ES2342018T3 - Metodo de tratamiento de afecciones inflamatorias usando extractos de maracuya. - Google Patents
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Abstract
Extracto obtenible de la piel de un maracuyá mediante extracción acuosa para el uso en el tratamiento o la mejoría de los síntomas de la osteoartritis en un mamífero.
Description
Método de tratamiento de afecciones
inflamatorias usando extractos de meracuyá.
La invención está relacionada en general con
extractos botánicos y, más específicamente, con extractos de
maracuyá (Passiflora sp.), incluyendo particularmente
extractos de la piel del maracuyá, de utilidad para tratar o
mejorar los síntomas de la artrosis.
La hipertensión, o una presión arterial superior
a 140/90 mmHg, es el factor de riesgo más común para la morbilidad
y mortalidad cardiovascular y cerebrovascular. En los Estados
Unidos, la hipertensión arterial es responsable de 40.000 muertes
al año, siendo al mismo tiempo el factor de riesgo más modificable
para el ictus. La hipertensión afecta a aproximadamente uno de cada
cuatro adultos o a casi 50 millones de personas en los Estados
Unidos.
Un estudio de Framingham mostraba que a medida
que la gente envejecía de los 30 a los 65 años su presión arterial
aumentaba una media de 20 mmHg la presión sistólica y 10 mmHg la
presión diastólica, continuando aumentando la presión arterial
sistólica hasta la edad de 90.
Aunque la presión arterial superior aumenta la
probabilidad de un acontecimiento cardiovascular, a menudo la
hipertensión no está bien controlada y demasiados pocos pacientes
están tratados adecuadamente. Los estudios epidemiológicos predicen
que una reducción de la presión arterial sistémica en la cantidad
que se consigue habitualmente en los ensayos clínicos más
importantes podría reducir los acontecimientos cerebrovasculares el
42% y los acontecimientos cardiacos el 24%.
Con frecuencia la hipertensión se trata
inespecíficamente, dando como resultado un gran número de efectos
secundarios minoritarios y una frecuencia relativamente alta de no
tratamiento o tratamiento inadecuado. Por lo tanto, continúa la
búsqueda de nuevos tratamientos para la hipertensión.
Son bien conocidas terapias derivadas de
productos naturales. Se ha establecido que ciertos flavonoides
tienen un efecto beneficioso sobre la hipertensión. Por ejemplo, un
extracto de corteza del pino marítimo (Pinus pinaster), que
contiene una mezcla de flavonoides, disminuye la presión arterial
sistólica cuando se toma por vía oral por pacientes levemente
hipertensos.
El óxido nítrico es un regulador molecular
importante de la presión arterial. El óxido nítrico es un
vasodilatador potente. Inhibe la activación plaquetaria, limita la
adhesión de leucocitos al endotelio y regula la contractilidad del
miocardio. La síntesis de óxido nítrico catalizada por la óxido
nítrico sintasa (NOS) se produce en el endotelio vascular, mientras
que la producción de óxido nítrico que implica a la óxido nítrico
sintasa inducible (iNOS) está asociada con la función inmunitaria.
Sin embargo, pequeñas cantidades de óxido nítrico producido por
otra NOS, la óxido nítrico sintasa epitelial (eNOS), tienen un
efecto citoprotector y acción vasodilatadora sobre el sistema
cardiovascular.
El peroxinitrito es un oxidante potencialmente
perjudicial formado a partir del óxido nítrico (NO + O_{2}
ONOO^{-}). El peroxinitrito puede causar la peroxidación de
lípidos, la nitración de proteínas, la rotura monocatenaria del ADN
y la nitración de guanidina.
Se ha demostrado que los flavonoides quercetina
y canferol inhiben la contracción espontánea del anillo aórtico
dependiente de NOLA en células de ratas espontáneamente hipertensas
(SHR) in vitro. El NOLA es un inhibidor de la óxido nítrico
sintasa. También puede inhibirse la contracción vascular inducida
por grandes dosis de acetilcolina por flavonoides antioxidantes
tales como quercetina, canferol, rutina y esculetina. La inhibición
de la contracción del músculo liso vascular debería conducir a una
menor presión arterial.
Además, los efectos de los flavonoides sobre la
función inmunitaria son controvertidos. La catequina potencia la
proliferación de linfocitos y la producción de anticuerpos al tiempo
que ejerce un efecto inhibidor a alta concentración. Algunos
estudios muestran que los flavonoides potencian la actividad de
células NK, mientras que otros estudios muestran que los
flavonoides no tienen efecto. La quercetina parece inhibir las
respuestas inmunológicas inespecíficas y ejerce una acción
antiinflamatoria.
El asma es una enfermedad muy común que afecta
al 4-5% de la población de los Estados Unidos,
aumentando su incidencia rápidamente. Se admite que comprende una
bronquitis eosinófila crónica y un proceso inflamatorio accionado
por mediadores en los pulmones. Estos agentes producen una
broncoconstricción potente, un aumento de la permeabilidad de la
membrana endotelial que conduce a edema de las vías respiratorias y
una secreción aumentada de moco viscoso espeso (Wenzel S. E.
Arachidonic acid metabolites: Mediators of inflammation in asthma.
Pharmacotherapy 1997; 17 (1 Pt 2): 3S-12S). Un
estrechamiento generalizado de los conductos respiratorios
manifiesta el asma. Este puede aliviarse espontáneamente o como
resultado de terapia y se define clínicamente por paroxismos de
disnea, tos y sibilancias. El asma es una enfermedad episódica: se
intercalan exacerbaciones agudas con periodos sin síntomas. Pueden
desencadenar ataques de asma oxidantes, polvo orgánico, alergenos
de transmisión aérea, sustancias químicas, aire frío e infecciones
víricas. La mayoría de los ataques son de corta duración, con una
duración de minutos a horas, y clínicamente el paciente se recupera
completamente después.
Aunque el asma es principalmente una enfermedad
de las vías respiratorias, prácticamente todos los aspectos de la
función pulmonar se ven comprometidos durante un ataque agudo.
Cuando un paciente se presenta para terapia, la capacidad vital
forzada (FVC) tiende a ser inferior al 50% de la normal. El volumen
espiratorio forzado en un segundo (FEV_{1}) es de media el 30% o
menos del de personas sanas y los índices de flujo espiratorio
medio máximo y mínimo se reducen hasta el 20% o menos de lo
esperado. En pacientes con enfermedad aguda, el volumen residual
(RV) se aproxima con frecuencia al 400% del normal y la capacidad
residual funcional se duplica. Los pacientes describen
habitualmente que el ataque ha terminado clínicamente cuando el RV
ha caído hasta el 200% de su valor esperado y el FEV_{1} alcanza
el 50% del valor esperado (American Thoracic Society: Lung function
testing: Selection of referente values and interpretative
strategies. Am Rev Respir Dis 1991; 144:
1202-1218).
