (2.80 g, 17.3 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla de reacción se agitó durante 1.5 horas bajo las mismas condiciones. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de amonio 28% y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos.
A continuación, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (2.90 g, rendimiento 59%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.39 (1H, s), 7.03 (1H, br s), 5.50 (1H, br s), 4.05-3.95 (1H, m), 3.66 (2H, ddd, J=12.5, 8.6, 3.7Hz), 3.43 (2H, ddd, J=12.5, 6.5, 4.2Hz), 1.92-1.75 (2H, m), 1.75-1.55 (2H, m), 0.90 (9H, s), 0.08 (6H, s).
Espectro de masas (FAB^{+}): 342 [M+H]^{+}
(2) 1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1.226 g, 3.59 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 15(1)) en tetrahidrofurano anhidro (30 ml) se añadieron ácido acético (1.85 ml) y una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (32.3 ml, 32.3 mmol) en un baño de hielo, y la mezcla se agitó durante 24 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice para dar 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (0.82 g, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 7.38 (1H, s), 3.95-3.80 (1H, m), 3.40-3.20 (2H, m), 2.00-1.85 (2H, m), 1.75-1.50 (2H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 228 [M+H]^{+}
(3) 1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina
A una solución de 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1.93 g, 8.49 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 15(2)) en cloruro de metileno (100 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (10.0 ml, 129 mmol) y trietilamina (18.0 ml, 129 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol a la mezcla de reacción en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1)
como eluyente para dar 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina (1.59 g, rendimiento 61%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 7.42 (1H, s), 5.10-4.90 (1H, m), 3.77 (2H, ddd, J=13.0, 7.4, 4.0Hz), 3.53 (2H, ddd, J=13.0, 7.7, 4.0Hz), 3.12 (3H, s), 2.18-2.07 (2H, m), 2.00-1.89 (2H, m).
Espectro de masas: 305 [M^{+}]
(4) 4-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina (1.59 g, 5.21 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 15(3)) en dimetilformamida (80 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.19 g, 10.4 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (90ºC) durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo :
n-hexano (10 : 1) como eluyente para dar 4-acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1.01 g, rendimiento 68%) en la forma de un sólido de color marrón.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.41 (1H, s), 7.00 (1H, br s), 5.55 (1H, br s), 3.90-3.78 (2H, m), 3.78-3.64 (1H, m), 3.35-3.25 (2H, m), 2.32 (3H, s), 2.10-2.00 (2H, m), 1,80-1.65 (2H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 285 [M+H]^{+}
Ejemplo de Referencia 16
4-Acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina 
\vskip1.000000\baselineskip
180 
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(1) 4-t-Butildimetilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (200 mg, 0.584 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(2)) en dimetilformamida (6.0 ml) se añadió carbonildiimidazol (114 mg, 0.703 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla de reacción se agitó entonces en un baño de aceite (50ºC) durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de metilamina 40% (0.23 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos.
A continuación, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica obtenida se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (5 : 4) como eluyente para dar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (202.5 mg, rendimiento 97%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
\newpage
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 7.20 (1H, br s), 4.10-3.98 (1H, m), 3.68 (2H, ddd, J=12.6, 8.5, 3.7Hz), 3.45 (2H, ddd, J=12.6, 6.4, 4.2Hz), 2.99 (3H, d, J=4.8Hz), 1.95-1.78 (2H, m), 1.78-1.60 (2H, m), 0.93 (H, s), 0.11 (6H, s).
Espectro de masas (FAB^{+}): 356 [M+H]^{+}
(2) 1-(4-N-Metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1.69 g, 4.75 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 16(1)) en tetrahidrofurano anhidro (85 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (23.8 ml, 23.8 mmol) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla se agitó en un baño de aceite (50ºC) durante 14.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1.48 g, rendimiento 97%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7.35 (1H, s), 7.18 (1H, br s), 4.05-3.90 (1H, m), 3.74 (2H, ddd, J=12.7, 4.7Hz), 3.28 (2H, ddd, J=12.7, 9.0, 3.6Hz), 2.10-1.90 (2H, m), 1.80-1.50 (3H, m).
Espectro de masas: 241 [M^{+}]
(3) 4-Metanosulfoniloxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1.143 g, 4.74 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 16(2)) en cloruro de metileno (35 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.44 ml, 5.63 mmol) y trietilamina (0.86 ml, 5.68 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol a la mezcla de reacción en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se añadió al residuo acetato de etilo, y la mezcla se filtró para dar 4-metanosulfoniloxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1.438 g, rendimiento 95%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.38 (1H, s), 7.14 (1H, br s), 5.06-4.93 (1H, m), 3.74 (2H, ddd, J=13.2, 7.5, 4.2Hz), 3.48 (2H, ddd, J=13.2, 7.2, 4.2Hz), 3.07 (3H, s), 2.97 (3H, d, J=5.1Hz), 2.20-1.90 (4H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 320 [M+H]^{+}
(4) 4-Acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 4-metanosulfoniloxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-1)piperidina (1.438 g, 4.50 mmol) (obtenida tal y como se describe en el Ejemplo de Referencia 16(3)) en dimetilformamida (72 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.03 g, 9.00 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (90ºC) durante 2.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : n-hexano (10 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para dar 4-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (1.22 g, rendimiento 91%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.38 (1H, s), 7.15 (1H, br s), 3.82 (2H, dt, J=12.7, 4.8Hz), 3.78-3.63 (1H, m), 3.30 (2H, ddd, J=12.7, 11.1, 4.7Hz), 2.95 (3H, d, J=6.4Hz), 2.35 (3H, s), 2.15-1.95 (2H, m), 1.85-1.35 (2H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 300 [M+H]^{+}
Ejemplo de Referencia 17
4-Acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
181
(1) 4-t-Butildimetilsililoxi-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)piperidina (0.98 g, 2.86 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 14(2)) en dimetilformamida (30 ml) se añadió carbonildiimidazol (559 mg, 3.45 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla de reacción se agitó entonces en un baño de aceite (50ºC) durante 3 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de dimetilamina 50% (100 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos.
A continuación, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y an acuoso solución. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (2 : 3) como eluyente para dar 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (440 mg, cantidad total 995 mg, rendimiento 94%) en la forma de un aceite de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.04 (1H, s), 4.05-3.95 (1H, m), 3.67 (2H, ddd, J=12.6, 8.4, 4.3Hz), 3.41 (2H, ddd, J=12.6, 7.0, 4.3Hz), 3.26 (3H, br s), 3.07 (3H, br s), 1.92-1.75 (2H, m), 1.72-1.50 (2H, m), 0.90 (9H, s), 0.08 (6H, s).
Espectro de masas (FAB^{+}): 370 [M+H]^{+}
(2) 1-(4-N,N-Dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina
A una solución de 4-t-butildimetilsililoxi-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (2.13 g, 5.76 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 17(1)) en tetrahidrofurano anhidro (85 ml) se añadieron ácido acético (1.65 ml, 28.8 mmol) y una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (28.8 ml, 28.8 mmol) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla se agitó en un baño de aceite (50ºC) durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1.47 g, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.07 (1H, s), 4.03-3.89 (1H, m), 3.83 (2H, ddd, J=12.0, 5.0Hz), 3.35-3.20 (5H, m), 3.08 (3H, br s), 2.05-1.90 (2H, m), 1.90-1.55 (3H, m).
Espectro de masas: 255 [M^{+}]
(3) 1-(4-N,N-Dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina
A una solución de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-hidroxipiperidina (1.47 g, 5.76 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 17(2)) en cloruro de metileno (60 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.82 ml, 10.6 mmol) y trietilamina (1.48 ml, 10.6 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol a la mezcla de reacción en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo :
metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina (1.38 g, rendimiento 72%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.12 (1H, s), 5.05-4.90 (1H, m), 3.85-3.65 (2H, m), 3.60-3.40 (2H, m), 3.23 (3H, br s), 3.08 (6H, br s), 2.20-1.90 (4H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 334 [M+H]^{+}
(4) 4-Acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina
A una solución de 1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-4-metanosulfoniloxipiperidina (1.33 g, 3.99 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 17(3)) en dimetilformamida (66 ml) se añadió tioacetato de potasio (940 mg, 8.23 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (90ºC) durante 3.0 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : n-hexano (5 : 1 \rightarrow 7 : 1) como eluyente para dar 4-acetiltio-1-(4-N,N-dimetilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)piperidina (629 mg, rendimiento 50%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.07 (1H, s), 3.90-3.78 (3H, m), 3.75-3.60 (2H, m), 3.40-3.15 (5H, m), 3.08 (3H, br s), 2.32 (3H, s), 2.12-1.98 (2H, m), 1.82-1.60 (2H, m).
Espectro de masas (FAB^{+}): 314 [M+H]^{+}
Ejemplo de Referencia 18
(3S)-3-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina 
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182 
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(1) Éster etílico del ácido [(3R)-3-Hidroxipirrolidina-1-carbotioil]carbámico
Se disolvió hidrocloruro de (3R)-3-hidroxipirrolidina (15 g, 121.4 mmol) en tetrahidrofurano (450 ml), y se añadió isotiocianato de etoxicarbonilo (15.7 ml) en un baño de hielo. La mezcla en solución se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos y a continuación se agitó durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se recristalizó desde una mezcla de acetato de etilo y n-hexano para dar el éster etílico del ácido [(3R)-3-hidroxipirrolidina-1-carbotioil]carbámico (24.62 g, rendimiento 93%) en la forma de un cristal de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.38-7.25 (1H, br s), 4.35-3.63 (5H, m), 4.16 (2H, q, J=6.8Hz), 2.19-2.05 (2H, m), 1.30 (3H, t, J=6.8Hz).
(2) (3R)-1-(4-Etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina
A una solución de hidrocloruro del ácido [(3R)-3-hidroxipirrolidina-1-carbotioil]carbámico (24.6 g, 113 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(1)) en etanol (125 ml) y agua destilada (125 ml) se añadió hidróxido de sodio (31.6 g, 789 mmol), y la mezcla se calentó a reflujo durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. Se añadió a la mezcla de reacción una solución de 4N cloruro de hidrógeno en dioxano en un baño de hielo hasta que el pH de la mezcla de reacción llegó a 7, se añadieron 2-bromopiruvato de etilo (28.4 ml, 226 mmol) y trietilamina (31.7 ml, 226 mmol), y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para dar (3R)-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (19.26 g, rendimiento 70%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.39 (1H, s), 4.66-4.61 (1H, m), 4.36 (2H, q, J=7.3Hz), 3.72-3.65 (2H, m), 3.62-3.56 (2H, m), 2.23-2.15 (1H, m), 2.14-2.07 (1H, m), 1.37 (3H, t, J=7.3Hz).
(3) (3R)-3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3R)-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (3.0 g, 12.4 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(2)) en dimetilformamida (90 ml) se añadieron cloruro t-butildifenilsililo (6.45 ml, 24.8 mmol) e imidazol (1.69 g, 24.8 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en un baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, etanol (2.59 ml) se añadió a la mezcla de reacción en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (5.85 g, rendimiento 90%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.69-7.60 (4H, m), 7.48-7.35 (6H, m), 7.39 (1H, s), 4.56-4.50 (1H, m), 4.12 (2H, q, J=7.3Hz), 3.77-3.70 (1H, m), 3.56-3.46 (3H, m), 2.06-1.90 (2H, m), 1.38 (3H, t, J=7.3Hz), 1.05 (9H, s).
(4) (3R)-3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (300 mg, 0.624 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(3)) en la mezcla de etanol (12 ml) y agua destilada (3 ml) se añadió una solución acuosa de hidróxido de sodio 1 N (1.56 ml, 1.56 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de ácido clorhídrico 1N (1.8 ml) en un baño de hielo hasta que el pH de la mezcla de reacción alcanzó un valor de entre 4 y 5. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida para dar (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (305 mg, rendimiento 97%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.68-7.60 (4H, m), 7.48-7.35 (6H, m), 7.40 (1H, s), 4.57-4.50 (1H, m), 3.72-3.62 (1H, m), 3.50-3.36 (3H, m), 2.10-1.92 (2H, m), 1.05 (9H, s).
(5) (3R)-3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (910 mg, 2.01 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(4)) en dimetilformamida (30 ml) se añadió carbonildiimidazol (652 mg, 4.02 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla de reacción se agitó entonces en un baño de aceite (50ºC) durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de amonio al 28% y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos.
A continuación, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice para dar (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (730 mg, rendimiento 80%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.71-7.64 (4H, m), 7.48-7.38 (6H, m), 7.09-7.05 (1H, br s), 5.50-5.44 (1H, br s), 4.57-4.52 (1H, m), 3.72-3.66 (1H, m), 3.51-3.45 (1H, m), 3.45-3.43 (2H, m), 2.09-2.02 (1H, m), 2.08-1.93 (1H, m), 1.08 (9H, s).
(6) (3R)-1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina
A una solución de (3R)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (950 mg, 2.10 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(5)) en tetrahidrofurano anhidro (20 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (2.52 ml, 2.52 mmol) en un baño de hielo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow metanol en acetato de etilo 10% como eluyente para dar (3R)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (428 mg, rendimiento 96%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 7.42-7.36 (1H, br s), 7.30-7.23 (1H, br s), 7.27 (1H, s), 5.08 (1H, d, J=3.7Hz), 4.42-4.37 (1H, m), 3.51 (1H, dd, J=11.0, 4.4Hz), 3.90-3.43 (2H, m), 3.30-3.27 (1H, m), 2.14-2.01 (1H, m), 1.99-1.86 (1H, m).
(7) (3R)-1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina y (3R)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina
A una solución de (3R)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (290 mg, 1.36 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(6)) suspendida en cloruro de metileno (9 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.684 ml, 8.85 mmol) y trietilamina (1.24 ml, 8.85 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió metanol (0.33 ml) a la mezcla de reacción en un baño de hielo, y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando metanol en acetato de etilo 5% \rightarrow metanol en acetato de etilo 10% como eluyente para dar (3R)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (148 mg, rendimiento 40%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
(3R)-1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (a)
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.41 (1H, s), 7.10-6.98 (1H, bs), 5.60-5.52 (1H, br s), 5.50-5.40 (1H, m), 3.88-3.76 (2H, m), 3.65-3.60 (2H, m), 3.08 (3H, s), 2.50-2.41 (1H, m), 2.39-2.32 (1H, m).
(3R)-1-(4-Ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (b)
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.23 (1H, s), 5.45-5.42 (1H, m), 3.88-3.76 (2H, m), 3.69-3.62 (2H, m), 3.08 (3H, s), 2.55-2.47 (1H, m), 2.43-2.32 (1H, m).
(8) (3S)-3-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3R)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (190 mg, 0.652 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(7)) en acetonitrilo (6 ml) se añadió tioacetato de potasio (223 mg, 1.96 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a reflujo durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo \rightarrow
2% metanol en acetato de etilo como eluyente para dar (3S)-3-acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (135 mg, rendimiento 77%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.37 (1H, s), 7.08-7.02 (1H, br s), 5.50-5.44 (1H, br s), 4.26-4.12 (1H, m), 3.94 (1H, dd, J=11.0, 6.6Hz), 3.62-3.50 (2H, m), 3.44 (1H, dd, J=11.0, 5.1Hz), 2.54-2.45 (1H, m), 2.36 (3H, s), 2.13-2.04 (1H, m).
Ejemplo de Referencia 19
(3S)-3-Acetiltio-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina 
\vskip1.000000\baselineskip
183
A una solución de (3R)-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (300 mg, 1.10 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(7)) en acetonitrilo (9 ml) se añadió tioacetato de potasio (376 mg, 3.30 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se calentó a reflujo durante 5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (5 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar (3S)-3-acetiltio-1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (137 mg, rendimiento 50%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.19 (1H, s), 4.19-4.12 (1H, m), 3.94 (1H, dd, J=11.0, 6.6Hz), 3.64-3.53 (2H, m), 3.43 (1H, dd, J=11.0, 5.1Hz), 2.55-2.48 (1H, m), 2.36 (3H, s), 2.15-2.06 (1H, m).
Ejemplo de Referencia 20
(3R)-3-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
184
(1) (3R)-1-(4-Etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina
A una solución de (3R)-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (970 mg, 4.00 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 18(2)) en cloruro de metileno (30 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (1.24 ml, 16.0 mmol) y trietilamina (2.24 ml, 16.0 mmol) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol (0.81 ml) y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (4 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar (3R)-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (1.00 g, rendimiento 78%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 5.44-5.41 (1H, m), 4.36 (2H, q, J=7.0Hz), 3.92 (1H, dd, J=12.5, 1.5Hz), 3.85 (1H, dd, J=12.5, 3.7Hz), 3.72-3.65 (2H, m), 3.06 (3H, s), 2.52-2.46 (1H, m), 2.40-2.31(1H,m), 1.38 (3H, t, J=7.0Hz).
(2) (3S)-3-Acetil-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3R)-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (1.0 g, 3.12 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(1)) en dimetilformamida (30 ml) se añadió tioacetato de potasio (919 mg, 9.36 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 5.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar (3S)-3-acetil-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (877 mg, rendimiento 99%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.41 (1H, s), 5.45-5.41 (1H, m), 4.36 (2H, q, J=7.3Hz), 3.44 (1H, dd, J=11.7, 5.1Hz), 3.70-3.60 (3H, m), 2.35-2.17 (2H, m), 2.05 (3H, s), 1.38 (3H, t, 7.3Hz).
(3) (3S)-1-(4-Etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina
A una solución de (3S)-3-acetil-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (5.0 g, 17.6 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(2)) en etanol (150 ml) se añadió etóxido de sodio (60 mg, 0.879 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla se agitó durante toda la noche bajo las mismas condiciones. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución de cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano 4N (0.22 ml) para neutralizar la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para dar (3S)-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (4.16 g, rendimiento 98%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.39 (1H, s), 4.67-4.61 (1H, m), 4.36 (2H, q, J=7.3Hz), 3.72-3.56 (4H, m), 2.24-2.07 (2H, m), 1.37 (3H, t, J=7.3Hz).
(4) (3S)-3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3S)-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (4.1 g, 16.9 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(3)) en dimetilformamida (120 ml) se añadieron cloruro t-butildifenilsililo (8.8 ml, 33.8 mmol) e imidazol (2.3 g, 33.8 mmol) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla de reacción se llevó hasta temperatura ambiente en 10 minutos, y se agitó durante durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol (1.18 ml) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para dar (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (7.60 g, rendimiento 94%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.68-7.61 (4H, m), 7.52-7.35 (6H, m), 7.37 (1H, s), 4.56-4.51 (1H, m), 4.36 (2H, q, J=7.0Hz), 3.77-3.69 (1H, m), 3.58-3.48 (3H, m), 2.05-1.88 (2H, m), 1.38 (3H, t, J=7.0Hz), 1.05 (9H, s).
(5) (3S)-3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (5.0 g, 10.4 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(4)) en una mezcla de etanol (200 ml) y agua destilada (50 ml) se añadió una solución acuosa de hidróxido de sodio 1 N (26.0 ml, 26.0 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 7.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N en un baño de hielo hasta que el pH de la mezcla de reacción alcanzó un valor de 4 a 5. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida para dar (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (4.71 g, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70-7.52 (4H, m), 7.52-7.25 (6H, m), 7.40 (1H, s), 4.57-4.40 (1H, m), 3.68-3.55 (1H, m), 3.48-3.24 (3H, m), 2.04-1.86 (2H, m), 1.07 (9H, s).
(6) (3S)-3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (4.7 g, 10.4 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(5)) en dimetilformamida (140 ml) se añadió carbonildiimidazol (3.37 g, 20.8 mmol) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y a continuación la mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (50ºC) durante 3.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió una solución acuosa de amonio 28% y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando tolueno : acetonitrilo (4 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para dar (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (3.14 g, rendimiento 67%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.68-7.62 (4H, m), 7.48-7.36 (6H, m), 7.34 (1H, s), 7.08-7.05 (1H, br s), 5.49-5.44 (1H, br s), 4.57-4.51 (1H, m), 2.10-1.93 (2H, m), 1.06 (9H, s).
(7) (3S)-1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina
A una solución de (3S)-3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (3.1 g, 6.86 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(6)) en tetrahidrofurano anhidro (90 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (8.24 ml, 8.24 mmol) en un baño de hielo, y la mezcla se agitó durante 1.5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo \rightarrow metanol en acetato de etilo 10% como eluyente para dar (3S)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (1.42 g, rendimiento 98%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 7.43-7.36 (1H, br s), 7.74-7.22 (1H, br s), 7.27 (1H, s), 5.09 (1H, d, J=3.7Hz), 4.44-4.38 (1H, m), 3.51 (1H, dd, J=11.0, 4.4Hz), 3.49-3.42 (2H, m), 3.33-3.28 (1H, m), 2.15-2.02 (1H, m), 1.97-1.89 (1H, m).
(8) (3S)-1-(4-Carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina
A una solución de (3S)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxipirrolidina (1.42 g, 6.66 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(7)) suspendida en una mezcla de cloruro de metileno (40 ml) y piridina (9 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (2.58 ml, 33.3 mmol) y trietilamina (4.67 ml, 33.3 mmol) en un baño de hielo, y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió metanol (1.2 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando metanol en acetato de etilo 5% \rightarrow metanol en acetato de etilo 10% como eluyente para dar (3S)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (1.15 g, rendimiento 60%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.41 (1H, s), 7.08-7.02 (1H, br s), 5.57-5.46 (1H, br s), 5.45-5.43 (1H, m), 3.86 (1H, dd, J=12.5Hz), 3.80 (1H, dd, J=12.5, 4.4Hz), 3.68-3.60 (2H, m), 3.08 (3H, s), 2.52-2.40 (1H, m), 2.39-2.31 (1H, m).
(9) (3R)-3-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina
A una solución de (3S)-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxipirrolidina (1.15 g) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(8)) en acetonitrilo (35 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.35 g, 11.8 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla se calentó a reflujo durante 6 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo \rightarrow metanol en acetato de etilo 2% como eluyente para dar (3R)-3-acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-tiazol-2-il)pirrolidina (962 mg, rendimiento 90%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.37 (1H, s), 7.13-6.99 (1H, br s), 5.59-5.45 (1H, br s), 4.19-4.09 (1H, m), 3.94 (1H, dd, J=11.0, 6.6Hz), 3.61-3.50 (2H, m), 3.44 (1H, dd, J=11.0, 5.1Hz), 2.54-2.45 (1H, m), 2.37 (3H, s), 2.14-2.05 (1H, m).
\newpage
Ejemplo de Referencia 21
3-Acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-tiazol-2-il)azetidina
185
(1) 1-Carbamoíl-3-hidroxiazetidina
Una solución de N-benzhidril-3-hidroxiazetidina (5.36 g, 22.4 mmol) en metanol (250 ml) se sometió hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio 10% (5.36 g) en un baño de agua (50ºC) a una presión de 1 atmósfera de hidrógeno. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se filtró para eliminar el catalizador. El filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se repartió entre acetato de etilo y agua destilada. La capa orgánica se extrajo con agua destilada. La capa acuosa obtenida se concentró bajo presión reducida para dar un producto aceitoso de color rojizo.
A continuación, el producto se secó bajo presión reducida y se disolvió en una mezcla de ácido acético (10 ml) y agua destilada (20 ml), se añadió una solución acuosa (20 ml) de cianuro sódico (2.91 g) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando cloruro de metileno : metanol (5 : 1) como eluyente para dar 1-carbamoíl-3-hidroxiazetidina en la forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (500 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 4.54-4.50 (1H, m), 4.16-4.12 (2H, m), 3.74 (2H, dd, J=4.4, 9.7 Hz).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-carbamoílazetidina
A una solución de 1-carbamoíl-3-hidroxiazetidina (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(1)) en dimetilformamida (100 ml) se añadieron cloruro t-butildifenilsililo (18.0 ml, 66.9 mmol) e imidazol (4.55 g, 66.9 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en un baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió etanol (1 ml) a la mezcla de reacción en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-carbamoílazetidina (1.4 5g, total rendimiento 18%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.60 (4H, d, J=8.1 Hz), 7.46-7.36 (6H, m), 4.59-4.54 (1H, m), 4.26 (2H, br s), 3.96 (2H, t, J=8.8 Hz), 3.91 (2H, dd, J=5.1, 8.8 Hz), 1.06 (9H, s).
(3) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-carbamoílazetidina (3.47 g, 9.79 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(2)) en tetrahidrofurano (170 ml) se añadieron hidrogenocarbonato de sodio (4.11 g, 48.95 mmol) y etil-2-bromopiruvato (2.5 ml, 19.58 mmol), y la mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 8 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo obtenido se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando hexano :
acetato de etilo (5 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (2.96 g, rendimiento 45%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.76 (1H, s), 7.60 (4H, d, J=7.8 Hz), 7.46-7.37 (6H, m), 4.71-4.67 (1H, m), 4.34 (2H, q, J=6.8 Hz), 4.14 (2H, t, J=8.8 Hz), 4.09 (2H, dd, J=5.9, 9.8 Hz), 1.34 (3H, t, J=6.8 Hz), 1.05 (9H, s).
(4) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (325 mg, 0.72 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(3)) en benceno (7 ml) se añadió una solución de metilamina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (2.7 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (20 ml) en un baño de hielo, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (236 mg, rendimiento 75%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.72 (1H, s), 7.61 (4H, d, J=7.8 Hz), 7.47-7.38 (6H, m), 6.88 (1H, brs), 4.74-4.68 (1H, m), 4.10 (2H, t, J=8.7 Hz), 4.04 (2H, dd, J=5.6, 8.8 Hz), 2.92 (3H, d, J=5.0 Hz), 1.06 (9H, s).
(5) 1-(4-N-Metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (662 mg, 1.52 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(4)) en tetrahidrofurano (33 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (1.5 ml, 1.5 mmol) en un baño de hielo, y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (210 mg, rendimiento 70%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 7.83 (1H, s), 4.86-4.66 (1H, m), 4.33 (2H, dd, J=6.6, 8.1 Hz), 3.93 (2H, dd, J=5.1, 8.8 Hz), 2.85 (3H, s).
(6) 1-(4-N-Metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (209 mg, 1.06 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(5)) en una mezcla de cloruro de metileno (5 ml) y piridina (15 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.41 ml, 5.30 mmol) y trietilamina (0.74 ml, 5.30 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió metanol (1 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (253 mg, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.78 (1H, s), 6.80 (1H, brs), 5.41-5.35 (1H, m), 4.48 (2H, dd, J=6.6, 10.3 Hz), 4.30 (2H, dd, J=4.4, 10.3 Hz), 3.10 (3H, s), 2.94 (3H, d, J=5.1 Hz).
(7) 3-Acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (252 mg, 0.92 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(6)) en dimetilformamida (12 ml) se añadió tioacetato de potasio (0.63 g, 5.52 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 8 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-N-metilcarbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (136 mg, rendimiento 58%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.75 (1H, s), 6.79 (1H, brs), 4.55 (2H, t, J=8.4 Hz), 4.43-4.37 (1H, m), 4.02 (2H, dd, J=5.8, 8.9 Hz), 2.94 (3H, d, J=5.1 Hz), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 22
3-Acetiltio-1-(4-N-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina
186
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1.70 g, 3.77 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(3)) en benceno (38 ml) se añadió una solución de metilamina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (13.7 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y a continuación la mezcla se agitó en agua bath (50ºC) durante 4 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (100 ml) en un baño de hielo, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (0.83 g, rendimiento 52%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.75 (1H, s), 7.61 (4H, d, J=6.7 Hz), 7.47-7.36 (6H, m), 6.72 (1H, brs), 5.69 (1H, brs), 4.74-4.69 (1H, m), 4.12 (2H, t, J=6.7 Hz), 4.05 (2H, dd, J=5.0, 7.8 Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-Carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1.30 g, 3.08 mmol) en tetrahidrofurano (60 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (3.1 ml) en un baño de hielo, y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (0.43 g, rendimiento 75%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CD_{3}OD): \delta(ppm) 7.87 (1H, s), 4.70-4.65 (1H, m), 4.34 (2H, dd, J=6.6, 9.5 Hz), 3.94 (2H, dd, J=5.9, 9.5 Hz).
(3) 1-(4-Carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (423 mg, 2.31 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 22(2)) en una mezcla de cloruro de metileno (10 ml) y piridina (30 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.90 ml,11.55 mmol) y trietilamina (1.60 ml, 11.55 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió a la mezcla de reacción metanol (1 ml) en un baño de hielo y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (470 mg, rendimiento 78%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 7.91 (1H, s), 5.45-5.42 (1H, m), 4.51 (2H, dd, J=6.6, 9.5 Hz), 4.28 (2H, dd, J=4.4, 9.5 Hz), 3.16 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (469 mg, 1.80 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 22(3)) en dimetilformamida (23 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.23 g, 10.80 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 8 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-carbamoíl-1,3-oxazol-2-il)azetidina (275 mg, rendimiento 63%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.79 (1H, s), 6.69 (1H, brs), 5.60 (1H, brs), 4.56 (2H, t, J=8.8 Hz), 4.44-4.37 (1H, m), 4.03 (2H, dd, J=5.1, 8.8 Hz), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 23
3-Acetiltio-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina
187
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (357 g, 0.79 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 21(3)) en benceno (8 ml) se añadió una solución de metilamina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (2.8 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agitó en un baño de agua (60ºC) durante 7 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (10 ml) en un baño de hielo, y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando hexano : acetato de etilo (5 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina (130 mg, rendimiento 41%) en la forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66 (1H, s), 7.60 (4H, d, J=8.1 Hz), 7.48-7.38 (6H, m), 4.73-4.70 (1H, m), 4.14 (2H, dd, J=6.6, 8.8 Hz), 4.08 (2H, dd, J=5.1, 9.5 Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-Ciano-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina (0.61 g, 1.51 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 23(1)) en tetrahidrofurano (30 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (1.5 ml) en un baño de hielo, y la mezcla se agitó durante 1 hora. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (0.21 g, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70 (1H, s), 4.83-4.81 (1H, m), 4.40 (2H, dd, J=6.6, 9.5 Hz), 4.06 (2H, dd, J=4.4, 8.8 Hz), 2.26 (1H, d, J=5.9 Hz).
(3) 1-(4-Ciano-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (214 mg, 1.30 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 23(2)) en una mezcla de cloruro de metileno (10 ml) y piridina (5 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.50 ml, 6.50 mmol) y trietilamina (0.90 ml, 6.50 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadió metanol (1 ml) en un baño de hielo y a continuación la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (310 mg, rendimiento 98%) en la forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.76 (1H, s), 5.42-5.36 (1H, m), 4.53 (2H, dd, J=6.6, 11.0 Hz), 4.34 (2H, dd, J=4.4, 11.0 Hz), 3.11 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (309 mg, 1.27 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 23(3)) en dimetilformamida (15 ml) se añadió tioacetato de potasio (0.87 g, 7.62 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica obtenida se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina (157 mg, rendimiento 55%) en la forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.72 (1H, s), 4.60 (2H, t, J=8.8 Hz), 4.45-4.38 (1H, m), 4.07 (2H, dd, J=5.9, 8.8 Hz), 2.37 (3H, s).
\newpage
Ejemplo de Referencia 24
3-t-Acetiltio-1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidina
188
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.0 g, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) se añadió una solución de azetidina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (4.6 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano :
acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (0.60 g, rendimiento 55%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.62 (4H, dd, J=8.0, 1.4Hz), 7.51-7.36 (6H, m), 7.42 (1H, s), 4.80-4.68 (1H, m), 4.56 (2H, t, J=7.7Hz), 4.16 (2H, t, J=7.7Hz), 4.09 (2H, t, J=8.7Hz), 4.00 (2H, dd, J=8.7, 4.9Hz), 2.28 (2H, quintet, J=7.7Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-Azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (0.60 g, 1.18 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 24(1)) en tetrahidrofurano anhidro (25 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (1.42 ml, 1.42 mmol) en un baño de hielo, y a continuación la mezcla se agitó durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando metanol en acetato de etilo 5% como eluyente para dar 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (242 mg, rendimiento 86%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.35 (1H, s), 4.86-4.78 (2H, t, J=7.7Hz), 4.30 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.16 (2H, t, J=7.7Hz), 3.93 (2H, dd, J=9.5, 5.0Hz), 2.29 (2H, quintet, J=7.7Hz), 1.95-1.5 (s poco nítido que incluye 1H de un grupo OH).
