ES2358330T3 - Formulaciones farmacéuticas de fsh y/o lh líquidas o liofilizadas junto con el tensioactivo no iónico poloxámero 188 y un agente bacteriostático. - Google Patents
Formulaciones farmacéuticas de fsh y/o lh líquidas o liofilizadas junto con el tensioactivo no iónico poloxámero 188 y un agente bacteriostático. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2358330T3 ES2358330T3 ES04725385T ES04725385T ES2358330T3 ES 2358330 T3 ES2358330 T3 ES 2358330T3 ES 04725385 T ES04725385 T ES 04725385T ES 04725385 T ES04725385 T ES 04725385T ES 2358330 T3 ES2358330 T3 ES 2358330T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- fsh
- pharmaceutical composition
- concentration
- cresol
- article made
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 239000000022 bacteriostatic agent Substances 0.000 title claims abstract description 48
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 46
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title claims abstract description 33
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 claims abstract description 274
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 claims abstract description 274
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 claims abstract description 273
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 174
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 96
- 229920001993 poloxamer 188 Polymers 0.000 claims abstract description 89
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 claims abstract description 53
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims abstract description 39
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims abstract description 34
- CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide/propylene oxide copolymer Chemical group CCCOC(C)COCCO CTKXFMQHOOWWEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 229940044519 poloxamer 188 Drugs 0.000 claims abstract description 17
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 claims description 212
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 claims description 212
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 claims description 212
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 178
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims description 145
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 60
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 51
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 51
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 44
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 41
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 claims description 38
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 25
- 108010082302 Human Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 claims description 16
- 102000003864 Human Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 claims description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 16
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 14
- 239000012931 lyophilized formulation Substances 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 claims description 10
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 10
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 10
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 10
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 9
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 6
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 6
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N L-Methionine Natural products CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229930195722 L-methionine Natural products 0.000 claims description 5
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 claims description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 3
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003708 ampul Substances 0.000 claims description 2
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 claims description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 125000003717 m-cresyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(O*)=C([H])C(=C1[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 claims 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 36
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 36
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 35
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 34
- -1 acetone Chemical class 0.000 description 28
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 28
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 24
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 24
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 19
- 239000000463 material Substances 0.000 description 19
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 18
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 17
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 17
- 102000011022 Chorionic Gonadotropin Human genes 0.000 description 15
- 108010062540 Chorionic Gonadotropin Proteins 0.000 description 15
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 14
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 13
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 12
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 12
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 12
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 11
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 11
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 11
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 11
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 10
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 10
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 10
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 10
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 10
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 9
- 229940084986 human chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 8
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 8
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 8
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 8
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 7
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 7
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 7
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 7
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940015047 chorionic gonadotropin Drugs 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 6
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 6
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 6
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 6
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 6
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 6
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 6
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 6
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 6
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 6
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 5
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 5
- GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N Propylene oxide Chemical compound CC1CO1 GOOHAUXETOMSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 5
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 5
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 5
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 5
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 5
- 210000001625 seminal vesicle Anatomy 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 5
- 201000010653 vesiculitis Diseases 0.000 description 5
- CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 4-chloro-m-cresol Chemical compound CC1=CC(O)=CC=C1Cl CFKMVGJGLGKFKI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000004297 Draba Species 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010033266 Ovarian Hyperstimulation Syndrome Diseases 0.000 description 4
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N o-cresol Chemical compound CC1=CC=CC=C1O QWVGKYWNOKOFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 4
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101800005309 Carboxy-terminal peptide Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010057021 Menotropins Proteins 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 3
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 3
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 3
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 3
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 3
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 3
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxybenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CBUWTGCATVNMJE-UHFFFAOYSA-N 6,6-dimethylheptanal Chemical compound CC(C)(C)CCCCC=O CBUWTGCATVNMJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 229920002021 Pluronic® F 77 Polymers 0.000 description 2
- 229920002023 Pluronic® F 87 Polymers 0.000 description 2
- 229920002025 Pluronic® F 88 Polymers 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010059594 Secondary hypogonadism Diseases 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 2
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 2
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 2
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 230000008512 biological response Effects 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 229960002242 chlorocresol Drugs 0.000 description 2
- 229960004407 chorionic gonadotrophin Drugs 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229940090343 human menopausal gonadotrophin Drugs 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 238000001155 isoelectric focusing Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N p-cresol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1 IWDCLRJOBJJRNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 238000003751 purification from natural source Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 2
- 239000012905 visible particle Substances 0.000 description 2
- ZDRRIRUAESZNIH-BZGUUIOASA-N (2s)-1-[(4r,7s,10s,13s,16s,19r)-19-amino-7-(2-amino-2-oxoethyl)-13-[(2s)-butan-2-yl]-10-[(1r)-1-hydroxyethyl]-16-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carbonyl]-n-[(2s)-1-[(2-amino-2-oxoethyl)amino]- Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)[C@@H](C)O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZDRRIRUAESZNIH-BZGUUIOASA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Natural products OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 239000004135 Bone phosphate Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031196 Choriogonadotropin subunit beta 3 Human genes 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 1
- 235000001418 Echinochloa stagnina Nutrition 0.000 description 1
- 240000001327 Echinochloa stagnina Species 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 101000776619 Homo sapiens Choriogonadotropin subunit beta 3 Proteins 0.000 description 1
- 101001033280 Homo sapiens Cytokine receptor common subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 206010058359 Hypogonadism Diseases 0.000 description 1
- 206010062767 Hypophysitis Diseases 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 101100227765 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) FSH2 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000004288 Sodium dehydroacetate Substances 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 108010047196 Urofollitropin Proteins 0.000 description 1
- 206010000210 abortion Diseases 0.000 description 1
- 231100000176 abortion Toxicity 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000001370 alpha-amino acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- 206010003883 azoospermia Diseases 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000002144 chemical decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000022811 deglycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940071120 dehydroacetate Drugs 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 150000001990 dicarboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- KDQPSPMLNJTZAL-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogenphosphate dihydrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O KDQPSPMLNJTZAL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000032692 embryo implantation Effects 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000013020 final formulation Substances 0.000 description 1
- 230000008217 follicular development Effects 0.000 description 1
- 108010006578 follitropin alfa Proteins 0.000 description 1
- 229940057854 gonal f Drugs 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 102000055647 human CSF2RB Human genes 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 201000003368 hypogonadotropic hypogonadism Diseases 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000011872 intimate mixture Substances 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 230000001592 luteinising effect Effects 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 208000008634 oligospermia Diseases 0.000 description 1
- 230000036616 oligospermia Effects 0.000 description 1
- 231100000528 oligospermia Toxicity 0.000 description 1
- 239000005022 packaging material Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 229940090048 pen injector Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M phenethicillin potassium Chemical compound [K+].N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 210000003635 pituitary gland Anatomy 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229940068977 polysorbate 20 Drugs 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 239000005060 rubber Substances 0.000 description 1
- 230000009450 sialylation Effects 0.000 description 1
- 229940079839 sodium dehydroacetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019259 sodium dehydroacetate Nutrition 0.000 description 1
- BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogenphosphate monohydrate Chemical compound O.[Na+].OP(O)([O-])=O BBMHARZCALWXSL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M sodium;(1e)-1-(6-methyl-2,4-dioxopyran-3-ylidene)ethanolate Chemical compound [Na+].C\C([O-])=C1/C(=O)OC(C)=CC1=O DSOWAKKSGYUMTF-GZOLSCHFSA-M 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000021595 spermatogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical class 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Una composición farmacéutica líquida que comprende la hormona estimulante de folículo (FSH) o uno de sus variantes, así como un tensioactivo que es poloxámero 188 y que además comprende metionina y un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol.
Description
Campo de la invención
La invención se refiere al campo de las formulaciones farmacéuticas de la hormona estimulante del folículo (abreviada generalmente como FSH por sus iniciales en inglés: follicle-stimulating hormone), formulaciones de la hormona luteinizante, (abreviada generalmente como LH por sus iniciales en inglés: luteinising hormone) y mezclas de FSH y 5 hormona luteinizante (LH), así como a métodos para producir dichas formulaciones.
Antecedentes de la invención
La hormona estimulante del folículo (FSH), la hormona luteinizante (LH) y la gonadotropina coriónica (CG) son proteínas inyectables que entran dentro de la clase de las gonadotropinas. La FSH, LH y hCG se usan solas y en combinación en el tratamiento de la infertilidad y los trastornos reproductivos en pacientes tanto hembras como machos. 10
En la naturaleza, la FSH y la LH son producidas por la glándula pituitaria. Para uso farmacéutico, la FSH y la LH y sus variantes se pueden producir por recombinación (rFSH y rLH) o se pueden producir a partir de la orina de mujeres post-menopáusicas (uFSH y uLH).
La FSH se usa en pacientes hembras para inducir la ovulación (OI) y en hiperestimulación ovárica controlada (COH) para técnicas de reproducción asistida (ART). En un régimen de tratamiento típico para la inducción de la ovulación, al 15 paciente se le administran inyecciones diarias de FHS o de un variante (aproximadamente 75 a 300 UI de FSH/día) durante un periodo de aproximadamente 6 a aproximadamente 12 días. En un régimen de tratamiento típico para la hiperestimulación ovárica controlada, al paciente se le administran inyecciones diarias de FHS o de un variante (aproximadamente 150-600 UI de FSH/día) durante un periodo de aproximadamente 6 a aproximadamente 12 días.
La FSH también se usa para inducir la espermatogénesis en hombres que padecen oligospermia. Se ha usado con éxito 20 un régimen que usa 150 UI de FSH 3 veces a la semana en combinación con 2.500 UI de hCG dos veces a la semana para obtener una mejora en el recuento del esperma en hombres que padecen hipogonadismo hipogonadotrópico1.
La LH se usa en pacientes hembras en combinación con la FSH en OI y en COH, particularmente en aquellas pacientes que tienen niveles muy bajos de LH endógena o resistencia a la LH, tales como mujeres que padecen hipogonadismo hipogonadotrópico (HH, Grupo I de la OMS) o pacientes mayores (es decir, de 35 años de edad o mayores) y en 25 pacientes en las que la implantación embrionaria o el aborto temprano plantean problemas. La LH en combinación con la FSH ha estado disponible tradicionalmente en una preparación denominada gonadotropinas menopáusicas humanas (hMG) extraídas de la orina de mujeres post-menopáusicas. LA hMG tiene una relación de actividad FSH:LH de 1:1.
La CG actúa en el mismo receptor que la LH y produce las mismas respuestas. La CG tiene una semivida en la circulación mayor que la LH y por lo tanto se usa generalmente como una fuente de actividad LH de acción prolongada. 30 La CG se usa en regímenes de OI y COH para imitar el pico natural de la LH y activar la ovulación. Una inyección de gonadotropina coriónica humana (hCG) se usa para activar la ovulación al final de la estimulación con FSH o con una mezcla de FSH y LH. La CG también se puede usar junto con la FSH durante la estimulación para la OI y la COH con el fin de proporcionar actividad LH durante la estimulación en pacientes en los que se desea tener actividad LH, tales como los que se han mencionado anteriormente. 35
La FSH, la LH y la CG son miembros de la familia de las hormonas de glicoproteína, heterodímeros, que también incluye la hormona estimuladora del tiroides (abreviada generalmente como TSH por sus iniciales en inglés: thyroid stimulating hormone). Los miembros de esta familia son heterodímeros que comprenden una subunidad y una . Las subunidades se mantienen unidas mediante interacciones no covalentes. El heterodímero de la FSH humana (hFSH) consiste en: (i) una subunidad alfa de glicoproteína madura de 92 aminoácidos que también es común en los otros 40 miembros de la familia humana (es decir, la gonadotropina coriónica (CG), la hormona luteinizante (LH) y la hormona estimulante del tiroides (TSH)); y (ii) una subunidad beta madura de 111 aminoácidos que es característica de la FSH2. El heterodímero de LH humana consiste en (i) la subunidad alfa de glicoproteína madura de 92 aminoácidos; y (ii) una subunidad beta madura de 112 aminoácidos que es característica de la LH3. Las subunidades alfa y beta de las glicoproteínas pueden tener tendencia a disociarse en las formulaciones debido a la interacción con un conservante, un 45 tensioactivo y otros excipientes. La disociación de las subunidades lleva a la pérdida de potencia biológica4.
La FSH se formula para inyección intramuscular (IM) o subcutánea (SC). La FSH se suministra en forma liofilizada (sólida) en frascos o ampollas de 75 UI/frasco y 150 UI/frasco con una durabilidad de un año y medio a dos años si se almacena a 2-25ºC. La disolución para la inyección se forma reconstituyendo el producto liofilizado con agua para inyección (API). Para la inducción de la ovulación o la hiperestimulación ovárica controlada, se recomiendan inyecciones 50 diarias con dosis iniciales de 75 a 600 UI hasta aproximadamente diez días. Dependiendo de la respuesta del paciente, se pueden usar hasta tres ciclos de tratamiento con dosis crecientes de FSH. Con las formulaciones liofilizadas se pide al paciente que reconstituya un frasco de material liofilizado nuevo con diluyente y que se lo administre inmediatamente después de su reconstitución diariamente [Prospecto N1700101A, publicado en Febrero de 1996 por Fertinex® (urofolitropina para inyección, purificada) para inyección subcutánea, por Serono Laboratorios, Inc., Randolph, MA]. 55
La FSH también se ha formulado en formatos líquidos bien para dosis única o bien para dosis múltiples, en frascos o ampollas. Los formatos para dosis única deben permanecer estables y potentes durante el almacenamiento antes de su utilización. Los formatos para dosis múltiples no solo deben permanecer estables y potentes durante el almacenamiento antes de su utilización, sino que también deben permanecer estables, potentes y relativamente libres de bacterias durante el periodo de administración en régimen de uso en dosis múltiples, después de que el precinto de la ampolla 5 haya sido roto. Por esta razón, los formatos para dosis múltiples contienen a menudo un agente bacteriostático.