El diagnóstico del asma se establece demostrando
una obstrucción reversible de las vías respiratorias. La
reversibilidad se define tradicionalmente como un aumento del 15% o
superior en el FEV_{1} después de 2 descargas de un agonista
\beta-adrenérgico. Una vez que se confirma el
diagnóstico, la evolución de la enfermedad y la eficacia de la
terapia pueden controlarse midiendo el índice de flujo espiratorio
máximo en casa o el FEV_{1} en el laboratorio o ambos. Se logra
un tratamiento con éxito del asma con el uso de un agonista \beta
para la fase temprana y la reducción de la inflamación con agentes
antiinflamatorios tales como glucocorticoides (que disminuyen la
hipersensibilidad de las vías respiratorias) para la fase
tardía.
Más de 15 millones de norteamericanos padecen
osteoartritis reumatoide y artrosis. La fuente más común de
discapacidad en adultos se debe a artrosis de rodilla. Los estudios
han documentado artrosis de rodilla radiológica y artrosis
sintomática en el 12% y el 6%, respectivamente, de las mujeres de
edades comprendidas entre los 45 y los 64 años. También se ha
descrito que la tasa de incidencia estandarizada por edad y sexo
para la artrosis de rodilla es de aproximadamente 240 personas de
cada 100.000 al año.
Aunque la artrosis no se considera una
enfermedad inflamatoria, los mediadores asociados clásicamente con
la inflamación perpetúan el daño de cartílago que resulta de una
lesión mecánica repetida. La destrucción de cartílago, una
característica patológica importante y una causa muy importante de
disfunción articular, está mediada por dos rutas diferentes: la
intrínseca, en la que los condrocitos son responsables de la
degradación de la matriz extracelular; y la extrínseca, en la que
células y tejidos distintos de condrocitos, tales como una membrana
sinovial inflamada, tejido de granulación y células inflamatorias,
afectan a la matriz extracelular por medio del líquido
sinovial.
Se ha demostrado que las metaloproteinasas de la
matriz (MMP), las enzimas proteolíticas más importantes implicadas
en la renovación de la matriz extracelular, se expresan en el
cartílago artrósico y contribuyen a la lesión tisular. Otro
presunto mediador de daño tisular es la superproducción de óxido
nítrico (NO), un factor catabólico muy importante producido por
condrocitos en respuesta a citocinas proinflamatorias tales como
IL-1\beta y TNF-\alpha. Los
fármacos antiinflamatorios no esteroideos (AINE) son las
medicaciones usadas más comúnmente para la artritis, pero se
asocian clínicamente con complicaciones significativas que incluyen
dispepsia no ulcerosa, úlceras gástricas y duodenales sintomáticas,
hemorragias y perforaciones de úlceras. Su impacto económico
incluye 100.000 hospitalizaciones al año que suponen un coste de 1,6
miles de millones de dólares con 17.000 muertes. Las complicaciones
de los AINE han aumentado con el envejecimiento de la población
norteamericana y han aumentado el uso de aspirina para
cardioprofilaxis. Por consiguiente, existe una necesidad creciente
de desarrollar un tratamiento eficaz y seguro para minimizar los
acontecimientos adversos en pacientes con artrosis.
Se describen extractos de maracuyá de utilidad
en la disminución de la presión arterial y de los niveles de óxido
nítrico en suero en mamíferos en el documento WO 2005/097153.
El maracuyá (Passiflora edulis) es una
planta subtropical o tropical con un carácter trepador vigoroso que
crece hasta 20 pies. El maracuyá morado es originario desde el sur
de Brasil, por Paraguay, hasta el norte de Argentina. Su fruto es
casi redondo u ovoide, de 1,5 a 3 pulgadas de ancho con una corteza
resistente, suave y cerosa.
En la búsqueda de los constituyentes bioactivos
del maracuyá se ha encontrado ahora sorprendentemente que un
extracto de maracuyá tiene un efecto de mejora sobre trastornos
inflamatorios. La inflamación, particularmente la inflamación
crónica, se ha implicado en el cáncer, la hipertensión, la alergia,
la diabetes, trastornos cutáneos crónicos y enfermedades
autoinmunes tales como el lupus y la esclerosis múltiple. El
extracto de maracuyá disminuye la presión arterial sistólica en
ratas espontáneamente hipertensas (SHR) y disminuye la producción
de óxido nítrico de la iONS, mejorando de este modo la disfunción
endotelial en las SHR. Por lo tanto, también se prevé que el
extracto de maracuyá presente propiedades antioxidantes. El extracto
de maracuyá disminuye la gravedad de los síntomas del asma,
incluyendo las sibilancias, tos, falta de aliento y funciones
espiratorias reducidas. El extracto de maracuyá disminuye la
gravedad de la artrosis, incluyendo el dolor, la rigidez y la
función física.
Por lo tanto, un objeto de la invención es
proporcionar un extracto de maracuyá que presente efectos
terapéuticos frente a la artrosis, o al menos proporcionar una
alternativa útil.
En un primer aspecto, la invención proporciona
el uso de extracto de maracuyá que puede obtenerse de la piel de un
maracuyá por extracción acuosa para tratar o mejorar los síntomas de
la artrosis.
La invención proporciona además el uso de
extracto de maracuyá en la fabricación de un medicamento para tratar
o mejorar los síntomas de la artrosis.
El extracto de maracuyá de la invención incluye,
pero sin limitación, uno o más del grupo seleccionado de
quercetina, glucósido de cianidina, catequina, epicatequina,
luteolina, ácido fenilpirúvico, el nuevo ácido edulílico aislado y
descrito en la presente memoria y cualquier glucósido del mismo.
Preferiblemente, el extracto de maracuyá se
prepara mediante un procedimiento que incluye las siguientes etapas:
preferiblemente, cortar el maracuyá en trozos para aumentar el área
superficial; poner los trozos de maracuyá en contacto con agua para
dar un extracto acuoso y un residuo sólido; separar el extracto
acuoso del residuo sólido; poner el extracto acuoso en contacto con
una matriz polimérica para adsorber uno o más componentes del
extracto sobre la matriz; lavar la matriz con agua; y eluir el uno o
más componentes de la matriz con un disolvente orgánico o con una
mezcla de disolventes orgánicos.
Opcionalmente, la piel del maracuyá se separa de
la carne y se usa en el procedimiento de extracción.
Se prefiere que el disolvente orgánico sea
metanol, etanol, alcohol isopropílico, l-propanol o
acetona.
La invención también proporciona el uso de una
composición que contiene un extracto de maracuyá que puede
obtenerse de la piel de un maracuyá por extracción acuosa con uno o
más excipientes farmacéuticamente aceptables para tratar o mejorar
los síntomas de la artrosis.
