ES2331022T3

ES2331022T3 - Metodos para aumentar la resistencia de las plantas a condiciones hipoxicas.

Info

Publication number: ES2331022T3
Application number: ES06754163T
Authority: ES
Inventors: Michael Metzlaff; Marc De Block
Original assignee: Bayer Bioscience NV
Current assignee: Bayer CropScience NV
Priority date: 2005-06-15
Filing date: 2006-06-06
Publication date: 2009-12-18
Anticipated expiration: 2026-06-06
Also published as: WO2006133827A2; US20090064371A1; AU2011201424A1; PT1893759E; EP2110437A1; ZA200800187B; AU2006257420B2; DE602006008459D1; CN101218345A; AU2011201424B2; EP1893759B1; US20130065761A1; ATE439449T1; US8143192B2; PL1893759T3; MX2007016199A; CA2611930A1; EP1893759A2; KR20080036579A; EP2311963A2

Abstract

Un método para aumentar la tolerancia de una célula de planta o una planta a condiciones hipóxicas o anóxicas, que comprende el paso de: a) aplicar una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I) **(Ver fórmula)** en donde Het representa un heterociclo que está en cada caso opcionalmente mono- o polisustituido con flúor, cloro, metilo o etilo, heterociclo que se selecciona del grupo de heterociclos siguiente: pirid-3-ilo, pirid-5-ilo, 3-piridinio, 1- óxido-5-piridinio, 1-óxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3-ilo, tiazol-5-ilo, A representa alquilo C1-C6, -N(R1)(R2) o S(R2), en donde R1 representa hidrógeno, alquilo C1-C6, fenil-alquilo C1-C4, cicloalquilo C3-C6, alquenilo C2-C6 o alquinilo C2- C6, y R2 representa alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -C(=O)-CH3 o bencilo, R representa hidrógeno, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, -C(=O)-CH3 o bencilo, o junto con R2 representa los grupos siguientes: -CH2-CH2-, -CH2-CH2-CH2-, -CH2-O-CH2-, -CH2-S-CH2-, -CH2-NH-CH2-, -CH2-N(CH3)-CH2-, y X representa N-NO2, N-CN o CH-NO2 a dicha planta o a su locus, o a semillas de dicha planta.

Description

Métodos para aumentar la resistencia de las plantas a condiciones hipóxicas.

Se proporcionan métodos para aumentar la resistencia de las plantas a condiciones hipóxicas o anóxicas. Tales métodos pueden aplicarse para aumentar la penetración de las raíces de las plantas en el medio de cultivo o en el suelo.

Los métodos de acuerdo con la invención pueden incluir la aplicación de compuestos neonicotinoides, tales como, pero sin carácter limitante, imidacloprid, nitempiram, acetamiprid, tiacloprid, tiametoxam, clotianidín, y dinotefurán, a las plantas o sus hábitats, o a células o semillas de las mismas. Compuestos neonicotinoides particularmente eficaces son compuestos neonicotinoides que comprenden una cadena lateral de cloropiridina, tales como imidacloprid, nitempiram, acetamiprid, y tiacloprid, particularmente aquéllos durante cuya degradación en las plantas puede liberarse ácido 6-cloronicotínico (6-CNA), como, v.g., imidacloprid y tiacloprid. Las plantas o sus hábitats pueden tratarse también directamente con 6-CNA.

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Técnica anterior

La aplicación de compuestos de la clase de los neonicotinoides a las plantas para propósitos distintos del control de los insectos se conoce también en la técnica (WO 01/26468, WO 03/096811).

WO 01/26468 describe un método para mejorar el crecimiento de las plantas que comprende aplicar a las plantas o al locus de las mismas al menos un compuesto seleccionado de la clase de los neonicotinoides.

WO 03/096811 expone que el rendimiento y/o el vigor de una planta agronómica puede aumentarse o mejorarse en localizaciones en las cuales el nivel de infestación por los insectos es inferior al que indica la necesidad de uso de un insecticida para propósitos de control de los insectos por tratamiento de una semilla de la planta con un compuesto neonicotinoide. El método se considera útil para plantas no Transgénicas y para plantas que tienen un gen extraño que codifica la producción de una proteína deltaendotoxina de Bacillus thuringiensis modificada.

Ninguno de estos documentos describe sin embargo el uso de compuestos de la clase de los neonicotinoides en las plantas para propósito de aumentar la tolerancia de las células de plantas o las plantas a condiciones hipóxicas o anóxicas o para permitir que el sistema radical de la planta penetre más profundamente en el medio de cultivo o el suelo.

Así pues, la técnica guarda silencio en cuanto a métodos para aumentar la profundidad de penetración de un sistema radical o de las raíces de una planta en el medio de cultivo o el suelo, o para aumentar la tolerancia de las células de plantas o las plantas a condiciones de estrés hipóxico o anóxico por aplicación de un compuesto químico de la clase de los neonicotinoides a las plantas o células de las mismas como se describe más adelante en esta memoria en las diferentes realizaciones y reivindicaciones.

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Sumario de la invención

En una realización de la invención, se proporciona un método para aumentar la tolerancia de las células de las plantas o las plantas a condiciones hipóxicas o anóxicas, que comprende aplicar a la células de la planta, la planta o semilla a partir de la cual se desarrolla dicha planta, o al hábitat de la misma, una cantidad eficaz de un compuesto neonicotinoide.

En otra realización, la invención se refiere al uso de tales compuestos para aumentar la penetración de las raíces de las plantas en el medio de cultivo, con inclusión del suelo.

La invención se refiere adicionalmente a un método para aumentar la tolerancia de las células de las plantas o las plantas a condiciones hipóxicas o anóxicas, que comprende el paso de proporcionar a las células de dicha planta una cantidad eficaz de ácido 6-cloronicotínico.

La invención se refiere también al uso de 6-CNA para aumentar la penetración de las raíces de las plantas en el medio de cultivo.

