ES2345099T3 - Feromonas tranquilizantes aviarias para disminuir el estres, la ansiedad y la agresividad. - Google Patents

Abstract

Una composición que comprende una feromona tranquilizante para aves, que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico, y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

Description

Feromonas tranquilizantes aviarias para disminuir el estrés, la ansiedad y la agresividad.

La presente invención se refiere a una composición que comprende una mezcla de ácidos grasos o sus derivados, procedente de las secreciones de las glándulas uropigiales de las aves. Esta composición, denominada una feromona tranquilizante para aves, se puede utilizar para disminuir el estrés, la ansiedad y la agresividad en las aves.

Técnica anterior

El estrés, por definición, es la reacción del cuerpo de un animal a fuerzas de naturaleza perjudicial, infecciones, y diferentes estados anormales que tienden a alterar la homeostasis.

Los animales expuestos a estrés responden con cambios en la actividad de los sistemas autónomo y neuroendocrino y en el comportamiento. La activación de estos sistemas biológicos es un requisito previo para que el animal se enfrente al estrés y, por lo tanto, es el recurso principal que proporcionará la defensa biológica adecuada frente a una amenaza que desafíe la homeostasis del animal. Moberg, G. P. Animal Stress, pp. 27-49 (1985); Vogel, W. H. Neuropsychobiology, 13, p. 1290 (1985).

El estrés está asociado con una agresión objetiva, y las consecuencias aparecen alterando diferentes sistemas, tales como los sistemas humoral, metabólico, inmunológico y/o de comportamiento. La respuesta hormonal está tradicionalmente determinada por una liberación de cortisol, una disminución de la secreción de la hormona de crecimiento, y un aumento de la secreción de las hormonas tiroideas, y también de los esteroides sexuales. El estrés también tiene un papel para disminuir ya sea directa o indirectamente la cantidad de consumo, que es el problema principal con los criadores de animales. Esta disminución en la cantidad del consumo en los animales puede ser causada por un aumento en el metabolismo o una disminución en el consumo de alimento debido al estrés.

De una manera más específica, el estrés se puede observar mediante un examen de diversos elementos clínicos en la sangre. Se sabe que, en un estado estresante, se produce un aumento en la relación H/L (heterófilos/linfocitos; significando los heterófilos todos los glóbulos blancos sanguíneos que no son linfocitos en las aves), y un aumento en el nivel de hormonas, tales como la T4 circulante (tiroxina), cortisol y prolactina. Davis y Siopas, Poultry Science, 66, pp. 34-43 (1987).

El aumento de T4 en las aves da como resultado la alteración de diferentes estados fisiológicos bien conocidos, tales como un aumento en el nivel de catabolismo de los carbohidratos, una desregulación de la termo-regulación, un aumento en el latido cardíaco y un aumento en el calcio de la orina y fecal. Idelman, Col. Grenoble Science PUB (1990).

Los agentes estresantes fisiológicos también pueden dar como resultado una secreción de corticosterona anormalmente elevada. Campo J. L., S. G. Davila, Poult. Sci. 81: 1637-1639, (2002); Moberg G. P., En: The Biology of animal stress (Moberg & Mench Ed.), CABI, 1-23 (2000).

Además de los ensayos o pruebas fisiológicos, también se pueden llevar a cabo ensayos de comportamiento para evaluar el estrés y/o el miedo en las aves. Uno de los ensayos de comportamiento más utilizado es el ensayo de inmovilidad tónica (abreviadamente TI por la expresión inglesa Tonic Immobility), que se describe por Campo J. L., S. G. Davila, Poult. Sci. 81: 1637-1639 (2002).

Se puede apreciar que el cambio en los estados fisiológicos debido al estrés en las aves, puede dar como resultado, en algunos casos, efectos fatales tales como mortalidad y en muchos casos pérdida de peso. Además, el estrés puede causar cambios de comportamiento que den como resultado agresividad, tal como picar a otras aves, canibalismo, y puede causar daño a la piel en los establecimientos de aves. El estrés es un perjuicio real al avicultor, debido a que da como resultado menos producción de las aves.

Por consiguiente, una disminución del estrés en las aves, y en especial en la cría de aves, conduciría a menos mortalidad, más ganancia de peso, y una producción de más alta calidad, dando como resultado una mayor ganancia financiera para el avicultor.

Las ventajas resultantes de una disminución del estrés en las aves son extremadamente beneficiosas para los avicultores que utilizan alojamientos confinados. En el alojamiento confinado, se cría un gran número de aves en jaulas, en gallineros, y hay un gran número de aves por jaula. Debido a que las aves están confinadas en una pequeña superficie con otras aves, los niveles de estrés son más altos en comparación con las aves que se crían en un sistema de espacio libre. El estrés en las aves en los sistemas de alojamiento confinados, por consiguiente, puede conducir a una gran pérdida en el rendimiento (Craig J. V. y W. M. Muir, Poult. Sci. 75 294-302 (1996), debido al comportamiento de picarse las plumas (Kjaer J. B. y P. Sorensen, Br. Poult. Sci. 38: 333-341 (1997)), a una más alta relación de alimento a ganancia (Buitenhuis A. J. et al., 7^{th} WCGALP, Montpellier-Francia, Comunicación Número 14-06), una más alta mortalidad (Buitenhuis A. J. et al., 7^{th} WCGALP, Montpellier-Francia, Comunicación Número 14-06), y/o una mala calidad de la carne (aves muertas) (Tankston J. D. et al., Poult. Sci. 80: 1384-1389 (2001)).

En un sistema de alojamiento confinado, las aves permanecen en interiores y se les proporcionan veinticuatro horas de luz al día para alentar el consumo de alimento. Los desechos se extienden en general sobre el suelo de los gallineros, el cual actúa para absorber la humedad, diluir el estiércol, y proporcionar acojinamiento y aislamiento para las aves. En la industria convencional, el desecho se extiende de 5,08 a 10,16 centímetros de profundidad, y se mantiene con un contenido de humedad del 20% al 30%. En general hay un período de descanso de aproximadamente una semana entre bandadas, cuando se limpian los gallineros para eliminar las tortas de residuos.

Por definición, las feromonas son sustancias liberadas por el cuerpo, que causan una reacción predecible en otro individuo de la misma especie.

Se sabe que un número de glándulas diferentes producen feromonas en mamíferos machos, tales como las glándulas salivales submaxilares, las glándulas paratiroides, y las glándulas sebáceas.

Las feromonas que son secretadas en las glándulas salivales submaxilares y paratiroides en los machos, se utilizan para marcar a las hembras durante el cortejo. En los cerdos machos (verracos), la secreción de estas glándulas da como resultado un comportamiento incierto. Se sabe que estas secreciones contienen una mezcla de androstenol y androsterona.

En la técnica se sabe que se pueden utilizar feromonas de mamíferos para disminuir el estrés, la ansiedad, y la agresividad, como se demuestra en las Patentes de los Estados Unidos Nº 6.077.87?; 6.054.481, y 6.169.113. Estas feromonas se obtuvieron de secreciones de glándulas mamarias de mamíferos. Sin embargo, las glándulas mamarias no existen en las aves. Además, existen algunas dudas entre los especialistas acerca de la presencia de feromonas en las aves, debido a que no hay un órgano vomeronasal, el cual es un órgano sensorial con su propia ruta hacia el cerebro.

Las glándulas uropigiales en las aves son una glándula holocrina bilobulada con secreciones que desempeñan varias funciones en las aves. Estas funciones incluyen la repelencia al agua de las plumas, la fabricación de precursores de vitamina D, el mantenimiento de la flexibilidad del pico, piel y suministro de plumas, y la prevención de infecciones bacterianas. Las secreciones de la glándula uropigial en general se extienden sobre las plumas durante el acto de arreglarse las plumas con el pico y por lo tanto, son las que hacen a las plumas repelentes del agua.