El extracto de maracuyá para usar según la
invención se administra convenientemente en una cantidad de entre
0,1 y 5 mg al día por libra de peso corporal del animal.
Típicamente, la cantidad administrada al día estará en el intervalo
de entre 2 mg y 1000 mg al día.
Las Figuras 1a-c son análisis de
trazas por HPLC del extracto de maracuyá realizados según la
presente invención.
La Figura 2 es una representación esquemática de
datos que muestran la reducción de la presión arterial en un grupo
de ratas espontáneamente hipertensas a las que se administró el
extracto de maracuyá.
La Figura 3 es una representación esquemática de
datos que muestran la reducción de los niveles séricos de óxido
nítrico en un grupo de ratas a las que se administró el extracto de
maracuyá.
Las Figuras 4a y 4b son representaciones
esquemáticas de datos que muestran el aumento in vivo de la
actividad de la Na-K ATPasa y la Ca ATPasa,
respectivamente, mediante el extracto de maracuyá.
Las Figuras 5a y 5b son una representación
esquemática de datos que muestran la reducción de la presión
arterial sistólica y la presión arterial diastólica,
respectivamente, en un grupo de seres humanos a los que se
administró el extracto de maracuyá.
Las Figuras 6a y 6b son dibujos que muestran
interacciones de los protones H-1 del metileno con
los H-1' y H-2' del resto
azúcar.
Las Figuras 7a y 7b son cromatogramas de
HPLC-ELSD de los extractos de piel y pulpa de
maracuyá, respectivamente, obtenidos en condiciones idénticas.
La Figura 8 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la proporción de pacientes
que tienen sibilancias, un síntoma del asma, antes y después del
tratamiento; los pacientes asmáticos recibieron placebo o extracto
de maracuyá (150 mg/día) durante cuatro semanas; los datos se
muestran como media \pm ETM. *P < 0,05 en comparación
con el grupo con placebo.
La Figura 9 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la proporción de pacientes
que tienen tos, un síntoma del asma, antes y después del
tratamiento; los pacientes asmáticos recibieron placebo o extracto
de PFP (150 mg/día) durante cuatro semanas; los datos se muestran
como media \pm ETM. *P < 0,001 en comparación con el
grupo con placebo.
La Figura 10 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la proporción de pacientes
que tienen falta de aliento, un síntoma del asma, antes y después
del tratamiento; los pacientes asmáticos recibieron placebo o
extracto de PFP (150 mg/día) durante cuatro semanas; los datos se
muestran como media \pm ETM. *P < 0,005 en comparación
con el grupo con placebo.
La Figura 11 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre el volumen espiratorio
forzado en el primer segundo (porcentaje del esperado), antes y
después del tratamiento en pacientes asmáticos que recibieron
placebo o extracto de maracuyá (150 mg/día) durante cuatro semanas;
los datos se muestran como media \pm ETM.
La Figura 12 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la capacidad vital forzada
(porcentaje de la esperada), antes y después del tratamiento en
pacientes asmáticos que recibieron placebo o extracto de maracuyá
(150 mg/día) durante cuatro semanas; los datos se muestran como
media \pm ETM.
La Figura 13 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre el índice de flujo espiratorio
máximo (l/min), antes y después del tratamiento en pacientes
asmáticos que recibieron placebo o extracto de maracuyá (150
mg/día) durante cuatro semanas; los datos se muestran como media
\pm ETM. *P < 0,05 en comparación con el grupo con
placebo.
La Figura 14 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la subescala de dolor WOMAC
antes y después del tratamiento en pacientes con artrosis que
recibieron placebo o extracto de maracuyá (150 mg/día) durante un
mes.
La Figura 15 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la subescala de rigidez WOMAC
antes y después del tratamiento en pacientes con artrosis que
recibieron placebo o extracto de maracuyá (150 mg/día) durante un
mes.
La Figura 16 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la subescala de función
física WOMAC antes y después del tratamiento en pacientes con
artrosis que recibieron placebo o extracto de maracuyá (150 mg/día)
durante un mes.
La Figura 17 es una representación gráfica del
efecto del extracto de maracuyá sobre la puntuación compuesta WOMAC
antes y después del tratamiento en pacientes con artrosis que
recibieron placebo o extracto de maracuyá (150 mg/día) durante un
mes.
Como se describe en la presente memoria, el
término "maracuyá" se refiere generalmente al fruto que incluye
tanto la piel como la pulpa comestible. La expresión "piel de
maracuyá" se usa para referirse a la parte restante del fruto
después de que se haya retirado la pulpa comestible del interior.
Las expresiones "extracto de maracuyá", "PFP" y
"extracto de PFP" se usan para referirse al extracto de
maracuyá preparado según los métodos descritos en los ejemplos de
las realizaciones preferidas de la presente invención. El análisis
de HPLC indica que el extracto de maracuyá contiene varios
flavonoides, incluyendo quercetina, galactósido de quercetina,
glucósido de quercetina, luteolina, glucósido de luteolina,
3-glucósidos de cianidina, catequina y epicatequina
(Figura 1).
Los componentes de flavonoides y cianidinas del
extracto inhiben la formación de superóxido y la producción de
óxido nítrico por la iNOS, mejorando de este modo la disfunción
endotelial y disminuyendo la presión arterial. Se ha demostrado que
la quercetina inhibe el ARNm de iNOS y la producción de óxido
nítrico.
La hipertensión esencial humana se caracteriza
por una vasodilatación dependiente del endotelio alterada causada
por estrés oxidativo. El extracto de la invención tiene efectos
antihipertensores. Además, los componentes de flavonoides del
extracto disminuyen la presión arterial inhiben la oxidación de LDL
e inhiben la agregación plaquetaria, ejerciendo de este modo una
acción protectora cardiovascular. Se señala que los componentes del
extracto incluyen quercetina, un compuesto que se sabe que tiene
actividad antihipertensora, pero la cantidad contenida en el
extracto es menor de entre aproximadamente el 1 y 5% y no es
suficiente para explicar sustancialmente las actividades
antihipertensoras del extracto. De hecho, ninguno de los
constituyentes previamente conocidos del extracto están presentes
en cantidades suficientes para proporcionar los efectos observados
en solitario.
También se prevé, basándose en los datos in
vitro, que el extracto tendrá propiedades antioxidantes.
En estudios con ratas espontáneamente
hipertensas (SHR), los solicitantes encontraron que dietas
complementadas con 50 mg/kg del extracto disminuían la presión
arterial en SHR, retrasando su aumento normal de la presión
arterial debido al envejecimiento. La presión arterial sistólica era
12,3 mmHg inferior en ratas alimentadas con 50 mg/kg del extracto
en comparación con un grupo de control (P < 0,01) (Figura 2).
