ES2337831T3 - Derivados de fenilglicinamida y piridilclicinamida utiles como agentes anticoagulantes. - Google Patents

Derivados de fenilglicinamida y piridilclicinamida utiles como agentes anticoagulantes. Download PDF

Info

Publication number
ES2337831T3
ES2337831T3 ES06785361T ES06785361T ES2337831T3 ES 2337831 T3 ES2337831 T3 ES 2337831T3 ES 06785361 T ES06785361 T ES 06785361T ES 06785361 T ES06785361 T ES 06785361T ES 2337831 T3 ES2337831 T3 ES 2337831T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
baselineskip
mmol
compounds
acid
alkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES06785361T
Other languages
English (en)
Inventor
Xiaojun Zhang
Alexandra A. Nirschl
Yan Zou
Eldon Scott Priestley
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bristol Myers Squibb Co
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Application granted granted Critical
Publication of ES2337831T3 publication Critical patent/ES2337831T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/26—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D237/30—Phthalazines
    • C07D237/34—Phthalazines with nitrogen atoms directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring, e.g. hydrazine radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Un compuesto de Fórmula (III): **(Ver fórmula)** o un esteroisómero o sal farmacéuticamente aceptable, o solvato del mismo, en la que: W es **(Ver fórmula)** o **(Ver fórmula)** X1 es CH o N; R1 es Cl, Br, Me, Et, OMe, OEt, OCHF2, o ciclopropilo; R2 es H, F, Cl, OMe, O(i-Pr), u OCHF2; R3 es H u OMe; R4 es H, F, Cl, u OMe; R7 es H, Me, -CH2CO2H, o -CH2CO2(alquilo C1-4); R8 es H, Me, CO2H, CO2(alquilo C1-4), -CH2CO2H, o -CH2CO2(alquilo C1-4); R10a es F, O(alquilo C1-4), CONRcRd, -S(alquilo C1-4), -SO2(alquilo C1-4), -SO2-ciclopropilo, -SO2-ciclobutilo, -SO2-ciclopentilo, -SO2-(pirrolidin-1-ilo), -SO2-(piperid-1-ilo), -SO2-(azepan-1-ilo), -SO2NRcRd, -SO2NH-ciclopropilo, morfolin-4-ilo, 3,5-dimetil-pirazol-1-ilo, o 3,5-dietil-pirazol-1-ilo; R10b es OH, NH2, -NHCO(alquilo C1-4), -NHCO2(alquilo C1-4), -NHSO2NH2, -SO2NH2, o -NHCONRcRd; R10c es H, Cl, o Me; Rc y Rd son, independientemente en cada ocurrencia, H o alquilo C1-4; alternativamente, Rc y Rd, cuando están unidos al mismo átomo de nitrógeno, se combinan formando un heterociclo de 4 a 5 eslabones que comprende: átomos de carbono y de 0 a 2 heteroátomos adicionales seleccionados entre N, O y S(O)p; estando dicho heterociclo sustituido con 0 a 2 Rg; y Rg es, independientemente en cada ocurrencia, =O, F, Cl, Br, CF3, OH, o alquilo C1-4.