Bohnet et al., en Journal of Biochemistry, Volumen 226, Nº 15, pp. 9795-9804 (1991), describen la producción, en ánades hembras, de feromonas sexuales, que son diésteres de ácidos 3-hidroxi-grasos en sus glándulas uropigiales durante la temporada de apareamiento. Fuera de la temporada de apareamiento, la glándula uropigial solamente produjo una cera de monoéster usual. No se sabe cómo cambia la glándula uropigial sus procesos biológicos para producir feromonas sexuales sólo durante la temporada de apareamiento.

Las feromonas sexuales, como las descritas por Bohnet et al., supra, y que se sabe que son producidas en diferentes aves sólo durante la temporada de apareamiento, actúan como atrayentes o estimulantes sexuales, y no se pueden utilizar como feromonas tranquilizantes que actúen para calmar, apaciguar, o aliviar la ansiedad debida al estrés como en la presente invención. Además, la composición química de las feromonas sexuales es diferente de las feromonas tranquilizantes de aves de la presente invención.

Por lo tanto, un aspecto de la presente invención es proporcionar una feromona tranquilizante para aves procedente de la glándula uropigial de un ave.

En otro aspecto, la presente invención proporciona una composición que comprende una feromona tranquilizante para aves que comprende ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico y ácido oleico y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

La presente invención proporciona una composición que comprende una feromona tranquilizante para aves que comprende una mezcla de aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un uso para tratar el estrés en un ave, comprendiendo dicho uso administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.

En todavía otro aspecto, la presente invención se refiere a un uso para tratar la pérdida de peso en un ave, comprendiendo dicho uso administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición de feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.

En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un uso para el tratamiento de un ave doméstica durante su transporte para eliminar su ansiedad, comprendiendo dicho uso administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición de feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un proceso para mejorar la conversión del alimento en un ave, que comprende administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición de feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades la glándula uropigial de un ave.

Estos y otros objetos se logran mediante la presente invención, como se pone de manifiesto por el sumario de la invención, la descripción de las realizaciones preferidas, y las reivindicaciones.

Sumario de la invención

La presente invención proporciona una composición como se define en las reivindicaciones que comprende una feromona tranquilizante para aves procedente de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.

En un aspecto de la invención, la presente invención describe una composición que comprende una feromona tranquilizante para aves que comprende ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico y ácido oleico, y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

La presente invención proporciona una composición que comprende una feromona tranquilizante para aves que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico, y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

Los derivados de la presente invención incluyen ésteres, tales como ésteres metílicos, sales, alcoholes, cetonas, éteres, aldehídos, esteroles, y amidas de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico y ácido oleico.

Las soluciones que contienen las composiciones anteriores también son contempladas por la presente invención.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un uso para el tratamiento de estrés en un ave, comprendiendo dicho uso administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición que comprenda una feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.

En todavía otro aspecto, la presente invención describe un uso para tratar la pérdida de peso en un ave, comprendiendo dicho uso administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición de feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.

En todavía otro aspecto, la presente invención proporciona un uso para tratar un ave doméstica durante su transporte para eliminar su ansiedad, comprendiendo dicho uso administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición de feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.

En todavía otro aspecto, la presente invención describe un proceso para mejorar la conversión del alimento en un ave, que comprende administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición de feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de la glándula uropigial de un ave.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 muestra perfiles de un cromatograma de gases/espectro de espectroscopía de masas, de gallinas que no fueron seguidas por sus pollos, y gallinas que fueron seguidas por los pollos en el día 8.

La Figura 2 muestra perfiles de un cromatograma de gases/espectro de espectroscopía de masas, de gallinas que fueron seguidas por sus pollos en los días 4, 8, y 12.

La Figura 3 es una gráfica de barras que muestra la ganancia de peso de los pollos jóvenes. \\\ indica que los pollos se trataron con feromona tranquilizante para aves, mientras que /// indica que los pollos se trataron con un placebo.

La Figura 4 es una gráfica que muestra el aumento en la ganancia de peso en los pollos jóvenes, cuando se les administró feromona tranquilizante para aves (línea superior) en comparación con un placebo (línea inferior).

La Figura 5 es una gráfica de barras que muestra los niveles de cortisol en gallinas (hembras) y gallos (machos), y machos + hembras combinados (M + H).

La Figura 6 es una gráfica de barras que muestra los niveles de T4 en gallinas (hembras) y gallos (machos), y machos + hembras combinados (M + H).

La Figura 7 es una gráfica de barras que muestra los niveles de cortisol en los pollos bajo diferentes condiciones de alojamiento. \\\ indica que los pollos se trataron con feromona tranquilizante para aves, mientras que /// indica que los pollos se trataron con un placebo.

La Figura 8 es una gráfica de barras que muestra los niveles de T4 en pollos bajo diferentes condiciones de alojamiento. \\\ indica que los pollos se trataron con feromona tranquilizante para aves, mientras que /// indica que los pollos se trataron con un placebo.

La Figura 9 es una gráfica de barras que muestra la ganancia de peso en los pollos bajo diferentes condiciones de alojamiento. \\\ indica que los pollos se trataron con feromona tranquilizante para aves, mientras que /// indica que los pollos se trataron con un placebo.

La Figura 10 es una gráfica de barras que muestra los niveles totales de cortisol bajo diferentes condiciones de alojamiento.

La Figura 11 es una gráfica de barras que muestra la relación H/L en las gallinas en diferentes fechas del mismo año 2002.

Descripción de las realizaciones preferidas

Como se utilizan en la presente memoria, las palabras "pájaro" y "ave" (o aves) se usan de una manera intercambiable, y abarcan cualquier animal de sangre caliente con plumas y alas, que ponga huevos, y que normalmente sea capaz de volar. Los ejemplos de pájaros incluyen, pero sin limitación, pollos, pollitos, gallinas de Guinea, loros, pavos, gallinas, patos, gansos y similares.

Como se utiliza en la presente memoria, la palabra "estrés" significa la reacción del cuerpo de un animal a fuerzas de naturaleza perjudicial, infección, y a diferentes estados anormales que tiendan a alterar la homeostasis. Esta reacción puede ser una reacción física o una reacción emocional, incluyendo ansiedad.

"Ansiedad" significa una aprensión de ira y temor, acompañada por desasosiego, tensión y similares, que es un estado de reacción caracterizado por una alta probabilidad de proporcionar respuestas de comportamiento y emocionales de espanto. En términos neurofísicos, este estado de ansiedad es acompañado por una hiperactividad de los sistemas noradrenérgico y de serotonina.

"Feromona" significa una sustancia liberada por el cuerpo de una especie particular que causa una reacción predecible en otro individuo de la misma especie, cuya sustancia puede servir, por ejemplo, como un atrayente específico, un agente de comunicación social, un estimulante sexual y similares.

"Feromona tranquilizante" significa una feromona que calma, apacigua, o alivia el estrés, la ansiedad y la agresividad. Las feromonas tranquilizantes se deben distinguir de las feromonas sexuales, actuando éstas últimas como estimulantes o atrayentes sexuales.

"Enfermedades asociadas con estrés" significa cualquier enfermedad cuyos síntomas aumenten debido al estrés.

"Mejor conversión del alimento" significa la disminución de la relación en el consumo de alimento/peso ganado.

El término "solución" significa un sólido que está dispersado en un líquido, ya sea disuelto en él o estando en suspensión.

"Efecto tranquilizante" significa una disminución del temor, la aprensión, la ansiedad, así como las consecuencias de comportamiento y físicas asociadas con el estrés. Las consecuencias del comportamiento asociadas con el estrés incluyen temblor, vocalización, vuelo, agresión, actividades de desplazamiento, y similares. Las consecuencias físicas asociadas con el estrés incluyen cambios en el ritmo cardíaco, cambios en los niveles de epinefrina, norepinefrina, ACTH, cortisol, glucosa y similares. En las aves utilizadas como una fuente de alimento, esta definición incluye los parámetros de la cría de los animales domésticos, tales como crecimiento, peso, eficacia de conversión del alimento, calidad de la carne, calidad bacteriana de los productos, tal como falta de Salmonella, y cantidad de huevos producidos. También incluye la calidad de las plumas producidas por las aves y la calidad de la producción de gansos.