Además, la concentración de óxido nítrico era de
18,82 \mumol/l en ratas alimentadas con 10 mg/kg del extracto, un
40% inferior a la de ratas no alimentadas con extracto. La
concentración de óxido nítrico era de 11,07 \mumol/l en ratas
alimentadas con 50 mg/kg del extracto, un 65% inferior a la de ratas
no alimentadas con extracto (Figura 3). Esto evitará la
superproducción de óxido nítrico y su posterior reacción para formar
peroxinitrito que es perjudicial para el sistema
cardiovascular.
Los solicitantes también han encontrado, en
estudios de hígado de rata, que el extracto de maracuyá es
hepatoprotector. Se incubaron cortes de hígado de rata cortados con
precisión con 20 \mug/ml de extracto de maracuyá. A las 9 y 24
horas de incubación, los niveles de potasio en los cortes, un índice
de viabilidad, no eran significativamente diferentes de los de los
cortes de control.
Después, el extracto se incubó con cortes de
hígado de rata cortados con precisión en presencia o ausencia de
cloroformo 1 mM, un tóxico hepático. A las 6 horas de incubación y a
las 9 horas de incubación el extracto de maracuyá mostraba un
efecto hepatoprotector significativo frente a la lesión por
cloroformo. No se encontró toxicidad del extracto en este
estudio.
Los estudios in vitro también han
demostrado que el extracto aumenta la actividad Na-K
ATPasa y Ca ATPasa unida a la membrana del eritrocito humano. La
bomba Na-K ATPasa unida a la membrana de RBC tenía
una actividad mucho mayor cuando se cultivaba con el extracto a
0,25 mg/ml (aumentaba el 102%), 1 mg/ml (aumentaba el 107%) o 25
mg/ml (aumentaba el 170%) que el grupo de control (Figura 4). El
extracto a concentraciones de 1 mg/ml y 2,5 mg/ml aumentaba la
actividad Ca ATPasa unida a membrana el 78% y 41% de media.
Los solicitantes también han realizado estudios
en seres humanos (Figura 5). La Figura 5 muestra el cambio en la
SBP (presión arterial sistólica) y la DBP (presión arterial
diastólica) en pacientes hipertensos que recibieron placebo o
extracto de maracuyá (2 mg/lb/día, máximo 400 mg/día) durante cuatro
semanas. Se administraron píldoras de extracto de maracuyá o
placebo en forma de grupos paralelos aleatorizados doblemente a
ciegas a estos pacientes. Tenían una presión arterial sistólica
media de 176,60 \pm 4,90 mmHg (media \pm ETM). El tratamiento
con maracuyá disminuyó significativamente (p < 0,001) la presión
arterial sistólica hasta 145,67 \pm 4,44 mmHg (media \pm ETM)
en comparación con el grupo con placebo. Los datos también
demostraron que la complementación con extracto de maracuyá
disminuye significativamente (p < 0,001) la presión arterial
diastólica en pacientes hipertensos con una presión arterial
diastólica media de 103,27 \pm 2,30 mmHg (media \pm ETM) hasta
78,67 \pm 2,78 mmHg (media \pm ETM). Ningún paciente en el
estudio mostró cambios electrocardiográficos después de cuatro
semanas de terapia.
Debido a las actividades descritas
anteriormente, también se espera que el extracto de maracuyá
beneficie a los pacientes con enfermedades relacionadas con
inflamación tales como artritis, asma y alergias, así como
cardiopatías e hipertensión. Además, aunque se usaron ingestas o
cantidades muy grandes del extracto en los estudios descritos en
esta solicitud, no se encontró toxicidad del extracto en seres
humanos, ratas, ratones o células en cultivo.
Los expertos en la materia apreciarán que el
extracto puede administrarse a un paciente por una diversidad de
vías, incluyendo la administración oral o la inyección. La cantidad
de extracto a administrar variará ampliamente dependiendo del
paciente y de la naturaleza y del grado del trastorno a tratar.
Típicamente, el extracto se formula como una composición que puede
administrarse por vía intravenosa o por ingestión oral. La
composición puede ingerirse o administrarse por vía intravenosa a
cualquier nivel de dosificación y frecuencia de dosificación
adecuados para mejorar los síntomas de la artrosis.
La composición de la invención también puede ser
un producto alimenticio, incluyendo, pero sin limitación, un
complemento nutricional.
En el caso de una composición farmacéutica, el
extracto puede formularse en preparaciones sólidas o líquidas, por
ejemplo, comprimidos, cápsulas, soluciones, suspensiones y
dispersiones. Las formas líquidas incluyen portadores tales como
agua y etanol, con o sin otros agentes tales como tensioactivos o
agentes de suspensión farmacéuticamente aceptables.
La invención se describe además con respecto a
los ejemplos siguientes. Sin embargo, se apreciará que la invención
no se limita a estos ejemplos.
Los maracuyás (Passiflora edulis) se
cortaron en mitades y se retiró la pulpa jugosa para obtener
cáscaras vacías de piel de maracuyá. Las cáscaras se picaron en
trozos pequeños de menos de 10 mm de longitud y se colocaron en un
recipiente. Se añadió agua caliente (65-75ºC) al
recipiente para sumergir las cáscaras picadas completamente. La
mezcla se agitó ocasionalmente durante la primera hora y después se
dejó en remojo durante una noche. La mezcla se filtró y el filtrado
pasó a través de una columna de resina polimérica no iónica para
absorber el fenólico y otros compuestos orgánicos. Se pasó agua
destilada a través de la columna para eliminar por lavado los
azúcares y otros componentes polares. Después, los compuestos
absorbidos se eluyeron de la columna con metanol y el eluyente se
concentró a presión reducida para dar un concentrado oscuro. El
concentrado se secó por congelación para dar el extracto de
maracuyá como un polvo rojo oscuro. Aunque se usó metanol como el
agente de elución, también podría haberse usado etanol, alcohol
isopropílico, l-propanol o acetona.
Los componentes del extracto se determinaron
mediante HPLC. Los experimentos se realizaron en un instrumento
Hewlett Packard 1100 equipado con un detector DAD y una columna
LiChrospher 100 RP-18 (\mum) (125 x 4) mantenida
a 30ºC. El programa disolvente partía de B al 3,6% (HOAC al 2% en
acetonitrilo) en disolvente A (HOAC al 2% en agua) a B al 12% en 20
min, al 20% en 30 min y a B al 50% en 45 min. El caudal se ajustó a
ml/min y los compuestos se controlaron por absorción UV ajustada a
280 nm para los ácidos fenólicos, a 350 nm para los flavonoides y a
520 nm para las antocianinas. La identidad de los compuestos se
confirmó por comparación de los tiempos de retención y de los
espectros UV/visible con materiales auténticos.
