ES2313126T3

ES2313126T3 - Derivados de 2-(4-sulfonilamino)-3-hidroxi-3,4-dihidro-2h-cromen-6-ilo sustituidos con amidometilo, procedimiento y productos intermedios para su preparacion y medicamentos que contienen estos compuestos.

Info

Publication number: ES2313126T3
Application number: ES04817204T
Authority: ES
Inventors: David Sykes; Brian Moloney; Lester Marrison; Dieter Ziegler; Michael Mlinaric; Christiane Boecker; Reinhard Brueckner; Michael Weske; Klaus Witte; Yvan Fischer
Original assignee: Solvay Pharmaceuticals GmbH
Current assignee: AbbVie Pharmaceuticals GmbH
Priority date: 2003-10-17
Filing date: 2004-10-14
Publication date: 2009-03-01
Anticipated expiration: 2024-10-14
Also published as: CN100532375C; WO2005037780A3; CA2542813C; MXPA06003958A; SI1678130T1; NO20062202L; IL174950A; ZA200602788B; JP4791968B2; AR046106A1; BRPI0415523A; ATE405547T1; RU2006116629A; TWI321564B; DE502004007916D1; JP2007516235A; EP1678130B1; CA2542813A1; RU2355685C2; KR20060129170A

Abstract

Compuestos de la fórmula general I, (Ver fórmula) en donde, R 1 significa alquilo C1 - 4, R 2 significa alquilo C1 - 4, R 3 significa fenilo, que está eventualmente sustituido, 1-2 veces, con halógeno, alquilo C1 - 4, alcoxi C1 - 4 o trifluorometilo; naftilo o bifenilo, R 4 significa hidrógeno; alquilo C1 - 6 o cicloalquil C3 - 7-alquilo C1 - 4, R 5 significa hidrógeno y R 6 significa alquilo C1 - 6; fenil-alquilo C1 - 4, cuyo grupo fenilo está eventualmente sustituido 1 vez con halógeno; furil-alquilo C1 - 4 o tetrahidronaftilo, o R 5 y R 6 , junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo de piperazina el cual está eventualmente sustituido con fenilo.

Description

Derivados de 2-(4-sulfonilamino)-3-hidroxi-3,4-dihidro-2H-cromen-6-ilo sustituidos con amidometilo, procedimiento y productos intermedios para su preparación y medicamentos que contienen estos compuestos.

La presente invención se refiere a nuevos derivados de 2-(4-sulfonilamino)-3-hidroxi-3,4-dihidro-2H-cromen-6-ilo sustituidos con amidometilo, con un efecto bloqueante del canal del potasio, en particular con un efecto que influye sobre el sistema cardiocirculatorio, así como a medicamentos que contienen a estos compuestos. Además, la invención se refiere a un procedimiento para la preparación de los nuevos compuestos y a productos intermedios de este procedimiento.

Por el documento WO 00/12077 A1 (corresponde al documento US 6.150.356) ya son conocidos indanos, benzopiranos, así como análogos de compuestos de este tipo, los cuales presentan efectos bloqueantes del canal del potasio, en particular que influyen favorablemente sobre el sistema cardiocirculatorio.

El documento WO 00/58300 da a conocer derivados de cromano que son adecuados como medicamentos, en particular como medicamentos de acción antiarrítmica.

La presente invención se propuso poner a disposición nuevas sustancias activas para el tratamiento de, en particular, enfermedades cardiocirculatorias, preferiblemente de arritmias del corazón que se distingan por una elevada actividad con una buena compatibilidad y, en el caso de un efecto antiarrítmico, también por un perfil de acción atrial-selectivo acusado.

Sorprendentemente, se ha encontrado ahora que un grupo de acuerdo con la invención de nuevos derivados de 2-(4-sulfonilamino)-3-hidroxi-3,4-dihidro-2H-cromen-6-ilo sustituidos con amidometilo presentan propiedades bloqueantes del canal del potasio y son adecuados para el tratamiento de enfermedades cardiocirculatorias, preferiblemente para el tratamiento de arritmias del corazón. Los compuestos de acuerdo con la invención se distinguen por una elevada eficacia con una buena compatibilidad y, en el caso de un efecto antiarrítmico, también por un perfil de acción atrial-selectivo acusado. Junto a ello, los compuestos de acuerdo con la invención presentan propiedades que permiten esperar un efecto adicional que influya sobre el sistema inmunológico.

Son objeto de la invención nuevos derivados de 2-(4-sulfonilamino)-3-hidroxi-3,4-dihidro-2H-cromen-6-ilo sustituidos con amidometilo de la fórmula general I,

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en donde,

R^{1}: significa alquilo C_{1-4},

R^{2}: significa alquilo C_{1-4},

R^{3}: significa fenilo, que está eventualmente sustituido, 1-2 veces, con halógeno, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4} o trifluorometilo; naftilo o bifenilo,

R^{4}: significa hidrógeno; alquilo C_{1-6} o cicloalquil C_{3-7}-alquilo C_{1-4},

R^{5}: significa hidrógeno y

R^{6}: significa alquilo C_{1-6}; fenil-alquilo C_{1-4}, cuyo grupo fenilo está eventualmente sustituido 1 vez con halógeno; furil-alquilo C_{1-4} o tetrahidronaftilo, o

R^{5} y R^{6}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo de piperazina el cual está eventualmente sustituido con fenilo.

Además, son objeto de la invención medicamentos que contienen los compuestos de la fórmula I. Además, son objeto de la invención un procedimiento para la preparación de los compuestos de la fórmula I y productos intermedios de este procedimiento.

Si en los compuestos de la fórmula I o en otros compuestos descritos en el marco de la presente invención significan o contienen sustituyentes alquilo C_{1-4} o alquilo C_{1-6}, éstos pueden ser de cadena lineal o ramificados.

R^{1} y R^{2} tienen preferiblemente en cada caso el significado de metilo.

R^{3} tiene preferiblemente el significado de fenilo, el cual está eventualmente sustituido, 1-2 veces, con halógeno, alquilo C_{1-4}, alcoxi C_{1-4} o trifluorometilo. En particular, R^{3} tiene el significado de fenilo sustituido 1 vez con alquilo C_{1-4}. Si R^{3} significa fenilo sustituido con halógeno, entran en consideración como halógeno flúor, cloro, bromo y yodo. En un significado particularmente preferido, R^{3} representa 4-etilfenilo.

R^{4} significa preferiblemente hidrógeno, alquilo C_{1-6} o ciclopropil-alquilo C_{1-4}, en particular ciclopropilmetilo. Si R^{4} representa alquilo C_{1-6}, éste está especialmente ramificado y representa preferiblemente neopentilo, 2,2-dimetilbutilo, 2-etilbutilo, 3-metilbutilo ó 2-metilpropilo.

R^{5} tiene preferiblemente el significado de hidrógeno.

R^{6} tiene preferiblemente los significados de fenil-alquilo C_{1-4}, en particular bencilo o fenetilo, o el significado de tetrahidronaftilo, en particular 1-tetrahidronaftilo. Se prefiere (R)-1-tetrahidronaftilo.

Compuestos de la fórmula I particularmente preferidos se eligen del grupo consistente en 2-(4-{[(4-etilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cro-men-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida; 2-((3S,
4R)-4-{[(4-etil-fenil)sulfonil]-amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-[(1R)-1,2,3,4-tetrahidronafta-len-1-il]-acetamida; N-bencil-2-{4-[((4-etilfenil)sulfonil](neopentil)amino]-3-hidroxi-2,2-di-metil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il}acetamida; 2-{4-[[(4-etilfenil)sulfonil](neopentil)-amino]-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il}-N-(2-feniletil)acetamida y 2-(4-{[(4-metilfenil)-sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida.

De acuerdo con la invención, los nuevos compuestos de la fórmula I se obtienen haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula general II,

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en donde R^{1}, R^{2}, R^{4}, R^{5} y R^{6} poseen los significados anteriores, con un compuesto de la fórmula general III,

IIIX - SO_{2} - R^{3}

en donde R^{3} posee el significado anterior y X significa un grupo lábil separable. La reacción puede llevarse a cabo por una vía química en húmedo habitual en un disolvente orgánico inerte bajo las condiciones de reacción, en particular un disolvente dipolar-aprótico tal como diclorometano, o en una mezcla de disolventes de este tipo y en presencia de una base. Como bases se adecuan bases nitrogenadas orgánicas no nucleófilas, tales como alquil-inferior-aminas terciarias, por ejemplo trietilamina. Bases orgánicas líquidas empleadas en exceso pueden también servir como disolventes. En caso deseado, la reacción puede catalizarse mediante un coadyuvante de acoplamiento en sí conocido tal como 4-N,N-dimetilaminopiridina (= DMAP). Temperaturas de reacción adecuadas se encuentran entre la temperatura ambiente y 80ºC, por ejemplo en 65ºC. Presiones de reacción adecuadas se encuentran entre la presión normal y aproximadamente 200 bar, por ejemplo a 180 bar. Si el compuesto de la fórmula III empleado es líquido, puede ser ventajoso eliminar de la mezcla de reacción de manera en si conocida, por ejemplo a presión reducida, el disolvente empleado después de la adición del compuesto de la fórmula III al compuesto de la fórmula II disuelto en el disolvente. Si en los compuestos de partida de la fórmula II R^{4} representa hidrógeno, es conveniente emplear cantidades equimolares de compuesto de la fórmula III. Como grupo lábil en los compuestos de la fórmula III se emplea habitualmente halógeno, preferiblemente cloro o bromo. Además, la reacción de un compuesto de la fórmula II con un compuesto de la fórmula III también se puede llevar a cabo de manera en si conocida en fase sólida, en particular en una resina de reacción tal como aminometil-poliestireno (AMPE). Esta variante de reacción puede emplearse preferiblemente para la preparación de pequeñas cantidades de sustancias, por ejemplo en la escala de 1 a 10 mmol. Si se sintetiza en fase sólida, puede emplearse como base preferiblemente una base fácilmente filtrable tal como metilpiperidina unida a polímero (= metilpiperidina soportada a polímero, metilpiperidina-SP) en sí conocida. Temperaturas de reacción adecuadas se encuentran, en el caso de la síntesis en fase sólida, entre 10ºC y 40ºC, preferiblemente a la temperatura ambiente. Compuestos de la fórmula I pueden aislarse de la mezcla de reacción de modo en si conocido y, en caso necesario, pueden purificarse de manera en si conocida.