(3) 1-(4-Azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (242 mg, 1.01 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 24(2)) en cloruro de metileno (10 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.43 ml, 3.04 mmol) y trietilamina (0.24 ml, 3.04 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. Se añadió al residuo isopropil éter y la mezcla resultante se filtró para dar 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (302 mg, rendimiento 94%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.44 (1H, s), 5.46-5.38 (1H, m), 4.58 (2H, t, J=7.8Hz), 4.43 (2H, ddd, J=9.6, 6.6, 1.0Hz), 4.24 (1H, ddd, J=9.6, 4.6, 1.0Hz), 4.17 (2H, t, J=7.8Hz), 3.10 (3H, s), 2.30 (2H, quintet, J=7.8Hz).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (302 mg, 0.95 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 24(3)) en dimetilformamida (10 ml) se añadió tioacetato de potasio (0.65 g, 5.70 mmol) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 6 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución de cloruro de sodio acuosa al 10%. La capa orgánica obtenida se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (247 mg, rendimiento 87%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.40 (1H, s), 4.57 (2H, t, J=7.8Hz), 4.51 (2H, t, J=8.4Hz), 4.46-4.36 (1H, m), 4.16 (2H, t, J=7.8Hz), 3.96 (2H, dd, J=8.4, 5.3Hz), 2.36 (3H, s), 2.29 (2H, quintet, J=7.8Hz).
Ejemplo de Referencia 25
3-Acetiltio-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
189
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.0 g, 2.14 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) se añadió una solución de tiomorfolina-trimetilaluminio en benceno 0.67 M (4.6 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se calentó a reflujo durante 4 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, se añadieron a la mezcla de reacción una solución de ácido acético acuoso 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) en un baño de hielo y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para dar 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.16 g, rendimiento 98%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.32 (4H, dd, J=7.9, 1.4Hz), 7.54-7.35 (6H, m), 7.07 (1H, s), 4.80-4.70 (1H, m), 4.10 (2H, dd, J=8.8, 6.5Hz), 4.10-3.86 (6H, m que incluye 2H, dd a 4.00, J=8.8, 4.8Hz), 2.80-2.55 (4H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-Tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1.16 g, 2.10 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 25(1)) en tetrahidrofurano anhidro (35 ml) se añadió una solución de fluoruro de tetra-n-butilamonio en tetrahidrofurano 1.0 M (2.52 ml, 2.52 mmol), y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida, y el residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo como eluyente para dar 1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (599 mg, rendimiento 100%) en la forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.09 (1H, s), 4.89-4.77 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=9.1, 6.7Hz), 4.10-3.90 (6H, m que incluye 2H, dd a 3.96, J=9.1, 4.3Hz), 2.80-2.58 (4H, m), 2.50 (1H, br s).
(3) 1-(4-Tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (599 g, 2.50 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 25(2)) en cloruro de metileno (30 ml) se añadieron cloruro de metanosulfonilo (0.49 ml, 6.30 mmol) y trietilamina (0.88 ml, 6.30 mmol) en un baño de hielo. Después de agitar la mezcla en el baño de hielo durante 10 minutos, la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 40 minutos. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio. La capa orgánica se lavó con una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando metanol en acetato de etilo 5% como eluyente para dar 1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (709 mg, rendimiento 93%) en la forma de un sólido de color amarillo pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.17 (1H, s), 5.46-5.38 (1H, m), 4.45 (2H, ddd, J=9.8, 6.7, <1.1Hz), 4.26 (2H, ddd, J=9.8, 4.4, 1.1Hz), 4.08-3.93 (4H, m), 3.11 (3H, s), 2.80-2.60 (4H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (709 g, 1.95 mmol) (obtenida tal como se describe en el Ejemplo de Referencia 25(3)) en dimetilformamida (20 ml) se añadió tioacetato de potasio (1.34 g, 11.7 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agitó en un baño de aceite (80ºC) durante 5 horas. Después de comprobar que la reacción se había completado, la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio. La capa orgánica se lavó de forma sucesiva con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio y una solución acuosa saturada de cloruro de sodio, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía en una columna de gel de sílice utilizando acetato de etilo : n-hexano : cloruro de metileno (1 : 1 : 1) como eluyente para dar 3-acetiltio-1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (413 mg, rendimiento 64%) en la forma de un sólido de color marrón pálido.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.13 (1H, s), 4.53 (2H, t, J=8.4Hz), 4.48-4.40 (1H, m), 4.13-3.86 (6H, m que incluye 2H, dd a 3.98, J=8.4, 5.2Hz), 2.80-2.60 (4H, m), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 26
3-Acetiltio-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
190
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) le fue añadida una solución de pirrolidina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (7,6 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber añadido acetato de etilo a ello, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (775 mg, rendimiento 78%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70-7.56 (4H, m), 7.35-7.50 (6H, m), 7.21 (1H, s), 4.80-4.70 (1H, m), 4.18-4.06 (2H, m), 4.00 (2H, dd, J= 8.6. 5.1 Hz), 3.80 (2H, t, J= 6.5 Hz), 3.60 (2H, t, J= 6.5 Hz), 1.83-1.98 (4H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (775 mg, 1,58 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 26(1)) en tetrahidrofurano anhidro (30 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (2,01 ml, 2,01 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (20 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (290 mg, rendimiento 72%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.42 (1H, s), 4.88-4.78 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J= 9.0, 6.8 Hz), 3.95 (2H, dd, J= 9.0, 4.3 Hz), 3.82 (2H, t, J= 6.5 Hz), 3.61 (2H, t, J= 6.5 Hz), 2.43 (1H, d, J= 6.8 Hz), 1.83-1.97 (4H, m).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (290 mg, 1,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 26(2)) en cloruro de metileno (9 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,30 ml, 5,12 mmoles) y trietilamina (0,70 ml, 5,12 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (335 mg, rendimiento 89%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.33 (1H, s), 5.48-5.38 (1H, m), 4.45 (2H, ddd, J= 10.1, 6.6, 1.2 Hz), 4.26 (2H, ddd, J= 10.1, 4.4, 1.1 Hz), 3.82 (2H, t, J= 6.6 Hz), 3.62 (2H, t, J= 6.6 Hz), 3.10 (3H, s), 2.00-1.83 (4H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (335 mg, 1,01 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 26(3)) en dimetilformamida (15 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,10 g, 8,80 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sódico y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-pirrolidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (235 mg, rendimiento 75%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.28 (1H, s), 4.52 (2H, dd, J= 8.4, 8.4 Hz), 4.39-4.48 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J= 8.4, 5.2 Hz), 3.82 (2H, t, J= 6.5 Hz), 3.61 (2H, t, J= 6.5 Hz), 2.36 (3H, s), 1.98-1.82 (4H, m).
Ejemplo de Referencia 27
3-Acetiltio-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
191
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 mg, 2,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) le fue añadida una solución de piperidina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (7,3 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sódico y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (607 mg, rendimiento 56%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.61 (4H, dd, J= 6.2 Hz), 7.35-7.50 (6H, m), 6.95 (1H, s), 4.78-4.70 (1H, m), 4.17-4.05 (2H, m), 4.01 (2H, dd, J= 8.6. 4.9 Hz), 3.64 (4H, t, J= 5.4 Hz), 1.75-1.48 (6H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (607 mg, 1,20 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 27(1)) en tetrahidrofurano anhidro (25 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,40 ml, 1,40 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo: metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (310 mg, rendimiento 97%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.97 (1H, s), 4.87-4.77 (1H, m), 4.33 (2H, ddd, J= 9.8, 6.6, 1.1 Hz), 3.96 (2H, dd, J= 9.8, 4.4 Hz), 3.57-3.72 (4H, t, J= 5.4 Hz), 1.81-1.45 (6H, m).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (310 mg, 1,16 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 27(2)) en cloruro de metileno (10 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,27 ml, 3,48 mmoles) y trietilamina (0,49 ml, 3,48 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (346 mg, rendimiento 86%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.06 (1H, s), 5.37-5.47 (1H, m), 4.46 (2H, dd, J= 9.8, 6.7 Hz), 4.27 (2H, dd, J= 9.8, 4.3 Hz), 3.65 (4H, t, J= 5.2 Hz), 3.10 (3H, t, J = 5.2 Hz), 1.78-1.47 (6H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (346 mg, 1,00 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 27(3)) en dimetilformamida (15 ml) le fue añadido tioacetato potásico (687 g, 6,01 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-piperidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (276 mg, rendimiento 85%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.02 (1H, s), 4.54 (2H, dd, J= 8.5 Hz), 4.39-4.49 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J= 8.5, 5.4 Hz), 3.65 (4H, t, J= 5.4 Hz), 2.36 (3H, s), 1.90-1.40 (6H, m).
Ejemplo de Referencia 28
3-Acetiltio-1-(4-N-ciclopentilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
192
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) le fue añadida una solución de ciclopropilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (7,20 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (979 mg, rendimiento 90%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.62-7.62 (4H, m), 7.33-7.50 (6H, m), 7.36 (1H, s), 4.80-4.68 (1H, m), 4.18-4.06 (3H, m), 4.02 (2H, dd, J= 8.2, 5.8 Hz), 3.80-3.70 (1H, m), 1.06 (9H, s), 0.83 (1H, t, J= 6.9 Hz), 0.82 (1H, t, J= 6.9 Hz), 0.70-0.58 (2H, m).
(2) 1-(4-N-Ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (907 mg, 1,94 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 28(1)) en tetrahidrofurano anhidro (40 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (2,30 ml, 2,30 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (367 mg, rendimiento 81%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.37 (1H, s), 7.23 (1H, s), 4.67-4.80 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J= 9.0, 6.7 Hz), 3.96 (2H, dd, J= 9.0, 4.3 Hz), 2.82-2.70 (1H, m), 0.84 (1H, t, J= 7.1 Hz), 0.83 (1H, t, J= 7.1 Hz), 0.55-0.70 (2H, m).
(3) 1-(4-N-Ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (376 mg, 1,57 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 28(2)) en cloruro de metileno (10 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,36 ml, 4,71 mmoles) y trietilamina (0,66 ml, 4,71 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue entonces agitada por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (343 mg, rendimiento 88%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.45 (1H, s), 7.18 (1H, s), 5.48-5.36 (1H, m), 4.44 (2H, dd, J= 10.2, 6.6 Hz), 4.26 (2H, dd, J= 10.2, 4.4 Hz), 3.11 (3H, s), 2.91-2.79 (1H, m), 0.85 (1H, d, J= 6.9 Hz), 0.84 (1H, d, J= 6.9 Hz), 0.72-0.66 (2H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (433 mg, 1,31 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 28(3)) en dimetilformamida (20 ml) le fue añadido tioacetato potásico (895 mg, 7,84 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-N-ciclopropilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (343 mg, rendimiento 88%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.14 (1H, s), 7.20 (1H, br s), 4.52 (2H, t, J= 8.6 Hz), 4.49-4.38 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J= 8.6, 5.9 Hz), 3.98 (2H, dd, J= 8.6, 5.9 Hz), 2,90-2.82 (1H, m), 2.36 (3H, s), 0.84 (1H, t, J= 7.0 Hz), 0.83 (1H, t, J= 7.0 Hz), 0.70-0.56 (2H, m).
Ejemplo de Referencia 29
3-Acetiltio-1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
193
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (50 ml) le fue añadida una solución de ciclobutilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (7,30 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (965 mg, rendimiento 87%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.62 (4H, d, J= 8.0 Hz), 7.28-7.39 (6H, m), 7.34 (1H, s), 4.70-4.80 (1H, m), 4.58-4.46 (1H, m), 4.11 (2H, dd, J= 8.8, 6.5 Hz), 4.02 (2H, dd, J= 8.8, 4.0 Hz), 2.35-2.20 (2H, m), 2.05-1.92 (2H, m), 1.69-1.80 (2H, m), 1.07 (9H, s).
(2) 1-(4-N-Ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (966 mg, 1,86 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 29(1)) en tetrahidrofurano anhidro (40 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (2,20 ml, 2,20 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (433 mg, rendimiento 95%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.35 (1H, s), 4.89-4.78 (1H, m), 4.60-4.45 (1H, m), 4.34 (2H, dd, J= 9.3, 6.7 Hz), 3.96 (2H, dd, J= 9.3, 6.7 Hz), 2.32-2.48 (2H, m), 2.48-2.32 (1H, m), 1.72-1.68 (2H, m).
(3) 1-(4-N-Ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (433 mg, 1,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 29(2)) en cloruro de metileno (10 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,30 ml, 5,12 mmoles) y trietilamina (0,70 ml, 5,12 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (567 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 5.48-5.38 (1H, m), 4.60-4.38 (3H, m including 4.47 (2H, dd, J= 9.6, 6.6 Hz)), 4.28 (2H, dd, J= 9.6, 4.6 Hz), 3.11 (3H, s), 2.48-2.33 (2H, m), 2.07-1.92 (2H, m), 1.85-1.68 (2H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (567 mg, 1,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 29(3)) en dimetilformamida (10 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,17 g, 10,3 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 90ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano: acetato de etilo (1 : 3) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-N-ciclobutilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (318 mg, rendimiento 75%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.33 (1H, s), 4.62-4.37 (4H, m including 4.54 (2H, t, J= 8.6 Hz), 4.00 (2H, dd, J= 8.6, 2.5 Hz)), 2,31-2.48 (5H,m including 2.37 (3H, s)), 2.07-1.93 (2H, m), 1.84-1.67 (2H, m).
Ejemplo de Referencia 30
3-Acetiltio-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
194
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en tolueno (50 ml) le fue añadida una solución de 1-metilpiperazina-trimetilaluminio 0,67M en tolueno (7,40 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (941 mg, rendimiento 85%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.62 (4H, dd, J= 8.0, 1.4 Hz), 7.50-7.36 (6H, m), 7.08 (1H, s), 4.10 (2H, dd, J= 10.3, 6.9 Hz), 4.00 (2H, dd, J= 10.3, 5.0 Hz)), 3.98-3.65 (4H, m), 2.63-2.42 (4H, m), 2.37 (3H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (941 mg, 1,81 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 30(1)) en tetrahidrofurano anhidro (47 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (2,17 ml, 2,17 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (3 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (422 mg, rendimiento 83%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.01 (1H, s), 4.88-4.80 (1H, m), 4.26 (2H, dd, J= 8.6, 7.1 Hz), 3.96 (2H, dd, J= 8.6, 4.8 Hz), 3.89-3.68 (4H, m), 2.80-2.58 (4H, m), 2.31 (3H, s).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (422 mg, 1,49 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 30(2)) en cloruro de metileno (21 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,14 ml, 1,79 mmoles) y trietilamina (0,25 ml, 1,79 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado mediante cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : metanol (3 : 1) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (537 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 5.47-5.40 (1H, m), 4.46 (2H, dd, J= 10.0, 6.6 Hz), 4.27 (2H, dd, J= 10.0, 4.3 Hz), 3.56-3.47 (4H, m), 3.11 (3H, s), 2.96-2.86 (4H, m), 2.81 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (537 mg, 1,49 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 20(3)) en dimetilformamida (16 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,02 g, 8,94 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (261 mg, rendimiento 51%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.15 (1H, s), 4.53 (2H, t, J= 8.5 Hz), 4.48-4.38 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J= 8.5, 5.4 Hz), 3.96-3.74 (4H, m), 2.63-2.42 (4H, m), 3.49 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 31
3-Acetiltio-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
195
(1) 1-t-Butoxicarbonil-3-metoxiazetidina
Una solución de 1-benzhidril-3-hidroxiazetidina (10,0 g, 41,8 mmoles) en metanol (300 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% (10,0 g) sobre carbón vegetal a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador. Al filtrado le fue añadido anhídrido di-t-butoxicarbónico (18,2 g, 83,6 mmoles), y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-t-butoxicarbonil-3-hidroxiazetidina (7,05 g, rendimiento 97%).
A continuación, a una solución de 1-t-butoxicarbonil-3-hidroxiazetidina (2,5 g, 14,4 mmoles) en dimetilformamida (125 ml) le fue añadido hidruro sódico (dispersión en aceite al 55%) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla por espacio de 10 minutos en el baño de hielo, la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 30 minutos. A la mezcla de reacción le fue añadido yoduro de metilo (1,79 ml, 28 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en un baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadida a ello en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10%, y la mezcla de reacción fue agitada en el baño de hielo por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para así obtener 1-t-butoxicarbonil-3-metoxiazetidina (2,18 g, rendimiento 81%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 4.16-4.10 (1H, m), 4.09-4.03 (2H, m), 3.82 (2H, dd, J=10.2, 4.4Hz), 3.28 (3H, s), 1.44 (9H, s).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 1-t-butoxicarbonil-3-metoxiazetidina (2,60 g, 13,9 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 31(1)) en 1,4-dioxano (26 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (26 ml) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada, y fueron añadidos al residuo acetato de etilo y éter diisopropílico. La mezcla resultante fue filtrada, y el residuo fue lavado con éter diisopropílico y fue luego secado bajo presión reducida para así obtener hidrocloruro de 3-metoxiazetidina (1,84 g, rendimiento 100%) en forma de cristales blancos.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,07 mmoles) en tolueno (25 ml) le fue añadida una solución de 3-metoxiazetidina-trimetilaluminio 0,77M en benceno (3,21 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada en un baño de agua (a 80ºC) por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (20 ml) y acetato de etilo (50 ml), y la mezcla resultante se tuvo en agitación a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (366 mg, rendimiento 67%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.64-7.60 (4H, m), 7.49-7.38 (6H, m), 7.36 (1H, s), 4.78-4.70 (2H, m), 4.42-4.36 (1H, m), 4.32-4.25 (1H, m), 4.24-4.18 (1H, m), 4.09 (2H, t, J=7.3Hz), 4.03-3.96 (3H, m), 3.33 (3H, s), 1.07 (9H, s).
(3) 3-Hidroxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (870 mg, 1,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 31(2)) en tetrahidrofurano anhidro (45 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (2,06 ml, 2,06 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (481 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.38 (1H, s), 4.85-4.79 (1H, m), 4.75 (1H, dd, J=10.3, 5.9 Hz), 4.41 (1H, dd, J=11.0, 2.9 Hz), 4.34-4.25 (3H, m), 4.22 (1H, tt, J=6.6, 4.4 Hz), 4.01 (1H, dd, J=10.3, 2.9 Hz), 3.93 (2H, dd, J=8.8, 4.4 Hz), 3.32 (3H, s).
(4) 3-Metanosulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (480 mg, 1,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 31(3)) en cloruro de metileno (25 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (397 \mul, 5,13 mmoles) y trietilamina (719 \mul, 5,13 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (568 mg, rendimiento 96%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.46 (1H, s), 5.45-5.39 (1H, m), 4.74 (1H, dd, J=10.6, 6.2 Hz), 4.47-4.37 (3H, m), 4.33-4.19 (4H, m), 4.04-3.99 (1H, m), 3.33 (3H, s), 3.10 (3H, s).
(5) 3-Acetiltio-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (560 mg, 1,61 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 31(4)) en dimetilformamida (28 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,10 g, 9,67 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 4,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (97 : 3) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (356 mg, rendimiento 68%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 4.73 (1H, dd, J=10.3, 5.1Hz), 4.51 (2H, t, J=8.1Hz), 4.46-4.37 (2H, m), 4.32-4.26 (1H, m), 4.21 (1H, tt, J=6.6, 4.4Hz), 4.00-3.93 (2H, m), 3.78-3.72 (1H, m), 3.32 (3H, s), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 32
3-Acetiltio-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
196
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en tolueno (100 ml) le fue añadida una solución de anilina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (14,6 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano: acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,20 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.73-7.61 (6H, m), 7.51-7.30 (9H, m), 7.14-7.08 (1H, m), 4.82-4.76 (1H, m), 4.14 (2H, dd, J= 15.2, 8.2 Hz), 4.06 (2H, dd, J= 8.9, 4.6 Hz), 1.08 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,20 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 32(1)) en tetrahidrofurano anhidro (110 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (5,15 ml, 5,15 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,18 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 9.04 (1H, br s), 7.76-7.65 (2H, m), 7.51-7.37 (3H, m), 7.18-7.08 (1H, m), 4.90-4.80 (1H, m), 4.36 (2H, dd, J= 9.1, 6.6 Hz), 3.99 (2H, dd, J= 9.1, 4.3 Hz).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,18 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 32(2)) en cloruro de metileno (60 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,50 ml, 6,44 mmoles) y trietilamina (0,90 ml, 6,44 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : acetato de etilo (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,36 g, rendimiento 89%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.98 (1H, br s), 7.68 (2H, d, J= 7.6 Hz), 7.55 (1H, s), 7.36 (2H, d, J= 8.0 Hz), 7.18-7.08 (1H, m), 5.50-5.40 (1H, m), 4.51 (2H, ddd, J= 9.6, 6.6, 1.0 Hz), 4.32 (2H, ddd, J= 9.6, 4.3, 1.0 Hz), 3.12 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-fenililcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,28 g, 3,85 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 32(3)) en dimetilformamida (40 ml) le fue añadido tioacetato potásico (2,60 g, 23,1 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-fenilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (893 mg, rendimiento 70%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 9.01 (1H, br s), 7.68 (2H, d, J= 8.6 Hz), 7.35 (2H, t, J = 7.5 Hz), 7.20-7.28 (1H, m), 4.58 (2H, t, J= 8.5 Hz), 4.52-4.02 (1H, m), 4.04 (2H, dd, J= 8.5, 5.3 Hz), 2.83 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 33
3-Acetiltio-1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina 
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197 
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(1) Éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)etil]carbámico
A una solución de aminoetanol (2,0 g, 32,7 mmoles) en cloruro de metileno (60 ml) le fueron añadidos éster bencílico del ácido clorofórmico (5,6 ml, 41,3 mmoles) y trietilamina (5,5 ml, 39,5 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (3 : 2) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido (2-hidroxietil)carbámico (5,37 g, rendimiento 840%) en forma de un sólido de color blanco.
A continuación, a una solución de éster bencílico del ácido (2-hidroxietil)carbámico (5,37 g, 27,5 mmoles) en dimetilformamida (160 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (8,6 ml, 33,0 mmoles) e imidazol (2,3 g, 33,8 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello etanol y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 2 horas. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (5 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)etil]carbámico (11,93 g, rendimiento 100%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.64 (4H, d, J=6.8Hz), 7.46-7.28 (12H, m), 5.10 (2H, s), 3.73 (2H, t, J=4.9Hz), 3.35 (2H, q, J=4.9Hz), 1.05 (9H, s).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Una solución de éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)etil]carbámico (3,01 g, 6,9 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 33(1)) en metanol (150 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% sobre carbón vegetal (3,0 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 2-(t-butildifenilsililoxi)etilamina (1,49 g, rendimiento 72%) en forma de un jarabe de color pardo claro.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,16 g, 2,49 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (8,5 ml) le fue añadida una solución de 2-(t-butildifenilsililoxi)etilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (6,42 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción solución de ácido acético acuoso al 10% (50 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (3 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,68 g, rendimiento 94%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.74 (1H, br t, J=4.6Hz), 7.67 (4H, d, J=7.5Hz), 7.60 (4H, d, J=7.5Hz), 7.42-7.32 (13H, m), 4.78-4.68 (1H, m), 4.08 (2H, t, J=7.8Hz), 4.03-3.98 (2H, m), 3.79 (2H, t, J=4.6Hz), 3.56 (2H, t, J=4.6Hz), 1.08 (9H, s), 1.06 (9H, s).
(3) 3-Hidroxi-1-(4-hidroxietilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,68 g, 2,33 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 33(2)) en tetrahidrofurano anhidro (75 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (5,6 ml, 5,6 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-hidroxietilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (481,2 mg, rendimiento 85%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 7.39 (1H, s), 4.78 (1H, m), 4.31 (2H, dd, J=8.4, 7.0Hz), 3.89 (2H, dd, J=8.4, 4.8Hz), 3.67 (2H, t, J=5.9Hz), 3.46 (2H, t, J=5.9Hz).
(4) 1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-hidroxietilcarbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (481,2 mg, 1,98 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 33(3)) en dimetilformamida (24,0 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (352 mg, 2,3 mmoles) e imidazol (116,3 mg, 2,4 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello metanol, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (2 : 3)
como eluyente para así obtener 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (531,1 mg, rendimiento 75%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.60 (1H, t, J=5.9Hz), 7.35 (1H, s), 4.88-4.76 (1H, m), 4.30 (2H, dd, J=9.8, 7.8Hz), 3.93 (2H, dd, J=9.8, 4.9Hz), 3.75 (2H, t, J=5.9Hz), 3.52 (2H, q, J=5.9Hz), 2.85 (1H, d, J=6.8Hz), 0.92 (9H, s), 0.08 (6H, s).
(5) 1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (531,1 mg, 1,49 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 33(4)) en cloruro de metileno (26,6 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,3 ml, 3,9 mmoles) y trietilamina (0,52 ml, 3,7 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a la mezcla de reacción metanol, y la mezcla resultante fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (647,1 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.54 (1H, br t, J=5.9Hz), 7.44 (1H, s), 5.46-5.39 (1H, m), 4.43 (2H, dd, J=9.7, 6.8Hz), 4.24 (2H, dd, J=9.7, 3.9Hz), 3.76 (2H, t, J=5.9Hz), 3.53 (2H, t, J=5.9Hz), 3.11 (3H, s), 0.93 (9H, s), 0.08 (6H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (647,1 mg, 1,49 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 33(5)) en dimetilformamida (32,0 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,28 mg, 8,9 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (3 : 2) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (398,2 mg, rendimiento 65%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.55 (1H, br t, J=5.4Hz), 7.40 (1H, s), 4.51 (2H, dd, J=8.8, 7.8Hz), 4.48-4.40 (1H, m), 3.96 (2H, dd, J=8.8, 4.9Hz), 3.75 (2H, t, J=5.4Hz), 3.52 (2H, q, J=5.4Hz), 2.37 (3H, s), 0.92 (9H, s), 0.08 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 34
3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
198
(1) Éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)propil]carbámico
A una solución de L-etilglicinol (2,00 g, 22,4 mmoles) en cloruro de metileno (60 ml) le fueron añadidos éster bencílico del ácido clorofórmico (3,84 ml, 26,9 mmoles) y trietilamina (3,77 ml, 26,9 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-1-(hidroximetil)propil]carbámico (4,27 g, 85%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-1-(hidroximetil)propil]carbámico (4,27 g, 19,1 mmoles) en dimetilformamida (128 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (5,97 ml, 22,9 mmoles) e imidazol (1,56 g, 22,9 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 4 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoxietil)propil]carbámico (9,48 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.65-7.60 (4H, m), 7.44-7.29 (11H, m), 5.09 (2H, s), 4.92-4.86 (1H, br d, J=8.8Hz), 3.71-3.47 (3H, m), 1.68-1.60 (2H, m), 1.05 (9H, s), 0.88 (3H, t, J=7.3Hz).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)propil]carbámico (3,70 g, 8,00 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 34(1)) en metanol (185 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (3,70 g) a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener (1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)propilamina (2,32 g, rendimiento 88%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (100 ml) le fue añadida una solución de (1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)propilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (12,9 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. La mezcla de reacción fue sometida a extracción con acetato de etilo. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,52 g, rendimiento 79%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.57-7.69 (8H, m), 7.28-7.46 (12H, m), 7.36 (1H, s), 4.69-4.74 (1H, m), 3.76-4.11 (5H, m), 3.74 (1H, dd, J=10.3, 2.9Hz), 3.70 (1H, dd, J=10.3, 4.1Hz), 1.08 (9H, s), 1.05 (9H, s), 0.93 (3H, t, J=7.3Hz).
(3) 3-Hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,52 g, 3,50 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 34(2)) en tetrahidrofurano anhidro (126 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (8,40 ml, 8,40 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (947 mg, rendimiento 100%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 4.86-4.75 (1H, m), 4.33 (2H, dd, J=8.1, 6.6Hz), 4.02-3.91 (3H, m), 3.79 (1H, dd, J=11.0, 1.2Hz), 3.67 (1H, dd, J=11.0, 6.6Hz), 3.19-3.10 (1H, br s), 3.02-2.97 (1H, br s), 1.73-1.64 (2H, m), 1.00 (3H, t, J=7.3Hz).
(4) 1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (940 mg, 3,50 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 34(3)) en dimetilformamida (47 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (633 mg, 4,20 mmoles) e imidazol (286 mg, 4,20 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (1,00 g, rendimiento 74%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.50-7.44 (1H, m), 7.36 (1H, s), 4.86-4.79 (1H, m), 4.33-4.27 (2H, m), 4.01-3.92 (3H, m), 3.72 (1H, dd, J=9.9, 2.6Hz), 3.65 (1H, dd, J=9.9, 4.0Hz), 1.70-1.60 (2H, m), 0.95 (3H, t, J=7.3Hz), 0.92 (9H, s), 0.06 (6H, s).
(5) 1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (1,00 mg, 2,59 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 34(4)) en cloruro de metileno (50 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (602 \mul, 7,78 mmoles) y trietilamina (1,09 ml, 7,78 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,02 g, rendimiento 85%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.44 (1H, s), 7.44-7.38 (1H, m), 5.45-5.39 (1H, m), 4.47-4.40 (2H, m), 4.29-4.21 (2H, m), 4.02-3.95 (1H, m), 3.73 (1H, dd, J=10.3, 2.9Hz), 3.65 (1H, dd, J=10.3, 4.4Hz), 3.11 (3H, s), 0.95 (3H, t, J=7.3Hz), 0.92 (9H, s), 0.06 (6H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,02 g, 2,20 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 34(5)) en dimetilformamida (50 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,51 mg, 13,2 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (618 mg, rendimiento 63%) en forma de un aceite de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43-7.39 (1H, m), 7.40 (1H, s), 4.53-4.47 (2H, m), 4.46-4.41 (1H, m), 4.00-3.93 (3H, m), 3.74-3.70 (1H, m), 3.67-3.62 (1H, m), 2.37 (3H, s), 1.72-1.56 (2H, m), 0.95 (3H, t, J=7.3Hz), 0.91 (9H, s), 0.06 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 35
3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
199
(1) Éster bencílico del ácido [(1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metil-etil]carbámico
A una solución de L-alaninol (2,00 g, 26,6 mmoles) en cloruro de metileno (60 ml) le fueron añadidos éster bencílico del ácido clorofórmico (4,57 ml, 32,0 mmoles) y trietilamina (4,48 ml, 32,0 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-2-hidroxi-1-metiletil]carbámico (4,61 g, rendimiento 83%) en forma de cristales blancos.
A continuación, a una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-1-(hidroximetil)etil]carbámico (4,61 g, 22,0 mmoles) en dimetilformamida (140 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (6,87 ml, 26,4 mmoles) e imidazol (1,80 g, 26,4 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (8 : 1 \rightarrow 6 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletil]carbámico (10,7 g, rendimiento 100%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.67-7.60 (4H, m), 7.42-7.29 (11H, m), 5.10 (2H, s), 4.96-4.85 (1H, br s), 3.91-3.80 (1H, m), 3.67 (1H, dd, J=10.3, 2.6Hz), 3.56 (1H, dd, J=10.3, 3.7Hz), 1.55 (3H, d, J=11.7Hz), 1.09 (9H, s).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletil]carbámico (6,71 g, 15,0 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 35(1)) en metanol (340 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (6,71 g) a temperatura ambiente por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno \rightarrow cloruro de metileno : metanol (85 : 15) como eluyente para así obtener (1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metil-etilamina (3,93 g, rendimiento 84%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,0 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (100 ml) le fue añadida una solución de (1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (12,9 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,77 g, rendimiento 88%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta(ppm) 7.69-7.65 (4H, m), 7.61-7.57 (4H, m), 7.46-7.30 (12H, m), 7.35 (1H, s), 4.75-4.68 (1H, m), 4.28-4.18 (1H, m), 4.10-4.03 (H,m), 4.03-3.97 (2H, m), 3.72 (1H, dd. J=9.9, 4.1Hz), 3.64 (1H, dd, J=9.9, 3.3Hz), 1.31 (3H, d, J=6.6Hz), 1.09 (9H, s), 1.05 (9H, s).
(3) 3-Hidroxi-1-[4-((1S)-2-hidroxi-1-metiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-2-(t-butildifenilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,77 g, 3,77 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 35(2)) en tetrahidrofurano anhidro (140 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (9,06 ml, 9,06 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 3,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-[4-((1S)-2-hidroxi-1-metiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (911 mg, rendimiento 94%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.34 (1H, s), 7.26-7.10 (1H, br s), 4.86-4.77 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.24-4.12 (1H,m), 3.99-3.92 (2H, m), 3.79-3.71 (1H, m), 3.66-3.58 (1H, m), 3.28-3.21 (1H, br s), 2.99-2.92 (1H, br d, J=5.1Hz), 1.25 (3H, d, J=7.2Hz).