Se prepararon membranas de eritrocitos como se
ha descrito anteriormente (Farrance, ML., y Vincenzi, FF. (1977)
Biochim Biophys Acta 471: 49-58). En resumen,
se extrajo sangre de seres humanos sanos. Se lavaron los eritrocitos
con solución salina y se lisaron en un tampón de imidazol
hipotónico (pH 7,4, 20 mM, Sigma) con EGTA (100 mM, Sigma) y PMSF
(10 mM, Sigma). Las membranas se lavaron con tampón de imidazol (20
mM) que contenía EGTA y PMSF, tampón de imidazol que contenía EGTA
y tampón de imidazol solamente, una vez con cada uno de forma
secuencial. El lavado final era en tampón de
imidazol-histidina 40 mM (pH 7,4) y las membranas se
almacenaron en un frigorífico (4-8ºC) en nitrógeno.
Antes del ensayo, se incubó la membrana de RBC (0,75 mg/ml) durante
30 minutos a 37ºC con 0, 0,25, 1, 2,5 mg/ml de extracto de piel de
maracuyá y suficiente solución salina para alcanzar un volumen
final de 1 ml. Después de la incubación y centrifugación, los
sobrenadantes se retiraron y la membrana se resuspendió en solución
salina hasta 1 ml. Después de eso, se midieron las actividades de
las ATPasas de membrana simultáneamente en placas multipocillo. La
mezcla de ensayo típica contenía membrana de RBC (75 \mug/ml),
imidazol-histidina 18 mM (pH 7,1, Sigma), MgCl_{2}
3 mM, NaCl 80 mM, KCl 15 mM, CaCl_{2} 0,2 mM, EGTA 0,1 mM,
Ouabaína 0,1 mM (Sigma) y CaM 30 nM (sólo para la bomba de Ca^{2+}
activada por CaM, Sigma). Después de una preincubación de 15
minutos a 37ºC, se añadió SDS al 5% (Sigma) a los grupos de control.
La reacción enzimática se inició con ATP 3 mM. Después de 60
minutos a 37ºC, la reacción se interrumpió con SDS al 5%; y el
fosfato inorgánico liberado se midió con una mezcla de molibdato de
amonio/ácido ascórbico y la absorción se midió a una longitud de
onda de 820 nM mediante un Lector Automático de Microplacas
(Bio-Tek Instruments, EL31 1 Estados Unidos). Para
mayor precisión, se realizó un ensayo BCA para determinar la
concentración final de proteína dentro de los tubos al final de
cada ensayo. Se añadió membrana (25 \mul) del experimento
anterior, 25 \mul de ddH_{2}O y 1 ml de reactivo de color en un
tubo y después se incubó durante 30 min a 37ºC. Entretanto, se
incubó una proteína patrón (Albúmina, Sigma) a diferentes
concentraciones. Después de la incubación, cada tubo se enfrió a
temperatura ambiente. Se midió la absorbancia de luz mediante un
espectrofotómetro (Beckman Coulter, DU640) a X = 562 nm. Se leyó la
concentración de proteína de la membrana a partir de la curva
patrón.
La actividad de ATPasa se calculó mediante:
Se mantuvieron ratas espontáneamente hipertensas
(SHR) de 6 semanas de edad a de 22 a 20ºC y una humedad del 50%
durante el experimento. Se dividieron 24 SHR en 3 grupos con 8 ratas
en cada grupo. Se alimentaron con las siguientes dietas: dieta
básica, dieta básica complementada con el extracto de maracuyá a 50
mg/kg o dieta básica complementada con el extracto de maracuyá a 10
mg/kg (Tabla 1). La cantidad de ingesta de alimento, el peso
corporal y la presión arterial sistólica se registraron una vez por
semana. Se midió la presión arterial sistólica mediante el método
del manguito en la cola (Softron, Co. Ltd, Tokio, Japón). Después de
8 semanas de alimentación, todas las ratas se sacrificaron bajo
anestesia con Nembutal (0,1 mg/100 g de peso corporal, Wako, Co.
Ltd., Japón). Se aisló timo, bazo, hígado y corazón y se pesaron. No
se observó toxicidad.
Se realizó la medición de óxido nítrico como se
ha descrito anteriormente (Rockett, KA., Awburn, MM., Cowden, WB. y
Clark, JA. (1991) Infect Immun 59: 3280-3).
El óxido nítrico se convierte fácilmente en nitrito. Se midió el
nitrato para el óxido nítrico. Se realizaron diluciones de
NaNO_{2} (BDH; Wako, Co. Ltd., Japón) y compuestos de ensayo en
agua destilada en placas de fondo plano de 96 pocillos a un volumen
final de 50 \mul. Se añadieron 20 microlitros de tampón borato
NH_{4}Cl a todos los pocillos que requerían análisis para el
óxido nítrico/nitrito. Después se añadieron 50 \mul de reactivo de
Griess [sulfanilamida al 1% más diclorhidrato de
N-(1-naftil)etilendiamina al 0,1% (Wako, Co.
Ltd., Japón) en H_{2}SO_{4} 2 M] a los pocillos a analizar para
determinar el óxido nítrico/nitrito. La placa se leyó a 540 nm
(ensayo) y se leyeron las concentraciones de óxido nítrico y
nitrito directamente a partir de una curva patrón de nitrito.
Se incluyeron en el estudio personas con
hipertensión, 14 hombres con edades de 57,0 \pm 14,48 años (media
\pm DT) y 16 mujeres con edades de 57,56 \pm 12,75 años (media
\pm DT). Los pacientes tenían hipertensión de fase 1 ó 2 según
las directrices del Joint National Committee on Detection,
Evaluation, and Treatament of High Blood Pressure. En mediciones de
presión arterial repetidas, tenían una presión arterial sistólica
(SBP) de entre 144 y 210 mmHg y una presión arterial diastólica
(DBP) de entre 80 y 120 mmHg. Los criterios de exclusión incluían
aquellos con enfermedad renal o cardiaca, que estuvieran tomando
anticonceptivos orales, que consumieran tabaco y alcohol o que
estuvieran tomando cualquier complemento vitamínico distinto de un
solo comprimido multivitamínico diario. Todos los sujetos incluidos
estaban tomando una terapia de combinación antihipertensora que
incluía un diurético, un bloqueante beta y un inhibidor de la ACE.
Se examinaron más de cien para seleccionar los treinta
participantes, ninguno de los cuales se retiró durante el
estudio.
Al comienzo del estudio, los grupos de maracuyá
y placebo no diferían en la presión arterial media (SBP, 176,60
\pm 4,90 frente a 179,67 \pm 3,79 mmHg y DBP, 103,27 \pm 2,30
frente a 104,33 \pm 2,06 mmHg), edad, sexo, altura, peso,
frecuencia cardiaca y medicación pretratamiento contra la
hipertensión o patrón de ECG.