Compuestos de la fórmula II se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto epóxido de la fórmula general IV,

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en donde R^{1}, R^{2}, R^{5} y R^{6} poseen los significados anteriores, de manera en sí conocida, con un compuesto nitrogenado orgánico nucleófilo, preferiblemente amoníaco en solución acuosa, en un disolvente dipolar-prótico tal como un alcohol alquílico inferior, preferiblemente etanol. Temperaturas de reacción adecuadas se encuentran entre la temperatura ambiente y 60ºC. Si se desean compuestos de la fórmula II, en donde R^{4} representa alquilo C_{1-6} o cicloalquil C_{3-7}-alquilo C_{1-4}, el compuesto obtenido de la fórmula II, en donde R^{4} representa hidrógeno se puede alquilar seguidamente de manera en si conocida. La alquilación puede llevarse a cabo, en particular, como aminoalquilación, haciendo reaccionar el compuesto de la fórmula II, en donde R^{4} representa hidrógeno, primeramente con un aldehído de la fórmula general V,

VR^{401}-CHO

en donde R^{401} significa hidrógeno, alquilo C_{2-5} o cicloalquil C_{3-7}-alquilo C_{0-3}, y reduciendo a continuación el producto intermedio de imina resultante, mediante la adición de un agente reductor, en el compuesto de alquilamina de la fórmula II. Como agente reductor se adecuan borohidruros complejos tales como NaBH_{3}CN o borohidruro ligado a polímero (= PS-BH_{4}) en sí conocido. En una primera variante, la reacción se puede llevar a cabo en un disolvente orgánico polar-prótico inerte bajo las condiciones de la reacción, en particular metanol, llevándose a cabo la reducción de la amina in situ sin su aislamiento en el mismo disolvente. Temperaturas de reacción adecuadas se encuentran para esta variante entre la temperatura ambiente y 60ºC, por ejemplo en 50ºC. En una segunda variante, la reacción del compuesto de la fórmula II, en donde R^{4} representa hidrógeno, se puede llevar a cabo con un aldehído de la fórmula V para dar el producto intermedio de imina en un disolvente dipolar-aprótico, en particular tetrahidrofurano (= THF). En este caso, es ventajoso, para la aceleración de la reacción, añadir cantidades catalíticas de un agente extractor de agua, por ejemplo de un ortoéster, en particular ortoformiato de trimetilo (= TMOF). A continuación, se puede aislar el producto intermedio de imina y recoger en un disolvente polar-prótico indicado precedentemente para la primera variante, con el fin de llevar a cabo la reducción en este disolvente. Esta segunda variante puede llevarse a cabo preferiblemente a la temperatura ambiente. En el caso de la reacción de apertura del anillo nucleófila, precedentemente descrita en dos variantes, de epóxidos de la fórmula IV se obtienen, por normal general, compuestos de la fórmula II, en donde los sustituyentes vecinales se encuentran en posición 3 y en posición 4 del anillo de pirano, a saber el grupo hidroxi y el grupo amino, en cada caso en posición trans uno respecto de otro.

Compuestos de la fórmula II son nuevos compuestos que se adecuan de manera ventajosa como productos intermedios para la preparación de nuevas sustancias farmacológicamente activas, por ejemplo para la preparación de los compuestos de la fórmula I.

Compuestos de la fórmula III y compuestos de la fórmula V son en sí conocidos y pueden prepararse de manera en sí conocida a partir de compuestos conocidos.

Compuestos de la fórmula IV pueden prepararse, haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula general VI,

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en donde R^{1}, R^{2}, R^{5} y R^{6} poseen los significados anteriores, de manera en sí conocida, con un compuesto peróxido capacitado para la formación de epóxidos, preferiblemente con ácido m-cloroperbenzoico (= MCPBA) en un disolvente polar-aprótico orgánico, inerte bajo las condiciones de la reacción, preferiblemente diclorometano, y en presencia de una base. Como bases se adecuan, en particular, una solución acuosa de hidrógeno-carbonato de sodio. La reacción puede llevarse a cabo preferiblemente a la temperatura ambiente.

Compuestos de la fórmula I presentan al menos en los átomos de carbono vecinos, en la posición 3 y en la posición 4 del anillo de pirano, en cada caso un centro de quiralidad y, por lo tanto, pueden manifestarse en varias formas isómeras. Objeto de la invención son tanto los compuestos de la fórmula I puros en cuanto a los isómeros, como también mezclas de estos isómeros. Los compuestos de la fórmula I ópticamente activos pueden obtenerse, por ejemplo, a partir de las mezclas de los isómeros de la fórmula I a partir de mezclas de los isómeros de la fórmula II de manera en sí conocida, por ejemplo por separación cromatográfica en materiales de separación quirales. Mezclas de los isómeros de la fórmula II también se pueden obtener por reacción con ácidos ópticamente activos adecuados, por ejemplo ácido canfosulfónico o ácido D- o L-tartárico, y subsiguiente separación en los respectivos antípodas ópticos por cristalización fraccionada de las sales obtenidas.

Los compuestos ópticamente activos de la fórmula I pueden prepararse directamente también por síntesis quiral. Si deben prepararse compuestos de la fórmula I, en los que el sustituyente hidroxi en la posición 3 del anillo de pirano y el sustituyente R^{4}NSO_{2}R^{3} en la posición 4 del anillo de pirano presentan una posición trans entre sí estereoquímicamente definida, se puede partir en cada caso de epóxidos de la fórmula IV, en donde ya está previamente formada la correspondiente estereoquímica. Epóxidos de la fórmula IV con una estereoquímica correspondientemente formada de antemano pueden prepararse, por ejemplo, epoxidando alquenos de la fórmula VI, de manera en sí conocida, con ayuda de un catalizador quiral según el método de Jacobsen (véase, por ejemplo, el documento EP 0 521 099 A1). Por ejemplo, si ha de prepararse un compuesto de la fórmula I, en donde el centro de quiralidad en la posición 3 del anillo de pirano presenta la configuración S y en donde el centro de quiralidad en la posición 4 del anillo de pirano presenta la configuración R, puede hacerse reaccionar un producto intermedio de la fórmula VI, en presencia de un catalizador quiral, en particular (S,S)-manganeso-III-saleno y en presencia de un donante de oxígeno, en particular hipoclorito sódico en solución acuosa en un disolvente orgánico inerte bajo las condiciones de la reacción, en particular diclorometano. Convenientemente, la reacción se lleva a cabo a un valor del pH entre 9,5 y 11,5. Para el ajuste de un valor del pH adecuado, puede añadirse a la mezcla de reacción preferiblemente un tampón consistente en Na_{2}HPO_{4} y piridina-N-óxido. Temperaturas de reacción adecuadas se encuentran entre -10ºC y la temperatura ambiente, preferiblemente en 0ºC. Si ha de prepararse un compuesto de la fórmula I, en donde el centro de quiralidad en la posición 3 del anillo de pirano presenta la configuración R y en donde el centro de quiralidad en la posición 4 del anillo de pirano presenta la configuración S, puede procederse análogamente a la prescripción descrita precedentemente, empleando sin embargo en lugar de (S,S)-manganeso-III-saleno, entonces el (R,R)-manganeso-III-saleno.

Compuestos de la fórmula VI pueden prepararse, haciendo reaccionar un compuesto de la fórmula general VII,

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en donde R^{1} y R^{2} poseen los significados anteriores, con un compuesto de la fórmula general VIII,

VIIIHNR^{5}R^{6}

en donde R^{5} y R^{6} poseen los significados anteriores, de un modo en si conocido para la aminoacilación. Como agentes acilantes pueden emplearse los ácidos carboxílicos de la fórmula VII o sus derivados reactivos tales como halogenuros de ácido, en particular cloruros de ácidos o bromuros de ácidos. En el caso de que como agente de acilación se empleen los propios ácidos de la fórmula VII, su reacción con los compuestos amino de la fórmula VIII puede llevarse a cabo convenientemente también en presencia de un reactivo de acoplamiento en sí conocido, por ejemplo 1,1-carbonildiimidazol, éster etílico de ácido clorofórmico, o de una alquilcarbodiimida, por ejemplo N'-(3-dimetilaminopropil)-N-etilcarbodiimida (= EDC), o de una cicloalquilcarbodiimida tal como diciclohexilcarbodiimida. La acilación puede efectuarse en un disolvente orgánico inerte bajo las condiciones de reacción, a temperaturas de -30º hasta +50ºC, preferiblemente a la temperatura ambiente. Como disolventes se adecuan hidrocarburos halogenados tales como diclorometano, o éteres cíclicos tales como tetrahidrofurano, dioxano o mezclas de estos
disolventes.

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Compuestos de la fórmula VII se pueden preparar saponificando de manera en sí conocida el grupo éster de un compuesto de la fórmula general IX,

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en donde R^{1} y R^{2} poseen los significados anteriores y R^{7} significa alquilo C_{1-4}. La saponificación puede llevarse a cabo, por ejemplo, en un disolvente polar-prótico tal como etilenglicol mediante el contacto con una base, por ejemplo una base fuerte tal como lejía de sosa acuosa diluida. Temperaturas de reacción adecuadas se encuentran entre la temperatura ambiente y el punto de ebullición del disolvente o de la mezcla de disolventes.

Compuestos de la fórmula IX pueden prepararse haciendo reaccionar, de manera en sí conocida, un compuesto de la fórmula general X,

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en donde R^{7} posee el significado anterior, con un compuesto de la fórmula general XI,

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en donde R^{1} y R^{2} poseen los significados anteriores. La reacción puede llevarse a cabo en un disolvente orgánico inerte bajo las condiciones de reacción tal como tolueno o xileno y en presencia de un ácido, bajo la separación de agua por destilación azeótropa. Como ácido se adecua, por ejemplo, ácido acético o ácido propiónico. Ventajosamente, se trabaja bajo la adición de un catalizador tal como un ácido de Lewis, por ejemplo ácido fenilbórico. Temperaturas de reacción adecuadas se encuentran entre la temperatura ambiente y el punto de ebullición del disolvente o de la mezcla de disolventes, por ejemplo en torno a 120ºC.

Los compuestos de la fórmula X y de la fórmula XI son en sí conocidos o pueden prepararse de modo en sí conocido a partir de compuestos conocidos.