(4) 1-{4-[(1S)-2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-[4-((1S)-2-hidroxi-1-metiletilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (910 mg, 3,54 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 35(3)) en dimetilformamida (46 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (586 mg, 3,89 mmoles) e imidazol (265 mg, 3,89 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 4) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (935 mg, rendimiento 71%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.48-7.42 (1H, br d, J=8.8Hz), 7.36 (1H, s), 4.86-4.79 (1H, m), 4.30 (2H, ddd, J=15.6, 5.9, 2.9Hz), 4.34-4.27 (1H, m), 3.97-3.91 (2H, m), 3.68 (1H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 3.63 (1H, dd, J=9.5, 2.9Hz), 1.25 (3H, d, J=7.3Hz), 0.93 (9H, s), 0.07 (6H, s).
(5) 1-{4-[(1S)-2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (930 mg, 2,50 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 35(4)) en cloruro de metileno (47 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (480 \mul, 6,20 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 35(4)) y trietilamina (869 \mul, 6,20 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,16 g, rendimiento 100%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 7.43-7.39 (1H, br s), 5.44-5.39 (1H, m), 4.43 (2H, ddd, J=6.6, 5.9, 1.5Hz), 4.27-4.21 (2H, m), 4.21-4.13 (1H, m), 3.68 (1H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 3.63 (1H, dd, J=9.5, 2.9Hz), 3.11 (3H, s), 1.25 (3H, d, J=6.6Hz), 0.93 (9H, s), 0.07 (6H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,16 g, 2,50 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 35(5)) en dimetilformamida (60 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,71 mg, 15,0 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-2-(t-butildimetilsililoxi)-1-metiletilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (709 mg, rendimiento 60%) en forma de un aceite de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 7.43-7.39 (1H, br s), 5.44-5.39 (1H, m), 4.43 (2H, ddd, J=6.6, 5.9, 1.5Hz), 4.27-4.21 (2H, m), 4.21-4.13 (1H, m), 3.68 (1H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 3.63 (1H, dd, J=9.5, 2.9Hz), 3.11 (3H, s), 1.25 (3H, d, J=6.6Hz), 0.93 (9H, s), 0.07 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 36
3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoxi)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
200
(1) Éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoxi)-2-metilpropil]carbámico
A una solución de L-valinol (2,00 g, 19,4 mmoles) en cloruro de metileno (60 ml) le fueron añadidos éster bencílico del ácido clorofórmico (3,32 ml, 23,3 mmoles) y trietilamina (3,27 ml, 23,3 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-1-(hidroximetil)-2-metilpropil]carbámico (4,56 g, rendimiento 99%) en forma de cristales blancos.
A continuación, a una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-1-(hidroximetil)-2-metilpropil]carbámico (4,56 g, 19,2 mmoles) en dimetilformamida (140 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (6,00 ml, 23,1 mmoles) e imidazol (1,57 g, 23,1 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (8 : 1 \rightarrow 6 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoxi)-2-metil-propil]-carbámico (10,1 g, rendimiento 100%) en forma de cristales blancos.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.65-7.60 (4H, m), 7.45-7.29 (11H, m), 5.09 (2H, s), 4.92-4.84 (1H, br d, J=9.5Hz), 3.71 (1H, dd, J=10.3, 4.4Hz), 3.66 (1H, dd, J=10.3, 4.4Hz), 3.55-3.46 (1H, m), 1.99-1.87 (1H, m), 1.05 (9H, s), 0.89 (6H, d, J=7.3Hz).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoxi)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoxi)-2-metilpropil]carbámico (7,14 g, 15,0 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 36(1)) en metanol (215 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (7,14 g) a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (98 : 2 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener (1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilpropilamina (3,73 g, rendimiento 73%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,0 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (100 ml) le fue añadida una solución de (1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilpropilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (12,9 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 4 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoxi)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,98 g, rendimiento 61%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.69-7.56 (8H, m), 7.44-7.31 (12H, m), 7.37 (1H, s), 4.74-4.67 (1H, m), 4.09-3.94 (4H, m), 3.87-3.78 (1H, m), 3.85 (1H, dd, J=10.3, 2.1Hz), 3.67 (1H, dd, J=10.3, 3.9Hz), 2.17-2.05 (1H, m), 1.09 (9H, s), 1.06 (9H, s), 0.99 (3H, d, J=6.9Hz), 0.97 (3H, d, J=6.8Hz).
(3) 3-Hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoxi)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,98 g, 2,60 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 36(2)) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (6,23 ml, 6,23 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación en el baño de hielo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (755 mg, rendimiento 100%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.34 (1H, s), 7.35-7.31 (1H, br s), 4.84-4.75 (1H, m), 4.32 2H, dd, J=8.8, 6.8Hz), 3.97 (1H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 3.94 (1H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 3.87-3.77 (2H, m), 3.73 (1H, dd, J=10.7, 6.8Hz), 3.33-3.21 (1H, br s), 3.24-2.94 (1H, br s), 1.98 (1H, septet, J=6.8Hz), 1.01 (3H, d, J=6.8Hz), 0.98 (3H, d, J=6.8Hz).
(4) 1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (750 mg, 2,60 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 36(3)) en dimetilformamida (38 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (470 mg, 3,12 mmoles) e imidazol (212 mg, 3,12 mmoles) en un baño de aceite, y la mezcla de reacción fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (700 mg, rendimiento 67%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.54-7.50 (1H, br d, J=9.8Hz), 7.37 (1H, s), 4.86-4.80 (1H, m), 4.35-4.27 (2H, m), 3.98-3.92 (2H, m), 3.84 (1H, dd, J=9.8, 2.9Hz), 3.84-3.79 (1H, m), 3.62 (1H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 2.00 (1H, septet, J=6.8Hz), 0.98 (3H, d, J=6.8Hz), 0.96 (3H, d, J=6.8Hz), 0.91 (9H, s), 0.06 (6H, s).
(5) 1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (700 mg, 1,75 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 36(4)) en cloruro de metileno (35 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (406 \mul, 5,25 mmoles) y trietilamina (736 \mul, 5,25 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (895 mg, rendimiento 100%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.50-7.45 (1H, br d, J=9.5Hz), 7.44 (1H, s), 5.45-5.39 (1H, m), 4.43 (2H, ddd, J=11.0, 6.6, 1.5Hz), 4.24 (2H, ddd, J=11.0, 4.4, 1.5Hz), 3.83 (1H, dd, J=10.7, 2.6Hz), 3.84-3.79 (1H, m), 3.62 (1H, dd, J=10.7, 4.8Hz), 3.11 (3H, s), 2.04-1.94 (1H, m), 0.98 (3H, d, J=7.3Hz), 0.96 (3H, d, J=6.6Hz), 0.91 (9H, s), 0.06 (6H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (890 mg, 1,75 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 36(5)) en dimetilformamida (45 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,20 g, 10,5 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 1)
como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilpropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (502 mg, rendimiento 63%) en forma de un aceite de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.50-7.45 (1H, br d, J=9.5Hz), 7.40 (1H, s), 4.54-4.43 (2H, m), 4.47-4.40 (1H, m), 4.00-3.93 (2H, m), 3.86-3.78 (2H, m), 3.64-3.59 (1H, m), 2.04-1.94 (1H, m), 0.98 (3H, d, J=6.6Hz), 0.96 (3H, d, J=6.6Hz), 0.91 (9H, s), 0.05 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 37
3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
201
(1) Éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutil]carbámico
A una solución de L-leucinol (1,00 g, 8,53 mmoles) en cloruro de metileno (30 ml) le fueron añadidos éster bencílico del ácido clorofórmico (1,46 ml, 10,2 mmoles) y trietilamina (1,43 ml, 10,2 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente por espacio de 3 días. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-1-(hidroximetil)-3-metilbutil]carbámico (2,31 g, rendimiento 100%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-1-(hidroximetil)-3-metilbutil]carbámico (4,84 g, 19,3 mmoles) en dimetilformamida (145 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (6,01 ml, 23,1 mmoles) e imidazol (1,57 g, 23,1 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo entonces en agitación a temperatura ambiente por espacio de 8 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (19 : 1 \rightarrow 7 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutil]carbámico (9,22 g, rendimiento 98%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.65-7.61 (4H, m), 7.45-7.32 (11H ,m), 5.09 (2H, d, J=2.9Hz), 4.85-4.80 (1H, br d, J=8.8Hz), 3.86-3.77 (1H, m), 3.70 (1H, dd, J=9.8, 2.9Hz), 3.59 (1H, dd, J=9.8, 2.9Hz), 1.63-1.54 (1H, m), 1.43-1.37 (2H, m), 1.06 (9H, s), 0.91 (3H, d, J=6.8Hz), 0.89 (3H, d, J=6.8Hz).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Una solución de éster bencílico del ácido [(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutil]carbámico (7,35 g, 15,0 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 37(1)) en metanol (220 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (7,35 g) a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (98 : 2 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener (1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutilamina (4,50 g, rendimiento 84%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (100 ml) le fue añadida una solución de (1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (12,9 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada en el baño de hielo por espacio de 0,5 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 4 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,14 g, rendimiento 64%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.68-7.62 (4H, m), 7.62-7.56 (4H, m), 7.46-7.28 (12H, m), 7.37 (1H, s), 4.74-4.69 (1H, m), 4.24-4.16 (1H, m), 4.11-4.03 (2H, m), 1.00 (1H, dd, J=10.7, 4.9Hz), 3.98 (1H, dd, J=11.7, 4.9Hz), 3.72 (1H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 3.67 (1H, dd, J=9.8, 2.9Hz), 1.65-1.46 (3H, m), 1.08 (9H, s), 1.05 (9H, s), 0.94 (3H, d, J=5.9Hz), 0.92 (3H, d, J=5.9Hz).
(3) 3-Hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,14 g, 3,72 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 37(2)) en tetrahidrofurano anhidro (107 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (8,94 ml, 8,94 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (825 mg, rendimiento 74%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.36 (1H, s), 7.24-7.17 (1H, br d, J=8.8Hz), 4.85-4.77 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=8.8, 7.3Hz), 4.20-4.12 (1H, m), 3.96 (2H, ddd, J=8.8, 8.8, 4.4Hz), 3.77 (1H, dd, J=10.9, 1.3Hz), 3.61 (1H, dd, J=10.9, 5.9Hz), 3.17-3.08 (1H, br s), 3.08-2.95 (1H,br s), 1.75-1.65 (1H, m), 1.55-1.46 (1H, m), 1.46-1.37 (1H, m), 0.95 (3H, d, J=6.6Hz), 0.94 (3H, d, J=6.6Hz).
(4) 1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(1S)-1-(hidroximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (820 mg, 2,74 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 37(3)) en dimetilformamida (41 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (495 mg, 3,29 mmoles) e imidazol (224 mg, 3,29 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción se tuvo entonces en agitación en el baño de hielo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (731 mg, rendimiento 65%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.40-7.37 (1H, br s), 7.36 (1H, s), 4.87-4.79 (1H, m), 4.31 (2H, dd, J=15.0, 8.4Hz), 4.21-4.12 (1H, m), 3.98-3.92 (2H, m), 3.68-3.65 (2H, m), 1.68-1.60 (1H, m), 1.56-1.40 (2H, m), 0.95 (3H, d, J=6.6Hz), 0.94 (3H, d, J=6.6Hz), 0.92 (9H, s,), 0.06 (6H, s).
(5) 1-{4-[(1S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (730 mg, 1,76 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 37(4)) en cloruro de metileno (37 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (409 \mul, 5,29 mmoles) y trietilamina (741 \mul, 5,29 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (846 mg, rendimiento 98%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.43 (1H, s), 7.36-7.30 (1H, br d, J=9.5Hz), 5.45-5.39 (1H, m), 4.47-4.39 (2H, m), 4.28-4.20 (2H, m), 4.20-4.14 (1H, m), 3.66 (2H, d, J=3.7Hz), 3.11 (3H, s), 1.70-1.58 (1H, m), 1.53 (1H, ddd, J=13.9, 8.8, 5.9Hz), 1.44 (1H, ddd, J=13.9, 8.8, 5.9Hz), 0.95 (6H, t, J=6.3Hz), 0.92 (9H, s), 0.09 (6H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (840 mg, 1,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 37(5)) en dimetilformamida (42 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,17 mg, 10,2 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(1S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-3-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (452 mg, rendimiento 56%) en forma de un aceite de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.39 (1H, s), 7.36-7.31 (1H, br d, J=9.5Hz), 4.54-4.39 (3H, m), 4.20-4.12 (1H, m), 3.97 (1H, dd, J=8.8Hz), 3.96 (1H, dd, J=8.8Hz), 3.66 (2H, d, J=3.7Hz), 1.70-1.60 (1H, m), 1.58-1.40 (2H, m), 0.95 (3H, d, J=6.6Hz), 0.94 (3H, d, J=6.6Hz), 0.91 (9H, s), 0.05 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 38
3-Acetiltio-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
202
(1) Éster bencílico del ácido [(1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutil]carbámico
A una solución de L-isoleucinol (2,20 g, 18,8 mmoles) en cloruro de metileno (66 ml) le fueron añadidos éster bencílico del ácido clorofórmico (3,22 ml, 22,5 mmoles) y trietilamina (3,15 ml, 22,5 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S,2S)-1-(hidroximetil)-2-metilbutil]carbámico (4,17 g, rendimiento 88%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de [(2S)-(N-benciloxicarbonil)-2-amino-3-metilbutanol (4,17 g, 16,6 mmoles) en dimetilformamida (125 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (5,18 ml, 19,9 mmoles) e imidazol (1,35 g, 19,9 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (19 : 1 \rightarrow 5 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [(1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutil]carbámico (6,72 g, rendimiento 83%) en forma de cristales incoloros.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.65-7.60 (4H, m), 7.45-7.30 (11H, m), 5.09 (2H, m), 4.93-4.84 (1H, br d, J=8.8Hz), 3.74-3.60 (2H, m), 3.60-3.52 (1H, m), 1.74-1.64 (1H, m), 1.53-1.44 (1H, m), 1.14-1.06 (1H, m), 1.04 (9H, s), 0.92-0.8 (6H, m).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze- tidina
Una solución de éster bencílico del ácido [(1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutil]carbámico (6,72 g, 13,7 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 38(1)) en metanol (200 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (6,72 g) a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (98 : 2 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener (1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutilamina (4,04 g, rendimiento 83%).
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (100 ml) le fue añadida una solución de (1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (12,9 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 30 minutos. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,89 g, rendimiento 57%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70-7.57 (8H, m), 7.46-7.26 (12H, m), 7.36 (1H, s), 4.73-4.67 (1H, m), 4.09-3.94 (4H, m), 3.93-3.86 (1H, m), 3.84 (1H, dd, J=10.7, 2.0Hz), 3.67 (1H, dd, J=10.7, 3.4Hz), 1.90-1.82 (1H, m), 1.22-1.11 (1H, m), 1.07 (9H, s), 1.04 (9H, s), 0.93 (3H, d, J=6.9Hz), 0.90 (3H, t, J=7.3Hz).
(3) 3-Hidroxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(hidroximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildifenilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,89 g, 2,45 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 38(2)) en tetrahidrofurano anhidro (95 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (5,87 ml, 5,87 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación en el baño de hielo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(hidroximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (811 mg, rendimiento 100%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.37 (1H, s), 7.35-7.31 (1H, br s), 4.87-4.78 (1H, m), 4.33 (2H, dd, J=10.3, 6.6Hz), 4.00-3.93 (2H, m), 3.92-3.86 (1H, m), 3.86-3.78 (1H, m), 3.78-3.70 (1H, m), 3.05-2.98 (1H, br s), 2.75-2.71 (1H, br d, J=7.3Hz), 1.80-1.70 (1H, m), 1.59-1.50 (1H, m), 1.27-1.13 (1H, m), 0.98 (3H, d, J=7.3Hz), 0.93 (3H, t, J=7.3Hz).
(4) 3-Hidroxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(hidroximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,34 g, 4,48 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 38(3)) en dimetilformamida (67 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (810 mg, 5,37 mmoles) e imidazol (527 mg, 5,37 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (5 : 1 \rightarrow
3 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,35 g, rendimiento 97%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.57-7.51 (1H, br d, J=8.8Hz), 7.36 (1H, s), 4.86-4.79 (1H, m), 4.34-4.26 (2H, m), 3.98-3.91 (2H, m), 3.90-3.84 (1H, m), 3.84 (1H, dd, J=9.8, 2.4Hz), 3.63 (1H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 2.63-2.59 (1H, br d, J=5.9Hz), 1.80-1.71 (1H, m), 1.60-1.51 (1H, m), 1.20-1.12 (1H, m), 0.95 (3H, d, J=6.8Hz), 0.91 (9H, s), 0.90 (2H, t, J=6.8Hz), 0.05 (6H, s).
(5) 1-{4-[(1S,2S)-1-(t-Butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,35 g, 3,26 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 38(4)) en cloruro de metileno (68 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (758 \mul, 9,79 mmoles) y trietilamina (1,37 ml, 9,79 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,55 g, rendimiento 97%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
\newpage
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.50-7.46 (1H, br d, J=9.8Hz), 7.43 (1H, s), 5.45-5.39 (1H, m), 4.45 (1H, dd, J=8.8, 6.8Hz), 4.42 (1H, dd, J=8.8, 6.8Hz), 4.26 (1H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 4.23 (1H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 3.91-3.85 (1H, m), 3.84 (1H, dd, J=10.3, 2.4Hz), 3.63 (1H, dd, J=10.3, 3.4Hz), 3.11 (3H, s), 1.80-1.71 (1H, m), 1.59-1.51 (1H, m), 1.22-1.12 (1H, m), 0.95 (3H, d, J=3.8Hz), 0.91 (9H, s), 0.91 (3H, t, J=6.8Hz), 0.05 (6H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,55 g, 3,15 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 38(5)) en dimetilformamida (78 ml) le fue añadido tioacetato potásico (2,16 g, 18,9 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(1S,2S)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-2-metilbutilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (910 mg, rendimiento 61%) en forma de un aceite de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.52-7.46 (1H, br d, J=9.5Hz), 7.39 (1H, s), 4.54-4.40 (3H, m), 4.00-3.92 (2H, m), 3.91-3.84 (1H, m), 3.83 (1H, dd, J=10.3, 2.2Hz), 3.63 (1H, dd, J=10.3, 3.7Hz), 2.37 (3H, s), 1.81-1.70 (1H, m), 1.58-1.50 (1H, m), 1.20-1.09 (1H, m), 0.95 (3H, d, J=6.6Hz), 0.91 (9H, s), 0.90 (3H, t, J=7.3Hz), 0.05 (6H, s).
Ejemplo de Referencia 39
3-Acetiltio-1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina 
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203 
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(1) Éster metílico de t-butildifenilsililoxi-N-carbobenciloxi-L-serina
A una solución de N-carbobenciloxi-L-serina (4,0 g, 16,7 mmoles) en benceno (200 ml) y metanol (50 ml) le fue añadida una solución de trimetilsilildiazometano 2M en hexano (10,9 ml, 21,7 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener éster metílico de N-carbobenciloxi-L-serina (4,40 g, rendimiento 100%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de éster metílico de N-carbobenciloxi-L-serina (4,40 g, 16,7 mmoles) en dimetilformamida (210 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (5,20 ml, 20,0 mmoles) e imidazol (1,36 g, 20,0 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 días. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (8 : 1 \rightarrow 6 : 1) como eluyente para así obtener éster metílico de t-butildifenilsililoxi-N-carbobenciloxi-L-serina (18,8 g, 99%).
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.61-7.56 (4H, m), 7.45-7.31 (11H, m), 5.69-5.62 (1H, br d, J=8.8Hz), 5.12 (2H, s), 4.45 (1H, dt, J=8.1, 2.9Hz), 4.09 (1H, dd, J=10.3, 2.9Hz), 3.90 (1H, dd, J=10.3, 2.9Hz), 3.74 (3H, s).
(2) Éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etil]carbámico
A una solución de éster metílico de t-butildifenilsililoxi-N-carbobenciloxi-L-serina (11,5 g, 24,8 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 39(1)) en una mezcla de tetrahidrofurano (115 ml) y etanol (230 ml) le fueron añadidos borohidruro sódico (1,88 g, 49,6 mmoles) y cloruro de litio (2,10 g, 49,6 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre cloruro de metileno y solución de ácido acético acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo
(3 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(hidroximetil)etil]carbámico (9,26 g, rendimiento 81%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(hidroximetil)etil]carbámico (9,26 g, 20,0 mmoles) en dimetilformamida (280 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (7,79 ml, 30,0 mmoles) e imidazol (2,04 g, 30,0 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (19 : 1 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etil]carbámico (13,6 g, 97%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.65-7.60 (8H, m), 7.44-7.29 (17H, m), 5.05 (2H, s), 4.99-4.93 (1H, br d, J=8.8Hz), 3.94-3.87 (1H, m), 3.85 (2H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 3.76 (2H, dd, J=9.8, 5.9Hz), 1.02 (18H, s).
(3) 3-t-Butildifeniloxi-1-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
Una solución de éster bencílico del ácido [2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etil]carbámico (13,6 g, 19,5 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 39(2)) en metanol (410 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (13,6 g) a temperatura ambiente por espacio de 3,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (98 : 2 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener 2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilamina (9,34 g, rendimiento 84%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,29 mmoles) obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (100 ml) le fue añadida una solución de 2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilamina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (12,9 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción solución de ácido acético acuoso al 10% (200 ml) y acetato de etilo (200 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1 \rightarrow 4 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifeniloxi-1-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (3,19 g, rendimiento 75%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70-7.65 (8H, m), 7.59-7.55 (4H, m), 7.44-7.28 (18H, m), 7.33 (1H, s), 4.71-4.64 (1H, m), 4.31-4.22 (1H, m), 4.04-3.97 (4H, m), 3.94 (2H, dd, J=9.2, 4.4Hz), 3.82 (2H, dd, J=9.2, 6.2Hz).
(4) 3-Hidroxi-1-{4-[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifeniloxi-1-{4-[2-(t-butildifenilsililoxi)-1-(t-butildifenilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (3,19 g, 3,23 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 39(3)) en tetrahidrofurano anhidro (160 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (11,6 ml, 11,6 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (9 : 1 \rightarrow 8 : 2) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[2-hidroxi-1-(hidroximetil)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,21 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 7.47-7.41 (1H, br d, J=8.8Hz), 7.42 (1H, s), 5.84 (1H, d, J=6.6Hz), 4.80 (2H, t, J=5.5Hz), 4.66-4.58 (1H, m), 4.28-4.21 (2H, m), 3.88-3.81 (1H, m), 3.80 (2H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 3.53 (2H, m), 3.45 (2H, m).
(5) 1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[2-hidroxi-1-(hidroximetil)etilcarbamoil]1,3-tiazol-2-il}azetidina (750 mg, 2,74 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 39(4)) en dimetilformamida (38 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (951 mg, 6,31 mmoles) e imidazol (430 mg, 6,31 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue agitada en el baño de hielo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo
(3 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (070 mg, rendimiento 71%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 7.62-7.57 (1H, br d, J=8.1Hz), 7.38 (1H, s), 4.87-4.78 (1H, m), 4.30 (2H, dd, J=10.3, 6.6Hz), 4.12-4.04 (1H, m), 3.93 (2H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 3.84 (2H, dd, J=9.5, 3.7Hz), 3.62 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 2.26-2.22 (1H, br d, J=6.6Hz), 0.92 (18H, s), 0.08 (12H, s).
(6) 1-{4-[2-(t-Butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-hidroxiazetidina (1,27 g, 2,53 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 39(5)) en cloruro de metileno (64 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (587 \mul, 7,59 mmoles) y trietilamina (1,06 ml, 7,59 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,56 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}):\delta (ppm) 7.58-7.53 (1H, br d, J=8.8Hz), 7.44 (1H, s), 5.43-5.38 (1H, m), 4.41 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.23 (2H, dd, J=9.5, 5.9Hz), 4.12-4.03 (1H, m), 3.84 (1H, dd, J=9.5, 2.9Hz), 3.64 (2H, dd, J=9.5, 5.9Hz), 3.11 (3H, s), 0.91 (18H, s), 0.07 (12H, s).
(7) 3-Acetiltio-1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti- dina
A una solución de 1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,56 g, 2,53 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 39(6)) en dimetilformamida (78 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,73 g, 15,2 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1 \rightarrow 2 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[2-(t-butildimetilsililoxi)-1-(t-butildimetilsililoximetil)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (773 mg, rendimiento 57%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.59-7.53 (1H, br d, J=8.8Hz), 7.40 (1H, s), 4.52-4.42 (3H, m), 4.11-4.06 (1H, m), 3.94 (2H, dd, J=8.4, 4.8Hz), 3.83 (2H, dd, J=9.5, 3.3Hz), 3.61 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 2.37 (3H, s), 0.91 (18H, s), 0.07 (12H, s).
Ejemplo de Referencia 40
3-Acetiltio-1-4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}1,3-tiazol-2-il}azetidina
204
(1) Éster bencílico del ácido N-[2-(t-butildifenilsililoxi)etil]-N-metil-carbámico
A una solución de N-metilaminoetanol (1,20 ml, 15,0 mmoles) en cloruro de metileno (36 ml) le fueron añadidos éster bencílico del ácido clorofórmico (2,56 ml, 18,0 mmoles) y trietilamina (2,52 ml, 18,0 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue dividida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbámico (2,8 g, rendimiento 90%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
A continuación, a una solución de éster bencílico del ácido N-(2-hidroxietil)-N-metilcarbámico (2,82 g, 13,5 mmoles) en dimetilformamida (85 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (4,21 ml, 16,2 mmoles) e imidazol (1,10 g, 16,2 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello metanol, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (9 : 1) como eluyente para así obtener éster bencílico del ácido N-[2-(t-butildifenilsililoxi)etil]-N-metil-carbámico (5,7 g, rendimiento 94%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.72 (1H, dd, J= 7.4, 1.6 Hz), 7.47-7.20 (11H, m), 7.64 (4H, t, J= 6.1 Hz), 5.12 (1H, s), 5.05 (1H, s), 3.80 (1H, t, J= 5.5 Hz), 3.73 (1H, t, J= 5.5 Hz), 3.45 (1H, t, J= 5.6 Hz), 3.41 (1H, t, J= 5.6 Hz), 2.99 (3H, s), 1.03 (9H, s).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-{N-[2-(t-butildifenilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
Una solución de éster bencílico del ácido N-[2-(t-butildifenilsililoxi)-etil]-N-metil-carbámico (5,7 g, 12,7 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 40(1)) en metanol (285 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (5,7 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo :
metanol (19 : 2) \rightarrow acetato de etilo : metanol (1 : 1) como eluyente para así obtener [2-(t-butildifenilsililoxi)etil]metilamina (2,67 g, rendimiento 69%) en forma de un aceite transparente.
A continuación, a una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-etoxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,91 g, 4,09 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(1)) en benceno (100 ml) le fue añadida una solución de [2-(t-butildifenilsililoxi)-etil]-metil-amina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (13,6 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue calentada en reflujo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción en un baño de hielo solución de ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (100 ml), y la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1)
como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-[2-(t-butildifenilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,54 g, rendimiento 85%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.74-7.55 (8H, m), 7.50-7.31 (12H, m), 7.00 (1H, s), 4.79-4.64 (1H, m), 4.08-3.59 (7H, m, including 4.80-4.00 (2H, m), 3.85-3.73 (2H, m)), 3.27 (0.3 H, s), 3.07 (0.7 H, s), 1.06 (9H, s), 1.02 (9H, s).
(3) 3-Hidroxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-[2-(t-butildifenilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (2,24 g, 3,05 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 40(2)) en tetrahidrofurano anhidro (70 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (7,32 ml, 7,32 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (20 : 1) \rightarrow acetato de etilo : metanol (15 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (833 mg, rendimiento 94%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.18 (1H, s), 4.86-4.74 (1H, m), 4.29 (2H, t, J= 8.4 Hz), 3.94 (2H, dd, J= 8.4, 4.9 Hz), 3.86 (2H, t, J= 5.0 Hz), 3.65 (2H, t, J= 5.0 Hz), 3.07 (3H, s).
(4) 1-(4-{N-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (576 mg, 2,24 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 40(3)) en dimetilformamida (29 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (354 mg, 2,35 mmoles) e imidazol (160 mg, 2,35 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (3 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (489 mg, rendimiento 60%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.11 (0.7H, s), 7.01 (0.3H, s), 4.87-4.76 (1H, m), 4.31 (2H, t, J= 8.3 Hz), 3.96 (2H, dd, J= 8.3, 4.5 Hz), 3.91-3.83 (1H, m), 3.79 (1H, d, J= 4.5 Hz), 3.74 (1H, d, J= 4.5 Hz), 3.66-3.52 (1H, m), 3.28 (0.9H, s), 3.11 (2.1H, s), 0.88 (9H, s), 0.05 (6H, d, J= 14.0 Hz).
(5) 1-(4-{N-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (442 mg, 1,19 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 40(4)) en cloruro de metileno (15 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,12 ml, 1,49 mmoles) y trietilamina (0,20 ml, 1,49 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico y secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (517 mg, rendimiento 97%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.18 (0.6H, s), 7.08 (0.4H, s), 5.45-5.35 (1H, m), 4.42 (2H, t, J= 8.7 Hz), 4.23 (2H, dd, J= 8.7, 3.7 Hz), 3.91-3.81 (1H, m), 3.81-3.74 (1H, m), 3.74-3.67 (1H, m), 3.62-3.53 (1H, m), 3.26 (1.2H, s), 3.09 (1.8H, s), 0.85 (9H, s), 0.01 (6H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (516 mg, 1,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 40(5)) en dimetilformamida (15 ml) le fue añadido tioacetato potásico (815 mg, 7,14 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-metil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (279 mg, rendimiento 57%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.08 (0.7H, s), 7.16 (0.4H, s), 4.52 (2H, t, J= 7.3 Hz), 4.48-4.39 (1H, m), 3.97 (2H, t, J= 7.3 Hz), 3.92-3.82 (1H, m), 3.78 (1H, d, J= 4.1 Hz), 3.75 (1H, d, J= 4.1 Hz), 3.66-3.50 (1H, m), 3.59 (0.9H, s), 3.92 (2.1H, s), 2.39 (3H, s), 0.88 (9H, d, J= 4.7 Hz), 0.04 (6H, d, J= 1.5 Hz).
Ejemplo de Referencia 41
(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-Nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo 
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205
(1) 1-(4-Aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (6,73 g, 15,3 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (330 ml) le fueron añadidos bromuro de alilo (1,59 ml, 18,4 mmoles) y diisopropiletilamina (3,21 ml, 18,4 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 10 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (5 : 1) como eluyente para así obtener 1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (5,31 g, rendimiento 73%) en forma de un aceite de color pardo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.63-7.59 (4H, m), 7.46 (1H, s), 7.47-7.36 (6H, m), 6.04-5.95 (1H, m), 5.40-5.35 (1H, m), 5.28-5.24 (1H, m), 4.80-4.78 (2H, m), 4.77-4.71 (1H, m), 4.16 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.06 (2H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-Aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (5,31 g, 11,1 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(1)) en tetrahidrofurano anhidro (266 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetrabutilamónico 1M en tetrahidrofurano (13,3 ml, 13,3 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,91 g, rendimiento 100%) en forma de cristales de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.49 (1H, s), 6.06-5.96 (1H, m), 5.42-5.35 (1H, m), 5.29-5.24 (1H, m), 4.87-4.80 (1H, m), 4.79 (2H, d, J=5.9Hz), 4.38 (2H, t, J=8.8Hz), 4.02 (2H, dd, J=9.8, 3.9Hz), 2.52-2.37 (1H, br s).
(3) 1-(4-Aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (2,91 g, 11,1 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(2)) en cloruro de metilo (146 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (2,58 ml, 33,3 mmoles) y trietilamina (4,67 ml, 33,3 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. Al residuo le fueron añadidos acetato de etilo y éter diisopropílico, y entonces la mezcla fue filtrada y el residuo resultante fue lavado con éter diisopropílico para así obtener 1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (2,71 g, rendimiento 77%) en forma de cristales de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.55 (1H, s), 6.07-5.96 (1H, m), 5.45-5.35 (2H, m), 5.30-5.25 (1H, m), 4.81 (2H, dt, J=5.9, 1.5Hz), 4.51 (2H, dd, J=11.0, 6.6, 1.5Hz), 4.31 (2H, ddd, J=11.0, 4.4, 1.5Hz), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (2,70 g, 8,51 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(3)) en dimetilformamida (135 ml) le fue añadido tioacetato potásico (5,83 g, 51,1 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 10 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,61 g, rendimiento 63%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.51 (1H, s), 6.06-5.96 (1H, m), 5.41-5.35 (1H, m), 5.29-5.26 (1H, m), 4.58 (2H, t, J=8.1Hz), 4.47-4.40 (1H, m), 4.04 (2H, dd, J=9.5, 5.9Hz), 2.36 (3H, s).