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Breve descripción de las figuras

Figura 1: Representación esquemática del ensayo para medir la profundidad de las raíces de una planta que crece en una solución de agar. Un recipiente (1) con un cierre hermético (2) se llena con un medio de cultivo transparente o translúcido (3), tal como agua-agar al 0,4% o agua-agar al 0,7%, al que pueden añadirse compuestos de test adicionales. Se añade al tubo una semilla pregerminada y se deja crecer durante 3 semanas. Después de 3 semanas de crecimiento en posición vertical, se mide la profundidad de la raíz (5) de la planta (4) desde el extremo superior del medio hasta el punto más bajo de las raíces.

Figura 2: Representación gráfica en recuadro de la profundidad de las raíces (mm) de plantas Arabidopsis thaliana cv. Col-0 que comprenden un transgén que codifica una molécula de dsRNA capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP2 comparada con plantas de Arabidopsis thaliana no Transgénicas (Col-0).

Se analizaron las poblaciones siguientes:

\bullet: Col-0: puntos de datos para la línea Arabidopsis de tipo salvaje

\bullet: 427-16: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende el gen anti-PARP2 con una tolerancia débil a condiciones de estrés por luz intensa

\bullet: 427-20 (sic): puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende el gen anti-PARP2 con una tolerancia débil a condiciones de estrés por luz intensa

\bullet: 427-20: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende el gen anti-PARP2 con una tolerancia moderada a condiciones de estrés por luz intensa.

El gráfico representa una gráfica en recuadro (o gráfica de recuadro y bigotes) típica a la izquierda de cada uno de los grupos de valores, que resumen las medidas estadísticas siguientes:

-: mediana

-: cuartiles superior e inferior

-: valores de datos mínimo y máximo.

Adicionalmente, a la derecha de cada uno de los grupos de valores, se indica el valor medio y el error estándar del valor medio para dichos valores.

La gráfica en recuadro se interpreta como sigue:

-: El recuadro propiamente dicho comprende el 50% central de los datos. El borde superior (bisagra) del recuadro indica el percentil 75º de la serie de datos, y la bisagra inferior indica el percentil 25º. El intervalo de los dos cuartiles centrales se conoce como el intervalo inter-cuartil.

-: La línea en el interior del recuadro indica el valor mediano de los datos.

-: Los extremos de los bigotes indican los valores mínimo y máximo de los datos, a no ser que estén presentes resultados aberrantes, en cuyo caso los bigotes se extienden hasta los puntos del valor más próximos dentro de un intervalo de 1,5 veces el intervalo intercuartil.

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Figura 3: Representación gráfica en recuadro y error estándar del valor medio para los valores medidos de profundidad de las raíces (mm) de Arabidopsis thaliana cv. Col- que comprenden un transgén que codifica una molécula de dsRNA capaz de reducir la expresión de los genes PARP endógenos.

Se analizaron las poblaciones siguientes:

\bullet: Col-0: puntos de datos para la línea de Arabidopsis de tipo salvaje

\bullet: 427-22: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende el gen anti-PARP2 con una tolerancia alta a condiciones de estrés por luz intensa

\bullet: 427-24: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende el gen anti-PARP2 con una tolerancia baja a condiciones de estrés por luz intensa

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Figura 4: Representación gráfica en recuadro y error estándar del valor medio para los valores medidos de profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 que comprenden un transgén que codifica una molécula de dsRNA capaz de reducir la expresión de genes endógenos PARP.

Se analizaron las poblaciones siguientes:

\bullet: C24: puntos de datos para la línea de Arabidopsis de tipo salvaje

\bullet: 1599: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende un gen anti-PARP2 con una tolerancia alta a condiciones de estrés por luz intensa

\bullet: 1463: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende un gen anti-PARP2 con una tolerancia moderada a condiciones de estrés por luz intensa

\bullet: 1681: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende un gen anti-PARP1 con una tolerancia moderada a condiciones de estrés por luz intensa

\bullet: 1690: puntos de datos para la línea Transgénica de A. thaliana que comprende un gen anti-PARP1 con una tolerancia moderada a condiciones de estrés por luz intensa.

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Figura 5: Representación gráfica en recuadro y error estándar del valor medio para los valores medidos de profundidad de las raíces (mm) medidos sobre una población de A. thaliana Col-0 que segrega el transgén anti-PARP2.

Se analizaron las poblaciones siguientes:

\bullet: Azigótica: puntos de datos para plantas de A. thaliana procedentes de la población que no comprende un gen anti-PARP2

\bullet: Transgénica: puntos de datos para plantas de A. thaliana procedentes de la población que comprende un gen anti-PARP2

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Figura 6: Representación gráfica en recuadro y error estándar del valor medio para los valores medidos de profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 tratadas con diversas concentraciones de imidacloprid en comparación con plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 sin tratar.

Se analizaron las poblaciones siguientes:

\bullet: 0: plantas de A. thaliana C24 sin tratar

\bullet: 50: plantas de A. thaliana C24 tratadas con 50 mg/l de imidacloprid

\bullet: 100: plantas de A. thaliana C24 tratadas con 100 mg/l de imidacloprid

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Figura 7: Representación gráfica en recuadro y error estándar del valor medio para los valores medidos de profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 tratadas con diversas concentraciones de ácido 6-cloronicotínico en comparación con plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 sin tratar.

Se analizaron las poblaciones siguientes:

\bullet: 0: plantas de A. thaliana C24 sin tratar

\bullet: 1: plantas de A. thaliana C24 tratadas con 1 mg/l de ácido 6-cloronicotínico

\bullet: 5: plantas de A. thaliana C24 tratadas con 5 mg/l de ácido 6-cloronicotínico

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Descripción detallada

Plantas que contenían genes de tolerancia al estrés, tales como los genes quiméricos que codifican dsRNA direccionado para silenciar la expresión de los genes parp1 o parp2 de las plantas, desarrollaban un sistema radical con raíces que penetraban más profundamente en el medio de cultivo que las raíces de las plantas de control. La penetración más profunda de las raíces se ha mantenido inadvertida en las plantas que comprenden genes de tolerancia al estrés como se describe en la técnica anterior y requería el desarrollo de un ensayo particular, como se describe en esta memoria, para analizar estadísticamente la penetración de las raíces en el medio.

