ES2276681T3 - Derivados heterociclicos utiles como agentes anticancerosos. - Google Patents

Abstract

El compuesto amida de ácido 2-(3, 3-dimetil-ureido)-4-propoxi-tiofen-3-carboxílico 3 o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

Derivados heterocíclicos útiles como agentes anticancerosos.

Antecedentes de la invención

Esta invención se refiere a derivados novedosos de isotiazol que son útiles en el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas, tales como cánceres, en mamíferos. Esta invención se refiere también a un procedimiento de uso del compuesto en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades hiperproliferativas en mamíferos, especialmente en humanos, y a composiciones farmacéuticas que contienen el compuestos.

Se conoce que una célula puede volverse cancerosa en virtud de la transformación de una porción de su ADN en un oncogén (es decir, un gen que una vez que se activa conduce a la formación de células tumorales malignas). Muchos oncogenes codifican proteínas que son tirosina quinasas aberrantes capaces de causar transformación celular. Alternativamente, la superexpresión de una tirosina quinasa proto-oncogénica normal puede dar como resultado trastornos proliferativos, dando a veces como resultado un fenotipo maligno. Se ha mostrado que ciertas tirosina quinasas pueden mutarse o sobreexpresarse en muchos cánceres humanos tales como cánceres de cerebro, de pulmón, de células escamosas, de vejiga, gástrico, de mama, de cabeza y garganta, esofágico, ginecológico y tiroideo. Además, la sobreexpresión de un ligando para un receptor de tirosina quinasa puede dar como resultado un incremento en el estado de activación del receptor, dando como resultado la proliferación de las células tumorales o de las células endoteliales. Por tanto, se cree que los inhibidores de los receptores de tirosina quinasas, tales como los compuestos de la presente invención, son útiles como inhibidores selectivos del crecimiento de las células cancerosas de mamíferos.

Se conoce que los factores de crecimiento polipeptídicos, tales como el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) que tiene una gran afinidad por el receptor que contiene un dominio insertado para la quinasa humana (KDR) o el receptor de la quinasa de hígado murino fetal 1 (FLK-1), han sido asociados con la proliferación de las células endoteliales y más particularmente con la vasculogénesis y angiogénesis. Véase la publicación de solicitud internacional PCT número WO 95/21613 (publicada el 17 de Agosto, 1995). Los agentes, tales como los compuestos de la presente invención, que son capaces de unirse al, o de modular el, receptor KDR/FLK-1 pueden usarse para tratar trastornos relacionados con la vasculogénesis o angiogénesis tales como diabetes, retinopatía diabética, hemangioma, glioma, melanoma, sarcopa de Kaposi y cáncer de ovario, de mama, de pulmón, pancreático, de próstata, de colon y epidermoide. Los derivados de isotiazol útiles en el tratamiento de trastornos hiperproliferativos se refieren a la patente de los Estados Unidos US 6.235.764 B1 (solicitud provisional de los Estados Unidos número 60/087.973(presentada el 4 de Junio, 1998).

Sumario de la invención

La presente invención se refiere a compuestos de la fórmula 1

1

y a sales, profármacos y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la que:

Z es S;

X es CR^{4};

X^{1} es O;

R es -CONR^{5}R^{6}, en el cual R^{5} y R^{6} son H;

R^{1} es propilo;

R^{2} es H;

R^{3} es -CNR^{5}R^{6},en el cual R^{5} y R^{6} son metilo;

R^{4} es H;

Específicamente la presente invención se refiere al siguiente compuesto:

Amida del ácido 2-(3,3-dimetil-ureido)-4-propoxi-tiofen-3-carboxílico;

y las sales e hidratos farmacéuticamente aceptables del compuesto precedente.

La invención también se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula 1, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En una realización, dicha composición farmacéutica es para el tratamiento del cáncer, tal como cáncer de cerebro, de pulmón, de células escamosas, de vejiga, gástrico, pancreático, de mama, de cabeza, de garganta, renal, de próstata, colorrectal, esofágico, ginecológico (tal como ovárico) o de tiroides.

La invención también se refiere al uso del compuesto de fórmula 1, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un trastorno mediado por angiogénesis en el que el trastorno es cáncer de cerebro, de pulmón, de células escamosas, de vejiga, gástrico, pancreático, de mama, de cabeza, de garganta, renal, de próstata, colorrectal, esofágico, ginecológico (tal como ovárico) o de tiroides.

