ES2273909T3

ES2273909T3 - Compuestos calciliticos.

Info

Publication number: ES2273909T3
Application number: ES01988571T
Authority: ES
Inventors: Pradip Bhatnagar; William M. Bryan; James F. Callahan; F. Huffman. William
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 2000-10-25
Filing date: 2001-10-25
Publication date: 2007-05-16
Anticipated expiration: 2021-10-25
Also published as: JP2004514659A; DE60124148T2; ATE343390T1; EP1383511A4; WO2002034204A8; EP1383511B1; DE60124148D1; US20040014723A1; AU2002230579A1; WO2002034204A2; WO2002034204A3; EP1383511A2

Abstract

Un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I) presentada a continuación: o una de sus sales farmacéuticamente aceptables. en la que: A es un arilo o arilo condensado, dihidro o tetrahidroarilo condensado, heteroarilo o heteroarilo condensado, dihidro o tetrahidroheteroarilo condensado, no sustituido o sustituido con cualquier sustituyente que se selecciona del grupo consistente en OH, halógeno, alquilo C1-4, alcoxi C1-4, cicloalquilo C3-6, CF3, OCF3, CN y NO2; D es C o N con hasta 2-N en el anillo, con la condición de que X1-X5 no están presentes cuanto D es N; X1 y X5 se seleccionan independientemente del grupo consistente en H, halógeno, CN y NO2, con la condición de que bien X1 o X5 es H; con la condición además de que X1 y X5 no están presentes cuando D es N; X2 se selecciona del grupo consistente en H, halógeno, O-alquilo C1-4 y J-K; X3 y X4 se seleccionan del grupo consistente en H, halógeno, O-alquilo C1-4, L y J-K; J es un enlace covalente, alquileno, O-alquileno o alquenileno; y K seselecciona del grupo consistente en, CO2R5, CONR4R''4, SO2NR4R4, OH, CHO, NR4R''4, NR4SO2R4" y CN; con la condición de que X2, X3 y X4 no están presentes cuando D es N; L es R4 y R''4 son independientemente H, alquilo, arilo o heteroarilo; R5 es H, alquilo, alquil-(O-alquil)m-O-alquilo, arilo o heteroarilo; n es un número entero de 0 a 4; y, m es un número entero de 1 a 3.

Description

Compuestos calcilíticos.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a nuevos compuestos calcilíticos, a composiciones que contienen estos compuestos y a su uso como antagonistas de los receptores de calcio.

En mamíferos, el Ca^{2+} extracelular está bajo un control homeostático rígido y regula diversos procesos tales como la coagulación sanguínea, la excitabilidad nerviosa y muscular y una formación ósea apropiada. El Ca^{2+} extracelular inhibe la secreción de hormona paratiroidea ("PTH") a partir de células paratiroideas, inhibe la resorción ósea por los osteoclastos y estimula la secreción de calcitonina por las células C. Las proteínas receptoras de calcio permiten que ciertas células especializadas respondan a cambios en la concentración de Ca^{2+} extracelular.

La PTH es el factor endocrino principal que regula la homeostasis de Ca^{2+} en la sangre y en fluidos extracelulares. La PTH, al actuar sobre el hueso y las células renales, aumenta el nivel de Ca^{2+} en la sangre. Este aumento en el Ca^{2+} extracelular después actúa como señal de retroalimentación negativa, reprimiendo la secreción de PTH. La relación recíproca entre el Ca^{2+} extracelular y la secreción de PTH constituye un importante mecanismo que mantiene la homeostasis de Ca^{2+} corporal.

El Ca^{2+} extracelular actúa directamente sobre las células paratiroideas regulando la secreción de PTH. Se ha confirmado la existencia de una proteína de la superficie de las células paratiroideas que detecta cambios en el Ca^{2+} extracelular. Véase Brown et al., Nature 366:574, 1993. En las células paratiroideas, esta proteína, el receptor de calcio, actúa como un receptor para el Ca^{2+} extracelular, detecta cambios en la concentración de iones de Ca^{2+} extracelular e inicia una respuesta celular funcional, la secreción de PTH.

El Ca^{2+} extracelular influye sobre diversas funciones celulares, como se revisa en Nemeth et al., Cell Calcium 11:319, 1990. Por ejemplo, el Ca^{2+} extracelular juega un papel en las células parafoliculares (células C) y en las células paratiroideas. Véase Nemeth, Cell Calcium 11:323, 1990. También se ha estudiado el papel del Ca^{2+} extracelular sobre los osteoclastos del hueso. Véase Zaidi, Bioscience Reports 10:493, 1990.

Se sabe que diversos compuestos imitan los efectos del Ca^{2+} extracelular sobre una molécula receptora de calcio. Los calcilíticos son compuestos capaces de inhibir la actividad del receptor de calcio, produciendo de esta manera una reducción en una o más actividades del receptor de calcio inducidas por el Ca^{2+} extracelular. Los calcilíticos son útiles como moléculas indicadoras en el descubrimiento, desarrollo, diseño, modificación y/o construcción de moduladores de calcio útiles, que son activos en receptores de Ca^{2+}. Estos calcilíticos son útiles en el tratamiento de diversos estados de enfermedad caracterizados por niveles anormales de uno o más componentes, por ejemplo, polipéptidos tales como hormonas, enzimas o factores de crecimiento, cuya expresión y/o secreción se regula o se ve afectada por la actividad en uno o más receptores de Ca^{2+}. Las enfermedades o trastornos diana de los compuestos calcilíticos incluyen enfermedades que implican anomalías en la homeostasis ósea y mineral.

Las anomalías en la homeostasis del calcio se caracterizan por una o más de las siguientes actividades: un aumento o reducción anormal en el nivel sérico de calcio; un aumento o reducción anormal en la excreción de calcio en orina; un aumento o reducción anormal en los niveles óseos de calcio (por ejemplo, como se evalúa por las mediciones de densidad mineral ósea); una absorción anormal del calcio de la dieta; un aumento o reducción anormal en la producción y/o liberación de mensajeros que afectan a los niveles séricos de calcio tales como PTH y calcitonina; y un cambio anormal en la respuesta inducida por mensajeros que afectan a los niveles séricos de calcio.

Así, los antagonistas de los receptores de calcio ofrecen un enfoque único hacia la farmacoterapia de enfermedades asociadas con anomalías en la homeostasis ósea o mineral, tales como hipoparatiroidismo, osteosarcoma, enfermedad periodontal, curación de fracturas, osteoartritis, artritis reumatoide, enfermedad de Paget, hipercalcemia humoral asociada con cáncer y curación de fracturas, y osteoporosis.

Compendio de la invención

La presente invención comprende nuevos antagonistas de los receptores de calcio representados por la Fórmula I más adelante y su uso para la preparación de un medicamento como antagonistas de los receptores de calcio en el tratamiento de una diversidad de enfermedades asociadas con anomalías en la homeostasis ósea o mineral, incluyendo aunque sin quedar limitadas a las mismas, hipoparatiroidismo, osteosarcoma, enfermedad periodontal, curación de fracturas, osteoartritis, artritis reumatoide, enfermedad de Paget, hipercalcemia humoral asociada con cáncer y curación de fracturas, y osteoporosis.

La presente invención proporciona también un uso para antagonizar receptores de calcio en un animal, incluyendo seres humanos, que comprende administrar a un animal que lo necesita una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula (I), indicada a continuación.

