ES2350258T3 - Derivado polimérico de un antagonista metabólico de la citidina. - Google Patents

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Hiroko NIPPON KAYAKU KABUSHIKI KAISHA MASHIBA
Takeshi c/o NIPPON KAYAKU KABUSHIKI KAISHA ONDA
Akira c/o NIPPON KAYAKU KABUSHIKI KAISHA MASUDA
Keiichirou c/o NIPPON KAYAKU K.K. YAMAMOTO
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Abstract

Un derivado polimérico de un antimetabolito de citidina, que comprende una estructura en la que un grupo amino de un antimetabolito de citidina se une por un enlace amida a un grupo carboxilo de una cadena lateral de un compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de cadena de poli(ácido glutámico), en el que el derivado es un compuesto representado por la fórmula general (1): **Fórmula** en la que R representa un grupo alquilo de C1 a C3; A representa un grupo acilo de C2 a C4, m representa 5 a 100 como valor medio; n representa 50 a 1.000 como valor medio; X representa un residuo de antimetabolito de citidina, un grupo hidroxilo, o un sustituyente hidrófobo, y X representa un residuo de antimetabolito de citidina en 3 a 100 % de m, un grupo hidroxilo en 0 a 95 % de m y un sustituyente hidrófobo en 0 a 80 % de m; y donde el residuo de antimetabolito de citidina es un grupo representado por la fórmula (2): **Fórmula** en la que Z representa un átomo de hidrógeno o un átomo de flúor; -Rf representa un grupo seleccionado del grupo que consiste en sustituyentes de la fórmula (3): **Fórmula**

Description

Campo técnico
La presente invención se refiere a un derivado polimérico de un antimetabolito de citidina, a su uso, y a un método para producir el mismo.
�� Antecedentes
Se han desarrollado diferentes antimetabolitos de citidina para tratar tumores malignos o enfermedades víricas; la citarabina, gemcitabina y similares se usan clínicamente como agentes antitumorales (anticáncer) y la zalcitabina, lamivudina y similares como agentes antivirales.
���
Sin embargo, muchos de estos antimetabolitos de citidina no tienen suficiente eficacia por sí mismos o necesitan ser administrados a dosis altas porque son susceptibles de metabolismo y excreción in vivo a pesar de presentar fuertes actividades in vitro. A modo de ejemplo, la gemcitabina tiene una fuerte actividad para suprimir el crecimiento de las células, in vitro, comparable a la de los agentes
���
anticáncer tales como paclitaxel y doxorubicina, pero es preciso administrarla clínicamente a una dosis alta de 1000 mg/m2 de superficie corporal para cada administración. Se considera que esto es debido a que el grupo amino en la posición 4 de la base se metaboliza e inactiva por la citidina-desaminasa, una enzima metabolizante por que la 2'-desoxicitidina reduce su biodisponibilidad in vivo (véase el
���
Documento de No Patente 1).
La unión de un agente a un polímero puede mejorar a veces la farmacocinética del mismo in vivo para aumentar el efecto terapéutico. El Documento de No Patente 2 describe un derivado polimérico en el que la citarabina se une a un poli(ácido glutámico) que tiene un peso molecular medio de aproximadamente 30.000. Sin
���
embargo, un derivado polimérico de un agente a veces provoca una reacción hipersensible debida a la reacción inmune y, en ese caso, no puede ser administrado en dosis repetidas como un agente.
El Documento de Patente 1 describe un derivado polimérico en el que un derivado de citidina se une a un polietilenglicol, y el Documento de No Patente 3
���
describe un derivado polimérico en el que la citarabina se une a ácido aspártico en un polietilenglicol que tiene el ácido aspártico sustituido en forma ramificada en sus dos extremos. Sin embargo, también existe el problema de la posibilidad de que los efectos terapéuticos de estos derivados poliméricos en la clínica se vean afectados en gran medida por diferencias individuales entre pacientes ya que la liberación del
agente a partir de los derivados depende en gran parte de la reacción de hidrólisis por
la enzima in vivo.
El Documento de Patente 2 describe aquellas moléculas en cada una de las
cuales un agente se une a un polímero tipo bloque obtenido por condensación de un
�� polietilenglicol con poli(ácido aspártico) que forman micelas para proporcionar un medicamento. En adición, el Documento de Patente 3 describe un polímero en el que una sustancia anticáncer se une a los grupos carboxilo de la cadena lateral de ácido glutámico de un polímero tipo bloque obtenido por condensación de un polietilenglicol con poli(ácido glutámico). Sin embargo, estos Documentos de Patentes no describen
���
antimetabolitos de citidina como agentes de unión. Documento de No Patente 1: Cancer Science, Japanese Cancer Association, Vol. 95, p. 105-111 (2004)
Documento de No Patente 2: Cancer Research, American Association for Cancer Research, Vol. 44, p. 25-30 (1984)
���
Documento de No Patente 3: Journal of Controlled Release (Elsevier, England), Vol. 79: p. 55-70 (2002) Documento de Patente 1: Japanese Patent Application Laying Open (KOHYO)
No. 2003-524028 Documento de Patente 2: Japanese Patent No. 2694923
���
Documento de Patente 3: Japanese Patent Application Laying Open (KOKAI) No. 05-000955
Descripción de la invención
Problemas a ser resueltos por la invención
Un objeto de la presente invención es proporcionar un antimetabolito de citidina
��� que tenga una mayor eficacia a dosis bajas y que sirva como un nuevo agente anticáncer o antiviral.
Medios para resolver los problemas
Como resultado de estudios intensivos para resolver los problemas anteriores, los presentes inventores han encontrado un derivado polimérico de un antimetabolito
��� de citidina, particularmente uno que comprende una estructura en la que un grupo amino en la posición 4 de un antimetabolito de citidina está unido por un enlace amida a un grupo carboxilo de un compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales, llegando de este modo a la presente invención.
Específicamente, la presente invención se refiere a los siguientes puntos (1) a (13).
(1) Un derivado polimérico de un antimetabolito de citidina, que comprende una estructura en la que un grupo amino de un antimetabolito de citidina se une por un
�� enlace amida a un grupo carboxilo de una cadena lateral de un compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales.
(2) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en el punto (1) anterior, en el que el resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las
���
cadenas laterales comprende una cadena de poli(ácido glutámico).
(3) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en los puntos (1) o (2) anteriores, en el que el derivado es un compuesto representado por la fórmula general (1):
���
[Fórmula I]
imagen1
en la que R representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C1 a C6; A representa un átomo de hidrógeno, un grupo acilo de C1 a C6, o un grupo alcoxicarbonilo de C1 a C6; m representa 3 a 200 como valor medio; n representa
���
5 a 2.000 como valor medio; X representa un residuo de antimetabolito de citidina, un grupo hidroxilo, o un sustituyente hidrófobo; y X representa un residuo de antimetabolito de citidina en 3 a 100 % de m, un grupo hidroxilo en 0 a 95 % de m y un sustituyente hidrófobo en 0 a 80 % de m.
(4) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en el
���
punto (3) anterior, en el que R representa un grupo alquilo de C1 a C3; A representa un grupo acilo de C2 a C4; m representa 5 a 100 como valor medio; n representa 50 a 1.000 como valor medio; y el residuo de antimetabolito de citidina es un grupo representado por la fórmula (2):
[Fórmula 2]
imagen1
en la que Z representa un átomo de hidrógeno o un átomo de flúor; -Rf representa
�� un grupo seleccionado del grupo que consiste en sustituyentes de la fórmula (3): [Fórmula 3]
imagen1
(5) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en el punto (3) anterior, en el que R representa un grupo metilo; A representa un grupo acetilo; m representa 10 a 60 como valor medio; n representa 100 a 300 como valor medio; X representa un residuo de antimetabolito de citidina o un grupo
��� hidroxilo; y el antimetabolito de citidina representa citarabina, gemcitabina, o 5'desoxi-5-fluorocitidina.
(6) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en los puntos (3) o (4) anteriores, en el que el sustituyente hidrófobo es un derivado de �-aminoácido representado por la fórmula (4):
[Fórmula 4]
imagen1
en la que Q representa una cadena lateral de un aminoácido neutro; W representa un grupo alquilo de C1 a C6 o un grupo bencilo.
�� (7) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en el punto (6) anterior, en el que Q representa un grupo isopropilo o un grupo bencilo; y W representa un grupo bencilo.
(8) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en los puntos (3) o (4) anteriores, en el que el sustituyente hidrófobo es un grupo
��� representado por la fórmula (5):
[Fórmula 5]
imagen2
en la que T representa un grupo alquilo de C1 a C6 opcionalmente sustituido con un grupo fenilo.
(9) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en el punto (8) anterior, en el que T representa un grupo bencilo, un grupo 3-fenipropilo,
���
un grupo 4-fenilbutilo, o un grupo 5-fenipentilo.
(10) El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en el punto (3) anterior, en el que R representa un grupo metilo; A representa un grupo acetilo; m representa 10 a 60 como valor medio; n representa 100 a 300 como valor medio; el antimetabolito de citidina representa citarabina, gemcitabina,
���
o 5'-desoxi-5-fluorocitidina; y el sustituyente hidrófobo representa un grupo benciloxi, un grupo 4-fenilbutoxi, un grupo (1-benciloxicarbonil-2-metil)propilamino,
o un grupo (1-benciloxicarbonil-2-fenil)etilamino.
(11) Un agente antitumoral que comprende el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en uno cualquiera de los puntos (1) a
���
(10) anteriores, como un ingrediente medicamentoso.
(12)
Un agente antiviral que comprende el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en uno cualquiera de los puntos (1) a (10) anteriores, como un ingrediente medicamentoso.
(13)
Un método para producir el derivado polimérico de un antimetabolito de
�� citidina como se ha descrito en uno cualquiera de los puntos (1) a (10) anteriores, que comprende la unión por un enlace amida, utilizando un agente de condensación por deshidratación en un disolvente orgánico, de un grupo amino de un antimetabolito de citidina con un grupo carboxilo de una cadena lateral de un compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de
��� polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales.
Efecto de la invención
El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente
invención tiene una estructura en la que un grupo amino en la posición 4 de un
antimetabolito de citidina se une por un enlace amida con un grupo carboxilo de un
���
compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales. El derivado puede liberar lentamente el antimetabolito de citidina in vivo y es útil como agente anticáncer o antivírico que tiene un excelente efecto terapéutico a dosis bajas. En adición, el tener la propiedad de liberar lentamente el agente independientemente de la enzima, hace
���
que el derivado tenga un efecto terapéutico menos afectado por las diferencias individuales entre pacientes. El derivado polimérico que forma micelas se acumula selectivamente en la parte afectada y sirve como un agente que tiene una mayor eficacia con menos efectos colaterales.