"Composición potenciadora" significa una composición de feromona activa que es específica de la especie en las aves, y que se puede utilizar para mejorar o actuar de una forma sinérgica con la composición de feromona básica para aumentar la efectividad de la composición en especies específicas.

"Heterófilo" significa todos los glóbulos blancos sanguíneos que no son linfocitos, que se encuentran en las aves.

Como se utiliza en la presente, el término "isómeros" incluye el isomerismo estructural y el isomerismo espacial, y se refiere a los isómeros de los ácidos grasos de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico y ácido oleico, así como sus derivados.

Cuando se hace referencia a las mezclas de uno o más de los ácidos grasos de la presente invención con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros, esto significa que las composiciones pueden incluir, por ejemplo, sólo ácido láurico, un derivado de ácido palmítico, un isómero de ácido linoléico y un isómero de un derivado de ácido oleico. Se apreciará que las composiciones de la presente invención abarcan todas las permutaciones (y no solamente las ejemplificadas anteriormente) de las mezclas de los ácidos grasos descritas, con sus derivados y/o sus isómeros. Adicionalmente, los derivados e isómeros referidos en la presente memoria, tienen los mismos porcentajes en peso que sus correspondientes de ácido graso. Por ejemplo, un derivado, isómero, o derivado de un isómero para ácido láurico debe tener una concentración de entre 12,3 y 13,7% (peso/peso).

De una manera más específica, la presente invención se refiere a la identificación de una composición de feromona tranquilizante para aves que procede de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de las aves.

Las composiciones de la presente invención son tranquilizantes y de un origen feromónico, y están formadas de moléculas volátiles, siendo los componentes esenciales de estas moléculas aminas y ácidos grasos de derivados indólicos, así como ésteres de estas aminas y ácidos grasos.

La composición de la presente invención comprende una mezcla de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico y ácido oleico, y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

De una manera más específica, la composición básica de la presente invención comprende una mezcla de aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico, y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

La composición también puede estar unida a un vehículo químico, siempre que se conserve la estructura bioactiva de los ácidos grasos. Estas moléculas vehículos incluyen, pero sin limitación, resinas, liposomas, compuestos de tipo corona, proteínas vehículos, polímeros, y similares.

Los ácidos grasos se pueden utilizar en su forma pura, es decir, como un ácido graso libre, así como su forma derivada, tal como los ésteres de ácidos grasos o sales de ácidos grasos, así como alcoholes de ácidos grasos, cetonas de ácidos grasos, éteres de ácidos grasos, y amidas de ácidos grasos. Estos derivados de ácidos grasos pueden reemplazar a uno o más o todos los ácidos grasos en las composiciones de la presente invención, y pueden tener los mismos efectos. Los derivados de los ácidos grasos se pueden encontrar en las composiciones o en las soluciones de la presente invención.

Se ha encontrado que la composición tiene un efecto tranquilizante en las aves, y se puede utilizar para aliviar estrés, ansiedad, reducir el comportamiento agresivo, mejorar la ganancia de peso, y mejorar la producción de huevos.

También se puede añadir a la composición tranquilizante para aves, si se desea una composición potenciadora que contenga entre 5% y 35% (peso/peso). Esta composición potenciadora comprende compuestos orgánicos volátiles y sus mezclas. Esta composición potenciadora puede ser de una naturaleza específica de la especie, y puede variar de acuerdo con la especie de ave seleccionada para utilizarse en la presente invención.

Los compuestos que se pueden utilizar en la composición potenciadora incluyen, pero sin limitación, aminas y ácidos grasos de derivados indólicos, ésteres de estas aminas y ácidos grasos, cetonas tales como acetona, alcoholes, esteroles, y similares.

También se pueden añadir a la composición cargas no tóxicas, las cuales incluyen ácidos grasos, alcoholes, aminas, escualeno y glicerol.

En otro aspecto, la presente invención comprende la composición de feromona tranquilizante para aves en solución.

La solución comprende ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico y ácido oleico, y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

La presente invención proporciona una solución de aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

La composición puede estar en la forma de una solución, líquido para aerosol, gel, matriz de liberación lenta, champú, y similares. La composición también se puede colocar en liposomas, en un difusor, en polímeros, en un difusor eléctrico, y puede estar microencapsulada.

Los ácidos grasos, que en general son de naturaleza sólida, se pueden diluir en cualquier disolvente no acuoso para formar la solución de la presente invención. Se usan disolventes tales como propilenglicol, alcohol, éter, cloroformo, etanol, benceno, disulfuro de carbono, polisorbato, alcohol propílico, isopropanol, 2-propanol, aceites fijos y volátiles y similares. También se pueden utilizar combinaciones de estos disolventes.

Por consiguiente, se puede utilizar una combinación de propilenglicol y etanol absoluto como un disolvente de la presente invención. Como un ejemplo, se expone 90% a 98% de propilenglicol, y 2% a 10% de etanol absoluto. También se puede utilizar 5% a 40% de isopropanol, y 60% a 95% de propilenglicol.

Los ácidos grasos están comercialmente disponibles en varias compañías químicas en forma sólida. Sin embargo, debido a que es difícil solubilizar los ácidos grasos, el ácido graso se añade en general al disolvente bajo agitación constante y a una temperatura de entre 37ºC y aproximadamente 38ºC. También puede ser de 37,5ºC.

Una vez obtenidas, las composiciones de la presente invención se pueden probar para determinar su eficacia con el fin de prevenir el estrés en un ave. Los agentes o circunstancias estresantes bien documentados son, por ejemplo, el destetado de las aves, el transporte de las aves y similares. La aplicación de las presentes composiciones de la invención en la forma de un pulverización, aerosol, y similares, en la superficie alrededor de los eventos estresantes, da como resultado una disminución del estrés como se indica por una variedad de factores, tales como ganancia de peso, comportamiento social respecto a otras aves, heridas en el cuerpo, cortisol salivar y similares.

Por consiguiente, las composiciones de la presente invención se pueden diluir y aplicar a diferentes objetos con los cuales entran en contacto las aves, tales como paredes, jaulas, el aire, y juguetes. Además, las presentes composiciones en la forma de soluciones también se pueden aplicar directamente a las aves.

Las composiciones anteriormente descritas se descubrieron después de un análisis detallado de la composición química de las secreciones obtenidas de la glándula uropigial en las aves que tenían a su descendencia siguiéndolas.

De una manera más particular, este procedimiento implicó limpiar la superficie alrededor de las glándulas uropigiales de las aves que tenían a su descendencia siguiéndolas, con una compresa estéril, y analizar la composición química de las secreciones mediante cromatografía de gases/espectroscopía de masas. Este procedimiento se describe con mayor detalle en los ejemplos que se encuentran más adelante.

Con el objeto de ilustrar completamente la presente invención, y las ventajas de la misma, se dan los siguientes ejemplos específicos, entendiéndose que los mismos pretenden ser solamente ilustrativos y de ninguna manera limitativos.

Ejemplos Ejemplo 1 Aislamiento y análisis para identificar feromonas de gallinas

En este ejemplo se utilizaron gallinas hembras que eran seguidas por su descendencia o no seguidas por su descendencia. Las muestras se obtuvieron en pollos hembras seguidas por su descendencia en un período del día 4, el día 8, el día 12, y el día 35 después de la eclosión (salida del cascarón). Se tomó otro conjunto de muestras de gallinas que no eran seguidas por su descendencia.

Las gallinas fueron sometidas a frotamiento varias veces alrededor de la zona de la glándula uropigial o de la glándula de la cola con compresas esterilizadas. La compresa se colocó inmediatamente en un matraz que contenía 10 mililitros de diclorometano.