Los efectos ventajosos de compuestos de la fórmula I como sustancias farmacológicamente activas resultan evidentes ante el siguiente fondo: es ya conocido que sustancias que bloquean canales del potasio del corazón propios del cuerpo pueden emplearse como sustancias activas contra enfermedades cardiocirculatorias, en particular contra arritmias del corazón. Mediante el bloqueo en el corazón de corrientes de potasio dirigidas hacia el exterior puede conseguirse una prolongación de los potenciales de acción del corazón que se manifiesta favorablemente sobre estados arrítmicos del corazón. Como ejemplos de esta aplicación en terapia conocida pueden nombrarse los antiarrítmicos de la clase III. Un problema de bloqueadores inespecíficos del canal del potasio de este tipo es su escasa selectividad con respecto a su acción sobre diferentes tejidos del corazón. Así, desde hace largo tiempo se supone que, en particular los antiarrítmicos de la clase III, pueden conducir a prolongaciones indeseadas del intervalo QT en el electrocardiograma (= ECG) y a taquicardias ventriculares polimorfas ("torsades de pointes"), con lo que, en última instancia, pueden desencadenarse complicaciones indeseadas tales como, por ejemplo, un aleteo ventricular. Por lo tanto, se buscaron bloqueadores del canal del potasio que estuvieran en condiciones de influir selectivamente sobre las corrientes de potasio de la aurícula del corazón (= atrio), pero no sobre el ventrículo del corazón (= ventrículo). Dado que los canales del potasio K_{v} 1.5 en el corazón, descubiertos hace algún tiempo, están exclusivamente localizados en la aurícula pero no en el ventrículo, se puede suponer de estos compuestos que bloquean los canales del potasio K_{v} 1.5 que sean adecuados como antiarrítmicos atrial-selectivos. Los canales del potasio K_{v} 1.5 y otros canales del potasio están sin embargo no solamente localizados en el corazón, sino también, por ejemplo, en vasos del cuerpo. Por lo tanto, no siempre se puede excluir que compuestos que bloquean el canal del potasio K_{v} 1.5 puedan conducir a aumentos de la presión sanguínea en los vasos como consecuencia del bloqueo de canales del potasio. Por lo tanto, se prefieren compuestos que bloquean el canal del potasio K_{v} 1.5 que estén exentos de efectos concomitantes que aumenten la presión sanguínea. Otros efectos concomitantes indeseados que pueden manifestarse al administrar algunos compuestos de acción bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.5 son efectos concomitantes adicionales antiarrítmicos de la clase I, así como efectos inótropos negativos.

Los compuestos de la fórmula I se distinguen por un efecto bloqueador de los canales del potasio K_{v} 1.5 cardiales, particularmente acusado y selectivo. Junto a una actividad particularmente buena y un perfil de acción antiarrítmico atrial-selectivo acusado, los compuestos de la fórmula I presentan en cualquier caso escasos efectos concomitantes indeseados tales como un aumento de la presión sanguínea, efectos concomitantes antiarrítmicos de la clase I, así como efectos inótropos negativos. Por lo tanto, los compuestos de la fórmula I están indicados para el tratamiento y/o la profilaxia de enfermedades cardiocirculatorias, en particular de la fibrilación ventricular, aleteo ventricular y otras arritmias cardíacas, en el caso de mamíferos superiores y el hombre.

Además, los compuestos de la fórmula I muestran un claro efecto bloqueante de los canales del potasio K_{v} 1.3. Canales del potasio K_{v} 1.3 están localizados, preferiblemente, en células del sistema inmune. Un bloqueo de los canales del potasio K_{v} 1.3 se correlaciona, entre otros, con un efecto antiproliferante y/o inmunosupresor (véase C. Beeton et al., The Journal of Immunology 166 (2001) 936-944). De compuestos que están en condiciones de bloquear los canales del potasio K_{v} 1.3 - por ejemplo los compuestos de la fórmula I - se puede suponer, por lo tanto, que también se adecuan para el tratamiento y/o profilaxia de enfermedades autoinmunes proliferantes y crónicamente inflamatorias tales como la esclerosis múltiple.

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Descripción de los métodos de ensayo farmacológicos

Los números de ejemplo indicados se refieren a los ejemplos de preparación seguidamente descritos.

1. Investigación in vitro del efecto bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.5 de las sustancias

El efecto bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.5 de las sustancias se detecta en un modelo de ensayo, en si conocido o análogamente a este modelo de ensayo (véase W. Hu et al., J. Pharmacol. Toxicol. Methods 34 (1995) 1-7). En este modelo de ensayo se emplea una línea de células de ovarios del hámster chino (= "chinese hamster ovary", "CHO"), que procede de una única célula y que expresa de forma estable el canal K_{v} 1.5. Mediante incubación a lo largo de una noche en un medio nutricio que contiene RbCl o en un "tampón de carga" (todos los valores en mM: RbCl 5, NaCl 140, CaCl_{2} 2, MgSO_{4} 1, tampón HEPES 10, glucosa 5), las células de ovarios antes mencionadas se cargan con Rb^{+} bajo la influencia de la Na^{+}/K^{+} ATPasa. Después, una parte de las células de ovarios se incuba como patrón comparativo en ausencia de un inhibidor, mientras que otra parte de las células de ovarios se incuba en presencia de la respectiva sustancia de ensayo de la fórmula I con actividad inhibidora. A continuación, las células de ovarios se despolarizan mediante el aumento de la concentración extracelular de iones potasio, con lo que se abren los canales del potasio K_{v} 1.5 de las células de ovarios. En ausencia de un inhibidor, los iones Rb^{+} fluyen a través de los canales del potasio K_{v} 1.5 al líquido que les rodea. En presencia de una sustancia de ensayo de la fórmula I con actividad inhibidora, los iones Rb^{+} permanecen incluidos, por el contrario, en el interior de las células de ovarios. La magnitud del efecto bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.5 de las sustancias de ensayo de la fórmula I se determina midiendo la concentración de iones Rb^{+} en el líquido que les rodea mediante espectroscopía de absorción atómica frente a un patrón comparativo.

Células de ovarios del hámster chino (véase antes) se cultivaron en un medio nutricio para células CHO con contenido en RbCl, en sí conocido, y se añadieron a los pocillos de una placa de 96 pocillos ("96 well plate"). Se dejó que las células de ovarios se desarrollaran durante una noche con el fin de obtener monocapas de las células de ovarios. Después, primeramente se separó por pipeteado el medio nutricio y cada pocillo se lavó, en cada caso tres veces, con 100 \mul de un tampón de preincubación de una baja concentración de iones potasio (todos los valores en mM: KCl 5, NaCl 140, CaCl_{2} 2, MgSO_{4} 1, tampón HEPES 10, glucosa 5). A continuación, se añadieron a cada pocillo 50 \mul de una solución de la respectiva sustancia de ensayo (solución de origen en DMSO, dilución con tampón de preincubación, concentración final en la tanda de ensayo de 10 \muM) o del disolvente (como controles negativos) y se incubó en cada caso durante 10 min a la temperatura ambiente. A continuación, a cada pocillo se añadieron en cada caso 50 \mul de un tampón de estimulación con una concentración incrementada de iones potasio (KCl 145 mM, NaCl 0 mM, por lo demás como el tampón de preincubación), y luego las muestras se incubaron durante 10 min a la temperatura ambiente. En cada caso 80 \mul del líquido que rodea a las células de ovarios procedente de cada pocillo se transfirieron entonces, en cada caso separados entre si, a los pocillos de una placa de análisis, y en los líquidos se determinó la concentración de iones Rb^{+} mediante espectroscopia de absorción atómica. Las sustancias de ensayo se sometieron a ensayo en cada caso por duplicado. Se definió el tramo de señal que representaba el componente K_{v} 1.5 de la corriente de Rb^{+}, utilizando como control positivo el bloqueador del canal del potasio 4-AP en sí conocido en una concentración (100 X CI_{50} para el canal K_{v} 1.5). Con ello, se pudo determinar que proporción de la corriente de Rb^{+} era dependiente de la influencia de 4-AP y, por lo tanto, se debe asociar al canal K_{v} 1.5. En el caso de las sustancias que conducían, en la concentración utilizada de 10 \muM, a una reducción de la corriente de Rb^{+} de al menos el 50%, se llevaron a cabo ensayos adicionales con concentraciones menores de la sustancia de ensayo, con el fin de poder determinar la concentración eficaz semimáxima. Como magnitud característica se indicó en cada caso la concentración de la inhibición semimáxima de la sustancia de ensayo de la fórmula I (CI_{50}).

En este modelo de ensayo, las sustancias de ensayo de la fórmula I recogidas en la siguiente Tabla 1 mostraban los valores CI_{50} indicados a continuación;

TABLA 1 Efecto bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.5 de las sustancias de ensayo in vitro

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2. Investigación in vitro del efecto bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.3 de las sustancias

El efecto bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.3 de las sustancias se detecta en un modelo de ensayo en sí conocido (por ejemplo de la firma Genion, Hamburg) o análogamente a este modelo de ensayo (véase J. Plàsek y K. Sigler, J. Photochem. Photobiol. 33 (1996) 101-124). En este modelo de ensayo se emplean células de ovarios del hámster chino (= CHO) en sí conocidas que son transfectadas de modo estable con el canal del potasio K_{v} 1.3. El bloqueo de la actividad del canal del potasio K_{v} 1.3 propia de las células en las células transfectadas va acompañado de un desplazamiento positivo del potencial de la membrana de aproximadamente -40 mV hasta -30 mV, mientras que en las células CHO de tipo salvaje investigadas paralelamente no se desencadena ningún desplazamiento digno de mención del potencial de la membrana. Por consiguiente, una variación del potencial de la membrana está relacionada con la disminución de la actividad del canal del potasio K_{v} 1.3. Mediante el bloqueo de los canales del potasio K_{v} 1.3, por ejemplo con sustancias de la fórmula I, y la variación del potencial de la membrana que resulta de ello se produce una acumulación de un colorante de fluorescencia sensible al potencial de la membrana en compartimientos intracelulares de las células de ovarios y, en última instancia, una fluorescencia creciente. La variación del potencial de la membrana de las células de ovarios se mide por lo tanto indirectamente a través del aumento de la fluorescencia de los colorantes sensibles al potencial de la membrana.

La transfección de las células con el plásmido K_{v} 1.3 se realizó de manera en sí conocida con un reactivo de transfección adquirible en el comercio (DMRIE-C de la firma Gibco BRL, Alemania). La transfección con éxito se verificó mediante inmunofluorescencia, así como mediante investigaciones de "pinzamiento zonal de la membrana" de la corriente de iones potasio. Las mediciones de fluorescencia se llevaron a cabo en un lector de fluorescencia Tecan Safir de la firma Tecan, Alemania. Como magnitud característica se determinó en cada caso el aumento de la intensidad de fluorescencia que fue provocado por el bloqueo de los canales del potasio K_{v} 1.3 en las células de ovarios con las sustancias de la fórmula I en una concentración de 10 \muM. El aumento de la intensidad de fluorescencia se indicó en cada caso en porcentaje (%) con respecto a un aumento de la intensidad de fluorescencia provocado por la sustancia de referencia margatoxina. Margatoxina es conocida como un bloqueador selectivo del canal del potasio K_{v} 1.3 (véase, por ejemplo, M. García-Calvo et al., J. Biol. Chem. 268 (1993) 18866-18874).

