ES2323450T3 - CONSUMABLE PRODUCT THAT CONTAINS PROBIOTICS. - Google Patents
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Abstract
Un producto consumible seco que comprende microorganismos probióticos, en el cual los microorganismos probióticos se aplicaban al producto consumible seco, y en el cual tras la aplicación de los microorganismos probióticos frescos la actividad del agua (Aw) es menor a 0,5, preferiblemente inferior a 0,3.A dry consumable product comprising probiotic microorganisms, in which the probiotic microorganisms were applied to the dry consumable product, and in which after the application of the fresh probiotic microorganisms the water activity (Aw) is less than 0.5, preferably less to 0.3.
Description
Producto consumible que contiene probióticos.Consumable product that contains probiotics
La presente invención se refiere a un producto consumible que contiene probióticos y a un proceso para obtenerlo.The present invention relates to a product consumable containing probiotics and a process for get it
Los microorganismos probióticos son microorganismos que influyen favorablemente en un huésped mejorando su equilibrio microbiano intestinal. En general, se piensa que estas bacterias inhiben o influyen en el crecimiento y/o el metabolismo de las bacterias patógenas en el tracto intestinal. También se acepta que a través de los microorganismos probióticos se activa la función inmunitaria del huésped. Por este motivo, existen muchos métodos distintos para incluir los microorganismos probióticos en los alimentos.Probiotic microorganisms are microorganisms that favorably influence a host by improving Your intestinal microbial balance. In general, it is thought that these bacteria inhibit or influence growth and / or the metabolism of pathogenic bacteria in the intestinal tract. It is also accepted that through probiotic microorganisms Host immune function is activated. For this reason, there are many different methods to include microorganisms Probiotics in food.
La WO98/10666 (SOCIETE DES PRODUITS NESTLE S.A.) revela un proceso para la fabricación de una composición alimenticia deshidratada que contiene bacterias ácidas probióticas vivas, en las cuales una composición alimenticia y un cultivo de bacterias de ácido láctico probióticas sensibles al oxígeno son pulverizadas conjuntamente bajo un chorro de aire caliente.WO98 / 10666 (SOCIETE DES PRODUITS NESTLE S.A.) reveals a process for manufacturing a composition dehydrated food containing probiotic acid bacteria live, in which a food composition and a crop of Oxygen-sensitive probiotic lactic acid bacteria are sprayed together under a jet of hot air.
La EP0862863 (SOCIETE DES PRODUITS NESTLE S.A.) informa sobre un producto a base de cereales ya preparado que consta de una matriz de almidón gelatinizada que incluye un revestimiento o un relleno que contiene un microorganismo probiótico.EP0862863 (SOCIETE DES PRODUITS NESTLE S.A.) reports on an already prepared cereal product that consists of a matrix of gelatinized starch that includes a coating or a filler that contains a microorganism probiotic.
La US4943437 (AB MEDIPHARM) informa sobre un proceso para el suministro de materiales biológicamente activos a los materiales de base de la alimentación, en los cuales el material biológicamente activo se mezcla con un soporte inerte, donde se mantiene insoluble, con el fin de formar una suspensión homogénea, después de lo cual se aplica la suspensión al material de base.US4943437 (AB MEDIPHARM) reports on a process for the supply of biologically active materials to the base materials of the feed, in which the material biologically active mixed with an inert support, where keeps insoluble, in order to form a homogeneous suspension, after which the suspension is applied to the base material.
La GB2205476 (UNILEVER) informa sobre una composición bacteriana respaldada que comprende un soporte inerte subdividido, que es la harina, y una suspensión acuosa de microflora viable. Luego esta mezcla se seca y es adecuada como inóculo de las bacterias de ácido láctico para la preparación de pan de masa avinagrada.GB2205476 (UNILEVER) reports on a Bacterial backed composition comprising an inert support subdivided, which is flour, and an aqueous suspension of microflora viable. Then this mixture dries and is suitable as inoculum of the lactic acid bacteria for the preparation of dough bread vinegar
Sin embargo, la incorporación de micro-organismos probióticos (de aquí en adelante "probióticos") en los alimentos implica grandes dificultades. Un primer objetivo es el de tener un número adecuado de cfu (unidad formadora de colonias) al día. Si la concentración de probióticos en el producto no excede un cierto valor umbral, el efecto favorable no se consigue. De ahí que partiendo de la observación de que una dosis es eficaz en el entorno de 10^{9} cfu por humano al día, y suponiendo que el consumidor tiene que tomarlas en su toma diaria, el objetivo será administrar esta cantidad de cfu en una a tres comidas.However, the incorporation of probiotic micro-organisms (hereafter "probiotics") in food involves great difficulties. A first objective is to have an adequate number of cfu (unit colony former) daily. If the concentration of probiotics in the product does not exceed a certain threshold value, the effect favorable is not achieved. Hence, based on the observation of that a dose is effective in the environment of 10 9 cfu per human at day, and assuming that the consumer has to take them in his shot daily, the goal will be to manage this amount of cfu in one to Three meals
Hasta ahora, el método ha consistido en utilizar probióticos que se han secado, por si solos o con una sustancia soporte. De ahí que después de su fermentación en un medio adecuado, normalmente los probióticos se concentran, por ejemplo por centrifugación o filtración, y luego se secan mediante un secado por pulverización, un secado en lecho fluidizado o un liofilizado. A partir del proceso de secado surge otro problema serio. Los probióticos sufren una pérdida sustancial del orden del 60, más frecuentemente del 90 al 99% de cfu dependiendo de la tecnología aplicada, a menos que se tomen medidas especiales. Todo esto quiere decir que estas etapas de secado son muy caras en energía. Pero el proceso de secado a alta temperatura tiene otros inconvenientes. Puede destruir o dañar los metabolitos que están presente en los propios probióticos o en el medio fermentado donde se cultivan. Dichos metabolitos pueden por tanto perder sus efectos favorables. El inconveniente de una etapa de concentración, es la pérdida de metabolitos que estaban presentes en el medio fermentado.So far, the method has been to use probiotics that have dried, by themselves or with a substance support. Hence, after fermentation in a suitable medium, normally probiotics are concentrated, for example by centrifugation or filtration, and then dried by drying spraying, a fluidized bed drying or a lyophilisate. TO From the drying process another serious problem arises. The Probiotics suffer a substantial loss of the order of 60, plus frequently from 90 to 99% of cfu depending on the technology applied, unless special measures are taken. All this wants To say that these drying stages are very expensive in energy. But High temperature drying process has other drawbacks. It can destroy or damage the metabolites that are present in the Probiotics themselves or in the fermented medium where they are grown. Such metabolites can therefore lose their favorable effects. The drawback of a concentration stage is the loss of metabolites that were present in the fermented medium.
