ES2276728T3 - Composicion de uso topico. - Google Patents
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Abstract
Composición cosmética para su aplicación tópica para contrarrestar el daño cutáneo inducido por la radiación UV que comprende como sustancias activas un primer componente obtenido a partir de cultivos inactivados de bacterias del género Bifidobacterium o de las siguientes bacterias relacionadas con el género Bifidobacterium: Actinomycetaceae, Propionimycetaceae, Lactobacillaceae y bacterias corineformes, y un segundo componente que es un extracto de una matriz extracelular vegetal que consiste en una o más glicoproteínas en una conformación sustancialmente nativa, un polímero de carbohidratos en una conformación sustancialmente nativa y una proteína de arabinogalactano en una conformación sustancialmente nativa, siendo obtenible dicha composición mediante un proceso en el que dichas bacterias inactivadas son desintegradas en dicho extracto de matriz extracelular vegetal.
Description
Composición de uso tópico.
La invención se refiere a composiciones
cosméticas con un efecto regenerador y protector mejorado sobre las
células epidémicas y dérmicas y su entorno extracelular. Comprende
un nuevo complejo activo de ingredientes activos, optimizado para
proteger la piel de efectos medioambientales potencialmente
dañinos.
Los ingredientes esenciales del complejo activo
según la invención consisten en cultivos inactivados y desintegrados
de bacterias del género Bifidobacterium o bacterias
relacionadas con este género, y una composición de matriz
extracelular vegetal, preparada preferiblemente a partir de
soja.
La exposición de la piel a radiación UV puede
provocar diversos efectos biológicos, incluyendo eritema solar
(inflamación), inducción de cáncer cutáneo (melanoma),
envejecimiento prematuro de la piel y alteraciones en las células
inmunes cutáneas (inmunosupresión), que dan lugar a daño
(permanente) en las células cutáneas.
El daño en las células cutáneas debido a la
radiación UV está inducido por diversos mecanismos, tales como una
inmunosupresión inducida por radiación UV, daños en el ADN inducidos
por radiación UV y la acumulación de los daños en el ADN.
La inmunosupresión es un estado de desequilibrio
inmunológico de la piel (Kripke, 1984; Baadsgard, 1991). Se sabe
que la exposición cutánea a la radiación UVB
(280-320 nm) induce una inhibición sistémica de la
hipersensibilidad por contacto mediada por los linfocitos T (CHS) a
haptenos y las respuestas de hipersensibilidad retardada (DTH) a
antígenos proteicos tales como el virus Herpes simplex, a
Candida albicans o micobacterias (Otani y col., 1987;
Giannini, 1986; Denkins y col., 1989; Jeevan y col., 1989).
Especialmente, las células de Langerhans (LC) que son células
presentadoras de antígenos altamente especializadas (APC), con un
papel esencial en la inducción de respuestas inmunes frente a
alérgenos de contacto, antígenos víricos y probablemente antígenos
tumorales cutáneos (Teunissen, 1992). Se demostró que la radiación
UVB disminuía el número de LC en la
epidermis.
epidermis.
Ratis y col., 1998, han demostrado que la
exposición a radiación UVB afecta a las LC al menos de dos formas
distintas:
1. la expresión de las
moléculas-1 de adhesión intercelular
(ICAM-1), y especialmente la expresión de CD 86,
está significativamente disminuida, y
2. la viabilidad de las LC se reduce, lo que da
lugar a una muerte celular apoptótica.
Ambos mecanismos contribuyen a los efectos
inmunosupresores inducidos por la radiación UVB.
Además de las LC, los queratinocitos (KC)
desempeñan un papel importante en la inmunosupresión inducida por
la radiación UV. La luz UV afecta a la producción y a la secreción
de citocinas inmunomoduladoras a partir de los KC, dependiendo de
su longitud de onda. Particularmente, se ha demostrado que la
expresión de la IL-10 juega un papel principal en
la inducción de una inmunosupresión sistémica y una activación
diferencial de los subconjuntos de linfocitos T colaboradores.
Shreedar y col., 1998, describieron que la liberación de
prostaglandina E_{2} (PGE_{2}) de KC irradiados induce
IL-4 sérica, que de nuevo induce la liberación de
IL-10. Por lo tanto, la exposición a la radiación
UV activa una cascada de citocinas que da como resultado una
inmunosupresión
sistémica.
sistémica.
Resultados recientes han demostrado que la
radiación UVA también contribuye a la inmunosupresión a través de
una vía oxidativa (Iwai y col., 1999), inhibiendo la función
presentadora de antígenos de las células epidémicas, acompañada por
una inhibición de la expresión de las moléculas coestimuladoras
sobre las LC. Se propone que este efecto está mediado por especies
de oxígeno reactivas.
Muchos efectos peligrosos están mediados por las
propiedades inmunosupresoras de la radiación UV, como la inducción
de una apoptosis o muerte celular programada. Las células
apoptóticas de la piel se denominan "células quemadas"
(Daniels y col., 1961; Young, 1987). Las células quemadas muestran
algunos cambios morfológicos característicos: el retículo
endoplásmico dilatado forma vacuolas, la cromatina está digerida y
se condensa a lo largo de la membrana nuclear, a menudo formando
esferas, y una drástica contracción celular es la característica
más prevalente de las células quemadas apoptóticas.
Se han identificado numerosos genes que
codifican mediadores que regulan la apoptosis, entre ellos se
considera que desempeñan papeles importantes el gen supresor
tumoral p53 y el gen inhibidor de la apoptosis
bcl-2. Wang y col., 1998, propusieron que las
radiaciones UVA y UVB inician la apoptosis desencadenando dos vías
diferentes de transducción de señales. Mientras que la radiación
UVA, que produce especies de oxígeno reactivas
- principalmente oxígeno singlete - que provocan la peroxidación lipídica (Kane y col., 1993) y una perturbación en la permeabilidad de la membrana, da lugar a una apoptosis inmediata mediante una regulación por disminución de la expresión de bcl-2, la radiación UVB provoca una apoptosis retardada caracterizada por una inducción de una lesión en el ADN en forma de dímeros de pirimidina y la subsiguiente expresión y acumulación de proteínas
p53.
- principalmente oxígeno singlete - que provocan la peroxidación lipídica (Kane y col., 1993) y una perturbación en la permeabilidad de la membrana, da lugar a una apoptosis inmediata mediante una regulación por disminución de la expresión de bcl-2, la radiación UVB provoca una apoptosis retardada caracterizada por una inducción de una lesión en el ADN en forma de dímeros de pirimidina y la subsiguiente expresión y acumulación de proteínas
p53.