(5) (1R,5S,6S)-6-[(R)-1-t-Butildimetilsililoxietil]-2-(difenilfosforiloxi)-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-(difenilfosforiloxi)-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (5,00 g, 8,41 mmoles) en dimetilformamida (250 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (2,54 g, 16,8 mmoles) e imidazol (1,14 g, 16,8 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue agitada en el baño de hielo por espacio de 7 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello metanol, y la mezcla resultante fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-2-(difenilfosforiloxi)-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (5,27 g, rendimiento 88%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.14 (2H, d, J=8.8Hz), 7.56 (2H, d, J=8.8Hz), 7.39-7.29 (4H, m), 7.28-7.17 (6H, m), 5.34 (1H, d, J=13.9Hz), 5.23 (1H, d, J=13.9Hz), 4.24 (1H, dq, J=5.9, 5.9Hz), 4.20 (1H, dd, J=10.3, 2.9Hz), 3.43 (1H, dq, J=10.3,7.3Hz), 3.28 (1H, dd, J=5.9, 2.9Hz), 1.23 (3H, d, J=5.9Hz), 1.20 (3H, d, J=7.3Hz), 0.86 (9H, s), 0.06 (6H, d, J=3.7Hz).
(6) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de 3-acetiltio-1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,61 g, 5,40 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(4)) en dimetilformamida (80 ml) le fue añadido acetato de hidrazina (596 mg, 6,47 mmoles) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada por espacio de 1,5 horas bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadida gota a gota a la mezcla de reacción en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno una solución de (1R,5S,6S)-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-2-(difenilfosforiloxi)-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (3,83 g, 5,40 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(5)) en acetonitrilo (190 ml).
A continuación fue añadida a la mezcla de reacción diisopropiletilamina (3,76 ml, 21,6 mmoles), y la mezcla se tuvo en agitación durante la noche mientras se incrementaba gradualmente la temperatura de la mezcla de reacción hasta la temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y fue luego lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (3,73 g, rendimiento 97%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.8Hz), 7.65 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53 (1H, s), 6.07-5.96 (1H, m), 5.45 (1H, d, J=13.9Hz), 5.42-5.35 (1H, m), 5.30-5.25 (1H, m), 5.26 (1H, d, J=13.9Hz), 4.80 (2H, d, J=5.1Hz), 4.55 (2H, q, J=8.1Hz), 4.32-4.22 (3H, m), 4.15-4.09 (3H, m), 3.26 (1H, dd, J=5.1, 2.9Hz), 3.13 (1H, J=9.5, 7.3Hz), 1.25 (3H, d, J=5.9Hz), 1.24 (3H, d, J=7.3Hz), 0.87 (9H, s), 0.08 (6H, d, J=5.1Hz).
(7) (1R,5S,6S)-2-[1-(4-Carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aliloxicarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (3,73 g, 5,2 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(6)) en cloruro de metileno (180 ml) le fueron añadidos dimedona (1,46 g, 10,4 mmoles), tetraquis(trifenilfosfina)paladio(0) (603 mg, 0,522 mmoles) y trifenilfosfina (205 mg, 0,783 mmoles), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol
(10 : 1) \rightarrow cloruro de metileno : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,91 g, rendimiento 54%) en forma de un sólido de color pardo claro.
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 675 [M+H]^{+}
(8) Éster p-nitrobencílico de N-(t-butoxicarbonil)glicina
A una solución de N-(t-butoxicarbonil)glicina (1,51 g, 8,62 mmoles) en cloruro de metileno anhidro (75 ml) le fueron añadidos alcohol p-nitrobencílico (2,63 ml, 17,2 mmoles), hidrocloruro de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (llamado de aquí en adelante WSC) (3,3 g, 17,2 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (106 mg, 0,87 moles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para así obtener éster p-nitrobencílico de N-(t-butoxicarbonil)glicina (2,67 g, rendimiento 100%) en forma de cristales blancos.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=7.5Hz), 7.53 (2H, d, J=7.5Hz), 5.28 (2H, s), 5.02 (1H, br t, J=3.3Hz), 4.00 (2H, d, J=3.3Hz), 1.46 (9H, s).
(9) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-Nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de éster nitrobencílico de N-(t-butoxicarbonil)glicina (2,67 g, 8,62 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(8)) en 1,4-dioxano (27 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (27 ml) en un baño de hielo. La mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción resultante fue filtrada, y el residuo obtenido fue lavado con éter dietílico y secado para así obtener hidrocloruro de éster p-nitrobencílico de glicina (1,59 g, rendimiento 75%) en forma de cristales blancos.
A continuación, a una suspensión de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (207,4 mg, 0,31 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(7)) e hidrocloruro de éster p-nitrobencílico de glicina (116 mg, 0,47 mmoles) (obtenido como se ha descrito anteriormente) en dimetilformamida (10,5 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,072 ml, 0,47 mmoles) y trietilamina (0,14 ml, 1,00 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con una solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, una solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (3 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (209,7 mg, rendimiento 77%) en forma de un jarabe de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.65 (2H, d, J=8.8Hz), 7.59 (1H, t, J=3.3Hz), 7.54 (2H, d, J=8.8Hz), 7.47 (1H, s), 5.46 (1H, d, J=13.9Hz), 5.30 (2H, s), 5.27 (1H, d, J=13.9Hz), 4.51 (1H, t, J=8.3Hz), 4.47 (1H, t, J=8.3Hz), 4.37-4.23 (5H, m), 4.08 (1H, dd, J=8.3, 3.3Hz), 4.06 (1H, dd, J=8.3, 3.3Hz), 3.27 (1H, dd, J=6.2, 3.6Hz), 3.16 (1H, dq, J=11.5, 8.8Hz), 1.27 (3H, d, J=8.8Hz), 1.25 (3H, d, J=8.8Hz), 0.87 (9H, s), 0.09 (3H, s), 0.08 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 42
(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-t-Butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
206
(1) 1-Benciloxicarbonil-3-t-butildifenilsililoxiazetidina
Una solución de 1-benzhidril-3-hidroxiazetidina (10 g, 41,8 mmoles) en metanol (300 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% (10 g) sobre carbón vegetal en un baño de agua (a 50ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada y el residuo fue lavado con metanol. El filtrado combinado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y agua destilada. La capa orgánica fue concentrada bajo presión reducida, y el residuo obtenido fue secado bajo presión reducida. El producto crudo resultante fue disuelto en una mezcla de cloruro de metileno (120 ml) y metanol (120 mol), fueron añadidos a ello éster bencílico del ácido clorofórmico (8,95 ml, 62,7 mmoles) y trietilamina (8,79 ml, 62,7 mmoles), y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-benciloxicarbonil-3-hidroxiazetidina (1,91 g, rendimiento 22%).
A continuación, a una solución de 1-benciloxicarbonil-3-hidroxiazetidina (1,91 g, 9,22 mmoles) en dimetilformamida (96 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildifenilsililo (2,88 ml, 11,1 mmoles) e imidazol (756 mg, 11,1 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla resultante fue agitada en el baño de hielo por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (6 : 1) como eluyente para así obtener 1-benciloxicarbonil-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (4,04 g, rendimiento 98%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.73-7.70 (1H, m), 7.60-7.56 (4H, m), 7.46-7.29 (10H, m), 5.07 (2H, s), 4.58-4.52 (1H, m), 4.01 (2H, m), 3.95 (2H, dd, J=9.8, 4.9Hz), 1.05 (9H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-t-Butildifenilsililoxiazetidina-1-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
Una solución de 1-benciloxicarbonil-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (4,04 g, 9,07 mmoles) en metanol (200 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (4,04 g) a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida, y el residuo obtenido fue secado bajo presión reducida para así obtener 3-t-butildifenilsililoxiazetidina (2,70 g, rendimiento 96%) en forma de un aceite incoloro.
A continuación, a una solución de (1R,5S,6S)-2-[1-(carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,71 g, 2,53 mmoles) y 3-t-butildifenilsililoxiazetidina (947 mg, 3,04 mmoles) (obtenida como se ha descrito anteriormente) en dimetilformamida (86 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (461 \mul, 3,04 mmoles) y trietilamina (426 \mul, 3,04 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 5,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (4 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (789 mg, rendimiento 32%).
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.66 (2H, d, J=8.8Hz), 7.62 (2H, d, J=8.8Hz), 7.47-7.36 (6H, m), 7.39 (1H, s), 5.46 (1H, d, J=13.7Hz), 5.27 (1H, d, J=13.7Hz), 4.65-4.52 (2H, m), 4.50-4.42 (2H, m), 4.40-4.34 (1H, m), 4.32-4.26 (3H, m), 4.19-4.11 (1H, m), 4.06-4.00 (3H, m), 3.28 (1H, dd, J=4.9, 2.9Hz), 3.18 (1H, dq, J=8.8, 7.8Hz), 1.27 (3H, d, J=7.8Hz), 1.26 (3H, d, J=5.9Hz), 1.07 (9H, s), 0.87 (9H, s), 0.09 (6H, d, J=5.9Hz).
Ejemplo de Referencia 43
(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-Metil-N-(p-nitrobenciloxicarbonil)metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo 
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207 
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(1) Éster p-nitrobencílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético
A una solución de sarcosina (3,56 g, 40 mmoles) en una mezcla de metanol (180 ml) y agua destilada (90 ml) le fue añadida solución de hidróxido sódico acuoso 1M (80 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello en el baño de hielo Dowex-50W para ajustar el pH de la mezcla de reacción a un valor de 5 a 4. La mezcla de reacción fue filtrada y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida para así obtener ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (7,57 g) en forma de un producto crudo.
A continuación, a una solución de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (2,52 g, 13,3 mmoles) y alcohol p-nitrobencílico (4,07 g, 26,6 mmoles) en cloruro de metileno (125 ml) le fueron añadidas WSC (5,10 g, 26,6 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (252 mg, 1,33 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener éster p-nitrobencílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (4,30 g, rendimiento 88%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.28-8.29 (2H, m), 7.58-7.47 (2H, m), 5.72 (2H, d, J= 2.2 Hz), 4.07 (1.2H, s), 3.99 (0.8H, s), 2.95 (3H, d, J= 5.8 Hz), 1.47 (5.4H, s), 1.39 (3.6H, s).
(2) Hidrocloruro de éster p-nitrobencílico de sarcosina
A una solución de éster p-nitrobencílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-metil-amino)acético (4,30 g, 133 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 43(1)) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (4,3 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción resultante fue filtrada y el residuo obtenido fue lavado con éter dietílico y secado para obtener hidrocloruro de éster p-nitrobencílico de sarcosina (3,04 g, rendimiento 88%).
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.32-8.23 (2H, m), 7.72-7.60 (2H, m), 5.42 (2H, s), 4.08 (2H, s), 2.77 (3H, s).
(3) (1R,5S,6S)-2-1-{4-[N-Metil-N(p-nitrobenciloxicarbonil)metilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-(t-butildimetilsililoxi)etil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una suspensión de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,00 g, 1,51 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(7)) e hidrocloruro de éster p-nitrobencílico de sarcosina (590 mg, 2,26 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 43(2)) en dimetilformamida (30 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,37 ml, 2,26 mmoles) y trietilamina (0,95 ml, 6,80 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-metil-N-(p-nitrobenciloxicarbonil)metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-(t-butildimetilsililoxi)etil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (997 mg, rendimiento 76%).
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.29-8.15 (4H, m), 7.71-7.62 (2H, m), 7.58-7.42 (2H, m), 7.40 (0.6H, s), 7.25 (0.4H, s), 5.46 (1H, d, J= 13.8 Hz), 5.34-5.22 (3H, m including 5.26 (1H, d, J= 13.9 Hz)), 4.63 (1H, s), 4.57-4.45 (1H, m), 4.27 (2H, t, J= 9.6 Hz), 4.26 (2H, t, J= 9.6 Hz), 3.89 (1H, dd, J= 7.7, 5.8 Hz), 3.36 (1.2H, s), 3.15 (1.8H, s), 3.26 (1H, dd, J= 5.0, 2.6 Hz), 1.25 (6H, d, J= 7.2 Hz), 0.86 (9H, s), 0.08 (6H, d, J= 5.0 Hz).
Ejemplo de Referencia 44
(1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-Metil-N-(carbamoil)metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo 
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208 
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(1) Éster t-butílico del ácido N-carbamoilmetil-N-metil-carbámico
A una solución de ácido N-(t-butoxicarbonil-N-metil-amino)-acético (5,03 g, 26,6 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 43(1)) en cloruro de metileno (250 ml) le fueron añadidos 1-hidroxibenzotriazol (7,19 g, 53,2 mmoles), WSC (10,2 g, 53,2 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (325 mg, 2,66 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno por espacio de 2 días. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadida a ello solución de amoníaco acuoso al 28%, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido N-carbamoilmetil-N-metil-carbámico (848 mg, rendimiento 17%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 3.87 (2H, s), 2.96 (3H, s), 1.47 (9H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-Metil-N-(carbamoil)metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de éster t-butílico del ácido N-carbamoilmetil-N-metil-carbámico (848 mg, 4,50 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 44(1)) en 1,4-dioxano (8,50 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (8,50 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción resultante fue filtrada, y el residuo obtenido fue lavado con éter dietílico y secado para así obtener hidrocloruro de 2-metilaminoacetamida (421 mg, rendimiento 75%).
A continuación, a una suspensión de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,00 g, 1,51 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(7)) e hidrocloruro de 2-metilamino-acetamida (282 mg, 2,26 mmoles) (obtenido como se ha descrito anteriormente) en dimetilformamida (30 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,37 ml, 2,26 mmoles) y trietilamina (0,95 ml, 6,80 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-metil-N-(carbamoil)metilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-(t-butildimetilsililoxi)etil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (932 mg, rendimiento 84%).
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J= 7.9 Hz), 7.65 (2H, d, J= 7.9), 7.35 (0.7H, s), 7.23 (0.3H, s), 5.46 (1H, d, J= 13.9 Hz), 5.26 (1H, d, J= 13. 9 Hz), 4.62 = 4.40 (2H, m), 4.40-4.22 (3H, m), 4.20 (1H, s), 4.12 (2H, dd, J= 14.2, 7.1 Hz), 4.07-3.97 (1H, m), 4.04 (0.6H, br s), 3.27 (1H, dd, J= 5.0, 2.8 Hz), 3.15 (1H, dq, J= 9.5, 7.3 Hz), 3.11 (2.4H, br s), 1.25 (6H, d, J= 5.8 Hz), 0.87 (9H, s), 0.08 (6H, d, J= 5.0 Hz).
Ejemplo de Referencia 45
(1R,5S,6S)-2-{1-[4-(Carbamoilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
209
(1) Éster t-butílico del ácido (carbamoilmetil)carbámico
A una solución de N-(t-butoxicarbonil)glicina (3,01 g, 17,2 mmoles) en cloruro de metileno anhidro (150 ml) le fueron añadidos 1-hidroxibenzotriazol (4,63 g, 34,3 mmoles), WSC (6,60 g, 34,4 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (210 mg, 1,72 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadida a ello solución de amoníaco acuoso al 28%, y la mezcla resultante fue agitada por espacio de 15 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre cloruro de metileno y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1)
como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido (carbamoilmetil)carbámico (717,7 mg, rendimiento 24%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta(ppm) 6.202 (1H, br s), 5.763 (1H, br s), 5.267 (1H, br t, J-5.1Hz), 3.820 (2H, d, J=5.1Hz), 1.456 (9H, s).
(2) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(Carbamoilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de éster t-butílico del ácido (carbamoilmetil)carbámico (717,2 mg, 4,12 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 45(1)) en 1,4-dioxano (7,2 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (7,2 ml) en un baño de hielo. La mezcla de reacción se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción resultante fue filtrada, y el residuo obtenido fue lavado con éter dietílico y secado para así obtener hidrocloruro de glicinamida (389 mg, rendimiento 86%) en forma de cristales blancos. A continuación, a una suspensión de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (566,6 mg, 0,85 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(7)) e hidrocloruro de glicinamida (154,3 mg, 1,40 mmoles) (obtenido como se ha descrito anteriormente) en dimetilformamida (28,0 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,2 ml, 1,32 mmoles) y trietilamina (0,36 ml, 2,6 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (2 : 3) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(carbamoilmetil)carbamoil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metil-carbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (428,6 mg, rendimiento 70%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.4Hz), 7.70 (1H, t, J=5.3Hz), 7.65 (2H, d, J=8.4Hz), 7.46 (1H, s), 6.15 (1H, br s), 5.46 (1H, d, J=13.4Hz), 5.43 (1H, br s), 5.27 (1H, d, J=13.4Hz), 4.52 (1H, t, J=8.3Hz), 4.50 (1H, t, J=8.3Hz), 4.345-4.24 (3H, m), 4.12-4.04 (4H, m), 3.265 (1H, dd, J=5.1, 2.7Hz), 3.155 (1H, dq, J=9.4, 7.0Hz), 1.264 (3H, d, J=7.0Hz), 1.22 (3H, d, J=4.8Hz), 0.86 (9H, s), 0.09 (3H, s), 0.08 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 46
(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-Metil-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
210
(1) Éster p-nitrobencílico de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina
A una solución de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina (2,50 g, 11,5 mmoles) en cloruro de metileno (125 ml) le fueron añadidos alcohol p-nitrobencílico (3,52 g, 23,0 mmoles), WSC (4,41 g, 23,0 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (140 mg, 1,15 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno por espacio de 4,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para así obtener éster p-nitrobencílico de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina (3,07 g, rendimiento 76%) en forma de cristales blancos.
211
(2) Hidrocloruro de alcohol p-nitrobencílico y L-valina
A una solución de éster p-nitrobencílico de N-(t-butoxicarbonil)-valina (3,07 g, 8,71 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 46(1)) en 1,4-dioxano (31 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (31 ml) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida, al residuo obtenido le fue añadido acetato de etilo, y la mezcla fue filtrada. El residuo resultante fue lavado con acetato de etilo y secado para así obtener hidrocloruro de éster p-nitrobencílico de L-valina (2,21 g, rendimiento 88%).
Análisis elemental:
Valor observado: C, 48,77% H, 5,63% N, 9,49% Cl, 12,38%
Valor calculado: C, 49,92% H, 5,93% N, 9,70% Cl, 12,28%
(3) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-Metil-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,00 g, 1,48 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(7)) e hidrocloruro de éster p-nitrobencílico de L-valina (514 mg, 1,78 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 46(2)) en dimetilformamida (50 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (275 \mul, 1,78 mmoles) y diisopropiletilamina (620 \mul, 3,56 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-2-metil-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,15 g, rendimiento 86%).
212
Ejemplo de Referencia 47
(1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Carbamoil-2-metilpropilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
213
(1) Éster t-butílico del ácido (1S)-1-carbamoil-2-metilcarbámico
A una solución de N-(t-butoxicarbonil)-L-valina (3,00 g, 13,8 mmoles) en cloruro de metileno anhidro (150 ml) le fueron añadidos 1-hidroxibenzotriazol (3,73 g, 27,6 mmoles), WSC (5,29 g, 27,6 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (169 mg, 1,38 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadida a ello solución de amoníaco acuoso al 28%, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido (1S)-1-carbamoil-2-metilcarbámico (2,81 g, rendimiento 94%) en forma de cristales blancos.
214
(2) Hidrocloruro de (2S)-2-amino-3-metilbutiramida
A una solución de éster t-butílico del ácido (1S)-1-carbamoil-2-metilcarbámico (2,81 g, 13,0 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 47(1)) en 1,4-dioxano (28 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (28 ml) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo entonces en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello acetato de etilo, la mezcla de reacción fue filtrada, y el residuo obtenido fue lavado con acetato de etilo y secado para así obtener hidrocloruro de (2S)-2-amino-3-metilbutiramida (1,94 g, rendimiento 98%).
Análisis elemental:
Valor observado: C, 39,21% H, 8,34% N, 18,31% Cl, 23,38%
Valor calculado: C, 39,35% H, 8,59% N, 18,35% Cl, 23,23%
(3) (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-Carbamoil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo
A una solución de (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carboxi-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (1,00 g, 1,48 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 41(7)) e hidrocloruro de L-valinamida (272 mg, 1,78 mmoles) obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 47(2) en dimetilformamida (50 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (275 \mul, 1,78 mmoles) y diisopropiletilamina (620 \mul, 3,56 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) \rightarrow cloruro de metileno : acetato de etilo (3 : 1) como eluyente para así obtener (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-carbamoil-2-metilpropilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-t-butildimetilsililoxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxilato de p-nitrobencilo (934 mg, rendimiento 82%).
215
Ejemplo de Referencia 48
3-Acetiltio-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1) Éster metílico del ácido N-(t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)acético
A una solución de hidrocloruro de éster metílico de glicina (3,03 g, 24,1 mmoles) en metanol (150 ml) le fueron añadidas trietilamina (3,4 ml, 24,4 mmoles) y acetona (17,7 ml, 241,1 mmoles) y la mezcla fue agitada en un baño de agua (a 50ºC) por espacio de 1,5 horas. A continuación fue añadido a ello en un baño de hielo cianoborohidruro sódico (3,03 g, 48,2 mmoles), y fue añadida a la mezcla de reacción una solución de cloruro de hidrógeno al 10% en metanol para ajustar el pH de la mezcla de reacción a un valor de 3 a 4, y la mezcla de reacción resultante fue agitada por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida, y el residuo fue secado bajo presión reducida. A una suspensión del producto crudo obtenido en una mezcla de metanol (45 ml) y cloruro de metileno (90 ml) le fueron añadidos anhídrido di-t-butoxicarbónico (10,5 g, 48,1 mmoles) y trietilamina (13,5 ml, 96,9 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetato de etilo (5 : 1) como eluyente para así obtener éster metílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (3,93 g, rendimiento 70%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 4.54-4.40 (0.6H, m), 4.24-4.10 (0.4H, m), 3.86 (0.8H, s), 3.74 (1.2H, s), 3.72 (3H, s), 1.48 (3.6H, s), 1.42 (5.4H, s), 1.11 (2.4H, d, J=7.7Hz), 1.09 (3.6H, d, J=7.7Hz).
(2) Éster p-nitrobencílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético
A una solución de éster metílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (5,59 g, 24,2 mmoles) en una mezcla de metanol (112 ml) y agua destilada (56 ml) le fue añadida solución de hidróxido sódico acuoso 1M (37 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 7 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello en un baño de hielo Dowex-50W para ajustar el pH de la mezcla de reacción a un valor de 5 a 4. La mezcla de reacción fue filtrada y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida para así obtener ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)acético (5,25 g) en forma de producto
crudo.
A continuación, a una solución de ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (2,05 g, 9,44 mmoles) y alcohol p-nitrobencílico (2,89 g, 18,9 mmoles) en cloruro de metileno (100 ml) le fueron añadidas WSC (3,62 g, 18,9 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (120 mg, 0,98 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla se tuvo entonces en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (5 : 2) como eluyente para así obtener éster p-nitrobencílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)acético (1,93 g, rendimiento 58%) en forma de un jarabe transparente y de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.24 (1H, d, J=8.0Hz), 8.22 (1H, d, J=8.0Hz), 7.53 (2H, d, J=8.0Hz), 5.26 (2H, s), 4.54-4.42 (0.5H, m), 4.28-4.16 (0.5H, m), 3.94 (1H, s), 3.84 (1H, s), 1.48 (4.5H, s), 1.36 (4.5H, s), 1.12 (3H, d, J=7.7Hz), 1.10 (3H, d, J=7.7Hz).
(3) Hidrocloruro de éster p-nitrobencílico del ácido (isopropilamino)acético
A una solución de éster p-nitrobencílico del ácido (N-t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (1,93 g, 5,48 mmoles) en 1,4-dioxano (20 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (20 ml) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos y filtrada, y el residuo obtenido fue lavado con éter dietílico y secado para así obtener hidrocloruro de éster p-nitrobencílico del ácido (isopropilamino)acético (1,50 g, rendimiento 95%) en forma de cristales blancos.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.26 (2H, d,. J=8.8Hz), 7.67 (2H, d, J=8.8Hz), 5.43 (2H, s), 4.11 (2H, s), 3.50-3.40 (1H, m), 1.34 (6H, d, J=5.9Hz).
(4) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti- dina
A una solución de hidrocloruro de éster p-nitrobencílico del ácido (isopropilamino)acético (500 mg, 1,73 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 48(3)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (506 mg, 1,15 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (15 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,28 ml, 1,73 mmoles) y trietilamina (0,60 ml, 4,32 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (578 mg, rendimiento 75%) en forma de un jarabe de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.28-8.18 (2H, m), 7.70-7.30 (12H, m), 7.38 (0.4H, br s), 7.10 (0.6H, br s), 5.29 (0.8H, br s), 5.16 (1.2H, br s), 5.04-4.44 (3H, m), 4.20-3.85 (5H, m), 1.17 (6H, br s), 1.06 (9H, br s).
(5) 3-Hidroxi-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,81 g, 2,69 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 48(4)) en tetrahidrofurano anhidro (90 ml) le fueron añadidos ácido acético (0,18 ml, 3,23 mmoles) y una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (3,23 ml, 3,23 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (968 mg, rendimiento 83%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.22 (2H, d, J= 8.0 Hz), 7.55 (1H, d, J= 8.0 Hz), 7.42 (1H, d, J= 8.0 Hz), 7.39 (0.4H, s), 7.12 (0.6H, s), 5.29 (1.2H, br s), 5.22 (0.8H, br s), 5.03-4.89 (0.5H, m), 4.89-4.76 (1H, m), 4.59 (1H, br s), 4.32 (1H, t, J= 7.3 Hz), 4.22-4.02 (2H, m), 4.02-3.85 (1H, m), 3.85 (1H, m), 1.10-1.03 (6H, m).
(6) 1-{4-[N-Isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[N-isopropil-(p-N-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidina) (968 mg, 2,23 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 48(5)) en cloruro de metileno (50 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,42 ml, 5,34 mmoles) y trietilamina (0,37 ml, 2,67 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla de reacción fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (835 mg, rendimiento 73%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J= 7.9 Hz), 7.55 (1H, d, J= 7.9 Hz), 7.48 (0.4H, br s), 7.43 (1H, d, J= 7.9 Hz), 7.26 (0.6H, br s), 5.51-5.16 (3H, m including 5.29 (1.2H, s), 5.22 (0.8H, s)), 5.04-4.89 (0.4H, m), 4.89-4.72 (1H, m), 4.59-4.48 (1H, m), 4.48-4.37 (1H, m), 4.37-4.18 (2H, m), 4.18-3.96 (2H, m), 3.11 (3H, s), 1.30-1.17 (6H, m).
(7) 3-Acetiltio-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}-3-metanosulfoniloxiazetidina (835 mg, 1,63 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 48(6)) en dimetilformamida (42 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,12 g, 9,77 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 7 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[N-isopropil-N-(p-nitrobenciloxicarbonilmetil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (312 mg, rendimiento 39%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J= 6.9 Hz), 7.55 (1H, d, J= 8.3 Hz), 7.44 (0.6H, br s), 7.43 (1H, d, J= 8.3 Hz), 7.17 (0.6H, br s), 5.19 (1.2H, s), 5.22 (0.8H, br s), 5.02-4.90 (0.6H, m), 4.90-4.78 (0.4H, m), 4.65-3.65 (7H, m), 2.36 (3H, br s), 1.40-1.18 (6H, m).
Ejemplo de Referencia 49
3-Acetiltio-1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina 
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216 
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(1) Éster t-butílico del ácido N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbámico
A una solución de ácido (t-butoxicarbonil-N-isopropil-amino)-acético (3,20 mg, 14,7 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 48(2)) y 1-hidroxibenzotriazol (4,0 g, 29,6 mmoles) en cloruro de metileno (150 ml) le fueron añadidas WSC (5,6 g, 29,2 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (200 mg, 1,64 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadida a ello solución de amoníaco acuoso al 28% (40 ml), y la mezcla resultante fue agitada por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre cloruro de metileno y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbámico (2,67 g, rendimiento 84%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 5.434 (1H, br s), 4.25 (1H, br s), 3.735 (2H, s), 1.478 (9H, s), 1.14 (6H, d, J=6.6Hz).
(2) Hidrocloruro de 2-isopropilaminoacetamida
A una solución de éster t-butílico del ácido N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbámico (2,67 g, 12,3 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 49(1)) en 1,4-dioxano (30 ml) le fue añadida una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (30 ml) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo entonces en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla resultante fue filtrada, y el residuo fue lavado con éter dietílico y fue luego secado bajo presión reducida para así obtener hidrocloruro de 2-isopropilaminoacetamida (1,82 g, rendimiento 97%) en forma de cristales blancos.
^{1}H-NMR (500 MHz, CD_{3}OD): \delta (ppm) 3.80 (2H, s), 3.46-3.38 (1H, m), 1.34 (6H, d, J=6.8Hz)
(3) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de hidrocloruro de 2-isopropilamino-acetamida (500 mg, 3,28 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 49(2)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (961 mg, 2,19 mmoles) en dimetilformamida (29 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,54 ml, 3,29 mmoles) y trietilamina (1,15 ml, 8,19 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,18 g, rendimiento 100%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.62 (4H, d, J= 6.6 Hz), 7.52-7.36 (6H, m), 7.21-6.85 (1H, m), 4.80-4.72 (1H, m), 4.28 (1H, t, J= 7.3 Hz), 4.24 (1H, t, J= 7.3 Hz), 4.16-4.01 (2H, m), 4.01-3.88 (2H, m), 1.25 (6H, d, J= 6.7 Hz), 1.07 (9H, br s).
(4) 1-[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (6,52 g, 11,8 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 49(3)) en tetrahidrofurano anhidro (326 ml) le fue añadida una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (14,2 ml, 14,2 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (2,35 g, rendimiento 67%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.20-7.02 (0.6H, m), 7.02-6.80 (0.6H, m), 5.86-5.62 (0.4H, m), 5.62-5.32 (0.6H, m), 5.25-5.14 (0.3H, m), 4.90-4.75 (0.7H, m), 4.67 (0.7H, quint., J= 6.6 Hz), 4.43-4.34 (0.4H, m), 4.34-4.22 (0.6H, m),4.03 (2H, s), 4.00-3.91 (2H, m), 3.89 (0.3H, quint., J= 6.0 Hz), 1.26 (6H, dd, J= 6.7, 2.4 Hz).
(5) 1-[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina y 1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (2,35 g, 7,88 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 49(4)) en cloruro de metileno (120 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,91 ml, 11,8 mmoles) y trietilamina (1,66 ml, 11,8 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla de reacción fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (516 mg, rendimiento 17%) en forma de un sólido de color amarillo claro y 1-[4-(cianometil-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (634 mg, rendimiento 22%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
1-[4-(N-Carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.15-6.72 (1H, m), 5.65-5.15 (1H, m), 4.79-4.62 (1H, m), 4.44 (2H, t, J= 6.7 Hz), 4.26 (2H, d, J= 6.7 Hz), 4.05 (2H, m), 3.11 (3H, s), 1.26 (6H, m).
\newpage
1-[4-(N-Cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.55-7.10 (1H, m), 5.50-5.38 (1H, m), 4.93-4.78 (1H, m), 4.60-4.00 (6H, m including 4.51 (2H, t, J= 9.6 Hz), 4.32 (2H, dd, J= 9.6, 3.7 Hz)), 3.11 (3H, s), 1.31 (6H, d, J= 6.8 Hz).
(6) 3-Acetiltio-1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanolsulfoniloxiazetidina (516 mg, 1,37 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 49(5)) en dimetilformamida (15 ml) le fue añadido tioacetato potásico (939 mg, 8,22 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (20 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(N-carbamoilmetil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (347 mg, rendimiento 71%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.45-6.72 (1H, m), 4.76-4.61 (1H, m), 4.51 (2H, t, J= 7.4 Hz), 4.47-4.40 (1H, m), 4.40 (2H, s), 3.98 (2H, t, J= 7.4 Hz), 2.37 (3H, s), 1.26 (6H, d, J= 6.8 Hz).