En este modelo de ensayo, las sustancias de ensayo de la fórmula I recogidas en la siguiente Tabla 2 mostraban los valores en % indicados seguidamente:

TABLA 2 Efecto bloqueante del canal del potasio K_{v} 1.3 de las sustancias de ensayo in vitro

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3. Investigación de la actividad funcional de las sustancias en el ventrículo del corazón de rata in vitro

La actividad antiarrítmica funcional de las sustancias se detecta en el modelo de ensayo indicado seguidamente. En este modelo de ensayo se determina en qué medida las sustancias de la fórmula I, que actúan de forma bloqueante de K_{v} 1.5, conducen a una prolongación del tiempo refractario funcional en el ventrículo izquierdo del corazón de la rata. El tiempo refractario es el intervalo de tiempo menor posible entre la excitación base y el estímulo adicional en el que puede desencadenarse una contracción renovada. La magnitud de la prolongación del tiempo refractario funcional es una medida de la actividad antiarrítmica de las sustancias de acuerdo con la invención. El tiempo refractario funcional se determina examinando en el preparado excitado eléctricamente en qué intervalo cronológico con respecto a la contracción que precede puede desencadenarse una nueva contracción mediante excitaciones eléctricas adicionales.

Se extrajeron los corazones de ratas recién sacrificadas (Sprague-Dawley, Charles-River, Alemania). Se aislaron los ventrículos izquierdos del corazón y se fijaron a registradores de fuerza en un baño de órganos atemperado (30ºC) y gasificado (O_{2} 95%, CO_{2} 5%) que estaba lleno de una solución modificada de Tyrode (todos los valores en mM: NaCl 137; KCl 2,7; CaCl_{2} 1,8; MgCl_{2} 0,8; NaHCO_{3} 11,9; NaH_{2}PO_{4} 0,6; glucosa 5). Con el fin de desencadenar contracciones regulares, los preparados fueron excitados eléctricamente (impulsos rectangulares, intensidad del impulso 3,5 x excitación umbral, anchura del impulso 1,5 ms, frecuencia 1 Hz). Primeramente, se determinó el valor de partida del tiempo refractario funcional aplicando adicionalmente a la excitación base impulsos extra, acortándose el intervalo cronológico con respecto a la estimulación base que precede hasta que ya no se podía desencadenar una contracción adicional. A continuación, se realizó la adición acumulativa de concentraciones crecientes (0,1-10 \muM) de las sustancias de la fórmula I a intervalos de en cada caso 20 min, determinándose de nuevo el tiempo refractario en cada caso 18 min después de efectuada la adición. Antes de la medición, se prepararon soluciones originales de las sustancias de ensayo (3,2 y 0,32 mM en DMSO al 100%). Con el fin de alcanzar las concentraciones finales deseadas de las sustancias (0,1-10 ìM) en el baño de órganos (volumen 100 ml), se añadieron entonces volúmenes correspondientes de estas soluciones de origen en el baño de órganos.

Como magnitud característica se indicó en cada caso la prolongación del tiempo refractario funcional (período refractario funcional, PRF) en el ventrículo izquierdo del corazón de rata en milisegundos, el cual se observó después de la adición de 10 \muM de la respectiva sustancia de la fórmula I a los preparados del ventrículo del corazón.

En este modelo de ensayo, las sustancias de ensayo de la fórmula I recogidas en la siguiente Tabla 3 mostraban las prolongaciones del tiempo refractario indicadas seguidamente, representando valores mayores una actividad antiarrítmica más intensa:

TABLA 3 Efecto prolongador de PRF de las sustancias de ensayo (10 \muM) en el ventrículo izquierdo del corazón de rata in vitro

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4. Investigación de la actividad funcional de las sustancias en el corazón del cobaya in vivo

En el modelo de ensayo indicado seguidamente se demuestra que las sustancias de acuerdo con la invención presentan en todo caso escasos efectos proarrítmicos indeseados sobre la formación renovada de la excitación en el ventrículo del corazón. Para ello, se investiga in vivo la influencia de los compuestos de la fórmula I sobre el tiempo refractario efectivo (período refractario efectivo, PRE) y otras magnitudes de influencia del corazón de cobaya. En este modelo de ensayo, bloqueadores del canal del potasio no selectivos y no de acuerdo con la invención, que también bloquean canales de HERG y/o K_{v}LQT1, conducen a una prolongación indeseada del PRE, así como del tiempo QT en el electrocardiograma (= ECG). El tiempo QT es asimismo una medida de la retroformación de excitaciones en el corazón. Prolongaciones del PRE condicionadas por la sustancia y del tiempo QT se indican ambas en cada caso independientes como indicaciones del riesgo de la aparición de arritmias de Torsade-de-Pointes indeseadas. Además, a partir del ECG se determinó también en cada caso el intervalo QRS como medida de la velocidad de expansión de la excitación ventricular. También, una prolongación del intervalo QRS provocada por una sustancia de ensayo se liga a un riesgo incrementado de efectos concomitantes proarrítmicos indeseados. Por lo tanto, en este modelo de ensayo, la carencia de una prolongación del PRE y del tiempo QT significa un riesgo menor, por el contrario la aparición de una prolongación relevante del PRE y QT significa un riesgo incrementado de efectos proarrítmicos indeseados. También la ausencia de una prolongación condicionada por la sustancia del intervalo QRS por parte de las sustancias de la fórmula I investigadas designa un escaso riesgo de efectos concomitantes proarrítmicos indeseados, ya que una prolongación ausente del QRS apunta a una extensión de la excitación no perturbada en el ventrículo del corazón. Inversamente, una prolongación QRS, que típicamente es desencadenada por antiarrítmicos de la clase I, indica una ralentización de la velocidad de conducción y puede favorecer la aparición de taquicardias ventriculares hasta el aleteo del ventrículo del corazón.

Cobayas machos (Dunkin-Hartley de la firma Charles River) se narcotizaron (cetamina 50 mg/kg, xilazina 10 mg/kg) y en cada caso se les colocó a través de la vena yugular un acceso venoso para la aplicación de compuestos de la fórmula I o de un vehículo. A través de la otra vena yugular se les introdujo a los cobayas un catéter de estimulación bipolar en el ventrículo derecho (frecuencia de estimulación 5 Hz). La tensión sanguínea arterial se midió a través de un catéter que se encontraba en la arteria carótida, el cual estaba conectado a un sensor de presión Statham. El ECG se derivó a través de electrodos de aguja. Los datos de medición se digitalizaron a través de un transformador A/D, se calcularon en un ordenador con un software adecuado (Ponemah Physiology Platform de la firma Gould, EE.UU.) y se imprimieron paralelamente en una impresora de varios canales. Después de un período de equilibrio de 45 min se aplicó a los cobayas, por vía intravenosa (= i.v) y a intervalos de 12 min, dosificaciones crecientes de los compuestos de la fórmula I o del vehículo. Antes de la primera aplicación y en cada caso un min después de la aplicación se midieron dosificaciones crecientes (0,1- máx. 30 \mumol/kg) de las sustancias de la fórmula I se midió el tiempo refractario efectivo. Para ello, después de en cada caso cinco excitaciones de estimulación normales se aplicó un impulso adicional y se aumentó su intervalo cronológico frente al impulso que le antecede hasta que se producía el desencadenamiento de una acción del corazón. El intervalo de tiempo observado se corresponde al PRE del miocardio ventricular.

Con el fin de determinar posibles efectos de las sustancias de ensayo sobre la presión sanguínea, en este mismo modelo de ensayo se determinó, después de cada adición de la sustancia, la presión sanguínea sistólica y la diastólica y se compararon con el nivel de presión sanguínea anterior. Los parámetros se registraron automáticamente 1 y 8 min después de cada administración de la sustancia. En la Tabla 4 se representan, además, las variaciones de la presión sanguínea sistólica por parte de los compuestos de la fórmula I indicados seguidamente (menos los efectos condicionados por el vehículo). Ninguno de los compuestos indicados condujo a un aumento relevante de la presión sanguínea.

En este modelo de ensayo, las sustancias de ensayo de la fórmula I, recogidas en la Tabla 4 que figura a continuación, mostraron los efectos indicados seguidamente. Únicamente, se recogieron efectos estadísticamente significativos, utilizándose un ensayo de T con un límite de significancia de P<0,05 para el examen estadístico. En la Tabla 4 indicada seguidamente, el dato "n.s" (= "no estadísticamente significativo") significa que la sustancia del ejemplo correspondiente no ejerce ninguna influencia estadísticamente significativa sobre la magnitud de medición indicada.

TABLA 4 Efecto de las sustancias de ensayo (1 min después de la aplicación de 10 \mumol/kg i.v.) sobre los intervalos PRE, QT y QRS en el ventrículo del corazón del cobaya y variaciones medidas simultáneamente de la presión sanguínea sistólica in vivo (n.s. = no estadísticamente significativo, los valores negativos significan un acortamiento o reducción)

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5. Investigación de la actividad funcional de las sustancias en el corazón del gato narcotizado in vivo

En el modelo de ensayo indicado seguidamente se demuestra que las sustancias de acuerdo con la invención presentan un acusado efecto atrial-selectivo en el corazón. Después de la administración de las sustancias de acuerdo con la invención se observa un fuerte aumento del umbral de fibrilación atrial - es decir, la intensidad de corriente hasta que se manifiesta una fibrilación ventricular -. Al mismo tiempo, se influye sólo mínimamente sobre el umbral de fibrilación ventricular.

