ES2274645T3

ES2274645T3 - Derivados de trifenilbuteno para el tratamiento de transtornos neurologicos.

Info

Publication number: ES2274645T3
Application number: ES99954098T
Authority: ES
Inventors: Richard Alan Keith; Timothy Martin Piser; Michael Thaddeus Klimas
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 1998-11-04
Filing date: 1999-10-29
Publication date: 2007-05-16
Anticipated expiration: 2019-10-29
Also published as: DE69933885T2; GB9824207D0; US6489481B1; DE69933885D1; EP1127045B1; ATE344230T1; EP1127045A2; JP2002528489A; WO2000025767A2; WO2000025767A3; AU1054200A

Abstract

El uso de un compuesto de fórmula VIII en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de, o la prevención de, trastornos neurológicos en un animal de sangre caliente Fórmula VIII en la que R1 es hidrógeno; D es alquenileno C2-4; R2 es hidrógeno; R3 es un grupo de la fórmula: -E-F-G-H en la que: E se selecciona de F se selecciona de o un enlace directo; G se selecciona de alquilo C1-6, o de un enlace directo; H se selecciona de hidrógeno, alcoxi C1-4, arilo, heteroarilo, carbociclilo, en los que el anillo arilo, heteroarilo o carbociclilo pueden estar opcionalmente sustituidos (en un átomo de carbono variable) con hasta 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alquilo C1-4, alcoxi C1-4, halo, amino, N-alquil C1-4-amino, NN-di-alquil C1-4-amino, amino-alquilo C1-4, o arilo; R4 se selecciona de metilo o etilo; R5 se selecciona de metilo, etilo o fenilo, o R4 y R5, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo seleccionado de pirrolidina o piperidina; R6 se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-4 o halo; R7 y R8 están unidos vía un átomo de azufre, vía -CH2- o vía -C2H4-, para formar un anillo de siete miembros que contiene azufre, un anillo de siete miembros, o un anillo de ocho miembros, respectivamente; R9 se selecciona de hidrógeno, metilo o etilo; R10 se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-4 o halo; y n es 2 ó 3; o una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o solvato del mismo.

Description

Derivados de trifenilbuteno para el tratamiento de trastornos neurológicos.

Esta invención proporciona métodos para prevenir y tratar trastornos neurológicos, tales como trastornos cognitivos y/o trastornos neurológicos relacionados con apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad, por ejemplo enfermedad de Alzheimer, demencia vascular y demencia relacionada con la edad, así como trauma cerebral, apoplejía, lesión de la médula espinal, esclerosis lateral amiotrófica (ALS), enfermedad de Parkinson, corea de Huntington, demencia relacionada con SIDA, neuropatías periféricas y degeneración macular. Tales métodos comprenden la administración, a un mamífero de sangre caliente, tal como un ser humano, que lo necesite, una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula VIII. Esta invención también se refiere al uso de un compuesto de Fórmula VIII para la fabricación de un medicamento para la prevención o tratamiento de los trastornos mencionados anteriormente.

Antecedentes de la invención

La enfermedad de Alzheimer (AD) es la forma más habitual de demencia, que afecta a aproximadamente 4 millones de personas en los Estados Unidos de América solamente. La AD es un trastorno cerebral degenerativo caracterizado clínicamente por una pérdida progresiva de memoria, de conocimiento, de razonamiento, de juicio y de estabilidad emocional, que conduce gradualmente a un deterioro mental profundo, y finalmente a la muerte. La AD es la causa principal de insuficiencia mental progresiva (demencia) en personas mayores, y se cree que representa la cuarta causa médica más habitual de muertes en los Estados Unidos de América. La AD se ha encontrado en diversas razas y grupos étnicos en todo el mundo, y presenta un problema importante y futuro de salud pública. Hasta la fecha, la AD ha demostrado ser incurable. Para repasos recientes de la enfermedad de Alzheimer, véase: Edelberg y Wei (1996) Mech Aging & Development 91:95 y De La Torre (1994) Neurosci & Biobehavioral Reviews 18:397.

Los cerebros de personas con AD muestran degeneración neuronal y lesiones características denominadas de forma variada como placas amiloidogénicas, angiopatía amiloide vascular, y enmarañamientos neurofibrilares. Un gran número de estas lesiones, particularmente las placas amiloidogénicas y los enmarañamientos neurofibrilares, se encuentran generalmente en diversas áreas del cerebro humano importantes para la memoria y la función cognitiva en pacientes con AD. Un número más pequeño de estas lesiones, en una distribución anatómica más restringida, se encuentra en los cerebros de la mayoría de las personas ancianas que no tienen AD clínica. Las placas amiloidogénicas y la angiopatía amiloide vascular también caracterizan a los cerebros de personas con Trisomia 21 (síndrome de Down) y hemorragia cerebral hereditaria con amiloidosis de tipo holandesa (HCHWA-D). Actualmente, un diagnóstico definitivo de AD requiere habitualmente observar las lesiones observadas anteriormente en el tejido cerebral de pacientes que han muerto con la enfermedad o, de forma rara, en pequeñas muestras de biopsias de tejido cerebral tomadas durante un procedimiento neuroquirúrgico invasivo.

Diversas líneas de indicios indican que la deposición cerebral progresiva de proteínas amiloidogénicas particulares, las proteínas b-amiloide (b-AP), desempeñan un papel como origen de la patogénesis de AD, y pueden preceder a los síntomas cognitivos en años o décadas. Véase, Selkoe, (1991) Neuron 6:487. Se ha demostrado que b-AP se liberan a partir de células neuronales que se hacen crecer en cultivo, y están presentes en fluido cerebroespinal (CSF) tanto de individuos normales como de pacientes con AD. Véase, Seubert et al., (1992) Nature 359:325-327.

Una cantidad cada vez mayor de investigación sugiere que la patogénesis de AD es debida al suministro vascular alterado de nutrientes al cerebro. Se sugiere que los patrones de flujo hemodinámicos anormales, provocados por deformidades estructurales de los capilares, conducen a un transporte cerebral anormal de nutrientes. La producción de placas y de enmarañamientos neurofibrilares se puede producir a partir de anormalidades hipometabólicas provocadas por la cerebromicrovasculatura alterada (para un repaso, véase de la Torre (1997) Gerontology 43:26).

Se considera que la demencia vascular es la segunda causa más habitual de demencia en Europa y en los Estados Unidos de América. En Asia y en muchos países en desarrollo, es más habitual que la demencia del tipo Alzheimer. La demencia vascular describe un deterioro cognitivo global atribuido a los efectos acumulativos de la vasculopatía isquémica. Se pierden sucesivamente habilidades cognitivas discretas y múltiples, incluyendo la memoria, como resultado de los ataques cerebrovasculares focales (para un repaso reciente de la demencia vascular, véase: Konno et al (1997) Drugs and Aging, 11:361).

El tamoxifeno y análogos estrechamente relacionados se han descrito como compuestos terapéuticos potenciales para algunos trastornos neurológicos, como se describe en la Solicitud de Patente Alemana DE 4320896 y en la Solicitud de Patente Europea EP 797990, que describe el uso de tamoxifeno y análogos estrechamente relacionados para el tratamiento de la demencia, y en la Solicitud de Patente Europea EP 792638, que describe hidroxitamoxifeno y análogos estrechamente relacionados para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer. Los análogos del tamoxifeno también se han descrito para el tratamiento de trastornos cardiovasculares, incluyendo apoplejía, como se describe en la Publicación de Solicitud de Patente Internacional nº WO 96/40098.

Descripción

Emopamil es un agente neuroprotector estructuralmente relacionado con el antagonista de Ca^{2+} verapamil. Sin embargo, el verapamil es sólo un inhibidor de Ca^{2+} débil en el cerebro, debido al acceso limitado al SNC. El emopamil, pero no verapamil, se une a un sitio de alta afinidad que está presente en el retículo endoplásmico en un número de tejidos, incluyendo el cerebro y el hígado. Recientemente, se ha sugerido que la proteína de unión a emopamil (EBP) representa un sitio de unión antiisquémico (Moebius et al, (1993) Mol Pharmacol 43:139). Más recientemente, Silve et al. ha demostrado que la EBP muestra actividad de 100 8 - 1007 esterolisomerasa cuando se expresa en levadura (Silve et al (1996) J. Biol. Chem. 271:22434). La 100 8 - 1007 esterolisomerasa es una enzima post-escualénica, que participa en la conversión de lanosterol a colesterol.

Sorprendentemente, se ha encontrado que un compuesto de fórmula VIII se une con elevada afinidad a EPB, y que un compuesto de fórmula VIII inhibe la muerte celular neuronal en un número de ensayos de neurodegeneración. La presente invención también se basa en el descubrimiento sorprendente de que un compuesto de fórmula VIII inhibe la apoptosis neuronal y excitotoxicidad, mecanísticamente dos vías distintas para la muerte neuronal, y que, por lo tanto, los compuestos de la invención descritos aquí, y las sales farmacéuticamente aceptables, profármacos y solvatos de los mismos, pueden ser valiosos en el tratamiento y/o prevención de apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad relacionadas con trastornos neurológicos.

Según la presente invención, se proporciona un método para tratar o prevenir trastornos neurológicos, en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de Fórmula VIII.

