ES2352305T3

ES2352305T3 - Derivados de isoindol como agonistas del receptor ep4.

Info

Publication number: ES2352305T3
Application number: ES07821299T
Authority: ES
Inventors: Gerard Martin Paul Giblin; Mark Patrick Healy
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Current assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 2006-10-17
Filing date: 2007-10-15
Publication date: 2011-02-17
Anticipated expiration: 2027-10-15
Also published as: US20100076048A1; EP2081897A1; GB0620619D0; WO2008046798A1; JP2010506878A; EP2081897B1; DE602007009286D1; ATE481384T1

Abstract

Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: Acido {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3- clorofenil}acetico ; Acido {3-cloro-4-[1,3-dioxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2- il]fenil}acetico ; Acido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3- clorofenil)acetico; Acido {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3- bromofenil}acetico; Acido {3-bromo-4-[1,3-dioxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2- il]fenil}acetico; Acido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3- bromofenil)acetico; Acido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3- clorofenil)acetico; Acido {3-cloro-4-[1-oxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2- il]fenil}acetico; Acido {3-bromo-4-[1-oxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2- il]fenil}acetico; Acido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3- bromofenil)acetico; y sales de los mismos.

Description

Esta invención se refiere a derivados de indol, a procedimientos para su preparación, a composiciones farmacéuticas que los contienen y a su uso en medicina.

Los compuestos de la presente invención son agonistas del receptor EP4.

Una serie de artículos de revisión describen la caracterización y la relevancia terapéutica de los receptores prostanoides así como los agonistas y antagonistas selectivos usados más comúnmente: Eicosanoids; From Biotechnology to Therapeutic Applications, Folco, Samuelsson, Maclouf, y Velo editores, Plenum Press, New York, 1996, capítulo 14, 137-154 y Journal of Lipid Mediators and Cell Signalling, 1996, 14, 83-87 y Prostanoid Receptors, Structure, Properties and Function, S Narumiya et al., Physiological Reviews 1999, 79(4), 1193-126.

El receptor EP4 es un receptor 7-transmembrana y su ligando natural es la prostaglandina PGE2. La PGE2 también presenta afinidad hacia los otros receptores EP (tipos EP1, EP2 y EP3). El receptor prostanoide EP4 cae dentro de un grupo de receptores normalmente asociados con la elevación de las concentraciones de adenosina monofosfato cíclica intracelular (cAMP). El receptor EP4 está asociado con la relajación del músculo liso, la presión intraocular, el dolor (en particular el dolor inflamatorio, neuropático y visceral), inflamación, neuroprotección, diferenciación de linfocitos, procesos metabólicos del hueso, actividades alérgicas, promoción del sueño, regulación renal, secreción gástrica o del mucus entérico y secreción de bicarbonato duodenal. El receptor EP4 juega un importante papel en el cierre del ductus arteriosus, vasodepresión, inflamación y remodelación del hueso como está revisado por Narumiya en Prostaglandins & Other Lipid Mediators 2002, 68-69 557

73.

Un número de publicaciones han demostrado que PGE2 actuando a través del subtipo de receptor EP4, y los agonistas EP4 solos, pueden regular las citoquinas inflamatorias después del estimulo inflamatorio. Takayama et al en Journal of Biological Chemistry 2002, 277(46), 44147-54 mostraron que PGE2 modula la inflamación durante las enfermedades inflamatorias mediante la supresión de macrófagos derivados de la producción de quemoquinas vía el receptor EP4. En Bioorganic & Medicinal Chemistry 2002, 10(7), 2103-2110, Maruyama et al demuestran que el agonista selectivo del receptor EP4 (ONO-AE1-437) suprime el TNF-� inducido por LPS en sangre entera de seres humano mientras que aumenta los niveles de IL-10. Un artículo en Anesthesiology, 2002, 97,170-176 sugiere que el agonista del receptor EP4 selectivo (ONO-AE1-329) inhibe efectivamente la hiperalgesia mecánica y térmica y las reacciones inflamatorias en la monoartritis aguda y crónica.

Dos artículos independientes de Sakuma et al en Journal of Bone and Mineral Research 2000, 15(2), 218-227 y Miyaura et al en Journal of Biological Chemistry 2000, 275(26), 19819-23, reportan la formación de osteoblastos impedidos en células cultivadas del receptor EP4 de ratón knock-out. Yoshida et al en Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2002, 99(7), 45804585, mediante el uso de ratones que carecen cada uno de los subtipos EP del receptor PGE2 , identificaron EP4 como el receptor que media la formación de hueso en respuesta a la administración de PGE2. También demostraron que el agonista (ONO-4891) del receptor EP4 selectivo consistentemente induce la formación de hueso en ratones tipo silvestre. Adicionalmente, Terai et al en Bone 2005, 37(4), 555-562 han mostrado que la presencia de un agonista (ONO-4819) del receptor EP4 selectivo aumenta la capacidad de rhBMP-2, una citoquina terapéutica que puede inducir la formación de hueso, de inducir hueso.

Investigaciones posteriores por Larsen et al muestran el efecto de PGE2 sobre la secreción en la segunda parte del duodeno humano que está mediada a través del receptor EP4 (Acta. Physiol: Scand. 2005, 185, 133-140). También, se ha mostrado que el agonista (ONO-AE1-329) del receptor EP4 selectivo puede proteger de la colitis en ratas (Nitta et al en Scandinavian Journal of Immunology 2002, 56(1), 66-75).

Doré et al en The European Journal of Neuroscience 2005, 22(9), 2199-206 han mostrado que PGE2 puede proteger las neuronas frente a la toxicidad del péptido beta amiloide por medio de la actuación sobre los receptores EP2 y EP4. Además Doré ha demonstrado en Brain Research 2005, 1066(1-2), 71-77 que un agonista (ONO-AE1-329) del receptor EP4 protege frente a la neurotoxicidad en un modelo de excitotoxicidad aguda en el cerebro.

Woodward et al en Journal of Lipid Mediators 1993, 6(1-3), 545-53 encontraron que la presión intraocular podía disminuirse usando agonistas prostanoides selectivos. Dos publicaciones en Investigative Ophthalmology & Visual Science han mostrado que el receptor EP4 prostanoide se expresa en células epiteliales de lentes humanas (Mukhopadhyay et al 1999, 40(1), 105-12), y sugiere un papel fisiológico para el receptor EP4 prostanoide en la modulación del flujo en el marco trabecular del ojo (Hoyng et al 1999, 40(11), 2622-6).