Cada vez hay más pruebas de que la apoptosis
puede jugar un papel importante en la reacción inmune (Lynch y
col., 1995).
Los protectores cutáneos clásicos frente a la
radiación UV que se usan como filtros solares absorben la radiación
UVA o UVB directamente sobre la superficie de la piel. La protección
proporcionada se expresa mediante su Factor de Protección Solar
(Sun Protection Factor, SPF), que es la dosis mínima a la
cual se observa un eritema (Dosis Mínima de Eritema -Minimal
Erythema Dose-, MED) y que es sumamente dependiente del tipo de
piel del usuario. El uso de dichos filtros solares es limitado
porque sólo proporcionan un cierto grado de protección mientras
están directamente expuestos al sol. No tienen ningún efecto
regenerador, ni pueden interactuar o prevenir ningún cambio
bioquímico inducido en la piel por la radiación UV.
Para una fotoprotección integral, especialmente
frente al envejecimiento prematuro de la piel, fotoalergias,
inmunosupresión y cáncer cutáneo, es necesario, sin embargo,
revertir o reducir los cambios bioquímicos inducidos en la piel por
la radiación UV.
El documento JP05-017363
describe el efecto antiinflamatorio producido por
Lactobacillus, bifidobacterias o sus paredes celulares en
relación con el eritema solar.
Se ha demostrado que la exposición a la
radiación UV puede provocar una dimerización de dos moléculas
adyacentes de pirimidina del ADN. Un sistema de reparación celular
endógeno controlado enzimáticamente es capaz de reparar dicho daño,
siempre que la frecuencia del daño no supere la capacidad
fisiológica de reparación. Si la capacidad de reparación es
insuficiente, lo que podría ser el caso en la piel envejecida o tras
una exposición excesiva a radiación UV, las células con el ADN no
reparado podrían ser capaces de sobrevivir. La consecuencia puede
ser una fotolesión crónica, como alteraciones funcionales dérmicas,
que dan como resultado un envejecimiento prematuro, el desarrollo
de una etapa precancerosa de las células, o el desarrollo final de
carcinomas
cutáneos.
cutáneos.
Los documentos EP0043128B1 y
US-A4.464.362 describen una composición cosmética
que promueve el proceso de reparación del ADN de la piel y que
contiene cultivos inactivados de bifidobacterias o de bacterias
relacionadas con este género.
Según extensas pruebas realizadas in
vitro e in vivo en animales y en seres humanos, se ha
determinado que la composición anterior, aplicada por vía tópica,
aumenta significativamente la tasa de reparación del ADN en células
dañadas por radiación UV. La anterior composición reparadora es una
contribución significativa a la técnica, ya que por primera vez se
proporciona un agente que puede prevenir eficazmente la lesión
inducida en el ADN por la radiación UV en las células cutáneas.
Sin embargo, según se discutió anteriormente, la
lesión cutánea inducida por la radiación UV implica una cascada de
acontecimientos fisiopatológicos, y no está limitada al daño en el
ADN. En los últimos años se ha hecho patente que la inhibición de
la inmunidad celular inducida por la radiación UV es otro factor muy
importante que contribuye a una lesión cutánea permanente,
incluyendo el desarrollo de un cáncer cutáneo y un envejecimiento
prematuro de la piel.
Fischer y col., 1998, describen mecanismos
moleculares de fotoenvejecimiento. La exposición a radiación UVR da
como resultado la estimulación de las citocinas liberadas desde los
queratinocitos o fibroblastos dérmicos. Esto da lugar a la
activación de las cascadas de transducción de señales de las cinasas
de proteínas, con la consecuencia de una activación del factor de
transcripción AP-1 que induce la expresión de
metaloproteasas de la matriz (MMP). Las MMP degradan la matriz
extracelular de la dermis. El daño en la ECM está seguido por una
reparación de la matriz, que es imperfecta, y por lo tanto da como
resultado un fotoenvejecimiento prematuro de la
piel.
piel.
Por lo tanto, el problema subyacente de la
presente invención es proporcionar una composición cosmética con
propiedades significativamente mejoradas porque minimiza o previene
las fotolesiones crónicas inducidas por la radiación UV en la piel
a nivel del ADN, promoviendo el mecanismo de reparación endógeno de
ADN, así como a nivel inmunológico.
Aunque se ha informado de que puede usarse la
administración por vía sistémica u oral de metabolitos o fracciones
de bifidobacterias para una modulación inmune (documentos DE4028018,
JP01-242532 y JP06-056618), no hay
ninguna divulgación o prueba de que la aplicación tópica de una
composición tal como la descrita por el anterior documento
US-A 4.464.362 tenga ningún efecto sobre la
inmunosupresión inducida por la radiación
UV.
UV.
Inesperadamente, se ha descubierto que una
composición cosmética que comprende biomasa de bifidobacterias o de
bacterias relacionadas con este género que ha sido suspendida y
desintegrada en una composición de matriz extracelular vegetal,
proporciona una protección óptima frente a la lesión cutánea crónica
inducida por la radiación UV actuando contra la inmunosupresión,
evitando roturas de la hebra de ADN y restaurando el equilibrio
entre las células cutáneas y su entorno extracelular.
Los documentos EP0668072B1 y US 5.547.997, que
se incorporan al presente documento como referencia, describen la
composición y el uso cosmético de una matriz extracelular vegetal.
La pared celular primaria de los vegetales superiores puede
definirse como una matriz extracelular vegetal. Según Roberts, 1990,
la pared celular vegetal primaria puede estar formada por varias
fracciones proteicas como glicoproteínas ricas en hidroxiprolina,
proteínas repetitivas ricas en prolina, proteínas de
arabinogalactano, extensinas, lectinas de solanáceas, proteínas
ricas en glicina y tioninas. Además de las fracciones proteicas, los
siguientes componentes están habitualmente presentes en la pared
celular primaria: pectina, xiloglucano, arabinoxilano, glucanos
\beta1-3 y \beta1-4, celulosa,
calosa y lignina (véase Roberts,
1989).
1989).
La pared celular vegetal consiste en una red de
polisacáridos y proteínas estructuralmente intrincada. Recientes
investigaciones han mostrado cómo las macromoléculas de la pared
celular, y fragmentos de las mismas, parecen estar implicados en
procesos tales como el crecimiento celular, la diferenciación
celular y tisular y el control de la patogenia (Levy y col.,
1992).
