ES2285984T3 - Procedimiento y dispositivo de separacion de elementos formes a partir de una fase liquida de una muestra de un fluido biologico complejo. - Google Patents
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Abstract
Sistema de recipientes destinado a examinar elementos formes que se encuentran comprendidos en una muestra de fluido biológico acuoso, presentando dicho sistema de recipientes una cámara (4) con un volumen conocido, encontrándose dicha cámara (4) definida por una primera pared (8), unas paredes laterales (6) y una pared transparente de visualización de la muestra (12) que se dispone en la cara opuesta a dicha primera pared (8); una capa (9) de un hidrogel expandible que cubre dicha primera pared (8) de la cámara, presentando dicha capa de hidrogel expandible (9) una superficie plana enfrentada a dicha pared de visualización de la muestra (12) de dicha cámara (4), encontrándose presente dicha capa de hidrogel expandible (9) en una cantidad que puede provocar que dicho hidrogel llene esencialmente dicha cámara (4) y capture todos los elementos formes de la muestra en dicha superficie plana del hidrogel cuando dicha capa de hidrogel (9) se expande debido a la absorción de esencialmente toda lafase acuosa de la muestra del fluido y a la exclusión de los elementos formes de la muestra.
Description
Procedimiento y dispositivo de separación de
elementos formes a partir de una fase líquida de una muestra de un
fluido biológico complejo.
La presente invención se refiere a un
dispositivo y a un procedimiento de separación de elementos formes
a partir de una fase líquida de una muestra de un fluido biológico,
a fin de facilitar la utilización de un instrumento óptico para
examinar los elementos formes. Más particularmente, la presente
invención se refiere a un dispositivo y a un procedimiento que
tiene como resultado que los elementos formes se disponen en una
superficie plana del dispositivo en el que dicha superficie plana
conforma el plano focal del instrumento óptico.
Los elementos formes de un fluido biológico
complejo se aíslan habitualmente, o se separan, de una fase líquida
de una muestra de tal modo que se permita el examen detallado de
dichos elementos formes. La citometría de flujo constituye una
técnica de identificación de elementos formes tales como los
glóbulos sanguíneos de una muestra de sangre. Al utilizar dicha
técnica, se pueden diferenciar entre sí diversos tipos de glóbulos
sanguíneos y otros elementos formes de la sangre, y se puede
realizar un recuento de los mismos. Al realizar dicho
procedimiento, la muestra de sangre se ha de diluir antes de
pasarse por el citómetro de flujo. Dicha técnica de citometría de
flujo no permite que las células u otros elementos formes de una
muestra de sangre se examinen en reposo. Dicha técnica no se puede
utilizar eficazmente para detectar hechos infrecuentes en una
muestra de sangre excepto si la muestra se somete a procedimientos
de enriquecimiento tales como los procedimientos de enriquecimiento
de perlas de partículas magnéticas del tipo propuesto por Dynel de
Noruega.
Una segunda técnica de identificación y recuento
de glóbulos sanguíneos y trombocitos de una muestra de sangre
anticoagulada se describe en la patente US n° 4.027.660 y en otras
patentes de Robert A. Levine y/o Stepehn C. Wardlaw. Dicha técnica
utiliza un tubo capilar que presenta un inserto dispuesto en su
interior. La muestra de sangre se mezcla con un tinte tal como el
naranja de acridina y se centrifugó en el tubo capilar. Los
glóbulos blancos y los trombocitos se depositaron en el tubo entre
el inserto y la pared del tubo de modo que las capas de glóbulos
blancos y de trombocitos se extienden en un factor de
aproximadamente diez. La extensión de las capas de glóbulos y de
plaquetas permite determinar la fórmula leucocitaria y la cifra de
trombocitos del turbo determinando la distancia entre las
interfaces opuestas de las capas celulares y transformar los
resultados a cifras de células. Dicha segunda técnica tampoco
permite el examen de glóbulos sanguíneos individuales de la muestra
de sangre.
El documento EP 919 812 describe un
procedimiento de análisis de una muestra de sangre anticoagulada en
relación con la presencia o ausencia de células epiteliales
irregulares y/o células precursoras hemáticas. El procedimiento
implica disponer la muestra de sangre entera en un tubo de ensayo
que comprende un inserto que ocupa un volumen suficiente del tubo
de ensayo para formar un área anular bien definida en el tubo de
ensayo entre el inserto y el tubo en el que las células individuales
se aislarán y se podrán examinar. El área bien definida del tubo de
ensayo se examina con un aumento de por lo menos 100X por lo que se
puede analizar la morfología de las células individuales de la
misma. Se ha de señalar que dicho procedimiento requiere la
centrifugación de la muestra de sangre en el tubo de ensayo antes de
que se puedan examinar las células aisladas.
Se puede centrifugar una muestra de un fluido
con una pluralidad de elementos para separar la fase líquida de la
muestra de los elementos formes de la muestra. Dicha técnica es la
utilizada más habitualmente en los análisis de orina. En una muestra
de fluido biológico que comprende células u otras partículas, las
partículas se depositarán gracias a la acción de la gravedad por
separado de la fase líquida, y las células y las partículas se
separarán también entre sí en función de su peso específico. Una vez
se ha centrifugado la muestra, el líquido y las fracciones de los
elementos formes de la muestra se separan entre sí, y uno o las
otras se continúan analizando.