Los pacientes que pueden tratarse con los compuestos de fórmulas 1, y las sales e hidratos farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos incluyen por ejemplo, pacientes que han sido diagnosticados de tener psoriasis, HPB, cáncer de pulmón, cáncer de huesos, cáncer pancreático, cáncer de piel, cáncer de cabeza y garganta, melanoma cutáneo o intraocular, cáncer uterino, cáncer de ovarios, cáncer rectal o cáncer de la región anal, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer de mama, tumores ginecológicos (por ejemplo, sarcomas uterinos, carcinoma de las trompas de falopio, carcinoma de endometrio, carcinoma del cervix, carcinoma de la vagina o carcinoma de la vulva), enfermedad de Hodgkin, cáncer del esófago, cáncer de intestino delgado, cáncer del sistema endocrino (por ejemplo, cáncer del tiroides, paratiroides o de las glándulas adrenales), sarcomas de los tejidos blandos, cáncer de la uretra, cáncer del pene, cáncer de próstata, leucemia aguda o crónica, tumores sólidos de la infancia, linfomas linfocíticos, cáncer de la vejiga, cáncer del riñón o del uréter (por ejemplo, carcinoma de las células renales, carcinoma de la pelvis renal), o neoplasias del sistema nervioso central (por ejemplo, linfoma del SNC primario, tumores de la médula espinal, gliomas del tronco encefálico o adenomas de la pituitaria).

La frase "sal(es) farmacéuticamente(s) aceptable(s)", tal como se usa en la presente, a menos que se indique lo contrario, incluye sales de grupos ácidos o básicos que pueden estar presentes en los compuestos de fórmula 1. Los compuestos de fórmula 1 que son de naturaleza básica son capaces de formar una amplia variedad de sales con diversos ácidos inorgánicos y orgánicos. Los ácidos que pueden usarse para preparar sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables de tales compuestos básicos de fórmula 1 son aquellos que forman sales de adición de ácidos no tóxicas, es decir, sales que contienen aniones farmacológicamente aceptables tales como las sales clorhidrato, bromhidrato, yodhidrato, nitrato, sulfato, bisulfato, fosfato, fosfato ácido, isonicotinato, acetato, lactato, salicilato, citrato, citrato ácido, tartrato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, gentisinato, fumarato, gluconato, glucaronato, sacarato, formiato, benzoato, glutamato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, p-toluenosulfonato, y pamoato [es decir, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)].

Aquellos compuestos de la fórmula 1 que son de naturaleza ácidos, son capaces de formar sales de base con diversos cationes farmacológicamente aceptables. Ejemplos de tales sales incluyen las sales de metales alcalinos o alcalino-térreos y particularmente, las sales de sodio y de potasio.

La invención objeto también incluye compuestos isotópicamente marcados, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, que son idénticos a aquellos enumerados en la fórmula 1, excepto por el hecho de que uno o más átomos se reemplazan por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico normalmente encontrado en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, flúor y cloro, tal como ^{2}H, ^{3}H, ^{13}C, ^{14}C, ^{15}N, ^{18}O, ^{17}O, ^{35}S, ^{18}F y ^{36}Cl, respectivamente. Los compuestos de la presente invención, los profármacos de los mismos, y las sales farmacéuticamente aceptables de dichos compuestos o de dichos profármacos que contienen los isótopos precedentes y/u otros isótopos de otros átomos están dentro del alcance de esta invención. Ciertos compuestos isotópicamente marcados de la presente invención, por ejemplo aquellos en los que se incorporan isótopos radiactivos tales como ^{3}H y ^{14}C, son incorporado como útiles en ensayos de distribución del fármaco y/o tejido substrato. Se prefieren particularmente los isótopos tritiados, es decir, ^{3}H y carbono-14, es decir, ^{14}C, por su facilidad de preparación y por su detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir ^{2}H, puede dar ciertas ventajas terapéuticas resultantes de su mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, incrementos en la semivida in vivo o requerimientos de dosis reducidas, y, por tanto, pueden preferirse en algunas circunstancias. Los compuestos isotópicamente marcados de fórmula 1 de esta invención y los profármacos de los mismos pueden prepararse generalmente llevando a cabo procedimientos descritos en los Esquemas y/o en los Ejemplos y Preparaciones siguientes, por la sustitución de un reactivo no marcado

