ES2317005T3 - Peptido novedoso, procedimiento para producir el mismo y composicion dfarmaceutica que contiene el peptido. - Google Patents
Peptido novedoso, procedimiento para producir el mismo y composicion dfarmaceutica que contiene el peptido. Download PDFInfo
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Abstract
Péptido que consiste en la siguiente secuencia de aminoácidos: tirosina-glicina-serina-arginina-serina.
Description
Péptido novedoso, procedimiento para producir el
mismo y composición farmacéutica que contiene el péptido.
La presente invención se refiere a un péptido
novedoso, a un procedimiento de preparación del mismo, a
composiciones farmacéuticas que comprenden el mismo y a su uso como
productos farmacéuticos, agentes antiinflamatorios y contra el
sarcoma. El péptido es particularmente útil como productos
farmacéuticos para tratar y/o prevenir el sarcoma y estados
inflamatorios. El péptido se extrae y se aísla de granos de
café.
Los aparatos dados a conocer en las patentes
estadounidenses números 5.572.923, 5.170.697 y 4.776.104 incluyen
sistemas de extracción para extraer un componente eficaz de un
material tal como malta, semillas de soja o similares. Un aparato
de este tipo comprende un tanque de generación de partículas
diminutas para pulverización que incluye medios para calentar un
depósito de agua hasta una temperatura predeterminada y un medio
para pulverizar o atomizar agua; un dispositivo de extracción
conectado al tanque de generación de partículas diminutas para
pulverización, dispositivo de extracción que contiene una capa de
materia prima para adherir un componente eficaz de la materia prima
a las partículas diminutas pulverizadas cuando las partículas
diminutas para pulverización pasan a través de la capa de materia
prima; un dispositivo de condensación conectado al dispositivo de
extracción para licuar las partículas diminutas pulverizadas que
han pasado a su través y han extraído un componente eficaz de la
capa de materia prima; un tanque de reserva en el que se vacía el
agua licuada en el dispositivo de condensación; un soplador previsto
en una trayectoria entre el tanque de reserva y el tanque de
generación de partículas diminutas para pulverización para
descomprimir la capa de materia prima dentro del dispositivo de
extracción; y un medio de enfriamiento para enfriar el dispositivo
de condensación y el tanque de reserva.
Se da a conocer un procedimiento mediante el
cual el extracto líquido preparado a partir del aparato anterior
y/o el extracto preparado a partir del aparato que tiene
condensadores mejorados y/o secado mejorado, puede solidificarse
fácilmente tal como mediante secado o liofilización en la solicitud
de patente estadounidense en tramitación junto con la presente con
número de serie 09/981.064, cuya descripción se incorpora por el
presente documento como referencia. Pueden prepararse fácilmente
composiciones farmacéuticas así como otras composiciones útiles en
la preparación de cosméticos, perfumes y/o potenciadores del aroma a
partir del extracto solidificado o secado. Además, el análisis del
extracto secado se facilita mediante el uso de un material
absorbente no nutritivo para solidificar el extracto, en comparación
con el análisis del propio extracto.
El presente inventor ha descubierto ahora que un
péptido biológicamente activo novedoso extraído de granos de café
tiene actividad anticancerígena y actividad antiinflamatoria.
Por tanto, es un objeto de la presente invención
proporcionar un péptido que tiene actividad biológica útil.
Es un objeto adicional de la presente invención
proporcionar una composición farmacéutica que comprende el
péptido.
Todavía es un objeto adicional de la presente
invención proporcionar un péptido que tiene actividad contra el
sarcoma.
Aún es otro objeto de la presente invención
proporcionar un péptido que tiene actividad antiinflamatoria.
Los problemas de la técnica anterior se han
superado mediante la presente invención, que proporciona un péptido
biológicamente activo, así como composiciones preparadas a partir de
él que tienen, entre otras cosas, actividad anticancerígena y
actividad antiinflamatoria, y un método para producir tal péptido y
tales composiciones. El péptido de la presente invención se obtiene
preferiblemente utilizando un sistema de calentamiento, extracción
y condensación que recupera eficazmente los derivados a partir de
una materia prima. Preferiblemente, el condensador está compuesto
por al menos dos recipientes preferiblemente cilíndricos, teniendo
al menos un recipiente un medio de enfriamiento en él, para
condensar la humedad a partir de una corriente de aire. Puede
añadirse un tercer recipiente opcional. El extracto líquido
resultante se pone en contacto con un material absorbente, y se seca
el material ahora empapado con el extracto. Alternativamente, se
empapa un material alimenticio animal o vegetal en el extracto y
luego se
seca.
seca.
El péptido de la presente invención es un
pentapéptido que tiene la siguiente secuencia de aminoácidos:
tirosina-glicina-serina-arginina-serina
(YGSRS).
La figura 1 es una vista esquemática de una
realización de un aparato de extracción/secado usado para extraer
el/los principio(s) activo(s) según la presente
invención;
la figura 2 es una vista esquemática de otra
realización del aparato de extracción/secado usado para extraer
el/los principio(s) activo(s) según la presente
invención;
la figura 3 es una vista en perspectiva
fragmentaria de un cilindro externo de un dispositivo de extracción
usado para extraer el/los principio(s) activo(s) según
la presente invención;
las figuras 4(a), (b) y (c) son vistas en
perspectiva que muestran la construcción del cilindro interno de un
dispositivo de extracción usado para extraer el/los
principio(s) activo(s) según la presente
invención;
la figura 5 es una vista en planta de los medios
de regulación del flujo de aire usados en el dispositivo de
extracción usado para extraer el/los principio(s)
activo(s) según la presente invención;
la figura 6 es una vista en sección tomada a lo
largo de las líneas 6-6 de la figura 5;
la figura 7 es una vista esquemática de una
realización de un dispositivo de condensación usado en un sistema de
extracción usado para extraer el/los principio(s)
activo(s) según la presente invención;
la figura 8 es una vista esquemática de un
dispositivo de condensación usado en un sistema de extracción usado
para extraer el/los principio(s) activo(s) según la
presente invención;
la figura 9 es una vista en sección transversal
de la parte de condensación de un dispositivo de condensación usado
en un sistema de extracción usado para extraer principio(s)
activo(s) según otra realización de la presente invención;
y
la figura 10 es una vista desde arriba de la
parte de condensación del dispositivo de la figura 9.