Los compuestos que muestran actividad de unión al receptor EP4 han sido descritos en, por ejemplo, los documentos de patente internacional WO98/55468, WO00/18744, WO00/03980, WO00/15608, WO0016760, WO00/21532, los documentos de patente europea EP0855389, EP0985663, los documentos de patente internacional WO02/50031, WO02/50032, WO02/50033, WO02/064564, WO03/103604, WO03/077910, WO03/086371, WO04/037813, WO04/067524, WO04/085430, el documento de patente de los Estados Unidos US04/142969,los documentos de patente internacional WO05/021508, WO05/105733, WO05/105732, WO05/080367, WO05/037812, WO05/116010 y WO06/122403.

Derivados de indoprofeno tales como el ácido [4-(1-oxo-1,3-dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2-il)fenil]-2-propiónico, sal sódica, han sido descritos por Rufer et. al. en Eur. J. Med. Chem.-Chimica Therapeutica, 1978, 13, 193.

Los compuestos de la presente invención han mostrado que exhiben actividades ventajosas in vivo e in vitro cuando se prueban en los ensayos biológicos descritos en este documento.

La presente invención proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste de: Ácido {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3clorofenil}acético ; Ácido {3-cloro-4-[1,3-dioxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il]fenil}acético ;

Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3clorofenil)acético;

Ácido {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3bromofenil}acético;

Ácido {3-bromo-4-[1,3-dioxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il]fenil}acético;

Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3bromofenil)acético ;

Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3clorofenil)acético;

Ácido: {3-cloro-4-[1-oxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2

il]fenil}acético;

Ácido: {3-bromo-4-[1-oxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2

il]fenil}acético;

Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3bromofenil)acético; y las sales de los mismos (de aquí en adelante “los compuestos de la invención”).

Se apreciará que, para uso farmacéutico, las sales mencionadas anteriormente serán sales farmacéuticamente aceptables, pero pueden encontrar utilidad otras sales, por ejemplo en la preparación de los compuestos de la invención y sus sales farmacéuticamente aceptables.

Las sales farmacéuticamente aceptables incluyen las descritas por Berge, Bighley y Monkhouse, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19. La expresión "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a sales preparadas a partir de bases farmacéuticamente aceptables incluyendo bases inorgánicas y bases orgánicas. Las sales derivadas de bases inorgánicas incluyen sales de aluminio, amonio, calcio, cobre, férricas, ferrosas, de litio, magnesio, sales mangánicas, manganosas, de potasio, sodio, cinc y similares. Las sales derivadas de bases orgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias, y terciarias; aminas sustituidas incluyendo las aminas sustituidas naturales; y las aminas cíclicas. En particular las bases orgánicas farmacéuticamente aceptables incluyen arginina, betaína, cafeína, colina, N,N'-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etil-morfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, tris(hidroximetil)aminometano, y semejantes. Las sales se pueden formar también a partir de resinas básicas de intercambio iónico, por ejemplo resinas de poliamina.

Será apreciado que los compuestos de la invención pueden ser producidos in vivo por el metabolismo de un profármaco adecuado. Tales profármacos pueden ser por ejemplo ésteres metabólicamente lábiles fisiológicamente aceptables de los compuestos de la invención. Estos pueden formarse por esterificación de un grupo ácido carboxílico en el compuesto original de la invención con, donde sea apropiado, protección previa de cualquier otro grupo reactivo presente en la molécula seguido por desprotección si es requerido. Ejemplos de tales ésteres metabólicamente lábiles incluyen ésteres de alquilo C1-4 por ejemplo ésteres de metilo etilo o ésteres de tbutilo, ésteres de alquenilo C3-6 por ejemplo ésteres de aminoalquilo alil sustituidos o ésteres aminoalquílicos no sustituidos, (por ejemplo, aminoetilo, 2-(N,N-dietilamino) etilo, o ésteres de 2-(4-morfolino)etilo o ésteres de aciloxialquilo tales como, aciloximetilo o 1-aciloxietilo por ejemplo pivaloiloximetilo, 1-pivaloiloxietilo, acetoximetilo, 1-acetoxietilo, 1-(1-metoxi-1-metil)etilcarboniloxietilo, 1-benzoiloxietilo, isopropoxicarboniloximetilo, 1-isopropoxicarboniloxietilo, ciclohexilcarboniloximetilo, éster de 1-ciclohexilcarboniloxietilo, ciclohexiloxicarboniloximetilo, 1ciclohexiloxicarboniloxietilo, 1-(4-tetrahidropiraniloxi)carboniloxietilo o 1-(4tetrahidropiranil)carboniloxietilo.

Debe comprenderse que la presente invención comprende todos los isómeros de los compuestos de la invención y sus sales, que incluye todas las formas geométricas, tautómeras y ópticas, y mezclas de las mismas (por ejemplo mezclas racémicas).

Ya que los compuestos de la invención se pretenden para uso en composiciones farmacéuticas, se comprenderá que son cada uno proporcionados en forma sustancialmente pura, por ejemplo de al menos el 50% puro, más adecuadamente al menos 75% puro y preferiblemente al menos 95% puro (porcentaje en bases de peso/peso). Las preparaciones impuras de los compuestos de la invención pueden usarse para preparar las formas más puras usadas en las composiciones farmacéuticas. Aunque la pureza de los compuestos intermedios de la presente invención es menos crítica, se entenderá fácilmente que se prefiere la forma sustancialmente pura en relación con los compuestos de la invención. Preferiblemente, siempre que sea posible, los compuestos de la presente invención se obtienen en forma cristalina.

Cuando algunos de los compuestos de esta invención se dejan cristalizar o se recristalizan a partir de disolventes orgánicos, el disolvente de cristalización puede estar presente en el producto cristalino. Esta invención incluye dentro de su alcance dichos solvatos. Similarmente; algunos de los compuestos de esta invención pueden estar cristalizados o recristalizados a partir de disolventes que contengan agua. En tales casos puede formarse agua de hidratación. Esta invención incluye dentro de su alcance los hidratos estequiométricos así como compuestos con cantidades variables de agua, que se pueden producir mediante procedimientos tales como la liofilización. Además, diferentes condiciones de cristalización pueden llevar a la formación de diferentes formas polimorfas de productos cristalinos. Esta invención incluye dentro de su alcance todas las formas polimorfas de los compuestos de la invención.