Breve descripción de los dibujos
���
La figura 1 es un gráfico que presenta la evolución en el tiempo de la liberación del agente en ausencia de la enzima; y
La figura 2 es un gráfico que presenta la evolución en el tiempo de la liberación del agente en plasma de ratón. Mejor modo para llevar a cabo la invención
���
El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención comprende una estructura en la que un grupo amino de un antimetabolito de citidina se une por un enlace amida con un grupo carboxilo de una cadena lateral de un compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales.
Para los fines de la presente invención, el “antimetabolito de citidina" no está particularmente limitado siempre que sea un derivado de 4-aminopirimidin-2-ona a la vez que es un compuesto que tiene actividad antitumoral o antiviral, y se refiere a un compuesto representado por la fórmula (2) en el que el resto básico del ácido nucleico
�� es citosina (donde Z es un átomo de hidrógeno) o 5-fluorocitosina (donde Z es un átomo de flúor); y el grupo (Rf) unido al mismo es un grupo seleccionado del grupo que consiste en los sustituyentes de la fórmula (3) anterior.
Ejemplos específicos del mismo incluyen citarabina, gemcitabina, 2'-desoxi-2'metilidencitidina (DMDC), tezacitabina, zalcitabina, lamivudina, 5'-desoxi-5��� fluorocitidina (5'-DFCR), troxacitabina, 2'-C-ciano-2'-desoxi-1-�-D-arabinofuranosil
citosina (CNDAC), 3'-etinilcitidina, y (-)-�-L-dioxolanocitidina.
Según la presente invención, ejemplos del resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales del "compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las
���
cadenas laterales" incluyen un polímero de tipo injerto en el que las cadenas de ácido carboxílico se ramifican a partir de la cadena principal del polímero, o un polímero de tipo bloque en el que se condensan los polímeros de poli(ácido carboxílico).
Ejemplos del compuesto polimérico en el que el resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales es el polímero de tipo injerto incluyen un
���
polímero obtenido, por ejemplo, mediante la reacción de copolimerización de un condensado de polietilenglicol y de un ácido acrílico con un ácido acrílico, anhídrido maleico o similares, seguido por una reacción opcional de hidrólisis como se describe en la Japanese Patent Application Laying Open (KOKAI) No. 11-279083.
Ejemplos de los compuestos poliméricos en los que el resto de polímero que
���
tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales es el polímero de tipo bloque incluyen un compuesto en el que un polietilenglicol que tiene un grupo funcional terminal se une a un poli(ácido carboxílico) que tiene un grupo funcional en el extremo, o un compuesto obtenido por la reacción de polimerización de un compuesto activado por un aminoácido en el que la polimerización empieza con un polietilenglicol que tiene un
��� grupo amino en el extremo como se describe en el Documento de Patente 3. Ejemplos del polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales incluyen poli(ácido acrílico), poli(ácido metacrílico), poli(ácido málico), y poli(ácido glutámico); el preferido es poli(ácido glutámico).
Para los fines de la presente invención, el “polietilenglicol" puede ser un
��� derivado de polietilenglicol, en el que uno o ambos extremos están modificados, en cuyo caso los grupos que modifican ambos extremos pueden ser idénticos o diferentes. Los ejemplos del grupo modificador terminal incluyen un grupo alquilo de C1 a C6 que opcionalmente tiene un sustituyente; se prefiere un grupo alquilo de C1 a C4 que opcionalmente tiene un sustituyente.
Ejemplos del grupo alquilo de C1 a C6 en el grupo alquilo de C1 a C6 que
�� opcionalmente tiene un sustituyente, incluyen un grupo alquilo de C1 a C6 de cadena lineal, ramificada o cíclico. Ejemplos específicos del mismo incluyen un grupo metilo, un grupo etilo, un grupo propilo, un grupo isopropilo, un grupo butilo, un grupo isobutilo, un grupo t-butilo, un grupo pentilo, un grupo isopentilo, un grupo 2metilbutilo, un grupo neopentilo, un grupo 1-etilpropilo, un grupo hexilo, un grupo 4
���
metilpentilo, un grupo 3-metilpentilo, un grupo 2-metilpentilo, un grupo 1-metilpentilo, un grupo 3,3-dimetilbutilo, un grupo 2,2-dimetilbutilo, un grupo 1,1-dimetilbutilo, un grupo 1,2-dimetilbutilo, un grupo 1,3-dimetilbutilo, un grupo 2,3-dimetilbutilo, un grupo 2-etilbutilo, un grupo ciclopropilo, un grupo ciclopentilo, y un grupo ciclohexilo. Es preferible un grupo alquilo de C1 a C4; ejemplos específicos del mismo incluyen un
���
grupo metilo, un grupo etilo, un grupo n-propilo, un grupo isopropilo, un grupo n-butilo,
un grupo s-butilo, y un grupo t-butilo. Es particularmente preferido un grupo metilo, un grupo etilo, un grupo n-propilo,
o un grupo isopropilo. El sustituyente del grupo alquilo de C1 a C6 que tiene opcionalmente un
���
sustituyente no está particularmente limitado; sin embargo, los ejemplos del mismo incluyen un grupo amino, un grupo metilamino, un grupo dimetilamino, un grupo etilamino, y un grupo dietilamino. Es preferible un grupo amino.
Según la presente invención, es preferible el derivado de polietilenglicol, en el que ambos extremos están modificados. Los ejemplos específicos del mismo incluyen
���
un derivado de polietilenglicol que tiene un grupo alquilo de C1 a C6 en un extremo y un grupo amino-alquilo de C1 a C6 en el otro extremo. Es preferible un derivado de polietilenglicol que tiene un grupo alquilo de C1 a C3 en un extremo y un grupo aminoalquilo de C1 a C4 en el otro extremo. Es particularmente preferible un derivado de polietilenglicol que tiene un grupo metilo en un extremo y un grupo aminopropilo en el
��� otro extremo. Según la presente invención, el “polietilenglicol" tiene un peso molecular medio de aproximadamente 200 a 500.000, preferiblemente aproximadamente 500 a 100.000, más preferiblemente aproximadamente 2.000 a 50.000.
Según la presente invención, el "compuesto polimérico que se compone de un
��� resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales" es preferiblemente un polímero de tipo bloque, más preferiblemente un copolímero de bloque de un polietilenglicol con un polímero que tiene grupos
carboxilo en las cadenas laterales.
Ejemplos del copolímero de bloque de un polietilenglicol con un polímero que
tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales incluyen un alcoxipolietilenglicol
�� poli(ácido acrílico), un alcoxipolietilenglicol-poli(ácido metacrílico), y un alcoxipolietilenglicol-poli(ácido glutámico); se prefiere el metoxipolietilenglicolpoli(ácido glutámico).
Según la presente invención, el "compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las
���
cadenas laterales" tiene un número medio de grupos carboxilo por molécula de aproximadamente 3 a 200, preferiblemente aproximadamente 5 a 100, más preferiblemente aproximadamente 10 a 60.
Según la presente invención, el "compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las
���
cadenas laterales" tiene un peso molecular medio de aproximadamente 500 a 500.000, preferiblemente aproximadamente 2.000 a 100.000, más preferiblemente aproximadamente 3.000 a 50.000.
Según la presente invención, la cantidad de antimetabolito de citidina unida por el enlace amida al compuesto polimérico que se compone de un resto de
���
polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales, no está particularmente limitada siempre que esté dentro del intervalo desde uno hasta el número total de los grupos carboxilo para cada compuesto polimérico, y puede ser aquella cantidad que sea suficiente para tener un efecto farmacológico cuando el compuesto se administra in vivo.
���
Es preferible de 3 a 100 %, más preferiblemente de 5 a 70 %, del número total de grupos carboxilo del polímero.
La cantidad anterior que se une, se puede determinar a partir de la intensidad del espectro de absorción en el ultravioleta de un compuesto de la presente invención. La cantidad se puede determinar también sometiendo el derivado polimérico de un
���
antimetabolito de citidina según la presente invención a hidrólisis alcalina para cuantificar el antimetabolito de citidina liberado, por ejemplo, mediante cromatografía de líquidos de alta resolución.
Un compuesto típico como derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención es un compuesto representado por la anterior fórmula
���
general (1), en la que R representa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo de C1 a C6; A representa un átomo de hidrógeno, un grupo acilo de C1 a C6, o un grupo
alcoxicarbonilo de C1 a C6; m representa 3 a 200 como valor medio; n representa 5 a
2.000 como valor medio; X representa un residuo de antimetabolito de citidina, un grupo hidroxilo, o un sustituyente hidrófobo; X representa el residuo de antimetabolito de citidina en 3 a 100 % de m, el grupo hidroxilo en 0 a 95 % de m y el sustituyente
�� hidrófobo en 0 a 80 % de m.
En la fórmula (1), el grupo alquilo de C1 a C6 para R tiene el mismo significado
que el grupo alquilo descrito anteriormente; un grupo preferible es también el mismo
que el anterior.
Ejemplos del grupo acilo de C1 a C6 para A en la fórmula (1) incluyen un grupo
���
formilo, un grupo acetilo, un grupo propionilo, un grupo butirilo, un grupo isobutirilo, un grupo valerilo, un grupo isovalerilo, un grupo pivaloilo, y un grupo hexanoilo. Es preferible un grupo acilo de C2 a C4, por ejemplo, un grupo acetilo o propionilo; es más preferible un grupo acetilo.
Ejemplos del grupo alcoxicarbonilo de C1 a C6 para A en la fórmula (1)
���
incluyen un grupo metoxicarbonilo, un grupo etoxicarbonilo, un grupo propoxicarbonilo, un grupo isopropoxicarbonilo, un grupo n-butoxicarbonilo, un grupo tercbutoxicarbonilo, un grupo pentoxicarbonilo, un grupo hexiloxicarbonilo, un grupo ciclopropoxicarbonilo, un grupo ciclopentiloxicarbonilo, y un grupo ciclohexiloxicarbonilo. Es preferible un grupo metoxicarbonilo, un grupo etoxicarbonilo,
���
un grupo propoxicarbonilo, un grupo isopropoxicarbonilo, un grupo butoxicarbonilo, o un grupo terc-butoxicarbonilo; es más preferible un grupo etoxicarbonilo o un grupo terc-butoxicarbonilo.