1

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en la que

R_{1} es hidrógeno;

D es alquenileno C_{2-4};

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula:

-E-F-G-H

en la que:

E se selecciona de

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2

\newpage

F se selecciona de

3

G se selecciona de alquilo C_{1-6}, o de un enlace directo;

H se selecciona de hidrógeno, alcoxi C_{1-4}, arilo, heteroarilo, carbociclilo, en los que el arilo, heteroarilo o carbociclilo pueden estar opcionalmente sustituidos (en un átomo de carbono variable) con hasta 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, amino, N-alquil C_{1-4}-amino, NN-di-alquil C_{1-4}-amino, amino-alquilo C_{1-4}, o arilo;

R_{4} se selecciona de metilo o etilo;

R_{5} se selecciona de metilo, etilo o fenilo, o

R_{4} y R_{5}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo seleccionado de pirrolidina o piperidina;

R_{6} se selecciona de hidrógeno, alquilo C_{1-4} o halo;

R_{7} y R_{8} están unidos vía un átomo de azufre, vía -CH_{2}- o vía -CH_{2}CH_{2}-, para formar un anillo de siete miembros que contiene azufre, un anillo de siete miembros, o un anillo de ocho miembros, respectivamente;

R_{9} se selecciona de hidrógeno, metilo o etilo;

R_{10} se selecciona de hidrógeno, alquilo C_{1-4} o halo; y

n es 2 ó 3; o una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o solvato del mismo.

Los compuestos usados en los métodos de la invención pueden existir en configuración tanto cis como trans. Estas dos configuraciones son activas en los ensayos bioquímicos y celulares descritos más abajo. Esto se refleja en los valores para A y B en la Fórmula VIII.

En esta memoria descriptiva, el término genérico "alquilo" incluye grupos alquilo tanto de cadena lineal como ramificada. Sin embargo, las referencias a grupos alquilo individuales, tales como "propilo", son específicas para la versión de cadena lineal solamente, y las referencias a grupos alquilo de cadena ramificada individuales, tales como "isopropilo", son específicas para la versión de cadena ramificada solamente. Se aplica una convención análoga a otros términos genéricos.

El término "arilo" se refiere a fenilo o naftilo.

El término "heteroarilo" se refiere a un anillo mono- o bicíclico aromático de 5-10 miembros, que contiene hasta 5 heteroátomos seleccionados independientemente de nitrógeno, oxígeno o azufre, enlazado vía átomos de carbono anulares o átomos de nitrógeno anulares cuando esté permitido un enlace desde un nitrógeno, por ejemplo no es posible ningún enlace al nitrógeno de un anillo de piridina, pero es posible un enlace a través del nitrógeno en 1 de un anillo de pirazol. Los ejemplos de sistemas anulares heteroarílicos de 5 ó 6 miembros incluyen pirrol, furano, imidazol, triazol, pirazina, pirimidina, piridazina, piridina, isoxazol, oxazol, 1,2,4-oxadiazol, isotiazol, tiazol y tiofeno. Un sistema anular heteroarílico bicíclico de 9 ó 10 miembros es un sistema anular bicíclico aromático que comprende un anillo de 6 miembros condensado a un anillo de 5 miembros o a otro anillo de 6 miembros. Los ejemplos de sistemas anulares bicíclicos de 5/6 y 6/6 incluyen benzofurano, bencimidazol, benzotiofeno, benzotiazol, bencisotiazol, benzoxazol, bencisoxazol, indol, piridoimidazol, pirimidoimidazol, quinolina, isoquinolina, quinoxalina, quinazolina, ftalazina, cinnolina y naftiridina.

El término "heterociclilo" se refiere a un anillo mono- o bicíclico, saturado o parcialmente saturado, de 5-10 miembros, que contiene hasta 5 heteroátomos seleccionados de nitrógeno, oxígeno o azufre, enlazado vía átomos de carbono anulares o átomos de nitrógeno anulares. Ejemplos de "heterociclilo" incluyen pirrolinilo, pirrolidinilo, morfolinilo, piperidinilo, piperazinilo, dihidropiridinilo y dihidropirimidinilo.

El término "carbociclilo" se refiere a un anillo de carbono mono-, bi- o tricíclico, total o parcialmente saturado. Ejemplos de anillos carbocíclicos son ciclopentilo, ciclohexilo, biciclo-octano o adamantilo.

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El término "halo" se refiere a fluoro, cloro, bromo o yodo.

El término "carbamoilo" se refiere a -C(O)NH_{2}.

Ejemplos de alquilo (C_{1-4}) incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, sec-butilo y terc-butilo; ejemplos de alcoxi (C_{1-4}) incluyen metoxi, etoxi y propoxi; ejemplos de N-alquil (C_{1-4})-carbamoilo incluyen metilaminocarbonilo, etilaminocarbonilo, propilaminocarbonilo, isopropilaminocarbonilo, sec-butilaminocarbonilo y terc-butilaminocarbonilo; ejemplos de NN-di-alquil (C_{1-4})-carbamoilo incluyen di-metilaminocarbonilo, di-etilaminocarbonilo y N-etil-N-metil-
aminocarbonilo; ejemplos de alquenileno (C_{1-4}) incluyen propenileno y 2-butenileno, o

4

Ejemplos de alquinileno (C_{1-4}) incluyen:

5

Lo más preferible, D es 2-propenileno.

Los valores convenientes para E

6

Preferentemente,

7

Lo más preferible,

8

Los valores convenientes para F son

9

o un enlace directo;

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Preferentemente, un enlace directo.

Los valores convenientes para G son etileno, metileno, propileno, 1,1-dimetiletileno (en los que el carbono 1 está unido a F), o un enlace directo. Preferentemente, metileno, 1,1-dimetiletileno o un enlace directo. Más preferentemente, 1,1-dimetiletileno o un enlace directo.

Los valores convenientes para sustituyentes sobre un anillo arilo, heteroarilo o carbociclilo en H son alquilo C_{1-4}, halo, amino o -alquil C_{1-4}-amino. Preferentemente, alquilo C_{1-4} o amino. Lo más preferible, amino.

Preferentemente, R_{4} y R_{5} representan cada uno metilo; cada uno representa etilo; R_{4} es metilo y R_{5} es fenilo; o R_{4} y R_{5} forman juntos un anillo pirrolidino o piperidino. Más preferentemente, R_{4} y R_{5} representan cada uno metilo; o R_{5} y R_{5} representan juntos un anillo pirrolidino; especialmente, R_{4} y R_{5} representan cada uno metilo, o juntos representan un anillo pirrolidino.

Los valores convenientes para R_{6} son alquilo C_{1-4} y halo. Más preferentemente, cloro, fluoro o alquilo C_{1-4}. Preferiblemente, cloro, fluoro o etilo. Lo más preferible, etilo o fluoro.

Los valores convenientes para R_{9} son hidrógeno o etilo. Lo más preferible, hidrógeno.

Los valores convenientes para R_{10} son hidrógeno, metilo, etilo o halo. Preferentemente, hidrógeno o halo. Lo más preferible, cloro.

Un grupo preferido de compuestos para cualquier característica de la invención incluye un compuesto de fórmula VIII, en la que:

R_{1} es hidrógeno; y

D es alquenileno C_{1-4}, preferentemente 2-propenileno.

R_{1} es hidrógeno;

D es alquenileno C_{1-4}, preferentemente 2-propenileno.

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H.

R_{4} es metilo o etilo, R_{5} es metilo, etilo o fenilo, o R_{4} y R_{5} forman juntos pirrolidina o piperidina;

R_{6} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} o halo;

R_{7} y R_{8} son ambos hidrógeno; y

R_{9} es hidrógeno, metilo o etilo.

R_{1} es hidrógeno;

D es alquenileno C_{1-4}, preferentemente 2-propenileno.

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H.

R_{6} es hidrógeno, alquilo C_{1-4} o halo;

R_{7} y R_{8} están unidos vía un átomo de azufre, vía -CH_{2}- o vía -C_{2}H_{4}- para formar un anillo de siete miembros que contiene azufre, un anillo de siete miembros, o un anillo de ocho miembros, respectivamente; y

R_{9} es hidrógeno, metilo o etilo.

Un grupo preferido adicional de compuestos para cualquier característica de la invención incluye un compuesto de fórmula VIII, en la que:

R_{1} es hidrógeno; y

R_{4} y R_{5} forman juntos pirrolidina o piperidina.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

R_{4} y R_{5} forman juntos pirrolidina o piperidina; y

R_{7} y R_{8} son ambos hidrógeno.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

R_{4} y R_{5} juntos forman pirrolidina o piperidina; y

R_{7} y R_{8} están unidos vía un átomo de azufre, vía -CH_{2}- o vía -C_{2}H_{4}- para formar un anillo de siete miembros que contiene azufre, un anillo de siete miembros, o un anillo de ocho miembros, respectivamente.

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

E es

10

F es un enlace directo;

G es alquilo C_{1-4}; y

H es hidrógeno.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

E es

11

F es un enlace directo;

G es alquilo C_{1-4};

H es hidrógeno; y

R_{7} y R_{8} son ambos hidrógeno.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

E es

12

F es un enlace directo;

G es alquilo C_{1-4};

H es hidrógeno; y

R_{4} es metilo o etilo; y

R_{5} es fenilo.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

R_{4} es metilo o etilo;

R_{5} es fenilo; y

R_{7} y R_{8} son ambos hidrógeno.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

R_{4} es alquilo C_{1-4};

R_{5} es fenilo; y

R_{6} es halo, preferentemente fluoro.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

R_{6} es halo, preferentemente fluoro; y

R_{7} y R_{8} son ambos hidrógeno.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

R_{6} es halo, preferentemente fluoro; y

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

E es

13

F es

14

G es alquilo C_{1-4}; y

H es fenilo.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

E es

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15

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F es

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16

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G es alquilo C_{1-4};

H es fenilo; y

R_{7} y R_{8} son ambos hidrógeno.