Gatos vivos fueron narcotizados con Chloralose-uretano (50/300 mg/kg i.v.) y se les hizo respirar con aire del recinto. Después, tras la tracotomía se les cosieron electrodos de excitación en la aurícula derecha y en el ventrículo. La determinación del umbral de fibrilación atrial y ventricular se realizó de manera en sí conocida mediante la aplicación de impulsos rectangulares de intensidad de corriente creciente hasta la aparición de una fibrilación de la aurícula (para la realización, véase en particular: Br. J. Pharmac. 17 (1961) 167; Hdb. exp. Pharmacol. XVI/3 (1975) 131; Pharmacol. Res. 25 Supl. 2 (1992) 156). Las sustancias de ensayo de la fórmula I se disolvieron en propilenglicol (al 80%) y se aplicaron por vía intravenosa en dosificaciones crecientes (5-30 \mumol/kg). Los umbrales de fibrilación atrial y ventricular se determinaron luego, de manera en si conocida, a intervalos de 5 min tras la adición de la dosificación. El aumento del respectivo umbral de fibrilación por parte de las sustancias investigadas se expresó en porcentaje del valor antes de la adición de la sustancia, es decir una duplicación del umbral de fibrilación corresponde a un aumento de entorno del 100%

En este modelo de ensayo, las sustancias de ensayo de la fórmula I recogidas en la Tabla 5 indicada seguidamente mostraron los efectos indicados seguidamente.

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TABLA 5 Aumento del umbral de fibrilación atrial (UFA) y ventricular (UFV) en gatos narcotizados in vivo (dosis 30 \mumol/kg i.v.)

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La compatibilidad particularmente buena de los compuestos de acuerdo con la invención puede también demostrarse en otros modelos de ensayo farmacológicos. Así, por ejemplo, en un ensayo in vitro en preparados del músculo del corazón de cobayas se puede demostrar que los compuestos de la fórmula I presentan en todo caso escasos efectos concomitantes antiarrítmicos de la clase I. Además, en un modelo in vitro en el corazón de rata y en otro modelo in vitro en el corazón de cobaya se puede demostrar que los compuestos de la fórmula I provocan en todo caso escasos efectos inótropos negativos.

Los compuestos de la fórmula I pueden administrarse en preparados farmacéuticos habituales. En un caso particular, pueden estar indicadas formas de dosificación especiales. Las dosis a utilizar pueden ser diferentes individualmente y variar por naturaleza en función del estado a tratar y de la sustancia utilizada. En general, para la aplicación al hombre y a mamíferos superiores son adecuadas, sin embargo, formas medicamentosas con un contenido en sustancia activa de 0,2 a 500 mg, en particular 10 a 200 mg de sustancia activa por dosis individual. Los compuestos pueden estar contenidos, de acuerdo con la invención, junto con coadyuvantes y/o sustancias de soporte farmacéuticos habituales en preparados farmacéuticos sólidos o líquidos. Como ejemplos de preparados sólidos se pueden mencionar preparados aplicables por vía oral tales como comprimidos, grageas, cápsulas, polvos o granulados, o también supositorios. Estos preparados pueden contener sustancias de soporte inorgánicas y/u orgánicas farmacéuticamente habituales, tales como, por ejemplo, talco, lactosa o almidón, junto a coadyuvantes farmacéuticos habituales, por ejemplo agentes deslizantes o agentes disgregantes de comprimidos. Preparados líquidos tales como suspensiones o emulsiones de las sustancias activas pueden contener los diluyentes habituales tales como agua, aceites y/o agentes de suspensión tales como polietilenglicoles y similares. También pueden añadirse adicionalmente otros coadyuvantes tales como, por ejemplo, agentes conservantes, correctores del sabor y similares.

Las sustancias activas pueden mezclarse y formularse con los coadyuvantes y/o sustancias de soporte farmacéuticos de manera en si conocida. Para la preparación de formas medicamentosas sólidas, las sustancias activas pueden mezclarse de manera habitual con los coadyuvantes y/o sustancias de soporte y granularse en húmedo o en seco. El granulado o polvo puede envasarse directamente en cápsulas o puede comprimirse de manera habitual para formar núcleos de comprimidos. Estos pueden gragearse en caso deseado de manera conocida.

Los ejemplos recogidos seguidamente han de explicar más detalladamente la invención, pero sin limitar su alcance.

Ejemplo 1 2-(4-{[(4-etilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida

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A): 25 g de 4-hidroxifenilacetato de metilo, 14,5 ml de 3-metilbut-2-enal y 18,3 g de ácido fenilbórico se añadieron conjuntamente, bajo una atmósfera de nitrógeno, en 1 l de tolueno seco y se calentaron a ebullición durante 7 h bajo enfriamiento a reflujo. A continuación, a esta carga se añadieron a la temperatura ambiente (= TA) 60 ml de ácido acético glacial y se dejó calentar de nuevo a ebullición durante 7 h bajo enfriamiento a reflujo. Se dejó enfriar hasta TA, el disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida y el residuo remanente se vertió en 300 ml de una mezcla 1:1 (v/v) a base de éster etílico de ácido acético (= EE) y agua. El valor del pH se ajustó a 5 mediante la adición de bicarbonato de sodio sólido, la fase orgánica se separó y ésta se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. La cromatografía del residuo remanente en gel de sílice (fase móvil: éter de petróleo/EE 10:1 v/v) proporcionó 16 g de (2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)-acetato de metilo en forma de un aceite amarillo pálido. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 1.15 (s, 3 H) 1.27 (t, 3 H) 1.43 (s, 3 H) 1.60 - 1.85 (3 H) 1.97 (m, 1 H) 2.66 - 2.82 (4 H) 3.20 - 3.29 (3 H) 3.54 (dd, 1 H) 4.23 (dd, 1 H) 5.06 (m, 1 H) 5.28 (d, 1 H) 5.59 (d, 1 H) 6.55 (d, 1 H) 6.66 (d, 1 H) 6.97 (dd, 1 H) 7.03 - 7.18 (4 H) 7.35 (m, 2 H) 7.87 (m, 2 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 15.1 (q) 18.5 (q) 20.1 (t) 26.6 (q) 28.8 (t) 29.2 (t) 30.2 (t) 42.9 (t) 47.7 (d) 55.1 (d) 74.8 (d) 78.7 (s) 117.9 (d) 121.3 (s) 126.3 (d) 127.2 (s) 127.4 (d, 3 C) 128.2 (d) 128.8 (d) 128.9 (d, 2 C) 129.3 (d) 130.3 (d) 136.5 (s) 137.6 (s) 137.7 (s) 150.2 (s) 152.3(s) 170.3 (s).

B): 46 g del (2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetato de metilo precedentemente obtenido (cantidad total procedente de varias tandas análogas), 150 ml de etilenglicol y 400 ml una lejía de sosa acuosa al 20% se calentaron a ebullición durante 3 h en 440 ml de tetrahidrofurano (= THF) bajo enfriamiento a reflujo. A continuación, la mezcla resultante se dejó enfriar hasta TA, el disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida y al residuo remanente se añadieron 200 ml de terc.-butiléter y 300 ml de agua. Se agitó durante 10 min y luego la fase acuosa se acidificó mediante la adición de una solución acuosa al 20% de ácido clorhídrico hasta pH 6. La fase acuosa se extrajo dos veces, en cada caso con 300 ml de diclorometano y las fases orgánicas reunidas se secaron sobre 20 g de sulfato de sodio. El disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida, el residuo remanente se mezcló con éter de petróleo y se separó por filtración del disolvente una primera fracción de cristales resultante. El filtrado se concentró de nuevo a presión reducida, resultando de nuevo una fracción de cristales. Las fracciones de cristales reunidas se secaron y se obtuvieron 33,8 g de ácido 2,2-(dimetil-2H-cromen-5-il)acético que se empleó sin purificación ulterior para la siguiente reacción. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 1.41 (s, 6 H) 3.52 (s, 2 H) 5.59 (d, 1 H) 6.27 (d, 1 H) 6.72 (d, 1 H) 6.88 (d, 1 H) 6.99 (dd, 1 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 28.1 (q, 2 C) 40.2 (t) 76.3 (s) 116.5 (d) 121.4 (s) 122.1 (d) 125.3 (s) 127.2 (d) 129.9 (d) 131.1 (d) 152.3 (s) 177.8 (s).

C): 9,6 g en 85 ml de 1,1-carbonildiimidazol (= CDI) disueltos en THF se añadieron lentamente a una solución de 11,7 g del ácido 2,2-(dimetil-2H-cromen-6-il)acético precedentemente obtenido en 100 ml de THF y se agitó durante 30 min a TA. A esta carga previa se añadieron lentamente gota a gota 8,8 ml de 1,2,3,4-tetrahidro-1-naftilamina, disueltos en 30 ml de THF, la mezcla resultante se agitó durante 1 h y se dejó reposar durante una noche a TA. El disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida, y el residuo remanente se agitó con una mezcla a base de dietiléter e isopropopanol (100:1 v/v) y se cristalizó. Los cristales resultantes se filtraron con succión y se secaron a 65ºC y 20 bar. La cromatografía del líquido de lavado de dietiléter/isopropanol en gel de sílice proporcionó un producto intermedio adicional que se reunió con la cantidad principal y se secó. Se obtuvieron 17,5 g de 2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida en forma de un sólido incoloro, que se empleó sin purificación ulterior para la siguiente reacción. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 1.41 (s, 6 H) 1.60 - 1.85 (3 H) 1.98 - 2.08 (1 H) 2.65 - 2.80 (2 H) 3.45 - 3.55 (2 H) 5.12 - 5.20 (1 H) 5.60 (d, 1 H) 5.66 (d, 1 H) 6.26 (d, 1 H) 6.71 (d, 1 H) 6.86 (d, 1 H) 6.96 (dd, 1 H) 7.02 - 7.07 (1 H) 7.08 - 7.17 (3 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 20.2 (t) 28.0 (q, 2 C) 29.2 (t) 30.3 (t) 43.2 (t) 47.7 (d) 76.3 (s) 116.8 (d) 121.7 (s) 122.0 (d) 126.2 (d) 126.9 (s) 127.2 (d) 128.2 (d) 129.1 (d) 129.8 (d) 131.3 (d) 136.7 (s) 137.5 (s) 152.2 (s) 170.7 (s).

D): 950 ml de una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato de sodio se añadieron a una solución de 11 g de la 2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida precedentemente obtenida en 600 ml de diclorometano. A esta carga previa se añadieron en total 15 g de ácido m-cloroperoxibenzoico (= MCPBA) en tres porciones de en cada caso 5 g a intervalos de en cada caso 5 min y se agitó durante 18 h a TA. La fase orgánica se separó y se concentró ampliamente por evaporación en el evaporador rotatorio a 65ºC y 20 bar. Se obtuvo 2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida en forma de un aceite bruto que se empleó sin purificación ulterior para la siguiente reacción. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 1.23 (s, 6 H) 1.56 (s, 6 H) 1.63 - 1.85 (6 H) 1.97 - 2.10 (2 H) 2.65 - 2.82 (4 H) 3.43 - 3.56 (6 H) 3.84 - 3.89 (2 H) 5.12 - 5.22 (2 H) 5.62 -5-72 (2 H) 6.75 (d, 1 H) 6.76 (d, 1 H) 7.02 - 7.19 (10 H) 7.23 -7.27 (2 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 20.1 (t) 22.6 (q) 25.7 (q) 29.2 (t) 30.2 (t) 43.1 (t) 47.7 (d) 50.8 (d) 62.7 (d) 73.2 (s) 118.6 (d) 120.5 (s) 126.2 (d) 126.3 (d) 127.2 (d) 127.3 (d) 127.5 (s) 128.2 (d) 128.3 (d) 129.2 (d) 130.5 (d) 131.1 (d) 131.2 (d) 136.5 (s) 137.5 (s) 137.6 (s) 151.8 (s) 170.4 (s).