\hbox{isotópicamente por un reactivo isotópicamente
marcado fácilmente disponible.}

Los compuestos de fórmula 1 que tiene grupos amino, amido, hidroxilo, o carboxílicos libres pueden convertirse en profármacos. Los profármacos incluyen los compuestos en los que un residuo aminoácido o una cadena polipeptídica de dos o más (por ejemplo, dos, tres o cuatro) residuos amino-ácidos están covalentemente unidos a través de un enlace amida o éster a un grupo amino, hidroxi o carboxílico libre de compuestos de fórmula 1. Los residuos amino ácidos incluyen pero no se limitan a los 20 aminoácidos que se encuentran naturalmente comúnmente designados por símbolos de tres letras y también incluyen 4-hidroxiprolina, hidroxilisina, demosina, isodemosina, 3-metilhistidina, norvalina, beta-alanina, ácido gamma-aminobutírico, citrulina, homocisteina, homoserina, ornitina y metionina sulfona.

También abarca tipos adicionales de profármacos. Por ejemplo, los grupos carboxilo libres, pueden derivatizarse como amidas o ésteres de alquilo. Los restos amida y éster pueden incorporar grupos que incluyen pero no se limitan a funciones éter, amina y ácido carboxílico. Los grupos hidroxi libres pueden derivatizarse usando grupos que incluyen pero no se limitan a hemisuccinatos, ésteres fosfato, dimetilaminoacetatos, y fosforiloximetiloxicarbonilos, tal como se describe en D. Fleisher, R. Bong, B.H. Stewart, Advanced Drug Delivery Reviews (1996) 19, 115. Se incluyen también profármacos carbamato de los grupos hidroxi y amino, como son profármacos carbonato y ésteres sulfato de grupos hidroxi. También abarca la derivatización de grupos hidroxi como éteres de (aciloxi)metilo y (aciloxi)etilo en los que el grupo acilo puede ser un éster de alquilo, opcionalmente sustituido con grupos que incluyen pero no se limitan a funciones éter, amina, y ácido carboxílico, o donde el grupo acilo es un éster de aminoácido tal como se describe anteriormente. Los profármacos de este

\hbox{tipo se describen
en R.P.  Robinson  et al. , J. Medicinal Chemistry (1996)
 39 , 10.}

Esta invención se refiere al uso de todos los isómeros ópticos y esteroisómeros de los compuestos de fórmula 1 y a las mezclas de los mismos. Los compuestos de fórmula 1 también pueden existir como tautómeros. Esta invención se refiere al uso de todos estos tautómeros y mezclas de los mismos.

Descripción detallada de la invención

Los compuestos de fórmula 1 y sus sales y solvatos farmacéuticamente aceptables pueden prepararse tal como se indica:

Esquema 1

2

En el Esquema 1, un correactante de condensación tal como el cetoéster 8 se puede hacer reaccionar con una base adecuada tal como el hidruro de sodio en un disolvente adecuado tal como el tetrahidrofurano (THF) seguido por la reacción con un aminoacilisotiocianato tal como el compuesto 9 a una temperatura que oscila entre -20ºC y reflujo, preferiblemente a 0ºC, hasta que la reacción se completa para dar la tiofenona 10. Después, la tiofenona se puede hacer reaccionar con un alcohol apropiado en un disolvente adecuado, tal como el propio alcohol, con una cantidad apropiada de un catalizador apropiado, tal como el H_{2}SO_{4} a una temperatura apropiada, tal como la de reflujo, hasta un tiempo tal en que la reacción se complete para dar el tiofeno 11. Después se puede establecer la funcionalidad amida mediante la reacción de 11 con una fuente de amoníaco tal como el hidróxido de amonio en etanol a una temperatura apropiada, tal como 40ºC en un tubo sellado para dar el compuesto de fórmula 1.

Las mezclas diasteroméricas se pueden separar en sus diastereómeros individuales partiendo de la base de sus diferencias físicoquímicas mediante procedimientos conocidos por las personas especializadas en la técnica, por ejemplo, mediante cromatografía o cristalización fraccionada. Los enantiómeros se pueden separar convirtiendo las mezclas enantioméricas en una mezcla diastereomérica mediante la reacción con un compuesto ópticamente activo apropiado (por ejemplo, alcohol), separando los diastereómeros y transformando los diastereómeros individuales (por ejemplo, mediante hidrólisis) en los enantiómeros puros correspondientes. Todos estos isómeros, incluyendo las mezclas de diastereómeros y los enantiómeros puros, se consideran como parte de la invención.