Ejemplo de Referencia 50
3-Acetiltio-1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
217
(1) 3-Acetiltio-1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (635 mg, 1,77 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 49(5)) en dimetilformamida (19 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,21 g, 10,6 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(N-cianometil-N-isopropil-carbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (344 mg, rendimiento 57%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.58-7.18 (1H, m), 4.96-4.82 (1H, m), 4.82-4.10 (5H, m including 4.54 (2H, t, J= 8.4 Hz), 4.50-4.40 (1H, m)), 4.01 (2H, t, J= 8.4 Hz), 2.36 (3H, s), 1.30 (6H, d, J= 6.8 Hz).
Ejemplo de Referencia 51
3-Acetiltio-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
218
(1) 4-Hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina
A una solución de hidrocloruro de 4-hidroxipiperidina (3,0 g, 21,8 mmoles) en una mezcla de cloruro de metileno (90 ml) y piridina (15 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (15,4 g, 72,0 mmoles) y trietilamina (13,1 ml, 93,8 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente por espacio de 3 días. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 4-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina (2,96 g, rendimiento 48%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.1Hz), 8.51 (2H, d, J=8.1Hz), 5.23 (2H, s), 3.98-3.87 (3H, m), 3.30-3.15 (2H, m), 1.96-1.85 (2H, m), 1.59-1.48 (2H, m).
(2) 4-Metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina
A una solución de 4-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina (2,96 g, 14,8 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 51(1)) en cloruro de metileno (90 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (1,15 ml, 14,8 mmoles) y trietilamina (2,07 ml, 14,8 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue llevada a la temperatura ambiente en 10 minutos, y fue entonces agitada por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue recristalizado desde una solución de n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) para así obtener 4-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina (3,31 g, rendimiento 87%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 5.23,(2H,s), 4.96-4.90 (1H, m), 3.79-3.72 (2H, m), 3.51-3.44 (2H, m), 3.05 (3H, s), 2.10-1.96 (2H, m), 1.92-1.84 (2H, m).
(3) 4-Azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina
A una solución de 4-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina (3,31 g, 9,24 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 51(2)) en dimetilformamida (100 ml) le fue añadida azida sódica (660 mg, 10,2 mmoles) y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 100ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener 4-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina (2,81 g, rendimiento 100%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 5.22 (2H, s), 3.86 (2H, dt, J=13.9, 5.1Hz), 3.68-3.62 (1H, m), 3.32-3.20 (2H, m), 1.98-1.85 (2H, m), 1.68-1.61 (2H, m).
(4) 4-Amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina
A una solución de 4-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidina (2,81 g, 9,17 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 51(3)) en acetonitrilo (84 ml) le fue añadida trifenilfosfina (2,53 g, 9,63 mmoles), y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 70ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello decahidrato de sulfato sódico (3,10 g, 9,63 mmoles), y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada y repartida entre cloruro de metileno y solución de cloruro de hidrógeno acuoso 0,1M. A la capa acuosa obtenida le fueron añadidos cloruro de metileno y carbonato de hidrógeno y sodio, y la capa acuosa fue sometida a extracción con cloruro de metileno. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue secado bajo presión reducida para así obtener 4-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidina (2,33 g, rendimiento 91%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, 8.8Hz), 7.51 (2H, d, 8.8Hz), 5.22 (2H, s), 4.18-4.06 (2H, m), 3.01-2.83 (2H, m), 1.88-1.80 (2H, m), 1.34-1.22 (2H, m).
(5) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 4-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidina (382 mg, 1,37 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 51(4)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (25 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (208 \mul, 1,37 mmoles) y trietilamina (192 \mul, 1,37 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano :
acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (574 mg, rendimiento 72%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.24 (2H, d, J=8.8Hz), 7.62 (4H, d, J=8.8Hz), 7.54-7.38 (6H, m), 7.36 (1H, s), 7.09-7.04 (1H, br d, J=8.8Hz), 5.23 (2H, s), 4.79-4.72 (1H, m), 4.22-4.04 (5H, m), 4.01 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 3.08-2.97 (2H, m), 2.08-2.00 (2H, m), 1.55-1.42 (2H, m), 1.07 (9H, s).
(6) 3-Hidroxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (570 mg, 0,820 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 51(5)) en tetrahidrofurano anhidro (17 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (56 \mul, 0,984 mmoles) y una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (984 \mul, 0,984 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con una solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (360 mg, rendimiento 95%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 7.39 (1H, s), 7.11-7.06 (1H, br d, J=8.1Hz), 5.23 (2H, s), 4.88-4.80 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.24-4.04 (3H, m), 3.96 (2H, dd, J=9.5, 4.4Hz), 3.12-2.95 (2H, m), 2.37-2.32 (1H, d, J=5.9Hz), 2.04-1.99 (2H, m), 1.55-1.43 (2H, m).
(7) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (360 mg, 0,780 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 51(6)) en cloruro de metileno (18 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (181 \mul, 2,34 mmoles) y trietilamina (328 \mul, 2,34 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (98 : 2) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (390 mg, rendimiento 93%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (1H, s), 7.06-7.02 (1H, br d, J=7.7Hz), 5.45-5.40 (1H, m), 5.23 (2H, s), 4.45 (2H, dd, J=10.3, 6.8Hz), 4.27 (2H, dd, J=10.3, 4.3Hz), 4.24-4.06 (3H, m), 3.11 (3H, s), 3.10-2.95 (2H, m), 2.07-2.00 (2H, m), 1.56-1.44 (2H, m).
(8) 3-Acetiltio-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (390 mg, 0,723 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 51(7)) en dimetilformamida (20 ml) le fue añadido tioacetato potásico (496 mg, 4,34 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperidin-4-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (262 mg, rendimiento 70%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.1Hz), 7.51 (2H, d, J=8.1Hz), 7.41 (1H, s), 7.08-7.04 (1H, br d, J=7.8Hz), 5.23 (2H, s), 4.53 (2H, t, J=8.8Hz), 4.46-4.40 (1H, m), 4.22-4.04 (3H, m), 3.98 (2H, dd, J=8.8, 5.9Hz), 3.12-2.96 (2H, m), 2.37 (3H, s), 2.06-2.00 (2H, m), 1.55-1.43 (2H, m).
Ejemplo de Referencia 52
3-Acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
219
(1) (3R)-3-Hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una suspensión de hidrocloruro de (3R)-3-hidroxipirrolidina (7,00 g, 56,6 mmoles) en cloruro de metileno (210 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (13,4 g, 62,3 mmoles) y trietilamina (17,4 ml, 125 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener (3R)-3-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (13,6 g, rendimiento 90%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.1Hz), 7.53 (2H, d, J=8.1Hz), 5.24 (2H, s), 4.55-4.50 (1H, m), 3.63-3.53 (3H, m), 3.51-3.44 (1H, m), 2.09-1.93 (2H, m)
(2) (3R)-3-Metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una solución de (3R)-3-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (9,0 g, 33,8 mmoles) en cloruro de metileno (270 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (2,88 ml, 37,2 mmoles) y trietilamina (5,21 ml, 37,2 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener (3R)-3-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidina (11,5 g, rendimiento 99%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.1Hz), 7.53 (2H, m), 5.33-5.23 (1H, m) 5.24 (2H, s), 3.82 (1H, dd, J=12.5, 5.1Hz), 3.72-3.53 (3H, m), 3.06 (3H, s), 2.42-2.26 (1H, m), 2.26-2.11 (1H, m).
(3) (3S)-3-Azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una solución de (3R)-3-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidina (4,00 g, 11,6 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(2)) en dimetilformamida (120 ml) le fue añadida azida sódica (831 mg, 12,8 mmoles), y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 100ºC) por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener (3S)-3-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (3,43 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.7Hz), 7.54 (2H, d, J=8.7Hz), 5.18 (2H, s), 4.24-4.38 (1H, m), 3.62-3.48 (4H, m), 2.19-2.11 (2H, m).
(4) (3S)-3-Amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una solución de (3S)-3-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidina (3,43 g, 11,6 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(3)) en acetonitrilo (103 ml) le fue añadida trifenilfosfina (3,19 g, 12,2 mmoles), y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 70ºC) por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello decahidrato de sulfato sódico (3,93 g, 12,2 mmoles), y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada y repartida entre cloruro de metileno y solución de cloruro de hidrógeno acuoso 0,1M. A la capa acuosa obtenida le fueron añadidos cloruro de metileno y carbonato de hidrógeno y sodio, y la capa acuosa fue sometida a extracción con cloruro de metileno. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue secado bajo presión reducida para así obtener (3S)-3-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (2,83 g, rendimiento 92%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.7Hz), 7.52 (2H, d, J=8.7Hz), 5.23 (2H, s), 3.68-3.57 (3H, m), 3.52-3.44 (1H, m), 3.19-3.11 (1H, m), 2.14-2.04 (1H, m), 1.77-1.64 (1H, m).
(5) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze- tidina
A una suspensión de (3S)-3-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (363 mg, 1,37 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(4)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (25 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (208 \mul, 1,37 mmoles) y trietilamina (192 \mul, 1,37 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (566 mg, rendimiento 72%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.61 (4H, d, J=8.8Hz), 7.53 (2H, m), 7.48-7.38 (6H, m), 7.37 (1H, s), 7.22-7.15 (1H, br t, J=8.3Hz), 5.24 (2H, d, J=10.7Hz), 4.80-4.74 (1H, m), 4.67-4.59 (1H, m), 4.11 (2H, t, J=7.3Hz), 4.07-4.00 (2H, m), 3.81 (1H, dt, J=10.7, 5.9Hz), 3.67-3.52 (2H, m), 3.40 (1H, dd, J=11.2, 5.4Hz), 2.33-2.22 (1H, m), 2.08-1.92 (1H, m), 1.07 (9H, s).
(6) 3-Hidroxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (560 mg, 0,816 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(5)) en tetrahidrofurano anhidro (17 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (56 \mul, 0,980 mmoles) y una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (980 \mul, 0,980 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a ello acetato de etilo y agua y la capa acuosa fue sometida a extracción con acetato de etilo. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 1)
como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (359 mg, rendimiento 98%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.53 (2H, m), 7.40 (1H, s), 7.24-7.17 (1H, br s), 5.30-5.18 (2H, m), 4.89-4.82 (1H, m), 4.66-4.58 (1H, m), 4.33 (2H, t, J=7.8Hz), 3.96 (2H, dd, J=8.8, 3.9Hz), 3.80 (1H, dt, J=11.2, 5.8Hz), 3.66-3.52 (2H, m), 3.46-3.39 (1H, m), 2.44-2.37 (1H, br s), 2.33-2.22 (1H, m), 2.10-1.95 (1H, m).
(7) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti- dina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (350 mg, 0,782 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(6)) en cloruro de metileno (18 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (182 \mul, 2,35 mmoles) y trietilamina (329 \mul, 2,35 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (98 : 2) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (410 mg, rendimiento 99%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, m), 7.53 (2H, m), 7.46 (1H, s), 7.20-7.14 (1H, br s), 5.45-5.40 (1H, m), 5.24 (2H, d, J=8.8Hz), 4.66-4.59 (1H, m), 4.46 (2H, t, J=8.1Hz), 4.27 (2H, dd, J=9.9, 4.0Hz), 3.81 (1H, dt, J=11.0, 6.3Hz), 3.67-3.52 (2H, m), 3.42 (1H, dd, J=11.0, 5.1Hz), 3.12 (3H, s), 2.31-2.24 (1H, m), 2.07-1.95 (1H, m).
(8) 3-Acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (410 mg, 0,780 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(7)) en dimetilformamida (21 ml) le fue añadido tioacetato potásico (534 mg, 4,68 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla de reacción fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (287 mg, rendimiento 73%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.52 (2H, m), 7.42 (1H, s), 7.20-7.15 (1H, br s), 5.24 (2H, d, J=10.7Hz), 4.66-4.59 (1H, m), 4.53 (2H, t, J=8.3Hz), 4.47-4.41 (1H, m), 3.99 (2H, t, J=6.4Hz), 3.84-3.76 (1H, m), 3.65-3.53 (2H, m), 3.41 (1H, dd, J=11.7, 4.9Hz), 2.37 (3H, s), 2.33-2.20 (1H, m), 2.07-1.93 (1H, m).
\newpage
Ejemplo de Referencia 53
3-Acetiltio-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
220
(1) (3S)-3-Acetoxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una solución de (3R)-3-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (7,50 g, 21,8 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(2)) en dimetilformamida (225 ml) le fue añadido acetato potásico (6,41 g, 65,3 mmoles), y la mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de cloruro sódico acuoso al 10% y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener (3S)-3-acetoxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (5,51 g, rendimiento 82%) en forma de cristales blancos.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.1Hz), 7.53 (2H, d, J=8.1Hz), 5.33-5.29 (1H, m), 5.24 (2H, s), 3.68-3.50 (4H, m), 2.19-2.02 (2H, m), 2.04 (3H, s).
(2) (3S)-3-Hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una solución de (3S)-3-acetoxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidina (5,51 g, 17,8 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(1)) en metanol (200 ml) le fue añadida una cantidad catalítica de metóxido sódico, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadida a ello una solución de cloruro de hidrógeno 4N en 1,4-dioxano (4,3 ml) para neutralizar la mezcla de reacción. La mezcla de reacción resultante fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener (3S)-3-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (4,00 g, rendimiento 84%) en forma de cristales blancos.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.1Hz), 7.53 (2H, d, J=8.1Hz), 5.24 (2H, s), 4.55-4.50 (1H, m), 3.63-3.52 (3H, m), 3.52-3.44 (1H, m), 2.09-1.92 (2H, m).
(3) (3S)-3-Metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una solución de (3S)-3-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (4,00 g, 15,0 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(2)) en cloruro de metileno (120 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (1,28 ml, 16,5 mmoles) y trietilamina (2,31 ml, 16,5 mmoles) en un baño de aceite. Tras haber agitado la mezcla en el baño de aceite por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener (3S)-3-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (5,33 g, rendimiento 100%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53 (2H, dd, J=8.1, 3.7Hz), 5.33-5.23 (1H, m), 5.24 (2H, s), 3.82 (1H, dd, J=12.5, 5.1Hz), 3.72-3.53 (3H, m), 3.06 (3H, s), 2.42-2.26 (1H, m), 2.26-2.11 (1H, m).
(4) (3R)-3-Azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidina
A una solución de (3S)-3-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (5,33 g, 15,0 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(3)) en dimetilformamida (159 ml) le fue añadida azida sódica (1,07 g, 16,5 mmoles) y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 100ºC) por espacio de 3,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución de cloruro sódico acuoso al 10% y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener (3R)-3-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (4,48 g, rendimiento 100%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53 (2H, d, J=8.8Hz), 5.24 (2H, s), 4.24-4.18 (1H, m), 3.62-3.48 (4H, m), 2.19-2.02 (2H, m).
(5) (3R)-3-Amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina
A una solución de (3R)-3-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (4,48 g, 15,4 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(4)) en acetonitrilo (134 ml) le fue añadida trifenilfosfina (4,22 g, 16,1 mmoles), y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 70ºC) por espacio de 1,5 horas. Tras haber comprobado la desaparición de las materias primas, fue añadido a ello decahidrato de sulfato sódico (5,19 g, 16,1 mmoles), y la mezcla de reacción fue entonces agitada por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada y repartida entre cloruro de metileno y solución de cloruro de hidrógeno acuoso 0,1M. A la capa acuosa obtenida le fueron añadidos cloruro de metileno y carbonato de hidrógeno y sodio, y la capa acuosa fue sometida a extracción con cloruro de metileno. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue secado bajo presión reducida para así obtener (3R)-3-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (3,53 g, rendimiento 86%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (2H, d, J=8.8Hz), 5.23 (2H, s), 3.66-3.58 (3H, m), 3.52-3.45 (1H, m), 3.19-3.12 (1H, m), 2.13-2.04 (1H, m), 1.76-1.66 (1H, m).
(6) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}aze- tidina
A una suspensión de (3R)-3-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidina (363 mg, 1,37 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(5)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,14 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (25 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (208 \mul, 1,37 mmoles) y trietilamina (192 \mul, 1,37 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (598 mg, rendimiento 51%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.62 (4H, d, J=8.1Hz), 7.56-7.38 (8H, m), 7.37 (1H, s), 7.22-7.16 (1H, br s), 5.24 (2H, d, J=8.8Hz), 4.76 (1H, ddd, J=6.6, 5.1Hz), 4.67-4.58 (1H, m), 4.15-4.07 (2H, m), 4.06-3.98 (2H, m), 3.86-3.78 (1H, m), 3.67-3.52 (2H, m), 3.40 (1H, dd, J=11.0, 5.1Hz), 2.34-2.20 (1H, m), 2.02-1.90 (1H, m), 1.07 (9H, s).
(7) 3-Hidroxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una suspensión de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (590 mg, 0,860 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(6)) en tetrahidrofurano anhidro (18 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (59 \mul, 1,03 mmoles) y una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,03 ml, 1,03 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (378 mg, rendimiento 98%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, m), 7.53 (2H, m), 7.40 (1H, s), 7.24-7.18 (1H,br s), 5.30-5.18 (2H, m), 4.88-4.81 (1H, m), 4.66-4.58 (1H, m), 4.32 (2H, t, J=7.8Hz), 3.96 (2H, dd, J=8.8, 4.9Hz), 3.80 (1H, dt, J=12.2, 6.8Hz), 3.66-3.52 (2H, m), 3.46-3.40 (1H, m), 2.49-2.41 (1H, br s), 2.33-2.22 (1H, m), 2.09-1.95 (1H, m).
(8) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti- dina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (370 mg, 0,827 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(7)) en cloruro de metileno (19 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (192 \mul, 2,48 mmoles) y trietilamina (348 \mul, 2,48 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla de reacción fue llevada a la temperatura ambiente en 10 minutos, y fue entonces agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (98 : 2) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (422 mg, rendimiento 97%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, m), 7.53 (2H, m), 7.46 (1H, s), 7.19-7.13 (1H, br s), 5.45-5.40 (1H, m), 5.24 (2H, d, J=10.7Hz), 4.66-4.59 (1H, m), 4.46 (2H, t, J=7.8Hz), 4.27 (2H, dd, J=9.8, 2.9Hz), 3.81 (1H, dt, J=13.7,5.9Hz), 3.66-3.54 (2H, m), 3.43 (1H, dd, J=11.2, 4.4Hz), 3.12 (3H, s), 2.30-2.22 (1H, m), 2.09-1.95 (1H, m).
(9) 3-Acetiltio-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (420 mg, 0,799 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(8)) en dimetilformamida (21 ml) le fue añadido tioacetato potásico (548 mg, 4,79 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo : metanol (99 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (280 mg, rendimiento 69%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.3 (2H, m), 7.42 (1H, s), 7.21-7.15 (1H, br s), 5.24 (2H, d, J=10.7Hz), 4.66-4.58 (1H,m), 4.53 (2H, dd, J=8.8, 7.8Hz), 4.47-4.41 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J=6.8, 5.9Hz), 3.84-3.76 (1H, m), 3.66-3.53 (2H, m), 3.41 (1H, dd, J=11.7, 4.9Hz), 2.37 (3H, s), 2.33-2.23 (1H, m), 2.03-1.94 (1H, m).
Ejemplo de Referencia 54
3-Acetiltio-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
221
(1) 3-Hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina
Una solución de 1-bencidril-3-hidroxiazetidina (9,00 g, 37,6 mmoles) en metanol (270 ml) fue sometida hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (9,00 g) en un baño de agua (a 50ºC) por espacio de 5,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y agua destilada. La capa orgánica fue concentrada bajo presión reducida y secada in vacuo para así obtener un producto crudo. A una solución del producto crudo en una mezcla de cloruro de metileno (82 ml) y metanol (55 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (8,90 g, 41,3 mmoles) y trietilamina (5,79 ml, 41,3 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (3,52 g, rendimiento 37%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50 (2H, d, J=8.8Hz), 5.19 (2H, s), 4.71-4.64 (1H, m), 4.27 (2H, dd, J=9.9, 7.0Hz), 3.93 (2H, dd, J=9.9, 4.0Hz), 2.20-2.16 (1H, br d, J=5.9Hz).
(2) 3-Metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (3,52 g, 14,0 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 54(1)) en cloruro de metileno (106 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (1,19 ml, 15,4 mmoles) y trietilamina (2,16 ml, 15,4 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (4,63 g, rendimiento 100%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50 (2H, d, J=8.8Hz), 5.29-5.22 (1H, m), 5.20 (2H, s), 4.40 (2H, dd, J=10.2, 6.2Hz), 4.22 (2H, dd, J=10.2, 4.0Hz), 3.08 (3H, s).
(3) 3-Azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (4,63 g, 14,0 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 54(2)) en dimetilformamida (140 ml) le fue añadida azida sódica (1,37 g, 21,0 mmoles), y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 100ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener 3-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (2,15 g, rendimiento 55%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50 (2H, d, J=8.8Hz), 5.19 (2H, s), 4.33-4.28 (3H, m), 4.03-3.96 (2H, m).
(4) 3-Amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina
A una solución de 3-azido-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (2,15 g, 7,76 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 54(3)) en acetonitrilo (65 ml) le fue añadida trifenilfosfina (2,14 g, 8,14 mmoles), y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 70ºC) por espacio de 2 horas. Tras haber comprobado la desaparición de las materias primas, fue añadido a ello decahidrato de sulfato sódico (2,62 g, 8,14 mmoles), y la mezcla de reacción fue entonces agitada por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada y repartida entre cloruro de metileno y solución de cloruro de hidrógeno acuoso 0,1M. A la capa acuosa obtenida le fueron añadidos cloruro de metileno y carbonato de hidrógeno y sodio, y la capa acuosa fue sometida a extracción con cloruro de metileno. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue secado bajo presión reducida para así obtener 3-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (1,87 g, rendimiento 96%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50 (2H, d, J=8.8Hz), 5.18 (2H, s), 4.27 (2H, dd, J=8.6, 8.6Hz), 3.87 (1H, tt, J=5.1,7.3Hz), 3.70 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz).
(5) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-amino-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)azetidina (549 mg, 2,18 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 54(4)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (800 mg, 1,82 mmoles) en dimetilformamida (40 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (331 \mul, 2,18 mmoles) y trietilamina (306 \mul, 2,18 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,06 g, rendimiento 49%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.1Hz), 7.62 (4H, d, J=8.1Hz), 7.54-7.39 (8H, m), 7.37 (1H, s), 5.21 (2H, s), 4.89-4.81 (1H, m), 4.81-4.73 (1H, m), 4.41 (2H, dd, J=8.8, 8.8Hz), 4.12 (2H, dd, J=8.8, 8.8Hz), 4.05-3.98 (4H, m), 1.07 (9H, s).
(6) 3-Hidroxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,06 g, 1,58 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 54(5)) en tetrahidrofurano anhidro (53 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (109 \mul, 1,90 mmoles) y una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (1,90 ml, 1,90 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (649 mg, rendimiento 95%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.58-7.50 (1H, br s), 7.52 (2H, d, J=8.8Hz), 7.40 (1H, s), 5.20 (2H, s), 4.90-4.80 (1H, m), 4.42 (2H, dd, J=8.8, 8.8Hz), 4.34 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.02 (2H, dd, J=9.5, 5.2Hz), 4.00-3.96 (2H, m).
(7) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (640 mg, 1,48 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 54(6)) en cloruro de metileno (20 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (343 \mul, 4,43 mmoles) y trietilamina (621 \mul, 4,43 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (98 : 2) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (611 mg, rendimiento 81%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50-7.46 (1H, br s), 7.46 (1H, s), 5.46-5.41 (1H, m), 5.20 (2H, s), 4.89-4.80 (1H, m), 4.49-4.38 (4H, m), 4.28 (2H, dd, J=11.8, 4.4Hz), 4.01 (2H, dd, J=9.5, 5.3Hz), 3.12 (3H, s).
(8) 3-Acetiltio-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (610 mg, 1,19 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 54(7)) en dimetilformamida (81 ml) le fue añadido tioacetato potásico (817 mg, 7,15 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 80ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(1-p-nitrobenciloxicarbonil)-azetidin-3-ilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (405 mg, rendimiento 69%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.53-7.49 (1H, m), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 7.43 (1H, s), 5.20 (2H, s), 4.89-4.79 (1H, m), 4.54 (2H, dd, J=8.1, 8.1Hz), 4.48-4.18 (3H, m), 4.04-3.97 (2H, m), 2.37 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 55
3-Acetiltio-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
222
(1) Hidrocloruro de 4-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperazina
A una solución de 4-(t-butoxicarbonil)piperazina (1,50 g, 8,05 mmoles) en cloruro de metileno (68 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (1,90 ml, 8,86 mmoles) y trietilamina (1,24 ml, 8,86 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 3) como eluyente para así obtener 1-(t-butoxicarbonil)-4-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperazina (2,60 g, rendimiento 89%) en forma de una aceite de color amarillo claro.
A continuación, a una solución de este producto (2,60 g, 7,12 mmoles) en acetonitrilo (100 ml) le fue añadida una solución 4N de cloruro de hidrógeno en acetato de etilo (15,0 ml) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico, y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción fue separada por filtración y lavada con éter dietílico para así obtener hidrocloruro de 4-(p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina (2,4 g, rendimiento 86%) en forma de un sólido de color blanco.
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de hidrocloruro de 4-(p-nitrobenciloxicarbonil)piperazina (874 mg, 2,19 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 55(1)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (800 mg, 1,82 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (40 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,33 ml, 2,19 mmoles) y trietilamina (0,30 ml, 2,19 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con una solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, una solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y una solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (915 mg, rendimiento 73%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.24 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.61 (4H, dd, J= 7.9, 1.4 Hz), 7.52 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.49-7.37 (6H, m), 7.14 (1H, s), 5.25 (2H, s), 4.80-4.71 (1H, m), 4.11 (2H, dd, J= 8.7, 6.6 Hz), 4.01 (2H, dd, J= 8.7, 4.9 Hz), 3.95-3.66 (4H, m), 3.65-3.52 (4H, m), 1.06 (9H, s).
(3) 3-Hidroxi-1-{4-[4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,77 g, 1,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 55(2)) en tetrahidrofurano anhidro (35 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (0,11 ml, 1,88 mmoles) y una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,88 ml, 1,88 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-3-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (726 mg, rendimiento 95%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.24 (2H, d, J= 8.6 Hz), 7.52 (2H, d, J= 8.6 Hz), 7.17 (1H, s), 5.25 (2H, s), 4.89-4.79 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J= 9.1, 6.7 Hz), 3.96 (2H, dd, J= 9.1, 4.5 Hz), 3.93-3.68 (4H, m), 3.66-3.52 (4H, m).
(4) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (804 mg, 1,80 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 55(3)) en cloruro de metileno (40 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,30 ml, 2,15 mmoles) y trietilamina (0,17 ml, 2,15 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]1,3-tiazol-2-il}azetidina (550 mg, rendimiento 58%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.5 Hz), 7.53 (2H, d, J= 8.5 Hz), 7.25 (1H, s), 5.50-5.39 (1H, m), 5.26 (2H, s), 4.49 (2H, t, J= 9.6 Hz), 4.26 (2H, dd, J= 9.6, 4.2 Hz), 4.00-3.66 (4H, m), 3.66-3.47 (4H, m), 3.11 (3H, s).
(5) 3-Acetiltio-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (550 mg, 1,05 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 55(4)) en dimetilformamida (40 ml) le fue añadido tioacetato potásico (717 mg, 6,28 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1)
como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(4-p-nitrobenciloxicarbonil)-piperazina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (345 mg, rendimiento 64%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.53 (2H, d, J= 8.7 Hz), 7.22 (1H, s), 5.25 (2H, s), 4.52 (2H, t, J= 8.4 Hz), 4.48-4.39 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J= 8.4, 5.3 Hz), 3.95-3.68 (4H, m), 3.45-3.68 (4H, m), 2.33 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 56
3-Acetiltio-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
223
(1) Éster t-butílico del ácido (2-hidroxietil)carbámico
A una solución de aminoetanol (2,51 g, 41,1 mmoles) en una mezcla de cloruro de metileno (50 ml) y metanol (50 ml) le fueron añadidos anhídrido di-t-butoxicarbónico (13,5 g, 61,9 mmoles) y trietilamina (8,6 ml, 61,7 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue repartido entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido (2-hidroxietil)carbámico (6,18 g, rendimiento 93%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 5.01 (1H, br s), 3.70 (2H, br s), 3.29 (2H, q, J=5.1Hz), 2.65 (1H, br s), 1.45 (9H, s).
(2) Éster t-butílico del ácido (2-azidoetil)carbámico
A una solución de éster t-butílico del ácido (2-hidroxietil)carbámico (1,5 g, 6,2 mmoles) en tetrahidrofurano (75 ml) le fueron añadidas azida de difenilfosforilo (3,0 ml, 13,9 mmoles), trifenilfosfina (3,7 g, 14,1 mmoles) y una solución al 40% de dietilazodicarboxilato en tolueno (5,1 g, 13,9 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue entonces agitada por espacio de 4 horas bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (3 : 1) como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido (2-azidoetil)carbámico (1,24 g, rendimiento 72%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 4.85 (1H, br s), 3.42 (2H, t, J=4.8Hz), 3.31 (2H, t, J=4.8Hz), 1.45 (9H, s).
IR (película líquida): 2103, 1697, 1521, 1368, 1272, 1253 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 187 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Valor observado: 187,1186 [M+H]^{+}, Valor calculado: 187,1195 (C_{7}H_{15}O_{2}N_{4})
(3) Éster p-nitrobencílico del ácido (2-t-butoxicarbonilaminoetil)carbámico
Una solución de éster t-butílico del ácido (2-azidoetil)carbámico (1,22 g, 6,55 mmoles) en metanol (60 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% sobre carbón vegetal (1,22 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. A una solución del producto crudo obtenido en cloruro de metileno (60 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (2,12 g, 9,8 mmoles) y trietilamina (1,37 ml, 9,8 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (3 : 1) como eluyente para así obtener éster p-nitrobencílico del ácido (2-t-butoxicarbonilaminoetil)carbámico (1,46 g, rendimiento 66%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=9.0Hz), 7.51 (2H, d, J=9.0Hz), 5.37 (1H, br s), 5.20 (2H, s), 4.82 (1H, br s), 3.35-3.25 (4H, m), 1.45 (9H, s).
IR (KBr): 3355, 1708, 1692, 1534, 1350, 1263, 1170 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 340 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Valor observado: 340,1512 [M+H]^{+}, Valor calculado: 340,1508 (C_{15}H_{22}O_{6}N_{3})
(4) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de éster p-nitrobencílico del ácido (2-t-butoxicarbonilaminoetil)carbámico (1,46 g, 4,3 mmoles) en 1,4-dioxano (15 ml) le fue añadida una solución 4N de cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (15 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 5,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello éter dietílico y la mezcla de reacción fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción resultante fue separada por filtración, y lavada con éter dietílico para así obtener hidrocloruro de 1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilamina (1,18 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color blanco.
A continuación, a una suspensión de hidrocloruro de 2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilamina (490 mg, 1,77 mmoles) obtenido como se ha descrito anteriormente y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (530 mg, 1,21 mmoles) (obtenida como se ha descrito en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (26,5 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,3 ml, 1,98 mmoles) y trietilamina (0,5 ml, 3,59 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (2 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (630 mg, rendimiento 79%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.16 (2H, d, J=8.8Hz), 7.62 (4H, d, J=6.8Hz), 7.50-7.38 (9H, m), 7.35 (1H, s), 5.62 (1H, br t, J=5.9Hz), 5.17 (2H, s), 4.79-4.72 (1H, m), 4.09 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.00 (2H, dd, J=8.8, 4.9Hz), 3.55 (2H, q, J=5.9Hz), 3.43 (2H, q, J=5.9Hz), 1.07 (9H, s).
IR (KBr): 1724, 1660, 1547, 1523, 1346, 1318, 1255, 1113 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 660 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Valor observado: 660,2324 [M+H]^{+}, Valor calculado: 660,2312 (C_{33}H_{38}O_{6}SS_{i})
(5) 3-Hidroxi-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,21 g, 1,84 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 56(4)) en tetrahidrofurano anhidro (60,6 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (0,13 ml, 2,27 mmoles) y una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (2,2 ml, 2,2 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada por espacio de 2,5 horas bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. Al residuo le fue añadido éter isopropílico, y la mezcla fue agitada, lavada y separada por filtración para así obtener 3-hidroxi-1-{4[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (667 mg, rendimiento 86%) en forma de un sólido de color amarillo.