La materia prima preferida que puede someterse
al sistema de extracción para producir un extracto que incluye el
péptido novedoso según la presente invención es granos de café.
A continuación en el presente documento, se
describirá en más detalle un método preferido de obtención del
extracto con referencia a los dibujos adjuntos. La figura 1 es una
vista esquemática que muestra una construcción de una primera
realización del aparato de fabricación, y en el dibujo, el número de
referencia 1 es una carcasa o recipiente que tiene un depósito de
líquido, preferiblemente agua, en el mismo. La carcasa 1 está
compuesta preferiblemente por acero inoxidable. El tamaño de la
carcasa 1 no está particularmente limitado, y en la realización de
extracción mostrada, depende generalmente de la cantidad de materia
4 prima usada y de la tasa de extracción deseada de componente
eficaz a partir de la misma. La carcasa 1 incluye medios H para
calentar el depósito, medios que no están particularmente limitados
y pueden incluir una bobina o elemento de calentamiento eléctrico,
un elemento de calentamiento de UV o IR, un quemador, etc. Los
medios H de calentamiento deben ser suficientes para calentar el
líquido en la carcasa 1 hasta una temperatura necesaria para
provocar la vaporización del líquido. El calentador puede acoplarse
a un calibrador (no mostrado) para permitir que el operario
especifique la temperatura del líquido deseada, y a un interruptor
(no mostrado) para activar el calentador. Los medios H de
calentamiento pueden ubicarse dentro o fuera de la carcasa 1. Los
medios (no mostrados) pueden proporcionarse opcionalmente en
asociación con la carcasa 1 para generar partículas diminutas
pulverizadas de agua o una niebla. Los medios adecuados incluyen un
dispositivo de generación de ondas ultrasónicas que comprende uno o
más conjuntos (dependiendo del tamaño del tanque) de vibradores
proporcionados en la parte inferior de la carcasa 1, teniendo cada
vibrador la capacidad de pulverizar agua y crear una niebla. Son
adecuados los generadores de ondas ultrasónicas convencionales que
se usan en humidificadores ultrasónicos domésticos. También podría
usarse atomización centrífuga.
La carcasa 1 está en comunicación fluida
mediante la tubería P1 o similar con un dispositivo 2 de extracción
para extraer un componente eficaz de la materia S prima contenida en
la misma. La figura 3 es una vista en perspectiva del aspecto
externo del cilindro externo que es el elemento principal del
dispositivo 2 de extracción, e incluye un primer cilindro 2a
externo y un segundo cilindro 2b externo, que están construidos
ambos de modo que se unen entre sí de manera que pueden soltarse, y
están compuestos preferiblemente por acero inoxidable. Puede
fijarse un sensor de temperatura (no mostrado) para detectar la
temperatura durante la operación de extracción al lado inferior del
segundo cilindro 2b externo. Un mecanismo C1 de bloqueo articulado
une el cilindro 2a al cilindro 2b de modo que la materia prima puede
cargarse y descargarse fácilmente del mismo. La figura 3 muestra el
dispositivo 2 de extracción en su posición abierta, sin
bloquear.
La figura 4 es un diagrama esquemático del
cilindro interno que está alojado en el cilindro 2 externo de la
figura 3. La figura 4(a) muestra el cilindro 2c interno, que
es de una forma y tamaño adecuados para fijarse dentro del cilindro
2 externo mencionado anteriormente, e incluye en la parte inferior
del mismo una parte de red para sostener la materia prima que se ha
triturado en pequeños trozos. La figura 4(b) muestra una
placa 2d de guía para su inserción en el cilindro 2c interno, y tal
como se muestra en la figura 4(c), está construida de modo
que separa los trozos S triturados de materia prima tales como café
molido en el interior del cilindro 2c interno. La presencia de esta
placa 2d de guía permite que el líquido vaporizado procedente de la
carcasa 1 pase fácil y suavemente a través de los trozos S
triturados de materia prima, tal como se describirá a continuación.
Los expertos en la técnica apreciarán que pueden usarse otras formas
para la placa 2d de guía, tales como una forma en espiral.
El dispositivo 2 de extracción está en
comunicación fluida con el dispositivo 3 de condensación mediante la
tubería P2. Puede situarse una válvula V1 en la tubería P2, y junto
con la válvula V2 en la tubería P3 (tratada a continuación), regula
el flujo de aire hacia y el grado de descompresión en el dispositivo
3 de condensación. El extracto puede enfriarse en el dispositivo 3
de condensación mediante diversos medios, incluyendo mediante
enfriamiento con aire o enfriamiento con líquido, tal como se da a
conocer en las patentes estadounidenses números 5.572.923 y
5.170.697.
Una realización del dispositivo 3 de
condensación se compone de dos cilindros concéntricos; el cilindro 4
externo que aloja un material de enfriamiento para enfriar el
contenido del cilindro 5 interno. En la realización mostrada, los
cilindros interno y externo no son coextensivos, permitiendo de ese
modo que haya una parte 5a interna inferior para recoger el
condensado líquido que resulta del procedimiento de enfriamiento.