Los compuestos de fórmula 1, que son de naturaleza básica, pueden formar una amplia variedad de sales diferentes con diversos ácidos orgánicos e inorgánicos. Aunque estas sales deben ser aceptables farmacéuticamente para la administración a animales, frecuentemente es deseable en la práctica aislar inicialmente el compuesto de fórmula 1 de la mezcla de reacción como una sal inaceptable farmacéuticamente, y luego simplemente transformar esta última nuevamente en el compuesto base libre mediante el tratamiento con un reactivo alcalino, y posteriormente transformar esta última base libre en una sal de adición de ácido aceptable farmacéuticamente. Las sales de adición de ácido de los compuestos básicos de esta invención se preparan fácilmente tratando el compuesto base con una cantidad sustancialmente equivalente del ácido orgánico o mineral escogido en un medio disolvente acuoso o en un disolvente orgánico adecuado, tal como metanol o etanol. La sal sólida deseada se obtiene fácilmente con la evaporación cuidadosa del disolvente. La sal de ácido deseada también se puede precipitar de una disolución de la base libre en un disolvente orgánico añadiendo a la disolución un ácido orgánico o mineral apropiado.

Aquellos compuestos de fórmula 1 que son de naturaleza ácida, son capaces de formar sales de base con diversos cationes aceptables farmacológicamente. Ejemplos de estas sales incluyen las sales de metales alcalinos o metales alcalinotérreos y particularmente, las sales de sodio y de potasio. Estas sales se preparan con técnicas convencionales. Las bases químicas que se utilizan como reactivos para preparar las sales de base aceptables farmacéuticamente de esta invención son aquéllas que forman sales de base no tóxicas con los compuestos ácidos de fórmula 1. Tales sales de base no tóxicas incluyen las derivadas de cationes aceptables farmacológicamente tales como el sodio, el potasio, el calcio y el magnesio, etc. Estas sales pueden prepararse fácilmente tratando los compuestos ácidos correspondientes con una disolución acuosa que contiene los cationes deseados aceptables farmacológicamente, y luego evaporando la disolución resultante a sequedad, preferiblemente bajo presión reducida. Alternativamente, también se pueden preparar mezclando disoluciones alcanólicas inferiores de los compuestos ácidos y el alcóxido de metal alcalino deseado, y evaporando la disolución resultante a sequedad de la misma forma que antes. En cualquiera de los dos casos, se emplean preferiblemente cantidades estequiométricas de los reactivos para asegurar la finalización de la reacción y los rendimientos máximos del producto final deseado.

En la presente invención se incluyen compuestos idénticos a los compuestos de fórmula 1 excepto por el hecho de que uno o más átomos de hidrógeno o de carbono están sustituidos por sus isótopos. Tales compuestos son útiles como herramientas de investigación y diagnóstico en los estudios farmacocinéticos del metabolismo y en ensayos de unión. Aplicaciones específicas en investigación incluyen ensayos de unión de radioligandos, estudios autorradiográficos y estudios de unión in vivo. Entre las formas radiomarcadas de los compuestos de fórmula 1 se incluyen los isótopos tritio y C^{14}.

La actividad in vitro de los compuestos de fórmula 1 en la inhibición del receptor KDR/VEGF se puede determinar por el procedimiento siguiente.