Luego la compresa se desabsorbió en diclorometano agitando el matraz varias veces. Se tomaron cinco mililitros de la muestra, y se sometieron a evaporación hasta dejar 1 mililitro utilizando aire.

Las muestras se sometieron entonces a cromatografía de gases/espectroscopía de masas (GS/MS) utilizando un espectrómetro Turbo Mass fabricado por Perkin Elmer. La detección se efectuó por impacto utilizando (El+) a una energía de 70 eV a 180ºC. Se utilizó una columna JW tipo DB 5 MS con una longitud de 30 m (diámetro interno = 0,25 mm; película = 0,25 \mum) con una división de 1/20 y un cociente división/sin división de 45 segundos.

Se inyectaron 2,0 \mul de cada muestra. Los resultados espectrográficos de la cromatografía de gases/espectroscopía de masas se muestran en la Figura 1 y en la Figura 2.

Con el fin de confirmar las estructuras de ciertas moléculas obtenidas del análisis de cromatografía de gases/espec-
troscopía de masas, se llevó a cabo luego una ionización química positiva (CI+) en metano, para visualizar el pico molecular (peso molecular). Este método es bien conocido en la técnica.

Los resultados se analizaron utilizando una base de datos para obtener los espectros más probables. Las bases de datos que contenían estos datos son bien conocidas en la técnica.

La siguiente Tabla 1 muestra los resultados obtenidos de este ejemplo.

TABLA 1

1

Después de un análisis completo de los cromatogramas, se encontró que la feromona tranquilizante para aves estaba constituida de la siguiente composición de la Tabla 2.

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TABLA 2

2

Ejemplo 2 Efecto de la feromona tranquilizante para aves sobre el peso en los pollos jóvenes

El siguiente ejemplo se llevó a cabo bajo las siguientes condiciones del criadero:

Tipo de criadero: Alojamiento semi-abierto.

Alimentación: ad libitum para alimento y agua con el alimento comúnmente utilizado por todos los criadores para alimentar pollos jóvenes.

Se dividieron dos lotes separados de pollos jóvenes. El Lote A recibió una dosificación del 2% de la feromona tranquilizante para aves que comprendía 13% (peso/peso) de ácido láurico, 40% (peso/peso) de ácido palmítico, 34% (peso/peso) de ácido linoléico y 13% (peso/peso) de ácido oleico, la cual se colocó en un difusor electrónico y se puso encima del alojamiento de los pollos jóvenes. El Lote B recibió un tratamiento con un placebo.

Antes de administrar la feromona tranquilizante para aves o el placebo, los pollos jóvenes también se agruparon de acuerdo con su peso; es decir, en el día 0.

Los resultados se muestran en las Figuras 3 y 4, en donde las agrupaciones de los pollos jóvenes en el día 0 fueron iguales. A partir de estas Figuras, se dedujo que con el Lote A tratado hubo una ganancia de peso importante en comparación con el Lote B de placebo.

Por consiguiente, la ganancia de peso es más rápida cuando se administra la feromona tranquilizante para aves.

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Ejemplo 3 El efecto de la feromona tranquilizante para aves en estrés crónico provocado en gallinas y gallos

Este ejemplo midió la influencia de la feromona tranquilizante para aves en gallinas y gallos sometidos a estrés intenso y crónico.

Las condiciones muy estresantes a las que se sometieron las gallinas y pollos incluyeron luces brillantes, ruidos metálicos, y descargas eléctricas. Se provocaron dos tipos de agentes estresantes cada día durante un período de 15 minutos de una manera aleatoria, que fue idéntica para los dos lotes.

El Lote A se trató con la feromona tranquilizante para aves (abreviadamente AAP por la expresión inglesa avian appeasing pheromone) que comprendía 13% (peso/peso) de ácido láurico, 40% (peso/peso) de ácido palmítico, 34% (peso/peso) de ácido linoléico y 13% (peso/peso) de ácido oleico. Al Lote B se le dio un placebo. Luego se analizaron diversos factores, tales como si las gallinas y gallos ganaban peso, los cambios en los niveles de cortisol, y los cambios en los niveles de T4 empleando ensayos convencionales para cortisol y T4, 8 días después del final del experimento.

No se observó una diferencia de peso significativa. Esto pudo deberse a que los agentes estresantes fueron demasiado violentos, y a que la feromona no pudo prevenir este tipo de estrés violento.

Los resultados endocrinos demostraron una tendencia tranquilizante en los animales individuales a los que se les administró la feromona tranquilizante para aves (A, B para cortisol - Figura 5; p = 0,14).

Idelman (1990), supra, demostró que la fase de resistencia al estrés libera las hormonas relacionadas con la secreción de ACTH que estimula el cortisol, cuyo cortisol es la hormona que se eleva más alto durante el estrés. La Figura 5 ilustra que las hembras son más sensibles al estrés que los machos (p = 0,12 para las hembras). También, las hembras tienen una acción más sensible a la feromona tranquilizante para aves; una reducción de aproximadamente 50% del nivel de cortisol antes y después del estrés.

Esto también fue confirmado por el nivel de T4 en las hembras, como se expone en la Figura 6. También, estos resultados demuestran que hay una diferencia significativa entre las hembras no tratadas y tratadas, que no es el caso para los machos (Figura 6; p = 0,08).

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Ejemplo 4 Feromona tranquilizante para aves y el efecto del alojamiento de los pollos

Este ejemplo se llevó a cabo para determinar si el alojamiento de los pollos tenía algún efecto sobre los resultados en el ensayo doble ciego. Ni la persona responsable del proyecto, ni el criador, conocían el tipo de tratamiento en cada alojamiento.

Los pollos se alojaron en dos lotes separados de 2 x 13.000 pollos, a una densidad de 18/m^{2} para cada lote. El Lote 1 representa el primer ensayo, y el Lote 2 el segundo ensayo; y los tratamientos A y B fueron como sigue:

Lote 1: A1 (se le administró la feromona tranquilizante para aves) frente a Lote B1 (placebo).

Lote 2: A2 (se le administró la feromona tranquilizante para aves) frente a Lote B2 (placebo).

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La feromona tranquilizante para aves que se administró comprendió 13% (peso/peso) de ácido láurico, 40% (peso/peso) de ácido palmítico, 34% (peso/peso) de ácido linoléico y 13% (peso/peso) de ácido oleico.

Una solución de la feromona tranquilizante para aves titulada al 2%, fue la dosificación utilizada en este Ejemplo. Esta dosificación se difundió con un difusor electrónico a una tasa de 1/50 m^{2}.

La ganancia de peso, los niveles de cortisol y la indicación de los niveles de consumo y los niveles de T4, se midieron empleando ensayos estándares para cortisol y T4 aproximadamente 40 días después del final del experimento.

Además, se observó que el índice medio de mortalidad fue más elevado en uno de los dos alojamientos de los pollos con respecto al otro. Esta observación significa que hay un posible "cruce" cuando se ensayan el placebo y el tratamiento en solamente un alojamiento.

Los niveles de cortisol, los niveles de T4, y el peso, se analizaron aproximadamente 40 días después del ensayo inicial.

Los resultados de este ejemplo son como sigue:

El nivel de cortisol del B1 era significativamente elevado en comparación con A1 (Figura 7; p = 0,04). Esto indicó que el estado medio de estrés fue más pronunciado en las aves del lote no tratado con la feromona tranquilizante para aves. Se observa una diferencia significativa a favor del Lote B2 en comparación con el A2 (Figura 7; p = 0,002).

No hubo una diferencia significativa entre los Lotes A1 y B1 en el nivel de T4. El B2 tuvo un nivel significativamente más alto que el A2 con respecto al nivel de T4 (Figura 8; p = 0,006).

Para el Lote 1, no hubo una diferencia de peso significativa entre el peso en vivo (LW) o el peso muerto (DW). Los animales del Lote A2 fueron significativamente más pesados que los del B2 (Figura 9; p = 0,03 y p = 0,06, respectivamente para el peso vivo y el peso muerto).

