ES2296310T5 - Disolución y procedimiento para la reanimación y reparación de tejido dañado isquémicamente - Google Patents

Disolución y procedimiento para la reanimación y reparación de tejido dañado isquémicamente Download PDF

Info

Publication number
ES2296310T5
ES2296310T5 ES97925571.8T ES97925571T ES2296310T5 ES 2296310 T5 ES2296310 T5 ES 2296310T5 ES 97925571 T ES97925571 T ES 97925571T ES 2296310 T5 ES2296310 T5 ES 2296310T5
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
organ
resuscitation
solution
function
resuscitation solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES97925571.8T
Other languages
English (en)
Other versions
ES2296310T3 (es
Inventor
Lauren Brasile
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Breonics Inc
Original Assignee
Breonics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=24603829&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=ES2296310(T5) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Breonics Inc filed Critical Breonics Inc
Publication of ES2296310T3 publication Critical patent/ES2296310T3/es
Application granted granted Critical
Publication of ES2296310T5 publication Critical patent/ES2296310T5/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A61L27/3691—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by physical conditions of the treatment, e.g. applying a compressive force to the composition, pressure cycles, ultrasonic/sonication or microwave treatment, lyophilisation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/10—Preservation of living parts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/10—Preservation of living parts
    • A01N1/12—Chemical aspects of preservation
    • A01N1/122—Preservation or perfusion media
    • A01N1/126—Physiologically active agents, e.g. antioxidants or nutrients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
    • A61L27/3683—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment
    • A61L27/3687—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix subjected to a specific treatment prior to implantation, e.g. decellularising, demineralising, grinding, cellular disruption/non-collagenous protein removal, anti-calcification, crosslinking, supercritical fluid extraction, enzyme treatment characterised by the use of chemical agents in the treatment, e.g. specific enzymes, detergents, capping agents, crosslinkers, anticalcification agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M31/00—Devices for introducing or retaining media, e.g. remedies, in cavities of the body
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M2202/00—Special media to be introduced, removed or treated
    • A61M2202/04—Liquids
    • A61M2202/0468—Liquids non-physiological
    • A61M2202/0476—Oxygenated solutions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Infusion, Injection, And Reservoir Apparatuses (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
DESCRIPCION
Disolucion y procedimiento para la reanimacion y reparacion de tejido danado isquemicamente Campo del invento
El presente invento se refiere generalmente a un proceso y disolucion para la conservacion, mantenimiento y reparacion de tejidos y organos, como se define en las reivindicaciones. Mas espedficamente, el presente invento proporciona un proceso mediante el cual la integridad, funcion, y viabilidad son restablecidas en un organo o tejido isquemicamente danado usando una composicion proporcionada aqu (como se define en las reivindicaciones).
Antecedentes del invento
Continua habiendo una escasez extrema de organos para transplantes. Actualmente, el principal factor limitante en transplantes clmicos es la continua escasez de organos. Por ejemplo, los transplantes de rinon son altamente dependientes de la disponibilidad de organos retirados de donantes cadaveres con el corazon aun latiente. Adicionalmente, una amplia y aun sin explotar fuente de organos para transplantes son cadaveres de corazon no latiente. Cadaveres con corazon no latiente son vfctimas de accidentes que sucumben en el sitio de la lesion y los que tienes tiempos de supervivencia postrauma cortos. En tales casos, la razon por la que tales organos no son usados es porque una vez el corazon deja de latir, la falta de suministro de sangre circulante (isquemia caliente) resulta en una cascada de lesiones.
Un organo marginalmente, pero funcionalmente, danado por una isquemia caliente no puede tolerar danos adicionales mediados por la hipotermia. En condiciones de hipotermia utilizadas para conservar organos que se pretende usar para transplantes, la bicapa lipfdica experimenta un cambio de fase y se vuelve de tipo gel, que reducir ampliamente la fluidez. El lfpido esencialmente congelado en las membranas celulares anula la utilizacion de O2, aun en presencia de una elevada tension de O2. La consecuencia metabolica es glicolisis, que es analogo al estado de anoxia. Se ha descrito que por debajo de 18°C, la hipotermia inhibe la actividad tubular del rinon y que a 4°C, la utilizacion de oxfgeno es aproximadamente 5% de la de normotermia.
El almacenamiento hipodermico puede tambien producir vasoespasmos y subsiguientes edemas en un organo. Los organos conservados hipotermicamente pueden experimentar inflamacion glomerular de celulas endoteliales y perdida de integridad vascular junto con necrosis tubular; fenomeno atribuido a las condiciones hipodermicas empleadas. La hipotermia puede tambien inhibir la ATPasa dependiente de Na/K y resulta en la perdida de la capacidad reguladora del volumen celular. La perdida de regulacion del volumen es lo que causa la inflamacion y dano celular. Un suministro amplio de oxfgeno puede disminuir activamente la cantidad de esta inflamacion. Sin un suministro de oxfgeno adecuado, la anoxia lleva a la desintegracion de los vasos mas pequenos tras varias horas de perfusion. La falta de oxfgeno y la subsiguiente deplecion de ATP almacenado significa que la glicolisis anaerobica es la principal fuente de energfa en condiciones de conservacion tradicional. La falta de oxfgeno molecular para fosforilacion oxidativa que tiene lugar en isquemia, lleva a la acumulacion de NADH y la deplecion de los almacenes de ATP dentro de la mitocondria. La subsiguiente perdida de nucleosidos es probablemente un factor muy importante en el fallo de tejidos sometidos a una isquemia caliente y penodos prolongados de isquemia fna para regenerar ATP tras el restablecimiento del suministro de sangre. La incapacidad para suministrar oxfgeno adecuado ha llevado a la dependencia rutinaria en la hipotermia para la conservacion de organos.
Asf, la isquemia (bien sea isquemia caliente o isquemia fna) es una cascada de eventos de lesiones que puede ser caracterizada como una fase preletal, y una fase letal. La fase preletal produce efectos daninos en tres maneras: hipoxia; malnutricion; y fallo en la eliminacion de desperdicios metabolicos toxicos. Con la falta de sangre circulante viene una falta en oxfgeno molecular. La hipoxia resultante induce a la deplecion de almacenes de energfa tales como la deplecion de almacenes de ATP en la mitocondria. La deplecion de ATP lleva a cambios celulares incluyendo edema, perdida de integridad celular, y perdida de polaridad de membrana. Los cambios celulares, inducen la fase letal de la isquemia dando como resultado una acumulacion de residuos metabolicos, activacion de proteasas, y muerte celular.
La disolucion del perfundido actual que representa la tecnica mas innovadora en conservacion hipodermica de organos, y proporciona una conservacion de organos optimizada en condiciones hipodermicas, contiene componentes que impiden el edema tisular inducido por las condiciones hipodermicas; metabolitos que facilitan la funcion del organo tras el transplante; antioxidantes; estabilizadores de membrana; coloides, iones; y sales (Southard y otros, 1990, Transpl. 49:251; y Southard, 1989, Transpl. Proc. 21:1195). La formulacion de este perfundido es designada para conservar los organos mediante una depresion del metabolismo inducida por las condiciones hipodermicas. Mientras que minimiza el edema y el vasospasmo encontrados normalmente durante el almacenamiento hipotermico, no proporciona la utilizacion de un agrupamiento de donantes sustancialmente expandido.
Esto es debido al hecho que un organo o tejido, marginalmente, pero funcionalmente, danado mediante isquemia caliente no puede tolerar un dano adicional mediado por la hipotermia. Aun con solo 30 minutos de isquemia, la funcion postransplante de un organo puede estar comprometida. Por ejemplo, usando organos de cadaveres con corazon latiente, la tasa no funcional inmediata se estima que es del 25%; y en solo 30 minutos de isquemia, la tasa
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
de no funcionalidad inmediata es aumentada hasta alrededor del 60%. Asf, el 60% de los rinones de cadaveres con corazon no latiente no funcionan inmediatamente debido a un dano isquemico preletal. Ademas, se cree que el dano y lesiones isquemicas irreversibles tienen lugar en organos deprivados de flujo sangumeo en solo unas pocas horas o menos (Klatz y otros, Patente norteamericana N° 5.395.314). A menos que nuevas fuentes de organos puedan desarrollarse, el numero de procedimientos de transplantes permanecera constante. Adicionalmente, la cantidad del donantes no puede ser sustancialmente expandida debido a que no hay un proceso/sistema disponible para reparar danos isquemicos preletales en organos o tejidos danados por isquemia caliente.
Esfuerzos recientes se han enfocado en la prevencion de dano isquemico mediante resucitacion con una disolucion de reperfusion inmediatamente despues de la interrupcion del suministro de sangre. Por ejemplo, una disolucion protectora, descrita en el documento de Patente norteamericana N°: 4.415.556, es usada durante tecnicas quirurgicas o para organos a ser transplantados para prevenir el dano isquemico al organo. La disolucion protectora es usada como un perfundido para mejorar el metabolismo aerobico durante la perfusion del organo. El documento de patente norteamericana N°. 5.395.314 describe un metodo para resucitar un cerebro haciendo circular, tras la interrupcion del suministro de sangre, a traves del cerebro una disolucion de conservacion hipodermica (aproximadamente 8-10°C) disenada para disminuir el metabolismo del organo, suministrar oxfgeno, e inhibir el dano por radicales libres.
Aunque tales metodos y disoluciones de conservacion son utiles para prevenir el dano isquemico en organos, estos efectos beneficiosos son eclipsados por las limitaciones practicas y funcionales. Primero, para que tales metodos y disoluciones sean eficaces a la hora de prevenir el dano isquemico, deben ser aplicadas inmediatamente (en un intervalo de minutos) tras la interrupcion del suministro de sangre. Las limitaciones logfsticas, por ejemplo en el caso de una vfctima de un accidente como donante de organos, puede reducir drasticamente el uso de tales metodos y disoluciones de modo que seran practicas solo en un entorno hospitalario. Segundo, dano y lesiones isquemicas irreversibles se piensa que tienen lugar en organos deprivados de flujo sangumeo en minutos (por ejemplo, cerebro) o en solo unas pocas horas (corazon, rinon). Un organo o tejido, marginalmente, pero funcionalmente, danado por isquemia caliente no puede tolerar un dano adicional mediado por almacenamiento hipodermico previo al transplante, o restablecimiento del flujo sangumeo tras el transplante. Una razon es que el restablecimiento de la circulacion tras la isquemia-reperfusion puede resultar paradojicamente en un dano tisular adicional (McCord y otros. 1985, N Engl J Med 312: 159-163). El restablecimiento de la circulacion da como resultado una reoxigenacion del tejido danado. La reoxigenacion del tejido danado isquemicamente puede dar como resultado una lesion del tejido causada a traves de la formacion de radicales libres de oxfgeno, deplecion de eliminadores de radicales libres, y la liberacion de agentes quimotacticos.
Asf, hay una necesidad para un proceso y disolucion que puedan superar, mas que solo inhibir, los efectos de isquemia en organos o tejidos durante la fase preletal, y apoyar un proceso de reparacion en organos o tejidos en las etapas mas tempranas de la isquemia letal. Un proceso para inducir la reparacion de organos y tejidos danados, a tal grado que la alteracion de la funcion pueda ser revertida, y la prevencion de dano tisular adicional durante el restablecimiento de la circulacion, puede llevar a que la cantidad de organos donantes sea sustancialmente expandida.
El documento de patente WO 95/31897 describe un metodo y un aparato para monitorizar la viabilidad de los organos transplantables.
El documento de patente norteamericana 5.395.314 describe un dispositivo y un metodo de resucitacion cerebral y conservacion de organos.
El presente invento proporciona un proceso ex vivo para inducir la reparacion de un organo danado isquemicamente hasta el grado que la alteracion de la funcion del organo puede ser revertida, dicho proceso comprende banar el organo a una temperatura de alrededor de 28°C hasta alrededor de 37°C con una disolucion fisiologica tamponada para eliminar la sangre y los productos acidoticos que se han acumulado en el organo durante la deprivacion de flujo sangumeo; y perfusion del organo a una temperatura de alrededor de 28°C hasta alrededor de 37°C con una disolucion fisiologica tamponada que comprende ademas un vasodilatador para dilatar los vasos sangumeos dentro del organo como se define en las reivindicaciones, factores troficos para restablecer la integridad celular y la funcion celular restableciendo de ese modo la funcion del organo y una combinacion de sustratos de energfa qmmica como se define en las reivindicaciones.