En la búsqueda de similitudes entre la matriz
extracelular de las células vegetales y animales se ha demostrado,
usando sondas de ADNc y anticuerpos antivitronectina humana, que las
plantas del lirio, el haba, la soja y el tomate contienen un
polipéptido de 55 kD que está relacionado con la vitronectina. Esto
sugiere que las moléculas similares a la vitronectina pueden
desempeñar un papel en la adhesión y la migración celular de una
forma análoga a las células animales (Sanders y col., 1991).
Un elevado consumo de soja, que da lugar a altas
exposiciones a isoflavonas de soja, se ha relacionado con una
reducción en el riesgo de cáncer. Las isoflavonas poseen una
variedad de características tales como capacidades antioxidantes,
antiproliferativas e inductoras de la diferenciación. El papel de la
función inmune está siendo cada vez más importante en la prevención
del cáncer (Zhang y col., 1997).
Mientras que las formulaciones cosméticas que
contienen la matriz extracelular vegetal mostraron que
contrarrestaban el envejecimiento prematuro de la piel inducido por
la radiación UV contrarrestando la reticulación del colágeno, y
mejoraban la firmeza y la elasticidad de la piel en seres humanos,
no hay ninguna descripción o sugerencia de que dicha composición de
matriz vegetal, aplicada por vía tópica, tenga un efecto protector
frente a la inmunosupresión inducida por radiación UV.
Según se mencionó anteriormente,
sorprendentemente se ha averiguado que las bifidobacterias,
desintegradas en una composición de una matriz extracelular
vegetal, proporcionan una protección óptima frente a las
alteraciones cutáneas inducidas por la radiación UV. Por lo tanto,
además de evitar la ruptura de la hebra de ADN, la composición
también contrarrestará la inmunosupresión inducida por la radiación
UV y mantendrá la integridad de la matriz extracelular.
Este hallazgo es inesperado y no podría haber
sido predicho según las propiedades conocidas de cada uno de los
componentes individuales. La preparación combinada del complejo de
sustancias activas según la invención proporciona una excelente
composición cosmética que contrarresta la lesión inducida en el ADN
por la radiación UV y la inmunosupresión. En vista de este perfil
de actividad único, se proporciona una nueva metodología integral
para la prevención del envejecimiento prematuro de la piel inducido
por la radiación UV.
El primer componente del complejo activo
inventivo es obtenido a partir de bacterias inactivadas del género
Bifidobacteria, tal como la especie Bifidobacterium
longum (Reuter) u otra bacteria grampositiva no esporulada
relacionada con el género Bifidobacterium, según se describe
en los documentos EP0043128B1 y US-A 4.464.362, que
se incorporan al presente documento como referencia. Contiene los
productos metabólicos, la fracción citoplasmática y los
constituyentes de la pared celular, tales como mureína y
polisacáridos.
Las bifidobacterias pueden cultivarse
anaeróbicamente en un medio apropiado, por ejemplo, en las
condiciones descritas en los documentos EP0043128B1 y
US-A 4.464.362. Después de alcanzar la fase
estacionaria temprana, las bacterias son inactivadas mediante
pasteurización (a 60-65ºC durante aproximadamente 30
min). Las bacterias son recogidas mediante las técnicas de
separación habituales, por ejemplo, filtración a través de membrana
o centrifugación, resuspendidas en una disolución fisiológica
estéril de NaCl y separadas de nuevo. El lavado se repite de dos a
tres veces y la biomasa se recoge, y puede ser almacenada
ultracongelada.
Otros materiales de partida adecuados que pueden
usarse son bacterias relacionadas con el género
Bifidobacterium, tales como las enumeradas en, por ejemplo,
Bergery's Manual of Determinative Bacteriology, 8ª edición (1975)
como Actinomycetaceae, Propionibacteriaceae, Lactobacillaceae
y bacterias corineformes (como referencia, entre otras, las páginas
576, 599, 633 y 659 hasta 600).
El segundo componente del complejo de sustancias
activas según la invención es una composición de matriz extracelular
vegetal que puede prepararse, por ejemplo, a partir de quelpos,
kudzú, maíz, zanahoria, tomate, tabaco, haba, soja, remolacha
azucarera, patata, melón o petunia. Una fuente particularmente
preferida es la soja.
Los procedimientos de extracción preferidos se
describen en el documento
EP-0-668072 en la pág. 4 línea 42 -
pág. 5 línea 27.
Las etapas del proceso particularmente preferido
para obtener el segundo componente se describen a continua-
ción:
ción:
- (a)
- el tejido vegetal, preferiblemente de soja, se trocea y se lava con una disolución acuosa que contiene opcionalmente como antioxidante metabisulfito (Na_{2}S_{2}O_{5}), preferiblemente a una concentración de 4 mM. Cualquier otra concentración en el intervalo mM es adecuada. La disolución de lavado contiene adicionalmente un conservante, por ejemplo, Phenonip, preferiblemente a una concentración del 0,3 al 0,4%.
- (b)
- el antioxidante opcional se elimina mediante un lavado con una disolución acuosa de lavado que contiene un conservante, por ejemplo, Phenonip, preferiblemente a una concentración del 0,3 al 0,4%.
- (c)
- el tejido vegetal troceado y lavado se extrae en condiciones no hidrolizantes con una disolución preferiblemente de CaCl_{2} 0,2 M, pH de aproximadamente 4, conservada preferiblemente con Phenonip del 0,3 al 0,4%. La proporción entre el tejido vegetal y la disolución de extracción es preferiblemente de 1:10 (p/v). La extracción continúa durante al menos 24 horas con agitación a una temperatura reducida de aproximadamente 5ºC.
- (d)
- el material insoluble se elimina del lavado usando técnicas de separación convencionales, por ejemplo centrifugación y una filtración final, usando preferiblemente una membrana de 0,45 \mum.
La composición de matriz extracelular vegetal
obtenida según la invención, obtenible mediante los anteriores
procedimientos de extracción, comprende uno o más de los siguientes
sustancialmente en su conformación nativa: glicoproteínas,
incluyendo proteínas ricas en hidroxiprolina (extensinas); proteínas
repetitivas ricas en prolina, proteínas de arabinogalactano, y
lectinas; y polímeros de carbohidratos tales como pectina,
xiloglucano, arabinoglucano, glucano, calosa y lignina.
La proporción relativa de estos componentes de
matriz extracelular vegetal en el extracto depende de la fuente del
extracto, es decir, del tipo de planta usada y de la técnica de
extracción empleada. Por ejemplo, un extracto de hojas de kudzú
contiene más glicoproteínas ricas en hidroxiprolina que un extracto
de maíz. Sin embargo, en cada caso los componentes de la matriz
extracelular tienen sustancialmente su conformación nativa y son
capaces de mediar en la función biológica de la matriz extracelular,
y por lo tanto son útiles en composiciones
cosméticas.
cosméticas.