La presente invención también incluye dentro de su alcance todos los compuestos isotópicamente marcados de la invención. Tales compuestos son idénticos a aquellos citados en la lista de los compuestos de la invención excepto que uno o más átomos en ellos están reemplazados por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa atómica diferente de la masa atómica o número de masa atómica usualmente encontrado en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse entre los compuestos de la invención y sales de los mismos incluye isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxigeno y cloro, tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O y 36Cl.

Los compuestos isotópicamente marcados de la invención, por ejemplo aquellos en los que los isótopos radioactivos tales como 3H, 14C están incorporados, son útiles en ensayos de distribución en sustratos de tejidos y/o fármacos. Se prefieren particularmente los isótopos tritio, es decir 3H, y carbono-14, es decir, 14C, por su facilidad de preparación y detectabilidad. El isótopo 11C es particularmente útil en PET (tomografía de emisión de positrones) y es útil en imágenes del cerebro. La sustitución adicional con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir, 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapéuticas producidas por una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo una mayor semivida in vivo o menores requerimientos de dosis y, por lo tanto, puede preferirse en algunas circunstancias. Los compuestos marcados isotópicamente de la invención pueden prepararse llevando a cabo procedimientos sintéticos descritos en los Esquemas y/o en los Ejemplos a continuación, mediante la sustitución de un reactivo marcado isotópicamente disponible por un reactivo no marcado isotópicamente.

Los compuestos de la invención son agonistas del receptor EP4 y pueden por tanto ser útiles para tratar enfermedades mediadas por el receptor EP4.

En particular los compuestos de la invención pueden ser útiles en el tratamiento del dolor, por ejemplo dolor articular crónico (por ejemplo artritis reumatoide, osteoartritis, espondilitis reumatoide, artritis gotosa y artritis juvenil) incluyendo la propiedad de modificación de la enfermedad y preservación de la estructura de la articulación; dolor musculoesquelético; dolor lumbar y cervical; torceduras y esguinces; dolor neuropático; dolor mantenido por el simpático; miositis; dolor asociado a cáncer y fibromialgia; dolor asociado con migraña; dolor asociado con gripe u otras infecciones víricas tales como el resfriado común; fiebre reumática; dolor asociado con trastornos funcionales del intestino tales como dispepsia sin úlcera, dolor de pecho no cardiaco y síndrome del intestino irritable; dolor asociado a isquemia de miocardio; dolor postoperatorio; dolor de cabeza; dolor de muelas y dismenorrea.

Los compuestos de la invención pueden ser particularmente útiles en el tratamiento del dolor neuropático y los síntomas asociados con él. Los síndromes de dolor neuropático incluyen: neuropatía diabética; ciática; dolor lumbar no específico; dolor de esclerosis múltiple; fibromialgia; neuropatía relacionada con VIH; neuralgia postherpética; neuralgia del trigémino; y dolor debido a un traumatismo físico, amputación, cáncer, toxinas o afecciones inflamatorias crónicas. Síntomas del dolor neuropático incluye dolor lancinante y comenzado espontáneamente o dolor ardiente continuo. Además, está incluido el dolor asociado con sensaciones no dolorosas normalmente como "pinchos y agujas" (parestesias y disestesias), sensibilidad aumentada al tacto (hiperestesia), sensación dolorosa que sigue a la estimulación inocua (alodinia dinámica, estática o térmica), sensibilidad aumentada a estímulos nocivos (hiperalgesia térmica, por frió, mecánica), sensación continuada de dolor después de la eliminación la estimulación (hiperpatía) o una ausencia o déficit en los caminos sensoriales selectivos (hipoalgesia).

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de la inflamación, por ejemplo en el tratamiento de las afecciones de la piel (por ejemplo quemaduras solares, quemaduras, eczema, dermatitis, soriasis); enfermedades oftálmicas tales como glaucoma, retinitis, retinopatías, uveítis y de lesiones agudas en el tejido ocular (por ejemplo conjuntivitis); trastornos pulmonares (por ejemplo asma, bronquitis, enfisema, rinitis alérgica, síndrome de dificultad respiratoria, neumopatía de los avicultores, neumopatía del agricultor, EPOC); alteraciones del tracto gastrointestinal (por ejemplo úlcera uptas, enfermedad de Crohn, gastritis atópica, gastritis varialoforme, colitis ulcerosa, enfermedad celiaca, ileitis regional, síndrome del intestino irritable, enfermedad del intestino inflamable, enfermedad del reflujo gastrointestinal , diarrea, estreñimiento); trasplante de órganos; otras afecciones con un componente inflamatorio tales como enfermedad vascular, migraña, periarteritis nudosa, tiroiditis, anemia aplásica, enfermedad de Hodgkin, esclerodoma, miastenia grave, esclerosis múltiple, sarcoidosis, síndrome nefrótico, síndrome de Bechet, polimiositis, gingivitis, isquemia de miocardio, pirexia, lupus eritematoso sistémico, polimiositis, tendinitis, bursitis y síndrome de Sjogren.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de las enfermedades inmunológicas tales como enfermedades autoinmunes, enfermedades de deficiencia inmunológica o transplante de órganos. Los compuestos de la invención pueden también ser eficaces para aumentar la latencia de la infección por el VIH.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de enfermedades con excesiva o indeseada activación de las plaquetas tales como claudicación intermitente, angina inestable, accidente cerebrovascular, síndrome coronario agudo (por ejemplo enfermedades vasculares oclusivas).

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles como un fármaco con acción diurética, o pueden ser útiles para tratar el síndrome de vejiga hiperactiva.

Los compuestos de la invención pueden también ser eficaces en el tratamiento de la impotencia o disfunción eréctil.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de la enfermedad de los huesos caracterizada por el metabolismo anormal del hueso o la reabsorción del hueso tal como la osteoporosis (especialmente la osteoporosis postmenopáusica), hipercalcemia, hiperparatiroidismo, enfermedad del hueso de Paget, osteolisis, hipercalcemia de malignidad con o sin metástasis de hueso, artritis reumatoide, periodontitis, osteoartritis, osteoalgia, osteopenia, calculosis, litiasis (especialmente urolitiasis), gota y espondilosis anquilosante, tendinitis y bursitis.