Sin embargo, los expertos en la técnica apreciarán que el cilindro
5 interno y externo puede ser coextensivo, proporcionándose medios
adecuados (tales como tubos en comunicación con el cilindro 5
interno en un extremo y con un recipiente complementario en el
otro) para la recogida del condensado en otro sitio. De manera
similar, el cilindro 5 interno podría ser de menor longitud que el
cilindro 4 externo con el fin de permitir que el material de
enfriamiento contenido en el cilindro 4 externo rodee no sólo los
laterales del cilindro 5 interno, sino también la parte inferior del
mismo. En esta última realización, se proporcionarían de nuevo
medios adecuados para recoger el condensado en otro sitio.
Preferiblemente, el material 6 de enfriamiento
contenido en el cilindro 4 externo es un líquido, tal como agua. Sin
embargo, el material 6 de enfriamiento también puede ser un gas o un
sólido tal como hielo u otro material que pueda mantener una
temperatura fría durante un periodo de tiempo prolongado. El
material 6 de enfriamiento puede hacerse circular en el cilindro 4
externo para potenciar el enfriamiento, y puede reponerse de manera
continua o constante durante el funcionamiento.
Preferiblemente, el cilindro 5 interno contiene
uno o más medios 36 de regulador del flujo de aire, lo más
preferiblemente dos tal como se muestra. Tal como se ilustra en las
figuras 5 y 6, los reguladores 36 del flujo de aire comprenden una
pluralidad de placas 37 inclinadas con un hueco "g" formado
entre placas 37 inclinadas adyacentes. Ajustando la inclinación de
las placas 37 inclinadas, es posible ajustar la cantidad del flujo
de aire que está regulándose. El aire que fluye hacia el cilindro 5
interno provoca que los reguladores 36 del flujo de aire roten
alrededor de un eje vertical, dirigiendo de ese modo por la fuerza
el flujo de aire hacia la pared del cilindro 5, que se enfría
mediante el material 6 de enfriamiento del cilindro 4 externo.
Alternativamente, el/los regulador(es) 36 del flujo de aire
pueden accionarse mediante un motor o similar para aumentar la
extracción de la humedad de la corriente de aire. El condensado
resultante se drena del desagüe 7 y se recoge.
La figura 7 ilustra una realización alternativa
del dispositivo 3 de condensación en el que la regulación del flujo
de aire se logra usando un diseño de recipiente triple o similar. El
recipiente 4'' externo contiene un material 6 de enfriamiento en su
corona circular, como en las realizaciones previas. El recipiente M
intermedio recibe el flujo de aire procedente del dispositivo de
extracción mediante tuberías 94 adecuadas, y el flujo de aire sale
del dispositivo (y opcionalmente se recircula de nuevo hasta la
carcasa 1) mediante la tubería 93. Un recipiente 5'' central está
situado de modo que ayuda a dirigir el contenido del recipiente M
intermedio contra el recipiente 4'' externo para potenciar el
enfriamiento. La forma de los recipientes es preferiblemente
cilíndrica pero no es necesario que lo sea; son adecuadas otras
formas siempre que se potencie el enfriamiento tal como forzando el
aire en el recipiente M intermedio contra el recipiente 4'' externo.
El área superficial de las paredes de enfriamiento también es
importante; por tanto, podría usarse una forma de
zig-zag para aumentar el área superficial; o podrían
extenderse proyecciones alternas desde las paredes de enfriamiento
para aumentar el área superficial de las mismas.
La figura 8 ilustra una realización alternativa
todavía adicional del dispositivo de condensación. Esta realización
es similar a la mostrada en la figura 7, excepto porque el
recipiente 5'' central se llena con un fluido de enfriamiento, que
puede ser igual o diferente del fluido de enfriamiento contenido en
el recipiente 4'' externo. Cuando el fluido es igual, pueden
proporcionarse medios 95 de conexión entre el recipiente 5'' central
y el recipiente 4'' externo para hacer circular el fluido de
enfriamiento entre ellos. Como en la realización de la figura 7, el
recipiente 5'' central es preferiblemente cilíndrico pero no es
necesario que lo sea; pueden usarse otras formas que potencien el
enfriamiento aumentando el área superficial de las superficies de
enfriamiento y ayuden a forzar el medio que va a enfriarse contra
las superficies de enfriamiento. El recipiente 5'' central también
puede fabricarse más corto de modo que el medio que va a enfriarse
también está expuesto al fondo del recipiente. Además, la entrada y
salida para el medio que va a enfriarse puede ubicarse de modo que
el medio que va a enfriarse se desplaza alrededor del perímetro del
recipiente 5'' central antes de su salida del dispositivo de
condensación. Como en la figura 9, el recipiente 5'' central también
puede ser más largo que el recipiente 4'' externo y el recipiente M
intermedio, e incluye una entrada 96 para introducir el fluido de
enfriamiento en el mismo. El dispositivo de condensación puede
combinarse con un calentador para aumentar la temperatura del medio
del que se está eliminando la humedad. Puede disponerse una
pluralidad de los dispositivos en serie para potenciar la
condensación, y puede disponerse en serie o bien vertical o bien
horizontalmente, dependiendo en parte de consideraciones de espacio.
El dispositivo es más fácil y más rápido de fabricar que la
realización de la figura 2 usando el dispositivo rotatorio para
regular el flujo de aire.
Con referencia a las figuras 9 y 10, se muestra
otra realización de un dispositivo 3 de condensación. Este
dispositivo 3 de condensación comprende una carcasa, que puede ser
de plástico, que tiene una o más superficies 4a-4n
de enfriamiento espaciadas en la misma, preferiblemente en forma de
aletas tal como se muestra. Las superficies 4a-4n
de enfriamiento pueden estar compuestas por cualquier material
conductor del calor, preferiblemente metal, lo más preferiblemente
aluminio. Las superficies 4a-4n de enfriamiento se
extienden preferiblemente a través de la mayoría de la carcasa 3,
proporcionando un área superficial extensa dentro de la carcasa para
ponerse en contacto con el material de entrada tal como se describe
en detalle a continuación. El número de superficies
4a-4n de enfriamiento espaciadas no es crítico,
dependerá del tamaño de la carcasa del dispositivo 3 de
condensación así como de la tasa de condensación óptima deseada.