La composición de matriz extracelular vegetal
así preparada en un tampón acuoso conservado puede usarse
directamente para resuspender la biomasa inactivada de
bifidobacterias o de bacterias relacionadas con este género. La
concentración de cultivos inactivados de bifidobacterias en el
extracto de matriz extracelular vegetal está preferiblemente en el
intervalo entre 0,1 g/l a 10 g/l (más preferiblemente en el
intervalo de 0,4 g/l). Esta suspensión puede desintegrarse mediante
ultrasonidos, procedimientos mecánicos tales como un molino celular,
u homogenizarse a alta presión, o mediante la combinación de los
procedimientos mencionados.
El complejo activo según la invención (es decir,
los cultivos inactivados de bifidobacterias homogenizadas como una
parte endógena de la composición de matriz extracelular vegetal) que
puede ser formulado en preparaciones cosméticas emulsionadas,
acuosas y acuosas-alcohólicas diseñadas para su
aplicación tópica sobre la piel por medios y procedimientos
conocidos por una persona experta habitual en la materia. La dosis
preferida en una composición cosmética es del 0,1% al 10%, pero no
está limitada a este intervalo. En casos especiales, el complejo
activo inventivo puede aplicarse sin un vehículo cosmético.
Mediante la aplicación tópica de las
composiciones cosméticas según la invención puede contrarrestarse la
lesión celular permanente debida a la lesión en el ADN y la
inmunosupresión provocada por la radiación UV, y retrasarse el
proceso de envejecimiento de la piel provocado por la luz,
proporcionando así composiciones cosméticas con unas cualidades
altamente deseables.
Las siguientes formulaciones son ejemplos de
formas de realización de la invención, pero no pretenden limitar el
ámbito de esta invención o restringirla a estas formulaciones en
particular.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
1
Una loción corporal (aceite en agua) que
contiene la composición activa que comprende:
\vskip1.000000\baselineskip
La mezcla a) se funde aproximadamente a 70ºC y
la mezcla b) se calienta aproximadamente a 70ºC y se añade a la
mezcla a) con agitación.
La agitación continúa hasta que la loción se ha
enfriado hasta aproximadamente 30ºC. Entonces se añaden las
composiciones c) y d) con agitación, la loción se homogeneiza.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
2
Un gel-loción que contiene la
composición activa que comprende:
La mezcla a) se disuelve aproximadamente a
50ºC.
La mezcla b) se dispersa a temperatura ambiente
y se añade a a) con agitación. Entonces se añade la composición c)
a la misma con agitación.
Una crema (aceite en agua) que contiene la
composición activa que comprende:
La mezcla a) se funde aproximadamente a 70ºC y
la mezcla b) se calienta asimismo aproximadamente a 70ºC y se añade
a la mezcla a) con agitación.
La agitación continúa hasta que la crema se ha
enfriado hasta aproximadamente 30ºC. Entonces se añade la
composición c) con agitación y la crema se homogeneiza.
\vskip1.000000\baselineskip
Una crema (aceite en agua) que contiene la
composición activa que comprende:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La mezcla a) se calienta aproximadamente a 80ºC,
la mezcla b) se lleva asimismo aproximadamente a 80ºC y se añade a
la mezcla a) con agitación.
La agitación continúa hasta que la crema se ha
enfriado hasta aproximadamente 30ºC. Se añaden c) y d). La crema se
homogeneiza mediante un rodillo.
El complejo activo combinado mostró
inesperadamente una elevada eficacia, con respecto a lo que podría
esperarse a partir de los efectos conocidos de los componentes
individuales.
Los experimentos descritos a continuación
demuestran claramente el efecto beneficioso de las
bifidobacterias/
complejo de matriz extracelular vegetal según la invención frente a la lesión cutánea inducida por radiación
UV.
complejo de matriz extracelular vegetal según la invención frente a la lesión cutánea inducida por radiación
UV.
Prueba
1
Para la investigación de la influencia del
complejo activo de la invención sobre la reparación del ADN se usó
el ELISA de Proliferación Celular con BrdU (obtenible en Roche;
1647229).
Se tripsinizaron queratinocitos humanos (HaCaT),
cultivados en DMEM + FCS al 5% + L-glutamina +
gentamicina (medio de cultivo), en fase de crecimiento
estacionario, y se preparó una suspensión celular de 3 x 10^{5}
células/ml.
\bullet la suspensión celular obtenida se
sembró en placas de microtitulación usando 50 \mul/pocillo (1,5 x
10^{4} células/pocillo).
\bullet se prepararon diluciones de muestra
(0,01%; 0,1%) del complejo activo según la invención usando el
medio de cultivo sin FCS y se introdujeron 50 \mul de cualquiera
de estas diluciones en los pocillos apropiados; como control se usó
únicamente medio de cultivo sin FCS.
\bullet la placa se incubó en la estufa de
incubación de CO_{2} a 37ºC durante 72 horas.
\bullet entonces se retiró el sobrenadante, y
cada pocillo se lavó dos veces con 200 \mul de PBS por
pocillo.
\bullet se añadieron 50 \mul de PBS a las
células de cada pocillo, que después se irradiaron (2 J/cm^{2} de
UVA + 0,2/cm^{2} de UVB).
\bullet el sobrenadante se retiró y se
sustituyó por medio de cultivo sin FCS (100 \mul/pocillo).
\bullet después de añadir la disolución de
BrdU (10 \mul/pocillo) las placas se incubaron en la estufa de
incubación de CO_{2} a 37ºC durante 18 horas.
\bullet entonces se retiró el medio y las
células se lavaron y se fijaron.
\bullet el anticuerpo
anti-BrdU-POD se incubó a
temperatura ambiente durante 2 horas (100 \mul/pocillo de
disolución de anticuerpo).
\bullet las placas se lavaron y se añadió la
disolución del sustrato (100 \mul/pocillo) (aproximadamente 20
min).
\bullet el ensayo terminó mediante la adición
de 50 \mul/pocillo de H_{2}SO_{4} 1 M y se leyeron los
valores de DO a 450 nm (referencia: 630 nm).
Según se muestra en la Fig. 1, el producto
inventivo aumenta la incorporación de bromodesoxiuridina (BrdU) en
el ADN hasta en un 18% tras una irradiación UV de los
queratinocitos, siendo el nivel de BrdU una medida directa de la
reparación del ADN.
Prueba
2
Para la determinación de la formación de
fragmentos de ADN se empleo el ELISA de Detección de Muerte Celular
(obtenible en Roche, 1774425).