En la fórmula (1), m tiene, como valor medio, 3 a 200, preferiblemente 5 a 100, más preferiblemente 10 a 60.
���
En la fórmula (1), n tiene, como valor medio, 5 a 2.000, preferiblemente 50 a 1.000, más preferiblemente 100 a 300.
En la fórmula general (1) para el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención, los derivados de ácido glutámico en cada uno de los cuales X es un residuo de antimetabolito de citidina, un grupo hidroxilo o un
���
sustituyente hidrófobo pueden estar unidos aleatoriamente o formando bloques.
En la fórmula (1), el residuo de antimetabolito de citidina para X significa el residuo del antimetabolito de citidina anterior; los ejemplos particularmente preferidos del antimetabolito de citidina incluyen citarabina, gemcitabina, y 5'-desoxi-5fluorocitidina.
���
En la fórmula (1), los ejemplos del sustituyente hidrófobo para X incluyen diferentes sustituyentes; el sustituyente no está particularmente limitado siempre que
no altere el efecto farmacológico del derivado polimérico de un antimetabolito de citidina. Sin embargo, los ejemplos preferidos del mismo incluyen un derivado de �aminoácido representado por la anterior fórmula (4), en la que Q representa una cadena lateral de un aminoácido neutro; W representa un grupo alquilo de C1 a C6 o
�� un grupo bencilo, y un grupo representado por la anterior fórmula (5), en la que T representa un grupo alquilo de C1 a C6 opcionalmente sustituido con un grupo fenilo.
Los ejemplos de la cadena lateral de un aminoácido neutro para Q en la fórmula (4) incluyen residuos de aminoácidos naturales, tales como un átomo de hidrógeno, un grupo metilo, un grupo isopropilo, un grupo isobutilo, un grupo s-butilo,
���
un grupo bencilo, un grupo hidroximetilo, un grupo 1-hidroxietilo, un grupo carbamoilmetilo, y un grupo 2-carbamoiletilo, y derivados de residuos de aminoácidos, tales como un grupo terc-butoximetilo, un grupo benciloximetilo, un grupo benciloxicarbonilmetilo, y un grupo 2-benciloxicarboniletilo. Los ejemplos preferidos del mismo incluyen un grupo isopropilo, un grupo isobutilo, un grupo s-butilo, un grupo
���
bencilo, un grupo benciloximetilo, un grupo benciloxicarbonilmetilo, y un grupo 2benciloxicarboniletilo; es más preferido un grupo isopropilo, un grupo bencilo, un grupo benciloximetilo, o grupo 2-benciloxicarboniletilo; es particularmente preferido un grupo isopropilo o un grupo bencilo.
Los ejemplos del grupo alquilo de C1 a C6 para W en la fórmula (4) incluyen el
���
mismo grupo que el anterior grupo alquilo; un grupo preferible es el mismo que el anterior.
El grupo alquilo de C1 a C6 para T en la fórmula (5) tiene el mismo significado que el grupo alquilo descrito anteriormente; un grupo preferible es también el mismo que el anterior. Los ejemplos del grupo representado por la fórmula (5) incluyen un
���
grupo metoxi, un grupo etoxi, un grupo n-propoxi, un grupo isopropoxi, un grupo nbutoxi, un grupo terc-butoxi, un grupo n-pentiloxi, un grupo n-hexiloxi, un grupo ciclopropiloxi, un grupo ciclopentiloxi, un grupo ciclohexiloxi, un grupo ciclohexilmetoxi, un grupo benciloxi, un grupo 2-fenetiloxi, un grupo 3-fenilpropoxi, un grupo 4fenilbutoxi, un grupo 5-fenilpentiloxi, y un grupo difenilmetoxi.
���
Los ejemplos del sustituyente hidrófobo incluyen también grupos amino tales como un grupo metilamino, un grupo etilamino, un grupo n-propilamino, un grupo isopropilamino, un grupo n-butilamino, un grupo isobutilamino, un grupo n-pentilamino, un grupo n-hexilamino, un grupo ciclopropilamino, un grupo ciclopentilamino, un grupo ciclohexilamino, un grupo ciclohexilmetilamino, un grupo diciclohexilmetilamino, un
���
grupo anilino, un grupo bencilamino, un grupo 2-fenetilamino, un grupo 3fenilpropilamino, un grupo 4-fenilbutilamino, y un grupo difenilmetilamino.
Como sustituyente hidrófobo para X en la fórmula (1) es particularmente preferible un grupo benciloxi, un grupo 3-fenilpropoxi, un grupo 4-fenilbutoxi, un grupo 5-fenilpentoxi, un grupo (1-benciloxicarbonil-2-metil)propilamino o un grupo (1benciloxicarbonil-2-fenil)etilamino, y más particularmente preferible un grupo benciloxi,
�� un grupo 4-fenilbutoxi, un grupo (1-benciloxicarbonil-2-metil)propilamino o un grupo (1benciloxicarbonil-2-fenil)etilamino.
En la fórmula (1), la proporción de un residuo de antimetabolito de citidina para X es 3 a 100 %, preferiblemente 5 a 70 % basado en el número total de grupos carboxilo (m) del polímero; la proporción de un grupo hidroxilo para X es 0 a 95 %,
���
preferiblemente 5 a 70 % basado en m; y la proporción de un sustituyente hidrófobo para X es 0 a 80 %, preferiblemente 20 a 70 % basado en lo mismo.
En el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención, cuando está presente un grupo carboxilo de la cadena lateral al que no se une el antimetabolito de citidina, el grupo carboxilo puede estar en forma libre o en una
���
forma de sal alcalina. Cuando se obtiene en forma libre, el grupo carboxilo se puede convertir en una forma de sal deseada por un método conocido por sí mismo o un método basado en éste. De manera inversa, cuando se obtiene en forma de sal, el grupo carboxilo se puede convertir en una forma libre o en otra forma de sal deseada por un método conocido por sí mismo o un método basado en éste.
���
Los ejemplos de sales alcalinas incluyen sales de litio, sodio, potasio, magnesio, amonio y trietilamonio.
En el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención, las unidades estructurales que constituyen el resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales pueden ser, cuando están presentes
���
isómeros ópticos, sustancias ópticamente activas, un racemato, o una mezcla de las mismas en cualquier proporción. Por ejemplo, cuando el resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales es un derivado de poli(ácido glutámico), el derivado puede ser un polímero en el que los poli(ácido L-glutámico), poli(ácido Dglutámico), y un ácido L-glutámico sustituido en la cadena lateral o un ácido D
���
glutámico sustituido en la cadena lateral, se unen en cualquier orden y en cualquier proporción.
Los ejemplos particularmente preferidos del derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención incluyen los compuestos que se muestran en la Tabla 1 que sigue.
���
En la Tabla 1, Bzl indica un grupo bencilo; Val, valina; Phe, fenilalanina; y C4H8Ph, un grupo 4-fenilbutilo. En X, los porcentajes de sustitución son valores
aproximados; el resto aparte del residuo y del grupo descritos en la tabla es un grupo hidroxilo. Como antimetabolitos de citidina para X, citarabina, gemcitabina, 5'-desoxi-5fluorocitidina, 2'-desoxi-2'-metilidencitidina (DMDC), 3'-etinilcitidina, 2'-C-ciano-2'desoxi-1-�-D-arabinofuranosil-citosina (CNDAC) y (-)-�-L-dioxolanocitidina, son los
�� siguientes compuestos. [Fórmula 6]
imagen1
Citarabina Gemcitabina 5’-Desoxi-5-fluorocitidina
imagen3
2’-Desoxi-2’-metilidencitidina 3’-Etinilcitidina
imagen1
2'-C-Ciano-2'-desoxi-1-�-D-arabinofuranosil-citosina
imagen1
(-)-�-L-Dioxolanocitidina
Tabla 1
Nº
R n (media) n (media) A X: Antimetabolito de citidina (porcentaje) X: Sustituyente hidrófobo (porcentaje)
1
CH3 272 32 CH3CO Citarabina (30 %) OBzl (50 %)
2
CH3 272 32 CH3CO Citarabina (30 %) Phe-OBzl (40 %)
3
CH3 272 25 CH3CO Citarabina (20 %) Phe-OBzl (60 %)
4
CH3 272 23 CH3CO Gemcitabina (15 %) Phe-OBzl (60 %)
5
CH3 272 23 CH3CO Gemcitabina (15 %) Val-OBzl (60 %)
6
CH3 272 23 CH3CO Gemcitabina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
7
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (30 %) OBzl (50 %)
8
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (30 %) Phe-OBzl (40 %)
9
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (25 %) Phe-OBzl (50 %)
10
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (15 %) Phe-OBzl (60 %)
11
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (15 %) Val-OBzl (60 %)
12
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (25 %) OC4H8Ph (40 %)
13
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (20 %) OC4H8Ph (50 %)
14
CH3 272 26 CH3CO Gemcitabina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
15
CH3 272 32 CH3CO Gemcitabina (30 %) Phe-OBzl (40 %)
16
CH3 272 32 CH3CO Gemcitabina (30 %) Phe-OBzl (50 %)
17
CH3 272 32 CH3CO Gemcitabina (20 %) Phe-OBzl (60 %)
18
CH3 272 32 CH3CO Gemcitabina (15 %) Val-OBzl (60 %)
19
CH3 272 32 CH3CO Gemcitabina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
20
CH3 272 35 CH3CO Gemcitabina (15 %) OC4H8Ph (55 %)
21
CH3 272 26 CH3CO 5'-Desoxi-5-fluorocitidina (15 %) Phe-OBzl (60 %)
22
CH3 272 26 CH3CO 5'-Desoxi-5-fluorocitidina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
23
CH3 272 26 CH3CO 2'-Desoxi-2'-metilidencitidina (15 %) Phe-OBzl (60 %)
24
CH3 272 26 CH3CO 2'-Desoxi-2'-metilidencitidina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
25
CH3 272 26 CH3CO 3'-Etinilcitidina (15 %) Phe-OBzl (60 %)
26
CH3 272 26 CH3CO 3'-Etinilcitidina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
27
CH3 272 26 CH3CO 2'-C-Ciano-2'-desoxi-1-�-Darabinofuranosil-citosina (15 %) Phe-OBzl (60 %)
28
CH3 272 26 CH3CO 2'-C-Ciano-2'-desoxi-1-�-Darabinofuranosil-citosina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
29
CH3 272 26 CH3CO (-)-�-L-Dioxolanocitidina (15 %) Phe-OBzl (60 %)
30
CH3 272 26 CH3CO (-)-�-L-Dioxolanocitidina (15 %) OC4H8Ph (60 %)
A modo de ejemplo particular no limitante, el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención se puede producir por condensación, utilizando un agente de condensación por deshidratación en un disolvente orgánico, de un antimetabolito de citidina con el copolímero de bloque
�� metoxipolietilenglicol-poli(ácido glutámico) preparado según el método descrito en el Documento de Patente 3.