Preferiblemente, las superficies 4a-4n de
enfriamiento se estrechan hacia sus extremos libres tal como se
muestra. En la realización preferida, las superficies
4a-4n de enfriamiento incluyen un separador 5
coextensivo para dividir la carcasa del dispositivo de condensación
en dos zonas o compartimentos separados; uno para el flujo del
material de entrada, el otro para el flujo de recirculación del
material de salida no condensado mediante el dispositivo 3 de
condensación. Más específicamente, el material de entrada
procedente de la tubería P2 fluye hacia abajo (basándose en la
orientación del aparato tal como se muestra en la figura 2) hacia un
primer compartimento en el que se pone en contacto con las
superficies 4a-4n de enfriamiento situadas en el
mismo. Cualquier material no condensado cruza entonces desde este
primer compartimento hasta el segundo compartimento en la cámara 30
de condensación en la que se comunican los dos compartimentos, y
entonces fluye hacia arriba (de nuevo con respecto a la orientación
del aparato tal como se muestra en la figura 2) a través del segundo
compartimento en el que se pone en contacto con las superficies
4a-4n de enfriamiento situadas en el mismo.
Cualquier material no condensado en el segundo compartimento fluye
hacia fuera de la tubería P3 y se recircula hasta el recipiente 1
mediante el soplador 8.
El enfriamiento de las superficies
4a-4n de enfriamiento se consigue con uno o más
enfriadores 20 termoeléctricos convencionales en la industria.
Brevemente, los enfriadores termoeléctricos son bombas de calor de
estado sólido, mediante las cuales el flujo de corriente CC a
través del enfriador provoca la transferencia de calor, creando un
lado frío y un lado caliente. El/los enfriador(es) 20
termoeléctrico(s) se ponen en relación de conducción de
calor con las superficies 4a-4n de enfriamiento, tal
como incluyendo el uso de grasa conductora térmica o similar. Los
enfriadores 20 están situados de manera que los lados fríos de los
mismos enfrían las superficies 4a-4n de
enfriamiento. Dependiendo del enfriamiento deseado, puede usarse un
diseño modular que contiene múltiples enfriadores 20
termoeléctricos. Preferiblemente, se pone también un disipador 21 de
calor en relación de conducción de calor con el/los
enfriador(es) 20 termoeléctrico(s) de modo que se
disipa calor de los mismos. Puede usarse un ventilador 22 en las
proximidades del disipador 21 de calor para potenciar la disipación
de calor tal como se muestra.
El presente inventor ha encontrado que la
cantidad de condensado producido mediante el dispositivo 3 de
condensación que incluye el/los enfriador(es) 20
termoeléctrico(s) se optimiza eficazmente si la temperatura
de las superficies 4a-4n de enfriamiento es de
entre 3ºC y 60ºC. Los intervalos de temperatura adecuados también
incluyen 10-60ºC y 30-55ºC. Las
temperaturas en el extremo inferior del intervalo requieren
múltiples enfriadores termoeléctricos, y por tanto un disipador de
calor más grande, más capacidad del ventilador y más electricidad
para alimentar el enfriador y el ventilador.
El condensado que resulta del enfriamiento en el
dispositivo 3 de condensación fluye hacia una cámara 30 de
condensación ubicada en el extremo inferior del dispositivo 3 de
condensación por debajo del punto en el que terminan las superficies
4a-4n de enfriamiento. Desde la cámara 30 de
condensación, el condensado fluye hacia una tubería 31 de drenaje en
la que se dirige hacia un depósito de extracto en el que se recoge.
Cualquier vapor no condensado se recircula mediante la tubería P3 y
el ventilador 8 hasta el recipiente 1 para su procesamiento
adicional.
Se proporciona al menos uno o más medios de
impulsión o circulación de aire (no mostrado), preferiblemente en
forma de un ventilador o soplador 8. El/los ventilador(es) 8
debe(n) ser de un tamaño suficiente de modo que se cree
descompresión y proporcione(n) flujo a través del sistema. La
descompresión debe estar en el intervalo de aproximadamente 5 a 500
mm H_{2}O. Se ha encontrado que un ventilador de una aspiradora
doméstica convencional es eficaz.
El dispositivo 3 de condensación está en
comunicación con la carcasa 1 mediante la tubería P3. La válvula V2
puede estar situada en la tubería P3 para regular el flujo de aire y
la descompresión con la válvula V1. Por ejemplo, si la válvula V1
está parcialmente cerrada mientras que la válvula V2 está abierta,
entonces el aparato 3 de condensación estará en un estado de
descompresión. Si la válvula V2 está parcialmente cerrada mientras
que la válvula V1 está abierta, aumentará la presión en el aparato 3
de condensación. La modulación de las válvulas puede conseguirse
manual o automáticamente.
El funcionamiento del aparato se describirá
ahora basándose en la construcción anterior.
En primer lugar, la materia prima se tritura
hasta una magnitud que se aproxima a la de un grano de arroz
mediante cualquier medio adecuado y se llena con la misma el
cilindro 2c interno ilustrado en la figura 5(a). Una vez
lleno, se pone la red sobre la materia prima con el fin de
mantenerla de manera estable en el cilindro 2c interno.