\bullet Se tripsinizaron queratinocitos
humanos (HaCaT), cultivados en DMEM + FCS al 5% +
L-glutamina + gentamicina (medio de cultivo), en
fase de crecimiento estacionario, y se preparó una suspensión
celular de 3 x 10^{5} células/ml.
\bullet la suspensión celular obtenida se
sembró en placas de microtitulación usando 50 \mul/pocillo (1,5 x
10^{4} células/pocillo).
\bullet se prepararon diluciones de muestra
(0,05%; 0,1%) del complejo activo según la invención usando el
medio de cultivo sin FCS y se introdujeron 50 \mul de cualquiera
de estas diluciones en los pocillos apropiados; como control se usó
únicamente medio de cultivo sin FCS.
\bullet después la placa se incubó en la
estufa de incubación de CO_{2} a 37ºC durante 72 horas.
\bullet entonces se retiró el sobrenadante, y
cada pocillo se lavó dos veces con 200 \mul de PBS por
pocillo.
\bullet se añadieron 50 \mul de PBS a cada
pocillo y la placa se irradió (1 J/cm^{2} de UVA + 0,1/cm^{2}
de UVB).
\bullet el sobrenadante se retiró y se
sustituyó por medio de cultivo sin FCS (100 \mul/pocillo).
Entonces la placa se incubó en la estufa de incubación de CO_{2}
a 37ºC durante 18 horas.
\bullet a continuación las células se lisaron
con 200 \mul de reactivo de lisado y se centrifugaron a 200 x g
durante 10 min.
\bullet el sobrenadante resultante se
introdujo en una placa de microtitulación, y los nucleosomas se
detectaron usando un anticuerpo
anti-histona-biotina y un anticuerpo
anti-ADN-POD (ELISA de Detección de
Muerte Celular (Roche; 1774425).
\bullet los valores de DO se leyeron a 405 nm
(referencia: 490 nm).
Según se muestra en la Fig. 2, el complejo
activo según la invención evita la formación de rupturas en el ADN
bicatenario (nucleosomas) tras una irradiación UV.
Prueba
3
\bullet Se tripsinizaron queratinocitos
humanos (HaCaT), cultivados en DMEM + FCS al 5% +
L-glutamina + gentamicina (medio de cultivo), en
fase de crecimiento estacionario, y se preparó una suspensión
celular de 3 x 10^{5} células/ml.
\bullet la suspensión celular obtenida se
sembró en placas de microtitulación usando 50 \mul/pocillo (1,5 x
10^{4} células/pocillo).
\bullet se prepararon diluciones de muestra
(0,01%; 0,05%; 0,1%; 0,5%) del complejo activo según la invención
usando el medio de cultivo sin FCS y se introdujeron 50 \mul de
cualquiera de estas diluciones en los pocillos apropiados; como
control se usó únicamente medio de cultivo sin FCS.
\bullet la placa se incubó en la estufa de
incubación de CO_{2} a 37ºC durante 72 horas.
\bullet entonces se retiró el sobrenadante, y
cada pocillo se lavó dos veces con 200 \mul de PBS por
pocillo.
\bullet se añadieron 50 \mul de PBS a cada
pocillo y la placa se irradió (2 J/cm^{2} de UVA + 0,2/cm^{2}
de UVB).
\bullet después se retiró el sobrenadante y se
añadieron 100 \mul/pocillo de medio sin FCS.
\bullet entonces la placa se incubó en la
estufa de incubación de CO_{2} a 37ºC durante 18 horas.
\bullet a cada pocillo se añadieron 10 \mul
de disolución de MTT (5 mg de PBS por ml), y la placa se incubó a
37ºC durante 4 horas (10% de CO_{2}).
\bullet el sobrenadante resultante se retiró,
y se añadieron a cada pocillo 100 \mul de una disolución ácida de
SDS/DMSO.
\bullet los valores de DO se leyeron a 570
nm.
Según se muestra en la Fig. 3, el complejo
activo según la invención contrarresta la reducción en la viabilidad
celular tras una irradiación UV.
Prueba
4
Se tripsinizaron queratinocitos humanos (HaCaT),
cultivados en DMEM + FCS al 5% + L-glutamina +
gentamicina (medio de cultivo), en fase de crecimiento
estacionario, y se preparó una suspensión celular de 3 x 10^{5}
células/ml.
\bullet la suspensión celular obtenida se
sembró en placas de microtitulación usando 50 \mul/pocillo (1,5 x
10^{4} células/pocillo).
\bullet se prepararon diluciones de muestra
(0,01%; 0,1%) del complejo activo según la invención usando el
medio de cultivo sin FCS y se introdujeron 50 \mul de cualquiera
de estas diluciones en los pocillos apropiados; como control se usó
únicamente medio de cultivo sin FCS.
\bullet la placa se incubó en la estufa de
incubación de CO_{2} a 37ºC durante 72 horas.
\bullet entonces se retiró el sobrenadante, y
cada pocillo se lavó dos veces con 200 \mul de PBS por
pocillo.
\bullet después se añadieron 50 \mul de PBS
a cada pocillo y la placa se irradió (2 J/cm^{2} de UVA +
0,2/cm^{2} de UVB).
\bullet se retiró el sobrenadante y se
añadieron 100 \mul/pocillo de medio sin FCS.
\bullet la placa se incubó en la estufa de
incubación de CO_{2} a 37ºC durante 12 horas, después se retiró
el medio de las células se lavaron y se fijaron.
\bullet el anticuerpo
anti-IL-10 se incubó a 37ºC durante
2 horas y después la placa se lavó.
\bullet el anticuerpo
anti-ratón-igG-biotina
se incubó a 37ºC durante 1 hora, luego se lavó de nuevo la
placa.
\bullet la placa se incubó con el complejo
estreptavidina-POD a 37ºC durante 1 hora, y después
de un lavado adicional se añadió la disolución de sustrato
(ABTS).
\bullet la reacción se detuvo con 50
\mul/pocillo de H_{2}SO_{4} 1 M y los valores de DO se leyeron
a 450 nm (referencia: 630 nm).
La Fig. 4 muestra que el complejo activo según
la invención reduce la expresión de IL-10 por parte
de los queratinocitos irradiados con UV en aproximadamente un 30%,
contrarrestando así la inmunosupresión sistémica.
Prueba
5
Se determinó la influencia sobre la secreción de
IL-10 mediante el ELISA Quantikine^{TM} para
IL-10 humana (obtenible en R&D Systems,
Wiesbaden, Alemania).