Se cree que los genes de tolerancia al estrés aumentan la tolerancia de las células de las plantas, con inclusión de las células de las raíces de las plantas a condiciones hipóxicas o anóxicas, permitiendo con ello que las raíces que comprenden un gen de tolerancia al estrés de este tipo se desarrollen en condiciones menos favorables de oxígeno, como pueden encontrarse en las áreas más profundas de un medio de cultivo o las capas más profundas del suelo, donde la tensión de oxígeno es menor. La penetración incrementada del sistema radical de las plantas en las capas más profundas del suelo proporciona una explicación parcial de la resistencia incrementada a la sequía en condiciones de campo observadas en el caso de las plantas que comprenden los genes de tolerancia al estrés que se describen en esta memoria, tales como los genes codificantes de dsRNA que silencian la expresión de los genes endógenos parp1 o parp2.

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Un efecto similar sobre la penetración de las raíces pudo observarse en el ensayo descrito después de la adición de un compuesto de la clase neonicotinoide o ácido 6-cloronicotínico. El efecto de la aplicación de neonicotinoides sobre la profundidad de crecimiento de las raíces es independiente de la presencia de insectos que son las dianas de los neonicotinoides arriba mencionados. De acuerdo con ello, el efecto está relacionado también con la mejora bioquímica de la tolerancia al estrés, particularmente tolerancia al estrés relacionada con hipoxia o anoxia, de una planta o células de la planta o la semilla a partir de la cual se desarrolla la misma.

Como se utiliza en esta memoria, la expresión "condiciones hipóxicas o anóxicas" hace referencia a condiciones a las que se ven expuestas las células de las plantas, plantas o partes de dichas plantas en las cuales la disponibilidad de oxígeno es baja a muy baja. Condiciones anóxicas hace referencia a condiciones en las cuales no existe prácticamente oxigeno disponible. Típicamente, las condiciones en las cuales la concentración de oxígeno disuelto es inferior a aproximadamente 2 mg/l se indican como hipóxicas (0,1 mg/l o 2 mg/l), y las condiciones en las cuales el oxígeno disuelto es inferior a 0,1 mg/l, particularmente inferior a 0,05 mg/l se indican como anóxicas. La concentración normal de oxígeno disuelto en el agua es aproximadamente 8 mg/l. Las condiciones hipóxicas en suelo hacen referencia a aquellas condiciones en las cuales la tensión de oxígeno es baja, particularmente aquéllas en las cuales el oxígeno cae por debajo de 5% en atmósfera del suelo.

Las condiciones hipóxicas pueden ocurrir v.g. después de inundación de las plantas o partes de las plantas. Las condiciones hipóxicas pueden ocurrir también en los casos en que el consumo de oxígeno es alto, tal como en las capas del suelo que comprenden una gran cantidad de residuos orgánicos en el proceso de metabolización por microorganismos. Adicionalmente, existen condiciones hipóxicas en las capas más profundas de un medio de cultivo en las que la difusión de oxígeno tiene lugar desde la superficie. Existen también condiciones hipóxicas en las capas más profundas del suelo dado que la difusión del oxígeno y por consiguiente la tensión de oxígeno decrece desde las superficies. La tasa de decrecimiento del oxígeno depende de la compacidad del suelo (en cuyo caso, cuanto más compacto es el suelo, tanto menos atmósfera de suelo está presente), la presencia de material orgánico en descomposición, el contenido de agua, etc.

Como se utiliza en esta memoria, "penetración de las raíces de las plantas" o "la penetración de las raíces de una planta en el medio de cultivo o el suelo" hace referencia a la profundidad del crecimiento de las raíces en un medio de cultivo sólido, con inclusión de suelo, como se mide desde la superficie del medio de cultivo hasta el punto más bajo de las raíces (véase también la Figura 1).

Como regla, un "aumento en la penetración o penetración de las raíces de las plantas" quiere decir un aumento al menos estadísticamente significativo en la profundidad del crecimiento de las raíces en el medio de cultivo tal como se mide desde la superficie del medio hasta el punto más bajo de crecimiento de las raíces, que puede medirse como diferencia en una comparación de la profundidad de las raíces de las plantas de referencia de tipo salvaje frente a la profundidad de las raíces de las plantas modificadas por ingeniería genética que son tolerantes al estrés, o como diferencia en una comparación de la profundidad de las raíces de las plantas tratadas con compuestos químicos particulares frente a la profundidad de las raíces de plantas sin tratar.

Para una comprensión correcta de la invención, es importante darse cuenta de que la penetración más profunda de un sistema radical de una planta en el medio de cultivo o el suelo, conseguida por los métodos de acuerdo con la invención, no debe considerarse igual a un aumento del sistema radical en volumen o peso seco o fresco. De hecho, el volumen de un sistema radical puede aumentarse significativamente, mientras que las raíces se mantienen todas ellas muy superficiales por debajo de la superficie del medio de cultivo o el suelo. En contraste, las raíces de las plantas tratadas de acuerdo con la invención pueden ser iguales en tamaño, volumen, peso o incluso en longitud, pero penetran mucho más profundamente bajo la superficie del medio de cultivo o el suelo.

Como se utiliza en esta memoria, "medio de cultivo" tiene por objeto hacer referencia a cualquier medio adecuado para crecimiento de las plantas, con inclusión de suelo. Tales medios pueden incluir líquidos solidificados o gelificados, tales como agua-agar, turba, terrón, tipos diferentes de suelo, etc.

En una realización, la invención está dirigida hacia el uso de un compuesto de la clase de los neonicotinoides para aumentar la tolerancia de una célula de planta, planta o semilla a condiciones hipóxicas o anóxicas. Así, se proporciona un método para aumentar la tolerancia en una célula de planta, planta o semilla a condiciones hipóxicas o anóxicas, que comprende el paso de aplicar una cantidad eficaz de un compuesto neonicotinoide de la fórmula (I) a las células de plantas, plantas o semillas o al hábitat de las plantas, o al medio de cultivo.