La capacidad de los compuestos de la presente invención para inhibir la actividad tirosina quinasa se puede medir usando una enzima recombinante en un ensayo que mide la capacidad de los compuestos para inhibir la fosforilación del sustrato exógeno, poliGluTyr (PGT, Sigma^{TM}, 4:1). El dominio quinasa del receptor KDR/VEGF humano (aminoácidos 805-1350) se expresa en células Sf9 de insectos como una proteína de fusión glutatión S-transferasa (GST) usando el sistema de expresión de baculovirus. La proteína se purifica a partir de los lisados de estas células usando columnas de afinidad de glutatión agarosa. El ensayo enzimático se lleva a cabo en placas de 96 pocillos que están cubiertos con el sustrato PGT (0,625 \mug de PGT por pocillo). Los compuestos del ensayo se diluyen en dimetilsulfóxido (DMSO), y después se añaden a las placas de PGT de manera que la concentración final de DMSO en el ensayo es del 1,6% (v/v). La enzima recombinante se diluye en tampón de fosforilación (Hepes 50 mM, pH 7,3, NaCl 125 mM, MgCl_{2} 24 mM). La reacción se inicia por la adición de ATP a una concentración final de 10 \muM. Después de una incubación de 30 minutos a temperatura ambiente con agitación, la reacción se aspira, y las placas se lavan con tampón de lavado PBS (que contiene 0,1% de Tween-20). La cantidad de PGT fosforilada se cuantifica por incubación con un conjugado de HRP (HRP es peroxidasa de rábano picante) anticuerpo PY-54 (Laboratorios Transduction), desarrollado con peroxidasa TMB (TMB es 3,3',5,5'-tetrametilbencidina), y la reacción se cuantifica en un lector BioRad^{TM} Microplate a 450 nm. La inhibición de la actividad ezimática quinasa mediante el compuesto del ensayo se detecta como una reducción de la absorbancia, y la concentración del compuesto que se requiere para inhibir la señal al 50% se presenta como el valor IC_{50} para el compuesto del ensayo.

Para medir la capacidad de los compuestos para inhibir la actividad tirosina quinasa KDR en toda la proteína que existe en un contexto celular, se pueden utilizar las células endoteliales aórticas porcinas (PAE) transfectadas con la KDR humana (Waltenberger y cols., J. Biol. Chem. 269:26988, 1994). Las células se colocan en placas y se deja que se unan a platos de 96 pocillos en el mismo medio (Ham's F12) con FBS (suero bovino fetal) al 10%. Después se lavan las células, se realimentan con medio desprovisto de suero que contiene albúmina sérica bovina (BSA) al 0,1% (v/v), y se dejan incubar durante 24 horas. Inmediatamente antes de administrar una dosis con el compuesto, se realimenta a las células con el medio desprovisto de suero (sin BSA). Los compuestos del ensayo, disueltos en DMSO, se diluyen en el medio (concentración final de DMSO de 0,5% (v/v)). Tras una incubación de 2 horas, se añade al medio VEGF_{165} (50 ng/ml finales) para una incubación de 8 minutos. Las células se lavan y se lisan en tampón HNTG (Hepes 20 mM, pH 7,5, NaCl 150 mM, Triton^{TM} X-100 al 0,2%, glicerol al 10%, PMSF (fluoruro de fenilmetilsulfonilo) 0,2 mM, 1 \mug/ml de pepstatina, 1 \mug/ml de leupeptina, 1 \mug/ml de aprotinina, pirofosfato de sodio 2 mM, ortovanadato de sodio 2 mM). El grado de fosforilación de la KDR se mide usando un ensayo ELISA. Las placas de 96 pocillos se cubren con 1 \mug por pocillo de anticuerpo anti-conejo de cabra. Los anticuerpos que no se unen se eliminan mediante lavado de la placa y los sitios que quedan se bloquean con tampón Superblock (Pierce) antes de la adicción del anticuerpo anti-flk-1 C-20 (0,5 \mug por placa, Santa Cruz). Todos los anticuerpos no unidos se eliminan de las placas mediante lavado antes de la adicción del lisado celular. Tras una incubación de 2 horas de los lisados con el anticuerpo flk-1, se cuantifica la fosfotirosina asociada a KDR por desarrollo con el conjugado HRP anticuerpo PY-54 y TMB, como se describió anteriormente. La capacidad de los compuestos para inhibir la reacción de autofosforilación estimulada por VEGF en un 50%, en relación con los controles estimulados por VEGF, se presenta como el valor IC_{50} para el compuesto del ensayo.