R_{1} es hidrógeno;

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula -E-F-G-H;

E es

or = o

C_{1-4}alkyl = alquilo C_{1-4}

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17

\newpage

F es

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G es alquilo C_{1-4};

H es fenilo; y

Un grupo preferido adicional de compuestos de la invención incluye un compuesto de Fórmula VIII, en la que:

R_{1} se selecciona de hidrógeno;

D es alquenileno C_{2-4};

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} se selecciona de hidrógeno, hidroxilo, alcoxi C_{1-4}, o de un grupo de la fórmula -E-F-G-H.

R_{4} y R_{5} representan cada uno alquilo C_{1-4}; R_{4} representa alquilo C_{1-4} y R_{5} representa fenilo; o R_{4} y R_{5} forman juntos un anillo pirrolidino;

R_{6} se selecciona de hidrógeno, alquilo C_{1-4} o halo;

R_{7} y R_{8} son ambos hidrógeno, o, cuando A tiene la Fórmula X, pueden estar unidos vía un átomo de azufre, vía -CH_{2}- o vía -C_{2}H_{4}- para formar un anillo de siete miembros que contiene azufre, un anillo de siete miembros, o un anillo de ocho miembros, respectivamente;

R_{9} es hidrógeno o alquilo C_{1-4}; y

R_{10} es hidrógeno.

o una sal farmacéuticamente acceptable, profármaco o solvato del mismo.

Otros compuestos preferidos para cualquier característica de la invención incluyen:

(1): 2-[(6-etil-11,12-dihidro-5-fenildibenzo[a,e]-cicloocten-2-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina;

(2): 4-[2-[2-(dimetilamino)etoxi]-6-etil-11,12-dihidrodibenzo[a,e]cicloocten-5-il-fenol;

(3): 2-[(10-etil-11-fenildibenzo[b,f]tiepin-3-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina;

(4): 4-[7-[2-(dimetilamino)etoxi]-11-etildibenzo[b,f]tiepin-10-il]-fenol; Más compuestos preferidos adicionales para cualquier característica de la invención incluyen:

(26): 2-[(10-(NN-dietilpropanamido)-11-fenildibenzo[b,f]tiepin-3-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina;

Los compuestos más preferidos para cualquier característica de la invención incluyen:

los compuestos para uso en cualquier característica de la invención pueden existir tanto en la configuración isómera (E) como (Z) que está relacionada con la proximidad de los grupos a lo largo del doble enlace en los compuestos de Fórmula VIII. Los compuestos de la invención son activos tanto en sus configuraciones (E) como (Z).

Según otro aspecto de la invención, se proporciona un compuesto seleccionado de:

(34): 2-[(10-(NN-dietilpropanamido)-11-fenildibenzo[b,f]tiepin-3-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina o sales, profármacos o solvatos del mismo.

Según otra característica de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, en asociación con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Según un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona un método para tratar o prevenir trastornos cognitivos, tales como enfermedad de Alzheimer, demencia vascular y demencia relacionada con la edad, en un mamífero de sangre caliente, tal como el hombre, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo.

En una característica adicional de la invención, se proporciona un método para tratar o prevenir la enfermedad de Alzheimer o la demencia vascular en un mamífero de sangre caliente, tal como el hombre, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo.

En una característica adicional de la invención, se proporciona un método para prevenir o inhibir la neurodegeneración inducida por isquemia, en un mamífero de sangre caliente, que comprende administrar un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo.

En una característica adicional de la invención, se proporciona un método para prevenir o inhibir la formación de placas de \beta-amiloide o enmarañamientos neurofibrilares en el cerebro, en un mamífero de sangre caliente, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo.

En una característica adicional de la invención, se proporciona un método para inhibir o prevenir la respuesta inflamatoria asociada con la enfermedad de Alzheimer, en un mamífero de sangre caliente, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo.

En una característica adicional de la invención, se proporciona un método para tratar apoplejía, trauma cerebral o lesión de la médula espinal, en un mamífero de sangre caliente, que comprende administrar una cantidad eficaz de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos neurológicos, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos cognitivos, tales como enfermedad de Alzheimer, demencia vascular o demencia relacionada con la edad, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para la fabricación de un medicamento para la prevención de, o para la inhibición de, la neurodegeneración inducida por isquemia, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para la fabricación de un medicamento para la prevención de, o para la inhibición de, la formación de placas de \beta-amiloide o enmarañamientos neurofibrilares en el cerebro, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para la fabricación de un medicamento para la prevención de, o para la inhibición de, la respuesta inflamatoria asociada con la enfermedad de Alzheimer, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de apoplejía, trauma cerebral o lesión de la médula espinal.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable, para la prevención o tratamiento de trastornos neurológicos, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable, para la prevención o tratamiento de trastornos cognitivos, tales como enfermedad de Alzheimer, demencia vascular o demencia relacionada con la edad, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable, para la prevención de, o para la inhibición de, neurodegeneración inducida por isquemia, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable, para la prevención de, o para la inhibición de, la formación de placas de \beta-amiloide o enmarañamientos neurofibrilares en el cerebro, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable, para la prevención de, o para la inhibición de, la respuesta inflamatoria asociada con la enfermedad de Alzheimer, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, en mezcla con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable, para el tratamiento de apoplejía, trauma cerebral o lesión de la médula espinal.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona un método para tratar o prevenir trastornos neurológicos relacionados con apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad, en un mamífero de sangre caliente, que comprende administrar a dicho animal de sangre caliente una cantidad eficaz de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o prevención de trastornos neurológicos relacionados con apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la actual invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención descrito aquí, o una sal farmacéuticamente aceptable, profármaco o solvato del mismo, para el prevención o tratamiento de trastornos neurológicos relacionados con apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad, en un mamífero de sangre caliente.

Según una característica adicional de la invención, se proporciona el uso de un compuesto, que tiene una elevada afinidad por la proteína de unión a emopamil y que inhibe la apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad neuronal, para el tratamiento o prevención de trastornos neurológicos.

Según una característica adicional de la invención, se proporciona el uso de un compuesto, que tiene una elevada afinidad por la proteína de unión a emopamil y que inhibe la apoptosis neuronal, para el tratamiento o prevención de trastornos neurológicos.

Según una característica adicional de la invención, se proporciona el uso de un compuesto, que tiene una elevada afinidad por la proteína de unión a emopamil y que inhibe la excitotoxicidad neuronal, para el tratamiento o prevención de trastornos neurológicos.

Los métodos de tratamiento, composiciones o medicamentos se pueden usar para tratar pacientes que muestran trastornos neurológicos, a fin de al menos aliviar los síntomas de tales trastornos, y/o para tratar pacientes profilácticamente, para evitar o inhibir el comienzo de trastornos neurológicos en pacientes que tienen susceptibilidad a desarrollar tales trastornos.

La expresión "trastornos neurológicos" incluye trastornos cognitivos, apoptosis neuronal, excitotoxicidad y/o trastornos que comprenden apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad como parte de su patología.

Tales "trastornos neurológicos" incluyen, pero no se limitan a, enfermedad de Alzheimer, demencia vascular y demencia relacionada con la edad, así como trauma cerebral, apoplejía, lesión de la médula espinal, esclerosis lateral amiotrófica (ALS), enfermedad de Parkinson, corea de Huntington, demencia relacionada con SIDA, neuropatías periféricas y degeneración macular.

La expresión "apoptosis neuronal y/o excitotoxicidad relacionadas con trastornos neurológicos", como se usa aquí significa trastornos neurológicos en los que están implicadas la apoptosis neuronal o la excitotoxicidad como un proceso patológico en dichos trastornos neurológicos, o tanto la apoptosis neuronal como la excitotoxicidad están implicadas como un proceso patológico en dichos trastornos neurológicos.

El término "tamoxifeno", como se usa aquí, incluye tamoxifeno y sus sales fisiológicamente compatibles, pero preferiblemente se usa para referirse a citrato de tamoxifeno.

La expresión "trastorno cognitivo" significa cualquier perturbación de la función normal relacionada con las actividades mentales asociadas con el pensamiento, aprendizaje y memoria, o cualquier proceso mediante el cual se adquiere conocimiento.

El término "inhibir" incluye su significado generalmente aceptado, que incluye prohibir, prevenir, restringir, y reducir, detener, o invertir la progresión, gravedad, o un síntoma o efecto resultante.

La expresión "cantidad eficaz" significa la cantidad de un compuesto necesaria para inhibir o prevenir un trastorno cognitivo tal como la enfermedad de Alzheimer o cualquiera de sus síntomas, inhibir o prevenir la neurodegeneración inducida por isquemia, inhibir o prevenir la neurotoxicidad mediada por el péptido beta-amiloide, o inhibir o prevenir la respuesta inflamatoria asociada con la enfermedad de Alzheimer, según sea el caso.