Description

Derivados de fenilglicinamida y piridilglicinamida útiles como anticoagulantes.
Campo de la invención
La presente invención proporciona nuevos derivados de fenilglicinamida y piridilglicinamida y análogos de los mismos, que son inhibidores selectivos de enzimas de serinproteasa de la cascada de coagulación y/o el sistema de activación de contacto; por ejemplo, factor VIIa, factor Xa, factor XIa, factor IXa, trombina y/o calicreína en plasma. En particular, se refiere a compuestos que son inhibidores del factor VIIa. Esta invención también se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos.
Antecedentes de la invención
El factor VIIa es una serinproteasa en plasma que interviene en el inicio de la cascada de coagulación. Está presente en la sangre humana en una concentración de aproximadamente 500 ng/ml, con aproximadamente el 1% de la cantidad total en el factor VIIa de forma proteolíticamente activa (Morrissey, J. H. y col. Blood 1993, 81, 734-744). El factor VIIa se une con alta afinidad con su cofactor, factor hístico, en presencia de iones de calcio para formar un complejo con actividad proteolítica mejorada (Carson, S.D. y Brozna, J.P. Blood Coag. Fibrinol. 1993, 4, 281-292). El factor hístico se expresa normalmente en células que rodean a la vasculatura y dentro de la pared del vaso, y se expone al factor VIIa en sangre por lesión en el vaso o ruptura de la placa aterosclerótica. Una vez formado, el complejo factor hístico/factor VIIa inicia la coagulación sanguínea por escisión proteolítica de factor X a factor Xa, factor IX a factor IXa y autoactivación de factor VII adicional a VIIa. El factor Xa, generado directamente por factor hístico/factor VIIa o indirectamente a través de la acción de factor IXa, cataliza la conversión de protrombina a trombina. La trombina convierte el fibrinógeno en fibrina, que se polimeriza para formar el marco estructural de un coágulo sanguíneo, y activa las plaquetas, que son un componente celular clave de coagulación (Hoffman, M. Blood Reviews 2003, 17, S1-S5). Además, existe evidencia de que el factor hístico está presente en la sangre, probablemente en una forma encriptada que se desencripta durante la formación de coágulos (Giesen, P. L. A. y col. Proc. Natl. Acad. Sci. 1999, 96, 2311-2315; Himber, J. y col. J. Tromb. Haemost. 2003, 1, 889-895). El complejo factor hístico/factor VIIa derivado de factor hístico transportado en sangre puede desempeñar un papel importante en la propagación de la cascada de coagulación (crecimiento de coágulos) y en formación de trombo en ausencia de lesión en las paredes de los vasos (es decir, trombosis venosa profunda o sepsis inducida por estasis). La fuente de factor hístico transportado por la sangre es un área de investigación activa (Morrissey, J. H. J. Tromb. Haemost. 2003, 1, 878-880).
Aunque la coagulación sanguínea es esencial para la regulación de la hemostasia de un organismo, también interviene en muchas dolencias patológicas. En trombosis, puede formarse un coágulo de sangre, o trombo, y obstruir la circulación localmente, causando isquemia y daño orgánico. Alternativamente, en un proceso conocido como embolia, el coágulo puede desalojarse y posteriormente quedar atrapado en un vaso distal, en el que de nuevo causa isquemia y daño orgánico. Las enfermedades que proceden de la formación de un trombo patológico se refieren colectivamente como trastornos trombóticos o tromboembólicos e incluyen síndrome coronario agudo, angina inestable, infarto de miocardio, accidente cerebrovascular isquémico, trombosis venosa profunda, enfermedad arterial oclusiva periférica, ataque isquémico transitorio y embolia pulmonar. Además, la trombosis se produce en superficies artificiales en contacto con sangre, lo que incluye catéteres y válvulas cardiacas artificiales. Por tanto, los fármacos que inhiben la coagulación sanguínea, o anticoagulantes, son "agentes centrales para la prevención y el tratamiento de trastornos tromboembólicos" (Hirsch, J. y col. Blood 2005, 105, 453-463).
Debido a su papel clave en la cascada de coagulación, los investigadores han postulado que la inhibición del factor VIIa podría usarse para tratar o prevenir enfermedad trombótica o tromboembólica. (Girard, T. J.; Nicholson, N. S. Curr. Opin. Pharmacol. 2001, 1, 159-163; Lazarus, R. A., y col. Curr. Med. Chem. 2004, 11, 2275-2290; Frederick, R. y col. Curr. Med. Chem. 2005, 12, 397-417). Varios estudios han confirmado que varios inhibidores biológicos y de moléculas pequeñas de factor VIIa tienen eficacia antitrombótica in vivo con una baja responsabilidad de hemorragia. Por ejemplo, se ha demostrado que un inhibidor de factor VIIa biológico XK1, que comprende un híbrido de primer dominio kunitz de inhibidor de ruta de factor hístico y cadena ligera de factor X, previene la formación de trombos en un modelo de rata de trombosis arterial, sin cambio en el tiempo de hemorragia o en la pérdida total de sangre (Szalony, J. A. y col. J. Thrombosis and Thrombolysis 2002, 14, 113-121). Además, los inhibidores de factor VIIa dirigidos a sitios activos de moléculas pequeñas han demostrado eficacia antitrombótica en modelos animales de trombosis arterial (Suleymanov, O., y col. J Pharmacology and Experimental Therapeutics 2003, 306, 1115-1121; Young, W. B., y col. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 16, 2037-2041) y trombosis venosa (Szalony, J. A., y col. Thrombosis Research 2003, 112, 167-174; Arnold, C. S., y col. Thrombosis Research 2006, 117, 343-349), con escaso impacto en el tiempo de hemorragia o pérdida de sangre. Por otra parte, actualmente se encuentra bajo investigación clínica la proteína anticoagulante de nematodos recombinante de inhibidor de factor VIIa biológico C_{2} (rNAPC_{2}) para tratamiento de síndromes coronarios agudos. Los resultados de los ensayos clínicos iniciales demuestran que rNAPC_{2} reduce la generación de trombina sistémica en pacientes sometidos a angioplastia coronaria (Moons, A. H. M. J. Am. Coll. Cardiol. 2003, 41, 2147-2153) y que evita la trombosis venosa profunda en pacientes sometidos a sustitución de rodilla total (Lee, A., y col. Circulation 2001, 104, 74-78).
En consecuencia se han realizado trabajos para identificar y optimizar los inhibidores de factor VIIa. Por ejemplo, el documento US-5.866.542 describe proteínas anticoagulantes de nematodos recombinantes que inhiben el factor VIIa. El documento US-5.843.442 desvela anticuerpos monoclonales o fragmentos de anticuerpos que poseen actividad inhibidora de factor VIIa, y el documento US-5.023.236 presenta tripéptidos y derivados de tripéptidos que inhiben el factor VIIa.
La solicitud de patente internacional WO-2004/072.102 describe compuestos de bencenoacetamida que son útiles en el tratamiento de trastornos asociados con el factor VIIa.
Una forma alternativa de inicio de la coagulación está operativa cuando se expone la sangre a superficies artificiales (por ejemplo, durante hemodiálisis, cirugía cardiovascular "en bomba", injertos de vasos, sepsis bacteriana). Este procedimiento se denomina también activación de contacto. La absorción superficial de factor XII conduce a cambio conformacional en la molécula de factor XII, con lo que se facilita la activación para factor XII proteolíticamente activo (factor XIIa y factor XIIf). El factor XIIa (o XIIf) tiene una serie de proteínas objeto, que incluyen precalicreína en plasma y factor XI. La calicreína en plasma activa además el factor XII, llevando a una amplificación de la activación de contacto. El FXI activado actúa sobre FIX, que actúa a través de la cascada de coagulación para producir trombina. Así, sería de esperar que los inhibidores de calicreína en plasma ejercieran un efecto antitrombótico en condiciones de activación de contacto. La activación de contacto es un procedimiento mediado en superficie responsable en parte de la regulación de la trombosis y la inflamación, y está mediado, al menos en parte, por rutas fibrinolíticas, de complemento, de cininógeno/cinina y otras rutas humorales y celulares (para revisión, Coleman, R. Contact Activation Pathway, páginas 103-122 en Hemostasia and Thrombosis, Lippincott Williams & Wilkins 2001; Schmaier A.H. Contact Activation, páginas 105-128 en Thrombosis and Hemorrhage, 1998).
La calicreína en plasma es un zimógeno de una serinproteasa de tipo tripsina y está presente en plasma en de 35 a 50 \mug/ml. La estructura génica es similar a la del factor XI; en conjunto, la secuencia de aminoácidos de calicreína en plasma tiene una homología del 58% con el factor XI. La activación proteolítica por factor XIIa en un enlace interno 1389-R390 produce una cadena pesada (371 aminoácidos) y una cadena ligera (248 aminoácidos). El sitio activo de calicreína está contenido en la cadena ligera. La cadena ligera de calicreína en plasma reacciona con inhibidores de proteasa, que incluyen alfa-2-macroglobulina e inhibidor C_{1}. De forma interesante, la heparina acelera significantemente la inhibición de calicreína en plasma por antitrombina III en presencia de cininógeno de alto peso molecular (HMWK). En sangre, la mayoría de la calicreína en plasma circula en complejo con HMWK. La calicreína escinde HMWK para liberar bradicinina. La liberación de bradicinina da como resultado un aumento de la permeabilidad vascular y la vasodilatación (para revisión, Coleman, R. Contact Activation Pathway, páginas 103-122 en Hemostasia and Thrombosis, Lippincott Williams & Wilkins 2001; Schmaier A.H. Contact Activation, páginas 105-128 en Thrombosis and Hemorrhage, 1998). Sería de esperar que los inhibidores de calicreína en plasma redujeran el potencial de liberación de bradicinina y ejercieran así un efecto antiinflamatorio.
Aunque en la técnica se ha tratado sobre diversos inhibidores de factor VIIa, siempre son deseables inhibidores mejorados, especialmente inhibidores no peptídicos, de serinproteasas para el tratamiento de trastornos tromboembólicos. La presente invención desvela derivados de fenilglicinamida y piridilglicinamida y análogos de los mismos, como inhibidores de coagulación de factor VIIa y, de este modo, su utilidad en el tratamiento de trastornos
tromboembólicos.
Además, es deseable también encontrar nuevos compuestos con características farmacológicas mejoradas con inhibidores de serinproteasa conocidos. Por ejemplo, se prefiere encontrar nuevos compuestos con actividad inhibidora de factor VIIa mejorada y selectividad por factor VIIa frente a otras serinproteasas. También, se prefiere encontrar nuevos compuestos con actividad inhibidora de calicreína en plasma mejorada y selectividad por calicreína en plasma frente a otras serinproteasas. También, se prefiere encontrar nuevos compuestos con actividad mejorada en ensayos de coagulación in vitro, como el ensayo de tiempo de protrombina (PT) o ensayo de tiempo de tromboplastina parcial activado (APTT) (para una descripción de los ensayos PT y APTT véase, Goodnight, S. H.; Hathaway, W. E. Screening Tests of Hemostasia. Disorders of Thrombosis and Hemostasia: a clinical guide, 2ª edición, McGraw-Hill: Nueva York, 2001 pág. 41-51). También es deseable y preferible encontrar compuestos con características ventajosas y mejoradas en una o más de las siguientes categorías, que se dan como ejemplos y no pretenden ser limitativas: (a) propiedades farmacocinéticas, incluyendo biodisponibilidad oral; (b) propiedades farmacéuticas; (c) requisitos de dosificación; (d) factores que reducen las características de concentración de sangre pico-valle; (e) factores que aumentan la concentración de fármaco activo en el receptor; (f) factores que reducen la responsabilidad de interacciones clínicas fármaco-fármaco; (g) factores que reducen el potencial de efectos secundarios adversos; y (h) factores que mejoran los costes de fabricación o la viabilidad.
Resumen de la invención
La presente invención proporciona nuevos derivados de fenilglicinamida y piridilglicinamida, y análogos de los mismos, que son útiles como inhibidores selectivos de enzimas de serinproteasa, especialmente factor VIIa, incluyendo esteroisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, solvatos o profármacos de los mismos.
La presente invención también proporciona procedimientos y productos intermedios para preparar uno de los compuestos de la presente invención o un esteroisómero, tautómero, sal farmacéuticamente aceptable, solvato o profármaco del mismo.
\newpage
La presente invención también proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden un vehículo farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de la presente invención o un esteroisómero, tautómero, sal farmacéuticamente aceptable, solvato o profármaco del mismo.
La presente invención también proporciona los compuestos de la presente invención o esteroisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, solvatos o profármacos de los mismos, para su uso en terapia.
La presente invención también proporciona el uso de los compuestos de la presente invención o esteroisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, solvatos o profármacos de los mismos, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno trombótico o tromboembólico.
La presente invención también proporciona el uso de los compuestos de la presente invención o esteroisómeros, tautómeros, sales farmacéuticamente aceptables, solvatos o profármacos de los mismos, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno inflamatorio.
Estas y otras características de la invención se expondrán en forma ampliada en la descripción que sigue.
Descripción detallada de la invención
En una primera forma de realización, la presente invención incluye los compuestos de Fórmula (III):
1
o un esteroisómero o sal farmacéuticamente aceptable o solvato de los mismos, en la que:
W es
2
o
3
X^{1} es CH o N;
R^{1} es Cl, Br, Me, Et, OMe, OEt, OCHF_{2}, o ciclopropilo;
R^{2} es H, F, Cl, OMe, O(i-Pr), u OCHF_{2};
R^{3} es H u OMe;
R^{4} es H, F, Cl, u OMe;
R^{7} es H, Me, -CH_{2}CO_{2}H, o -CH_{2}CO_{2} (alquilo C_{1-4});
R^{8} es H, Me, CO_{2}H, CO_{2}(alquilo C_{1-4}), -CH_{2}CO_{2}H, o -CH_{2}CO_{2} (alquilo C_{1-4});
R^{10a} es F, O(alquilo C_{1-4}), CONR^{c}R^{d}, -S(alquilo C_{1-4}), -SO_{2}(alquilo C_{1-4}), -SO_{2}-ciclopropilo, -SO_{2}-ciclobutilo, -SO_{2}-ciclopentilo, -SO_{2}-(pirrolidin-1-ilo), -SO_{2}-(piperid-1-ilo), -SO_{2}-(azepan-1-ilo), -SO_{2}NR^{c}R^{d}, -SO_{2}NH-ciclopropilo, morfolin-4-ilo, 3,5-dimetil-pirazol-1-ilo, o 3,5-dietil-pirazol-1-ilo;
R^{10b} es OH, NH_{2}, -NHCO(alquilo C_{1-4}), -NHCO_{2}(alquilo C_{1-4}), -NHSO_{2}NH_{2}, -SO_{2}NH_{2}, o -NHCONR^{c}R^{d};
R^{10c} es H, Cl, o Me;
R^{c} y R^{d} son, independientemente en cada ocurrencia, H o alquilo C_{1-4}; alternativamente, R^{c} y R^{d}, cuando están unidos al mismo átomo de nitrógeno, se combinan formando un heterociclo de 4 a 5 eslabones que comprende: átomos de carbono y de 0 a 2 heteroátomos adicionales seleccionados entre N, O y S(O)p; estando dicho heterociclo sustituido con 0 a 2 R^{g}; y
R^{g} es, independientemente en cada ocurrencia, =O, F, Cl, Br, CF_{3}, OH, o alquilo C_{1-4}.
\vskip1.000000\baselineskip
En una segunda forma de realización, la presente invención incluye los compuestos de Fórmula (III), dentro del ámbito de la primera forma de realización en la que:
W es
4
X^{1} es CH;
R^{7} es H, Me, o -CH_{2}CO_{2}H;
R^{8} es H, Me, CO_{2}H, -CH_{2}CO_{2}H, o -CH_{2}CO_{2}Me;
R^{10a} es F, O(i-Pr), -CONMe_{2}, -CO-(pirrolidin-1-ilo), -CO-(piperid-1-ilo), -S(i-Pr), -SO_{2}Et, -SO_{2}Pr, -SO_{2}(i-Pr),
-SO_{2}(t-Bu),-SO_{2}-ciclopropilo, -SO_{2}-ciclobutilo, -SO_{2}-ciclopentilo, -SO_{2}-(pirrolidin-1-ilo), -SO_{2}-(piperid-1-ilo), -SO_{2}-(azepan-1-ilo), -SO_{2}NHMe, -SO_{2}NMe_{2}, -SO_{2}NHEt, -SO_{2}NH(i-Pr), -SO_{2}NH-ciclopropilo, morfolin-4-ilo, 3,5-dimetil-pirazol-1-ilo, o 3,5-dietil-pirazol-1-ilo;
R^{10b} es OH, NH_{2}, -NHCOMe, -NHCOPr, -NHCO_{2}Me, -NHCO_{2}Et, -NHCO_{2}(i-Pr), -NHCO_{2}(i-Bu), -NHSO_{2}NH_{2}, -SO_{2}NH_{2}, -NHCON(Me)_{2}, -NHCON(Me)(Et), -NHCON(Me)(i-Pr), o
5
o
6
y
R^{10c} es H.
\newpage
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: W es
7
En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: W es
8
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: X^{1} es
CH.
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{1} es OMe u OEt. En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{1} es OMe. En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{1} es OEt.
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{2} es H, OMe, u O(i-Pr). En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{2} es OMe, u O(i-Pr). En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{2} es O(i-Pr).
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{4} es H.
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{7} es H o Me. En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{7} es H.
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{8} es H o Me. En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{8} es H.
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{10a} es CONMe_{2}, -CO-(pirrolidin-1-ilo), -CO-(piperid-1-ilo), -S(i-Pr), -SO_{2}Et, -SO_{2}Pr, -SO_{2}(i-Pr), -SO_{2}(t-Bu), -SO_{2}-ciclopropilo, -SO_{2}-ciclobutilo, -SO_{2}-ciclopentilo, -SO_{2}-(pirrolidin-1-ilo), -SO_{2}-(piperid-1-ilo), -SO_{2}-(azepan-1-ilo),
-SO_{2}NHMe, -SO_{2}NMe_{2}, -SO_{2}NHEt, -SO_{2}NH(i-Pr), o -SO_{2}NH-ciclopropilo. En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{10a} es -SO_{2}Et, -SO_{2}Pr, -SO_{2} (i-Pr), -SO_{2}(t-Bu), -SO_{2}-ciclopropilo, -SO_{2}-ciclobutilo, -SO_{2}-ciclopentilo, -SO_{2}-(pirrolidin-1-ilo), -SO_{2}-(piperid-1-ilo), -SO_{2}-(azepan-1-ilo),
-SO_{2}NHMe, -SO_{2}NMe_{2}, -SO_{2}NHEt, -SO_{2}NH(i-Pr), o -SO_{2}NH-ciclopropilo. En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{10a} es -SO_{2}Et, -SO_{2}Pr, o -SO_{2}(i-Pr).
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{10b} es -NHCOMe, -NHCO_{2}Me, -NHSO_{2}NH_{2}, o -SO_{2}NH_{2}. En otras formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{10b} es -NHCOMe o -NHCO_{2}Me.
En algunas formas de realización, la presente invención incluye compuestos de Fórmula (III) en la que: R^{10c} es H.
En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado entre los compuestos ilustrados o un esteroisómero o sal farmacéuticamente aceptable o solvato de los mismos.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y al menos uno de los compuestos de la presente invención o un esteroisómero, sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un vehículo farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos uno de los compuestos de la presente invención o un esteroisómero, sal farmacéuticamente aceptable o solvato del mismo.
Los compuestos de la invención son útiles para tratar trastornos trombóticos o tromboembólicos.
El trastorno tromboembólico puede seleccionarse entre el grupo constituido por trastornos tromboembólicos cardiovasculares arteriales, trastornos tromboembólicos cardiovasculares venosos, trastornos tromboembólicos cerebrovasculares arteriales y trastornos tromboembólicos cerebrovasculares venosos.
El trastorno tromboembólico puede también seleccionarse entre angina inestable, un síndrome coronario agudo, fibrilación auricular, primer infarto de miocardio, infarto de miocardio recurrente, muerte súbita isquémica, ataque isquémico transitorio, accidente cerebrovascular, aterosclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, trombosis venosa, trombosis venosa profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar y trombosis resultantes de implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre se expone a una superficie artificial que promueve la trombosis.
Los compuestos de la invención son útiles para tratar trastornos inflamatorios.
El trastorno inflamatorio puede seleccionarse entre el grupo constituido por sepsis, síndrome disneico agudo y síndrome de respuesta inflamatoria sistémica.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende además al menos un agente terapéutico adicional seleccionado entre uno o más entre abridores de canales del potasio, bloqueantes de canales de potasio, bloqueantes de canales del calcio, inhibidores intercambiadores de hidrógeno-sodio, agentes antiarrítmicos, agentes antiateroscleróticos, anticoagulantes, agentes antitrombóticos, agentes protrombóticos, antagonistas de fibrinógeno, diuréticos, agentes antihipertensivos, inhibidores de ATPasa, antagonistas de receptores de mineralocorticoides, inhibidores de fosfodiesterasa, agentes antidiabéticos, agentes antiinflamatorios, antioxidantes, moduladores de angiogénesis, agentes antiosteoporosis, terapias de sustitución de hormonas, moduladores de receptores de hormonas, anticonceptivos orales, agentes antiobesidad, antidepresivos, agentes antiansiedad, agentes antipsicóticos, agentes antiproliferativos, agentes antitumorales, agentes de enfermedad de reflujo gastroesofágico y antiúlcera, agentes de hormona del crecimiento y/o secretagogos de hormona del crecimiento, miméticos tiroideos, agentes antiinfecciosos, agentes antivirales, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, agentes de reducción de colesterol/lípidos y terapias de perfil lipídico, y agentes que emulan preacondicionamiento isquémico y/o aturdimiento miocárdico, o una combinación de los mismos.
En una forma de realización preferida, la presente invención proporciona una composición farmacéutica en la que el o los agentes terapéuticos adicionales son un agente antihipertensivo seleccionado entre inhibidores de ACE, antagonistas de receptores de A-1, antagonistas de receptores beta-adrenérgicos, antagonistas de receptores de ETA, antagonistas de receptores de ETA/A-1 duales, e inhibidores de vasopeptidasa, un agente antiarrítmico seleccionado entre inhibidores IKur, un agente anticoagulante seleccionado entre inhibidores de trombina, activadores de antitrombina-III, activadores de cofactor II de heparina, otros inhibidores de factor VIIa, otros inhibidores de calicreína en plasma, antagonistas de inhibidores de activadores de plasminógenos (PAI-1), inhibidores de inhibidores de fibrinólisis de trombina activables (TAFI), inhibidores de factor IXa, inhibidores de factor Xa e inhibidores de factor XIa, o un agente antiplaquetario seleccionado entre bloqueantes de GPIIb/IIIa, antagonistas de receptores activados de proteasa (PAR-1), inhibidores de fosfodiesterasa-III, antagonistas de receptores de P2Y1, antagonistas de receptores de P2Y12, antagonistas de receptores de tromboxano, inhibidores de ciclooxigenasa-1 y aspirina, o una combinación de los mismos.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende además agente(s) terapéutico(s) adicional(es) seleccionado(s) entre un agente antiarrítmico, un agente antihipertensivo, un agente anticoagulante, un agente antiplaquetario, un agente de inhibición de trombina, un agente trombolítico, un agente fibrinolítico, un bloqueante del canal del calcio, un bloqueante del canal del potasio, un agente de reducción de colesterol/lípidos, o una combinación de los mismos.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que comprende además agente(s) terapéutico(s) adicional(es) seleccionado(s) entre warfarina, heparina no fraccionada, heparina de bajo peso molecular, pentasacárido sintético, hirudina, argatrobán, aspirina, ibuprofeno, naproxeno, sulindac, indometacina, mefenamato, dipiridamol, droxicam, diclofenac, sulfinpirazona, piroxicam, ticlopidina, clopidogrel, tirofibano, eptifibatida, abciximab, melagatrán, ximelagatrán, disulfatohirudina, activador de plasminógeno tisular, activador de plasminógeno tisular modificado, anistreplasa, urocinasa y estreptocinasa, o una combinación de los mismos.
En una forma de realización preferida, la presente invención proporciona una composición farmacéutica, en la que el o los agentes terapéuticos adicionales son un agente antiplaquetario o una combinación de los mismos.
En una forma de realización preferida, la presente invención proporciona una composición farmacéutica, en la que el agente terapéutico adicional es el agente antiplaquetario seleccionado entre clopidogrel y aspirina, o una combinación de los mismos.
En una forma de realización preferida, la presente invención proporciona una composición farmacéutica, en la que el agente terapéutico adicional es el agente antiplaquetario clopidogrel.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención para su uso en terapia.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona un compuesto de la presente invención para su uso en terapia para tratar un trastorno trombótico y tromboembólico.
En otra forma de realización, la presente invención también proporciona el uso de un compuesto de la presente invención para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno trombótico o tromboembólico.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona una preparación combinada de un compuesto de la presente invención y agente(s) terapéutico(s) adicional(es) para su uso en terapia simultáneo, separado o secuencial.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona una preparación combinada de un compuesto de la presente invención y agente(s) terapéutico(s) adicional(es) para uso simultáneo, separado o secuencial en tratamiento de un trastorno trombótico o tromboembólico.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona un nuevo artículo de fabricación, que comprende: (a) un primer recipiente; (b) una composición farmacéutica situada dentro del primer recipiente, en el que la composición comprende: un primer agente terapéutico, que comprende: un compuesto de la presente invención; y (c) un inserto de envase que indica que la composición farmacéutica puede usarse para el tratamiento de un trastorno trombótico o tromboembólico.
En otra forma de realización preferida, la presente invención proporciona un nuevo artículo de fabricación, que comprende además: (d) un segundo recipiente; en el que los componentes (a) y (b) están situadas dentro del segundo recipiente y el componente (c) está situado dentro o fuera del segundo recipiente.
En otra forma de realización, la presente invención proporciona un nuevo artículo de fabricación, que comprende: (a) un primer recipiente; (b) una composición farmacéutica situada dentro del primer recipiente, en el que la composición, comprende: un primer agente terapéutico, que comprende: un compuesto de la presente invención; y (c) un inserto de envase que indica que la composición farmacéutica puede usarse en combinación con un segundo agente terapéutico para tratar un trastorno trombótico o tromboembólico.
En otra forma de realización preferida, la presente invención proporciona un nuevo artículo de fabricación, que comprende además: (d) un segundo recipiente; en el que los componentes (a) y (b) están situados dentro del segundo recipiente y el componente (c) está situado dentro o fuera del segundo recipiente.
La presente invención puede estar realizada en otras formas específicas sin apartarse del espíritu o los atributos esenciales de la misma. Esta invención comprende todas las combinaciones de aspectos preferidos de la invención indicados en la presente memoria descriptiva. Se entiende que todas y cualesquiera de las formas de realización de la presente invención pueden tomarse en conjunción con cualquier otra forma de realización o formas de realización para describir formas de realización adicionales más preferidas. También debe entenderse que cada elemento individual de las formas de realización preferidas es a su vez una forma de realización preferida independiente. Además, se entiende que cualquier elemento de una forma de realización puede combinarse con todos y cualesquiera de los otros elementos de cualquier forma de realización para describir una forma de realización adicional.
Definiciones
Los compuestos descritos en la presente memoria descriptiva pueden tener centros asimétricos. Los compuestos de la presente invención que contienen un átomo sustituido asimétricamente pueden aislarse en formas ópticamente activas o racémicas. Se conoce bien en la técnica cómo preparar formas ópticamente activas, como por resolución de formas racémicas o por síntesis usando materiales de partida ópticamente activos o catalizadores ópticamente activos. En los compuestos descritos en la presente memoria descriptiva también pueden estar presentes isómeros geométricos de dobles enlaces como olefinas y dobles enlaces C=N, y todos dichos isómeros estables se contemplan en la presente invención. Se describen isómeros geométricos cis y trans de los compuestos de la presente invención y pueden aislarse como una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. Se pretenden todas las formas quirales, diastereoméricas, racémicas y todas las formas isoméricas geométricas de una estructura, a menos que se indique específicamente la forma estereoquímica o isomérica específica. Cuando no se hace mención específica de la configuración (cis, trans o R o S) de un compuesto (o de un carbono asimétrico), entonces se pretende cualquiera de los isómeros o una mezcla de más de un isómero. Los procedimientos para preparación pueden usar racematos, enantiómeros o diastereómeros como materiales de partida.
Todos los procedimientos usados para preparar compuestos de la presente invención y productos intermedios hechos con la misma se consideran parte de la presente invención. Cuando se preparan productos enantioméricos o diastereoméricos, éstos pueden separarse por procedimientos convencionales, por ejemplo, por cromatografía o cristalización fraccionada. Los compuestos de la presente invención, y las sales de los mismos, pueden existir en múltiples formas tautoméricas, en las que los átomos de hidrógeno están traspuestos a otras partes de las moléculas y los enlaces químicos entre los átomos de las moléculas se reordenan consiguientemente. Debe entenderse que todas las formas tautoméricas, en la medida en que puedan existir, están incluidas dentro de la invención. Los compuestos de la invención pueden estar en forma libre o hidratada.
\newpage
Preferentemente, el peso molecular de compuestos de la presente invención es menor que aproximadamente 500, 550, 600, 650, 700, 750 ó 800 gramos por mol. Preferentemente, el peso molecular es menor que aproximadamente 800 gramos por mol. Más preferentemente, el peso molecular es menor que aproximadamente 750 gramos por mol. Más preferentemente todavía, el peso molecular es menor que aproximadamente 700 gramos por mol.
El término "sustituido", según se usa en la presente memoria descriptiva, significa que uno o más hidrógenos cualesquiera en el átomo designado está sustituido por una selección a partir del grupo indicado, siempre que no se supere la valencia normal del átomo designado, y que la sustitución dé como resultado un compuesto estable. Cuando un sustituyente es ceto (es decir, =O), entonces se sustituyen 2 hidrógenos en el átomo. Cuando se dice que se sustituirá un sistema de anillos (por ejemplo, carbocíclico o heterocíclico) con un grupo carbonilo o un doble enlace, se quiere decir que el átomo de carbono del grupo carbonilo o un átomo de carbono del doble enlace es parte de (es decir, está dentro de) el anillo. Los dobles enlaces de anillos, según se usa en la presente memoria descriptiva, son dobles enlaces que se forman entre dos átomos adyacentes del anillo (por ejemplo, C=C, C=N o N=N).
En casos en que existen átomos de nitrógeno (por ejemplo, aminas) en compuestos de la presente invención, pueden convertirse en N-óxidos por tratamiento con un agente oxidante (por ejemplo, MCPBA y/o peróxidos de hidrógeno) para dar lugar a otros compuestos de esta invención. Así, se considera que todos los átomos de nitrógeno mostrados y reivindicados cubren tanto el nitrógeno mostrado como su derivado de N-óxido (N\rightarrowO). En casos en que existen átomos de carbono cuaternarios en compuestos de la presente invención, pueden ser sustituidos con átomos de silicio, siempre que no formen enlace Si-N o Si-O.
Cuando una variable cualquiera aparece más de una vez en cualquier constituyente o fórmula para un compuesto, su definición en cada ocurrencia es independiente de su definición en cada otra ocurrencia. Así, por ejemplo, si se muestra que un grupo está sustituido con 0 a 3 R^{10}, entonces dicho grupo puede ser sustituido opcionalmente con hasta tres grupos R^{10} grupos y R^{2b} en cada ocurrencia se selecciona independientemente de la definición de R^{10}. También, las combinaciones de sustituyentes y/o variables son permisibles sólo si dichas combinaciones dan como resultado compuestos estables.
Cuando se muestra que un enlace con un sustituyente cruza un enlace que une dos átomos en un anillo, entonces dicho sustituyente puede estar unida a cualquier átomo en el anillo. Cuando un sustituyente se enumera sin indicar el átomo a través del cual el sustituyente está unido al resto del compuesto de una fórmula dada, entonces dicho sustituyente puede estar unido por medio de cualquier átomo de dicho sustituyente. Las combinaciones de sustituyentes y/o variables son permisibles sólo si dichas combinaciones dan como resultado compuestos estables.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, "alquilo" o "alquileno" pretende incluir grupos de hidrocarburos alifáticos saturados de cadena lineal o ramificada que tienen el número especificado de átomos de carbono. Por ejemplo, "alquilo C_{1}-C_{10} " o "alquilo C_{1-10}" (o alquileno), pretende incluir grupos alquilo C_{1}, C_{2}, C_{3}, C_{4}, C_{5}, C_{6}, C_{7}, C_{8}, C_{9} y C_{10}. Adicionalmente, por ejemplo, "alquilo C_{1-6}" denota alquilo que tiene de 1 a 6 átomos de carbono. Los grupos alquilo pueden estar sustituidos o no sustituidos de manera que uno o más de sus hidrógenos están reemplazados por otro grupo químico. Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a, metilo (Me), etilo (Et), propilo (por ejemplo, n-propilo e isopropilo), butilo (por ejemplo, n-butilo, isobutilo, t-butilo), pentilo (por ejemplo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo), y similares.
"Alquenilo" o "alquenileno" pretende incluir cadenas de hidrocarburos de una configuración lineal o ramificada que tiene el número especificado de átomos de carbono y uno o más enlaces carbono-carbono insaturados que pueden presentarse en cualquier punto estable a lo largo de la cadena. Por ejemplo, "alquenilo C_{2-6}" (o alquenileno), pretende incluir grupos alquenilo C_{2}, C_{3}, C_{4}, C_{5} y C_{6}. Los ejemplos de alquenilo incluyen, pero no se limitan a, etenilo, 1-propenilo, 2-propenilo, 2-butenilo, 3-butenilo, 2-pentenilo, 3-pentenilo, 4-pentenilo, 2-hexenilo, 3-hexenilo, 4-hexenilo, 5-hexenilo, 2-metil-2-propenilo, 4-metil-3-pentenilo, y similares.
"Alquinilo" o "alquinileno" pretende incluir cadenas de hidrocarburo de configuración lineal o ramificada y uno o más triples enlaces carbono-carbono que pueden presentarse en cualquier punto estable a lo largo de la cadena. Por ejemplo, "alquinilo C_{2-6}" (o alquinileno), pretende incluir grupos alquinilo C_{2}, C_{3}, C_{4}, C_{5}, y C_{6}; como etinilo, propinilo, butinilo, pentinilo, hexinilo y similares.
El término "cicloalquilo" se refiere a grupos alquilo cíclicos, que incluyen sistemas de anillos mono-, bi- o poli-cíclicos. El cicloalquilo C_{3-7} pretende incluir grupos cicloalquilo C_{3}, C_{4}, C_{5}, C_{6}, y C_{7}. Los ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, norbornilo, y similares. Los grupos cicloalquilo ramificados como 1-metilciclopropilo y 2-metilciclopropilo se incluyen en la definición de "cicloalquilo".
"Alcoxi" o "alquiloxi" representa un grupo alquilo según se define anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unidos a través de un puente de oxígeno. Por ejemplo, "alcoxi C_{1}-C_{6}" (o alquiloxi), pretende incluir grupos alcoxi C_{1}, C_{2}, C_{3}, C_{4}, C_{5} y C_{6}. Los ejemplos de alcoxi incluyen, pero no se limitan a, metoxi, etoxi, n-propoxi, i-propoxi, n-butoxi, s-butoxi, t-butoxi, n-pentoxi y s-pentoxi. Análogamente, "alquiltio" o "tioalcoxi" representa un grupo alquilo según se define anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unidos a través de un puente de azufre; por ejemplo metil-S-, etil-S-, y similares.
"Halo" o "halógeno" según se usa en la presente memoria descriptiva se refiere a flúor, cloro, bromo, y yodo; y "contraión" se usa para representar una especie pequeña, cargada negativamente como cloruro, bromuro, hidróxido, acetato, sulfato, y similares.
"Haloalquilo" pretende incluir grupos de hidrocarburos alifáticos de cadena lineal y ramificada que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más halógenos. Los ejemplos de haloalquilo incluyen, pero no se limitan a, fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, triclorometilo, pentafluoroetilo, pentacloroetilo, 2,2,2-trifluoroetilo, heptafluoropropilo y heptacloropropilo. Los ejemplos de haloalquilo incluyen también "fluoroalquilo" que pretende incluir grupos de hidrocarburos alifáticos saturados lineales y ramificados que tienen el número especificado de átomos de carbono, sustituidos con 1 o más átomos de flúor.
"Haloalcoxi" o "haloalquiloxi" representa un grupo haloalquilo según se define anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unidos a través de un puente de oxígeno. Por ejemplo, "haloalcoxi C_{1}-C_{6}" pretende incluir grupos haloalcoxi C_{1}, C_{2}, C_{3}, C_{4}, C_{5}, y C_{6}. Los ejemplos de haloalcoxi incluyen, pero no se limitan a, trifluorometoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi, pentafluorotoxi, y similares. Análogamente, "haloalquiltio" o "tiohaloalcoxi" representa un grupo haloalquilo según se define anteriormente con el número indicado de átomos de carbono unidos a través de un puente de azufre; por ejemplo trifluorometil-S-, pentafluoroetil-S-, y similares.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, "carbociclo" pretende significar cualquier anillo monocíclico o bicíclico estable de 3, 4, 5, 6, 7 u 8 eslabones o bicíclico o tricíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12 ó 13 eslabones, cualquiera de los cuales puede ser saturado, parcialmente insaturado o aromático. Los ejemplos de dichos carbociclos incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, adamantilo, ciclooctilo, [3,3,0]biciclooctano, [4,3,0]biciclononano, [4,4,0]biciclodecano (decalina), [2,2,2] biciclooctano, fluorenilo, fenilo, naftilo, indanilo, adamantilo o tetrahidronaftilo (tetralina). Los carbociclos preferidos, salvo que se especifique lo contrario, son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, fenilo e indanilo. Cuando se usa el término "carbociclo", pretende incluir "arilo".
Según se usa en la presente memoria descriptiva, el término "arilo", " arilo C_{6}-C_{10}" o "residuo aromático", pretende significar una fracción aromática que contiene, si se especifica, el número especificado de átomos de carbono; por ejemplo fenilo o naftilo. Salvo que se especifique lo contrario, "arilo", "arilo C_{6}-C_{10}" o "residuo aromático" puede estar sustituido o sin sustituir por de 0 a 3 grupos seleccionados entre H, OH, OCH_{3}, Cl, F, Br, I, CN, NO_{2}, NH_{2}, N(CH_{3})H, N(CH_{3})_{2}, CF_{3}, OCF_{3}, C(=O)CH_{3}, SCH_{3}, S(=O)CH_{3}, S(=O)_{2}CH_{3}, CH_{3}, CH_{2}CH_{3}, CO_{2}H, y CO_{2}CH_{3}.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, el término "carbociclo bicíclico" o "grupo carbocíclico bicíclico" pretende significar un sistema de anillo carbocíclico estable de 9 ó 10 eslabones que contiene dos anillos condensados y constituidos por átomos de carbono. De los dos anillos condensados, un anillo es un anillo benzo condensado con un segundo anillo; y el segundo anillo es un anillo de carbono de 5 ó 6 eslabones que es saturado, parcialmente insaturado, o insaturado. El grupo carbocíclico bicíclico puede estar unido a su grupo lateral en cualquier átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable. El grupo carbocíclico bicíclico descrito en la presente memoria descriptiva puede estar sustituido en cualquier carbono si el compuesto resultante es estable. Los ejemplos de un grupo carbocíclico bicíclico son, pero no se limitan a, naftilo, 1,2-dihidronaftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo e indanilo.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, el término "heterociclo" o "grupo heterocíclico" pretende significar un anillo estable monocíclico o policíclico de 5, 6 ó 7 eslabones o policíclico heterocíclico de 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ó 14 eslabones que es saturado, parcialmente insaturado o totalmente insaturado, y que consta de átomos de carbono y 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre el grupo constituido por N, O y S; y que incluye cualquier grupo policíclico en el que cualquiera de los anillos heterocíclicos definidos anteriormente está condensado con un anillo de benceno. Los heteroátomos de nitrógeno y azufre pueden opcionalmente oxidarse a -NO-, -SO-, o -SO_{2}-. El anillo heterocíclico puede estar unido a su grupo lateral en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable. El anillo heterocíclico descrito en la presente memoria descriptiva puede estar sustituido en carbono o en un átomo de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Si se indica específicamente, un nitrógeno en el heterociclo puede estar cuaternizado opcionalmente. Se prefiere que cuando el número total de átomos de S y O en el heterociclo supere 1, entonces estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que el número total de átomos de S y O en el heterociclo no sea superior a 1. Cuando se usa el término "heterociclo", pretende incluir heteroarilo.
Los ejemplos de heterociclos incluyen, pero no se limitan a, 2-pirrolidonilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, 2H-pirrolilo, 3H-indolilo, 4-piperidonilo, 4aH-carbazol, 4H-quinolizinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, acridinilo, azocinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotiofenilo, benzoxazolilo, benzoxazolinilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, benzotetrazolilo, bencisoxazolilo, bencisotiazolilo, bencimidazalonilo, carbazolilo, 4aH-carbazolilo, b-carbolinilo, cromanilo, cromenilo, cinnolinilo, decahidroquinolinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofurano, furanilo, furazanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, imidazolopiridinilo, 1H-indazolilo, indolenilo, indolinilo, indolizinilo, indolilo, isatinoílo, isobenzofuranilo, isocromanilo, isoindazolilo, isoindolinilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isotiazolopiridinilo, isoxazolilo, isoxazolopiridinilo, morfolinilo, naftiridinilo, octahidroisoquinolinilo, oxadiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, oxazolopiridinilo, oxazolidinilperimidinilo, oxindolilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenarsazinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxatiinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, piperazinilo, piperidinilo, pteridinilo, piperidonilo, 4-piperidonilo, pteridinilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, pirazolopiridinilo, pirazolilo, piridazinilo, piridooxazol, piridoimidazol, piridotiazol, piridinilo, piridilo, pirimidinilo, pirrolidinilo, pirrolinilo, pirrolilo, quinazolinilo, quinolinilo, 4H-quinolizinilo, quinoxalinilo, quinuclidinilo, carbolinilo, tetrazolilo, tetrahidrofuranoílo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tiazolopiridinilo, tienilo, tienotiazolilo, tienooxazolilo, tienoimidazolilo, tiofenilo, triazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,5-triazolilo, 1,3,4-triazolilo y xantenilo.
Los heterociclos preferidos de 5 a 10 eslabones incluyen, pero no se limitan a, piridinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazinilo, piperazinilo, piperidinilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tetrahidrofuranoílo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo, triazolilo, bencimidazolilo, 1H-indazolilo, benzofuranilo, benzotiofuranilo, benzotetrazolilo, benzotriazolilo, bencisoxazolilo, benzoxazolilo, oxindolilo, benzoxazolinilo, benzotiazolilo, bencisotiazolilo, isatinoílo, isoquinolinilo, octahidroisoquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, isoxazolopiridinilo, quinazolinilo, quinolinilo, isotiazolopiridinilo, tiazolopiridinilo, oxazolopiridinilo, imidazolopiridinilo y pirazolopiridinilo.
Los heterociclos de 5 a 6 eslabones preferidos incluyen, pero no se limitan a, piridinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, pirazinilo, piperazinilo, piperidinilo, imidazolilo, imidazolidinilo, indolilo, tetrazolilo, isoxazolilo, morfolinilo, oxazolilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, tetrahidrofuranoílo, tiadiazinilo, tiadiazolilo, tiazolilo, triazinilo y triazolilo.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, el término "heterociclo bicíclico" o "grupo heterocíclico bicíclico" pretende significar un sistema de anillo heterocíclico estable de 9 ó 10 eslabones que contiene dos anillos condensados y consta de átomos de carbono y 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre el grupo constituido por N, O y S. De los dos anillos condensados, un anillo es un anillo aromático monocíclico de 5 ó 6 eslabones que comprende un anillo de heteroarilo de 5 eslabones, un anillo de heteroarilo de 6 eslabones o un anillo benzo, cada uno condensado a un segundo anillo. El segundo anillo es un anillo monocíclico de 5 ó 6 eslabones que es saturado, parcialmente insaturado o insaturado, y comprende un heterociclo de 5 eslabones, un heterociclo de 6 eslabones o un carbociclo (siempre que el primer anillo no sea benzo cuando el segundo anillo es un carbociclo).
El grupo heterocíclico bicíclico puede estar unido a su grupo lateral en cualquier heteroátomo o átomo de carbono que dé como resultado una estructura estable. El grupo heterocíclico bicíclico descrito en la presente memoria descriptiva puede estar sustituido en un carbono o en un átomo de nitrógeno si el compuesto resultante es estable. Se prefiere que cuando el número total de átomos de S y O en el heterociclo sea superior a 1, entonces estos heteroátomos no sean adyacentes entre sí. Se prefiere que el número total de átomos de S y O en el heterociclo no sea superior a 1.
Son ejemplos de un grupo heterocíclico bicíclico, pero no se limitan a, quinolinilo, isoquinolinilo, ftalazinilo, quinazolinilo, indolilo, isoindolilo, indolinilo, 1H-indazolilo, bencimidazolilo, 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo, 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo, 5,6,7,8-tetrahidro-quinolina, 2,3-dihidro-benzofuranilo, cromanilo, 1,2,3,4-tetrahidro-quinoxalina y 1,2,3,4-tetrahidro-quinazolina.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, el término "grupo heterocíclico aromático" o "heteroarilo" pretende significar hidrocarburos aromáticos monocíclicos y policíclicos estables que incluyen al menos un miembro de anillo de heteroátomo como azufre, oxígeno o nitrógeno. Los grupos heteroarilo preferidos son anillos aromáticos estables monocíclicos de 5, 6 ó 7 eslabones o bicíclicos de 7, 8, 9 ó 10 que constan de átomos de carbono y 1, 2, 3 ó 4 heteroátomos seleccionados independientemente entre el grupo constituido por N, NH, O y S. Debe indicarse que el número total de átomos de S y O en el heterociclo aromático no es superior a 1. Los grupos heteroarilo incluyen, sin limitación, piridilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, triazinilo, furilo, quinolilo, isoquinolilo, tienilo, imidazolilo, tiazolilo, indolilo, pirrilo, oxazolilo, oxadiazolilo, benzofurilo, benzotienilo, benzotiazolilo, isoxazolilo, pirazolilo, triazolilo, tetrazolilo, indazolilo, 1,2,4-tiadiazolilo, isotiazolilo, benzotienilo, purinilo, carbazolilo, bencimidazolilo, 2,3-dihidrobenzofuranilo, 2,3-dihidrobenzotienilo, 2,3-dihidrobenzotienil-S-óxido, 2,3-dihidrobenzotienil-S-dióxido, benzoxazolin-2-on-ilo, indolinilo, benzodioxolanilo, benzodioxano, y similares. Los grupos heteroarilo pueden ser sustituidos o sin sustituir.
También se incluyen compuestos espiro y de anillos condensados que contienen, por ejemplo, los carbociclos o heterociclos anteriores.
Los anillos con puentes también se incluyen en la definición de carbociclo o heterociclo. Un anillo con puente se produce cuando uno o más átomos (es decir, C, O, N o S) se unen con dos átomos de carbono o nitrógeno no adyacentes. Los puentes preferidos incluyen, pero no se limitan a, un átomo de carbono, dos átomos de carbono, un átomo de nitrógeno, dos átomos de nitrógeno y un grupo carbono-nitrógeno. Debe observarse que un puente siempre convierte un anillo monocíclico en un anillo tricíclico. Cuando en un anillo existe un puente, los sustituyentes citados para el anillo también pueden estar presentes en el puente.
Cuando se usa un anillo con línea de puntos dentro de una estructura de anillo, indica que la estructura de anillo puede ser saturada, parcialmente saturada o insaturada.
El término "contraión" se usa para representar una especie pequeña y cargada negativamente como cloruro, bromuro, hidróxido, acetato y sulfato.
La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea en la presente memoria descriptiva para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas farmacéuticas que son, dentro del ámbito del criterio médico fundado, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación excesivos, proporcionados con una relación beneficio/riesgo razonable.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos desvelados en los que el compuesto progenitor se modifica preparando sales ácidas o básicas del mismo. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero no se limitan a, sales de ácidos minerales u orgánicos de grupos básicos como aminas; y sales alcalinas u orgánicas de grupos ácidos como ácidos carboxílicos. Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las sales no tóxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario del compuesto progenitor formadas, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Por ejemplo, dichas sales no tóxicas convencionales incluyen las derivadas de ácidos inorgánicos como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico y nítrico; y las sales preparadas a partir de ácidos orgánicos como acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluensulfónico, metanosulfónico, etanodisulfónico, oxálico e isetiónico, y similares.
Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden sintetizarse a partir del compuesto progenitor que contiene una fracción básica o ácida mediante procedimientos químicos convencionales. Generalmente, dichas sales pueden prepararse haciendo reaccionar las formas básicas o ácidas libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiados en agua o en un disolvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente, se prefieren medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. Se encuentran listas de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ª ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990, cuya descripción se incorpora aquí como referencia.
Los compuestos de la presente invención marcados isotópicamente, es decir, en los que uno o más de los átomos descritos están sustituidos por un isótopo radiactivo de ese átomo (por ejemplo, C sustituido por ^{13}C o por ^{14}C; e isótopos de hidrógeno que incluyen tritio y deuterio) en la presente memoria descriptiva. Dichos compuestos tienen una diversidad de usos potenciales, por ejemplo, como patrones y reactivos en la determinación de la capacidad de un producto farmacéutico potencial para unirse a proteínas o receptores objeto, o para compuestos de obtención de imágenes de esta invención unidos a receptores biológicos in vivo o in vitro.
Los compuestos de la presente invención, después de su preparación, preferentemente se aíslan y purifican para obtener una composición que contenga una cantidad en peso igual o superior al 98%, preferentemente el 99%, de compuesto de la presente invención ("sustancialmente puro"), que a continuación se usa o se formula según se describe en la presente memoria descriptiva. Dichos compuestos "sustancialmente puros" se contemplan también en la presente memoria descriptiva como parte de la presente invención.