E): A una solución de 16 g de la 2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida precedentemente obtenida 88 ml de etanol se añadieron en 88 ml de una solución acuosa de amoníaco al 25%, y se agitó durante 18 h a TA. A continuación, se añadieron 200 ml de diclorometano y 50 ml de metanol y se dejó agitar durante otros 15 min. Después, se añadieron 200 ml de agua y se dejó agitar de nuevo durante 15 min. Se separó la fase orgánica y se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. El residuo remanente se agitó con 30 ml de EE, se filtró y se secó en el evaporador rotatorio a 70ºC y 20 bar. Se obtuvieron 3,1 g de 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida en forma de un sólido gris que se empleó sin purificación ulterior para la siguiente reacción. ^{1}H-RMN (400 MHz, DMSO-D_{6}) \delta [ppm]: 1.08 (s, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.60 -1.95 (12 H) 2.63 -2.83 (4 H) 3.17 (d, 2 H) 3.32 - 3.40 (4 H) 3.49 (d, 2 H) 4.90 - 4.98 (2 H) 5.32 -5.38 (2 H) 6.62 (d, 2 H) 7.01 (dd, 2 H) 7.05 - 7.18 (8 H) 7.47 (d, 2 H) 8.32 -8.35 (2 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, DMSO-D_{6}) \delta [ppm]: 18.6 (q) 19.9 (t) 27.0 (q) 28.7 (t) 29.8 (t) 41.7 (t) 46.2 (d) 50.8 (d) 76.6 (d) 77.8 (s) 115.6 (d) 125.5 (s) 125.6 (d) 125.7 (d) 126.5 (d) 127.9 (s) 128.0 (d) 128.1 (d) 128.3 (d) 128.4 (d) 128.6 (d) 136.9 (s) 137.5 (s) 150.5 (s) 169.8 (s).

F): 1,67 g de cloruro de 4-etilbencenosulfonilo se añadieron gota a gota a una solución de 3,75 g de la 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida precedentemente obtenida y 8,4 ml de trietilamina en 160 ml de diclorometano. Se agregaron, además, 5 ml de dimetilformamida (= DMF) y la mezcla resultante se dejó agitar durante 18 h a TA. A continuación, se añadieron 100 ml de agua y se agitó de nuevo durante 5 min. La fase orgánica se separó y el disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. El residuo remanente se cromatografió en gel de sílice (fase móvil: EE/ciclohexano/metanol 110:140:2 v/v/v) y las fases de producto se reunieron y concentraron. El residuo se agitó con éter de petróleo/dietiléter 10:1 v/v. El cristalizado resultante se filtró con succión y se secó en el evaporador rotatorio a 40ºC y 25 bar. Se obtuvieron 2,3 g del compuesto del título en forma de un cristalizado incoloro. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: m 1.14 (s, 3 H) 1.16 (s, 3 H) 1.26 (t, 3 H) 1.28 (t, 3 H) 1.44 (s, 6 H) 1.60 - 1.85 (8 H) 1.95 - 2.08 (2 H) 2.66 - 2.83 (8 H) 3.18 - 3.33 (6 H) 3.53 -3-63 (2 H) 4.18 - 4.28 (2 H) 5.02 -5.13 (2 H) 5.26 -5.37 (2 H) 5.52 -5.60 (2 H) 6.54 (d, 2 H) 6.66 - 6.71 (2 H) 6.95 - 7.19 (m, 10 H) 7.34 - 7.39 (4 H) 7.85 - 7.92 (4 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 15.1 (q) 18.4 (q) 20.1 (t) 26.6 (q) 28.8 (t) 29.2 (t) 30.2 (t) 42.9 (t) 47.7 (d) 47.8 (d) 55.1 (d) 74.9 (d) 75.0 (d) 78.6 (s) 78.7 (s) 118.0 (d) 121.0 (s) 126.2 (d) 126.3 (d) 127.2 (s) 127.4 (d) 128.2 (d) 128.8 (d) 128.9 (d) 129.2 (d) 129.3 (d) 130.3 (d) 136.5 (s) 137.6 (s) 150.3 (s) 152.3 (s) 170.3 (s).

Ejemplo 2 2-((3S,4R)-4-{[(4-etilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-[(1R)-1,2,3,4-tetra- hidronaftalen-1-il]acetamida

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A): 24,5 g de CDI, 30 g de ácido 2,2-(dimetil-2H-cromen-6-il)acético (preparación, véase el Ejemplo 1B)) y 22,8 ml de (1R)-1,2,3,4-tetrahidro-1-naftil-amina se hicieron reaccionar de manera correspondiente a la indicada precedentemente en el Ejemplo 1C). Se obtuvieron 49 g de 2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)-N-[(1R)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida en forma de un cristalizado incoloro que se empleó sin purificación ulterior para la siguiente reacción. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 1.41 (s, 6 H) 1.60 - 1.85 (3 H) 1.98 - 2.08 (1 H) 2.65 - 2.80 (2 H) 3.45 - 3.55 (2 H) 5.12 - 5.20 (1 H) 5.60 (d, 1 H) 5.66 (d, 1 H) 6.26 (d, 1 H) 6.71 (d, 1 H) 6.86 (d, 1 H) 6.96 (dd, 1 H) 7.02 - 7.07 (1 H) 7.08 - 7.17 (3 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 20.2 (t) 28.0 (q, 2 C) 29.2 (t) 30.3 (t) 43.2 (t) 47.7 (d) 76.3 (s) 116.8 (d) 121.7 (s) 122.0 (d) 126.2 (d) 126.9 (s) 127.2 (d) 128.2 (d) 129.1 (d) 129.8 (d) 131.3 (d) 136.7 (s) 137.5 (s) 152.2 (s) 170.7 (s).

B): A una solución de 44 g de 2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)-N-[(1R)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida precedentemente obtenida en 800 ml de diclorometano se añadieron 5 g de (S,S)-manganeso-(III)-saleno y 7 g de piridina-N-óxido. La carga previa, así obtenida, se enfrió hasta 0ºC y durante 45 min se agregó una mezcla a base de 660 ml de una solución acuosa de hipoclorito de sodio (Cl > 13%) y 88 ml de una solución acuosa al 9% de Na_{2}HPO_{4}. Se agitó durante otras 3 h a 0ºC y luego se separó la fase orgánica y se la agitó durante 1 h con 500 g de Celite® 503. El sólido se separó por filtración y se lavó con diclorometano hasta que el filtrado era incoloro. El filtrado se concentró por evaporación hasta sequedad a presión reducida. Se obtuvieron 40 g de 2-[(1aS,7bS)-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il]-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilaceta-mida en forma de un aceite bruto que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

C): 40 g de la 2-[(1aS,7bS)-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il]-N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida precedentemente obtenida y 250 ml de una solución acuosa al 25% de amoníaco se hicieron reaccionar de manera correspondiente al modo indicado precedentemente en el Ejemplo 1E). La cromatografía del producto bruto en gel de sílice (fase móvil: diclorometano/metanol/solución acuosa al 25% de amoníaco (75:50:2 v/v/v)) proporcionó 13,2 g de 2-[(3S,4R)-4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-[(1R)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il]acetamida en forma de aceite que se empleó sin purificación ulterior para la siguiente reacción, ^{1}H-RMN (400 MHz, DMSO-D_{6}) \delta [ppm]: 1.08 (s, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.60 -1.95 (12 H) 2.63 -2.83 (4 H) 3.17 (d, 2 H) 3.32 - 3.40 (4 H) 3.49 (d, 2 H) 4.90 - 4.98 (2 H) 5.32 -5.38 (2 H) 6.62 (d, 2 H) 7.01 (dd, 2 H) 7.05 - 7.18 (8 H) 7.47 (d, 2 H) 8.32 -8.35 (2 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, DMSO-D_{6}) \delta [ppm]: 18.6 (q) 19.9 (t) 27.0 (q) 28.7 (t) 29.8 (t) 41.7 (t) 46.2 (d) 50.8 (d) 76.6 (d) 77.8 (s) 115.6 (d) 125.5 (s) 125.6 (d) 125.7 (d) 126.5 (d) 127.9 (s) 128.0 (d) 128.1 (d) 128.3 (d) 128.4 (d) 128.6 (d) 136.9 (s) 137.5 (s) 150.5 (s) 169.8 (s).

D): 5,94 ml de cloruro de 4-etilbencenosulfonilo, 13,2 g de la 2-[(3S,4R)-4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-[(1R)-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-il]acetamida precedentemente obtenida, 88 ml de trietilamina y 4 ml de dimetilformamida se hicieron reaccionar de manera correspondiente a la manera indicada precedentemente en el Ejemplo 1F). Se obtuvieron 6,2 g del compuesto del título en forma de una espuma sólida amorfa. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 1.15 (s, 3 H) 1.26 (t, J=7.6 Hz, 3 H) 1.45 (s, 3 H) 1.60 - 1.85 (3 H) 2.01 (m, 1 H) 2.65 - 2.82 (4 H) 3.20 - 3.33 (3 H) 3.58 (dd, J=9.0, 3.0 Hz, 1 H) 4.23 (dd, J =9.0, 8.7 Hz, 1 H) 5.04 (m, 1 H) 5.16 (d, J=8.7 Hz, 1 H) 5.51 (d, J=8.5 Hz, 1 H) 6.54 (d, J=2.0 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.4 Hz, 1 H) 6.98 (dd, J=8.4, 2.0 Hz, 1 H) 6.95 - 7.19 (4 H) 7.37 (m, 2 H) 7.87 (m, 2 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 15.1 (q) 18.4 (q) 20.1 (t) 26.6 (q) 28.9 (t) 29.2 (t) 30.2 (t) 43.0 (t) 47.8 (d) 55.1 (d) 75.0 (d) 78.7 (s) 118.0 (d) 121.1 (s) 126.2 (d) 127.3 (s) 127.4 (d, 3 C) 128.2 (d) 128.7 (d) 129.0 (d, 2 C) 129.3 (d) 130.4 (d) 136.5 (s) 137.6 (s) 137.7 (s) 150.4 (s) 152.3 (s) 170.3 (s); -8,3º (c=0.1, MeOH).