Generalmente, el compuesto se formula con excipientes, diluyentes o vehículos habituales, y se comprime en comprimidos, o se formula como elixires o disoluciones para la administración oral conveniente, o se administra mediante las vías intramuscular o intravenosa. Los compuestos se pueden administrar transdérmicamente, y se pueden formular como formas de dosificación de liberación sostenida, y similares.

Los procedimientos para producir los compuestos preferidos de la invención y otros análogos de tamoxifeno se detallan en las siguientes patentes: toremifeno (patente U.S. nº 5491173, patente U.S. nº 4996225), droloxifeno (patente U.S. nº 5047431), TAT 59 (patente U.S. nº 4897503) y yodoxifeno (patente U.S. nº 4839155).

Para la formación de compuestos usados en los métodos de la invención, en los que R_{7} y R_{8} están unidos vía un átomo de azufre, vía -CH_{2}- o vía -C_{2}H_{4}- para formar un anillo de siete miembros que contiene azufre, un anillo de siete miembros o un anillo de ocho miembros, respectivamente, y A tiene la Fórmula X, se usa un compuesto de Fórmula XI.

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en la que R_{1}' es hidrógeno, J es un grupo de la fórmula -S-, -CH_{2}- o -CH_{2}-CH_{2}-, y D y R_{6} son como se definen anteriormente. Para la síntesis de un compuesto de Fórmula XI, se dirige al lector a Acton et al [1983] J. Med Chem. 26, 1131-1137.

Un compuesto de fórmula XI se puede desmetilar como se describe anteriormente, y después se puede hacer reaccionar con compuestos de la fórmula general:

R_{4}R_{5}N-[CH_{2}]_{n}Cl

para formar un compuesto de Fórmula XII

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El compuesto de Fórmula XII se hace reaccionar adicionalmente mediante una reacción de Grignard, en un disolvente inerte, con un derivado de haluro de fenilmagnesio de la fórmula:

21

o con una especie de halobenceno organometálica de la fórmula:

22

en la que R_{2}' es hidrógeno, alquilo C_{1-4} o un grupo hidroxilo protegido, y R_{3}' es hidrógeno, un hidroxilo protegido o halo, para producir un compuesto de Fórmula XIII:

23

Para la formación de compuestos usados en los métodos de la invención, en los que R_{3} tiene la fórmula:

-E-F-G-H

y E se selecciona de:

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se puede acilar un compuesto de Fórmula VIII, en la que R_{3} es un hidroxilo, con un derivado acilante obtenido a partir de un ácido de la fórmula:

HOOC-E'-F-G-H

en la que E' es el grupo E sin el oxígeno ni el carboxilo a la izquierda del grupo, o, cuando E es un grupo de la fórmula:

25

se puede hacer reaccionar con un isocianato de la fórmula:

OCN-F-G-H

Los compuestos usados en los métodos de la invención, en los que R_{3} tiene la fórmula:

-E-F-G-H

y E se selecciona de:

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se pueden obtener a partir de un compuesto de Fórmula XIV, en la que A, B, D, R_{2}, R_{4}, R_{5}, R_{8} y R_{9} son como se definen aquí anteriormente.

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El químico experto en la técnica será capaz de sintetizar los derivados de ácido o de isocianato respectivos del grupo -E-F-G-H para usarlos en el acoplamiento a un compuesto de Fórmula VIII en la que R_{3} es un hidroxilo.

Para una guía general sobre grupos protectores, se le emplaza al lector a que se dirija a Protective Groups in Organic synthesis, 2ª Edición, de Green et al., publicado por John Wiley & Sons.

La presente invención se refiere a los compuestos de Fórmula VIII como se definen aquí anteriormente, así como a las sales de los mismos. Las sales para uso en composiciones farmacéuticas serán sales farmacéuticamente aceptables, pero otras sales pueden ser útiles en la producción de los compuestos de Fórmula I y sus sales farmacéuticamente aceptables. Una sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la Fórmula VIII es, por ejemplo, una sal de adición de ácidos de un compuesto de la Fórmula VIII que es suficientemente básico, por ejemplo, una sal de adición de ácidos con un ácido inorgánico u orgánico, tal como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, trifluoroacético, cítrico o maleico; o, por ejemplo, una sal de un compuesto de la Fórmula VIII que es suficientemente ácido, por ejemplo una sal de metal alcalino o alcalino-térreo, tal como una sal de calcio o de magnesio, o una sal de amonio, o una sal con una base orgánica tal como metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina o tris-(2-hidroxietil)amina.

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En la técnica se conocen diversas formas de profármacos. Para ejemplos de tales derivados de profármacos, véanse:

a): Design of Prodrugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) y Metods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, editado por K. Widder, et al. (Academic Press, 1985);

b): A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krogsgaard-Larsen y H. Bundgaard, capítulo 5 "Design and Application of Prodrugs", por H. Bundgaard, p. 113-191 (1991);

c): H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992);

d): H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); y

e): N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull, 32, 692 (1984).

Los ejemplos de tales profármacos se pueden usar para formar ésteres escindibles in vivo de un compuesto de la Fórmula (1). Un éster escindible in vivo de un compuesto de la Fórmula (1) que contiene un grupo carboxi es, por ejemplo, un éster farmacéuticamente aceptable que se escinde en el cuerpo del ser humano o del animal para producir el ácido progenitor. Los ésteres farmacéuticamente aceptables adecuados para carboxi incluyen los ésteres alcoxi(C_{1-6})metílicos, por ejemplo metoximetilo; ésteres alcanoil(C_{1-6})oximetílicos, por ejemplo pivaloiloximetilo; ésteres ftalidílicos; ésteres cicloalcoxi(C_{3-8})carboniloxi-alquílicos(C_{1-6}), por ejemplo 1-ciclohexilcarboniloxietilo; ésteres 1,3-dioxolan-2-ilmetílicos, por ejemplo 5-metil-1,3-dioxolan-2-ilmetilo; y ésteres alcoxi(C_{1-6})carboniloxietílicos, por ejemplo 1-metoxicarboniloxi-etilo; y se pueden formar en cualquier grupo carboxi en los compuestos de esta invención.

También se entenderá que ciertos compuestos de la presente invención pueden existir en formas solvatadas, por ejemplo hidratada, así como en formas no solvatadas. Se entenderá que la presente invención engloba todas las citadas formas solvatadas que poseen las propiedades de inhibir o prevenir trastornos cognitivos, inhibir o prevenir neurodegeneración inducida por isquemia, inhibir o prevenir la formación de placas de \beta-amiloide o enmarañamientos neurofibrilares en el cerebro, o inhibir o prevenir la respuesta inflamatoria asociada con la enfermedad de Alzheimer.

Las composiciones de la invención pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo, como comprimidos, tabletas, cápsulas duras o blandas, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, polvos o gránulos dispersables, jarabes o elixires), para uso tópico (por ejemplo, como cremas, ungüentos, geles, o suspensiones o disoluciones acuosas u oleosas), para administración mediante inhalación (por ejemplo, como un polvo finamente dividido o un aerosol líquido), para administración por insuflación (por ejemplo, como un polvo finamente dividido) o para administración parenteral (por ejemplo, como una disolución acuosa u oleosa estéril para dosificación intravenosa, subcutánea, intramuscular, o como un supositorio para dosificación rectal).

Las composiciones de la invención se pueden obtener mediante procedimientos convencionales usando excipientes farmacéuticos convencionales, bien conocidos en la técnica. De este modo, las composiciones destinadas a uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o más agentes colorantes, edulcorantes, saborizantes y/o conservantes.

Los excipientes adecuados farmacéuticamente aceptables para una formulación en comprimidos incluyen, por ejemplo, diluyentes inertes tales como lactosa, carbonato de sodio, fosfato de calcio o carbonato de calcio, agentes granulantes o disgregantes tales como almidón de maíz o ácido algínico; agentes aglutinantes tales como almidón; agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, ácido esteárico o talco; agentes conservantes tales como p-hidroxibenzoato de etilo o de propilo, y antioxidantes, tales como ácido ascórbico. Las formulaciones en comprimidos pueden estar recubiertas o no recubiertas, ya sea para modificar su desintegración y la absorción subsiguiente del ingrediente activo en el tubo digestivo, o para mejorar su estabilidad y/o aspecto, usando en cualquiera de los casos agentes de revestimiento convencionales y procedimientos bien conocidos en la técnica.

Las composiciones para uso oral pueden estar en forma de cápsulas de gelatina duras, en las que el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blandas, en las que el ingrediente se mezcla con agua o un aceite, tal como aceite de cacahuete, parafina líquida, o aceite de oliva.

Las suspensiones acuosas generalmente contienen el ingrediente activo en forma de polvo fino, junto con uno o más agentes de suspensión, tales como carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma arábiga; agentes dispersantes o humectantes, tales como lecitina o productos de condensación de un óxido de alquileno con ácidos grasos (por ejemplo estearato de polioxietileno), o productos de condensación de óxido de etileno con alcoholes alifáticos de cadena larga, por ejemplo heptadecaetilenoxicetanol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos con un hexitol, tales como monooleato de polioxietilensorbitol, o productos de condensación de óxido de etileno con ésteres parciales derivados de ácidos grasos con anhídridos de hexitol, por ejemplo monooleato de polietilensorbitán. Las suspensiones acuosas también pueden contener uno o más conservantes (tales como p-hidroxibenzoato de etilo o de propilo), antioxidantes (tales como ácido ascórbico), agentes colorantes, agentes aromatizantes, y/o agentes edulcorantes (tales como sacarosa, sacarina o aspartamo).