El polvo obtenido mediante el secado se puede aplicar luego al producto alimenticio deseado. De acuerdo con el EP0862863 anteriormente citado, por ejemplo, los probióticos secos se mezclarán con una sustancia soporte líquida, que es aceite, agua o una mezcla proteínica. Luego esta sustancia se pulverizará en el producto alimenticio.The powder obtained by drying can be then apply to the desired food product. According to EP0862863 cited above, for example, dry probiotics they will be mixed with a liquid support substance, which is oil, water or a protein mixture. Then this substance will be sprayed in the food product.
Debido a la necesidad de un número relativamente elevado de cfu en una única comida y debido a las elevadas pérdidas durante el secado, resulta un problema tener un producto alimenticio con un número eficaz de cfu. Otro problema, también dirigido a las referencias anteriormente citadas, es la estabilidad a largo plazo de los probióticos en el producto alimenticio, es decir, el producto alimenticio con los probióticos tiene que ser estable a temperatura ambiente. Otra preocupación es la viabilidad de los probióticos en el estómago y el intestino. Los probióticos deben ser suficientemente resistentes al entorno ácido en el estómago y a los ácidos biliares para colonizar con éxito el intestino. Además, el producto alimenticio que consta de probióticos debe ser agradable para el consumidor. Existe la necesidad de aplicar probióticos a un producto alimenticio sin influir notablemente en sus propiedades organolépticas. Ciertamente es un problema el que aparezcan cambios mínimos o nulos en el sabor, aspecto y textura del producto acabado que contiene probióticos con respecto al mismo producto sin probióticos.Due to the need for a relatively number high cfu in a single meal and due to high losses during drying, it is a problem to have a food product with an effective number of cfu. Another problem, also aimed at references cited above, is long-term stability of probiotics in the food product, that is, the food product with probiotics has to be stable to room temperature. Another concern is the viability of probiotics in the stomach and intestine. Probiotics must be sufficiently resistant to the acidic environment in the stomach and to Bile acids to successfully colonize the intestine. Further, The food product consisting of probiotics must be Nice for the consumer. There is a need to apply probiotics to a food product without significantly influencing its organoleptic properties. It is certainly a problem that minimal or no changes appear in taste, appearance and texture of the finished product containing probiotics with respect thereto product without probiotics.
La presente invención se refiere a los problemas mencionados.The present invention relates to the problems mentioned.
Con esta finalidad, la presente invención aporta un producto consumible que comprende probióticos, en el que los probióticos se han aplicado recientemente al mismo.For this purpose, the present invention provides a consumable product comprising probiotics, in which the Probiotics have recently been applied to it.
En otro aspecto, la presente invención aporta un producto consumible que comprende metabolitos producidos por los probióticos, en el que los metabolitos se encuentran en un medio fermentado que se ha separado del probiótico cultivado en el mismo.In another aspect, the present invention provides a consumable product comprising metabolites produced by probiotics, in which metabolites are found in a medium fermented that has separated from the probiotic grown in the same.
Del mismo modo, el proceso para obtener un producto consumible que comprende probióticos, conforme a la presente invención, comprende la fabricación de una biomasa fresca de probióticos por fermentación en un medio líquido y aplicar directamente la biomasa fresca al producto consumible.Similarly, the process to obtain a consumable product comprising probiotics, according to the This invention comprises the manufacture of a fresh biomass of probiotics by fermentation in a liquid medium and apply directly fresh biomass to the consumable product.
Además, en un cuarto aspecto, el proceso para obtener un producto consumible que comprenda metabolitos producidos por probióticos, conforme a la presente invención, comprende el cultivo de probióticos en un medio líquido, separando el medio líquido de los probióticos y aplicando directamente el medio líquido al producto consumible.In addition, in a fourth aspect, the process for obtain a consumable product that comprises metabolites produced by probiotics, according to the present invention, comprises the culture of probiotics in a liquid medium, separating the medium liquid of the probiotics and directly applying the liquid medium to the consumable product.
Contrariamente a lo razonablemente esperado, se ha descubierto que la biomasa derivada de un proceso de fermentación se puede aplicar directamente a un producto consumible sin un secado a alta temperatura. De esta forma, se obtiene un producto consumible que contiene probióticos, que tiene una excelente estabilidad al almacenamiento y que tiene un aspecto y unas propiedades organolépticas similares al aspecto y a las propiedades organolépticas de un producto consumible similar que no contenga probióticos.Contrary to what is reasonably expected, it has discovered that biomass derived from a fermentation process It can be applied directly to a consumable product without a high temperature drying In this way, a product is obtained consumable that contains probiotics, which has an excellent storage stability and that looks and organoleptic properties similar to appearance and properties Organoleptic of a similar consumable product that does not contain probiotics
Además, el producto consumible, si se consume en la cantidad razonable o esperada, contiene una cantidad de cfu que es suficiente para lograr un efecto favorable.In addition, the consumable product, if consumed in the reasonable or expected amount, contains an amount of cfu that It is enough to achieve a favorable effect.
En toda la presente descripción, la expresión "producto consumible" equivale a un producto que es consumible por los humanos y/o animales como perros, gatos, por ejemplo.Throughout this description, the expression "consumable product" is equivalent to a product that is consumable by humans and / or animals such as dogs, cats, for example.
Con respecto a la presente invención, el término
"probióticos frescos" o "biomasa recién aplicada" hace
referencia a los probióticos que, tras el proceso de fermentación
no se secan, por ejemplo, mediante un secado por pulverización, un
secado en lecho fluidizado o un liofilizado. No obstante, el término
"probióticos frescos" no pretende ser entendido como la
biomasa que se aplica un cierto límite de tiempo al producto
consumible. Es posible almacenar "biomasa fresca" durante un
cierto periodo de tiempo sin pérdida alguna. Si la biomasa también
se puede congelar durante cierto tiempo y descongelar sin una
pérdida sustancial, se considera todavía como fresca. También es
posible añadir a la "biomasa fresca" agentes protectores
conocidos por incrementar la supervivencia de, por ejemplo, las
bacterias de ácido láctico durante el proceso de aplicación, por
ejemplo durante el pulverizado al producto consumible, durante el
almacenamiento del producto y también durante el paso del producto
consumible a través de los tractos digestivos. La WO 98/10666
menciona algunas de las sustancias con dichos efectos y también
aporta una lista extensa de modelos anteriores relacionados con la
mejora en la supervivencia de los microorganismos probióticos. A
pesar de dichos aditivos,
la biomasa se puede considerar como
"biomasa fresca", porque no existe un proceso de secado a alta
temperatura.With respect to the present invention, the term "fresh probiotics" or "freshly applied biomass" refers to probiotics which, after the fermentation process, do not dry out, for example, by spray drying, fluidized bed drying or a lyophilisate However, the term "fresh probiotics" is not intended to be understood as biomass that applies a certain time limit to the consumable product. It is possible to store "fresh biomass" for a certain period of time without any loss. If the biomass can also be frozen for a certain time and thawed without a substantial loss, it is still considered fresh. It is also possible to add to the "fresh biomass" protective agents known to increase the survival of, for example, lactic acid bacteria during the application process, for example during spraying to the consumable product, during product storage and also during the passage of the consumable product through the digestive tracts. WO 98/10666 mentions some of the substances with such effects and also provides an extensive list of previous models related to the improvement in the survival of probiotic microorganisms. Despite these additives,
Biomass can be considered as "fresh biomass", because there is no high temperature drying process.