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La presente invención proporciona además un uso para aumentar los niveles séricos de hormona paratiroidea en un animal, incluyendo seres humanos, que comprende administrar a un animal que lo necesita una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula (I), indicada a continuación.

Descripción detallada de la invención

Los compuestos de la presente invención se seleccionan de la Fórmula (I) siguiente:

1

en la que:

: A es un arilo o arilo condensado, dihidro o tetraarilo condensado, heteroarilo o heteroarilo condensado, dihidro o tetrahidroheteroarilo condensado, no sustituido o sustituido con cualquier sustituyente que se selecciona del grupo consistente en OH, halógeno, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, CF_{3}, OCF_{3}, CN y NO_{2};

: D es C o N con hasta 2-N en el anillo, con la condición de que X_{1}-X_{5} no están presentes cuanto D es N;

: X_{1} y X_{5} se seleccionan independientemente del grupo consistente en H, halógeno, CN y NO_{2}, con la condición de que bien X_{1} o X_{5} es H; con la condición además de que X_{1} y X_{5} no están presentes cuando D es N;

: X_{2} se selecciona del grupo consistente en H, halógeno, O-alquilo C_{1-4} y J-K;

: X_{3} y X_{4} se seleccionan del grupo consistente en H, halógeno, O-alquilo C_{1-4}, L y J-K;

: J es un enlace covalente, alquileno, O-alquileno o alquenileno; y

: K se selecciona del grupo consistente en, CO_{2}R_{5}, CONR_{4}R'_{4}, SO_{2}NR_{4}R_{4}, OH, CHO, NR_{4}R'_{4}, NR_{4}SO_{2}R_{4}'' y CN; con la condición de que X_{2}, X_{3} y X_{4} no están presentes cuando D es N;

: L es

2

: R_{4} y R'_{4} son independientemente H, alquilo, arilo o heteroarilo;

: R_{5} es H, alquilo, alquil-(O-alquil)_{m}-O-alquilo, arilo o heteroarilo;

: n es un número entero de 0 a 4; y,

: m es un número entero de 1 a 3.

Tal como se usa en la presente memoria, "alquilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado opcionalmente sustituido unido por enlaces carbono-carbono sencillos y que tiene de 1 a 20 átomos de carbono unidos entre si. El grupo hidrocarburo alquilo puede ser lineal, ramificado o cíclico, saturado o insaturado. Con preferencia, los sustituyentes sobre alquilo opcionalmente sustituido se seleccionan del grupo consistente en arilo, CO_{2}R, CO_{2}NHR, OH, OR, CO, NH_{2}, halo, CF_{3}, OCF_{3} y NO_{2}, donde R representan H, alquilo C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, alquenilo C_{2-5}, alquinilo C_{2-5}, heterocicloalquilo o arilo. Otros sustituyentes se seleccionan de F, Cl, Br, I, N, S y O. Con preferencia, están presentes no más de tres sustituyentes. Más preferiblemente, el alquilo tiene 1-12 átomos de carbono y no está sustituido. Con preferencia, el grupo alquilo es lineal.

Tal y como se usa en la presente memoria "cicloalquilo" se refiere a anillos carbocíclicos de 3-7 miembros opcionalmente sustituidos en los que cualquier sustituyente se selecciona del grupo consistente en, F, Cl, Br, I, N(R_{4})_{2}, SR_{4} y OR_{4}, a no ser que se indique de otro modo.

Tal y como se usa en la presente memoria, "arilo" se refiere a un grupo aromático opcionalmente sustituido con al menos un anillo que tiene un sistema de electrones pi conjugado, que contiene hasta dos sistemas de anillo conjugados o condensados. Arilo incluye arilo carbocíclico y grupos biarilo, los cuales pueden estar todos opcionalmente sustituidos. Arilo preferido incluye fenilo y naftilo. Más preferiblemente, arilo incluye fenilo. Los sustituyentes preferidos se seleccionan del grupo consistente en halógeno, alquilo C_{1-4}, OCF_{3}, CF_{3}, OMe, CN, OSO_{2}R y NO_{2}, donde R representan alquilo C_{1-4} o cicloalquilo C_{3-6}.

Tal y como se usa en la presente memoria, "heteroarilo" se refiere a un anillo arilo que contiene 1, 2 ó 3 heteroátomos tales como N, S u O.

Tal y como se usa en la presente memoria, "alquenilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado opcionalmente sustituido que contiene al menos un doble enlace carbono-carbono y que contiene hasta 5 átomos de carbono unidos entre si. La cadena hidrocarbonada alquenilo puede ser lineal, ramificada o cíclica. Los sustituyentes se seleccionan del grupo consistente en halógeno, alquilo C_{1-4}, OCF_{3}, CF_{3}, OMe, CN, OSO_{2}R y NO_{2}, donde R representan alquilo C_{1-4} o cicloalquilo C_{3-6}.

Tal y como se usa en la presente memoria, "alquinilo" se refiere a un grupo hidrocarbonado opcionalmente sustituido que contiene al menos un triple enlace carbono-carbono entre los átomos de carbono y que contiene hasta 5 átomos de carbono unidos entre si. El grupo hidrocarbonado alquinilo puede ser lineal, ramificado o cíclico. Los sustituyentes se seleccionan del grupo consistente en halógeno, alquilo C_{1-4}, OCF_{3}, CF_{3}, OMe, CN, OSO_{2}R y NO_{2}, donde R representa alquilo C_{1-4} o cicloalquilo C_{3-6}.

Los compuestos de la presente invención pueden contener uno o varios átomos de carbono asimétricos y pueden existir en formas racémicas y ópticamente activas. Todos estos compuestos y diastereómeros se contemplan dentro del alcance de la presente invención.

Compuestos preferidos de la presente invención incluyen:

Éster etílico del ácido 3-{4-ciano-3-[(R)-3-(2-indan-2-il-1,1-dimetil-etilamino)-2-fosfonooxi-propoxi]-fenil}-pro-
piónico;

Ácido 3-{4-ciano-3-[(R)-3-(2-indan-2-il-1,1-dimetil-etilamino)-2-fosfonooxi-propoxi]-fenil}-propiónico;

Éster etílico del ácido 3'-{(R)-3-[2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamino]-2-fosfonooxipropoxi}-4'-ciano-bifenil-4-carboxílico; y

Ácido 3'-{(R)-3-[2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamino]-2-fosfonooxipropoxi}-4'-ciano-bifenil-4-carboxílico.

Las sales farmacéuticamente aceptables son sales no tóxicas en las cantidades y concentraciones a las que éstas se administran.

Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales de adición de ácidos tales como las que contienen sulfato, hidrocloruro, fumarato, maleato, fosfato, sulfamato, acetato, citrato, lactato, tartrato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato, ciclohexilsulfamato y quinato. Una sal preferida es una sal hidrocloruro. Sales farmacéuticamente aceptables se pueden obtener de ácidos tales como ácido clorhídrico, ácido maleico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido sulfámico, ácido acético, ácido cítrico, ácido láctico, ácido tartárico, ácido malónico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido p-toluenosulfónico, ácido ciclohexilsulfámico, ácido fumárico y ácido quínico.

Sales farmacéuticamente aceptables incluyen también sales de adición de bases tales como las que contienen benzatina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina, procaína, aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio, amonio, alquilamina y cinc, cuando están presentes grupos funcionales ácidos tales como ácido carboxílico o fenol.