La LH se formula para inyección intramuscular (IM) o subcutánea (SC). La LH se suministra en forma liofilizada (sólida) en frascos o ampollas de 75 UI/frasco con una durabilidad de un año y medio a dos años si se almacena a 2-25ºC. La disolución para inyección se forma reconstituyendo el producto liofilizado con agua para inyección (API). Para la inducción de la ovulación o la hiperestimulación ovárica controlada, junto con la FSH, se recomiendan inyecciones 10 diarias con dosis iniciales de 75 a 600 UI de LH hasta aproximadamente diez días.
El documento EP 0618808 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.) describe una composición farmacéutica que comprende una mezcla íntima sólida de gonadotropina y una cantidad estabilizante de sacarosa sola o combinada con glicina.
El documento EP 0814841 (Applied Research Systems ARS Holding N.V.) describe una composición farmacéutica 15 líquida estable que comprende gonadotropina coriónica humana (hCG) recombinante y una cantidad estabilizante de manitol.
El documento EP 0448146 (AZKO N.V.) describe un liofilizado que contiene gonadotropina estabilizada que comprende una parte en peso de gonadotropina; y 200 a 10.000 partes en peso de un estabilizante de una sal de ácido dicarboxílico asociado con la gonadotropina. 20
El documento EP 0853945 (Akzo Nobel N.V.) describe una formulación líquida que contiene gonadotropina caracterizada porque la formulación comprende una gonadotropina y cantidades estabilizantes de un ácido policarboxílico o una de sus sales y de un compuesto de tioéter.
El documento WO 00/04913 (Eli Lilly and Co.) describe una formulación que comprende FSH o un variante de la FSH que contiene una subunidad alfa y una beta y un conservante elegido entre el grupo que consiste en fenol, m-cresol, p-25 cresol, o-cresol, clorocresol, alcohol bencílico, alquil-parabeno (metil, etil, propil, butil y similares), cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, deshidroacetato de sodio y timerosal, o sus mezclas, en un diluyente acuoso.
Todavía persiste la necesidad de formulaciones líquidas estables de FSH o variantes de la FSH, y mezclas de FSH y LH, para administración bien en dosis única o bien en dosis múltiples.
Resumen de la invención 30
Un objetivo de la invención es proporcionar nuevas formulaciones liofilizadas así como líquidas de FSH o variantes de la FSH y LH o variantes de la LH, para proporcionar métodos para su preparación y métodos para su uso farmacéutico o veterinario en el tratamiento de trastornos de la fertilidad.
Un objetivo adicional de la invención es proporcionar nuevas formulaciones liofilizadas y líquidas de mezclas de FSH y LH para proporcionar métodos para su preparación y métodos para su uso farmacéutico o veterinario en el tratamiento 35 de trastornos de la fertilidad.
En un primer aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica liofilizada y líquida que comprende FSH o uno de sus variantes y el tensioactivo Pluronic® F68.
En un segundo aspecto, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica líquida que comprende formar una disolución de FSH o uno de sus variantes, el tensioactivo Pluronic® F68 y API. 40
En un tercer aspecto, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende dispensar una disolución que comprende FSH y el tensioactivo Pluronic® F68 en un contenedor.
En un cuarto aspecto, la invención proporciona un artículo elaborado para el uso farmacéutico humano que comprende un frasco que comprende una disolución de FSH o un variante de la FSH y el tensioactivo Pluronic® F68 y material escrito que indica que dicha disolución puede mantenerse durante un periodo de o aproximadamente veinticuatro horas 45 o más después del primer uso.
En un quinto aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica liofilizada y líquida que comprende FSH y LH y el tensioactivo Pluronic® F68.
En un sexto aspecto, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica liofilizada o líquida que comprende formar una disolución de FSH y LH y el tensioactivo Pluronic® F68. 50
En un séptimo aspecto, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende dispersar una disolución que comprende FSH y LH y el tensioactivo Pluronic® F68 en un contenedor.
En un octavo aspecto, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico humano que comprende un frasco que comprende una disolución de FSH y LH y el tensioactivo Pluronic® F68 y material escrito que indica que dicha disolución puede mantenerse durante un periodo de o de aproximadamente veinticuatro horas o más después del primer uso.
En un noveno aspecto, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico humano que comprende 5 un primer contenedor que comprende FSH liofilizada, o uno de sus variantes y el tensioactivo Pluronic® F68 y un segundo contenedor que comprende un disolvente para la reconstitución, preferiblemente una disolución acuosa que contiene un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol, preferiblemente m-cresol.
En un décimo aspecto, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico humano que comprende un primer contenedor que comprende LH liofilizada, o uno de sus variantes, y el tensioactivo Pluronic® F68 y un 10 segundo contenedor que comprende un disolvente para la reconstitución, preferiblemente una disolución acuosa que contiene un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol, preferiblemente m-cresol.
En un undécimo aspecto, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico humano que comprende un primer contenedor que comprende FSH así como LH o un variante de la FSH o de la LH, liofilizados y el tensioactivo Pluronic® F68 y un segundo contenedor que comprende un disolvente para la reconstitución, 15 preferiblemente una disolución acuosa con m-cresol.
Descripción detallada de la invención
Breve descripción de los dibujos
La figura 1 muestra el porcentaje de subunidad oxidada en las formulaciones de FSH que contienen Pluronic® F68, metionina a 10 g/ml (“Met 10 mcg/ml”) y 100 g/ml (“Met 100 mcg/ml”) frente a una formulación sin metionina (“Sin 20 metionina”), para tiempos de 0, 1 semana y 2 semanas.
Las formulaciones líquidas y liofilizadas de FSH o de FSH y LH de la invención tienen propiedades mejoradas y más adecuadas o estabilidad y son útiles para el tratamiento de la infertilidad en mujeres y/u hombres. Estas formulaciones y los artículos elaborados son adecuados adicionalmente para su uso en sistemas de administración inyectables y sistemas alternativos, por ejemplo, pero sin estar limitados a ellos, nasal, pulmonar, oral, subcutáneo, intramuscular o 25 liberación parenteral prolongada. En un modo de realización particularmente preferido, las formulaciones de la invención son para inyección subcutánea y/o intramuscular. Las disoluciones de FSH o variantes de la FSH y de la LH y las formulaciones proporcionadas también pueden tener una potencia in vivo aumentada a lo largo del tiempo, en comparación con productos comerciales conocidos, mediante la prevención o la reducción de la pérdida de actividad o de estabilidad, o mediante la mejora de cualquier aspecto de eficacia o de adecuación de la administración, por ejemplo 30 al menos uno entre el modo, frecuencia, dosificación, confort, facilidad de uso, actividad biológica in vitro o in vivo y similares.
La hormona estimulante del folículo, o FSH, como se usa en la presente memoria, se refiere a la FSH producida como una proteína madura completa que incluye, pero sin limitarse a ella, la FSH humana o “hFSH”, bien sea producida por recombinación o bien aislada a partir de fuentes humanas, tales como la orina de mujeres post-menopáusicas. La 35 secuencia proteica de la subunidad alfa de la glicoproteína se da en la SEQ. ID. Nº 1, y la secuencia proteica de la subunidad beta de la FSH humana se da en la SEQ. ID. Nº 2.
La expresión “variante de la FSH” pretende incluir aquellas moléculas que se diferencian de la FSH humana en la secuencia de aminoácidos, el patrón de glicosilación o en una unión dentro de la subunidad, pero que presenta actividad FSH. Los ejemplos incluyen la CTP-FSH, una FSH recombinante modificada de acción prolongada, que consiste en la 40 subunidad de tipo natural y una subunidad híbrida en la que el péptido carboxi-terminal de la hCG se ha condensado con el C terminal de la subunidad de la FSH, como se describe en LaPolt et al., Endocrinology, 1992, 131, 2514-2520; o en Klein et al., Development and characterization of a long-acting recombinant hFSH agonist; Human Reprod. 2003, 18, 50-56. También se incluye una CTP-FSH de cadena única, una molécula de cadena única, que consiste en las siguientes secuencias (de N terminal a C terminal): 45
- FSH
- hCG-CTP (113-145) FSH
donde FSH significa la subunidad de la FSH, hCG CTP (113-145) significa el péptido carboxi terminal de la hCG y FSH significa la subunidad de la FSH, como se describe en Klein et al.5. Otros ejemplos de variantes de la FSH incluyen moléculas de FSH que tienen sitios de glicosilación adicionales incorporados en la subunidad y/o , como se describe en el documento WO 01/58493 (Maxygen), particularmente como se describe en las reivindicaciones 10 y 11 50 del documento WO 01/58493, y moléculas de FSH con enlaces S-S dentro de la subunidad, como se describe en el documento WO 98/58957.
Los variantes de la FSH a los que se refiere la presente memoria incluyen las deleciones carboxi-terminales de la subunidad beta que son más cortas que la proteína madura completa de la SEQ. ID. Nº 2. Las deleciones carboxi-terminales de la subunidad beta humana se dan en las SEQ. ID. Nº: 3, 4 y 5. Se entiende que los variantes carboxi-55
terminales de la cadena beta forman dímeros con una subunidad alfa conocida para formar un heterodímero variante de la FSH.
Los heterodímeros de la FSH o los heterodímeros variantes de la FSH se pueden producir por cualquier método adecuado, tal como por recombinación, por aislamiento o purificación a partir de fuentes naturales como puede ser el caso, o por síntesis química, o mediante cualquier combinación de ellos. 5
El uso del término “recombinante” se refiere a las preparaciones de la FSH, LH o variantes de la FSH y de la LH que se producen mediante el uso de tecnología de ADN recombinante (véase por ejemplo el documento WO 85/01958). Se conocen las secuencias genómicas y de los clones de ADNc de la FSH para las subunidades alfa y beta de varias especies6. Un ejemplo de un método que expresa la FSH o la LH usando tecnología recombinante es mediante la transfección de células eucarióticas con las secuencias de ADN que codifican una subunidad alfa y beta de la FSH o la 10 LH, bien proporcionada sobre un vector o bien sobre dos vectores, teniendo cada subunidad un promotor separado, como se describe en la patentes europeas Nº: EP 0211894 y EP 0487512. Otro ejemplo del uso de la tecnología recombinante para producir FSH o LH es mediante el uso de recombinación homóloga para insertar un segmento regulador heterólogo con conexión operativa en secuencias endógenas que codifican las subunidades de la FSH o de la LH, como se describe en la patente europea EP 0505500 (Applied Research Systems ARS Holding NV). 15
La FSH o el variante de la FSH usado según la presente invención se puede producir no solo por medios recombinantes, incluyendo a partir de células de mamífero, sino que también se pueden purificar a partir de otras fuentes biológicas, tales como a partir de fuentes urinarias. Las metodologías aceptables incluyen las descritas en Hakola, K. Molecular and Cellular Endocrinology, 127: 59-69, 1997; Keene et al., J. Biol. Chem., 264: 4769-4775, 1989; Cerpa-Poljak et al., Endocrinology, 132: 351-356, 1993; Dias et al., J. Biol. Chem., 269: 25289-25294, 1994; Flack et al., 20 J. Biol. Chem., 269: 14015-14020, 1994; y Valove et al., Endocrinology, 135 : 2657-2661, 1994; en la patente de Estados Unidos 3.119.740 y en la patente de Estados Unidos 5.767.067.
La hormona luteinizante, o LH, como se usa en la presente memoria, se refiere a la LH producida como una proteína madura completa, que incluye, pero sin limitarse a ella, la LH humana o “hLH”, ya sea producida por recombinación o bien aislada a partir de fuentes humanas, tales como la orina de mujeres post-menopáusicas. La secuencia proteica de 25 la subunidad alfa de la glicoproteína humana se da en la SEQ. ID. Nº 1, y la secuencia proteica de la subunidad beta de la LH humana7 se da en la SEQ. ID. Nº 6. En un modo de realización preferido, la LH es recombinante.
La expresión “variante de la LH” pretende incluir aquellas moléculas que se diferencian de la LH humana en la secuencia de aminoácidos, el patrón de glicosilación o en una unión dentro de la subunidad, pero que presenta actividad LH. 30
Los heterodímeros de la LH o heterodímeros variantes de la LH se pueden producir por cualquier método adecuado, tal como por recombinación, por aislamiento o purificación a partir de fuentes naturales como puede ser el caso o por síntesis química, o cualquier combinación de ellos.
El término “administrar” o “administración” significa introducir una formulación de la presente invención en el cuerpo de un paciente que lo necesita para tratar una enfermedad o trastorno. 35
El término “paciente” significa un mamífero que es tratado de una enfermedad o trastorno. Los pacientes tienen, pero sin limitarse a ellos, los siguientes orígenes: humano, ovino, porcino, equino, bovino, conejo o similares.
El término “potencia” con respecto a la actividad FSH se refiere a la capacidad de una formulación de FSH o una formulación mixta para producir respuestas biológicas asociadas con la FSH, tal como una ganancia de peso ovárico en el ensayo de Steelman-Pohley8, o crecimiento folicular en un paciente hembra. El crecimiento folicular en un paciente 40 hembra puede ser evaluado por ultrasonidos, por ejemplo, en función del número de folículos que tienen un diámetro medio de o de aproximadamente 16 mm el día 8 de la estimulación. La actividad biológica se evalúa con respecto a un patrón aceptado para la FSH.
El término “potencia” con respecto a la actividad LH se refiere a la capacidad de una formulación de LH o una formulación mixta para producir respuestas biológicas asociadas con la LH, tal como el método de ganancia de peso de 45 la vesícula seminal9. La actividad biológica se evalúa con respecto a un patrón aceptado para la LH.
El término “diluyente acuoso” se refiere a un disolvente líquido que contiene agua. Los sistemas disolventes acuosos pueden consistir solo en agua, o pueden consistir en agua más uno o más disolventes miscibles, y pueden contener solutos disueltos, tales como azúcares, tampones, sales u otros excipientes. Los disolventes no acuosos más comúnmente usados son los alcoholes orgánicos de cadena corta, tales como metanol, etanol, propanol, cetonas de 50 cadena corta, tal como la acetona, y polialcoholes, tal como el glicerol.