El presente invento tambien proporciona una disolucion de resucitacion para inhibir el dano isquemico, y para inducir la reparacion del dano isquemico a tal grado que la alteracion de la funcion del organo es revertida en un organo deprivado de flujo sangumeo, dicha disolucion de resucitacion comprende una disolucion fisiologica tamponada y comprende ademas: vasodilatadores en una cantidad fisiologicamente eficaz para dilatar la vasculatura del organo como se define en las reivindicaciones; una combinacion de sustratos de energfa qmmica, como se define en las reivindicaciones; y factores troficos en una cantidad fisiologicamente eficaz para promover uno o mas procesos de reparacion celular para restablecer la funcion celular perdida durante la deprivacion de flujo sangumeo al organo.
El presente invento indica que, hasta el momento del invento, se pensaba que el dano isquemico y lesiones a los organos o tejidos deprivados de flujo sangumeo era irreversible. El proceso y las composiciones son usadas
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
despues del dano isquemico y lesiones para inducir la reparacion de los organos y tejidos danados isquemicamente, y la prevencion de dano tisular adicional durante el restablecimiento de la circulacion. Esto distingue el proceso y las composiciones segun el presente invento de metodos y composiciones usados actualmente dirigidos a ser usados antes del dano isquemico y lesiones, con el proposito pretendido de impedir o inhibir dicho dano. El proceso segun el presente invento es un proceso mediante el cual la integridad y funcion de un organo o tejidos danados isquemicamente pueden ser restablecidos, durante al menos la fase preletal de la isquemia, usando una disolucion de resucitacion segun el presente invento. Ademas, el proceso y disolucion segun el presente invento llevan la intencion de impedir o inhibir dano tisular adicional que puede ser inducido durante el restablecimiento de la circulacion sangumea en un organo o tejido deprivado del flujo sangumeo.
El proceso segun el presente invento (como se define en las reivindicaciones) comprende lavar el organo a traves del sistema arterial con la disolucion de resucitacion del presente invento a una temperatura caliente de alrededor 28°C hasta alrededor de 37°C para eliminar la sangre y los productos acidotidos que se han acumulado en el organo o tejido durante el penodo de deprivacion de flujo sangumeo; y perfundiendo el organo o tejido lavado con la disolucion de resucitacion como se define en las reivindicaciones para (i) dilatar los vasos sangumeos, particularmente microvasos estrechos, dentro del organo o tejido, (ii) restablecer la funcion del organo o tejido suministrando factores troficos, (iii) restablecer la integridad celular y la funcion al organo o tejido danado isquemicamente y (iv) restablecer el metabolismo oxidativo readaptando el organo o tejido danado isquemicamente, a una disolucion de resucitacion oxigenada; volviendo el organo o tejido adecuado para el transplante y/o el restablecimiento de la circulacion sangumea.
Breve descripcion de los dibujos
Figura 1 es un organigrama que muestra los procesos del organo afectado por el proceso y disolucion de resucitacion segun el presente invento.
Figura 2 es una grafica de un parametro de la funcion del organo (creatinina serica) relacionada con el numero de dfas postransplante en un alotransplante canino usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento.
Figura 3 es una grafica de un parametro de la funcion del organo (creatinina en orina) relacionado con el numero de dfas postransplante en un alotransplante canino usando el proceso y disolucion de resucitacion segun el presente invento.
Figura 4 es una grafica de un parametro de una funcion del organo (creatinina serica relacionada con el numero de dfas postransplante en un autotransplante canino usando el proceso y disolucion de resucitacion segun el presente invento.
Figura 5 es un grafico de un parametro de la funcion del organo (creatinina en orina)relacionada con el numero de dfas postransplante en un autotransplante canino usando el proceso y disolucion de resucitacion segun el presente invento.
Descripcion detallada de las realizaciones preferidas
Definiciones
“Deprivado de flujo sangumeo” es un termino usado de aqrn en adelante para los propositos de la especificacion y reivindicaciones que se refieren al cese de la circulacion sangumea a traves de un organo o un tejido en cualquier circunstancia en la que la circulacion sangumea puede ser cesada y seguirle una isquemia caliente. Esto incluye paradas del ritmo cardfaco para procedimientos quirurgicos, o debido a causas naturales tales como un paro cardfaco.
“Un organo o tejido” es un termino usado de aqrn en adelante para los propositos de la especificacion y reivindicaciones que se refiere a un “organo” incluyendo, pero sin limitarse a, rinon, corazon, tngado, pulmon, intestino delgado, pancreas, cerebro, ojo, y piel.
“Disolucion de resucitacion” es un termino usado de aqrn en adelante para los propositos de la especificacion que se refiere a una disolucion fisiologica tamponada que proporciona medios para el restablecimiento de la integridad y funcion en organos danados isquemicamente y lesionados deprivados de flujo sangumeo, y para la prevencion o inhibicion de dano tisular adicional que puede ser introducido durante el restablecimiento de la circulacion sangumea en un organo deprivado de flujo sangumeo. La disolucion de resucitacion del invento es tal como se define en las reivindicaciones.
El proceso segun el presente invento (como se define en las reivindicaciones) es un proceso mediante el cual la integridad y funcion de un organo danado isquemicamente pueden ser restablecidas, durante al menos la fase preletal de la isquemia, usando una disolucion de resucitacion segun el presente invento. El restablecimiento de la integridad y funcion de un organo usando el proceso y composiciones segun el presente invento fue inesperado puesto que se pensaba, en el momento del invento, que el dano isquemico y las lesiones en los organos deprivados
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
de flujo sangumeo durante tan solo unas pocas horas o menos era irreversible. Ademas, el proceso y disolucion segun el presente invento pretend^an impedir o inhibir danos tisulares adicionales que pueden ser inducidos durante el restablecimiento de la circulacion sangumea en un organo deprivado de flujo sangumeo.
El proceso y disolucion segun el presente invento (como se define en las reivindicaciones) proporciona un medio para eliminar sangre y productos acidoticos acumulados durante el penodo de deprivacion de flujo sangumeo del organo; un medio para restablecer la integridad y funcion celular, restableciendo de este modo la funcion del organo; y un medio para readaptar el organo a un medio oxigenado. La capacidad de restablecer la funcion en un organo siguiendo al dano y lesion isquemicos se descubrio posible basado en las premisas que (1) la sangre no se coagula mientras que esta en contacto con celulas endoteliales vasculares viables, y por lo tanto organos isquemicamente danados pueden ser perfundidos de nuevo siempre que el endotelio este aun viable e intacto; (2) el restablecimiento de la dinamica vascular depende de que se proporcione una vasodilatacion dependiente de celulas endoteliales adecuada para perfundir adecuadamente y oxigenar el tejido y proporcionar los mecanismos autorreguladores normales; (3) los microvasos deben ser dilatados adecuadamente para la resucitacion, pero la permeabilidad no puede ser alterada para que la integridad celular sea restablecida; y (4) factores troficos, perdidos durante la isquemia, deben ser restablecidos, y la polaridad celular establecida para que se recupere la funcion.
El proceso y la disolucion segun el presente invento actuan juntos para resucitar un organo danado isquemicamente con el proposito de restablecer la funcion del organo y para readaptar el organo a un medio oxigenado. La Figura 1 es un organigrama que muestra los procesos del organo afectado mediante el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento.
Los siguientes ejemplos ilustran las realizaciones preferidas de la practica del invento. En las siguientes realizaciones usadas para ilustrar el invento, es importante considerar el siguiente concepto. El modelo de ternera bovina y el modelo canino han sido validados para la evaluacion de composiciones y metodos referidos al transplante de organos que se pretenden emplear en humanos ya que se ha demostrado que los modelos reflejan una base fisiologica. Asf, mientras que la composicion y metodos segun el presente invento han sido validados en estos modelos experimentales, la composicion y metodos han de ser utilizados ante todo en humanos. Una base fisiologica para aumentar de escala a partir de los modelos experimentales a humanos es conocida por aquellos con experiencia en la tecnica, e incluye la consideracion de diferencias tales como volumenes de organos y caudales en los organos (Vease por ejemplo, Harrison y otros, 1977, J. Pharm. Sci. 66:1679-1683). Debena entenderse que estos ejemplos se usan como ilustraciones, y no como limitaciones.
Ejemplo 1- el proceso
El proceso segun el presente invento (como se define en las reivindicaciones) implica interceder durante una ventana de tiempo de deprivacion de flujo sangumeo en un organo antes de que tenga lugar una muerte celular sustancial. Se puede apreciar por aquellos con experiencia en la materia que la ventana de tiempo en la que el proceso puede ser usado vana dependiendo del tipo de organo que ha de ser tratado. Por ejemplo, la ventana para el tratamiento de un corazon usando el proceso segun el presente invento puede ser menor de aproximadamente una hora; mientras que un rinon puede ser tratado usando el proceso en un penodo de tiempo de hasta aproximadamente 4 horas de deprivacion del flujo sangumeo. Para parar la cascada de dano isquemico que conduce a la muerte celular, y de una manera como la que se ilustra en la Fig. 1, el proceso segun el presente invento comprende las etapas de:
(1) Lavar el organo danado isquemicamente a traves del sistema arterial con la disolucion de resucitacion segun el presente invento a una temperatura calida de alrededor de 28°C hasta alrededor de 37°C para
(i) eliminar la sangre y los productos acidoticos que se han acumulado en el organo durante el penodo de deprivacion de flujo sangumeo;
(ii) restablecer el medio celular a un pH fisiologico;
(iii) dilatar adecuadamente los microvasos;
(iv) apoyar el metabolismo anaerobico como un procedimiento de rescate proporcionando compuestos de elevada energfa y apoyando la glicolisis con sustratos suplementarios que incluyen, pero no se limitan a, glucosa, piruvato, y uridina 5'-trifosfato (UTP);
(v) iniciar una conversion desde metabolismo anaerobico hasta metabolismo oxidativo proporcionando sustratos metabolicos para restablecer el conjunto del compuesto de adenina, apoyar el ciclo del acido cftrico, y restablecer el acoplamiento de la cadena transportadora de electrones, por la cual el oxfgeno molecular es lentamente introducido para impedir un dano por reperfusion mediado por la toxicidad del oxfgeno;
(vi) proporcionar un mecanismo para vasodilatar adecuadamente el lecho de celulas endoteliales de los microvasos en un organo isquemicamente danado edematoso gravemente estrechado, sin alterar sustancialmente la permeabilidad del organo, y en el que la vasodilatacion permite la perfusion adecuada del tejido del organo que
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
proporciona una presion de perfusion estable, caudales estables, y temperatura constante, pH constante, y oxigenacion constante;
(vii) proporciona factores troficos para restablecer la funcion en el organo danado isquemicamente, proporcionando de ese modo metabolites para recuperar la integridad y la funcion celular; y
2) Perfundir el organo danado isquemicamente a traves del sistema arterial con la disolucion de resucitacion segun el presente invento (como se define en las reivindicaciones) a una temperatura calida de alrededor de 28°C hasta alrededor de 37°C para
(i) normalizar la oxigenacion, temperatura, y pH;
(ii) continuar proporcionando un mecanismo para vasodilatar adecuadamente la vasculatura del organo, sin alterar sustancialmente la permeabilidad del organo, dando de ese modo como resultado una presion de perfusion estable, y caudales de vasculatura estable; y
(iii) continuar proporcionado factores troficos para restablecer la funcion en el organo danado isquemicamente, proporcionando de ese modo metabolitos para recuperar la integridad y la funcion celular tal como apretar las uniones celulares y restablecer la polaridad de membrana.
Se apreciara por aquellos con experiencia en la tecnica, que uno o mas de los beneficios derivados durante la etapa de lavado tambien continuara en la etapa de perfusion, ya que la disolucion de resucitacion segun el presente invento puede ser usada durante el proceso completo, es decir, incluyendo tanto las etapas de lavado como la de perfusion.
Para propositos de ilustracion, y no limitacion, en la etapa de lavado una cantidad suficiente de la disolucion de resucitacion es introducida lentamente mediante infusion via una canula en el principal suministro de sangre arterial para ese organo en particular hasta que el efluido este libre de sangre. De este modo, la sangre isquemica y los productos acidoticos, que se han acumulado en el espacio vascular durante el pertedo en el que el organo esta deprivado de flujo sangumeo, se eliminan del espacio vascular. Ademas, el pH es restablecido y sustrato fresco es suministrado para apoyar el metabolismo anaerobico y otras rutas celulares necesarias para la integridad y funcion celular. Se apreciara por aquellos con experiencia en la tecnica que la cantidad de la disolucion de resucitacion suficientes para usar en el lavado puede depender del tipo de organo en particular y el tamano a ser lavado, asf como en la longitud de tiempo de deprivacion de flujo sangumeo. A modo de ilustracion, pero no limitacion, 200 a 600 ml de la disolucion de resucitacion puede ser una cantidad suficiente para lavar un rinon humano que ha sido deprivado de flujo sangumeo durante un pertedo de 1-3 horas.