Para el objetivo de la presente invención, el término "probióticos", "microorganismo probiótico" o biomasa probiótica se entiende que incluye cualquier microorganismo, contenido celular o metabolito de los microorganismos que tienen efectos favorables para su huésped. Por lo tanto, se pueden incluir levaduras, hongos y bacterias. La EP 0862863 enumera algunos ejemplos de probióticos conocidos en la actualidad. Por ejemplo, se pueden utilizar cepas de Lactobacillus johnsonii (CNCM I-1225), Bifidobacterium lactis (DSM20215), Streptococcus thermophilus (TH4, Chr. Hansen, DK), o bien Lactobacillus paracasei (CNCM I-2116). Christian Hansen BioSystems A/S (CHL), 10-12 Boge Allé, P.O Box 407, DK-2970 Horsholm, Denmark, ofrece una selección de las diferentes cepas probióticas.For the purpose of the present invention, the term "probiotics", "probiotic microorganism" or probiotic biomass is understood to include any microorganism, cellular content or metabolite of microorganisms that have favorable effects for their host. Therefore, yeasts, fungi and bacteria can be included. EP 0862863 lists some examples of probiotics known today. For example, strains of Lactobacillus johnsonii (CNCM I-1225), Bifidobacterium lactis (DSM20215), Streptococcus thermophilus (TH4, Chr. Hansen, DK), or Lactobacillus paracasei (CNCM I-2116) can be used. Christian Hansen BioSystems A / S (CHL), 10-12 Boge Allé, PO Box 407, DK-2970 Horsholm, Denmark, offers a selection of the different probiotic strains.
Para la finalidad de la presente invención, el término "probióticos" pretende incluir además los metabolitos generados por los microorganismos durante un proceso de fermentación, si no se indican por separado. Estos metabolitos pueden ser liberados al medio de fermentación o bien pueden ser almacenados en el microorganismo. Puede ocurrir también que dichos metabolitos sean responsables de parte o de la totalidad de los efectos favorables de un microorganismo probiótico en particular.For the purpose of the present invention, the term "probiotics" is intended to also include metabolites generated by microorganisms during a process of fermentation, if not indicated separately. These metabolites they can be released to the fermentation medium or they can be stored in the microorganism. It may also happen that said metabolites are responsible for part or all of the favorable effects of a probiotic microorganism in particular.
Sorprendentemente, se ha demostrado que los probióticos no necesitan estar necesariamente concentrados y no es preciso que se sequen a altas temperaturas sino que se pueden aplicar directamente al producto alimenticio. Por lo tanto la presente invención tiene también la gran ventaja de que no existen un tratamiento a alta temperatura que pueda dañar o incluso destruir la efectividad de los metabolitos producidos por los probióticos. El hecho de que se pueda omitir la etapa de la concentración tiene la ventaja de que los metabolitos eficaces presente en el medio fermentado no se pierden, por ejemplo, por filtración.Surprisingly, it has been shown that Probiotics do not necessarily need to be concentrated and it is not they need to be dried at high temperatures but can be Apply directly to the food product. Therefore, the The present invention also has the great advantage that there are no a high temperature treatment that can damage or even destroy the effectiveness of the metabolites produced by the probiotics The fact that the stage of the concentration has the advantage that effective metabolites present in the fermented medium are not lost, for example, by filtration.
Por consiguiente, se ha observado que es realmente posible lograr un producto consumible que contenga probióticos que tenga una estabilidad excelente al almacenamiento y que tenga un aspecto y unas propiedades organolépticas similares al aspecto y a las propiedades organolépticas de un producto consumible similar que no contenga probióticos. Contrariamente a todas las expectativas, se ha observado que la aplicación directa y nueva de biomasa probiótica a un producto consumible no causa o bien solamente provoca cambios mínimos en el aroma, aspecto y textura del producto acabado que contiene probióticos.Therefore, it has been observed that it is really possible to achieve a consumable product that contains probiotics that have excellent storage stability and that has an appearance and organoleptic properties similar to appearance and organoleptic properties of a consumable product similar that does not contain probiotics. Contrary to all expectations, it has been observed that the direct and new application of probiotic biomass to a consumable product does not cause either only causes minimal changes in aroma, appearance and texture of the finished product that contains probiotics.