Un “agente de isotonicidad” es un compuesto que es tolerado fisiológicamente y que confiere una tonicidad adecuada a la formulación para evitar el flujo neto de agua a través de las membranas celulares que están en contacto con la formulación. Para dicho objetivo se usan generalmente compuestos tales como glicerina con concentraciones conocidas. Otros agentes de isotonicidad adecuados incluyen, pero sin limitarse a ellos, aminoácidos o proteínas (por 55
ejemplo, glicina o albúmina), sales (por ejemplo, cloruro de sodio) y azúcares (por ejemplo, dextrosa, sacarosa y lactosa).
El término “bacteriostático” o “agente bacteriostático” se refiere a un compuesto o a composiciones añadidas a la formulación para actuar como agente antibacteriano. Una formulación protegida de la presente invención que contiene FSH o un variante de la FSH o FSH y LH preferiblemente satisface las directivas legales o reguladoras de la eficacia de 5 los conservantes para ser un producto multiusos comercialmente viable, preferiblemente en humanos. Los ejemplos de agentes bacteriostáticos incluyen fenol, m-cresol, p-cresol, o-cresol, clorocresol, alcohol bencílico, alquil-parabeno (metil, etil, propil, butil y similares), cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, deshidroaceatato de sodio y timerosal, siendo el fenol y el m-cresol los agentes bacteriostáticos usados en la presente invención.
El término “tampón” o la expresión “tampón fisiológicamente aceptable” se refiere a disoluciones de compuestos que se 10 sabe que son seguras para su uso farmacéutico o veterinario en formulaciones y que tienen el efecto de mantener o controlar el pH de la formulación en el intervalo de pH deseado para la formulación. Tampones adecuados para controlar el pH de un pH moderadamente ácido a un pH moderadamente básico incluyen, pero sin estar limitados a ellos, compuestos tales como fosfato, acetato, citrato, arginina, TRIS e histidina. “TRIS” se refiere al 2-amino-2-hidroximetil-1,3-propanodiol y a cualquiera de sus sales farmacológicamente aceptables. Los tampones preferidos son 15 los tampones de fosfato con disolución salina o una sal aceptable.
El término “tampón de fosfato” se refiere a disoluciones que contienen ácido fosfórico o sus sales, ajustadas a un pH deseado. Generalmente los tampones de fosfato se preparan a partir de ácido fosfórico o de una sal del ácido fosfórico, incluyendo, pero sin limitarse a ellas, las sales de sodio y de potasio. En la técnica se conocen varias sales del ácido fosfórico, tales como las sales de sodio y de potasio, monobásicas, dibásicas y tribásicas del ácido. También se sabe 20 que las sales del ácido fosfórico se presentan como hidratos de la sal. Los tampones de fosfato pueden cubrir un intervalo de pH tal como de aproximadamente pH 4 a aproximadamente pH 10, y los intervalos preferidos son de aproximadamente pH 5 a aproximadamente pH 9 y un intervalo más preferido de o de aproximadamente 6,0 hasta o hasta aproximadamente 8,0, más preferiblemente a o aproximadamente a pH 7,0.
El término frasco se refiere ampliamente a un contenedor adecuado para conservar la FSH en forma sólida o líquida en 25 un estado estéril contenido. Los ejemplos de un frasco como se usa en la presente memoria, incluyen ampollas, cartuchos, envases en blíster, y otros contenedores similares adecuados para suministrar la FSH al paciente mediante una jeringa, bomba (incluyendo osmótica), catéter, parche transdérmico o pulverización pulmonar o transmucosal. Los frascos adecuados para los productos envasados para administración parenteral, pulmonar, transmucosal o transdérmica son bien conocidos y reconocidos en la técnica. 30
El término “estabilidad” se refiere a la estabilidad física, química y conformacional de la FSH y la LH en las formulaciones de la presente invención (incluyendo el mantenimiento de la potencia biológica). La inestabilidad de una formulación de proteína puede ser producida por degradación química o agregación de las moléculas de proteína para formar polímeros de orden superior, por disociación de los heterodímeros en monómeros, desglicosilación, modificación de la glicosilación, oxidación (particularmente de la subunidad ) o cualquier otra modificación estructural que reduzca al 35 menos una actividad biológica de un polipéptido de la FSH incluido en la presente invención.
Una disolución o formulación “estable” es una en la que el grado de degradación, modificación, agregación, pérdida de la actividad biológica y similares, de las proteínas en ella está controlada aceptablemente y no aumenta de forma inaceptable a lo largo del tiempo. Preferiblemente, la formulación mantiene al menos hasta o aproximadamente hasta el 80% de la actividad de la FSH indicada en la etiqueta y al menos hasta o aproximadamente hasta el 80% de la actividad 40 de la LH indicada en la etiqueta, durante un periodo de 6 meses a una temperatura de o de aproximadamente 2-8ºC, más preferiblemente de o de aproximadamente 2-8ºC, más preferiblemente de o de aproximadamente 4-5ºC. La actividad de la FSH se puede medir usando el bioensayo de ganancia de peso ovárico de Steelman-Pohley5. La actividad de la LH se puede medir usando el bioensayo de ganancia de peso de la vesícula seminal10.
El término “tratamiento” se refiere a la administración, seguimiento, control y/o cuidado de un paciente para el que la 45 administración de FSH y/o LH es adecuada con el objetivo de la estimulación del folículo o testicular o cualquier otra respuesta fisiológica regulada por la FSH y/o la LH. El tratamiento puede incluir, por lo tanto, pero sin limitarse a ello, la administración de FSH y/o LH para la inducción o la mejora de la calidad del esperma, la estimulación de la liberación de testosterona en los machos o el desarrollo folicular o la inducción de la ovulación en las hembras.
La expresión “uso en dosis múltiples” pretende incluir el uso de un único frasco, ampolla o cartucho de una formulación 50 de FSH o una formulación de FSH y LH para más de una inyección, por ejemplo 2, 3, 4, 5, 6 ó más inyecciones. Las inyecciones se hacen preferiblemente durante un periodo de al menos o de aproximadamente 12 horas, 24 horas, 48 horas, etc., preferiblemente hasta un periodo de o de aproximadamente 12 días. Las inyecciones pueden espaciarse en el tiempo, por ejemplo, durante un periodo de 6, 12, 24, 48 ó 72 horas.
Una “sal” de una proteína es una sal de adición de ácido o de base. Dichas sales se forman preferiblemente entre uno 55 cualquiera o más de los grupos cargados en la proteína y cualquier o más cationes o aniones no tóxicos fisiológicamente aceptables. Las sales orgánicas e inorgánicas incluyen, por ejemplo, las preparadas a partir de ácidos tales como el clorhídrico, sulfúrico, sulfónico, tartárico, fumárico, bromhídrico, gliclólico, cítrico, maléico, fosfórico,
succínico, acético, nítrico, benzoico, ascórbico, p-toluenosulfónico, bencenosulfónico, naftalenosulfónico, propiónico, carbónico y similares, o, por ejemplo, amonio, sodio, potasio, calcio o magnesio.
Los inventores han encontrado que formulando la FSH y las mezclas de FSH y LH con el tensioactivo Pluronic® F68 (BASF, Pluronic® F68 también se conoce como Poloxámero 188), se obtienen formulaciones estables que minimizan la pérdida de principio activo (FSH o FSH y LH) producida por adsorción sobre las superficies del frasco y/o del dispositivo 5 de administración (por ejemplo, jeringa, bomba, catéter, etc.).
Los inventores han encontrado además que formulando la FSH y mezclas de FSH y LH con el tensioactivo Pluronic® F68 (BASF, Pluronic® F68 también se conoce como Poloxámero 188), se obtiene una formulación estable que evita el problema de precipitación en presencia de un agente bacteriostático, tal como m-cresol y fenol. La precipitación, que produce la formación de disoluciones turbias o lechosas, se produce cuando se usa TWEEN 20 con m-cresol o fenol. 10
Los tensioactivos Pluronic® son copolímeros de bloques de óxido de etileno (EO, por sus iniciales en inglés) y óxido de propileno (PO, por sus iniciales en inglés). El bloque de óxido de propileno (PO) está encajado entre dos bloques de óxido de etileno (EO).
Los tensioactivos Pluronic® se sintetizan mediante un procedimiento en dos etapas: 15
1. Se crea un hidrófobo del peso molecular deseado mediante la adición controlada de óxido de propileno a los grupos hidroxilo del propilenglicol; y
2. se añade óxido de etileno para encajar el hidrófobo entre los grupos hidrofílicos.
En el Pluronic® F77, el porcentaje de polioxietileno (hidrófilo) es de 70% y el peso molecular del hidrófobo (polioxipropileno) es de aproximadamente 2.306 Da. 20
En el Pluronic® F87, el porcentaje de polioxietileno (hidrófilo) es de 70% y el peso molecular del hidrófobo (polioxipropileno) es de aproximadamente 2.644 Da.
En el Pluronic® F88, el porcentaje de polioxietileno (hidrófilo) es de 80% y el peso molecular del hidrófobo (polioxipropileno) es de aproximadamente 2.644 Da.
En el Pluronic® F68, el porcentaje de polioxietileno (hidrófilo) es de 80% y el peso molecular del hidrófobo 25 (polioxipropileno) es de aproximadamente 1.967 Da.
Las propiedades típicas del Pluronic® F77 se indican a continuación:
Peso molecular medio: 6.600;
Punto de fusión/punto de fluidez crítica: 48ºC;
Forma física a 20ºC: sólido; 30
Viscosidad (Brookfield) cps (Pa·s): 480 (0,48)
[líquido a 25ºC, pasta a 60ºC y sólido a 77ºC];
Tensión superficial, dinas/cm (mN/m) a 25ºC:
- Concentración al 0,1%: 47,0
- Concentración al 0,01%: 49,3 35
- Concentración al 0,001%: 52,8
Tensión interfacial, dinas/cm (mN/m) a 25ºC frente al Nujol:
- Concentración al 0,1%: 17,7
- Concentración al 0,01%: 20,8
- Concentración al 0,001%: 25,5
Humectación Draves, segundos a 25ºC:
- Concentración al 1,0%: > 360
- Concentración al 0,1%: > 360
Altura de espuma: 5
- Ross Miles, 0,1%, mm a 50ºC: 100
- Ross Miles, 0,1%, mm a 26ºC: 47
- Dinámica, 0,1%, mm a 400 ml/min: > 600
Punto de turbidez en disolución acuosa, ºC:
- Concentración al 1%: > 100 10
- Concentración al 10%: > 100
HLB (equilibrio hidrófilo-lipófilo): 25
Las propiedades típicas del Pluronic® F87 se indican a continuación:
Peso molecular medio: 7.700;
Punto de fusión/punto de fluidez crítica: 49ºC; 15
Forma física a 20ºC: sólido;
Viscosidad (Brookfield) cps (Pa·s): 700 (0,70)
[líquido a 25ºC, pasta a 60ºC y sólido a 77ºC];
Tensión superficial, dinas/cm (mN/m)a 25ºC:
- Concentración al 0,1%: 44,0 20
- Concentración al 0,01%: 47,0
- Concentración al 0,001%: 50,2
Tensión interfacial, dinas/cm (mN/m) a 25ºC frente al Nujol:
- Concentración al 0,1%: 17,4
- Concentración al 0,01%: 20,3 25
- Concentración al 0,001%: 23,3
Humectación Draves, segundos a 25ºC:
- Concentración al 1,0%: > 360
- Concentración al 0,1%: > 360
Altura de espuma: 30
- Ross Miles, 0,1%, mm a 50ºC: 80
- Ross Miles, 0,1%, mm a 26ºC: 37
- Dinámica, 0,1%, mm a 400 ml/min: > 600
Punto de turbidez en disolución acuosa, ºC:
- Concentración al 1%: > 100 35
- Concentración al 10%: > 100
HLB (equilibrio hidrófilo-lipófilo): 24
Las propiedades típicas del Pluronic® F88 se indican a continuación:
Peso molecular medio: 11.400;
Punto de fusión/punto de fluidez crítica: 54ºC;
Forma física a 20ºC: sólido;
Viscosidad (Brookfield) cps (Pa·s): 2.300 (2,30) 5
[líquido a 25ºC, pasta a 60ºC y sólido a 77ºC];
Tensión superficial, dinas/cm (mN/m) a 25ºC:
- Concentración al 0,1%: 48,5
- Concentración al 0,01%: 52,6
- Concentración al 0,001%: 55,7 10
Tensión interfacial, dinas/cm (mN/m) a 25ºC frente al Nujol:
- Concentración al 0,1%: 20,5
- Concentración al 0,01%: 23,3
- Concentración al 0,001%: 27,0
Humectación Draves, segundos a 25ºC: 15
- Concentración al 1,0%: > 360
- Concentración al 0,1%: > 360
Altura de espuma:
- Ross Miles, 0,1%, mm a 50ºC: 80
- Ross Miles, 0,1%, mm a 26ºC: 37 20
- Dinámica, 0,1%, mm a 400 ml/min: > 600
Punto de turbidez en disolución acuosa, ºC:
- Concentración al 1%: > 100
- Concentración al 10%: > 100
HLB (equilibrio hidrófilo-lipófilo): 28 25
Las propiedades típicas del Pluronic® F68 se indican a continuación:
Peso molecular medio: 8.400;
Punto de fusión/punto de fluidez crítica: 52ºC;
Forma física a 20ºC: sólido;
Viscosidad (Brookfield) cps (Pa·s): 1000 (1,00) 30
[líquido a 25ºC, pasta a 60ºC y sólido a 77ºC];
Tensión superficial, dinas/cm (mN/m) a 25ºC:
- Concentración al 0,1%: 50,3
- Concentración al 0,01%: 51,2
- Concentración al 0,001%: 53,6 35
Tensión interfacial, dinas/cm (mN/m) a 25ºC frente al Nujol:
- Concentración al 0,1%: 19,8
- Concentración al 0,01%: 24,0
- Concentración al 0,001%: 26,0
Humectación Draves, segundos a 25ºC:
- Concentración al 1,0%: > 360
- Concentración al 0,1%: > 360 5
Altura de espuma:
- Ross Miles, 0,1%, mm a 50ºC: 35
- Ross Miles, 0,1%, mm a 26ºC: 40
- Dinámica, 0,1%, mm a 400 ml/min: > 600
Punto de turbidez en disolución acuosa, ºC: 10
- Concentración al 1%: > 100
- Concentración al 10%: > 100
HLB (equilibrio hidrófilo-lipófilo): 29
El tensioactivo preferido es el Pluronic® F68.