^{1}H-NMR (500 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.8Hz), 8.03 (1H, t, J=5.9Hz), 7.59 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50 (1H, t, J=5.9Hz), 7.41 (1H, s), 5.83 (1H, d, J=5.9Hz), 5.17 (2H, s), 4.66-4.58 (1H, m), 4.23 (2H, dd, J=8.8, 7.0Hz), 3.79 (2H, dd, J=8.8, 4.9Hz), 3.31 (2H, q, J=5.9Hz), 3.16 (2H, q, J=5.9Hz).
IR (KBr): 1698. 1655, 1552, 1520, 1343, 1279 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 422 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Valor observado: 444,0952 [M+Na]^{+}, Valor calculado: 444,0953 (C_{17}H_{19}O_{6}N_{5}SNa)
(6) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (658,4 mg, 1,56 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 56(5)) en una mezcla de cloruro de metileno (33 ml) y piridina (5 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,31 ml, 4,00 mmoles) y trietilamina (0,57 ml, 4,09 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (607,3 mg, rendimiento 78%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.8Hz), 8.10 (1H, t, J=5.9Hz), 7.59 (2H, d, J=8.8Hz), 7.51 (1H, t, J=5.9Hz), 7.50 (1H, s), 5.46-5.41 (1H, m), 5.17 (2H, s), 4.45 (2H, dd, J=9.9, 6.6Hz), 4.17 (2H, dd, J=9.9, 4.0Hz), 3.29 (3H, s).
IR (KBr): 1720, 1658, 1547, 1523, 1348, 1255, 1184, 1169 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 500 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Valor observado: 500,0910 [M+H]^{+}, Valor calculado: 500,0910 (C_{18}H_{22}O_{8}N_{5}S_{2})
(7) 3-Acetiltio-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (607,3 mg, 1,22 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 56(6)) en dimetilformamida (33 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,06 g, 7,35 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 7 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (335,8 mg, rendimiento 58%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (500 MHz, DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.3Hz), 8.05 (1H, t, J=5.9Hz), 7.58 (2H, d, J=8.3Hz), 7.50 (1H, t, J=5.9Hz), 7.47 (1H, s), 5.17 (2H, s), 4.50 (2H, t, J=8.8Hz), 4.42-4.36 (1H, m), 3.92 (2H, dd, J=8.8, 4.6Hz), 3.305 (2H, q, J=5.9Hz), 3.16 (2H, q, J=5.9Hz), 2.36 (3H, s).
IR (KBr): 3368, 1690, 1677, 1543, 1520, 1494, 1349, 1255, 1239, 1108 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 480 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Valor observado: 480,1002 [M+H]^{+}, Valor calculado: 480,1011 (C_{19}H_{22}O_{6}N_{5}S_{2})
Ejemplo de Referencia 57
3-Acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
224
(1) 1-t-Butoxicarbonil-3-(metonosulfoniloxi)azetidina
Una solución de 1-t-butoxicarbonil-3-hidroxiazetidina (3,24 g, 18,7 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 31(1)) en cloruro de metileno (160 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (1,59 ml, 20,6 mmoles) y trietilamina (2,89 ml, 20,6 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-t-butoxicarbonil-3-(metanosulfoniloxi)azetidina (4,71 mg, rendimiento 100%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 5.23-5.17 (1H, m), 4.28 (2H, dd, J=6.6,1.5Hz), 4.10 (2H, m), 3.07 (3H, s), 1.46 (9H, s).
(2) 3-Azido-1-(t-butoxicarbonil)azetidina
A una solución de 1-t-butoxicarbonil-3-(metanosulfoniloxi)azetidina (4,71 g, 18,7 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 57(1)) en dimetilformamida (140 ml) le fue añadida azida sódica (3,65 g, 56,1 mmoles), y la mezcla se tuvo en agitación en un baño de aceite (a 90ºC) durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1) como eluyente para así obtener 3-azido-1-(t-butoxicarbonil)-azetidina (3,44 g, rendimiento 93%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 4.25-4.15 (3H, m), 3.92-3.87 (2H, m), 1.45 (9H, s).
(3) 1-t-Butoxicarbonil-3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina
Una solución de 3-azido-1-(t-butoxicarbonil)azetidina (3,44 g, 17,4 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia (57(2)) en metanol (170 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (3,44 g) a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador. El filtrado fue concentrado bajo presión reducida para así obtener 3-amino-1-t-butoxicarbonilazetidina como producto crudo. Este producto fue disuelto en cloruro de metileno (170 ml), y fueron añadidos a ello en un baño de hielo éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (5,63 g, 26,1 mmoles) y trietilamina (3,66 ml, 26,1 mmoles). La mezcla se tuvo en agitación a temperatura durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1 \rightarrow 1 : 2) como eluyente para así obtener 1-t-butoxicarbonil-3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina (4,84 g, rendimiento 79%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.1Hz), 7.50 (2H, d, J=8.1Hz), 5.26-5.18 (1H, br s), 5.26 (2H, s), 5.84 (1H, d, J=5.1Hz), 4.50-4.40 (1H, m), 4.24 (2H, t, J=9.5Hz), 3.76 (2H, dd, J=9.5, 5.1Hz), 1.43 (9H, s).
(4) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azeti- dina
A una solución de 1-t-butoxicarbonil-3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina (4,84 g, 13,8 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 57(3)) en 1,4-dioxano (50 ml) le fue añadida una solución 4N de cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (50 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. Al residuo le fue añadido acetato de etilo, y la mezcla resultante fue filtrada, y el residuo fue lavado con acetato de etilo y luego secado bajo presión reducida para así obtener hidrocloruro de 3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina (2,31 g, rendimiento 58%) en forma de cristales de color amarillo claro.
A continuación, a una suspensión de hidrocloruro de 3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina (944 mg, 3,28 mmoles) (obtenido como se ha descrito anteriormente) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,2 g, 2,74 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (60 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (498 \mul, 3,28 mmoles) y trietilamina (922 \mul, 6,58 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (853 mg, rendimiento 53%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.64-7.59 (4H, m), 7.52 (2H, d, J=8.8Hz), 7.48-7.37 (6H, m), 7.37 (1H, s), 5.58-5.51 (1H, br d, J=8.1Hz), 5.22 (2H, s), 4.93-4.84 (1H, m), 4.76-4.70 (1H, m), 4.60-4.50 (1H, m), 4.50-4.41 (1H, m), 4.39-4.30 (1H, m), 4.11-4.03 (2H, m), 3.97 (2H, dd, J=8.1, 5.1Hz), 4.00-3.92 (1H, m), 1.06 (9H, s).
(5) 3-Hidroxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (850 mg, 1,27 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 57(4)) en tetrahidrofurano anhidro (43 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (87 \mul, 1,52 mmoles) y una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,52 ml, 1,52 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. Al residuo le fueron añadidos acetato de etilo y éter diisopropílico, y la mezcla resultante fue separada por filtración y lavada con éter diisopropílico para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (486 mg, rendimiento 88%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.25 (2H, d, J=8.8Hz), 8.14 (1H, d, J=7.3Hz), 7.61 (2H, d, J=8.8Hz), 7.43 (1H, s), 5.83 (1H, d, J=5.9Hz), 5.19 (2H, s), 4.74-4.67 (1H, m), 4.66-4.58 (1H, m), 4.40-4.34 (1H, m), 4.32-4.26 (1H, m), 4.24-4.17 (3H, m), 3.86-3.80 (1H, m), 3.79-3.71 (2H, m).
(6) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidina (630 mg, 1,45 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 57(5)) en una mezcla de cloruro de metileno (32 ml) y piridina (12 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (377 \mul, 4,36 mmoles) y trietilamina (611 \mul, 4,36 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. Al residuo le fueron añadidos acetato de etilo y éter diisopropílico, y la mezcla fue sometida a separación por filtración y lavada con éter diisopropílico para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (766 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.25 (2H, d, J=8.8Hz), 8.15 (2H, d, J=7.3Hz), 7.61 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (1H, s), 5.50-5.43 (1H, m), 5.19 (2H, s), 4.72 (1H, t, J=8.8Hz), 4.46-4.27 (4H, m), 4.25-4.11 (3H, m), 3.85 (1H, dd, J=9.9, 5.5Hz), 3.29 (3H, s).
(7) 3-Acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (760 mg, 1,45 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 57(6)) en dimetilformamida (38 ml) le fue añadido tioacetato potásico (993 mg, 8,70 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 9 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (397 mg, rendimiento 56%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.52 (2H, d, J=8.8Hz), 7.44 (1H, s), 5.36-5.30 (1H, m), 5.21 (2H, s), 4.74-4.83 (1H, m), 4.60-4.34 (6H, m), 3.95 (3H, m), 2.37 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 58
3-Acetiltio-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
225
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[N-metil-N-(2-hidroxietil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una suspensión de N-metilaminoetanol (1,0 ml, 12,4 mmoles) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (3,64 g, 8,3 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (180 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (1,9 ml, 12,5 mmoles) y trietilamina (1,73 ml, 12,4 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 7 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-metil-N-(2-hidroxietil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (3,41 g, rendimiento 83%) en forma de un jarabe transparente y de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.61 (4H, d, J=7.0Hz), 7.48-7.36 (6H, m), 7.17 (1H, s), 4.79-4.71 (1H, m), 4.17 (2H, t, J=6.8Hz), 4.05 (2H, dd, J=6.8, 2.7Hz), 3.84 (2H, t, J=5.4Hz), 3.64 (2H, t, J=5.4Hz), 3.28 (1H, br s), 3.05 (3H, s), 1.06 (9H, s).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-azidoetil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-metil-N-(2-hidroxietil)carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (997,5 mg, 2,0 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 58(1)) en tetrahidrofurano (50 ml) le fueron añadidas difenilfosforil azida (0,65 ml, 3,02 mmoles), trifenilfosfina (793 mg, 3,02 mmoles) y una solución al 40% de dietilazodicarboxilato en tolueno (1,12 g, 3,04 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla se tuvo en agitación durante la noche bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butidifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-azidoetil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,05 g, rendimiento 100%) en forma de un jarabe incoloro y transparente.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.80-7.00 (11H, m), 4.90-3.00 (11H, m), 1.06 (9H, s).
(3) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-{N-(metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbamoilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
Una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-azidoetil)-N-metil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,05 g, 2,02 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 58(2)) en metanol (60 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% sobre carbón vegetal (1,05 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. A una solución del producto crudo obtenido en cloruro de metileno (52,3 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (650,7 mg, 3,02 mmoles) y trietilamina (0,42 ml, 3,01 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (2 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (699,5 mg, rendimiento 52%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.12 (2H, d, J=7.8Hz), 7.78 (1H, br s), 7.68-7.30 (13H, m), 5.18 (0.5H, s), 5.13 (1.5H, s), 4.80-4.64 (1H, m), 4.10 (2H, t, J=7.3Hz), 4.01 (2H, dd, J=7.3, 5.4Hz), 3.72 (2H, m), 3.50 (2H, m), 3.25 (0.75H, s), 3.02 (2.25H, s), 1.03 (9H, s).
Espectro de masas (FAB^{+}): 674 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Valor observado: 674,2490 [M+H]^{+}, Valor calculado: 674,2468 (C_{34}H_{40}O_{6}N_{3}SSi)
(4) 3-Hidroxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (806,9 mg, 1,20 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 58(3)) en tetrahidrofurano anhidro (40 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (0,09 ml, 1,57 mmoles) y una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,44 ml, 1,44 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (15 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (428,2 mg, rendimiento 84%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.8Hz), 7.71 (1H, t, J=5.5Hz), 7.49 (2H, d, J=8.8Hz), 7.17 (1H, s), 5.18 (2H, s), 4.88-4.70 (1H, m), 4.27 (2H, dd, J=9.1, 7.8Hz), 3.93 (2H, dd, J=9.1, 4.8Hz), 3.68 (2H, t, J=5.5Hz), 3.47 (2H, q, J=5.5Hz), 3.25 (0.8H, s), 3.03 (2.2H, s), 2.40 (1H, d, J=5.9Hz).
(5) 3-Metanosulfoniloxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (428,2 mg, 1,01 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 58(4)) en cloruro de metileno (21,4 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,25 ml, 3,23 mmoles) y trietilamina (0,45 ml, 3,23 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (15 : 1) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (480,1 mg, rendimiento 93%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.1Hz), 7.60-7.44 (3H, m including d, at 7.50 ppm, J=8.1Hz), 7.26 (0.3H, s), 7.24 (0.7H, s), 5.41 (0.3H, m), 5.34 (0.7H, m), 5.18 (2H, s), 4.42 (2H, dd, J=9.0, 7.4Hz), 4.25 (2H, dd, J=9.0, 3.2Hz), 3.66 (2H, t, J=5.2Hz), 3.60-3.42 (2H, m), 3.26 (0.9H, br s), 3.10 (0.9H, br s), 3.08 (2.1H, s), 3.03 (2.1H, s).
(6) 3-Acetiltio-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(4-{N-metil-[N-2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (480,1 mg, 0,93 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 58(5)) en dimetilformamida (24 ml) le fue añadido tioacetato potásico (820 mg, 5,69 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (15 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-{N-metil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (348,9 mg, rendimiento 76%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, d, J=8.8Hz), 7.73 (1H, br s), 7.49 (2H, d, J=8.8Hz), 7.29 (0.4H, s), 7.20 (0.6H, s), 5.18 (2H, s), 4.47 (2H, t, J=8.8Hz), 4.40-4.28 (1H, m), 3.92 (2H, dd, J=8.8, 5.7Hz), 3.66 (2H, t, J=5.4Hz), 3.52-3.44 (2H, m), 3.26 (1.2H, s), 3.03 (1.8H, s), 2.36 (1.2H, s), 2.34 (1.8H, s).
Ejemplo de Referencia 59
3-Acetiltio-1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
226
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una suspensión de N-isopropilaminoetanol (0,61 ml, 1,38 mmoles) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (500 mg, 1,14 mmoles) en dimetilformamida (15 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (0,23 ml, 1,38 mmoles) y trietilamina (0,19 ml, 0,23 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada por espacio de 2 horas bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución de ácido clorhídrico acuoso 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (318 mg, rendimiento 56%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.57 (4H, d, J= 6.5 Hz), 7.50-7.30 (6H, m), 7.07 (0.6H, s), 6.92 (0.4H, s), 4.81-4.63 (1H, m), 4.49 (0.5 H, s), 4.33 (0.5H, s), 4.22-3.88 (4H, m, including 4.06 (2H, dd, J= 14.3, 7.7 Hz)), 3.88-3.62 (2H, m), 1.39-1.08 (6H, m), 1.02 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (2,49 mg, 4,75 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 59(1)) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (5,70 ml, 5,70 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,33 g, rendimiento 98%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.13 (0.7H, s), 7.03 (0.3H, s), 4.62-4.48 (1H, m), 4.48-4.36 (1H, m), 4.29 (2H, t, J= 8.0 Hz), 3.94 (2H, dd, J= 8.0, 4.1 Hz), 3.80 (2H, br s), 3.57 (2H, br s), 1.35 (3H, br s), 1.20 (3H, br s).
(3) 1-(4-{N-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
Una solución de 3-hidroxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,33 g, 4,66 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 59(2)) en dimetilformamida (40 ml) le fueron añadidos cloruro de t-butildimetilsililo (738 mg, 4,89 mmoles) e imidazol (333 mg, 4,89 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a ello metanol y la mezcla fue agitada por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (1,26 g, rendimiento 69%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.99 (0.2H, s), 6.91 (0.8H, s), 4.84-4.72 (1H, m), 4.72-4.35 (1H, m), 4.27 (2H, dd, J= 9.4, 6.8 Hz), 3.91 (2H, dd, J= 9.4, 4.8 Hz), 3.71-3.35 (1H, m), 3.71-3.50 (2H, m), 3.50-3.28 (1H, m), 1.17 (6H, br s), 0.87 (9H, br s), 0.06 (6H, d, J= 2.8 Hz).
(4) 1-(4-{N-[2-(t-Butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (1,24 g, 3,23 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 59(3)) en cloruro de metileno (62 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,30 ml, 3,28 mmoles) y trietilamina (0,54 ml, 3,88 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (649 mg, rendimiento 42%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.16-6.95 (1H, m), 5.46-5.36 (1H, m), 4.49-3.68 (3H, m including 4.41 (2H, ddd, J= 9.6, 6.6, 1.0 Hz)), 4.23 (2H, dd, J= 9.6, 4.4 Hz), 3.91-3.72 (1H, m), 3.72-3.51 (2H, m), 3.51-3.30 (1H, m), 3.07 (3H, s), 1.24 (6H, br s), 0.83 (9H, s), 0.06 (6H, d, J= 3.4 Hz).
(5) 3-Acetiltio-1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (649 mg, 1,35 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 59(4)) en dimetilformamida (19 ml) le fue añadido tioacetato potásico (930 mg, 8,14 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (3 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-{N-[2-(t-butildimetilsililoxi)-etil]-N-isopropil-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (618 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.20-6.89 (1H, m), 4.68-4.18 (4H, m including 4.48 (2H, t, J= 8.5 Hz)), 3.94 (2H, dd, J= 8.5, 5.3 Hz), 3.88-3.23 (4H, m), 2.39 (3H, s), 1.16 (6H, br s), 0.86 (9H, s), 0.04 (6H, d, J= 1.4 Hz).
Ejemplo de Referencia 60
3-Acetiltio-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
227
(1) 1-{4-[N-(2-Azidoetil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina-3-t-butildifenilsililoxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (1,46 g, 2,79 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 59(1)) en tetrahidrofurano (73 ml) le fueron añadidas difenilfosforil azida (0,90 ml, 4,18 mmoles), trifenilfosfina (1,10 g, 4,18 mmoles) y una solución al 40% de dietilazodicarboxilato en tolueno (1,54 g, 4,18 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue entonces agitada por espacio de 3 horas bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (2 : 1) como eluyente para así obtener 1-{4-[N-(2-azidoetil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,38 g, rendimiento 87%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.62 (4H, dd, J= 8.0, 1.4 Hz), 7.36-7.26 (6H, m), 7.26-6.90 (1H, m), 4.80-4.76 (1H, m), 4.75-4.61 (1H, m), 4.13 (1H, t, J= 7.4 Hz), 4.10 (1H, t, J= 7.4 Hz), 4.01 (2H, dd, J= 8.7, 4.0 Hz), 3.80-3.33 (4H, m including 3.56 (2H, br s)), 1.20 (6H, br s), 1.06 (9H, s).
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
Una solución de 1-{4-[N-(2-azido-etil)-N-isopropil-carbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,33 g, 2,42 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 60(1)) en metanol (65 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% sobre carbón vegetal (1,33 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. A una solución del producto crudo obtenido en cloruro de metileno (63 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (627 mg, 2,90 mmoles) y trietilamina (0,41 ml, 2,90 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica obtenida fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (945 mg, rendimiento 56%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.60 (4H, d, J= 1.0 Hz), 7.55-7.32 (10H, m), 7.12 (0.4H, br s), 6.95 (0.6H, br s), 5.28-5.18 (2H, m), 4.81-4.67 (1H, m), 4.24-4.06 (2H, m), 4.00 (2H, dd, J= 8.7, 4.9 Hz), 3.70-3.18 (4H, m), 1.20 (6H, br s), 1.06 (9H, d, J= 1.6 Hz).
(3) 3-Hidroxi-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (945 mg, 1,38 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 60(2)) en tetrahidrofurano anhidro (50 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (0,10 ml, 1,66 mmoles) y una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (1,66 ml, 1,66 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue entonces agitada en el baño de hielo por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (433 mg, rendimiento 66%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J= 8.5 Hz), 7.49 (2H, d, J= 8.5 Hz), 7.11 (0.4H, s), 6.95 (0.6H, s), 5.18 (2H, s), 4.88-4.62 (1H, m), 4.62-4.18 (3H, m), 3.93 (2H, dd, J= 8.8, 4.4 Hz), 3.72-3.36 (4H, m), 1.30 (3H, br s), 1.20 (3H, br s).
(4) 1-(4-{N-Isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,43 g, 3,09 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 60(3)) en cloruro de metileno (72 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,29 ml, 3,70 mmoles) y trietilamina (0,52 ml, 3,70 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato \rightarrow acetato de etilo : metanol (20 : 1) como eluyente para así obtener 1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (766 mg, rendimiento 46%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.20 (2H, d, J= 8.4 Hz), 7.50 (2H, d, J= 8.4 Hz), 7.20 (0.4H, br s), 7.07 (0.6H, br s), 5.41 (1H, br s), 5.19 (2H, s), 4.66-4.18 (5H, m including 4.44 (2H, t, J= 8.8 Hz), 4.25 (2H, t, J= 8.8 Hz)), 3.68-3.36 (4H, m), 3.10 (3H, s), 1.31 (3H, br s), 1.22 (3H, br s).
(5) 3-Acetiltio-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (776 mg, 1,43 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 60(4)) en dimetilformamida (23 ml) le fue añadido tioacetato potásico (982 mg, 8,60 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-{N-isopropil-N-[2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)etil]-carbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (746 mg, rendimiento 46%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J= 8.4 Hz), 7.50 (2H, d, J= 8.4 Hz), 7.15 (0.4H, br s), 7.04 (0.6H, br s), 5.19 (2H, s), 4.66-4.20 (4H, m), 4.08-3.88 (2H, m), 3.66-3.26 (4H, m), 2.96 (3H, s), 2.36 (3H, br s), 1.63 (3H, br s).
Ejemplo de Referencia 61
3-Acetiltio-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(2-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil)propilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
228
(1) Éster t-butílico del ácido ((1S)-1-hidroximetil-2-metilpropil)carbámico
A una solución de L-valinol (2,00 g, 19,4 mmoles) en una mezcla de cloruro de metileno (50 ml) y metanol (50 ml) le fue añadido anhídrido di-t-butoxicarbónico (5,08 g, 23,3 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla de reacción fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido ((1S)-1-hidroximetil-2-metilpropil)carbámico (4,19 mg, rendimiento 100%) en forma un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 4.70-4.59 (1H, br s), 3.74-3.66 (1H, m), 3.65-3.57 (1H, m), 3.48-3.39 (1H, m), 2.38-2.30 (1H, br s), 1.89-1.78 (1H, m), 1.45 (9H, s), 0.96 (3H, d, J=6.6Hz), 0.94 (3H, d, J=6.6Hz).
(2) Éster t-butílico del ácido ((1S)-1-azidometil-2-metilpropil)carbámico
A una solución de éster t-butílico del ácido ((1S)-1-hidroximetil-2-metilpropil)carbámico (3,00 g, 14,8 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 61(1)) en tetrahidrofurano (150 ml) le fueron añadidas difenilfosforil azida (4,78 ml, 22,2 mmoles), trifenilfosfina (5,82 g, 22,2 mmoles) y una solución al 40% de dietilazodicarboxilato en tolueno (9,67 g, 22,2 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada por espacio de 2 horas bajo las mismas condiciones. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo obtenido fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (9 : 1) como eluyente para así obtener éster t-butílico del ácido ((1S)-1-azidometil-2-metilpropil)carbámico (3,26 g, rendimiento 90%) en forma de un aceite incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 4.59-4.45 (1H, m), 3.56-3.47 (1H, m), 3.42 (2H, d, J=4.4Hz), 1.86-1.74 (1H, m), 1.45 (9H, s), 0.95 (3H, d, J=6.6Hz), 0.93 (3H, d, J=7.3Hz).
(3) Éster p-nitrobencílico del ácido ((2S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutil)carbámico
Una solución de éster t-butílico del ácido ((1S)-1-azidometil-2-metilpropil)-carbámico (3,26 g, 13,3 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 61(2)) en metanol (160 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal (3,26 g) a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. A una solución del producto crudo obtenido en cloruro de metileno (160 ml) le fueron añadidos éster p-nitrobencílico del ácido clorofórmico (4,31 g, 20,0 mmoles) y trietilamina (2,80 ml, 20,0 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo entonces en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (8 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener éster p-nitrobencílico del ácido ((2S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutil)carbámico (3,13 mg, rendimiento 62%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.8Hz), 7.50 (2H, d, J=8.8Hz), 5.43-5.31 (1H, br s), 5.19 (2H, s), 4.57-4.49 (1H, br d, J=8.8Hz), 3.60-3.49 (1H, m), 3.40-3.29 (1H, m), 3.26-3.13 (1H, m), 1.82-1.71 (1H, m), 1.43 (9H, s), 0.96 (3H, d, J=7.3Hz), 0.93 (3H, d, J=6.6Hz).
(4) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1[-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de éster p-nitrobencílico del ácido ((2S)-2-t-butoxicarbonilamino-3-metilbutil)-carbámico (3,13 g, 8,21 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 61(3)) en 1,4-dioxano (31 ml) le fue añadida una solución 4N de cloruro de hidrógeno en 1,4-dioxano (31 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. Fue añadido al residuo acetato de etilo, y la mezcla resultante fue sometida a separación por filtración y lavada con acetato de etilo para así obtener hidrocloruro de éster p-nitrobencílico del ácido ((2S)-2-amino-3-metilbutil)carbámico (1,82 g, rendimiento 70%) en forma de cristales de color amarillo claro.
A continuación, a una suspensión de hidrocloruro de éster p-nitrobencílico del ácido ((2S)-2-amino-3-metilbutil)carbámico (1,29 g, 4,05 mmoles) obtenido como se ha descrito anteriormente y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,48 g, 3,37 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(4)) en dimetilformamida (74 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (615 \mul, 4,05 mmoles) y trietilamina (1,14 ml, 8,10 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,55 g, rendimiento 74%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.11 (2H, d, J=8.8Hz), 7.64-7.60 (4H, m), 7.49-7.39 (8H, m), 7.35 (1H, s), 7.20-7.18 (1H, br d, J=9.8Hz), 5.56-5.48 (1H, br s), 5.20 (1H, d, J=13.7Hz), 5.08 (1H, d, J=13.7Hz), 4.78-4.72 (1H, m), 4.14-4.06 (2H, m), 4.04-3.94 (3H, m), 3.46 (1H, dt, J=13.7, 3.9Hz), 3.31 (1H, ddd, J=13.7, 10.7, 5.9Hz), 1.95-1.86 (1H, m), 1.07 (9H, s), 1.01 (3H, d, J=6.8Hz), 0.99 (3H, d, J=6.8Hz).
(5) 3-Hidroxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,54 g, 2,20 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 61(4)) en tetrahidrofurano anhidro (78 ml) le fueron añadidos sucesivamente ácido acético (151 \mul) y una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (2,64 ml, 2,64 mmoles) en un baño de hielo. La mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica obtenida fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (927 mg, rendimiento 91%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.09 (2H, d, J=8.8Hz), 7.41 (2H, d, J=8.8Hz), 7.39 (1H, s), 7.19-7.14 (1H, br d, J=9.5Hz), 5.54-5.46 (1H, m), 5.22 (1H, d, J=13.6Hz), 5.06 (1H, d, J=13.6Hz), 4.87-4.78 (1H, m), 4.37-4.26 (2H, m), 4.04-3.90 (3H, m), 3.47-3.40 (1H, m), 3.38-3.30 (1H, m), 2.38 (1H, d, J=7.3Hz), 1.94-1.83 (1H, m), 1.00 (3H, d, J=7.3Hz), 0.99 (3H, d, J=7.3Hz).
(6) 3-Metanosulfoniloxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (920 mg, 1,98 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 61(5)) en cloruro de metileno (46 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (461 \mul, 5,95 mmoles) y trietilamina (834 \mul, 5,95 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla en el baño de hielo por espacio de 10 minutos, la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 4) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,06 g, rendimiento 99%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.10 (2H, d, J=8.8Hz), 7.45 (1H, s), 7.41 (2H, d, J=8.8Hz), 7.18-7.12 (1H, br d, J=8.8Hz), 5.50-5.45 (1H, br s), 5.42 (1H, tt, J=6.6, 4.4Hz), 5.22 (1H, d, J=13.2Hz), 5.08 (1H, d, J=13.2Hz), 4.49-4.40 (2H, m), 4.29-4.20 (2H, m), 4.04-3.95 (1H, m), 3.44 (1H, dt, J=13.9, 4.4Hz), 3.38-3.24 (1H, m), 3.12 (3H, s), 1.94-1.85 (1H, m), 1.01 (3H, d, J=6.6Hz), 0.99 (3H, d, J=6.6Hz).
(7) 3-Acetiltio-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,06 g, 1,96 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 61(6)) en dimetilformamida (53 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,34 mg, 11,7 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 8,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada sucesivamente con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 3) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-{(1S)-2-metil-[1-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil]-propilcarbamoil}-1,3-tiazol-2-il)azetidina (785 mg, rendimiento 77%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.12 (2H, d,J =8.8Hz), 7.42 (2H, d, J=8.8Hz), 7.41 (1H, s), 7.20-7.16 (1H, br d, J=9.5Hz), 5.54-5.45 (1H, br s), 5.21 (1H, d, J=13.2Hz), 5.09 (1H, d, J=13.2Hz), 4.51 (2H, dt, J=11.0, 8.4Hz), 4.47-4.39 (1H, m), 4.03-3.93 (3H, m), 3.45 (1H, dt, J=13.2, 4.0Hz), 3.37-3.68 (1H, m), 2.37 (3H, s), 1.95-1.84 (1H, m), 1.00 (3H, d, J=7.3Hz), 0.99 (3H, d, J=7.3Hz).
\newpage
Ejemplo de Referencia 62
3-Acetiltio-1-{4-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il}azetidina 
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229 
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(1) 1-(4-Azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,02 g, 2,39 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(2)) en tetrahidrofurano (50 ml) le fueron añadidas difenilfosforil azida (0,8 ml, 3,71 mmoles), trifenilfosfina (950 mg, 3,62 mmoles) y solución de dietilazodicarboxilato al 40% en tolueno (1,32 g, 3,59 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (8 : 1) como eluyente para así obtener 1-(4-azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,06 g, rendimiento 99%) en forma de un jarabe incoloro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.66-7.36 (10H, m), 6.45 (1H, s), 4.78-4.71 (1H, m), 4.24 (2H, s), 4.12 (2H, dd, J=8.6, 6.2Hz), 4.02 (2H, dd, J=8.6, 5.7Hz), 1.06 (9H, s).
IR (liquid film): 2858, 2170, 2100, 1527, 1313, 1182, 1143, 1114 cm^{-1}
Espectro de masas (FAB^{+}): 450 [M+H]^{+}
Espectro de masas de alta resolución (FAB^{+}): Calculado para C_{23}H_{28}ON_{5}SSi: 450,1784; Hallado: 450,1793
[M+H]^{+}
(2) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
1-(4-Azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,06 g, 2,37 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(1)) en metanol (53 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% sobre carbón vegetal (1,05 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue disuelto en cloruro de metileno (53,2 ml). Fueron añadidos a la mezcla cloroformiato de p-nitrobencilo (0,76 g, 3,52 mmoles) y trietilamina (0,5 ml, 3,59 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo entonces en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue destilada bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetato de etilo (3 : 2) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (867,2 mg, rendimiento 61%) en forma de un sólido de color amarillo.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.3Hz), 7.62 (4H, d, J=8.3Hz), 7.50 (2H, d, J=8.3Hz), 7.50-7.34 (6H, m), 6.37 (1H, s), 5.38 (1H, br t, J=5.4Hz), 5.20 (2H, s), 4.78-4.71 (1H, m), 4.26 (2H, d, J=5.4Hz), 4.10 (2H, dd, J=8.3, 6.8Hz), 4.00 (2H, dd, J=8.3, 4.7Hz), 1.06 (9H, s).
(3) 3-Hidroxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (867,2 mg, 1,44 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(2)) en tetrahidrofurano anhidro (45 ml) le fueron añadidos ácido acético (0,1 ml, 1,75 mmoles) y fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,72 ml, 1,72 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en el baño de hielo por espacio de 4,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (15 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (457 mg, rendimiento 87%) en forma de un sólido de color amarillo.
^{1}H-NMR (500 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.6Hz), 7.51 (2H, d, J=8.6Hz), 6.40 (1H, s), 5.38 (1H, br s), 5.21 (2H, s), 4.88-4.80 (1H, m), 4.32 (2H, dd, J=9.1, 6.8Hz), 4.27 (2H, d, J=5.7Hz), 3.95 (2H, dd, J=9.1, 4.5Hz), 2.23 (1H, d, J=7.9Hz).