El disolvente usado en la reacción anterior no está particularmente limitado siempre que permita que se lleve a cabo la reacción; sin embargo, los ejemplos del mismo incluyen un hidrocarburo aromático tal como tolueno y xileno, un hidrocarburo
���
halogenado tal como cloruro de metileno, cloroformo y 1,2-dicloroetano, un éter tal como tetrahidrofurano, dioxano, dimetoxietano y dietilenglicol-dimetil-éter, un nitrilo tal como acetonitrilo y propionitrilo, una amida tal como dimetilformamida, dimetilacetamida y N-metilpirrolidona, una urea tal como 1,3-dimetilimidazolidinona, y una mezcla de estos disolventes. Son preferibles la amida o la urea; es más preferida
���
la dimetilformamida o la 1,3-dimetilimidazolidinona.
El agente de condensación por deshidratación usado en la reacción anterior no está particularmente limitado siempre que permita la realización de la reacción de condensación de un grupo amino en la posición 4 de un antimetabolito de citidina con el grupo carboxilo; sin embargo, los ejemplos preferidos del mismo incluyen DMT-MM
���
(cloruro de 4-(4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolinio) y 2-etoxi-1-etoxicarbonil1,2-dihidroquinolina. La temperatura de reacción en la reacción anterior es típicamente 4 a 60 ºC,
preferiblemente 15 a 50 ºC. Después de la reacción anterior, se pueden aplicar apropiadamente unos
���
medios de separación conocidos por sí mismos tales como, por ejemplo, concentración a vacío, extracción con disolvente, cristalización, diálisis y cromatografía, si es necesario, para aislar y purificar un compuesto deseado.
Por el método anterior, se puede obtener un derivado polimérico en el que X consiste en un residuo de antimetabolito de citidina solo o en un residuo de
���
antimetabolito de citidina y un grupo hidroxilo.
Cuando el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención tiene un sustituyente hidrófobo, se puede producir el derivado por condensación utilizando un agente de condensación por deshidratación en un disolvente orgánico, un grupo amino de un antimetabolito de citidina con un grupo
���
carboxilo no sustituido en una cadena lateral de un compuesto polimérico que se compone del siguiente resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos
carboxilo en las cadenas laterales que se obtiene introduciendo un sustituyente hidrófobo en una parte de los grupos carboxilo del copolímero de bloque metoxipolietilenglicol-poli(ácido glutámico) preparado, por ejemplo, según el método descrito en el Documento de Patente 3.
�� El sustituyente hidrófobo se introduce de la siguiente manera. Por ejemplo, cuando el sustituyente hidrófobo es un grupo alcoxi, la introducción se realiza mediante la condensación de un alcohol correspondiente con el grupo carboxilo (esterificación) utilizando un agente de condensación por deshidratación en un disolvente o sometiendo un haluro de alquilo correspondiente o similares y el grupo
���
carboxilo a una reacción de sustitución nucleófila en presencia de una base en un disolvente. Por ejemplo, cuando el sustituyente hidrófobo es un grupo amino sustituido, el derivado que tiene el sustituyente se puede producir condensando una amina correspondiente con el grupo carboxilo (amidación) utilizando un agente de condensación por deshidratación en un disolvente.
���
El disolvente utilizado en la condensación por deshidratación (esterificación) anterior, no está particularmente limitado siempre que permita que la reacción se lleve a cabo. Sin embargo, se puede utilizar el mismo disolvente que es utilizable en la condensación por deshidratación del anterior copolímero de bloque metoxipolietilenglicol-poli(ácido glutámico) con un antimetabolito de citidina; un
���
disolvente preferible es también el mismo anterior. El agente de condensación por deshidratación no está particularmente limitado siempre que permita que se realice la condensación por deshidratación de un alcohol con un grupo carboxilo; sin embargo, se prefieren la diciclohexilcarbodiimida, diisopropilcarbodiimida, 1-dimetilaminopropil-3etilcarbodiimida, carbonildiimidazol, cloroformiato de isobutilo, o cloruro de ácido
��� piválico. Se puede utilizar un ayudante de la reacción en la reacción de condensación por deshidratación; ejemplos de los mismos incluyen N-hidroxisuccinimida, 1hidroxibenzotriazol, 4-dimetilaminopiridina y 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina.
La temperatura de reacción en la reacción de condensación por deshidratación
���
es típicamente 4 a 60 ºC, preferiblemente 15 a 50 ºC. El tiempo de reacción es de 2 horas a varios días, preferiblemente 4 a 48 horas.
El disolvente utilizado en la anterior reacción de sustitución nucleófila no está particularmente limitado siempre que permita que se realice la reacción. Sin embargo, se puede utilizar el mismo disolvente que es utilizable en la condensación por
���
deshidratación del anterior copolímero de bloque metoxipolietilenglicol-poli(ácido glutámico) con un antimetabolito de citidina; un disolvente preferible es también el
mismo anterior. Los ejemplos de la base incluyen un carbonato de un metal alcalino tal como carbonato de litio, carbonato de sodio y carbonato de potasio; un hidruro de un metal alcalino tal como hidruro de litio, hidruro de sodio e hidruro de potasio; un hidróxido de un metal alcalino tal como hidróxido de litio, hidróxido de sodio e hidróxido
�� de potasio; un alcóxido de un metal alcalino tal como metóxido de litio, metóxido de sodio, etóxido de sodio y terc-butóxido de potasio; y una amina orgánica tal como trietilamina, tributilamina, N,N-diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, piridina, 4-(N,Ndimetilamino)piridina, N,N-dimetilanilina, N,N-dietilanilina, 1,5-diazabiciclo[4.3.0]nona5-eno, 1,4-diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) y 1,8-diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno
��� (DBU); se prefiere una amina orgánica. La temperatura de reacción en la reacción anterior de sustitución nucleófila es típicamente de 4 a 60 ºC, preferiblemente de temperatura ambiente a 50 ºC. El tiempo de reacción es desde una hora hasta varios días, preferiblemente de 4 a 48 horas.
El disolvente utilizado en la anterior reacción de condensación por
���
deshidratación (reacción de amidación) no está particularmente limitado siempre que permita que se lleve a cabo la reacción. Sin embargo, se puede utilizar el mismo disolvente que el utilizable en la condensación por deshidratación del anterior copolímero de bloque metoxipolietilenglicol-poli(ácido glutámico) con un antimetabolito de citidina; un disolvente preferible es también el mismo anterior. El agente de
���
condensación por deshidratación no está particularmente limitado siempre que permita realizar la condensación por deshidratación de una amina con un grupo carboxilo; sin embargo, se prefieren la diciclohexilcarbodiimida, diisopropilcarbodiimida, 1dimetilaminopropil-3-etilcarbodiimida, carbonildiimidazol, cloroformiato de isobutilo, cloruro de ácido piválico, DMT-MM (cloruro de 4-(4,6-dimetoxi-1,3,5-triazin-2-il)-4
���
metilmorfolinio), TFFH (hexafluorofosfato de tetrametilfluoroformamidinio), o BOP (hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilaminofosfonio).
Se puede utilizar un ayudante de la reacción en la reacción de condensación por deshidratación; ejemplos de los mismos incluyen N-hidroxisuccinimida, 1hidroxibenzotriazol, 4-dimetilaminopiridina y 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina.
���
La temperatura de reacción en la reacción de condensación por deshidratación es típicamente de 4 a 60 ºC, preferiblemente de temperatura ambiente a 50 ºC. El tiempo de reacción es de una hora a varios días, preferiblemente de 4 a 48 horas.
Puesto que no importa la secuencia de la reacción para la unión del sustituyente hidrófobo y el antimetabolito de citidina al compuesto polimérico, se
���
pueden mezclar estos para la reacción. Sin embargo, el sustituyente hidrófobo se introduce preferiblemente en el soporte polimérico antes de la unión del antimetabolito
de citidina para evitar la reacción y descomposición del antimetabolito ya que el cuerpo
de actividad tiene un grupo multifuncional.
El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente
invención puede formar micelas que tienen cubiertas formadas por el resto de
�� polietilenglicol en agua. La formación de las micelas se puede identificar, por ejemplo, mediante cromatografía de filtración en gel (GPC) o dispersión dinámica de la luz.
Según la presente invención, la formación de las micelas se facilita por la unión del grupo carboxilo, que no está unido al antimetabolito de citidina, al sustituyente hidrófobo.
���
La presente invención engloba un agente antitumoral o antiviral que comprende el derivado polimérico descrito anteriormente de un antimetabolito de citidina como un ingrediente medicamentoso. El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina se puede administrar tal cual o en la forma de una composición farmacéutica en la que se mezcla con sustancias farmacéuticamente aceptables. La forma farmacéutica de la
���
composición farmacéutica puede ser cualquier forma farmacéutica tal como un inyectable, un polvo, un gránulo, un comprimido y un supositorio. Estas preparaciones pueden contener también diferentes sustancias auxiliares para uso farmacéutico, a saber, un vehículo y otros auxiliares incluyendo aditivos tales como un estabilizante, un conservante, un agente lubricante y un emulsionante.
���
El contenido del derivado polimérico de un antimetabolito de citidina en una preparación varía de forma muy diversa dependiendo de la preparación; sin embargo, es típicamente de 0,1 a 100 % en peso, preferiblemente de 1 a 98 % en peso.
La indicación del agente antitumoral de la presente invención que comprende el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como un ingrediente
���
medicamentoso no está particularmente limitada; sin embargo, el agente se puede usar para cánceres tales como, por ejemplo, cáncer de pulmón de células no pequeñas, cáncer de páncreas, cáncer de estómago, cáncer de colon, cáncer rectal, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de vejiga y sarcoma de Kaposi asociado con el SIDA.
���
La indicación del agente antiviral de la presente invención que comprende el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como un ingrediente medicamentoso no está particularmente limitada; sin embargo, el agente se puede usar, por ejemplo, para el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), herpes zoster, enfermedad infecciosa por virus de herpes simplex, y similares y se puede
���
emplear también con el fin de prevenir la infección.