Las suspensiones oleosas se pueden formular suspendiendo el ingrediente activo en un aceite vegetal (tal como aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco), o en un aceite mineral (tal como parafina líquida). Las suspensiones oleosas también pueden contener un agente espesante, tal como cera de abeja, parafina dura o alcohol cetílico. Los agentes edulcorantes, tales como los expuestos anteriormente, y los agentes aromatizantes se pueden añadir para proporcionar una preparación oral de sabor agradable. Estas composiciones se pueden conservar mediante la adición de un antioxidante, tal como ácido ascórbico.

Los polvos y gránulos dispersables, adecuados para la preparación de una suspensión acuosa mediante adición de agua, generalmente contienen el ingrediente activo junto con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión, y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados se ejemplifican mediante los ya mencionados anteriormente. También pueden estar presentes excipientes adicionales tales como agentes edulcorantes, aromatizantes y colorantes.

Las composiciones farmacéuticas de la invención también pueden estar en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como aceite de oliva o aceite de cacahuete, o un aceite mineral, tal como por ejemplo parafina líquida, o una mezcla de cualquiera de estos. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser, por ejemplo, gomas de origen natural tales como goma arábiga o goma de tragacanto, fosfátidos de origen natural tales como haba de soja, lecitina, y ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos con anhídridos de hexitol (por ejemplo monooleato de sorbitán), y productos de condensación de los mencionados ésteres parciales con óxido de etileno, tales como monooleato de polioxietilensorbitán. Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes, aromatizantes y conservantes.

Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes, tales como glicerina, propilenglicol, sorbitol, aspartamo o sacarosa, y también pueden contener un agente emoliente, un conservante, un aromatizante y/o un colorante.

Las composiciones farmacéuticas también pueden estar en forma de una suspensión acuosa u oleosa estéril inyectable, la cual se puede formular según procedimientos conocidos usando uno o más de los agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión apropiados, que se han mencionado anteriormente. Una preparación inyectable estéril también puede ser una disolución o suspensión inyectable estéril, en un diluyente o disolvente no tóxico, parenteralmente aceptable, por ejemplo una disolución en 1,3-butanodiol.

Las formulaciones de supositorios se pueden preparar mezclando el ingrediente activo con un excipiente no irritante adecuado, el cual es sólido a temperaturas normales, pero es líquido a la temperatura rectal y por lo tanto se fundirá en el recto para liberar el fármaco. Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, manteca de cacao y polietilenglicoles.

Las formulaciones tópicas, tales como cremas, ungüentos, geles y disoluciones o suspensiones acuosas u oleosas, se pueden obtener generalmente formulando un ingrediente activo con un vehículo o diluyente convencional, tópicamente aceptable, usando procedimientos convencionales bien conocidos en la técnica.

Las composiciones para la administración mediante insuflamiento pueden estar en forma de un polvo finamente dividido que contiene partículas de diámetro medio de, por ejemplo, 30 \mum o menos, comprendiendo el propio polvo el ingrediente activo solo o diluido con uno o más vehículos fisiológicamente aceptables, tal como lactosa. El polvo para insuflamiento se retiene entonces convenientemente en una cápsula que contiene, por ejemplo, 1 a 50 mg de ingrediente activo para uso con un dispositivo Turboinhaler, tal como se usa para el insuflamiento del agente conocido cromoglicato sódico.

Las composiciones para la administración mediante inhalación pueden estar en forma de un aerosol a presión convencional, montado para administrar el ingrediente activo ya sea como un aerosol que contiene un sólido finamente dividido o como gotitas líquidas. Se pueden usar propelentes convencionales de aerosoles, tales como hidrocarburos fluorados volátiles o hidrocarburos, y el dispositivo de aerosol se monta convenientemente para administrar una cantidad medida de ingrediente activo.

Frecuentemente, será deseable o necesario introducir las composiciones farmacéuticas directa o indirectamente al cerebro. Las técnicas directas implican habitualmente la colocación de un catéter de suministro del fármaco en el sistema ventricular del hospedante, para atravesar la barrera hematoencefálica. Las técnicas indirectas, que se prefieren generalmente, implican formular las composiciones para proporcionar una modificación del fármaco mediante la conversión de los fármacos hidrófilos en fármacos solubles en lípidos. La modificación generalmente se logra bloqueando los grupos hidroxilo, carboxilo, y aminas primarias presentes en el fármaco, para hacer que el fármaco sea más soluble en lípidos y susceptible al transporte a través de la barrera hematoencefálica. Como alternativa, el suministro de fármacos hidrófilos se puede potenciar mediante infusión intraarterial de disoluciones hipertónicas que pueden abrir transitoriamente la barrera hematoencefálica.

Para una información adicional sobre la formulación, refiérase el lector al Capítulo 25.2 en el Volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990.

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La cantidad de ingrediente activo que se combina con uno o más excipientes para producir una forma de dosificación individual variará necesariamente dependiendo del hospedante tratado y de la ruta particular de administración. Por ejemplo, una formulación destinada a la administración oral a seres humanos generalmente contendrá, por ejemplo, de 0,5 mg a 2 g de ingrediente activo formulado con una cantidad apropiada y conveniente de excipientes, que puede variar de alrededor de 5 hasta alrededor de 98 por ciento en peso de la composición total. Las formas unitarias de dosificación generalmente contendrán alrededor de 1 mg hasta alrededor de 500 mg de un ingrediente activo. Para una información adicional sobre rutas de administración y regímenes de dosificación, refiérase el lector al Capítulo 25.3 en el Volumen 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990.

La cantidad de la dosis para fines terapéuticos o profilácticos, de un compuesto de Fórmula VIII, naturalmente variará según la naturaleza y gravedad de las afecciones, de la edad y del sexo del animal o del paciente, y de la ruta de administración, según principios bien conocidos de medicina.

Al usar un compuesto de la Fórmula VIII con fines terapéuticos o profilácticos, generalmente se administrará de forma que se reciba una dosis diaria en el intervalo de, por ejemplo, 0,1 mg a 1000 mg por día, dada, si se requiere, en dosis divididas. En general, se administrarán dosis más bajas cuando se emplee una ruta parenteral. De este modo, por ejemplo, para la administración intravenosa, generalmente se usará una dosis en el intervalo de, por ejemplo, 0,5 mg a 30 mg por kg de peso corporal. De forma similar, para la administración mediante inhalación, se usará una dosis en el intervalo de, por ejemplo, 0,5 mg a 25 mg por kg de peso corporal. Sin embargo, se prefiere la administración oral, particularmente en forma de comprimido. Las formas de dosificación unitarias contendrán alrededor de 1 mg hasta 500 mg de un compuesto de esta invención; más típicamente, la forma de dosificación contendrá entre 1 mg y 50 mg. Los compuestos de Fórmula VIII se administran preferiblemente en forma oral, convenientemente en una dosis de 10-40 mg al día.

Los compuestos de esta invención se pueden usar en combinación con otros fármacos y terapias usados en el tratamiento o la prevención de trastornos cognitivos tales como enfermedad de Alzheimer, demencia vascular o, menos preferiblemente, demencia relacionada con la edad.

Si se formula como una dosis fija, tales productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de dosificación descrito aquí y el otro agente farmacéuticamente activo dentro de su intervalo de dosificación aceptado. Se contempla el uso secuencial cuando sea inapropiada una formulación de combinación.

La invención se describirá ahora con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.

El desplazamiento del ensayo de unión de ^{3}H-emopamil, el modelo de muerte neuronal inducida por NMDA, y la inhibición de la apoptosis en células PC 12 son todos ellos ensayos/modelos estándares reconocidos en la comunidad médica, de gran eficacia.

Se ha demostrado que los compuestos que se unen con afinidad elevada a la proteína de unión a 3H-emopamil son neuroprotectores en modelos de animales de isquemia cerebral. Puesto que se ha demostrado que la proteína de unión a emopamil es el homólogo mamífero de la delta-8, delta-7 esterol isomerasa, se ha sugerido que el mecanismo neuroprotector de los ligandos del sitio de unión con alta afinidad a 3H-emopamil resulta de la inhibición del metabolismo de novo del colesterol. La inhibición del metabolismo del colesterol puede alterar el procesamiento de la proteína precursora amiloide de una manera que sería de esperar que retrasase la progresión de la patofisiología de la enfermedad de Alzheimer. Por lo tanto, sería de esperar que los ligandos del sitio de unión con alta afinidad a 3H-emopamil, que inhiben la síntesis de novo del colesterol, alivien la neurodegeneración inducida por isquemia, e inhiban la progresión patofisiológica de la enfermedad de Alzheimer. [Véase: Moebius et al., Trends Pharmacol Sci 18:67-70, 1997; Racchi et al., Biochem J 322:893-898, 1997; Silve et al., Mol. Cell. Biol. 16:2719-2727, 1996].