Ejemplo 3 N-bencil-2-{4-[[(4-etilfenil)sulfonil](neopentil)amino]-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il}acetamida

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A): 16,2 g de CDI disueltos en 300 ml de THF se añadieron lentamente a una solución de 19,7 g de ácido (2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acético (preparación, véase el Ejemplo 1B)) en 300 ml de THF y se agitó durante 10 min a TA. A esta carga previa se añadieron lentamente gota a gota 10,9 ml de bencilamina, y la mezcla resultante se agitó durante 1 h. El disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida, y el residuo remanente se extrajo una vez con 500 ml de una mezcla a base de EE y agua (2:3 v/v). La fase orgánica se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida y el residuo remanente se cromatografió en gel de sílice (fase móvil: EE/ciclohexano 1:1 v/v). El secado de las fracciones de producto en el evaporador rotatorio a 70ºC y 20 bar proporcionó 28 g de N-bencil-2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetamida en forma de aceite que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

B): 980 ml de una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato de sodio se añadieron a una solución de 28 g de la N-bencil-2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetamida precedentemente obtenida en 480 ml de diclorometano. A esta carga previa se añadieron en total 44,1 g de MCPBA en tres porciones de en cada caso 14,7 g a un intervalo de en cada caso 5 min, y se agitó durante 18 h a TA. La fase orgánica se separó, se extrajo una vez con sendos 200 ml de una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato de sodio, y la fase orgánica se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. Se obtuvieron 35 g de N-bencil-2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il)acetamida en forma de un aceite bruto que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

C): A una solución de 35 g de la N-bencil-2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il)acetamida precedentemente obtenida en 250 ml de etanol se añadieron 250 ml de una solución acuosa al 25% de amoníaco, y se agitó durante 18 h a TA. La mezcla de reacción se vertió en 500 ml de agua y se extrajo con 250 ml de diclorometano. La fase orgánica se separó, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. El residuo remanente se mezcló con 200 ml de dietiléter. El cristalizado resultante después de algún tiempo se filtró con succión y se secó en el evaporador rotario a 60ºC y 20 bar. Se obtuvieron 11 g de 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-bencilacetamida en forma de un sólido gris que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

D): A una solución de 11 g de la 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-bencilacetamida precedentemente obtenida en 200 ml de metanol se añadieron 4 ml de trimetilacetaldehído. Se agregaron 2,44 g de NaBH_{3}CN en varias porciones, y la solución resultante se agitó durante 2 h a 50ºC. Después del enfriamiento hasta TA, la mezcla de reacción se vertió en 200 ml de agua. La fase acuosa se extrajo una vez con 150 ml de EE, las fases orgánicas reunidas se secaron sobre sulfato de sodio y el disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. La cromatografía del residuo remanente en gel de sílice (fase móvil: EE/ciclohexano 1:1 v/v) y el secado de las fracciones de producto en el evaporador rotatorio proporcionaron 10,8 g de N-bencil-2-[3-hidroxi-2,2-dimetil-4-(neopentilamino)-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il]acetamida en forma de un aceite incoloro, ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 1.15 (s, 3 H) 1.25 (t, 3 H) 1.43 (s, 3 H) 2.70 (q, 2 H) 3.18 - 3.31 (3 H) 3.55 (dd, 1 H) 4.22 (dd, 1 H) 4.30 (d, 2 H) 5.51 (d, 1 H) 5.81 (t, 1 H) 6.56 (d, 1 H) 6.67 (d, 1 H) 6.96 (dd, 1 H) 7.15 (m, 2 H) 7.21 - 7.30 (3 H) 7.32 (m, 2 H) 7.84 (m, 2 H); ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 15.1 (q) 18.5 (q) 26.6 (q) 28.8 (t) 42.7 (t) 43.5 (t) 55.1 (d) 74.8 (d) 78.7 (s) 117.9 (d) 121.2 (s) 127.0 (s) 127.4 (d, 2 C) 127.5 (d, 3 C) 128.7 (d, 2 C) 128.9 (d, 3 C) 130.4 (d) 137.6 (s) 138.1 (s) 150.2 (s) 152.3 (s) 171.0 (s).

Ejemplo 4 N-bencil-2-{4-[[(4-etilfenil)sulfonil](neopentil)amino]-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il}acetamida

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4,1 ml de cloruro de 4-etilbencenosulfonilo se añadieron gota a gota a una solución de 10,8 g de la N-bencil-2-[3-hidroxi-2,2-dimetil-4-(neopentilamino)-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il]acetamida obtenida precedentemente en el Ejemplo 3 y 5 ml de trietilamina en 100 ml de diclorometano. El diclorometano se concentró ampliamente por evaporación de inmediato a presión reducida y, la mezcla de reacción resultante se agitó durante 90 min a 65ºC y 180 bar. Toda la tanda se vertió en 150 ml de agua y la fase acuosa se extrajo una vez con 200 ml de EE. El disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida, el residuo remanente se secó sobre sulfato de sodio y se cromatografió en gel de sílice (fase móvil: éter de petróleo/EE 3:1 v/v). El secado de las fracciones de producto en el vacío de la bomba de aceite proporcionó 3,6 g del compuesto del título (2 confórmeros) en forma de un aceite incoloro. ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 0.75 (s, 9H) 1.15 (s, 3 H) 1.26 (t, 3 H) 1.46 (s, 3 H) 2.36 (1H) 2.65 - 2.75 (2 H) 2.90 -3.40 (4H) 3.86 (d,d 1 H) 4.39 (d, 2H) 4.76 (d, 1 H) 5.50 (t, 1 H) 6.48 (1 H) 6.73 (d, 1 H) 7.03 (dd, 1 H) 7.15 -7.35 (7 H) 7.81 (m, 2 H) principal; ^{1}H-RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 0.86 (s, 9H) 1.19 (s, 3 H) 1.24 (t, 3 H) 1.51 (s, 3 H) 2.65 - 2.75 (2 H) 2.81 (d, 1H) 3.25 -3.60 (4H) 4.25 - 4.61 (4 H) 4.60 (d,d 1H) 5.87 (t, 1 H) 6.73 (d, 1 H) 6.96 (dd, 1 H) 7.15 - 7.35 (8 H) 7.66 (m, 2 H) secundario; ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 15.1 (q) 17.9 (q) 27.0 (q) 28.8 (q, 3C) 28.8 (t) 32.0 (s) 43.0 (t) 43.7 (t) 56.3 (t) 59.0 (d) 71.2 (d) 79.1 (s) 118.4 (d) 120.7 (s) 127.0 -130.4 (12C) 137.2 (s) 138.1 (s) 150.4 (s) 153.0 (s) 170.7 (s) principal; ^{13}C-RMN (101 MHz, CDCl_{3}) \delta [ppm]: 15.1 (q) 18.6 (q) 27.2 (q) 28.0 (q, 3C) 28.8 (t) 33.5 (s) 43.3 (t) 43.6 (t) 63.0 (t) 63.4 (d) 73.2 (d) 78.8 (s) 118.0 (d) 122.0 (s) 125.7 - 129.8 (12C) 137.3 (s) 138.3 (s) 150.2 (s) 151.8 (s) 171.3 (s) secundario.

Ejemplo 5 N-(4-clorobencil)-2-(3-hidroxi-2,2-dimetil-4-{[(3-metilfenil)sulfonil]amino}-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)acetamida

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A): 175,6 g de 4-hidroxifenilacetato de metilo y 128,9 g de ácido fenilbórico se añadieron conjuntamente en 3,5 ml de m-xileno. A esta mezcla se añadieron 88,9 g de 3-metilbut-2-enal y 130 ml de ácido acético glacial. Bajo una atmósfera de nitrógeno se calentó hasta 140ºC en un equipo Dean-Stark hasta la reacción de aproximadamente el 70% del fenol (aproximadamente 48-72 h). A continuación, se dejó enfriar la mezcla de reacción a TA, se filtró y el disolvente se concentró por evaporación a presión reducida. El residuo remanente se disolvió en una mezcla 1:1 a base de THF y una solución acuosa al 25% de amoníaco (v/v) y se agitó durante 2 h. El THF se separó ampliamente por evaporación a presión reducida y se añadió EE. La fase orgánica se separó, se lavó a continuación con NaOH 1 N acuoso y una solución acuosa saturada de sal común y, por último, se secó sobre sulfato de sodio. El disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida, y el residuo remanente se cromatografió en gel de sílice (fase móvil: n-hexano/EE 15:1 a 10:1 v/v). El secado de las fracciones de producto en el vacío de la bomba de aceite proporcionó 106 g (2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetato de metilo en forma de un aceite amarillo pálido que se empleó sin caracterización ulterior para la siguiente reacción.

B): 106 g del (2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetato de metilo precedentemente obtenido se disolvieron en 900 ml de THF. A esta carga previa se añadió una solución de 57,6 g de LiOH en 900 ml de agua y se agitó durante 16 h a TA. El THF se separó ampliamente por evaporación a presión reducida, y el residuo acuoso se acidificó mediante la adición de una solución acuosa de ácido clorhídrico 6 N. La fase acuosa se extrajo con EE y las fases orgánicas reunidas se lavaron sucesivamente con una solución acuosa saturada de sal común y con agua. La fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio y el disolvente se concentró ampliamente por evaporación en vacío. Se obtuvieron 97,6 g de ácido 2,2-(dimetil-2H-cromen-6-il)acético, que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

C): 14,0 g del ácido 2,2-(dimetil-2H-cromen-6-il)acético precedentemente obtenido y 13,54 g de EDCxHCl se disolvieron en diclorometano a TA. A esta carga previa se añadieron, con agitación y gota a gota, 10,0 g de 4-clorobencilamina y se continuó agitando durante 16 h a TA. A continuación, la mezcla de reacción se lavó sucesivamente con agua, solución acuosa de cloruro sódico 1 N y solución acuosa saturada de sal común, y la fase orgánica se secó sobre sulfato de sodio. La concentración por evaporación del disolvente a presión reducida y el secado del residuo remanente en el vacío de la bomba de aceite proporcionaron 21,92 g de la N-4-clorobencil-2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetamida bruta que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

D): 700 ml de una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato de sodio se añadieron a una solución 21,92 g de la N-4-clorobencil-2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetamida precedentemente obtenida en 600 ml de diclorometano. A esta carga previa se añadieron en total 31,6 g de MCPBA (al 72%) en porciones y se agitó durante 16 h a TA. La fase orgánica se separó, se lavó dos veces con una solución acuosa de hidrógeno-carbonato de sodio al 5%, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. El secado en el vacío de la bomba de aceite proporcionó N-(4-clorobencil)-2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il)acetamida en forma de un aceite bruto que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

E): La N-(4-clorobencil)-2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il)aceta-mida precedentemente obtenida se añadió inmediatamente a una mezcla de etanol y solución acuosa al 25% de amoníaco (6:5 v/v) en tal cantidad hasta que se obtuvo una solución 0,2 M del compuesto, y se agitó durante 16 h a 50ºC. A continuación, se dejó enfriar hasta TA y el disolvente se concentró ampliamente por evaporación a presión reducida. El residuo remanente se cromatografió en gel de sílice (fase móvil: gradiente diclorometano/metanol/solución acuosa al 25% de amoníaco 97,5:2:0,5 a 90:9,5:0,5 v/v/v). El secado de las fracciones del producto proporcionó 7,3 g de 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-4-clorobencilacetamida, que se empleó sin purificación ulterior para la siguiente reacción. No se observó el otro regioisómero 2-[3-amino-4-hidroxi-2,2-dimetilcromen-6-il]-N-4-clorobencil- acetamida.