En el caso de un análisis de orina, una vez se
ha finalizado la centrifugación, entre el 90 y 95% del líquido
sobrenadante se decanta o se separa, y se vuelven a suspender las
células y las partículas en una cantidad inferior del líquido
restante y se disponen en un recipiente o en un portaobjetos para
su examen. Se podrá apreciar que el examen de diversos tipos de
células o partículas utilizando la técnica de centrifugación es
lento y requiere una destreza considerable por parte del técnico.
Dicha técnica asimismo no resulta precisa debido a la pérdida o a
la destrucción de elementos de la muestra durante la
centrifugación, y en el caso del análisis de orina, la imprecisión
de las etapas de decantación y de resuspensión.
Los elementos formes se pueden separar también
de una fase líquida biológica por filtración. Al utilizar dicha
técnica, se hace fluir la muestra a través de un filtro con un
tamaño de poro que evitará que determinados elementos formes
atraviesen el mismo. De este modo, si se conoce el tamaño de un
elemento forme seleccionado que se encuentra en la mezcla, se puede
seleccionar el filtro apropiado para separar el elemento
seleccionado de la muestra. Una vez los elementos formes se ven
retenidos por el filtro, se pueden separar y cultivar, o seguir
analizando. Los problemas que presenta dicha técnica comprenden el
coste de los filtros diversos; la necesidad de conocer el tamaño de
los elementos formes seleccionados; la instalación de conductos
requeridos para hacer fluir la muestra a través del filtro; la
posibilidad de obstruir el filtro.
Los elementos formes que se pueden aislar a
partir de disoluciones por centrifugación y/o filtración comprenden
microbios en fluidos biológicos; los cilindros urinarios; las
células somáticas y los glóbulos de los fluidos corporales distintos
de la sangre; quistes; células de muestras citológicas obtenidas
mediante frotación, aspiración o raspado, que se han dispuesto en
un medio líquido; huevos y parásitos que se encuentran en muestras
de heces; y células epiteliales cancerosas y células precursoras
hemáticas de sangre anticoagulada.
Tal como se ha señalado anteriormente, todas las
técnicas conocidas de separación de elementos formes a partir de
una fase líquida de una muestra de un fluido biológico comprenden
la centrifugación de la muestra o la filtración de la muestra. Se
pretende proporcionar una técnica de separación de los elementos
formes relativamente infrecuentes a partir de una fase líquida en
una muestra de fluido biológico en reposo, funcionando dicha
técnica sin movimientos, que resulte económica, que no requiera la
utilización de equipos adjuntos costosos tales como centrífugas,
conductos de fluidos y filtros, y que no requiera un grado elevado
de destreza y experiencia para poder utilizarla.
El documento US 3 990 849 da a conocer un
sistema de recipientes destinado a recoger elementos formes tales
como células que se encuentran comprendidas en una muestra de fluido
biológico acuoso tal como la sangre. Dicho sistema de recipientes
presenta una cubeta y una capa de gel comprendida en dicha cubeta en
la que la capa de gel presenta una superficie plana sobre la que se
vierte la muestra. La capa de gel absorbe sustancialmente toda la
fracción acuosa de la muestra del fluido a excepción de los
elementos formes que permanecen en dicha superficie plana del
gel.
El documento US 5 770 086 describe un
procedimiento para concentrar una disolución en la que se utilizan
hidrogeles expandibles para recoger elementos formes. Dichos
hidrogeles absorben sustancialmente toda la fase acuosa de la
muestra del fluido a excepción de los elementos formes.
La presente invención se refiere a un
procedimiento y a un dispositivo para utilizar en la separación de
elementos formes a partir de una fase líquida de una muestra de un
fluido acuoso. Las muestras de fluidos acuosos de interés
comprenden: orina; líquido cefalorraquídeo; líquido pleural;
ascitis; humores succionados de quistes, tales como quistes de
tiroides o de mama; muestras citológicas que se han dispuesto en un
fluido; suspensiones acuosas de muestras de heces; muestras de
plasma con abundantes trombocitos, mezclas preparadas de cultivos
microbianos acuosos, etcétera.
El dispositivo de la presente invención
comprende un recipiente para las muestras que presenta una parte
transparente destinada a la visualización de las muestras y que
comprende una pared extensible plana, que se puede expandir en
presencia de un medio acuoso. Dicha pared comprende un hidrogel
cuando se expande al añadir disoluciones acuosas según la presente
invención. El medio, antes de la expansión, puede comprender una
cantidad de disolución acuosa inferior a la capacidad de equilibrio
del medio permitiendo que el medio se hidrate y se expanda aún más,
o el medio puede ser un xerogel, es decir, una estructura
polimérica seca que, al absorber agua, se convierte en un hidrogel,
hinchándose durante el proceso. En aras de la simplicidad, el
término "hidrogel" tal como se utiliza en la presente
solicitud, pretende comprender cualquier matriz polimérica
estructurada que se hincha con agua a partir de un estado seco hasta
un estado de equilibrio completamente hinchado. La pared de capas
de hidrogel se dispone en la cara opuesta de la parte de
visualización de la muestra. La capa de hidrogel presenta un
espesor constante de modo que la superficie de la capa de hidrogel
que se encuentra más próxima a la parte de visualización de la
muestra del recipiente es plana. Cuando el dispositivo se utiliza
para analizar una muestra, la cámara. se llena con una cierta
cantidad de la muestra a examinar, depositándose la muestra en la
parte superior de capa de hidrogel. El recipiente para las muestras
presenta un volumen conocido, y el volumen de la capa del hidrogel
absorbente de agua es tal que, cuando se encuentra completamente
hidratado, absorberá esencialmente todo el agua de la muestra y
llenará sustancialmente el recipiente para las muestras con el
hidro-
gel.
gel.