Para propositos de ilustracion, y no limitacion, en la etapa de perfusion una cantidad suficiente de la disolucion de resucitacion es lentamente perfundida a una presion sistolica apropiada para el organo danado isquemicamente que va a ser resucitado, hasta que se alcanza un caudal que es proximo al normal para tal tipo de organo en particular. A modo de ilustracion, pero no limitacion, un rinon humano que ha sido deprivado de flujo sangumeo durante un pertedo de 1-3 horas puede ser lentamente perfundido con la disolucion de resucitacion a una presion sistolica de <80 mmHg, hasta que se logra un caudal de >50 ml/min. El pH es normalizado en un intervalo fisiologico introduciendo lentamente oxfgeno molecular via un oxigenador, o via un compuesto transportador de oxfgeno como un componente en la disolucion de resucitacion. La oxigenacion del organo durante la perfusion, asf como la normalizacion de la temperatura y pH, tiene lugar dentro de alrededor de los primeros 15-30 minutos de perfusion. Segun el organo se va vasodilatando lentamente, las presiones de perfusion y los caudales comienzan a estabilizarse, y el organo cambia rapidamente a metabolismo oxidativo. Se aprecia por aquellos con experiencia en la tecnica que la longitud de tiempo necesaria para la perfusion depende del tipo y del tamano del organo en particular a ser perfundido, asf como en la longitud de tiempo de la deprivacion de flujo sangumeo. Sin embargo, el tratamiento de un organo danado isquemicamente con el proceso (lavado y perfusion) segun el presente invento durante aproximadamente 2 horas puede ser suficiente en la resucitacion de la mayona de los organos (por ejemplo, deprivados de flujo sangumeo entre 0,5 a 4 horas) durante la reanudacion de la funcion del organo. Tambien, si el organo produce un producto, tal como un rinon produce orina, el proceso puede dar como resultado la produccion de un producto normal de la funcion del organo.
El proceso segun el presente invento (segun se define en las reivindicaciones) ha sido desarrollado para conservar y resucitar los organos danados isquemicamente ex vivo sin la hipotermia tradicional (4°-10°C). El proceso proporciona el suministro de oxfgeno necesario, nutrientes para metabolismo, presion oncotica, pH, presiones de perfusion, y caudales para apoyar el metabolismo del organo ex vivo, con mas frecuencia dentro o cerca del intervalo normal respectivo in vivo. Una tasa proxima a la normal del metabolismo es aqrn definida como alrededor del 70-90% del intervalo de tasas normales de metabolismo. Ademas, el proceso segun el presente invento apoya un nivel de metabolismo ex vivo que proporciona suficiente metabolismo oxidativo que da como resultado el producto funcional normal del organo. El desarrollo de este proceso que apoya los organo ex vivo, sin hipotermia tradicional, presenta la oportunidad para apoyar una tasa casi normal de metabolismo y establece capacidades funcionales que pueden estar correlacionadas con un curso posquirurgico o postransplantacional.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
En una realizacion adicional, el proceso segun el presente invento puede ser realizado usando un dispositivo que comprende un sistema de bombeo laminar o pulsatil para suministrar la disolucion de resucitacion, incluyendo medios para proporcionar y controlar la perfusion y la presion de perfusion; medios para el control de la temperature; y medios para proporcionar y controlar la introduccion de, y la ventilacion de, los gases respiratorios. Tal dispositivo ha sido descrito mediante el presente invento en el documento de patente norteamericana 5.699.793. Tal dispositivo puede tambien incluir un medio dispositivo para ensayar y/o recoger el perfundido que ya ha circulado a traves del organo para monitorizar y medir una o mas caractensticas funcionales tales como pH, diversas presiones, caudal, resistencia vascular, diversos constituyentes qmmicos, oxigenacion, concentracion de dioxido de carbono, y consumo de oxfgeno. Ademas, los medios dispositivos o un medio dispositivo secundario junto con el dispositivo, puede ser usado para medir y/o recoger productos del organo desviados desde el organo, tal como orina de un rinon, en el que la medida subsiguiente de los parametros del producto del organo puede referirse a la integridad del organo y la funcion durante o posterior al proceso segun el presente invento.
Ejemplo 2- La disolucion de resucitacion
La conservacion del organo y las disoluciones del perfundido son conocidas en la tecnica como que comprenden una disolucion basica que consiste en una disolucion fisiologica tamponada, tal como una disolucion salada o un medio basal de tipo cultivo celular, al cual se anade una variedad de suplementos definidos. En una realizacion preferida, la disolucion de resucitacion del presente invento tambien emplea tal disolucion basica que contiene aminoacidos, iones, sales fisiologicas, impermeantes, protemas y/o factores sericos, y azucares. Ademas de los compuestos de la disolucion base, la disolucion de resucitacion del presente invento contiene una nueva combinacion de suplementos que pueden ser agrupados en al menos 3 categonas de componentes, como se define en las reivindicaciones. Se puede apreciar por aquellos con experiencia en la tecnica que los componentes en cada categona pueden ser sustituidos por un compuesto funcionalmente equivalente para lograr el mismo resultado. Asf, las siguientes especies de componentes listadas en cada categona de componentes es para propositos de ilustracion, y no limitacion.
Una primera categona de componentes, vasodilatadores, comprende una combinacion de componentes en una cantidad fisiologicamente eficaz que proporciona un medio para dilatar adecuadamente vasos grandes via relajacion de celulas de musculo liso, asf como dilatar adecuadamente microvasos. Para asegurar que la permeabilidad normal de la vasculatura es mantenida, la vasodilatacion es controlada en una manera dependiente de celulas endoteliales. Tal combinacion de componentes puede incluir (i) sustratos para la vasodilatacion mediada por celulas endoteliales, tal como acetilcolina, dopamina, bradiquinina, y arginina; (ii) sustratos para dilatacion de microvasos, tal como prostaciclina (y analgos, es decir, carbaciclina) y Mg+; y (iii) adenosina (y analogo, es decir ciclohexiladenosina), y verapamil para sus efectos combinados en dilatacion vascular mediada por el bloqueo de canales de calcio (otros bloqueantes de canales de calcio incluyen flunarizina, nifedipina, SNX-11, clorpromazina,y diltiazem). El resultado de usar tal combinacion de vasodilatadores es que la vasculatura este bien dilatada mientras que se conserva simultaneamente su integridad y la funcion de barrera normal. Los vasodilatadores comprenden desde alrededor del 1% hasta alrededor del 50% en volumen (p/v) de la nueva combinacion de suplementos que son anadidos a la disolucion basica formando la disolucion de resucitacion del presente invento.
Una segunda categona de componentes, sustratos de energia qmmica, comprende una combinacion de componentes en una cantidad fisiologicamente eficaz que proporciona un medio para restablecer el metabolismo oxidativo que se ha perdido durante el penodo de deprivacion de flujo sangurneo. Durante la deprivacion de flujo sangurneo, la perdida resultante de la integridad de membrana lleva a la perdida de componentes intracelulares tales como iones, componentes del grupo de compuestos de adenina, del ciclo de acido cftrico, y de la cadena transportadora de electrones. La combinacion de sustratos de energfa qmmica anadida a la disolucion de resucitacion incluye piruvato; glucosa; ATP; AMP; coenzima A; p-nicotinamida adenin dinucleotido (NAD+); p- nicotinamida adenin dinucleotido fosfato (NADP+); flavin adenin dinucleotido (FAD); cloruro de tiamina pirofosfato (cocarboxilasa); uridina 5' trifosfato (UTP); cloruro; adenosina; y magnesio. Si el suministro de energfa es restablecido en las celulas tisulares antes de que la muerte de las celulas tenga lugar, los cambios celulares durante el penodo de deprivacion de flujo sangurneo pueden ser revertidos, y el volumen de celulas tisulares vuelve al normal. Los sustratos de energfa qmmica comprenden desde alrededor del 0.01% hasta alrededor del 90% en volumen de la combinacion nueva de suplementos que son anadidos a la disolucion basica que forma la disolucion de resucitacion del presente invento.
Una tercera categona de componentes, factores troficos, comprende una combinacion de componentes en una cantidad fisiologicamente eficaz que proporciona un medio para promover uno o mas procesos de reparacion celular para restablecer la funcion celular perdida durante el penodo de deprivacion de flujo sangurneo. La combinacion de factores troficos proporciona un medio para promover la smtesis proteica que conduce al restablecimiento de uniones celulares mas fuertes y la regeneracion de la polaridad de membrana conduciendo asf a la recuperacion de la funcion celular. Tales factores troficos anadidos a la disolucion de resucitacion pueden incluir un concentracion elevada de aminoacidos y magnesio (por ejemplo, 2 a 6 veces la concentracion en plasma tfpica), derivados de acidos nucleicos, y ribonucleotidos; y factores de crecimiento con potenciadores de membrana, tales como factor de crecimiento de fibroblastos acido (FGF), FGF basico, heparina y condroitm sulfato, y combinaciones de los mismos. Los factores troficos comprenden desde alrededor del 1% hasta alrededor del 90% en volumen de la combinacion
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
nueva y suplementos que son anadidos a, y disueltos en, la disolucion basica para formar la disolucion de resucitacion del presente invento.
Se apreciara por aquellos con experiencia en la tecnica que los componentes en una cualquiera o mas de las tres categonas de componentes pueden tener funciones deseables adicionales para el proceso segun el presente invento. Por ejemplo, iones de magnesio (introducidos como parte de un compuesto que lleva magnesio) actuan tanto como vasodilatadores y como sustrato de energfa qmmica; y la glucosa actua tanto como un factor trofico y como sustrato de energfa qmmica. Ademas, en una realizacion preferida, los aminoacidos contenidos en la disolucion de resucitacion incluyen cistina y cistema en cantidades que, a parte de funcionar como factores troficos, funcionan tambien como antioxidantes, preferiblemente como eliminadores de radicales libres que eliminan radicales libres toxicos durante las etapas de lavado y perfusion del proceso. Otros antioxidantes, tales como glutation, ciclodextrina, superoxido dismutasa (SOD), catalasa, clorpromazina, y prostaciclina pueden ser incluidos o usados como compuestos funcionalmente equivalentes, en la disolucion de resucitacion del presente invento. Tales antioxidantes comprenden desde 0.000% hasta 10% en volumen de la combinacion nueva de suplementos que son anadidos a, y disueltos en, la disolucion basica que forma la disolucion de resucitacion del presente invento.
En otra realizacion del presente invento, en el que el tejido a ser resucitado usando la disolucion de resucitacion segun el presente invento implica tejido neurologico (por ejemplo, cerebro), la disolucion de resucitacion puede comprender ademas drogas neuroprotectoras tales como agentes de bloqueo del receptor de NMDA (agentes bloqueantes de los canales ionicos del receptor de NMDA, por ejemplo, Aptiganel y Cerestat; agentes bloqueantes del sitio de glicina del receptor NMDA, por ejemplo ZD 9379 y GV 150-562A), agentes bloqueantes de la acumulacion de oxido mtrico (NO) (por ejemplo, lubeluzol), y bloqueantes de canales de sodio para inhibir el influjo de sodio en celulas que puede desencadenar la liberacion de glutamato (por ejemplo, BW619-C89, fosfenitoina).
En otra realizacion del presente invento, mas que introducir el oxfgeno molecular via un oxigenador en el proceso, la disolucion de resucitacion contiene uno o mas compuestos transportadores de oxfgenos (“agentes transportadores de oxfgeno”) que funcionan para proporcionar oxfgeno molecular para metabolismo oxidativo al organo danado isquemicamente y lesionado. Tales agentes transportadores de oxfgeno son conocidos por aquellos con experiencia en la tecnica e incluyen, pero no se limitan a, hemoglobina, derivados estabilizados de hemoglobina (hechos a partir de eritrocitos humanos hemolizados tales como hemoglobina piridoxilada), conjugados polioxietilenos (PHP), productos de hemoglobina recombinante, emulsiones perfluoroqmmicas (PFC) y/o microburbujas perfluroqmmicas (llamadas colectivamente “agentes perfluoroqmmicos”). Tales agentes transportadores de oxfgenos comprenden desde alrededor del 0,000% hasta alrededor del 50% en volumen de una combinacion nueva de suplementos que son anadidos a, y disueltos en, la disolucion basica que forman la disolucion de resucitacion del presente invento; o alrededor del 0,000% hasta alrededor del 20% de la disolucion de resucitacion total (v/v).