La capacidad de los compuestos para inhibir la mitogénesis en las células endoteliales humanas se mide por su capacidad para inhibir la incorporación de ^{3}H-timidina a las células HUVE (células endoteliales de la vena umbilical humana, Clonetics^{TM}). Este ensayo está bien descrito en la literatura (Waltenberger J y cols. J. Biol. Chem. 269:26988, 1994; Cao Y y cols. J. Biol. Chem. 271:3154, 1996). Brevemente, 10^{4} células se colocan en placas de 24 pocillos cubiertos con colágeno y se deja que se unan. Las células se realimentan en un medio desprovisto de suero, y 24 horas después se tratan con diversas concentraciones del compuesto (preparado en DMSO, la concentración final de DMSO en el ensayo es del 0,2% v/v), y 2 ng/ml - 30 ng/ml de VEGF_{165}. Durante las últimas 3 horas de las 24 horas de tratamiento compuesto, las células se pulsan con ^{3}H-timidina (NEN, 1 \muCi por pocillo). Después se eliminan los medios, y las células se lavan extensamente con solución salina equilibrada de Hank enfriada con hielo, y luego dos veces con ácido tricloroacético enfriado con hielo (10% v/v). Las células se lisan por la adición de 0,2 ml de NaOH 0,1 N, y los lisados se transfieren a viales de centelleo. Después se lavan los pocillos con 0,2 ml de HCl 0,1 N, y este lavado se transfiere luego a los viales. El grado de incorporación de ^{3}H-timidina se mide por conteo de centelleo. La capacidad de los compuestos para inhibir la incorporación en un 50%, en relación con el control (tratamiento de VEGF con vehículo DMSO únicamente) se presenta como el valor IC_{50} para el compuesto del ensayo.

La actividad de los compuestos de fórmula 1, in vivo, se puede determinar por el grado de inhibición del crecimiento tumoral mediante un compuesto del ensayo en relación con un control. Los efectos inhibidores del crecimiento tumoral de diversos compuestos se miden según los métodos de Corbett T. H., y cols. "Tumor Induction Relationships in Development of Transplantable Cancers of the Colon in Mice for Chemotherapy Assays, with a Note on Carcinogen Structure", Cancer Res., 35, 2434-2439 (1975) y Corbett, T.H., y cols., "A Mouse Colon-tumor Model for Experimental Therapy", "Cancer Chemoter. Rep. (Part 2)", 5, 169-186 (1975), con ligeras modificaciones. Los tumores se inducen en el costado mediante inyección s.c. de 1 x 10^{6} células tumorales en cultivo en fase logarítmica suspendidas en 0,1 ml - 0,2 ml de PBS. Cuando ha pasado tiempo suficiente para que los tumores sean palpables (5 mm - 6 mm de diámetro), los animales del ensayo (ratones atímicos) se tratan con el compuesto activo (formulado por disolución en un diluyente apropiado, por ejemplo agua o Gelucire^{TM} 44/14 rm PBS al 5% por vías de administración intraperitoneal (ip) u oral (po) una o dos veces diarias durante 5-10 días consecutivos. Para determinar un efecto anti-tumoral, se mide el tumor en milímetros con un calibrador Vernier a través de dos diámetros y el volumen del tumor (mm^{3}) se calcula usando la fórmula: peso del tumor = (longitud x [anchura]^{2})/2, según los métodos de Geran, R.I., y cols. "Protocols for Screening Chemical Agents and Natural Products Against Animal Tumors and Other Biological Systems", Tercera Edición, Cancer Chemother. Rep., 3, 1-104 (1972). El lugar del costado de implante del tumor proporciona efectos dosis/respuesta reproducibles para una variedad de agentes quimioterapéuticos, y el procedimiento de medida (diámetro del tumor) es un procedimiento fiable para calcular las tasas de crecimiento tumoral.

La administración de los compuestos de la presente invención (denominados en lo sucesivo el (los) "compuesto(s) activo(s)") se puede llevar a cabo mediante cualquier procedimiento que permita la liberación de los compuestos el sitio de acción. Estos procedimientos incluyen vías orales, vías intraduodenales, inyección parenteral (incluyendo la intravenosa, la subcutánea, la intramuscular, la intravascular o la infusión), administración tópica y rectal.

La cantidad del compuesto activo administrado dependerá del sujeto tratado, de la severidad del trastorno o condición, de la tasa de administración y del criterio del médico que prescriba. Sin embargo, una dosificación eficaz está en el intervalo de alrededor de 0,001 mg a 100 mg por kg de peso corporal al día, preferiblemente alrededor de 1 mg/kg/día a 35 mg/kg/día, en dosis únicas o divididas. Para un humano de 70 kg, esto ascendería a alrededor de 0,05 g/día a 7 g/día, preferiblemente de alrededor de 0,2 g/día a 2,5 g/día. En algunos casos, los niveles de dosificación por debajo del límite inferior del intervalo mencionado anteriormente pueden ser más que adecuados, mientras que en otros casos pueden emplearse dosis aún mayores sin causar ningún efecto secundario dañino, siempre que tales dosis mayores se dividan primero en varias dosis pequeñas para administrarse a lo largo del día.