El Pluronic® F68 está presente preferiblemente en la formulación a una concentración que es suficiente para mantener 15 la estabilidad de la FSH y/o de la LH a lo largo del periodo de almacenamiento deseado (por ejemplo, de 6 a 12 a 24 meses) y también a una concentración que es suficiente para evitar las pérdidas de proteína debidas a adsorción sobre las superficies, tales como las del frasco, ampolla o cartucho o de la jeringa.
Preferiblemente, la concentración de Pluronic® F68, en formulaciones líquidas, es de o de aproximadamente 0,01 mg/ml hasta o hasta aproximadamente 1 mg/ml, más preferiblemente de o de aproximadamente 0,05 mg/ml hasta o hasta 20 aproximadamente 0,5 mg/ml, más particularmente preferido de o de aproximadamente 0,2 mg/ml hasta o hasta aproximadamente 0,4 mg/ml, lo más preferiblemente de o aproximadamente de 0,1 mg/ml.
La hormona estimulante del folículo (FSH) en formulación liofilizada está presente preferiblemente a una concentración (peso/peso) de o de aproximadamente 0,1 a 10 g/mg de la formulación total. En un modo de realización, la hormona estimulante del folículo (FSH) está presente a una concentración de o de aproximadamente 0,3 a 5 g/mg de la 25 formulación total. En un modo de realización adicional, la hormona estimulante del folículo (FSH) está presente a una concentración de o de aproximadamente 0,37 a 2 g/mg de la formulación total.
La hormona luteinizante (LH) en formulación liofilizada está presente preferiblemente a una concentración de o de aproximadamente 0,1 a 3 g/mg de la formulación total. En un modo de realización, la hormona luteinizante (LH) está presente a una concentración de o de aproximadamente 0,1 a 1 g/mg de la formulación total. En un modo de 30 realización adicional, la hormona luteinizante (LH) está presente a una concentración de o de aproximadamente 0,1 a 0,6 g/mg de la formulación total.
En las formulaciones líquidas –incluyendo las formulaciones reconstituidas- que comprenden FSH, preferiblemente la concentración de FSH en la formulación es de o de aproximadamente 150 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 2.000 UI/ml, más preferiblemente de o de aproximadamente 300 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 1.500 UI/ml, más 35 particularmente preferible de o de aproximadamente 450 hasta o hasta aproximadamente 750, lo más preferiblemente de o de aproximadamente 600 UI/ml.
En las formulaciones líquidas –incluyendo las formulaciones reconstituidas- que comprenden LH, preferiblemente la concentración de LH en la formulación es de o de aproximadamente 50 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 2.000 UI/ml, más preferiblemente de o de aproximadamente 150 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 1.500 UI/ml, más 40 particularmente preferible de o de aproximadamente 300 hasta o hasta aproximadamente 750 UI/ml, particularmente preferible de o de aproximadamente 625 UI/ml.
En las formulaciones que comprenden tanto FSH como LH, la relación entre la FSH y la LH (FSH:LH, UI:UI, FSH medida mediante el ensayo de ganancia de peso ovárico en ratas y LH medida mediante el ensayo de ganancia de peso de la vesícula seminal en ratas) está preferiblemente en el intervalo de o de aproximadamente 6:1 hasta o hasta 45 aproximadamente 1:6, más preferiblemente de o de aproximadamente 4:1 hasta o hasta aproximadamente 1:2, más particularmente preferido de o de aproximadamente 3:1 hasta o hasta aproximadamente 1:1. Las relaciones particularmente preferidas son 1:1 y 2:1.
En las formulaciones liofilizadas, el tensioactivo Pluronic® F68 está preferiblemente presente a una concentración de o de aproximadamente 0,001 hasta o hasta aproximadamente 0,1 mg por mg de la formulación total, más preferiblemente de o de aproximadamente 0,01 hasta o hasta aproximadamente 0,075 mg/mg.
Preferiblemente, la concentración de Pluronic® F68 en las formulaciones reconstituidas es de o de aproximadamente 0,01 mg/ml hasta o hasta aproximadamente 1 mg/ml, más preferiblemente de o de aproximadamente 0,05 mg/ml hasta 5 o hasta aproximadamente 0,5 mg/ml, más particularmente preferido de o de aproximadamente 0,2 mg/ml hasta o hasta aproximadamente 0,4 mg/ml, lo más preferiblemente de o de aproximadamente 0,1 mg/ml.
Preferiblemente, la FSH y la LH se producen por recombinación, de forma particularmente preferida se producen en células de ovario de hámster chino transfectadas con un vector o vectores que comprenden ADN que codifica para la subunidad alfa y la subunidad beta de glicoproteína humana de la FSH o la LH. El ADN que codifica para las 10 subunidades alfa y beta puede estar presente en el mismo o en diferentes vectores.
La FSH y la LH recombinantes presentan varias ventajas frente a sus homólogas urinarias. Las técnicas de cultivo y aislamiento que usan células recombinantes permiten obtener lotes consistentes. Por el contrario, la FSH y la LH de origen urinario varían de forma importante de un lote a otro en características tales como pureza, patrón de glicosilación y sialilación y oxidación de las subunidades. Debido a la mayor consistencia entre lotes y pureza de la FSH y LH 15 recombinantes, las hormonas pueden ser identificadas y cuantificadas fácilmente usando técnicas tales como focalización isoeléctrica (IEF, por sus iniciales en inglés). La facilidad con la que se pueden identificar y cuantificar la FSH y LH recombinantes permite llenar los frascos por masa de la hormona (dosificación en masa) en lugar de llenarlos por bioensayo.
Preferiblemente, las formulaciones de FSH de la presente invención tienen un pH de o de aproximadamente 6,0 hasta o 20 hasta aproximadamente 8,0, más preferiblemente de o de aproximadamente 6,8 hasta o hasta aproximadamente 7,8, incluyendo un pH de aproximadamente 7,0, 7,2 y 7,4. Un tampón preferido es el de fosfato, siendo los contraiones preferidos los iones de sodio o potasio. Los tampones de fosfato con disolución salina son bien conocidos en la técnica, tal como la disolución salina tamponada con fosfato de Dulbecco. Las concentraciones de tampón en la disolución total pueden variar de o de aproximadamente 5mM, 9,5mM, 10mM, 50mM, 100mM, 150mM, 200mM, 250mM y 500mM. 25 Preferiblemente, la concentración de la disolución tampón es de o de aproximadamente 10mM. Se prefiere particularmente una disolución tampón 10mM en iones fosfato con un pH de 7,0.
Preferiblemente, las formulaciones o mezclas de FSH y LH de la presente invención tienen un pH de o de aproximadamente 6,0 hasta o hasta aproximadamente 9,0, más preferiblemente de o de aproximadamente 6,8 hasta o hasta aproximadamente 8,5, incluyendo un pH de aproximadamente 7,0, 8,0 y 8,2, lo más preferiblemente un pH de o 30 de aproximadamente 8,0.
La invención se refiere a formulaciones líquidas así como a formulaciones secadas por congelación (liofilizadas) que pueden ser reconstituidas, en las que el disolvente (también para la reconstitución) es agua para inyección. Las formulaciones líquidas pueden ser para una dosis única o para múltiples dosis. Las formulaciones líquidas así como las secadas por congelación de FSH y/o de LH de la invención que se pretende que sean para su uso en múltiples dosis 35 comprenden un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol. El más preferido es el m-cresol. El agente bacteriostático se usa en una cantidad que dé una concentración que sea eficaz para mantener la formulación esencialmente libre de bacterias (adecuada para inyección) durante el periodo de inyección de las múltiples dosis, que puede ser de o de aproximadamente 12 ó 24 horas hasta o hasta aproximadamente 12 ó 14 días, preferiblemente de o de aproximadamente 6 hasta o hasta aproximadamente 12 días. El agente bacteriostático está presente preferiblemente 40 en una concentración de o de aproximadamente 0,1% (masa del agente bacteriostático/masa del disolvente) hasta o hasta aproximadamente 2,0%, más preferiblemente de o de aproximadamente 0,2% hasta o hasta aproximadamente 1,0%. En el caso del fenol, se prefiere particularmente de o de aproximadamente 0,5%. En el caso del m-cresol, la concentración particularmente preferida es de o de aproximadamente 0,3% (por ejemplo, de o de aproximadamente 3 mg/ml de API). 45
En un modo de realización preferido, la invención proporciona una composición farmacéutica líquida, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende FSH o uno de sus variantes, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol.
En un modo de realización preferido adicional, la invención proporciona una composición farmacéutica líquida, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende LH, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente 50 bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol.
En todavía un modo de realización preferido adicional, la invención proporciona una composición farmacéutica líquida, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende FSH y LH, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol. Preferiblemente, la FSH y la LH están presentes en una relación (FSH:LH) de o de aproximadamente 2:1 hasta o hasta aproximadamente 1:1. 55
En un modo de realización preferido adicional, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica líquida, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende elaborar una disolución acuosa de
FSH o uno de sus variantes, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol, y API.
En un modo de realización preferido adicional, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica líquida, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende elaborar una disolución acuosa de LH, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol, y 5 API.
En un modo de realización preferido adicional, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica líquida, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende elaborar una disolución acuosa de FSH y LH, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol, y API. 10
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende administrar una disolución que comprende FSH, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende administrar una disolución que comprende FSH y LH, el tensioactivo Pluronic® 15 F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico en humanos que comprende un frasco que comprende una disolución de FSH o un variante de la FSH, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol, y material escrito que indica que dicha disolución puede mantenerse durante un periodo de o de aproximadamente veinticuatro horas o 20 más después del primer uso. Preferiblemente, el material escrito indica que la disolución puede mantenerse hasta o hasta aproximadamente 12 ó 14 días después del primer uso.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico en humanos que comprende un frasco que comprende una disolución de FSH y LH, el tensioactivo Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol, y material escrito que indica que dicha 25 disolución puede mantenerse durante un periodo de o de aproximadamente veinticuatro horas o más después del primer uso. Preferiblemente, el material escrito indica que la disolución puede mantenerse hasta o hasta aproximadamente 12 ó 14 días después del primer uso.
En un modo de realización particularmente preferido, la formulación comprende m-cresol y Pluronic® F68. Los inventores han encontrado sorprendentemente que las formulaciones que comprenden Pluronic® F68 no precipitan en 30 presencia de m-cresol, un problema observado con otros tensioactivos.
Antes de su primer uso, es decir antes de que el precinto del frasco, ampolla o cartucho haya sido roto, las formulaciones de la invención pueden mantenerse durante al menos o aproximadamente 6 meses, 12 meses o 24 meses. En las condiciones de almacenamiento preferidas, antes de su primer uso, las formulaciones se mantienen protegidas de la luz brillante (preferiblemente en la oscuridad) y a temperaturas de o de aproximadamente 2-8ºC, más 35 preferiblemente de o de aproximadamente 4-5ºC.
En un modo de realización específico, la invención proporciona una formulación liofilizada para reconstitución, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende FSH o uno de sus variantes y el tensioactivo Pluronic® F68.
En un modo de realización específico adicional, la invención proporciona una formulación liofilizada para reconstitución, 40 preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende LH y el tensioactivo Pluronic® F68.
En un modo de realización específico adicional, la invención proporciona una formulación liofilizada, preferiblemente para uso en múltiples dosis, que comprende FSH y LH y el tensioactivo Pluronic® F68. Preferiblemente, la FSH y la LH están presentes en una relación (FSH:LH) de o de aproximadamente 2:1 hasta o hasta aproximadamente 1:1.
En un modo de realización específico adicional, la invención proporciona un método para elaborar una formulación 45 liofilizada, preferiblemente para uso en múltiples dosis después de su reconstitución, que comprende formar una mezcla de FSH o de uno de sus variantes con el tensioactivo Pluronic® F68 y someter dicha mezcla a liofilización.
En un modo de realización específico adicional, la invención proporciona un método para elaborar una formulación liofilizada, preferiblemente para uso en múltiples dosis después de su reconstitución, que comprende formar una mezcla de LH con el tensioactivo Pluronic® F68 y someter dicha mezcla a liofilización. 50
En un modo de realización específico adicional, la invención proporciona un método para elaborar una formulación liofilizada, preferiblemente para uso en múltiples dosis después de su reconstitución, que comprende formar una mezcla de FSH y LH, así como el tensioactivo Pluronic® F68 y someter dicha mezcla a liofilización.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende administrar una mezcla liofilizada que comprende FSH y el tensioactivo Pluronic® F68.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende administrar una mezcla liofilizada que comprende LH y el tensioactivo Pluronic® 5 F68 en un contenedor.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende administrar una mezcla liofilizada que comprende FSH así como LH y el tensioactivo Pluronic® F68 en un contenedor.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico en 10 humanos que comprende un primer contenedor o frasco que contiene FSH o un variante de la FSH liofilizados y el tensioactivo Pluronic® F68. Un segundo contenedor o frasco contiene un diluyente para reconstitución, preferiblemente agua y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico en humanos que comprende un primer contenedor o frasco que contiene LH o un variante de la LH liofilizados y el 15 tensioactivo Pluronic® F68. Un segundo contenedor o frasco contiene un diluyente para reconstitución, preferiblemente agua y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol.
En todavía otro modo de realización preferido, la invención proporciona un artículo elaborado para uso farmacéutico en humanos que comprende un primer contenedor o frasco que contiene FSH o un variante de la FSH así como LH o un variante de la LH liofilizados y el tensioactivo Pluronic® F68. Un segundo contenedor o frasco contiene un diluyente 20 para reconstitución, preferiblemente agua y un agente bacteriostático elegido entre m-cresol y fenol, preferiblemente m-cresol.