La presente invención proporciona compuestos de Fórmula (I) anterior, que se pueden preparar usando técnicas convencionales. Una estrategia general para preparar compuestos preferidos descrita en la presente memoria se puede llevar a cabo como se describe en esta sección. Los siguientes ejemplos ilustran la síntesis de compuestos específicos. Usando los protocolos descritos en la presente memoria como modelo, un experto en la técnica puede producir fácilmente otros compuestos de la presente invención.

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Todos los reaccionantes y disolventes se obtuvieron de suministradores comerciales. Los materiales de partida se sintetizaron usando técnicas y procedimientos convencionales.

Esquema 1

3

Esquema 2

4

Preparación general

Se puede llevar a cabo un procedimiento general usado para sintetizar muchos de los compuestos como se describe en el Esquema 1, anterior: se trató una solución de alcohol heteroarílico en acetona con una base apropiada tal como K_{2}CO_{3}, se calentó durante 15 minutos, se añadió nosilato de R-glicidilo y la reacción continuó durante la noche dando el éter glicidílico correspondiente (Esquema 1). Se agita a reflujo durante una noche una solución del éter glicidílico sustituido y amina en exceso (por ejemplo, 1,1-dimetil-2-(4-metiloxifenil)etilamina) en etanol absoluto, acetonitrilo, THF, dioxano, tolueno o cualquier otro disolvente similar en presencia de un catalizador adecuado tal como LiClO_{4}. El producto se purifica por cromatografía. Las sales hidrocloruro se preparan por tratamiento de la base libre correspondiente con HCl bien en fase gaseosa o en solución de dioxano 4 M, o por cualquier otro procedimiento convencional. En el Esquema 2 se muestra un procedimiento representativo para preparar los ésteres
fosfato.

Con el fin de usar un compuesto de Fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables para el tratamiento de seres humanos y otros animales, éste normalmente se formula conforme a la práctica farmacéutica convencional en la forma de una composición farmacéutica.

Los compuestos calcilíticos pueden administrarse por vías diferentes incluyendo administración intravenosa, intraperitoneal, subcutánea, intramuscular, oral, tópica (transdérmica) o transmucosa. Para la administración sistémica, se prefiere la administración oral. Para la administración oral, por ejemplo, los compuestos pueden formularse en formas de dosificación oral convencionales tales como cápsulas, comprimidos y preparaciones líquidas tales como jarabes, elixires y gotas concentradas.

Como alternativa, puede usarse la inyección (administración por vía parenteral), por ejemplo, intramuscular, intravenosa, intraperitoneal y subcutánea. Para la inyección, los compuestos de la invención se formulan en soluciones líquidas, preferiblemente en tampones o soluciones fisiológicamente compatibles, tales como solución salina, solución de Hank o solución de Ringer. Además, los compuestos pueden formularse en forma sólida y redisolverse o suspenderse inmediatamente antes del uso. También pueden producirse formas liofilizadas.

La administración sistémica también puede realizarse a través de la mucosa o por medios transdérmicos. Para la administración transmucosa o transdérmica, en la formulación se usan penetrantes apropiados para la barrera a atravesar. Tales penetrantes se conocen generalmente en la técnica, e incluyen, por ejemplo, para la administración transmucosa, sales biliares y derivados de ácido fusídico. Además, pueden usarse detergentes para facilitar la penetración. La administración transmucosa, por ejemplo, puede realizarse a través de pulverizadores nasales, supositorios rectales o supositorios vaginales.

Para la administración tópica, los compuestos de la invención pueden formularse en pomadas, ungüentos, geles o cremas, como se conoce generalmente en la técnica.

Las cantidades de los diversos compuestos calcilíticos a administrar pueden determinarse mediante procedimientos convencionales que tienen en cuenta factores tales como el valor CI_{50}, el valor CE_{50} y la semivida biológica del compuesto, la edad, tamaño y peso del paciente, y la enfermedad o trastorno asociado con el paciente. La importancia de estos y otros factores que se han de considerar es conocida por los expertos en la técnica.

Las cantidades administradas también dependen de las vías de administración y del grado de biodisponibilidad oral. Por ejemplo, para los compuestos con baja biodisponibilidad oral, habrá que administrar dosis relativamente superiores.

Preferiblemente, la composición está en una forma de dosificación unitaria. Para aplicación oral, por ejemplo, se puede administrar un comprimido o cápsula, para aplicación nasal se puede administrar una dosis de aerosol medida, para aplicación transdérmica se puede administrar una formulación tópica y para liberación transmucosa se puede administrar un parche sublingual. En cualquier caso, la dosificación es tal que el paciente puede administrarse una sola dosis.

Cada dosis unitaria para administración oral contiene de forma adecuada de 0,01 a 500 mg/Kg, y preferiblemente de 0,1 a 50 mg/Kg, de un compuesto de Fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, calculada como base libre. La dosificación diaria para las vías parenteral, nasal, por inhalación oral, transmucosa o transdérmica contiene de forma adecuada de 0,01 mg a 100 mg/Kg, de un compuesto de Fórmula (I). Una formulación tópica contiene convenientemente de 0,01 a 5,0% de un compuesto de Fórmula (I). El ingrediente activo puede administrarse, por ejemplo, de 1 a 6 veces al día, preferiblemente una vez, suficiente para mostrar la actividad deseada, como resulta obvio para un especialista en la técnica.

Como se usa en este documento, "tratamiento" de una enfermedad incluye, pero sin limitación, la prevención, retraso y profilaxis de la enfermedad.

Las enfermedades y trastornos que podrían tratarse o prevenirse, basándose en las células afectadas, incluyen enfermedades o trastornos óseos y relacionados con minerales; hipoparatiroidismo; los del sistema nervioso central tales como ataques, apoplejía, traumatismo craneal, lesión en la médula espinal, lesión de células nerviosas inducida por hipoxia, tal como la que se produce en un paro cardiaco o en distrés neonatal, epilepsia, enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Huntington y la enfermedad de Parkinson, demencia, tensión muscular, depresión, ansiedad, trastorno de pánico, trastornos obsesivo-compulsivos, trastorno de estrés postraumático, esquizofrenia, síndrome neuroléptico maligno y síndrome de Tourette; enfermedades que implican un exceso de reabsorción de agua por el riñón, tales como el síndrome de una secreción inapropiada de ADH (SIADH), cirrosis, insuficiencia cardiaca congestiva y nefrosis; hipertensión; prevención y/o reducción de la toxicidad renal de antibióticos catiónicos (por ejemplo, antibióticos aminoglucósidos); trastornos de la motilidad intestinal tales como diarrea y colon espástico; enfermedades de úlceras gastrointestinales; enfermedades gastrointestinales con una absorción excesiva de calcio tales como sarcoidosis; enfermedades autoinmunes y rechazo de trasplante de órganos; carcinoma de células escamosas; y pancreatitis.

En una realización preferida de la presente invención, los compuestos de la presente invención se usan para aumentar los niveles séricos de hormona paratiroidea ("PTH"). El aumento de los niveles séricos de PTH puede ser útil para tratar enfermedades tales como hipoparatiroidismo, osteosarcoma, enfermedad periodontal, fractura, osteoartritis, artritis reumatoide, enfermedad de Paget, hipercalcemia humoral, cáncer y osteoporosis.