Contrariamente al pensamiento corriente en la tecnología de los alimentos-probióticos, también es posible pulverizar la biomasa nueva sobre un producto alimenticio seco, por ejemplo, unos cereales para el desayuno, sin necesidad de un proceso de secado a alta temperatura antes, durante o después de la aplicación de la biomasa. En cuanto al significado de la presente invención, solamente se tiene que pulverizar una cantidad relativamente pequeña de líquido o de emulsión procedente de un proceso de fermentación sobre el producto alimenticio seco. Preferiblemente, la fermentación continúa hasta que se obtiene una concentración relativamente alta de cfu. El producto alimenticio absorberá la mayor parte del agua sin un incremento sustancial de la actividad del agua del producto alimenticio respectivo. Por este motivo, tampoco es necesario someter al producto consumible que contiene los probióticos a otro proceso de secado o bien a otro tratamiento, tal como sugiere la literatura. Hasta la fecha siempre ha existido el problema de añadir muchos probióticos y luego secar el producto final. Solamente pocos cfu sobreviven normalmente al proceso de secado. Para compensar esta pérdida, se tenía que aplicar una gran cantidad de probióticos, por ejemplo, en un soporte como agua. Esto en cambio requería la presencia de un proceso de secado, especialmente en un producto que se pretendía que se secara al final. En contraste con esto, la presente invención evita un proceso de secado destructivo y por tanto ya no es necesario aplicar probióticos en elevada cantidad al producto consumible. Como consecuencia de ello, una cantidad relativamente pequeña de mezcla o de líquido del fermentador que comprende probióticos se tiene que aplicar al producto consumible. Naturalmente, también conforme a la presente invención, se tendrá que aplicar una cantidad significativamente inferior de probióticos al producto consumible para compensar las pérdidas inevitables durante el almacenamiento así como el paso a través del tracto digestivo del producto.Contrary to current thinking in the food-probiotic technology, it is also possible to spray new biomass on a food product dry, for example, some breakfast cereals, without the need for a high temperature drying process before, during or after The application of biomass. As for the meaning of the In the present invention, only a quantity has to be sprayed relatively small liquid or emulsion from a fermentation process on the dry food product. Preferably, the fermentation continues until a relatively high concentration of cfu. Food product it will absorb most of the water without a substantial increase in water activity of the respective food product. For this reason, it is also not necessary to submit the consumable product that contains probiotics to another drying process or to another treatment, as the literature suggests. To date always There has been the problem of adding many probiotics and then drying the final product Only few cfu normally survive the drying process. To compensate for this loss, you had to apply a large number of probiotics, for example, on a support like water. This instead required the presence of a process of drying, especially in a product that was intended to dry in the end. In contrast to this, the present invention avoids a destructive drying process and therefore is no longer necessary apply probiotics in high quantity to the consumable product. How as a result, a relatively small amount of mixture or of fermenter liquid comprising probiotics you have to Apply to the consumable product. Naturally, also according to the present invention, an amount will have to be applied significantly lower from probiotics to the consumable product to compensate for inevitable losses during storage as well as the passage through the digestive tract of the product.
Sorprendentemente, los estudios de caducidad han revelado que la viabilidad de los probióticos en los productos alimenticios obtenidos por aplicación directa de la biomasa es muy alta. Dependiendo del organismo probiótico usado, los probióticos retienen su actividad hasta 365 días sin una pérdida sustancial.Surprisingly, expiration studies have revealed that the viability of probiotics in products food obtained by direct application of biomass is very high. Depending on the probiotic organism used, the probiotics they retain their activity up to 365 days without a substantial loss.
Además, se ha observado que los probióticos aplicados a un producto alimenticio muestran, dependiendo de las especies y cepas del organismo probiótico, suficiente resistencia al entorno del estómago y a los ácidos gástricos y biliares (pruebas in vitro).In addition, it has been observed that probiotics applied to a food product show, depending on the species and strains of the probiotic organism, sufficient resistance to the stomach environment and to gastric and bile acids ( in vitro tests).
De acuerdo con el producto consumible aportado por la presente invención, al menos se puede añadir un agente protector a los probióticos antes de su aplicación al producto consumible, por ejemplo.According to the consumable product provided by the present invention, at least one agent can be added probiotic protector before application to the product consumable, for example.
Los probióticos conforme a la presente invención se pueden obtener por fermentación y se pueden almacenar después de la fermentación y antes de la aplicación al producto consumible durante un tiempo y a una temperatura que impida la pérdida sustancial de cfu de probiótico. Resulta evidente que la biomasa, una vez finalizada la fermentación o el cultivo, se puede almacenar durante cierto tiempo. En los experimentos, la biomasa de diferentes probióticos se almacenaba durante 4 días a 5ºC sin pérdida detectable. Además, la resistencia al ácido gástrico o biliar (pruebas in vitro) no se veía influida por el periodo de almacenamiento.Probiotics according to the present invention can be obtained by fermentation and can be stored after fermentation and before application to the consumable product for a time and at a temperature that prevents the substantial loss of probiotic cfu. It is evident that the biomass, once the fermentation or cultivation is finished, can be stored for a certain time. In the experiments, the biomass of different probiotics was stored for 4 days at 5 ° C with no detectable loss. In addition, resistance to gastric or bile acid ( in vitro tests) was not influenced by the storage period.
Para realizar la invención, los probióticos pueden ser fermentados hasta una concentración final de 10^{6} a 5x10^{10}, preferiblemente 10^{7} a 3x10^{10}, más preferiblemente 1,5x10^{7} a 10^{10}, incluso más preferiblemente 10^{8} a 9,5x10^{9}, en particular 2 a 9 x 10^{9} cfu por ml de medio fermentado, por ejemplo.To carry out the invention, probiotics they can be fermented to a final concentration of 10 6 a 5x10 10, preferably 10 7 to 3x10 10, more preferably 1.5x10 7 to 10 10, even more preferably 10 8 to 9.5x10 9, in particular 2 to 9 x 10 9 cfu per ml of fermented medium, for example.
Es posible que los probióticos aplicados al producto alimenticio s concentren en una concentración final de 10^{7} a 10^{12}, preferiblemente 10^{8} a 5x10^{11}, más preferiblemente 1,5x10^{8} a 10^{11}, incluso más preferiblemente 10^{9} a 5x10^{10} cfu por ml de medio fermentado, por ejemplo.It is possible that probiotics applied to food product s concentrate on a final concentration of 10 7 to 10 12, preferably 10 8 to 5x10 11, more preferably 1.5x108 to 1011, even more preferably 10 9 to 5x10 10 cfu per ml of medium fermented, for example.
Para la fermentación se puede utilizar cualquier microorganismo probiótico.Any fermentation can be used. probiotic microorganism
Según la invención, se puede seleccionar una cepa o cepas probióticas de un grupo que comprende levaduras, preferiblemente del género Saccharomyces, hongos, preferiblemente del género Aspergillus, bacterias, preferiblemente del género Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus, Enterococcus, y una mezcla de todo ello. Por ejemplo, se pueden utilizar las cepas de las especies Lactobacillus johnsonii, Bifidobacterium lactis, Streptococcus thermophilus, o bien, Lactobacillus paracasei. Por ejemplo, si se tienen que fabricar probióticos bacterianos se deberán seleccionar cepas del género Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus, Enterococcus, Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium, Melissococcus, Propionibacterium, Lactococcus, Staphylococcus, Peptostreptococcus, Bacillus, Pediococcus, Micrococcus, Leuconostoc, Weissella, Aerococcus, Oenococcus.According to the invention, a probiotic strain or strains can be selected from a group comprising yeasts, preferably from the genus Saccharomyces , fungi, preferably from the genus Aspergillus , bacteria, preferably from the genus Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus, Enterococcus , and a mixture of all . For example, the strains of the species Lactobacillus johnsonii, Bifidobacterium lactis, Streptococcus thermophilus , or Lactobacillus paracasei can be used . For example, if bacterial probiotics have to be manufactured, strains of the genus Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus, Enterococcus, Bacteroides, Clostridium, Fusobacterium, Melissococcus, Propionibacterium, Lactococcus, Staphylococcus, Peptostreccus, Leptiococcus, Leptiococcus, Leptiococcus, Lept. Aerococcus, Oenococcus .