Sucesivamente, se inserta el cilindro 2c interno
en el cilindro 2 externo mostrado en la figura 3. La carcasa 1 se
llena con una cantidad suficiente de agua u otro líquido de modo que
pueda producirse una niebla. El agua puede mantenerse al mismo
nivel de manera continua, o puede añadirse de manera discontinua. Se
fija el calibrador de temperatura a la temperatura deseada, y se
activa el calentador para calentar el agua hasta una temperatura
adecuada de tal manera que la temperatura en el dispositivo 2 de
extracción está a tal nivel (generalmente inferior a 100ºC) de modo
que no se destruyan los componentes eficaces de la materia prima.
Por ejemplo, en el caso de granos de café, la temperatura del agua
se calienta preferiblemente hasta aproximadamente 85ºC, de modo que
la temperatura del agua cuando alcanza el dispositivo de extracción
está entre aproximadamente 60-70ºC, preferiblemente
es de aproximadamente 65ºC.
Una vez que la temperatura del agua en la
carcasa 1 alcanza el nivel deseable, se activa el/los
soplador(es) 8 para iniciar el flujo a través del sistema.
El/los soplador(es) 8 provoca(n) que el flujo de aire
circule en la trayectoria de circulación cerrada formada por la
carcasa 1, el dispositivo 2 de extracción y el dispositivo 3 de
condensación, así como las tuberías que conectan estos dispositivos
respectivos. La niebla de agua generada en la carcasa 1 pasa así a
través de la tubería P junto con el flujo de aire y alcanza el
dispositivo 2 de extracción. La temperatura en el dispositivo 2 de
extracción puede medirse mediante un sensor de temperatura para
garantizar que se alcanza la temperatura apropiada en el mismo. La
temperatura en la carcasa 1 puede controlarse en respuesta a la
temperatura en el dispositivo 2 de extracción.
Tal como se describió anteriormente, se hace
circular el flujo de aire entre cada dispositivo mediante el
funcionamiento del/de los soplador(es) 8, pero dado que el
dispositivo 2 de extracción se llena con las partículas S trituradas
de materia prima, la materia prima crea una resistencia al flujo de
aire, creando de ese modo un espacio descomprimido dentro del
dispositivo 2 de extracción.
Una vez que se logra el estado descomprimido, se
extraen los componentes dentro de la materia prima hasta la
superficie de los trozos S triturados de materia prima, y entonces
se capturan mediante la niebla de agua que pasa a través de los
mismos. Dado que la temperatura dentro del dispositivo de
extracción, y más particularmente, la temperatura dentro del
cilindro 2c interno se mantiene dentro del intervalo deseado, los
componentes contenidos en la materia prima se extraen en el agua sin
destruirse por el calor.
El líquido resultante (por ejemplo, agua) que
contiene el componente eficaz de la materia prima fluye entonces
hasta el dispositivo 3 de condensación a través de la tubería P2 de
conexión junto con el flujo de aire procedente del soplador 8. El
cilindro 4 externo del dispositivo 3 de condensación se llena con
material de enfriamiento, preferiblemente agua, a una temperatura
suficiente para provocar la condensación del agua en el cilindro 5
interno. El flujo de aire y la descompresión en el dispositivo 3 de
condensación se controlan mediante la modulación de las válvulas V1
y V2. El material condensado o licuado se drena a través del desagüe
7 tal como se muestra, y en última instancia puede recogerse a
través de la válvula V3.
Las partículas que no se licuan en el
dispositivo 3 de condensación se succionan hacia la carcasa 1 a
través de la tubería P3 de conexión junto con el flujo de aire, y se
recirculan de ese modo. La parte recirculada puede precalentarse
opcionalmente tal como mediante una placa rectificadora o una forma
en espiral, de modo que no se reduce la temperatura del agua en el
tanque 1.
El material de enfriamiento en el dispositivo 3
de condensación puede cambiarse de manera periódica.
Alternativamente, puede usarse un flujo continuo de líquido de
enfriamiento para enfriar el cilindro 5 interno.
La materia prima puede triturarse hasta
aproximadamente el tamaño de un grano de arroz. Sin embargo, la
concentración de componente eficaz contenido en el producto final
puede controlarse variando el tamaño de la materia prima. Por
ejemplo, si la materia prima se tritura en trozos finos, puede
obtenerse un producto final con una alta concentración de
componente eficaz. Sin embargo, en tal caso, disminuye la tasa a la
que se produce el producto final. A medida que aumenta el tamaño de
la materia prima, disminuye la concentración de componente eficaz
en el producto final, y aumenta la tasa de producción. De manera
similar, el uso de la placa 2d de guía aumenta el rendimiento de
producto final por hora en aproximadamente un 20%, pero disminuye la
concentración de componente eficaz en el producto final.
Con el aparato anterior descrito en cada una de
las realizaciones, es posible obtener un secado equilibrado sin
influencia del aire externo haciendo circular aire cargado de
humedad a través de un dispositivo de condensación para reducir o
eliminar el contenido en humedad del mismo. El resultado es una
reducción sustancial en el tiempo de secado y los requisitos de
energía concomitantes para el mismo.
El producto es un líquido incoloro, transparente
y claro. Entonces se solidifica el extracto. En una primera
realización, el procedimiento para la solidificación es tal como
sigue.
Se usa un material no nutritivo que es
absorbente. Los materiales adecuados incluyen filtros de membrana
hidrófila tales como membranas de poli(fluoruro de
vinilideno) modificado tales como el filtro Durapore® comercialmente
disponible de Millipore Corporation, membranas de fibra de vidrio,
algodón, nailon, celulosa o material de papel tal como el usado en
bolsas de té. La forma del material no está particularmente
limitada, y puede incluir láminas y discos. La identidad particular
del material elegido para una aplicación dada dependerá en parte de
la naturaleza del disolvente usado en un procedimiento posterior,
tal como un procedimiento de análisis usado para identificar los
componentes del producto final.