En una realización preferida de la presente invención, los presentes compuestos se administran junto con un agente antiresorción. Tales agentes incluyen, aunque no quedan limitados a los mismos, estrógenos, 1, 25 (OH)_{2} vitamina D3, calcitonina, moduladores selectivos del receptor de estrógenos, antagonistas del receptor de vitronectina, inhibidores de V-H+-ATPasa, antagonistas de src SH2, bisfosfonatos e inhibidores de catepsina K.

Otro aspecto de la presente invención describe un método para tratar a un paciente que comprende administrar al paciente una cantidad de un compuesto de la presente invención suficiente para aumentar el nivel sérico de PTH. Preferiblemente, el método se realiza administrando una cantidad del compuesto eficaz para producir un aumento en la duración y/o cantidad de nivel sérico de PTH suficiente para tener un efecto terapéutico.

En diversas realizaciones, el compuesto administrado a un paciente produce un aumento en el nivel sérico de PTH que tiene una duración de hasta una hora, de aproximadamente una a aproximadamente veinticuatro horas, de aproximadamente una a aproximadamente doce horas, de aproximadamente una a aproximadamente seis horas, de aproximadamente una a aproximadamente cinco horas, de aproximadamente una a aproximadamente cuatro horas, de aproximadamente dos a aproximadamente cinco horas, de aproximadamente dos a aproximadamente cuatro horas, o de aproximadamente tres a aproximadamente seis horas.

En una realización alternativa de la presente invención, el compuesto administrado a un paciente causa un aumento en PTH sérica que tiene una duración mayor que aproximadamente veinte horas con la condición de que se administre junto con un agente antiresorción.

En otras realizaciones diferentes, el compuesto administrado a un paciente produce un aumento en el nivel sérico de PTH de hasta dos veces, de dos a cinco veces, de cinco a diez veces y al menos 10 veces mayor que el nivel máximo en suero de PTH en el paciente. El nivel máximo en suero se mide con respecto a un paciente que no se ha sometido a tratamiento.

La composición de Fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables, que son activos cuando se administran por vía oral, se pueden formular como jarabes, comprimidos, cápsulas y tabletas. Una formulación de jarabe consistirá por lo general en una suspensión o solución del compuesto o una sal en un vehículo líquido, por ejemplo, etanol, aceite de cacahuete, aceite de oliva, glicerina o agua con un agente aromatizante o colorante. Cuando la composición está en forma de comprimido, se puede usar cualquier vehículo farmacéutico usado de forma habitual para preparar formulaciones sólidas. Ejemplos de tales vehículos incluyen estearato de magnesio, sulfato de calcio, talco, gelatina, goma arábiga, ácido esteárico, almidón, lactosa y sacarosa. Cuando la composición esté en la forma de una cápsula, es adecuada cualquier rutina de encapsulación, por ejemplo, usando los vehículos anteriormente citados en una envuelta de cápsulas de gelatina dura. Cuando la composición esté en forma de una cápsula con envuelta de gelatina blanda se puede considerar cualquier vehículo farmacéutico de rutina usado para preparar dispersiones o suspensiones, por ejemplo, gomas acuosas, celulosas, silicatos o aceites y se incorporan en una envuelta de cápsula de gelatina blanda.

Composiciones parenterales típicas consisten en una solución o suspensión de un compuesto o sal en un vehículo acuoso o no acuoso estéril que opcionalmente contiene aceite parenteralmente aceptable, por ejemplo, polietilenglicol, polivinilpirrolidona, lecitina, aceite de cacahuete o aceite de sésamo.

Las composiciones típicas para inhalación están en forma de disolución, suspensión o emulsión que puede administrarse como un polvo seco o en forma de un aerosol usando un propulsor convencional, tal como diclorodifluorometano o triclorofluorometano.

Una formulación típica de supositorio comprende un compuesto de Fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables que es activa cuando se administra de este modo, con un agente ligante y/o lubricante, por ejemplo, glicoles poliméricos, gelatinas, manteca de cacao u otras ceras o grasas vegetales de bajo punto de fusión o sus análogos sintéticos.

Las formulaciones dérmicas y transdérmicas típicas comprenden un vehículo acuoso o no acuoso convencional, por ejemplo, una crema, pomada, loción o pasta, o están en forma de una venda enyesada, parche o membrana con medicamento.

Preferiblemente, la composición está en forma de dosificación unitaria, por ejemplo, un comprimido, cápsula o dosis de aerosol medida, de modo que el paciente puede administrarse una sola dosis.

No se esperan efectos toxicológicos inaceptables cuando los compuestos de la presente invención se administran de acuerdo con la presente invención.

La actividad biológica de los compuestos de Fórmula (I) se demuestra por los siguientes ensayos:

(I) Ensayo de Inhibidor del Receptor de Calcio

La actividad calcilítica se midió determinando la CI_{50} del compuesto de ensayo para bloquear los aumentos de Ca^{2+} intracelular provocados por Ca^{2+} extracelular en células HEK 293 4.0-7 que expresan de forma estable el receptor de calcio humano. Se prepararon células HEK 293 4.0-7 como se describe por Rogers et al., J. Bone Miner. Res. 10 Suppl. 1:S483, 1995 (incorporado en la presente memoria como referencia). Los aumentos de Ca^{2+} intracelular se indujeron aumentando el Ca^{2+} extracelular de 1 a 1,75 mM. El Ca^{2+} intracelular se midió usando fluo-3, un indicador de calcio fluorescente.

El procedimiento fue el siguiente:

1.: Las células se mantuvieron en matraces T-150 en medio de selección (DMEM suplementado con suero bovino fetal al 10% y 200 ug/ml de higromicina B), en CO_{2} al 5%: aire al 95% a 37ºC y se reprodujeron hasta una confluencia del 90%.

2.: El medio se decantó y se lavó la monocapa de células dos veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS) mantenida a 37ºC. Después del segundo lavado, se añadieron 6 ml de EDTA al 0,02% en PBS y se incubó durante 4 minutos a 37ºC. Después de la incubación, las células se dispersaron por agitación suave.

3.: Se reunieron las células de 2 ó 3 matraces y se sedimentaron (100 x g). El sedimento celular se resuspendió en 10-15 ml de SPF-PCB+ y se sedimentó de nuevo por centrifugación. Este lavado se realizó dos veces.

: El tampón de células paratiroideas sin sulfato y sin fosfato (SPF-PCB) contiene Na-Hepes 20 mM, pH 7,4, NaCl 126 mM, KCl 5 mM y MgCl_{2} 1 mM. Se constituyó el SPF-PCB y se almacenó a 4ºC. En el día de uso, el SPF-PCB se suplementó con 1 mg/ml de D-glucosa y CaCl_{2} 1 mM y después se dividió en dos fracciones. A una fracción, se le añadió albúmina de suero bovino (BSA; fracción V, ICN) a 5 mg/ml (SPF-PCB+). Este tampón se usó para el lavado, carga y mantenimiento de las células. La fracción sin BSA se usó para diluir las células en la cubeta para medir la fluorescencia.

4.: El sedimento se resuspendió en 10 ml de SPF-PCB+ que contenía 2,2 uM de fluo-3 (Molecular Probes) y se incubó a temperatura ambiente durante 35 minutos.