F): En un pocillo de una placa de pocillos para la síntesis paralela automática se añadieron a una solución de 9 mg de la 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-4-clorobencilacetamida precedentemente obtenida en 0,5 ml de diclorometano, sucesivamente 15 mg de PS-metilpiperidina y una solución de 6,0 mg de cloruro de 3-metilbencenosulfonilo en 0,5 ml de diclorometano. Se sacudió durante 40 h a TA y, a continuación, se añadieron 20 mg de AMPS. Se sacudió durante otras 16 h a TA antes de separar la fase de reacción acuosa de la resina, y la resina se lavó dos veces, en cada caso con 1 ml de diclorometano. El disolvente de las fases orgánicas reunidas se separó por evaporación a presión reducida y se obtuvo el compuesto del título con una pureza del 95% (determinación por HPLC-MS), [M+H]^{+} 529.

Ejemplo 6 N-butil-2-{4-[[(2,5-dimetoxifenil)sulfonil](2-etilbutil)amino]-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il}ace- tamida

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A): 10,0 g de ácido 2,2-(dimetil-2H-cromen-6-il)acético (preparación, véase el Ejemplo 5B)), 9,67 g de EDCxHCl y 5,41 g de n-butilamina se hicieron reaccionar de manera correspondiente al modo indicado en el Ejemplo 5 C). Se obtuvieron 17,5 g de N-(n-butil)-2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetamida bruta que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

B): 700 ml de una solución acuosa saturada de hidrógeno-carbonato de sodio se hicieron reaccionar de manera correspondiente al modo indicado en el Ejemplo 5 D), con una solución de 17,5 g de la N-(n-butil)-2-(2,2-dimetil-2H-cromen-6-il)acetamida precedentemente obtenida en 600 ml de diclorometano y 31,6 g de MCPBA (al 72%). Se obtuvo la N-butil-2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]cromen-6-il)acetamida bruta, que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

C): La N-butil-2-(2,2-dimetil-1a,7b-dihidro-2H-oxireno[c]-cromen-6-il)acetamida precedentemente obtenida se añadió inmediatamente a una mezcla de etanol, y solución acuosa al 25% de amoníaco (6:5 v/v) en una cantidad tal que se obtuvo una solución 0,2 M del compuesto y se continuó tratando de manera correspondiente al modo indicado en el Ejemplo 5 E). Se obtuvieron 7,4 g de 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-(n-butil)acetamida, que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción. No se observó el otro regioisómero, 2-[3-amino-4-hidroxi-2,2-dimetilcromen-6-il]-N-(n-butil)acetamida.

D): 610 mg de la 2-(4-amino-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-(n-butil)acetamida precedentemente obtenida se disolvieron en 20 ml de THF y se añadieron 220 \mul de TMOF. A continuación, a esta carga previa se añadieron 197 mg de etilbutiraldehído, y la mezcla de reacción se sacudió durante 16 h a TA. Se retiró el disolvente a presión reducida, el residuo remanente se recogió con 20 ml de metanol, se añadieron 7,9 g de PS-BH_{4} y, la mezcla de reacción se sacudió durante otras 16 h a TA. Después, la mezcla de reacción se filtró y la resina de reacción se lavó con metanol. Los filtrados reunidos se concentraron ampliamente por evaporación a presión reducida, el residuo remanente se disolvió en 20 ml de diclorometano y se añadieron sucesivamente 0,4 equivalentes de un aldehído unido al polímero en sí conocido (PS-CHO) y 0,6 equivalentes de AMPS. Se sacudió de nuevo durante 16 h a TA, la fase líquida se separó por filtración de la resina de reacción y ésta se continuó lavando con THF. Las fases orgánicas líquidas reunidas se concentraron por evaporación a presión reducida y se obtuvieron 572 mg de 2-[4-(2-etilbutil-amino)-3-hidroxi-2,2-dimetilcromen-6-il]-N-(n-butil)acetamida pura en un 95% (determinación por HPLC-MS) que se empleó sin purificación o caracterización ulterior para la siguiente reacción.

E): En un pocillo de una placa de pocillos para la síntesis paralela automática se añadieron a una solución de 14,8 mg de la 2-[4-(2-etilbutil-amino)-3-hidroxi-2,2-dimetilcromen-6-il]-N-(n-butil)acetamida precedentemente obtenida en 0,6 ml de diclorometano, sucesivamente, 20 mg de resina de PS-metilpiperidina y una solución de 37,1 mg de cloruro de 3,5-dimetoxibencenosulfonilo en 0,4 ml de diclorometano. Se sacudió durante 168 h a TA, se separó por filtración de la resina y, a continuación, se añadieron al filtrado 120 mg de PS-AMPS. Se sacudió durante otras 16 h a TA antes de separar la fase de reacción líquida de la resina y la resina se lavó dos veces, en cada caso con 1 ml de diclorometano. El disolvente de las fases orgánicas reunidas se separó por evaporación a presión reducida y se obtuvo el compuesto del título en una pureza del 96% (determinación por HPLC-MS), [M+H]^{+} 591.

Según los procedimientos descritos en los ejemplos precedentemente indicados o según procedimientos análogos a ellos, se pueden preparar también los compuestos de la fórmula I indicados en la siguiente Tabla 6:

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TABLA 6 Compuestos adicionales de fórmula I

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Ejemplo I Cápsulas con contenido en 2-(4-{[(4-etilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)- N-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1-ilacetamida

Se prepararon cápsulas con la siguiente composición por cápsula:

2-(4-{[(4-etilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-

2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-

N-1,2,3,4-tetrahidronaft-1-ilacetamida: 20 mg

Almidón de maíz: 60 mg

Lactosa: 300 mg

EE: c.s.

La sustancia activa, el almidón de maíz y la lactosa se elaboraron para formar una mezcla pastosa homogénea con ayuda de EE. La pasta se desmenuzó y el granulado resultante se llevó a una bandeja adecuada y se secó a 45ºC para la eliminación del disolvente. El granulado secado se condujo a través de una desmenuzadora y se mezcló en una mezcladora con los siguientes otros coadyuvantes:

Talco: 5 mg

Estearato de magnesio: 5 mg

Almidón de maíz: 9 mg

y acto seguido se envasó en cápsulas de 400 mg (= tamaño de la cápsula 0).

Claims

1. Compuestos de la fórmula general I,

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21

en donde,

R^{1}: significa alquilo C_{1-4},

R^{2}: significa alquilo C_{1-4},

R^{5}: significa hidrógeno y

2. Compuestos según la reivindicación 1, en donde R^{1} y R^{2} significan en cada caso metilo.

3. Compuestos según la reivindicación 1, en donde R^{3} significa fenilo eventualmente sustituido 1 vez.

4. Compuestos según la reivindicación 1, en donde R^{4} significa hidrógeno, alquilo C_{1-6} o ciclopropil-alquilo C_{1-4}.

5. Compuestos según la reivindicación 1, en donde R^{6} significa fenil-alquilo C_{1-4} o tetrahidronaftilo.

6. Compuestos según la reivindicación 1, en donde en el anillo de pirano el carbono que porta el sustituyente hidroxi (C-3) presenta la configuración S y el carbono que porta el sustituyente con contenido en nitrógeno (C-4) presenta la configuración R.

7. Compuestos de la fórmula I según una de las reivindicaciones precedentes, los cuales se eligen del grupo consistente en

2-(4-{[(4-etilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronafta-
len-1-ilacetamida;

2-((3S,4R)-4-{[(4-etilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-[(1R)-1,2,3,4-
tetrahidronaftalen-1-il]acetamida;

N-bencil-2-{4-[[(4-etilfenil)sulfonil](neopentil)amino]-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il}-aceta-
mida;

2-{4-[[(4-etilfenil)sulfonil](neopentil)amino]-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il}-N-(2-feniletil)
acetamida y

2-(4-{[(4-metilfenil)sulfonil]amino}-3-hidroxi-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-cromen-6-il)-N-1,2,3,4-tetrahidronaf-
talen-1-ilacetamida.

8. Medicamento, que contiene una cantidad farmacológicamente eficaz de un compuesto de la fórmula I según la reivindicación 1 y coadyuvantes y/o sustancias de soporte farmacéuticos habituales.

9. Uso de compuestos de la fórmula I según la reivindicación 1 para la preparación de medicamentos para el tratamiento de enfermedades cardiocirculatorias y/o para el tratamiento de enfermedades proliferativas, inflamatorias crónicas y autoinmunes.

10. Procedimiento para la preparación de compuestos de la fórmula I,

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en donde

R^{1}: significa alquilo C_{1-4},

R^{2}: significa alquilo C_{1-4},

R^{5}: significa hidrógeno y

R^{5} y R^{6}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo de piperazina el cual está eventualmente sustituido con fenilo,

caracterizado porque se hace reaccionar un compuesto de la fórmula general II,

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IIIX - SO_{2} - R^{3}

en donde R^{3} posee el significado anterior y X significa un grupo lábil separable.

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11. Compuestos de la fórmula general II,

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en donde

R^{1}: significa alquilo C_{1-4},

R^{2}: significa alquilo C_{1-4},

R^{5}: significa hidrógeno y