El estudio se autorizó por el Comité de Sujetos
Humanos de la Universidad de Mashhad. Después de proporcionar
consentimiento informado y de la retirada durante una semana de
cualquier tratamiento antihipertensor previo excepto el
Triamtereno-H en dos sujetos, los pacientes que
cumplían los requisitos fueron admitidos en un estudio de grupos
paralelos controlado con placebo doblemente a ciegas de cuatro
semanas. Se pidió a los pacientes que acudieran a la clínica para
un seguimiento todas las semanas durante el estudio para evaluar los
efectos secundarios. Además, se midió la presión arterial y la
frecuencia cardiaca. En la primera visita se realizó una historia
médica completa y un examen físico incluyendo un electrocardiograma.
Se midió la presión arterial por una enfermera titulada después de
que el sujeto hubiera estado sentado descansando durante 10 minutos.
Se tomaron las fases I y V de Korotkoff como las presiones
arteriales sistólica y diastólica, respectivamente. Se tomaron
lecturas repetidas a intervalos de 2 minutos para un total de 3
mediciones sentado cada visita. Se registró el promedio de
mediciones repetidas en una visita dada. En la segunda visita, se
evaluó la presión arterial y la frecuencia cardiaca de nuevo y los
pacientes se aleatorizaron para recibir una dosificación dos veces
al día de 2 mg/lb/día (máxima de 400 mg/día) de una fórmula
estadística de píldora de maracuyá o un placebo de aspecto similar
durante 4 semanas. Los datos para la semana 1 y la semana 0 se
combinaron como valores basales. En la última visita, para cada
paciente se realizó un ECG y se recogió el fármaco de estudio. Se
registraron todos los cambios en medicaciones concomitantes y
acontecimientos adversos clínicos, ya fueran dados voluntariamente
u obtenidos por interrogatorio, en las visitas inicial y de
seguimiento, no describiéndose ninguno.
Se evaluó la conformidad por recuento de
comprimidos. Durante el periodo de tratamiento de cuatro semanas
todos los sujetos tomaron el 100% por cien de las píldoras
proporcionadas a ciegas. Todos los ensayos se realizaron de dos a
cuatros horas después del último consumo de píldoras.
Se disolvió extracto de peladura de maracuyá
preparado según el Ejemplo 1 en etanol acuoso al 50% y se trató en
una columna Sephadex LH20 y se eluyó con etanol acuoso al 50%. Las
fracciones cromatográficas se recogieron en tubos de 20 ml con
ayuda de un colector de fracciones. Las fracciones se controlaron
mediante cromatografía en capa fina usando TLC de celulosa revelada
con ácido acético acuoso al 6% y visualizada bajo UV. En esta
condición, el nuevo compuesto (Rf 0,8) coeluía con la fracción de
antocianinas coloreadas (Rf 0,4-0,5). Esta fracción
se recogió y se concentró y se volvió a someter a cromatografía en
una columna de MCI GEL CHP 20P adquirida en Mitsubishi Chemical
Industries Ltd. usando metanol acuoso al 15% como el disolvente de
elución. Las fracciones se recogieron y se controlaron mediante TLC
de celulosa revelada con BuOH
terciario-AcOH-H_{2}O (3/1/1
v/v). Las fracciones que contenían el nuevo compuesto (Rf 0,9 con
este disolvente) se recogieron y el disolvente se evaporó y el
residuo se secó por congelación.
Se realizó una espectrometría de masas de alta
resolución con ionización por electropulverización del ácido
edulílico en una estación de trabajo de bioespectrometría MARINER en
la Universidad Victoria de Wellington, Nueva Zelanda, que
funcionaba en el modo ión negativo para dar un pico
(M-H)-^{1} a 301,09691 que se
correspondía con la fórmula molecular C_{13}H_{18}O_{8}. Se
realizaron diversos estudios de RMN (1H, 13C, COSY, HMQC, HMBC y
NOSEY) y de espectrometría de masas sobre el ácido edulílico. La
Tabla 1 contiene los datos de los estudios de RMN.
Basándose en esto, se proporciona a continuación
la estructura química del ácido edulílico. El enlace beta del resto
glucosa se asigna debido a la gran magnitud de acoplamiento J (J =
7,3 Hz) del protón anomérico.
El dibujo de la molécula se preparó usando el
programa informático ACD/ChemSketch que proporcionó el nombre de la
IUPAC de ácido
(2E)-ciclopent-2-en-1-iliden((3,4,5-trihidroxi-6-(hidroximetil)tetrahidro-2H-piran-2-il)oxi)acético.
El compuesto se ha identificado por toda esta memoria como "ácido
edulílico", habiéndose encontrado originariamente en el fruto de
Passiflora edulis. La estructura del ácido edulílico
representada anteriormente es el isómero E o trans.
Se espera que el ácido edulílico experimente una enolización
cis/trans hacia la forma Z o cis y de vuelta a
la anterior. El desplazamiento de electrones puede ir desde los
protones C-2 a través del resto ácido acético o
desde el resto ácido acético y viajar en la dirección opuesta para
dar el mismo resultado cis/trans.
El espectro NOESY del ácido edulílico en
D_{2}O muestra que existe cierta interacción del protón anomérico
del azúcar con los protones de metileno en C-1 según
la numeración en la estructura mostrada anteriormente (Figuras 6a y
6b). Esto sólo es posible si el resto ácido carboxílico está en el
lado del doble enlace del anillo de ciclopenteno. Estudios
adicionales usando un modelo Dreiding para el ácido edulílico
muestran que la orientación del resto azúcar que ofrece la menor
aglomeración en el anillo de ciclopenteno situaba de hecho el
protón anomérico en estrecha proximidad a los protones de metileno
en C-1.
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Se preparó un extracto acuoso de pulpa de
maracuyá de una forma similar a la descrita en el Ejemplo 1 con
respecto a la piel y se examinó su perfil químico usando HPLC. Se
usó una programación de disolvente de HPLC diferente usando metanol
en lugar de acetonitrilo para resolver con éxito los picos de ácido
edulílico y prunasina. Además, en lugar de detección UV se usó
detección evaporativa de dispersión de luz (ELSD) para una mejor
detección de compuestos de débil absorción UV tales como prunasina.
Las Figuras 7a y 7b muestran los cromatogramas de HPLC de los
extractos de la piel y de la pulpa, respectivamente, obtenidos en
dichas condiciones. Aunque los extractos de piel y pulpa eran
claramente distinguibles por su perfil de HPLC, también era evidente
que tanto el ácido edulílico como la prunasina estaban presentes en
ambos extractos.
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Materiales y Métodos. El Comité de
Sujetos Humanos de la Universidad de Mashhad autorizó el estudio. Se
incluyeron en el estudio los pacientes que cumplían los criterios
de la Sociedad Torácica Americana para el asma y que cumplían los
criterios de admisión. Estos incluían ser asmático y de una edad
comprendida entre los 18 y los 60 años de edad, con valores del
índice de flujo espiratorio forzado en un segundo (FEB1) basales del
30-75% del normal esperado, con un aumento en el
FEV1 de más del 15% por encima de los valores pretratamiento después
de dos descargas de un agonista beta-adrenérgico.
Se excluyeron los voluntarios con pruebas clínicas de enfermedad
pulmonar obstructiva crónica, problemas renales, hepáticos y
cardiacos, enfermedades endocrinas, hipertensión o gestación. Se
les permitió tomar sus medicaciones habituales excepto
glucocorticoides, antagonistas de leucotrienos, multivitaminas,
aspirina o cualquier AINE.
Diseño del Estudio. Después de
proporcionar consentimiento informado los pacientes que cumplían los
requisitos fueron admitidos en un estudio de grupos paralelos
controlado con placebo doblemente a ciegas de cuatro semanas. Se
realizó un examen físico completo y se obtuvieron los valores
espirométricos basales en la visita de inclusión en el estudio. Se
realizó una espirometría en cada visita siguiente. La gravedad de
los síntomas se valoró en una escala de 4 puntos: síntomas leves de
asma: conciencia de síntomas de asma y/o signos que eran fácilmente
tolerados (puntuación 1 = sólo necesita medicina de rescate,
puntuación 2 = necesita medicación diaria), síntomas moderados y
dependencia de medicaciones diaria (puntuación 3), síntomas graves y
dependencia de medicación diaria (puntuación 4). Se incluyeron en
el estudio personas con asma. Los criterios de exclusión incluían
aquellos con enfermedad renal o cardiaca, que estuvieran tomando
anticonceptivos orales, que consumieran tabaco y alcohol o que
estuvieran tomando cualquier complemento vitamínico distinto de un
solo comprimido multivitamínico diario. Se examinaron más de cien
para seleccionar a los participantes.
Se pidió a los pacientes que acudieran a la
clínica para un seguimiento todas las semanas durante el estudio
para evaluar los efectos secundarios. En la primera visita se
realizó una historia médica completa y un examen físico incluyendo
ensayos de pinchazo en la piel y de la función hepática. Una
enfermera titulada midió la presión arterial después de que el
sujeto hubiera estado sentado descansando durante 10 minutos. En la
segunda visita, se evaluó de nuevo el aire inhalado y espirado y la
falta de aliento y los pacientes se aleatorizaron para recibir la
píldora de extracto de PFP 150 mg/día o una píldora de placebo de
aspecto similar durante 4 semanas. Las píldoras se tomaban por la
mañana. Los datos para la semana 1 y la semana 0 se combinaron como
valores basales. En la última visita, para cada paciente se realizó
un ECG y se recogió el extracto de estudio. Se registraron todos
los cambios en medicaciones concomitantes y acontecimientos adversos
clínicos, ya fueran dados voluntariamente u obtenidos por
interrogatorio, en las visitas inicial y de seguimiento, no
describiéndose ninguno. Se evaluó la conformidad por recuento de
comprimidos. Durante el periodo de tratamiento de cuatro semanas
todos los sujetos tomaron el 95% por ciento de las píldoras
proporcionadas a ciegas. Todos los ensayos se realizaron de dos a
cuatro horas después del último consumo de
píldoras.
píldoras.
Estadísticas. Las variables de eficacia
primarias eran los cambios desde las medidas basales en las
puntuaciones de síntomas de asma y los ensayos de función pulmonar
(FEV^{1}% esperado, FEV^{1}/FVC). Las variables de eficacia
secundarias incluían los niveles séricos de citocinas Th1 y Th2
(IL-2 e IL-4). Los efectos de la
terapia con extracto de PFP en cada sujeto y para cada parámetro se
evaluaron usando una prueba t de dos colas para muestras
relacionadas. Una probabilidad de menos de 0,05 se consideraba
significativa y se confirmó con un ensayo no paramétrico, el
Análisis de Varianza por Rangos de Medidas de Friedman. Ese ensayo
mostraba si al menos uno de los grupos ensayados difería de los
otros grupos. La diferencia estadística significativa entre grupos
experimentales se analizó mediante el método de ecuaciones de
estimación generalizadas (usando el programa informático Stata) y
la prueba t de Student (usando el programa informático SPSS).
Resultados. Las características
demográficas incluían 13 mujeres y 6 hombres a los que se les
administró placebo y 16 sujetos femeninos y 8 masculinos que
tomaron píldoras de extracto de PFP. De los 44 pacientes incluidos
en el estudio, 42 completaron el estudio, retirándose 2. Su edad
media era de 34 años.
Además, la altura, el peso y la medicación
pretratamiento contra el asma no diferían significativamente (no se
muestran los datos). Las píldoras de extracto de PFP o placebo se
administraron en forma de grupos paralelos aleatorizados doblemente
a ciegas durante cuatro semanas a los pacientes con asma. Tenían un
promedio de 130 a 70 mmHg (media +/- 120/70).
De los pacientes que tenían sibilancias como
síntoma clínico sólo el 20% las tenía todavía después del
tratamiento con PFP mientras que todavía las tenía el 80% en el
grupo con placebo (Figura 8). De forma similar, los que tenían tos
se redujeron el 85% durante el tratamiento con PFP mientras que la
tos se redujo sólo el 45% en el grupo con placebo (Figura 9). Se
encontró falta de aliento en el 90% de los pacientes antes del
tratamiento con PFP mientras que estaba presente sólo en el 10%
después (Figura 10). En los sujetos tratados con placebo, el 80%
tenía falta de aliento antes del tratamiento y el 38% después, una
disminución menor no significativa (Figura 10). El FEV^{1}
aumentó en los sujetos tratados con PFP y con placebo (Figura 11).
Sin embargo, el aumento era estadísticamente significativo sólo en
el grupo con PFP. La Capacidad Vital Forzada aumentó en los sujetos
tratados con PFP y disminuyó en los sujetos tratados con placebo
(Figura 12). El flujo espiratorio máximo aumentó significativamente
debido al tratamiento con PFP mientras que el placebo no tuvo efecto
(Figura 13).
Discusión. Los resultados de este estudio
piloto indican que el extracto de PFP puede ser un ingrediente de
complemento dietético valioso en el tratamiento de los síntomas del
asma crónica. Los resultados principales del presente estudio son
(A) que el extracto de PFP producía reducciones clínicamente y
estadísticamente significativas en los síntomas del asma después de
cuatro semanas de complementación en pacientes y (B) aumentaba el
aire espirado forzado y el flujo de aire espiratorio máximo. Estas
observaciones muestran que el PFP y sus fuertes propiedades
antioxidantes tenían acciones antiinflamatorias que confirman
estudios recientes en los que el PFP reducía la hipertensión grave
en personas y animales. Puesto que los sujetos sólo recibieron el
extracto de PFP durante 4 semanas, un tratamiento más prolongado
podría aumentar sus efectos beneficiosos.
\vskip1.000000\baselineskip
Materiales y Métodos. El Comité de
Sujetos Humanos de la Universidad de Mashhad autorizó el estudio. Se
incluyeron en el estudio los pacientes que cumplían los criterios
del Colegio Americano de Reumatología para artrosis de rodilla
primaria (grado 1 y grado 2) y que cumplían los criterios de
admisión. Los incluidos tenían entre 25 y 65 años de edad, tenían
un índice de subescala de dolor "WOMAC" (Índice de Artrosis de
las Universidades Western Ontario y McMaster) de al menos 20 en las
medias basales y tenían dolor intermitente o constante en la
rodilla diana durante al menos el 50% del tiempo en los últimos tres
meses que requería tratamiento médico en forma de AINE o
inhibidores selectivos de la COX-2 la mayoría de los
días. Los criterios de exclusión eran la existencia de artrosis
secundaria debida a un trastorno conocido, artroscopia, cirugía o
una inyección articular de la rodilla diana en los seis meses
anteriores, historia previa de sustitución de la articulación de la
rodilla, o tener cualquier enfermedad sistémica grave; o tener o
cualquier otro trastorno inflamatorio crónico.
Diseño del Estudio. Después de
proporcionar el consentimiento informado los pacientes que cumplían
los criterios fueron admitidos en un estudio de grupos paralelos
aleatorizados controlado con placebo doblemente a ciegas de un mes.
Se realizó un examen físico completo y evaluación con rayos x en la
visita inicial. En la segunda visita (basal) los pacientes
completaron el cuestionario de WOMAC y se repartieron para recibir
extracto de PFP (50 mg, tres veces al día) o placebo
correspondiente. Las características basales de los sujetos de
estudio se exponen en la Tabla 2.
En la última vista, que era un mes después de la
visita inicial, el efecto del tratamiento sobre el dolor articular,
la rigidez y la limitación de la función física se evaluaron usando
el índice de WOMAC.
Estadísticas. Se realizaron análisis
estadísticos con el programa SPSS versión 11.5. Los valores
obtenidos a partir del grupo con PFP se compararon con el grupo con
placebo usando una prueba t de Student. Los ensayos no
paramétricos comparables (Kruskal-Wallis y el ensayo
de suma de rangos) se sustituyeron cuando fallaban los ensayos para
normalidad e igual varianza.
Resultados. Se administraron píldoras de
extracto de PFP o un placebo similar a pacientes durante cuatro
semanas y se evaluó la conformidad por recuento de las píldoras
cada visita. Se registraron los valores del índice de WOMAC, se
calculó el promedio y se realizó una evaluación estadística para
cada uno de los parámetros de ensayo incluyendo dolor, rigidez,
función física y una puntuación compuesta. La Figura 14 muestra que
existía una disminución estadísticamente significativa (P <
0,05) en la subescala de dolor en pacientes tratados con el
extracto de maracuyá (150 mg/día) durante cuatro semanas respecto a
las medidas basales y al grupo con placebo. El parámetro de
subescala de rigidez mostraba que existía una disminución
estadísticamente significativa en la rigidez en el grupo con
extracto de maracuyá respecto a las medidas basales pero no respecto
al grupo con placebo (Figura 15). Existía una mejora
estadísticamente significativa (P < 0,05) en la función física
respecto a la basal y al grupo con placebo en el grupo con extracto
de maracuyá (Figura 16). Una reducción en el valor de la subescala
de función física WOMAC indica una mejora en la función física. Las
puntuaciones compuestas WOMAC (dolor, rigidez y función física
combinadas) también se mejoraron estadísticamente (P < 0,05) en
el grupo con extracto de maracuyá respecto a las medidas basales y
al grupo con placebo después del tratamiento de cuatro semanas con
150 mg de extracto de maracuyá al día (Figura 17).
Discusión. Los datos del estudio piloto
de artrosis muestran que el extracto de maracuyá tiene actividad en
la disminución de los efectos de la artrosis en seres humanos. El
índice de WOMAC es una medida validada de los parámetros de
artrosis y es bien respetada en la profesión médica. La actividad
del extracto de maracuyá sobre los síntomas relacionados con la
artrosis se deben muy probablemente a sus efectos antiinflamatorios
y antioxidantes. El extracto de maracuyá podría administrarse como
un ingrediente de complemento dietético para el paciente con
artrosis que pueda desear una terapia alternativa a los AINE o que
pueda querer complementar su dieta para mejorar su salud
general.
La descripción anterior y los dibujos comprenden
realizaciones ilustrativas de las presentes invenciones. Las
realizaciones anteriores y los métodos descritos en la presente
memoria pueden variar basándose en la capacidad, experiencia y
preferencia de los expertos en la materia. La simple enumeración de
las etapas del método en cierto orden no constituye ninguna
limitación del orden de las etapas del método. La descripción
anterior y los dibujos simplemente explican e ilustran la invención
y la invención no se limita a los mismos excepto en la medida en
que la limiten las reivindicaciones. Los expertos en la materia que
tengan delante la descripción serán capaces de realizar
modificaciones y variaciones en la misma sin alejarse del alcance
de la invención.
Claims (5)
1. Extracto obtenible de la piel de un maracuyá
mediante extracción acuosa para el uso en el tratamiento o la
mejoría de los síntomas de la osteoartritis en un mamífero.
2. Extracto para el uso según se define en la
reivindicación 1, en el que el mamífero es un ser humano.
3. Uso de un extracto obtenible de la piel de un
maracuyá mediante extracción acuosa en la fabricación de un
medicamento destinado al tratamiento o mejoría de los síntomas de la
osteoartritis.
4. Composición farmacéutica que comprende un
extracto obtenible de la piel de un maracuyá mediante extracción
acuosa en combinación con un portador farmacéuticamente aceptable
para el uso en el tratamiento o la mejoría de los síntomas de la
osteoartritis.
5. Uso de una composición farmacéutica que
comprende un extracto obtenible de la piel de un maracuyá mediante
extracción acuosa en combinación con un portador farmacéuticamente
aceptable en la fabricación de un medicamento destinado al
tratamiento o mejoría de los síntomas de la osteoartritis.
Applications Claiming Priority (2)
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