Una vez que se ha añadido la muestra del fluido
al recipiente, el hidrogel se expandirá hacia la parte de
visualización de la muestra del recipiente hasta que el recipiente
se llene sustancialmente completamente con el hidrogel expandido. La
superficie del hidrogel expandido que se encuentra más próxima a la
parte de visualización de la muestra del recipiente permanecerá
plana mientras la capa de hidrogel se hincha. La fase acuosa de la
muestra biológica se absorberá en el hidrogel provocando de este
modo la expansión o el hinchamiento del hidrogel. A medida que el
hidrogel se expande, cualquier elemento forme que se encuentre en
la muestra se verá capturado en la superficie plana móvil del
hidrogel y permanecerá en su lugar en dicha superficie del hidrogel
mientras el hidrogel continúa expandiéndose. Cuando el hidrogel ha
alcanzado su volumen expandido final, sustancialmente toda la fase
líquida de la muestra se habrá absorbido en el hidrogel y todos los
elementos formes de la muestra se habrán capturado en la superficie
del hidrogel. Debido a que la superficie de captura del hidrogel
permanece plana, y a que se presiona preferentemente contra la
parte de visualización de la muestra del recipiente, los elementos
formes capturados de la muestra se fijarán en la superficie plana
que se puede realizar para que ocupe el plano focal de un
instrumento que se utiliza para examinar los elementos formes
capturados. Los diversos elementos formes que se encuentran en la
muestra y que se capturan en la superficie del hidrogel rehidratado
se pueden realzar de un modo diferenciador mediante sustancias
específicas de análitos de modo que diversos elementos formes se
puedan diferenciar entre sí. También se pueden teñir los elementos
formes de modo que se pueda examinar su morfología en la superficie
del hidrogel. Se puede realizar el recuento de diversos elementos
formes realzados de un modo diferenciador. Debido a que se conoce
el volumen de la muestra añadida al recipiente, se puede obtener la
cifra de elementos formes por unidad de volumen de la muestra. El
aislamiento y la concentración de elementos formes de la superficie
del hidrogel permite asimismo recoger elementos formes específicos
de la superficie del hidrogel para seguir analizando los elementos
recogidos. El dispositivo de la presente invención se puede
examinar mediante un instrumento de lectura óptica, tal como un
microscopio o un instrumento de diferenciación óptica.
Constituye por lo tanto un objetivo de la
presente invención proporcionar un procedimiento y un dispositivo
para utilizar en la obtención de información que se refiere a los
elementos formes comprendidos en una muestra de un fluido biológico
en reposo.
Constituye un objetivo adicional de la presente
invención proporcionar un procedimiento y un dispositivo del tipo
descrito en el que los elementos formes de la muestra se capturen
en la superficie plana de un hidrogel expandido dispuesto en un
recipiente para muestras.
Constituye otro objetivo de la presente
invención proporcionar un procedimiento y un dispositivo del tipo
descrito en el que la fase líquida de la muestra pueda expandir una
capa de hidrogel absorbente de agua dispuesto en el recipiente para
muestras.
Constituye un objetivo adicional de la presente
invención proporcionar un procedimiento y un dispositivo del tipo
descrito en el que la superficie plana del hidrogel expandido
conforme un plano focal para un instrumento de examen óptico que se
utiliza junto con el recipiente para muestras.
Éstos y otros objetivos y ventajas de la
presente invención se pondrán más claramente de manifiesto a partir
de la siguiente descripción detallada de una forma de realización
de la presente invención considerada en conjunto con los dibujos
adjuntos en los que:
la Figura 1 es una vista esquemática en sección
transversal de un recipiente para analizar muestras que comprende
una cámara destinada a alojar las muestras que presenta un elemento
de hidrogel absorbente de agua en una pared de la misma;
la Figura 2 es una vista esquemática en planta
de un recipiente del tipo ilustrado en la Figura 1 en el que el
recubrimiento de hidrogel se ha expandido hasta llenar
sustancialmente la cámara;
la Figura 3 es una vista esquemática en planta
del recipiente de las Figuras 1 y 2 ilustrando un conjunto de
elementos formes de la muestra que se han capturado en la
superficie superior del hidrogel expandido de la cámara; y
la Figura 4 es una imagen compuesta de un campo
inicial de visión de la muestra en la cámara para muestras y una
imagen posterior del mismo campo de visión de la muestra.
Haciendo referencia ahora a los dibujos, la
Figura 1 es una ilustración esquemática del recipiente para
muestras que se indica de un modo general mediante la referencia
numérica 2, comprendiendo dicho recipiente 2 una cámara 4 que se
define mediante una pared lateral 6 y una pared inferior plana 8.