De ahí que, en un entorno de la presente invención, se pueda seleccionar una cepa o cepas probióticas de un grupo formado por la Lactobacillus johnsonii (I-1225 CNCM), Bifidobacterium lactis (DSM20215), Streptococcus thermophilus (TH4, Chr. Hansen, DK), mezclas de las mismas y una mezcla que también comprenda otros microorganismos probióticos.Hence, in an environment of the present invention, a strain or probiotic strains can be selected from a group consisting of Lactobacillus johnsonii (I-1225 CNCM), Bifidobacterium lactis (DSM20215), Streptococcus thermophilus (TH4, Chr. Hansen, DK), mixtures thereof and a mixture that also comprises other probiotic microorganisms.
Según la presente invención, el porcentaje de biomasa nueva de probióticos que se añade al producto consumible puede ser del 0,05% al 4%, preferiblemente del 0,1 al 1,5%, más preferiblemente del 0,2 al 1% en peso de producto consumible, por ejemplo.According to the present invention, the percentage of new probiotic biomass that is added to the consumable product it can be from 0.05% to 4%, preferably from 0.1 to 1.5%, more preferably 0.2 to 1% by weight of consumable product, per example.
De acuerdo con todo ello, la concentración final de los probióticos aplicada al producto consumible puede ser de 10^{6} a 10^{9}, más preferiblemente de 10^{7}a 10^{8}, más preferiblemente de 2 a 8x10^{7} cfu/g con respecto al peso total del producto consumible.According to all this, the final concentration of the probiotics applied to the consumable product can be of 10 6 to 10 9, more preferably 10 7 to 10 8, more preferably from 2 to 8x10 7 cfu / g with respect to the total weight of the consumable product.
Conforme al producto consumible que comprende metabolitos producidos por los probióticos, el medio fermentado puede haber sido aplicado directamente al producto consumible.According to the consumable product that includes metabolites produced by probiotics, the fermented medium It may have been applied directly to the consumable product.
De acuerdo con el proceso de la presente invención, la fermentación se puede mantener en marcha hasta una concentración final de 10^{6} a 5x10^{10}, preferiblemente de 10^{7} a 3x10^{10}, más preferiblemente de 1,5x10^{7} a 10^{10}, incluso más preferiblemente de 10^{8} a 9,5x10^{9}, en particular de 2 a 9x10^{9} cfu probióticos por ml de medio fermentado.In accordance with the process of this invention, the fermentation can be kept running until a final concentration of 10 6 to 5x10 10, preferably of 10 7 to 3x10 10, more preferably from 1.5x10 7 to 10 10, even more preferably from 10 8 to 9.5x10 9, in particular from 2 to 9x10 9 cfu probiotics per ml of medium fermented
Conforme a la concentración deseada y a la actividad del agua (Aw) del producto final consumible, el proceso de la presente invención puede implicar antes de aplicar la biomasa nueva a un producto consumible, la concentración de la biomasa hasta una concentración final de 10^{7} a 10^{12}, preferiblemente de 10^{8} a 5x10^{11}, más preferiblemente de 1,5x 10^{8} a 10^{11}, incluso más preferiblemente de 10^{9} a 5x10^{10} cfu por ml de medio fermentado, por ejemplo.According to the desired concentration and the Water activity (Aw) of the final consumable product, the process of the present invention may involve before applying the biomass new to a consumable product, the biomass concentration to a final concentration of 10 7 to 10 12, preferably from 10 8 to 5x10 11, more preferably from 1.5 x 10 8 to 10 11, even more preferably from 10 9 to 5x10 10 cfu per ml of fermented medium, for example.
Por ejemplo, la Aw del producto consumible al principio y/o durante el periodo de caducidad es inferior a 0,5. Preferiblemente, es inferior a 0,4 y más preferiblemente inferior a 0,3. Más preferiblemente, la Aw del producto consumible es inferior a 0,2. Por ejemplo, la Aw se sitúa en el rango de 0,005 a 0,3, o bien de 0,01 a 0,15 durante el periodo de caducidad del producto consumible.For example, the Aw of the consumable product at principle and / or during the expiration period is less than 0.5. Preferably, it is less than 0.4 and more preferably less than 0.3. More preferably, the Aw of the consumable product is lower to 0.2. For example, Aw is in the range of 0.005 to 0.3, or either 0.01 to 0.15 during the product expiration period consumable.
La Aw que tendrá el producto dependerá de la capacidad de la cepa para sobrevivir las condiciones específicas, que variarán de cepa a cepa.The Aw the product will have will depend on the ability of the strain to survive specific conditions, which will vary from strain to strain.
Preferiblemente, el producto consumible tiene un envasado que limita sustancialmente la absorción de agua del entorno. De ahí que el índice de permeabilidad del envasado del producto consumible se sitúe preferiblemente por debajo de 4,2 ml/m2d, preferiblemente por debajo de 3,8 ml/m2d, más preferiblemente por debajo de 3 g/m2d. El experto es capaz de seleccionar el material con dichas propiedades. Por ejemplo, el envasado puede constar de polietileno (LDPE) de baja densidad orientado reticulado co-extruido. Las bolsas se sellarán herméticamente, por ejemplo mediante calor.Preferably, the consumable product has a packaging that substantially limits the water absorption of environment. Hence the permeability index of the packaging of the consumable product is preferably below 4.2 ml / m2d, preferably below 3.8 ml / m2d, more preferably below 3 g / m2d. The expert is able to Select the material with these properties. For example, him Packaging may consist of low density polyethylene (LDPE) co-extruded reticulated oriented. The bags are they will seal tightly, for example by heat.
El objetivo del envasado mencionado es el de mantener los valores Aw preferidos durante el periodo de estabilidad del producto consumible. El periodo de estabilidad del producto puede ser de hasta 6 meses, preferiblemente de hasta 12 meses, más preferiblemente de hasta 18 meses y más preferiblemente de hasta dos años.The purpose of the aforementioned packaging is that of maintain preferred Aw values during the stability period of the consumable product. The product stability period it can be up to 6 months, preferably up to 12 months, more preferably up to 18 months and more preferably up to two months years.
En otra configuración, el proceso puede comprender además después de la fermentación, el almacenamiento de biomasa nueva durante un tiempo y a una temperatura que impida la pérdida sustancia de cfu probiótico, por ejemplo.In another configuration, the process can further understand after fermentation, the storage of new biomass for a while and at a temperature that prevents substance loss of probiotic cfu, for example.