En un modo de realización particularmente preferido, el disolvente para reconstitución comprende m-cresol. Los inventores han encontrado que las formulaciones liofilizadas que comprenden Pluronic® F68 no precipitan cuando se reconstituyen con un diluyente que contiene m-cresol, un problema observado con otros tensioactivos, por ejemplo 25 Tween.
Las formulaciones liofilizadas de la invención se pueden mantener al menos durante o durante aproximadamente 6 meses, 12 meses o 24 meses. En las condiciones de almacenamiento preferidas, antes de su primer uso, las formulaciones se mantienen protegidas de la luz brillante (preferiblemente en la oscuridad) y a temperaturas de o de aproximadamente 2-8ºC, más preferiblemente de o de aproximadamente 4-5ºC. 30
Después del primer uso de una formulación líquida o reconstituida para uso en múltiples dosis se puede mantener y usar durante al menos 24 horas, preferiblemente al menos durante o aproximadamente 4, 5 ó 6 días, más preferiblemente durante hasta 12 ó 14 días. Después del primer uso, la formulación se almacena preferiblemente a una temperatura por debajo de la temperatura ambiente (es decir, por debajo de aproximadamente 25ºC), más preferiblemente por debajo o a aproximadamente 10ºC, más preferiblemente a o a aproximadamente 2-8ºC, lo más 35 preferiblemente a o a aproximadamente 5-0ºC.
Las formulaciones de la invención contienen el antioxidante metionina. El antioxidante evita la oxidación de la FSH y de la LH (particularmente de la subunidad ).
La metionina en las formulaciones líquidas y/o reconstituidas está presente preferiblemente a un concentración de o de aproximadamente 0,01 hasta o hasta aproximadamente 1,0 mg/ml, más preferiblemente de o de aproximadamente 0,05 40 hasta o hasta aproximadamente 0,5 mg/ml, lo más preferiblemente de o de aproximadamente 0,1 mg/ml.
Preferiblemente, las formulaciones de la invención contienen un mono- o di-sacárido o un alcohol de azúcar como estabilizador y agente de ajuste de la tonicidad, tal como sacarosa, dextrosa, lactosa, manitol y/o glicerol. El más preferido es la sacarosa, preferiblemente a una concentración de o de aproximadamente 60 mg/ml.
Como se ha indicado anteriormente, la invención proporciona formulaciones líquidas para un solo uso y para uso en 45 múltiples dosis que contienen un agente bacteriostático o a las que se añade un agente bacteriostático cuando se reconstituye la formulación. Las formulaciones de la invención son adecuadas para uso farmacéutico o veterinario.
Como se ha indicado anteriormente, en un modo de realización preferido la invención proporciona un artículo elaborado que comprende material envasado y un frasco que comprende una disolución de FSH o un variante de la FSH, LH, o FSH y LH, Pluronic® F68, metionina y un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol, opcionalmente con 50 tampones y/u otros excipientes, en un diluyente acuoso, en el que dicho material envasado comprende material escrito que indica que dicha disolución se puede mantener durante un periodo de veinticuatro horas o más después del primer uso. La invención comprende además un artículo elaborado que comprende material envasado, un frasco que comprende una formulación de FSH o de un variante de la FSH según la invención, en el que dicho material envasado
comprende material escrito que instruye al paciente sobre como reconstituir la FSH o un variante de la FSH en el diluyente acuoso para formar una disolución que se puede mantener durante un periodo de veinticuatro horas o más.
Como se ha indicado anteriormente, en un modo de realización preferido la invención proporciona un artículo elaborado que comprende un material envasado y un frasco que comprende FSH o un variante de la FSH, LH o un variante de la LH, o FSH y LH liofilizados, Pluronic® F68 y metionina. El agente bacteriostático en el segundo contenedor que incluye 5 el diluyente se elige entre fenol y m-cresol, opcionalmente con excipientes adicionales, donde dicho material envasado comprende material escrito que indica que dicha disolución puede mantenerse durante un periodo de veinticuatro horas o más después de su primer uso.
El intervalo de proteína hormona en las formulaciones de la invención incluye cantidades que dan, después de la reconstitución, concentraciones de aproximadamente 1,0 g/ml a aproximadamente 50 mg/ml, aunque se puede operar 10 con concentraciones mayores y menores y dependen del vehículo de administración previsto, por ejemplo las formulaciones en disolución se diferenciarán de los parches transdérmicos y de las de administración pulmonar, transmucosal o por métodos osmóticos o por microbombas. La concentración de la proteína hormona es preferiblemente de o de aproximadamente 5,0 g/ml hasta o hasta aproximadamente 2 mg/ml, más preferiblemente de o de aproximadamente 10 g/ml hasta o hasta aproximadamente 1 mg/ml, lo más preferiblemente de o de 15 aproximadamente 50 g/ml hasta o hasta aproximadamente 200 g/ml.
El intervalo de proteína hormona en las formulaciones de la invención incluye cantidades que dan, después de la reconstitución, concentraciones de aproximadamente 1,0 g/ml a aproximadamente 50 mg/ml, aunque se puede operar con concentraciones mayores y menores y dependen del vehículo de administración previsto, por ejemplo las formulaciones en disolución se diferenciarán de los parches transdérmicos y de las de administración pulmonar, 20 transmucosal o por métodos osmóticos o por microbombas. La concentración de la proteína hormona es preferiblemente de o de aproximadamente 5,0 g/ml hasta o hasta aproximadamente 2 mg/ml, más preferiblemente de o de aproximadamente 10 g/ml hasta o hasta aproximadamente 1 mg/ml, lo más preferiblemente de o de aproximadamente 50 g/ml hasta o hasta aproximadamente 200 g/ml.
Preferiblemente, las formulaciones de la invención retienen al menos o aproximadamente 80% de la actividad de la FSH 25 y/o de la actividad de la LH en el tiempo de envasado durante un periodo de 24 meses (antes de su primer uso). La actividad de la FSH se puede medir usando el bioensayo de Steelman-Pohley de ganancia de peso ovárico5. La actividad de la LH se puede medir mediante el bioensayo de ganancia de peso de la vesícula seminal en ratas.
Las formulaciones líquidas de la presente invención se pueden preparar mediante un procedimiento que comprende mezclar la FSH o un variante de la FSH, la LH, o una mezcla de FSH y LH y el Pluronic® F68 y un agente 30 bacteriostático elegido entre el fenol y el m-cresol como sólidos o disolver la FSH o un variante de la FSH, la LH, o una mezcla de FSH y LH (“proteína”) y el Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre el fenol y el m-cresol en un diluyente acuoso. La mezcla de los componentes y su disolución en un diluyente acuoso se realiza usando procedimientos convencionales de disolución y mezcla. Para preparar una formulación adecuada, por ejemplo, una cantidad medida de FSH o de un variante de la FSH, LH o una mezcla de FSH y LH en una disolución tamponada se 35 combina con Pluronic® F68 y un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol en una disolución tamponada en cantidades suficientes para proporcionar la proteína, el Pluronic® F68 y el agente bacteriostático en las concentraciones deseadas. La disolución resultante se suministra entonces en frascos, ampollas o cartuchos. Las variaciones de este procedimiento serán reconocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, el orden en el que se añaden los componentes, si se usan aditivos adicionales, la temperatura y el pH a los que se prepara la formulación, son todos 40 factores que pueden ser optimizados para la concentración y los medios de administración usados.
En un modo de realización preferido, las formulaciones líquidas de la invención se elaboran preparando disoluciones madre individuales de concentración conocida de todos los componentes de la formulación (por ejemplo, disolución tampón de fosfato de sodio, sacarosa, TWEEN, metionina, FSH y/o LH), y tomando cantidades volumétricas alícuotas para formar una “disolución madre” de la misma composición que la formulación final. La “disolución madre” se filtra 45 preferiblemente a través de una membrana Duropore® (Millipore) 0,22 micrones PDF para eliminar los micro-organismos y a continuación las alícuotas se administran en contenedores individuales, tal como frascos, ampollas o cartuchos.
Las formulaciones liofilizadas de la presente invención se pueden preparar mediante un procedimiento que comprende mezclar la FSH o un variante de la FSH, la LH o un variante de la LH, o una mezcla de FSH y LH, y Pluronic® F68, así 50 como otros excipientes como el antioxidante metionina y/o un tampón y someter la mezcla a liofilización. La mezcla de los componentes y su liofilización se realizan usando procedimientos convencionales. Para preparar una formulación adecuada, por ejemplo, se combina una cantidad medida de FSH o un variante de la FSH, LH o un variante de la LH o una mezcla de FSH y LH, con Pluronic® F68 y la mezcla resultante se liofiliza y a continuación se suministra en frascos, ampollas o cartuchos. Las variaciones de este procedimiento serán reconocidas por los expertos en la técnica. Por 55 ejemplo, el orden en el que se añaden los componentes, si se usan aditivos adicionales, la temperatura y el pH a los que se prepara la formulación, son todos factores que pueden ser optimizados para la concentración y los medios de administración usados.
Las formulaciones de la invención se pueden administrar usando dispositivos reconocidos. Los ejemplos que comprenden estos sistemas de frasco único incluyen dispositivos de lápiz-inyector para administrar una disolución tal como EasyJect®, Gonal-F® Pen, Humaject®, NovoPen®, B-D® Pen, AutoPen® y Optipen®.
Los productos reivindicados en la presente memoria incluyen material envasado. El material envasado proporciona, además de la información requerida por las agencias reguladoras, las condiciones en las que se debe usar el producto. 5 El material envasado de la presente invención proporciona instrucciones a los pacientes para reconstituir la FSH o un variante de la FSH en el diluyente acuoso para formar una disolución y para usar la disolución durante un periodo de veinticuatro horas o más para el producto en dos frascos de producto húmedo/seco. Para el producto en disolución en un solo frasco, la etiqueta indica que dicha disolución puede ser almacenada después de su primer uso por un periodo de veinticuatro horas o más, preferiblemente hasta 12 ó 14 días. Los productos reivindicados en la presente memoria 10 son útiles para su uso como producto farmacéutico en humanos.
Las formulaciones estables conservadas pueden ser administradas a los pacientes como disoluciones límpidas. La disolución puede ser para un solo uso o puede ser reutilizada varias veces y puede ser suficiente para un solo ciclo o varios ciclos del tratamiento del paciente y, por lo tanto, proporciona un régimen de tratamiento más conveniente que el que está disponible actualmente. 15
La FSH o un variante de la FSH, la LH o las mezclas de FSH y LH en las formulaciones o disoluciones, tanto estables como conservadas, descritas en la presente memoria, pueden ser administradas a un paciente según la presente invención mediante varios métodos de administración, incluyendo inyección SC o IM; administración transdérmica, pulmonar, transmucosal, implantes, por bomba osmótica, cartucho, microbomba, oral y otros medios apreciados por los expertos en la técnica, como es bien conocido en la técnica. 20
Los siguientes ejemplos se proporcionan únicamente para ilustrar adicionalmente la preparación de las formulaciones y composiciones de la invención. El alcance de la invención no debe ser considerado como consistente únicamente en los siguientes ejemplos.
Ejemplo 1
Formulaciones comparativas 25
Materiales
- Item
- Fabricante
- r-hFSH masiva usada como candidato para las formulaciones
- Laboratorios Serono SA
- D-Manitol (DAB, Ph Eur, BP, FU, USP, FCC, E421)
- Merck
- Sacarosa (DAB, Ph Eur, BP, NF)
- Merck
- NaCl (ACS, ISO)
- Merck
- Na2HPO4·2H2O (GR para análisis)
- Merck
- NaH2PO4·H2O (GR para análisis)
- Merck
- Alcohol bencílico (GR para análisis)
- Merck
- m-Cresol (para síntesis)
- Merck
- TWEEN 20 (polisorbato 20) (para síntesis)
- Merck
- Pluronic® F68 (Poloxámero 188)
- Sigma
- l-Metionina (para bioquímica)
- Merck
- Ácido ortofosfórico al 85% (Ph Eur, BP, NF)
- Merck
- Cartucho de vidrio de 1,5 ml
- SFAM (con silicona Aguettant)
- Cauchos de tipo A
- West Company
- Cierre alabeado
- Aguettant
- Millex-GV Unidad de filtro con jeringa – Durapore
- Millipore
- Filtros de membrana Durapore de 0,22 m GV
- Millipore
- Jeringa de plástico de 20 ml Plastipak
- Becton Dickinson
- Soporte de acero para filtración
- Sartorius
Equipo
- Sistemas de HPLC
- Detector modelo 486 ó 490 Controlador modelo 600S Bomba modelo 626 Automuestreador modelo 717 Waters 2
- pH-metro
- Modelo9 654 Metrohm 1
- Osmómetro
- 030-D Osmomat 1
El siguiente estudio evaluó los siguientes parámetros para un gran número de formulaciones:
- Compatibilidad del tensioactivo y el agente bacteriostático
- Oxidación de la subunidad alfa
Las formulaciones eran formulaciones para dosis múltiples y estaban contenidas bien en TWEEN 20 o bien en Pluronic® F68, así como un agente bacteriostático. Se evaluaron los tres agentes bacteriostáticos siguientes: 5
- Alcohol bencílico al 0,9%
- m-Cresol al 0,3%
- Fenol al 0,5%
El TWEEN 20 y el Pluronic® F68 se usaron en el siguiente intervalo de concentraciones:
- TWEEN 20: intervalo de 10 a 100 g/g 10
- Pluronic® F68: intervalo de 10 a 100 g/g
Las disoluciones preparadas se recogen en la Tabla 1.