Se dispone una capa de espesor constante de un hidrogel
preferentemente transparente o translúcido 9 sobre la pared inferior
8 de la cámara 4. Un hidrogel apropiado comprende el gel
"PHYTA", que es un hidrogel realizado de ácido glucurónico,
ramnosa y glucosa. Es transparente e incoloro y, por lo tanto, un
buen material para utilizar en la detección de elementos formes.
Dicho hidrogel es un producto de Sigma Diagnostics.
Otros hidrogeles apropiados comprenden el óxido
de polietileno; el poli(óxido de etileno y de propileno); la
poli(povidona); el poli(alcohol vinílico); la
poli(acrilamida); el poli(acetato de vinilo); el
poli(ácido acrílico) [en forma Na^{+}]; el poli(ácido acrílico y
acrilimida) [en forma Na^{+}]; el poli(ácido poliacrílico) [en
forma Na^{+}]; el poli(ácido metacrílico) [en forma Na^{+}]; el
poli(ácido metacrílico - co-acrilamida) [en forma
Na^{+}]; el poli(acrilonitrilo y acrilamida); el
poli(hidroxietilacrilato); el
poli(hidroximetilmetacrilato); y poli(uretanos)
hidrófilos).
La superficie superior 10 de la capa de hidrogel
9 es plana, reproduciendo la pared inferior plana 8 de la cámara 4.
El volumen de la capa de hidrogel 9 que se dispone en la cámara es
tal que, cuando el hidrogel 9 absorbe el agua de una muestra que se
ha introducido en la cámara 4, llenará sustancialmente la cámara 4
y absorberá esencialmente todo el agua de la muestra. La cámara 4
comprende una pared transparente 12, que puede presentar la forma
de un cubreobjetos, que proporciona una ventana a través de la que
se puede observar la superficie superior 10 del gel 9. Se puede
disponer previamente una pluralidad de elementos formes
identificables 14 sobre la superficie del gel y utilizarla para
permitir que el instrumento óptico 16 enfoque la superficie
superior 10 del hidrogel 9 una vez que este último se ha expandido,
tal como se ilustra en la Figura 2.
Los cuerpos formes 14 desempeñan tres funciones,
la primera permitir el enfoque del instrumento óptico 16 en la
superficie del hidrogel 10; la segunda confirmando la posición de
la superficie 10 cuando el instrumento 16 no detecta otros elementos
formes en la superficie. En este caso, el instrumento 16 registrará
que la muestra que se está analizando no comprende elemento forme
alguno. La tercera función de los cuerpos formes 14 es servir de
registro óptico o de puntos de guía. Dicha función resulta útil
cuando el análisis de la muestra que se está realizando requiere que
se examine repetidamente una pluralidad de áreas de la cámara
durante un período de tiempo. Debido a que la mayoría de los
instrumentos de análisis no pueden realizar una relocalización
exacta de un punto determinado de la superficie, pero sí una
relocalización aproximada, se puede utilizar un mapa de las
posiciones de los cuerpos preformados de cualquier campo para
reajustar las imágenes posteriores del mismo campo de modo que se
puedan realizar determinaciones comparativas sucesivas en dicho
campo durante un período de tiempo.
La Figura 4 ilustra dicho reajuste de los
cuerpos formes 14. Obsérvese que la Figura 4 ilustra un campo de
visión particular en el que se encuentra un cierto número de
elementos formes B. El campo de visión comprende asimismo tres de
los cuerpos formes 14 que resulta que se disponen en una
configuración triangular. Se realizará el tratamiento de las
imágenes de dicho campo de visión mediante el instrumento de
lectura, y la posición de las coordenadas X, Y de dicho campo de
visión las registrará el instrumento. Suponiendo que el instrumento
esté programado para volver a dicho campo de visión particular por
algún motivo, se utilizarán las coordenadas X, Y registradas para
volver al campo de visión en cuestión. Cuando vuelve al campo de
visión en cuestión, no podrá reproducir exactamente las posiciones
de los elementos formes B o las posiciones de los cuerpos formes
14, por lo que las posiciones de los cuerpos formes en el campo de
visión reprocesado gráficamente pueden ser tal como se indican en
vista transparente en la Figura 4, indicándose sus posiciones con
la referencia numérica 14'. A continuación el instrumento compara
las posiciones 14' del cuerpo forme reprocesado gráficamente con
las posiciones 14 del cuerpo forme original y ajusta el campo de
visión reprocesado gráficamente con el campo de visión original
superponiendo las imágenes reprocesadas gráficamente de los cuerpos
14' con las posiciones de los cuerpos 14 originalmente procesadas
gráficamente. De este modo, se pueden utilizar los cuerpos 14 y sus
posiciones en un campo de visión para guiarse de nuevo hacia un
campo idéntico de visión de la imagen. Se apreciará que los cuerpos
formes 14 se distribuirán aleatoriamente por toda la muestra de
modo que cualquier configuración de cuerpos formes 14 observada en
un campo de visión particular será propia de dicho campo de visión.
Un instrumento que se puede utilizar para examinar las muestras
puede ser similar al instrumento ilustrado y descrito en la
solicitud publicada
WO 99 45 385.
WO 99 45 385.