Los compuestos de la invención pueden también ser eficaces en la remodelación del hueso y/o promoción de la generación de hueso y/o promoción de la curación de la fractura.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles para atenuar los efectos secundarios hemodinámicos de los inhibidores de AINEs y los inhibidores de COX-2.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de las enfermedades cardiovasculares tales como hipertensión o isquemia de miocardio; insuficiencia venosa funcional u orgánica; tratamiento varicoso; hemorroides y estados de choque asociados con un descenso acusado de la presión arterial (por ejemplo choque septicémico).

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de enfermedades neurodegenerativas y de la neurodegeneración tal como la demencia, particularmente la demencia degenerativa (que incluye la demencia senil, la enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Pick, corea de Huntingdon, enfermedad de Parkinson y enfermedad de Creutzfeldt-Jakob, ALS, enfermedad de la neurona motora); demencia vascular (incluyendo demencia multiinfarto); así como demencia asociada a lesiones que ocupan el espacio intracraneal; traumatismos; infecciones y afecciones relacionadas (incluyendo infección por VIH); metabolismo; toxinas; anoxia y deficiencia de vitaminas; y deterioro cognitivo leve asociado con el envejecimiento, particularmente pérdida de memoria asociada con la edad.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de trastornos neurológicos y pueden ser útiles como agentes neuroprotectores. Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de la neurodegeneración que sigue al accidente cerebrovascular, paro cardiaco, bypass pulmonar, herida traumática del cerebro, herida de la médula espinal o similares.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de las complicaciones de la diabetes tipo 1 (por ejemplo la microangiopatía diabética, retinopatía diabética, nefropatía diabética, degeneración macular, glaucoma), síndrome nefrótico, anemia aplástica, uveítis, enfermedad de Kawasaki y sarcoidosis.

Los compuestos de la invención pueden también ser útiles en el tratamiento de la disfunción renal (nefritis, particularmente glomerulonefritis proliferativa mesangial, el síndrome nefrítico), la disfunción del hígado (hepatitis, cirrosis) y disfunción gastrointestinal (diarrea).

Debe apreciarse que las referencias a tratamiento incluyen tanto el tratamiento de síntomas establecidos como el tratamiento profiláctico.

Según una realización adicional de la invención, se proporciona un compuesto de la invención o una sal del mismo para uso en seres humanos o medicina veterinaria.

Según otra realización de la invención, se proporciona un compuesto de la invención o una de sus sales para uso en el tratamiento de un trastorno que es mediado por la acción, o pérdida de acción, de PGE2 en los receptores EP4.

Según otra realización de la invención, se proporciona el uso de un compuesto de la invención o una sal del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección que está mediada por la acción de PGE2 en los receptores EP4.

Según otro aspecto de la invención se proporciona el uso de un compuesto de la invención o un derivado en forma de sal del mismo para la fabricación de un medicamento para el tratamiento o la prevención de una afección tal como un dolor, trastorno inflamatorio, inmunológico, óseo, neurodegenerativo o renal.

Los compuestos de la invención y sus sales se administran convenientemente en la forma de composiciones farmacéuticas. De modo conveniente, dichas composiciones se pueden presentar para su uso de manera convencional en mezcla con uno o más vehículos o excipientes fisiológicamente aceptables.

Así, en otro aspecto de la invención se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención o una sal del mismo adaptada al uso en medicina de seres humanos o veterinaria.

Mientras que es posible para los compuestos de la invención o una sal de los mismos el ser administrados como un producto químico sin tratar es preferible presentarlo como una formulación farmacéutica. Las formulaciones de la presente invención comprenden los compuestos de la invención o una sal de los mismos junto con uno o más vehículos aceptables o diluyentes aceptables de los mismos y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos. El vehículo debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación y no ser perjudicial para el receptor de la misma.

Las formulaciones incluyen aquellas adecuadas para administración oral, parenteral (que incluye subcutánea, por ejemplo, por inyección o comprimido de absorción lenta, intradérmica, intratecal, intramuscular, por ejemplo, absorción lenta e intravenosa), rectal y tópica (que incluye dérmica, bucal y sublingual), aunque la vía más adecuada dependerá, por ejemplo, del cuadro y el trastorno del receptor. Las formulaciones pueden convenientemente presentarse en dosis unitaria y pueden prepararse por cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica farmacéutica (véase por ejemplo los métodos descritos en 'Remingtom -The Science and Practice of Pharmacy', Edición 21, Lippincott, Williams & Wilkins, USA, 2005 y referencias en él). Todos los métodos incluyen la etapa de asociar el compuesto de la invención o su sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable ("principio activo") con el vehículo que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan poniendo en contacto íntimo y uniforme el principio activo con vehículos líquidos o con vehículos sólidos finamente divididos, o ambos, y después, si es necesario, dando forma al producto para convertirlo en la formulación deseada.

Las formulaciones de la presente invención adecuadas para administración oral pueden presentarse como unidades discretas tales como cápsulas, obleas o comprimidos (por ejemplo, comprimidos masticables, en particular para administración pediátrica) que contienen, cada una, una cantidad predeterminada del principio activo; como polvo o gránulos; como disolución o suspensión en un líquido acuoso o un líquido no acuoso; o como emulsión líquida de aceite en agua o emulsión líquida de agua en aceite. El principio activo también se puede presentar como bolo, electuario o pasta.

Un comprimido se puede preparar por prensado o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos también se pueden preparar prensando en una máquina adecuada el principio activo en una forma suelta tal como polvo o gránulos, opcionalmente mezclando con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, tensioactivo o dispersante. Los comprimidos moldeados se pueden fabricar moldeando una mezcla de polvo del compuesto humedecido con un diluyente líquido inerte en una máquina adecuada. Los comprimidos opcionalmente pueden revestirse o ranurarse y pueden formularse de manera que proporcionen liberación lenta o controlada del principio activo contenido en ellos.

Las formulaciones para la administración por vía parenteral incluyen soluciones para inyección esterilizadas acuosas y no acuosas, que pueden contener antioxidantes, tampones, agentes bacteriostáticos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del destinatario pretendido; y suspensiones esterilizadas, acuosas y no acuosas, que pueden incluir agentes de suspensión y agentes espesantes. Se pueden presentar las formulaciones en envases de dosis unitaria o en envases multidosis, por ejemplo ampollas selladas y viales, y se pueden conservar en estado liofilizado, que requiera sólo la adición de un vehículo líquido estéril, por ejemplo agua para inyección, inmediatamente antes de su uso. Las disoluciones y suspensiones extemporáneas para inyección se pueden preparar a partir de polvos, gránulos, y comprimidos estériles del tipo descrito previamente.