"Compuesto estable" y "estructura estable" quieren indicar un compuesto que es suficientemente robusto para sobrevivir al aislamiento en un grado útil de pureza a partir de una mezcla de reacción, y de formulación en un agente terapéutico eficaz. Se prefiere que los compuestos de la presente invención no contengan un grupo N-halo, S(O)_{2}H, o S(O)H.
Además, los compuestos de fórmula III pueden tener formas de profármaco. Cualquier compuesto que se convertirá in vivo para proporcionar el agente bioactivo (es decir, un compuesto de fórmula III) es un profármaco. En la técnica se conocen bien varias formas de profármacos. Para ejemplos de dichos derivados de profármacos, véase:
a) Design of Prodrugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985), y Methods in Enzymology, Vol. 42, en pág. 309-396, editado por K. Widder, y col. (Academic Press, 1985);
b) A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krosgaard-Larsen y H. Bundgaard, capítulo 5, "Design and Application of Prodrugs", de H. Bundgaard, en pág. 113-191 (1991);
c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, Vol. 8, pág. 1-38 (1992);
d) H. Bundgaard, y col., Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 77, p. 285 (1988); y
e) N. Kakeya, y col., Chem Phar Bull., Vol. 32, p. 692 (1984).
\vskip1.000000\baselineskip
La preparación de profármacos es bien conocida en la técnica y se describe, por ejemplo, en Medicinal Chemistry: Principles and Practice, ed. F. D. King, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, RU, 1994, que se incorpora en la presente memoria descriptiva como referencia en su totalidad.
Los compuestos que contienen un grupo carboxi pueden formar ésteres fisiológicamente hidrolizables que sirven como profármacos al hidrolizarse en el cuerpo para producir compuestos de fórmula III de por sí. Dichos profármacos se administran preferentemente oralmente ya que la hidrólisis en muchos casos se produce principalmente bajo la influencia de las enzimas digestivas. Puede usarse administración parenteral cuando el éster sea activo de por sí, o en aquellos casos en que se produzca hidrólisis en la sangre. Los ejemplos de ésteres fisiológicamente hidrolizables de compuestos de fórmula III incluyen alquilbencilo C_{1-6}, 4-metoxibencilo, indanilo, ftalilo, metoximetilo, alcanoíloxi C_{1-6}-alquilo C_{1-6}, por ejemplo acetoximetilo, pivaloíloximetilo o propioniloximetilo, alcoxicarboniloxi C_{1-6}-alquilo C_{1-6}, por ejemplo metoxicarbonil-oximetilo o etoxicarboniloximetilo, gliciloximetilo, fenilgliciloximetilo, (5-metil-2-oxo-1,3-dioxolen-4-il)-metilo y otros ésteres fisiológicamente hidrolizables bien conocidos usados, por ejemplo, en las técnicas de las penicilinas y las cefalosporinas. Dichos ésteres pueden prepararse mediante técnicas convencionales conocidas en la técnica.
El término "solvato" significa una asociación física de un compuesto de esta invención con una o más moléculas de disolvente, orgánico o inorgánico. Esta asociación física incluye enlaces de hidrógeno. En ciertos casos el solvato será capaz de aislamiento, por ejemplo cuando se incorporen una o más moléculas de disolvente en la retícula cristalina del sólido cristalino. "Solvato" comprende solvatos en fase de solución y aislables. Los solvatos ilustrativos incluyen hidratos, etanolatos, metanolatos, isopropanolatos y similares. Los procedimientos de solvatación son conocidos generalmente en la técnica.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, el término "paciente" comprende todas las especies de mamíferos.
Según se usa en la presente memoria descriptiva, "tratar" o "tratamiento" cubren el tratamiento de un estado de enfermedad en un mamífero, en particular en un ser humano, e incluyen: (a) prevención de que se produzca el estado de enfermedad en un mamífero, en particular, cuando dicho mamífero está predispuesto al estado de enfermedad pero todavía no se le ha diagnosticado que la tenga; (b) inhibición del estado de enfermedad, es decir, detención de su desarrollo; y/o (c) alivio del estado de enfermedad, es decir, causar la regresión del estado de enfermedad.
"Cantidad terapéuticamente eficaz" pretende incluir una cantidad de un compuesto de la presente invención que sea eficaz cuando se administra en solitario o en combinación con otros ingredientes activos para inhibir el factor VIIa y/o la calicreína en plasma o para tratar los trastornos enumerados en la presente memoria descriptiva. Cuando se aplica a una combinación, el término se refiere a cantidades combinadas de los ingredientes activos que producen el efecto terapéutico, si se administran en combinación, en serie o simultáneamente. La combinación de compuestos es preferentemente una combinación sinérgica. La sinergia, tal como se describe, por ejemplo, en Chou y Talalay, Adv. Enzyme Regul. 1984, 22:27-55, se produce cuando el efecto (en este caso, por ejemplo, prevención de trombosis) de los compuestos cuando se administran en combinación es mayor que el efecto aditivo de los compuestos cuando se administran en solitario como un único agente. En general, un efecto sinérgico se demuestra con la máxima claridad en concentraciones subóptimas de los compuestos. La sinergia puede existir en términos de menor citotoxicidad, aumento del efecto antitrombótico y/o antiinflamatorio, o algún otro efecto beneficioso de la combinación en comparación con los componentes individuales.
El término "composición farmacéutica" significa una composición que comprende un compuesto de la invención en combinación con al menos un vehículo farmacéutico adicional. "Vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a medios generalmente aceptados en la técnica para el suministro de agentes biológicamente activos a animales, en particular, mamíferos, incluyendo, es decir, adyuvante, excipiente o vehículo, como diluyentes, agentes conservantes, cargas, agentes de regulación de flujo, agentes de desintegración, agentes de humectación, agentes emulsionantes, agentes de suspensión, agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes perfumantes, agentes antibacterianos, agentes antifúngicos, agentes lubricantes y agentes de dispensación, dependiendo de la naturaleza del modo de administración y de las formas farmacéuticas. Los vehículos farmacéuticamente aceptables se formulan según una serie de factores incluidos bien en el alcance de los expertos en la materia. Entre ellos se incluyen, sin limitación: el tipo y la naturaleza del agente activo que se está formulando; el sujeto al que se administrará la composición que contiene el agente; la vía pretendida de administración de la composición; y la indicación terapéutica que se persigue. Los vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen medios líquidos acuosos y no acuosos, así como una diversidad de formas farmacéuticas sólidas y semisólidas. Dichos vehículos pueden incluir una serie de diferentes ingredientes y aditivos además del agente activo, de manera que los ingredientes adicionales se incluyen en la formulación por una diversidad de razones como, por ejemplo, estabilización del agente activo, aglutinantes, etc., bien conocidas para el experto en la materia. Se encuentran descripciones de vehículos farmacéuticamente aceptables adecuados, y factores implicados en su selección, en una diversidad de fuentes fácilmente disponibles como, por ejemplo, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18ª ed., 1990, que se incorpora en la presente memoria descriptiva como referencia en su totalidad.
Las abreviaturas usadas en los Ejemplos se definen del modo siguiente: "1 x" para una vez, "2 x" para dos veces, "3 x" para tres veces, "ºC" para grados Celsius, "eq" para equivalente o equivalentes, "g" para gramo o gramos, "mg" para miligramo o miligramos, "l" para litro o litros, "ml" para mililitro o mililitros, "\mul" para microlitro o microlitros, "M" para molar, "mmol" para milimol o milimoles, "min" para minuto o minutos, "h" para hora u horas, "t.a." para temperatura ambiente, "atm" para atmósfera, "kPa" para kilopascales, "TR" para tiempo de retención, "sat" o "satd " para saturado, "PM" para peso molecular, "EM" para espectrometría de masas, "ESI" para espectroscopia de masas de ionización por electropulverización, "AR" para alta resolución, "CL-EM" para cromatografía líquida con espectrometría de masas acoplada, "HPLC" para cromatografía líquida de alta presión, "RMN" para espectroscopia de resonancia magnética nuclear, "^{1}H" para protón, "\delta" para delta, "s" para singlete, "d" para doblete, "t" para triplete, "q" para cuadruplete, "m" para multiplete, "br" para ancho, "Hz" para hercio, "tlc" o "TLC" para cromatografía de capa fina, y "\alpha", "\beta", "R", "S", "E", y "Z" son designaciones estereoquímicas familiares para el experto en la materia.
\newpage
AcOH o HOAc es ácido acético,
AIBN es azo-bis-isobutirlnitrilo,
BH_{3}\cdotSMe_{2} es complejo borano-sulfuro de dimetilo,
BH_{3}\cdotTHF es complejo borano-tetrahidrofurano,
BINAP es 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo,
Bn es bencilo,
Boc es terc-butiloxicarbonilo,
BOP es hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio,
Bu es butilo,
iBu o i-Bu es isobutilo,
t-Bu es terc-butilo,
Cbz es carbonilbenciloxi,
CbzSerOtBu es éster terc-butílico de ácido (S)-2-terc-butoxicarbonilamino-3-hidroxi-propiónico,
CDI es 1,1'-carbonildiimidazol,
CH_{2}Cl_{2} es diclorometano,
CH_{3}CN es acetonitrilo,
Oxaziridina Davis es 2-bencenosulfonil-3-fenil-oxaziridina,
DBU es 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno,
DCE es 1,2-dicloroetano,
DIBAH es hidruro de diisobutilaluminio,
DIC es 1,3-diisopropilcarbodimida,
DIEA es dietilpropilamina,
DMAP es dimetilaminopiridina,
DMF es dimetilformamida,
DMSO es dimetil sulfóxido,
DMPU es 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidona,
DPPA es difenilfosforilazida,
EDCl es clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida,
Et es etilo,
EtOAc es acetato de etilo,
HATU es O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio,
HBTU es hexafluorofosfato de O-benzotriazol-1-il-N,N,N',N'-tetrametiluronio,
HCl es ácido clorhídrico,
HOAt o HOAT es 1-hidroxi-7-azabenzotriazol,
HOBt o HOBT es 1-hidroxibenzotriazol,
H_{3}PO_{4} es ácido fosfórico,
K_{2}CO_{3} es carbonato de potasio,
LAH es hidruro de litio-aluminio,
LDA es diisopropilamida de litio,
LiHMDS es bis(trimetilsilil)amida,
mCPBA o MCPBA es ácido meta-cloroperbenzoico,
Me es metilo,
MeOH es metanol,
MgSO_{4} es sulfato de magnesio,
MoOPH es oxodiperoximolibdeno(piridina)(hexametilfosfórico triamida),
MsCl es cloruro de metanosulfonilo,
Na es sodio,
NaH es hidruro de sodio,
NaHCO_{3} es bicarbonato de sodio,
NaHSO_{3} es tiosulfito de sodio,
NaOAc es acetato de sodio,
NBS es N-bromosuccinimida,
NCS es N-clorosuccinimida,
OAc es acetato,
Pd/C es paladio sobre carbón,
Pd(PPH_{3})_{4} es tetraquis(trifenilfosfina)paladio,
Ph es fenilo,
Pr es propilo,
i-Pr o i-Pr es isopropilo,
i-PrOH o IPA es isopropanol,
PyBroP o Py-BroP es hexafluorofosfato de bromotripirrolidinfosfonio,
Selectfluor^{TM} es [1(clorometi)-4-fluoro-1,4-diazoniabiciclo[2,2,2]octanebis(tetrafluoroborato)],
TBAI es yoduro de tetrabutilamonio,
tBME es éter metílico de terc-butilo,
TEA es trietilamina,
TFA es ácido trifluoroacético,
TFAA es anhídrido trifluoroacético,
THF es tetrahidrofurano.
\vskip1.000000\baselineskip
Síntesis
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse en una serie de formas conocidas para el experto en la técnica de síntesis orgánica. Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse usando los procedimientos descritos más adelante, junto con procedimientos sintéticos conocidos en la técnica de química orgánica sintética, o por variaciones de la misma según apreciarán los expertos en la materia. Los procedimientos preferidos incluyen, pero no se limitan a, los descritos a continuación. Las reacciones se realizan en un disolvente apropiado para los reactivos y materiales empleados y adecuados para las transformaciones que se están efectuando. Los expertos en la técnica de síntesis orgánica comprenderán que la funcionalidad presente en la molécula debe ser coherente con las transformaciones propuestas. A veces esto requerirá un criterio para modificar el orden de las etapas sintéticas o para seleccionar un es-
quema de procedimiento en particular por encima de otro con el fin de obtener un compuesto de la invención deseado.
Puede encontrarse un compendio particularmente útil de procedimientos sintéticos que pueden ser aplicables a la preparación de compuestos de la presente invención en Larock, R. C. Comprehensive Organic Transformations, VCH: Nueva York, 1989. Los procedimientos preferidos incluyen, pero no se limitan a, los descritos más adelante. Todas las referencias citadas en la presente memoria descriptiva se incorporan así en su totalidad en la presente memoria descriptiva como referencia.
Los nuevos compuestos de esta invención pueden prepararse usando las reacciones y técnicas descritas en esta sección. Las reacciones se realizan en disolventes apropiados para los reactivos y materiales empleados y son adecuados para las transformaciones que se efectuarán. También, en la descripción de los procedimientos sintéticos descritos más adelante, se entenderá que todas las condiciones de reacción propuestas, incluyendo la elección de disolvente, la atmósfera de la reacción, la temperatura de reacción, la duración del experimento y los procedimientos de trabajo, se eligen de forma que sean las condiciones estándar para esa reacción, lo que debería reconocer fácilmente un experto en la materia. Un experto en la materia de la síntesis orgánica entenderá que la funcionalidad presente en varias partes de la molécula debe ser compatible con los reactivos y reacciones propuestos. Dichas restricciones en los sustituyentes que son compatibles con las condiciones de reacción serán evidentes fácilmente para el experto en la materia y a continuación deben usarse procedimientos alternativos.
Se reconocerá también que otra consideración importante en la planificación de cualquier ruta sintética en este campo es la elección prudente del grupo protector usado para protección de los grupos funcionales reactivos presentes en los compuestos descritos en esta invención. Una referencia fue una autoridad que describe las numerosas alternativas para el profesional instruido es Greene y Wuts (Protective Groups In Organic Synthesis, Wiley-Interscience, 3ª Edición, 1999). Todas las referencias citadas en la presente memoria descriptiva se incorporan así en su totalidad en la presente memoria descriptiva como referencia.
Para las preparaciones y esquemas detallados más adelante, todas las referencias a R^{6}/R^{6a} corresponden a sustituyentes en el anillo bencénico dentro de la definición de W anterior; las referencias a R^{10} corresponden a sustituyentes R^{10a-c}, dentro de la definición de la Fórmula (III) anterior; R^{6b} es H; R^{c} es alquilo C_{1-4} o cicloalquilo C_{3-5} y R^{a} es alquilo C_{1-4}.
Los compuestos que tienen la Fórmula general (III):
9 
\vskip1.000000\baselineskip
en la que W, R^{7} y R^{8} son cada uno según se define anteriormente y en la que Y es
10 
\newpage
R^{11} es H, Z es
11 
\vskip1.000000\baselineskip
y R^{9} es H, pueden prepararse mediante acoplamiento de un ácido de Fórmula (Ia):
12 
\vskip1.000000\baselineskip
con una amina de Fórmula (Ib):
13
en condiciones adecuadas para formar un enlace amida entre el ácido y la amina. Las condiciones de acoplamiento pueden encontrarse en Bodanszky, "Principles of Peptide Synthesis, Second Edition" Springer Verlag Ed, Berlín (1993). Los reactivos de acoplamiento incluyen CDI, DIC y EDCl. Opcionalmente, puede prepararse un éster activado intermedio añadiendo un equivalente de 1-hidroxibenzotriazol o 1-hidroxi-7-azabenzotriazol. Otros reactivos de acoplamiento incluyen HATU, HBTU y Py-Brop que habitualmente se hacen reaccionar en presencia de un equivalente de una base terciaria como DIEA o TEA. Puede requerirse la protección y desprotección de grupos funcionales antes o después de la etapa de formación de amidas para producir un compuesto de Fórmula (III).
\vskip1.000000\baselineskip
Los ácidos intermedios de Fórmula (Ia) pueden prepararse de varias formas diferentes. Por ejemplo, pueden prepararse según las etapas descritas en el Esquema 1, en el que las aminas 1 (preparadas siguiendo los procedimientos mostrados en Esquemas posteriores y en los Ejemplos) reaccionan con derivados de acetato de fenilo 2 (para preparación, véase documento WO-2004/072.101) en condiciones básicas para dar 3. LG es un grupo saliente como Cl, Br, OMs (metilsulfonato) u OTf (triflurometilsulfonato) y P y P' son grupos protectores. Los derivados de acetato piridilo 2 pueden prepararse por procedimientos conocidos para el experto en la materia. La desprotección de P en 3 por hidrólisis o hidrogenación da productos intermedios ácidos Iaa que contienen un grupo 1-aminoisoquinolina o 1-aminoftalazina sustituido.
\newpage
Esquema 1
14 
\vskip1.000000\baselineskip
Los ácidos Iaa en los que Y es un grupo fenilo también pueden prepararse mediante una reacción de Mannich con ácido borónico de Petasis (J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 445-446) mostrada en el Esquema 2a. Las aminas 1 reaccionan con derivados de ácido fenilborónico 4 y glucooxaldehído 5 en un disolvente adecuado para dar los ácidos Iaa directamente. Esta reacción de condensación de tres componentes puede efectuarse térmicamente o bajo irradiación de microondas. La preparación de ácidos borónicos 4 es bien conocida para los expertos en la materia (véase Tetrahedron 2002, 58, 9633-9695; Synthesis 2003, 4, 469-483). Los ácidos Iaa en los que Y es un grupo piridilo pueden prepararse por aminación reductiva (Tetrahedron, 1996, 52, 9777-9784) de \alpha-cetoácidos piridílicos 6 con aminas 1 según se muestra en el Esquema 2b. Los \alpha-cetoácidos piridílicos 6 pueden prepararse por procedimientos conocidos para el experto en la materia.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 2a
15 
\newpage
Esquema 2b
16
Los ácidos Iaa en los que Y es un grupo fenilo también pueden prepararse por aminación reductora (Tetrahedron, 1996, 52, 9777-9784) de \alpha-cetoácidos 6 con aminas 1 según se muestra en el Esquema 3.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 3
17
Las aminas de isoquinolina sustituidas 1 pueden obtenerse a partir de 11 según se muestra en el Esquema 5. Las anilinas 11 pueden tratarse con una fuente electrófila de halógenos (Hal+), como, por ejemplo, NCS, NBS o Selectfluor^{TM}. Los bromuros 12 pueden manipularse adicionalmente para proporcionar anilinas 1 en las que R^{6} = alquilo, por ejemplo, por medio de reacción con tetra-alquilestaño en presencia de un catalizador de paladio como PdCl_{2}(PPH_{3})_{3}.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 5
18
Las aminas de aminoisoquinolina sustituidas 20 pueden obtenerse a partir de haluros de fenilo 13 según se muestra en el Esquema 6. Las anilinas de haluros de fenilo pueden protegerse con grupos de protección apropiados mediante procedimientos conocidos para los expertos en la materia para proporcionar haluros 13. Éstos pueden hacerse avanzar por calentamiento con crotonatos de alquilo o acrilatos de alquilo 14 en presencia de un catalizador de paladio como acetato de paladio (II) y un ligando como tri(o-tolil)fosfina y una base como trietilamina para dar ésteres 15. La hidrólisis, seguida por la activación del ácido resultante como, por ejemplo, un anhídrido mezclado, y el tratamiento con una fuente de azida, como azida sódica, produce azidas de acilo 16. El calentamiento de azidas 16 a alta temperatura en un disolvente como éter difenílico, en presencia de una base apropiada como tributilamina, proporciona isoquinolin-1(2H)-onas 17. El tratamiento con oxicloruro fosforoso (III) en reflujo da cloruros 18 que pueden convertirse en las aminoisoquinolinas 19 deseadas mediante calentamiento en una solución de amoniaco en un disolvente como etilenglicol en presencia de un catalizador como óxido de cobre (I). La protección apropiada, por ejemplo, con exceso de dicarbonato de di-terc-butilo, y la desprotección de la anilina C-6 de formas conocidas en la técnica produce aminoisoquinolinas 20.
\newpage
Esquema 6a
19
Éstos pueden hacerse avanzar a ácidos 22 mediante acoplamiento con cloruros 21 en presencia de una base como DIPEA y calentamiento, seguido por desprotección del éster bencílico según se muestra en el Esquema 6b.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 6b
20
El ácido Ia en el que W es aminoftalazina-6-ilo puede prepararse según el Esquema 7. El ácido 4-bromobenzoico 23 se convierte en el cloruro de ácido y se hace reaccionar con dietilamina. La dietilbenzamida 24 resultante se formula mediante tratamiento con tetrametilpiperidida de litio a -78ºC, seguido por inactivación con DMF. La ciclación posterior en ácido clorhídrico en reflujo proporciona la hidroxiftalida 25. La hidroxiftalida 25 se somete a reflujo con hidrazina en etanol para producir 6-bromoftalazin-1(2H)-ona 26. El tratamiento con oxicloruro fosforoso da 6-bromo-1-cloroftalazina 27, que se convierte en 1-amino-6-bromoftalazina 28 por reacción con etilenglicol saturado con amoniaco a 130ºC. La amina se protege mediante reacción con dicarbonato de di-terc-butilo y 4-dimetilaminopiridina en acetonitrilo. El bromuro resultante 29 puede acoplarse a continuación con un éster de fenilglicina 30 con complejo paladio-BINAP. La posterior hidrólisis estérica del éster 31 da el ácido 32.
\newpage
Esquema 7
21 
\vskip1.000000\baselineskip
Las aminas de Fórmula (Ib) están disponibles comercialmente o se preparan según los procedimientos dados en los Esquemas y Ejemplos mostrados a continuación.
22
En general, las bencilaminas funcionalizadas 34, en las que R^{7} = H, y Z es un grupo fenilo funcionalizado, se preparan según se ilustra en el Esquema 8 por medio de la reducción de benzonitrilos 33 disponibles comercialmente o preparados (según se muestra en los Esquemas y Ejemplos mostrados a continuación) por medio, por ejemplo, de hidrogenación en presencia de un catalizador como Pd/C o níquel Raney, o usando una fuente de hidruro, como BH_{3} o LAH en THF. Alternativamente, según se muestra en el Esquema 9, las bencilaminas 34 pueden prepararse a partir de ésteres 35 o aldehídos 36 por medio de reducción a alcoholes bencílicos 37 usando, por ejemplo, LAH, seguido por conversión a azidas 38 con un reactivo apropiado como difenilfosforilazida en un disolvente como THF o tolueno. La reducción de azidas 38 con, por ejemplo, hidrogenación, LAH o trifenilfosfina, proporciona bencilaminas 34. Finalmente, según se muestra en el Esquema 10, las bencilaminas 34 también pueden prepararse a partir de ésteres 35 por medio de hidrólisis, tratamiento con hidróxido de amonio en presencia de reactivos de acoplamiento apropiados, como EDC y HOBT o HOAT, seguido por reducción de la amida primaria derivada con una fuente de hidruro, como BH_{3}.
\newpage
Esquema 8
23 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 9
24 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 10
25 
\vskip1.000000\baselineskip
Las aminas de Fórmula (Ib), en las que R^{7} = alquilo y Z es un grupo fenilo funcionalizado, puede prepararse a partir de bencilaminas 34 según se ilustra en el Esquema 11 por medio de protección con, por ejemplo, anhídrido trifluoroacético para dar 39, seguido por alquilación con un haluro de alquilo, por ejemplo, yoduro de metilo. La desprotección con una base como carbonato de potasio produce las N-metil bencilaminas 41 deseadas.
\newpage
Esquema 11
26 
\vskip1.000000\baselineskip
Las bencilaminas 44 que contienen un sustituyente de sulfona en orto pueden prepararse, según se muestra en el Esquema 12, a partir de sulfuros 42, por medio de oxidación a benzonitrilsulfonas 43 con un agente oxidante apropiado, como MCPBA. Los benzonitrilos 43 pueden convertirse a continuación en las bencilaminas 44 correspondientes según se mostró anteriormente en el Esquema 8.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 12
27 
\vskip1.000000\baselineskip
Los sulfuros 42 pueden prepararse de varias formas diferentes. Según se muestra en el Esquema 13, un procedimiento implica el avance de o-bromobenzonitrilos 45 disponibles comercialmente por medio de intercambio de litio-halógeno usando, por ejemplo n-butil-litio a temperaturas frías en un disolvente como THF seguido por reacción con disulfuros 46. Los sulfuros 42 pueden convertirse a continuación en las bencilaminas 44 correspondientes por oxidación a las sulfonas y después reducción a las bencilaminas según se mostró anteriormente en los Esquemas 8 y 12.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 13
28 
\vskip1.000000\baselineskip
Además, según se muestra en el Esquema 14, los sulfuros 42 también pueden prepararse a partir de o-cianofenildisulfuros 47 por reacción con nucleófilos organometálicos 48, por ejemplo, reactivos de Grignard. A continuación los sulfuros 42 pueden convertirse en las bencilaminas 44 correspondientes por oxidación a las sulfonas y después reducción a bencilaminas según se mostró anteriormente en los Esquemas 8 y 12.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 14
\vskip1.000000\baselineskip
29 
\vskip1.000000\baselineskip
Según se muestra en el Esquema 15, los sulfuros 42 también pueden prepararse a partir de o-fluorobenzonitrilos 49 por medio de reacción con tioles 50 en un disolvente como DMF en presencia de una base como carbonato de sodio. Los sulfuros 42 pueden convertirse a continuación en las bencilaminas 44 correspondientes por oxidación a las sulfonas y después reducción a bencilaminas según se mostró anteriormente en los Esquemas 8 y 12. También, los sulfuros 42 pueden convertirse en bencilaminas 51 por tratamiento con un agente reductor, como BH_{3}.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 15
\vskip1.000000\baselineskip
30 
\vskip1.000000\baselineskip
Finalmente, según se muestra en el Esquema 16, los sulfuros 54 pueden prepararse a partir de tiosalicilatos 52 por medio de alquilación con haluros de alquilo 53, seguido por oxidación a las sulfonas 55 según se mostró anteriormente en el Esquema 12. Los ésteres 55 pueden convertirse en bencilaminas 44 según se mostró anteriormente en el Esquema 9 o el Esquema 10.
\newpage
Esquema 16
\vskip1.000000\baselineskip
31 
\vskip1.000000\baselineskip
Las bencilaminas 58 que contienen un sustituyente heterocíclico pueden prepararse según se muestra en el Esquema 17. Los fluorobenzonitrilos 49 se tratan con aminas 56 en un disolvente como acetonitrilo. Los benzonitrilos 57 resultantes se convierten a continuación en las bencilaminas 58 según se mostró anteriormente en el Esquema 8.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 17
32
Según se muestra en el Esquema 18, las bencilaminas 62 que contienen un sustituyente de orto-sulfonamida pueden prepararse a partir de cloruros de o-cianosulfonilo 59 por medio de reacción con aminas 60 (o sales de clorhidrato de amina) en presencia de una base, por ejemplo, TEA, en un disolvente como THF o agua. Los benzonitrilos 61 pueden convertirse a continuación en las bencilaminas 62 correspondientes según se mostró anteriormente en el Esquema 8.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 18
33 
\vskip1.000000\baselineskip
Las bencilaminas 65 que contienen un sustituyente de amida pueden obtenerse de ácidos cianobenzoicos 63 según se muestra en el Esquema 19, por tratamiento de ácidos 63 con aminas 60 (o sales de clorhidrato de amina) en presencia de reactivos de acoplamiento apropiados como EDC, HOAT y una base como DIEA. Los benzonitrilos 64 obtenidos pueden convertirse a continuación en las bencilaminas 65 según se mostró anteriormente en el Esquema 8. Alternativamente, las amidas 65 pueden prepararse según se muestra en el Esquema 20 a partir de isobenzofuran-1(3H)-onas 66 por tratamiento con aminas 60 en presencia de trimetilaluminio. Los alcoholes bencílicos obtenidos 67 pueden convertirse a continuación en las bencilaminas correspondientes según se mostró anteriormente en el Esquema 9.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 19
34 
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 20
340 
\vskip1.000000\baselineskip
Las bencilaminas 71 que contienen un sustituyente de éter en orto pueden prepararse, según se muestra en el Esquema 21, a partir de fenoles 68, por medio de alquilación con haluros de alquilo 69. Los benzonitrilos 70 obtenidos pueden convertirse a continuación en las bencilaminas 71 correspondientes según se mostró anteriormente en el Esquema 8.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 21
35 
\vskip1.000000\baselineskip
Las bencilaminas funcionalizadas 76 que contienen un sustituyente alquilo pueden prepararse, según se muestra en el Esquema 22, a partir de benzaldehídos 72, por medio de reacción de Wittig con haluros de alquiltrifenilfosfonio 73 en presencia de una base, como terc-butóxido de potasio. Las olefinas obtenidas 74 pueden convertirse a continuación en las bencilaminas insaturadas 75 correspondientes usando una fuente de hidruro como BH_{3}, o a las bencilaminas saturadas 76 por medio de hidrogenación en presencia de un catalizador, como Pd/C.
\newpage
Esquema 22
\vskip1.000000\baselineskip
36 
\vskip1.000000\baselineskip
Según se muestra en el Esquema 24, los \beta-aminoésteres quirales 89 pueden prepararse por una adición conjugada de (S)-(-)-N-bencil-N-\alpha-metilbenzamidas de litio a ésteres \alpha,\beta-insaturados 87 que a su vez pueden prepararse por condensación de los aldehídos 85 y ésteres de dietilfosfonato 86. El aducto conjugado 88 puede hidrogenarse con un catalizador como Pd(OH)_{2}/C para dar \beta-aminoésteres 89 enriquecidos enantioméricamente.
\vskip1.000000\baselineskip
Esquema 24
37 
\vskip1.000000\baselineskip
Alternativamente, los aldehídos 85 (Esquema 25) pueden condensarse con (S)-(+)-toluensulfinamida 90 en presencia de catalizador como Ti(OEt)_{4} a las sulfiniliminas 91. La adición de enolatos metálicos 92 a la sulfinilimina 91 debe proceder estereoselectivamente para dar las sulfinamidas 93 que pueden desprotegerse en condiciones ácidas a \beta-aminoésteres 89.
\newpage
Esquema 25
38 
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto de la presente invención descrito en la presente memoria descriptiva puede tener centros asimétricos. Por ejemplo, el átomo quiral de carbono de la Fórmula III según se indica más adelante, existe en configuración S o R.
39 
\vskip1.000000\baselineskip
Posiblemente, existe un segundo átomo quiral de carbono cuando R^{8} y R^{9} son diferentes. Así, las configuraciones estereoisoméricas de cada compuesto de la presente invención se consideran parte de la invención. Por ejemplo, pero sin limitarse a ello, en los compuestos de Fórmula (III), son posibles las dos siguientes configuraciones estereoisoméricas:
40
en las que X^{2} y X^{3} son los dos C.
\newpage
Colectivamente, así como individualmente, se consideran parte de la invención. En una forma de realización estereoisomérica preferida, la presente invención proporciona una configuración estereoisomérica de isómero-1 para todas las formas de realización de la Fórmula (III); o sal farmacéuticamente aceptable o forma de solvato de las mismas.
En los siguientes procedimientos experimentales, las proporciones de solución expresan una relación en volumen, a no ser que se indique lo contrario. Los desplazamientos químicos de RMN (\delta) se refieren en partes por millón.
Los productos se analizaron por HPLC analítica de fase inversa efectuada en un sistema de HPLC Shimadzu Analytical que ejecutaba el software DiscoveryVP usando Procedimiento A: columna Phenomenex Luna C18 (4,6 x 50 mm o 4,6 x 75 mm) eluida a 4 ml/min con un gradiente de 4 u 8 min del 100% de A al 100% de B (A: metanol al 10%, agua al 89,9%, TFA al 0,1%; B: agua al 10%, metanol al 89,9%, TFA al 0,1%, UV 220 nm), o Procedimiento B: columna Phenomenex Luna C18 (4,6 x 50 mm) eluida a 4 ml/min con un gradiente de 4 min desde el 100% de A al 100% de B (A: acetonitrilo al 10%, agua al 89,9%, TFA al 0,1%; B: agua al 10%, acetonitrilo al 89,9%, TFA al 0,1%, UV 220 nm). La purificación de productos intermedios y productos finales se efectuó por medio de cromatografía de fase normal o de fase inversa. La cromatografía de fase normal se efectuó en un Sistema ISCO CombiFlash^{TM} usando cartuchos precargados de SiO_{2} eluidos con gradientes de hexanos y acetato de etilo. La HPLC preparativa de fase inversa se efectuó usando un sistema HPLC Shimadzu Preparative que ejecutaba software DiscoveryVP usando Procedimiento A: columna YMC Sunfire 5 \mum C18 30 X 100 mm con un gradiente de 10 min a 40 ml/min desde el 100% de A al 100% de B (A: metanol al 10%, agua al 89,9%, TFA al 0,1%; B: agua al 10%, metanol al 89,9%, TFA al 0,1%, UV 220 nm), Procedimiento B: columna Phenomenex AXIA Luna 5 \mum C18 30 x 75 mm con un gradiente de 10 min a 40 ml/min desde el 100% de A al 100% de B (A: acetonitrilo al 10%, agua al 89,9%, TFA al 0,1%; B: agua al 10%, acetonitrilo al 89,9%, TFA al 0,1%, UV 220 nm), Procedimiento C: columna Phenomenex Luna 5 \mum C18 30 x 100 mm con un gradiente de 10 min a 40 ml/min del 100% de A al 100% de B (A: acetonitrilo al 10%, agua al 89,9%, TFA al 0,1%; B: agua al 10%, acetonitrilo al 89,9%, TFA al 0,1%, UV 220 nm), o Procedimiento D: columna Phenomenex Luna 5 \mum C18 30 x 100 mm con un gradiente de 10 min a 40 ml/min desde el 100% de A al 100% de B (A: metanol al 10%, agua al 89,9%, TFA al 0,1%; B: agua al 10%, metanol al 89,9%, TFA al 0,1%, UV 220 nm). Los cromatogramas CLEM se obtuvieron en un sistema Shimadzu HPLC que ejecutaba el software DiscoveryVP, acoplado con un espectrómetro de masas Waters ZQ que ejecutaba el software MassLynx versión 3.5 usando las mismas columnas y condiciones que se usaron para la analítica descrita anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplos
Los siguientes ejemplos se han preparado, aislado y caracterizado usando los procedimientos desvelados en la presente memoria descriptiva. Los siguientes ejemplos muestran un alcance parcial de la invención y no pretenden ser limitativos del alcance de la invención.
\vskip1.000000\baselineskip
Síntesis de productos intermedios comunes
Producto intermedio 1
6-Amino-1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolina
41
Producto intermedio 1A
(E)-2-(2-(Dimetilamino)vinil)-4-nitrobenzonitrilo
42
Se agitó una mezcla de compuesto 2-metil-4-nitrobenzonitrilo (Aldrich, 5,0 g, 31 mmol) y 1-(1,1-dimetiletoxi)-N,N,N',N'-tetrametil-metanodiamina (Aldrich, 12,2 ml, 59 mmol) en DMF en seco (8 ml) a 70ºC durante 2 h bajo N_{2}. Después de enfriar a t.a., se retiró el DMF al vacío y se trituró el producto en bruto con hexanos/acetato de etilo (5:1). Se recogió el sólido por filtrado y se lavó con hexano dando el Producto intermedio 1A (6,5 g, rendimiento del 97%) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 2,97 (s, 6H) 5,36 (d, J = 13,18 Hz, 1H) 7,16 (d, J = 113,62 Hz, 1H) 7,52 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,60 (m, 1H) 8,11 (d, J = 1,76 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 1B
2-(2,4-Dimetoxibencil)-6-nitroisoquinolin-1(2H)-imina
43
Se calentaron Producto intermedio 1A (4,6 g, 21,2 mmol) y 2,4-dimetoxilbencilamina (4,0 ml, 1,25 equiv) en DMPU (10 ml) a 140ºC durante 3 h. Se eliminó el disolvente por destilación al vacío y se trató el residuo con hexanos/acetato de etilo (1:1). Se recogió el sólido por filtrado y se lavó con hexano dando Producto intermedio 1B (4,6 g). RMN ^{1}H (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta ppm 3,72 (s, 3H) 3,81 (s, 3H) 4,96 (s, 1H) 6,28 (d, J = 6,59 Hz, 1H) 6,46 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 6,58 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,03 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,27 (d, J = 6,15 Hz, 1H) 8,02 (dd, J = 9,01, 2,42 Hz, 1H) 8,31 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 8,43 (d, J = 8,35 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 1C
6-Nitroisoquinolin-1-amina
44
A una solución de Producto intermedio 1B (11,9 g, 35 mmol) en anisol (24 ml) se añadió TFA (24 ml). Se agitó la mezcla de reacción a 90ºC durante 6 h y se eliminó el disolvente a presión reducida. Se suspendió el residuo en MeOH (50 ml) y a continuación se trató con NaHCO_{3} (3,3 g, 39 mmol) en agua (200 ml). Se agitó la mezcla a t.a. durante 15 min y se verificó el pH para que fuera aproximadamente 8,0. Se eliminó la mayoría del metanol al vacío. Se recogió el precipitado por filtrado y se lavó con agua proporcionando Producto intermedio 1C (6,0 g). RMN ^{1}H (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta ppm 7,20 (d, J = 5,72, 1H) 7,36 (s, 2H) 7,95 (d, J = 5,72 Hz, 1H) 8,15 (dd, J = 9,24, 2,64 Hz, 1H) 8,43 (d, J = 9,24 Hz, 1H) 8,67 (d, J = 2,64 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 1D
6-Nitro-1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolina
45
Se calentó una mezcla de Producto intermedio 1C (50 mg) y dicarbonato de di-terc-butilo (200 mg) a 120ºC durante 1,0 h. Se purificó el residuo en bruto por cromatografía instantánea (EtOAc/hexanos al 25%) proporcionando 78 mg (rendimiento del 78%) de Producto intermedio 1D como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,33 (s, 18H) 7,86 (d, J = 5,27 Hz, 1H) 8,15 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,39 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 8,62 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 8,82 (d, J = 2,20 Hz, 1H). CL-EM: 801 (2M + Na).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 1
6-Amino-1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolina
Se hidrogenó el Producto intermedio 1D (55 mg) en metanol (2,5 ml) con un globo de hidrógeno en presencia de Pd/C (10%, 35 mg) durante 2,0 h. El filtrado del Pd/C y la concentración dio Producto intermedio 1 como un sólido blanco (47 mg, 92%). RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,33 (m, 18H) 4,18 (s, 2H) 6,89 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,99 (dd, J = 9,01, 2,42 Hz, 1H) 7,35 (d, J =,59 Hz, 1H) 7,75 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,22 (d, J = 5,71 Hz, 1H). CL-EM: 741 (2M + Na).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 2
Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acético
46
Producto intermedio 2A
Acetato de 2-isopropoxifenilo
47
A una solución de 2-isopropoxifenol (1,53 g, 10 mmol) en CH_{2}Cl_{2} a 0ºC, se añadió piridina (1,76 ml, 22 mmol) seguido por cloruro de acetilo (0,79 ml, 1,1 eq). Se agitó la mezcla a 0ºC durante 1,0 h, se diluyó con éter dietílico, se lavó con ácido cítrico al 5% y salmuera. Se secó el extracto orgánico sobre Na_{2}SO_{4}, se evaporó dando Producto intermedio 2A como un aceite. Se usó durante la etapa siguiente sin purificación adicional.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 2B
Acetato de 5-yodo-2-isopropoxifenilo
48
A una solución de Producto intermedio 2A (10 mmol) en CH_{2}Cl_{2} a 0ºC, se añadió monocloruro de yodo (1,0 M en CH_{2}Cl_{2}, 11,0 ml) gota a gota en 20 min. Se agitó la mezcla a 0ºC durante 2,0 h, se diluyó con éter, se lavó con Na_{2}S_{2}O_{3} saturado y salmuera. Se secó el extracto orgánico sobre MgSO_{4}, se evaporó dando Producto intermedio 2B como un aceite. Se usó durante la etapa siguiente sin purificación adicional.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 2C
5-Yodo-2-isopropoxifenol
49
A una solución de Producto intermedio 2B (10 mmol) en MeOH (5 ml) y THF (15 ml), se añadió LiOH (1,0 M, 15 ml) a 0ºC. Después se agitó la mezcla a t.a. durante 3,0 h, se añadió ácido cítrico al 5% (30 ml) y éter dietílico (150 ml). Se lavó el extracto orgánico con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó dando Producto intermedio 2C (2,3 g) como un aceite.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 2D
2-Etoxi-4-yodo-1-isopropoxibenceno
50
A una solución de Producto intermedio 2C (2,3 g, 8,3 mmol) en DMF (20 ml) se añadieron K_{2}CO_{3} (2,3 g, 16,5 mmol) y yoduro de etilo (0,86 ml, 10,8 mmol). Se agitó la mezcla a 40ºC durante 2,0 h. Se diluyó con éter dietílico, se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO_{4}. Se purificó el producto en bruto por cromatografía (EtOAc/hexanos 5:1) dando Producto intermedio 2D (2,5 g, rendimiento 96%) como un aceite.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 2E
Ácido 3-etoxi-4-isopropoxifenilborónico
51
A una solución de Producto intermedio 2D (2,39 g, 7,8 mmol) en THF (25 ml) a -78ºC, se añadió lentamente n-BuLi (1,6 M en hexanos, 6,83 ml, 1,4 eq). Se agitó la mezcla de reacción a -78ºC durante 20 min, seguido por adición de borato de triisopropilo (4,95 ml, 21,5 mmol). Se agitó la mezcla a -78ºC durante 3,0 h y a continuación se calentó hasta t.a. durante 1,0 h. Se inactivó por adición de ácido cítrico al 5% (20 ml), seguido por una solución de Na_{2}S_{2}O_{3}. Después de extracción con EtOAc, secando sobre Na_{2}SO_{4}, se purificó el producto en bruto por cromatografía dando Producto intermedio 2E (1,2 g, rendimiento 67%) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,41 (d, J = 6,15 Hz, 6H) 1,49 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 4,21 (q, J = 7,03 Hz, 2H) 4,64 (m, 1H) 7,02 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,70 (s, 1H) 7,79 (m, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 2
Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acético
Una mezcla de Producto intermedio 2E (308 mg, 1,38 mmol), Producto intermedio 1 (494 mg, 1,38 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (127,1 mg, 1,38 mmol) en tolueno (12 ml) y metanol (2,5 ml) se calentó a 60ºC durante 6,0 h y a continuación se agitó a t.a. durante toda la noche. Después de eliminar el disolvente, se purificó el producto en bruto por cromatografía eluyendo con CH_{2}Cl_{2}/MeOH dando Producto intermedio 2 (0,65 g, rendimiento 78%) como un sólido amarillo. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,29 (m, 24H) 1,35 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 4,05 (dd, J = 7,03, 5,27 Hz, 2H) 4,49 (m, 1H) 5,11 (s, 1H) 6,68 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 6,93 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,10 (dd, J = 8,35, 2,20 Hz, 1H) 7,17 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,27 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,42 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,62 (d,.J = 9,23 Hz, 1H) 8,01 (d, J = 6,15 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 3
Clorhidrato de ácido 2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acético
52
Se disolvió Producto intermedio 2 (1,04 g, 1,75 mmol) en acetato de etilo (26 ml) y se trató con una solución de HCl 4 N en 1,4-dioxano (26 ml, 105 mmol). Después de agitar a t.a. durante toda la noche, se concentró la reacción, se diluyó con éter dietílico y se filtró para proporcionar Producto intermedio 3 (747 mg) como un sólido amarillo. RMN ^{1}H (400 MHz, d_{6}-DMSO) \delta ppm 1,22 (d, J = 7,03 Hz, 6H), 1,30 (t, J = 7,03 Hz, 3H), 4,00 (q, J = 7,03 Hz, 2H), 4,37-4,53 (m, 2H), 5,19-5,33 (m, 1H), 6,75 (s, 1H), 6,81 (d, J = 7,03 Hz, 1H), 6,90-7,04 (m, 2H), 7,13 (d, J = 2,20 Hz, 1H), 7,24 (d, J = 8,79 Hz, 1H), 7,43 (dd, 1H), 7,43 (dd, J = 7,03, 5,71 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 8,20 (d, J = 9,23 Hz, 1H), 8,50 (s, 2H), 12,52 (d, J = 5,27 Hz, 1H). CL-EM: 396,30 (M+H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 4
Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxifenil)acético 
\vskip1.000000\baselineskip
53
Una mezcla de ácido 3,4-dimetoxifenilborónico (457 mg, 2,5 mmol), Producto intermedio 1 (900 mg, 2,5 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (231 mg, 2,5 mmol) en tolueno (20 ml) y metanol (2,5 ml) se calentó a 50ºC durante 3,0 h y a continuación se agitó a t.a. durante toda la noche. Después de eliminar el disolvente, se purificó el producto en bruto por cromatografía eluyendo con CH_{2}Cl_{2}/MeOH. El Producto intermedio 4 (1,18 g, 85%) se obtuvo como un sólido amarillo. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,27 (s, 18H) 3,79 (s, 3H) 3,81 (s, 3H) 5,07 (s, 1H) 6,67 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,92 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,13 (m, 1H) 7,18 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,26 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,41 (d, J = 6,15 Hz, 1H) 7,62 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,00 (d, J = 5,71 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 9
N-(3-(Aminometil)-4-(etilsulfonil)fenil)acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
54 
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 9A
2-(Etiltio)-5-nitrobenzonitrilo 
\vskip1.000000\baselineskip
55
A 2-fluoro-5-nitrobenzonitrilo (5,00 g, 30,1 mmol) en DMF (100 ml), se añadió trietilamina (9,30 ml, 66,7 mmol) y seguido por etanotiol (2,80 ml, 37,9 mmol). Después de agitar a t.a. durante 1 h, la mezcla de reacción se vertió en agua (500 ml). Se filtró el precipitado resultante y se secó en alto vacío durante toda la noche para proporcionar Producto intermedio 9A (6,08 g, 97%).
\newpage
Producto intermedio 9B
2-(Etilsulfonil)-5-nitrobenzonitrilo
56
Al Producto intermedio 9A (6,08 g, 29,2 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (100 ml), se añadió MCPBA al \sim75% (16,0 g, 69,5 mmol). Después de agitar a t.a. durante toda la noche, se lavó el producto de reacción con NaHCO_{3} acuoso saturado, H_{3}PO_{4} 1 M y salmuera, a continuación se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró. Se purificó el residuo resultante por medio de cromatografía de gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexano al 10-35% para proporcionar Producto intermedio 9B (6,20 g, 88%). CL-EM: 209,20 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 9C
N-(3-Ciano-4-(etilsulfonil)fenil)acetamida
57
Al Producto intermedio 9B (3,60 g, 15,0 mmol) en ácido acético/anhídrido acético 1:1 (150 ml), se añadió Fe (4,20 g, 75,2 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 2 h y a continuación se vertió en hielo. Después de que se fundiera el hielo, se extrajo el producto con acetato de etilo, y se lavó la capa orgánica con NaHCO_{3} acuoso saturado y salmuera. Se secó la capa orgánica (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró para proporcionar Producto intermedio 9C (3,14 g, 83%). CL-EM: 241,18 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 9
N-(3-(Aminometil)-4-(etilsulfonil)fenil)acetamida
Al Producto intermedio 9C (423 mg, 1,65 mmol) en MeOH (17 ml), se añadió Ni Raney (cat). Se agitó la mezcla completa con hidrógeno (413,7 kPa) durante 8 h. Se filtró el producto de reacción y se concentró para proporcionar Producto intermedio 9 (397 mg, 92%). CL-EM: 253,23 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 10
Sal del ácido trifluoroacético de N-(4-(etilsulfonil)-3-((metilamino)metil)fenil)acetamida
58
Producto intermedio 10A
N-(4-(Etilsulfonil)-3-((metilamino)-2,2,2-trifluoroacetamida)-fenil)acetamida
59
Se agitó una solución de Producto intermedio 9 (100 mg, 0,39 mmol) en anhídrido trifluoroacético (5 ml) a t.a. durante 30 min. Se vertió la reacción en hielo, y después de que el hielo se fundiera, se extrajo el producto con acetato de etilo. Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó (Na_{2}SO_{4}), se filtró y se concentró. Se purificó el residuo resultante por medio de cromatografía de gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexanos al 10-60% para proporcionar Producto intermedio 10A (45 mg). CL-EM: 353,11 (M+H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 10B
N-(4-(Etilsulfonil)-3-((metilamino)-2,2,2. trifluoroacetamida-N-metil)-fenil)acetamida
60
A una mezcla de NaH al 60% (4,8 mg, 0,12 mmol) en DMF (1 ml) se añadió una solución de Producto intermedio 10A (41 mg, 0,12 mmol) en DMF (1,5 ml). Después de agitar a t.a. durante 1 h, se añadió una solución de yoduro de metilo (17 mg, 0,12 mmol) en DMF (0,5 ml) y se calentó la reacción a 80ºC durante toda la noche. Se enfrió la reacción a t.a. y se concentró. Se purificó el residuo resultante por medio de HPLC preparativa eluyendo con MeOH/agua/TFA para proporcionar Producto intermedio 10B (38 mg).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 10
Sal del ácido trifluoroacético de N-(4-(etilsulfonil)-3-((metilamino)metil)fenil)acetamida
Al Producto intermedio 10B (38 mg, 0,10 mmol) en MeOH (3 ml) se añadió carbonato de potasio (42 mg, 0,30 mmol) en agua (0,5 ml). Se calentó la reacción a reflujo durante 1 h, a continuación se enfrió a t.a. y se concentró. Se purificó el residuo resultante por medio de HPLC preparativa eluyendo con CH_{3}CN/agua/TFA para proporcionar Producto intermedio 10 (31 mg). RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 1,26 (t, J = 7,25 Hz, 3H), 2,18 (s, 3H), 2,78 (s, 3H), 3,23-3,36 (m, 3H), 4,43 (s, 2H), 7,80 (dd, J = 8,19, 2,20 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 8,79 Hz, 1H), 8,11 (d,J = 2,20 Hz, 1H). CL-EM: 271,16 (M+H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 15
Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-etoxifenil)acético
61 
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 15A
4-Bromo-1-cloro-2-etoxibenceno
62
A una solución de 2-cloro-5-bromofenol (documento WO-98/03.464, 3,43 g, 16,5 mmol) y K_{2}CO_{3} (4,57 g, 33,0 mmol) en DMF (20 ml) se añadió yoduro de etilo (1,78 ml, 22,3 mmol) a t.a. Se calentó la mezcla a 55ºC durante 3,0 h. Después de enfriar a t.a., se diluyó con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4}. Se purificó el residuo en bruto por cromatografía de columna instantánea dando 3,85 g (99%) de Producto intermedio 15A como un aceite viscoso. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,48 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 4,08 (d, J = 7,03 Hz, 2H) 7,03 (m, 2H) 7,22 (d, J = 6,15 Hz, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 15B
Ácido 4-cloro-3-etoxifenilborónico
63
A una solución de Producto intermedio 15A (3,8 g, 16 mmol) en THF (20 ml) a -78ºC se añadió n-BuLi (1,6 M en hexanos, 13,6 ml, 21,8 mmol). Se agitó la mezcla a -78ºC durante 40 min antes de añadir borato de triisopropilo (7,43 ml, 32 mmol). Se dejó la reacción en agitación desde -78ºC a t.a. durante 18 h. Se inactivó con HCl 1,0 N (50 ml), se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Se purificó el residuo en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:EtOAc:MeOH = 50:50:1) dando 1,85 g (57%) de Producto intermedio 15B como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,53 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 4,23 (d, J = 7,03 Hz, 2H) 7,48 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,66 (d, J = 6,15 Hz, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 15
Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-etoxifenil)acético
Una mezcla de Producto intermedio 15B (46 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en 1,2-dicloroetano (0,8 ml) se calentó a 100ºC durante 5 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 57 mg (50%) de Producto intermedio 15 como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,29 (s, 18H) 1,32 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 4,10 (m, 2H) 5,52 (s, 1H) 6,81 (s, 1H), 7,21 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,21 (s, 1H), 7,37 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,50 (m, 1H), 7,69 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,96 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 8,00 (d, J = 7,91 Hz, 1H) CL EM 572 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Producto intermedio 16
Ácido (1-di-terc-butoxicarbonilamino-isoquinolin-6-ilamino)-(3-etoxi-fenil)acético
64
Una mezcla de ácido 3-etoxifenilborónico (45 mg, 0,27 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,20 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (26 mg, 0,28 mmol) en 1,2-dicloroetano (2 ml) se calentó a 100ºC durante 12,5 min. en un reactor de microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (gradiente del 0 al 20% de metanol en diclorometano) dando 60 mg (56%) de Producto intermedio 16 como un sólido. CL-EM m/z: 538,3 (M + H)^{+}.
\newpage
Procedimiento general de acoplamiento-desprotección
La mayoría de los compuestos finales descritos en los ejemplos siguientes se prepararon según el siguiente esquema general de acoplamiento-desprotección:
\vskip1.000000\baselineskip
65 
\vskip1.000000\baselineskip
Se agitó una mezcla de producto intermedio ácido (1 eq, preparación dada en ejemplos), amina (1,5-8 eq, disponible comercialmente o advertido en caso contrario con preparación), EDCl (2-4 eq), HOAT (0,4-3 eq), DIEA (0-8 eq) en CH_{2}Cl_{2} (0,01 M) o CH_{2}Cl_{2}/DMF (0,03 M, 10:1) a t.a. durante 4 h a toda la noche. Se concentró el producto de reacción y se purificó por medio de HPLC preparativa (MeOH/H_{2}O/TFA o CH_{3}CN/H_{2}O/TFA) para proporcionar la amida di-Boc-protegida deseada. A una solución de la amida (1 eq) en EtOAc (\sim0,04 M) se añadió una solución 4 M de HCl en dioxano (\sim100 eq) y se agitó la reacción a t.a. durante 4 h a toda la noche. A continuación se concentró el producto de reacción y se purificó por medio de HPLC preparativa (MeOH/H_{2}O/TFA o CH_{3}CN/H_{2}O/TFA), a continuación se liofilizó (CH_{3}CN, H_{2}O) para proporcionar el compuesto final deseado como una sal de TFA sólida. La producción de las sales finales de TFA estuvo en el intervalo del 15 al 85%.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 5 Sal del ácido trifluoroacético del ácido [2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxi-fenil)-acetilami-no-(3-sulfamoil-fenil)acético (Ejemplo de referencia)
66 
\vskip1.000000\baselineskip
5A:N-terc-Butil-3-(hidroximetil)bencenosulfonamida (Ejemplo de referencia)
67
A una solución de ácido 3-terc-butilsulfamoil-benzoico (5,15 g, 20 mmol, J. Med. Chem. 1999, 42, 515-525) en THF (100 ml) a -20ºC se añadió N-metilmorfolina (2,97 ml, 1,35 eq) y cloroformiato de etilo (2,11 ml, 1,1 eq). Se agitó la mezcla a entre -20 y -10ºC durante 30 min. A continuación se añadió NaBH_{4} (1,13 g, 1,5 eq), seguido por lenta adición de MeOH (20 ml). Después de agitar a -20ºC durante 40 min, se inactivó la reacción por adición de ácido cítrico al 5%. Después de retirada del disolvente, se diluyó el producto en bruto con EtOAc, se lavó con NaHCO_{3} al 5% y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. La evaporación del disolvente dio 5A como un sólido blanco.
\vskip1.000000\baselineskip
5B:N-terc-Butil-3-formilbencenosulfonamida (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
68 
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución de 5A (4,4 g, 18 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (80 ml) a 0ºC, se añadieron NaHCO_{3} (1,8 g, 1,2 eq) y periodinano Dess-Martin (7,64 g, 18 mmol). Se agitó la mezcla a t.a. durante 2,0 h antes de diluir con EtOAc y se lavó con agua y salmuera. Se secó el extracto sobre Na_{2}SO_{4} y se purificó el producto en bruto por cromatografía eluyendo con EtOAc/hexanos 1:3 dando 5B (3,9 g, rendimiento 89%).
\vskip1.000000\baselineskip
5C: Éster metílico del ácido amino-(3-terc-butilsulfamoil-fenil)acético (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
69 
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución de 5B (190 mg, 0,79 mmol) en 7,0 N NH_{3} en MeOH (4,0 ml), se añadió cianuro de trimetilsililo (0,28 ml, 2,1 mmol) a 0ºC. Se agitó la mezcla a t.a. durante toda la noche. Se eliminó el disolvente al vacío dando el aminonitrilo correspondiente. Se disolvió el aminonitrilo en MeOH (5,0 ml) y se trató con HCl 4,0 N/dioxano (5,18 ml, 10 eq) a t.a. durante 3,0 h, se sometió a reflujo durante 8,0 h. Después de eliminación del disolvente, se obtuvo 5C con pureza suficiente para la etapa siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
5D: Éster metílico de ácido amino-(3-sulfamoil-fenil)-acético (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
70 
\vskip1.000000\baselineskip
Se trató 5C (150 mg, 0,5 mmol) con anisol (0,16 ml, 3,0 eq) y TFA (2,5 ml) a t.a. durante toda la noche. Después de eliminación del disolvente al vacío, se disolvió el producto en bruto en MeOH (3,0 ml) y se trató con resina básica (WA215 de Supelco) a t.a. durante 1,0 h hasta pH > 7. El filtrado y evaporación del disolvente dio 5D como un aceite. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,21 (m, 6H) 1,28 (m, 3H) 3,94 (m, 2H) 4,44 (m, 1H) 5,14 (d, J = 15,38 Hz, 1H)5,51 (d, J = 12,30 Hz, 1H) 6,60 (dd, J = 41,74, 2,20 Hz, 1H) 6,74 (dd, J = 38,67, 7,03 Hz, 1H) 6,87 (m, 1H) 7,02 (m, 3H) 7,22 (t, J = 7,47 Hz, 1H) 7,32 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,51 (m, 1H) 7,76 (m, 2H) 7,98 (t, J = 9,01 Hz, 1H).
5E: (Ejemplo de referencia) Se preparó Ejemplo 5 (5 mg) según el acoplamiento-desprotección general usando Producto intermedio 2 (25 mg) y 5D (20 mg) seguido por saponificación del éster metílico (13 mg) usando 4,0 equivalentes de LiOH (1,0 M en H_{2}O en THF durante 5,0 h. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,21 (m, 6H) 1,28 (m, 3H) 3,94 (m, 2H) 4,44 (m, 1H) 5,14 (d, J = 15,38 Hz, 1H) 5,51 (d, J = 12,30 Hz, 1H) 6,60 (dd, J = 41,74, 2,20 Hz, 1H) 6,74 (dd, J = 38,67, 7,03 Hz, 1H) 6,87 (m, 1H) 7,02 (m, 3H) 7,22 (t, J = 7,47 Hz, 1H) 7,32 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,51 (m, 1H) 7,76 (m, 2H) 7,98 (t, J = 9,01 Hz, 1H). CL-EM 608 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 24 Sal del ácido trifluoroacético de 2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxi-fenil)-N-(2-metoxi-5-sulfamoil-bencil)-acetamida
71 
\vskip1.000000\baselineskip
24A: 3-(Hidroximetil)-4-metoxibencenosulfonamida
72
A una solución de 2-metoxi-5-sulfamoilbenzoato de metilo (245 mg, 1,0 mmol) en THF (5,0 ml), se añadió LiBH_{4} (2,0 M en THF, 1,0 ml). Después de agitar a t.a. durante 5,0 h, se añadió otra porción de LiBH_{4} (1,0 ml) se añadió seguido por 1,0 ml de MeOH. Se agitó la mezcla durante 3 h, se diluyó con EtOAc y se inactivó con ácido cítrico al 5%. La extracción con EtOAc, el secado con Na_{2}SO_{4} y la evaporación del disolvente dio 24A (240 mg) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 3,86 (s, 3H) 4,66 (d, J = 6,15 Hz, 2H) 4,75 (s, 2H) 6,88 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,80 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,85 (d, J = 2,20 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
24B: 3-(Azidometil)-4-metoxibencenosulfonamida 
\vskip1.000000\baselineskip
73
A una solución de 24A (230 mg, 1,0 mmol) en THF (4,0 ml), se añadieron DPPA (0,5 ml, 2,0 eq) y DBU (0,34 ml, 2,0 eq). Se agitó la mezcla a t.a. durante toda la noche. Se diluyó con EtOAc, se inactivó con ácido cítrico al 5%. Se lavó la capa orgánica con salmuera, se secó con Na_{2}SO_{4}. Se purificó el producto por cromatografía eluyendo con hexanos/EtOAc (1:1) dando 120 mg de 24B como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 3,90 (s, 3H) 4,35 (s, 2H) 5,23 (s, 2H) 6,95 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,81 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,87 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
24C: 3-(Aminometil)-4-metoxibencenosulfonamida
74
A una solución de 24B (116 mg) en MeOH (10 ml), se añadió Pd/C (10% en peso, 30 mg). Esta mezcla se hidrogenó con un globo de H_{2} durante 4,0 h. Después de filtrado y concentración, se obtuvo 24C como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}CN) \delta ppm 3,75 (s, 2H) 3,86 (s, 3H) 7,00 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,70 (dd, J = 8,57, 2,42 Hz, 1H) 7,81 (d, J = 2,20 Hz, 1H).
24D: El Ejemplo 24 se preparó según el acoplamiento-desprotección general usando Producto intermedio 2 y 24C. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,29 (d, J = 6,15 Hz, 6H) 1,36 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 3,74 (s, 3H) 3,99 (q, J = 7,03 Hz, 2H) 4,47 (m, 3H) 5,07 (s, 1H) 6,61 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,77 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,97 (t, J = 8,13 Hz, 2H) 7,06 (m, 2H) 7,15 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,30 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,75 (m, 2H) 8,06 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,61 (t, J = 5,93 Hz, 1H). LS-EM 594 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 63 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-etoxi-fenil)-acetamida
75
Ejemplo 63 se preparó según el acoplamiento-desprotección general usando Producto intermedio 15 y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,16 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 1,35-1,40 (m, 3H) 2,13 (s, 3H) 3,22-3,28 (m, 2H) 3,96-4,05 (m, 2H) 4,60-4,66 (m, 1H) 4,71-4,77 (m, 1H) 5,17 (s, 1H) 6,62 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,77 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,07 (dd, J = 8,13, 1,98 Hz, 1H) 7,11 (d,J = 1,76 Hz, 1H) 7,17 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,29-7,32 (m, 1H) 7,34 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,58 (dd, J = 8,35, 2,20 Hz, 1H) 7,74 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,77 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,06 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,68 (t, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM (610 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
64A: 5-Bromo-2-fluorofenol (Ejemplo de referencia)
76
A una solución de 2,2,6,6-tetrametilpiperidina (5,6 ml, 33,2 mmol) en THF a -20ºC se añadió n-BuLi (1,6 M en hexanos, 18,8 ml, 30 mmol). Se agitó la mezcla a -20ºC durante 10 min antes de enfriar a -78ºC. Se añadió 1-bromo-4-fluorobenceno (2,95 ml, 27 mmol) durante 10 min y se agitó la mezcla a -78ºC durante 2,0 h antes de añadir borato de trimetilo (6,0 ml, 54 mmol). Se agitó la mezcla a -78ºC durante 30 min y a continuación a t.a. durante 2,0 h. Después de enfriar de nuevo a 0ºC, se añadió ácido acético glacial (4,86 ml, 81 mmol) y se agitó durante 30 min, seguido por adición de H_{2}O_{2} al 30% (4,86 ml, 81 mmol). Se agitó la mezcla a t.a. durante 24 h., se inactivó por adición de MnO_{2} (40 mg). Después de agitar a t.a. durante 30 min., se filtró la solución turbia a través de un lecho de Celite® húmedo y se extrajo con EtOAc. Se lavó la capa de EtOAc con NaHSO_{3} acuoso, salmuera y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Se purificó el residuo en bruto por cromatografía de columna instantánea (EtOAc:hexanos = 1:5) dando 4,4 g (85%) de 64A como un líquido. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 5,39 (s, 1H) 6,90-6,98 (m, 2H) 7,14 (dd, J = 8,13,1,98 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
64B: 4-Bromo-2-etoxi-1-fluorobenceno (Ejemplo de referencia)
77
A una solución de 64A (4,4 g, 23 mmol) y K_{2}CO_{3} (6,4 g, 46 mmol) en DMF (30 ml) se añadió yoduro de etilo (2,49 ml, 31 mmol) a t.a. Se calentó la mezcla a 50ºC durante 2,0 h. Después de enfriar a t.a., se diluyó con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4}. Se purificó el residuo en bruto por cromatografía de columna instantánea (EtOAc:hexanos = 1: 5) dando 3,86 g (77%) de 64B como un aceite viscoso. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,47 (m, 3H) 4,00 (m, 2H) 6,96-7,08 (m, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
64C: Ácido 3-etoxi-4-fluorofenilborónico (Ejemplo de referencia)
78
A una solución de 64B (3,86 g, 17,6 mmol) en THF (60 ml) a -78ºC se añadió n-BuLi (1,6 M en hexanos, 14,3 ml, 22,8 mmol). Se agitó la mezcla a -78ºC durante 40 min antes de añadir borato de trimetilo (3,63 ml, 33 mmol). Se dejó la reacción en agitación desde -78ºC a t.a. durante 4 h. Se inactivó con HCl 1,0 N (40 ml), se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación del disolvente, se trituró el producto sólido en bruto con EtOAc/hexanos (1:4). Después de filtración, 64C (2,2 g, rendimiento 69%) se recogió como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,42 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 4,11 (q, J = 7,03 Hz, 2H) 7,03 (dd, J = 11,42, 8,35 Hz, 1H) 7,18-7,29 (m, 2H) 7,35 (d, J = 7,91 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
64D: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-fluorofenil)acético (Ejemplo de referencia)
79
Una mezcla de 64C (43 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en 1,2-dicloroetano (0,8 ml) se calentó a 100ºC durante 5 min. en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 36 mg (32%) de 64D como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,26 (s, 18H) 4,08 (dd, J = 12,30, 7,03 Hz, 2H) 4,98 (s, 1H) 6,61 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,03 (s, 1H) 7,13 (s, 1H) 7,25 (s, 2H) 7,38 (d, J = 6,15 Hz, 1H) 7,61 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,99 (d, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 556 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 65 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-fluoro-fenil)-acetamida
80
El Ejemplo 65 se preparó según el acoplamiento-desprotección general usando 64D un Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,16 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 1,35 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 2,12 (s, 3H) 3,22-3,29 (m, 2H) 3,95-4,05 (m, 2H) 4,60-4,66 (m, 1H) 4,71-4,77 (m, 1H) 5,15 (s, 1H) 6,60 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,75 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,07 (d, J = 7,91 Hz, 2H) 7,15 (d, J = 9,23 Hz, 2H) 7,29 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,58 (dd, J = 8,57, 1,98 Hz, 1H) 7,71 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,76 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,05 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,67 (t, J = 5,93 Hz, 1H); CL EM 594 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
67A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(2,5-dimetoxifenil)acético (Ejemplo de referencia)
81
Una mezcla de ácido 2,5-dimetoxifenilborónico (29 mg, 0,16 mmol), Producto intermedio 1 (50 mg, 014 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (15 mg, 0,16 mmol) en 1,2-dicloroetano (0,7 ml) se calentó a 100ºC durante 5 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}: MeOH = 100:15) dando 26 mg (33%) de 67A como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,26 (s, 18H) 3,66 (s, 3H) 3,92 (s, 3H) 5,44 (s, 1H) 6,70 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 6,78 (dd, J = 9,01, 2,86 Hz, 1H) 6,95 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,06 (d, J = 2,64 Hz, 1H) 7,17 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,35 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,56 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,98 (d, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 554 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 68 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(2,5-dimetoxi-fenil)-acetamida
82
El Ejemplo 68 se preparó según el acoplamiento-desprotección general usando 67A y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,17 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 2,12 (s, 3H) 3,24 (q, J = 7,18 Hz, 2H) 3,62-3,66 (s, 3H) 3,82-3,86 (s, 3H) 4,67 (dd, J = 6,15, 3,52 Hz, 2H) 5,52 (s, 1H) 6,57 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,73 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,85 (td, J = 8,57, 3,08 Hz, 2H) 6,95 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,12 (dd, J = 9,23; 2,64 Hz, 1H) 7,27 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,64-7,69 (m, 1H) 7,72-7,80 (m, 2H) 8,02 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,25 (t, J = 6,37 Hz, 1H); CL EM 592 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
69A: 4-Bromo-2-metoxi-1-fluorobenceno (Ejemplo de referencia)
83
A una solución de 64A (3,3 g, 17,3 mmol) y K_{2}CO_{3} (4,78 g, 34,6 mmol) en DMF (20 ml) se añadió yoduro de metilo (1,46 ml, 23,4 mmol) a t.a. Se calentó la mezcla a 40ºC durante 2,0 h. Después de enfriar a t.a., se diluyó con éter, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO_{4}. Se purificó el residuo en bruto por cromatografía de columna instantánea (EtOAc:hexanos = 1: 6) dando 2,74 g (77%) de 69A como un aceite viscoso. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 3,89 (s, 3H), 6,95-7,00 (m, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
69B: Ácido 3-metoxi-4-fluorofenilborónico (Ejemplo de referencia)
84
A una solución de 69A (2,7 g, 13,1 mmol) en THF (25 ml) a -78ºC se añadió n-BuLi (1,6 M en hexanos, 11,0 ml, 17,7 mmol). Se agitó la mezcla a-78ºC durante 40 min antes de añadir borato de trimetilo (2,7 ml, 24,3 mmol). Se dejó la reacción en agitación desde -78ºC a t.a. durante 18 h. Se inactivó con HCl 1,0 N (40 ml), se extrajo con EtOAc, se lavó con salmuera y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación del disolvente, se trituró el producto sólido en bruto con EtOAc/hexanos (1:4). Después de filtración, 69B (0,75 g, rendimiento 35%) se recogió como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 3,86 (s, 3H) 7,03-7,45 (m, 3H).
\vskip1.000000\baselineskip
69C: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(4-fluoro-3-metoxifenil)acético (Ejemplo de referencia)
85
Una mezcla de 69B (39 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en 1,2-dicloroetano (0,8 ml) se calentó a 85ºC durante 8 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 54 mg (50%) de 69C como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,27 (s, 18H) 3,83 (s, 3H) 4,97 (s, 1H) 6,61 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,00 (dd, J = 10,99, 8,35 Hz, 1H) 7,12 (ddd, J = 8,24, 4,28, 1,98 Hz, 1H) 7,23 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,32 (dd, J = 8,35, 2,20 Hz, 1H) 7,38 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,61 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,99 (d, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 542 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 70 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-amino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(4-fluoro-3-metoxi-fenil)-acetamida
86
El Ejemplo 70 se preparó según el acoplamiento-desprotección general usando 69C y Producto intermedio 9. La acetamida se hidrolizó a la anilina durante la etapa de desprotección. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,13 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 3,11 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 3,81 (s, 3H) 4,56 (d, J = 5,71 Hz, 2H) 5,14 (s, 1H) 6,55-6,58 (m, 1H) 6,58-6,64 (m, 3H) 6,81 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,05-7,12 (m, 3H) 7,15-7,19 (m, 2H) 7,20 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,31 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,48 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 8,07 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,48 (s, 1H). LS-EM 538 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 73 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluoro-fenil)-acetamida
87
73A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluorofenil)acético
88
Una mezcla de ácido 5-etoxi-2-fluorofenilborónico (43 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo (0,7 ml) y DMF (0,07 ml) se calentó a 85ºC durante 30 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}: MeOH = 100:15) dando 28 mg (25%) de 73A como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,14 (s, 18H) 1,19 (t, J = 6,81 Hz, 3H) 3,83 (q, J = 7,03 Hz, 2H) 5,39 (s, 1H) 6,59 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,70-6,77 (m, 1H) 6,89-7,00 (m, 2H) 7,16 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,33 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,52 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,85 (s, 1H) 7,91 (d, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 556 (M + H).
73B: Se preparó Ejemplo 73 según el acoplamiento-desprotección general usando 73A y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,09 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 1,23 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 2,05 (s, 3H) 3,13-3,22 (m, 2H) 3,73-3,89 (m, 2H) 4,55-4,71 (m, 2H) 5,37 (s, 1H) 6,58 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,71 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,77-6,85 (m, 2H) 6,95-7,05 (m, 1H) 7,09 (dd, J = 9,01, 2,42 Hz, 1H) 7,23 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,51-7,66 (m, 1H) 7,69 (d, J = 8,79 Hz, 2H) 7,99 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,56 (t, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 594 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
77A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(2-cloro-5-metoxifenil)acético (Ejemplo de referencia)
89
Una mezcla de ácido 2-cloro-5-metoxifenilborónico (43 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo (0,7 ml) y DMF (0,07 ml) se calentó a 85ºC durante 30 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2} MeOH = 100:15) dando 28 mg (25%) de 77A como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,16 (s, 18H) 3,24 (s, 3H) 5,55 (s, 1H) 6,57 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,75-6,84 (m, 2H) 7,00 (d, J = 3,08 Hz, 1H) 7,10-7,20 (m, 1H) 7,27 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,32 (d, J = 5,27 Hz, 1H) 7,54 (d,J = 9,23 Hz, 1H) 7,93 (d, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 558 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 78 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(2-cloro-5-metoxi-fenil)-acetamida
90
El Ejemplo 78 se preparó según el acoplamiento-desprotección general usando 77A y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,09 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 2,05 (s, 3H) 3,14-3,21 (m, 2H) 3,59 (s, 3H) 4,63 (t, J = 5,05 Hz, 2H) 5,47 (s, 1H) 6,56 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,70 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,80-6,86 (m, 2H) 7,07 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,22 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,28 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,54 (dd, J = 8,35, 2,20 Hz, 1H) 7,69 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,76 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,99 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,52 (t, J = 5,93 Hz, 1H); CL EM 596 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
79A: Ácido 4-cloro-3-metoxifenilborónico (Ejemplo de referencia)
91
A 4-bromo-1-cloro-2-metoxibenceno (2,2 g, 9,9 mmol) en tolueno/THF (16/6 ml) a -78ºC se añadió n-butil-litio (8,7 ml, 1,6 M en hexano, 14 mmol) gota a gota. Se agitó la reacción a -78ºC durante 30 min., a continuación se añadió trimetilborato (2,2 ml, 19,8 mmol). Se dejó calentar la reacción a t.a. y se agitó durante toda la noche y a continuación se inactivó con HCl 1 M (15 ml). Se separó la capa orgánica y se secó sobre sulfato de sodio. Se eliminó el disolvente y se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea dando 79A (1,2 g, rendimiento 65%) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 3,87 (m, 3H) 7,11 (d, J = 7,83 Hz, 1H) 7,20 (s, 1H) 7,29 (d, J = 7,83 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
79B: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-metoxifenil)acético (Ejemplo de referencia)
92
Una mezcla de 79A (43 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo (0,7 ml) y DMF (0,07 ml) se calentó a 85ºC durante 30 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 56 mg (50%) de 79B como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,18 (s, 18H) 3,78 (s, 3H) 6,56 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,05 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,17 (dd, J = 8,79,2,20 Hz, 1H) 7,20-7,25 (m, 3H) 7,32 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,53 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,92 (d, J = 5,71 Hz, 1H); CL EM 558 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 81 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-metoxi-fenil)-acetamida
93
Se preparó Ejemplo 81 según el acoplamiento-desprotección general usando 79B y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,07 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 2,03 (s, 3H) 3,11-3,32 (m, 2H) 3,73 (s, 3H) 4,47-4,70 (m, 2H) 5,08 (s, 1H) 6,52 (d, J = 2,64 Hz, 1H) 6,68 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,98 (dd, J = 8,13, 1,98 Hz, 1H) 7,04-7,12 (m, 2H) 7,21 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,26 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,47 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,62-7,72 (m, 2H) 7,97 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,58 (t, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 596 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
82A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-fluoro fenil)acético (Ejemplo de referencia)
94
Una mezcla de ácido 2-fluoro-5-metoxifenilborónico (38 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo (0,7 ml) y DMF (0,07 ml) se calentó a 85ºC durante 30 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 27 mg (25%) de 82A como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,17 (s, 18H) 3,63 (s, 3H) 5,43 (s, 1H) 6,62 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,74-6,91 (m, 2H) 6,93-7,04 (m, 2H) 7,18 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,36 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,54 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,94 (d, J = 5,71 Hz, 1H); CL EM 542 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 84 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(2-fluoro-5-metoxi-fenil)-acetamida
95
Se preparó Ejemplo 84 según el acoplamiento-desprotección general usando 82A y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,08 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 2,03 (s, 3H) 3,11-3,21 (m, 2H) 3,60 (s, 3H) 4,51-4,71 (m, 2H) 5,37 (s, 1H) 6,56 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,69 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,77-6,86 (m, 2H) 7,00 (t, J = 9,01 Hz, 1H) 7,08 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,21 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,53 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,65-7,71 (m, 2H) 7,98 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,57 (t, J = 5,93 Hz, 1H); CL EM 580 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
87A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(2-fluoro-5-metilfenil)acético (Ejemplo de referencia)
96
Una mezcla de ácido 2-fluoro-5-metilfenilborónico (34 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo (0,7 ml) y DMF (0,07 ml) se calentó a 85ºC durante 30 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 52 mg (50%) de 87A como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,18 (s, 18H) 2,19 (s, 3H) 5,44 (s, 1H) 6,62 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,93-7,00 (m, 1H) 7,03-7,09 (m, 1H) 7,19 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,22-7,27 (m, 1H) 7,37 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,55 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,95 (d, J = 5,71 Hz, 1H); CL EM 526 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 88 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(2-fluoro-5-metil-fenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
97
Se preparó Ejemplo 88 según el acoplamiento-desprotección general usando 87A y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,08 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 2,04 (s, 3H) 2,17 (s, 3H) 3,14 (s, 2H) 4,61 (t, J = 5,27 Hz, 2H) 5,35 (s, 1H) 6,55 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,68 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,89-7,01 (m, 1H) 7,05-7,16 (m, 3H) 7,21 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,53 (dd, J = 8,57, 1,98 Hz, 1H) 7,67 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,73 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,97 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,56 (t, J = 5,93 Hz, 1H); CL EM 564 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
89A: 1-(3-Bromo-4-fluorofenil)etanol (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
98
A una solución de 3-bromo-4-fluoroacetofenona (10 g, 46 mmol) en THF (100 ml) y metanol (1,0 ml) se añadió borohidruro de sodio (2,1 g, 55,5 mmol). Se calentó la mezcla hasta 70ºC durante 1 h, a continuación se enfrió a t.a. Se inactivó la reacción por 100 ml de solución de HCl 1 N y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna dando 9,8 g de 89A (rendimiento 97%). RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,48 (d, J = 6,15 Hz, 3H) 7,24-7,33 (m, 1H) 7,59 (dd, J = 6,59, 2,20 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
89B: 2-Bromo-4-etil-1-fluorobenceno (Ejemplo de referencia)
99
A 89A (9,8 g, 45 mmol) en ácido trifluoroacético (20 ml) se añadió trietilsilano (14,3 ml, 90 mmol). Después de agitar a 50ºC durante 6 h, se inactivó la reacción por 100 ml de solución saturada de NaHCO_{3} y se extrajo con éter dietílico (3x). Se lavó la capa orgánica combinada con salmuera, se secó por MgSO_{4}, y se concentró. Se destiló el residuo en bruto a 200ºC dando 89B (pureza del 85%). RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,22 (t, J = 7,69 Hz, 3H) 2,60 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 7,02 (t, J = 8,57 Hz, 1H) 7,06-7,12 (m, 1H) 7,37 (dd, J = 6,59, 2,20 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
89C: Ácido 5-etil-2-fluorofenilborónico (Ejemplo de referencia)
100
A 89B (550 mg, 2,3 mmol) en THF (10 ml) se añadió n-butil-litio 1,6 M en hexano (2,2 ml, 3,5 mmol) a -78ºC. Después de agitar durante 1 h, se introdujo trimetilborato (0,52 ml, 4,6 mmol) a -78ºC. Se calentó la mezcla de reacción hasta temperatura ambiente durante toda la noche. A continuación se inactivó con HCl 1,0 N (10 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Se lavó la capa orgánica combinada con salmuera, se secó sobre MgSO_{4} y se concentró. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna dando 255 mg de sólido blanco de 89C. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,15-1,27 (m, 3H) 2,61 (q, J = 7,76 Hz, 2H) 6,94 (t, J = 8,57 Hz, 1H) 7,17-7,27 (m, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
89D: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etil-2-fluoro-fenil)acético (Ejemplo de referencia)
101
Una mezcla de 89C (36 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo (0,7 ml) y DMF (0,07 ml) se calentó a 85ºC durante 30 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 54 mg (rendimiento 51%) de 89D como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,05 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 1,16 (s, 18H) 2,48 (q, J = 7,62 Hz, 2H) 5,44 (s, 1H) 6,61 (d,J = 2,20 Hz, 1H) 6,93-7,00 (m, 1H) 7,03-7,10 (m, 1H) 7,18 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,25 (dd, J = 7,03, 2,20 Hz, 1H) 7,35 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,54 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,93 (d, J = 6,15 Hz, 1H) CL EM 540 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 90 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etil-2-fluoro-fenil)-acetamida
102
Se preparó Ejemplo 90 según el acoplamiento-desprotección general usando 89D y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,01-1,10 (m, 6H) 2,04 (s, 3H) 2,46 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 3,11-3,21 (m, 2H) 4,61 (d, J = 6,15 Hz, 2H) 5,35 (s, 1H) 6,56 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,69 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,98 (t, J = 9,67 Hz, 1H) 7,04-7,15 (m, 3H) 7,22 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,55 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,67 (d, J = 8,3 5 Hz, 1H) 7,73 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,98 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,56 (t, J = 6,15 Hz, 1H); CL EM 578 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
91A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-etil-fenil)acético (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
103
Una mezcla de ácido 4-cloro-3-etilfenilborónico (38 mg, 0,23 mmol), Producto intermedio 1 (72 mg, 0,2 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (21 mg, 0,23 mmol) en acetonitrilo (0,7 ml) y DMF (0,07 ml) se calentó a 85ºC durante 30 min en un Reactor de Microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna instantánea (CH_{2}Cl_{2}:MeOH = 100:15) dando 54 mg (50%) de 91A como un sólido. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,07 (t, J = 7,69 Hz, 3H) 1,16 (s, 18H) 2,63 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 5,11 (s, 1H) 6,56 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,18 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,21-7,24 (m, 1H) 7,26-7,33 (m, 2H) 7,40 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,53 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,91 (d, J = 5,71 Hz, 1H); CL EM 556 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 92 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-etil-fenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
104
Se preparó Ejemplo 92 según el acoplamiento-desprotección general usando 91A y Producto intermedio 9. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,02-1,14 (m, 6H) 2,03 (s, 3H) 2,63 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 3,11-3,21 (m, 2H) 4,46-4,69 (m, 2H) 5,06 (s, 1H) 6,50 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,66 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,07 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,17-7,33 (m, 4H) 7,49 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,62-7,72 (m, 2H) 7,96 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,58 (t, J = 5,93 Hz, 1H); CL EM 594 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 98 Sal del ácido trifluoroacético del éster metílico del ácido (R)-3-[2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluoro-fenil)-acetilamino]-3-(2-isopropilsulfanil-5-metoxicarbonilamino-fenil)-propiónico 
\vskip1.000000\baselineskip
105 
\vskip1.000000\baselineskip
98A: (S,E)-N-(2-(Isopropiltio)-5-nitrobencilideno)-4-metilbencenosulfinamida 
\vskip1.000000\baselineskip
106
A 2-(isopropiltio)-5-nitrobenzaldehído (234 mg, 1,0 mmol) y (S)-(+)-p-toluenosulfinamida (161 mg, 1,0 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) se añadió Ti(OEt)4 (25% tec, 0,54 ml). Se calentó la mezcla a 75ºC durante 3,0 h. TLC indicó una reacción limpia. Se eliminó el disolvente y se redisolvió el residuo en EtOAc, en solución sat. de Na_{2}SO_{4} en agitación y se agitó la suspensión espesa a t.a. durante 30 min antes de filtrar a través de un lecho de Celite®. Se extrajo el filtrado con EtOAc, se lavó con salmuera y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación del disolvente, 98A (320 mg, rendimiento 88%) se obtuvo como un sólido usado durante la etapa siguiente sin purificación adicional. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,34 (d, J = 6,59 Hz, 6H) 2,34 (s, 3H) 3,51-3,61 (m, 1H) 7,27 (d, J = 7,91 Hz, 2H) 7,45 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,59 (d, J = 8,35 Hz, 2H) 8,14 (dd, J = 8,79, 2,64 Hz, 1H) 8,69 (d, J = 2,64 Hz, 1H) 9,17 (s, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
98B: (R)-3-(2-(isopropiltio)-5-nitrofenil)-3-((S)-4-metilfenilsulfinamido)propanoato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
107 
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución de bis(trimetilsilil)amida sódica (1,0 M en THF, 0,82 ml) en Et_{2}O a -78ºC se añadió acetato de metilo (0,065 ml, 0,82 mmol). Después de agitar durante 30 min a -78ºC, se añadió lentamente una solución de 98A (150 mg, 0,41 mmol) en una mezcla de Et_{2}O (1,0 m) y THF (1,0 ml). Se agitó la mezcla durante 30 min antes de inactivar por adición de solución sat. de cloruro de amonio a -78ºC. Después de calentar a t.a., se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de purificación de columna (EtOAc:hexanos = 1:2), 98B (318 mg, rendimiento 90%) se obtuvo como un aceite viscoso. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,42 (m, 6H) 2,42 (s, 3H) 2,84-2,93 (m, 2H) 3,63 (s, 3H) 5,34 (s, 1H) 7,32 (d, J = 7,91 Hz, 2H) 7,40 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,46 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,60 (d, J = 7,91 Hz, 2H) 8,10 (dd, J = 8,57, 2,42 Hz, 1H) 8,36 (d, J = 2,64 Hz, 1H); CL EM 437 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
98C: (R)-3-amino-3-(2-(isopropiltio)-5-nitrofenil)propanoato de metilo
108
Se trató una solución de 98B (550 mg, 1,3 mmol) en metanol (5,0 ml) con TFA (0,28 ml, 3,78 mmol) a 0ºC durante 2,0 h y a t.a. durante 1,0 h. Después de eliminación del disolvente, se diluyó el producto en bruto con éter dietílico y se lavó con HCl 3,0 N (3 x 4,0 ml). Se desechó la capa de éter y la acuosa se basificó por adición de NaOH 1,0 N (15 ml). Se extrajo la fase acuosa con EtOAc y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación del disolvente 98C (220 mg, rendimiento 58%) se obtuvo como un aceite viscoso. Se usó durante la etapa siguiente sin purificación adicional. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,39 (m, 6H) 2,59 (dd, J = 16,70, 9,67 Hz, 1H) 2,71-2,81 (m, 1H) 3,56-3,64 (m, 1H) 3,71 (s, 3H) 4,06-4,17 (m, 1H) 4,87 (dd, J = 9,67, 3,08 Hz, 1H) 7,36 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,05 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 8,46 (d, J = 2,64 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
98D: (R)-3-(terc-butoxicarbonil)-3-(2-(isopropiltio)-5-nitrofenil)propanoato de metilo
109
Se trató una solución de 98C (220 mg, 0,74 mmol) en THF (2,0 ml) con una solución de dicarbonato de di-terc-butilo (1,0 M en THF, 1,3 ml, 1,3 mmol) y trietilamina (0,13 ml, 0,93 mmol) a t.a. durante 4,0 h. Se diluyó con EtOAc, se lavó con HCl 1,0 N y salmuera, se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación del disolvente, se obtuvo 98D (230 mg, rendimiento 82%) como un aceite viscoso usado en la etapa siguiente sin purificación adicional. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,44 (m, 15H) 2,84 (d, J = 3,95 Hz, 2H) 3,58-3,67 (m, 4H) 5,39 (s, 1H) 5,91 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,38 (d, 7 = 8,79 Hz, 1H) 8,04 (dd, J = 8,57, 2,42 Hz, 1H) 8,1-9 (d, J = 2,64 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
98E: (R)-3-(terc-butoxicarbonil)-3-(2-(isopropiltio)-5-(metoxicarbonil)fenil)propanoato de metilo
110
Se hidrogenó una solución de 98D (230 mg, 0,63 mmol) en metanol con un globo de hidrógeno sobre Pd/C al 10% (50 mg) durante 2,0 h. Después de evaporación del disolvente, se disolvió el producto en bruto en piridina (2,0 ml) y se trató con cloroformiato de metilo (0,085 ml, 1,1 mmol) a 0ºC durante 30 min y a continuación a t.a. durante 2,0 h. Se diluyó con EtOAc, se lavó con HCl 5,0 N, salmuera y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación del disolvente y purificación de columna (EtOAc:hexanos = 1:2), 98E (210 mg, rendimiento 80%) se obtuvo como un aceite viscoso. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,25-1,31 (m, 6H) 1,41 (s, 9H) 2,85 (d, J = 4,83 Hz, 2H) 3,28-3,38 (m, 1H) 3,61 (s, 3H) 3,77 (s, 3H) 6,67 (s, 1H) 7,24 (s, 1H) 7,42 (s, 2H).
\vskip1.000000\baselineskip
98F: (R)-3-amino-3-(2-(isopropiltio)-5-(metoxicarbonil)fenil)propanoato de metilo
111
Se trató una solución de 98E (210 mg, 0,49 mmol) en EtOAc (2,5 ml) con HCl 4,0 N en dioxano (2,5 ml, 10 mmol) a t.a. durante 4,0 h. Después de evaporación del disolvente, 98F se obtuvo como un sólido blanco usado durante la etapa siguiente sin purificación adicional. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,18 (d, J = 6,59 Hz, 6H) 2,93 (dd, J = 16,92, 5,49 Hz, 1H) 3,11 (dd, J = 17,14, 8,35 Hz, 1H) 3,18-3,28 (m, 1H) 3,64 (s, 3H) 3,66 (s, 3H) 5,42 (dd, J = 8,35, 5,27 Hz, 1H) 7,48 (s, 2H) 7,63 (s, 1H); CL EM 327 (M + H).
98G: Se preparó Ejemplo 98 según el acoplamiento-desprotección general usando 73A y 98F. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,07-1,14 (m,6H) 1,18-1,24 (m,3H) 2,58-2,80 (m,2H) 3,22-3,30 (m, 1H) 3,32 y 3,53 (s, 3H) 3,57 y 3,64 (s, 3H) 3,74-3,93 (m, 2H) 5,24 y 5,35 (s, 1H) 5,88-6,02 (m, 1H) 6,55 (dd, J = 23,95, 1,98 Hz, 1H) 6,66-7,38 (m, 8H) 7,90-8,09 (m, 1H) 8,80 (dd, J = 23,29, 8,35 Hz, 1H); CL EM 664 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 100 Sal del ácido trifluoroacético del éster metílico del ácido (R)-3-[2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetilamino]-3-(2-isopropilsulfanil-5-metoxicarbonilamino-fenil)-propiónico
112
Se preparó Ejemplo 100 según el acoplamiento-desprotección general usando Producto intermedio 4 y 98F. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,20 (m, 6H) 2,74 (d, J = 4,83 Hz, 1H) 2,77 (m, 2H) 3,35 (m, 1H) 3,66 (s, 3H) 3,79 (s, 3H) 3,82 (s, 3H) 4,99 (s, 1H) 5,98-6,02 (m, 1H) 6,59 (s, 1H) 6,83 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 6,93 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,04-7,08 (m, 4H) 7,11 (s, 1H) 7,16 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,29 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,33 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 8,06 (d, J = 9,23 Hz, 1H); CL EM 662 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 102 Sal del ácido trifluoroacético del ácido (R)-3-[2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluoro-fenil)-acetilamino]-3-(2-isopropilsulfanil-5-metoxicarbonilamino-fenil)-propiónico
113
Se preparó Ejemplo 102 a partir del Ejemplo 98 por hidrólisis del éster metílico según se describe en el procedimiento 5E. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,19 (m, 6H) 1,31 (m, 3H) 2,69-2,80 (m, 1H) 3,65 y 3,74 (s, 3H) 3,83-3,94 (m, 2H) 5,38 y 5,46 (s, 1H) 6,00 (m, 1H) 6,64-7,41 (m, 9H) 8,03-8,09 (m, 2H) CL EM 650 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 103 Sal del ácido trifluoroacético del ácido (R)-3-[(R)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetilaminol-3-(2-isopropilsulfanil-5-metoxicarbonilamino-fenil)-propiónico 
\vskip1.000000\baselineskip
114 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó Ejemplo 103 a partir del Ejemplo 100 por hidrólisis del éster metílico según se describe en el procedimiento 5E. Se separó el enantiómero de los diastereómeros por HPLC preparativa. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,20 (m, 6H) 2,74 (m, 1H) 3,66 (s, 3H) 3,80 (s, 3H) 3,82 (s, 3H) 4,99 (s, 1H) 6,00 (dd, J = 9,67, 4,83 Hz, 1H) 6,59 (s, 1H) 6,83 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 6,93 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,04-7,08 (m, 4H) 7,10-7,18 (m, 2H) 7,29 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,33 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 8,02-8,08 (m, 2H); CL EM 648 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
121A: 2-(3-Bromofenil)acetato de metilo (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
115 
\vskip1.000000\baselineskip
Se sometió a reflujo una mezcla de ácido 3-bromofenilacético (5,29 g, 24,6 mmol) y ácido sulfúrico concentrado (100 \mul) en metanol anhidro (40 ml) durante toda la noche y a continuación se concentró al vacío. Se repartió el residuo entre acetato de etilo y solución saturada de bicarbonato de sodio. Se lavó la capa orgánica con solución saturada de bicarbonato de sodio, solución saturada de cloruro de sodio, se secó (MgSO_{4}) y se concentró al vacío dando 121A (5,82 g, 100%) como un aceite amarillo claro. CL-EM m/z: 228,18 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
121B: 2-Bromo-2-(3-bromofenil)acetato de metilo (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
116 
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de 121A (2,28 g, 10,0 mmol) y N-bromosuccinimida (1,96 g, 11,0 mmol) en tetracloruro de carbono (20 ml) se desoxigenó con un flujo de nitrógeno durante 5 min. Se añadió 2,2'-azobisisobutironitrilo (82 mg, 0,5 mmol) y se sometió a reflujo la mezcla durante 18 h. Se añadieron hexanos a la mezcla enfriada, y el sólido resultante se filtró y se lavó con hexanos. Se concentró el filtrado en un evaporador giratorio y a continuación se cromatografió (gel de sílice, gradiente escalonado del 100% de hexanos al 5% de acetato de etilo en hexanos) dando 121B (1,3 g, 42%) como un aceite transparente. CL-EM m/z: 309,1 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
121C: 2-(1-(di-terc-Butoxicarbonilamino)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-bromofenil)acetato de metilo (Ejemplo de referencia)
117
Una mezcla de 121B (404 mg, 1,31 mmol), Producto intermedio 1 (238 mg, 0,66 mmol) y 2,6-lutidina (0,60 ml, 5,17 mmol) en dimetilformamida (3 ml) se calentó en un tubo de presión a 55ºC durante 3 días. Se concentró la mezcla al vacío y se repartió el residuo entre acetato de etilo y solución saturada de bicarbonato de sodio. Se lavó la capa orgánica con agua, solución saturada de cloruro de sodio, se secó (MgSO_{4}), y se concentró. La cromatografía (gel de sílice, acetato de etilo en hexanos al 30%) dio 121C (263 mg, 68%) como un aceite amarillo que solidificó al dejar en reposo. CLEM m/z: 586,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
121D: Ácido 2-(1-(di-terc-butoxicarbonilamino)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-bromofenil)acético (Ejemplo de referencia)
118
Una mezcla de 121C (600 mg, 1,03 mmol) e hidróxido de litio monohidratado (86 mg, 2,05 mmol) en THF (4 ml), agua (4 ml), y metanol (1 ml) se agitó a t.a. durante 1 h. Se concentró la mezcla al vacío, y se repartió el residuo entre acetato de etilo y solución 1 N de ácido clorhídrico. Se lavó la capa orgánica con solución saturada de cloruro de amonio, agua, solución saturada de cloruro de sodio, se secó (MgSO_{4}), y se concentró dando 121D (547 mg, 93%) como un sólido amarillo. CL-EM m/z: 572,1 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
124A: Ácido 2-(1-(di-terc-butoxicarbonilamino)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-metoxifenil)acético (Ejemplo de referencia)
119
Una mezcla de ácido 3-metoxifenilborónico (76 mg, 0,5 mmol), Producto intermedio 1 (90 mg, 0,25 mmol), y ácido glioxílico (0,23 mg, 0,25 mmol) en DCE (1,3 ml), se calentó en un tubo de presión a 60ºC durante 5 h. Se cromatografió la mezcla (gel de sílice, metanol en cloroformo al 10%) dando 124A (72 mg, 56%). CL-EM m/z: 524,3 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
136A: (E)-3-(3-amino-5-fluorofenil)acrilato de metilo (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
120 
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de 1-fluoro-3-yodo-5-nitrobenceno (1,145 g, 4,29 mmol), acetato de sodio (0,430 g, 5,24 mmol), acetato de paladio (II) (1,7 mg, 0,0076 mmol), acrilato de metilo (0,425 ml, 4,71 mmol), y 1-metil-2-pirrolidinona (11 ml) en argón se desgasificó con tres ciclos de congelación/bombeo/descongelación. La mezcla de reacción se calentó a 130ºC durante 35 min y a continuación a 100ºC durante 14 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y solución saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo tres veces con éter dietílico. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con solución saturada de bicarbonato de sodio, ácido clorhídrico (1 N), y salmuera, se secó (MgSO_{4}), y se concentró a presión reducida. Se suspendió el residuo en una mezcla de etanol (12 ml), agua (2,5 ml), y ácido acético (1,25 mmol) y se calentó a reflujo. Se añadió polvo de hierro (0,519 g, 9,28 mmol) en porciones durante 30 min, y se continuó con el reflujo durante 30 min adicionales. Se concentró la mezcla de reacción a presión reducida. Se repartió el residuo entre acetato de etilo y solución de bicarbonato de sodio y se filtró a través de un filtro de fibra de vidrio para eliminar un precipitado gris fino. Se extrajo la fase acuosa con acetato de etilo (3x) y se secó la fase orgánica (MgSO_{4}) y se concentró a presión reducida dando 136A (0,328 g, 74%) como un sólido amarillo claro. CL-EM m/z: 196,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
136B: (E)-3-(3-(Dibencilamino)-5-fluorofenil)acrilato de metilo (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
121 
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió bromuro de bencilo (0,440 ml, 3,70 mmol) a una solución de 136A (0,328 g, 1,68 mmol) y DIEA (0,880 ml) en acetonitrilo (5 ml). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 14 h y a continuación se concentró a presión reducida. Se trituró el sólido residual dos veces con éter dietílico, se disolvió en diclorometano, y se extrajo con ácido clorhídrico (1 N) y solución saturada de bicarbonato de sodio. Se secó la capa orgánica (MgSO_{4}) y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 15% de acetato de etilo en hexanos) dando 136B (0,468 g, 74%) como un sólido blanco. CL-EM m/z: 376,5 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
136C: Ácido (E)-3-(3-(dibencilamino)-5-fluorofenil)acrílico (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
122 
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió hidróxido de sodio (2 ml, 2 mmol, solución 1,00 N) a una solución de 136B (0,467 g, 1,24 mmol) en tetrahidrofurano (2 ml) y metanol (1 ml). Se calentó la reacción a 80ºC durante 1 h. Se añadió ácido clorhídrico (1 N) y se extrajo la mezcla de reacción con acetato de etilo (2x). Se secaron las capas orgánicas combinadas (MgSO_{4}) y se concentró a presión reducida dando 136C (0,411 g, 91%) como un sólido amarillo claro. CL-EM m/z:
362,4 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
136D: 6-(Dibencilamino)-8-fluoroisoquinolin-1(2H)-ona (Ejemplo de referencia)
123
Se añadió una solución de cloroformiato de etilo (0,421 ml, 4,4 mmol) en acetona (10 ml) gota a gota a una suspensión de 136C (1,46 g, 4,0 mmol) en una mezcla de acetona (50 ml) y trietilamina (1,25 ml, 9,0 mmol) a 0ºC. La mezcla de reacción se agitó durante 45 min y a continuación se añadió gota a gota una solución de azida sódica (0,478 g 7,4 mmol) en agua (14 ml) durante 1 h. Después de 1 h adicional, la reacción se calentó a t.a., se vertió en agua, y se extrajo con diclorometano (3x). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secó (MgSO_{4}), y se concentró a presión reducida dando un sólido amarillo (1,5 g). (Precaución: este producto intermedio de azida de acilo es potencialmente explosivo y debe manejarse en pequeñas cantidades detrás de un blindaje de seguridad). Se disolvió una parte de este sólido (0,488 g) en una mezcla de diclorometano (1 ml) y éter fenílico (3 ml) y se añadió lentamente gota a gota a una mezcla en reflujo de éter fenílico (3 ml) y tributilamina (0,8 ml). Se continuó con el reflujo durante 1 h adicional, después de lo cual la mayoría del disolvente se eliminó al vacío. Se enfrió el residuo a t.a. y se añadió una mezcla de hexanos y éter dietílico. Se recogió el sólido por filtrado y se lavó con hexanos dando 136D (0,245 g, 46%) como un sólido blanquecino. CL-EM m/z: 359,4 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
136E:N^{6},N^{6}-Dibencil-8-fluoroisoquinolina-1,6-diamina (Ejemplo de referencia)
124
Se calentó una mezcla de 136D (0,284 g, 0,792 mmol) y oxicloruro fosforoso (3 ml) a 100ºC durante 1 h. Se concentró la mezcla de reacción a presión reducida, y se añadió hielo, seguido por hidróxido de sodio (solución 1 N) hasta que el pH fue básico. Se recogió el sólido resultante por filtración, se lavó con agua, y se secó al vacío dando un producto intermedio de cloruro (0,33 g) como un sólido amarillo. Una parte de este sólido (0,100 g) se trató con una solución saturada de amoniaco en etilenglicol (4 ml) a 130ºC en un tubo de presión de vidrio durante toda la noche. Se concentró la mezcla de reacción a presión reducida y se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (metanol/diclorometano al 5%) dando 136E (55 mg, 64%) como un sólido pardo. CL-EM m/z: 358,4 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
136F:N^{6},N^{6}-Dibencil-N^{1},N^{1}-di-terc-butoxicarbonil-8-fluoroisoquinolina-1,6-diamina (Ejemplo de referencia)
125
Se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (58 mg, 0,266 mmol) a una suspensión de 136E (21 mg, 0,059 mmol) y DMAP (5 mg, 0,041 mmol) en acetonitrilo (2 ml). La mezcla de reacción se agitó durante toda la noche a t.a. y a continuación se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 30% de acetato de etilo en hexanos) proporcionando 136F (23 mg, 70%) como un vidrio transparente. CL-EM m/z: 558,3 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
136G:N^{1},N^{1}-Di-terc-butoxicarbonil-8-fluoroisoquinolina-1,6-diamina (Ejemplo de referencia)
126