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en donde

Het: representa un heterociclo que está en cada caso opcionalmente mono- o polisustituido con flúor, cloro, metilo o etilo, heterociclo que se selecciona del grupo de heterociclos siguiente: pirid-3-ilo, pirid-5-ilo, 3-piridinio, 1-óxido-5-piridinio; 1-óxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3-ilo, tiazol-5-ilo,

A: representa alquilo C_{1}-C_{6}, -N(R^{1})(R^{2}) o S(R^{2}), en donde R^{1} representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, fenil-alquilo C_{1}-C_{4}, cicloalquilo C_{3}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6} o alquinilo C_{2}-C_{6}, y

\quad: R^{2} representa alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, -C(=O)-CH_{3} o bencilo,

R: representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, -C(=O)-CH_{3} o bencilo o junto con R^{2} representa los grupos siguientes: -CH_{2}-CH_{2}-, -CH_{2}-CH_{2}-CH_{2}-, -CH_{2}-O-CH_{2}-, -CH_{2}-S-CH_{2}-, -CH_{2}-NH-CH_{2}-, -CH_{2}-N(CH_{3})-CH_{2}-, y

X: representa N-NO_{2}, N-CN o CH-NO_{2}.

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Los radicales hidrocarbonados saturados o insaturados, tales como alquilo o alquenilo, pueden ser en cada caso lineales o ramificados siempre que esto sea posible, incluso en combinación con heteroátomos, tal como, por ejemplo, en alcoxi.

Se sabe que estos compuestos tienen actividad insecticida (véase, por ejemplo, EP A1-192 606, EP A2-580 533, EP A2-376 279; EP A2-235 725).

Los compuestos de la fórmula (I) que pueden mencionarse son los neonicotinoides enumerados en "The Pesticide Manual", edición 13ª, 2003 (British Crop Protection Council).

Un compuesto es imidacloprid, de la fórmula

2

conocido, por ejemplo, por EP A1 0 192 060.

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Otro compuesto es nitempiram de la fórmula

3

conocido, por ejemplo, por EP A2 0 302 389.

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Otro compuesto es acetamiprid de la fórmula

4

conocido, por ejemplo, por WO A1 91/04965.

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Otro compuesto es tiacloprid de la fórmula

5

conocido, por ejemplo, por EP A2 0 235 725.

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Otro compuesto es tiametoxam de la fórmula

6

conocido, por ejemplo, por EP A2 0580553.

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Otro compuesto es clotianidina de la fórmula

7

conocido, por ejemplo, por EP A2 0 376 279.

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Otro compuesto es dinotefurán de la fórmula

8

conocido, por ejemplo, por EP A1 0 649 845.

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Particularmente adecuados para la presente invención son los compuestos de la fórmula (I) en donde el sustituyente "Het" representa cloropiridilo

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tales como imidacloprid, nitempiram, acetamiprid, y tiacloprid.

Compuestos particularmente preferidos son imidacloprid y tiacloprid. El ácido 6-cloronicotínico puede liberarse durante la degradación de los neonicotinoides arriba mencionados que llevan este grupo, tales como imidacloprid, nitempiram, y tiacloprid.

Por ejemplo, el imidacloprid se degrada gradualmente para dar el metabolito primario ácido 6-cloronitocínico, que finalmente se descompone en dióxido de carbono. Se encontró que este metabolito aumenta también la tolerancia al estrés y la salud de una planta o célula de planta o semilla a partir de la cual se desarrolla dicha planta y que se ha modificado por ingeniería genética para ser tolerante al estrés y puede utilizarse también de acuerdo con los métodos de la presente invención.

Un modo de determinar si se libera 6-CNA durante la degradación de los neonicotinoides arriba mencionados en las plantas o en plantas particulares ha sido descrito por Placke y Weber (Pflanzen-Nachrichten Bayer 46/1993, 2 109-182).

Así, en otra realización de la invención, se describe un método que es útil para aumentar la tolerancia de las células de las plantas o plantas o partes de las mismas a condiciones hipóxicas o anóxicas, que comprende el paso de proporcionar a dicha planta, a una célula de la planta o a la semilla a partir de la cual se desarrollan dichas plantas, una cantidad eficaz de ácido 6-cloronicotínico (niacina, CAS NO: 5326-23-8) de la fórmula (3)

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La cantidad eficaz de ácido 6-cloronicotínico puede proporcionarse a la célula de la planta, la planta o la semilla por aplicación directa del compuesto de la fórmula (3) a la célula de la planta, la planta, la semilla y/o el hábitat de la misma. Sin embargo, el 6-CNA puede proporcionarse también a la planta proporcionando un compuesto que puede ser metabolizado por la planta para producir 6-CNA como metabolito, tal como los compuestos arriba mencionados.

Debe quedar inmediatamente claro que los compuestos arriba descritos pueden utilizarse también para aumentar la penetración de las raíces de una planta en el medio de cultivo o el suelo, comprendiendo el paso de proporcionar una cantidad eficaz de un compuesto neonicotinoide de la fórmula (I), tal como un compuesto neonicotinoide de la fórmula (I) que comprende una cadena lateral de cloropiridina, particularmente aquellos neonicotinoides de la fórmula (I) que comprenden una cadena lateral de cloropiridina que puede ser metabolizada en las plantas para producir 6-CNA, con inclusión de imidacloprid o tiacloprid, o proporcionar 6-CNA a las células de las plantas, las plantas o las semillas o al hábitat de las plantas o al medio de cultivo.

Una de las ventajas de la presente invención es que las propiedades sistémicas de los compuestos de acuerdo con la invención y composiciones que comprenden dichos compuestos significan que el tratamiento de la semilla de las plantas con estas composiciones es suficiente para aumentar la penetración de las raíces de la planta en germinación y la planta resultante después del brote.

En otra realización de la invención, se describe un método que es útil para aumentar la penetración de las raíces de una planta, que comprende aplicar a dicha planta y/o su hábitat, a una célula de la planta o a la semilla a partir de la cual se desarrollan dichas plantas, una cantidad eficaz de una composición que comprende los compuestos de la fórmula (I).

De acuerdo con ello, la invención se refiere también a composiciones que comprenden los compuestos de la fórmula (I) para el uso de tales composiciones de acuerdo con la invención.