\bullet se aislaron monocitos y linfocitos de
sangre periférica obtenidos de un voluntario sano mediante un
aislamiento por gradiente de densidad (Polymorphprep^{TM}). Los
monocitos se separaron mediante una incubación de los monocitos y
de los linfocitos en medio RPMI 1640 con un 10% de FCS durante 2
horas, mediante lo cual los monocitos se adhirieron a las placas de
cultivo.
\bullet el complejo activo según la invención
(0,01% y 0,001%) se añadió a los monocitos (1,75 x 10^{5}
células/200 \mul/pocillo) estimulados con 10 \mug de
lipopolisacáridos (LPS). Los monocitos estimulados con 10 \mug/ml
de LPS sirvieron como control positivo.
\bullet los monocitos se cultivaron durante 18
horas (37ºC, 10% de CO_{2}).
\bullet la IL-10 en los
sobrenadantes de los cultivos celulares se cuantificó mediante un
ELISA en sándwich disponible comercialmente (ELISA
Quantikine^{TM} para IL-10 humana obtenido en
R&D Systems, Wiesbaden, Alemania), que se llevaron a cabo por
duplicado.
La exposición a radiación UV da como resultado
una inmunosupresión sistémica mediada por la IL-10
secretada por los monocitos. En esta relación, podría demostrarse
que el complejo activo según la invención disminuye la secreción de
IL-10 de los monocitos estimulados de una forma
dependiente de la dosis, según se muestra en la
Fig. 5.
Fig. 5.
Prueba
6
Se determinó la expresión de la
MMP-1 tras una irradiación UV usando el Sistema de
Ensayo de Actividad de MMP-1 (obtenido en Biotrak
[Amersham Pharmacia]; RPN 2629).
Se tripsinizaron queratinocitos humanos (HaCaT),
cultivados en DMEM + FCS al 5% + L-glutamina +
gentamicina (medio de cultivo), en fase de crecimiento
estacionario, y se preparó una suspensión celular de 3 x 10^{5}
células/ml.
\bullet la suspensión celular obtenida se
sembró en placas de microtitulación usando 50 \mul/pocillo (1,5 x
10^{4} células/pocillo).
\bullet se prepararon diluciones de muestra
(0,1%; 0,5%) del complejo activo según la invención usando el medio
de cultivo sin FCS y se introdujeron 50 \mul de cualquiera de
estas diluciones en los pocillos apropiados; como control se usó
únicamente medio de cultivo sin FCS.
\bullet la placa se incubó en la estufa de
incubación de CO_{2} a 37ºC durante 72 horas.
\bullet entonces se retiró el sobrenadante, y
cada pocillo se lavó dos veces con 200 \mul de PBS por
pocillo.
\bullet después se añadieron 50 \mul de PBS
a cada pocillo, después la placa se irradió (1 J/cm^{2} de UVA +
0,1/cm^{2} de UVB).
\bullet se retiró el sobrenadante y se añadió
medio de cultivo sin FCS (100 \mul/pocillo), después la placa se
incubó en la estufa de incubación de CO_{2} a 37ºC durante 48
horas.
\bullet entonces se añadieron 100 \mul del
sobrenadante a los pocillos apropiados de la placa de prueba
recubierta con anti-MMP-1, que se
incubó entonces a 4ºC durante 18 horas.
\bullet la placa se lavó y se añadieron la
disolución de detección (50 \mul/pocillo) así como 50 \mul del
tampón de prueba (añadir al patrón una disolución de APMA en lugar
del tampón de prueba).
\bullet tras una breve agitación la placa se
leyó a 405 nm (Abs_{t=0}).
\bullet tras una incubación a 37ºC durante 6
horas, la placa se leyó de nuevo a 405 nm (Abs_{t=0}).
\bullet la expresión de la
MMP-1 activa se calculó usando la siguiente
fórmula:
\vskip1.000000\baselineskip
\frac{(Abs_{t=6} - Abs_{t=o})\ x\
1000}{h^{2}}
\vskip1.000000\baselineskip
Según se muestra en la Fig. 6, el complejo
activo según la invención reduce la expresión de la
MMP-1 tras una irradiación UV de queratinocitos
humanos en hasta un 68% en comparación con el control. La reducción
en la actividad de la MMP-1 representa una
protección frente a la escisión hidrolítica del colágeno de triple
hélice de los tipos I, II y III.
Los resultados de las pruebas anteriores indican
claramente que las bifidobacterias/complejo de matriz extracelular
vegetal según la invención es particularmente eficaz para
contrarrestar la lesión de las células cutáneas inducida por la
radiación UV.
\bulletBaadsgard, O.: In vivo
ultraviolet irradiation of human skin results in profound
perturbation of the immune system. Arch Dermatol 127:
99-109, 1991
\bulletDaniels, F., Jr., D.
Brophy y W. C. Lobitz Jr.: Histochemical responses of
human skin following ultraviolet irradiation. J Invest
Dermatol 37: 351-356, 1961
\bulletDenkins, Y. D., I. J.
Fidler y M. L. Kripke: Exposure of mice to
UV-B radiation suppresses delayed hypersensitivity
to Candida albicans. Photochem Photobiol 49:
615-619, 1989
\bulletFisher, G. J. y J. J.
Voorhees: Molecular Mechanisms of Photoaging and its
Prevention by Retinoic Acid: UVR Induces MAP Kinase Signal
Transduction Cascades that Induce AP-1 Regulated
Matrix Metalloproteinases that Degrade Human Skin In Vivo. J
Invest Dermatol, Symposium Proceedings 3: 61-68,
1998
\bulletGiannini, M. S.: Suppression of
pathogenesis in cutaneous leishmaniasis by
UV-irradiation. Infect Immunol 51:
838-843, 1986
\bulletIwai, I., M. Hatao, M.
Naganum, Y. Kumano y M. Ichihashi:
UVA-induced immune suppression through an oxidative
pathway. J Invest Dermatol 112 (1): 19-24,
1999
\bulletJeevan, A. y M. L.
Kripke: Effect of a single exposure to UVB radiation on
Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin
infection in mice. J Immunol 143: 2837-2843,
1989
\bulletKane, D. J., T. A.
Sarafin, S. Auton y col.: Bcl-2 inhibition of
neural cell death: decreased generation of reactive oxygen species.
Science 262: 1274-1276, 1993
\bulletKripke, M. L.: Immunological
unresponsiveness induced by UV radiation. Immunol Rev 80:
87-102, 1984
\bulletKvam, E. y R. M.