La Figura 3 ilustra un conjunto de elementos
formes que se pueden encontrar en una muestra de orina que se
analiza según la presente invención. Los cuerpos enfocados 14 se
ilustran en la Figura 3. Los elementos formes capturados tales como
bacterias A; eritrocitos B; cilindros urinarios C y cristales D,
por ejemplo, se pueden observar en la superficie 10 del hidrogel 9.
Se apreciará que se puede realizar una tinción diferencial de
algunos elementos individuales A, B, C o D, o resaltar de algún otro
modo; se pueden utilizar en la muestra tinciones supravitales de
modo que se pueda realizar el examen morfológico de determinados
elementos; y se pueden separar los elementos individuales de la
superficie del hidrogel para continuar examinándolos. Una vez se ha
identificado un elemento con el instrumento 16, se conocerá la
posición exacta del elemento y no cambiará, pudiéndose de este modo
volver a localizar el elemento en cuestión.
Un modo de preparar la cámara para muestras para
realizar el análisis de las muestras es el siguiente. Se puede
llenar una cámara para muestras vacía con un hidrogel hidratado por
lo menos en parte de modo que la superficie superior del hidrogel
hidratado sea plana y sea coplanar con el plano de la superficie
inferior de la cubierta 12 de la cámara. La cámara llenada de este
modo se puede someter a continuación a un medio que provoque la
evaporación del agua del hidrogel de modo que la capa de hidrogel
de la cámara se encoja y desplace la superficie superior del
hidrogel hacia abajo alejándose de la superficie inferior de la
cubierta 12. A continuación se introduce en la cámara para muestras
una alícuota de una muestra acuosa a analizar en relación con sus
elementos formes sobre el hidrogel encogido, tras lo que se deja que
este último se expanda de nuevo hasta alcanzar su volumen original
mediante la absorción de agua de la muestra. La superficie superior
del gel expandido de nuevo se ve de este modo empujada contra la
cubierta 12 de modo que desplaza todos los elementos formes
capturados de la muestra hasta un plano focal que coincide con la
superficie inferior de la cubierta 12. Antes de añadir la muestra
al gel encogido, se pueden disponer los cuerpos formes 14 en la
superficie superior del gel encogido.
Otro procedimiento que se puede utilizar para
producir las cámaras para muestras es el siguiente. Cuando se
utilizan hidrogeles "blandos" (es decir, parcialmente
hidratados) como absorbentes del agua, dichos geles blandos no se
pueden deshidratar parcialmente in situ en la cámara para
muestras. Se pueden preparar en el exterior de la cámara para
muestras. Por ejemplo, se pueden cortar discos de gel a partir de
una lámina de gel y disponer los discos de gel en la zona inferior
de la cámara de modo que se adhieran a dicha zona inferior de la
cámara. En cualquier caso, el gel ha de poder absorber
esencialmente todo el agua de la muestra y no ha de poder levantar
la cubierta 12 de la cámara cuando se expanda el gel.
Se apreciará que el procedimiento y el
dispositivo de la presente invención proporciona una técnica
económica para examinar determinadas muestras de fluidos biológicos
en relación con sus elementos formes. Los elementos formes distintos
que se pueden encontrar en la muestra se pueden diferenciar entre
sí, se pueden recoger del dispositivo y se puede realizar su
recuento. Los elementos formes de la muestra se separan de la fase
líquida de la muestra provocando que la fase líquida es absorbida
por el hidrogel hidrófilo que no se encuentra en un estado de
equilibro acuoso de modo que se pueda continuar hidratando el
hidrogel. Durante la hidratación posterior del hidrogel, e
capturarán todos los elementos formes de la muestra sobre la
superficie expandida del hidrogel.
Debido a que se pueden realizar muchos cambios y
variaciones de la forma de realización de la presente invención que
se ha descrito sin aparatarse del concepto inventivo, no se
pretende limitar la invención de ningún otro modo según lo dispuesto
en las reivindicaciones adjuntas.
Los elementos formes de una muestra de material
biológico fluido acuoso se separan de la fase acuosa de la muestra
y se concentran en el plano focal del instrumento de examen
mediante el que se pueden examinar ampliados. Los ejemplos de
fluidos que se pueden analizar de este modo comprenden la orina; el
líquido cefalorraquídeo; el líquido pleural; las ascitis; los
humores succionados de quistes, tales como quistes de tiroides o de
mama; las muestras citológicas que se han dispuesto en un fluido
acuoso; las muestras de plasma con abundantes trombocitos;
etcétera. La muestra se dispone en una cámara que presenta una capa
de hidrogel hidrófilo que cubre una superficie de la cámara. La
superficie opuesta de la cámara es transparente y se puede realizar
con un cubreobjetos o un dispositivo similar. El volumen de
hidrogel en la cámara resulta suficiente para que, cuando el
hidrogel absorbe esencialmente toda la fase acuosa de la muestra,
el hidrogel se expanda y llene la cámara. La superficie de captura
del hidrogel expandido es preferentemente plana y todos los
elementos formes de la muestra se capturarán en la superficie de
captura de la capa de hidrogel y no serán absorbidos en el
hidrogel. Los elementos formes, tales como; células; bacterias;
cristales; protozoos; huevos y parásitos; y similares, se pueden
realzar de un modo diferenciador mediante la utilización de
anticuerpos marcados, tinciones selectivas o similares, de modo que
se facilite el examen óptico y la diferenciación de los diversos
elementos formes que se pueden encontrar en la muestra. Los
elementos formes se pueden recoger de la superficie de captura de
la capa de hidrogel expandido para un examen y análisis más
detallados. La superficie de captura del hidrogel se puede
proporcionar con una pluralidad de perlas utilizadas para localizar
la superficie de captura con el instrumento de lectura óptica y
para restablecer los campos de visión examinados previamente.