- Tabla 1: Formulaciones comparativas
- ID
- Na2HPO4 2H2O (mg/g) NaH2PO4 2H2O (mg/g) r-hFSH* Pluronic® F68 (µg/g) TWEEN 20 (µg/g) Agente Bacteriostático Excipiente (mg/g)
- 1P
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - Fenol 0,5% Sacarosa 70,6
- 2P
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - Fenol 0,5% Manitol 38,7
- 3P
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - Fenol 0,5% Sacarosa 70,6
- 4P
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - Fenol 0,5% Manitol 38,7
- 5P
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 Fenol 0,5% Sacarosa 70,6
- 6P
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 Fenol 0,5% Manitol 38.7
- 7
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 Alc. Bencílico 0,9% NaCl 6,0
- 8
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa 62,3
- 9
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 Alc. Bencílico 0,9% Manitol 34,1
- 10
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 m-Cresol 0,3% NaCl 7,6
- 11
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 m-Cresol 0,3% Sacarosa 78,0
- 12
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 m-Cresol 0,3% Manitol 42,7
- 13
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 Alc. Bencílico 0,9% NaCl 6,0
- 14
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa 62,3
- 15
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 Alc. Bencílico 0,9% Manitol 34,1
- 16
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 m-Cresol 0,3% NaCl 7,6
- 17
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 m-Cresol 0,3% Sacarosa 78,0
- 18
- 1,11 0,45 600 UI/g - 10 m-Cresol 0,3% Manitol 42,7
- 19
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - Alc. Bencílico 0,9% NaCl 6,0
- 20
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa 62,3
- 21
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - Alc. Bencílico 0,9% Manitol 34,1
- 22
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - m-Cresol 0,3% NaCl 7,6
- 23
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - m-Cresol 0,3% Sacarosa 78.0
- 24
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - m-Cresol 0,3% Manitol 42,7
- 25
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - Alc. Bencílico 0,9% NaCl 6,0
- 26
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa 62,3
- 27
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - Alc. Bencílico 0,9% Manitol 34,1
- 28
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - m-Cresol 0,3% NaCl 7,6
- 29
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - m-Cresol 0,3% Sacarosa 78.0
- 30
- 1,11 0,45 600 UI/g 10 - m-Cresol 0,3% Manitol 42,7
* Se añadió FSH a las formulaciones en función de su potencia biológica en lugar del contenido de proteína.
Del examen visual de las formulaciones se determinó que el TWEEN 20 no se puede usar con m-cresol y fenol porque las formulaciones de FSH que contienen TWEEN 20 y m-cresol o TWEEN 20 y fenol presentaban una suspensión blanca opalescente. Por el contrario, las formulaciones de FSH que contienen Pluronic® F68 no presentaron este problema con m-cresol y fenol. El uso del Pluronic® F68 permite el uso de fenol y m-cresol.
Combinación de FSH y Pluronic® F68 con antioxidantes 5
Se evaluó la capacidad de los siguientes antioxidantes para inhibir la oxidación de la subunidad α en presencia de Pluronic® F68:
- Metionina: intervalo de 10 a 100 µg/g
- Ácido ascórbico: intervalo de 10 a 100 µg/g
Se usaron sacarosa y manitol como agentes de tonicidad y se añadieron TWEEN 20 o Pluronic® a una concentración 10 100 µg/g.
Las formulaciones preparadas se listan en la Tabla 2. ¿???????????’
- Tabla 2: Formulaciones comparativas con y sin metionina
- ID
- Na2HPO4 2H2O (mg/g) NaH2PO4 H2O (mg/g) r-hFSH* Pluronic® F68 (g/g) TWEEN (g/g) Ác. Ascórbico (g/g) Metionina (g/g) Agente Bacteriostático Excipiente
- 31
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - - m-Cresol 0,3% Sacarosa
- 32
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - - m-Cresol 0,3% Manitol
- 33
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 - - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 34
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 - - Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 35
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 36
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - - Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 37
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 10 m-Cresol 0,3% Sacarosa
- 38
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 10 m-Cresol 0,3% Manitol
- 39
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 100 m-Cresol 0,3% Sacarosa
- 40
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 100 m-Cresol 0,3% Manitol
- 41
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 10 - m-Cresol 0,3% Sacarosa
- 42
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 10 - m-Cresol 0,3% Manitol
- 43
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 100 - m-Cresol 0,3% Sacarosa
- 44
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 100 - m-Cresol 0,3% Manitol
- 45
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 - 10 Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 46
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 - 10 Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 47
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 - 100 Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 48
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 - 100 Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 49
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 10 - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 50
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 10 - Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 51
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 100 - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 52
- 1,11 0,45 600 UI/g - 100 100 - Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 53
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 10 Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 54
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 10 Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 55
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 100 Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 56
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 100 Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 57
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 10 - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 58
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 10 - Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 59
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 100 - Alc. Bencílico 0,9% Sacarosa
- 60
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 100 - Alc. Bencílico 0,9% Manitol
- 61
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - - Fenol Sacarosa
- 62
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - - Fenol Manitol
- 63
- 1,11 0,45 600 UI/g Fenol Sacarosa
- 64
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 10 Fenol Manitol
- 65
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 100 Fenol Sacarosa
- 66
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - - 100 Fenol Manitol
- 67
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 10 - Fenol Sacarosa
- 68
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 10 - Fenol Manitol
- 69
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 100 - Fenol Sacarosa
- 70
- 1,11 0,45 600 UI/g 100 - 100 - Fenol Manitol
* Se añadió FSH a las formulaciones en función de su potencia biológica en lugar del contenido de proteína.
Se prepararon 20 g de cada formulación en tubos de polipropileno Falcon y se filtraron a través de una unidad de filtro de jeringa Millex-GV de 0,22 m, 3 cm2, de Durapore, a continuación se analizaron según el siguiente esquema:
- Ensayo analítico
- t = 0 1 semana 2 semanas 3 semanas 4 semanas
- HPLC en fase inversa para la subunidad alfa oxidada (%)
- X X X X X
- HPLC de exclusión de tamaño para la cuantificación de la proteína (g/g)
- X X X X X
- HPLC de exclusión de tamaño cualitativa de las subunidades libres
- X X X X X
(X): Ensayo realizado
La HPLC en fase inversa muestra que en las formulaciones que contienen FSH, Pluronic® F68, m-cresol y metionina (a 5 10 y 100 g/ml), la oxidación de la subunidad de la FSH cuando la formulación se almacena a 40ºC se redujo considerablemente frente a la formulación que no contenía metionina como se puede observar en la Figura 1. En función de la media de dos experimentos, en la formulación que no contiene metionina, el porcentaje de la subunidad oxidada es 2,3 a t = 0, 4,0 a t = 1 semana y 7,1 a t = 2 semanas. En la formulación que contiene 10 g/ml de metionina, el porcentaje de la subunidad oxidada es 2,0 a t = 0, 3,2 a t = 1 semana y 3,8 a t = 2 semanas. En la formulación que 10 contiene 100 g/ml de metionina, el porcentaje de la subunidad oxidada es 1,8 a t = 0, 1,7 a t = 1 semana y 1,3 a t = 2 semanas.
Ejemplo 2
Formulación para dosis única de FSH recombinante para inyección subcutánea o intramuscular.
En función de los resultados del Ejemplo 1, se preparó la siguiente formulación. 15
Los componentes 1 a 7 mostrados en la Tabla 3 se prepararon como disoluciones volumétricas en API. Se añadieron alícuotas de cada disolución a una vasija de mezcla para formar una “disolución madre”. La disolución madre se suministró en frascos de forma que contuvieran 10,9 microgramos (150 UI) o 5,45 microgramos (75 UI) de FSH. Con la FSH recombinante, la bioactividad y la actividad específica son consistentes, permitiendo que la FSH se dosifique por masa en vez de por bioensayo. 20
- Tabla 3: Componentes de las formulaciones de FSH para dosis única
- Componente
- Descripción 150 UI de FSH 75 UI de FSH
- 1
- rhFSH (g/frasco) 10,9 (150 UI) 5,45 (75 UI)
- 2
- Sacarosa (mg/frasco) 15,00 7,50
- 3
- NaH2PO4 H2O (mg/frasco) 0,111 0,0555
- 4
- Na2HPO4 2H2O (mg/frasco) 0,273 0,1365
- 5
- Pluronic® F68 (mg/frasco) 0,025 0,0125
- 6
- Metionina (mg/frasco) 0,025 0,0125
- 7
- m-cresol (mg/frasco) 0,75 0,375
- 8
- pH 7,0 7,0
- 9
- API c.s.p. 1 ml c.s.p. 0,5 ml
Los frascos se rellenaron y se sellaron en condiciones estériles. La formulación tiene una durabilidad de has dos años a temperatura ambiente.
Ejemplo 3
Formulación líquida para múltiples dosis de FSH recombinante para inyección subcutánea o intramuscular 25
En función de los resultados del Ejemplo 1, se preparó la siguiente formulación para dosis múltiples.
Los componentes 1 a 7 mostrados en la Tabla 4 se prepararon como disoluciones volumétricas en API. Se añadieron alícuotas de cada disolución a una vasija de mezcla para formar una “disolución madre”. La disolución madre se suministró en frascos de forma que contuvieran 22,2 microgramos (305 UI) o 33,3 microgramos (458 UI) y 66,7 microgramos (916 UI) de FSH. Las formulaciones resultantes permitían administrar un total de 300, 450 y 900 UI de 30 FSH.
Los cartuchos se llenaron y se sellaron en condiciones estériles. La formulación para dosis múltiples se puede almacenar a o aproximadamente a 2-8ºC, más preferiblemente a o aproximadamente a 4-5ºC, hasta el primer uso durante hasta dos años. Después del primer uso, el cartucho debe almacenarse a o aproximadamente a 2-8ºC, más
preferiblemente a o aproximadamente a 4-5ºC durante el periodo de dosis múltiples, que puede ser de 24 horas, 2 días o hasta 12 ó 14 días.
- Tabla 4: Componentes de las formulaciones de FSH para múltiples dosis
- Comp.
- Descripción 300 UI de FSH 450 UI de FSH 900 UI de FSH
- 1
- rhFSH (g/cartucho) 22,2 (305 UI) 33,3 (458 UI) 66,7 (916 UI)
- 2
- Sacarosa (mg/cartucho) 30,0 45,00 90,0
- 3
- NaH2PO4 H2O (mg/cartucho) 0,225 0,337 0,675
- 4
- Na2HPO4 2H2O (mg/cartucho) 0,555 0,832 1,665
- 5
- Pluronic® F68 (mg/cartucho) 0,050 0,075 0,150
- 6
- Metionina (mg/cartucho) 0,050 0,075 0,150
- 7
- m-cresol (mg/cartucho) 1,50 2,25 4,50
- 8
- pH 7,0 7,0 7,0
- 9
- API c.s.p. 0,5 ml c.s.p. 0,75 ml c.s.p. 1,5 ml
Ejemplo 4
Formulación líquida para dosis única de LH recombinante para inyección subcutánea o intramuscular 5
Se preparó la siguiente formulación.
Los componentes 1 a 7 mostrados en la Tabla 5 se prepararon como disoluciones volumétricas en API. Se añadieron alícuotas de cada disolución a una vasija de mezcla para formar una “disolución madre”. La disolución madre se suministró en frascos de forma que contuvieran 3 microgramos (75 UI) de LH. La formulación resultante suministra una dosis única de 75 UI de LH. 10
Con la LH recombinante, la bioactividad y la actividad específica son consistentes, permitiendo que la LH se dosifique por masa en vez de por bioensayo.
- Tabla 5: Componentes de la formulación de LH para dosis única
- Componente
- Descripción 75 UI de LH
- 1
- rhLH (g/frasco) 3,0
- 2
- Sacarosa (mg/frasco) 52,5
- 3
- NaH2PO4 H2O (mg/frasco) 0,052
- 4
- Na2HPO4 2H2O (mg/frasco) 0,825
- 5
- Pluronic® F68 (mg/frasco) 0,0125
- 6
- Metionina (mg/frasco) 0,125
- 7
- m-cresol (mg/frasco) 0,375
- 9
- API c.s.p. 0,5 ml
Los frascos se rellenaron y se sellaron en condiciones estériles. La formulación tiene una durabilidad de hasta dos años.
Ejemplo 5 15
Formulaciones para múltiples dosis de FSH y LH recombinantes (2:1) para inyección subcutánea o intramuscular.
Se prepararon las siguientes formulaciones para múltiples dosis de FSH y LH con una relación FSH:LH de 2:1.
Los componentes 1 a 8 mostrados en la Tabla 6 se prepararon como disoluciones volumétricas en API. Se añadieron alícuotas de cada disolución a una vasija de mezcla para formar una “disolución madre”. El pH de la disolución madre se 20 ajustó a 8,0, si era necesario, por adición de NaOH o de HCl. La disolución madre se suministró en cartuchos de forma que contuvieran 18,3 microgramos (457 UI) de LH con 66,7 microgramos (916 UI) de FSH, previstos para 6 dosis de 150 UI de FSH cada una; 9,2 microgramos (230 UI) de LH con 33,3 microgramos (458 UI) de FSH, previstos para 3 dosis de 150 UI de FSH cada una de FSH; y 6,1 microgramos (152,5 UI) de LH con 22,23 microgramos (305 UI) de FSH, previstos para 2 dosis de 150 UI de FSH cada una. 25
Los cartuchos se llenaron y se sellaron en condiciones estériles. La formulación para dosis múltiples se puede almacenar a o aproximadamente a 2-8ºC, más preferiblemente a o aproximadamente a 4-5ºC, hasta el primer uso durante hasta dos años. Después del primer uso, el cartucho debe almacenarse a o aproximadamente a 2-8ºC, más preferiblemente a o aproximadamente a 4-5ºC durante el periodo de dosis múltiples, que puede ser de 24 horas, 2 días o hasta 12 ó 14 días. 30
- Tabla 6: Componentes de las formulaciones líquidas de FSH y LH (2:1) para múltiples dosis
- Comp.
- Descripción 6 dosis 3 dosis 2 dosis
- 1
- rhLH (g/cartucho) 18,3 (457 UI) 9,2 (230 UI) 6,1 (152,5 UI)
- 2
- rhFSH (g/cartucho) 66,7 (916 UI) 33,3 (458 UI) 22,23 (305 UI)
- 3
- Sacarosa (mg/cartucho) 115,5 57,75 38.5
- 4
- H3PO4 (mg/cartucho) 1.35 0,735 0,49
- 5
- NaOH (mg/cartucho) c.s.p. pH 8,0 c.s.p. pH 8,0 c.s.p. pH 8,0
- 6
- Pluronic® F68 (mg/cartucho) 375,0 187,5 125,0
- 7
- Metionina (mg/cartucho) 225 112,5 75,0
- 8
- m-cresol (mg/cartucho) 4,5 2,25 1,5
- 9
- pH 8,0 8,0 8,0
- 10
- API c.s.p. 1,5 ml c.s.p. 0,75 ml c.s.p. 0,5 ml
Ejemplo 6
Formulaciones para múltiples dosis de FSH y LH recombinantes (1:1) para inyección subcutánea o intramuscular.