La muerte neuronal inducida por NMDA es un modelo de excitotoxicidad que es un reflejo de la muerte inducida por necrosis. Durante los sucesos isquémicos cerebrales, existe una liberación excesiva de glutamato, el agonista del receptor de NMDA endógeno, lo que da como resultado la muerte celular neuronal debido predominantemente a mecanismos necróticos. Los compuestos que inhiben la función del receptor de NMDA son activos en modelos experimentales de isquemia que se piensa son un fiel reflejo de la situación clínica, y un número de estos compuestos se encuentra en evaluación de ensayo clínico para el tratamiento de apoplejía. Los sucesos isquémicos recidivantes son la causa principal de demencia en la demencia vascular, y la neurodegeneración inducida por isquemia exacerba enormemente el deterioro cognitivo que está asociado con la patofisiología de la enfermedad de Alzheimer. Por lo tanto, sería de esperar que los fármacos que inhiban la función del receptor de NMDA preserven las neuronas en la apoplejía, y eviten el deterioro cognitivo, inducido por isquemia, que se observa en la demencia vascular y en la enfermedad de Alzheimer. [véase: Gotti et al., Brain Research 522:290-307, 1990; Gwag et al., Neuroscience 68:615-619, 1995; Koroshetz y Moskowitz, Trends in Pharmacological Sci. 17:227-233, 1996; Snowdon et al., JAMA, 277:813-817, 1997].

La eliminación del factor de crecimiento de nervios, en células PC 12 diferenciadas, es un modelo de muerte neuronal inducida por apoptosis. La neurodegeneración que resulta de mecanismos apoptóticos se ha visto implicada en un número de procesos mórbidos, incluyendo apoplejía, lesión traumática del cerebro, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica, demencia vascular, demencia relacionada con SIDA y degeneración macular. Por lo tanto, sería de esperar que los compuestos que son activos inhibiendo la apoptosis en células PC 12 alivien la muerte neuronal asociada con apoptosis en estos trastornos neurológicos. [Véase: Barinaga, Science 281:1303-1304, 1998; Kusiak et al., Molecular and Chemical Neuropathology 28:153-162, 1996; Spence et al., Exp. Opin. Ther. Patents 6:345-366, 1996; Charriaut-Marlangue et al., TINS 19:109-114, 1996; von Bartheld, Histology and Histopathology, 13:437-459, 1998; Hara et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA 94:2007-2012, 1997; Yakovlev, et al., J. Neuroscience 17:7415-7424, 1997].

Se cree que la muerte celular neuronal en la apoplejía, en la enfermedad de Alzheimer, en la enfermedad de Parkinson y en otros trastornos neurológicos se produce como resultado de mecanismos patofisiológicos asociados tanto con apoptosis como con necrosis, y puede depender de la gravedad de la lesión neuronal. Mientras que sería de esperar que los enfoques farmacológicos que inhiben la necrosis o la apoptosis ofreciesen cierto beneficio, este beneficio puede ser limitado debido a la inhibición incompleta de las vías que conducen a la muerte celular neuronal. Por ejemplo, los factores neurotróficos que inhiben la apoptosis neuronal exacerban la excitotoxicidad inducida por la activación del receptor de NMDA. De este modo, es posible que, evitando la apoptosis, se pueda producir en último lugar un aumento de la muerte celular necrótica. Por lo tanto, los enfoques neuroprotectores óptimos pueden ser aquellos que puedan inhibir tanto la apoptosis como la necrosis. A este respecto, se ha demostrado que los compuestos de Fórmula VIII, especialmente citrato de tamoxifeno, inhiben tanto la apoptosis como la necrosis, y por lo tanto han mostrado un beneficio terapéutico mayor que los enfoques que sólo inhiben una vía para la muerte celular neuronal, por ejemplo inhibidores de los receptores de NMDA que sólo inhiben la necrosis, o factores neurotróficos que sólo inhiben la apoptosis. [Véase: Ferrer et al., Acta Neuropathol. (Ber) 90:504-510, 1995; Choi, Current Opinion in Neurobiology 6:667-672, 1996; Koh et al., Science 268:573-575, 1995].

Ensayo 1

Desplazamiento de la unión a ^{3}H-emopamil en membranas hepáticas de cobaya

El método del desplazamiento de unión a ^{3}H-emopamil fue una modificación de Zech et al (1991) Eur. J. Pharm. 208:119-130.

Las membranas hepáticas de cobaya se prepararon según lo siguiente: se sacrificaron cobayas macho mediante asfixia con CO_{2} con hielo seco. Los hígados se cortaron rápidamente y se pesaron, y se aclararon en tampón de preparación de membranas que contiene 10 mM de Hepes, 1 mM de Tris-EDTA base, 250 mM de sacarosa, pH 7,4. Los hígados se homogeneizaron cortándolos en pedazitos, en un volumen de 10 veces, con un homogeneizador de Teflón-vidrio accionado por un motor, con tres golpes sobre hielo. El homogenado se centrifugó a 1000 x g en un rotor SS34 durante 5 minutos a 4ºC. El sobrenadante se filtró a través de 4 capas de gasa, y después se centrifugó a 8000 x g durante 10 minutos a 4ºC. Este sobrenadante resultante se centrifugó a 40.000 x g durante 15 minutos a 4ºC. El pelete resultante se resuspendió en tampón de ensayo, y se centrifugó nuevamente a 40.000 x g durante 15 minutos a 4ºC. Este pelete se resuspendió en tampón de ensayo (2,5 veces con respecto al peso húmedo original), y se homogeneizó con un golpe con el homogeneizador de Teflón-vidrio. Se almacenaron alícuotas de 1 ml a -70ºC.

El ensayo de desplazamiento se realizó según lo siguiente: la mezcla de reacción contenía:

: tampón de ensayo: 10 mM de Tris-HCl, 0,1 mM de fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF), 0,2% de seroalbúmina bovina (BSA), pH 7,4 a 4ºC.

: Radioligando: 0,96 nM de (-)-3H-emopamil (Amersham).

: Membranas hepáticas de cobaya: 40 mg/ml de peso húmedo original.

: Compuestos: 1-300 nM.

: Volumen total: 500 \mul.

Esta mezcla se incubó durante 60 minutos a 37ºC. La incubación se terminó filtrando con una cosechadora de células Brandel sobre filtros de GF/C Whatman que se habían empapado durante al menos 120 minutos en 0,3% de polietilenamina (PEI), y se lavó tres veces con 5 ml de tampón de lavado que contiene 10 mM de Tris-HCl, 10 mM de MgCl_{2}, 0,2% de BSA, pH 7,4 a 25ºC. La unión específica se definió con 10 \muM de emopamil. En general, tuvieron interés los compuestos con una IC_{50} por debajo de 1 \muM en este ensayo.

Ensayo 2

Inhibición de muerte inducida por NMDA de neuronas corticales de ratón en cultivo de células primarias

Se preparó una capa alimentadora glial a partir del primer o segundo día después del nacimiento de los ratones. Las cortezas se diseccionaron en una disolución salina equilibrada, libre de Ca^{2+}/Mg^{2+}, se trituraron hasta obtener un picadillo, se incubaron en lote de medio (MS; MEM de GIBCO suplementado con bicarbonato, glucosa y glutamina) que contiene tripsina, durante 30 minutos a 37ºC, y se centrifugaron a 1500 g durante 5 minutos para producir un pelete celular. El pelete se resuspendió en medio de cultivo de placas (MS suplementado con suero de caballo y suero fetal de ternero), y se trituró con una pipeta Pasteur de vidrio. Las células se colocaron en placas en cápsulas de cultivo de tejido Falcon Primaria de 24 pocillos, a una densidad de 0,5 semiesferas por placa. Las cápsulas se habían revestido toda la noche con 10 mg/ml de laminina de ratón y 25 mg/ml de polilisina, y después se lavaron tres veces con agua. La capa de alimentación de neurogliocitos se mantuvo en una atmósfera humidificada de 5% de CO_{2}/95% de aire, a 37ºC durante dos semanas.

Las cortezas preparadas usando métodos similares, procedentes de ratones embriónicos de 16 días (de las cuales sólo sobrevivieron en cultivo las neuronas), se cultivaron en placas sobre la capa de alimentación de neurogliocitos al final de dos semanas, a una densidad de 350.000 células por pocillo. Seis días después, los cultivos neurogliales/neuronales mixtos se trataron con 10 mM de arabinósido de citosina durante 48 horas para evitar la mitosis posterior, y después se alimentaron con medios recientes que contienen 3 mM de citrato de tamoxifeno. Los medios se intercambiaron con medios que contienen tamoxifeno reciente, después de tres días. Después de seis días de tratamiento con el fármaco, los cultivos se lavaron tres veces con disolución salina de control tamponada con HEPES (HCSS en mM: 120 NaCl, 5,4 KCl, 0,8 MgCl_{2}, 2,6 CaCl_{2}, 15 glucosa, 20 HEPES, 10 NaOH, pH 7,4), se trataron con 300 \muM de NMDA y 10 mM de glicina durante cinco minutos en HCSS, se lavaron nuevamente tres veces con HCSS, y después se devolvieron a la incubadora en MS. Veinticuatro horas después, se retiraron las muestras de los medios de cultivo celular a partir de cada pocillo, y se ensayaron para determinar la muerte celular midiendo la actividad de lactatodeshidrogenasa (LDH) en el medio de crecimiento.