Claims (9)
1. Sistema de recipientes destinado a examinar
elementos formes que se encuentran comprendidos en una muestra de
fluido biológico acuoso, presentando dicho sistema de recipientes
una cámara (4) con un volumen conocido, encontrándose dicha cámara
(4) definida por una primera pared (8), unas paredes laterales (6)
y una pared transparente de visualización de la muestra (12) que se
dispone en la cara opuesta a dicha primera pared (8); una capa (9)
de un hidrogel expandible que cubre dicha primera pared (8) de la
cámara, presentando dicha capa de hidrogel expandible (9) una
superficie plana enfrentada a dicha pared de visualización de la
muestra (12) de dicha cámara (4), encontrándose presente dicha capa
de hidrogel expandible (9) en una cantidad que puede provocar que
dicho hidrogel llene esencialmente dicha cámara (4) y capture todos
los elementos formes de la muestra en dicha superficie plana del
hidrogel cuando dicha capa de hidrogel (9) se expande debido a la
absorción de esencialmente toda la fase acuosa de la muestra del
fluido y a la exclusión de los elementos formes de la muestra.
2. Sistema de recipientes según la
reivindicación 1, en el que dicha primera pared (8) de la cámara es
plana.
3. Sistema de recipientes según la
reivindicación 1, que comprende además unos cuerpos ópticamente
detectables dispuestos en dicha superficie plana de dicha capa de
hidrogel (9), permitiendo dichos cuerpos ópticos localizar dicha
superficie plana de dicha capa de hidrogel (9) una vez que dicha
capa de hidrogel (9) se ha expandido en dicha cámara (4).
4. Sistema de recipientes según la
reivindicación 1, en el que existen por lo menos tres cuerpos
ópticamente detectables en dicha superficie plana de dicha
superficie de hidrogel.
5. Procedimiento para examinar las
características de por lo menos un elemento forme que se encuentra
comprendido en una muestra de fluido biológico acuoso,
comprendiendo dicho procedimiento:
a) la etapa de proporcionar un sistema de
recipientes según las reivindicaciones 1 a 4.
b) la etapa de introducir la muestra de fluido
en dicha cámara (4) en dicha capa de hidrogel (9), y permitiendo
que la fase líquida de dicha muestra de fluido sea absorbida por y
expanda dicha capa de hidrogel (9), al mismo tiempo que captura los
elementos formes de dicha muestra de fluida en la superficie de
dicha capa de hidrogel (9) que se expande en dicha cámara (4),
y
c) examinar por lo menos uno de los elementos
formes que se encuentran capturados en la superficie de la capa de
hidrogel (9) expandida en la cámara (4).
6. Procedimiento según la reivindicación 5, en
el que dicha superficie de dicha capa de hidrogel (9) es plana y
permanece plana mientras se expande dicha capa de hidrogel (9).
7. Procedimiento según la reivindicación 6, en
el que dicha superficie plana comprende unos cuerpos ópticamente
distinguibles dispuestos en la misma que permiten la confirmación
de la posición de dicha superficie plana una vez dicha capa de
hidrogel (9) se ha expandido.
8. Procedimiento según la reivindicación 5, que
comprende:
a) la etapa de expandir dicha capa de hidrogel
(9) de modo que desplace dicha superficie plana de dicha capa de
hidrogel (9) hasta una posición final en dicha cámara (4); y
b) la etapa de disponer los elementos formes
distinguibles de enfoque en dicha cámara (4), cuyos elementos son
coplanares con dicha posición final de dicha superficie plana de
modo que un instrumento óptico puede enfocar dichos elementos y de
este modo localizar la posición de dicha disposición final de dicha
superficie plana del hidrogel en la cámara (4).
9. Procedimiento según la reivindicación 8, en
el que dichos elementos de enfoque se disponen en dicha superficie
plana de dicho hidrogel antes de la expansión de dicho hidrogel, y
en la que dichos elementos de enfoque se transportan hasta dicha
posición final de dicha superficie plana al expandirse dicho
hidrogel.
hidrogel.