Tyrrell: Induction of oxidative DNA base damage in human skin
cells by UV and near visible radiation. Carcinogenesis 18:
2379-2384, 1997
\bulletLevy, S., L. A.
Staehelin: Synthesis, assembly and function of plant cell
wall macromolecules. Current Opinion in Cell Biology 4:
856-862, 1992
\bulletLynch, D. H., F.
Ramsdell y M. R. Alderson: Fas and FasL in the
homeostatic regulation of immune responses. Immunol Today
16: 569-574, 1995
\bulletMiller y col. Biochem
11: 4903, 1972
\bulletOtani, T. y R. Mori: The
effects of ultraviolet irradiation of the skin on herpes simplex
virus infection: alteration in immune function mediated by
epidermal cells and in the course of infection. Arch Virol
96: 1-15, 1987
\bulletRattis y col.: Effects of UVB
Radiation on Human Langerhans Cells: Functional Alteration of CD 86
Upregulation and Induction of Apoptotic Cell Death. J Invest
Dermatol 111: 373-379, 1998
\bulletRoberts, K. Curr Op Cell
Biol 1: 1020-1027, 1989
\bulletRoberts, K. Curr Op Cell
Biol 2: 920-928, 1990
\bulletSanders, L. C., C. S.
Wang, L. L. Walling, E. M. Lord: Homologes of
the Substrate Adhesion Molecule Vitronectin occurs in four Species
of Flowering Plants. Plant Cell 3: 629-635,
1991
\bulletShreedar, V., T. Giese,
V. W. Sung y S. E. Ullrich: A cytokine cascade
including prostaglandin E2, IL-4, and
IL-10 is responsible for UV-induced
systemic immune suppression. J Immunol 160 (8):
3783-3789, 1998
\bulletTeunissen, M. B. M.: Dynamic
nature and function of epidermal Langerhans cells in vivo and
in vitro: a review, with emphasis on human Langerhans cells.
Histochem J24: 697-716, 1992
\bulletWang, Y. y col.: Differential
Regulation of P53 and Bcl-2 Expression by UV A and
B. J Invest Dermatol 111: 380-384,
1998
\bulletYoung, A. R.: The sunburn cell.
Photodermatol 4: 127-134, 1987
\bulletZhang, R., Y. Li, W.
Wang: Nutrition and Cancer 29
(1):24-28, 1997
Claims (9)
1. Composición cosmética para su aplicación
tópica para contrarrestar el daño cutáneo inducido por la radiación
UV que comprende como sustancias activas un primer componente
obtenido a partir de cultivos inactivados de bacterias del género
Bifidobacterium o de las siguientes bacterias relacionadas
con el género Bifidobacterium: Actinomycetaceae,
Propionimycetaceae, Lactobacillaceae y bacterias corineformes, y
un segundo componente que es un extracto de una matriz extracelular
vegetal que consiste en una o más glicoproteínas en una conformación
sustancialmente nativa, un polímero de carbohidratos en una
conformación sustancialmente nativa y una proteína de
arabinogalactano en una conformación sustancialmente nativa, siendo
obtenible dicha composición mediante un proceso en el que dichas
bacterias inactivadas son desintegradas en dicho extracto de matriz
extracelular vegetal.
2. Composición cosmética según las
reivindicación 1, en la que el daño cutáneo inducido por la
radiación UV es inmunosupresión, daño en el ADN, reducción de la
viabilidad celular, transformación a un estado precanceroso,
formación de células quemadas o envejecimiento prematuro de la
piel.
3. Composición cosmética según las
reivindicaciones 1-2, en la que la inmunosupresión
está causada por un aumento en la expresión de la
IL-10.
4. Composición cosmética según las
reivindicaciones 1-2, en la que el envejecimiento
prematuro de la piel está causado por un aumento en la expresión de
la MMP-1.
5. Composición cosmética según las
reivindicaciones 1-4, caracterizada porque el
complejo de sustancias activas comprende un segundo componente que
consiste en una matriz extracelular vegetal procedente de las
siguientes plantas: quelpo, kudzú, maíz, zanahoria, tomate, tabaco,
haba, soja, remolacha azucarera, patata, melón o petunia.
6. Composición cosmética según la reivindicación
5, caracterizada porque el segundo componente procede de una
pared celular vegetal primaria o secundaria.
7. Composición cosmética según las
reivindicaciones 1 a 6, en la que el cultivo bacteriano inactivado
es obtenible mediante las siguientes etapas:
- (a)
- las bifidobacterias se cultivan en condiciones anaerobias en un medio apropiado,
- (b)
- tras alcanzar la fase estacionaria temprana, las bacterias son inactivadas mediante pasteurización, seguido de
- (c)
- recoger mediante técnicas de separación convencionales y lavar de 2 a 3 veces con una disolución fisiológica de NaCl, y
- (d)
- la biomasa recogida puede almacenarse ultracongelada.
8. Composición cosmética según las
reivindicaciones 1 a 7, en la que el segundo componente es obtenible
mediante las siguientes etapas de proceso:
- (a)
- el tejido vegetal se trocea y se lava con una disolución acuosa que contiene opcionalmente un antioxidante, conteniendo adicionalmente un conservante,
- (b)
- el antioxidante opcional se elimina lavándolo con una disolución acuosa de lavado que contiene un conservante,
- (c)
- el tejido vegetal troceado y lavado se extrae en condiciones no hidrolizantes, y
- (d)
- el material insoluble se elimina del extracto usando técnicas de separación convencionales y una filtración final.
9. Composición cosmética según las
reivindicaciones 1 a 8, obtenible mediante un proceso en el que:
- (a)
- la biomasa de bifidobacterias obtenidas según la reivindicación 7 se suspende en el extracto de una matriz extracelular vegetal obtenida según la reivindicación 8, con una proporción entre la biomasa y el extracto de preferiblemente aproximadamente 0,4 g en 1 l, y
- (b)
- la suspensión que contiene las bacterias inactivadas se desintegra preferiblemente usando técnicas mecánicas, como un molino celular.