La actividad de LDH se midió según lo siguiente: se mezclaron 50 ml de medios de cultivo celular procedentes de cada pocillo con 200 ml de 0,1 M de KH_{2}PO_{4} que contiene 30 mg de NADH, en una placa de microtitulación de 96 pocillos. Después de 10 minutos a temperatura ambiente, se añadieron 30 ml de 2,4 mM de piruvato sódico, y la absorbancia de esta disolución, a 340 nm, se midió inmediatamente a intervalos de 15 segundos durante aproximadamente 6 minutos, usando un lector de placas Molecular Devices Spectromax 250. La NADH absorbe luz a 340 nm. La velocidad de caída de la absorción a 340 nm se ajustó mediante regresión lineal para derivar V_{max}, que es una función lineal de la concentración de LDH. Los datos de V_{max} se convirtieron a porcentaje de muerte neuronal normalizando a medidas de V_{max} de medios de cultivo celular procedentes de células no expuestas a NMDA (sin muerte neuronal) y células expuestas a 300 nM de NMDA durante 24 horas (muerte neuronal completa con apenas neurogliocitos), según la fórmula (DV_{max} - CV_{max})/(NV_{max} - CV_{max}) X 100, en la que DV_{max}, CV_{max}, NV_{max} son medidas de V_{max} procedentes de cultivos tratados con fármaco expuestos a NMDA durante 5 minutos, Cultivos sin tratar, y cultivos expuestos a NMDA durante 24 h, respectivamente. Los experimentos individuales se repitieron por cuadruplicado.

Ensayo 3

Inhibición de la apoptosis en células PC 12 inducida por eliminación de NGF

Se hicieron crecer células PC 12 de rata (número de acceso de ATCC CRL-1721) en tampón de RPMIO-1640 que contiene 10% de suero fetal bovino (FBS) inactivado por calor y 1% de L-glutamina (Gibco). Las células se cultivaron en placas Falcon de colágeno I de 100 mm (Becton Dickinson), a una densidad de \sim1 x 10^{6}-2 x 10^{6}, y se hicieron pasar cada día a una relación de 1:10 (las células se tripsinizaron y se centrifugaron a 1000 rpm durante 5 min. Las células se resuspendieron y se colocaron en placas a una densidad de 1-2 x 10^{6} células). Se disolvió tamoxifeno en DMSO, a una concentración de 10 mM. Se obtuvieron diluciones subsiguientes en medio de crecimiento de células PC 12, el cual contiene 1% de FBS.

Diferenciación inducida por NGF y eliminación: las células PC 12 se diferenciaron en un fenotipo neuronal en RPMI 1640 que contiene 1% de FBS y 50 ng/ml de NGF (2.5S, Cat.#N6009, Sigma). La diferenciación de las células PC 12 en el fenotipo neuronal (extensión neurítica) tomó 9-14 días. La eliminación del factor de crecimiento de nervios (NGF) se logró lavando las células una vez con medio libre de NGF. Las células se sometieron entonces a tripsina, se centrifugaron y se colocaron en placas de 96 pocillos, a una densidad de \sim1 x 10^{4}/pocillo. A esto le siguió la incubación en medio libre de NGF que contiene anticuerpo de conejo (anti-NGF) frente a 2.5sNGF (Sigma catalog# N6655) a una dilución de 1:400. Los fármacos se añadieron inmediatamente después de la eliminación del NGF. Las células se incubaron con o sin fármaco durante 3 horas, y se cosecharon mediante tripsinización. Después de 3 h, las células se hicieron girar a 1000 rpm durante 10 min., y se desechó el sobrenadante. Para cada ensayo, se usaron 1 x 10^{6} células (placa de 96 pocillos).

Las células se cosecharon a diversos tiempos después del procedimiento de eliminación del NGF, para determinar el transcurso del tiempo de la muerte celular. Se realizaron, como se describe más abajo, ensayos de apoptosis (ELISA de Detección de Muerte Celular) y ensayos de necrosis celular (LDH). Los compuestos se usaron a diversas concentraciones, y el grado de apoptosis que se produjo en presencia de los compuestos se expresó como un porcentaje con relación a cultivos de control que se expusieron sólo a vehículo. De este modo, 100% fue equivalente a ninguna inhibición de la apoptosis, y 0% fue equivalente a la inhibición total de la apoptosis.

Ensayo 4

Inhibición de apoptosis en células PC 12 inducida por b-amiloide

Se cultivaron células PC 12 de rata como se describe anteriormente. Se agregó toda la noche, a temperatura ambiente antes del uso, b-amiloide (1-42) como una disolución madre acuosa 1 mM (Bachem (Cat# H-1368)). La agregación de amiloide se produjo espontáneamente en estas condiciones. En experimentos iniciales, se examinó una relación de dosis y respuesta, y se determinó que 100 nM de b-amiloide, añadido a células PC 12 diferenciadas por NGF (en presencia de NGF), durante 3 h, dio como resultado la apoptosis.

Las células se tripsinizaron, se centrifugaron a 1000 rpm durante 5 min., y se colocaron en placas a 1 x 10^{4} células/pocillo. 100 nM de b-amiloide agregado se añadió a células PC 12 diferenciadas mediante NGF. Las células se cosecharon mediante tripsinización a 3 h después de la adición de b-amiloide.

La apoptosis se midió usando el kit de ELISA de Muerte Celular de Boehringer-Mannheim, como se describe más abajo.

Ensayo 5

Detección de muerte celular (apoptosis) mediante ELISA para células PC 12

La muerte celular se midió usando un ELISA para la Detección de Muerte Celular (Boehringer-Mannheim Cat# 1774425), según las instrucciones del fabricante. El ELISA es un inmunoensayo enzimático fotométrico que determina la cantidad de fragmentos de ADN asociados con histona citoplásmica, después de la muerte celular inducida.

Los peletes celulares de cada ensayo se resuspendieron en 200 \mul de tampón de lisis (del kit). La muestra se colocó en una placa de microtitulación revestida con estreptavidina. Se añadió una mezcla de anti-histona-biotina y anti-ADN peroxidasa, y se incubó durante 2 h adicionales. Los anticuerpos no unidos se eliminaron mediante una etapa de lavado. La cantidad de nucleosomas se cuantificó mediante la peroxidasa retenida en el inmunocomplejo. La peroxidasa se determinó colorimétricamente con 2,2'-azino-di[3-etilbenztiazolin-sulfonato] (ABTS), como sustrato.

Ensayo 6

Ensayo de LDH para determinar necrosis en células PC 12

Se midió LDH usando un kit para la muerte celular disponible comercialmente (Boehringer-Mannheim; kit LDH, Cat. # 1 644 793. Una modificación del procedimiento descrito por Koh and Choi, J. Neurosci. Methods 20:83-90, 1987). En el Ensayo 2 se describe un método alternativo.

Como se establece anteriormente, se usaron células PC 12 diferenciadas (50 ng/ml de NGF durante 12 días) a 10.000 células/pocillo. Para determinar la actividad de LDH, se añadieron 100 \mul del sobrenadante procedente de las células PC 12 a la mezcla de reacción que consiste en disolución I [catalizador] y en la disolución II [colorante], y se incubó durante 30 min. a RT (temperatura ambiente). La actividad de LDH se midió a 490 nm.

Aunque las propiedades farmacológicos de los compuesto de Fórmula VIII varían con el cambio estructural como se sospechaba, en general tienen una afinidad por la proteína de unión a emopamil entre 0,1 nM y 1 \muM, y en la inhibición de la apoptosis, en el ensayo de células PC 12, se midieron valores entre 0 y 75%. Por ejemplo, el éster del ácido (E)-2,2-dimetil-4-[1-[4-[2-(dimetilamino)etoxi]fenil]-2-fenil-1-butenil]fenilpropanoico tiene una IC_{50} de 75 nM para la proteína de unión a emopamil, y un porcentaje de 41% en el ensayo de PC 12.

La invención se ilustrará ahora con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes:

la RMN ^{1}H se registró usando CDCl_{3} o Me_{2}SO-d_{6}, con Me_{4}Si como patrón interno. Los desplazamientos químicos están en \delta (ppm), y las multiplicidades de los picos se denominan según lo siguiente: s, singlete; d, doblete; t, triplete; m, multiplete.

Ejemplo 1

2-[(6-Etil-11,12-dihidro-5-fenildibenzo[a,e]cicloocten-2-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina, preparada como se describe en J. Med. Chem. (1983), 26(8), 1131-7.

Ejemplo 2

4-[2-[2-(Dimetilamino)etoxi]-6-etil-11,12-dihidrodibenzo[a,e]cicloocten-5-il]-fenol, preparado como se describe en J. Med. Chem. (1983), 26(8), 1131-7.

Ejemplo 3

2-[(10-Etil-11-fenildibenzo[b,f]tiepin-3-il)oxi]-N,N-dimetiletanamina preparada como se describe en J. Med.
Chem. (1983), 26(8), 1131-7.

\newpage

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Ejemplo 4

4-[7-[2-(Dimetilamino)etoxi]-11-etildibenzo[b,f]tiepin-10-il]-fenol preparado como se describe en J. Med. Chem. (1983), 26(8), 1131-7.

Ejemplo 5 2-[(10-(NN-Dietilpropanamido)-11-fenildibenzo[b,f]tiepin-3-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina

La 7-metoxi-11-metil-10-fenildibenzo[b,f]tiepina se sintetizó como en Acton et al [1983] J. Med. Chem 26, 1131-1137.