Una mezcla de 136F (77 mg, 0,14 mmol), hidróxido de paladio(II) sobre carbón al 20% (94 mg) y etanol (20 ml) se hidrogenó (379,2 kPa) durante 4 h. La mezcla de reacción se filtró y se concentró a presión reducida dando 136G (47 mg, 90%) como un sólido amarillo. CL-EM m/z: 378,3 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 137 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-8-fluoro-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-fenil)-acetamida
127 
\vskip1.000000\baselineskip
137A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilamino-8-fluoroisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxifenil)acético
128
Una mezcla de 136G (40 mg, 0,11 mmol), ácido 3-etoxifenilborónico (25 mg, 0,15 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (15 mg, 0,16 mmol) en 1,2-dicloroetano (1 ml) se calentó a 100ºC durante 10 min en un reactor de microondas. Se purificó el producto en bruto por HPLC de fase inversa dando 137A (22 mg, 36%) como un sólido. CL-EM m/z: 556,2 (M + H)^{+}.
137B. Ejemplo 137: usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 137A (22 mg, 0,033 mmol) con Producto intermedio 9 (22 mg, 0,085 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 137 (12 mg, 52%) como un sólido amarillo. CL-EM m/z: 594,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 138 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-Acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-8-fluoro-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-fenil)-N-metil-acetamida
129
Usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 137A (60 mg, 0,11 mmol) con Producto intermedio 10 (39 mg, 0,14 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 138 (21 mg, 30%) como un sólido amarillo. CL-EM m/z: 608,0 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
139A: Ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilamino-8-fluoroisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-metoxifenil)acético (Ejemplo de referencia)
130
Una mezcla de 136G (106 mg, 0,28 mmol), ácido 3-metoxifenilborónico (52 mg, 0,34 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (31 mg, 0,34 mmol) en 1,2-dicloroetano (2 ml) se calentó a 100ºC durante 10 min en un reactor de microondas. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 20% de metanol en diclorometano) dando 139A (40 mg, 26%) como un sólido. CL-EM m/z: 542,0 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 141 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonilbencil)-2-(1-amino-8-fluoro-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-metoxi-fenil)-N-metil-acetamida
131
Usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 139A (26 mg, 0,048 mmol) con Producto intermedio 10 (17 mg, 0,063 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 141 (8 mg, 28%) como un sólido amarillo. CL-EM m/z: 594,0 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 146 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-fenil)-acetamida
132
Usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló Producto intermedio 16 (54 mg, 0,10 mmol) con Producto intermedio 9 (33 mg, 0,13 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 146 (37 mg, 54%) como un sólido amarillo. CL-EM m/z: 576,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 147 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-metoxi-fenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
133 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 124A (27 mg, 0,051 mmol) con Producto intermedio 9 (17 mg, 0,066 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 147 (23 mg, 66%) como un sólido marrón claro. CL-EM m/z: 562,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 148 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etil-fenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
134 
\vskip1.000000\baselineskip
148A: Ácido 2-(1-(di-terc-butoxicarbonil)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-vinilfenil)acético 
\vskip1.000000\baselineskip
135 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando el procedimiento para preparación de Producto intermedio 16, se hizo reaccionar Producto intermedio 1 (108 mg, 0,300 mmol) con ácido 3-vinilborónico (59 mg, 0,40 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (38 mg, 0,41 mmol) dando Ejemplo 148A (60 mg, 38%) como un sólido. CL-EM m/z: 520,3 (M + H)^{+}.
148B. Ejemplo 148: usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 148A (26 mg, 0,050 mmol) con Producto intermedio 9 (17 mg, 0,066 mmol). Antes de desprotección, se disolvió el material en metanol (5 ml) y se hidrogenó (413,7 kPa) sobre paladio/carbono al 10% (19 mg) para 2,5 h. Se filtró la solución y se concentró a presión reducida. Este material se desprotegió según el procedimiento general dando Ejemplo 148 (23 mg, 68%) como un sólido marrón claro. CL-EM m/z: 560,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 149 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-metil-fenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
136 
\vskip1.000000\baselineskip
149A: Ácido 2-(1-(di-terc-butoxicarbonil)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-metilfenil)acético 
\vskip1.000000\baselineskip
137 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando el procedimiento para preparación de Producto intermedio 16, se hizo reaccionar Producto intermedio 1 (108 mg, 0,300 mmol) con ácido 3-metilborónico (49 mg, 0,36 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (41 mg, 0,44 mmol) dando Ejemplo 149A (65 mg, 43%) como un sólido. CL-EM m/z: 508,3 (M + H)^{+}.
149B. Ejemplo 149: usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 149A (26 mg, 0,051 mmol) con Producto intermedio 9 (17 mg, 0,066 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 149 como un sólido marrón claro. CL-EM m/z: 546,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 155 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-bromo-fenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
138 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 121D (30 mg, 0,052 mmol) con Producto intermedio 9 (17 mg, 0,066 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 155 (6 mg, 16%) como un sólido marrón claro. CL-EM m/z: 610,1, 612,1 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 157 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-clorofenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
139 
\vskip1.000000\baselineskip
157A: Ácido 2-(1-(di-terc-butoxicarbonil)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-clorofenil)acético 
\vskip1.000000\baselineskip
140 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando el procedimiento para preparación de Producto intermedio 16, se hizo reaccionar Producto intermedio 1 (108 mg, 0,300 mmol) con ácido 3-cloroborónico (56 mg, 0,36 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (36 mg, 0,39 mmol) dando 157A (42 mg, 26%) como un sólido. CL-EM m/z: 528,2 (M + H)^{+}.
157B. Ejemplo 157: usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 157A (20 mg, 0,038 mmol) con Producto intermedio 9 (18 mg, 0,070 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 157 (16 mg, 62%) como un sólido marrón claro. CL-EM m/z: 566,1, 568,1 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
159A: Éster metílico del ácido (1-di-terc-butoxicarbonilamino-isoquinolin-6-ilamino)-(3-ciclopropil-fenil)-acético (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
141 
\vskip1.000000\baselineskip
Se desgasificó una mezcla de 121C (100 mg, 0,17 mmol), ácido ciclopropilborónico (30 mg, 0,35 mmol), fosfato de potasio (150 mg), tolueno (2 ml) y agua (0,050 ml) por burbujeo de N_{2} a través de la suspensión. Se añadió triciclohexilfosfina (14 mg) y acetato de paladio (II) (7 mg) y se calentó la reacción durante toda la noche a 90ºC y a continuación se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 20% de metanol en diclorometano) dando una mezcla 2:1 de 159A y 121C (33 mg, 24%) como un vidrio transparente. CL-EM m/z: 548,3 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
159B: Ácido (1-di-terc-butoxicarbonilamino-isoquinolin-6-ilamino-(3-ciclopropil-fenil)-acético (Ejemplo de referencia)
142
Se hidrolizó el éster 159A (63 mg, 0,1 mmol, mezcla 1:1 de 159A y 121C) según el procedimiento para 121D dando una mezcla 1:1 159B y 121D como un sólido. CL-EM m/z: 534 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 160 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-ciclopropilfenil)acetamida
143
Usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 159B (30 mg, 0,05 mmol, 1:1 mezcla de 159B y 121D) con Producto intermedio 9 (24 mg, 0,094 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 160 (5 mg) como un sólido marrón claro. CL-EM m/z: 572,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 166 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonilbencil)-2-(1-amino-7-fluoro-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxifenil)-N-metil-acetamida
144
166A: 3-(Dibencilamino)-4-fluorobenzoato de etilo
145
Se calentó a reflujo una solución de etil-3-amino-4-fluorobenzoato (4,58 g, 25 mmol), bromuro de bencilo (7 ml, 59 mmol), y DIEA (15 ml, 86 mmol) en acetonitrilo (50 ml) durante toda la noche. Se añadió una parte adicional de bromuro de bencilo (0,5 ml) y se continuó el reflujo 8 h. Se concentró la mezcla de reacción a presión reducida y se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 10% de acetato de etilo en hexanos) dando 166A (7,4 g, 81%) como un aceite transparente que solidificó en reposo.
\vskip1.000000\baselineskip
166B: (3-(Dibencilamino)-4-fluorofenil)metanol 
\vskip1.000000\baselineskip
146
Se añadió hidruro de litio-aluminio (2,5 ml, solución 1 M en tetrahidrofurano, 2,5 mmol) gota a gota a una solución de 166A (0,916 g, 2,52 mmol) en tetrahidrofurano (10 ml) a 0ºC. A continuación se calentó la mezcla de reacción a 80ºC durante 1,5 h. Se enfrió la mezcla a 0ºC y se añadió agua (\sim 1 ml) gota a gota, seguido por NaOH 1 N (\sim 1 ml). Se filtró la mezcla, se concentró el filtrado a presión reducida, y se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 30% de acetato de etilo en hexanos) dando 166B (0,9 g, 100%). CL-EM m/z: 322,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
166C: 3-(Dibencilamino)-4-fluorobenzaldehído 
\vskip1.000000\baselineskip
147
Se añadió óxido de manganeso (IV) (2,3 g, 30 mmol) a una solución de 166B (1,4 g, 4,4 mmol) en tetrahidrofurano (35 ml). Después de dos horas, se añadió una parte adicional de óxido de manganeso (IV) (2,3 g). Después de tres horas, se filtró la mezcla de reacción y se concentró a presión reducida. Se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 30% de acetato de etilo en hexanos) dando 166C (0,94 g, 68%) junto con 166B recuperado (0,32 g).
\vskip1.000000\baselineskip
166D: 3-(3-(Dibencilamino)-4-fluorofenil)acrilato de (E)-etilo 
\vskip1.000000\baselineskip
148
Se añadió hidruro de sodio (16 mg, dispersión en aceite al 60%, 0,4 mmol) a una solución de 166C (111 mg, 0,35 mmol) y éster etílico de ácido dietilfosfórico (94 mg, 0,42 mmol) en tetrahidrofurano (2,5 ml). La mezcla de reacción se calentó a 60ºC durante 2 h. A continuación se diluyó la reacción con acetato de etilo y se lavó sucesivamente con solución de hidrogenosulfato de potasio al 5%, bicarbonato de sodio saturado, agua, y salmuera. Se secó la capa orgánica (MgSO_{4}) y se concentró a presión reducida dando 166D (0,122 g, 89%) como un aceite que solidificó en reposo. CL-EM m/z: 390,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
166E: Ácido (E)-3-(3-(dibencilamino)-4-fluorofenil)acrílico 
\vskip1.000000\baselineskip
149
Usando un procedimiento similar al descrito para 136C, se hidrolizó 166D (0,500 g, 1,28 mmol) dando 166E (0,5 g, 100%) como un sólido blanco. CL-EM m/z: 362,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
166F: 6-(Dibencilamino)-7-fluoroisoquinolin-1(2H)-ona 
\vskip1.000000\baselineskip
150 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando un procedimiento similar al descrito para 136D, se convirtió 166E (0,500 g, 1,38 mmol) en una acilazida y a continuación se cicló dando 166F (0,22 g, 56%) como un sólido blanquecino. CL-EM m/z: 359,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
166G:N^{6},N^{6}-dibencil-7-fluoroisoquinolina-1,6-diamina 
\vskip1.000000\baselineskip
151 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando un procedimiento similar al descrito para 136E, se cloró 166F (0,22 g, 0,61 mmol) y a continuación se hizo reaccionar con amoniaco dando 166G como un sólido. CL-EM m/z: 358,3 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
166H:N^{6},N^{6}-Dibencil-N^{1},N^{1}-di-terc-butoxicarbonil-7-fluoroisoquinolina-1,6-diamina 
\vskip1.000000\baselineskip
152 
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de 166G (50 mg, 0,14 mmol), dicarbonato de di-terc-butilo (277 mg, 1,27 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (6 mg, 0,049 mmol) se calentó a 130ºC durante 15 min. Se concentró la mezcla al vacío, y se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice (gradiente del 0 al 50% de acetato de etilo en hexanos) proporcionando 166H (60 mg, 77%) como un sólido. CL-EM m/z: 558,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
166I:N^{1},N^{1}-Di-terc-butoxicarbonil-7-fluoroisoquinolina-1,6-diamina 
\vskip1.000000\baselineskip
153 
\vskip1.000000\baselineskip
Una mezcla de 166H (123 mg, 0,22 mmol), hidróxido de paladio(II) sobre carbón (138 mg, tipo Degussa) y etanol (10 ml) se hidrogenó (379,2 kPa) durante 6 h. Se filtró la mezcla de reacción y se concentró a presión reducida dando 166I (80 mg, 96%) como un sólido blanco. CL-EM m/z: 378,3 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
166J: Ácido (1-di-terc-butoxicarbonilamino-7-fluoro-isoquinolin-6-ilamino)-(3-etoxi-fenil) acético
154
Usando el procedimiento para preparación de Producto intermedio 16, se hizo reaccionar 166I (38 mg, 0,10 mmol) con ácido 3-etoxiborónico (11 mg, 0,30 mmol) y ácido glioxílico monohidratado (22 mg, 0,24 mmol) dando 166J (10 mg, 18%). CL EM m/z: 556,2 (M + H)^{+}.
166K. Ejemplo 166: usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló 166J (10 mg, 0,018 mmol) con Producto intermedio 10 (10 mg, 0,037 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 166 (5 mg, 38%) como un sólido. CL-EM m/z: 608,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 169 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonilbencil)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-eto-xifenil)-N-metil-acetamida
155
Usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección, se acopló Producto intermedio 16 (20 mg, 0,056 mmol) con Producto intermedio 10 (20 mg, 0,074 mmol) y posteriormente se desprotegió dando Ejemplo 169 (8 mg, 20%) como un sólido blanco. CL-EM m/z: 590,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 234 Sal del ácido trifluoroacético de N-(2-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-5-hidroxibencil)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxifenil)acetamida
156
234A: 2-(3,5-Dimetil-1H-pirazol-1-il)-5-metoxibenzoato de metilo
157
A ácido 2-amino-5-metoxibenzoico (1,00 g, 5,99 mmol) en HCl conc. (12 ml) a 0ºC se añadió nitrito de sodio (496 mg, 7,19 mmol) en agua fría (5 ml), gota a gota. Después de agitar a la misma temperatura durante 30 min, se añadió lentamente cloruro de estaño (II) dihidratado (4,05 g, 18,0 mmol) en HCl conc. frío (6 ml) y se retiró el baño de hielo. Después de agitar durante 45 min, se añadió 2,4-pentadiona (1,23 ml, 12,0 mmol), y después de 30 min adicionales, se añadió acetonitrilo (3 ml). Después de 2 h, se concentró la reacción, se diluyó con cloruro de metileno, y se filtró a través de Celite® lavando con acetato de etilo y cloruro de metileno. Se concentró la solución y se purificó por medio de cromatografía de gel de sílice eluyendo con MeOH/CH_{2}Cl_{2} al 10% proporcionando un sólido pardo [6,6 g, CL-EM: 246,98 (M + H)^{+}]. Se disolvió el sólido en MeOH (50 ml), se enfrió a 0ºC, y se añadió cloruro de tionilo (1,31 ml). Después de agitar durante toda la noche con calentamiento a t.a., se calentó la reacción a reflujo durante todo el día y toda la noche. La reacción estaba casi completa, y se añadió cloruro de tionilo adicional (0,5 ml) y se continuó el reflujo durante toda la noche. Después de enfriar a t.a., se concentró la reacción y se purificó por medio de cromatografía de gel de sílice eluyendo con acetato de etilo al 100%. El aceite pardo resultante se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua, bicarbonato de sodio acuoso saturado (3x), agua y salmuera (2x). Se secó la capa orgánica (MgSO_{4}), se filtró y se concentró para proporcionar 234A (0,89 g) como un aceite pardo. CL-EM: 261,08 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
234B: (2-(3,5-Dimetil-1H-pirazol-1-il)-5-metoxifenil)metanol
158
A 234A (450 mg, 1,73 mmol) en THF (17 ml) a 0ºC se le añadió LAH 1 M en THF (3,8 ml, 3,80 mmol). Después de aproximadamente 5 min, la reacción se inactivó lentamente con agua (0,14 ml) en THF (1 ml), a continuación se agitó durante 5 min. Se añadió NaOH al 15% (0,4 ml), a continuación después de 5 min se añadió agua (0,4 ml) en THF (1 ml). Se agitó la mezcla durante 5 min, a continuación se filtró a través de Celite®, lavando con THF y acetato de etilo. Concentrando se proporcionó 234B (393 mg) como un sólido amarillo. CL-EM: 233,05 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
234C: 1-(2-(Azidometil)4-metoxifenil)-3,5-dimetil-1H-pirazol
159
A 234B (393 mg, 1,70 mmol) en tolueno (5 ml) a 0ºC se añadió DPPA (0,44 ml, 2,04 mmol) seguido por DBU (0,28 ml, 1,87 mmol). Se retiró el baño de hielo y se agitó la reacción durante toda la noche. A continuación se diluyó la reacción con agua y acetato de etilo, y se separaron las capas. Se lavó la capa orgánica con agua y HCl 1 N, a continuación se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró para proporcionar 234C (325 mg) como un aceite amarillo. CL-EM: 258,01 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
234D: (2-(3,5-Dimetil-1H-pirazol-1-il)-5-metoxifenil)metanamina
160
A 234C (325 mg, 1,26 mmol) en THF (13 ml) a 0ºC se añadió LAH 1 M en THF (1,5 ml, 1,50 mmol). Después de 45 min, se inactivó lentamente la reacción con agua (0,2 ml) en THF (1 ml), a continuación se agitó durante 5 min. Se añadió NaOH al 15% (0,3 ml), a continuación después de 5 min se añadió agua (0,3 ml) en THF (1 ml). Se agitó la mezcla durante 5 min y a continuación se filtró a través de Celite®, lavando con THF y acetato de etilo. El concentrado proporcionó 234D (240 mg) como un aceite amarillo. CL-EM: 232,05 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
234E: 3-(Aminometil)-4-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)fenol 
\vskip1.000000\baselineskip
161
A 234D (240 mg, 1,04 mmol) en cloruro de metileno (2,6 ml) a -78ºC se añadió tribromuro de boro 1 M en cloruro de metileno (2,6 ml, 2,6 mmol). Se retiró el baño frío y se agitó la reacción durante 2 h, a continuación se colocó en un congelador durante toda la noche. A continuación se llevó la reacción a t.a., se agitó durante 1,5 h y a continuación se concentró, se diluyó con THF y se filtró para proporcionar un sólido. Se disolvió el sólido en agua y se lavó con éter dietílico (3x). Se basificó la capa acuosa con NaOH 1 N, a continuación se extrajo con éter dietílico/acetato de etilo (3x). Se secó la solución (MgSO_{4}), se filtró y se concentró para proporcionar 234E (80 mg) como un sólido blanco. CL-EM: 218,15 (M + H)^{+}.
234F: Se preparó Ejemplo 234 (5,0 mg) a partir de Producto intermedio 4 (20 mg) y 234E (16 mg) siguiendo el procedimiento general de acoplamiento/desprotección en rendimiento total del 18%. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 2,02 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 3,89-4,07 (m, 2H), 5,06 (s, 1H), 6,04 (s, 1H), 6,70 (dd, J = 18,68, 2,42 Hz, 2H), 6,76 (dd, J = 8,3 5, 2,64 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 7,03 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,35 Hz, 1H), 7,02-7,12 (m, 4H), 7,19 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 7,03 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 9,23 Hz, 1H); CL-EM: 553,14 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 235 Sal del ácido trifluoroacético de N-(2-(3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-5-hidroxibencil)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
162
Se preparó Ejemplo 235 (7,5 mg) a partir de Producto intermedio 2 (20 mg) y 234E (15 mg) siguiendo el procedimiento general de acoplamiento/desprotección en rendimiento total del 27%. CL-EM: 595,21 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 243 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxi-fenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
163
Se preparó Ejemplo 243 (33 mg) a partir de Producto intermedio 2 (135 mg) y Producto intermedio 9 (85 mg) siguiendo el procedimiento general de acoplamiento/desprotección en rendimiento total del 20%. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD \delta ppm 1,07 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 1,19 (d, J = 6,15 Hz, 6H) 1,26 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 2,03 (s, 3H) 3,14 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 3,87 m, 2H) 4,42 (m, 1H) 4,59 (m, 2H) 4,98 (s, 1H) 6,50 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,66 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,85 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 6,94 (m, 2H) 7,07 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,20 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,55 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,65 (m, 2H) 7,96 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,48 (m, 1H). CL-EM: 634,52 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 244 N-(5-Acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetamida
164
Se preparó Ejemplo 244 (10 mg) a partir de Producto intermedio 4 (44 mg) y Producto intermedio 9 (33 mg) siguiendo el procedimiento general de acoplamiento/desprotección en rendimiento total del 18%. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD \delta ppm 1,07 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 3,14 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 3,69 (s, 3H) 3,72 (s, 3H) 4,59 (m, 2H) 5,00 (s, 1H) 6,51 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,66 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,85 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 6,97 (m, 2H) 7,07 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,20 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,51 (dd, J = 8,35, 2,20 Hz, 1H) 7,61 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,67 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,96 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,49 (t, J = 5,93 Hz, 1H). CL-EM: 592,44 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 245 Sal del ácido trifluoroacético de (R)-N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetamida
y
Ejemplo 246 Sal del ácido trifluoroacético de (S)-N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxi-fenil)-acetamida
165
Se disolvió Ejemplo 244 (260 mg) en isopropanol y se separaron los enantiómeros en una columna Chiralpak® AD eluyendo con heptano al 70%, 3MeOH/EtOH 1:1 al 0%, DEA al 0,1% que eluyeron Ejemplo 245 (base libre), seguido por Ejemplo 246 (base libre). Los dos productos se repurificaron por medio de HPLC preparativa (MeOH/agua/TFA) y a continuación se liofilizaron (acetonitrilo/agua) durante toda la noche para proporcionar Ejemplo 245 (22,5 mg) [CL-EM: 592,34 (M + H)^{+}], y Ejemplo 246 (24,8 mg) [CL-EM: 592,31 (M + H)^{+}].
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 247 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxifenil)-N-Me-acetamida
166
Se preparó Ejemplo 247 (3,1 mg) a partir de Producto intermedio 4 (16 mg) y Producto intermedio 10 (11 mg) siguiendo el procedimiento general de acoplamiento/desprotección en rendimiento total del 16%. CL-EM: 606,30 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 248 Sal del ácido trifluoroacético de N-(2-(etilsulfonil)-5-N-aminosulfonilaminobencil)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acetamida
167
248A: 5-Amino-2-(etitsulfonil)benzonitrilo
168
A Producto intermedio 9B (200 mg, 0,833 mmol) en ácido acético (3,0 ml) se añadió Fe (233 mg, 4,16 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 100ºC durante 1 h. Después de enfriar a t.a., se extrajo el producto con acetato de etilo, y se lavó la capa orgánica con agua, a continuación se concentró y se sometió a azeotropismo con tolueno para proporcionar 248A (163 mg, 93%) como un sólido tostado. CL-EM: 209,2 (M-H)-.
\vskip1.000000\baselineskip
248B: Éster fenilmetílico del ácido [(3-ciano-4-etilsulfonilfenilamino)sulfonil]carbámico
169
A 248A (163 mg, 0,776 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (7 ml) se añadió clorosulfonilcarbamato de bencilo (25A) (232 mg, 0,932 mmol). Después de agitar a t.a. durante 3 h, se concentró la reacción, absorbido en acetato de etilo, y se lavó con acuoso saturado NaHCO_{3} y salmuera, a continuación se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró para proporcionar 248B (275 mg, 84%) como una película amarilla. CL-EM: 422,1 (M-H)-.
\vskip1.000000\baselineskip
248C: Clorhidrato de 2-etilsulfonil-5-(aminosulfonil)aminobencilamina 
\vskip1.000000\baselineskip
170 
\vskip1.000000\baselineskip
A 248B (275 mg, 0,650 mmol) en MeOH (5 ml), se añadió Pd/C al 10% (20,0 mg). Se hidrogenó la mezcla a 344,7 kPa durante 48 h. Se concentró la reacción para proporcionar un sólido blanquecino (219 mg) que contenía una mezcla de 2-etilsulfonil-5-aminobencilamina [CL-EM: 215,27 (M + H)^{+}] y 248C, 2-etilsulfonil-5-(aminosulfonil)aminobencilamina [CL-EM: 294,24 (M + H)^{+}].
248D: Ejemplo 248: una mezcla de Producto intermedio 2 (44 mg, 0,062 mmol), EDC (24,0 mg, 0,13 mmol), HOAT (8,4 mg, 0,062 mmol), DIPEA (54 PL, 0,31 mmol) y una mezcla de 2-etilsulfonil-5-aminobencilamina y 248C, 2-etilsulfonil-5-(aminosulfonil)aminobencilamina (61 mg) en CH_{2}Cl_{2} (1 ml) y DMF (100 PL) se agitaron durante toda la noche. Se concentró la reacción y se purificó por medio de HPLC preparativa (MeOH/H_{2}O/TFA) para proporcionar dos productos: el primero para fluir fue sal del ácido trifluoroacético de N-(2-(etilsulfonil)-5-N-aminosulfonilaminobencil)-2-(1-bis(terc-butil)carbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acetamida [13 mg, CL-EM: 871,65 (M + H)+] seguido por sal del ácido trifluoroacético de N-(2-(etilsulfonil)-5-N-aminobencil)-2-(1-bis(terc-butil)carbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acetamida [40 mg, CL-EM: 792,65 (M + H)+]. Se disolvió el producto secundario en acetato de etilo (0,50 ml) y se trató con HCl 4 M en dioxano (0,50 ml) y se agitó a t.a. durante toda la noche. Se concentró la reacción y se purificó por medio de HPLC preparativa (MeOH/H_{2}O/TFA) para proporcionar Ejemplo 248 (1,2 mg) como una película transparente. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{2}OD) \delta ppm 1,06 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 1,19 (d, J = 6,15 Hz, 6H) 1,26 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 3,14 (q, J = 7,47 Hz, 2H) 3,86 (m, 2H) 4,42 (m, 1H) 4,59 (m, 2H) 4,98 (s, 1H) 6,50 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,66 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,85 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 6,94 (m, 2H) 7,07 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,20 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,55 (dd, J = 8,79,2,20 Hz, 1H) 7,65 (m, 2H) 7,96 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,48 (t, J = 6,15 Hz, 1H). CL-EM: 671,48 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 249 N-(5-Acetilamino-2-morfolino-bencil)-2-(1-amino-isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
171 
\vskip1.000000\baselineskip
249A: 2-Morfolino-5-nitrobenzonitrilo 
\vskip1.000000\baselineskip
172
A 2-fluoro-5-nitrobenzonitrilo (1,00 g, 6,02 mmol) en acetonitrilo (60 ml) se añadió morfolina (525 \mul, 6,02 mmol) y se agitó la reacción a t.a. durante 1,5 h, a continuación se calentó a 60ºC. Como la reacción avanzaba lentamente, se añadió morfolina adicional (100 \mul) y se calentó la reacción a 80ºC durante 30 min. Se enfrió la reacción a t.a., se concentró, se diluyó con MeOH y se filtró para proporcionar un sólido amarillo. Se concentró el filtrado, se diluyó con MeOH, se filtró y se combinó con el primer lote para proporcionar 249A (1,35 g total) como un sólido amarillo.
\vskip1.000000\baselineskip
249B:N-(3-Ciano-4-morfolinofenil)acetamida
173
A 249A (900 mg, 3,86 mmol) en anhídrido acético (9 ml) se añadió hierro (1,08 g, 19,3 mmol) y se calentó la reacción a 100ºC durante 2 h. Se enfrió la mezcla a t.a. y se vertió sobre hielo. Cuando se fundió el hielo, se extrajo el producto con acetato de etilo (2x). Se separaron las capas y se lavó la capa orgánica con agua (3x), NaHCO_{3} acuoso saturado (3x) y salmuera (1x), a continuación se secó (MgSO_{4}), se filtró y se concentró para proporcionar un sólido amarillo (200 mg) que contenía una mezcla 2:1 de 249B y el subproducto diacilado.
\vskip1.000000\baselineskip
249C: Sal del ácido trifluoroacético de N-(3-(aminometil)-4-morfolinofenil)acetamida
174
Se disolvió 249B (200 mg, 0,816 mmol) en MeOH (4 ml) y se hidrogenó a 413,7 kPa en presencia de Ni Raney (cat) durante 2 d. Se filtró la mezcla a través de Celite® y se concentró, y el aceite resultante se purificó por medio de cromatografía preparativa eluyendo con MeOH/agua/TFA para proporcionar 249C (108 mg) como un aceite transparente. CL-EM: 250,10 (M + H)^{+}.
249D: Se preparó Ejemplo 249 (5,2 mg) a partir de Producto intermedio 2 (15 mg) y 249C (20 mg) siguiendo el procedimiento general de acoplamiento/desprotección en rendimiento total del 25%. CL-EM: 627,28 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
258A: 5-Bromo-6-amino-1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolina (Ejemplo de referencia)
175
A Producto intermedio 1 (250 mg, 0,696 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (7 ml), se añadió NBS (124 mg, 0,697 mmol). Después de agitar durante 10 min, se concentró la reacción y se purificó por medio de cromatografía de gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexano al 30-50% para proporcionar 258A (350 mg) como un sólido amarillo claro. CL-EM: 438 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
258B: Sal del ácido trifluoroacético de 5-metil-6-amino-1-di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolina (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
176
Se colocaron 258A (150 mg, 0,343 mmol) y PdCl_{2} (PPH_{3})_{2} en un tubo y se desgasificaron los sólidos con nitrógeno durante 5 min. Se añadieron DMF (1,5 ml) y tetrametiltina (141 ml, 1,02 mmol) y se desgasificó la mezcla con nitrógeno durante 2 min. Se selló el tubo y se calentó la mezcla de reacción a 110ºC durante toda la noche y a continuación se enfrió a t.a. Se cargó la mezcla en una columna de gel de sílice y se eluyó con hexanos al 100% seguido por acetato de etilo/hexano al 30-50%. Se purificó el producto aislado por medio de cromatografía preparativa (MeOH/agua/TFA) para proporcionar 258B (91 mg, 57%) como una película amarilla. CL-EM: 374,30 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
258C: Sal del ácido trifluoroacético de 2-(1-di-terc-butoxicarbonilamino-5-metilisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acetato de bencilo (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
177
A una mezcla de éster bencílico del ácido cloro-(3-etoxi-4-isopropoxi-fenil)-acético (documento
WO-2004/072.101) (131 mg, 0,361 mmol) y 258B (91 mg, 0,244 mmol) en acetonitrilo (2,4 ml) en un tubo, se añadieron DIPEA (167 \mul, 0,959 mmol) y TBAB (15 mg, 0,047 mmol). Se selló el tubo y se calentó la mezcla de reacción a 80ºC durante toda la noche. Después de enfriar a t.a., se concentró la reacción y se purificó por medio de cromatografía preparativa (MeOH/agua/TFA) para proporcionar 2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)-2-hidroxiacetato de bencilo (50 mg) seguido por 258C (43 mg, 26%) como un aceite amarillo. CLEM: 700,64 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
258D: Sal del ácido trifluoroacético del ácido 2-(1-di-terc-butoxicarbonilamino-5-metilisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)acético (Ejemplo de referencia) 
\vskip1.000000\baselineskip
178
Se hidrogenó 258C (43 mg, 0,062 mmol) en metanol (1 ml) con un globo de hidrógeno en presencia de Pd/C al 10% (10 mg) durante 1,5 h. Se filtró a través de Celite® y la concentración dio el compuesto 258D como un aceite amarillo (32 mg, 73%). CL-EM: 610,57 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 260 Sal del ácido trifluoroacético de N-(5-acetilamino-2-etanosulfonil-bencil)-2-(1-amino-5-metilisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-etoxi-4-isopropoxifenil)-N-Me-acetamida 
\vskip1.000000\baselineskip
179 
\vskip1.000000\baselineskip
Se preparó Ejemplo 260 (6 mg) a partir de 258D (20 mg) y Producto intermedio 10 (18 mg) siguiendo el procedimiento general de acoplamiento/desprotección en rendimiento total del 23%. CL-EM: 662,40 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 276 Sal del ácido trifluoroacético de carbamato de 3-((2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluorofenil)acetamido)metil)-4-(etilsulfonil)fenilo 
\vskip1.000000\baselineskip
180 
\vskip1.000000\baselineskip
276A: 5-Amino-2-(etilsulfonil)benzonitrilo 
\vskip1.000000\baselineskip
181 
\vskip1.000000\baselineskip
Se añadió polvo de hierro (1,67 g, 29,9 mmol) en porciones durante 1,5 h a una suspensión de Producto intermedio 9B (0,95 g, 4,0 mmol) en una mezcla de ácido acético (3 ml), etanol (26 ml) y agua (5 ml) a 115ºC. Se enfrió la reacción a t.a., se filtró a través de papel de filtro de fibra de vidrio, se neutralizó con bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con acetato de etilo (4x). Se lavaron los productos orgánicos combinados con salmuera, se secó y se concentró al vacío. Se purificó el residuo por cromatografía de gel de sílice dando 276A (0,312 g, 38%), junto con material de partida recuperado (0,737 g). RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,31 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 3,31 (q, J = 7,18 Hz, 2H) 4,47 (s, 2H) 6,89 (dd, J = 8,79, 2,64 Hz, 1H) 7,04 (d, J = 2,64 Hz, 1H) 7,86 (d, J = 8,35 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
276B: 3-(aminometil)-4-(etilsufonil)fenilcarbamato de etilo
182
Se añadió cloroformiato de etilo (0,077 ml, 0,8 mmol) gota a gota a una solución de 276A (84 mg, 0,4 mmol) en piridina (0,5 ml) a 0ºC. Se calentó la mezcla de reacción a t.a., se agitó durante 30 min, y a continuación se almacenó durante toda la noche en un frigorífico. Se eliminó el disolvente al vacío y se trituró el residuo con agua. Se hidrogenó este sólido (379,2 kPa) sobre níquel Raney en MeOH durante toda la noche. Se filtró la solución y se concentró al vacío dando 276B (36 mg, 31%). RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 1,25 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 1,32 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 3,24-3,33 (m, 2H) 4,23 (q, J = 7,03 Hz, 2H) 4,33 (s, 2H) 7,72 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,85 (s, 1H) 7,92 (d, J = 8,79 Hz, 1H).
276C: Se preparó Ejemplo 276 (38 mg, 52%, sólido amarillo) a partir de 276B (35 mg, 0,13 mmol) y 73A (56 mg, 0,1 mmol) usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 1,18 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 1,32 (t, J = 6,81 Hz, 3H) 3,19-3,30 (m, 2H) 3,74 (s, 3H) 3,79-4,02 (m, 2H) 4,58-4,81 (m, 2H) 5,46 (s, 1H) 6,66 (s, 1H) 6,78 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,83-6,96 (m, 2H) 7,09 (t, J = 9,01 Hz, 1H) 7,18 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,31 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,51 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,65 (s, 1H) 7,75 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 8,08 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,73 (t, J = 5,93 Hz, 1H) 9,64 (s, 1H); CL-EM: 610,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 277 Sal del ácido trifluoroacético de 3-((2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluorofenil)acetamido)metil)-4-(etilsulfonil)fenilcarbamato de isopropilo
183 
\vskip1.000000\baselineskip
277A: 3-(Aminometil)4-(etilsulfonil)fenilcarbamato de isopropilo 
\vskip1.000000\baselineskip
184 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando un procedimiento análogo al usado para preparar 276B, se hizo reaccionar cloroformiato de isopropilo (0,8 ml, 0,8 mmol, solución en tolueno 1 M) con 276A (84 mg, 0,4 mmol) seguido por hidrogenación dando 277A (20 mg, 17%). CL-EM: 301,3 (M + H)^{+}.
277B: Se preparó Ejemplo 277 (21 mg, 55%, sólido amarillo) a partir de 277A (20 mg, 0,067 mmol) y 73A (28 mg, 0,050 mmol) usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 1,17 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 1,27-1,36 (m, 9H) 3,25 (q, J = 7,32 Hz, 2H) 3,77-3,95 (m, 2H) 4,64-4,78 (m, 1H) 4,91-4,99 (m, 2H) 5,47 (s, 1H) 6,67 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,79 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 6,84-6,92 (m, 2H) 7,08 (t, J = 9,45 Hz, 1H) 7,18 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,31 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,51 (dd, J = 8,35, 2,20 Hz, 1H) 7,68 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,74 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,08 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,67 (t, J = 6,15 Hz, 1H) 9,59 (s, 1H); CL-EM:
638,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 278 Sal del ácido trifluoroacético de 3-((2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluorofenil)acetamido)metil)-4-(etilsulfonil)fenilcarbamato de isobutilo 
\vskip1.000000\baselineskip
185 
\vskip1.000000\baselineskip
278A: 3-(Aminometil)-4-(etilsulfonil)fenilcarbamato de isobutilo 
\vskip1.000000\baselineskip
186 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando un procedimiento análogo al usado para preparar 276B, se hizo reaccionar cloroformiato de isobutilo (0,104 ml, 0,8 mmol) con 276A (84 mg, 0,4 mmol) seguido por hidrogenación dando 278A (80 mg, 64%). CL-EM: 315,3 (M + H)^{+}.
278B: Se preparó Ejemplo 278 (21 mg, 55%, sólido amarillo) a partir de 278A (20 mg, 0,067 mmol) y 73A (28 mg, 0,050 mmol) usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 0,95-0,98 (m, 3H) 0,99 (s, 3H) 1,17 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 1,30 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 1,97 (dq, J = 13,40, 6,59 Hz, 1H) 3,26 (q, J = 7,18 Hz, 2H) 3,78-3,96 (m, 4H) 4,64-4,79 (m, 2H) 5,43-5,50 (m, 1H) 6,67 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,77 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,82-6,95 (m, 2H) 7,08 (t, J = 9,23 Hz, 1H) 7,16 (dd, J = 9,01, 2,42 Hz, 1H) 7,30 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,52 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,69 (s, 1H) 7,74 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,06 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,70 (t, J = 5,93 Hz, 1H) 9,65 (s, 1H); CL-EM: 638,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 279 Sal del ácido trifluoroacético de N-(3-((2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(5-etoxi-2-fluorofenil)acetamido)metil)-4-(etilsulfonil)fenil)pentanamida 
\vskip1.000000\baselineskip
187 
\vskip1.000000\baselineskip
279A:N-(3-(Aminometil)-4-(etilsulfonil)fenil)pentanamida 
\vskip1.000000\baselineskip
188 
\vskip1.000000\baselineskip
Usando un procedimiento análogo al usado para preparar 276B, se hizo reaccionar cloruro de butirilo (0,083 ml, 0,8 mmol) con 276A (84 mg, 0,4 mmol) seguido por hidrogenación dando 279A (36 mg, 32%). CL-EM: 285,3 (M + H)^{+}.
279B: Se preparó Ejemplo 279 (21 mg, 39%, sólido amarillo) a partir de 279A (36 mg, 0,13 mmol) y 73A (56 mg, 0,10 mmol) usando el procedimiento general de acoplamiento-desprotección. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 0,99 (t, J = 7,47 Hz, 3H) 1,17 (t, J = 7,25 Hz, 3H) 1,30 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 1,71 (tq, J = 7,47 Hz, 1H) 2,36 (t, J = 7,47 Hz, 2H) 3,26 (q, J = 7,32 Hz, 2H) 3,35 (s, 1H) 3,81-3,94 (m, 2H) 4,69-4,75 (m, J = 5,71 Hz, 2H) 5,47 (s, 1H) 6,67 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 6,78 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 6,85-6,93 (m, 2H) 7,08 (t, J = 9,23 Hz, 1H) 7,17 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,31 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,67 (dd, J = 8,57, 1,98 Hz, 1H) 7,78 (d, J = 8. 10 Hz, 1H) 7,85 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 8,07 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,68 (t, J = 5,93 Hz, 1H); CL-EM: 622,2 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 282 Sal del ácido trifluoracético del ácido (R)-3-((R)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(5-cloro-2-fluorofenil)acetamido)-3-(2-(isopropilsulfonil)-5-(metoxicarbonilamino)fenil)propanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
189
282A: 2-(2-Fluoro-5-clorofenil)-2-hidroxiacetonitrilo 
\vskip1.000000\baselineskip
190 
\vskip1.000000\baselineskip
A 2-fluoro-5-cloro-benzaldehído (12,7 g, 17 mmol) en acetato de etilo (50 ml) se añadió una solución de KCN (3,3 g) y NaHSO_{3} (5,3 g) disuelta en H_{2}O (25 ml). Se dejó en agitación durante toda la noche antes de extraer con acetato de etilo (3 x 50 ml). Se secaron los extractos orgánicos combinados y se concentró. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna de gel de sílice dando 282A (3,1 g, rendimiento 99%) como un aceite.
\vskip1.000000\baselineskip
282B: 2-(5-Cloro-2-fluorofenil)-2-hidroxiacetato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
191 
\vskip1.000000\baselineskip
A 282A (640 mg, 3,48 mmol) en éter dietílico anhidro (15 ml) a 0ºC se añadió MeOH (1,4 ml) y HCl 4,0 N en dioxano (3,5 ml). Se agitó la mezcla a 0ºC durante 30 min y a continuación a t.a. durante 4 h. Se eliminó el disolvente dando sal de HCl de 2-(5-cloro-2-fluorofenil)-2-hidroxiacetimidato de metilo. A esta sal en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) se añadió H_{2}O (10 ml). Se agitó la mezcla a t.a. durante 30 min, a continuación se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 50 ml). Se secaron los extractos orgánicos combinados y se concentró. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna sobre gel de sílice dando 282B (610 mg, rendimiento 80%) como un aceite viscoso. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 3,55 (d, J = 4,83 Hz, 1H) 3,80 (s, 3H) 5,38 (d, J = 4,83 Hz, 1H) 7,03 (t, J = 9,23 Hz, 1H) 7,27-7,31 (m, 1H) 7,39 (dd, J = 6,15, 2,64 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
282C: 2-(1-(Bis(terc-butoxicarbonil)amino)isoquinolin-6-ilamino)-2-(5-cloro-2-fluorofenil)acetato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
192 
\vskip1.000000\baselineskip
A 282B (320 mg, 1,47 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5,0 ml) a 0ºC se añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (0,27 ml) y 2,6-lutidina (0,26 ml). Se agitó la mezcla durante 15 min antes de añadir Producto intermedio 1 (475 mg, 1,32 mmol) y 2,6-lutidina (0-51 ml) en CH_{2}Cl_{2} (2,0 ml). Se dejó la reacción en agitación desde 0ºC a t.a. durante 3,0 h. Se diluyó con acetato de etilo, se lavó con HCl 0,5 N (3 x 20 ml). Se secó el extracto orgánico y se concentró. Una purificación en cromatografía de columna de gel de sílice produjo 282C (447 mg, rendimiento 60%). RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,16 (s, 18H) 3,67 (s, 3H) 5,58 (s, 1H) 6,63 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,10 (t, J = 9,23 Hz, 1H) 7,19 (dd, J = 9,01, 2,42 Hz, 1H) 7,22-7,30 (m, 1H) 7,37 (d, J = 5,71 Hz, 1H) 7,44 (d, J = 2,64 Hz, 1H) 7,56 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,95 (d, J = 5,71 Hz, 1H); CL-EM 560 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
282D: Ácido 2-(1-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)isoquinolin-6-ilamino-2-(5-cloro-2-fluorofenil)acético
193
Se hidrolizó 282C (440 mg, 0,79 mmol)) con NaOH (1,0 N, 0,95 ml, 0,95 mmol) en THF (4 ml) y MeOH (0,5 ml) a t.a. durante 2 h. Después de acidificación con KHSO_{4} al 5%, se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 ml). Se secó el extracto orgánico y se concentró dando un producto sólido 282D (400 mg, rendimiento 93%). RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,29 (s, 18H) 5,62 (s, 1H) 6,77 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,22 (t, J = 9,23 Hz, 1H) 7,33-7,40 (m, 2H) 7,54-7,59 (m, 2H) 7,73 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,07 (d, J = 6,15 Hz, 1H); CL-EM 546 (M + H)^{+}.
\vskip1.000000\baselineskip
282E: (R)-3-(terc-Butoxicarbonilamino)-3-(2-(isopropilsulfonil)-5-(metoxicarbonilamino)fenil) propanoato de metilo
194
A 98E (1,5 g, 3,4 mmol) en EtOH (15 ml) a t.a. se añadió Oxone® (4,2 g, 6,8 mmol) en H_{2}O (40 ml). Se agitó la mezcla a t.a. durante toda la noche. Se eliminó EtOH al vacío. Se suspendió el residuo en EtOAc y se lavó con agua, Na_{2}S_{2}O_{3} y salmuera. Se secó la capa orgánica sobre Na_{2}SO_{4}. Después de evaporación del disolvente, se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con gradiente EtOAc en hexanos dando 282E como un sólido blanco (1,5 g, rendimiento 93%). RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,14 (d, J = 7,03 Hz, 3H) 1,18 (d, J = 7,05 Hz, 3H) 1,36 (s, 9H) 1,47 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 2,83-2,90 (m, 1H) 2,93-3,00 (m, 1H) 3,81 (s, 3H) 3,86 (s, 1H) 4,11 (m, 2H) 5,57-5,65 (m, 1H) 6,18 (s, 1H) 6,96 (s, 1H) 7,51 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,62 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,90 (d, J = 8,79 Hz, 1H); CL-EM 473 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
282F: Clorhidrato de (R)-3-amino-3-(2-(isopropilsulfonil)-5-(metoxicarbonilamino)fenil)propanoato de metilo
195
A 282E (1,35 g, 2,86 mmol) en EtOAc (10 ml) se añadió HCl 4,0 N en dioxano (15 ml, 60 mmol). Se agitó la mezcla a t.a. durante 3,0 h. se eliminó el disolvente al vacío dando 282F como un sólido blanco (1,1 g, rendimiento 99%). RMN ^{1}H (500 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,11-1,1 (m, 6H) 1,31 (d, J = 7,15 Hz, 3H) 3,04-3,11 (m, 1H) 3,15-3,20 (m, 1H) 3,50 (ddd, J = 13,61, 6,74, 6,60 Hz, 1H) 3,70 (s, 3H) 4,05 (q, J = 7,15 Hz, 2H) 5,44 (t, J = 7,42 Hz, 1H) 7,51 (d, J = 1,0,45 Hz, 1H) 7,85 (d, J = 8,80 Hz, 1H) 7,99 (s, 1H), CL-EM 373 (M + H).
282G: Se preparó Ejemplo 282 según el acoplamiento-desprotección general usando 282D y 282F seguido por hidrólisis del éster. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,13 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 1,43 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 2,71-2,93 (m, 2H) 3,66 (s, 3H) 4,13-4,30 (m, 1H) 5,39 (s, 1H) 5,85-6,00 (m, 1H) 6,64 (d,J = 2,20 Hz, 1H) 6,88 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,16 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,18-7,28 (m, 2H) 7,30-7,35 (m, 2H) 7,37-7,44 (m, 1H) 7,54 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,76 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,11 (d, J = 8,79 Hz, 1H); CL-EM 786 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 283 Sal del ácido trifluoroacético del ácido (R)-3-((R)-2-(1-Aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-(difluorometoxi)fenil)acetamido)-3-(2-(isopropilsulfonil)-5-(metoxicarbonilamino)fenil)propanoico 
\vskip1.000000\baselineskip
196 
\vskip1.000000\baselineskip
283A: 2-(3-Difluorometoxifenil)-2-hidroxiacetonitrilo 
\vskip1.000000\baselineskip
197 
\vskip1.000000\baselineskip
A 3-difluorometoxibenzaldehído (1,77 g, 10 mmol) en acetato de etilo (25 ml) se añadió una solución de KCN (2,0 g) y NaHSO_{3} (3,2 g) disuelta en H_{2}O (25 ml). Se dejó en agitación durante toda la noche antes de extraer con acetato de etilo (2 x 50 ml). Se secaron los extractos orgánicos combinados y se concentró. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna sobre gel de sílice dando 283A (1,85 g, rendimiento 92%) como un aceite. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 5,66 (s, 1H) 6,86 (t, J = 73,82 Hz, 1H) 7,18 (dd, J = 7,91,2,20 Hz, 1H) 7,31 (s, 1H) 7,36-7,42 (m, 1H) 7,47 (t, J = 7,91 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
283B: 2-(3-Difluorometoxifenil)-2-hidroxiacetato de metilo 
\vskip1.000000\baselineskip
198 
\vskip1.000000\baselineskip
A 283A (1,83 g, 9,2 mmol) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (30 ml) a 0ºC se añadió MeOH (2,24 ml) y HCl 4,0 N en dioxano (9,2 ml). Se agitó la mezcla a 0ºC durante 30 min y a continuación a t.a. durante 4,0 h. Se eliminó el disolvente dando sal de HCl de 2-(3-(difluorometoxi)-fenil)-2-hidroxiacetimidato de metilo. A esta sal en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) se añadió H_{2}O (10 ml). Se agitó la mezcla a t.a. durante 30 min, a continuación se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (2 x 50 ml). Se secaron los extractos orgánicos combinados y se concentró. Se purificó el producto en bruto por cromatografía de columna de gel de sílice dando 283B (700 mg, rendimiento 33%) como un aceite viscoso. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 3,70 (s, 3H) 5,22 (s, 1H) 6,82 (t, J = 74,04 Hz, 1H) 7,09 (dd, J = 7,91, 2,20 Hz, 1H) 7,23 (s, 1H) 7,28-7,34 (m, 1H) 7,38 (t, J = 7,91 Hz, 1H).
\vskip1.000000\baselineskip
283C: 2-(1-(bis(terc-Butoxicarbonil)amino)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-(difluorometoxi)fenil)acetato de metilo
199
A 283B (650 mg, 2,8 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (10 ml) a 0ºC se añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (0,52 ml) y 2,6-lutidina (0,49 ml). Se agitó la mezcla durante 15 min antes de añadir Producto intermedio 1 (1,0 g, 2,8 mmol) y 2,6-lutidina (0,97 ml) en CH_{2}Cl_{2} (5,0 ml). Se dejó la reacción en agitación desde 0ºC a t.a. durante 3,0 h. Se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con HCl 0,5 N (3 x 20 ml). Se secó el extracto orgánico y se concentró. Una purificación de cromatografía de columna sobre gel de sílice dio 283C (680 mg, rendimiento 42%). RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,27 (s, 18H) 3,76 (s, 3H) 5,44 (s, 1H) 6,56-7,03 (m, 2H) 7,10-7,14 (m, 1H) 7,31 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,35 (s, 1H) 7,41-7,47 (m, 3H) 7,65 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,04 (d, J = 6,15 Hz, 1H); CL-EM 574 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
283D: Ácido 2-(1-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-(difluorometoxi)fenil)acético
200
Se hidrolizó 283C (680 mg, 1,2 mmol) con NaOH (1,0 N, 1,42 ml, 1,42 mmol) en THF (6 ml) y MeOH (0,5 ml) a t.a. durante 3 h. Después de acidificación con KHSO_{4} al 5% se extrajo con acetato de etilo (2x30 ml). Se secó el extracto orgánico y se concentró dando un producto sólido 283D (650 mg, rendimiento 96%). RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) (ppm 1,26 (s, 18H) 4,99 (s, 1H) 6,58 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,79 (t, J = 74,26 Hz, 1H) 7,01 (dd, J = 8,13, 2,42 Hz, 1H) 7,25 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,31-7,40 (m, 3H) 7,47 (d, J = 7,91 Hz, 1H) 7,61 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,99 (d, J = 5,71 Hz, 1H). CL-EM 560 (M + H).
283E: Se preparó Ejemplo 283 según el acoplamiento-desprotección general usando 282F y 283D seguido por hidrólisis del éster. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,10 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 1,42 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 2,67-2,93 (m, 2H) 3,69 (s, 3H) 4,12-4,31 (m, 1H) 5,09 (s, 1H) 5,83-5,98 (m, 1H) 6,58 (s, 1H) 6,63-7,02 (m, 2H) 7,10-7,15 (m, 1H) 7,15-7,23 (m, 2H) 7,28 (s, 1H) 7,31 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,35-7,43 (m, 2H) 7,45 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,72 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,09 (d, J = 9,23 Hz, 1H); CL-EM 686 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 284 Ácido (R)-3-((R)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3-clorofenil)acetamido)-3-(2-(isopropilsulfonil)-5-(metoxi-carbonilamino)fenil)propanoico