Los compuestos de fórmula (I) pueden utilizarse también en mezcla con otros compuestos activos, por ejemplo, insecticidas, bactericidas, acaricidas, fungicidas, etc. en la forma de sus formulaciones comercialmente útiles o en las formas de aplicación preparadas a partir de tales formulaciones. Esto puede hacerse para obtener composiciones que, además de aumentar la penetración de las raíces de las plantas de acuerdo con la invención, combaten también las plagas que puedan estar presentes. Insecticidas que pueden utilizarse son, por ejemplo, agentes organofosforados, agentes de carbamato, productos químicos de tipo carboxilato, productos químicos del tipo de los hidrocarburos clorados, sustancias insecticidas producidas por microbios, etc.

En muchos casos, esto da como resultado efectos sinérgicos, es decir que la actividad de la mezcla excede de la actividad de los componentes individuales. Tales formulaciones y formas de aplicación son especialmente útiles comercial y ecológicamente dado que por regla general pueden utilizarse menores cantidades de los ingredientes activos. Un agente sinérgico, sin embargo, no tiene que ser necesariamente activo pos sí mismo, con tal que mejore la acción del compuesto activo.

Una mezcla con otros compuestos activos conocidos, tales como herbicidas, o con agentes fitoprotectores, fertilizantes y reguladores del crecimiento es también posible.

El tratamiento de acuerdo con la invención de las plantas y partes de las plantas con los compuestos activos se lleva a cabo directamente o dejando que los compuestos actúen en sus entornos, en el ambiente o el espacio de almacenamiento por los métodos de tratamiento habituales, por ejemplo por inmersión, pulverización, evaporación, nebulización, dispersión, aplicación como pintura y, en el caso de material de propagación, en particular en el caso de las semillas, también por aplicación de uno o más recubrimientos.

Los compuestos activos pueden convertirse en las formulaciones habituales, tales como soluciones, emulsiones, polvos humectables, suspensiones, polvos, polvos finos, pastas, polvos solubles, gránulos, concentrados suspensión-emulsión, materiales naturales y sintéticos impregnados con compuesto activo, y microencapsulaciones en sustancias polímeras.

El contenido de los compuestos activos de la presente invención en una formulación o forma de aplicación comercialmente útil puede modificarse dentro de un amplio intervalo. El contenido de compuesto activo de las formas de uso preparadas a partir de las formulaciones comerciales puede variar dentro de límites amplios.

Estas formulaciones se producen de manera conocida, por ejemplo por mezcla de los compuestos activos con extendedores, es decir disolventes líquidos y/o vehículos sólidos, opcionalmente con el uso de agentes tensioactivos, es decir emulsionantes y/o dispersantes, y/o formadores de espuma.

Si el extendedor utilizado es agua, es posible también emplear por ejemplo disolventes orgánicos como disolventes auxiliares. Esencialmente, disolventes líquidos adecuados son: hidrocarburos aromáticos tales como xileno, tolueno o alquilnaftalenos, hidrocarburos aromáticos clorados o alifáticos clorados tales como clorobencenos, cloroetilenos o cloruro de metileno, hidrocarburos alifáticos tales como ciclohexano o parafinas, por ejemplo fracciones de petróleo, aceites minerales y vegetales, alcoholes tales como butanol o glicol así como sus éteres y ésteres, cetonas tales como acetona, metil-etil-cetona, metil-isobutil-cetona o ciclohexanona, disolventes fuertemente polares tales como dimetilformamida y dimetil-sulfóxido, y agua.

Como vehículos sólidos son adecuados: por ejemplo sales amónicas y minerales naturales molidos tales como caolines, arcillas, talco, creta, cuarzo, attapulgita, montmorillonita o tierra de diatomeas, y minerales sintéticos molidos, tales como sílice altamente dispersa, alúmina y silicatos; como vehículos sólidos para gránulos son adecuados: por ejemplo rocas naturales trituradas y fraccionadas tales como calcita, mármol, pómez, sepiolita y dolomita, así como gránulos sintéticos de harinas inorgánicas y orgánicas, y gránulos de materiales orgánicos tales como serrín, cáscaras de coco, carozos de maíz y tallos de tabaco; como emulsionantes y/o formadores de espuma son adecuados: por ejemplo emulsionantes no iónicos y aniónicos, tales como ésteres de ácidos grasos de polioxietileno, éteres de alcoholes grasos de polioxietileno, por ejemplo alquilaril-poliglicol-éteres, alquilsulfonatos, alquil-sulfatos, arilsulfonatos así como hidrolizados de proteínas; como dispersantes son adecuados: por ejemplo lejías residuales de ligninsulfito y metilcelulosa.

Pueden utilizarse en las formulaciones agentes de adherencia tales como carboximetilcelulosa y polímeros naturales y sintéticos en forma de polvos, gránulos o látex, tales como goma arábiga, poli(alcohol vinílico) y poli(acetato de vinilo), así como fosfolípidos naturales tales como cefalinas y lecitinas, y fosfolípidos sintéticos. Otros aditivos pueden ser aceites minerales y vegetales.

Es posible utilizar colorantes tales como pigmentos inorgánicos, por ejemplo óxido de hierro, óxido de titanio y Azul de Prusia, y colorantes orgánicos, tales como colorantes de alizarina, colorantes azoicos y colorantes de ftalocianinas metálicas, así como nutrientes traza tales como sales de hierro, manganeso, boro, cobre, cobalto, molibdeno y cinc.

Las formulaciones comprenden por regla general entre 0,1 y 98% en peso de compuesto activo, preferiblemente entre 0,1 y 90% y de modo particularmente preferible entre 0,5 y 60% en peso de compuesto activo.

El efecto de los compuestos neonicotinoides y 6-CNA sobre la profundidad de crecimiento de las raíces es muy acusado particularmente a ciertas tasas de aplicación. Sin embargo, las tasas de aplicación de los compuestos activos pueden modificarse dentro de intervalos relativamente amplios. En general, las tasas de aplicación son de 1 g a 1600 g del compuesto activo por hectárea, preferiblemente de 10 g a 800 g del compuesto activo por hectárea, y de modo particularmente preferible de 10 g a 600 g del compuesto activo por hectárea.