El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención se puede administrar por cualquier método incluyendo administración oral, inyección, administración intrarrectal, administración intraportal, en mezcla para perfusión de un órgano, y administración local en un órgano afectado. Sin embargo, es
�� preferida la administración parenteral; más preferida la administración intravenosa o intraarterial por inyección o administración local en un órgano afectado. La dosis del derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la presente invención varía dependiendo del estado de la enfermedad, el método de administración, la condición, edad y peso corporal de un paciente, y similares; sin embargo, es típicamente de 1 mg
���
a 5.000 mg, preferiblemente de 10 mg a 2.000 mg, por m2 de superficie corporal, que se puede administrar de una sola vez o en varias porciones al día. La administración se puede realizar diariamente, o repetidamente durante varios días a varios meses. Cuando sea necesario se puede utilizar un método de administración, dosis y programa de administración distinto del anterior.
���
El derivado polimérico de la presente invención incluye también aquel al que se une un profármaco. Aquí, el profármaco es un derivado químico de un compuesto parental biológicamente activo, que libera el compuesto parental in vivo cuando se administra. Ejemplos
���
La presente invención se describe a continuación con más detalle en referencia a los Ejemplos, Ejemplos de referencia y Ejemplos de ensayo. Sin embargo, no se pretende limitar a ellos el alcance de la invención.
Ejemplo de referencia 1: Síntesis del copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000
���
con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 26
Se disolvió un polietilenglicol que tiene un grupo metoxi en un extremo y un grupo 3-aminopropilo en el otro extremo (SUNBRIGHT MEPA-12T de NOF Corporation, peso molecular medio: 12.000, 16 g) en dimetilsulfóxido (320 mL), se
��� añadió entonces al mismo anhídrido N-carboxílico de �-bencil-L-glutamato (BLG-NCA, 9,48 g; 27 equivalentes basados en el polietilenglicol) seguido por agitación a 30 ºC durante la noche. Se añadió gota a gota con agitación la solución de reacción a una mezcla de disolventes de éter isopropílico-etanol (4:1, 6,4 L), que se agitó después durante 3 horas más. Se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una
��� mezcla de disolventes de éter isopropílico-etanol (4:1, 400 mL). El producto resultante (22,78 g) se disolvió en N,N-dimetilformamida (370 mL), a la que se añadió después anhídrido acético (6,83 mL), seguido por agitación a 20 ºC durante la noche. La solución resultante se añadió gota a gota con agitación a una mezcla de disolventes de éter isopropílico-acetato de etilo (4:1, 3,7 L), que se agitó después durante 3 horas
�� más. Se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter isopropílico-acetato de etilo (4:1, 300 mL). El producto resultante (22,92 g) se disolvió en N,N-dimetilformamida (370 mL), a la que se añadió después paladio-carbón al 5 % (conteniendo 55 % de agua, 2,50 g), seguido por agitación a 30 ºC en atmósfera de hidrógeno durante 4 horas y después a temperatura ambiente
���
durante la noche. Después de separar por filtración el paladio-carbón, se añadió el filtrado gota a gota con agitación a una mezcla de disolventes de éter isopropílicoacetato de etilo (4:1, 5 L), que se agitó después durante 1 hora más. Se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter isopropílico-acetato de etilo (4:1, 300 mL). El producto resultante (16 g) se disolvió en
���
agua destilada (800 mL), a la que se añadió después una solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M para ajustar el pH de la solución a 11. Se añadió a la misma agua destilada para obtener un volumen final de solución de 1.600 mL, seguido por la adición de cloruro de sodio (80 g). Se pasó esta solución a través de una columna de la resina de adsorción HP-20ss (de Mitsubishi Chemical Corporation, 500 mL); se lavó
���
la columna con una solución acuosa de cloruro de sodio al 5 % (2.000 mL) y agua destilada (20.000 mL) y después se eluyó con una solución acuosa de acetonitrilo al 50 % (2.500 mL). La fracción eluida que contiene el compuesto deseado se pasó y se eluyó a través de una columna de la resina de cambio catiónico Dowex 50W (de The Dow Chemical Company, tipo protónico, 100 mL); se eluyó la columna adicionalmente
���
con acetonitrilo acuoso al 50 % (150 mL). La fracción eluida que contiene el compuesto deseado se concentró a presión reducida hasta que el volumen de la solución llegó aproximadamente a 300 mL, y después se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (15,84 g).
El grado medio de polimerización de ácido glutámico (el número de ácidos
���
carboxílicos) en una molécula del compuesto fue de 26,22, basado en el valor de titulación obtenido utilizando una solución acuosa de hidróxido de sodio.
Ejemplo de referencia 2: Síntesis del copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente
��� 41
Según el método descrito en el Ejemplo de referencia 1, se utilizaron 45 equivalentes de BLG-NCA basados sobre el polietilenglicol para obtener el compuesto del epígrafe.
El grado medio de polimerización de ácido glutámico (el número de ácidos
�� carboxílicos) en una molécula del compuesto fue de 41,45, basado en el valor de titulación obtenido utilizando una solución acuosa de hidróxido de sodio.
Ejemplo de referencia 3: Síntesis del copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente
��� 24
Según el método descrito en el Ejemplo de referencia 1, se utilizaron 25 equivalentes de BLG-NCA basados sobre el polietilenglicol para obtener el compuesto del epígrafe. El grado medio de polimerización de ácido glutámico (el número de ácidos carboxílicos) en una molécula del compuesto fue de 23,70, basado en el valor de
���
titulación obtenido utilizando una solución acuosa de hidróxido de sodio.
Ejemplo de referencia 4: Síntesis del copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 32
���
Según el método descrito en el Ejemplo de referencia 1, se utilizaron 35 equivalentes de BLG-NCA basados sobre el polietilenglicol para obtener el compuesto del epígrafe.
El grado medio de polimerización de ácido glutámico (el número de ácidos carboxílicos) en una molécula del compuesto fue de 31,71, basado en el valor de titulación obtenido utilizando una solución acuosa de hidróxido de sodio.
���
Ejemplo de referencia 5: Síntesis del copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 36
Según el método descrito en el Ejemplo de referencia 1, se utilizaron 40
���
equivalentes de BLG-NCA basados sobre el polietilenglicol para obtener el compuesto del epígrafe.
El grado medio de polimerización de ácido glutámico (el número de ácidos carboxílicos) en una molécula del compuesto fue de 35,90, basado en el valor de titulación obtenido utilizando una solución acuosa de hidróxido de sodio.
Ejemplo de referencia 6: Síntesis del copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 21
�� Según el método descrito en el Ejemplo de referencia 1, se utilizaron 23 equivalentes de BLG-NCA basados sobre el polietilenglicol para obtener el compuesto del epígrafe.
El grado medio de polimerización de ácido glutámico (el número de ácidos carboxílicos) en una molécula del compuesto fue de 21,38, basado en el valor de
���
titulación obtenido utilizando una solución acuosa de hidróxido de sodio.
Ejemplo de referencia 7: Síntesis del copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 26
���
Según el método descrito en el Ejemplo de referencia 1, se utilizaron 30 equivalentes de BLG-NCA basados sobre el polietilenglicol para obtener el compuesto del epígrafe.
El grado medio de polimerización de ácido glutámico (el número de ácidos carboxílicos) en una molécula del compuesto fue de 26,48, basado en el valor de
���
titulación obtenido utilizando una solución acuosa de hidróxido de sodio.
Ejemplo de referencia 8: Síntesis del conjugado de amida de éster bencílico de Lfenilalanina con un copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 24
���
El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 24 (1,533 g) descrito en el Ejemplo de referencia 3, se disolvió en N,N-dimetilformamida (32 mL), a la que se añadieron entonces 4-toluenosulfonato de éster bencílico de L-fenilalanina (0,464 g), TFFH
���
(0,286 g), N,N-diisopropiletilamina (0,672 mL) y 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina (0,495 g), seguido por agitación de la mezcla a 37 ºC durante 20 horas. Se enfrió la solución de reacción a temperatura ambiente y después se diluyó con etanol (64 mL), al que se añadió después éter diisopropílico (256 mL) gota a gota con agitación. Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una
mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 30 % (45 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). Se añadió acetonitrilo (15 mL) a la solución dializada, y se pasó la mezcla a
�� través de la resina de cambio catiónico Dowex 50W (tipo protónico), que se eluyó con acetonitrilo acuoso al 50 %. La fracción eluida que contiene el compuesto deseado se concentró a presión reducida hasta 1/2 volumen y se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (1,689 g).
Después de hidrolizar el compuesto, se cuantificó el alcohol bencílico liberado
��� por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) para determinar la tasa de unión por enlace amida del grupo Phe-OBzl en el compuesto. Como resultado, la tasa de unión fue de 32,8 % basada en los grupos carboxilo del poli(ácido glutámico).
Método de hidrólisis
El compuesto del epígrafe (34,48 mg) se disolvió en metanol (1 mL), al cual se
���
añadió entonces una solución acuosa de hidróxido de sodio 0,5 M (1 mL), seguido por agitación a 40 ºC durante una hora. Se neutralizó la solución con ácido acético y se diluyó después con agua destilada para preparar 5 mL exactos de solución.
Condiciones de análisis de HPLC (Análisis de alcohol bencílico) Columna: Inertsil ODS-3 (tamaño de partícula: 5 µm), 4,6 ø x 150 mm;
���
Temperatura de la columna: 40 ºC; Eluyente: solución A: solución acuosa de ácido fosfórico al 1%, solución B: acetonitrilo; Gradiente: % solución B (tiempo: minutos) 30 (O), 80 (10); Caudal: 1 mL/min;
���
Detector (longitud de onda de detección): UV (260 nm)
Ejemplo de referencia 9: Síntesis del conjugado de amida de éster bencílico de Lfenilalanina con un copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 41
���
El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 41 (176,5 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 2, se disolvió en N,N-dimetilformamida (5,3 mL), a la que se añadieron entonces 4-toluenosulfonato de éster bencílico de L-fenilalanina (63,0 mg), TFFH (38,9
���
mg), N,N-diisopropiletilamina (117,3 µL) y 2,6-di-t-butil-4-metilpiridina (87,0 mg),
seguido por agitación de la mezcla a 37 ºC durante 22 horas. Se enfrió la solución de reacción a temperatura ambiente y después se diluyó con etanol (10,6 mL), al que se añadió después éter diisopropílico (42,4 mL) gota a gota con agitación. Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una
�� mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 20 % (16 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se pasó a través de la resina de cambio catiónico Dowex 50W (tipo protónico, 9 mL), que se eluyó con acetonitrilo acuoso al 50 %. La
���
fracción eluida que contiene el compuesto deseado se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (194,0 mg).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo de referencia 8, se cuantificó el alcohol bencílico liberado por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que en el Ejemplo de referencia 8
���
para determinar la tasa de unión por enlace amida del grupo Phe-OBzl en el compuesto. Como resultado, la tasa de unión fue de 32,6 % basada en los grupos carboxilo del poli(ácido glutámico).