El material absorbente se pone en contacto con
el extracto. Preferiblemente, se humecta toda la superficie del
material absorbente con el extracto. En el caso en el que el
material absorbente es un filtro, puede conseguirse la humectación
completa del material con el extracto usando una fuerza impulsora
para empujar o tirar del extracto a través del filtro, tal como
presión o vacío (usando una bomba de vacío, por ejemplo). El
material absorbente puede calentarse opcionalmente, antes o durante
la humectación con el extracto, para expandir los poros y potenciar
la humectación. Alternativamente o además, el extracto puede
calentarse, solo o junto con el material absorbente.
Una vez que el material absorbente está
suficientemente humectado con el extracto, se adhiere el extracto
al filtro preferiblemente mediante secado. El secado puede
conseguirse mediante liofilización, calentamiento o secado al aire,
prefiriéndose particularmente la liofilización. El material secado
puede almacenarse durante duraciones de tiempo significativas sin
deterioro del extracto. Puede disolverse en agua o un disolvente
adecuado, dando como resultado la disolución del componente eficaz
del extracto en agua o el disolvente. Puede usarse una presión
aumentada para facilitar la disolución, si se desea. El material
secado también puede someterse a análisis, particularmente análisis
para investigación farmacéutica, o disolverse en primer lugar y
luego someterse a análisis la disolución resultante. Si el material
absorbente usado era un papel, el material secado puede disolverse
en agua e ingerirse como una bebida saludable.
En el caso de que se use liofilización, el
procedimiento de liofilización se lleva a cabo preferiblemente a una
temperatura que oscila desde aproximadamente -10ºC hasta
aproximadamente -70ºC y a un vacío de aproximadamente 5,3 cfm a
aproximadamente 23 cfm de desplazamiento. Los expertos en la técnica
apreciarán que la temperatura y el vacío pueden variar dependiendo
de la naturaleza del material y del tamaño del material, así como
del liofilizador particular usado. La cantidad de tiempo durante el
cual se somete el material a liofilización puede determinarse
fácilmente por el experto en la técnica y depende en parte de la
concentración del material.
El producto resultante puede almacenarse durante
largas duraciones de tiempo, que abarcan muchos días o meses, sin
afectar de manera perjudicial a la calidad o el sabor del producto.
De hecho, el sabor del producto resultante, tras su reconstitución
con agua u otro vehículo líquido, se potencia en comparación con la
materia prima original. El transporte y almacenamiento se facilitan
y se hacen más rentables. Los componentes eficaces en el extracto,
que de otra manera pueden destruirse por calentamiento, se conservan
usando el procedimiento de extracción detallado anteriormente. El
producto liofilizado también tiene una vida útil de almacenamiento
más larga que el extracto líquido, y se presta por sí mismo a
identificación y pruebas químicas.
El producto liofilizado puede reconstituirse
simplemente añadiendo un vehículo líquido, preferiblemente agua, al
producto. La cantidad de vehículo líquido que va a añadirse no está
particularmente limitada, y depende de la concentración deseada de
extracto en el líquido potable final. Puede usarse tal como está (es
decir, sin reconstitución) como aditivo para o con otros alimentos,
tal como un aderezo para ensalada, un ingrediente de sopa
deshidratada, o mezclarse con otros ingredientes alimenticios. El
producto liofilizado puede calentarse de modo que el aroma
vaporizado puede distribuirse en una sala.
El péptido de la presente invención, extraído de
granos de café según el método anterior, está representado por la
secuencia:
tirosina-glicina-serina-arginina-serina.
Las composiciones farmacéuticas que contienen
una cantidad eficaz del péptido son útiles como fármacos para seres
humanos y animales, tales como para el tratamiento y/o la prevención
de diversas enfermedades y estados, incluyendo cáncer y estados
antiinflamatorios. Una cantidad eficaz para tratar un paciente es la
cantidad del primer compuesto que, tras su administración a un
paciente que lo necesita, inhibe la evolución del cáncer, reduce o
elimina el volumen o tamaño de los tumores, destruye células
malignas y/o reduce o elimina la inflamación. Las diversas
enfermedades contra las que el péptido es eficaz incluyen diversos
tipos de cáncer. Los diversos tipos de inflamación frente a los que
el péptido es eficaz incluyen encefalitis, meningitis cerebral,
blefaritis marginal, conjuntivitis, queratitis, iritis, retinitis,
estomatitis, queilitis, glositis, amigdalitis, otitis interna,
otitis externa, otitis media, gastritis, duodenitis, neumonía,
pleuresía, bronquitis, rinitis, colitis, inflamación del intestino
delgado, nefritis, pielitis, pancreatitis, colecistitis, hepatitis,
tiroiditis, prostatitis, cistitis, miositis, periostitis,
osteomielitis, orquitis, endometritis, vaginitis, ovaritis,
dermatitis, artritis, periproctitis, linfadenitis, diabetes
(inflamación de los islotes pancreáticos), resfriado común
(amigdalitis, bronquitis, rinitis, mucositis), urticaria, diversas
clases de eccema (dermatitis), nefrosis (nefritis), piorrea
alveolar (parodontitis, aplicalis, endodontitis), asma (bronquitis),
neuralgia (neuritis), tuberculosis pulmonar (neumonía, bronquitis,
mucositis), enfermedades infecciosas (inflamación inducida por
bacterias y virus), alergia (inflamación inducida por la reacción
antígeno-anticuerpo), lepra (dermatitis viral y
miositis), cáncer (la inflamación y la induración fibroide son
también causas), úlcera (evolución de la inflamación), induración
fibroide (evolución de la inflamación y úlcera), reducción de la
energía (adenitis), queratosis, enfermedades del colágeno, histeria,
neurosis, cirrosis hepática, hipertensión, trombosis, angina,
reumatismo, gota, rigidez, Alzheimer, enfermedades de Lyme,
enfermedad de las vacas locas e inflamación debida a parásitos.