En otra configuración de la presente invención el proceso comprenderá además, antes, durante o después de la fabricación de biomasa nueva de probióticos, la adición de al menos un agente protector al medio de fermentación o a la masa probiótica nueva, por ejemplo.In another configuration of the present invention the process will also include, before, during or after the manufacture of new probiotic biomass, adding at least a protective agent to the fermentation medium or probiotic mass New, for example.
El proceso de fermentación conforme a la presente invención puede funcionar durante 6 horas hasta 3 días, preferiblemente de 6 a 20 horas, más preferiblemente de 7 a 17 horas, dependiendo de la cepa de microorganismo probiótico utilizada, por ejemplo.The fermentation process according to the Present invention can work for 6 hours up to 3 days, preferably from 6 to 20 hours, more preferably from 7 to 17 hours, depending on the strain of probiotic microorganism used, for example.
Según el proceso conforme a la presente invención, la misma cepa o cepas se pueden utilizar tal como se ha descrito antes con respecto a los probióticos que comprenden producto consumible, por ejemplo.According to the process according to this invention, the same strain or strains can be used as has been described above with respect to probiotics that comprise consumable product, for example.
Es posible que el porcentaje de biomasa nueva de probióticos añadidos al producto consumible pueda ser del 0,05 al 4%, preferiblemente del 0,1 al 1,5%, más preferiblemente del 0,2 al 1% en peso de producto consumible, por ejemplo.It is possible that the percentage of new biomass of probiotics added to the consumable product can be from 0.05 to 4%, preferably 0.1 to 1.5%, more preferably 0.2 to 1% by weight of consumable product, for example.
Por lo tanto, según una configuración de la presente invención, la concentración final de probióticos aplicada al producto consumible puede ser de 10^{6} a 10^{9}, más preferiblemente de 10^{7}a 10^{8}, más preferiblemente de 2 a 8x10^{7}, en particular de 5x10^{7} cfu/g con respecto al peso total del producto consumible.Therefore, according to a configuration of the present invention, the final concentration of probiotics applied to the consumable product can be from 10 6 to 10 9, more preferably from 10 7 to 10 8, more preferably from 2 to 8x10 7, in particular 5x10 7 cfu / g with respect to weight Total consumable product.
Es posible, aunque no necesario, que la biomasa recién obtenida del proceso de fermentación se encuentre concentrada. Por ejemplo, dicha concentración se puede alcanzar por centrifugación o filtración. El nivel de concentración permite dosificar con exactitud la cantidad de cfu por gramo de producto consumible. La concentración puede tener en cuenta también la pérdida posterior de cfu durante el periodo de estabilidad del producto alimenticio o durante el paso por el tracto digestivo. Un proceso de secado a alta temperatura se podrá evitar al pulverizar o bien aplicar de alguna forma biomasa no concentrada o relativamente poco concentrada al producto consumible, de manera que la actividad del agua de todo el producto no aumente de forma decisiva. No se necesita un proceso de secado a alta temperatura debido a la "sequedad absortiva"; el producto alimenticio ya seco absorbe rápidamente el agua acompañada y contenida en la biomasa probiótica. La exposición a temperatura ambiente durante el proceso de aplicación es suficiente para impedir un aumento decisivo de la actividad del agua del producto final.It is possible, although not necessary, that the biomass newly obtained from the fermentation process is concentrated. For example, said concentration can be achieved by centrifugation or filtration. The concentration level allows accurately dose the amount of cfu per gram of product consumable. The concentration may also take into account the subsequent loss of cfu during the stability period of the food product or during the passage through the digestive tract. A High temperature drying process can be avoided by spraying either apply some unconcentrated biomass or relatively little concentrated to the consumable product, so that the water activity of the entire product does not increase decisive A high temperature drying process is not necessary due to "absorptive dryness"; the food product already dry quickly absorbs water accompanied and contained in the probiotic biomass Exposure at room temperature during application process is enough to prevent an increase decisive of the water activity of the final product.
En caso de que la biomasa se concentrara, no será preciso descartar el sobrenadante obtenido. El medio después de la fermentación con probióticos contiene normalmente metabolitos que tienen efectos ventajosos similares que los propios probióticos. Por lo tanto, el medio de sobrenadante puede, tras la concentración de la biomasa, ser aplicado también a un producto consumible.In case the biomass is concentrated, no It will be necessary to discard the obtained supernatant. The middle after Fermentation with probiotics normally contains metabolites which have similar advantageous effects as their own probiotics Therefore, the supernatant medium can, after biomass concentration, also be applied to a product consumable.
Para llevar a cabo el proceso conforme a la presente invención, se puede utilizar todo tipo de productos consumibles de partida. Alimentos y bebidas para seres humano así como alimentos para animales pueden verse enriquecidos por los probióticos. Naturalmente, también pueden aparecer fórmulas nutricionales acompañando a los probióticos. Existe una elevada variedad de fórmulas nutricionales, por ejemplo, para deportistas o atletas, para gente con necesidades nutricionales especiales como las personas alérgicas a ciertos alimentos naturales o bien personas con trastornos gastrointestinales. Por ejemplo, con los probióticos se suministran también chocolate u otros productos dulces. De hecho, todo tipo de producto alimenticio extruido, o cocinado o preparado de alguna otra manera puede acompañar a los probióticos. Por ejemplo, los productos secos se pueden utilizar como alimento liofilizado para animales u otro producto alimenticio seco, como por ejemplo, polvos, harina, leche o polvo o copos de cereales. Los probióticos se pueden utilizar para ser aplicados a toda clase de cereales de desayuno, por ejemplo. También componentes, ingredientes o materiales de partida de productos consumibles pueden ser pulverizados con los probióticos. Por ejemplo, son adecuadas las partículas de una o más bases de cereales cocinadas que comprenden materiales amiláceos. Las partículas de bases de cereales cocinadas pueden ser cualquiera de las conocidas por el experto como los cereales en copos, los cereales típicos del desayuno, los cereales extruidos, cereales laminados, cereales inflados en el horno, copos y/o cereales extruidos cocinados, cereales expandidos extruidos, cereales de desayuno horneados, galletas tipo copo comprimido, por ejemplo. Los copos de cereales se pueden preparar cociendo los granos de cereales con un licor, formando comprimidos de la masa cocinada así obtenida, laminando, tostando y probablemente revistiéndolos con azúcar, por ejemplo.To carry out the process according to the present invention, all kinds of products can be used starting consumables. Food and drinks for humans as well how animal feed can be enriched by probiotics Naturally, formulas may also appear Nutritional accompanying probiotics. There is a high variety of nutritional formulas, for example, for athletes or athletes, for people with special nutritional needs like people allergic to certain natural foods or people with gastrointestinal disorders. For example, with Probiotics are also supplied chocolate or other products sweet. In fact, all kinds of extruded foodstuff, or cooked or prepared in some other way can accompany the probiotics For example, dry products can be used as freeze-dried food for animals or other foodstuff dry, such as powders, flour, milk or powder or flakes of cereals. Probiotics can be used to be applied to All kinds of breakfast cereals, for example. Too components, ingredients or starting materials of products Consumables can be sprayed with probiotics. By For example, particles of one or more bases of cooked cereals comprising starchy materials. The cooked cereal base particles can be any of those known by the expert as flaked cereals, Typical breakfast cereals, extruded cereals, cereals rolled, baked cereals, flakes and / or cereals cooked extrudates, extruded expanded cereals, cereals Baked breakfast, compressed flake cookies, for example. The cereal flakes can be prepared by baking cereal grains with a liquor, forming tablets of cooked dough as well obtained, rolling, roasting and probably coating them with sugar, for example.