Como se ha mencionado anteriormente, la invención se refiere a métodos que son útiles para aumentar la penetración de las raíces de una planta en el medio de cultivo o para aumentar la tolerancia a condiciones de hipoxia, que comprenden aplicar al material de propagación de la planta, con inclusión de las semillas a partir de las cuales se desarrolla la planta, una cantidad eficaz de una composición que comprende los compuestos de la fórmula (I). El material de propagación de la planta puede tratarse antes de la plantación; por ejemplo, las semillas pueden acondicionarse antes de la siembra. Los compuestos de acuerdo con la invención pueden aplicarse también a granos de semilla por impregnación de los granos con una formulación líquida o por recubrimiento de los mismos con una formulación sólida. La composición puede aplicarse también al sitio de plantación cuando el material de propagación está siendo plantado, v.g. durante la siembra.

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En conexión con el tratamiento de materiales de propagación de las plantas tales como semillas, las tasas de aplicación favorables son por regla general 0,1 a 1000 g, en particular 1 a 800 g, preferiblemente 10 a 500 g de uno de los compuestos neonicotinoides o 6-CNA por 100 kg de material a tratar.

Todas las plantas y partes de plantas pueden tratarse de acuerdo con la invención. Partes de plantas debe entenderse que significan todas las partes y órganos de las plantas, tanto las partes aéreas como las subterráneas, tales como brote, hoja, flor y raíz, siendo ejemplos de las mismas que pueden mencionarse hojas, acículas, tallos, troncos, flores, cuerpos frutales, frutos, semillas, raíces, tubérculos y rizomas. Las partes de planta incluyen también material recolectado, y material de propagación vegetativo y generativo, por ejemplo esquejes, tubérculos, rizomas, acodos y semillas. Se incluyen también células de plantas, tales como pueden utilizarse o resultan de la transformación de una célula de planta de acuerdo con la invención. Es posible también aplicar los compuestos mencionados anteriormente encima o en el interior del suelo, v.g. antes de la plantación o siembra para alcanzar el efecto descrito, v.g. para mejorar la tolerancia de las plantas al estrés después de la plantación y la planta emergente que se desarrolla a partir de una semilla que ha sido sembrada en el suelo tratado.

El método de la presente invención puede ser adecuado para cualquier planta, tanto plantas dicotiledóneas como monocotiledóneas con inclusión, pero sin carácter limitante, de algodón, hortalizas del género Brassica, colza oleaginosa, trigo, maíz europeo o americano, cebada, girasoles, arroz, avenas, caña de azúcar, soja, hortalizas (con inclusión de escarola, lechuga, tomate), tabaco, patata, remolacha azucarera, papaya, piña, mango, Arabidopsis thaliana, pero también plantas utilizadas en horticultura, floricultura o silvicultura, y cereales que incluyen trigo, avena, cebada, centeno, arroz, césped de hipódromo, sorgo, mijo o caña de azúcar. Los métodos de la invención pueden aplicarse también a cualquier planta con inclusión, pero sin carácter limitante, de algodón, tabaco, canola, colza oleaginosa, soja, hortalizas, patatas, Lemna spp., Nicotiana spp., batatas, Arabidopsis, alfalfa, cebada, habichuelas, maíz, algodón, lino, guisante, colza, arroz, centeno, cártamo, sorgo, soja, girasol, tabaco, trigo, espárragos, remolacha, brécol, repollo, zanahoria, coliflor, apio, pepino, berenjena, lechuga, cebolla, colza oleaginosa, pimiento, patata, calabacín, rábano, espinaca, calabaza, tomate, zucchini, almendra, manzana, albaricoque, plátano, mora, arándano común, cacao, cereza, coco, arándano agrio, dátil, uva, pomelo, guayaba, kiwi, limón, lima, mango, melón, nectarina, naranja, papaya, fruto de la pasión, melocotón, cacahuete, pera, piña, pistacho, ciruela, frambuesa, fresa, mandarina, nuez y sandía.

Como se utiliza en esta memoria, "que comprende" debe interpretarse que especifica la presencia de las características, entidades completas, pasos o componentes indicados a los que se hace referencia, pero no excluye la presencia o adición de una o más características, entidades completas, pasos o componentes, o grupos de los mismos. Así, v.g., un ácido nucleico o proteína que comprende una secuencia de nucleótidos o aminoácidos puede comprender más nucleótidos o aminoácidos que los citados expresamente, es decir, puede estar incluido en un ácido nucleico o proteína más largo. Un transgén que comprende una región de DNA que está definida funcional o estructuralmente, puede comprender regiones de DNA adicionales, etc.

A no ser que se indique otra cosa en los Ejemplos, todas las técnicas de DNA recombinante se llevan a cabo de acuerdo con protocolos estándar como se describen en Sambrook et al. (1989) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2ª Edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY y en los volúmenes 1 y 2 de Ausubel et al. (1994) Current Protocols in Molecular Biology, Current Protocols, EE.UU. Materiales y métodos estándar para trabajo molecular con plantas se describen en Plant Molecular Biology Labfax (1993) por R.D.E. Croy, publicado conjuntamente por BIOS Scientific Publications Ltd. (Reino Unido) y Blackwell Scientific Publications, Reino Unido. Otras referencias para técnicas estándar de biología molecular incluyen Sambrook y Russell (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3ª Edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY, volúmenes I y II de Brown (1998)

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Ejemplos Ejemplo 1 Protocolo para medida de la profundidad de crecimiento de las raíces de Arabidopsis en medio de cultivo Medio

Medio de germinación: Sales semiconcentradas de Murashige y Skoog; vitaminas B5; 1,5% sacarosa; pH 5,8; 0,4% agar Difco.

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Plantas de Arabidopsis

Esterilización de las semillas de Arabidopsis : 2 min, etanol al 70%; 10 min blanqueo (cloro activo 6%) + 1 gota de Tween 20 para 20 ml de solución; lavado 5 veces con agua estéril del grifo; la esterilización se realiza en tubos Eppendorf de 2 ml. Las semillas de Arabidopsis caen al fondo del tubo, permitiendo la separación de los líquidos por medio de un Pipetman de 1 ml.

Pregerminación de las semillas: En cápsulas Petri Optilux de 9 cm (Falcon) que comprenden 10 ml de agua estéril del grifo. Iluminación baja durante la noche hasta 24 horas.