La magnitud de la dosis terapéutica o
profiláctica de los extractos de la presente invención en el
tratamiento o la prevención de la enfermedad dependerá en parte de
la identidad, gravedad y naturaleza del estado que está tratándose.
La dosis y la frecuencia de la dosificación también variarán según
la edad, el peso corporal y la respuesta del paciente particular.
En general, el intervalo de dosis diaria total para el péptido de
la presente invención es de desde aproximadamente 1 hasta
aproximadamente 10 mcg/kg de peso corporal al menos una vez al día,
preferiblemente de dos a tres veces al día. La dosis para estados
más graves puede ser de desde aproximadamente 10 hasta
aproximadamente 100 mcg/kg de peso corporal, al menos una vez al
día. La frecuencia de dosis puede ser hasta de aproximadamente tres
a cuatro veces al día si es necesario o se desea.
Puede emplearse cualquier vía de administración
adecuada bien conocida por los expertos en la técnica para
proporcionar una dosificación eficaz del péptido de la presente
invención, incluyendo la oral, intravenosa, intramuscular,
intradérmica y subcutánea, aunque se prefiere la administración
oral, lo más preferiblemente en forma líquida.
Las composiciones farmacéuticas de la presente
invención pueden combinarse con otros agentes terapéuticos, tales
como analgésicos.
Las composiciones farmacéuticas de la presente
invención se administran a animales, incluyendo perros, gatos, peces
y seres humanos. Los compuestos de la presente invención pueden
incluir vehículos farmacéuticamente aceptables y otros aditivos
convencionales, incluyendo vehículos de base acuosa, codisolventes
tales como alcohol etílico, propilenglicol y glicerina, cargas,
lubricantes, agentes humectantes, agentes aromatizantes, agentes
colorantes, agentes emulsionantes, de suspensión o dispersantes,
agentes de suspensión, edulcorantes, etc. Preferiblemente, el
extracto simplemente se diluye con agua y se administra por vía oral
sin ningún vehículo ni aditivo.
El péptido de la invención se aisló e identificó
tal como sigue.
Se usó el método de extracción detallado
anteriormente con granos de café como materia prima. Se humectó una
membrana de fibra de vidrio (96,4 g) con el extracto resultante. Se
extrajo la membrana con tres porciones de 300 ml de un acetato de
etilo. Se llevó el acetato de etilo casi hasta sequedad a vacío
usando un evaporador rotatorio. La temperatura de la fase de
disolvente no superó los 40ºC. El residuo era un líquido de color
marrón claro (20,6 ml). Se extrajo entonces este extracto con etil
éter, 150 ml. Se eliminó la fase de éter y se secó con sulfato de
sodio anhidro. Se eliminó el sulfato de sodio y se llevó la fase de
éter hasta sequedad en un evaporador rotatorio a vacío. Resultó un
compuesto con aspecto de agujas cortas blancas. Se llevó esto a
etanol y se recristalizó con evaporación del etanol. Entonces se
secuenció el compuesto dando los siguientes parámetros:
- Espectros de absorción:
- 384 um
- Cromatografía en capa fina en gel de sílice Merck:
- 3,8
- Micro Kjeldahl:
- 12,4%
- Punto de fusión:
- 172ºC
- Secuencia de aminoácidos
- Tirosina-glicina-serina-arginina-serina
\vskip1.000000\baselineskip
Se ha mostrado que un modelo de artritis
inducida por adyuvante desarrollado usando ratas permite seleccionar
compuestos que pueden ser útiles en el tratamiento de la artritis
reumatoide en el hombre. La artritis inducida por adyuvante responde
tanto a compuestos esteroideos como no esteroideos. El grado de
inflamación se evaluará midiendo las diferencias en el peso del pie
y/o el volumen del pie.
Se adquirieron ratas que pesaban entre
150-200 g de Animal Technologies Ltd., Kent, WA.
Eran ratas Sprague-Dawley macho. Se mantuvieron los
animales individualmente en jaulas de acero inoxidable con libre
acceso a agua y alimento (dieta de roedores Harlan Teklan). El ciclo
de luz se mantuvo a 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad. La
temperatura se mantuvo a 22ºC \pm 3ºC con una humedad relativa del
40 al 70%.
Se disolvieron o suspendieron los materiales de
prueba en agua desionizada a las dosis de 10 mcg/kg y 1 mcg/kg de
peso corporal. El compuesto de prueba y la hidrocortisona se
administraron mediante sonda nasogástrica.
Se sensibilizaron ratas
Sprague-Dawley macho (150-200 g)
mediante inyección de adyuvante completo de Fruend (suspensión al
0,5% de Mycobacterium tuberculosis inactivado (H37RA, Difco,
en aceite mineral)). Se administró por vía intradérmica una alícuota
de 0,1 ml en un sitio plantar de la pata trasera derecha de cada
rata.
Se administraron los materiales de prueba por
vía oral (mediante sonda nasogástrica) a cada una de las 5 ratas por
grupo de tratamiento una vez al día durante 10 días. La
administración de los materiales de prueba se inició en el día de la
sensibilización.
Se midió en la garra trasera izquierda justo
antes de la sensibilización y de nuevo en el día 10. Se determinaron
la tasa inhibidora del edema plantar y la tasa de aumento de peso
corporal mediante la comparación con los grupos de ratas no
sensibilizadas.
Se promediaron los pesos de las garras para cada
grupo. Se determinó la actividad antiinflamatoria comparando los
pesos de las garras calculados tal como sigue:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Se usó hidrocortisona como control positivo. Es
un antiinflamatorio común administrado a pacientes con artritis
reumatoide a una dosis de 10 mg/kg de peso corporal. Se administró
el péptido a 10 mcg/kg y 1 mcg/kg de peso corporal.