Las formulaciones para administración rectal se pueden presentar como un supositorio con los vehículos habituales tales como manteca de cacao, grasa hidrogenada o polietilenglicol.

Las formulaciones para administración tópica en la boca, por ejemplo por vía bucal o sublingual, incluyen pastillas para chupar que comprenden el ingrediente activo en una base con sabor, tal como sacarosa, y goma arábiga o tragacanto, y pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base tal como gelatina y glicerina o sacarosa y goma arábiga.

Los compuestos de la invención también pueden formularse como preparaciones de depósito. Estas formulaciones de actuación prolongada pueden administrarse por implantación (por ejemplo, por vía subcutánea o por vía intramuscular) o por inyección intramuscular. De esta manera, por ejemplo, los compuestos de la invención se pueden formular con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, como una emulsión en un aceite aceptable) o resinas de intercambio iónico o como derivados poco solubles, por ejemplo, como una sal poco soluble.

Además de los ingredientes mencionados anteriormente de forma particular, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica que guarden relación con el tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, los adecuados para la administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.

Los compuestos del receptor EP4 para uso en la presente invención pueden ser usados en combinación con otros agentes terapéuticos, por ejemplo los inhibidores de COX-2 , tales como celecoxib, rofecoxib, valdecoxib or parecoxib; inhibidores de la 5lipoxigenasa; analgésicos tales como paracetamol; AINE's, tales como diclofenaco, indometacina, nabumetona, naproxen o ibuprofeno; antagonistas de receptores de leucotrienos; FARME tales como metotrexato; bloqueantes de los canales de sodio, tales como lamotrigina; agonistas del canal de calcio de tipo N; moduladores del receptor de NMDA, tales como antagonistas de receptor de glicina; gabapentina, pregabalina y compuestos relacionados; antidepresivos tricíclicos tales como amitriptilina; fármacos antiepilépticos estabilizadores neuronales; inhibidores de la captación monoaminérgica tales como venlafaxina; analgésicos opiáceos; anestésicos locales; agonistas de 5HT1 tales como triptanos, por ejemplo sumatriptán, naratriptán, zolmitriptán, eletriptán, frovatriptán, almotriptán o rizatriptán; ligandos del receptor EP1; ligandos del receptor EP2; ligandos del receptor EP3; antagonistas de EP1; antagonistas de EP2 y antagonistas de EP3; agonistas del receptor canabinoide; antagonistas VR1. Cuando los compuestos se usan en combinación con otros agentes terapéuticos, los compuestos se pueden administrar secuencial o simultáneamente por cualquier vía conveniente.

La invención proporciona así en además otra realización, una combinación que comprende un compuesto de la invención o una sal del mismo con además un agente

o agentes terapéuticos. En una realización de la invención se proporciona una combinación que comprende un compuesto de la fórmula (I) o una sal del mismo y paracetamol.

Las combinaciones mencionadas anteriormente se pueden presentar convenientemente para uso en la forma de una formulación farmacéutica, y de esta manera las formulaciones farmacéuticas que comprenden una combinación como se ha definido anteriormente junto con un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable comprenden otro aspecto de la invención. Los componentes individuales de tales combinaciones se pueden administrar secuencial o simultáneamente en formulaciones farmacéuticas separadas o combinadas.

Cuando un compuesto de la invención o una sal del mismo se usan en combinación con un segundo agente terapéutico activo frente a la misma enfermedad, la dosis de cada compuesto puede diferir de cuando el compuesto se usa solo. Los especialistas en la técnica apreciarán fácilmente las dosis apropiadas.

Una dosis diaria propuesta de un compuesto de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para el tratamiento del hombre es de 0,001 a 30 mg/kg de peso corporal por día y más particularmente de 0,1 a 3 mg/kg de peso corporal por día, calculado como ácido libre, que puede administrarse como dosis única o dosis dividida, por ejemplo de una a cuatro veces por día. El intervalo de dosis para el ser humano adulto esta siendo generalmente de 0,1 a 1000 mg/día, tal como de 10 a 800 mg/día, preferiblemente de 10 a 200 mg/día, calculado como el ácido libre.

En una realización, cuando el compuesto de Formula (I) o sales del mismo, son administradas en combinación con paracetamol, una dosis adecuada diaria de paracetamol es hasta 4000 mg por día. Dosis unitarias adecuadas incluyen 200, 400, 500 y 1000 mg, una, dos, tres o cuatro veces por día.

La cantidad precisa de los compuestos de la invención administrada a un hospedador, particularmente un paciente humano, será la responsabilidad del médico adjunto. Sin embargo, la dosis empleada dependerá de un número de factores que incluyen la edad y el sexo del paciente, la condición precisa que se esté tratando y su severidad, la ruta de administración, y cualquier terapia de combinación que pueda estarse llevando a cabo.

Los compuestos de la invención pueden prepararse según los Esquemas 1, 2 y 3 en los que se denominan generalmente como "Formula (I)".

Esquema 1

imagen1

(i) R-Br, K2CO3, (CH3)2CO; (ii) NaOH, EtOH/H2O; (iii) SOCl2, CHCl3; (iv) CH3CO2H; (v) NaBH4, MeOH/THF; (vi) Et3SiH, TFA (donde R = R1 = R2 = alquilo C1-4; R3 = Br o Cl y R4 = alquilo C1-6)

El compuesto (1) puede prepararse según el método descrito en el documento de patente internacional, número de publicación WO02/064564.

Esquema 2

imagen2

(i) Ácido acético glacial, HCl 2N (donde R1 = R2 = alquilo C1-4; R3 = Br o Cl y R4 = alquilo C1-6)

Esquema 3

imagen3

(i) EtOH, NaOH 2N (donde R1 = R2 = alquilo C1-4; R3 = Br o Cl y R4 = alquilo C1-6)

Los compuestos de fórmula (5) pueden prepararse según el esquema de reacción 4.