Las emulsiones de PFC conocidas por ser utiles como agentes que transportan oxfgeno son descritas, por ejemplo, en los numeros de patente norteamericana: 5.403.575, 4.868.318, 4.866.096, 4.865.836, 4.686.024, 4.534.978, 4.443.480, 4.423.077, 4.252.827, 4.187.252, 4.186.253, 4.110.474, y 3.962.439. Tales emulsiones de PFC lfquido incluyen, pero no se limitan a, bromuro de perfluorooctilo, dibromuro de perfluoroctilo, bromofluorocarbonos, perfluoroeter, Fluosol DA™, F-44E, 1,2-bisperfluorobutil-etileno, F-4-metil octahidroquinolidizina, perfluoro aminos de 9 a 12 carbonos, perfluorodecalino, perfluoroindano, perfluoro-trimetil biciclo [3,3,1] onano, perfluorometil adamantano, perfluorodimetil adamantano. Las microburbujas de PFC que pueden ser utiles, como agentes transportadores de oxfgeno, son descritas, por ejemplo, en la patente norteamericana 5.409.688 y 5.393.524. Las PFCs que son descritas como que son utiles por crear tales microburbujas incluyen, pero no se limitan a, dodecafluoropentano (DDFP), sulfuro de hexafluoruro, pentano, hexafluoropropileno, octafluoropropano, hexafluoretano, octafluor-2-butino, hexafluorbuta-1,3-dieno, isopreno, octafluorociclobutano, decafluorobutano, cis-2- pentano, dimetil sulfuro, etilarsina, bromoclorofluorometano, trans-2-pentano, 2 cloropropano, hexafluorodisulfato, etilmercaptano, dietileter, etilvinileter, valileno, trisfluoroarsina, bromuro furfurilo, cloruro de cis-propileno, fluoruro de butilo, 1,1 dicloroetano, metil isopropil eter, isopropilamina, metilformiato, 2-acetil-furano, etilenfluoruro, 1-penteno, isopropilacetileno, perfluoropentano, isopentano, eter de vinilo, 2-butino, 1,4-pentadieno, tetrametil silano, dimetil fosfina, dibromodifluorometano, 2-cloro-propano, difluoroiodometano, acetaldehfdo, trimetil borato, 3-metil-2-butano, 1,1 dimetilciclopropano, aminoetano, bromuro de vinilo, disilanometano, triclorofluorometano, bromofluoro-metano, trifluorodicloro-etano, perfluoropentano, y otros fluoruros que contienen hidrocarbonos (patente norteamericana No. 5.409.688).
En un proceso para preparar la disolucion de resucitacion segun el presente invento, se anade a una disolucion basica y se disuelve ah una combinacion original de suplementos que pueden ser agrupados en al menos 3 categonas de componentes que comprenden vasodilatadores, sustratos de energfa qmmica y factores troficos, como se define en las reivindicaciones. Aunque la composicion de la solucion de resucitacion, para el uso con el proceso segun el presente invento, puede variar por componente e intervalos de componentes, segun lo permitido por las reivindicaciones, una formulacion preferida es expuesta abajo en la Tabla 1 para propositos de ilustracion y no limitacion (notese que un componente que puede funcionar en mas de una de las al menos 3 categonas de componentes es colocado en una categona inferior, para propositos de claridad).
Tabla 1
Suplementos anadidos a la disolucion basica (Las cantidades son miligramos por litro de disolucion basica)
Vasodilatadores
Cantidad
Arginina
140
Acetilcolina
2
Verapamil
0,2
Prostaciclina
0,06
Magnesio
600
Sustratos de energfa qmmica
ATP
2
AMP
2
UTP
4
Coenzima A
10
Sifosfopiridm nucleotido
28
FAD
4
Trifosfopiridm nucleotido monosodico
4
Cocarboxilasa
4
Factores troficos
FGFs acidos y/o basicos
200
Pioruvato
220
Glucosa
2.000
Heparina
180
Insulina
10
(Derivados de acidos nucleicos)
Desoxiadenosina
40
Desoxiguanosina
40
Desoxicitidina
40
Timidina
40
(Ribonucleotidos)
Adenosina
40
Citidina
40
Guanosina
40
Uridina
40
La disolucion de resucitacion as^ preparada debena tener una osmolaridad > 330 mOsm pero preferiblemente menor que 600 mOsm, y en un intervalo preferible de alrededor de 350 Osm hasta alrededor de 400 mOsm. El pH de la disolucion de resucitacion debena ser ajustado a un pH dentro de un intervalo de pH de alrededor de 6,5 hasta 5 alrededor de 7,5 y preferiblemente en un intervalo de pH de 7,3 hasta 7,45.
Como se indica, en otra realizacion la disolucion de resucitacion puede comprender ademas antioxidantes adicionales, y uno o mas agentes que transportan oxfgeno como se indica (por litro de disolucion basica):
Antioxidantes
Cantidad
Glutation
1mg
5
10
15
20
25
30
35
Ciclodextrina
500 mg
Agente transportador de oxfgeno
Agente perfluorqmmico
20% v/v
Ejemplo 3- Efecto de privacion de sangre
Los experimentos fueron conducidos para mostrar el efecto de la isquemia caliente, causada por deprivar a un organo de flujo sangumeo durante aproximadamente 30 minutos. Tal isquemia caliente conduce a una deterioracion rapida de la integridad celular. La cascada de danos isquemicos empieza con la perdida del conjunto compuesto de adenina, que conduce al edema. La perdida de la integridad celular y la aparicion del edema da como resultado el colapso de la integridad vascular y la perdida de la funcion de permeabilidad normal. En un organo tal como el rinon, el dano isquemico causado por deprivar al rinon de flujo sangumeo durante tan solo 30 minutos puede ser visto como causa de vasoconstricciones profundas. Las vasocons-tricciones profundas dan como resultado unos intervalos de flujo inadecuados que perfunden adecuadamente el rinon. Una resistencia vascular alta, en los vasos vasoconstrictores, conduce a una deterioracion adicional con anoxia secundaria, por lo que conduce a una perdida de capacidad funcional (es decir, falta de produccion de orina). La Tabla 2 ilustra una comparacion de caractensticas de perfusion (presion; caudal; y resistencia vascular) y funcion organica (produccion de orina) en un sistema de modelo de animal experimental que comprende rinones de ternera bovina que no han sido deprivados de flujo sangumeo (“normal”), y rinones de ternera bovina deprivados de flujo sangumeo durante solo 30 minutos (“isquemico”). La resistencia vascular es la media de la presion/media del caudal.
Tabla 2
Parametros
Normal Isquemico
Numero de rinones
25 5
Presion media
50/30 44/40
Caudal medio
> 95 cc/min 12.9 cc/min
Resistencia vascular media
0,4 3.26
Produccion de orina
Si no
Ejemplo 4- Los efectos del proceso de resucitacion y de la disolucion
Los experimentos fueron conducidos para mostrar la capacidad del proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento para superar, mas que solo inhibir, los efectos de la isquemia caliente en los organos y ayudar en un proceso de reparacion a tal grado que la alteracion de la funcion del organo pueda ser revertida. Los rinones fueron obtenidos de terneras bovinas eutanasiadas. A los 30 minutos o 60 minutos de deprivacion de flujo sangumeo, los rinones fueron retirados por incision en la lmea media. No se dio ningun tratamiento antes de retirar los rinones, incluyendo la no administracion de anticoagulantes. Cada rinon testigo experimento 30 minutos de deprivacion de flujo sangumeo por lo que sufrio danos isquemicos durante ese periodo. Los rinones testigo, despues de retirarlos, fueron enjuagados con 100 cc de un medio de cultivo celular basal a una temperatura de 32°C, de modo que los rinones fueron limpiados de la sangre que quedaba en sus respectivos compartimentos vasculares. Cada rinon de ensayo experimento 60 minutos de deprivacion de flujo sangumeo por lo que sufrio danos isquemicos durante ese penodo. Los rinones de ensayo, despues de retirarlos, fueron enjuagados con 100 cc de la disolucion de resucitacion a una temperatura de 32°C. Despues del enjuague, los rinones respectivos fueron bombeados con un sistema de conservacion de transporte MOX-100™ modificado. Los rinones testigo fueron bombeados a 32°C, usando la tecnologfa previamente desarrollada para conservar los organos usando la tecnologfa de conservacion caliente, usando el medio de cultivo celular basal como un perfundido. Los rinones de ensayo fueron bombeados usando el proceso y solucion de resucitacion segun el presente invento, a 32°C. Una comparacion de las caractensticas de perfusion (presion; caudal; y resistencia vascular) y la funcion de los organos (produccion de orina) del grupo de control (30 minutos sin el invento) con el grupo de prueba (60 minutos con invento) es ilustrada en la Tabla 3.
Tabla 3
Parametros
30' sin invento 60' con invento
Numero de rinones
5 16
Presion media
44/40 54/25
Caudal medio
12,9 cc/min 97,4 cc/min
Parametros
30' sin invento 60' con invento
Resistencia vascular media
3,26 0,47
Produccion de orina
Ninguna si
Los rinones de ensayo, despues de sufrir danos isquemicos por un penodo de una hora, los cuales fueron despues resucitados con el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento, demostraron las caractensticas de perfusion (presion; caudal; y resistencia vascular) y la funcion de los organos (produccion de orina) dentro del intervalo funcional de los rinones normales ilustrados en la Tabla 2. De esta manera, es demostrada la capacidad del 5 proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento para superar, mas que solo inhibir, los efectos de la isquemia caliente en los organos y apoyar un proceso de reparacion a tal grado que la discapacidad de la funcion del organo pueda ser revertida.
Ejemplo 5-Efectividad con la variacion de los tiempos de dano
Los experimented fueron conducidos para evaluar los efectos del proceso y la disolucion de resucitacion segun el 10 presente invento en los organos que han sido privados de flujo sangumeo por unos pertedos de tiempo mayores que 1 hora. Los rinones de ternera bovina fueron retirados de las terneras eutanasiadas en diversos pertedos de tiempo de deprivacion de flujo sangumeo incluyendo 60 minutos, 90 minutos, 2 horas o 4 horas. Ningun tratamiento fue dado antes de retirar los rinones, incluyendo la no administracion de anticoagulantes. Cada rinon fue despues enjuagado con 100 cc de la disolucion de resucitacion segun el presente invento a una temperatura de 32°C. En 15 ningun caso ninguno de los rinones se encontro que tuviera sangre coagulada en el compartimento vascular. La sangre parece mantenerse fluida siempre que este en contacto con el endotelio vascular viable. Despues del enjuague, los rinones respectivos fueron bombeados durante varias horas usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento, a 30°C. Una comparacion de las caractensticas de perfusion media (presion; caudal; y resistencia vascular) y la funcion de los organos (concentracion de creatinina en orina/ eliminacion de 20 creatinina; histologfa) de los rinones deprivados de flujo sangumeo durante 60 minutos (60'), rinones deprivados de flujo sangumeo durante 90 minutos (90'), rinones deprivados de flujo sangumeo durante 2 horas (120'), y rinones deprivados de flujo sangumeo durante 4 horas (240') se muestran en la Tabla 4.
Tabla 4
Parametro
60' (N=16) 90'(N=5) 120' (N=5) 240' (N=2)
Presion(mmHg)
54/25 58/37 55/37 52/40
Caudal(cc/min)
97,4 72 68,6 36,5
Resistencia vascular
0,47 0,67 0,73 1,27
Creatinina (mg/dl)
41,8 22,9 18,5 23,5
Histologfa
Bien conservada Bien conservada con aplastamiento focal del epitelio Bien en conjunto; edema focal Necrosis focal temprana
Los resultados mostraron que el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento pueden resucitar 25 un organo danado isquemicamente en pertedos de tiempo de al menos hasta 4 horas de deprivacion de flujo sangumeo. Por ejemplo, cuando un rinon, que ha sufrido 60 minutos de dano isquemico calido, es bombeado durante 2 horas usando el proceso y la disolucion de resucitacion, las caractensticas de perfusion son equivalentes a las de los rinones normales como se muestra en la Tabla 1. Las evaluaciones histologicas soportan los datos funcionales, ya que las secciones de tejido examinadas muestran que la morfologfa y la integridad parecen bien 30 conservadas.