La ganancia de peso y la indicación de los niveles de consumo fueron equivalentes (1,9 para la indicación del consumo) para los 4 diferentes lotes.

También se interpretaron los resultados con respecto a los efectos de diferentes alojamientos de los pollos que se ensayaron. Se encuentran individuos en el mismo alojamiento con un nivel de cortisol más elevado (Figura 10; p = 0,003). No se observa diferencia alguna entre A y B. No hubo una diferencia significativa entre A y B o en el alojamiento 1 ó 2.

No hubo una diferencia significativa entre A y B, ya sea en el peso en vivo o en el peso muerto.

Por consiguiente, las conclusiones que se sacaron fueron que no hubo tendencia alguna en relación con el alojamiento de los pollos en este ejemplo.

Ejemplo 5

Este protocolo somete a ensayo la influencia de la feromona tranquilizante para aves sobre las gallinas ponedoras. Las técnicas de crianza para las gallinas ponedoras con frecuencia son estresantes y causan una pérdida de huevos que se ponen, y también peleas entre las gallinas individuales.

Se llevaron a cabo diferentes ensayos en este ejemplo, incluyendo técnicas zoológicas, marcadores biológicos, y sensibilidad a ácaros sobre las gallinas ponedoras, con o sin la administración de la feromona tranquilizante para aves.

El siguiente es un calendario de eventos específicos que tuvieron lugar en este ejemplo:

Nacimiento de los pollos: Mayo del año 1.

Bandada inicial: 4 meses después del nacimiento (año 1).

Comienzo de la acción de picarse las plumas: 8 meses después del nacimiento (año 2).

Tratamiento para ácaros (Dermanysuss u Ornithonyssus): 9 meses después del nacimiento (año 2).

Muestreo de ácaros: 10 meses después del nacimiento, año 2.

Muestreo de sangre: 10 meses después del nacimiento, año 2, y 11 meses después del nacimiento, año 2.

Colocación de los difusores con la feromona tranquilizante para aves: 10 meses después del nacimiento (año 2), y 11 meses después del nacimiento (año 2).

Colocación de anteojos a las gallinas: 10 meses después del nacimiento, año 2.

La tecnología zoológica se observó a través de todo el calendario de eventos descrito anteriormente, empleando los siguientes criterios técnicos: la tasa o proporción de gallinas fuera de sus nidos; la tasa de gallinas en masa; el índice de mortalidad; y el consumo alimentario para las gallinas a las que se les administró la feromona tranquilizante para aves, y para las que no se les administró la feromona tranquilizante para aves (control).

No hubo diferencias significativas entre los dos grupos. Los resultados fueron equivalentes con o sin la feromona tranquilizante para aves. Los anteojos tuvieron un efecto sobre las gallinas; las gallinas fuera de sus nidos fueron menos numerosas, y hubo un menor número de huevos desclasificados.

También se analizaron los ácaros durante el transcurso de este ejemplo. En el día 0, se colocaron los primeros difusores de la feromona tranquilizante para aves, y se efectuó el muestreo de ácaros. Para las 12 muestras que se tomaron, 5 muestras permitieron hacer la identificación de la especie de ácaros en el criadero; se utilizaron 3 y se colocaron en un cultivo de ácaros, y se recuperaron al final del experimento interno; y 4 sirvieron para probar la sensibilidad de los parásitos a los ácaros utilizados.

En las 5 muestras efectuadas, se identificaron 117 muestras de parásitos. 76% (n = 86) se identificó como Dermanyssus gallinae (ácaros de pollos), y 24% (n = 28) se identificó como Ornithonyssus sylviarum (ácaros de aves de corral septentrionales).

La cantidad de ácaros encontrados en las gallinas implica una importante infestación para el criador; con una muestra interna de 2, se estimó que la infestación fue de 5 y 6, de un nivel de 8. (Véase, el trabajo de Devaney y Agutin (1987), que describe la escala del número de Orinthonyssus en la piel, justo debajo del ala). Las últimas dos nuevas infestaciones no pudieron obtenerse bajo las condiciones experimentales empleadas.

Se observa que las muestras tomadas se efectuaron solamente dos días después del tratamiento de ácaros. El criador también sabía que había una fuerte infestación de ácaros, y en especial de Dermanyssus gallinae (DG). Las muestras tomadas dieron una infestación global final de 5/8. Esta tasa dio como resultado una muestra de un tamaño "profesional" (1) que se considera de 30 DG/cm^{2} para una tasa de manifestación máxima de 8. La tasa 8/8 representa una etapa de desangramiento con una tasa de mortalidad cercana al 100%. 5/8 representa un nivel de 3 a 5 DG/cm^{2} de infestación, que es una etapa intermedia en la que es obligatorio el tratamiento para prevenir un incremento en la infestación por ácaros.

No se encontraron ácaros de polvo, lo cual significa que el tratamiento de ácaros emprendido fue eficiente para los ácaros del polvo. Sin embargo, hubo una gran presencia de ácaros parasitarios justo después del tratamiento de ácaros, lo cual significa que los ácaros parasitarios muy probablemente pierden su sensibilidad al tratamiento de ácaros que se utilizó, el cual se ensayó más adelante.

A continuación se realizó el ensayo de sensibilidad de los ácaros. Este ensayo se llevó a cabo en la población de ácaros con un sistema in vitro que verifica la sensibilidad del tratamiento de ácaros utilizado (carbamato).

Los parásitos se expusieron de esta manera a una variedad de concentraciones de acaricidas. La dosificación se determinó por el valor del folleto de recomendación de dosificación del producto. En esta dosis, no se obtiene la DL 50 (50% de los ácaros expuestos durante un período de 24 horas son aniquilados), ni la DL 100 (100% de los ácaros son aniquilados en un período de 24 horas). La DL 50 no se obtuvo con una dosis que fue 8 veces superior a la recomendada. La DL 100 no se obtuvo con una dosis que fue 32 veces superior a la prescrita.

Bajo condiciones experimentales, se sometieron a los ensayos2 lotes (T1 y T2). El Lote T1 correspondió a un ensayo universal, que no está autorizado en la crianza, debido a que se utilizó Ivermectina. El Lote 2 correspondió a un ensayo realizado con Amitraze. Para T1 y T2, se obtuvo la DL 100 con las dosis prescritas en los folletos de los productos, en los alrededores correspondientes a las condiciones de la crianza. Los resultados se muestran en la siguiente Tabla 3:

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TABLA 3

3

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Por consiguiente, se recomendó que se cambiara el material activo para el tratamiento de ácaros, debido a la sensibilidad demostrada anteriormente.

A continuación se llevaron a cabo ensayos en sangre como se indica en el calendario de eventos anterior. Los diferentes marcadores de estrés se observaron mediante el análisis efectuado con una muestra de sangre. Se observa una elevación con respecto a los heterófilos/linfocitos (5), y también una variación en ciertas hormonas, tales como T4 circulante, cortisol, y prolactina (4).

Se empleó la siguiente metodología. Se extrajo sangre de los animales en las fechas indicadas en la Tabla 4 que se encuentra más adelante, en dos tipos de tubos diferentes; uno sin conservante (parte superior roja) y uno con un conservante de EDTA (parte superior azul).

Se hicieron los siguientes ensayos fisiológicos: hematocrito, recuento de glóbulos sanguíneos, y relación heterófilos/linfocitos. Después de la recolección, se conservó el suero a -20ºC hasta que se recolectaron todas las muestras. La última se envió a un laboratorio clínico para el análisis de los contenidos de hormonas de estrés.

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TABLA 4

4

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El hematocrito se extrajo en un tubo que contenía el conservante EDTA, y los resultados obtenidos se recogen en la Tabla 5.