Se prepararon las siguientes formulaciones para múltiples dosis de FSH y LH con una relación FSH:LH de 1:1. 5
Los componentes 1 a 8 mostrados en la Tabla 7 se prepararon como disoluciones volumétricas en API. Se añadieron alícuotas de cada disolución a una vasija de mezcla para formar una “disolución madre”. El pH de la disolución madre se ajustó a 8,0, si era necesario, por adición de NaOH o de HCl. La disolución madre se suministró en cartuchos de forma que contuvieran 36,6 microgramos (914 UI) de LH con 66,7 microgramos (916 UI) de FSH, previstos para 6 dosis de 150 UI de FSH cada una; 18,4 microgramos (460 UI) de LH con 33,3 microgramos (458 UI) de FSH, previstos para 3 10 dosis de 150 UI de FSH cada una; y 12,2 microgramos (305 UI) de LH con 22,23 microgramos (305 UI) de FSH, previstos para 2 dosis de 150 UI de FSH cada una.
Los cartuchos se llenaron y se sellaron en condiciones estériles. La formulación para dosis múltiples se puede almacenar a o aproximadamente a 2-8ºC, más preferiblemente a o aproximadamente a 4-5ºC, hasta el primer uso durante hasta dos años. Después del primer uso, el cartucho debe almacenarse a o aproximadamente a 2-8ºC, más 15 preferiblemente a o aproximadamente a 4-5ºC durante el periodo de dosis múltiples que puede ser de 24 horas, 2 días o hasta 12 ó 14 días.
- Tabla 7: Componentes de las formulaciones líquidas de FSH y LH (1:1) para múltiples dosis
- Comp.
- Descripción 6 dosis 3 dosis 2 dosis
- 1
- rhLH (g/cartucho) 36,6 (914 UI) 18,4 (460 UI) 12,2 (305 UI)
- 2
- rhFSH (g/cartucho) 66,7 (916 UI) 33,3 (458 UI) 22,23 (305 UI)
- 3
- Sacarosa (mg/cartucho) 115,5 57,75 38,5
- 4
- H3PO4 (mg/cartucho) 1.35 0,735 0,49
- 5
- NaOH (mg/cartucho) c.s.p. pH 8,0 c.s.p. pH 8,0 c.s.p. pH 8,0
- 5
- Pluronic® F68 (mg/frasco) 375,0 187,5 125,0
- 6
- Metionina (g/cartucho) 225 112,5 75,0
- 7
- m-cresol (mg/cartucho) 4,5 2,25 1,5
- 8
- pH 8,0 8,0 8,0
- 9
- API c.s.p. 1,5 ml c.s.p. 0,75 ml c.s.p. 0,5 ml
Ejemplo 7
Experimentos de estabilidad para las formulaciones líquidas para múltiples dosis de FSH mezclada con LH. 20
7.1.- Análisis por HPLC en fase inversa del contenido de proteína
Se evaluó el contenido de proteína en la formulación del ejemplo 5 (6 dosis), tanto para la FSH como para la LH, usando el método de HPLC en fase inversa.
El contenido de proteína (FSH y LH) se midió en el tiempo cero y después de 1, 2, 3 y 6 meses de almacenamiento de la formulación a 4ºC. Los resultados se muestran en la tabla 8 en microgramos de FSH o de LH por gramo de 25 disolvente.
7.2.- Ensayo de la subunidad alfa oxidada
Se midió el porcentaje de subunidad alfa oxidada en una formulación del ejemplo 5 mediante un método de HPLC en fase inversa (RP-HPLC).
El porcentaje de subunidad alfa oxidada se midió en el tiempo cero y después de 1, 2, 3 y 6 meses de almacenamiento a 4ºC. Los resultados se muestran en la tabla 8.
7.3.- Ensayo in vivo para la FSH
Se analizó la actividad de la FSH en la formulación del ejemplo 5 (6 dosis) usando el bioensayo de ganancia de peso ovárico de Steelman-Pohley en el tiempo cero y después de 1, 2, 3 y 6 meses de almacenamiento a 4ºC. Los resultados 5 se muestran en la tabla 8 en unidades internacionales (UI) por gramo de disolvente.
7.4.- Ensayo in vivo para la LH
Se analizó la actividad de la LH en la formulación del ejemplo 5 (6 dosis) usando el bioensayo de ganancia de peso de la vesícula seminal en ratas en el tiempo cero y después de 1, 2, 3 y 6 meses de almacenamiento a 4ºC. Los resultados se muestran en la tabla 8 en unidades internacionales (UI) por gramo de disolvente. 10
7.5.- Evaluación de la subunidad libre (rFSH + rLH)
Se evaluó el porcentaje de subunidad libre en una formulación del ejemplo 5 por SDS-PAGE.
Las medidas se realizaron en el tiempo cero y después de 1, 2, 3 y 6 meses de almacenamiento a 4ºC. Los resultados se dan como porcentaje de la proteína total (rFSH + rLH) y se muestran en la tabla 8.
7.5.- Evaluación de agregados 15
Se evaluó el porcentaje de agregados en una formulación del ejemplo 5 por SDS-PAGE como se ha descrito anteriormente para la evaluación de la subunidad libre en 7.5, excepto que los agregados de mayor peso molecular se determinaron como el porcentaje de la proteína total (rFSH + rLH). Las medidas se realizaron en el tiempo cero y después de 1, 2, 3 y 6 meses de almacenamiento a 4ºC. Los resultados se muestran en la tabla 8.
7.6.- Partículas visibles 20
Se evaluaron las partículas visualmente en la formulación del ejemplo 5 en el tiempo cero y después de 3 y 6 meses de almacenamiento a 4ºC. Los resultados se muestran en la tabla 8.
7.7.- pH
El pH de una formulación del ejemplo 5 se midió en el tiempo cero y después de 1, 2, 3 y 6 meses de almacenamiento a 4ºC. Los resultados se muestran en la tabla 8. 25
- Tabla 8. Parámetros analíticos para una formulación líquida de FSH y LH (2:1) en el tiempo cero y después de almacenamiento a 4ºC durante 1, 2, 3 y 6 meses
- Análisis
- Tiempo 0 1 mes 2 meses 3 meses 6 meses
- Contenido de rFSH por RP-HPLC (microgramos/g)
- 46,50 46,98 46,71 46,31 44,98
- Contenido de rLH por RP-HPLC (microgramos/g)
- 11,74 11,81 12,68 12,67 13,21
- % de subunidad alfa oxidada
- 2,29 2,17 2,08 2,48 2,95
- Análisis in vivo para la FSH 553 (UI/g)
- 566 No analizado No analizado No analizado 578 (23 semanas)
- Análisis in vivo para la LH (UI/g)
- 331 No analizado No analizado 311 286
- Subunidad libre por SDS-PAGE (rFSH + rLH; %)
- ≤ 5 No analizado No analizado ≤ 5 ≤ 5 (23 semanas)
- Agregados por SDS-PAGE (rFSH + rLH; %)
- ≤ 2 No analizado No analizado >3 4
- Partículas visibles
- No No analizado No analizado No No
- pH
- 8,262 8,125 8,216 8,188 8,283
Ejemplo 8
Formulación liofilizada de FSH y LH para múltiples dosis
Se prepararon dos formulaciones liofilizadas A y B que tenían las siguientes composiciones:
Formulación A
FSH g 32,75 (450 UI)
LH g 9,0 (225 UI)
Sacarosa mg 15,0
NaH2PO4 H2O mg 0,052 5
Na2HPO4 2H2O mg 0,825
Pluronic® F68 mg 0,05
L-Metionina mg 0,05
Formulación B
FSH g 65,5 (900 UI) 10
LH g 18,0 (450 UI)
Sacarosa mg 30,0
NaH2PO4 H2O mg 0,104
Na2HPO4 2H2O mg 1,65
Pluronic® F68 mg 0,10 15
L-Metionina mg 0,10
El procedimiento de elaboración consistió en mezclar la sustancia fármaco directamente con los ingredientes, filtrar la disolución obtenida y liofilizar el filtrado.
Una descripción de cada etapa del procedimiento se da a continuación:
- Añadir en un contenedor aforado API, hidrógeno-fosfato de disodio dihidratado, dihidrógeno-fosfato de sodio 20 monohidratado, sacarosa, Pluronic® F68 al 5% y L-metionina y agitar durante 10 minutos hasta que la disolución es completa.
- Controlar el pH y opcionalmente corregirlo a pH 7,00 ± 0,2 con NaOH al 10% o H3PO4 diluido.
- Añadir FSH y LH a la mezcla preparada anteriormente y agitar suavemente la disolución obtenida durante 10 minutos. 25
- Controlar de nuevo el pH y opcionalmente ajustarlo a pH 7,0 ± 0,1 con NaOH al 10% o H3PO4 diluido.
- Filtrar la disolución con una membrana Durapore de 0,22 m con una relación de filtración no menor de 15 g/cm2, con una corriente de nitrógeno gaseoso con una presión no superior a 1,5 atm.
- Recoger la disolución en un frasco previamente esterilizado.
- Rellenar el contenedor de vidrio con la disolución filtrada, poner el tapón y colocar los frascos rellenos en una 30 bandeja de aluminio inoxidable.
- Cargar las bandejas en el liofilizador y liofilizar el producto usando el siguiente ciclo de liofilización:
Equilibrar a +4ºC durante aproximadamente 20 minutos.
Llevar los estantes a una temperatura de -25ºC y mantenerla durante 2 horas.
Llevar los estantes a una temperatura de -15ºC y mantenerla durante 1 hora. 35
Llevar los estantes a una temperatura de -45ºC y mantenerla durante 3 horas.
Llevar el condensador a una temperatura de -65ºC.
Aplicar vacío a la cámara.
Cuando el vacío alcance un valor de 7x10-2 mbares, subir la temperatura del estante hasta -10ºC y mantenerla durante 14 horas.
Aumentar la temperatura del estante hasta +35ºC en 8 horas y mantenerla hasta el final del ciclo (14 horas).
Romper el vacío permitiendo la entrada de nitrógeno en la cámara.
Realizar el taponado con el sistema automático del liofilizador. 5
Sellar los frascos tapados con tapones abatibles adecuados.
Las formulaciones A y B se han almacenado a 25 ± 2ºC y se ha evaluado su estabilidad y actividad biológica como se indica a continuación. Antes de analizar las composiciones, se han reconstituido usando agua para inyección que comprendía 0,3% de m-cresol como agente bacteriostático.
Los valores de estabilidad y actividad biológica se determinaron como sigue: 10
- Análisis in vivo para la FSH: se analizó la actividad FSH de la formulación usando el bioensayo de ganancia de peso ovárico de Steelman-Pohley.
- Análisis in vivo para la LH: se analizó la actividad LH de la formulación usando el bioensayo de ganancia de peso de la vesícula seminal en ratas.
- Análisis de la subunidad alfa oxidada: el porcentaje de subunidad alfa oxidada se midió mediante un método de 15 HPLC en fase inversa (RP-HPLC).
- Evaluación de la subunidad libre (rFSH + rLH): el porcentaje de subunidad libre se evaluó por SDS-PAGE.
- Evaluación de agregados: el porcentaje de agregados se evaluó por SDS-PAGE como se ha descrito anteriormente para la evaluación de la subunidad libre.
Los análisis biológicos se han realizado cumpliendo con las regulaciones de la Farmacopea Europea. En particular, los 20 análisis se han publicado en la monografía “Menotropin”.
La tabla 9 resume los resultados de los ensayos analíticos relacionados con la estabilidad y la actividad biológica de la formulación A. Los valores se determinaron en 4 puntos de control: a tiempo cero, después de 1 mes, 3 meses y 6 meses de almacenamiento, a una temperatura de almacenamiento de 25 2ºC.
TABLA 9 25
- Ensayo
- Tiempo cero 1 mes 3 meses 6 meses
- Actividad biológica FSH U.I.
- 416 420 415 417
- Actividad biológica LH U.I.
- 276 250 259 270
- % de producto oxidado
- 1,95 1,81 1,95 1,57
- % de dímeros/agregados
- < 2 < 2 < 2 < 2
- % de subunidades libres
- < 5 < 5 < 5 < 5
La tabla 10 resume los resultados de los ensayos analíticos relacionados con la estabilidad y la actividad biológica de la formulación B. Los valores se determinaron en 4 puntos de control: a tiempo cero, después de 3 meses, 6 meses y 9 meses de almacenamiento, a una temperatura de almacenamiento de 25 2ºC.
TABLA 10 30
- Ensayo
- Tiempo cero 3 meses 3 meses 6 meses
- Actividad biológica FSH U.I.
- 821 850 830 838
- Actividad biológica LH U.I.
- 570 564 580 622
- % de producto oxidado
- 1,0 0,9 1,0 1,0
- % de dímeros/agregados
- < 2 < 2 < 2 < 2
- % de subunidades libres
- < 5 < 5 < 5 < 5
De las tablas 9 y 10 se puede concluir que la actividad biológica de las formulaciones A y B se conserva bien después de 9 meses de almacenamiento. Las formulaciones tienen una estabilidad elevada.
La elevada estabilidad no es afectada por cantidades grandes de FSH recombinante y LH recombinante.
Secuencias:
SEQ. ID. Nº 1: subunidad de glicoproteína humana;
SEQ. ID. Nº 2: subunidad de la hFSH;
SEQ. ID: Nº 3: variante 1 de la subunidad de la hFSH;
SEQ. ID: Nº 4: variante 2 de la subunidad de la hFSH; 5
SEQ. ID: Nº 5: variante 3 de la subunidad de la hFSH;
SEQ. ID: Nº 6: subunidad de la hLH.
Referencias
1 Burgues et al.; Subcutaneous self-administration of highly purified follicle stimulating hormone and human chorionic 10 gonadotrophin for the treatment of male hypogonadotrophic hypogonadism. Spanish Collaborative Group on Male Hypogonadotrophic Hypogonadism; Hum. Reprod.; 1997, 12, 980-6.