A 90 minutos y 120 minutos de deprivacion de flujo sangumeo, estos rinones reflejan una incapacidad celular mas extensa (es decir, presiones diastolicas elevadas y caudales reducidos) que los rinones deprivados de flujo sangumeo durante 60 minutos. Sin embargo, a pesar de tal incapacidad celular, estos rinones producen todavfa orina; e histologicamente aparecen bien conservados. Ademas, no se detecta necrosis en estos rinones. Los rinones 35 privados de flujo sangumeo durante 4 horas exhibieron flujos reducidos sustancialmente, con una elevacion concomitante en las presiones diastolicas que incluyen constriccion en los lechos de los microvasos. Sin embargo, es importante senalar que estos rinones exhibfan todavfa funcion organica. La orina fue producida con una concentracion de creatinina en urina de 23,5 mg/dL.
Histologicamente, estos rinones mostraron los primeros signos de necrosis focal, temprana. Caractensticas mitoticas 40 fueron observadas adyacentes a las areas de la necrosis de tubulos focal, indicando que un proceso reparador activo parece haber sido iniciado. De este modo, incluso despues de 4 horas de deprivacion de flujo sangumeo, se demuestra la capacidad del proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento para superar, mas que
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
solo inhibir, los efectos de la isquemia caliente en los organos y apoyar un proceso de reparacion a tal grado que la discapacidad de la funcion del organo pueda ser revertida.
Es importante notar que los rinones testigo (sin tratamiento con el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento) fueron evaluados histologicamente despues de bien 2 o 4 horas de deprivacion de flujo sangumeo para determinar el beneficio relativo del proceso y la disolucion de resucitacion. La evaluacion histologica de los rinones testigo que sufrieron 2 horas de isquemia caliente mostro necrosis tubular difusa temprana. A 4 horas de dano de isquemia caliente, los rinones testigo mostraron una descomposicion difusa de las celulas tubulares. En contraste, en los rinones sufriendo 2 horas de isquemia caliente, y luego tratados con el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento, mostraron integridad celular reestablecida. Ademas, los rinones que sufrieron 4 horas de isquemia caliente, y luego fueron tratados con el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento, solo mostraron necrosis tubular focal, como se compara con el dano tubular extendido en los rinones testigo. Las evaluaciones histologicas apoyan ademas la eficacia sustancial del proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento en invertir la cascada de los eventos de isquemia calida despues de la deprivacion de flujo sangumeo.
Ejemplo 6-Funcion in vivo de un organo resucitado
A. Alotransplante
Un organo resucitado usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento fue evaluado en lo que se refiere a una funcion in vivo subsiguiente a la resucitacion. Un alotransplante canino fue realizado dejando un penodo de deprivacion de flujo sangumeo de 60 minutos postmortem, retirando un rinon de un donante canino; enjuagando el organo con la disolucion de resucitacion segun el presente invento; y perfundiendo el organo durante 2 horas, usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento, entre 30 y 32°C. Siguiendo el proceso de resucitacion, el rinon fue luego autotransplantado a un receptor canino con una nefrectoirna bilateral simultanea de los rinones del receptor. Por tanto, el receptor canino fue dependiente del rinon resucitado para sobrevivir. El curso postransplante del receptor canino se muestra en las Figs. 2 y 3.
El rinon reperfundio bien y produjo orina dentro de las dos horas despues del transplante. El rinon continuo produciendo orina a lo largo del penodo postransplante observado. Como se muestra en la FIG. 2, el receptor experimento un ligero aumento en creatinina serica a un nivel por encima de 2 mg/dl a las 24 horas despues del transplante. La creatinina serica volvio a un intervalo normal dentro de las 48 horas postransplante. Los parametros qmmicos del suero permanecieron normales hasta el decimo dfa postransplante, cuando tuvo lugar un agudo rechazo del organo (un regimen de inmunosupresion insuficiente fue administrado al receptor canino). Como se muestra en la FIG. 3, el valor de creatinina en orina aumento rapidamente y estuvo dentro de un intervalo normal de aproximadamente 70 mg/dl dentro de las 48 horas postransplante. Este leve episodio de necrosis tubular aguda (ATN) que ocurrio inicialmente, fue rapidamente invertido dentro de las 48 horas postransplante. La naturaleza reversible de la necrosis tubular aguda, junto con la capacidad del rinon transplantado de soportar la supervivencia continuada del receptor, demostro la viabilidad y la funcion in vivo del organo transplantado que habfa sufrido mas de 60 minutos de isquemia caliente. Asf pues, un organo resucitado usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento puede funcionar in vivo subsiguiente a la resucitacion.
B. Autrotransplante
En otra realizacion, un organo resucitado usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento fue evaluado en lo que se refiere a una funcion in vivo subsiguiente a la resucitacion. Usando dos perros, se realizo un auto transplante canino retirando los rinones izquierdos, que fueron luego danados mediante isquemia caliente en un bano salino a 37°C durante 2 horas. Siguiendo el penodo de isquemia caliente, los rinones fueron encanulados y enjuagados con la disolucion de resucitacion segun el presente invento; y perfundidos durante 2 horas, usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento, entre 30 y 32°C. Siguiendo el proceso de resucitacion, los rinones fueron autotransplantados con una nefrectomfa simultanea del rinon contralateral no tratado. Por tanto, cada perro receptor fue unicamente dependiente del rinon resucitado para su supervivencia. El curso postransplante de los perros receptores se muestra en las FIGs. 4 y 5.
El rinon reperfundio bien y produjo orina a las pocas horas del transplante. Los rinones continuaron a producir orina a lo largo del penodo postransplante observado. Como se muestra en la FIG. 4, ambos perros experimentaron un ligero aumento en creatinina serica consistente con ATN. En cada caso, un valor pico de creatinina serica tuvo lugar al tercer dfa postransplante con valores de 3,5 mg/dl y 2,8 mg/dl, respectivamente. Sin embargo, los niveles de creatinina serica volvieron a un intervalo normal dentro del decimo dfa postransplante. Los parametros qmmicos del suero permanecieron normales durante el resto del periodo postransplante observado. Como se muestra en la FIG. 5, el valor de creatinina en orina aumento rapidamente y estuvo dentro de un intervalo normal varios dfas antes de la normalizacion de los parametros qmmicos en suero. Tras la eutanasia, los hallazgos histologicos revelaron esencialmente rinones normales. Estos hallazgos son indicativos de la regeneracion del epitelio tubular. La naturaleza reversible de la necrosis tubular aguda, junto con la capacidad del rinon transplantado de soportar la supervivencia continuada del receptor, demostro la viabilidad y la funcion in vivo del organo transplantado que habfa
5
10
15
20
25
30
35
40
45
sufrido mas de 2 horas de isquemia caliente. As^ pues, un organo resucitado usando el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento puede funcionar in vivo subsiguiente a la resucitacion.
Ejemplo 7 - Comparacion con las disoluciones de conservacion conocidas
Los organos fueron resucitados usando o bien el proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento, o una disolucion de conservacion conocida en la tecnica (o bien un medio de cultivo basal RSM210™, o VIASPAN™), y luego comparado en lo que se refiere a funcion e histologfa. Cada grupo de rinones que sufrieron 60 minutos de deprivacion de flujo sangumeo fue enjuagado a 32°C usando la disolucion respectiva, y luego perfundida durante 2 horas con la disolucion respectiva: VIASPAN™ a 4°C; o RSM-210™ o la disolucion de resucitacion segun el presente invento a 30-32°C, usando el mismo proceso para la resucitacion. Una comparacion de las caractensticas de la perfusion media (presion; flujo; y resistencia vascular) y la funcion organica (concentracion de creatinina en orina; histologfa) de los rinones deprivados de flujo sangumeo durante 60 minutos y tratados con la disolucion respectiva se muestra en la Tabla 5.
Tabla 5
Parametro
Disolucion de resucitacion RSM-210™ VIASPAN™
Presion (mmHg)
54/25 44/40 54/46
caudal (cc/min)
97,4 12,9 27
Resistencia vascular
0,47 3,25 1,8
Creatinina (mg/dl)
41,8 No orina No orina
Histologfa
Bien conservada Bien conservada Inflamacion de los glomerulos, necrosis tubular temprana
Los resultados mostrados en la Tabla 5 demuestran que la disolucion de resucitacion segun el presente invento tiene una capacidad superior, comparada con la de RSM-210™ y VIASPAN™, para restaurar las caractensticas vasculares, asf como la funcion en los organos isquemicamente danados. Por ejemplo, los rinones enjuagados y perfundidos usando la disolucion de resucitacion segun el presente invento en el proceso de resucitacion deseado mostro vasoconstriccion reducida, y flujos mas altos comparados con los enjuagados y perfundidos con RSM-210™ y VIASPAN™. Similarmente, los rinones enjuagados y perfundidos usando la disolucion de resucitacion segun el presente invento fueron los unicos rinones en los que la funcion del organo fue restablecida, dando como resultado una produccion de orina con secrecion concordante de creatinina.
Histologicamente, solo los rinones enjuagados y perfundidos usando la disolucion de resucitacion segun el presente invento o con RSM-210™, fueron restaurados y conservados suficientemente como se indico por la arquitectura renal bien conservada. En contraste, estos rinones enjuagados y perfundidos con la disolucion VIASPAN™ demostraron evidencia de danos histologicos incluyendo inflamacion de los glomerulos y necrosis tubular. Demostrada es la capacidad superior, como se comparo con las disoluciones de conservacion conocidas por aquellos con experiencia en la tecnica, del proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento para superar los efectos de la isquemia calida en los organos, y soportar un proceso de reparacion al grado que la incapacidad de la funcion del organo pueda ser revertida.
EJEMPLO 8 - Distribucion de oxigeno en el proceso de resucitacion
Como se discutio en detalle anteriormente, una realizacion del presente invento es la de incluir como componente en la formulacion de la disolucion de resucitacion uno o mas agentes que transportan oxfgeno. Se evaluaron los efectos de diversos agentes que transportan oxfgeno como un componente en la disolucion de resucitacion, y su papel relativo de distribucion de oxfgeno molecular; y la capacidad del proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento para soportar el metabolismo oxidativo en curso. La disolucion de resucitacion no complementada con un agente que transporta oxigeno (en la Tabla 6,aparece como “RS”), la disolucion de resucitacion complementada con celulas de globulos rojos lavadas (en la Tabla 6, aparece como “RS-RBC”; 15% v/v), la disolucion de resucitacion complementada con hemoglobina purificada (en la Tabla 6, aparece como “RS-Hgb”; 60 cc/litro de una preparacion comercial), y la disolucion de resucitacion complementada con emulsion perfluoroqmmica (en la Tabla 6, aparece como “Rs-Pf”; 20% v/v) fueron usadas cada una para resucitar rinones que sufrieron desde 60 minutos de isquemia caliente. Cada grupo de rinones que sufrieron desde 60 minutos de deprivacion de flujo sangumeo fueron enjuagados a 30 hasta 32°C usando la disolucion respectiva, y luego perfundidos a 30 hasta 32°C durante 2 horas con la disolucion respectiva usando el mismo proceso para la resucitacion. Una comparacion de las caractensticas de perfusion media (presion; caudal; y resistencia vascular) y de la funcion organica (orina, concentracion de creatinina; histologfa) de los rinones deprivados de flujo sangumeo durante 60 minutos y tratados con la disolucion respectiva se muestra en la tabla 6.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
Tabla 6
Disolucion
Presion (mmHg) Caudal (cc/min) Resistencia vascular Creatinina Histologfa
RS
54/38 92.3 0,50 8,4 Bien conservada
RS-RBC
56/36 98,2 0,58 8,3 Bien conservada
RS-Hgb
58/42 66,67 0,75 18 Bien conservada
RS-Pf
54/25 97,4 0,47 41,8 Bien conservada
Los resultados mostrados en la Tabla 6 demuestran que segun aumenta la concentracion del ox^geno molecular en la disolucion de resucitacion, via un agente transportador de oxfgeno mas eficaz como un componente en la disolucion de resucitacion, la funcion organica es mejorada como resultado del proceso de resucitacion. Por ejemplo, los agentes perfluoroqmmicos transportadores de ox^geno eficaces o hemoglobina purificada dan como resultado una concentracion mas alta de oxfgeno molecular distribuido durante el proceso. La funcion de los rinones tratados con la disolucion de resucitacion que contiene o bien estos agentes de transporte es mejorada por encima de la de los rinones tratados con disolucion de resucitacion que carecen de un agente que transporta oxigeno anadido, o que contienen un agente que transporta oxigeno menos eficaz. Por ejemplo, usando la disolucion de resucitacion con bien hemoglobina purificada o bien agentes perfluoroqmmicos segun el presente invento dio como resultado una concentracion de creatinina de orina media de 18 mg/dl y 41,8 mg/dl, respectivamente. En contraste, cuando un oxigenador no es usado en el proceso de resucitacion y la disolucion de resucitacion carece de un agente que transporta oxigeno, o contiene una concentracion baja de celulas de globulos rojos lavadas, la creatinina urinaria media es de 8,4 mg/dl y 8,3 mg/dl, respectivamente. Demostrada es otra realizacion de la disolucion de resucitacion en la que, por adicion de uno o mas agentes que transportan oxigeno eficaz como un componente en la disolucion, la funcion organica mejorada se nota en un organo danado isquemicamente tratado mediante el proceso del presente invento.