La producción de biomasa probiótica es un proceso que es bien conocido. En general, se utilizan depósitos o unidades de fermentación especialmente equipadas. Aunque, en principio incluso un depósito estéril que comprende un medio puede ser adecuado para cultivar microorganismos. Según las preferencias particulares de una cierta cepa probiótica, se elige la composición del medio. Una composición del medio óptima para una cepa probiótica en particular acompaña en general a los organismos de partida probióticos del proveedor. Una vez completada la fermentación, la biomasa puede ser aplicada directamente al producto consumible. También es posible almacenarlo durante cierto tiempo sin alterar su adaptabilidad para ser aplicado a un producto consumible. Especialmente si se precisa de un transporte al lugar de producción, la biomasa probiótica se puede congelar de forma temporal para impedir la pérdida de cfu probiótico.The production of probiotic biomass is a process that is well known. In general, deposits or specially equipped fermentation units. Although principle even a sterile reservoir comprising a means can Be suitable for growing microorganisms. According to preferences particular of a certain probiotic strain, the composition is chosen medium. An optimal medium composition for a probiotic strain in particular it accompanies the starting organizations in general Provider probiotics. Once the fermentation is complete, the Biomass can be applied directly to the consumable product. It is also possible to store it for a certain time without altering its adaptability to be applied to a consumable product. Especially if a transport to the place of production, probiotic biomass can be frozen in a way temporary to prevent the loss of probiotic cfu.
Antes de aplicar la biomasa a un producto consumible, la biomasa se puede concentrar. La etapa de concentración, aunque no es obligatoria, puede ser apropiada si incluso se tiene que evitar un ligero aumento del contenido de agua del producto final. Por ejemplo, se lleva a cabo una concentración si la concentración final de probiótico en el producto tiene que ser especialmente elevada, tanto si se trata de una comida pequeña, única de producto consumible que comprende un número suficiente de cfu, como si es por otros motivos. El proceso de concentración es también bien conocido. En general, el método de elección es la filtración o la centrifugación.Before applying biomass to a product consumable, the biomass can be concentrated. The stage of concentration, although not mandatory, may be appropriate if even a slight increase in water content has to be avoided of the final product. For example, a concentration is carried out if the final concentration of probiotic in the product has to be especially high, whether it's a small meal, single consumable product comprising a sufficient number of cfu, as if it is for other reasons. The concentration process is also well known. In general, the method of choice is the filtration or centrifugation.
Finalmente, la biomasa probiótica, concentrada o no, se aplicará al producto consumible. Esta aplicación se puede llevar a cabo según las reglas generales del revestimiento de los productos alimenticios. Por ejemplo, la aplicación de biomasa se puede realizar a medida que el producto es transportado en un transportador o, de forma alternativa, en un tambor de revestimiento. En el diseño del sistema pulverizador existen varias opciones, desde un tubo plisado hasta un disco giratorio. Algunos productos pueden ser apropiados para un tratamiento en un tambor de revestimiento, por ejemplo, en un tambor giratorio. El tambor de revestimiento puede servir tanto como mezclador como mecanismo para exponer el cereal al pulverizador. La biomasa puede ser pulverizada en la parte superior de los cereales que giran usando boquillas de pulverización de dos fases (aire/líquido) de tipo comercial. En general, para los productos secos como los cereales del desayuno, por ejemplo, se puede utilizar el mismo sistema pulverizador que para el revestimiento con una solución a base de vitaminas. Estas técnicas son bien conocidas.Finally, probiotic biomass, concentrated or No, it will apply to the consumable product. This application can be carry out according to the general rules of the coating of food products. For example, the application of biomass is can perform as the product is transported in a conveyor or, alternatively, in a drum coating. In the design of the spray system there are several options, from a pleated tube to a rotating disk. Some products may be appropriate for treatment in a drum coating, for example, in a rotating drum. The drum of coating can serve both as a mixer and as a mechanism for expose the cereal to the sprayer. The biomass can be pulverized on top of the cereals that rotate using nozzles Commercial two-phase (air / liquid) spray. In general, for dry products such as breakfast cereals, for example, you can use the same spray system that for coating with a solution based on vitamins. These Techniques are well known.
Dependiendo de las particularidades y preferencias, el producto alimenticio que ahora comprende probióticos se puede exponer a alta temperatura o a temperatura ambiental, de manera que no se produzca una pérdida sustancial de cfu. Naturalmente, pueden producirse otros tratamientos adicionales del producto consumible dependiendo del producto final o del objetivo del producto consumible. Un ejemplo de ello sería la aireación del producto final con un gas inerte o con mezclas de gas como N_{2} ó N_{2}/CO_{2}.Depending on the particularities and preferences, the food product that you now understand Probiotics can be exposed to high temperature or temperature environmental, so that there is no substantial loss of cfu Naturally, other additional treatments may occur. of the consumable product depending on the final product or the target of the consumable product. An example would be the aeration of the final product with an inert gas or with gas mixtures as N 2 or N 2 / CO 2.
El proceso y el producto conforme a la presente invención se han descrito con gran detalle en los ejemplos que se muestran a continuación.The process and the product in accordance with this invention have been described in great detail in the examples that are show below.
Las cepas utilizadas para los ejemplos son las siguientes:The strains used for the examples are the following:
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- Bifidibacterium lactis*: DSM20215 (German Culture Collection) Bifidibacterium lactis *: DSM20215 (German Culture Collection)
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- Streptococcus thermophilus (TH4)* Streptococcus thermophilus (TH4) *
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- Lactobacillus johnsonii: I-1225 (CNCM) Lactobacillus johnsonii : I-1225 (CNCM)
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- Lactobacillus paracasei: I-2116 (CNCM) Lactobacillus paracasei : I-2116 (CNCM)
* obtenidas de Christian Hansen BioSystems A/S (CHL), 10-12 Boge ALlé, P.O. Box 405, DK 2970 Horsholm, Denmark.* obtained from Christian Hansen BioSystems A / S (CHL), 10-12 Boge ALlé, P.O. Box 405, DK 2970 Horsholm, Denmark
Para los experimentos, se utilizaban un producto a base de cereales para niños, copos de cereales de desayuno, snack de cereales/leche y cereales en polvo para bebés.For the experiments, a product was used Cereal based for children, breakfast cereal flakes, snack of cereals / milk and powdered cereals for babies.