Crecimiento de las plantas de Arabidopsis : Las semillas se siembran en tubos de vidrio de 25 x 150 mm (Sigma C5916) con cierre de color natural (transparente) (Sigma C5791) que comprende \pm 34 ml de medio de germinación: 1 semilla/tubo. Los tubos se ponen en las dos filas exteriores de soportes de tubos para 40 tubos (VWR nalg5970-0025) envueltos en papel metalizado de aluminio a fin de que las raíces puedan crecer en la oscuridad.

Las plantas se cultivan a 23ºC. 30-50 \mug Einstein s^{-1} m^{-2}. 12 horas luz - 12 horas oscuridad. (Véase la Figura 1)

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Medida de la profundidad de las raíces

Al cabo de 3 semanas, se mide la profundidad de las raíces desde la superficie del medio hasta el punto más bajo de crecimiento de la raíz. (Véase la Figura 1).

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Ejemplo 2 Análisis de la profundidad de crecimiento de las raíces de plantas de Arabidopsis que comprenden un transgén que mejora la tolerancia al estrés

Plantas de Arabidopsis thaliana que comprenden un transgén que codifica una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP1 o PARP2, como se describen en WO 00/04173A1 (v.g. en el Ejemplo 8 de dicho documento) se cultivaron como se describe en el Ejemplo 1.

Al cabo de 3 semanas, se midió la profundidad de las raíces de las plantas Transgénicas y se comparó con la profundidad de las raíces de plantas no Transgénicas de control o plantas no Transgénicas isogénicas cultivadas de manera similar.

En un primer experimento, diversas poblaciones de plantas Arabidopsis thaliana cv. Col-0 que comprendían un transgén codificante de una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP2 (representando las líneas 427-16 y 427-20 tolerancia baja al estrés por luz intensa y representando la línea 427-19 una tolerancia moderada al estrés por luz intensa) se compararon con una población de plantas no Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0.

Los resultados de las medidas se sometieron a análisis estadístico, resumido en la Tabla 1, que representa también el valor medio, la desviación estándar y los intervalos de confianza.

Las raíces de las plantas Transgénicas de Arabidopsis thaliana que exhibían la tolerancia máxima a las condiciones de estrés por luz intensa (línea 427-19) penetraban a mayor profundidad en un grado estadísticamente significativo (para el nivel de confianza de 99%) en el medio de cultivo que las plantas no Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 de control (véanse la Figura 2 y la Tabla 1).

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TABLA 1 Profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 que comprenden un transgén codificante de una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP2 en comparación con plantas no Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0

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En un experimento ulterior, una población de plantas Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 que comprendían un transgén codificante de una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP2 y que son tolerantes al estrés por luz intensa (línea 427-22) se compararon con una línea Transgénica que contenía un transgén similar pero que era sensible al estrés por luz intensa (línea 427-24), así como con plantas no Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 de control.

Los resultados de las medidas se sometieron a análisis estadístico, resumido en la Tabla 2, que representa también el valor medio, la desviación estándar y los intervalos de confianza.

Las raíces de plantas Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 de la línea Transgénica tolerante al estrés (línea 427-22) penetraban más profundamente en el medio de cultivo (que comprendía agar Difco al 0,7% en lugar de 0,4%) que las raíces de las plantas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 de control y que las raíces de la línea Transgénica sensible al estrés de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 (línea 427-24) (véanse la Figura 3 y la Tabla 2).

TABLA 2 Profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 que comprendían un transgén que codifica una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP2 en comparación con plantas no Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0

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En otro experimento, se analizaron las poblaciones siguientes:

\quad: C24: Línea de Arabidopsis de tipo salvaje; línea 1599: línea Transgénica de A. thaliana que comprende el transgén anti-PARP2 con una tolerancia alta a las condiciones de estrés por luz intensa; línea 1463: línea Transgénica de A. thaliana que comprende el transgén anti-PARP2 con una tolerancia moderada a las condiciones de estrés por luz intensa; línea 1681: línea Transgénica de A. thaliana que comprende el gen antiPARP1 con una tolerancia moderada a las condiciones de estrés por luz intensa; y línea 1690: línea Transgénica de A. thaliana que comprende el gen anti-PARP1 con tolerancia moderada a las condiciones de estrés por luz intensa. La tolerancia al estrés de la línea 1599 es muy alta, y la tolerancia al estrés de las líneas 1463, 1681 y 1690 varía desde moderada a alta.

Los resultados de las medidas se sometieron a análisis estadístico, resumido en la Tabla 3, que representa el valor medio, la desviación estándar y los intervalos de confianza.

Las raíces de plantas Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. C24 que comprenden un transgén que codifica una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP1 (líneas 1681 y 1690) o los genes PARP2 (líneas 1599 y 1463) penetraban más profundamente en el medio de cultivo que las plantas de control no Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. C24 (véanse la Figura 4 y la Tabla 3).

TABLA 3 Profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 que comprenden un transgén que codifica una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP1 o PARP2 en comparación con plantas no Transgénicas de Arabidopsis thaliana cv. C24

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En un experimento ulterior, se analizó una población segregante 1:1 de la línea Transgénica de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 que comprendía un transgén que codificaba una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP2 y con tolerancia alta al estrés por luz intensa. La presencia del transgén se comprobó por análisis PCR.

Las plantas que comprendían el transgén tenían raíces que penetraban más profundamente en el medio de cultivo que las plantas azigóticas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 derivadas de la línea 427-19 (véanse la Figura 5 y la

\hbox{Tabla 4).}

TABLA 4 Profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 que comprenden un transgén que codifica una molécula de dsRNA que es capaz de reducir la expresión de los genes endógenos PARP2 en comparación con las plantas azigóticas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0

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Ejemplo 3 Análisis de la profundidad de crecimiento de las raíces de plantas de Arabidopsis después de la aplicación de imidacloprid

Se cultivaron plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 como se describe en el Ejemplo 1 en medio de germinación (con 0,7% de agar Difco en lugar de 0,4%) que comprendía diversas concentraciones de imidacloprid (0, 50 y 100 mg/l). Después de 3 semanas, se midió la profundidad de las raíces de las plantas tratadas con 50 y 100 mg/l de imidacloprid y se comparó con la profundidad de las raíces de plantas sin tratar cultivadas de manera similar.

Las raíces de las plantas de Arabidopsis tratadas penetraban más profundamente en el medio de cultivo que las raíces de las plantas de Arabidopsis sin tratar (véanse la Figura 6 y la Tabla 5).