Ejemplo 9
El proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento pueden ser usados para superar los efectos de la isquemia caliente en el hngado deprivado de flujo sangurneo, y soportar un proceso de reparacion a tal grado que el dano de la funcion del hngado puede ser invertido. Mientras la duracion del tiempo necesario para la perfusion puede depender de la duracion del tiempo de la privacion de flujo sangurneo, el tratamiento de un hngado danado isquemicamente con el proceso (enjuague y perfusion) segun el presente invento durante aproximadamente 2 horas podna ser suficiente en la resucitacion de la mayona de los hngados (por ejemplo, deprivados de flujo sangurneo durante alrededor de entre 0,5 y 4 horas) para la reanudacion de la funcion organica. En general la funcion del hngado, asf como los aspectos individuales de la fisiologfa, pueden ser determinados por la medicion de las concentraciones de los constituyentes en tanto el perfundido circulado como el producto del hngado (bilis). Las caractensticas funcionales del hngado pueden ser evaluadas por medicion de los parametros que incluyen, pero no se limitan a, concentraciones de bilis de sales de bilis, colesterol, fosfatasa alcalina; pH de la bilis, y caudal vascular del hngado, consumo de oxigeno, y utilizacion de glucosa (medida a partir de la perfusion). Asf, de acuerdo con el proceso y las disoluciones como se ilustran en los Ejemplos 1 y 2, el hngado isquemicamente danado podna ser tratado y luego eventualmente evaluado en lo que se refiere a la funcion metabolica.
Ejemplo 10
El proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento pueden ser usados para superar los efectos de la isquemia caliente en el pancreas deprivado de flujo sangurneo, y soportar un proceso de reparacion a tal grado que el dano de la funcion del pancreas puede ser invertido. Mientras la duracion del tiempo necesario para la perfusion puede depender de la duracion del tiempo de la deprivacion de flujo sangurneo, el tratamiento de un pancreas isquemicamente danado con el proceso (enjuague y perfusion) segun el presente invento durante aproximadamente 2 horas podna ser suficiente en la resucitacion de la mayona de los pancreas (por ejemplo, deprivados de flujo sangurneo durante alrededor de entre 0,5 y 4 horas) para la reanudacion de la funcion organica. En general la funcion del pancreas, asf como los aspectos individuales de la fisiologfa del pancreas, pueden ser determinados por la medicion de las concentraciones de los constituyentes tanto en el perfundido circulado como en el pancreas. Las caractensticas funcionales del pancreas incluyen concentraciones de enzimas pancreaticas tales como amilasa, lipasa; la hormona de insulina; pH de la secrecion pancreatica, sodio y potasio; y caudal vascular del pancreas, consumo de oxigeno, y utilizacion de glucosa (como se mide de los perfundidos). Asf, de acuerdo con el proceso y las disoluciones como se ilustra en los Ejemplos 1 y 2, el pancreas isquemicamente danado podna ser tratado y luego eventualmente evaluado en lo que se refiere a la funcion metabolica.
Ejemplo 11
El proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento pueden ser usados para superar los efectos de la isquemia caliente en un corazon deprivado de flujo sangurneo, y soportar un proceso de reparacion a tal grado
5
10
15
20
25
30
35
40
45
que el dano de la funcion del corazon puede ser invertido. Mientras la duracion del tiempo necesario para la perfusion puede depender de la duracion del tiempo de la deprivacion de flujo sangumeo, el tratamiento de un corazon isquemicamente danado con el proceso (enjuague y perfusion) segun el presente invento durante aproximadamente 2 horas podna ser suficiente en la resucitacion de la mayona de los corazones (por ejemplo, deprivados de flujo sangumeo durante alrededor de entre 0,5 y 4 horas) para la reanudacion de la funcion organica. En general la funcion cardfaca, asf como los aspectos individuales de la fisiologfa del corazon, pueden ser determinados por la medicion de las concentraciones de los constituyentes tanto en el perfundido circulado como en el corazon. Las caractensticas funcionales del corazon pueden ser evaluadas por medicion de los parametros que incluyen, pero no limitados a, trabajo electrico y mecanico, enzimas de corazon tales como las transaminasas (aspartato aminotransferasa, AST), lactato deshidrogenasa (LD), aldolasa de la fructosa 1,6 difosfato (ALS), malato deshidrogenasa (MD), glutation reductasa (GR), creatina fosfoquinasa (CPK), hidroxibutirato deshidrogenasa (HBD); caudal vascular del corazon, consumo de oxfgeno, y utilizacion de glucosa (como se mide de los perfundidos). Asf, de acuerdo con el proceso y las disoluciones como se ilustra en los Ejemplos 1 y 2, el corazon isquemicamente danado podna ser tratado y luego eventualmente evaluado en lo que se refiere a la funcion metabolica.
Ejemplo 12
El proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento pueden ser usados para superar los efectos de la isquemia caliente en un intestino delgado deprivado de flujo sangumeo, y soportar un proceso de reparacion a tal grado que el dano de la funcion del intestino delgado puede ser invertido. Mientras la duracion del tiempo necesario para la perfusion puede depender de la duracion del tiempo de la deprivacion de flujo sangumeo, el tratamiento de un intestino delgado isquemicamente danado con el proceso (enjuague y perfusion) segun el presente invento durante aproximadamente 2 horas podna ser suficiente en la resucitacion de la mayona de los intestinos delgados (por ejemplo, deprivados de flujo sangumeo durante alrededor de entre 0,5 y 4 horas) para la reanudacion de la funcion organica. En general la funcion intestinal, asf como los aspectos individuales de la fisiologfa del intestino delgado, pueden ser determinados por la medicion de las concentraciones de los constituyentes en ambos perfundidos circulados y el intestino delgado. Las caractensticas funcionales del intestino delgado pueden ser evaluadas por medicion de los parametros que incluyen, pero se limitan a, ensayos funcionales tales como ensayos de estimulacion de acidos gastricos y ensayos de absorcion usando moleculas trazadoras, caudal vascular del intestino delgado, consumo de oxfgeno, y utilizacion de glucosa (como se mide de los perfundidos). Asf, de acuerdo con el proceso y las disoluciones como se ilustra en los Ejemplos 1 y 2, el intestino delgado isquemicamente danado podna ser tratado y luego evaluado potencialmente para la funcion metabolica.
Ejemplo 13
El proceso y la disolucion de resucitacion segun el presente invento pueden ser usados para superar los efectos de la isquemia caliente en un pulmon deprivado de flujo sangumeo, y soportar un proceso de reparacion a tal grado que el dano de la funcion del pulmon puede ser invertido.
Puede ser deseable tratar primero el transplante de pulmon con un tensioactivo justo antes de le perfusion (vease, por ejemplo, Erasmus y otros, 1996, Am. J. Respir. Crit. Care Med. 153:665-670). Mientras la duracion del tiempo necesario para la perfusion puede depender de la duracion del tiempo de la deprivacion de flujo sangumeo, el tratamiento de un pulmon isquemicamente danado con el proceso (enjuague y perfusion) segun el presente invento durante aproximadamente 2 horas podna ser suficiente en la resucitacion de la mayona de los pulmones (por ejemplo, deprivados de flujo sangumeo durante alrededor de entre 0,5 y 4 horas) para la reanudacion de la funcion organica. En general la funcion pulmonar, asf como los aspectos individuales de la fisiologfa del pulmon, pueden ser determinados por la medicion de las concentraciones de los constituyentes en los perfundidos circulados tales como niveles de la protema A tensioactiva (SP-A). Las caractensticas funcionales del pulmon pueden ser evaluadas por medicion de los parametros que incluyen, pero no se limitan a, FVC (capacidad vital forzada), FEV1 (volumen expiratorio forzado en 1 segundo), PEFR (pico del caudal expiratorio), VA (volumen alveolar medio), TLC (capacidad pulmonar total), y DLCO (transferencia por monoxido de carbono). Asf, de acuerdo con el proceso y las disoluciones como se ilustra en los Ejemplos 1 y 2, el pulmon isquemicamente danado podna ser tratado y luego evaluado potencialmente para la funcion metabolica.

Claims (9)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    REIVINDICACIONES
    1. Un proceso ex vivo para inducir la reparacion de un organo isquemicamente danado a tal grado que la alteracion de la funcion del organo puede ser revertida, dicho proceso comprende:
    lavar el organo a traves del sistema arterial a una temperatura de alrededor de 28°C hasta alrededor de 37°C con una disolucion de resucitacion para eliminar la sangre y los productos acidotidos que se han acumulado en el organo durante el penodo de deprivacion de flujo sangmneo; y
    perfundir el organo a una temperatura de alrededor de 28°C hasta alrededor de 37°C con una disolucion de resucitacion;
    en el que la disolucion de resucitacion comprende una disolucion basica fisiologica tamponada y comprende ademas la siguiente combinacion de suplementos:
    (i) vasodilatadores, en una cantidad fisiologicamente eficaz, para dilatar los vasos sangmneos dentro del organo, en el que los vasodilatadores comprenden del 1% al 50% en volumen (p/v) de la combinacion de suplementos anadidos a la disolucion basica;
    (ii) factores troficos para restablecer la integridad celular y la funcion celular restableciendo de ese modo la funcion del organo, y
    (iii) una combinacion de sustratos de energfa qmmica en una cantidad fisiologicamente eficaz, para restablecer el metabolismo oxidativo en el organo readaptando el organo a un entorno oxigenado, en el que la combinacion de sustratos de energfa qmmica comprende piruvato, glucosa, ATP, AMP, UTP, coenzima A; p-nicotinamida adenin dinucleotido (Nad+); p-nicotinamida adenin dinucleotido fosfato (NADP); flavin adenin dinucleotido (FAD); cocarboxilasa, cloruro; adenosina; y magnesio; en el que los sustratos de energfa qmmica comprenden del 0,01% hasta el 90% en volumen de la combinacion de suplementos anadidos a la disolucion basica.
  2. 2. Un proceso segun la Reivindicacion 1, en el que dicho proceso comprende ademas introducir oxfgeno molecular mediante un modo seleccionado a partir del grupo que consiste en un oxigenador y un agente transportador de oxfgeno.
  3. 3. Un proceso segun la reivindicacion 1, en el que la perfusion es realizada usando un dispositivo que comprende un sistema de bombeo laminar o pulsatil para suministrar la disolucion fisiologica tamponada, y dicho dispositivo incluye ademas
    un medio para proporcionar y controlar la presion y la presion de perfusion, un medio para el control de la temperatura, y
    un medio para proporcionar y controlar la introduccion de, y la ventilacion de, gases respiratorios, y
    medios para ensayar o recoger para ensayos la disolucion fisiologica tamponada, que ha sido ya perfundida a traves del organo para controlar y medir una o mas caractensticas funcionales tales como el pH, diversas presiones, caudal, resistencia vascular, constituyentes qmmicos, oxigenacion, concentracion del dioxido de carbono, y consumo de oxfgeno.
  4. 4. Un proceso segun la Reivindicacion 3, en el que la perfusion es realizada usando un segundo dispositivo, junto con el primer dispositivo, para ensayar o recoger para ensayo un producto de un organo desviado a partir del organo, en el que la subsiguiente medida de los parametros del producto del organo se refiere a la integridad y funcion del organo.