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TABLA 5

5

El valor medio fisiológico normal para un hematocrito es 55 por ciento. Como se puede ver de los resultados anteriores, hay una disminución en los hematocritos, lo cual significa que hay una disminución de los glóbulos rojos sanguíneos del animal. Esta disminución indica que los animales se lesionaron de alguna manera. Esta pérdida de sangre probablemente se debe a la picadura de plumas en la zona de la cola, lo cual causa una mala cicatrización y puede conducir a manchas de sangre en los huevos.

El análisis de glóbulos blancos sanguíneos mostró una fuerte presencia de granulocitos, que se correlaciona con una infestación por parásitos.

Se llevó a cabo un recuento de leucocitos sobre las muestras de sangre recogidas, y los resultados se presentaron utilizando una relación heterófilos/linfocitos. Los resultados se presentan en la siguiente Tabla 6:

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TABLA 6

6

Como se puede ver en los resultados anteriores, este estudio muestra un valor medio de 2,49 para el primer conjunto de muestras de sangre extraídas, y una caída de 60% para la segunda y la tercera muestras de sangre que se extrajeron. El análisis estadístico indicado en la Tabla 6 anterior, muestra una diferencia entre las primeras muestras extraídas y las segundas muestras extraídas, y entre las primeras muestras extraídas y las terceras muestras extraídas, pero no hay una diferencia estadística entre las segunda y tercera muestras que se extrajeron. El valor medio para los criadores es 0,42 \pm 0,13 (3).

Los resultados se muestran gráficamente en la Figura 11.

Conclusiones

La feromona tranquilizante para aves reduce el estrés en las aves. Sin embargo, se deben mantener ciertas condiciones para que funcione de una manera efectiva. La feromona tranquilizante para aves se debe utilizar en los pollos jóvenes inmediatamente después de la eclosión.

Las observaciones mostradas en la presente memoria ilustran que inclusive con un estrés importante, tal como una parasitismo intenso por ácaros de pollos, la feromona es capaz de reducir el estrés inducido. Por consiguiente, la composición de feromona de la presente invención es eficaz incluso cuando perdure la causa del estrés.

Ejemplo 6 Animales y condiciones de la crianza

Se utilizaron dos edificios idénticos de 1200 m^{2} cada uno para este ejemplo. En cada edificio, se criaron 24.000 pollos "ROSS 308", divididos en 2/3 machos - 1/3 hembras. Los pollos machos y hembras se separaron por razones prácticas. Los pollos machos se alojaron durante más tiempo que los pollos hembras, debido a que los machos ganan más peso en los últimos 10 días de producción antes de la matanza, y por consiguiente, es económicamente más beneficioso para el avicultor alojar pollos machos durante un período de tiempo más largo que pollos hembras. En el día de la partida de los pollos hembras, los pollos machos ocuparán el 100% de la zona, y por consiguiente, son libres de vagar por el gallinero. Los machos se venden en general trinchados, a diferencia de las hembras, que se venden en su totalidad. En cada uno de los edificios, las condiciones de cría se mantuvieron estrictamente de una manera similar; es decir, el suelo del gallinero estaba constituido de virutas de madera (conocido como cama) distribuido sobre el piso de ambos edificios, los pollos se alimentaron ad libitum (alimento y agua), y el programa de luz fue el mismo en ambos edificios. Se usó luz del día natural durante el tiempo de día, y se utilizó luz artificial en la noche. Seis horas antes de la partida para ir al matadero, se interrumpió la alimentación sólida de los pollos.

Tratamiento

Se fabricó P010, una feromona tranquilizante para aves que comprende una mezcla de 13% (peso/peso) de éster metílico de ácido láurico, 40% (peso/peso) de éster metílico de ácido palmítico, 34,0% (peso/peso) de éster metílico de ácido linoléico y 13.0% (peso/peso) de éster metílico de ácido oleico, como un bloque de liberación lenta, mediante métodos conocidos en la técnica, el cual se protegió mediante una envoltura de plástico con orificios perforados. El tratamiento consistió en una difusión pasiva de P010 en la atmósfera local.

Cada bloque pesó 150 gramos, y se colocaron 18 bloques que contenían una concentración de 2% de la feromona tranquilizante para aves anterior en el edificio tratado (ya sea P010 o un placebo). El tratamiento empezó en el día anterior a la llegada de los pollos (anotado como D0 ó Día 0). En el Día 29 (D29), los bloques que contenían P010 fueron reemplazados por nuevos. En este estudio, el edificio 01 se trató con el placebo, y el edificio 02 con P010. El edificio tratado será denominado posteriormente en la presente memoria "P010" y el otro "control" (placebo). El ensayo se llevó a cabo en la modalidad doble ciego.

Transporte hasta el matadero

El transporte de los pollos hasta el matadero fue en un camión de carga, y los pollos se transportaron a media noche en contenedores con cajones que contenían cada uno 50 kilogramos de animales en peso vivo.

La partida de los pollos hacia el matadero tuvo lugar a media noche en el mismo día para cada edificio; es decir, en el Día 52 para los pollos machos, y en el Día 40 para los pollos hembras. Estos datos son comparables con los resultados nacionales (N.r.1) descritos en ITAVI, (2001) Les syntheses economiques - performances techniques et couts de production (Las técnicas económicas de síntesis - prestación, y costos de producción), que son en el Día 49 para los pollos machos frente al Día 39 para los pollos hembras.

Datos recogidos Datos recogidos antes del transporte de los pollos hacia el matadero

Se llevaron a cabo ensayos fisiológicos sobre muestras de sangre tomadas de los pollos en el día de su partida hacia el matadero. Se llevaron a cabo un total de 200 de estos ensayos (se sometieron a ensayo 50 machos y 50 hembras por cada edificio).

Se extrajo sangre de los pollos tanto en los tubos que contenían EDTA como en los tubos regulares que no contenían conservantes químicos. Se recogió la sangre de la vena del ala de los pollos. Se midieron la relación hematocrito/linfocitos (H/L), hematocrito, nivel de glucosa, y nivel de corticosterona. La relación hematocrito/linfocitos se calculó utilizando células Mallacez, sobre las cuales se extendieron 2 x 500 \mul sobre 50 cuadrados (1 cm^{3}). El cálculo se realizó utilizando la técnica de cruzamiento. Luego se contó la población total de linfocitos, y se calculó la relación. El hematocrito se midió después de la centrifugación a 9000 m/s^{2} (3.500 rpm durante 2 minutos), y se expresó como la relación de (sangre total)/(fase celular). El nivel de glucosa se midió utilizando un Glucotrend®.

También se llevó a cabo un ensayo de comportamiento (abreviadamente BT por la expresión inglesa Behavioral Test) el día en el cual se tomaron las muestras de sangre. El ensayo de comportamiento (BT) que se utilizó es un derivado del ensayo de inmovilidad tónica (TI) y es indicativo de la reacción de temor de los pollos cuando se someten a una situación que estimula una agresión predatoria. El ensayo de comportamiento se llevó a cabo como sigue:

Cada pollo se capturó y se colocó sobre su dorso en una pequeña hamaca durante un máximo de 60 segundos. Una vez que el pollo estaba sobre su dorso, se restringía su movimiento suavemente colocando una mano tocando su pecho durante 10 segundos, y luego se soltaba, mientras era mirado por los ojos de otra persona colocada a 1 metro, ojo con ojo.

Cada uno de los resultados fisiológicos y de comportamiento se obtuvo utilizando el mismo pollo. Cada pollo se capturó, se le realizó el ensayo de comportamiento, y luego se extrajo sangre para los ensayos de sangre mencionados anteriormente. Los niveles de glucosa se calcularon inmediatamente después del ensayo de comportamiento.

Datos recogidos en el matadero

En el matadero, se realizaron varios ensayos con respecto al rendimiento de los pollos. Primero se midieron peso en vivo (LW), peso muerto (DW), relación de alimento a ganancia (FGR), e índice de prestación (abreviadamente PI por la expresión inglesa performance index).