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Los resultados indican que el péptido a 10
mcg/kg de peso corporal proporcionó una inhibición del 100% de la
inflamación inducida. Al nivel de 1 mcg/kg, el péptido proporcionó
una inhibición del 85,3%. Por tanto, el péptido es un potente
inhibidor de la inflamación sin inducir pérdida de peso.
La reserva tumoral era un sarcoma 180, que se
inició en el laboratorio a partir de la Colección Americana de
Cultivos Tipo. Este cultivo de reserva se ha pasado a intervalos
semanales como una ascitis en ratones Swiss-Webster
no tratados.
Se llevaron a cabo todos los estudios actuales
con ratones Swiss-Webster obtenidos de Animal
Technologics Ltd., Kent, WA. Para preparar el inóculo, se aspiró el
líquido ascítico de un ratón con una ascitis de 7-12
días usando una técnica estéril. Se comprobó la viabilidad de las
células tumorales usando la técnica de tinción con azul trípano. Una
vez que se estableció un recuento celular, se diluyeron las células
tumorales con solución salina normal o solución salina tamponada con
fosfato para obtener una concentración final de 1 a 2 x 10^{6}
células por mm^{3}. Esta es la suspensión tumoral que se inyecta
entonces a los ratones. Se siembra en placas la dilución final sobre
agar tripticasa de soja para determinar si está libre de
contaminación.
Se inocula una décima parte (0,1 ml) de la
suspensión anterior en el músculo de la pata trasera izquierda (masa
de los músculos isquiotibiales) de cada ratón. Se ponen los ratones
inoculados en una jaula grande y luego se segregan aleatoriamente en
grupos de cinco ratones. Se alojan los ratones en jaulas tipo caja
de zapatos sobre virutas de madera con libre acceso a agua y comida
de laboratorio. Se pesan los ratones en el día de inoculación, en el
día 7, el día 12 y en el momento del sacrificio.
Se inició el tratamiento de los ratones el día
posterior al trasplante. Al final del periodo de observación, se
sacrificaron los ratones mediante anestesia con éter. Se retira la
piel sobre la pata trasera izquierda para exponer el tumor y se
extirpan el tumor y la pata por la articulación de la cadera. Se
retira cualquier piel residual y se pesan individualmente las patas
con los tumores. Se preparan diez patas normales (patas derechas) de
una manera similar y se pesan. Se resta el valor medio de la pata
normal del peso de la pata con el tumor para proporcionar una
estimación del peso tumoral real.
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\vskip1.000000\baselineskip
Tal como muestran los datos, el péptido
proporcionó una inhibición del 100% al nivel de 10 mcg/kg de peso
corporal. El aumento de peso asociado con la administración del
péptido era comparable al del control, e indica que no había
toxicidad.
<110> KUBOYAMA BIOKEN CO., LTD.
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<120> PÉPTIDO NOVEDOSO, MÉTODO DE
PRODUCCIÓN DEL MISMO Y COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA QUE CONTIENE EL
MISMO
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<130> 1314-PCT
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\vskip0.400000\baselineskip
<150> Documento de EE.UU. 10/747.466
\vskip0.400000\baselineskip
<151>
29-12-2003
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<160> 1
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\vskip0.400000\baselineskip
<170> windows Me
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\vskip0.400000\baselineskip
<210> 1
\vskip0.400000\baselineskip
<211> 5
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<212> PRT
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<213> Granos de café
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\vskip0.400000\baselineskip
<220>
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
<223> Inventor: Henry Aoki
\vskip1.000000\baselineskip
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<400> 1
\hskip1cm
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<110> KUBOYAMA BIOKEN CO., LTD.
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<120> PÉPTIDO NOVEDOSO, MÉTODO DE
PRODUCCIÓN DEL MISMO Y COMPOSICIÓN FARMACÉUTICA QUE CONTIENE EL
MISMO
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<130> 1314-PCT
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<150> Documento de EE.UU. 10/747.466
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<151>
29-12-2003
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<170> Windows Me
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<211> 5
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<212> PRT
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<213> Granos de café
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<220>
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<223> Inventor: Henry Aoki
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<400> 1
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Claims (6)
1. Péptido que consiste en la siguiente
secuencia de aminoácidos:
tirosina-glicina-serina-arginina-serina.
2. Composición farmacéutica que comprende el
péptido según la reivindicación 1 junto con un vehículo
farmacéuticamente aceptable.
3. Método de preparación de un péptido que
consiste en la secuencia de aminoácidos
tirosina-glicina-serina-arginina-serina,
que comprende extraer de granos de café un extracto mediante el
siguiente método:
calentar agua hasta una temperatura
predeterminada;
atomizar dicha agua calentada en partículas
diminutas;
poner en contacto dichos granos de café en un
estado de descompresión con dichas partículas de agua calentada y
atomizada;
condensar las partículas de agua
resultantes;
recoger el agua enfriada resultante; y
solidificar el extracto líquido resultante mediante el siguiente
método:
proporcionar un absorbente;
poner en contacto dicho material absorbente con
dicho extracto; y
secar el material absorbente humectado
resultante para producir una forma sólida de dicho extracto; y
aislar una disolución que comprende dicho péptido de dicho
extracto.
4. Método según la reivindicación 3, en el que
dicho material absorbente comprende fibra de vidrio.
5. Método según la reivindicación 3, en el que
dicho secado es liofilización.
6. Método según la reivindicación 5, en el que
dicha liofilización se lleva a cabo a una temperatura que oscila
desde aproximadamente -10ºC hasta aproximadamente -70ºC.
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