201
284A: Ácido 2-(1-(bis(terc-butoxicarbonil)amino)isoquinolin-6-ilamino)-2-(3-clorofenil)acético
202
Se preparó 284A en procedimientos similares al de 282D siguiendo las etapas 282A a 282D partiendo de 3-clorobenzaldehído. RMN ^{1}H (400 MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 1,27 (s, 18H) 5,29 (s, 1H) 6,67 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 7,27-7,40 (m, 3H) 7,44 (d, J = 6,15 Hz, 1H) 7,53 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 7,61 (s, 1H) 7,65 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 8,03 (d, J = 5,71 Hz, 1H); CL-EM 530 (M+1).
284B: Se preparó Ejemplo 284 según el acoplamiento-desprotección general usando 282F y 284A seguido por hidrólisis del éster. RMN ^{1}H (400, MHz, Metanol-d_{4}) \delta ppm 0,98 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 1,30 (d, J = 7,03 Hz, 3H) 2,58-2,80 (m, 2H) 3,58 (s, 3H) 4,03-4,15 (m, 1H) 4,99 (s, 1H) 5,75-5,83 (m, 1H) 6,47 (s, 1H) 6,71 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,04 (dd, J = 9,23, 2,20 Hz, 1H) 7,10 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,19 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,21-7,25 (m, 2H) 7,31-7,38 (m, 3H) 7,61 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,96 (d, J = 9,23 Hz, 1H); CL-EM 654 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 290 Sal del ácido trifluoroacético de 2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-etoxifenil)-N-(5-(3,3-dimetilureido)-2-(isopropilsulfonil)bencil)acetamida
203 
\vskip1.000000\baselineskip
290A: 5-Amino-2-(isopropilsulfonil)benzonitrilo
204
Usando los procedimientos análogos a los descritos para preparación de Producto intermedio 9A, Producto intermedio 9B, y 276A, 2-fluoro-5-nitrobenzonitrilo y isopropanotiol se convirtieron en 290A.
\vskip1.000000\baselineskip
290B: 3-(3-Ciano-4-(isopropilsulfonil)fenil)-1,1-dimetilurea
205
Se disolvió 290A (25 mg, 0,11 mmol) en 2 ml piridina. Se añadió cloruro de dimetilcarbamilo (0,025 ml, 0,3 mmol) se añadió a t.a., y se agitó la solución a t.a. durante toda la noche. Se concentró y se purificó por ISCO (0-80% EtOAc/Hex) para proporcionar 290B (12,8 mg) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,26 (d, J = 7,03. Hz, 6H) 3,01 (s, 6H) 3,33-3,54 (m, 1H) 7,30 (s, 1H) 7,67-7,80 (m, 1H) 7,80-7,91 (m, 1H) 8,00 (d, J = 2,20 Hz, 1H). CL-EM 296,37 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
290C: 3-(3-(Aminometil)-4-(isopropilsulfonil)fenil)-1,1-dimetilurea
206
A 290B (13 mg, 0,044 mmol) en 2 ml THF se añadió Ni Raney (aproximadamente 5 mg), y se hidrogenó el conjunto a 413,7 kPa durante 4 h. Se filtró y se concentró la reacción para proporcionar 290C (13 mg, 100%) como un sólido incoloro. CLEM 300,38 (M + H).
290D: Se preparó Ejemplo 290 según el acoplamiento-desprotección general usando Producto intermedio 15 y 290C. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 1,17 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 1,21 (d, J = 7,03 Hz, 3H) 1,37 (q, J = 7,32 Hz, 3H) 3,02 (s, 6H) 3,33-3,47 (m, 1H) 3,93-4,11 (m, 2H) 4,56-4,81 (m, 2H) 5,18 (s, 1H) 6,63 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,79 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 7,08 (dd, J = 8,13, 1,98 Hz, 1H) 7,11-7,20 (m, 2H) 7,30 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,35 (d, J = 7,9 Hz, 1H) 7,49 (dd, J = 8,35, 2,20 Hz, 1H) 7,57 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,69 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,00 (d, J = 9,23 Hz, 1H). CL-EM 653,48 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 291 Sal del ácido trifluoroacético de N-(3-((2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(4-cloro-3-etoxifenil)acetamido)metil)-4-(isopropilsulfonil)fenil)pirrolidin-1-carboxamida
207 
\vskip1.000000\baselineskip
291A:N-(3-Ciano-4-(isopropilsulfonil)fenil)pirrolidin-1-carboxamida
208
Se disolvió 290A (35 mg, 0156 mmol) en 2 ml de CH_{2}Cl_{2}. Se añadió NaHCO_{3} (126 mg, 1,5 mmol), seguido de fosgeno (0,2 ml, 0,38 mmol) a 0ºC. Se agitó a t.a. durante 2 h, se filtró y se concentró, y se secó. Se disolvió el residuo en 2 ml CH_{2}Cl_{2}, se añadió Et_{3}N (65 mg, 0,64 mmol), seguido por pirrolidina (22 mg, 0,31 mmol) a 0ºC, se agitó a t.a. durante 2 h, se purificó por ISCO (EtOAc/Hex 0-80%) para proporcionar 291A (40 mg) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,29 (d, J = 6,59 Hz, 6H) 1,95 (s, 4H) 3,39-3,53 (m, 5H) 7,28 (s, 1H) 7,85 (s, 2H) 8,13 (s, 1H). CL-EM 322,34(M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
291B:N-(3-(Aminometil)-4-(isopropilsulfonil)fenil)pirrolidin-1-carboxamida
209
Se preparó 291B a partir de 291A en rendimiento del 94% siguiendo un procedimiento análogo al usado en la preparación de 290C. RMN ^{1}H (400 MHz, CDCl_{3}) \delta ppm 1,20 (d, J = 6,59 Hz, 6H) 1,93 (m, 4H) 3,29-3,37 (m, 1H) 3,39-3,49 (m, 4H) 3,94 (s, 2H) 7,56-7,62 (m, 1H) 7,64 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,73 (d, J = 8,79 Hz, 1H). CL-EM 326,37(M + H).
291C: Se preparó Ejemplo 291 según el acoplamiento-desprotección general usando Producto intermedio 15 y 291B. RMN ^{1}H (400 MHz, EDCl_{3}) \delta ppm 1,09 (d, J = 7,03 Hz, 3H) 1,13 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 1,29 (t, J = 7,03 Hz, 3H) 1,90 (s, 4H) 3,26-3,33 (m, 1H) 3,36 (t, J = 6,81 Hz, 4H) 3,82-4,05 (m, 2H) 4,48-4,73 (m, 2H) 5,08 (s, 1H) 6,54 (d, J = 1,76 Hz, 1H) 6,70 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,98 (dd, J = 8,13, 1,98 Hz, 1H) 7,02-7,11 (m, 2H) 7,21 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,26 (d, J = 8,35 Hz, 1H) 7,47 (d, J = 9,23 Hz, 1H) 7,52 (t, J = 2,42 Hz, 1H) 7,61 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,97 (d, J = 9,23 Hz, 1H). CLEM 679,38 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 294 Sal del ácido trifluoroacético de 2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-N-(5-(3,3-dimetilureido)-2-(isopropilsulfonil)bencil)-2-(5-etoxi-2-fluorofenil)acetamida
210
Se preparó Ejemplo 294 según el acoplamiento-desprotección general usando 73A y 290C. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 1,17 (d, J = 7,03 Hz, 3H) 1,20 (d, J = 7,03 Hz, 3H) 1,27-1,35 (m, 3H) 3,01 (s, 6H) 3,37 -3,47 (m, 1H) 3,82-3,95 (m, 2H) 4,69 (dd, J = 13,40, 5,93 Hz, 2H) 5,45 (s, 1H) 6,66 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6,78 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,85-6,91 (m, 1H) 6,92 (dd, J = 5,71, 3,08 Hz, 1H) 7,08 (t, J = 9,23 Hz, 1H) 7,14 (dd, J = 9,2,3, 2,20 Hz, 1H) 7,30 (d, J = 7,47 Hz, 1H) 7,52 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,62 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,67 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 8,05 (d, J = 9,23 Hz, 1H). CL-EM 637,38 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo 296 Sal del ácido trifluoroacético de (R)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxifenil)-N-(5-(3,3-dimetilureido)-2-(isopropilsulfonil)bencil)acetamida
211
296A: Ácido (R)-2-(1-Di-terc-butoxicarbonilaminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxifenil)acético
212
Se disolvió Producto intermedio 4 (10,5 g) en 240 ml de disolvente (MeOH/TFA/DEA, 100/0,1/0,05), y se inyectó en una columna Chiralpak AD, eluida con CO_{2}/(MeOH/TFA/DEA, 100/0,10/,05) (75/25). Se recogió el primer pico. Con 8 l de solución en la mano, se añadió Et_{3}N (4 ml), y se concentró el conjunto. Se mezcló el residuo con CH_{2}Cl_{2} (200 ml) y se filtró, se secó para proporcionar 296A (2,8 g).
\vskip1.000000\baselineskip
296B: Ácido (R)-2-(1-aminoisoquinolin-6-ilamino)-2-(3,4-dimetoxifenil)acético
213
Se añadió ácido clorhídrico concentrado gota a gota a una solución de 296A (366 mg,1,04 mmol) en THF (10 ml), hasta que se obtuvo una solución transparente. Se concentró la mezcla de reacción y se secó para proporcionar 296B (402 mg) como un sólido amarillo. CL-EM 354,2 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
296C: Ejemplo 296
Se mezclaron 296B (20 mg, 0,051 mmol), 290C (18,5 mg, 0,055 mmol), BOP (40 mg, 0,09 mmol) y Et_{3}N (50 mg, 0,5 mmol) en DMF (2 ml), se agitó a t.a. durante 2 h y se purificó por HPLC preparativa para proporcionar Ejemplo 296 (28,3 mg) como un sólido blanco. RMN ^{1}H (400 MHz, CD_{3}OD) \delta ppm 1,13 (d, J = 7,03 Hz, 3H) 1,16 (d, J = 6,59 Hz, 3H) 3,00 (s, 6H) 3,33-3,43 (m, 1H) 3,74 (s, 3H) 3,79 (s, 3H) 4,65-4,69 (m, 2H) 5,11 (s, 1H) 6,60 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 6:74 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 6,92 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,02 (dd, J = 9,01, 2,42 Hz, 1H) 7,05-7,11 (m, 2H) 7,26 (d, J = 7,03 Hz, 1H) 7,49 (dd, J = 8,79, 2,20 Hz, 1H) 7,56 (d, J = 2,20 Hz, 1H) 7,66 (d, J = 8,79 Hz, 1H) 7,95 (d, J = 9,23 Hz, 1H). CL-EM 635,32 (M + H).
\vskip1.000000\baselineskip
Utilidad
Los compuestos de la presente invención son inhibidores de factor VIIa y/o calicreína en plasma y son útiles como anticoagulantes para la prevención o tratamiento de trastornos tromboembólicos en mamíferos. En general, un trastorno tromboembólico es una enfermedad circulatoria causada por coágulos de sangre (es decir, enfermedades que implican formación de fibrina, activación de plaquetas y/o agregación de plaquetas). El término "trastornos (o dolencias) tromboembólicos" según se usa en la presente memoria descriptiva incluye trastornos tromboembólicos cerebrovasculares o cardiovasculares arteriales o venosos, y trastornos tromboembólicos en las cavidades cardiacas o en la circulación periférica. El término "trastornos tromboembólicos" según se usa en la presente memoria descriptiva también incluye trastornos específicos seleccionados entre, pero no limitados a, angina inestable u otros síndromes coronarios agudos, fibrilación auricular, infarto de miocardio primero o recurrente, muerte súbita isquémica, ataque isquémico transitorio, accidente cerebrovascular, aterosclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, trombosis venosa, trombosis venosa profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial cerebral y coronaria, embolia cerebral, embolias renales, embolias pulmonares y trombosis resultante de implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie artificial que promueve la trombosis. Los implantes o dispositivos médicos incluyen, pero no se limitan a: válvulas protésicas, válvulas artificiales, catéteres internos, stents, oxigenadores sanguíneos, derivaciones, puertos de acceso vascular e injertos en los vasos. Los procedimientos incluyen, pero no se limitan a: derivación cardiopulmonar, intervención coronaria percutánea y hemodiálisis.
Se señala que la trombosis incluye oclusión de los vasos (por ejemplo después de una derivación) y reoclusión (por ejemplo, durante o después de angioplastia coronaria transluminal percutánea). Los trastornos tromboembólicos pueden proceder de dolencias que incluyen pero no se limitan a aterosclerosis, complicaciones de cirugía o quirúrgicas, inmovilización prolongada, fibrilación arterial, trombofilia congénita, cáncer, diabetes, efectos de medicaciones u hormonas, y complicaciones del embarazo. Se cree que el efecto anticoagulante o antitrombótico de los compuestos de la presente invención se debe a inhibición de serin-proteasas implicadas en la cascada de coagulación, más específicamente, inhibición de los factores de coagulación: factor VIIa, factor IXa, factor Xa, factor XIa, trombina y/o calicreína en plasma.
El término "trombosis", según se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a formación o presencia de un trombo (pl. trombos); formación de coágulos dentro de un vaso sanguíneo que pueden causar isquemia o infarto de tejidos irrigados por el vaso. El término "embolia", según se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a bloqueo repentino de una arteria por un coágulo o material extraño que ha sido llevado a su lugar de alojamiento por la corriente sanguínea. El término "tromboembolia", según se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a obstrucción de un vaso sanguíneo con material trombótico transportado por el torrente sanguíneo desde el lugar de origen para taponar otro vaso. El término "accidente cerebrovascular", según se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a accidente cerebrovascular embólico o accidente cerebrovascular aterotrombótico que surge de trombosis oclusiva en las arterias carótida común, carótida interna o intracerebral.
La eficacia de los compuestos de la presente invención como inhibidores de los factores de coagulación VIIa, IXa, Xa, XIa o trombina, puede determinarse usando una serin-proteasa purificada relevante, respectivamente, y un sustrato sintético apropiado. La tasa de hidrólisis del sustrato cromógeno por la serin-proteasa relevante se midió tanto en ausencia como en presencia de compuestos de la presente invención. La hidrólisis del sustrato dio como resultado la liberación de para-nitroanilina (pNA), que se controló espectrofotométricamente midiendo el aumento de la absorbancia a 405 nM, o la liberación de aminometilcumarina (AMC), que se controló espectrofluorométricamente midiendo el aumento en la emisión a 460 nM con excitación a 380 nM. Una disminución en la tasa del cambio de absorbancia a 405 nM en presencia de inhibidor es indicativa de inhibición enzimática. Dichos procedimientos son conocidos para el experto en la materia. Los resultados de este ensayo se expresan como constante inhibidora, K_{i}.
Las determinaciones de factor VIIa se realizaron en cloruro de calcio 0,005 M, cloruro de sodio 0,15 M, tampón HEPES 0,05 M que contenía PEG 8000 al 0,5% a un pH de 7,4. Las determinaciones se realizaron usando Factor VIIa humano purificado (Haematologic Technologies) o Factor VIIa humano recombinante (Novo Nordisk) como una concentración final de ensayo de 2 a 5 nM, factor hístico soluble recombinante a una concentración de 18 a 35 nM y el sustrato sintético H-D-Ile-Pro-Arg-pNA (S-2288; Chromogenix o BMPM = 2; AnaSpec) a una concentración de 0,001 M.
En general, se ha identificado que los compuestos preferidos de la presente invención, como los compuestos particulares desvelados en los ejemplos anteriores, son activos y muestran K_{i} igual o inferior a 15 \muM en el ensayo del Factor VIIa, demostrando con ello la utilidad de los compuestos de la presente invención como inhibidores de coagulación Factor VIIa especialmente eficaces. Los compuestos más preferidos tienen K_{i} igual o inferior a 1 \muM, preferentemente igual o inferior a 0,5 \muM, más preferentemente igual o inferior a 0,2 \muM, más preferentemente todavía igual o inferior a 0,1 \muM.
Las determinaciones de factor IXa se realizaron en cloruro de calcio 0,005 M, cloruro de sodio 0,1 M, base TRIS 0,05 M y PEG 8000 al 0,5% a un pH de 7,4. Las determinaciones se realizaron usando Factor IXa humano purificado (Haematologic Technologies) a una concentración final de ensayo de 20 a 100 nM y el sustrato sintético PCIXA2100-B (Centerchem) o Pefafluor IXa 3688 (H-D-Leu-Phe-Gly-Arg-AMC; Centerchem) a una concentración de 0,0004 a 0,0005 M. En general, los compuestos probados en el ensayo de Factor IXa se consideran activos si muestran una K_{i} igual o inferior a 15 \muM.
Las determinaciones de factor Xa se realizaron en tampón de fosfato de sodio 0,1 M a un pH de 7,4 que contenía cloruro de sodio 0,2 M y PEG 8000 al 0,5%. Las determinaciones se realizaron usando Factor Xa humano purificado (Haematologic Technologies) a una concentración final de ensayo de 150 a 1.000 pM y el sustrato sintético S-2222 (Bz-Ile-Glu(gamma-OMe, 50%)-Gly-Arg-pNA; Chromogenix) a una concentración de 0,0002 a 0,0003 M. En general, los compuestos probados en el ensayo de Factor Xa se consideran activos si muestran una K_{i} igual o inferior a 15 \muM.
Las determinaciones de Factor XIa se realizaron en tampón HEPES 50 mM a pH 7,4 que contenía NaCl 145 mM, KCl 5 mM y PEG 8000 al 0,1% (polietilenglicol; JT Baker o Fisher Scientific). Las determinaciones se realizaron usando Factor XIa humano purificado en una concentración final de 75 a 200 pM (Haematologic Technologies) y el sustrato sintético S-2366 (piroGlu-Pro-Arg-pNA; Chromogenix) a una concentración de 0,0002 a 0,00025 M. En general, los compuestos probados en el ensayo de Factor XIa se consideran activos si muestran una K_{i} igual o inferior a 15 \muM.
Las determinaciones de trombina se realizaron en tampón de fosfato de sodio 0,1 M a un pH de 7,4 que contenía cloruro de sodio 0,2 M y PEG 8000 al 0,5%. Las determinaciones se realizaron usando alfa-trombina humana purificada (Haematologic Technologies o Enzyme Research Laboratories) a una concentración final de ensayo de 200 a 250 pM y el sustrato sintético S-2366 (piroGlu-Pro-Arg-pNA; Chromogenix) a una concentración de 0,0002 M. En general, los compuestos probados en el ensayo de trombina se consideran activos si muestran una K_{i} igual o inferior a 15 \muM.
Las determinaciones de calicreína en plasma se realizaron en tampón de fosfato de sodio 0,1 M a un pH de 7,4 que contenía cloruro de sodio 0,2 M y PEG 8000 al 0,5%. Las determinaciones se realizaron usando calicreína humana purificada (Enzyme Research Laboratories) a una concentración final de ensayo de 200 pM y el sustrato sintético S-2302 (H-(D)-Pro-Phe-Arg-pNA; Chromogenix) a una concentración de 0,00008 a 0,0004 M. En general, los compuestos probados en el ensayo de calicreína en plasma se consideran activos si muestran una K_{i} igual o inferior a 15 \muM.
La selectividad de un compuesto puede evaluarse tomando la proporción del valor K_{i} para una proteasa dada con el valor K_{i} para la proteasa de interés (es decir, selectividad para FVIIa frente a proteasa P = K_{i} para proteasa P/K_{i} para FVIIa). Los compuestos con selectividad ratios > 20 se consideran selectivos. Se prefieren los compuestos con proporciones de selectividad >100, y son más preferidos los compuestos con proporciones de selectividad > 500.
Se determinó la constante de Michaelis, K_{m}, para hidrólisis de sustratos por cada proteasa a 25ºC usando el procedimiento de Lineweaver y Burk. Se determinaron los valores de K_{i} permitiendo que la proteasa reaccionara con el sustrato en presencia del inhibidor. Se permitió que las reacciones continuaran durante periodos de 20 a 180 minutos (dependiendo de la proteasa) y se midieron las velocidades (tasa de cambio de absorbancia frente al tiempo). Se usó la siguiente relación para calcular los valores de K_{i}:
(v_{O} - v_{S})/v_{S} = I/K_{i} (1 + S/K_{m}))
para un inhibidor competitivo con un sitio de unión; o
v_{S}/v_{O} = A + ((B - A)/1 + (CI_{50}/(I)^{n})))
y
K_{i} = CI_{50}/(1 + S/K_{m}) para un inhibidor competitivo
en las que:
v_{o} es la velocidad del control en ausencia de inhibidor;
v_{s} es la velocidad en presencia de inhibidor;
I es la concentración de inhibidor;
A es la actividad mínima residual (normalmente bloqueada a cero);
B es la actividad máxima residual (normalmente bloqueada a 1,0);
n es el coeficiente de Hill, una medida del número y la cooperatividad de sitios de unión potenciales del inhibidor;
CI_{50} es la concentración de inhibidor que produce inhibición al 50% en las condiciones de ensayo;
K_{i} es la constante de disociación del complejo inhibidor de enzimas;
S es la concentración de sustrato; y
K_{m} es la constante de Michaelis para el sustrato.
\vskip1.000000\baselineskip
La eficacia de los compuestos de la presente invención como agentes antitrombóticos puede determinarse usando modelos relevantes de trombosis in vivo, que incluyen Modelos de Trombosis de Arteria Carótida inducida eléctricamente in vivo y Modelos de Trombosis de Derivación Arteriovenosa de Conejos In vivo.
\vskip1.000000\baselineskip
Modelo de Trombosis de la Arteria Carótida inducida Eléctricamente (TACE) in vivo
En este estudio puede usarse el modelo TACE de conejo, descrito por Wong y col. (J Pharmacol Exp Ther 2000, 295, 212-218). Conejos machos Blancos de Nueva Zelanda se anestesian con cetamina (50 mg/kg + 50 mg/kg/h IM) y xilazina (10 mg/kg +10 mg/kg/h IM). Estos anestésicos se suplementan en caso necesario. Se coloca una sonda de flujo electromagnético en un segmento de una arteria carótida aislada para controlar el flujo de sangre. Los agentes o vehículos de prueba se suministrarán (i.v., i.p., s.c. u oralmente) antes del inicio de la trombosis. La formación de trombo se induce por estimulación eléctrica de la arteria carótida durante 3 min a 4 mA usando un electrodo bipolar externo de acero inoxidable. El flujo de sangre carotídea se mide continuamente durante un periodo de 90 min para controlar la oclusión inducida por trombo. Se calcula el flujo total de sangre carotídea durante 90 min por regla trapezoidal. A continuación se determina el flujo carotídeo medio durante 90 min por conversión del flujo sanguíneo carotídeo total durante 90 min al porcentaje de flujo sanguíneo carotídeo total de control, lo que daría como resultado si el flujo de sangre de control se hubiera mantenido continuamente durante 90 min. Se estiman las DE_{50} (dosis en que se incrementa el flujo sanguíneo carotídeo medio durante 90 min al 50% del control) de compuestos mediante un programa de regresión no lineal de mínimos cuadrados usando la ecuación E_{máx} sigmoidea de Hill (DeltaGraph; SPSS Inc., Chicago, IL).
\vskip1.000000\baselineskip
Modelo de trombosis por derivación arteriovenosa (AV) de conejos in vivo
En este estudio puede usarse el modelo de derivación AV de conejo, descrito por Wong y col. (Wong, P. C. y col. J Pharmacol Exp Ther 2000, 292, 351-357). Conejos machos Blancos de Nueva Zelanda se anestesian con cetamina (50 mg/kg + 50 mg/kg/h IM) y xilazina (10 mg/kg + 10 mg/kg/h IM). Estos anestésicos se suplementan en caso necesario. Se aíslan y cateterizan la arteria femoral, la vena yugular y la vena femoral. Se conecta un dispositivo de derivación AV relleno con suero salino entre la arteria femoral y las cánulas venosas femorales. El dispositivo de derivación AV consiste en una pieza exterior de tubo de tygon (longitud = 8 cm; diámetro interno = 7,9 mm) y una pieza interior de tubo (longitud = 2,5 cm; diámetro interno = 4,8 mm). La derivación AV contiene también un hilo de seda 2-0 de 8 cm de longitud (Ethicon, Somerville, NJ). La sangre fluye desde la arteria femoral por medio de la derivación AV en la vena femoral. la exposición de sangre que fluye a un hilo de seda induce la formación de un trombo importante. Cuarenta minutos más tarde, la derivación se desconecta y se pesa el hilo de seda cubierto por un trombo. Se suministrarán los agentes o vehículos de prueba (i.v., i.p., s.c. u oralmente) antes de la apertura de la derivación AV. Se determina la inhibición porcentual de formación de trombo para cada tratamiento grupo. Se estiman los valores DI_{50} (dosis que produce 50% de inhibición de formación de trombo) mediante un programa de regresión no lineal de mínimos cuadrados usando la ecuación E_{max} sigmoidea de Hill (DeltaGraph; SPSS Inc., Chicago, IL).
Los compuestos de la presente invención pueden administrarse en solitario o en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales. Estos otros agentes incluyen, pero no se limitan a, otros agentes anticoagulantes o inhibidores de la coagulación, agentes antiplaquetarios o inhibidores de plaquetas, o agentes trombolíticos o fibrinolíticos.
Por "administrado en combinación" o "terapia de combinación" quiere decirse que el compuesto de la presente invención y uno o más agentes terapéuticos adicionales se administran concurrentemente al mamífero que se está tratando. Cuando se administran en combinación cada componente puede administrarse al mismo tiempo o en secuencia en cualquier orden de diferentes puntos de tiempo. Así, cada componente puede administrarse por separado pero suficientemente cerca en el tiempo de manera que se proporcione el efecto terapéutico deseado.
Otros agentes anticoagulantes (o agentes inhibidores de la coagulación) que pueden usarse en combinación con los compuestos de esta invención incluyen warfarina, heparina (heparina fraccionada o cualquier heparina de bajo peso molecular disponible comercialmente, por ejemplo LOVANO^{TM}), pentasacárido sintético, inhibidores de trombina de acción directa incluyendo hirudina y argatrobán, así como otros inhibidores de factor VIIa, inhibidores de factor IXa, inhibidores de factor Xa (por ejemplo, Arixtra^{TM}, apixabán, rivaroxabán, LY-517717, DU-176b, DX-9065a, y los desvelados en los documentos WO-98/57.951, WO-03/026.652, WO-01/047.919 y WO-00/076.970), inhibidores de factor XIa e inhibidores de TAFI y PAI-1 activados conocidos en la técnica.
El término agentes antiplaquetarios (o agentes inhibidores de plaquetas), según se usa en la presente memoria descriptiva, denota agentes que inhiben la función plaquetaria, por ejemplo, al inhibir la agregación, la adhesión o la secreción de contenido granular de plaquetas. Dichos agentes incluyen, pero no se limitan a, los diversos fármacos antiinflamatorios no esteroideos (NSAID) conocidos como acetaminofeno, aspirina, codeína, diclofenac, droxicam, fentanilo, ibuprofeno, indometacina, cetorolac, mefenamato, morfina, naproxeno, fenacetina, piroxicam, sufentanilo, sulfinpirazona, sulindac y sales farmacéuticamente aceptables o profármacos de los mismos. De los NSAID, se prefieren aspirina (ácido acetilsalicílico o AAS) y piroxicam. Otros agentes inhibidores de plaquetas adecuados incluyen antagonistas de glucoproteína IIb/IIIa (por ejemplo, tirofiban, eptifibatida, abciximab e integrelina), antagonistas de receptores de tromboxano A2 (por ejemplo, ifetroban), inhibidores de tromboxano-A-sintetasa, inhibidores de fosfodiesterasa-III (PDE-III) (por ejemplo, dipiridamol, cilostazol) e inhibidores de PDE-V (como sildenafilo), antagonistas de receptores 1 activados por proteasa (PAR1) (por ejemplo, SCH-530348, SCH-203099, SCH-529153 y SCH-205831), y sales farmacéuticamente aceptables o profármacos de los mismos.
El término agentes antiplaquetarios (o agentes inhibidores de plaquetas), según se usa en la presente memoria descriptiva, pretende también incluir antagonistas de receptores de ADP (difosfato de adenosina), preferentemente antagonistas de los receptores purinérgicos P2Y1 y P2Y12, siendo P2Y12 más preferido todavía. Los antagonistas P2Y12 preferidos incluyen ticlopidina y clopidogrel, prasugrel y AZD-6140, y sales farmacéuticamente aceptables o profármacos de los mismos. Clopidogrel es un agente todavía más preferido. Ticlopidina y clopidogrel son también compuestos preferidos, ya que son conocidos por ser más suaves que la aspirina en el tracto gastrointestinal en uso.
El término inhibidores de trombina (o agentes antitrombina), según se usa en la presente memoria descriptiva, denota inhibidores de la trombina de serin-proteasa. Por la trombina inhibidora, se interrumpen varios procesos mediados por trombina, como activación de plaquetas mediada por trombina (que es, por ejemplo, la agregación de plaquetas, y/o la secreción de contenido de gránulos de plaquetas incluyendo y/o serotonina) y/o formación de fibrina. Los expertos en la técnica conocen una serie de inhibidores de trombina y para estos inhibidores se contempla su uso en combinación con los presentes compuestos. Dichos inhibidores incluyen, pero no se limitan a, derivados de boroarginina, boropéptidos, heparinas, hirudina y argatrobán, dabigatrán, AZD-0837, y los desvelados en los documentos WO-98/37.075 y WO-02/044.145, y sales farmacéuticamente aceptables y profármacos de los mismos. Los derivados de boroarginina y boropéptidos incluyen N-acetil y péptidos derivados de ácido borónico, como derivados de ácido a-aminoborónico C-terminal de lisina, omitina, arginina, homoarginina y análogos de isotiouronio correspondientes de los mismos. El término hirudina, según se usa en la presente memoria descriptiva, incluye derivados adecuados o análogos de hirudina, referidos en la presente memoria descriptiva como hirulogos, como disulfatohirudina.
El término agentes trombolíticos (o fibrinolíticos) (o trombolíticos o fibrinolíticos), según se usa en la presente memoria descriptiva, denota agentes que lisan los coágulos de sangre (trombos). Dichos agentes incluyen activador de plasminógeno tisular (TPA, natural o recombinante) y formas modificadas del mismo, anistreplasa, urocinasa, estreptocinasa, tenecteplasa (TNK), lanoteplasa (nPA), inhibidores de factor VIIa, inhibidores de trombina, inhibidores de factores IXa, Xa y XIa, inhibidores de PAI-I (es decir, inactivadores de inhibidores de activador plasminógeno tisular), inhibidores de TAFI activado, inhibidores de alfa-2-antiplasmina, y complejo activador de estreptocinasa-plasminógeno anisoilado, incluyendo sales farmacéuticamente aceptables o profármacos de los mismos. El término anistreplasa, según se usa en la presente memoria descriptiva, se refiere a complejo de activador de estreptocinasa-plasminógeno anisoilado, según se describe, por ejemplo, en la solicitud de patente europea nº 028.489, cuya descripción se incorpora así como referencia en la presente memoria descriptiva. El término urocinasa, según se usa en la presente memoria descriptiva, pretende denotar urocinasa de cadena doble y simple, refiriéndose también a la última en la presente memoria descriptiva como prourocinasa.
Los ejemplos de agentes antiarrítmicos adecuados para su uso en combinación con los presentes compuestos incluyen: agentes de Clase I (como propafenona); agentes de Clase II (como carvadiol y propranolol); agentes de Clase III (como sotalol, dofetilida, amiodarona, azimilida e ibutilida); agentes de Clase IV (como ditiazem y verapamilo); agentes de apertura de canales de K^{+} como inhibidores de IAch e inhibidores de IKur (por ejemplo, compuestos como los desvelados en el documento WO-01/40.231).
Los ejemplos de agentes antihipertensivos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen bloqueantes alfa-adrenérgicos; bloqueantes beta-adrenérgicos; bloqueantes del canal del calcio (por ejemplo, diltiazem, verapamilo, nifedipina, amlodipina y mibefradilo); diuréticos (por ejemplo, clorotiazida, hidroclorotiazida, flumetiazida, hidroflumetiazida, bendroflumetiazida, metilclorotiazida, triclorometiazida, politiazida, benzotiazida, ácido etacrínico, tricrinafeno, clorthalidona, furosemida, musolimina, bumetanida, triamtreneno, amilorida, espironolactona); inhibidores de renina; inhibidores de enzima convertidora de la angiotensina (ACE) (por ejemplo, captopril, lisinopril, fosinopril, enalapril, ceranopril, cilazopril, delapril, pentopril, quinapril, ramipril, lisinopril), antagonistas de receptores de angiotensina A-1 (por ejemplo, irbestatina, losartán, valsartán); antagonistas de receptores de ETA (por ejemplo, sitaxsentán, atrsentán y compuestos desvelados en las patentes de EE.UU. nº 5.612.359 y 6.043.265); antagonista de ETA/A-1 Dual (por ejemplo, compuestos desvelados en el documento WO-00/01.389); inhibidores de endopeptidasa neutra (NEP); inhibidores de vasopepsidasa (inhibidores de ACE/NEP duales, por ejemplo, omapatrilat, gemopatrilat, nitratos) y bloqueantes \beta (por ejemplo propanolol, nadolol o
carvedilol).
Los ejemplos de glucósidos cardiacos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen digitalis y ouabaina.
Los ejemplos de antagonistas de receptores de mineralocorticoides adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen esprionolactona y eplirinona.
Los ejemplos de agentes antidiabéticos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen: biguanidas (por ejemplo, metformina); inhibidores de glucosidasa (por ejemplo, acarbosa); insulinas (incluyendo secretagogos de insulina o sensibilizadores de insulina); meglitinidas (por ejemplo, repaglinida); sulfonilureas (por ejemplo, glimepirida, gliburida y glipizida); combinaciones de biguanida/gliburida (por ejemplo, glucovance), tiozolidindionas (por ejemplo, troglitazona, rosiglitazona y pioglitazona), agonistas PPAR-alfa, agonistas PPAR-gamma, agonistas duales PPAR alfa/gamma, inhibidores de SGLT2, inhibidores de proteínas de unión a ácidos grasos (aP2) como los desvelados en el documento WO-00/59.506, péptido-1 de tipo glucagón (GLP-1) e inhibidores de dipeptidil-peptidasa IV (DPP4).
Los ejemplos de agentes antidepresivos adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen nefazodona y sertralina. Los ejemplos de agentes antiinflamatorios adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen: prednisona; dexametasona; enbrel; inhibidores de protein-tirosin-cinasa (PTK); inhibidores de ciclooxigenasa (incluyendo NSAID, e inhibidores de COX-1 y/o COX-2); aspirina; indometacina; ibuprofeno; prioxicam; naproxeno; celecoxib y/o rofecoxib.
Los ejemplos de agentes de antiosteoporosis adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen alendronato y raloxifeno. Los ejemplos de terapias de sustitución de hormonas adecuadas para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen estrógeno (por ejemplo, estrógenos conjugados) y estradiol.
\newpage
Los ejemplos de agentes antiobesidad adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen orlistat, inhibidores de aP2 (como los desvelados en el documento WO-00/59.506), y antagonistas CB1 de receptores de cannabinoides (por ejemplo, rimonabant, AVE-1625, SR-147778 y CP-945598).
Los ejemplos de agentes antiansiedad adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen diazepam, lorazepam, buspirona y pamoato de hidroxizina.
Los ejemplos de agentes antiproliferativos adecuados agentes para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen ciclosporina A, paclitaxel, adriamicina; epitilones, cisplatino y carboplatino.
Los agentes de reducción de colesterol/lípidos para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen inhibidores de HMG-CoA reductasa (lovastatina, simvastatina, pravastatina, fluvastatina, atorvsatatina, rosuvastatina y otras estatinas), agentes de secuestración (colestiramina y colestipol), ácido nicotónico, derivados de ácido fenofíbrico (gemfibrozil, clofibrat, fenofibrato y benzafibrato) y probucol.
Los ejemplos de agentes antiulcerantes y de enfermedad de reflujo gastroesofágico adecuados para su uso en combinación con los compuestos de la presente invención incluyen famotidina, ranitidina y omeprazol.
La administración de los compuestos de la presente invención (es decir, un primer agente terapéutico) en combinación con al menos un agente terapéutico adicional (es decir, un segundo agente terapéutico), permite preferentemente una ventaja de eficacia sobre los compuestos y agentes en solitario, preferentemente a la vez que permiten el uso de dosis menores de cada uno. Una dosificación menor minimiza el potencial de efectos secundarios, proporcionando así un margen mayor de seguridad. Se prefiere que al menos uno de los agente terapéuticos se administre en una dosis subterapéutica. Se prefiere todavía más que todos los agentes terapéuticos se administren en dosis subterapéuticas. Subterapéutico pretende significar una cantidad de un agente terapéutico que en sí mismo no suministra el efecto terapéutico deseado para la dolencia o enfermedad que se va a tratar. Combinación sinérgica pretende significar que el efecto observado de la combinación es mayor que la suma de los agentes individuales administrados en solitario.
Los compuestos de la presente invención son útiles también como compuestos estándar o de referencia, por ejemplo como un estándar o control de calidad, en pruebas o ensayos que implican la inhibición de calicreína en plasma, trombina, factor VIIa, IXa, Xa y/o XIa. Dichos compuestos pueden proporcionarse en un kit comercial, por ejemplo, para su uso en investigación farmacéutica que implica calicreína en plasma, trombina, factor VIIa, IXa, Xa y/o XIa. Por ejemplo, un compuesto de la presente invención podría usarse como referencia en un ensayo para comparar su actividad conocida con un compuesto con una actividad desconocida. Esto aseguraría al experimentador que el ensayo se estaba realizando adecuadamente y proporciona una base para comparación, especialmente si el compuesto de prueba era un derivado del compuesto de referencia. Cuando se desarrollan nuevos ensayos o protocolos, los compuestos según la presente invención podrían usarse para probar su eficacia.
Los compuestos de la presente invención también pueden usarse en ensayos de diagnóstico que implican calicreína en plasma, trombina, factor VIIa, IXa, Xa y/o XIa. Por ejemplo, la presencia de calicreína en plasma, trombina, factor VIIa, IXa, Xa y/o XIa en una muestra desconocida podría determinarse por adición del sustrato cromógeno relevante, por ejemplo, S2288 para factor VIIa, a una serie de soluciones que contienen muestra de prueba y opcionalmente uno de los compuestos de la presente invención. Si se observa producción de pNA en las soluciones que contienen muestra de prueba, pero no en presencia de un compuesto de la presente invención, a continuación se concluiría que el factor VIIa estaba presente.
La presente invención también comprende un artículo de fabricación. Según se usa en la presente memoria descriptiva, artículo de fabricación pretende incluir, pero no se limita a, kits y envases. El artículo de fabricación de la presente invención, comprende: (a) un primer recipiente; (b) una composición farmacéutica situada dentro del primer recipiente, comprendiendo la composición: un primer agente terapéutico, que comprende: un compuesto de la presente invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y, (c) un inserto de envase que indique que la composición farmacéutica puede usarse para el tratamiento de un trastorno tromboembólico (según se define anteriormente). En otra forma de realización, el inserto de envase indica que la composición farmacéutica puede usarse en combinación (según se define anteriormente) con un segundo agente terapéutico para tratar un trastorno tromboembólico. El artículo de fabricación puede comprender además: (d) un segundo recipiente, en el que los componentes (a) y (b) están situados dentro del segundo recipiente y el componente (c) está situado dentro o fuera del segundo recipiente. Situados dentro de los recipientes primero y segundo significa que el recipiente respectivo contiene el elemento dentro de sus límites.
El primer recipiente es un receptáculo usado para contener una composición farmacéutica. Este recipiente puede ser para fabricar, almacenar, expedir y/o vender individualmente/a granel. Primer recipiente pretende cubrir un frasco, botella, vial, matraz, jeringuilla, tubo (por ejemplo, para una preparación de crema), o cualquier otro recipiente usado para fabricar, contener, almacenar o distribuir un producto farmacéutico.
El segundo recipiente es uno usado para guardar el primer recipiente y, opcionalmente, el inserto del envase. Los ejemplos del segundo recipiente incluyen, pero no se limitan a, cajas (por ejemplo, de cartón o plástico), cajas de embalaje, envases de cartón, bolsas (por ejemplo, bolsas de papel o plástico), bolsitas y sacos. El inserto de envase puede estar unido físicamente al exterior del primer recipiente por medio de cinta adhesiva, cola, grapas u otro procedimiento de fijación, o puede descansar dentro del segundo recipiente sin ningún medio físico de fijación al primer recipiente. Alternativamente, el inserto de envase se sitúa en el exterior del segundo recipiente. Cuando se sitúa en el exterior del segundo recipiente, es preferible que el inserto de envase se una físicamente por medio de cinta adhesiva, cola, grapas u otro procedimiento de fijación. Alternativamente, puede estar adyacente a o tocando el exterior del segundo recipiente sin estar unido físicamente.
El inserto de envase es una etiqueta, marca, marcador, etc., que contiene información relativa a la composición farmacéutica situada dentro del primer recipiente. La información contenida estará determinada habitualmente por la agencia reguladora que rige en el área en que se va a vender el artículo de fabricación (por ejemplo, la Food and Drug Adminsitration de los Estados Unidos). Preferentemente, el inserto de envase contiene específicamente las indicaciones para las que se ha aprobado la composición farmacéutica. El inserto de envase puede estar hecho de cualquier material en el que una persona pueda leer la información contenida en él o en su interior. Preferentemente, el inserto de envase es un material imprimible (por ejemplo, papel, plástico, cartón, lámina de aluminio, papel con base adhesiva o plástico, etc.) en el que se ha conformado la información deseada (por ejemplo, impresa o aplicada).
\vskip1.000000\baselineskip
Dosificación y formulación
Los compuestos de esta invención pueden administrarse en formas farmacéuticas orales como comprimidos, cápsulas (cada una de las cuales incluye formulaciones de liberación sostenida o de liberación sincronizada), píldoras, polvos, gránulos, elixires, tinturas, suspensiones, jarabes y emulsiones. Pueden administrarse también en forma intravenosa (bolo o infusión), intraperitoneal, subcutánea o intramuscular, usando siempre formas farmacéuticas bien conocidas para el experto en las técnicas farmacéuticas. Pueden administrarse en solitario, aunque generalmente se administrarán con un vehículo farmacéutico seleccionado basándose en la vía de administración escogida y en la práctica farmacéutica estándar. El régimen de dosificación para los compuestos de la presente invención variará, naturalmente, dependiendo de factores conocidos, como las características farmacodinámicas del agente en concreto y en su modo y vía de administración; la especie, edad, sexo, salud, dolencia médica y peso del receptor; la naturaleza y extensión de los síntomas; la clase de tratamiento concurrente; la frecuencia de tratamiento; la vía de administración, la función renal y hepática del paciente, y el efecto deseado. Un médico o veterinario puede determinar y prescribir la cantidad eficaz del fármaco requerido para prevenir, contrarrestar o detener el avance del trastorno
tromboembólico.
Para orientación general, la dosificación oral diaria de cada ingrediente activo, cuando se usa para los efectos indicados, oscilará entre aproximadamente 0,001 y 1.000 mg/kg de peso corporal, preferentemente entre aproximadamente 0,01 y 100 mg/kg de peso corporal por día, y con la máxima preferencia entre aproximadamente 0,001 y 20 mg/kg/día. Por vía intravenosa, las dosis más preferidas oscilan entre aproximadamente 0,1 y aproximadamente 10 mg/kg/minuto durante una infusión de velocidad constante. Los compuestos de esta invención pueden administrarse en una dosis diaria única, o la dosificación diaria total puede administrarse en dosis divididas de dos, tres o cuatro veces al día.
Los compuestos de esta invención pueden administrarse en forma intranasal por medio de uso tópico de vehículos intranasales adecuados, o por medio de vías transdérmicas, usando parches cutáneos transdérmicos. Cuando se administran en forma de un sistema de suministro transdérmico, la administración de dosificación será, naturalmente, continua más que intermitente durante todo el régimen de dosificación.
Los compuestos se administran normalmente en mezcla con diluyentes, excipientes o vehículos farmacéuticos adecuados (referidos colectivamente en la presente memoria descriptiva como vehículos farmacéuticos) seleccionados de forma adecuada con respecto a la forma pretendida de administración, es decir, comprimidos orales, cápsulas, elixires, jarabes y similares, y coherentes con las prácticas farmacéuticas convencionales.
Por ejemplo, para administración oral en forma de un comprimido o cápsula, el componente activo del fármaco puede combinarse con un vehículo oral, no tóxico, farmacéuticamente aceptable, inerte como lactosa, almidón, sacarosa, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, fosfato de dicalcio, sulfato de calcio, mannitol, sorbitol y similares; para administración oral en forma líquida, los componentes del fármaco oral pueden combinarse con cualquier vehículo inerte oral, no tóxico farmacéuticamente aceptable como etanol, glicerol, agua y similares. Por otra parte, cuando se desee o sea necesario, pueden incorporarse también en la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes de desintegración y agentes colorantes adecuados. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales como glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales o sintéticas como acacia, tragacanto, o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares. Los lubricantes usados en estas formas farmacéuticas incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares. Los agentes de desintegración incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano y similares.
Los compuestos de la presente invención pueden administrarse también en forma de sistemas de suministro de liposomas, como pequeñas vesículas monolaminares, grandes vesículas monolaminares y vesículas multilaminares. Los liposomas pueden formarse a partir de una diversidad de fosfolípidos, como colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.
Los compuestos de la presente invención también pueden acoplarse con polímeros solubles como vehículos de fármacos objeto. Dichos polímeros pueden incluir polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamida-fenol, polihidroxietilaspartamidafenol, o polietilenoóxido-polilisina sustituido por residuos de palmitoílo. Además, los compuestos de la presente invención pueden acoplarse a una clase de polímeros biodegradables útiles para conseguir la liberación controlada de un fármaco, por ejemplo, poliácido láctico, poliácido glicólico, copolímeros de poliácido láctico y poliglicólico, poliépsilon-caprolactona, poliácido hidroxibutírico, poliortoésteres, poliacetales, polidihidropiranos, policianoacilatos y copolímeros de bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles.
Las formas farmacéuticas (composiciones farmacéuticas) adecuadas para administración pueden contener de aproximadamente 1 miligramo a aproximadamente 1.000 miligramos de ingrediente activo por unidad de dosificación. En estas composiciones farmacéuticas el ingrediente activo estará presente comúnmente en una cantidad de aproximadamente el 0,1 al 95% en peso basándose en el peso total de la composición.
Las cápsulas de gelatina pueden contener el ingrediente activo y vehículos en polvo, como lactosa, almidón, derivados de celulosa, estearato de magnesio, ácido esteárico y similares. Pueden usarse diluyentes similares para preparar comprimidos. Los comprimidos y las cápsulas pueden fabricarse como productos de liberación sostenida para proporcionar liberación continua de medicación durante un periodo de unas horas. Los comprimidos pueden estar recubiertos con azúcar o recubiertos con película para enmascarar cualquier sabor desagradable y proteger el comprimido de la atmósfera, o con recubrimiento entérico para la desintegración selectiva en el tracto gastrointestinal.
Las formas farmacéuticas líquidas para administración oral pueden contener coloración y aromatización para aumentar la aceptación del paciente.
En general, el agua, un aceite adecuado, solución salina, dextrosa acuosa (glucosa) y soluciones de azúcares relacionadas y glicoles como propilenglicol o polietilenglicoles son vehículos adecuados para soluciones parenterales. Las soluciones para administración parenteral contienen preferentemente una sal soluble en agua del ingrediente activo, agentes de estabilización adecuados, y si es necesario, sustancias tampón. Agentes antioxidantes como bisulfito de sodio, sulfito de sodio o ácido ascórbico, ya sean en solitario o combinados, son agentes de estabilización adecuados. También se usan ácido cítrico y sus sales y EDTA sódica. Además, las soluciones parenterales pueden contener conservantes, como cloruro de benzalconio, metil-o propil-parabeno y clorobutanol.
Se describen vehículos farmacéuticos adecuados en Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, un texto de referencia estándar en este campo.
Cuando los compuestos de esta invención se combinan con otros agentes anticoagulantes, por ejemplo, una dosificación diaria puede ser de aproximadamente 0,1 a 100 miligramos del compuesto de la presente invención y de aproximadamente 0,1 a 7,5 miligramos del segundo anticoagulante, por kilogramo de peso corporal del paciente. Para una forma farmacéutica en comprimidos, los compuestos de esta invención generalmente pueden estar presentes en una cantidad de aproximadamente 5 a 100 miligramos por unidad de dosificación, y el segundo anticoagulante en una cantidad de aproximadamente 1 a 50 miligramos por unidad de dosificación.
Cuando los compuestos de la presente invención se administran en combinación con un agente antiplaquetario, a modo de orientación general, normalmente una dosificación diaria puede ser aproximadamente de 0,01 a 25 miligramos del compuesto de la presente invención y aproximadamente de 50 a 150 miligramos del agente antiplaquetario, preferentemente aproximadamente de 0,1 a 1 miligramos del compuesto de la presente invención y aproximadamente de 1 a 3 miligramos de agentes antiplaquetarios, por kilogramo de peso corporal del paciente.
Cuando los compuestos de la presente invención se administran en combinación con agente trombolítico, normalmente una dosificación diaria puede ser aproximadamente de 0,1 a 1 miligramos del compuesto de la presente invención, por kilogramo de peso corporal del paciente y, en el caso de los agentes trombolíticos, la dosificación habitual del agente trombolítico cuando se administra en solitario puede reducirse en aproximadamente del 50 al 80% cuando se administra con un compuesto de la presente invención.
Cuando se administran dos o más de los segundos agentes terapéuticos precedentes con el compuesto de la presente invención, generalmente la cantidad de cada componente en una dosificación diaria típica y la forma farmacéutica típica pueden reducirse con respecto a la dosificación habitual del agente cuando se administra en solitario, a la vista del efecto aditivo o sinérgico de los agentes terapéuticos cuando se administran en combinación.
En particular, cuando se proporciona como una unidad de monodosis, existe potencial para una interacción química entre los ingredientes activos combinados. Por este motivo, cuando el compuesto de la presente invención y un segundo agente terapéutico se combinan en una única monodosis se formulan de tal manera que aunque los ingredientes activos se combinan en una sola monodosis, el contacto físico entre los ingredientes activos se minimiza (es decir, se reduce). Por ejemplo, un ingrediente activo puede tener un recubrimiento entérico. Mediante el recubrimiento entérico de los ingredientes activos, es posible no sólo minimizar el contacto entre los ingredientes activos combinados, sino también, es posible controlar la liberación de uno de estos componentes en el tracto gastrointestinal de manera que uno de estos componentes no se libere en el estómago sino que se libere en los intestinos. Uno de los ingredientes activos también puede estar recubierto con un material que efectúa una liberación sostenida en todo el tracto gastrointestinal y también sirve para minimizar el contacto físico entre los ingredientes activos combinados. Además, el componente de liberación sostenida puede estar adicionalmente con recubrimiento entérico de manera que la liberación de este componente se produzca sólo en el intestino. Otro enfoque más implicaría la formulación de un producto de combinación en el que el componente esté recubierto con un polímero de liberación sostenida y/o entérica, y el otro componente está también recubierto con un polímero como una calidad de baja viscosidad de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC) u otros materiales apropiados según se conocen en la técnica, con el fin de separar adicionalmente los componentes activos. El recubrimiento de polímero sirve para formar una barrera adicional a la interacción con el otro componente.
Éstos, así como otros medios de minimizar el contacto entre los componentes de productos de combinación de la presente invención, si se administran en una sola forma farmacéutica o se administran en formas separadas pero al mismo tiempo de la misma manera, serán fácilmente evidentes para los expertos en la materia, una vez armados con la presente descripción.

Claims (8)

  1. \global\parskip0.950000\baselineskip
    1. Un compuesto de Fórmula (III):
    214
    o un esteroisómero o sal farmacéuticamente aceptable, o solvato del mismo, en la que:
    W es
    215
    o
    216
    X^{1} es CH o N;
    R^{1} es Cl, Br, Me, Et, OMe, OEt, OCHF_{2}, o ciclopropilo;
    R^{2} es H, F, Cl, OMe, O(i-Pr), u OCHF_{2};
    R^{3} es H u OMe;
    R^{4} es H, F, Cl, u OMe;
    R^{7} es H, Me, -CH_{2}CO_{2}H, o -CH_{2}CO_{2}(alquilo C_{1-4});
    R^{8} es H, Me, CO_{2}H, CO_{2}(alquilo C_{1-4}), -CH_{2}CO_{2}H, o -CH_{2}CO_{2}(alquilo C_{1-4});
    R^{10a} es F, O(alquilo C_{1-4}), CONR^{c}R^{d}, -S(alquilo C_{1-4}), -SO_{2}(alquilo C_{1-4}), -SO_{2}-ciclopropilo, -SO_{2}-ciclobutilo, -SO_{2}-ciclopentilo, -SO_{2}-(pirrolidin-1-ilo), -SO_{2}-(piperid-1-ilo), -SO_{2}-(azepan-1-ilo), -SO_{2}NR^{c}R^{d}, -SO_{2}NH-ciclopropilo, morfolin-4-ilo, 3,5-dimetil-pirazol-1-ilo, o 3,5-dietil-pirazol-1-ilo;
    R^{10b} es OH, NH_{2}, -NHCO(alquilo C_{1-4}), -NHCO_{2}(alquilo C_{1-4}), -NHSO_{2}NH_{2}, -SO_{2}NH_{2}, o -NHCONR^{c}R^{d};
    R^{10c} es H, Cl, o Me;
    R^{c} y R^{d} son, independientemente en cada ocurrencia, H o alquilo C_{1-4}; alternativamente, R^{c} y R^{d}, cuando están unidos al mismo átomo de nitrógeno, se combinan formando un heterociclo de 4 a 5 eslabones que comprende: átomos de carbono y de 0 a 2 heteroátomos adicionales seleccionados entre N, O y S(O)_{p}; estando dicho heterociclo sustituido con 0 a 2 R^{g}; y
    R^{g} es, independientemente en cada ocurrencia, =O, F, Cl, Br, CF_{3}, OH, o alquilo C_{1-4}.
    \global\parskip1.000000\baselineskip
  2. 2. Un compuesto según la reivindicación 1, en el que:
    W es
    217
    X^{1} es CH;
    R^{7} es H, Me, o -CH_{2}CO_{2}H;
    R^{8} es H, Me, CO_{2}H, -CH_{2}CO_{2}H, o -CH_{2}CO_{2}Me;
    R^{10a} es F, O(i-Pr), -CONMe_{2}, -CO-(pirrolidin-1-ilo), -CO-(piperid-1-ilo), -S(i-Pr), -SO_{2}Et, -SO_{2}Pr,
    -SO_{2}(i-Pr), -SO_{2}(t-Bu), -SO_{2}-ciclopropilo, -SO_{2}-ciclobutilo, -SO_{2}-ciclopentilo, -SO_{2}-(pirrolidin-1-ilo), -SO_{2}-(piperid-1-ilo), -SO_{2}-(azepan-1-ilo), -SO_{2}NHMe, -SO_{2}NMe_{2}, -SO_{2}NHEt, -SO_{2}NH(i-Pr), -SO_{2}NH-ciclopropilo, morfolin-4-ilo, 3,5-dimetil-pirazol-1-ilo, o 3,5-dietil-pirazol-1-ilo;
    R^{10b} es OH, NH_{2}, -NHCOMe, -NHCOPr, -NHCO_{2}Me, -NHCO_{2}Et, -NHCO_{2}(i-Pr), -NHCO_{2}(i-Bu), -NHSO_{2}NH_{2}, -SO_{2}NH_{2}, -NHCON(Me)_{2}, -NHCON(Me)(Et), -NHCON(Me)(i-Pr),
    218
    o
    219
    y
    R^{10c} es H.
    \vskip1.000000\baselineskip
  3. 3. Un compuesto según la reivindicación 1, seleccionándose el compuesto entre
    220
    221
    222
    223
    224
    225
    226
    227
    228
    229
    230
    231
    o un esteroisómero o sal farmacéuticamente aceptable, o solvato del mismo.
    \vskip1.000000\baselineskip
  4. 4. Una composición farmacéutica, que comprende: un vehículo farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.
  5. 5. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 para su uso en terapia.
  6. 6. El compuesto según la reivindicación 5 para su uso en el tratamiento de un trastorno tromboembólico.
  7. 7. El compuesto según la reivindicación 6, en el que el trastorno tromboembólico se selecciona entre el grupo constituido por trastornos tromboembólicos cardiovasculares arteriales, trastornos tromboembólicos cardiovasculares venosos y trastornos tromboembólicos en las cavidades cardiacas o en la circulación periférica.
  8. 8. El compuesto según la reivindicación 6, en el que el trastorno tromboembólico se selecciona entre angina inestable, un síndrome coronario agudo, fibrilación auricular, primer infarto de miocardio, infarto de miocardio recurrente, muerte súbita isquémica, ataque isquémico transitorio, accidente cerebrovascular, aterosclerosis, enfermedad arterial oclusiva periférica, trombosis venosa, trombosis venosa profunda, tromboflebitis, embolia arterial, trombosis arterial coronaria, trombosis arterial cerebral, embolia cerebral, embolia renal, embolia pulmonar, y trombosis resultante de implantes, dispositivos o procedimientos médicos en los que la sangre está expuesta a una superficie artificial que promueve la trombosis.
ES06785361T 2005-06-24 2006-06-22 Derivados de fenilglicinamida y piridilclicinamida utiles como agentes anticoagulantes. Active ES2337831T3 (es)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US69407605P 2005-06-24 2005-06-24
US69407405P 2005-06-24 2005-06-24
US694074P 2005-06-24
US694076P 2005-06-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2337831T3 true ES2337831T3 (es) 2010-04-29

Family

ID=37467511

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES06785361T Active ES2337831T3 (es) 2005-06-24 2006-06-22 Derivados de fenilglicinamida y piridilclicinamida utiles como agentes anticoagulantes.

Country Status (6)

Country Link
US (1) US7456195B2 (es)
EP (1) EP1910298B1 (es)
AT (1) ATE455103T1 (es)
DE (1) DE602006011752D1 (es)
ES (1) ES2337831T3 (es)
WO (1) WO2007002313A2 (es)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE602005009252D1 (de) * 2004-12-08 2008-10-02 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclische verbindungen als inhibitoren von faktor viia
PE20061117A1 (es) 2005-01-10 2006-10-13 Bristol Myers Squibb Co DERIVADOS DE FENILGLICINAMIDA COMO INHIBIDORES DEL FACTOR VIIa
AR058380A1 (es) * 2005-12-23 2008-01-30 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores del factor viia macrociclicos utiles como anticoagulantes
WO2007146719A2 (en) 2006-06-08 2007-12-21 Bristol-Myers Squibb Company 2-aminocarbonylphenylamino-2-phenylacetamides as factor viia inhibitors useful as anticoagulants
PE20081775A1 (es) * 2006-12-20 2008-12-18 Bristol Myers Squibb Co Compuestos macrociclicos como inhibidores del factor viia
WO2008079759A1 (en) * 2006-12-20 2008-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclic lactam factor viia inhibitors useful as anticoagulants
EP2191887A1 (en) 2008-11-26 2010-06-02 Polymers CRC Limited Clickable thin film composite polyamide membranes
WO2011017296A1 (en) 2009-08-04 2011-02-10 Schering Corporation 4, 5, 6-trisubstituted pyrimidine derivatives as factor ixa inhibitors
JPWO2011043359A1 (ja) 2009-10-06 2013-03-04 協和発酵キリン株式会社 芳香族複素環化合物を含有する医薬
US8575336B2 (en) 2011-07-27 2013-11-05 Pfizer Limited Indazoles
AU2013250726B2 (en) 2012-04-20 2017-01-05 Advinus Therapeutics Limited Substituted hetero-bicyclic compounds, compositions and medicinal applications thereof
EP2858977A1 (en) 2012-06-08 2015-04-15 Bristol-Myers Squibb Company Macrocyclic factor viia inhibitors
EP2928471B1 (en) 2012-12-06 2020-10-14 Celgene Quanticel Research, Inc. Histone demethylase inhibitors
SG11201708622UA (en) 2015-02-02 2017-11-29 Forma Therapeutics Inc 3-aryl-4-amido-bicyclic [4,5,0] hydroxamic acids as hdac inhibitors
UY36548A (es) 2015-02-05 2016-06-01 Bayer Cropscience Ag Derivados heterocíclicos condensados bicíclicos sustituidos por 2-(het)arilo como pesticidas
TWI828952B (zh) 2015-06-05 2024-01-11 美商艾佛艾姆希公司 作為除草劑之嘧啶氧基苯衍生物
CA2987914C (en) * 2015-06-30 2022-09-13 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibitors of egfr and methods of use thereof
EP3319968A1 (en) 2015-07-06 2018-05-16 Rodin Therapeutics, Inc. Heterobicyclic n-aminophenyl-amides as inhibitors of histone deacetylase
LT3319959T (lt) 2015-07-06 2021-12-27 Alkermes, Inc. Histono deacetilazės hetero-halogeno inhibitoriai
CN105481733A (zh) * 2015-12-30 2016-04-13 苏州诚和医药化学有限公司 一种一步法合成2-甲氧基-5-氨磺酰基苯甲酸甲酯的方法
RS62959B1 (sr) 2017-01-11 2022-03-31 Alkermes Inc Biciklični inhibitori histon-deacetilaze
US11225475B2 (en) 2017-08-07 2022-01-18 Alkermes, Inc. Substituted pyridines as inhibitors of histone deacetylase
CN111606827B (zh) * 2020-06-23 2022-10-25 内蒙古京东药业有限公司 一种制备依度沙班手性胺中间体的方法

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2667864B2 (fr) * 1990-03-07 1994-08-05 Rhone Poulenc Sante Derives de n-phenyl glycinamides, leur preparation et les medicaments les contenant.
IL123986A (en) * 1997-04-24 2011-10-31 Organon Nv Medicinal compounds
EP0921116B1 (de) * 1997-12-04 2003-06-18 F. Hoffmann-La Roche Ag N-(4-carbamimido-phenyl)-glycinamidderivate
US6358960B1 (en) * 1998-02-17 2002-03-19 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Amidino derivatives and drugs containing the same as the active ingredient
YU41801A (sh) * 1998-12-14 2003-12-31 F. Hofman - La Roche Ag. Derivati fenilglicina
WO2000041531A2 (en) * 1999-01-13 2000-07-20 Genentech, Inc. Serine protease inhibitors
EP1059302A1 (en) * 1999-06-08 2000-12-13 Aventis Pharma Deutschland GmbH Factor VIIa inhibitors
US6548694B2 (en) * 2000-05-23 2003-04-15 Hoffman-La Roche Inc. N-(4-carbamimidoyl-phenyl)-glycine derivatives
US6642252B2 (en) * 2000-11-07 2003-11-04 Bristol-Myers Squibb Company Acid derivatives useful as serine protease inhibitors
DE10102322A1 (de) * 2001-01-19 2002-07-25 Merck Patent Gmbh Phenylderivate
RU2003132706A (ru) * 2001-04-06 2005-04-20 Байокрист Фармасьютикалз, Инк. (Us) Диариловые соединения в качестве ингибиторов сериновых протеаз
DE10139060A1 (de) * 2001-08-08 2003-02-20 Merck Patent Gmbh Phenylderivate
US6642386B2 (en) * 2002-02-06 2003-11-04 Hoffmann-La Roche Inc. N-(4-carbamimidoyl-phenyl)-glycine derivatives
US6821974B2 (en) * 2002-03-05 2004-11-23 Barbeau Pharma, Inc Stable pharmaceutical compositions
DE10214832A1 (de) * 2002-04-04 2003-10-16 Merck Patent Gmbh Phenylderivate 4
EP1594505A4 (en) * 2003-02-11 2008-08-13 Bristol Myers Squibb Co PHENYLGLYCIN DERIVATIVES USEFUL AS SERINE PROTEASE INHIBITORS
WO2004072102A2 (en) * 2003-02-11 2004-08-26 Bristol-Myers Squibb Company Benzene acetamide compounds useful as serine protease inhibitors
DE602005009252D1 (de) * 2004-12-08 2008-10-02 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclische verbindungen als inhibitoren von faktor viia
PE20061117A1 (es) * 2005-01-10 2006-10-13 Bristol Myers Squibb Co DERIVADOS DE FENILGLICINAMIDA COMO INHIBIDORES DEL FACTOR VIIa
CN101277958B (zh) * 2005-10-05 2011-09-07 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 萘啶衍生物
US7618985B2 (en) * 2005-12-08 2009-11-17 N.V. Organon Isoquinoline derivatives

Also Published As

Publication number Publication date
WO2007002313A2 (en) 2007-01-04
EP1910298B1 (en) 2010-01-13
ATE455103T1 (de) 2010-01-15
EP1910298A2 (en) 2008-04-16
US20070003539A1 (en) 2007-01-04
WO2007002313A3 (en) 2007-05-18
US7456195B2 (en) 2008-11-25
DE602006011752D1 (de) 2010-03-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2337831T3 (es) Derivados de fenilglicinamida y piridilclicinamida utiles como agentes anticoagulantes.
US7622585B2 (en) Phenylglycinamide derivatives useful as anticoagulants
TWI586651B (zh) 作為因子ｘｉａ抑制劑之經取代四氫異喹啉化合物
ES2310861T3 (es) Compuestos heterociclicos como inhibidores del factor viia.
US20090281139A1 (en) Macrocyclic factor viia inhibitors useful as anticoagulants
US8039506B2 (en) Bicyclic lactam factor VIIa inhibitors useful as anticoagulants
ES2360818T3 (es) Miméticos de urea lineal antagonistas del receptor p2y, útiles en el tratamiento de afecciones trombóticas.
US8044242B2 (en) 2-(aryloxy) acetamide factor VIIa inhibitors useful as anticoagulants
US7247654B2 (en) 3,4-disubstituted benzamidines and benzylamines, and analogues thereof, useful as serine protease inhibitors
US8222453B2 (en) Benzamide factor VIIa inhibitors useful as anticoagulants
CN101389613B (zh) 用作抗凝血药的大环凝血因子viia抑制剂