  5. 5. Una disolucion de resucitacion para inhibir el dano isquemico, y para inducir la reparacion del dano isquemico a tal grado que la alteracion de la funcion del organo es revertida en un organo deprivado de flujo sangmneo, dicha disolucion de resucitacion comprende una disolucion basica fisiologica tamponada y comprende ademas la siguiente combinacion de suplementos:
    (i) vasodilatadores en una cantidad fisiologicamente eficaz para dilatar la vasculatura del organo, en los que los vasodilatadores comprenden del 1% hasta el 50% en volumen (p/v) de la combinacion de suplementos anadidos a la disolucion basica;
    (ii) una combinacion de sustratos de energfa qmmica en una cantidad fisiologicamente eficaz para restablecer el metabolismo oxidativo perdido durante la deprivacion de flujo sangmneo en el organo, en el que la combinacion de sustratos de energfa qmmica comprende piruvato, glucosa, ATP, AMP, UTP, coenzima A; p-nicotinamida adenin dinucleotido (Nad+); p-nicotinamida adenin dinucleotido fosfato (NADP); flavin adenin dinucleotido (FAD); cocarboxilasa, cloruro; adenosina; y magnesio; en el que los sustratos de energfa qmmica comprenden del 0,01% hasta el 90% en volumen de la combinacion de suplementos anadidos a la disolucion basica; y
    (iii) factores troficos en una cantidad fisiologicamente eficaz para promover uno o mas procesos de reparacion celular para restablecer la funcion celular perdida durante la deprivacion del flujo sangumeo en el organo.
  6. 6. Una disolucion de resucitacion segun la Reivindicacion 5, en el que los vasodilatadores comprenden una combinacion de componentes seleccionados a partir del grupo que consiste en sustratos para la vasodilatacion
    5 mediada por celulas endoteliales, sustratos para la vasodilatacion de microvasos, bloqueantes de canales de calcio.
  7. 7. Una disolucion de resucitacion segun la Reivindiacion 6, en la que los sustratos para la vasodilatacion mediada por celulas endoteliales comprenden acetilcolina y arginina, en la que los sustratos para la vasodilatacion de microvasos comprende prostaciclina y Mg+, y en la que los bloqueantes de canales de calcio comprenden adenosina y verapamil.
    10 8. Una disolucion de resucitacion segun la Reivindicacion 5, en la que los factores troficos son seleccionados
    a partir del grupo que consiste en aminoacidos, magnesio, derivados de acidos nucleicos, ribonucleosidos, factor de crecimiento de fibroblastos acido (FGF), FGF basico, heparina, condroitm sulfato, y una combinacion de los mismos.
  8. 9. Una disolucion de resucitacion segun la Reivindicacion 5, en la que la disolucion comprende ademas, una cantidad fisiologicamente eficaz de un componente seleccionado a partir del grupo que consiste en un antioxidante,
    15 un agente transportado de oxfgeno, y una combinacion de los mismos.
  9. 10. Una disolucion de resucitacion segun la Reivindicacion 5, en la que la disolucion comprende ademas, una cantidad farmaceuticamente eficaz de un farmaco neuroprotector.
ES97925571.8T 1996-05-17 1997-05-16 Disolución y procedimiento para la reanimación y reparación de tejido dañado isquémicamente Expired - Lifetime ES2296310T5 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/649,200 US5843024A (en) 1996-05-17 1996-05-17 Solution and process for resuscitation and preparation of ischemically damaged tissue
US649200 1996-05-17
PCT/US1997/008205 WO1997043899A1 (en) 1996-05-17 1997-05-16 Solution and process for resuscitation and reparation of ischemically damaged tissue

Publications (2)

Publication Number Publication Date
ES2296310T3 ES2296310T3 (es) 2008-04-16
ES2296310T5 true ES2296310T5 (es) 2016-06-24

Family

ID=24603829

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES97925571.8T Expired - Lifetime ES2296310T5 (es) 1996-05-17 1997-05-16 Disolución y procedimiento para la reanimación y reparación de tejido dañado isquémicamente

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5843024A (es)
EP (1) EP1021084B2 (es)
JP (1) JP4259614B2 (es)
CN (1) CN1163125C (es)
AT (1) ATE374526T1 (es)
AU (1) AU723424B2 (es)
CA (1) CA2255657C (es)
DE (1) DE69738184T2 (es)
ES (1) ES2296310T5 (es)
RU (1) RU2199310C2 (es)
WO (1) WO1997043899A1 (es)

Families Citing this family (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060003447A1 (en) * 2003-12-30 2006-01-05 Richard Fike Dry powder cells and cell culture reagents and methods of production thereof
US8409846B2 (en) 1997-09-23 2013-04-02 The United States Of America As Represented By The Department Of Veteran Affairs Compositions, methods and devices for maintaining an organ
US6736790B2 (en) 1998-02-25 2004-05-18 Denise R. Barbut Method and system for selective or isolated integrate cerebral perfusion and cooling
US20050203053A1 (en) * 1999-07-30 2005-09-15 Wurtman Richard J. Uridine administration improves phosphatide synthesis, synaptic transmission and cogntive function
US8314064B2 (en) * 1998-07-31 2012-11-20 Massachusetts Institute Of Technology Uridine administration stimulates membrane production
US8143234B2 (en) 1998-07-31 2012-03-27 Massachusetts Institute Of Technology Uridine administration improves phosphatide synthesis, synaptic transmission and cognitive function
US8518882B2 (en) * 1998-07-31 2013-08-27 Massachusetts Institute Of Technology Methods and compositions for ameliorating or inhibiting decline in memory or intelligence or improving same
DE69937198T2 (de) * 1998-07-31 2008-07-03 Massachusetts Institute Of Technology, Cambridge Behandlung der alzheimer-krankheit durch erhöhung des cytidin-spiegels in vivo
CA2342944A1 (en) * 1998-09-29 2000-04-06 Organ Recovery Systems, Inc. Apparatus and method for maintaining and/or restoring viability of organs
US6977140B1 (en) 1998-09-29 2005-12-20 Organ Recovery Systems, Inc. Method for maintaining and/or restoring viability of organs
US6673594B1 (en) 1998-09-29 2004-01-06 Organ Recovery Systems Apparatus and method for maintaining and/or restoring viability of organs
US7749693B2 (en) 1998-09-29 2010-07-06 Lifeline Scientific, Inc. Method of determining that an organ is not suitable for transplantation and using it for testing substances
US6485959B1 (en) 1998-10-07 2002-11-26 Cedars Sinai Medical Center Cell preconditioning and cryopresevation medium
SE516133C2 (sv) * 1999-02-25 2001-11-19 Lundblad Leif J I Användning av vissa substituerade indolokinoxaliner för framställning av ett medel för skydd av vävnader, organ och celler vid transplantation
US20070166292A1 (en) * 1999-04-14 2007-07-19 Breonics, Inc. System for exsanguinous metabolic support of an organ or tissue
US20040038192A1 (en) * 1999-04-14 2004-02-26 Breonics, Inc. System for exsanguinous metabolic support of an organ or tissue
CA2847723A1 (en) * 1999-04-14 2000-10-19 Breonics, Inc. System for exsanguinous metabolic support of an organ or tissue
US6846842B2 (en) * 1999-10-07 2005-01-25 Beth Israel Deconess Medical Center, Inc. Pyruvate ester composition and method of use for resuscitation after events of ischemia and reperfusion
US20020039786A1 (en) 2000-01-19 2002-04-04 Reid Lola M. Liver tissue source
US6492103B1 (en) * 2000-01-31 2002-12-10 Organ Recovery Systems, Inc. System for organ and tissue preservation and hypothermic blood substitution
JP2004507473A (ja) * 2000-08-25 2004-03-11 オルガン　リカヴァリー　システムス　インコーポレイテッド 血栓溶解性器官処理および修復法
DE60121027T3 (de) 2000-11-03 2011-06-09 Xvivo Perfusion Ab Lösung zur evaluierung und konservierung
EP1339829B1 (en) * 2000-11-06 2018-10-24 Life Technologies Corporation Dry powder cell culture media and methods of production thereof
WO2002081020A2 (en) * 2001-04-04 2002-10-17 Critical Therapeutics, Inc. Method for preventing acute renal failure
EP2253699A1 (en) * 2001-11-30 2010-11-24 Life Technologies Corporation Dry powder cell culture products containing lipid and methods of production thereof
AU2003228593B2 (en) * 2002-04-17 2006-07-27 Critical Therapeutics, Inc. Pharmaceutical composition comprising an alpha-ketoalkanoic acid ester or -amine and lactic acid or a lactic acid salt
US20060140914A1 (en) * 2002-10-31 2006-06-29 The General Hospital Corporation Repairing or replacing tissues or organs
US8128740B2 (en) 2003-04-04 2012-03-06 Organ Recovery Systems, Inc. Device for separating gas from a liquid path
USD531320S1 (en) 2003-04-04 2006-10-31 Organ Recovery Systems Cassette for organ transporter
USD531319S1 (en) 2003-04-04 2006-10-31 Organ Recovery Systems Tube frame for organ transporter
CA2521324C (en) 2003-04-04 2014-12-09 Organ Recovery Systems, Inc. Methods and apparatus for perfusion, diagnosis, storage and/or transport of an organ or tissue
EP1475434A1 (en) * 2003-05-09 2004-11-10 Oncoscience AG Method for storing tumor cells
EP2769745B1 (en) 2003-05-21 2016-05-04 JMS Co., Ltd. A blood component separator and a method for preparing a serum
WO2005082384A1 (ja) * 2004-02-27 2005-09-09 Nihon Trim Co., Ltd. 人工生理的塩類溶液およびその製造方法
US7504201B2 (en) * 2004-04-05 2009-03-17 Organ Recovery Systems Method for perfusing an organ and for isolating cells from the organ
RU2279878C2 (ru) * 2004-08-17 2006-07-20 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "БАШКИРСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ Федерального Агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО БГМУ РОСЗДРАВА) Способ защиты головного мозга в реконструктивной хирургии сонных артерий
NZ761002A (en) 2004-10-07 2021-07-30 Transmedics Inc Systems and methods for ex- vivo organ care
US9301519B2 (en) 2004-10-07 2016-04-05 Transmedics, Inc. Systems and methods for ex-vivo organ care
US8304181B2 (en) 2004-10-07 2012-11-06 Transmedics, Inc. Method for ex-vivo organ care and for using lactate as an indication of donor organ status
US12010987B2 (en) 2004-10-07 2024-06-18 Transmedics, Inc. Systems and methods for ex-vivo organ care and for using lactate as an indication of donor organ status
US20060079479A1 (en) * 2004-10-13 2006-04-13 Italo Biaggioni Methods of inducing vasodilation
BRPI0517333A (pt) * 2004-11-12 2008-10-07 Doorzand Airdrive B V solução de conservação e perfusão de órgãos para manter a viabilidade do órgão doador, e, método para conservar um órgão
US20060160062A1 (en) * 2005-01-14 2006-07-20 Young Lindon H Perfusion and/or preservation solution for organs
US20060204482A1 (en) * 2005-03-14 2006-09-14 Deolden James Methods of islet isolation and transplantation
US9078428B2 (en) * 2005-06-28 2015-07-14 Transmedics, Inc. Systems, methods, compositions and solutions for perfusing an organ
RU2302246C2 (ru) * 2005-07-29 2007-07-10 Леонид Лазаревич Каталымов Специфический и обратимый блокатор натриевых каналов возбудимой мембраны нервных волокон
US10071218B2 (en) 2006-01-24 2018-09-11 Zoll Medical Corporation Reperfusion protection in resuscitation
US20070169779A1 (en) * 2006-01-24 2007-07-26 Freeman Gary A Reperfusion protection in resuscitation
RU2311135C1 (ru) * 2006-04-07 2007-11-27 Владимир Иванович Оноприев Способ сегментарной трансплантации поджелудочной железы
EP1942726B1 (en) 2006-04-19 2017-01-04 Transmedics, Inc. Methods for ex vivo organ care
US9457179B2 (en) 2007-03-20 2016-10-04 Transmedics, Inc. Systems for monitoring and applying electrical currents in an organ perfusion system
DE102007038121A1 (de) * 2007-07-31 2009-02-05 Novalung Gmbh Konditionierung von Blut eines Patienten durch Gase
BRPI0817387A2 (pt) 2007-11-02 2015-09-08 Massachusetts Inst Technology métodos de conformidade de suplementação dietária de uridina e uso dos mesmos