5.: Después del periodo de incubación, las células se sedimentaron por centrifugación. El sedimento resultante se lavó con SPF-PCB+. Después de este lavado, las células se resuspendieron en SPF-PCB+ a una densidad de 1-2 x 10^{6} células/ml.

6.: Para registrar las señales de fluorescencia, se diluyeron 300 ul de suspensión celular en 1,2 ml de tampón SPF que contenía CaCl_{2} 1 mM y 1 mg/ml de D-glucosa. Las medidas de fluorescencia se llevaron a cabo a 37ºC con agitación constante usando un espectrofluorímetro. Las longitudes de onda de excitación y emisión se midieron a 485 y 535 nm, respectivamente. Para calibrar las señales de fluorescencia, se añadió digitonina (5 mg/ml en etanol) para obtener el valor de Fmax, y el valor de Fmin aparente se determinó añadiendo Tris-EGTA (Tris-Base 2,5 M, EGTA 0,3 M). La concentración de calcio intracelular se calculó usando la siguiente ecuación: Calcio intracelular = (F-F_{min}/F_{max}) x K_{d}; donde _{Kd} = 400 nM.

7.: Para determinar la actividad calcilítica potencial de los compuestos de ensayo, las células se incubaron con compuesto de ensayo (o vehículo como control) durante 90 segundos antes de aumentar la concentración de Ca^{2+} extracelular de 1 a 2 mM. Los compuestos calcilíticos se detectaron por su capacidad de bloquear, de una manera dependiente de la concentración, aumentos en la concentración de Ca^{2+} intracelular inducidos por Ca^{2+} extracelular.

En general, son compuestos más preferidos los compuestos que tienen valores de CI_{50} menores en el Ensayo de Inhibidor del Receptor de Calcio. Los compuestos que tenían un valor de CI_{50} mayor de 50 uM se consideraron inactivos. Los compuestos preferidos son aquellos que tuvieron una CI_{50} igual o inferior a 10 uM, los compuestos más preferidos tienen una CI_{50} de 1 uM, y los compuestos más preferidos tienen una CI_{50} igual o inferior a 0,1 uM.

(II) Ensayo de Unión al Receptor de Calcio

Se aumentaron a escala células HEK 293 4.0-7 transfectadas de manera estable con el Receptor de Calcio Paratiroideo Humano ("HuPCaR") en matraces de cultivo de tejidos T180. La membrana plasmática se obtuvo por homogeneización con un Polytron o con un Dounce de vidrio en tampón (Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, EDTA 1 mM, MgCl_{2} 3 mM) en presencia de un cóctel inhibidor de proteasa que contenía Leupeptina 1 uM, Pepstatina 0,04 uM y PMSF 1 mM. Las alícuotas de membrana se congelaron rápidamente y se almacenaron a -80ºC. El compuesto marcado con ^{3}H se radiomarcó a una actividad específica de 44 Ci/mmol, se dividió en alícuotas y se almacenó en nitrógeno líquido para determinar la estabilidad radioquímica.

Una mezcla típica de reacción contiene ^{3}H-compuesto ((R,R)-N-4'-Metoxi-t-3-3'-metil-1'-etilfenil-1-(1-naftil)etilamina) 2 nM o ^{3}H-compuesto (R)-N-[2-Hidroxi-3-(3-cloro-2-cianofenoxi)propil]-1,1-dimetil-2-(4-metoxifenil)etilamina y 4-10 \mug de tampón de homogeneización que contiene 0,1% de gelatina y 10% de EtOH en un volumen de reacción de 0,5 ml. La incubación se realiza en 12 x 75 tubos de polietileno en un baño de agua enfriada con hielo. A cada tubo se le añaden 25 ul de muestra de ensayo en EtOH al 100%, seguido de 400 ul de tampón de incubación frío y 25 ul de ^{3}H-compuesto 40 nM en EtOH al 100% para una concentración final de 2 nM. La reacción de unión se inició mediante la adición de 50 ul de 80-200 ug/ml de membrana de HEK 293 4.0-7 diluidos en tampón de incubación y se dejaron incubar a 4ºC durante 30 minutos. El tampón de lavado es Tris-HCl 50 mM que contiene PEI al 0,1%. La unión no específica se determina mediante la adición de un exceso de 100 veces de ligando homólogo no marcado, y generalmente es 20% de la unión total. La reacción de unión se termina por filtración rápida sobre filtros GF/C pretratados con PEI al 1% usando un recolector Brandel. Los filtros se ponen en líquido de centelleo y la radiactividad se evalúa por recuento de centelleo de líquidos.

Ejemplos

Los espectros de resonancia magnética nuclear se registraron bien a 250 o 400 MHz usando, respectivamente, un espectrómetro Bruker AM 250 o Bruker AC 400. CDCl_{3} es deuteriocloroformo, DMSO-d6 es hexadeuteriodimetilsulfóxido y CD_{3}OD es tetradeuteriometanol. Los desplazamientos químicos se expresan en partes por millón (\bullet) de campo bajo el patrón interno tetrametilsilano. Las abreviaturas para los datos de RMN son como sigue: s=singlete, d=doblete, t=triplete, c=quartete, m=multiplete, dd=doblete de dobletes, dt=doblete de tripletes, app=apparente, a=ancho. J indica la constante de acoplamiento de RMN medida en Hertz. Los espectros de infrarrojos (IR) de onda continua se registraron en un espectrómetro de infrarrojos Perkin-Elmer 683 y los espectros de infrarrojos por transformada de Fourier (FTIR) se registraron en un espectrómetro de infrarrojos Nicolet Impact 400 D. Los espectros de IR y FTIR se registraron en modo de transmisión y las posiciones de las bandas se expresan en números de ondas inversos (cm^{-1}). Los espectros de masas se tomaron en instrumentos VG 70 FE, PE Syx API III o VG ZAB HF, usando técnicas de ionización de bombardeo con átomos rápidos (FAB) o electropulverización (ES). Los análisis elementales se obtuvieron usando un analizador elemental Perkin-Elmer 240C. Los puntos de fusión se tomaron con un aparato de punto de fusión Thomas-Hoover y están sin corregir. Todas las temperaturas se expresan en grados Celsius.

Para la cromatografía en capa fina se usaron placas de capa fina de gel de sílice Analtech Silica Gel GF y E. Merck Silica Gel 60 F-254. Los cromatogramas ultrarrápidos y de gravedad se llevaron a cabo en gel de sílice E. Merck Kieselgel 60 (230-400 de malla). Las HPLC analítica y preparativa se llevaron a cabo en cromatógrafos Rainin o Gilson. ODS se refiere a un soporte cromatográfico de gel de sílice modificado con octadecilsililo. 5 \mu Apex-ODS indica un soporte cromatográfico de gel de sílice modificado con octadecilsililo que tiene un tamaño de partícula nominal de 5 \mu, fabricado por Jones Chromatography, Littleton, Colorado. YMC ODS-AQ® es un soporte cromatográfico de ODS y es una marca comercial registrada de YMC Co. Ltd., Kyoto, Japón. PRP-1® es un soporte cromatográfico polimérico (estirenodivinilbenceno), y es una marca comercial registrada de Hamilton Co., Reno, Nevada) Celite® es un auxiliar de filtrado compuesto por sílice de diatomeas lavadas al ácido y es una marca comercial registrada de Manville Corp., Denver, Colorado. Siguiendo el procedimiento general descrito antes se han sintetizado los siguientes compuestos:

Ejemplo 1 Preparación de 2-Indan-2-il-1,1-dimetil-etilamina a) Éster metílico del ácido indan-2-il-acético

Se agitó una solución de ácido indan-2-il-acético (Lancaster, 20 g, 0,11 mol) en metanol (200 ml) y se enfrió hasta 0-10ºC en un baño de hielo y se trató gota a gota con cloruro de tionilo (14,8 g, 0,125 mol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas, se concentró a vacío y el residuo oleoso se disolvió en acetato de etilo, se lavó con solución de hidróxido sódico 2,5 N, agua y salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se concentró a vacío dando el compuesto del epígrafe (21 g, 97%) que solidificó.

b) 1-Indan-2-il-2-metil-propan-2-ol

Se añadió gota a gota una solución del compuesto del Ejemplo 1(a) (6,3 g, 33 mmol) en éter (150 ml) a metil litio 1,4 M en éter (100 ml, 4,25 eq) agitado en un baño de hielo. La mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente, se agitó durante 2 horas y se inactivó muy cuidadosamente mediante adición gota a gota de cloruro amónico acuoso saturado (150 ml). La fase acuosa se separó y se extrajo con éter y la fase de éter reunida se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se concentró a vacío proporcionando el compuesto del epígrafe como un aceite que cristalizó en reposo (\sim89%).

c) N-(2-Indan-2-il-1,1-dimetil-etil)-acetamida

Se añadió a una mezcla de ácido sulfúrico concentrado (1,7 ml) en acetonitrilo (6 ml) agitada en un baño de hielo durante 45 minutos una solución gota a gota del compuesto del Ejemplo 1(b) (3,3 g, 17,3 mmol) en ácido acético glacial (5 ml). La mezcla se dejó calentar hasta temperatura ambiente, se agitó durante 16 horas, se vertió en agua helada y se extrajo con acetato de etilo. El extracto orgánico reunido se lavó con hidróxido sódico 2,5 N, agua y salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se concentró a vacío dando un residuo oleoso que se trituró con hexano y unas pocas gotas de acetato de etilo, se añadió un iniciador y se enfrió proporcionando un sólido que se aisló por filtración proporcionando el compuesto del epígrafe como un sólido color castaño (1,9 g, 47%). EM(ES) m/e 231,9 [M+H]^{+}. El filtrado se concentró a vacío proporcionando más compuesto del epígrafe como un aceite (1,5 g, 37%).

d) 2-Indan-2-il-1,1-dimetil-etilamina

Se trató con lentejas de hidróxido potásico trituradas (13 g) una mezcla del compuesto del Ejemplo 1(c) (6,5 g, 28 mmol) en etilenglicol (170 ml), se agitó y se calentó hasta 190ºC durante 24 horas. La mezcla se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica reunida se lavó con salmuera y se extrajo con ácido clorhídrico 1 N. El extracto ácido reunido se lavó con acetato de etilo, se basificó con hidróxido sódico 2,5 N y se extrajo con acetato de etilo. El extracto orgánico reunido se lavó con salmuera, se secó (MgSO_{4}) y se concentró a vacío proporcionando el compuesto del epígrafe (3,2 g, 60%). EM(ES) m/e 190,6 [M+H]^{+}.

Ejemplo 2 Preparación de (R)-4-ciano-3-(oxiranilmetoxi)bencenopropionato de etilo a) 3-Hidroxibencenopropionato de etilo

Se trató con ácido sulfúrico concentrado (6 ml) una solución de ácido 3-(3-hidroxifenil)propiónico (Lancaster, 66,4 g, 0,4 mol) en etanol (700 ml), se calentó hasta reflujo durante 2 horas y se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. La mezcla se enfrió con hielo, se neutralizó con carbonato sódico acuoso al 10% y se concentró a vacío hasta aproximadamente 50 ml. Se añadió agua (-200 ml) y la mezcla se extrajo tres veces con acetato de etilo. El extracto reunido de acetato de etilo se lavó con agua y salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró a vacío proporcionando el compuesto del epígrafe como un aceite (70 g, 90%).

b) 4-Formil-3-hidroxibencenopropionato de etilo

Se añadió trietilamina (152 g, 1,5 mol), seguida de cloruro de magnesio (57,1 g, 0,6 mol) a una solución del compuesto del Ejemplo 2(a) (77,2 g, 0,4 mol) en acetonitrilo seco (1 l) agitado en argón. Después de agitar durante 5 minutos, se añadió paraformaldehído (81 g) y la reacción se llevó a reflujo en argón durante 1,5 horas. La reacción se enfrió, se añadió ácido clorhídrico 6 N (400 ml) y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. El extracto reunido de acetato de etilo se lavó con agua, se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró a vacío. El aceite residual se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (gel de sílice, acetato de etilo al 10%/hexano) dando el compuesto del epígrafe (66,6 g, 75%).

c) 3-Hidroxi-4-[(hidroxiimino)metil]bencenopropionato de etilo

Se trató una solución del compuesto del Ejemplo 2(b) (66,6 g, 0,3 mol) en etanol absoluto (500 ml) con trietilamina (40,4 g, 0,4 mol) seguido por hidrocloruro de hidroxilamina (23 g, 0,33 mol). La reacción se agitó en argón a reflujo durante 18 horas, se concentró a vacío y el aceite residual se disolvió en acetato de etilo y se lavó con ácido clorhídrico 1 N. La fase de acetato de etilo se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró a vacío dando el compuesto del epígrafe como un aceite que se usó en la etapa siguiente.

d) 3-Acetoxi-4-cianobencenopropionato de etilo

Se trató el compuesto del Ejemplo 2(c) con anhídrido acético (500 ml) y se llevó a reflujo en argón durante 90 minutos. La reacción se concentró a vacío y el aceite resultante se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua. La fase de acetato de etilo se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró a vacío dando el compuesto del epígrafe como un aceite que se usó en la etapa siguiente.

e) 4-Ciano-3-hidroxibencenopropionato de etilo

Se disolvió en etanol (200 ml) una solución del compuesto del Ejemplo 2(d) y se trató con una solución de carbonato sódico (64 g, 0,6 mol) en agua (1,5 l). Después de agitar a temperatura ambiente durante 5 horas, la mezcla se neutralizó con ácido clorhídrico 6 N hasta pH 5 y se concentró a vacío. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. La solución de acetato de etilo se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró a vacío dando el compuesto del epígrafe como un aceite [61,9 g, 94,2% de rendimiento total a partir del compuesto de la Preparación 2(c)].

f) (R)-4-Ciano-3-(oxiranilmetoxi)bencenopropionato de etilo

Se trató una solución del compuesto del Ejemplo 2(e) (28,3 g, 0,13 mol) y 3-nitrobencenosulfonato de (2R)-glicidilo (33,7 g, 0,13 mol) en acetona seca (500 ml) con carbonato potásico (36 g, 0,26 mol) y se llevó a reflujo en argón durante 18 horas. La reacción se enfrió, se filtró y el filtrado se concentró a vacío y el residuo se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (sílice, acetato de etilo al 30%/hexano) proporcionando el compuesto del epígrafe (29,5 g, 82,4%).