(4) 3-Metanosulfoniloxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (457 mg, 1,25 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(3)) en cloruro de metileno (25 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,29 ml, 3,75 mmoles) y trietilamina (0,53 ml, 3,80 mmoles) en un baño de hielo. Tras haber agitado la mezcla por espacio de 10 minutos en el baño de hielo, la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (499,4 mg, rendimiento 90%) en forma de un sólido de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=7.8Hz), 7.51 (2H, d, J=7.8Hz), 6.46 (1H, s), 5.44-5.38 (2H, m), 5.26 (2H, s), 4.43 (2H, dd, J=9.8, 6.8Hz), 4.28 (2H, d, J=5.9Hz), 4.24 (2H, dd, J=9.8, 4.4Hz), 3.10 (3H, s).
(5) 3-Acetiltio-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (499,4 mg, 1,13 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(4)) en dimetilformamida (25 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,0 g, 6,93 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 6,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con ácido clorhídrico 0,5M, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (2 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(p-nitrobenciloxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (265,2 mg, rendimiento 56%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.21 (2H, d, J=8.42Hz), 7.51 (2H, d, J=8.4Hz), 6.42 (1H, s), 5.39 (1H, br t, J=7.5Hz), 5.21 (2H, s), 4.51 (2H, t, J=8.1Hz), 4..50-4.38 (1H, m), 4.27 (2H, d, J=7.5Hz), 3.96 (2H, dd, J=8.1, 5.1Hz), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 63
3-Acetiltio-1-[4-(metoxicarbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
230
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
1-(4-Azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (2,12 g, 4,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(1)) en metanol (106 ml) fue sometida a reducción catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% (2,12 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue disuelto en cloruro de metileno (100 ml). Fueron añadidos a la mezcla cloroformiato de metilo (0,43 ml, 5,65 mmoles) y trietilamina (0,79 ml, 5,65 mmoles), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue destilada bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,88 g, rendimiento 45%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.60 (4H, d, J= 1.5 Hz), 7.48-7.31 (6H, m), 7.19 (1H, t, J= 8.1 Hz), 7.00 (1H, s), 4.78-4.68 (1H, m), 4.24 (2H, d, J= 5.8 Hz), 4.09 (2H, t, J= 9.0, 6.6 Hz), 3.99 (2H, t, J= 9.0, 5.0 Hz), 3.67 (3H, s), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,88 g, 3,90 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 63(1)) en tetrahidrofurano anhidro (94 ml) le fueron añadidos ácido acético (0,27 ml, 4,68 mmoles) y fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (4,68 ml, 4,68 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (426 mg, rendimiento 45%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.39 (1H, s), 4.79-4.39 (1H, m), 4.31 (2H, dd, J= 9.1, 6.7 Hz), 4.25 (2H, d, J= 5.8 Hz), 3.94 (2H, dd, J= 9.1, 4.3 Hz), 3.68 (3H, s).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (426 mg, 1,75 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 63(2)) en cloruro de metileno (20 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,16 ml, 2,10 mmoles) y trietilamina (0,29 ml, 2,10 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (448 mg, rendimiento 80%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.45 (1H, s), 5,45-5.36 (1H, m), 4.43 (2H, dd, J= 9.6, 6.7 Hz), 4.25 (2H, s), 4.25 (1H, t. J= 5.8 Hz), 4.23 (1H, t. J= 5.8 Hz), 3.69 (3H, s), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(metoxicarbonilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (448 mg, 1,39 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 63(3)) en dimetilformamida (13 ml) le fue añadido tioacetato potásico (952 mg, 8,34 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(metoxicarbonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (441 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.41 (1H, s), 4.50 (2H, t, J= 8.5 Hz), 4.49-4.45 (1H, m), 4.25 (2H, d, J= 5.7 Hz), 3.56 (2H, dd, J= 8.5, 5.3 Hz), 3.68 (3H, s), 2.05 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 64
3-Acetiltio-1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina 
\vskip1.000000\baselineskip
231 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) 1-[4-(Benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-t-butildifenilsililoxiazetidina
1-(4-Azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (2,53 g, 5,60 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(1)) en metanol (120 ml) fue sometida a reducción catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% (2,53 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador. Al filtrado le fue añadido anhídrido benzoico (1,90 ml, 8,40 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 2,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue destilada bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (3 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,49 g, rendimiento 50%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.79 (2H, d, J= 7.3 Hz), 7.63-7.55 (4H, m), 7.55-7.31 (9H, m), 6.79 (1H, br s), 6.44 (1H, s), 4.79-4.68 (1H, m), 4.51 (2H, d, J= 5.4 Hz), 4.11 (2H, dd, J= 8.4, 7.3 Hz), 4.01 (2H, dd, J= 8.4, 5.0 Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-[4-(Benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina
A una solución de 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (1,49 g, 2,82 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 64(1)) en tetrahidrofurano anhidro (75 ml) le fue añadida una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (3,39 ml, 3,39 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 2) \rightarrow acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (582 mg, rendimiento 71%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.79 (2H, dd, J= 7.4 Hz), 7.60-7.36 (3H, m), 6.82 (1H, br s), 6.46 (1H, s), 4.85-4.77 (1H, m), 4.51 (2H, d, J= 5.6 Hz), 4.31 (2H, dd, J= 8.9, 6.6 Hz), 3.95 (2H, dd, J= 8.5, 4.4 Hz).
(3) 1-[4-(Benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (582 mg, 2,01 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 64(2)) en cloruro de metileno (30 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,19 ml, 2,41 mmoles), trietilamina (0,34 ml, 2,41 mmoles) y piridina (5,8 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (739 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.80 (2H, d, J= 6.9 Hz), 7.57-7.41 (3H, m), 6.71 (1H, bs), 6.53 (1H, s), 5.46-5.38 (1H, m), 4.54 (2H, d, J= 5.2 Hz), 4.44 (2H, ddd, J= 9.6, 6.6, 0.9 Hz), 4.25 (2H, ddd, J= 9.6, 9.3, 0.9 Hz), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-[4-(benzoilamino-metil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (739 mg, 2,01 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 64(3)) en dimetilformamida (20 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,38 g, 12,1 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 3,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidina (698 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.08 (2H, d, J= 7.8 Hz), 7.55-7.46 (3H, m), 6.77 (1H, br s), 6.49 (1H, s), 4.47-4.38 (4H, m), 4.47-4.38 (1H, m), 3.97 (2H, dd, J= 8.6, 5.2 Hz), 2.37 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 65
3-Acetiltio-1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
232
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
1-(4-Azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (2,12 g, 4,71 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(1)) en metanol (106 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% (2,12 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue disuelto en cloruro de metileno (100 ml). Fueron añadidos a la mezcla cloruro de bencenosulfonilo (0,90 g, 7,07 mmoles) y trietilamina (0,98 ml, 7,07 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue destilada bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (755 mg, rendimiento 28%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.80 (2H, d, J= 7.5 Hz), 7.61 (4H, d, J= 6.3 Hz), 7.54-7.30 (9H, m), 6.21 (1H, s), 5.07 (1H, t, J= 6.0 Hz), 4.74-4.66 (1H, m), 4.05 (2H, d, J= 6.3 Hz), 3.99 (2H, dd, J= 7.6 Hz), 3.89 (2H, dd, J= 8.8, 4.8 Hz), 1.07 (9H, s).
(2) 1-[4-(Bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (2,79 g, 4,95 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 65(1)) en tetrahidrofurano anhidro (140 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (5,94 ml, 5,94 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,06 g, rendimiento 66%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.79 (2H, d, J= 7.5 Hz), 7.50-7.41 (3H, m), 6.25 (1H, s), 5.51 (1H, br s), 4.80-4.70 (1H, m), 4.19 (2H, t, J= 9.1 Hz), 4.03 (2H, t, J= 3.5 Hz), 3.83 (2H, dd, J= 9.1, 4. Hz).
(3) 1-[4-(Bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,06 g, 3,26 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 65(2)) en cloruro de metileno (50 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,38 ml, 4,89 mmoles) y trietilamina (0,68 ml, 4,89 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,16 mg, rendimiento 91%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.82 (2H, d, J= 7.3 Hz), 7.61-7.46 (3H, m), 6.33 (1H, s), 5.42-5.33 (1H, m), 5.15 (1H, t, J= 5.9 Hz), 4.34 (2H, dd, J= 9.8, 6.7 Hz), 4.14 (2H, dd, J= 9.8, 4.1 Hz), 4.08 (2H, d, J= 6.3 Hz), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,16 g, 2,98 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 65(3)) en dimetilformamida (35 ml) le fue añadido tioacetato potásico (2,04 g, 17,9 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : acetato de etilo (5 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(bencenosulfonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,00 g, rendimiento 91%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.82 (2H, d, J= 7.4Hz), 7.58-7.42 (3H, m), 6.23 (1H, s), 5.40-5.50 (1H, m), 4.48-4.30 (3H, m), 4.09 (2H, d, J= 5.8 Hz), 3.90 (2H, dd, J= 8.3, 4.5 Hz), 2.37 (3H, s).
\newpage
Ejemplo de Referencia 66
3-Acetiltio-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
233
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
1-(4-Azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (2,47 g, 5,50 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(1)) en metanol (120 ml) fue sometida a hidrogenación catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% (2,47 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue disuelto en cloruro de metileno (115 ml). Fueron añadidos a la mezcla cloruro de tenoilo (0,71 ml, 6,60 mmoles) y trietilamina (0,92 ml, 6,60 mmoles), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue destilada bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,88 g, rendimiento 64%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.75-7.32 (13H, m), 7.11-7.03 (1H, m), 6.65 (1H, br s), 4.80-4.70 (1H, m), 4.47 (2H, d, J= 5.0 Hz), 4.11 (2H, t, J= 8.5 Hz), 4.01 (2H, dd, J= 8.5, 5.0 Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (2,18 g, 4,08 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 66(1)) en tetrahidrofurano anhidro (110 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (4,90 ml, 4,90 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (571 mg, rendimiento 47%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.53 (1H, d, J= 3.5 Hz), 7.46 (1H, d, J= 5.4 Hz), 7.60 (1H, dd, J= 4.9, 3.8 Hz), 6.87 (1H, br s), 6.46 (1H, s), 4.87-4.78 (1H, m), 4.48 (2H, d, J= 5.6 Hz), 4.33 (2H, dd, J= 8.7, 4.6 Hz), 3.98 (2H, dd, J= 8.7, 4.6 Hz).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonil-amino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (571 mg, 1,93 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 66(2)) en cloruro de metileno (28 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,18 ml, 2,32 mmoles) y trietilamina (0,33 ml, 2,32 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (1 : 1)
como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (490 mg, rendimiento 91%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.56 (1H, d, J= 5.4 Hz), 7.47 (1H, d, J= 5.4 Hz), 7.07 (1H, dd, J= 5.1, 3.7 Hz), 6.87 (1H, br s), 6.50 (1H, s), 4.57 (2H, t, J= 8.6 Hz), 4.50 (2H, t, J= 5.4 Hz), 4.50 (2H, d, J= 5.4 Hz), 4.48-4.37 (1H, m), 4.36 (2H, dd, J= 8.6, 5.5 Hz), 2.36 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (623 mg, 1,67 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 66(3)) en dimetilformamida (18 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,14 g, 10,0 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (490 mg, rendimiento 91%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.56 (1H, d, J= 5.4 Hz), 7.47 (1H, d, J= 5.4 Hz), 7.07 (1H, dd, J= 5.1, 3.7 Hz), 6.87 (1H, br s), 6.50 (1H, s), 4.57 (2H, t, J= 8.6 Hz), 4.50 (2H, t, J= 5.4 Hz), 4.50 (2H, d, J= 5.4 Hz), 4.48-4.37 (1H, m), 4.36 (2H, dd, J= 8.6, 5.5 Hz), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 67
3-Acetiltio-1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
234 
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(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
1-(4-Azidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (2,47 g, 5,50 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 62(1)) en metanol (120 ml) fue sometida a reducción catalítica en presencia de hidróxido de paladio al 20% (2,47 g) a temperatura ambiente. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue filtrada a fin de retirar el catalizador, y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue disuelto en cloruro de metileno (115 ml). Fueron añadidos a la mezcla cloruro de 2-furoilo (0,65 ml, 6,60 mmoles) y trietilamina (0,92 ml, 6,60 mmoles), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue destilada bajo presión reducida. El residuo fue repartido entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1)
como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,60 g, rendimiento 60%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.75-7.58 (4H, m), 7.50-7.09 (9H, m), 6.68 (1H, br s), 4.82-4.70 (1H, m), 4.47 (2H, d, J= 5.5 Hz), 4.11 (2H, t, J= 8.3 Hz), 4.02 (2H, dd, J= 8.3, 5.0 Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-[4-(Furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (1,90 g, 3,68 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 67(1)) en tetrahidrofurano anhidro (95 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (4,41 ml, 4,41 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (10 : 1) como eluyente para así obtener 1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (426 mg, rendimiento 47%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.44 (1H, s), 7.12 (1H, d, J= 3.5 Hz), 7.04 (1H, br s), 6.49 (1H, dd, J= 3.4, 1.7 Hz), 6.45 (1H, s), 4.86-4.78 (1H, m), 4.48 (2H, d, J= 5.7 Hz), 4.33 (2H, t, J= 8.8 Hz), 3.98 (2H, dd, J= 8.8, 4.4 Hz).
(3) 1-[4-(Furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (426 mg, 1,72 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 67(2)) en cloruro de metileno (20 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,16 ml, 2,07 mmoles) y trietilamina (0,29 ml, 2,07 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (20 : 1)
como eluyente para así obtener 1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (481 mg, rendimiento 78%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.45 (1H, d, J= 0.9 Hz), 7.13 (1H, d, J= 3.5 H), 7.00 (1H, s), 6.53 (1H, s), 6.50 (1H, dd, J= 3.5, 1.8 Hz), 5.49-5.38 (1H, m), 4.51 (2H, d, J= 5.8 Hz), 4.48 (2H, dd, J= 3.1, 1.0 Hz), 4.29 (2H, dd, J= 5.8, 4.9 Hz), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
A una solución de 1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (481 mg, 1,34 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 67(3)) en dimetilformamida (14 ml) le fue añadido tioacetato potásico (921 mg, 8,07 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(furan-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il]azetidina (341 mg, rendimiento 83%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.45 (1H, s), 7.12 (1H, d, J= 3.5 Hz), 7.09-6.94 (2H, m), 6.49 (2H, t, J= 2.5 Hz), 4.56 (2H, t, J= 8.5 Hz), 4.50 (2H, d, J= 5.7 Hz), 4.48-4.38 (1H, m), 4.02 (2H, dd, J= 8.5, 6.1 Hz), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 68
3-Acetiltio-1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il]azetidina
235
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,50 g, 3,53 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(2)) en tetrahidrofurano (75 ml) le fueron añadidas ftalimida (519 mg, 5,30 mmoles), trifenilfosfina (1,39 g, 5,30 mmoles) y solución de azodicarboxilato de dietilo al 40% en tolueno (2,03 ml, 5,30 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 5) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,52 mg, rendimiento 78%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.88 (2H, dd, J= 5.5, 3.1 Hz), 7.33 (2H, dd, J= 5.5, 3.1 Hz), 7.60 (4H, dd, J= 7.9, 1.4 Hz), 7.47-7.34 (6H, m), 6.26 (1H, s), 4.83 (2H, s), 4.76-4.68 (1H, m), 4.26-4.08 (2H, m), 4.08-3.92 (2H, m), 1.05 (9H, s).
(2) 1-(4-Ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,52 g, 2,57 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 68(1)) en tetrahidrofurano anhidro (76 ml) le fue añadida una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (3,29 ml, 3,29 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (864 mg, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.87 (2H, dd, J= 5.4, 3.1 Hz), 7.73 (2H, dd, J= 5.4, 3.1 Hz), 6.32 (1H, s), 4.79 (2H, s), 4.78-4.70 (1H, m), 4.27 (2H, dd, J= 9.2, 6.9 Hz), 3.91 (2H, dd, J= 9.2, 4.6 Hz).
(3) 1-(4-Ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (864 mg, 2,74 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 68(2)) en cloruro de metileno (35 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,25 ml, 3,29 mmoles) y trietilamina (0,46 ml, 3,29 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue añadida a éter dietílico y agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla fue entonces filtrada, y el sólido fue recogido por filtración y lavado con éter dietílico para así obtener 1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (726 mg, rendimiento 67%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.91 (2H, dd, J= 5.5, 2.8 Hz), 7.86 (2H, dd, J= 5.5, 3.5 Hz), 6.70 (1H, s), 5.46-5.39 (1H, m), 4.63 (2H, s), 4.36 (2H, dd, J= 10.0, 6.6 Hz), 4.09 (2H, dd, J= 10.0, 3.4 Hz), 3.27 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (726 mg, 1,85 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 68(3)) en dimetilformamida (22 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,26 g, 11,1 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 6,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano :
acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-(ftalimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (599 mg, rendimiento 87%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.88 (2H, dd, J= 5.4, 2.9 Hz), 7.73 (2H, dd, J= 5.4, 3.1 Hz), 6.35 (1H, s), 4.82 (2H, s), 4.52 (2H, t, J= 8.4 Hz), 4.45-4.35 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J= 8.4, 5.7 Hz), 2.34 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 69
3-Acetiltio-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
236
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,50 g, 3,53 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 2(2)) en tetrahidrofurano (75 ml) le fueron añadidas succinimida (525 mg, 5,30 mmoles), trifenilfosfina (1,39 g, 5,30 mmoles) y solución de azodicarboxilato de dietilo al 40% en tolueno (2,03 ml, 5,30 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando hexano : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,79 g, rendimiento 100%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.65-7.57 (4H, m), 7.49-7.36 (6H, m), 6.30 (1H, s), 4.75-4.66 (1H, m), 4.60 (2H, s), 4.21 (4H, dd, J= 14.2, 7.1 Hz), 4.12 (4H, dd, J= 14.2, 7.1 Hz), 4.09 (2H, t, J= 8.5 Hz), 3.99 (2H, dd, J= 8.5, 4.9 Hz), 1.05 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,79 g, 3,53 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 69(1)) en tetrahidrofurano anhidro (141 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (4,24 ml, 4,24 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato magnésico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (20 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (456 mg, rendimiento 49%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.34 (1H, s), 4.84-4.74 (1H, m), 4.62 (2H, s), 4.31 (2H, dd, J= 9.9, 6.6 Hz), 3.94 (2H, dd, J= 9.9, 4.4 Hz), 2.76 (4H, m).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (459 mg, 1,72 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 69(2)) en cloruro de metileno (50 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (0,16 ml, 2,06 mmoles) y trietilamina (0,29 ml, 2,06 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (515 mg, rendimiento 87%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.43 (1H, s), 5.44-5.34 (1H, m), 4.62 (2H, s), 4.44 (2H, dd, J= 10.3, 6.6 Hz), 4.24 (2H, dd, J= 10.3, 4.2 Hz), 3.09 (3H, s), 2.76 (4H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (515 mg, 1,49 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 69(3)) en dimetilformamida (15 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,02 g, 8,95 mmoles) a temperatura ambiente, y se efectuó entonces agitación en un baño de aceite (a 90ºC) por espacio de 8 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-succinimidometil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (238 mg, rendimiento 49%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 6.37 (1H, s), 4.62 (2H, s), 4.51 (2H, t, J= 8.5 Hz), 4.45-4.35 (1H, m), 3.97 (2H, dd, J= 8.4, 5.4 Hz), 2.76 (4H, s), 2.35 (3H, m).
Ejemplo de Referencia 70
3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-oxazol-2-il)azetidina 
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237 
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(1) Éster metílico del ácido (2S)-3-(t-butildifenilsililoxi)-2-isotiocianatopropiónico
Éster metílico de t-butildifenilsililoxi-N-benciloxicarbonil-L-serina (32,0 g, 65,1 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 39(1)) en metanol (960 ml) fue sometido a hidrogenación catalítica en presencia de paladio al 10% sobre carbón vegetal a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Al final de este periodo de tiempo, la mezcla de reacción fue filtrada y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener éster metílico de t-butildifenilsililoxi-L-serina (19,7 g, rendimiento 85%) en forma de un aceite incoloro. A una solución del producto (éster metílico de t-butildifenilsililoxi-L-serina) (19,7 g, 55,0 mmoles) en cloruro de metileno (590 ml) le fueron añadidos disulfuro de carbono (6,62 g, 110 mmoles) y trietilamina (19,3 ml, 138 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla se tuvo en agitación durante la noche. Fueron añadidos a la mezcla resultante cloroformiato de etilo (13,2 ml, 138 mmoles) y trietilamina (19,3 ml, 138 mmoles), y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido metanol a la mezcla de reacción, y la mezcla resultante fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno como eluyente para así obtener éster metílico del ácido (2S)-3-(t-butildifenilsililoxi)-2-isotiocianatopropiónico (14,8 g, rendimiento 67%) en forma de cristales de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70-7.62 (4H, m), 7.48-7.38 (6H, m), 4.28 (1H, dd, J=3.7, 5.1Hz), 4.05 (1H, dd, J=5.1, 10.3Hz), 3.95 (1H, dd, J=3.7, 10.3Hz), 3.80 (3H, s), 1.06 (9H, s).
(2) Éster metílico del ácido (2S)-3-(t-butildifenilsililoxi)-2-[(3-hidroxiazetidina-1-carbotioil)amino]propiónico
A una solución de éster metílico del ácido 3-(t-butildifenilsililoxi)-2-isotiocianatopropiónico (13,4 g, 33,5 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(1)) en tetrahidrofurano (245 ml) le fue añadida una solución de 3-hidroxiazetidina (4,90 g, 67,1 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 31(1)) en agua (50 ml) a temperatura ambiente, y la mezcla se tuvo en agitación durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno y tolueno : acetonitrilo (3 : 1)
como eluyente para así obtener éster metílico del ácido (2S)-3-(t-butildifenilsililoxi)-2-[(3-hidroxiazetidina-1-carbotioil)amino]propiónico (9,60 g, rendimiento 61%) en forma de un sólido de color amarillo.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.61-7.55 (4H, m), 7.47-7.36 (6H, m), 5.94 (1H, br d, J=8.1Hz), 5.19 (1H, dt, J=2.9, 8.1Hz), 4.71-4.64 (1H, m), 4.40-4.33 (1H, m), 4.31-4.23 (1H, m), 4.18 (1H, dd, J=2.2, 10.3Hz), 4.04 (1H, dd, J=2.9, 10.3Hz), 4.02-3.96 (1H, m), 3.94-3.88 (1H, m), 3.76 (3H, s), 2.24 (1H, br d, J=5.9Hz), 1.04 (9H, s).
(3) Éster metílico del ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidina-1-carbotioil]amino}-3-(t-butildifenilsililoxi)propiónico
A una solución de éster metílico del ácido (2S)-3-(t-butildifenilsililoxi)-2-[(3-hidroxiazetidina-1-carbotioil)-amino]propiónico (21,1 g, 44,6 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(2)) en piridina (630 ml) le fueron añadidas una solución de anhídrido benzoico (30,0 g, 133 mmoles) y 4-dimetilaminopiridina (545 mg, 4,46 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con ácido clorhídrico 0,5N, solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (4 : 1) como eluyente para así obtener éster metílico del ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidina-1-carbotioil]amino}-3-(t-butildifenilsililoxi)propiónico (23,3 g, rendimiento 91%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.10-8.05 (2H, m), 7.65-7.54 (4H, m), 7.52-7.45 (3H, m), 7.44-7.35 (6H, m), 5.96 (1H, br d, J=8.1Hz), 5.47-5.40 (1H, m), 5.20 (1H, dt, J=8.1, 2.9Hz), 4.57-4.51 (1H, m), 4.49-4.40 (1H, m), 4.27-4.20 (1H, m), 4.20 (1H, dd, J=2.2, 10.3Hz), 4.06 (1H, dd, J=2.9, 10.3Hz), 3.77 (3H, s), 1.04 (9H, s).
(4) Éster metílico del ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidina-1-carbotioil]amino}-3-hidroxipropiónico
A una solución de éster metílico del ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidina-1-carbotioil]amino}-3-(t-butildifenilsililoxi)propiónico (23,3 g, 40,0 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(3)) en tetrahidrofurano (700 ml) le fue añadida una solución 1,0M de fluoruro tetra-n-butilamónico en tetrahidrofurano (48,4 g, 48,4 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (3 : 1) como eluyente para así obtener éster metílico del ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidina-1-carbotioil]amino}-3-hidroxi-propiónico (12,6 g, rendimiento 92%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.08-8.04 (2H, m), 7.64-7.59 (1H, m), 7.51-7.45 (2H, m), 6.00 (1H, d, J=7.3Hz), 5.49-5.43 (1H, m), 5.25 (1H, dt, J=7.3, 3.7Hz), 4.63-4.56 (2H, m), 4.32-4.24 (2H, m), 4.12-4.02 (2H, m), 3.82 (3H, s).
(5) 3-Benzoiloxi-1-[(4S)-4-metoxicarbonil-1,3-oxazolin-2-il]azetidina
A una solución de tetrafluoroborato de 2-cloro-3-etilbenzoxazolio (15,1 g, 55,9 mmoles) en acetonitrilo (380 ml) le fue añadida gota a gota una solución de éster metílico del ácido (2S)-2-{[3-(benzoiloxi)-azetidina-1-carbotioil]amino}-3-hidroxipropiónico (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(4)) (12,6 g, 37,2 mmoles) en acetonitrilo (500 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. A la mezcla resultante le fue añadida trietilamina (10,4 ml, 74,4 mmoles), y la mezcla fue agitada por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio, y la capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-benzoiloxi-1-[(4S)-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazolin-2-il)azetidina (9,12 g, rendimiento 81%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.08-8.04 (2H, m), 7.63-7.58 (1H, m), 7.49-7.44 (2H, m), 5.50-5.44 (1H, m), 4.69 (1H, dd, J=6.6, 9.5Hz), 4.55 (1H, dd, J=6.6, 8.1Hz), 4.51-4.44 (3H, m), 4.20-4.14 (2H, m), 3.78 (3H, s).
(6) 3-Benzoiloxi-1-[4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-benzoiloxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazolin-2-il)azetidina (9,12 g, 30,0 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(5)) en una mezcla de tolueno (450 ml) y cloruro de metileno (180 ml) le fue añadido dióxido de manganeso (63,8 g), y la mezcla fue calentada en reflujo por espacio de 5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue filtrada y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo = 1 : 1 como eluyente para así obtener 3-benzoiloxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (5,24 g, rendimiento 58%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.08-8.04 (2H, m), 7.84 (1H, s), 7.63-7.58 (1H, m), 7.50-7.44 (2H, m), 5.60-5.53 (1H, m), 4.61 (1H, dd, J=5.9, 9.5Hz), 4.31 (1H, dd, J=3.4, 9.5Hz), 3.89 (3H, s).
(7) 3-Hidroxi-1-[4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-benzoiloxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (5,24 g, 17,3 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(6)) en una mezcla de metanol (260 ml) y cloruro de metileno (80 ml) le fue añadida una cantidad catalítica de metóxido sódico a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue neutralizada con gas cloruro de hidrógeno 4N en dioxano y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (2,65 g, rendimiento 77%) en forma de cristales de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.81 (1H, s), 4.83-4.76 (1H, br s), 4.41 (2H, dd, J=6.6, 9.5Hz), 4.06 (2H, dd, J=4.4, 9.5Hz), 3.88 (3H, s), 2.39-2.30 (1H, br s).
(8) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (2,64 g, 13,4 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(7)) en dimetilformamida (80 ml) le fueron añadidos t-butildifenilsilano (6,97 ml, 26,8 mmoles) e imidazol (1,82 g, 26,8 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación en un baño de hielo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido metanol a la mezcla de reacción, y la mezcla fue agitada por espacio de 30 minutos. La mezcla resultante fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (4 : 3 \rightarrow 3 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (4,95 g, rendimiento 85%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.78 (1H, s), 7.62-7.58 (4H, m), 7.48-7.36 (6H, m), 4.74-4.67 (1H, m), 4.15 (1H, dd, J=6.6, 9.5Hz), 4.08 (1H, dd, J=5.1, 9.5Hz), 3.87 (3H, s), 1.06 (9H, s).
(9) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (4,95 g, 11,3 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(8)) en tetrahidrofurano anhidro (100 ml) le fue añadida gota a gota una suspensión de hidruro de aluminio y litio (1,29 g, 33,9 mmoles) en tetrahidrofurano anhidro (250 ml) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 5 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido gradualmente a la mezcla de reacción en un baño de hielo decahidrato de sulfato magnésico. Tras haber concluido la espumación, la mezcla resultante fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Fue añadido gradualmente a la mezcla de reacción acetato de etilo. La mezcla resultante fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro sódico. La capa orgánica fue secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando tolueno : acetonitrilo (3 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (3,88 g, rendimiento 84%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.63-7.59 (4H, m), 7.47-7.36 (6H, m), 7.13 (1H, s), 4.73-4.66 (1H, m), 4.45 (2H, s), 4.11 (2H, dd, J=6.6, 8.8Hz), 4.04 (2H, dd, J=5.1, 8.8Hz), 2.21-2.15 (1H, br s), 1.06 (9H, s).
(10) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-formil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-hidroximetil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (3,88 g, 9,50 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(9)) en cloruro de metileno (190 ml) le fue añadido dióxido de manganeso activado (19,4 g), y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue filtrada y el filtrado fue concentrado bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (3 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-formil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (3,09 g, rendimiento 80%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 9.75 (1H, s), 7.80 (1H, s), 7.63-7.58 (4H, m), 7.48-7.37 (6H, m), 4.75-4.68 (1H, s), 4.16 (2H, dd, J=6.6, 9.5Hz), 4.10 (2H, dd, J=5.1, 9.5Hz), 1.06 (9H, s).
(11) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-formil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (3,09 g, 7,60 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(10)) en cloruro de metileno anhidro (18 ml) le fueron añadidos t-butanol (93 ml) y una solución de 2-metil-2-buteno 2M en tetrahidrofurano (5,70 ml, 11,4 mmoles), a continuación de lo cual se efectuó una adición gota a gota de una solución de clorito sódico (1,72 g, 15,2 mmoles) y fosfato de dihidrógeno y sodio (1,82 g, 15,2 mmoles) en agua (18 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fue añadido a la mezcla de reacción ácido clorhídrico 1M hasta un pH de 2 a 3. La mezcla resultante fue sometida a extracción con acetato de etilo. La capa orgánica fue separada, lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno y cloruro de metilo (9 : 1) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-tiazol-2-il)azetidina (1,90 g, rendimiento 59%) en forma de un sólido de color pardo.
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 423 [M+H]^{+}
Ejemplo de Referencia 71
3-Acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
238
(1) 1-(4-Azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (2,00 g, 4,58 mmoles) en tolueno (100 ml) le fue añadida una solución de azetidina-trimetilaluminio 0,67M en benceno (13,7 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 100ºC) por espacio de 5,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. La mezcla de reacción fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 1) y acetato de etilo como eluyente para así obtener 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (875 mg, rendimiento 41%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.67 (1H, s), 7.65-7.57 (4H, m), 7.48-7.37 (6H, m), 4.72-4.66 (1H, m), 4.54-4.47 (2H, m), 4.18-4.11 (2H, m), 4.10 (2H, dd, J=6.6, 8.8Hz), 4.04 (2H, dd, J=5.1, 8.8Hz), 2.30 (2H, quintet, J=7.7Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-(4-Azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina
A una solución de 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-t-butildifenilsililoxiazetidina (870 mg, 1,88 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 71(1)) en tetrahidrofurano anhidro (44 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (2,26 ml, 2,26 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (9 : 1) como eluyente para así obtener 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (396 mg, rendimiento 94%) en forma de cristales de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.70 (1H, s), 4.81-4.74 (1H, m), 4.53 (2H, dd, J=6.8, 7.8Hz), 4.34 (2H, dd, J=6.8, 9.8Hz), 4.16 (2H, dd, J=6.8, 7.8Hz), 3.99 (2H, dd, J=4.9, 8.8Hz), 2.34 (1H, d, J=7.8Hz), 2.31 (2H, quintet, J=7.8Hz).