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| ES2646622T3 (es) * | 2002-07-31 | 2017-12-14 | Premium Genetics (Uk) Limited | Sistema y método de clasificación de materiales usando dirección de láser holográfica |
| GB0220642D0 (en) * | 2002-09-04 | 2002-10-16 | Smiths Group Plc | Oocyte handling systems |
| US20050239045A1 (en) * | 2003-12-08 | 2005-10-27 | Arkray Inc. | Microorganism or cell collecting method, and microorganism or cell collecting implement used for the method |
| US7235592B2 (en) | 2004-10-12 | 2007-06-26 | Zimmer Gmbh | PVA hydrogel |
| JP2008531769A (ja) | 2005-02-23 | 2008-08-14 | ズィマー・テクノロジー・インコーポレーテッド | ブレンドヒドロゲルおよびその製造方法 |
| US7694828B2 (en) | 2005-04-27 | 2010-04-13 | Biomet Manufacturing Corp. | Method and apparatus for producing autologous clotting components |
| US8262730B2 (en) | 2005-12-07 | 2012-09-11 | Zimmer, Inc. | Methods of bonding or modifying hydrogels using irradiation |
| DE602006017160D1 (de) | 2005-12-22 | 2010-11-11 | Zimmer Inc | Perfluorcyclobutanvernetzte Hydrogele |
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| EP1880764B1 (de) | 2006-07-20 | 2012-09-05 | ibidi GmbH | Probenträger zur Untersuchung von Zellwachstum |
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| US7731988B2 (en) | 2007-08-03 | 2010-06-08 | Zimmer, Inc. | Multi-polymer hydrogels |
| US8062739B2 (en) | 2007-08-31 | 2011-11-22 | Zimmer, Inc. | Hydrogels with gradient |
| US7947784B2 (en) | 2007-11-16 | 2011-05-24 | Zimmer, Inc. | Reactive compounding of hydrogels |
| US8034362B2 (en) | 2008-01-04 | 2011-10-11 | Zimmer, Inc. | Chemical composition of hydrogels for use as articulating surfaces |
| US9997325B2 (en) | 2008-07-17 | 2018-06-12 | Verity Instruments, Inc. | Electron beam exciter for use in chemical analysis in processing systems |
| JP5461556B2 (ja) * | 2008-08-21 | 2014-04-02 | シーメンス・ヘルスケア・ダイアグノスティックス・インコーポレーテッド | 尿残渣分析用多層スライド |
| EP2335825A1 (en) * | 2009-12-21 | 2011-06-22 | F. Hoffmann-La Roche AG | Unit and device for the preparation of cells and/or particles in a liquid and method for microscopic analysis |
| WO2012031265A2 (en) * | 2010-09-02 | 2012-03-08 | Schlumberger Canada Limited | Method and apparatus to observe a swellable packer element |
| US8665432B2 (en) * | 2010-10-29 | 2014-03-04 | Hewlett-Packard Development Company, L.P. | Apparatus for performing SERS |
| EP2562541A1 (de) * | 2011-08-23 | 2013-02-27 | Siemens Aktiengesellschaft | Hochgenaue Bestimmung des Masseanteils einer Komponente in einem Mehrkomponenten-Fluid |
| CN103033129B (zh) | 2011-10-07 | 2015-10-21 | 财团法人工业技术研究院 | 光学设备及光学定址方法 |
| JP5997357B2 (ja) * | 2012-03-30 | 2016-09-28 | エスセーアー・ハイジーン・プロダクツ・アーベー | 流体採取デバイス及び採取のための方法 |
| JP6228379B2 (ja) * | 2013-04-10 | 2017-11-08 | 株式会社アイ・イー・ジェー | 生物組織の密着・保持部材およびそれを備えた容器 |
| JP6456969B2 (ja) | 2014-02-21 | 2019-01-23 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | 膨張顕微鏡法 |
| US9550028B2 (en) | 2014-05-06 | 2017-01-24 | Biomet Biologics, LLC. | Single step desiccating bead-in-syringe concentrating device |
| US8895262B1 (en) | 2014-06-11 | 2014-11-25 | Adawia A. M. Henedi | Staining method for identification of flatworms |
| US10526649B2 (en) | 2015-04-14 | 2020-01-07 | Massachusetts Institute Of Technology | Augmenting in situ nucleic acid sequencing of expanded biological samples with in vitro sequence information |
| US10059990B2 (en) | 2015-04-14 | 2018-08-28 | Massachusetts Institute Of Technology | In situ nucleic acid sequencing of expanded biological samples |
| US11408890B2 (en) | 2015-04-14 | 2022-08-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Iterative expansion microscopy |
| WO2017027368A1 (en) * | 2015-08-07 | 2017-02-16 | Massachusetts Institute Of Technology | Protein retention expansion microscopy |
| CN108474029B (zh) | 2015-08-07 | 2021-07-23 | 麻省理工学院 | 通过扩展显微法的蛋白质和核酸的纳米级成像 |
| WO2018136856A1 (en) | 2017-01-23 | 2018-07-26 | Massachusetts Institute Of Technology | Multiplexed signal amplified fish via splinted ligation amplification and sequencing |
| WO2018157074A1 (en) | 2017-02-24 | 2018-08-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods for diagnosing neoplastic lesions |
| WO2018157048A1 (en) | 2017-02-24 | 2018-08-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods for examining podocyte foot processes in human renal samples using conventional optical microscopy |