2 Shome et al.; J. Clin. Endocrinol. Metab. 39: 187-205 (1974) ; Shome et al., J. Prot. Chem., 7: 325-339, 1988.
3 Keutmann et al., Structure of human luteinizing hormone beta subunit: evidence for related carboxyl-terminal sequence among certain peptide hormones; Biochem. Byophys. Res. Commun.; 1979, 90, 842-848; Talmadge et al.; Evolution of 15 the genes for the beta subunits of human chorionic gonadotropin and luteinizing hormone; Nature; 1984, 307, 37-40; Fiddes & Talmadge; Structure, expression and evolution of the gene for the human glycoprotein hormones; Recent Prog. Horm. Res.; 1984, 40, 43-78.
4 Reichert, L. E., Ramsey, R. B.; Dissociation of human follicle-stimulating hormone; J. Biol. Chem; 1975, 250, 3034-3040. 20
5 Klein et al.; Pharmacokinetics and pharmacodynamics of single-chain recombinant human follicle-stimulating hormone containing the human chorionic gonadotrophin carboxyterminal peptide in the rhesus monkey; Fertility & Sterility; 2002, 77, 1248-1255.
6 a) Fiddes, J. C. et al., J. of Mol. and Applied Genetics, 1: 3-18 (1981); b) Esch F. S. et al.; DNA 5: 363-369 (1986); c) Watkings P. C. et al., DNA 6: 205-212 (1987); d) Hirai, T. et al., J. Mol. Endocrinol. 5: 147-158 (1990) ; e) Maurer, R. A. 25 et al., Mol. Endocrinol. 1: 717-723 (1987); f) Guzman, K. et al., DNA Cell Biol. 10: 593-601 (1991); g) Kumar T. R. et al., Gene, 1995 Diciembre 12; 166 (2): 335-6; h) Kumar, T. R. et al., Gene 1995 Diciembre 12; 166 (2): 333-4.
7 Biochem. Biophys. Res. Commun.; 1979, 90, 842-848.
8 Steelman et al.; Assay of the follicle stimulating hormona based on the augmentation with human chorionic gonadotrophin; Endocrinology, 1953, 53, 604-616. 30
9 Van Hell et al., Effects of human menopausal gonadotrophin preparations in different bioassay methods; Acta Endocrinologica, 1984, 47, 409-418.
10 Van Hell et al.; Effects of human menopausal gonadotrophin preparations in different bioassay methods; Acta Endocrinologica, 1964, 47, 409-418.
LISTADO DE SECUENCIAS
Claims (36)
- REIVINDICACIONES1.- Una composición farmacéutica líquida que comprende la hormona estimulante de folículo (FSH) o uno de sus variantes, así como un tensioactivo que es poloxámero 188 y que además comprende metionina y un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol.
- 2.- Una composición farmacéutica líquida que comprende la hormona estimulante de folículo (FSH) o un variante y la 5 hormona luteinizante (LH) o uno de sus variantes, así como un tensioactivo que es poloxámero 188 y que además comprende metionina y un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol.
- 3.- Una composición farmacéutica líquida que comprende la hormona luteinizante (LH) o uno de sus variantes, así como un tensioactivo que es poloxámero 188 y que además comprende metionina y un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol. 10
- 4.- Una composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la hormona estimulante de folículo (FSH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 150 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 1.200 UI/ml.
- 5.- Una composición farmacéutica líquida según la reivindicación 4, en la que la hormona estimulante de folículo (FSH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 300 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 900 UI/ml. 15
- 6.- Una composición farmacéutica líquida según la reivindicación 5, en la que la hormona estimulante de folículo (FSH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 600 UI/ml.
- 7.- Una composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones 2 ó 3, en la que la hormona luteinizante (LH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 150 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 1.200 UI/ml. 20
- 8.- Una composición farmacéutica líquida según la reivindicación 7, en la que la hormona luteinizante (LH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 300 UI/ml hasta o hasta aproximadamente 750 UI/ml.
- 9.- Un artículo elaborado que comprende una formulación liofilizada que comprende la hormona estimulante de folículo (FSH) o uno de sus variantes, un tensioactivo que es poloxámero 188 así como metionina, comprendiendo además el artículo elaborado un disolvente para reconstitución que contiene un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-25 cresol.
- 10.- Un artículo elaborado que comprende una formulación liofilizada que comprende la hormona luteinizante (LH) o uno de sus variantes, un tensioactivo que es poloxámero 188 así como metionina, comprendiendo además el artículo elaborado un disolvente para reconstitución que contiene un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol.
- 11.- Un artículo elaborado que comprende una formulación liofilizada que comprende la hormona estimulante de folículo 30 (FSH) o uno de sus variantes así como la hormona luteinizante (LH) o uno de sus variantes, un tensioactivo que es poloxámero 188 así como metionina, comprendiendo además el artículo elaborado un disolvente para reconstitución que contiene un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol.
- 12.- El artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, en el que la hormona estimulante del folículo (FSH) está presente en una concentración (peso/peso) de o de aproximadamente 0,1 a 10 g/mg de la formulación 35 total.
- 13.- El artículo elaborado según la reivindicación 12, en el que la hormona estimulante del folículo (FSH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 0,3 a 5 g/mg de la formulación total.
- 14.- El artículo elaborado según la reivindicación 13, en el que la hormona estimulante del folículo (FSH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 0,37 a 2 g/mg de la formulación total. 40
- 15.- El artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, en el que la hormona luteinizante (LH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 0,1 a 3 g/mg de la formulación total.
- 16.- El artículo elaborado según la reivindicación 15, en el que la hormona luteinizante (LH) está presente en una concentración de o de aproximadamente 0,1 a 1 g/mg de la formulación total.
- 17.- El artículo elaborado según la reivindicación 16, en el que la hormona luteinizante (LH) está presente en una 45 concentración de o de aproximadamente 0,1 a 0,6 g/mg de la formulación total.
- 18.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la hormona estimulante del folículo es una hormona estimulante del folículo humana y/o la hormona luteinizante (LH) es una hormona luteinizante (LH) humana.
- 19.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según la reivindicación 18, en la que la hormona estimulante del folículo es una hormona estimulante del folículo humana urinaria y/o la hormona luteinizante (LH) es una hormona luteinizante (LH) humana urinaria.
- 20.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según la reivindicación 18, en la que la hormona estimulante del folículo es una hormona estimulante del folículo humana recombinante y/o la hormona luteinizante (LH) es una hormona 5 luteinizante (LH) humana recombinante.
- 21.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la relación entre la FSH y la LH está en el intervalo de o de aproximadamente 6:1 hasta o hasta aproximadamente 1:6.
- 22.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según la reivindicación 21, en la que la relación entre la FSH y la LH está en el intervalo de o de aproximadamente 4:1 hasta o hasta aproximadamente 1:2. 10
- 23.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según la reivindicación 22, en la que la relación entre la FSH y la LH está en el intervalo de o de aproximadamente 3:1 hasta o hasta aproximadamente 1:1.
- 24.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según la reivindicación 23, en la que la relación entre la FSH y la LH está en el intervalo de o de aproximadamente 2:1 y 1:1.
- 25.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que 15 el agente bacteriostático es m-cresol.
- 26.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según la reivindicación 25, que comprende m-cresol a una concentración de o de aproximadamente 0,3% (masa/masa de disolvente).
- 27.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende además sacarosa. 20
- 28.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones precedentes que comprende además un tampón de fosfato a un pH de o de aproximadamente 6,0 hasta o hasta aproximadamente 8,0.
- 29.- Una composición farmacéutica o artículo manufactura según la reivindicación 28, que comprende además un tampón de fosfato a un pH de o de aproximadamente 7,0.
- 30.- Una composición farmacéutica o artículo manufactura según la reivindicación 29, que comprende los siguientes 25 ingredientes: rFSH, poloxámero 188, sacarosa, metionina, m-cresol y una disolución acuosa tampón de fosfato de pH a o a aproximadamente 7,0.
- 31.- Una composición farmacéutica o artículo elaborado según la reivindicación 30, en la que la rFSH está presente a una concentración de o de aproximadamente 600 UI/ml, el poloxámero 188 está presente a una concentración de o de aproximadamente 0,1 mg/ml, la sacarosa está presente a una concentración de o de aproximadamente 60 mg/ml, la 30 metionina está presente a una concentración de o de aproximadamente 0,1 mg/ml, el m-cresol está presente a una concentración de o de aproximadamente 3 mg/ml y el tampón de fosfato es de o de aproximadamente 10mM en fosfato.
- 32.- Un artículo elaborado según la reivindicación 11, que comprende 32,75 g de FSH recombinante, 9,0 g de LH recombinante, 15,0 mg de sacarosa, 0,052 mg de NaH2PO4 H2O, 0,825 mg de Na2HPO4 2H2O, 0,05 mg de poloxámero 188 y 0,05 mg de L-metionina. 35
- 33.- Un artículo elaborado según la reivindicación 11, que comprende 65,5 g de FSH recombinante, 18,0 g de LH recombinante, 30,0 mg de sacarosa, 0,104 mg de NaH2PO4 H2O, 1,65 mg de Na2HPO4 2H2O, 0,10 mg de poloxámero 188 y 0,10 mg de L-metionina.
- 34.- Un método para elaborar una composición farmacéutica que comprende la etapa de formar una disolución de FSH, un tensioactivo que es poloxámero 188 y un diluyente líquido y añadir además metionina y un agente bacteriostático 40 elegido entre fenol y m-cresol.
- 35.- Un método para elaborar una composición farmacéutica envasada que comprende colocar una disolución que comprende FSH, un tensioactivo que es poloxámero 188 y colocar además metionina y un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol, en un frasco, ampolla o cartucho.
- 36.- Un método para elaborar un artículo elaborado según cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, que comprende la 45 etapa de formar una mezcla de FSH con o sin LH, o LH sola, así como un tensioactivo que es poloxámero 188, añadir metionina y someter la mezcla a liofilización, y proporcionar un disolvente para reconstitución que contiene un agente bacteriostático elegido entre fenol y m-cresol.
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP03100882 | 2003-04-02 | ||
| EP03100882 | 2003-04-02 | ||
| EP03101543 | 2003-05-27 | ||
| EP03101543 | 2003-05-27 | ||
| EP03101828 | 2003-06-20 | ||
| EP03101828 | 2003-06-20 | ||
| PCT/EP2004/050432 WO2004087213A1 (en) | 2003-04-02 | 2004-04-02 | Liquid pharmaceutical formulations of fsh and lh together with a non-ionic surfactant |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2358330T3 true ES2358330T3 (es) | 2011-05-09 |
| ES2358330T5 ES2358330T5 (es) | 2018-12-03 |
Family
ID=36806115
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES04725385.1T Expired - Lifetime ES2358330T5 (es) | 2003-04-02 | 2004-04-02 | Formulaciones farmacéuticas líquidas de FSH y LH junto con un tensioactivo no iónico |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN100488566C (es) |
| ES (1) | ES2358330T5 (es) |
| UA (1) | UA91960C2 (es) |
| ZA (1) | ZA200507287B (es) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102309745B (zh) * | 2008-09-17 | 2013-05-08 | 上海天伟生物制药有限公司 | 一种卵泡刺激素冻干针剂 |
| CN101347613B (zh) * | 2008-09-17 | 2011-10-26 | 上海天伟生物制药有限公司 | 几乎不含亚基的糖蛋白的组合物及其制备方法 |
| KR101668502B1 (ko) * | 2008-11-04 | 2016-10-21 | 아스카 세이야쿠 가부시키가이샤 | 난포자극호르몬 함유 수성 조성물 |
| CN102293756A (zh) * | 2011-08-24 | 2011-12-28 | 蚌埠丰原涂山制药有限公司 | 一种尿促性素冻干粉针剂及其制备方法 |
| CN104856951A (zh) * | 2015-05-06 | 2015-08-26 | 华侨大学 | 一种卵泡刺激素透皮纳米乳剂及其制备方法 |
| CN116549403A (zh) * | 2019-11-28 | 2023-08-08 | 成都景泽生物制药有限公司 | 卵泡刺激素冻干制剂及其制备方法和用途 |
| CN115429751B (zh) * | 2022-09-21 | 2023-11-17 | 景泽生物医药(合肥)股份有限公司 | 一种人重组卵泡刺激素注射剂及其制备方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1250075B (it) * | 1991-12-18 | 1995-03-30 | Serono Cesare Ist Ricerca | Composizioni farmaceutiche contenenti gonadotropine. |
| IL122732A0 (en) * | 1997-01-15 | 1998-08-16 | Akzo Nobel Nv | Liquid gonadotropin-containing formulation its preparation and a device containing same |
| IL140984A0 (en) * | 1998-07-23 | 2002-02-10 | Lilly Co Eli | Fsh and fsh variant formulations, products and methods |
-
2004
- 2004-04-02 ES ES04725385.1T patent/ES2358330T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-02 UA UAA200509209A patent/UA91960C2/ru unknown
- 2004-04-02 CN CNB2004800145043A patent/CN100488566C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2004-04-02 ZA ZA200507287A patent/ZA200507287B/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN100488566C (zh) | 2009-05-20 |
| ES2358330T5 (es) | 2018-12-03 |
| ZA200507287B (en) | 2007-03-28 |
| CN1795012A (zh) | 2006-06-28 |
| UA91960C2 (ru) | 2010-09-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2249869B1 (en) | Liquid formulation of fsh | |
| US7741268B2 (en) | Liquid pharmaceutical formulations of FSH and LH together with a non-ionic surfactant | |
| ES2358330T3 (es) | Formulaciones farmacéuticas de fsh y/o lh líquidas o liofilizadas junto con el tensioactivo no iónico poloxámero 188 y un agente bacteriostático. | |
| ES2414705T3 (es) | Formulaciones liofilizadas de FSH/LH | |
| HK1086503B (en) | Liquid pharmaceutical formulations of fsh and lh together with a non-ionic surfactant | |
| HK1149494B (en) | Liquid formulation of fsh |