El compuesto activo se puede aplicar como un tratamiento único o puede implicar a una o más de otras sustancias antitumorales, por ejemplo aquellas seleccionadas entre, por ejemplo, inhibidores mitóticos, por ejemplo la vinblastina; agentes alquilantes, por ejemplo el cisplatino, el carboplatino y la ciclofosfamida; anti-metabolitos, por ejemplo el 5-fluorouracilo, el arabinósido de citosina y la hidroxiurea, o, por ejemplo, uno de los anti-metabolitos preferidos descritos en la Solicitud de Patente Europea No. 239362 tal como el ácido N-(5-[N-(3,4-dihidro-2-metil-4-oxoquinazolin-6-ilmetil)-N-metilamino]2-tenoil)-L-glutámico; inhibidores del factor de crecimiento; inhibidores del ciclo celular; antibióticos intercalantes, por ejemplo la adriamicina y la bleomicina; enzimas, por ejemplo el interferón; y anti-hormonas, por ejemplo anti-estrógenos tal como Nolvadex^{TM} (tamoxifeno) o, por ejemplo anti-andrógenos tal como Casodex^{TM} (4'-ciano-3-(4-fluorofenilsulfonil)-2-hidroxi-2-metil-3'-(trifluorometil)propionanilida). Este tratamiento conjunto se puede lograr por medio de la dosificación simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento.

Por ejemplo, la composición farmacéutica puede estar en una forma conveniente para la administración oral como un comprimido, cápsula, píldora, polvo, formulaciones de liberación continua, solución, suspensión, para inyección parenteral como una solución estéril, suspensión o emulsión, para administración tópica como una pomada o una crema o para administración rectal como un supositorio. La composición farmacéutica puede estar en formas de dosificación unitaria adecuadas para la administración única de dosis exactas. La composición farmacéutica incluirá un vehículo o excipiente farmacéutico convencional y un compuesto de acuerdo con la invención como un componente activo. Además, puede incluir otros agentes medicinales o farmacéuticos, vehículos, adyuvantes, etc.

Las formas ejemplares de administración parenteral incluyen disoluciones o suspensiones de compuestos activos en disoluciones acuosas estériles, por ejemplo, disoluciones acuosas de propilenglicol o de dextrosa. Estas formas de dosificación pueden tamponarse adecuadamente, si se desea.

Los vehículos farmacéuticos adecuados incluyen diluyentes o cargas inertes, agua y diversos disolventes orgánicos. Si se desea, las composiciones farmacéuticas pueden contener componentes adicionales tales como agentes para dar sabor, ligantes, excipientes y similares. Así, para la administración oral se pueden emplear comprimidos que contengan diversos excipientes, tales como el ácido cítrico junto con diversos disgregadores tales como el almidón, el ácido algínico y ciertos complejos de silicatos y con ligantes tales como la sacarosa, la gelatina y la goma arábiga. Adicionalmente, agentes lubricantes tales como el estearato de magnesio, el lauril sulfato de sodio y el talco frecuentemente son útiles para los comprimidos. También se pueden emplear las composiciones sólidas de un tipo similar en cápsulas blandas y duras rellenas de gelatina. Por consiguiente, los materiales preferidos incluyen lactosa o azúcar de leche y polietilenglicol de elevado peso molecular. Cuando se desean suspensiones acuosas o elixires para administración oral, el compuesto activo se puede combinar en ellas con diversos agentes edulcorantes o que den sabor, sustancias para dar color o colorantes y, si se desea, agentes emulsionantes o agentes suspensores, junto con diluyentes tales como agua, etanol, propilenglicol, glicerina o sus combinaciones.

Los procedimientos para preparar diversas composiciones farmacéuticas con una cantidad específica de compuesto activo son conocidos por las personas especializadas en esta técnica, o serán evidentes para ellas. Como ejemplos, véase Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa., Decimoquinta Edición (1975).