Esquema 4

imagen1

(i) N-Bromosuccinamida o N-clorosuccinamida (donde R3 = Br o Cl y R4 = alquilo C1-6) Los compuestos de la fórmula (D) están comercializados o pueden prepararse 5 según métodos conocidos en la técnica (por ejemplo, el (4-aminofenilo)acetato de etilo está comercializado por Avocado Research).

Las siguientes Descripciones y Ejemplos ilustran la preparación de compuestos de la fórmula (I). Las descripciones se refieren a los compuestos intermedios y los Ejemplos se refieren a los compuestos de la fórmula (I). El material de partida para la

10 preparación de los productos intermedios no ha sido necesariamente preparado a partir del lote específico descrito. Los productos intermedios para la preparación de los ejemplos no han sido necesariamente preparados a partir del lote específico descrito.

Abreviaturas

DMAP 4-(Dimetilamino)piridina

15 EtOH Etanol IPA Alcohol isopropílico MeOH Metanol NaOH Hidróxido de sodio TFA Ácido trifluoroacético

20 THF Tetrahidrofurano

Procedimientos analíticos CL/EM Columna:

Waters Atlantis, 4,6 mm x 50 mm. Tamaño de partícula de la fase estacionaria; 3 µm.

25 Disolventes

A: Disolvente acuoso = Agua + ácido fórmico al 0,05 %

B: Disolvente orgánico = Acetonitrilo + ácido fórmico al 0,05 %

Método

Tiempo / min: % de B

0: 3

0,1: 3

4: 97

4,8: 97

4,9: 3

5,0: 3

• Velocidad de caudal, 3 ml/min. 5 • Volumen de inyección, 5 µl.

•: Temperatura de la columna, 30ºC.

•: Intervalo de detección del UV, 220 a 330 nm. Todos los tiempos de retención se miden en minutos.

Técnicas de purificación

10 La purificación de los Ejemplos se puede llevar a cabo por métodos convencionales tales como cromatografía y/o recristalización, usando disolventes adecuados. Los métodos cromatográficos incluyen la cromatografía en columna, cromatografía de flash, HPLC (cromatografía líquida de alta resolución), SFC (cromatografía con fluido supercrítico), y MDAP (autopreparación dirigida por la masa).

15 El término "Biotage", cuando se usa en el presente documento, se refiere a cartuchos de gel de sílice pre-cargados que se comercializan en el mercado.

Descripción 1

1,4-Bis(propiloxi)-2,3-naftalenodicarboxilato de dietilo

imagen4

Se añadió 1-bromopropano (13,1 ml, 144,4 mmoles) a una solución agitada de 1,4-dihidroxi-2,3-naftalenodicarboxilato de dietilo (11 g, 36,1 mmoles) [documento de patente internacional WO 02/064564] y carbonato potásico (24,9 g, 180,5 mmoles) en acetona (180 ml). Se mantuvo a reflujo durante la noche en atmósfera de argón. La mezcla obtenida se enfrió, se filtró y se evaporó el disolvente del filtrado. El residuo se retomó en tolueno y se lavó con solución de hidróxido potásico al 5%, salmuera y se secó con sulfato magnésico. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con acetato de etilo/hexano (1:9) para producir el compuesto del título (11,45 g, 29.5 mmoles). CL/EM: RT 3,87, MH+ 389.

Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar al 1,4-bis(propiloxi)2,3-naftalenodicarboxilato de dietilo usando los materiales de partida adecuados.

Descripción: Nombre CL/EM

Descripción 2: 1,4-Bis(propiloxi)-2,3naftalenodicarboxilato de dietilo Rt=3,49 [MH]+ 361

Descripción 3: 1,4-Bis(1-metiletoxi)-2,3naftalenodicarboxilato de dietilo Rt=3,63 [MH]+ 389

10 Descripción 4

Ácido 1,4-bis(propiloxi)-2,3-naftalenodicarboxílico

imagen1

Se mantuvo a reflujo durante 4 horas una mezcla de 1,4-bis(propiloxi)-2,3naftalenodicarboxilato de dietilo (11,45 g, 29,5 mmoles), etanol (70 ml), hidróxido 15 sódico (3,54 g, 88,5 mmoles) y agua (15 ml). La mezcla de reacción se enfrió y se evaporó hasta un tercio de su volumen. Esta se acidificó con ácido clorhídrico (2N) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 ml). Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con agua, salmuera y se secaron sobre sulfato de magnesio. El disolvente se evaporó para dar el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo (8,91

20 g, 26,8 mmoles). CL/EM: RT 2,74, MH+ 333.

Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar al ácido 1,4bis(propiloxi)-2,3-naftalenodicarboxílico usando los materiales de partida adecuados.

Descripción: Nombre CL/EM

Descripción 5: Ácido 1,4-bis(etiloxi)2,3naftalenodicarboxílico Rt=2,38 [MH]+ 305

Descripción 6: Ácido 1,4-bis(1metiletoxi)-2,3naftalenodicarboxílico Rt=2,50 [MH]-331

Descripción 7

4,9-Bis(propiloxi)nafto[2,3-c]furano-1,3-diona

imagen1

A una solución del ácido 1,4-bis(propiloxi)-2,3-naftalenodicarboxílico (8,91 g, 26,8 mmoles) en cloroformo (80 ml) se le añadió cloruro de tionilo (20,5 ml, 281,4

10 mmoles) gota a gota y se calentó a 65ºC durante 2,5 horas. La mezcla de reacción se enfrió y el disolvente se evaporó para dar un sólido amarillo. Se formó una mezcla azeotrópica con cloroformo para dar el compuesto del título como un sólido beige (8,74 g, 27,8 mmoles). CL/EM: RT 3,77, MH+ 315. Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar a la 4,9

15 bis(propiloxi)nafto[2,3-c]furano-1,3-diona usando los materiales de partida adecuados.

Descripción: Nombre CL/EM

Descripción 8: 4,9-Bis(etiloxi)nafto[2,3c]furano-1,3-diona Rt=3,48 [MH]+ 287

Descripción 9: 4,9Bis(1metiletoxi)nafto[2,3c]furano-1,3-diona Rt=3,6 [MH]+ 315

Descripción 10

(4-Amino-3-bromofenil)acetato de etilo

imagen1

5 Se disolvió en cloroformo (100 ml) (4-aminofenil)acetato de etilo (5 g, 27,9 mmoles), se trató con N-bromosuccinimida (4,97 g, 27,9 mmoles) y se agitó durante una hora a temperatura ambiente en atmósfera de argón. La mezcla de reacción se lavó con agua, salmuera y se secó sobre sulfato de magnesio. Se evaporó hasta un aceite marrón que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con

10 acetato de etilo/hexano (1:3) proporcionando el compuesto del epígrafe como un aceite amarillo (6,03 g, 23,4 mmoles). LC/MS: RT 2,55, MH+ 260. El siguiente compuesto se preparó de forma similar al (4-amino-3bromofenil)acetato de etilo, usando los materiales de partida adecuados.