El peso en vivo (LW) se obtuvo sumando el peso total de los pollos dividido entre el número total de pollos que fueron entregados por el criador. Las mediciones se registraron por separado para los pollos machos y para los pollos hembras.

El peso muerto (DW) fue la medición tomada del peso de cada pollo individualmente. Luego se clasificó el peso en clases de 100 gramos.

La relación alimento/ganancia (FDG) fue la medición tomada para la cantidad total de alimento consumido por los pollos en cada edificio, tanto para los pollos machos como para los pollos hembras.

El índice de prestación (PI) es el principal índice que los criadores de pollos tomaron en cuenta para evaluar la prestación. El PI se calculó como sigue: (Ganancia diaria de peso)/Relación de alimento a ganancia (FGR).

En el análisis, también se tuvieron en cuenta los resultados de los pollos descalificados que se asfixiaron, se rascaron, y/o se marcaron en sus patas. Este criterio se calculó en porcentaje de los pollos totales entregados al matadero, excluyendo el porcentaje de peso muerto (DW) para la descalificación global.

También se llevó a cabo un procedimiento denominado "Rendimiento de la Tabla" (abreviadamente TY por la expresión inglesa Table Yield) sobre pollos estándares (n = 10 por sexo, de la misma clase del peso muerto (DW): 1,9 kilogramos para los machos, y 1,2 kilogramos para las hembras). El procedimiento del rendimiento de la Tabla evalúa el rendimiento de los animales; es decir, grasa, filete, pata (carne), relación piel/peso en vivo, y rendimiento global: (piel + pata)/peso en vivo.

Finalmente, se resumieron los datos con respecto a la rentabilidad económica para evaluar la eficacia económica de P010 [margen en bruto (abreviadamente GM por la expresión inglesa gross margin)].

Análisis estadístico

El análisis estadístico se llevó a cabo utilizando el programa de ordenador Statview F-4.5®. Los datos se analizaron mediante una comparación de valores medios y varianzas, utilizando el ensayo t y el ensayo U de Mann-Whitney, según fuera apropiado. Algunos datos no se pudieron analizar estadísticamente debido a la falta de datos, y por consiguiente, no se calculó la significación estadística. No obstante, se mostraron algunos de los resultados no analizados estadísticamente debido a su relación con otros datos.

Resultados del ejemplo 6

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TABLA 7 Valor medio del peso muerto

7

Los valores medios dentro de una fila con diferente superíndice difieren significativamente (p<0,0001, ensayo t).

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TABLA 8 Animales descalificados - Machos (% de animales excepto para el total:% de peso muerto)

8

TABLA 9 Animales descalificados - Hembras (% de animales excepto por el total:% de peso muerto)

9

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TABLA 10 Resultados fisiológicos – Machos

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TABLA 11 Resultados fisiológicos – Hembras

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Análisis de los resultados

La diferencia entre el control y P010 fue significativa para el peso muerto (DW) tanto para los pollos machos como para los pollos hembras. Los pollos de control fueron más ligeros comparados con los pollos tratados con P010 (p < 0,0001 (véase la Tabla 7 anterior). El peso en vivo final (LW) fue más bajo en el grupo de control, comparado con P010, tanto para los pollos machos como para los pollos hembras (un valor medio de 2,84 kilogramos (control) frente a 3,08 kilogramos (tratados), y 1,60 kilogramos (control) frente a 1,69 kilogramos (tratados), respectivamente). Los pollos machos de P010 fueron más pesados comparados con los encontrados en los resultados nacionales (N.r.1) (2,85 kilogramos). La relación alimento a ganancia (FGR) fue ligeramente más alta en el edificio P010 (1,96 (tratados) frente a 1,90 (control), respectivamente), lo cual representa el valor medio nacional como se describe en Le Douarin P. Enquete technico economique. Reussir Aviculture 83: 24-24 (2003)). Sin embargo, el índice de prestación (PI) fue más alto para los pollos tratados de P010, comparado con los pollos de control (2,49 (tratados) frente a 2,40 (control)), lo cual significa que la ganancia de peso diaria (abreviadamente DWG) por la expresión inglesa daily weight gain) fue más alta para los pollos de P010.

Aun cuando algunos de estos datos no se pudieron comparar estadísticamente, son útiles para entender las diferencias en el peso muerto (DW). El valor de los resultados nacionales (N.r.2) para el peso en vivo (LW) es 2,35 kilogramos, como se expone en Le Douarin P (2003), supra. Los resultados obtenidos en la presente invención para el peso en vivo de los pollos fueron 2,38 kilogramos para los pollos de P010, y 2,20 kilogramos para los pollos de control. Se observa que el control está ligeramente debajo del valor de 2 de los resultados nacionales, el cual no es el caso para P010. Esta observación puede dar cuenta de la diferencia mostrada en el peso muerto (DW), debido a que se puede considerar que hay una correlación entre el peso muerto (DW) y el peso en vivo (LW) (Feddes J. J. R., E. J. Emmanuel, M. J. Zuidhof, Poult. Sci. 81: 774-779 (2002)).

Además, es lógico que la ganancia de peso diaria (DWG) más alta, conduce a un mayor peso final, sin considerar la relación alimento a ganancia (FGR). Esto da una justificación a la gran importancia dada al índice de prestación (PI).

El total de los pollos machos de P010 descalificados (véase la Tabla 8 anterior) representó 0,78% del peso muerto (DW), comparado con 0,57% para el total de pollos de control descalificados (p < 0,01). Esto se debe al nivel más alto de patas marcadas para los pollos tratados con P010 (47% frente a 12%, p < 0,001). Sin embargo, el porcentaje tanto de los pollos asfixiados como de los pollos rascados es más bajo en los pollos tratados de P010, como es puesto de manifiesto por los valores de 1,36% (machos tratados) frente a 1,11% de los machos de control para la asfixia, y de 8% (machos tratados) frente a 22% (machos de control) (p < 0,001) para los pollos rascados.

Los resultados con respecto a los pollos hembras son comparables con los de los pollos machos (véase la Tabla 9 anterior). Los resultados mostraron un número significativamente más alto para los pollos hembras tratados de P010 (8% tratados) frente al 4% (control) p < 0,001), pero se asfixiaron un número más bajo de pollos hembras tratados de P010 (3,25% (tratados) frente a 6,36% (control), p < 0,001), y estaban rascados (10% (tratados) frente a 19% (control), p < 0,001) para el grupo de P010.

No obstante, no se encontró ninguna diferencia significativa para el total de peso muerto (DW) descalificado para los pollos de este estudio. El total de pollos tratados de P010 descalificados estuvo debajo del valor de 2 de los resultados nacionales del 0,96 por ciento, como se expone en Le Douarin P (2003), supra.

Aunque el estudio tuvo lugar en edificios limpios, algunos mataderos utilizan un sistema de calificación de las patas marcadas que se correlaciona con una cama demasiado húmeda en el piso del gallinero (LEJAS I., La France Agricole. (Fev. (Feb.) 2003)). Por ejemplo, el umbral de 40% de las patas marcadas de los pollos es una indicación de que la bandada está afectada, y 80% es una indicación de que la bandada está "sobre-afectada". En este estudio, los pollos machos de P010 se pueden considerar como afectados. Esto se correlaciona con el hecho de que las muestras de la cama mostraron un nivel más alto de humedad en uno de los edificios, comparados con el control.

Aunque no se tuvo en cuenta la cantidad total de agua utilizada por los pollos para cada edificio, se puede suponer que los pollos de P010 tratados consumieron más agua, comparados con los pollos de control no tratados, lo cual concuerda con la diferencia en la relación de alimento a ganancia (FGR). Debido a que los pollos machos se quedaron más tiempo en el gallinero antes de la matanza, es lógico que estuvieran más afectados por la calidad de la cama. Finalmente, es debido a que el total de pollos descalificados está representado en el cálculo de todos estos criterios, que los resultados parecen ser más bajos, inclusive si todos los demás criterios (excepto las patas marcadas) son buenos.