Los ejemplos y las preparaciones proporcionados a continuación ilustran y ejemplifican adicionalmente los compuestos de la presente invención y los procedimientos para preparar tales compuestos. Debe entenderse que el alcance de la presente invención no se limita en modo alguno al alcance de los ejemplos y las preparaciones siguientes.

Preparación 1

Éster metílico del ácido 2-(3,3-dimetil-ureido)-4-oxo-4,5-dihidro-tiofen-3-carboxílico

Una disolución de metil 4-cloroacetoacetato de metilo (1,77 ml, 15,3 mmoles) en THF (10 ml) se añadió a 0ºC a una suspensión de hidruro de sodio (386 mg) en THF (40 ml). La agitación se continuó hasta que cesó el burbujeo, dando una disolución de color amarillo claro. A continuación se añadió una disolución de N,N-dimetilaminoacilisotiocianato (2,00 g, 15,4 mmoles) en THF (10 ml). Transcurrido aproximadamente un minuto, se formó una suspensión de color amarillo claro. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Después se repartió la mezcla entre agua y una mezcla de acetato de etilo/cloruro de metileno. La capa orgánica se secó (Na_{2}SO_{4}), se concentró y se recristalizó en metanol dando el compuesto del título como un sólido de color amarillo claro (2,09 g, 8,56 mmoles, 56%) RMN^{1}H (CDCl_{3}, 400 MHz) 3,10 (s a, 6H), 3,56 (s, 2H), 3,86 (s, 3H), 12,41 (s, 1H).

Éster metílico del ácido 2-(3,3-dimetil-ureido)-4-propoxi-tiofen-3-carboxílico

Una disolución de éster metílico del ácido 2-(3,3-dimetil-ureido)-4-oxo-4,5-dihidro-tiofeno-3-carboxílico (50 mg, 0,205 mmoles) en n-propanol (5 ml) se trató con H_{2}SO_{4} (5 microlitros) y se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Se observó poca reacción por lo que la temperatura se incrementó a 100ºC. Después de 2 horas se observó poca reacción, por lo que se añadieron tamices moleculares de cuatro angstroms y la reacción se continuó a 100ºC durante dos horas más, punto en el que se observó suficiente cantidad de producto. Después se concentró la mezcla y se purificó el residuo por cromatografía radial en una placa de 4 mm usando hexanos/acetato de etilo (1/1) dando el compuesto del título como un sólido blanco (31 mg, 0,108 mmoles, 53%) RMN^{1}H (CDCl_{3}, 400 MHz) 1,03 (t, 3H, J = 7,3 Hz), 1,78-1,84 (m, 2H), 3,06 (s, 6H), 3,84-3,89 (m, 5H), 5,51 (s, 1H), 11,08 (s, 1H).

Ejemplo 1 Amida del ácido 2-(3,3-dimetil-ureido)-4-propoxi-tiofeno-3-carboxílico

Una solución de éster metílico del ácido 2-(3,3-dimetil-ureido)-4-propoxi-tiofeno-3-carboxílico en etanol (6 ml) se trató con hidróxido de amonio concentrado (6 ml) en un tubo sellado y se calentó a 40ºC durante 5 horas. Después la mezcla se enfrió, se evaporó, se acidificó con una pequeña cantidad de ácido acético y se purificó por cromatografía radial en una placa de 2 mm usando hexanos/acetato de etilo (3/1) más metanol al 2% como eluyente dando un sólido blanco (15 mg, 55,3 micromoles, 51%) RMN^{1}H (CDCl_{3}, 400 MHz) 1,03 (t, 3H, J = 7,3 Hz), 1,81-1,88 (m, 2H), 3,04 (s, 6H), 3,97 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 5,33 (s ancho, 1H), 5,55 (s, 1H), 7,50 (s ancho, 1H), 12,00 (s, 1H).

Claims (3)

1. El compuesto amida de ácido 2-(3,3-dimetil-ureido)-4-propoxitiofen-3-carboxílico o una sal o solvato farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto según la reivindicación 1, o una sal o hidrato farmacéuticamente aceptable del mismo, y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

3. Uso de un compuesto según la reivindicación 1 en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de un trastorno mediado por angiogénesis, en el que el trastorno es un cáncer seleccionado de cáncer de cerebro, de células escamosas, de vejiga, gástrico, pancreático, de mama, de cabeza, de garganta, esofágico, de próstata, colorrectal, de pulmón, renal, ovárico, ginecológico y tiroideo.