Ejemplo 3 Preparación de 3-{4-ciano-3-[(R)-2-hidroxi-3-(2-indan-2-il-1,1-dimetil-etilamino)-propoxi]-fenil}-propionato de etilo

Se agitó una mezcla de los compuestos del Ejemplo 2(f) (6 g, 31,7 mmol) y el Ejemplo 1(d) (8,6 g, 31,7 mmol) en etanol absoluto (200 ml) y se calentó hasta reflujo durante 56 horas, se enfrió y se concentró a vacío. El residuo se disolvió en diclorometano (30 ml) y se acidificó con cloruro de hidrógeno 1,0 N en éter. El sólido blanco que se formó se aisló por filtración y se recristalizó proporcionando el compuesto del epígrafe (10 g, 63%). p.f. (diclorometano/éter) 155-157ºC; EM(ES) m/e 465,4 [M+H]^{+}.

Ejemplo 4 Preparación de éster etílico del ácido 3-{4-ciano-3-[(R)-3-(2-indan-2-il-1,1-dimetil-etilamino)-2-fosfonooxi-propoxi]-fenil}-propiónico y ácido 3-{4-ciano-3-[(R)-3-(2-indan-2-il-1,1-dimetil-etilamino)-2-fosfonooxi-propoxi]-fenil}-propiónico

Se dejó reposar a temperatura ambiente durante 2 días el compuesto del Ejemplo 3 (0,2 g, 0,4 mmol) en ácido polifosfórico (3 g). La mezcla se diluyó con agua (2 ml), dimetilsulfóxido (2 ml) y etanol (2 ml). Esta solución (2 ml) se sometió a HPLC preparativa en una columna de 50 X 20 mm ID YMC Combiprep ODS eluyendo a 20 ml/min con un gradiente lineal de MeCN al 20% (TFA al 0,1%)/agua al 80% (0,TFA al 1%) hasta MeCN al 60% (TFA al 0,1%) durante 15 min dando el éster (20 mg); MS (ES) m/z: 545,2 [M+H]^{+} y el ácido (6 mg); MS (ES) m/z: 517,2 [M+H]^{+}.

Ejemplo 5 Preparación de éster etílico del ácido 4'-ciano-3'-((R)-1-oxiranilmetoxi)-bifenil-4-carboxílico a) 2-hidroxil-4-bromobenzonitrilo

Se calentó a reflujo durante 36 horas una mezcla de 2-fluoro-5-bromobenzonitrilo (30 g, 152,3 mmol), acetato potásico (222,4 g, 228,5 mmol) y éter 18-corona-6 (60,4 g, 288,5 mmol) en MeCN (400 ml). La mezcla se enfrió, se añadió NaOH 2,5 N (200 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se extrajo con éter (desechó). La fase acuosa se acidificó con HCl 6 N, se extrajo con EtOAc, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró, se purificó por cromatografía en columna ultrarrápida (EtOAc al 40%/Hex) dando el compuesto del epígrafe anterior como una espuma amarilla clara (24,45 g, 81%). RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta 7,13 (dd, J=1,7, 8,3Hz, 1H), 7,17 (d, J=1,7Hz, 1H), 7,61 (d, J=8,3Hz, 1H).

b) 4-[[3-Hidroxil-4-ciano]fenil]benzoato de etilo

Se calentó a reflujo durante 24 horas una mezcla del Ejemplo 5(a) (3,0 g, 1,52 mmol), ácido p-carboxilbenceno bórico (3,02 g, 1,82 mmol), (Ph_{3}P)_{4}Pd (0,88 g, 0,76 mmol) y Na_{2}CO_{3} 2 M (38 ml, 7,6 mmol) en tolueno/EtOH (60 ml, 4:1). La mezcla se enfrió y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con éter (desechó), se acidificó con HCl 6N. El sólido castaño (3,6 g, 99%) se filtró, se secó y se disolvió en EtOH y se añadió HCl 4 M en p-dioxano (20 ml). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 24 horas. La mezcla se enfrió, se concentró, se recogió en H_{2}O, se agitó, se filtró y se secó dando el compuesto del epígrafe anterior como un sólido blanquecino (3,75 g, 85%). RMN de ^{1}H (300 MHz, DMSO-d6): \delta 1,32 (t, J=7,1Hz, 3H), 4,34 (c, J=7,1Hz, 2H), 7,29 (s,1H), 7,31 (d, J=8,3Hz, 1H), 7,73 (d, J=8,3Hz, 1H), 7,76 (d, J=8,3Hz, 2H), 8,06 (d, J=8,3Hz, 2H).

c) 4-[[3-[[R-glicidil]oxil]metil-4-ciano]fenil]benzoato de etilo

Se calentó a reflujo durante 24 horas una mezcla del Ejemplo 5(b) (0,71 g, 2,7 mmol), carbonato potásico (0,73 g, 5,3 mmol) y 3-nitrobencenosulfonato de R-glicidilo (0,73 g, 2,8 mmol) en acetona (30 ml). La mezcla se enfrió, se concentró, se recogió en H_{2}O, se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se concentraron proporcionando el compuesto del epígrafe anterior como un sólido blanquecino (0,7 g, 82%). RMN (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta 1,32 (t, J=7,1Hz, 3H), 2,78 (dd, J=2,6, 4,9Hz, 1H), 2,91 (t, J=4,9, 1H), 3,44 (m, 1H), 4,20 (dd, J=6,5, 11,7, 1H), 4,39 (c, J=7,1Hz, 2H), 4,72 (dd, J=2,6, 11,7Hz, 1H), 7,47 (dd, J=1,4, 8Hz, 1H), 7,57 (d, J=1,4Hz, 1H), 7,85 (d, J=8Hz, 1H), 7,95 (d, J=8,5Hz, 1H), 8,08 (d, J=8,5Hz, 1H).

Ejemplo 6 Preparación de 2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamina a) Éster metílico del ácido 3-(5-cloro-tiofen-2-il)-2,2-dimetil-propiónico

Se añadieron 37,8 ml de una solución 2,5 M de n-BuLi en N_{2} a una solución agitada y enfriada (-78ºC) de diisopropilamina (9,54 g, 94,3 mmol) en THF anhidro (100 ml). Después de agitar a -78ºC durante 30 minutos, se añadió isobutirato de metilo (9,2 g, 89,8 mmol) y se continuó agitando durante 1 hora. Se añadió una solución de 5-cloro-2-metilclorotiofeno (15 g, 89,8 mmol) en THF seco (50 ml). La mezcla de reacción se dejó agitando durante otras 4 horas más a dicha temperatura, luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente, se inactivó con agua, se extrajo con éter (3 x 100 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron proporcionando el compuesto del epígrafe anterior como un aceite color pardo (19,2, 93%). RMN de ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,21 (s, 6H), 2,95 (s, 2H), 3,7 (s, 3H), 6,52 (d, J= 3,6 Hz, 1H), 6,71 (d, J= 3,6 Hz, 1H).

b) Ácido 3-(5-cloro-tiofen-2-il)-2,2-dimetil-propiónico

Se calentó a 80ºC durante 24 horas una mezcla del compuesto del Ejemplo 6(a) (19,5 g, 83,8 mmol) y NaOH 2,5 N (67 ml, 167,7 mmol) en p-dioxano (200 ml). La mezcla se enfrió seguidamente, el disolvente orgánico se eliminó a vacío y el residuo acuoso se extrajo con éter (desechó). La fase acuosa se acidificó con HCl 6 N hasta pH=4, se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 75 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron proporcionando el compuesto del epígrafe anterior como un aceite color pardo (16,5,90%). RMN de ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,25 (s, 6H), 2,98 (s, 2H), 6,60 (d, J=3,6 Hz, 1H), 6,75 (d, J=3,6 Hz, 1H).