TABLA 5 Profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 tratadas con 50 y 100 mg/l de imidacloprid en comparación con las plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 no tratadas con imidacloprid

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Ejemplo 4 Análisis de la profundidad de crecimiento de las raíces de plantas de Arabidopsis después de aplicación de ácido 6-cloronicotínico (6-CNA)

Se cultivaron plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 como se describe en el Ejemplo 1 en medio de germinación que comprendía diversas concentraciones de 6-CNA (0, 1, y 5 mg/l). Después de 3 semanas, se midió la profundidad de las raíces de las plantas tratadas con 1 y 5 mg/l de 6-CNA y se comparó con la profundidad de las raíces de las plantas no tratadas con 6-CNA cultivadas de manera similar.

Las raíces de las plantas tratadas de Arabidopsis penetraban más profundamente en el medio de cultivo que las raíces de las plantas de Arabidopsis sin tratar (véanse la Figura 7 y la Tabla 6).

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TABLA 6 Profundidad de las raíces (mm) de plantas de Arabidopsis thaliana cv. C24 tratadas con 1 y 5 mg/l de 6-CNA en comparación con plantas de Arabidopsis thaliana cv. Col-0 no tratadas con 6-CNA

16

Claims

1. Un método para aumentar la tolerancia de una célula de planta o una planta a condiciones hipóxicas o anóxicas, que comprende el paso de:

a) aplicar una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I)

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en donde

\quad: Het representa un heterociclo que está en cada caso opcionalmente mono- o polisustituido con flúor, cloro, metilo o etilo, heterociclo que se selecciona del grupo de heterociclos siguiente: pirid-3-ilo, pirid-5-ilo, 3-piridinio, 1-óxido-5-piridinio, 1-óxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3-ilo, tiazol-5-ilo,

\quad: A representa alquilo C_{1}-C_{6}, -N(R^{1})(R^{2}) o S(R^{2}), en donde

\quad: R^{1} representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, fenil-alquilo C_{1}-C_{4}, cicloalquilo C_{3}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6} o alquinilo C_{2}-C_{6}, y

\quad: R representa hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, -C(=O)-CH_{3} o bencilo, o junto con R^{2} representa los grupos siguientes: -CH_{2}-CH_{2}-, -CH_{2}-CH_{2}-CH_{2}-, -CH_{2}-O-CH_{2}-, -CH_{2}-S-CH_{2}-, -CH_{2}-NH-CH_{2}-, -CH_{2}-N(CH_{3})-CH_{2}-, y

\quad: X representa N-NO_{2}, N-CN o CH-NO_{2} a dicha planta o a su locus, o a semillas de dicha planta.

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2. Un método para aumentar la penetración de las raíces de una planta en un medio de cultivo, que comprende el paso de:

a) aplicar una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I)

18

en donde

\quad: Het representa un heterociclo que está en cada caso opcionalmente mono- o polisustituido con flúor, cloro, metilo o etilo, heterociclo que se selecciona del grupo de heterociclos siguiente:

\quad: pirid-3-ilo, pirid-5-ilo, 3-piridinio, 1-óxido-5-piridinio, 1-óxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3-ilo, tiazol-5-ilo,

3. El método de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el cual dicho compuesto de fórmula (I) es un compuesto neonicotinoide.

4. El método de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el cual dicho heterociclo representado por Het de dicho compuesto de fórmula (I) es un heterociclo pirid-3-ilo sustituido con cloro.

5. El método de la reivindicación 4, en el cual dicho compuesto de fórmula (I) es imidacloprid, o tiacloprid.

6. Un método para aumentar la tolerancia de una célula de planta o una planta a condiciones hipóxicas o anóxicas, que comprende el paso de: proporcionar a dicha célula de planta o dicha planta una cantidad eficaz de ácido 6-cloronicotínico.

7. Un método para aumentar la penetración de las raíces de una planta en un medio de cultivo que comprende el paso de: proporcionar a células de dicha planta una cantidad eficaz de ácido 6-cloronicotínico.

8. El método de acuerdo con la reivindicación 6 o la reivindicación 7, en el cual dicho ácido 6-cloronicotínico se proporciona a dicha célula de planta o dicha planta por aplicación de una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I)

19

en donde

\quad: Het representa un heterociclo que está en cada caso opcionalmente mono- o polisustituido con cloro, heterociclo que se selecciona del grupo de heterociclos siguiente:

\quad: pirid-3-ilo o pirid-5-ilo,

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9. El método de acuerdo con la reivindicación 8, en el cual dicho ácido 6-cloronicotínico se libera durante la degradación de neonicotinoides que comprenden una cadena lateral de cloropiridina en las plantas.

10. El método de la reivindicación 9, en el cual dicho neonicotinoide es imidacloprid o tiacloprid.

11. El método de la reivindicación 6 o la reivindicación 7, en el cual dicho ácido 6-cloronicotínico se aplica directamente a dicha planta o dicho hábitat de la misma, dicha célula de planta o dicha semilla.

12. El uso de

a) ácido 6-cloronicotínico o un compuesto de fórmula (I)

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en el cual

\quad: Het representa un heterociclo que está en cada caso opcionalmente mono- o polisustituido con flúor, cloro, metilo o etilo, heterociclo que se selecciona del grupo de heterociclos siguiente: pirid-3-ilo, pirid-5-ilo, 3-piridinio, 1-óxido-5-piridinio; 1-óxido-5-piridinio, 1-óxido-5-piridinio, tetrahidrofuran-3-ilo, tiazol-5-ilo,

\quad: X representa N-NO_{2}, N-CN o CH-NO_{2} para aumentar la penetración de las raíces de una planta en un medio de cultivo.

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13. El uso de

a) ácido 6-cloronicotínico o un compuesto de fórmula (I)

21

en donde

\quad: X representa N-NO_{2}, N-CN o CH-NO_{2}, para aumentar la tolerancia de una planta a condiciones hipóxicas o anóxicas.

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14. El uso de la reivindicación 13, en el cual dichas condiciones hipóxicas o anóxicas en dicha planta están causadas por exposición a empapamiento, inmersión o inundación.