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|---|---|---|---|---|
| AU2003210820B2 (en) * | 2002-01-31 | 2007-12-20 | University Of Rochester | Light activated gene transduction using ultraviolet light for cell targeted gene delivery |
| US7704272B2 (en) * | 2002-01-31 | 2010-04-27 | University Of Rochester | Method for introducing an ultraviolet light activated viral vector into the spinal column |
| HUE025145T2 (en) * | 2002-02-22 | 2016-01-28 | Meda Ab | A method for reducing and treating immunosuppression induced by ultraviolet B radiation |
| US20040264853A1 (en) * | 2003-01-31 | 2004-12-30 | Schwarz Edward M | Light probe for ultraviolet light activated gene transduction |
| JP2005082553A (ja) * | 2003-09-10 | 2005-03-31 | Kuraray Co Ltd | 皮膚外用剤 |
| MXPA06015184A (es) * | 2004-06-23 | 2007-11-22 | Nestec Sa | Procedimiento y composiciones utiles para prevenir y/o tratar pieles sensibles y/o secas. |
| FR2872047B1 (fr) * | 2004-06-23 | 2007-06-15 | Oreal | Composition pour peaux sensibles associant cation mineral et probiotique(s) |
| US7594594B2 (en) | 2004-11-17 | 2009-09-29 | International Flavors & Fragrances Inc. | Multi-compartment storage and delivery containers and delivery system for microencapsulated fragrances |
| JP4988186B2 (ja) * | 2004-12-06 | 2012-08-01 | 株式会社コーセー | 抗皮膚障害剤、及びこれを含有する皮膚外用剤 |
| CN101263222A (zh) * | 2005-09-13 | 2008-09-10 | 巴斯夫欧洲公司 | 抑制腋臭形成的微生物 |
| WO2007039086A1 (en) * | 2005-09-19 | 2007-04-12 | Basf Aktiengesellschaft | Microorganisms inhibiting the formation of foot malodor |
| WO2007134219A2 (en) * | 2006-05-11 | 2007-11-22 | Living Proof, Inc. | In situ polymerization for skin treatment |
| CA2671507A1 (en) * | 2006-12-19 | 2008-06-26 | Basf Se | Uses and methods for preventing and/or treating caries caused by mutans streptococci |
| FR2920305B1 (fr) | 2007-09-04 | 2010-07-30 | Oreal | Utilisation d'un lysat de bifidobacterium species pour le traitement de peaux sensibles. |
| FR2920304B1 (fr) | 2007-09-04 | 2010-06-25 | Oreal | Utilisation cosmetique de lysat bifidobacterium species pour le traitement de la secheresse. |
| EP2133414A1 (en) * | 2008-06-11 | 2009-12-16 | Basf Se | Uses and methods for preventing and /or treating oral malodour |
| FR2937547B1 (fr) | 2008-10-28 | 2012-11-09 | Oreal | Utilisation d'un lysat de microorganisme pour le traitement des peaux grasses |
| FR2937536B1 (fr) * | 2008-10-28 | 2016-07-01 | Oreal | Utilisation cosmetique d'un lysat de bifidobacterium species pour le traitement du cuir chevelu gras |
| GB2466195A (en) * | 2008-12-10 | 2010-06-16 | Sharad Mohan | Microbiotic Soap containing yoghurt bacteria |
| FR2942719B1 (fr) | 2009-03-04 | 2011-08-19 | Oreal | Utilisation de microorganismes probiotiques pour limiter les irritations cutanees |
| DE102009018334A1 (de) * | 2009-04-23 | 2010-10-28 | Beiersdorf Ag | Verwendung von Glycyrrhetinsäure und/oder Derivaten zur Herstellung kosmetischer oder dermatologischer Zubereitungen zur Prophylaxe von Schäden an der hauteigenen DNA und/oder zur Reparatur bereits eingetretener Schäden an der heuteigenen DNA |
| DE102009003026A1 (de) | 2009-05-12 | 2010-11-18 | Henkel Ag & Co. Kgaa | Probiotisches Handgeschirrspülmittel |
| FR2948021A1 (fr) | 2009-07-16 | 2011-01-21 | Oreal | Utilisation cosmetique de polypeptides de type lacritine |
| EP2522355B1 (en) * | 2010-01-06 | 2018-02-21 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Dna damage repair promoter for oral application, and elastase activity inhibitor for oral application |
| FR2959128B1 (fr) * | 2010-04-23 | 2012-07-13 | Oreal | Utilisation cosmetique d'un lysat de bifidobacterium species pour le traitement des odeurs corporelles |
| EP2672954B1 (en) * | 2011-02-11 | 2017-04-19 | Laboratorios Cinfa, S.A. | Biotechnologically derived active in cosmetic compositions useful for protecting the skin from damages induced or produced by infrared-radiations |
| CA2831345C (en) | 2011-05-06 | 2022-05-03 | Organobalance Medical Ag | Lactic acid bacterial strains that coaggregate with staphylococcus aureus, and compositions and uses of the strains |
| ES2660775T3 (es) | 2011-05-16 | 2018-03-26 | Belano Medical Ag | Nuevas bacterias del ácido láctico y composiciones que las contienen contra los resfriados bacterianos |
| FR2999932B1 (fr) | 2012-12-21 | 2020-01-31 | Société des Produits Nestlé S.A. | Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthese de melanine |
| FR2999931A1 (fr) | 2012-12-21 | 2014-06-27 | Oreal | Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthese de melanine |
| US9789070B2 (en) | 2015-07-28 | 2017-10-17 | Elc Management Llc | Sheet packs for treating facial or body surfaces |
| WO2017063909A1 (en) * | 2015-10-13 | 2017-04-20 | Unilever N.V. | A process for preparing metabolites by reaction of a prebiotic component with a probiotic component |
| CA3205229A1 (en) * | 2020-12-18 | 2022-06-23 | Liberty Biosecurity, Llc | Compositions from a bacterial organism and uses thereof |
| WO2022155881A1 (zh) * | 2021-01-22 | 2022-07-28 | 佛山科学技术学院 | 一种具有皮肤紫外灼伤修复功能的皮肤源细菌kbfs1720及其应用 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3024318A1 (de) * | 1980-06-27 | 1982-01-28 | Chemisches Laboratorium Dr. Karl Richter GmbH, 1000 Berlin | Kosmetische mittel |
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| CH679677A5 (es) | 1989-09-29 | 1992-03-31 | Om Lab Sa | |
| US5547997A (en) * | 1991-10-01 | 1996-08-20 | Chemisches Laboratorium Dr. Kurt Richter Gmbh | Plant-derived cosmetic composition and method of treatment of skin |
| FR2696932B1 (fr) * | 1992-10-19 | 1994-11-25 | Sederma Sa | Nouvelles compositions à usage cosmétique consistant de l'association d'un filtrat de fermentation et d'extraits de plantes. |
| FR2756181B1 (fr) | 1996-11-26 | 1999-03-05 | Au Mont Beaute | Composition cosmetique, pharmaceutique a base de culture inactivee de bacteries bifidobacterium, d'huile de menthe et d'un acide |
| BR9914476B1 (pt) * | 1998-10-09 | 2010-11-30 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | composição cosmética. |
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