Descripción: Nombre CL/EM

Descripción 11: (4-amino-3clorofenil)acetato de etilo Rt = 2,53 [MH+] 214, 216.

Descripción 12

{4-[4,9-Bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3-clorofenil}acetato de etilo

imagen2

Se trató una suspensión agitada de 4,9-bis(etiloxi)nafto[2,3-c]furano-1,3-diona (0,200 g, 0,7 mmoles) en ácido acético (2 ml) con (4-amino-3-clorofenil)acetato de etilo (0,284 g, 1,33 mmoles) y DMAP (0,024 g, 0,21 mmoles). Se sometió esto a reflujo

10 durante la noche con tamiz molecular en atmósfera de argón. Se enfrió la mezcla de reacción y se retiró el tamiz molecular por filtración a través de celita, lavando con ácido acético. Se añadió agua con agitación hasta que se formó un precipitado. El sólido se recogió por filtración y se lavó con agua. Este se recristalizó de IPA hirviendo para dar el compuesto del título (0,102 g, 0,21 mmoles). CL/EM: RT 3,84, MH+ 482.

15 Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar al {4-[4,9-bis(etiloxi)1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3-clorofenil}acetato de etilo usando los materiales de partida adecuados.

Descripción: Nombre CL/EM

Descripción 13: [3-Cloro-4-[1,3-dioxo4,9-bis(propiloxi)-1, 3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]phenil}acetato de etilo Rt=4,19 [MH]+ 510

Descripción 14: (4-{4,9-bis(1metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2-il}-3clorofenil)acetato de etilo Rt=4,00 [MH]+ 510

Descripción: 4-[4,9-Bis(etiloxi)-1,3 Rt=3,77

15: dioxo-1,3-dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2-il]-3bromofenil}acetato de etilo [MH]+ 528

Descripción: {3-bromo-4-[1,3 Rt=4,13

16: dioxo-4,9bis(propiloxi)-,1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]fenil}acetato de etilo [MH]+ 556

Descripción: (4-{4,9-bis(1 Rt=4,06

17: metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2-il}-3bromofenil)acetato de etilo [MH]+ 556

Ejemplo 1

Ácido {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3clorofenil}acético;

imagen2

Se suspendió el {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il]-3-clorofenil}acetato de etilo (0,120 g, 0,25 mmoles) en ácido acético glacial (4 ml) y ácido clorhídrico 2 N (4 ml), y se calentó hasta que se completó la reacción, (100º C, 2-5 horas). Se enfrió y se añadió agua. Se filtró el precipitado blanco que se formó, se

10 lavó con agua, se recogió y se secó en un horno durante la noche para dar el compuesto del título como un sólido blanco, (0,084 g, 0,19 mmoles). CL/EM: Rt=3,39 MH]+ 454

Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar al ácido {4-[4,9bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3-clorofenil}acético usando los materiales de partida adecuados.

Ejemplo: Nombre CL/EM

Ejemplo 2: Ácido{3-cloro-4-[1,3dioxo-4,9bis(propiloxi)-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]fenil}acético Rt=3,75 [MH]+ 482

Ejemplo 3: Ácido(4-{4,9-bis(1metiletoxi)-1,3dioxo-1,3-dihidro2H-benzo[f]isoindol2-il}-3clorofenil)acético Rt=3,56 [MH]+ 482

Ejemplo 4: Ácido{4-[4,9bis(etiloxi)-1,3dioxo-1,3-dihidro2H-benzo[f]isoindol2-il]-3bromofenil}acético Rt=3,44 [MH]+ 500

Ejemplo 5: Ácido{3-bromo-4[1,3-dioxo-4,9bis(propiloxi)-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]fenil}acético Rt=3,75 [MH]+ 528

Ejemplo 6: Ácido(4-{4,9-bis(1metiletoxi)-1,3dioxo-1,3-dihidro2H-benzo[f]isoindol2-il}-3bromofenil)acético Rt=3,60 [MH]+ 528

Descripción 18

(3-Cloro-4-{1-hidroxi-4,9-bis(1-metiletoxi)-3-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il}fenil)acetato de etilo

imagen2

Se suspendió (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol2-il}-3-clorofenil)acetato de etilo (0,500 g, 0,98 mmoles) en metanol (1 ml), se añadieron etanol (2 ml) y tetrahidrofurano (4 ml) para ayudar a la solubilidad. Se enfrió hasta 0º C en un baño de hielo y se trató con borohidruro de sodio (0,111 g, 2,94

10 mmoles) en porciones durante 2 minutos. Se agitó en atmósfera de argón a 0º C durante 2 horas. Se evaporó el disolvente y el residuo se dividió entre acetato de etilo y una solución de cloruro amónico 1 M. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (x2). Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera y se secaron sobre sulfato de magnesio. Los disolventes orgánicos se evaporaron para proporcionar

15 el compuesto del título (0,499 g, 0,97 mmoles). CL/EM: RT 3,71, MH+ 512. Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar al (3-cloro-4-{1hidroxi-4,9-bis(1-metiletoxi)-3-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}fenil)acetato de etilo usando los materiales de partida adecuados.

Descripción: Nombre CL/EM

Descripción 19: {3-Cloro-4-[1-hidroxi3-oxo4,9bis(propiloxi)-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]fenil}acetato de etilo Rt=3,88 [MH]+ 512

Descripción 20: {3-Bromo-4-[1hidroxi-3-oxo4,9bis(propiloxi)-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]fenil}acetato de etilo Rt=3,91 [MH]+ 558

Descripción 21: (3-Bromo-4-{1hidroxi-4,9-bis(1metiletoxi)-3-oxo-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il}fenil)acetato de etilo Rt=3,75 [MH]+ 558

Descripción 22

(4-{4,9-Bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3-chlorofenil)acetato de etilo

imagen2

Se disolvió (3-cloro-4-{1-hidroxi-4,9-bis(1-metiletoxi)-3-oxo-1,3-dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2-il}fenil)acetato de etilo (0,499 g, 0,97 mmoles) en ácido trifluoroacético (2 ml) y se enfrió en un baño de hielo hasta 0º C. Se trató con trietilsilano (0,23 ml, 1,46 mmoles) y se agitó a 0ºC durante 1 hora. Se evaporaron los 10 compuestos volátiles y se purificó directamente por cromatografía en gel de sílice para dar el compuesto del título (0,180 g, 0,36 mmoles). CL/EM: RT 3,93, MH+ 496.

Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar al: (4-{4,9-bis(1

metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3-clorofenil)acetato: de etilo

usando los materiales de partida adecuados.

15

Descripción: Nombre CL/EM

Descripción 23: {3-Cloro-4-[1-oxo-4,9bis(propiloxi)-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]fenil}acetato de etilo Rt=4,21 [MH]+ 496

Descripción 24: {3-Bromo-4-[1-oxo4,9-bis(propiloxi)-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol2il]fenil}acetato de etilo Rt=4,23 [MH]+ 542

Descripción 25: (4-{4,9-Bis(1metiletoxi)-1-oxo-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2-il}3-bromofenil)acetato de etilo Rt=4,08 [MH]+ 542

Ejemplo 7:

Ácido(4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3clorofenil)acético

imagen2

Se disolvió el (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il}-3-clorofenil)acetato de etilo (0,160 g, 0,32 mmoles) en etanol (3 ml) y se trató con hidróxido sódico 2N (5 ml). Se calentó a reflujo durante una hora después se enfrió, y se evaporó el disolvente. Se aciduló el residuo con ácido clorhídrico 2N hasta pH 1.

10 Esto se extrajo con acetato de etilo (x2), se lavó con salmuera y se secó sobre sulfato magnésico. El disolvente se evaporó y después el residuo se trituró con hexano y se secó para producir el compuesto del título (0,125 g, 0,26 mmoles). CL/EM: RT 3,53, MH+ 468.

Los siguientes compuestos se prepararon de forma similar al ácido (4-{4,9bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3-clorofenil)acético usando los materiales de partida adecuados.

Ejemplo: Nombre CL/EM

Ejemplo 8: Ácido{3-cloro-4-[1-oxo4,9-bis(propiloxi)-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2il]fenil}acético Rt=3,72 [MH]+ 468

Ejemplo 9:: Ácido{3-bromo-4-[1-oxo4,9-bis(propiloxi-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2i]fenil}acético Rt=3,74 [MH]+ 514

Ejemplo 10:: Ácido(4-{4,9-bis(1metiletoxi)-1-oxo-1,3dihidro-2Hbenzo[f]isoindol-2-il}-3bromofenil)acético Rt=3,55 [MH]+ 514

5

Datos biológicos

Se realizaron estudios usando células HEK-293(T) que son células que expresan el receptor EP4 prostanoide humano recombinante (células HEK-EP4). Las células se cultivaron como un cultivo monocapa en DMEM-F12/F12 que contenía

10 glutamax II (Gibco) suplementado con suero fetal bovino al 10% y 0,4 mg.ml-1 G418. Las células HEK-EP4 se trataron anticipadamente 24 horas y 30 minutos antes del experimento con indometacina 10 µM y se recogieron usando Versene que contenía indometacina 10 µM. Las células se resuspendieron en tampón de ensayo (DMEM:F12, indometacina 10 µM e IBMX 200 µM ) a 1×106 células por ml y se

15 incubaron durante 20 minutos a 37ºC. Después de esto, se añadieron 50 µl de células a 50 µl de agonista (compuesto de la Fórmula (I)) y se incubaron a 37º C durante 4 minutos antes de parar las reacciones con 100 µl de triton X-100 al 1%. Se determinaron las concentraciones de cAMP en los lisados celulares usando un ensayo de unión competitiva. En este ensayo se midió la habilidad de los lisados celulares para inhibir la unión de 3H-cAMP (Amersham) a la subunidad de unión de la proteína quinasa A y las concentraciones de cAMP se calcularon de una curva estándar. Los datos para cada compuesto se expresaron como el % de la respuesta a una concentración máxima 10 nM del agonista estándar PGE2. Se calcularon para cada

5 compuesto la respuesta máxima y la concentración del compuesto que causó el 50% de su respuesta máxima. Se expresa la actividad intrínseca en relación a la respuesta máxima a PGE2. A no ser que se indique de otra manera, los reactivos se obtuvieron comercialmente de Sigma.

Los ejemplos de la presente invención se probaron en el ensayo mencionado 10 anteriormente y mostraron valores de pEC50 de 6,6 o mayores y actividades intrínsecas de 60% o mayores.

Claims

1.: Un compuesto seleccionado del grupo que consiste en: Ácido {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3clorofenil}acético ; Ácido {3-cloro-4-[1,3-dioxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il]fenil}acético ; Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3clorofenil)acético; Ácido {4-[4,9-bis(etiloxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il]-3bromofenil}acético; Ácido {3-bromo-4-[1,3-dioxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il]fenil}acético; Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1,3-dioxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3bromofenil)acético; Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3clorofenil)acético; Ácido {3-cloro-4-[1-oxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il]fenil}acético; Ácido {3-bromo-4-[1-oxo-4,9-bis(propiloxi)-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2il]fenil}acético; Ácido (4-{4,9-bis(1-metiletoxi)-1-oxo-1,3-dihidro-2H-benzo[f]isoindol-2-il}-3bromofenil)acético; y sales de los mismos.

2.: Un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 1, para uso en medicina humana o veterinaria.

3.: Un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 1, para uso en el tratamiento de una afección que está mediada por la acción, o pérdida de acción, de PGE2 en los receptores EP4.

4.: EL uso de un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable según la reivindicación 1, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de una afección que está mediada por la acción de PGE2 en los receptores EP4.

5.: El uso según la reivindicación 4, en donde la afección se selecciona del grupo que consiste en el dolor, y los trastornos inflamatorios, inmunológicos, óseos, neurodegenerativos o renales.

6.: Una composición farmacéutica que comprende un compuesto o sal del mismo según la reivindicación 1, y uno o más vehículos o diluyentes aceptables.

7.: Una composición farmacéutica según la reivindicación 6, que comprende además uno o más agentes terapéuticos adicionales.