Con respecto al rendimiento de la Tabla (TY), ninguno de los resultados observados fue estadísticamente diferente tanto para los pollos machos como para los pollos hembras. Sin embargo, se observó que los pollos de P010 parecían haber tenido más carne, comparándose con los pollos de control.

Los dos grupos observados mostraron diferencias entre los sexos para los resultados fisiológicos (veánse la Tabla 4 y la Tabla 5, anteriores). En realidad, la relación H/L fue significativamente más baja para los pollos de P010 (p < 0,01), y es el único parámetro que mostró una diferencia para los pollos hembras entre los grupos. Con respecto a los pollos machos, el nivel de corticosterona fue más alto para el control (p < 0,05), pero el nivel de glucosa fue más bajo (p < 0,01) para este mismo grupo de control. Es interesante observar que estos resultados tienden a mostrar que los pollos machos tienen un nivel de estrés que es diferente entre los grupos. El caso es menor para los pollos hembras, excepto por la relación H/L, lo cual tiende a representar un estrés social (Campo J. L., Davila S. G., Poult. Sci. 81: 1637-1639 (2002)). Una vez más, el hecho de que la partida hacia el matadero de los machos tuviera lugar 12 días después de las hembras, puede ser una explicación.

Con respecto al hematocrito, los grupos son comparables, y los datos están de acuerdo con la literatura científica (Fisher T. M., Blood Cells. 4: 453-461 (1978)). Los datos de los resultados fisiológicos se podrían observar en paralelo con los del rendimiento de la Tabla (TY). En realidad, las aves de corral expuestas a un agente estresante tienden a acumular grasa y, por lo tanto, son más flacos; es decir tienen menos carne (Leclerc B., Guy, G., Rideaux, F. Reprod. Nutr. Dev. 28: 931-937 (1988)). La elevación de los niveles de corticosterona parece disminuir la capacidad de metabolismo de proteínas (Grizard J. et al., Nutr. Research Rev. 8: 67-91 (1995)). Los resultados de los valores de glucosa de las aves machos parecieron ser ambiguos, inclusive cuando son similares a los de la literatura científica (Padilha J. F. C., Influence of heat on energy metabolism and its regulation on broilers. Tesis Francesa para PhD. Tours University, 205 páginas, 1995). En realidad, se puede argumentar que los pollos de P010 fueron "muy reactivos", lo cual también podría explicar las diferencias en la grasa, debido a que hay una captura más baja de glucosa por parte de los músculos, lo cual tiende a conducir a un índice más alto de almacenamiento de lípidos (Bray G. A., York, D. A., Physiol. Reviews. 59: 719-809 (1979)). Por consiguiente, se puede concluir que el estrés conduce a una mala calidad de la carne debido a una elevación de la producción de ácido láctico que genera una carne con un bajo pH (Alvarado C. Z., Sams A. R., Poult. Sci. 81: 1365-1370 (2002)).

No se podrían mostrar diferencias entre los grupos o sexos utilizando el ensayo de comportamiento (BT). Este ensayo dio un valor medio de 39,6 segundos para las aves machos, y de 41,2 segundos para las aves hembras. Comparado con un ensayo de referencia (Riedstra B., Groothuis, N. Appl. Anim. Behav. Sci. 77: 127-138 (2002)), se podría argumentar que este ensayo no se llevó a cabo durante suficiente tiempo como para observar una diferencia real entre las aves de corral. En este estudio se llevó a cabo el ensayo de comportamiento (BT), de tal manera que el criador pudiera obtener un resultado rápido para conocer el nivel de estrés de la bandada.

Finalmente, se calculó el margen bruto (GM) para cada edificio, y se encontró que el margen de pollo/alimento era más alto en el edificio de P010 en 4,8%.

En conclusión, el producto de P010 reduce el estrés en los pollos, y es económicamente beneficioso para el avicultor, como se pone de manifiesto por los resultados anteriores.

Aunque la invención se ha descrito en términos de diferentes realizaciones preferidas, el experto apreciará que se pueden hacer diferentes modificaciones, sustituciones, omisiones, y cambios sin apartarse de su alcance. De conformidad con lo anterior, se pretende que el alcance de la presente invención esté limitado por el alcance de las siguientes reivindicaciones, incluyendo sus equivalentes.

Claims (20)

1. \global\parskip0.950000\baselineskip

   1. Una composición que comprende una feromona tranquilizante para aves, que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico, y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.
2. 2. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1, en donde dichos derivados son ésteres, sales, alcoholes, cetonas, éteres, aldehídos, esteroles, y amidas de ácido láurico, ácido palmítico, ácido linoléico y ácido oleico.
3. 3. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende además una carga no tóxica o un excipiente sólido.
4. 4. Una composición de acuerdo con la reivindicación 3, en donde dicha carga no tóxica se selecciona del grupo de ácidos grasos, alcoholes, aminas, escualeno y glicerol.
5. 5. Una solución que comprende una feromona tranquilizante para aves, que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.
6. 6. Una solución de acuerdo con la reivindicación 5, en donde el disolvente es alcohol y propilenglicol.
7. 7. Una solución de acuerdo con la reivindicación 6, en donde dicha solución está en la forma de un líquido para pulverización, un champú, un aerosol, está microencapsulada, está en una matriz de liberación lenta, en un polímero o en un difusor.
8. 8. Una solución de acuerdo con la reivindicación 7, en donde dicho difusor es un difusor eléctrico.
9. 9. Uso de una composición que comprende un una feromona tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave para la preparación de un medicamento para el tratamiento del estrés en aves.
10. 10. Uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde dichas secreciones comprenden una feromona tranquilizante para aves, que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico y/o sus derivados y/o isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.
11. 11. Uso de acuerdo con la reivindicación 9 o la reivindicación 10, en donde dicha composición está en solución y se administra mediante la aplicación de esta solución a las paredes, sobre las plumas o la piel de un ave, en el aire o sobre juguetes.
12. 12. Uso de una composición feromónica tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una pérdida de peso en aves.
13. 13. Uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde dichas secreciones comprenden una feromona tranquilizante para aves, que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.
14. 14. Uso de acuerdo con la reivindicación 12 o la reivindicación 13, en donde dicha composición está en solución y se administra mediante la aplicación de dicha solución a las paredes, sobre las plumas o la piel de un ave, en el aire o sobre juguetes.
15. 15. Uso de una composición feromónica tranquilizante para aves, procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave, para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un ave doméstica durante su transporte para eliminar su ansiedad.
16. 16. Uso de acuerdo con la reivindicación 15, en donde dichas secreciones comprenden una feromona tranquilizante para aves, que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35.7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.

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17. 17. Uso de acuerdo con la reivindicación 15 o la reivindicación 16, en donde dicha composición está en solución y se administra mediante la aplicación de esta solución a las paredes, sobre las plumas o la piel de un ave, en el aire o sobre juguetes.
18. 18. Proceso para mejorar la conversión del alimento en un ave, que comprende administrar a un ave que necesite dicho tratamiento, una composición feromónica tranquilizante para aves procedente de las secreciones de las proximidades de la glándula uropigial de un ave.
19. 19. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 18, en donde dichas secreciones comprenden una feromona tranquilizante para aves, que comprende aproximadamente 12,3 a 13,7% (peso/peso) de ácido láurico, aproximadamente 38,0 a 42,0% (peso/peso) de ácido palmítico, aproximadamente 32,3 a 35,7% (peso/peso) de ácido linoléico y aproximadamente 12,0 a 14,0% (peso/peso) de ácido oleico y/o sus derivados y/o sus isómeros, así como mezclas de uno o más de estos ácidos grasos con uno o más de sus derivados y/o uno o más de sus isómeros.
20. 20. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 18 o la reivindicación 19, en donde dicha composición está en solución y se administra mediante la aplicación de esta solución a las paredes, sobre las plumas o la piel de un ave, en el aire o sobre juguetes.