c) 2-Cloro-5-(2-isocianato-2-metil-propil)-tiofeno

Se añadió azida de difenilfosforilo (22,6 g, 83,1 mmol) a una mezcla agitada del compuesto del Ejemplo 6(b) (16,5 g, 75,5 mmol) y trietilamina (8,41 g, 83,1 mmol) en tolueno seco (200 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora, luego se calentó a 80ºC durante 2 horas, se enfrió hasta temperatura ambiente, se inactivó con agua y se separaron las fases. La fase acuosa se extrajo con éter (3 x 100 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron proporcionando el compuesto del epígrafe anterior como un aceite color pardo (16,3, 100%). RMN de ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}) \delta 1,38 (s, 6H), 2,88 (s, 2H), 6,65 (d, J=3,6 Hz, 1H), 6,79 (d, J=3,6 Hz, 1H).

d) 2-(5-Cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamina

Se añadió HCl 6N (200 ml) a una solución agitada del compuesto del Ejemplo 6(c) (16,3 g, 75,5 mmol) en diglyme (200 ml). La mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante 2 horas, se enfrió, se concentró a alto vacío y se recogió en agua, se extrajo con éter (desechó). La fase acuosa ácida se llevó hasta pH= 8 con una solución de NaOH al 50%, luego se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (5 x 50 ml). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO_{4}, se filtraron y se concentraron proporcionando el compuesto del epígrafe anterior como un aceite color pardo (12,5, 87%). RMN de ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}) \delta 1,01 (s, 6H), 2,71 (s, 2H), 6,70 (d, J=3,6 Hz, 1H), 6,92 (d, J=3,6 Hz, 1H).

Ejemplo 7 Preparación de éster etílico del ácido 3'-{(R)-3-[2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamino]-2-hidroxi-propoxi}-4'-ciano-bifenil-4-carboxílico

Se trató la solución de los compuestos del Ejemplo 5(c) (5 g, 15,47 mmol) y 6(d) (4,39 g, 23 mmol) en dioxano/
CH_{3}CN (1:1, 250 ml) con LiClO_{4} (1,7 g, 16,1 mmol) y se calentó a reflujo durante 3 días. La mezcla de reacción se enfrió y evaporó. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida dando el compuesto del epígrafe anterior (6,23 g, 78,6%). MS(ES) m/z 513 [M+H]^{+}.

Ejemplo 8 Preparación de éster etílico del ácido 3'-{(R)-3-[2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamino]-2-fosfonooxi-propoxi}-4'-ciano-bifenil-4-carboxílico

Se dejó reposar a temperatura ambiente durante 4 días el compuesto del Ejemplo 7 (0,5 g, 0,98 mmol) en ácido polifosfórico (5 g). La mezcla se diluyó con agua (50 ml) y el sólido se filtró. El sólido (200 mg) se sometió a HPLC preparativa en una columna de 50 X 20 mm ID YMC Combiprep ODS eluyendo a 20 ml/min con un gradiente lineal de MeCN al 40% (TFA al 0,1% TFA)/agua al 60% (TFA al 0,1%) hasta MeCN al 60% (TFA al 0,1%) durante 15 min dando el compuesto del epígrafe anterior (50 mg). MS (ES) m/z: 593 [M+H]^{+}.

Ejemplo 9 Preparación de ácido 3'-{(R)-3-[2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamino]-2-fosfonooxi-propoxi}-4'-ciano-bifenil-4-carboxílico

Se agitó a temperatura ambiente durante 3 días el sólido bruto del Ejemplo 8 (60 mg) en hidróxido sódico 1 N (1 ml) y etanol (0,5 ml). La mezcla se concentró hasta 1 ml y se sometió a HPLC preparativa en una columna de 50 X 20 mm ID YMC Combiprep ODS eluyendo a 20 ml/min con un gradiente lineal de MeCN al 20% (TFA al 0,1%)/agua al 80% (TFA al 0,1%) hasta MeCN al 60% (TFA al 0,1%) durante 15 min dando el compuesto del epígrafe anterior (30 mg). MS (ES) m/z: 565,2 [M+H]^{+}.

Claims

1. Un compuesto de acuerdo con la Fórmula (I) presentada a continuación:

o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

5

en la que:

: A es un arilo o arilo condensado, dihidro o tetrahidroarilo condensado, heteroarilo o heteroarilo condensado, dihidro o tetrahidroheteroarilo condensado, no sustituido o sustituido con cualquier sustituyente que se selecciona del grupo consistente en OH, halógeno, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, cicloalquilo C_{3-6}, CF_{3}, OCF_{3}, CN y NO_{2};

: J es un enlace covalente, alquileno, O-alquileno o alquenileno; y

: L es

6

: R_{4} y R'_{4} son independientemente H, alquilo, arilo o heteroarilo;

: n es un número entero de 0 a 4; y,

: m es un número entero de 1 a 3.

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, seleccionado del grupo que consiste en:

éster etílico del ácido 3-{4-ciano-3-[(R)-3-(2-indan-2-il-1,1-dimetil-etilamino)-2-fosfonooxipropoxi]-fenil}-pro-
piónico;

ácido 3-{4-ciano-3-[(R)-3-(2-indan-2-il-1,1-dimetil-etilamino)-2-fosfonooxipropoxi]-fenil}-propiónico;

éster etílico del ácido 3'-{(R)-3-[2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamino]-2-fosfonooxi-propoxi}-4'-ciano-bifenil-4-carboxílico; y

ácido 3'-{(R)-3-[2-(5-cloro-tiofen-2-il)-1,1-dimetil-etilamino]-2-fosfonooxi-propoxi}-4'-ciano-bifenil-4-carboxílico.

3. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en la fabricación de un medicamento para antagonizar un receptor de calcio.

4. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en la fabricación de un medicamento para tratar una enfermedad o trastorno caracterizado por anomalías en la homeostasis ósea o mineral.

5. Un uso según la reivindicación 4, en el que la enfermedad o trastorno óseo o mineral se selecciona del grupo consistente en osteosarcoma, enfermedad periodontal, curación de fracturas, osteoartritis, colocación de prótesis articulares, artritis reumatoide, enfermedad de Paget, hipercalcemia humoral, cáncer y osteoporosis.

6. Un uso según la reivindicación 5, en el que la enfermedad o trastorno óseo o mineral es osteoporosis.

7. El uso de un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 en la fabricación de un medicamento para aumentar los niveles séricos de hormona paratiroidea.

8. Un uso según la reivindicación 6 o la reivindicación 7, en el que el compuesto se administra junto con un agente antiresorción.

9. Un uso según la reivindicación 8, en el que el agente antiresorción se selecciona del grupo consistente en: estrógenos, 1, 25 (OH)_{2} vitamina D3, calcitonina, moduladores selectivos del receptor de estrógenos, antagonistas de vitronectina, inhibidores de V-H+-ATPasa, antagonistas de src SH2, bisfosfonatos e inhibidores de catepsina K.

10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

11. Un procedimiento para sintetizar un compuesto según la reivindicación 1 o la reivindicación 2 fosforilando las ariloxipropinolaminas correspondientes de forma selectiva en el alcohol secundario con ácido polifosfórico.