(3) 1-(4-Azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-hidroxiazetidina (390 mg, 1,75 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 71(2)) en cloruro de metileno (20 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (406 \mul, 5,24 mmoles) y trietilamina (734 \mul, 5,24 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 10 minutos y luego a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con cloruro sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. Fueron añadidos al residuo acetato de etilo y éter diisopropílico para así obtener un sólido, y el sólido fue recogido por filtración, lavado con éter diisopropílico y secado in vacuo para así obtener 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (449 mg, rendimiento 85%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.74 (1H, m), 5.40-5.34 (1H, m), 4.55-4.49 (2H, br t, J=7.3Hz), 4.47 (2H, ddd, J=11.0, 6.6, 0.7Hz), 4.29 (2H, dd, J=11.0, 4.4Hz), 4.19-4.12 (2H, br t, J=7.3Hz), 3.09 (3H, s), 2.32 (2H, quintet, J=7.3Hz).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)-3-metanosulfoniloxiazetidina (470 mg, 1,56 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 71(3)) en dimetilformamida (25 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,07 g, 9,36 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 8,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo y acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (330 mg, rendimiento 75%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.71 (1H, s), 4.54 (2H, t, J=8.8Hz), 4.55-4.49 (2H, br t, J=8.1Hz), 4.43-4.35 (1H, m), 4.18-4.12 (2H, br t, J=8.1Hz), 4.00 (2H, dd, J=8.8, 5.9Hz), 2.35 (3H, s), 2.36-2.26 (2H, m).
Ejemplo de Referencia 72
3-Acetiltio-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
239 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,00 g, 2,29 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(8)) en tolueno (50 ml) le fue añadida una solución de morfolina-trimetilaluminio 0,67M en tolueno (6,87 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 4 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción ácido acético acuoso al 10% (50 ml) y acetato de etilo (100 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. A la mezcla de reacción le fue añadido acetato de etilo. La mezcla fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 2) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (400 mg, rendimiento 36%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.68 (1H, s), 7.62-7.59 (4H, m), 7.48-7.37 (6H, m), 4.73-4.67 (1H, m), 4.15-4.09 (2H, m), 4.05 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 3.75-3.65 (8H, br s), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (730 mg, 1,48 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 72(1)) en tetrahidrofurano anhidro (37 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,78 ml, 1,78 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (95 : 5 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (377 mg, rendimiento 100%) en forma de cristales blancos.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.71 (1H, s), 4.82-4.74 (1H, m), 4.35 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.00 (2H, dd, J=9.5, 4.4 Hz), 3.76-3.65 (8H, m), 2.42-2.30 (1H, br s).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (370 mg, 1,48 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 72(2)) en cloruro de metileno (19 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (344 \mul, 4,44 mmoles) y trietilamina (622 \mul, 4,44 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 10 minutos y luego a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con cloruro sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (93 : 7) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (404 mg, rendimiento 100%) en forma de cristales de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.75 (1H, s), 5.41-5.34 (1H, m), 4.48 (2H, ddd, J=9.5, 6.6, 1.5Hz), 4.30 (2H, ddd, J=9.5, 4.0, 1.5Hz), 3.78-3.65 (8H, m), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (400 mg, 1,21 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 72(3)) en dimetilformamida (20 ml) le fue añadido tioacetato potásico (827 mg, 7,24 mmoles) a temperatura ambiente, y se efectuó agitación en un baño de aceite (80ºC) por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (266 mg, rendimiento 71%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.72 (1H, s), 4.55 (2H, t, J=8.4Hz), 4.43-4.36 (1H, m), 4.02 (2H, dd, J=9.5, 5.9Hz), 3.76-3.66 (8H, br s), 2.36 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 73
3-Acetiltio-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina 
\vskip1.000000\baselineskip
240 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,57 g, 3,60 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(8)) en tolueno (80 ml) le fue añadida una solución de 3-metoxiazetidina 0,67M (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 31(2))-trimetilaluminio en tolueno (10,8 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 60ºC) por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción ácido acético acuoso al 10% (100 ml) y acetato de etilo (200 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 1 hora. Fue añadido a la mezcla de reacción acetato de etilo. La mezcla fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (1,50 g, rendimiento 90%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.69 (1H, s), 7.63-7.59 (4H, m), 7.48-7.37 (6H, m), 4.73-4.76 (2H, m), 4.37-4.19 (3H, m), 4.10 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.03 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 4.02-3.98 (1H, m), 3.32 (3H, s), 1.06 (9H,
s).
(2) 3-Hidroxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidina (1,49 g, 3,23 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 72(1)) en tetrahidrofurano anhidro (75 ml) le fue añadida una solución de fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (3,88 ml, 3,88 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1 hora. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo : metanol (95 : 5 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (486 mg, rendimiento 60%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.71 (1H, s), 4.81-4.66 (2H, m), 4.34 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.39-4.20 (3H, m), 4.04-3.98 (1H, m), 3.99 (2H, dd, J=9.6, 4.4Hz), 3.32 (3H, s), 2.45 (1H, d, J=6.6Hz).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (480 mg, 1,89 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 73(2)) en cloruro de metileno (24 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (439 \mul, 5,67 mmoles) y trietilamina (795 ml, 5,67 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 10 minutos y luego a temperatura ambiente por espacio de 30 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con cloruro sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. Fueron añadidos al residuo acetato de etilo y éter diisopropílico para así obtener un sólido, y el sólido fue recogido por filtración y lavado con éter diisopropílico para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (586 mg, rendimiento 94%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.76 (1H, s), 5.41-5.34 (1H, m), 4.72-4.63 (1H, m), 4.29 (2H, dd, J=11.0, 4.4Hz), 4.38-4.20 (5H, m), 4.03-3.97 (1H, m), 3.32 (3H, s), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-[4-(3-metoxi-azetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (580 mg, 1,75 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 73(3)) en dimetilformamida (30 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,20 g, 10,5 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 6 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (97 : 3) como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-[4-(3-metoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (336 mg, rendimiento 62%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.73 (1H, s), 4.72-4.65 (1H, m), 4.54 (2H, t, J=8.8Hz), 4.43-4.19 (4H, m), 4.03-3.97 (1H, m), 4.01 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 3.31 (3H, s), 2.35 (3H, s).
Ejemplo de Referencia 74
3-Acetiltio-1-[4-(3-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina
241
(1) 1-[4-(3-t-Butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-hidroxiazetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-(4-metoxicarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (500 mg, 2,52 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(7)) en tolueno (25 ml) le fue añadida una solución de 3-t-butildifenilsililoxiazetidina 0,67M (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 42(2))-trimetilaluminio en tolueno (11,3 ml) a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 15 minutos. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, fueron añadidos a la mezcla de reacción ácido acético acuoso al 10% (20 ml) y acetato de etilo (50 ml) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada a temperatura ambiente por espacio de 0,5 horas. Fue añadido a la mezcla de reacción acetato de etilo. La mezcla fue repartida entre acetato de etilo y agua. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (95 : 5 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener 1-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,24 g, rendimiento 100%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.68 (1H, s), 7.61 (4H, dd, J=8.1, 1.5Hz), 7.47-7.36 (6H, m), 4.81-4.74 (1H, m), 4.65-4.52 (2H, m), 4.40-4.36 (1H, m), 4.33 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 4.18-4.11 (1H, m), 4.06-3.97 (1H, m), 3.98 (2H, dd, J=9.5, 5.1Hz), 1.06 (9H, s).
(2) 1-[4-(3-t-Butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina
A una solución de 1-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-hidroxiazetidina (1,68 g, 3,53 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 74(1)) en cloruro de metileno (84 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (820 \mul, 10,6 mmoles) y trietilamina (1,49 ml, 10,6 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 10 minutos y luego a temperatura ambiente por espacio de 0,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con cloruro sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : acetato de etilo (1 : 1) como eluyente para así obtener 1-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,56 g, rendimiento 80%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.72 (1H, s), 7.61 (4H, d, J=6.8Hz), 7.45 (2H, t, J=6.8Hz), 7.39 (4H, t, J=6.8Hz), 5.40-5.34 (1H, m), 4.64-4.59 (1H, m), 4.59-4.52 (1H, m), 4.45 (2H, dd, J=10.7, 5.9Hz), 4.39-4.32 (1H, m), 4.28 (2H, dd, J=10.7, 4.9Hz), 4.18-4.12 (1H, m), 4.05-4.00 (1H, m), 3.10 (3H, s), 1.07 (9H, s).
(3) 3-Acetiltio-1-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina
A una solución de 1-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]-3-metanosulfoniloxiazetidina (1,56 g, 2,81 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 74(2)) en dimetilformamida (80 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,92 g, 16,8 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 7,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (2 : 1 \rightarrow 1 : 1) como eluyente para así obtener 3-acetiltio1-[4-(3-t-butildifenilsililoxiazetidina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidina (863 mg, rendimiento 57%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 7.69 (1H, s), 7.63-7.60 (4H, m), 7.47-7.36 (6H, m), 4.64-4.54 (2H, m), 4.53 (2H, t, J=8.8Hz), 4.43-4.32 (2H, m), 4.18-4.13 (1H, m), 4.06-4.00 (1H, m), 4.00 (2H, dd, J=8.8, 5.9Hz), 2.36 (3H, s), 1.06 (9H, s).
Ejemplo de Referencia 75
3-Acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina 
\vskip1.000000\baselineskip
242 
\vskip1.000000\baselineskip
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de hidrocloruro de 3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina (1,39 g, 4,83 mmoles) (obtenido como se describe en el Ejemplo de Referencia 57(4)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,70 g, 4,02 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(11)) en dimetilformamida (85 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (801 \mul, 4,83 mmoles) y trietilamina (1,70 ml, 12,1 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo
(1 : 2) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (596 mg, rendimiento 23%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.71 (1H, s), 7.61 (4H, d, J=8.8Hz), 7.53-7.49 (2H, m), 7.47-7.38 (6H, m), 5.30-5.26 (1H, m), 5.21 (2H, s), 4.89-4.80 (1H, m), 4.72-4.66 (1H, m), 4.59-4.51 (1H, m), 4.51-4.42 (1H, m), 4.37-4.30 (1H, m), 4.12-4.06 (2H, m), 4.02 (2H, dd, J=8.8, 4.9Hz), 3.97-3.90 (1H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (640 mg, 0,976 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 75(1)) en tetrahidrofurano anhidro (32 ml) le fue añadida una solución de ácido acético (67 \mul, 1,17 mmoles) y fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,17 ml, 1,17 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada en un baño de hielo por espacio de 1,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica obtenida fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno : metanol (95 : 5 \rightarrow 9 : 1) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (360 mg, rendimiento 88%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.73 (1H, s), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 5.46-5.40 (1H, m), 5.21 (2H, s), 4.89-4.74 (2H, m), 4.60-4.40 (2H, m), 4.39-4.31 (1H, m), 4.33 (2H, dd, J=9.5, 6.6Hz), 3.98 (2H, dd, J=9.5, 5.1Hz), 3.96-3.90 (1H, m).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}aze-
tidina (360 mg, 0,863 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 75(2)) en cloruro de metileno (18 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (200 \mul, 2,59 mmoles) y trietilamina (363 \mul, 2,59 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 10 minutos y luego a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando cloruro de metileno \rightarrow cloruro de metileno : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)-azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (390 mg, rendimiento 91%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.23 (2H, d, J=8.8Hz), 7.77 (1H, s), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 5.40-5.34 (1H, m), 5.11-5.27 (1H, m), 5.21 (2H, s), 4.90-4.81 (1H, m), 4.60-4.53 (1H, m), 4.45 (2H, dd, J=10.3, 6.6Hz), 4.39-4.30 (1H, m), 4.27 (2H, dd, J=10.3, 4.4Hz), 3.99-3.92 (1H, m), 3.10 (3H, s).
(4) 3-Acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (390 mg, 0,787 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 75(3)) en dimetilformamida (20 ml) le fue añadido tioacetato potásico (539 mg, 4,72 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 10,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 3) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[3-(p-nitrobenciloxicarbonilamino)azetidina-1-carbonil]-1,3-tiazol-2-il}azetidina (195 mg, rendimiento 52%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.24 (2H, d, J=8.8Hz), 7.75 (1H, s), 7.51 (2H, d, J=8.8Hz), 5.16-5.10 (1H, br d, J=5.9Hz), 5.21 (2H, s), 4.89-4.80 (1H, m), 4.60-4.10 (4H, m), 4.53 (2H, t, J=8.8Hz), 3.99 (2H, dd, J=9.5, 5.9Hz), 3.98-3.91 (1H, m), 2.36 (3H, s).
\newpage
Ejemplo de Referencia 76
3-Acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
243
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}aze- tidina
A una solución de (3S)-3-amino-1-p-nitrobenciloxicarbonilpirrolidina (905 mg, 3,41 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 52(4)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,20 g, 2,84 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(11)) en dimetilformamida (36 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (556 \mul, 3,41 mmoles) y trietilamina (478 \mul, 3,41 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo
(1 : 2 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (936 mg, rendimiento 49%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.72 (1H, s), 7.63-7.58 (4H, m), 7.53 (2H, m), 7.48-7.37 (6H, m), 6.85-6.80 (1H, br t, J=8.1Hz), 5.24 (2H, d, J=8.1Hz), 4.75-4.67 (1H, m), 4.65-4.58 (1H, m), 4.16-4.09 (2H, m), 4.06 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 3.83-3.75 (1H, m), 3.64-3.46 (2H, m), 3.38 (1H, dd, J=11.0, 4.4Hz), 2.30-2.20 (1H, m), 2.04-1.90 (1H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (1,10 g, 1,64 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 76(1)) en tetrahidrofurano anhidro (55 ml) le fue añadida una solución de ácido acético (113 \mul, 1,97 mmoles) y fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,97 ml, 1,97 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación en un baño de hielo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (687 mg, rendimiento 97%) en forma de un sólido de color blanco.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.75 (1H, s), 7.52 (2H, m), 6.89-6.82 (1H, m), 5.27-5.20 (2H, m), 4.84-4.77 (1H, m), 4.66-4.59 (1H, m), 4.36 (2H, dd, J=8.8, 7.3Hz), 4.01 (2H, dd, J=8.8, 5.2Hz), 3.82-3.74 (1H, m), 3.67-3.52 (3H, m), 3.45-3.39 (1H, m), 2.30-2.20 (1H, m), 2.03-1.93 (1H, m).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}aze- tidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}-
azetidina (680 mg, 1,58 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 76(2)) en cloruro de metileno (34 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (366 \mul, 4,73 mmoles) y trietilamina (663 \mul, 4,73 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 10 minutos y a temperatura ambiente por espacio de 2 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (96 : 4) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (760 mg, rendimiento 95%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.78 (1H, s), 7.52 (2H, m), 6.85-6.80 (1H, m), 5.42-5.37 (1H, m), 5.24 (2H, d, J=8.1Hz), 4.66-4.58 (1H, m), 4.49 (2H, dd, J=10.3, 6.6Hz), 4.31 (2H, dd, J=10.3, 4.4Hz), 3.82-3.74 (1H, m), 3.64-3.75 (2H, m), 3.44-3.38 (1H, m), 3.11 (3H, s), 2.30-2.20 (1H, m), 2.04-1.96 (1H, m).
(4) 3-Acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (760 mg, 1,49 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 76(3)) en dimetilformamida (38 ml) le fue añadido tioacetato potásico (1,02 g, 8,95 mmoles) a temperatura ambiente, y se efectuó agitación en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 10,5 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 6) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(3S)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (533 mg, rendimiento 73%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.76 (1H, s), 7.52 (2H, m), 6.87-6.80 (1H, br s), 5.24 (2H, d, J=7.3Hz), 4.66-4.58 (1H, m), 4.56 (2H, t, J=8.8Hz), 4.44-4.36 (1H, m), 4.03 (2H, dd, J=8.8, 5.9Hz), 3.79 (1H, dt, J=11.0, 6.6Hz), 3.65-3.51 (2H, m), 3.40 (1H, dd, J=11.0, 4.4Hz), 2.36 (3H, s), 2.32-2.20 (1H, m), 2.23-1.91 (1H, m).
Ejemplo de Referencia 77
3-Acetiltio-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
244
(1) 3-t-Butildifenilsililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}aze- tidina
A una solución de (3R)-3-amino-1-p-nitrobenciloxicarbonilpirrolidina (798 mg, 3,01 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 53(5)) y 3-t-butildifenilsililoxi-1-(4-carboxil-1,3-oxazol-2-il)azetidina (1,06 g, 2,51 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 70(11)) en dimetilformamida (50 ml) le fueron añadidos cianuro de dietilfosforilo (464 \mul, 3,01 mmoles) y trietilamina (422 \mul, 3,01 mmoles) en un baño de hielo bajo una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla se tuvo en agitación a temperatura ambiente durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo
(1 : 2 \rightarrow 1 : 3) como eluyente para así obtener 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (813 mg, rendimiento 48%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.72 (1H, s) 7.63-7.59 (4H, m), 7.53(2H, m), 7.48-7.38 (6H, m), 6.86-6.60 (1H, m), 5.24 (2H, d, J=8.1Hz), 4.77-4.68 (1H, m), 4.64-4.58 (1H, m), 4.15-4.09 (2H, m), 4.05 (2H, dd, J=8.8, 5.1Hz), 3.82-3.75 (1H, m), 3.64-3.49 (2H, m), 3.38 (1H, dd, J=11.0, 5.1Hz), 2.30-2.20 (1H, m), 2.06-1.90 (1H, m), 1.06 (9H, s).
(2) 3-Hidroxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-t-butildifenilsililoxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (810 mg, 1,21 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 77(1)) en tetrahidrofurano anhidro (40 ml) le fue añadida una solución de ácido acético (83 \mul, 1,45 mmoles) y fluoruro tetra-n-butilamónico 1,0M en tetrahidrofurano (1,45 ml, 1,45 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla se tuvo en agitación en un baño de hielo durante la noche. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla de reacción fue concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (95 : 5) como eluyente para así obtener 3-hidroxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (507 mg, rendimiento 97%) en forma de un aceite de color amarillo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.75 (1H, s), 7.52 (2H, m), 6.89-6.83 (1H, br s), 5.28-5.20 (2H, m), 4.84-4.76 (1H, m), 4.66-4.58 (1H, m), 4.36 (2H, dd, J=8.8, 6.6Hz), 4.01 (2H, dd, J=8.8, 4.4Hz), 3.82-3.74 (1H, m), 3.64-3.51 (2H, m), 3.44-3.37 (1H, m), 2.32-2.20 (1H, m), 2.08-1.92 (1H, m).
(3) 3-Metanosulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}aze- tidina
A una solución de 3-hidroxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (500 mg, 1,16 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 77(2)) en cloruro de metileno (25 ml) le fueron añadidos cloruro de metanosulfonilo (269 \mul, 3,48 mmoles) y trietilamina (448 \mul, 3,48 mmoles) en un baño de hielo, y la mezcla fue agitada por espacio de 10 minutos y luego a temperatura ambiente por espacio de 3 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando acetato de etilo \rightarrow acetato de etilo : metanol (96 : 4) como eluyente para así obtener 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (546 mg, rendimiento 92%) en forma de un sólido de color amarillo claro.
Espectro de masas (FAB^{+}): m/z: 510 [M+H]^{+}
(4) 3-Acetiltio-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina
A una solución de 3-metanosulfoniloxi-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (540 mg, 1,06 mmoles) (obtenida como se describe en el Ejemplo de Referencia 77(3)) en dimetilformamida (27 ml) le fue añadido tioacetato potásico (726 mg, 6,36 mmoles) a temperatura ambiente, y la mezcla fue agitada en un baño de aceite (a 80ºC) por espacio de 9 horas. Tras haber verificado la conclusión de la reacción, la mezcla fue repartida entre acetato de etilo y solución de cloruro sódico acuoso al 10%. La capa orgánica fue lavada con solución acuosa saturada de carbonato de hidrógeno y sodio y solución acuosa saturada de cloruro sódico, secada con sulfato sódico anhidro, filtrada y concentrada bajo presión reducida. El residuo fue purificado por cromatografía en columna de gel de sílice usando n-hexano : acetato de etilo (1 : 6) \rightarrow acetato de etilo como eluyente para así obtener 3-acetiltio-1-{4-[(3R)-1-(p-nitrobenciloxicarbonil)-pirrolidin-3-ilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidina (281 mg, rendimiento 54%) en forma de un sólido de color pardo claro.
^{1}H-NMR (400 MHz, CDCl_{3}): \delta (ppm) 8.22 (2H, m), 7.76 (1H, s), 7.52 (2H, m), 6.86-6.80 (1H, m), 5.23 (2H, d, J=7.3Hz), 4.64-4.58 (1H, m), 4.56 (2H, t, J=8.8Hz), 4.44-3.86 (1H, m), 4.03 (2H, dd, J=8.8, 5.9Hz), 3.79 (1H, dd, J=11.0, 6.6Hz), 3.65-3.52 (2H, m), 3.40 (1H, dd, J=11.0, 4.4Hz), 2.12 (3H, s), 2.32-2.20 (1H, m), 2.23-1.92 (1H, m).
Ejemplo de Ensayo
Actividades Antibacterianas In vitro
Para valorar las actividades antibacterianas de los compuestos, fueron determinadas por el método de dilución en placas de agar las concentraciones mínimas (\mug/ml) de los compuestos para inhibir el crecimiento de varias bacterias patogénicas. Los resultados están indicados en la Tabla 6. En esta Tabla, las bacterias A, B y C empleadas fueron las siguientes:
A: Staphylococcus aureus B: Streptococcus pneumoniae
C: Haemophilis influenzae cepa 9787 (una cepa que produce \beta-lactamasa)
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(Tabla pasa a página siguiente)
TABLA 6
245
246
Estos resultados indican que los compuestos de la presente invención ejercen potentes actividades antibacterianas.
Ejemplo de Ensayo 2
Farmacocinética
Los compuestos de la presente invención fueron inyectados (20 mg/kg) por vía subcutánea a ratones (n = 3, ddY, machos, adquiridos a la SLC Japan). La concentración en plasma del compuesto fue determinada por un método de bioensayo a los 5, 15 y 30 min. y a las 1, 1,5 y 2 h de la administración. Los parámetros farmacocinéticos determinados están resumidos en la Tabla 7. En la Tabla, C_{max}, T_{1/2} y AUC_{all} indican la máxima concentración en plasma, la vida media en concentración en plasma y el área bajo la curva de concentración-tiempo en plasma del compuesto, respectivamente.
TABLA 7 
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247 
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Ejemplo de Ensayo 3
Actividades Antibacterianas in vivo
Ratones ddY macho de 4 semanas de edad (adquiridos a la SLC Japan) fueron inoculados por vía intraperitoneal con S. pneumoniae 9605 (PRSP) a razón de un volumen de 0,2 ml (con un contenido de un 5% de mucina, 1-5 x 10^{3} unidades formadoras de colonias (cfu)/ratón). Inmediatamente después de haber sido infectados los ratones, los mismos fueron tratados por vía subcutánea con el compuesto de ensayo individualmente a razón de un volumen de 0,1 ml. Fueron usados siete ratones por grupo. Fue usada para el experimento una solución del compuesto de ensayo preparada mediante dilución en 2 pasos. Los valores ED_{50} de los compuestos fueron calculados por el método de Probit a partir de los porcentajes de supervivencia a los 7 días de la infección. Los resultados están resumidos en la Tabla 8.
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TABLA 8 
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248
Ejemplo de Preparación 1
Agente de inyección
500 mg del compuesto del Ejemplo 3 fueron disueltos en 5 ml de agua destilada para inyección y la solución fue secada por congelación tras haberla pasado por un filtro de esterilización para preparar una preparación secada por congelación para inyección.
Ejemplo de Preparación 2
Cápsulas
Compuesto del Ejemplo 24 50 mg
Lactosa 128 mg
Almidón de maíz 70 mg
Estearato de magnesio 2 mg
\overline{250 \ mg}
Fueron mezclados polvos de la formulación anteriormente indicada, y después de haber pasado la mezcla por un tamiz del tamaño 60 los polvos fueron cargados en una cápsula de gelatina del Nº 3 de 250 mg para preparar una cápsula.
Ejemplo de Preparación 3
Tabletas
Compuesto del Ejemplo 24 50 mg
Lactosa 126 mg
Almidón de maíz 23 mg
Estearato de magnesio 1 mg
\overline{200 \ mg}
Fueron mezclados polvos de la formulación anteriormente indicada, y tras haber sido la mezcla granulada en húmedo usando almidón de maíz y secada, fue preparada una tableta de 200 mg. De ser necesario, esta tableta puede ser recubierta con azúcar.
Efecto de la invención
Los compuestos de 1-metilcarbapenem de fórmula (I) de la presente invención y las sales farmacológicamente aceptables de los mismos presentan una excelente actividad antibacteriana, son estables frente a la dehidropeptidasa I y la \beta-lactamasa, y presentan un alto porcentaje de recuperación en la orina. Adicionalmente, puesto que presentan una baja toxicidad para el riñón, los compuestos son útiles como fármacos, y en particular como agentes antibacterianos.

Claims (35)

1. Un compuesto de 1-metilcarbapenem representado por la fórmula (I):
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249 
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en la que:
R^{1} representa
(1) a un grupo representado por la fórmula COOR^{3}
[en la que R^{3} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} o un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}],
(2) a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5}
[en la que R^{4} y R^{5} pueden ser iguales o distintos y representan cada uno a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente A que se indica más adelante), un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, un grupo heterocíclico de 3 a 6 miembros o un grupo arilo de C_{6}-C_{10} (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B que se indica más adelante), o R^{4} y R^{5}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están enlazados, representan a un heterociclo de 3 a 6 miembros con contenido de nitrógeno (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B que se indica más adelante)],
(3) a un grupo ciano,
(4) a un grupo representado por la fórmula CH_{2}OR^{6}
[en la que R^{6} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} o un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}] o
(5) a un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8}
[en la que R^{7} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} o un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, y R^{8} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6,} un grupo cicloalquilo de C_{3}-C_{6}, un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{6}, un grupo (C_{6}-C_{10} aril)carbonilo (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B que se indica más adelante), un grupo (C_{1}-C_{6} alcoxi)carbonilo, un grupo heterociclocarbonilo aromático de 5 o 6 miembros, un grupo alquilsulfonilo de C_{1}-C_{6} o un grupo arilsulfonilo de C_{6}-C_{10}, o R^{7} y R^{8}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están enlazados, representan un grupo succinimida (que puede ser condensado con un grupo fenilo)];
R^{2} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{6};
n representa 1, 2 o 3;
X representa a un átomo de azufre o un átomo de oxígeno;
el grupo sustituyente A comprende un grupo hidroxilo, un grupo amino (que puede ser sustituido por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carbamoilo (cuya mitad amino puede ser sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carboxilo, un grupo ciano y un grupo alcoxi de C_{1}-C_{6}; y
el grupo sustituyente B comprende un grupo hidroxi-C_{1}-C_{4}-alquilo, un grupo amino-C_{1}-C_{4}-alquilo (cuya mitad amino puede ser sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carbamoilo (cuya mitad amino puede ser sustituida por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo carboxilo, un grupo hidroxilo, un grupo amino (que puede ser sustituido por uno o dos grupos alquilo de C_{1}-C_{6}), un grupo alcoxi de C_{1}-C_{6} y un grupo alquilo de C_{1}-C_{6}];
o un derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo.
2. Compuesto de 1-metilcarbapenem o sal o éster farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5}, un grupo ciano o un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8}.
3. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} o un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8}.
4. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5}.
5. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R^{2} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}.
6. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que R^{2} representa a un átomo de hidrógeno.
7. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que R^{3} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}.
8. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que R^{3} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo metilo o un grupo etilo.
9. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R^{4} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}.
10. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R^{4} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo metilo o un grupo isopropilo.
11. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R^{5} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente A) o un grupo heterocíclico de 4 a 6 miembros con contenido de nitrógeno.
12. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R^{5} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente A), o un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo.
13. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R^{4} y R^{5}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están enlazados, representan a un heterociclo de 4 a 6 miembros con contenido de nitrógeno (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B).
14. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que R^{4} y R^{5}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están enlazados, representan a un grupo azetidino, piperazino, morfolino o tiomorfolino (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B).
15. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que R^{6} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}.
16. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que R^{6} representa a un átomo de hidrógeno.
17. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R^{7} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}.
18. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R^{7} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo metilo.
19. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R^{7} representa a un átomo de hidrógeno.
20. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R^{8} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}, un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{3}, un grupo benzoilo (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B), un grupo (C_{1}-C_{3} alcoxi)carbonilo, un grupo tienilcarbonilo, un grupo furilcarbonilo o un grupo piridilcarbonilo.
21. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R^{8} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo benzoilo (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B), un grupo (2-tienil)carbonilo, un grupo (2-furil)carbonilo o un grupo (3-piridil)carbonilo.
22. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, en el que n representa 1.
23. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, en el que X representa a un átomo de oxígeno.
24. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que:
R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en la que R^{4} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}; y R^{5} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente A) o un grupo heterocíclico de 4 a 6 miembros con contenido de nitrógeno);
R^{2} representa a un átomo de hidrógeno;
n representa a 1; y
X representa a un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
25. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que:
R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en la que R^{4} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo metilo o un grupo isopropilo; y R^{5} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{6} (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente A), o un grupo azetidinilo, pirrolidinilo o piperidinilo);
n representa a 1; y
X representa a un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
26. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que:
R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en la que R^{4} y R^{5}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están enlazados, representan a un heterociclo de 4 a 6 miembros con contenido de nitrógeno que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B);
R^{2} representa a un átomo de hidrógeno;
n representa a 1; y
X representa a un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
27. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que:
R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CONR^{4}R^{5} (en la que R^{4} y R^{5}, junto con el átomo de nitrógeno al cual están enlazados, representan a un grupo azetidino, piperazino, morfolino o tiomorfolino que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B);
R^{2} representa a un átomo de hidrógeno;
n representa a 1; y
X representa a un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
28. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que:
R^{1} representa a un grupo ciano;
R^{2} representa a un átomo de hidrógeno;
n representa a 1; y
X representa a un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
29. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que:
R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8} (en la que R^{7} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}, y R^{8} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo de C_{1}-C_{3}, un grupo alcanoilo de C_{1}-C_{3}, un grupo benzoilo (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B), un grupo (C_{1}-C_{3} alcoxi)carbonilo, un grupo tienilcarbonilo, un grupo furilcarbonilo o un grupo piridilcarbonilo;
R^{2} representa a un átomo de hidrógeno;
n representa a 1; y
X representa a un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
30. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, en el que:
R^{1} representa a un grupo representado por la fórmula CH_{2}NR^{7}R^{8} (en la que R^{7} representa a un átomo de hidrógeno o un grupo metilo; y R^{8} representa a un átomo de hidrógeno, un grupo benzoilo (que puede ser sustituido por uno o dos grupos que pueden ser iguales o distintos y son seleccionados de entre los miembros del grupo que constituye el grupo sustituyente B), un grupo (2-tienil)carbonilo, un grupo (2-furil)carbonilo o un grupo (3-piridil)carbonilo);
R^{2} representa a un átomo de hidrógeno;
n representa a 1; y
X representa a un átomo de oxígeno o un átomo de azufre.
31. Compuesto de 1-metilcarbapenem o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según la reivindicación 1, seleccionado de entre los miembros del siguiente grupo de compuestos:
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-carbamoil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-hidroximetil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-ciano-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
\newpage
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-morfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-azetidinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-aminoazetidino)carbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(3-hidroxiazetidino)carbonil-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-tiomorfolinocarbonil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperidin-4-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(azetidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3R)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((3S)-pirrolidin-3-ilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazina-1-carbonil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(piperazina-1-carbonil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-aminoetilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(2-aminoetilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-aminometil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-((1S)-1-aminometil-2-metil-propilcarbamoil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-aminoetil)-N-isopropilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropilcarbamoil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[N-(2-hidroxietil)-N-isopropilcarbamoil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-1,3-tiazol-2-il)azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-[1-(4-aminometil-1,3-oxazol-2-il)azetidin-3-il]tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(benzoilaminometil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-tiazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-{1-[4-(bencenosulfonilaminometil)-1,3-oxazol-2-il]azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofeno-2-carbonilamino)metil-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(tiofeno-2-carbonilamino)metil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il}tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-tiazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico,
ácido (1R,5S,6S)-2-(1-{4-[(furan-2-carbonilamino)metil]-1,3-oxazol-2-il}azetidin-3-il)tio-6-[(R)-1-hidroxietil]-1-metilcarbapen-2-em-3-carboxílico;
o un derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable de los mismos.
32. Composición farmacéutica que contiene un compuesto o un derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo como los que se definen en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 como ingrediente activo.
33. Composición farmacéutica según la reivindicación 32, en la que la composición farmacéutica es una composición para la prevención o el tratamiento de infecciones bacterianas.
34. Compuesto o derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, que está destinado a ser usado como medicamento.
35. Uso de un compuesto o un derivado que es un éster o una sal farmacológicamente aceptable del mismo según se define en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31 en la fabricación de un medicamento para la prevención o el tratamiento de infecciones bacterianas.
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