| US11180804B2 (en) | 2017-07-25 | 2021-11-23 | Massachusetts Institute Of Technology | In situ ATAC sequencing |
| US11873374B2 (en) | 2018-02-06 | 2024-01-16 | Massachusetts Institute Of Technology | Swellable and structurally homogenous hydrogels and methods of use thereof |
| CN108715801B (zh) * | 2018-06-01 | 2021-12-03 | 苏州凯虹高分子科技有限公司 | 一种细胞分离滤芯及其制作方法 |
| WO2020013833A1 (en) | 2018-07-13 | 2020-01-16 | Massachusetts Institute Of Technology | Dimethylacrylamide (dmaa) hydrogel for expansion microscopy (exm) |
| CA3130889A1 (en) | 2019-02-22 | 2020-08-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Iterative direct expansion microscopy |
| CN110201729A (zh) * | 2019-05-24 | 2019-09-06 | 阜阳职业技术学院 | 一种保湿盒以及支架板 |
| US12265004B2 (en) | 2019-11-05 | 2025-04-01 | Massachusetts Institute Of Technology | Membrane probes for expansion microscopy |
| WO2021113505A1 (en) | 2019-12-05 | 2021-06-10 | Massachusetts Institute Of Technology | Method for preparing a specimen for expansion microscopy |
| CN111310591A (zh) * | 2020-01-20 | 2020-06-19 | 复旦大学 | 多类型样本数据制作装置及方法 |
Family Cites Families (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4587213A (en) * | 1971-09-29 | 1986-05-06 | Malecki George J | Methods and means of determining microorganism population |
| DE2441288C2 (de) * | 1974-08-27 | 1976-10-28 | Max Planck Gesellschaft | Korpuskularstrahlmikroskop, insbesondere elektronenmikroskop, mit verstelleinrichtungen zur aenderung der lage des abzubildenen objekts oder des objektbildes |
| US3990849A (en) * | 1975-02-07 | 1976-11-09 | Technicon Instruments Corporation | Separation of cells from liquid components of blood |
| DE2739008A1 (de) * | 1977-08-30 | 1979-03-15 | Behringwerke Ag | Vorrichtung zum nachweis von inhaltsstoffen einer fluessigkeit |
| US4250257A (en) * | 1978-08-24 | 1981-02-10 | Technicon Instruments Corporation | Whole blood analyses in porous media |
| US4327725A (en) * | 1980-11-25 | 1982-05-04 | Alza Corporation | Osmotic device with hydrogel driving member |
| US4513438A (en) * | 1982-04-15 | 1985-04-23 | Coulter Electronics, Inc. | Automated microscopy system and method for locating and re-locating objects in an image |
| JPS6013513U (ja) * | 1983-07-07 | 1985-01-29 | 凸版印刷株式会社 | プレパラ−ト |
| JPH048349Y2 (es) * | 1986-03-05 | 1992-03-03 | ||
| US4833382A (en) * | 1986-06-06 | 1989-05-23 | Gibbs David L | Method and apparatus for use in microscope investigations |
| DE3902348A1 (de) * | 1989-01-27 | 1990-08-02 | Gerhard Dr Wanner | Plattenfoermiger objekttraeger fuer die mikroskopie |
| JP2943454B2 (ja) * | 1991-09-20 | 1999-08-30 | 東洋インキ製造株式会社 | 血液分離剤および血液分離管 |
| JP2611890B2 (ja) * | 1991-07-19 | 1997-05-21 | 富士写真フイルム株式会社 | 乾式分析要素を用いた測定方法及び乾式分析要素 |
| US5226902A (en) * | 1991-07-30 | 1993-07-13 | University Of Utah | Pulsatile drug delivery device using stimuli sensitive hydrogel |
| US5428690A (en) * | 1991-09-23 | 1995-06-27 | Becton Dickinson And Company | Method and apparatus for automated assay of biological specimens |
| DE4205878A1 (de) * | 1992-02-26 | 1993-09-02 | Abg Werke Gmbh | Strassenfraese |
| JPH06181745A (ja) * | 1992-08-21 | 1994-07-05 | Showa Yakuhin Kako Kk | 化学的及び微生物学的試験用用具 |
| JP3799395B2 (ja) * | 1995-02-10 | 2006-07-19 | アークレイ株式会社 | ヘマトクリット値測定方法及び試験具 |
| JPH08261140A (ja) * | 1995-03-23 | 1996-10-08 | Olympus Optical Co Ltd | マイクロディスペンサ装置 |
| WO1997024432A1 (en) * | 1995-12-27 | 1997-07-10 | Chisso Corporation | Microorganism incubating member and culture medium |
| US5770086A (en) * | 1996-01-25 | 1998-06-23 | Eureka| Science Corp. | Methods and apparatus using hydrogels |
| JP3569715B2 (ja) * | 1996-07-29 | 2004-09-29 | アークレイ株式会社 | 液状試料を分析するための用具とその製造方法 |
| JPH10132800A (ja) * | 1996-09-05 | 1998-05-22 | S R L:Kk | 体液分離シートと一体型の検体保護容器 |
| US5786219A (en) * | 1996-10-28 | 1998-07-28 | Molecular Probes, Inc. | Microspheres with fluorescent spherical zones |
| US5812312A (en) * | 1997-09-04 | 1998-09-22 | Lorincz; Andrew Endre | Microscope slide |
| US6004821A (en) * | 1998-03-07 | 1999-12-21 | Levine; Robert A. | Method and apparatus for performing chemical, qualitative, quantitative, and semi-quantitative analyses of a urine sample |
| AU5565299A (en) * | 1998-08-17 | 2000-03-06 | California Institute Of Technology | Devices and methods for analysis of non-ionic solutes |
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