Ejemplo de referencia 10: Síntesis del conjugado de amida de éster bencílico de Lfenilalanina con un copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol
���
que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 32
El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene
un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene
un grado de polimerización de aproximadamente 32 (668 mg) descrito en el Ejemplo
���
de referencia 4, se disolvió en N,N-dimetilformamida (13 mL), a la que se añadieron entonces 4-toluenosulfonato de éster bencílico de L-fenilalanina (282 mg), TFFH (175 mg) y N,N-diisopropiletilamina (345 µL), seguido por agitación de la mezcla a 40 ºC durante 20 horas. Se enfrió la solución de reacción a temperatura ambiente y después se diluyó con etanol (26 mL), al que se añadió después éter diisopropílico (104 mL)
���
gota a gota con agitación. Se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 50 % (16 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se pasó a través de la resina de cambio catiónico
���
Dowex 50W (tipo protónico, 10 mL), que se eluyó con acetonitrilo acuoso al 50 %. La
fracción eluida que contiene el compuesto deseado se sometió a secado por
congelación para obtener el compuesto del epígrafe (762 mg).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo de
referencia 8, se cuantificó el alcohol bencílico liberado por cromatografía de líquidos de
�� alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que en el Ejemplo de referencia 8 para determinar la tasa de unión por enlace amida del grupo Phe-OBzl en el compuesto. Como resultado, la tasa de unión fue de 41,8 % basada en los grupos carboxilo del poli(ácido glutámico).
Ejemplo de referencia 11: Síntesis del conjugado de amida de éster bencílico de L
���
valina con un copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 36
El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene
���
un grado de polimerización de aproximadamente 36 (531 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 5, se disolvió en N,N-dimetilformamida (10,6 mL), a la que se añadieron entonces 4-toluenosulfonato de éster bencílico de L-valina (195 mg), TFFH (135 mg) y N,N-diisopropiletilamina (288 µL), seguido por agitación de la mezcla a 40 ºC durante 30 horas. Se enfrió la solución de reacción a temperatura ambiente y después se
���
diluyó con etanol (20 mL), al que se añadió después éter diisopropílico (80 mL) gota a gota con agitación. Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílicoetanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 30 % (25 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de
���
diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). Se añadió a la solución dializada resina de cambio catiónico Dowex 50W (tipo protónico, 3 mL), que se agitó durante 30 minutos, seguido por la separación de la resina por filtración. El filtrado que contiene el compuesto deseado se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (559 mg).
���
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo de referencia 8, se cuantificó el alcohol bencílico liberado por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que en el Ejemplo de referencia 8 para determinar la tasa de unión por enlace amida del grupo Val-OBzl en el compuesto. Como resultado, la tasa de unión fue de 41,3 % basada en los grupos
���
carboxilo del poli(ácido glutámico).
Ejemplo de referencia 12: Síntesis del conjugado de amida de éster bencílico de Lfenilalanina con un copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 26
�� El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 26 (6,00 g) descrito en el Ejemplo de referencia 1, se disolvió en N,N-dimetilformamida (150 mL), a la que se añadieron entonces hidrocloruro de éster bencílico de L-fenilalanina (2,08 g), DMT-MM (2,37 g) y
���
N,N-diisopropiletilamina (1,24 mL), seguido por agitación de la mezcla a 40 ºC durante la noche. Se enfrió la solución de reacción a temperatura ambiente y después se añadió gota a gota a una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1,
1.500 mL). Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1).
���
El producto resultante se disolvió en DMF acuosa al 97 % en peso (150 mL), a la que se añadió la resina de cambio catiónico Dowex 50W (tipo protónico, 15 mL) antes de agitar la mezcla a temperatura ambiente durante 2 horas, seguido por la separación de la resina por filtración y lavado de la resina con DMF (75 mL). El filtrado resultante se añadió gota a gota a una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1)
���
(2.400 mL), que se agitó durante 30 minutos, seguido por la recogida del depósito precipitado por filtración para obtener el compuesto del epígrafe (6,88 g).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo de referencia 8, se cuantificó el alcohol bencílico liberado por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que en el Ejemplo de referencia 8
���
para determinar la tasa de unión por enlace amida del grupo Phe-OBzl en el compuesto. Como resultado, la tasa de unión fue de 62,4 % basada en los grupos carboxilo del poli(ácido glutámico).
Ejemplo de referencia 13: Síntesis del conjugado de éster de bromuro de bencilo con un copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso
���
molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 26
El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene
un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene
un grado de polimerización de aproximadamente 26 (342 mg) descrito en el Ejemplo
��� de referencia 1, se disolvió en N,N-dimetilformamida (6,8 mL), a la que se añadieron entonces bromuro de bencilo (29,0 µL) y N,N-diisopropiletilamina (53,1 µL), seguido por agitación de la mezcla a 37 ºC durante la noche. Se enfrió la solución de reacción a temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (13,6 mL), al que se añadió éter diisopropílico (54,4 mL) gota a gota con agitación. Después de una hora de
�� agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 50 % (20 mL), y se pasó la solución a través de la resina de cambio catiónico Dowex 50W (tipo protónico, 4 mL) que se eluyó después con acetonitrilo acuoso al 50 %. La fracción eluida que contiene el compuesto deseado se
���
concentró a presión reducida hasta 1/2 volumen y después se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (352 mg).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo de referencia 8, se cuantificó el alcohol bencílico liberado por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que en el Ejemplo de referencia 8
���
para determinar la tasa de unión del grupo OBzl en el compuesto. Como resultado, la tasa de unión fue de 25,0 % basada en los grupos carboxilo del poli(ácido glutámico).
Ejemplo de referencia 14: Síntesis del conjugado de éster de bromuro de 4-fenilbutilo con un copolímero de bloque N-acetilado de monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con poli(ácido glutámico) que tiene un
���
grado de polimerización de aproximadamente 26
El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 26 (2,33 g) descrito en el Ejemplo de referencia 7, se disolvió en N,N-dimetilformamida (50 mL), a la que se añadieron
���
entonces bromuro de 4-fenilbutilo (682 mg) y 1,8-diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno (DBU, 598 µL), seguido por agitación de la mezcla a 38 ºC durante la noche. Se enfrió la solución de reacción a temperatura ambiente y después se añadió gota a gota a una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1, 500 mL). Después de una hora de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una
���
mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 50 %, al cual se añadió la resina de cambio catiónico Dowex 50W (tipo protónico, 5 mL) antes de agitar la mezcla durante 2 horas, seguido por la separación de la resina por filtración y sometiendo después el filtrado a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (2,54 g).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo de referencia 8, se cuantificó el 4-fenilbutanol liberado por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) para determinar la tasa de unión del grupo 4-fenilbutoxi en el compuesto. Como resultado, la tasa de unión fue de 65,7 % basada en los grupos
�� carboxilo del poli(ácido glutámico).
Ejemplo 1: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 21; y X es gemcitabina o grupo hidroxilo
Se añadieron N,N-dimetilformamida (15 mL) y N,N-diisopropiletilamina (192 µL)
���
al copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 21 (759 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 6 y a hidrocloruro de gemcitabina (330 mg), que se agitó después a 37 ºC. Después de disolución, se añadió a la misma 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2
���
dihidroquinolina (EEDQ, 300 mg), que se agitó a 37 ºC durante 20 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (30 mL), al que se añadió éter diisopropílico (120 mL) gota a gota con agitación. Después de una hora de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se
���
disolvió en acetonitrilo acuoso al 25 % (40 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (1.078 mg).
Después de hidrolizar el compuesto, la gemcitabina liberada se cuantificó por
���
cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) para determinar el contenido de gemcitabina del compuesto. Como resultado, el contenido fue de 20,8 % (p/p) (58,0 % basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de hidrocloruro de gemcitabina. En adición, cuando el compuesto de la presente invención se sometió a análisis por HPLC, el contenido de gemcitabina libre fue de 0,3 % o menos.
���
Método de hidrólisis
El compuesto del epígrafe (3,60 mg) se disolvió en metanol (0,5 mL), al que se añadió entonces agua con amoníaco concentrado (0,5 mL) antes del sellado, seguido por agitación a 37 ºC durante una hora. Se neutralizó la solución con ácido acético y se diluyó después con agua destilada para preparar 10 mL exactos de solución.
���
Condiciones de análisis de HPLC (análisis de gemcitabina)
Columna: Inertsil ODS-3 (tamaño de partícula: 5 µm), 4,6 ø x 150 mm; Temperatura de la columna: 40 ºC; Eluyente: tampón de fosfato (10 mM, pH 6,9) 95 % -acetonitrilo 5 %; Caudal: 1 mL/min;
�� Detector (longitud de onda de detección): UV (275 nm)
Ejemplo 2: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 24; y X es gemcitabina, grupo hidroxilo o residuo de éster bencílico de L-fenilalanina
Se añadieron N,N-dimetilformamida (26 mL) y N,N-diisopropiletilamina (0,213
���
mL) al compuesto (1,298 g) descrito en el Ejemplo de referencia 8 y a hidrocloruro de gemcitabina (0,366 g), y se agitó después a 37 ºC. Después de disolución, se añadió a la misma 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 0,362 g), y se agitó a 37 ºC durante la noche. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (52 mL), al que se añadió éter diisopropílico (208 mL) gota a
���
gota con agitación. Después de una hora de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílicoetanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 25 % (40 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a
���
secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (1,330 g).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo 1, la gemcitabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que las del Ejemplo 1 para determinar el contenido de gemcitabina del compuesto. Como resultado, el contenido fue de 10,7 % (p/p) (28,1
���
% basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de hidrocloruro de gemcitabina. En adición, cuando el compuesto se sometió a análisis por HPLC, el contenido de gemcitabina libre fue de 0,3 % o menos.