US10750738B2 (en) 2008-01-31 2020-08-25 Transmedics, Inc. Systems and methods for ex vivo lung care
KR20100135886A (ko) * 2008-04-09 2010-12-27 더 유니버시티 오브 노쓰 캐롤라이나 엣 채플 힐 액틴 세포 골격의 재배열 및 세포간 갭 형성을 조절하는 방법
CN102596010A (zh) * 2009-08-10 2012-07-18 P2科学有限公司 用于诊断狭窄和其他血流受限之病症的utp
US9320269B2 (en) 2009-09-25 2016-04-26 John Brassil Organ preservation system
RU2423931C2 (ru) * 2009-09-30 2011-07-20 Государственное Учреждение "Санкт-Петербургский Научно-Исследовательский Институт Скорой Помощи Им. И.И. Джанелидзе" Способ восстановления жизнеспособности ишемически поврежденных донорских органов
DE102009045589A1 (de) 2009-10-12 2011-04-14 Universitätsklinikum Freiburg Vorrichtung zur Behandlung eines Individuums mit Herzminderleistung, Herzstillstand oder Schlaganfall
WO2012009651A1 (en) 2010-07-16 2012-01-19 Lifeline Scientific, Inc. Methods for increasing isolation yields of cellular products
JP6073794B2 (ja) 2010-10-22 2017-02-01 ライフライン サイエンティフィック インコーポレイテッドＬｉｆｅｌｉｎｅ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ， Ｉｎｃ． 培養膵島
WO2012078968A2 (en) 2010-12-10 2012-06-14 Lifeline Scientific, Inc. Machine perfusion with complement inhibitors
US9426979B2 (en) 2011-03-15 2016-08-30 Paragonix Technologies, Inc. Apparatus for oxygenation and perfusion of tissue for organ preservation
US8835158B2 (en) 2011-03-15 2014-09-16 Paragonix Technologics, Inc. Apparatus for oxygenation and perfusion of tissue for organ preservation
US8828710B2 (en) 2011-03-15 2014-09-09 Paragonix Technologies, Inc. System for hypothermic transport of samples
US12279610B2 (en) 2011-03-15 2025-04-22 Paragonix Technonogies, Inc. System for hypothermic transport of samples
US12096765B1 (en) 2011-03-15 2024-09-24 Paragonix Technologies, Inc. System for hypothermic transport of samples
US9253976B2 (en) 2011-03-15 2016-02-09 Paragonix Technologies, Inc. Methods and devices for preserving tissues
US11178866B2 (en) 2011-03-15 2021-11-23 Paragonix Technologies, Inc. System for hypothermic transport of samples
US9867368B2 (en) 2011-03-15 2018-01-16 Paragonix Technologies, Inc. System for hypothermic transport of samples
EP2704560B1 (en) 2011-04-14 2022-04-06 Transmedics, Inc. Organ care solution for ex-vivo machine perfusion of donor lungs
WO2012170633A1 (en) 2011-06-09 2012-12-13 Lifeline Scientific, Inc. Data record for organ transport and/or storage, comprising biomarker and events information
CA2774383A1 (en) 2011-06-22 2012-12-22 Shaf Keshavjee Repaired organ and method for making the same
US8785116B2 (en) 2012-08-10 2014-07-22 Paragonix Technologies, Inc. Methods for evaluating the suitability of an organ for transplant
US9560846B2 (en) 2012-08-10 2017-02-07 Paragonix Technologies, Inc. System for hypothermic transport of biological samples
US9877474B2 (en) 2012-09-08 2018-01-30 Organ Technologies, Inc. Method for maintaining organ or tissue for transplantation use for long period
US20140278468A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 I.D. Therapeutics Llc Apparatus and method for optimizing treatment using medication compliance patterns and glucose sensor
US10420337B2 (en) 2013-03-15 2019-09-24 Lifeline Scientific, Inc. Transporter with a glucose sensor for determining viability of an organ or tissue
CN113287600B (zh) 2014-06-02 2022-08-19 特兰斯迈迪茨公司 对离体肝脏灌注的灌注回路和系统以及对其保存的系统
US9994811B2 (en) 2014-10-09 2018-06-12 Lauren Brasile Reducing the immunogenicity of allografts
AU2015361996B2 (en) 2014-12-12 2019-09-26 Transmedics, Inc. Apparatus and method for organ perfusion
GB201511207D0 (en) * 2015-06-25 2015-08-12 Xvivo Perfusion Ab Isolated organ evaluation and treatment
IL310004B2 (en) 2015-09-09 2025-04-01 Transmedics Inc Endotracheal tube for an extracorporeal organ therapy system
CN105918308A (zh) * 2016-04-28 2016-09-07 上海市胸科医院 一种用于移植供肺灌流的肺灌流液及其制备方法
US10091986B2 (en) 2016-05-09 2018-10-09 Xor-Labs Toronto Inc. Organ perfusion device and method
US11540509B2 (en) 2016-05-30 2023-01-03 Tevosol, Inc. Apparatus and method for ex vivo lung ventilation with a varying exterior pressure
CA3066625A1 (en) 2017-06-07 2018-12-13 Paragonix Technologies, Inc. Apparatus for tissue transport and preservation
US20210400952A1 (en) 2017-06-07 2021-12-30 Paragonix Technologies, Inc. Apparatus for tissue transport and preservation
JP2020002062A (ja) * 2018-06-28 2020-01-09 株式会社Ｓｃｒｅｅｎホールディングス 灌流装置および灌流方法
WO2020252148A1 (en) 2019-06-11 2020-12-17 Paragonix Technologies, Inc. Organ transport container with antiviral therapy
US12337012B2 (en) * 2019-09-27 2025-06-24 Virginia Commonwealth University Compositions and methods for restoring or increasing tissue perfusion
US11632951B2 (en) 2020-01-31 2023-04-25 Paragonix Technologies, Inc. Apparatus for tissue transport and preservation
WO2022233642A1 (en) * 2021-05-06 2022-11-10 Xvivo Perfusion Ab Methods for removing leucocytes from isolated organs
USD1031028S1 (en) 2022-09-08 2024-06-11 Paragonix Technologies, Inc. Tissue suspension adaptor
AU2024258739A1 (en) * 2023-04-21 2025-11-06 Advance Pharmaceutical, Inc. Uses of super-oxide dismutase supplements
US12357533B2 (en) 2023-08-25 2025-07-15 Paragonix Technologies, Inc. Systems and methods for maintaining organ pressure
US12410408B2 (en) 2024-02-02 2025-09-09 Paragonix Technologies, Inc. Method for hypothermic transport of biological samples
USD1087382S1 (en) 2025-01-30 2025-08-05 Paragonix Technologies, Inc. Device for transporting a biological sample

Family Cites Families (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5331209B2 (es) 1973-10-05 1978-09-01
US4187252A (en) 1977-08-26 1980-02-05 Suntech, Inc. Tetramethylpentane blood substitutes
US4110474A (en) 1977-08-26 1978-08-29 Suntech, Inc. Tetramethylpentane blood substitutes
US4186253A (en) 1978-10-10 1980-01-29 The Green Cross Corporation Perfusate for preserving organ to be transplanted and preserving method
US4252827A (en) 1979-05-23 1981-02-24 The Green Cross Corporation Oxygen-transferable fluorocarbon emulsion
US4686085A (en) * 1980-04-14 1987-08-11 Thomas Jefferson University Stroke treatment utilizing extravascular circulation of oxygenated synthetic nutrients to treat tissue hypoxic and ischemic disorders
US5085630A (en) * 1980-04-14 1992-02-04 Thomas Jefferson University Oxygenated fluorocarbon nutrient solution
US4443480A (en) 1982-04-12 1984-04-17 Children's Hospital Medical Center Artificial blood and other gas transport agents
US4423077A (en) 1982-07-27 1983-12-27 The University Of Pennsylvania Perfluorochemical emulsion artificial blood
US4534978A (en) 1982-12-28 1985-08-13 The Green Cross Corporation Perfluorocycloamines
US4686024A (en) 1985-02-01 1987-08-11 The Green Cross Corporation Novel perfluoro chemicals and polyfluorinated compounds and process for production of the same
US4868318A (en) 1985-02-01 1989-09-19 The Green Cross Corporation Perfluoro chemicals and polyfluorinated compounds
US4879283A (en) * 1985-10-03 1989-11-07 Wisconsin Alumni Research Foundation Solution for the preservation of organs
US4865836A (en) 1986-01-14 1989-09-12 Fluoromed Pharmaceutical, Inc. Brominated perfluorocarbon emulsions for internal animal use for contrast enhancement and oxygen transport
US4866096A (en) 1987-03-20 1989-09-12 Air Products And Chemicals, Inc. Stable fluorochemical aqueous emulsions
US5130230A (en) * 1988-05-02 1992-07-14 Cryomedical Sciences, Inc. Blood substitute
US5011469A (en) * 1988-08-29 1991-04-30 Shiley, Inc. Peripheral cardiopulmonary bypass and coronary reperfusion system
US5584804A (en) * 1990-10-10 1996-12-17 Life Resuscitation Technologies, Inc. Brain resuscitation and organ preservation device and method for performing the same
US5395314A (en) * 1990-10-10 1995-03-07 Life Resuscitation Technologies, Inc. Brain resuscitation and organ preservation device and method for performing the same
US5137510A (en) * 1990-12-14 1992-08-11 Mallinckrodt Medical, Inc. System and method for oxygenation of the heart using subpericardial fluids
US5290766A (en) * 1991-02-18 1994-03-01 The National Heart Foundation Of New Zealand Cardioplegic compositions
CA2066374C (en) * 1991-04-19 2002-01-29 Paul E. Segall Solution for perfusing primates
US5409688A (en) 1991-09-17 1995-04-25 Sonus Pharmaceuticals, Inc. Gaseous ultrasound contrast media
US5403575A (en) 1991-12-12 1995-04-04 Hemagen/Pfc Highly fluorinated, chloro-substituted organic compound-containing emulsions and methods of using them
RU2025973C1 (ru) * 1992-02-10 1995-01-09 Научно-производственное предприятие "Биофарм" Раствор для консервации живых органов
US5552267A (en) * 1992-04-03 1996-09-03 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Solution for prolonged organ preservation
US5370989A (en) * 1992-04-03 1994-12-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Solution for prolonged organ preservation
US5362622A (en) * 1993-03-11 1994-11-08 Board Of Regents, The University Of Texas System Combined perfusion and oxygenation apparatus
WO1994021116A1 (en) * 1993-03-16 1994-09-29 Alliance Pharmaceutical Corp. Preservation solution and method for warm organ preservation
US5405742A (en) * 1993-07-16 1995-04-11 Cyromedical Sciences, Inc. Solutions for tissue preservation and bloodless surgery and methods using same
ATE423464T1 (de) * 1994-05-20 2009-03-15 Breonics Inc Verfahren zur überwachung der lebensfähigkeit transplantabler organe

Also Published As

Publication number Publication date
JP2000511531A (ja) 2000-09-05
AU723424B2 (en) 2000-08-24
JP4259614B2 (ja) 2009-04-30
EP1021084A4 (en) 2004-10-13
EP1021084B1 (en) 2007-10-03
EP1021084A1 (en) 2000-07-26
HK1021925A1 (en) 2000-07-21
US5843024A (en) 1998-12-01
AU3067197A (en) 1997-12-09
EP1021084B2 (en) 2016-03-09
RU2199310C2 (ru) 2003-02-27
CN1226132A (zh) 1999-08-18
EP1021084B9 (en) 2008-02-27
DE69738184T2 (de) 2008-07-24
CA2255657A1 (en) 1997-11-27
CA2255657C (en) 2009-09-01
CN1163125C (zh) 2004-08-25
WO1997043899A1 (en) 1997-11-27
ES2296310T3 (es) 2008-04-16
ATE374526T1 (de) 2007-10-15
DE69738184D1 (de) 2007-11-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2296310T5 (es) Disolución y procedimiento para la reanimación y reparación de tejido dañado isquémicamente
CN101098622B (zh) 用于器官冷藏和灌注的组合物
US6582953B2 (en) Organ chamber for exsanguinous metabolic support system
US6642045B1 (en) System for exsanguinous metabolic support of an organ or tissue
US20100316705A1 (en) System for exsanguinous metabolic support of an organ or tissue
EP1392113A1 (en) Organ chamber for exsanguinous metabolic support system
JP5705324B2 (ja) 灌流組成物
JPH01246201A (ja) 臓器保存用溶液
Salehi et al. Advances in perfusion systems for solid organ preservation
US20090298043A1 (en) In-situ preservation (isp) bridge method and solution for non-heart beating donors
CA2376607C (en) System for exsanguinous metabolic support of an organ or tissue
Třeška et al. Can ischemia-reperfusion syndrome in transplanted kidneys procured from non–heart-beating donors be influenced by adding selenium into the reperfusion solution? an experimental study
KR20210151201A (ko) 장기 이식을 위한 방법 및 장치
EP0664953B1 (en) Lung graft preservative composition and a method for viable preservation of lung grafts
HK1021925B (en) Solution and process for resuscitation and reparation of ischemically damaged tissue
Minor Gaseous oxygen to improve viability of marginal or pre-damaged organ grafts during hypothermic storage
Hosgood et al. Ex-vivo Normothermic Perfusion in Renal Transplantation
AU2001259832A1 (en) Organ chamber for exsanguinous metabolic support system