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Ejemplo 1Example one
La Bifidobacterium lactis se fermentaba y luego concentraba por centrifugación. Los detalles de la fermentación se indican en las tablas 2 y 3 siguientes. Se añadían agentes protectores estándar al concentrado. Se añadía esta biomasa a escala experimental a diferentes productos a base de cereales disponibles en el comercio (ver tabla 1). Bifidobacterium lactis was fermented and then concentrated by centrifugation. The details of the fermentation are indicated in tables 2 and 3 below. Standard protective agents were added to the concentrate. This biomass was added on an experimental scale to different commercially available cereal products (see table 1).
Para la aplicación a escala experimental se colocaban 1,5-2 kg de cereales en un tambor giratorio y la biomasa se pulverizaba por encima de los cereales giratorios usando un pulverizador con una boquilla bifásica (aire/líquido). La pistola que contiene la biomasa se pesaba cuidadosamente antes y después del pulverizado para calcular la cantidad exacta de biomasa aplicada al cereal. En todos los casos se añadía un 0,5% de la cantidad total de cereales.For experimental scale application, placed 1.5-2 kg of cereals in a drum rotating and the biomass was pulverized above the cereals rotating using a sprayer with a two-phase nozzle (air / liquid). The gun containing the biomass was weighed carefully before and after spraying to calculate the exact amount of biomass applied to cereal. In all cases it added 0.5% of the total amount of cereals.
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Como muestra la tabla 4, se obtienen elevados recuentos viables por g de producto consumible. La actividad del agua se mantiene en un margen aceptable para fines de almacenamiento.As Table 4 shows, high rates are obtained. viable counts per g of consumable product. The activity of water is maintained in an acceptable range for the purpose of storage.
Ejemplo 2Example 2
Se fermentaban diferentes cepas (detalles de la fermentación indicados en las tablas 5 a 12) y luego se concentraban por centrifugación. Se añadían agentes protectores estándar al concentrado. Se añadía un 0,5% por peso total de producto de las distintas biomasas en una escala experimental a un producto de cereales para niños disponible en el comercio (Mismo método que en el ejemplo 1).Different strains were fermented (details of the fermentation indicated in tables 5 to 12) and then concentrated by centrifugation. Standard protective agents were added to the concentrated. 0.5% was added by total product weight of the different biomass on an experimental scale to a product of commercially available cereal for children (Same method as in example 1).
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Es decir, otras cepas aplicadas al producto de cereales para niños revelaban suficientes recuentos viables y una actividad del agua final baja.That is, other strains applied to the product of cereals for children revealed enough viable counts and a low end water activity.
Ejemplo 3Example 3
Lactobacillus johnsonii se fermentaba y luego concentraba por centrifugación (para detalles sobre la fermentación ver las tablas 14 y 15). Se añadían agentes protectores estándar al concentrado. La biomasa se añadía a escala piloto a un producto de cereales para niños. Lactobacillus johnsonii was fermented and then concentrated by centrifugation (for details on fermentation see tables 14 and 15). Standard protective agents were added to the concentrate. Biomass was added on a pilot scale to a cereal product for children.
Para la aplicación a escala piloto se introducían 100 kg/h de producto a base de cereales para niños en un tambor. 0,5 kg/h de biomasa de Lactobacillus johnsonii se pulverizaban sobre la parte superior de los cereales con una serie de boquillas bifásicas (aire/líquido).For the pilot scale application, 100 kg / h of cereal products for children were introduced into a drum. 0.5 kg / h of Lactobacillus johnsonii biomass was sprayed on top of the cereals with a series of two-phase nozzles (air / liquid).
El producto acabado se envasaba en bolsas o fundas de aluminio y se sometía a un estudio del periodo de validez a 20ºC (resultados ver tabla 16).The finished product was packaged in bags or aluminum covers and underwent a study of the period of validity at 20 ° C (results see table 16).
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El estudio del periodo de validez revela que el almacenamiento de hasta un año no reduce de un modo sustancial el número de cfu en el producto.The study of the period of validity reveals that the storage of up to one year does not substantially reduce the cfu number on the product.
Ejemplo 4Example 4
La Bifidobacterium lactis se fermentaba (los detalles se indican en las tablas 17 y 18), una parte de la biomasa se utilizaba directamente y una segunda parte se concentraba por centrifugación con adición de agentes protectores estándar. Ambas biomasas se añadían a escala experimental a un producto a base de cereales para niños. Se realizaba una segunda serie de ensayos con las mismas biomasas almacenadas a 5ºC durante 4 días antes de la aplicación. Bifidobacterium lactis was fermented (details are indicated in Tables 17 and 18), a part of the biomass was used directly and a second part was concentrated by centrifugation with the addition of standard protective agents. Both biomass were added on an experimental scale to a cereal-based product for children. A second series of tests was performed with the same biomass stored at 5 ° C for 4 days before application.
Para la aplicación a escala experimental se colocaban 2 kg de producto a base de cereales en un tambor giratorio y la biomasa se pulverizaba en la parte superior de los cereales que giraban usando un pulverizador comercial con una boquilla bifásica (aire/líquido). En todos los casos se añadía el 0,5% de la cantidad total de cereales. En un caso la biomasa se utilizaba directamente después de la fermentación y en el otro caso se concentraba y luego se repetían los mismos pasos con biomasas almacenadas durante 4 días (5ºC) antes de la aplicación.For experimental scale application, placed 2 kg of cereal-based product in a rotating drum and the biomass was sprayed on the top of the cereals that turned using a commercial sprayer with a nozzle biphasic (air / liquid). In all cases, 0.5% of the Total amount of cereals. In one case the biomass was used directly after fermentation and in the other case it concentrated and then repeated the same steps with biomass stored for 4 days (5 ° C) before application.
Los productos acabados se analizaban in vitro para la resistencia del tracto gástrico.The finished products were analyzed in vitro for resistance of the gastric tract.
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Tal como muestra la tabla 19, las pérdidas se encuentran en un margen aceptable en un entorno intestinal simulado.As Table 19 shows, losses are found in an acceptable margin in an intestinal environment simulated.
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