Ejemplo 3: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 41;
���
y X es gemcitabina, grupo hidroxilo o residuo de éster bencílico de L-fenilalanina
Se añadieron N,N-dimetilformamida (3,3 mL) y N,N-diisopropiletilamina (39,2 µL) al compuesto (165 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 9 y a hidrocloruro de gemcitabina (67,4 mg), que se agitó después a 37 ºC. Después de disolución, se añadió a la misma 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 56,0 mg), que
���
se agitó después a 37 ºC durante 23 horas. La solución de reacción se enfrió a
temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (6,6 mL), al que se añadió éter diisopropílico (26,4 mL) gota a gota con agitación. Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en
�� acetonitrilo acuoso al 10 % (16 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (183 mg).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo 1, la
���
gemcitabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que las del Ejemplo 1 para determinar el contenido de gemcitabina del compuesto de la presente invención. Como resultado, el contenido fue de 21,2 % (p/p) (42,6 % basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de hidrocloruro de gemcitabina. En adición, cuando el compuesto se
���
sometió a análisis por HPLC, el contenido de gemcitabina libre fue de 0,3 % o menos.
Ejemplo 4: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 26; y X es gemcitabina, grupo hidroxilo o grupo benciloxi
Se añadieron N,N-dimetilformamida (6 mL) y N,N-diisopropiletilamina (63,1 µL)
���
al compuesto (295 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 13 y a hidrocloruro de gemcitabina (108,5 mg), y se agitó después a 37 ºC. Después de disolución, se añadió a la misma 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 98,2 mg), y se agitó a 37 ºC durante 23 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (12 mL), al que se añadió éter diisopropílico (48 mL) gota a
���
gota con agitación. Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílicoetanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 10 % (16 mL), que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a
���
secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (334 mg).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo 1, la gemcitabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que las del Ejemplo 1 para determinar el contenido de gemcitabina del compuesto de la presente invención. Como resultado, el contenido
���
fue de 20,5 % (p/p) (49,9 % basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico))
en términos de hidrocloruro de gemcitabina. En adición, cuando el compuesto se sometió a análisis por HPLC, el contenido de gemcitabina libre fue de 5,1 %.
Ejemplo 5: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 36;
�� y X es gemcitabina, grupo hidroxilo o residuo de éster bencílico de L-valina
Se añadieron N,N-dimetilformamida (10,3 mL) y N,N-diisopropiletilamina (77,9
µL) al compuesto (515 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 11 y a hidrocloruro de
gemcitabina (134 mg), y se agitó después a 40 ºC. Después de disolución, se añadió a
la misma 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 166 mg), que se agitó a
���
40 ºC durante 20 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (20,6 mL), al que se añadió éter diisopropílico (82,4 mL) gota a gota con agitación. Se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 30 % (20 mL), que se dializó después con agua
���
destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (574 mg).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo 1, la gemcitabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución
���
(HPLC) en las mismas condiciones que las del Ejemplo 1 para determinar el contenido de gemcitabina del compuesto de la presente invención. Como resultado, el contenido fue de 14,1 % (p/p) (28,8 % basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de hidrocloruro de gemcitabina. En adición, cuando el compuesto se sometió a análisis por HPLC, el contenido de gemcitabina libre fue de 0,2 % o menos.
���
Ejemplo 6: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 26; y X es gemcitabina, grupo hidroxilo o residuo de éster bencílico de L-fenilalanina
Se añadieron N,N-dimetilformamida (75 mL) y N,N-diisopropiletilamina (286 µL) al compuesto (3,0 g) descrito en el Ejemplo de referencia 12 y a hidrocloruro de
���
gemcitabina (492 mg), y se agitó después a 40 ºC. Después de disolución, se añadió a la misma 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 508 mg), y se agitó a 40 ºC durante 24 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y después se añadió gota a gota a una mezcla de disolventes de éter diisopropílicoetanol (4:1) (750 mL). Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el
���
depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico
etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 50 % (50 mL), que se dializó después con agua destilada (3 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (2,94 g).
�� Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo 1, la gemcitabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que las del Ejemplo 1 para determinar el contenido de gemcitabina del compuesto. Como resultado, el contenido fue de 4,67 % (p/p) (11,9 % basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de
���
hidrocloruro de gemcitabina. En adición, cuando el compuesto de la presente invención se sometió a análisis por HPLC, el contenido de gemcitabina libre fue de 0,2 % o menos.
Ejemplo 7: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 26;
���
y X es gemcitabina, grupo hidroxilo o residuo de alcohol 4-fenilbutílico
Se añadieron N,N-dimetilformamida (50 mL) y N,N-diisopropiletilamina (218 µL) al compuesto (2,07 g) descrito en el Ejemplo de referencia 14 y a hidrocloruro de gemcitabina (375 mg), y se agitó después a 40 ºC. Después de disolución, se añadió a la misma 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 386 mg), y se agitó a 40
���
ºC durante 24 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y después se añadió gota a gota a una mezcla de disolventes de éter diisopropílicoetanol (4:1, 750 mL). Después de una hora de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílicoetanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 50 % (25 mL),
���
que se dializó después con agua destilada (3 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (2,05 g).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo 1, la gemcitabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución
���
(HPLC) en las mismas condiciones que las del Ejemplo 1 para determinar el contenido de gemcitabina del compuesto de la presente invención. Como resultado, el contenido fue de 7,35 % (p/p) (17,5 % basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de hidrocloruro de gemcitabina. En adición, cuando el compuesto se sometió a análisis por HPLC, el contenido de gemcitabina libre fue de 0,2 % o menos.
Ejemplo 8: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 32; y X es citarabina o grupo hidroxilo
El copolímero de bloque N-acetilado de un monometoxipolietilenglicol que tiene
�� un peso molecular de aproximadamente 12.000 con un poli(ácido glutámico) que tiene un grado de polimerización de aproximadamente 32 (130 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 4 y citarabina (50,0 mg), se disolvieron en N,N-dimetilformamida (2,6 mL), a la que se añadió entonces 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 63,6 mg), seguido por agitación a 40 ºC durante 24 horas. La solución de reacción se
���
enfrió a temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (5,2 mL), al que se añadió entonces éter diisopropílico (20,8 mL) gota a gota con agitación. Después de 30 minutos de agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 20 %, que se dializó después con agua destilada (2 L
���
x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe (143 mg).
Después de hidrolizar el compuesto, la citarabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) para determinar el contenido de
���
citarabina del compuesto. Como resultado, el contenido fue de 22,5 % (p/p) (59,2 % basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de citarabina. Método de hidrólisis
El compuesto del epígrafe (3,20 mg) se disolvió en metanol (0,5 mL), al que se añadió entonces agua con amoníaco concentrado (0,5 mL) antes del sellado, seguido
���
por agitación a 37 ºC durante una hora. Se neutralizó la solución con ácido acético y
se diluyó después con agua destilada para preparar 10 mL exactos de solución. Condiciones de análisis de HPLC (análisis de citarabina) Columna: SUPELCO Discovery HS F5 (tamaño de partícula: 5 µm), 4,6 ø x 250 mm;
���
Temperatura de la columna: 40 ºC; Eluyente: tampón de fosfato (10 mM, pH 6,9); Caudal: 1 mL/min; Detector (longitud de onda de detección): UV (275 nm)
Ejemplo 9: Derivado polimérico de un antimetabolito de citidina de la fórmula (1) en el que R es grupo metilo; A es grupo acetilo; la media de n es 272; la media de m es 32; y X es citarabina, grupo hidroxilo o residuo de éster bencílico de L-fenilalanina
El compuesto (267 mg) descrito en el Ejemplo de referencia 10 y citarabina
�� (50,0 mg), se disolvieron en N,N-dimetilformamida (5,3 mL), a la que se añadió entonces 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-dihidroquinolina (EEDQ, 63,6 mg), seguido por agitación a 40 ºC durante 21 horas. La solución de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó después con etanol (10,6 mL), al que se añadió entonces éter diisopropílico (42,4 mL) gota a gota con agitación. Después de 30 minutos de
���
agitación, se recogió por filtración el depósito precipitado y se lavó con una mezcla de disolventes de éter diisopropílico-etanol (4:1). El producto resultante se disolvió en acetonitrilo acuoso al 30 %, que se dializó después con agua destilada (2 L x 3) utilizando una membrana de diálisis (corte molecular de 12.000 a 14.000). La solución dializada se sometió a secado por congelación para obtener el compuesto del epígrafe
���
(290 mg).
Después de hidrolizar el compuesto del mismo modo que en el Ejemplo 8, la citarabina liberada se cuantificó por cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC) en las mismas condiciones que las del Ejemplo 8 para determinar el contenido de citarabina del compuesto. Como resultado, el contenido fue de 11,3 % (p/p) (31,5 %
���
basado en los grupos carboxilo del poli(ácido carboxílico)) en términos de citarabina.
Ejemplo de ensayo 1: Ejemplo de liberación del agente en ausencia de enzima
El compuesto del Ejemplo 1 (indicado como compuesto 1 en la Figura 1), el
compuesto del Ejemplo 2 (indicado como compuesto 2 en la Figura 1), o el compuesto
del Ejemplo 7 (indicado como compuesto 7 en la Figura 1) se disolvieron en solución
���
salina tamponada con fosfato (pH 7,4) para dar una concentración de 1,0 mg/mL, que se dejó en reposo a un temperatura constante de 37 ºC. La cantidad de gemcitabina liberada se midió a lo largo del tiempo por HPLC para determinar el porcentaje de la cantidad de gemcitabina liberada basada en la cantidad de la gemcitabina total en el compuesto usado. Los resultados se muestran en la Figura 1. Como resultado, se
���
demostró que los compuestos de la presente invención liberaban lentamente los agentes sin depender de la enzima.
Ejemplo de ensayo 2: Ejemplo de liberación del agente en plasma de ratón
El compuesto del Ejemplo 1 (2,3 mg; indicado como compuesto 1 en la Figura 2) o el compuesto del Ejemplo 2 (3,7 mg; indicado como compuesto 2 en la Figura 2) se disolvieron en solución salina tamponada con fosfato (0,1 mL, pH 7,4), a la que se añadió entonces una cantidad 4 veces mayor (v/v) del plasma (0,4 mL) recogido y preparado de ratones, seguido por dejar la mezcla en reposo a una temperatura constante de 37 ºC. Se tomaron a lo largo del tiempo alícuotas de cincuenta microlitros
�� cada una y se diluyeron con metanol acuoso al 50 % (450 µL). Se sometió la solución a tratamiento de desproteinización utilizando un filtro de membrana (tamaño de poro: 0,45 µm), seguido por la medida mediante HPLC de la cantidad de gemcitabina liberada para determinar el porcentaje de la cantidad de gemcitabina liberada basado en la cantidad de la gemcitabina total en el compuesto utilizado. Los resultados se
��� muestran en la Figura 2. Se demostró que los compuestos de la presente invención liberaban lentamente los agentes también en el plasma.
Ejemplo de ensayo 3: Efecto antitumoral sobre ratones que tienen cáncer (1)
Se mantuvo el carcinoma de colon murino Colon 26 mediante implantación subcutánea seriada en ratones. El tumor Colon 26 se troceó en fragmentos cuadrados
���
de aproximadamente 2 mm y estos trozos de tumor se implantaron a los ratones subcutáneamente mediante trocar. Siete días después de la implantación del tumor, el compuesto del Ejemplo 1 (indicado como compuesto 1 en la Tabla 2), el compuesto del Ejemplo 2 (indicado como compuesto 2 en la Tabla 2), el compuesto del Ejemplo 4 (indicado como compuesto 4 en la Tabla 2), y el hidrocloruro de gemcitabina como un
���
agente de control se disolvieron en solución inyectable de glucosa al 5 %, respectivamente, y cada compuesto o agente de control se administró una vez intravenosamente a las dosis descritas en la Tabla 2. Se midió el tamaño del tumor el día de comienzo de la administración y el día 7 después de la iniciación de la administración del fármaco, y se calcularon los volúmenes del tumor utilizando la
���
siguiente ecuación. Se estimaron los volúmenes relativos del tumor a los 7 días después de la administración frente a los del día del inicio. Los resultados se muestran en la Tabla 2. [Ecuación 1]
Volumen del tumor (mm3) =
��� [Diámetro mayor del tumor (mm)] x [Diámetro menor del tumor (mm)] x [Diámetro menor del tumor] 2
���
�
[Tabla 2]
Tabla 2
Agente Sin tratamiento Compuesto 1 Compuesto 2 Compuesto 4 Agente de control
Dosis (en hidrocloruro de gemcitabina) (mg/kg) 0 50 25 12,5 6,25 25 6,25 200 100 Volumen relativo del tumor* 8,8 ± 4,9 0,4 ± 0,2 1,5 ± 0,5 0,5 ± 0,3 2,4 ± 1,1 0,5 ± 0,1 3,6 ± 0,5 1,4 ± 0,1 2,6 ± 0,7
*El volumen relativo medio del tumor (media ± SD) a los 7 días del comienzo de
la administración cuando el volumen del tumor en la fecha de comienzo de la
administración se fija a 1,0.
Queda claro a partir de estos resultados que los compuestos de la presente
���
invención tienen efectos antitumorales equivalentes o mayores a dosis más bajas que el hidrocloruro de gemcitabina como agente de control. Se demostró también que el compuesto de la presente invención que tiene el sustituyente hidrófobo (el compuesto del Ejemplo 2 o 4) tenía un efecto comparable a dosis más reducidas en comparación con el compuesto que no tiene sustituyente hidrófobo (el compuesto del Ejemplo 1).
���
Ejemplo de ensayo 4: Efecto antitumoral sobre ratones que tienen cáncer (2)
Se mantuvo el carcinoma de colon murino Colon 26 mediante implantación subcutánea seriada en ratones. El tumor Colon 26 se troceó en fragmentos cuadrados de aproximadamente 2 mm y estos trozos de tumor se implantaron a los ratones subcutáneamente mediante trocar. Siete días después de la implantación del tumor, el
���
compuesto del Ejemplo 7 (indicado como compuesto 7 en la Tabla 3), y gemcitabina como un agente de control se disolvieron respectivamente en solución inyectable de glucosa al 5 %, y cada uno se administró una vez intravenosamente a las dosis descritas en la Tabla 3. Se calcularon los volúmenes del tumor el día de comienzo de la administración y el día 10 después de la iniciación de la administración del fármaco,
���
como se describe en el Ejemplo de ensayo 3. Se estimaron los volúmenes relativos del tumor a los 10 días después de la administración frente a los del día del comienzo. Los resultados se muestran en la Tabla 3.
imagen4
���
�
[Tabla 3]
Tabla 3
Agente
Dosis (en hidrocloruro de gemcitabina) Volumen relativo del tumor*
(mg/kg)
Sin tratamiento
0 10,5 ± 5,0
Compuesto 7
25 16,7 0,3 ± 0,3 1,1 ± 0,5
Agente de control
200 100 3,4 ± 0,6 3,9 ± 0,5
*El volumen relativo medio del tumor (media ± SD) a los 7 días del comienzo de la administración cuando el volumen del tumor en la fecha de comienzo de la administración se fija a 1,0.
imagen1
�� Queda claro a partir de estos resultados que el compuesto de la presente invención tiene un efecto antitumoral equivalente o mayor a dosis más bajas que el hidrocloruro de gemcitabina como agente de control.
Ejemplo de ensayo 5: Efecto antitumoral sobre ratones que tienen cáncer (3)
Se mantuvo el carcinoma de colon murino Colon 26 mediante implantación
���
subcutánea seriada en ratones. El tumor Colon 26 se troceó en fragmentos cuadrados de aproximadamente 2 mm y estos trozos de tumor se implantaron a los ratones subcutáneamente mediante trocar. Siete días después de la implantación del tumor, el compuesto del Ejemplo 8 (indicado como compuesto 8 en la Tabla 4), y citarabina como un agente de control se disolvieron en solución inyectable de glucosa al 5 %,
���
respectivamente, y cada compuesto o agente de control se administró una vez intravenosamente a las dosis descritas en la Tabla 4. Se calcularon los volúmenes del tumor el día de comienzo de la administración y el día 10 después de la iniciación de la administración del fármaco, como se describe en el Ejemplo de ensayo 3. Se estimaron los volúmenes relativos del tumor a los 10 días después de la
���
administración frente a los del día del comienzo. Los resultados se muestran en la Tabla 4.
���
�
[Tabla 4]
Tabla 4
Agente Sin tratamiento Compuesto 8 Compuesto 9 Agente de control
Dosis (en citarabina) (mg/kg) 0 200 100 150 100 1600 800 100 x 5** Volumen relativo del tumor* 10,4 ± 4,0 6,9 ± 1,3 9,4 ± 2,6 5,7 ± 1,5 6,4 ± 0,5 8,4 ± 2,9 10,0 ± 3,3 9,0 ± 2,0
*El volumen relativo medio del tumor (media ± SD) a los 10 días del comienzo de la administración cuando el volumen del tumor en la fecha de comienzo de la administración se fija a 1,0.
** Administración continua el día cinco a 100 mg/kg
imagen5
invención tienen efectos antitumorales más altos a dosis más bajas que la citarabina como agente de control. Se demostró también que el compuesto que tiene el sustituyente hidrófobo (el compuesto del Ejemplo 9) tenía un efecto comparable a dosis más reducidas en comparación con el compuesto que no tiene sustituyente
��� hidrófobo (el compuesto del Ejemplo 8).

Claims (10)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un derivado polimérico de un antimetabolito de citidina, que comprende una estructura en la que un grupo amino de un antimetabolito de citidina se une por un enlace amida a un grupo carboxilo de una cadena lateral de un compuesto polimérico
    �� que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de cadena de poli(ácido glutámico), en el que el derivado es un compuesto representado por la fórmula general (1):
    imagen1
    en la que R representa un grupo alquilo de C1 a C3; A representa un grupo acilo de
    ���
    C2 a C4, m representa 5 a 100 como valor medio; n representa 50 a 1.000 como valor medio; X representa un residuo de antimetabolito de citidina, un grupo hidroxilo, o un sustituyente hidrófobo, y X representa un residuo de antimetabolito de citidina en 3 a 100 % de m, un grupo hidroxilo en 0 a 95 % de m y un sustituyente hidrófobo en 0 a 80 % de m; y donde el residuo de antimetabolito de citidina es un grupo representado por
    ���
    la fórmula (2):
    imagen1
    en la que Z representa un átomo de hidrógeno o un átomo de flúor; -Rf representa un grupo seleccionado del grupo que consiste en sustituyentes de la fórmula (3):
    imagen1
  2. 2. El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la reivindicación 1, en el que R representa un grupo metilo; A representa un grupo acetilo; m representa
    �� 10 a 60 como valor medio; n representa 100 a 300 como valor medio; X representa un residuo de antimetabolito de citidina o un grupo hidroxilo; y el antimetabolito de citidina representa citarabina, gemcitabina, o 5'-desoxi-5-fluorocitidina.
  3. 3. El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la reivindicación 1, en el que el sustituyente hidrófobo es un derivado de �-aminoácido representado
    ��� por la fórmula (4)
    imagen1
    en la que Q representa una cadena lateral de un aminoácido neutro; W representa un grupo alquilo de C1 a C6 o un grupo bencilo.
  4. 4. El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la reivindicación
    ��� 4, en el que Q representa un grupo isopropilo o un grupo bencilo; y W representa un grupo bencilo.
  5. 5. El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la reivindicación 1, en el que el sustituyente hidrófobo es un grupo representado por la fórmula (5)
    ��� imagen2
    en la que T representa un grupo alquilo de C1 a C6 opcionalmente sustituido con un grupo fenilo.
  6. 6. El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la reivindicación 5, en el que T representa un grupo bencilo, un grupo 3-fenipropilo, un grupo 4fenilbutilo, o un grupo 5-fenipentilo.
  7. 7. El derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según la reivindicación
    �� 1, en el que R representa un grupo metilo; A representa un grupo acetilo; m representa 10 a 60 como valor medio; n representa 100 a 300 como valor medio; el antimetabolito de citidina representa citarabina, gemcitabina, o 5'-desoxi-5-fluorocitidina; y el sustituyente hidrófobo representa un grupo benciloxi, un grupo 4-fenilbutoxi, un grupo (1-benciloxicarbonil-2-metil)propilamino, o un grupo (1-benciloxicarbonil-2
    ���
    fenil)etilamino.
  8. 8. Un agente antitumoral que comprende el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2 a 7, como un ingrediente medicamentoso.
  9. 9. Un agente antiviral que comprende el derivado polimérico de un
    ���
    antimetabolito de citidina según una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2 a 7, como un ingrediente medicamentoso.
  10. 10. Un método para producir el derivado polimérico de un antimetabolito de citidina como se ha descrito en una cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2 a 7, que comprende la unión por un enlace amida, utilizando un agente de condensación por
    ���
    deshidratación en un disolvente orgánico, de un grupo amino de un antimetabolito de citidina a un grupo carboxilo de una cadena lateral de un compuesto polimérico que se compone de un resto de polietilenglicol y un resto de polímero que tiene grupos carboxilo en las cadenas laterales.
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