Se disolvió 7-metoxi-11-metil-10-fenildibenzo[b,f]tiepina (0,1 g) en tetracloruro de carbono (10 ml), y se añadió N-bromosuccinimida (0,054 g). La mezcla se agitó y se calentó a reflujo durante 2 horas bajo iluminación de una lámpara de 60 W. La mezcla se enfrió, y la succinamida precipitada, que flotaba en la parte superior, se separó por filtración. El disolvente se eliminó entonces para formar un sólido blanco. El sólido se recristalizó en acetato de etilo (5 ml) para dar un sólido blanco, 7-metoxi-11-bromometil-10-fenildibenzo[b,f]tiepina.

Se añadió malonato de dietilo (1,06 g) a una suspensión de hidruro de sodio (0,48 g) en tetrahidrofurano seco (20 ml), y la suspensión se agitó a temperatura ambiente en argón durante 2 horas. La disolución de malonato se filtró, y la disolución se añadió a una disolución de 7-metoxi-11-bromometil-10-fenildibenzo[b,f]tiepina (2,7 g) en tetrahidrofurano, lo que toma 1 hora para la adición. La mezcla se almacenó a temperatura ambiente toda la noche. Precipitó bromuro de sodio. Después se añadió agua (30 ml), y se eliminó la mayor parte del tetrahidrofurano. Se añadió éter dietílico (50 ml), y se separó por filtración un sólido blanco. Se recogió la capa etérea, se lavó con agua y con disolución saturada de cloruro sódico, se secó sobre sulfato de magnesio y se evaporó para dejar un aceite/sólido. El aceite/sólido se redisolvió en éter, y se separó por filtración una pequeña cantidad de material insoluble. El residuo se volvió a aislar y se cromatografió sobre sílice (250 g), eluyendo con hexano:éter dietílico 100:30. El material sin reaccionar eluyó en primer lugar, seguido del producto, 7-metoxi-11-[(2-dietilmalon-2-il)etil]-10-fenildibenzo[b,f]tiepina.

Una disolución de hidróxido potásico (0,14 g) en agua (10 ml) se calentó a reflujo, y la disolución se agitó mecánicamente. Se añadió gota a gota 7-metoxi-11-[(2-dietilmalon-2-il)etil]-10-fenildibenzo[b,f]tiepina (0,244 g) disuelta en etanol (10 ml). La disolución se calentó a reflujo, y se agitó durante 1,5 horas. Se añadió agua (30 ml), y se recogieron 25 ml de un destilado para eliminar el alcohol. Se añadió una mezcla de ácido sulfúrico concentrado (1 ml) y agua (3 ml), y la mezcla de reacción se calentó a reflujo con agitación durante 1 hora. La disolución se enfrió y se extrajo con éter dietílico. El producto se recogió en disolución de bicarbonato sódico, y se lavó con éter dietílico. La disolución de bicarbonato se acidificó con cuidado, y se extrajo con éter dietílico. El extracto de éter dietílico se lavó y se secó para formar una espuma. La espuma se calentó en un baño de aceite a 165ºC durante 0,5 horas. Se formó un sólido, 7-metoxi-11-[(2-carboxi)etil]-10-fenildibenzo[b,f]tiepina, al enfriar. Éste se recristalizó en isopropanol.

La 7-metoxi-11-[(2-carboxi)etil]-10-fenildibenzo[b,f]tiepina (el éster metílico) se desmetiló según lo siguiente: se añadió ácido clorhídrico concentrado (45 ml) a piridina (40 ml), y la disolución se calentó con agitación. El destilado se descartó hasta que la temperatura alcanzó 210ºC y no quedaba agua. El éter metílico (23,71 g) se calentó hasta una temperatura de alrededor de 100ºC, y se vertió sobre él hidrocloruro de piridina líquido caliente, que se dejó enfriar hasta alrededor de 50ºC. La mezcla se calentó con agitación a reflujo a 210ºC durante 20 minutos. La mezcla de reacción se vertió entonces sobre hielo (200 g) con agitación, con lo que se separó el producto como una goma marrón. La mezcla se extrajo con éter dietílico (2 x 150 ml), la disolución se evaporó y se destiló azeotrópicamente con tolueno para eliminar las trazas de piridina. El producto se filtró en disolución de éter dietílico a través de sílice, y se evaporó la disolución. Se añadió cloruro de metileno, con lo que el producto cristalizó. El producto se recristalizó en éter dietílico con cloruro de metileno como antes.

Se trató 7-hidroxi-11-[(2-carboxi)etil]-10-fenildibenzo[b,f]tiepina (1,87 g), en dimetilformamida seca (25 ml), con hidruro de sodio (0,4 g de 75%), y se agitó, primero a temperatura ambiente, y después a 50ºC hasta que se detuvo la efervescencia. Se añadió una disolución de 1-cloro-2-NN-dimetilaminoetano en tolueno (15 ml de 1 M), y la mezcla se calentó con agitación en argón hasta 100ºC. Después de 1,5 horas, la mezcla se dejó enfriar, se trató con agua y se extrajo tres veces con acetato de etilo. La disolución de acetato de etilo se evaporó, y el residuo se disolvió en metanol (10 ml) y en hidróxido sódico acuoso al 10% (5 ml), y se puso a reflujo durante 20 minutos. El disolvente se eliminó en su mayor parte, y la sal sódica se disolvió en 200 ml de agua hirviendo. Se hizo pasar dióxido de carbono a través de la disolución hirviendo hasta que el pH cayó hasta 8. Ésta se extrajo tres veces en acetato de etilo con un poco de metanol. La disolución se secó y se evaporó.

Una disolución de 2-NN-dimetilaminoetoxi-10-[(2-carboxi)etil]-11-fenildibenzo[b,f]tiepina (0,74g) en SOCl_{2} (5 ml) se agitó durante 5 minutos, y se evaporó y se destiló azeotrópicamente con tolueno seco. El residuo se disolvió en cloruro de metileno, y se añadió durante aproximadamente 2 minutos a una disolución de dietilamina (1,46 g/2,07 ml) en cloruro de metileno (5 ml) en argón a 0ºC. La reacción se dejó calentar. Después de 5 minutos, la mezcla de reacción se evaporó, se disolvió en acetato de etilo, se filtró y se evaporó. El residuo se disolvió y se purificó sobre sílice, usando cloruro de metileno:metanol 100:7 como eluyente. El eluato se secó y se recristalizó en éter de petróleo. RMN ^{1}H (90Mhz, CDCl_{3}): 0,82 (t, 6H), 1,15-1,4 (m, 2H), 2,1-2,45 (m, 12H), 2,63 (t, 4H), 3,95 (t, 2H), 6,5-7 (m, 12H).

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Claims

1. El uso de un compuesto de fórmula VIII en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de, o la prevención de, trastornos neurológicos en un animal de sangre caliente

28

en la que

R_{1} es hidrógeno;

D es alquenileno C_{2-4};

R_{2} es hidrógeno;

R_{3} es un grupo de la fórmula:

-E-F-G-H

en la que:

E se selecciona de

29

F se selecciona de

30

: o un enlace directo;

: G se selecciona de alquilo C_{1-6}, o de un enlace directo;

\newpage

: H se selecciona de hidrógeno, alcoxi C_{1-4}, arilo, heteroarilo, carbociclilo, en los que el anillo arilo, heteroarilo o carbociclilo pueden estar opcionalmente sustituidos (en un átomo de carbono variable) con hasta 3 sustituyentes seleccionados independientemente de halo, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, halo, amino, N-alquil C_{1-4}-amino, NN-di-alquil C_{1-4}-amino, amino-alquilo C_{1-4}, o arilo;

R_{4} se selecciona de metilo o etilo;

R_{5} se selecciona de metilo, etilo o fenilo, o

R_{6} se selecciona de hidrógeno, alquilo C_{1-4} o halo;

R_{7} y R_{8} están unidos vía un átomo de azufre, vía -CH_{2}- o vía -C_{2}H_{4}-, para formar un anillo de siete miembros que contiene azufre, un anillo de siete miembros, o un anillo de ocho miembros, respectivamente;

R_{9} se selecciona de hidrógeno, metilo o etilo;

R_{10} se selecciona de hidrógeno, alquilo C_{1-4} o halo; y

2. El uso de un compuesto según la reivindicación 1, en el que:

E es

31

: F es un enlace directo;

: G es alquilo C_{1-4}; y

: H es hidrógeno.

: o una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o solvato del mismo.

3. El uso de un compuesto según la reivindicación 1, en el que:

: E es

32

: F es

33

: G es alquilo C_{1-4}; y

: H es fenilo.

4. El uso de un compuesto según la reivindicación 1, en el que D es 2-propenileno, o una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o solvato del mismo.

5. El uso de un compuesto en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de, o la prevención de, trastornos neurológicos en un animal de sangre caliente, seleccionado de:

2-[(10-(NN-dietilpropanamido)-11-fenildibenzo[b,f]-tiepin-3-il)oxi]-N,N-dimetil-etanamina;

o una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o solvato del mismo.

6. El uso según la reivindicación 1, la reivindicación 2, la reivindicación 3, la reivindicación 4 o la reivindicación 5, en el que el trastorno neurológico es un trastorno neurológico relacionado con la excitotoxicidad neuronal.

7. El uso según la reivindicación 1, la reivindicación 2, la reivindicación 3, la reivindicación 4 o la reivindicación 5, en el que en el que el trastorno neurológico es un trastorno neurológico relacionado con la apoptosis neuronal.

8. Un compuesto seleccionado de:

o una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o solvato del mismo.

9. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la reivindicación 8, o una sal farmacéuticamente aceptable, un profármaco o solvato del mismo, en asociación con un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable.