ES2359673T3 - Compuestos de benzoimidazolona-carboxamida como agonista del receptor 5-ht4. - Google Patents
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Abstract
Compuesto de la fórmula (I): **(Ver fórmula)** donde:R1 es hidrógeno o alquilo C1-3; R2 es hidrógeno o alquilo C1-3; R3 es alquilo C1-3; R4 es -C(O)R5, -S(O)2R6, **(Ver fórmula)** o R3 y R4 junto con el átomo de nitrógeno al que se unen forman **(Ver fórmula)** R5 es hidrógeno, alquilo C1-3, -NH2, o piridinilo, donde el alquilo C1-3 es opcionalmente sustituido con hidroxi; R6 es alquilo C1-3, -NH2, o imidazolilo, donde el imidazolilo es opcionalmente sustituido con alquilo C1-3; R7 es -NR9S(O)2alquilo C1-3, -NR10C(O)R11, o **(Ver fórmula)** R8 es -S(O)2alquilo C1-3 o C(O)R12; R9, R10 y R11 son cada uno independientemente alquilo C1-3 y R12 es hidrógeno, alquilo C1-3 o tetrahidrofuranilo, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o estereoisómero del mismo.
Description
Compuestos de
benzoimidazolona-carboxamida como agonista del
receptor 5-HT_{4}.
La invención se dirige a compuestos de
benzoimidazolona-carboxamida que sirven como
agonistas del receptor 5-HT_{4}. La invención
también se dirige a composiciones farmacéuticas comprendiendo tales
compuestos y encuentra utilidad en métodos para utilizar tales
compuestos para tratar o prevenir condiciones médicas mediadas por
la actividad del receptor 5-HT_{4}. También se
proporcionan los procesos e intermediarios útiles para preparar
tales compuestos.
La serotonina
(5-hidroxitriptamina, 5-HT) es un
neurotransmisor ampliamente distribuido por todo el cuerpo, tanto en
el sistema nervioso central como en los sistemas periféricos. Al
menos siete subtipos de receptores de serotonina han sido
identificados y la interacción de la serotonina con estos receptores
diferentes está vinculada a una amplia variedad de funciones
fisiológicas. Existe, por lo tanto, un interés sustancial en el
desarrollo de agentes terapéuticos que se dirijan a los subtipos
específicos de los receptores 5-HT.
En particular la caracterización de los
receptores 5-HT_{4} y la identificación de los
agentes farmacéuticos que interactúan con ellos ha sido el foco de
importantes actividades recientes. (Véase, por ejemplo, la revisión
realizada por Langlois y Fischmeister, J. Med. Chem. 2003, 46,
319-344). Los agonistas del receptor
5-HT_{4} son útiles para el tratamiento de los
trastornos de la motilidad reducida del tracto gastrointestinal.
Estos trastornos incluyen el síndrome de intestino irritable (SII),
el estreñimiento crónico, la dispepsia funcional, el retraso en el
vaciamiento gástrico, la enfermedad por reflujo gastroesofágico
(ERGE), la gastroparesia, el íleo postoperatorio, la
pseudoobstrucción intestinal y el tránsito retardado inducido por
medicamentos. Además, se ha sugerido que algunos compuestos
agonistas del receptor 5-HT_{4} pueden utilizarse
en el tratamiento de desórdenes del sistema nervioso, incluyendo los
trastornos cognitivos, trastornos de conducta, trastornos del estado
de ánimo y los trastornos del control de la función autonómica.
A pesar de la amplia utilidad de los agentes
farmacéuticos que modulan la actividad del receptor
5-HT_{4}, en la actualidad se utilizan pocos
compuestos de agonistas del receptor 5-HT_{4}. La
patente EP 908 459 A describe una serie de indazol- y
2-oxobenzamidazol-3-carboxamidas
que son antagonistas del receptor 5-HT_{4} de la
serotonina.
Por consiguiente, hay una demanda de nuevos
agonistas del receptor 5-HT_{4} que logren los
efectos deseados con efectos secundarios mínimos. Los agentes
preferidos pueden poseer, entre otras propiedades, una selectividad,
potencia, propiedades farmacocinéticas y/o duración de la acción
mejoradas.
La invención provee nuevos compuestos que poseen
actividad agonista del receptor 5-HT_{4}. Se ha
descubierto que, entre otras propiedades, los compuestos de la
invención son agonistas del receptor 5-HT_{4}
potentes y selectivos. Además, se ha descubierto que los compuestos
de la invención presentan propiedades farmacocinéticas favorables
que son predictivas de una buena biodisponibilidad en la
administración oral.
Por consiguiente, la invención proporciona un
compuesto de la fórmula (I):
donde:
- R^{1} es hidrógeno o alquilo C_{1-3};
- R^{2} es hidrógeno o alquilo C_{1-3};
- R^{3} es alquilo C_{1-3};
- R^{4} es -C(O)R^{5}, -S(O)2R^{6},
- o R^{3} y R^{4} junto con el átomo de nitrógeno al que se unen forman
- R^{5} es hidrógeno, alquilo C_{1-3}, -NH_{2}, o piridinilo, donde el alquilo C_{1-3} es opcionalmente sustituido con hidroxi;
- R^{6} es alquilo C_{1-3}, -NH_{2}, o imidazolilo, donde el imidazolilo es opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-3};
- R^{7} es -NR^{9}S(O)_{2}3alquilo C_{1-3}, -NR^{10}C(O)R^{11}, o
- R^{8} es -S(O)_{2}alquiloC_{1-3} o -C(O)R^{12};
- R^{9}, R^{10} y R^{11} son cada uno independientemente alquilo C_{1-3} y
- R^{12} es hidrógeno, alquilo C_{1-3} o tetrahidrofuranilo, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o estereoisómero de los mismos.
\vskip1.000000\baselineskip
La invención también proporciona una composición
farmacéutica que comprende un compuesto de la invención y un soporte
farmacéuticamente aceptable.
La invención encuentra utilidad en un método
para tratar una enfermedad o condición asociada con la actividad del
receptor 5-HT_{4}, por ejemplo, un trastorno de la
motilidad reducida del tracto gastrointestinal, el método
comprendiendo administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente
eficaz de un compuesto de la invención.
Además, la invención encuentra utilidad en un
método para tratar una enfermedad o condición asociada con la
actividad del receptor 5-HT_{4} en un mamífero, el
método comprendiendo administrar al mamífero una cantidad
terapéuticamente eficaz de una composición farmacéutica que
comprende un compuesto de la invención y un soporte
farmacéuticamente aceptable.
Los compuestos de la invención también pueden
utilizarse como herramientas de investigación, es decir, para
estudiar sistemas biológicos o muestras, o para el estudio de la
actividad de otros compuestos químicos. En consecuencia, en otro de
los aspectos de su método, la invención proporciona un método para
usar un compuesto de la fórmula (I), o una sal farmacéuticamente
aceptable o solvato o estereoisómero del mismo, como herramienta de
investigación para el estudio de un sistema biológico o muestra
in vitro o para descubrir nuevos agonistas del receptor
5-HT_{4}, el método comprendiendo poner en
contacto un sistema biológico o muestra in vitro con un
compuesto de la invención y la determinación de los efectos causados
por el compuesto en el sistema biológico o muestra.
En aspectos separados y distintos, la invención
también proporciona procesos de síntesis y productos intermedios
descritos en la presente memoria, que son útiles para preparar los
compuestos de la invención.
La invención también proporciona un compuesto de
la invención tal como se describe en la presente memoria para su uso
en terapia médica, así como el uso de un compuesto de la invención
en la elaboración de una fórmula o medicamento para tratar una
enfermedad o condición asociada con la actividad del receptor
5-HT_{4}, por ejemplo, un trastorno de la
motilidad reducida del tracto gastrointestinal, en un mamífero.
La figura muestra un polvo de difracción de
rayos X (PXRD) patrón de una sal de hidrocloruro cristalina de
{(1S,3R,SR)-8-[(R)-3-(acetilinetilamino)-2-hidroxipropil-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
de la invención.
La invención proporciona nuevos agonistas del
receptor 5-HT_{4} de
benzoimidazolona-carboxamida de la fórmula (I), o
sales farmacéuticamente aceptables o solvatos o estereoisómeros de
la misma. Los sustituyentes y valores siguientes están destinados a
proporcionar ejemplos representativos de los diversos aspectos de
esta invención. Estos valores representativos pretenden definir
mejor tales aspectos y no pretenden excluir otros valores o limitar
el alcance de la invención.
En los aspectos específicos de la invención,
R^{1} es etilo, propilo o isopropilo, o R^{1} es etilo o
isopropilo.
En otro aspecto específico, R^{1} es
isopropilo.
En un aspecto específico, R^{2} es hidrógeno,
metilo o etilo.
En otro aspecto específico, R^{2} es
hidrógeno.
En un aspecto específico, R^{1} es etilo o
isopropilo y R^{2} es hidrógeno.
En unos aspectos específicos, R^{3} es metilo
o etilo, o R^{3} es metilo.
En un aspecto específico, R^{4} es
-C(O)R^{5}.
En otro aspecto específico, R^{4} es
-S(O)2R^{6}.
En otro aspecto específico, R^{4} es
En otro aspecto específico, R^{4} es
En otro aspecto específico, R^{4} es
-C(O)H,-C(O)CH_{3},
-C(O)NH_{2}, -S(O)2CH_{3},
-S(O)_{2}-1-metilimidazol-4-il,
o
En un aspecto específico R^{3} y R^{4} junto
con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman
En otro aspecto específico R^{3} y R^{4}
junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos forman
En un aspecto específico, R^{5} es hidrógeno,
alquilo C_{1-3}, -NH_{2} o piridinilo. En unos
aspectos específicos, R^{5} es hidrógeno o alquilo
C_{1-3}, o R^{5} es hidrógeno o metilo.
En un aspecto específico, R^{6} es alquilo
C_{1-3} o imidazolilo, donde el imidazolilo es
sustituido con alquilo C_{1-3}. En otro aspecto
específico, R^{6} es metilo o
1-metilimidazol-4-ilo.
En otro aspecto específico más, R^{6} es
1-metilimidazol-4-ilo.
En unos aspectos específicos, R^{7} es
-NR^{9}S(O)_{2}CH_{3} o
-NR^{10}C(O)CH_{3}, o R^{7} es
-NR^{10}C(O)CH_{3}.
En un aspecto específico, R^{8} es
-S(O)_{2}alquilo C_{1-3}, tal como
-S(O)_{2}CH_{3}.
En otro aspecto específico, R^{8} es
-C(O)R^{12}, tal como R^{8} es
-C(O)H, -C(O)CH_{3} o
-C(O)-tetrahidrofuran-2-ilo.
En un aspecto específico, R^{8} es
-S(O)_{2}CH_{3}, -C(O)CH_{3}, o
-C(O)-tetrahidrofuran-2-ilo.
En unos aspectos específicos, R^{9} es metilo
o etilo, o R^{9} es metilo.
En unos aspectos específicos, R^{10} es metilo
o etilo, o R^{10} es metilo.
En unos aspectos específicos, R^{11} es metilo
o etilo, o R^{11} es metilo.
En un aspecto específico, R^{12} es metilo o
tetrahidrofuranilo.
En otro aspecto más, la invención proporciona un
compuesto de la fórmula (I) donde:
- R^{1} es etilo o isopropilo;
- R^{2} es hidrógeno;
- R^{3} es metilo;
- R^{4} es -C(O)H, -C(O)CH_{3}, -C(O)NH_{2}, -S(O)_{2}CH_{3}, -S(O)_{2}-1-metilimidazol-4-ilo, o
- o R^{3} y R^{4} junto con el átomo de nitrógeno al cual están unidos, forman
- y
- R^{8} es -S(O)_{2}CH_{3}, -C(O)CH_{3} o -C(O)-tetrahidrofurano-2-ilo.
\vskip1.000000\baselineskip
Las nomenclaturas químicas utilizadas en la
presente memoria se ilustran para el compuesto del Ejemplo 1:
que es designado
{(1S,3R,5R)-8-[2-hidroxi-3-(4-metanosulfonilpiperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico, según el software de AutoNom, suministrado por MDL Information Systems, GmbH (Frankfurt am Main, Alemania). La designación (1S,3R,5R) describe la orientación relativa de los enlaces relacionados con el sistema de anillos bicíclicos que se representan como cuñas continuas y discontinuas. El compuesto es alternativamente denominado ácido N-[(3-endo)-8-[2-hidroxi-3-(4-metanosulfonil-piperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il]-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzo-imidazol-1-carboxílico. En todos los compuestos de la invención representados en la presente memoria, a menos que se especifique lo contrario, la benzoimidazolona-carboxamida es endo al grupo azabiciclooctano.
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico, según el software de AutoNom, suministrado por MDL Information Systems, GmbH (Frankfurt am Main, Alemania). La designación (1S,3R,5R) describe la orientación relativa de los enlaces relacionados con el sistema de anillos bicíclicos que se representan como cuñas continuas y discontinuas. El compuesto es alternativamente denominado ácido N-[(3-endo)-8-[2-hidroxi-3-(4-metanosulfonil-piperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il]-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzo-imidazol-1-carboxílico. En todos los compuestos de la invención representados en la presente memoria, a menos que se especifique lo contrario, la benzoimidazolona-carboxamida es endo al grupo azabiciclooctano.
\vskip1.000000\baselineskip
Se debe mencionar en particular los siguientes
compuestos:
{(1S,3R,5R)-8-[2-hidroxi-3-(4-metanosulfonilpiperazin-1-il)1-propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{2-hidroxi-3-[4-(tetrahidrofuran-2-carbonil)piperazin-1-il]propil}-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-[3-(4-acetilpiperazin-1-il)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{3-[(1,1-dioxotetrahidro-1.6-tiofen-3-il)metilamino]-2-hidroxipropil}-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(S)-2-hidroxi-3-(4-metanosulfonilpiperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-2-hidroxi-3-(4-metanosulfonilpiperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(S)-3-(4-acetilpiperazin-1-il)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-3-(4-acetilpiperazin-1-il)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-((S)-2-hidroxi-3-[4((R)-tetrahidrofuran-2-carbonil)piperazin-1-il]propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{(S)-2-hidroxi-3-[4((S)-tetrahidrofuran-2-carbonil)piperazin-1-il]propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-3-(acetilmetilamino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-((R)-2-hidroxi-3-[metil-(1-metil-1H-imidazol-4-sulfonil)amino]propil}-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-
il}amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
il}amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-2-hidroxi-3-(1-metilureido)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{2-hidroxi-3-[metil-(1-metil-1H-imidazol-4-sulfonil)amino]propil}-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[2-hidroxi-3-(1-metilureido)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
y
{(1S,3R,5R)-8-[3-(formilmetilamino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo-[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico.
\vskip1.000000\baselineskip
Otras realizaciones de la invención incluyen
compuestos de la fórmula (I) ejemplificados en la presente memoria,
tal como un compuesto de la fórmula (I), donde el compuesto es
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-3-(acetilmetilamino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico.
Como ilustran los compuestos particulares que
aparecen arriba, los compuestos de la invención puede contener uno o
más centros quirales. Por ejemplo, el átomo de carbono en la fórmula
(I) que lleva el sustituyente -OR^{2} es opcionalmente un centro
quiral. En consecuencia, la invención incluye mezclas racémicas,
estereoisómeros puros y mezclas enriquecidas con estereoisómero de
tales isómeros, a menos que se indique lo contrario. Cuando se
muestra un estereoisómero particular, los expertos en la materia
entenderán que pequeñas cantidades de otros estereoisómeros pueden
estar presentes en las composiciones de la invención, a menos que se
indique lo contrario, siempre que la utilidad de la composición en
su conjunto no sea eliminada por la presencia de estos otros
isómeros.
En la descripción de los compuestos,
composiciones y métodos de la invención, los siguientes términos
tienen los siguientes significados, a menos que se indique lo
contrario.
El término "alquilo" significa un grupo
hidrocarbono saturado monovalente que puede ser lineal o ramificado
o combinaciones de los mismos. Los grupos alquilo representativos
incluyen, a título de ejemplo, metilo, etilo,
n-propilo (n-Pr), isopropilo
(i-Pr), n-butilo
(n-Bu), sec-butilo, isobutilo,
terc-butilo, y similares.
El término "halo" significa flúor, cloro,
bromo o yodo.
El término "compuesto" significa un
compuesto que se preparó de forma sintética o se produjo de otra
manera, como por metabolismo.
El término "compuesto de la invención" o
"compuesto de la fórmula I" o "compuesto de la fórmula
I-a" como se usa aquí incluye las sales
farmacéuticamente aceptables o solvatos o estereoisómeros de tales
compuestos, a menos que se indique lo contrario.
El término "cantidad terapéuticamente
efectiva" significa una cantidad suficiente para efectuar el
tratamiento cuando se administra a un paciente con necesidad de
tratamiento.
El término "tratamiento" como se usa en la
presente memoria, significa el tratamiento de una enfermedad,
trastorno o condición médica de un paciente, como un mamífero
(particularmente un humano) que incluye:
- (a)
- evitar que se produzca la enfermedad, trastorno o estado médico, es decir, el tratamiento profiláctico de un paciente;
- (b)
- mejorar la enfermedad, trastorno o condición médica, es decir, eliminar o causar la regresión de la enfermedad, trastorno o condición médica en un paciente;
- (c)
- suprimir la enfermedad, trastorno o condición médica, es decir, retardar o detener el desarrollo de la enfermedad, trastorno o condición médica de un paciente; o
- (d)
- aliviar los síntomas de la enfermedad, el trastorno o la condición médica de un paciente.
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El término "sal farmacéuticamente
aceptable" significa una sal preparada a partir de un ácido o
base que sea aceptable para la administración a un paciente, como un
mamífero. Estas sales se pueden derivar de ácidos inorgánicos u
orgánicos farmacéuticamente aceptables y de bases farmacéuticamente
aceptables. Por lo general, las sales farmacéuticamente aceptables
de los compuestos de la presente invención son preparadas a partir
de ácidos.
Las sales derivadas de ácidos farmacéuticamente
aceptables incluyen, aunque no exclusivamente, ácido acético,
adípico, bencenosulfónico, benzoico, canforsulfónico, cítrico,
etanosulfónico, fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico,
clorhídrico, láctico, maléico, málico, mandélico, metanosulfónico,
múcico, nítrico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico,
tartárico, p-toluenosulfónico, xinafoico (ácido
1-hidroxi-2-naftoico),
naftaleno-1,5-disulfónico y
similares.
El término "sal del mismo" significa un
compuesto formado cuando el hidrógeno de un ácido es reemplazado por
un catión, tal como un catión metálico o un catión orgánico y
similares. En la presente invención, el catión comprende típicamente
una forma protonada de un compuesto de fórmula I, es decir, cuando
uno o más grupos amino han sido protonados por un ácido.
Preferiblemente, la sal es una sal farmacéuticamente aceptable,
aunque esto no es necesario para las sales de compuestos intermedios
que no están destinadas a la administración a un paciente.
El término "solvato" significa un complejo
o agregado formado por una o más moléculas de un soluto, es decir,
un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable
del mismo y una o más moléculas de un solvente. Tales solvatos
suelen ser sólidos cristalinos teniendo una relación molar
sustancialmente fija de soluto y solvente. Los solventes
representativos incluyen, a título de ejemplo, agua, metanol,
etanol, isopropanol, ácido acético y similares. Cuando el solvente
es agua, el solvato formado es un hidrato.
Se entenderá que la expresión "o una sal
farmacéuticamente aceptable o solvato o estereoisómero del mismo"
pretende incluir todas las permutaciones de las sales, solvatos y
estereoisómeros, tal como un solvato de una sal farmacéuticamente de
un estereoisómero de un compuesto de la fórmula (I).
El término "grupo saliente" significa un
grupo funcional o átomo que puede ser desplazado por otro grupo
funcional o átomo en una reacción de sustitución tal como una
reacción de sustitución nucleofílica. A modo de ejemplo, los grupos
salientes representativos incluyen grupos de cloro, bromo y yodo,
grupos de éster sulfónico, tales como mesilato, tosilato, brosilato,
nosilato y similares y grupos aciloxi, tales como acetoxi,
trifluoroacetoxi y similares.
El término "derivado protegido del mismo"
significa un derivado de un compuesto específico en el que uno o más
grupos funcionales del compuesto están protegidos de reacciones no
deseadas con un grupo protector o bloqueador. Los grupos funcionales
que pueden ser protegidos incluyen, a título de ejemplo, grupos de
ácido carboxílico, grupos amino, grupos hidróxilo, grupos tiol,
grupos carbonilo y similares. Los grupos protectores representativos
para ácidos carboxílicos incluyen ésteres (tales como un éster
p-metoxibencílico), amidas e hidracidas; para grupos
amino, carbamatos (tales como terc-butoxicarbonilo)
y amidas; para grupos hidróxilos, éteres y ésteres; para grupos
tioles, tioéteres y tioésteres; para grupos carbonilo, acetales y
cetales; y similares. Tales grupos protectores son bien conocidos
por los expertos en la materia y se describen, por ejemplo, en T.W.
Greene y GM Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, tercera
edición, Wiley, Nueva York, 1999, y referencias allí citadas.
El término "grupo protector de amino"
significa un grupo protector adecuado para prevenir reacciones no
deseadas en un nitrógeno amino. Los grupos protectores de amino
representativos incluyen, aunque no exclusivamente, formilo, grupos
acilo, por ejemplo grupos alcanoilo, como acetilo, grupos
alcoxicarbonilo, como terc-butoxicarbonilo (Boc),
grupos arilmetoxicarbonilo, como benciloxicarbonilo (Cbz) y
9-fluoronilmetoxicarbonilo (Fmoc); grupos
arilmetilo, tal como bencilo (Bn), tritilo (Tr) y
1,1-di-(4'-metoxifenil)metilo,
grupos sililo, como trimetilsililo (TMS) y tertbutildimetilsililo
(TBDMS), y similares.
Los compuestos de la invención pueden ser
preparados a partir de materias primas disponibles utilizando los
siguientes métodos y procedimientos generales. Aunque en los
esquemas que siguen se ilustra un aspecto particular de la presente
invención, los expertos en la técnica reconocerán que todos los
aspectos de la presente invención pueden prepararse utilizando los
métodos que se describen aquí o utilizando otros métodos, reactivos
y materiales iniciales conocidos por los expertos en la materia.
También se apreciará que cuando se den condiciones típicas o
preferidas del proceso (es decir, temperaturas de reacción, tiempos,
relaciones molares de reactivos, solventes, presiones, etc.) también
se pueden utilizar otras condiciones de proceso a no ser que se
indique otra cosa. Las condiciones óptimas de reacción pueden variar
dependiendo de los reactivos particulares o solventes utilizados,
pero tales condiciones pueden ser determinadas por un experto en la
técnica mediante procedimientos de optimización rutinarios.
Además, como resultará obvio para los expertos
en la técnica, puede que se necesiten grupos protectores
convencionales para evitar que algunos grupos funcionales
experimenten reacciones no deseadas. La elección de un grupo
adecuado para la protección de un grupo funcional particular, así
como las condiciones adecuadas para la protección y desprotección,
son muy conocidas en la técnica. Por ejemplo, se describen numerosos
grupos protectores y su introducción y eliminación en T. W. Greene y
G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, tercera edición,
Wiley, Nueva York, 1999, y las referencias citadas en el mismo.
Los sustituyentes y las variables que se
muestran en los esquemas siguientes tienen las definiciones
proporcionadas en la presente memoria a menos que se indique lo
contrario.
En un método de síntesis, los compuestos de la
fórmula (I) se pueden preparar como se ilustra en el Esquema A.
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Esquema
A
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Se hace reaccionar un intermediario de acetidina
(III) con el intermediario IV), una amina secundaria o un derivado
de una amina primaria, para proporcionar un compuesto de la fórmula
(I). En el Esquema A, L' representa un contraión, tal como haluro,
por ejemplo, Cl-, Br-, o trifluoroacetato. Normalmente, el
intermediario de acetidina (III) se disuelve en un diluyente inerte,
tal como etanol, y se pone en contacto con entre aproximadamente 1 y
aproximadamente 8 equivalentes de la amina secundaria (IV), en
presencia de una base, tal como
N,N-diisopropiletilamina. Esta reacción se suele
realizar a una temperatura de aproximadamente 0ºC a 100ºC durante
entre cerca de 2 y 24 horas o hasta que la reacción está
sustancialmente completada.
El producto de la fórmula (I) es aislado y
purificado por métodos convencionales. Por ejemplo, el producto se
puede concentrar hasta secarse bajo presión reducida, recoger en una
solución acuosa de ácido débil y purificar por cromatografía
HPLC.
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En otro método de síntesis, los compuestos de la
fórmula (I) se pueden preparar como se ilustra en el Esquema B.
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Esquema
B
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En el esquema B, se hace reaccionar un
intermediario de acetidina diferente (V) con un intermediario de
benzoimidazolona-carboxamida tropano (VI) para
proporcionar un compuesto de la fórmula (I). En el esquema B, L' es
un contraión, tal como haluro, por ejemplo, Cl-, Br-, o
trifluoroacetato. En este proceso, el intermediario (V) se disuelve
en un diluyente inerte, tal como etanol, y se pone en contacto con
entre aproximadamente 1 y aproximadamente 8 equivalentes del
benzoimidazolona-carboxamida tropano (VI). Esta
reacción se suele realizar a una temperatura de aproximadamente 0ºC
a 100ºC durante entre cerca de 2 y 24 horas o hasta que la reacción
está sustancialmente completada.
Se entenderá que en el proceso del Esquema B y
en otros procesos descritos en esta memoria utilizando el
intermediario (VI), el intermediario (VI) puede ser suministrado en
forma de base libre o en forma de sal, con un ajuste apropiado de la
condiciones de reacción, según sea necesario, como conocen los
expertos en la materia.
Los esquemas C y D a continuación son útiles
para la preparación de compuestos de la fórmula (I) en el que la
estereoquímica en el centro marcado por el asterisco es
específicamente (R) o (S), así como para la preparación de
compuestos no quirales de la fórmula (I).
En otro método alternativo de síntesis, los
compuestos de la fórmula (I-a), donde R^{2} es
hidrógeno, y el átomo de carbono unido a -OR^{2} es opcionalmente
quiral, se pueden preparar como se ilustra en el Esquema C.
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Esquema
C
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Se hace reaccionar un intermediario de
benzoimidazolona-carboxamida tropano (VI) con un
intermediario de oxirano-amina (VII), donde el *
indica un centro quiral, para proporcionar un compuesto de la
fórmula (I-a). Como se muestra en el Esquema C, la
benzoimidazolona-carboxamida tropano (VI) se pone en
contacto con al menos un equivalente de una
oxirano-amina (VII) en un diluyente inerte, como el
tolueno, hexano o etanol, para formar un compuesto de la fórmula
(I-a). La reacción se suele realizar a una
temperatura de aproximadamente 0ºC a 100ºC durante entre 12 y cerca
de 24 horas o hasta que la reacción está sustancialmente
completada.
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En otro método más de síntesis, se pueden
preparar los compuestos de la fórmula (I), en los que el átomo de
carbono unido a -OR^{2} es opcionalmente quiral, como se ilustra
en el Esquema D.
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Esquema
D
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En el esquema D, un intermediario (VIII), donde
el * indica un centro quiral, se hace reaccionar con el
intermediario (IX), donde L^{1} representa un grupo saliente, tal
como cloro, bromo, yodo, o etoxi, y R^{4} es tal como se define en
esta memoria.
Las condiciones de reacción óptimas para la
reacción del esquema D pueden variar dependiendo de las propiedades
químicas de los reactivos L^{1}-R^{4}, como
saben bien los expertos en la materia.
Por ejemplo, cuando L^{1} es un grupo
saliente, como el cloro, la reacción suele ser llevada a cabo
poniendo en contacto el intermediario (VII) con entre
aproximadamente 1 y aproximadamente 4 equivalentes de intermediario
(IX) en un diluyente inerte, tal como diclorometano o
dimetilformamida, en presencia de un exceso de base, por ejemplo,
entre aproximadamente 3 y aproximadamente 6 equivalentes de base,
tales como N,N-diisopropiletilamina o
1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno
(DBU). Los diluyentes inertes adecuados también incluyen
N,N-dimetilformamida, triclorometano,
1,1,2,2-tetracloroetano, tetrahidrofurano y
similares. La reacción se suele realizar a una temperatura en el
rango de aproximadamente -10ºC a aproximadamente 35ºC durante entre
cerca de un cuarto de hora hasta 2 horas o hasta que la reacción
está sustancialmente completada. Los reactivos ejemplares
L^{1}-R^{4} en los que L^{1} es halo incluyen
metanosulfonilcloruro y acetilcloruro.
Cuando L^{1} es un grupo saliente, tal como
etoxi, por ejemplo, cuando L^{1}-R^{4} es
formato de etilo, la reacción suele ser llevada a cabo poniendo en
contacto el intermediario (VIII) con entre aproximadamente 1 y
aproximadamente 4 equivalentes del intermediario (IX) en un
diluyente inerte, como la dimetilformamida, en presencia de un
exceso de base, por ejemplo, entre aproximadamente 3 y 6
equivalentes de base, tal como
N,N-diisopropiletilamina. La reacción suele ser
llevada a cabo a una temperatura en el rango de cerca de 50ºC a
100ºC durante unas 22 a 24 horas, o hasta que la reacción está
sustancialmente completada.
Por otra parte, puede hacerse reaccionar el
intermediario (VIII) con un isocianato protegido, tal como
O=C=NP^{1}, donde P^{1} es un grupo
amino-protector, como trimetilsililo (TMS), para
proporcionar un compuesto de la fórmula (I) donde el átomo de
carbono unido a -OR^{2} es opcionalmente quiral. La reacción suele
ser llevada a cabo poniendo en contacto el intermediario (VIII) con
entre aproximadamente 1 y aproximadamente 4 equivalentes de un
isocianato protegido en un diluyente inerte, como la
dimetilformamida, en presencia de un exceso de base, por ejemplo,
entre aproximadamente 3 y aproximadamente 6 equivalentes de base,
tal como N,N-diisopropil-etilamina. La
reacción se suele realizar a una temperatura en el rango de
aproximadamente 0ºC a aproximadamente 35ºC durante entre cerca de un
cuarto de hora hasta 2 horas o hasta que la reacción está
sustancialmente completada. El grupo protector de amino se puede
quitar fácilmente como saben los expertos en la materia. Por
ejemplo, la extinción de la mezcla de reacción con ácido acético y
agua hidrolizará el grupo trimetilsililo (TMS) para producir una
urea primaria.
Los compuestos intermedios de la fórmula (VIII)
se pueden hacer a partir de compuestos disponibles. Por ejemplo,
puede prepararse un compuesto intermedio de la fórmula (VIII) a
partir de la reacción de un compuesto de la fórmula (III) y
R^{3}NH_{2}. También se explica una forma alternativa de
preparar compuestos de la fórmula (III) en el Esquema G de la
presente memoria.
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Se puede preparar un intermediario de azetidina
(III) por el procedimiento ilustrado en el Esquema E.
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Esquema
E
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En el esquema E, L' es un contraión, tal como
haluro, por ejemplo, Cl- o Br-, o trifluoroacetato.
En primer lugar, se hace reaccionar un
intermediario de la fórmula (VI) con el intermediario (a), donde
L^{2} representa un grupo saliente, como el bromo, para formar una
sal de azetidina de fórmula (III-a) en la que
R^{2} es hidrógeno. El intermediario (a) puede ser, por ejemplo,
2-bromometiloxirano (comúnmente epibromohidrina).
Esta reacción suele ser llevada a cabo poniendo en contacto el
intermediario (VI) con entre aproximadamente 2 y 4 equivalentes del
oxirano en un diluyente polar, como el etanol. La reacción se suele
realizar a una temperatura ambiente durante cerca de entre 24 y 48
horas o hasta que la reacción está sustancialmente completada.
Se puede preparar un intermediario de la fórmula
(III-b) en el que R^{2} es alquilo
C_{1-3} poniendo en contacto los intermediarios
(III-a) con desde algo menos de un equivalente hasta
aproximadamente un equivalente de un compuesto de la fórmula
L^{3}-R^{2}, donde L^{3} es un grupo saliente,
tal como halo, y R^{2} es como se define aquí, en un diluyente
inerte en la presencia de entre aproximadamente 1 y aproximadamente
3 equivalentes de una base fuerte, tal como
terc-butóxido de potasio o hidruro de sodio. La
reacción se suele realizar a una temperatura ambiente durante cerca
de un cuarto hasta una hora o hasta que la reacción está
sustancialmente completada. Los diluyentes inertes adecuados
incluyen diclorometano, triclorometano,
1,1,2,2-tetracloroetano y similares.
Del mismo modo, se puede preparar un
intermediario de azetidina de la fórmula (V) haciendo reaccionar un
intermediario de amina secundaria (IV) con un intermediario de
oxirano (a), como epibromohidrina, para proporcionar el
intermediario (V) en el que R^{2} es hidrógeno (denominado (Va),
en las condiciones descritas para el Esquema E. Se puede preparar un
intermediario de la fórmula (V) en el que R^{2} es alquilo
C_{1-3} (denominado (Vb)), poniendo en contacto el
intermediario (Va) con un compuesto de fórmula
L^{3}-R^{2}, intermediario (b), tal como se
describe en el esquema E. En el ejemplo 5 de la presente memoria se
describe un método representativo para preparar el intermediario
(V).
Se puede preparar un compuesto intermediario de
la fórmula (VII) como se describe en el Esquema F.
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Esquema
F
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Los compuestos intermedios de la fórmula (VII)
son típicamente preparados haciendo reaccionar el intermediario (IV)
con el intermediario (a), donde L^{2} es un grupo saliente, como
el cloro, y el * indica quiralidad R o S opcional, para proporcionar
un intermediario de propanol (VII), que luego se cicla para
proporcionar un compuesto de la fórmula (VII).
Por lo general, un compuesto de amina de la
fórmula (IV) se disuelve en un diluyente inerte, tal como etanol, y
se pone en contacto con entre aproximadamente 1 y 8 equivalentes de
un intermediario de oxirano (a), tal como la epiclorhidrina, para
proporcionar un intermediario de propanol de la fórmula (VII). El
intermediario (VII), disuelto en un disolvente inerte, tal como
tetrahidrofurano, en presencia de una base fuerte, como el hidróxido
de sodio, se cicla para formar el intermediario (VII). Cada etapa de
esta reacción se suele realizar a una temperatura de aproximadamente
0ºC a 80ºC durante entre cerca de 2 y 24 horas o hasta que la
reacción está sustancialmente completada.
Alternativamente, se puede hacer reaccionar un
compuesto de la fórmula (VII') con un compuesto de la fórmula (VI)
para formar un compuesto de la fórmula (I-a). Esta
reacción suele ser llevada a cabo poniendo en contacto un compuesto
de la fórmula (VI) con entre aproximadamente 1 y aproximadamente 3
equivalentes de un compuesto de la fórmula (VII) en un diluyente
inerte, como el metanol o el etanol, en presencia de un exceso de
una base, tal como
N,N-diisopropil-etilamina, para
proporcionar un compuesto de la fórmula (I-a).
Se puede preparar un compuesto intermediario de
la fórmula (VII) como se muestra abajo en el Esquema G.
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Esquema
G
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En el Esquema G, se hace reaccionar un compuesto
de la fórmula (VI) con el intermediario (c), donde P^{2} es un
grupo protector de amino, tal como Boc, y el * indica quiralidad R o
S opcional, para producir un compuesto protegido
(VIII-a) donde R^{2} es hidrógeno. Para preparar
un compuesto de la fórmula (VIII-b) en el que
R^{2} es alquilo C_{1-3}, se hace reaccionar el
intermediario (VIII-a) con un compuesto de la
fórmula L^{3}-R^{2}, donde L^{3} es un grupo
saliente y R^{2} es como se define, para proporcionar un compuesto
de la fórmula (VIII-b). El grupo protector de amino
es eliminado del intermediario (VIII-a) o
(VIII-b) para proporcionar un compuesto de la
fórmula (VIII). En el Ejemplo 12 se describe con más detalle un
método representativo de la preparación de un compuesto de fórmula
(VIII) utilizando el esquema G, y también un método representativo
de la preparación del intermediario (c).
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Se puede preparar un compuesto de la fórmula
(VI) como se muestra abajo en el Esquema H.
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Esquema
H
En el esquema H, se disuelve el intermediario
(d), una
1,3-dihidrobenzoimidazol-2-ona,
en un diluyente inerte, tal como tetrahidrofurano, en presencia de
una base fuerte, tal como hidruro de sodio, y se hace reaccionar con
cloroformiato de 4-nitrofenilo. La mezcla se agita a
aproximadamente 0ºC hasta aproximadamente 40ºC durante entre unas 12
y 24 horas o hasta que la reacción está completa para formar un
éster activo, el intermediario (e), que se hace reaccionar, in
situ, con un aminotropano protegido, el intermediario (f), donde
P^{3} representa un grupo protector de amino, tal como Boc, en
presencia de un diluyente inerte, tal como tetrahidrofurano, a una
temperatura de aproximadamente 30ºC a 90ºC durante entre cerca de 10
y 24 horas para proporcionar un intermediario protegido (g).
Utilizando métodos convencionales, se elimina el grupo protector de
amino, P^{3}, del intermediario (g) para proporcionar un compuesto
de benzoimidazolona-carboxamida tropano de la
fórmula (VI). En los pasos (a)-(h) del Ejemplo 1 se describe con más
detalle un método representativo para preparar el intermediario
(VI).
Se puede preparar el compuesto de
benzoimidazolona del intermediario (d) como se muestra abajo en el
Esquema I.
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Esquema
I
En el Esquema I, se hace reaccionar
2-fluoro-nitrobenceno con un
intermediario de una amina primaria (h), donde R^{1} es como se
describe en esta memoria, para proporcionar el intermediario (i),
que se reduce a un diaminofenilo, intermediario (j). El
diaminofenilo se hace reaccionar con carbonildiimidazol en presencia
de un diluyente inerte, tal como tetrahidrofurano, a una temperatura
de aproximadamente 20ºC a 40ºC durante entre unas 12 y 30 horas,
para proporcionar un compuesto de benzoimidazolona del intermediario
(d). En los pasos (a)-(c) del Ejemplo 1 se describe con más detalle
una síntesis representativa de un compuesto del intermediario
(d).
El aminotropano protegido, intermediario (f),
empleado en las reacciones descritas en esta solicitud es preparado
a partir de materias primas disponibles. Por ejemplo, cuando el
grupo protector de amino P3 es Boc, el aminotropano protegido se
puede preparar como se muestra en el Esquema J, y como se describe
en los pasos (d)-(f) del Ejemplo 1.
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Esquema
J
Para preparar el intermediario protegido (d), se
pone en contacto 2,5-dimetoxi tetrahidrofurano con
entre 1 y 2 equivalentes de bencilamina y un ligero exceso, por
ejemplo, alrededor de 1,1 equivalentes de ácido
1,3-acetonadicarboxílico en una solución acuosa
ácida en presencia de un agente tampón como el fosfato de hidrógeno
de sodio. La mezcla de reacción se calienta a entre unos 60ºC y
100ºC para garantizar la descarboxilación de cualquier intermediario
carboxilado en el producto,
8-bencil-8-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ona,
comúnmente N-benciltropanona.
El intermediario de
N-benciltropanona suele reaccionar con un ligero
exceso de dicarbonato
di-terc-butílico (comúnmente
(Boc)_{2}O), por ejemplo, alrededor de 1,1 equivalentes,
bajo una atmósfera de hidrógeno en presencia de un catalizador de
metal de transición para proporcionar éster
terc-butílico del ácido
3-oxo-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico.
La reacción suele llevarse a cabo a temperatura ambiente durante
aproximadamente 12 hasta aproximadamente 72 horas. Por último, el
éster terc-butílico del ácido
3-oxo-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico
es puesto en contacto con un gran exceso, por ejemplo, por lo menos
unos 25 equivalentes, de formiato de amonio en un diluyente inerte,
como el metanol en presencia de un catalizador de metales de
transición para proporcionar el producto, el intermediario (d), en
la configuración endo con estereoespecificidad alta, por ejemplo con
una relación endo a exo de > 99:1. La reacción se suele realizar
a una temperatura ambiente durante cerca de entre 12 y 72 horas o
hasta que la reacción está sustancialmente completada. Es ventajoso
añadir el reactivo de formiato de amonio en porciones. Por ejemplo,
el éster terc-butílico del ácido
3-oxo-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico
es puesto en contacto con una porción inicial de formiato de amonio
de aproximadamente 15 a 25 equivalentes. Después de un intervalo de
aproximadamente 12 a aproximadamente 36 horas, se añade una porción
adicional de 5 a 10 equivalentes de formiato de amonio. La adición
posterior se puede repetir después de un intervalo similar. El
producto, el intermediario (f), puede purificarse por procedimientos
convencionales, como la extracción alcalina.
Se puede preparar un compuesto de oxirano del
intermediario (c) como se muestra abajo en el Esquema K.
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Esquema
K
Una bencilamina, intermediario (k), como la
N-bencilmetilamina, se pone en contacto con al menos
un equivalente de un oxirano quiral, intermediario (a), tal como la
epiclorhidrina, en un diluyente no polar, como el hexano o tolueno,
para formar una 2-hidroxipropilamina, intermediario
(1). La reacción se suele realizar a una temperatura ambiente
durante cerca de entre 12 y 24 horas o hasta que la reacción está
sustancialmente completada. El intermediario (1) suele reaccionar
con un ligero exceso de dicarbonato de
di-terc-butílico (comúnmente
(Boc)_{2}O), por ejemplo, alrededor de 1,1 equivalentes,
bajo una atmósfera de hidrógeno en presencia de un catalizador de
metales de transición para proporcionar el intermediario (m)
protegido de Boc. La reacción suele llevarse a cabo a temperatura
ambiente durante aproximadamente entre 8 y 24 horas. El
intermediario (m) se convierte entonces en una forma ciclada
disolviendo el intermediario (m) en un diluyente inerte, por
ejemplo, tetrahidrofurano, en presencia de una base, por ejemplo,
hidróxido de sodio, para proporcionar el intermediario (c).
Los reactivos L^{1}-R^{4},
L^{3}-R^{2}, HNR^{3}R^{4} y el intermediario
de oxirano (a) están disponibles comercialmente o se preparan
fácilmente mediante procedimientos estándares con materias primas
comunes.
Se describen otros detalles respecto a las
condiciones de reacción específicas y otros procedimientos para
preparar compuestos representativos de la invención o intermediarios
de los mismos en los ejemplos expuestos abajo.
Por consiguiente, en un aspecto del método, la
invención proporciona un proceso para preparar un compuesto de la
fórmula (I):
donde R^{1}, R^{2}, R^{3} y
R^{4} son tal como se define en esta memoria, o una sal o un
estereoisómero del mismo, el proceso
comprendiendo:
- (a)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (III):
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- \quad
- con un compuesto de la fórmula (IV):
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- (b)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (V):
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\newpage
- \quad
- con un compuesto de la fórmula (VI):
- (c)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VIII):
- \quad
- con un compuesto de la fórmula (IX):
(IX)L^{1}-R^{4}
- \quad
- donde L^{1} es un grupo saliente y R^{4} es como se define en esta memoria, o
- (d)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VIII) con O=C=NP^{1}, donde P^{1} es un grupo protector de amino, y luego quitar el grupo protector de amino P^{1},
para proporcionar un compuesto de la fórmula
(I), o una sal o estereoisómero del mismo.
\vskip1.000000\baselineskip
La invención también proporciona un proceso para
preparar un compuesto de la fórmula (I-a):
donde R^{1}, R^{3} y R^{4}
son tal como se define en esta memoria, o una sal o un
estereoisómero de los mismos, el proceso
comprendiendo:
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI):
\newpage
- con un compuesto de la fórmula (VII):
- o
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI), con un compuesto de la fórmula (VII'):
- donde L^{2} es un grupo saliente,
- para proporcionar un compuesto de fórmula (I), o una sal o un estereoisómero del mismo.
\vskip1.000000\baselineskip
En otras formas de realización, esta invención
se dirige a cualquiera de los procesos descritos en esta memoria y a
los productos elaborados por dichos procesos.
La invención también proporciona un compuesto de
la fórmula (VIII), donde R^{1}, R^{2} y R^{3} son tal como se
define en esta memoria para un compuesto de la fórmula (I), o una
sal o estereoisómero o derivado protegido del mismo.
La invención también proporciona un compuesto de
la fórmula (I), donde el compuesto se prepara mediante un proceso
que comprende:
- (a)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (III) con un compuesto de la fórmula (IV);
- (b)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (V) con un compuesto de la fórmula (VI);
- (c)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VIII) con un compuesto de la fórmula (IX), donde L^{1} es un grupo saliente y R^{4} es como se define en esta memoria;
- (d)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VIII) con O=C=NP^{1}, donde P^{1} es un grupo protector de amino, y luego quitar el grupo protector de amino P^{1};
- (e)
- cuando R^{2} es hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de la fórmula (VII); o
- (f)
- cuando R^{2} es hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de la fórmula (VII), donde L^{2} es un grupo saliente, para proporcionar un compuesto de la fórmula (I).
Los compuestos de
benzoimidazolona-carboxamida suelen ser
administrados a un paciente en forma de una composición
farmacéutica. Tales composiciones farmacéuticas pueden administrarse
al paciente por cualquier vía de administración aceptable
incluyendo, aunque no exclusivamente, modos de administración oral,
rectal, vaginal, nasal, por inhalación, tópica (incluyendo
transdérmica) y parenteral.
Por consiguiente, en uno de los aspectos de sus
composiciones, la invención se dirige a una composición farmacéutica
que comprende un soporte o excipiente farmacéuticamente aceptable y
una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la fórmula
(I) o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
Opcionalmente, tales composiciones farmacéuticas pueden contener
otros agentes terapéuticos y/o de formulación, si se desea.
Las composiciones farmacéuticas de la invención,
normalmente contienen una cantidad terapéuticamente eficaz de un
compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del
mismo. Normalmente, tales composiciones farmacéuticas contendrán
desde aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 95% en peso del
principio activo, preferiblemente, desde aproximadamente 5 hasta
aproximadamente 70% en peso, y más preferiblemente desde
aproximadamente 10 hasta aproximadamente 60% en peso del principio
activo.
Se puede usar cualquier soporte o excipiente
convencional en las composiciones farmacéuticas de la invención. La
elección de un soporte o excipiente particular o combinaciones de
soportes y excipientes, dependerá del modo de administración que se
esté utilizando para tratar a un paciente o tipo de condición médica
o estado de enfermedad particular. A este respecto, la preparación
de una composición farmacéutica adecuada para un modo particular de
administración entra en la competencia de los expertos en técnicas
farmacéuticas. Además, los ingredientes para tales composiciones
están comercialmente disponibles en, por ejemplo, Sigma, P.O. Box
14508, St. Louis, MO 63178. Para mayor ilustración, se describen las
técnicas de formulación convencionales en Remington: The Science and
Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott Williams & White,
Baltimore, Maryland (2000); and H.C. Ansel et al.,
Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th Edition,
Lippincott Williams & White, Baltimore, Maryland (1999).
Ejemplos representativos de materiales que
pueden servir como soportes farmacéuticamente aceptables incluyen,
pero no se limitan a, los siguientes: (1) azúcares, como lactosa,
glucosa y sacarosa, (2) almidones, como el almidón de maíz y fécula
de patata; (3) celulosa, como la celulosa microcristalina, y sus
derivados, tales como la carboximetilcelulosa sódica, etilcelulosa y
acetato de celulosa, (4) tragacanto en polvo, (5) malta; (6)
gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tales como la manteca de cacao
y ceras para supositorios; (9) aceites, como el aceite de cacahuete,
aceite de semilla de algodón, aceite de cártamo, aceite de sésamo,
aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soja; (10) glicoles,
tales como propilenoglicol; (11) polioles, como glicerina, sorbitol,
manitol y polietilenoglicol; (12), ésteres, tales como oleato de
etilo y laurato de etilo; (13) agar; (14) agentes tampón, como el
hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; (15) ácido algínico;
(16) agua libre de pirógenos; (17) solución salina isotónica; (18)
solución de Ringer; (19) alcohol etílico; (20) soluciones tampón de
fosfato, y (21) otras sustancias no tóxicas compatibles empleadas en
las composiciones farmacéuticas.
Las composiciones farmacéuticas de la invención
suelen prepararse mezclando o combinando cuidadosamente y a fondo un
compuesto de la invención con un soporte farmacéuticamente aceptable
y uno o más ingredientes opcionales. Si se necesita o desea, la
mezcla uniformemente combinada resultante puede ser formada o
cargada en comprimidos, cápsulas, píldoras y similares utilizando
procedimientos y equipos convencionales.
Las composiciones farmacéuticas de la invención
son preferiblemente envasadas en una forma de dosificación unitaria.
El término "forma de dosificación unitaria" significa una
unidad físicamente diferenciada adecuada para la dosificación a un
paciente, es decir, cada unidad conteniendo una cantidad
predeterminada de principio activo calculada para producir el efecto
terapéutico deseado ya sea solo o en combinación con una o más
unidades adicionales. Por ejemplo, tales formas de dosificación
unitarias pueden ser cápsulas, comprimidos, píldoras y
similares.
En una forma de realización preferida, las
composiciones farmacéuticas de la invención son adecuadas para la
administración oral. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para
la administración oral pueden estar en forma de cápsulas,
comprimidos, píldoras, pastillas para chupar, sellos, grageas,
polvos, gránulos; o como una solución o suspensión en un líquido
acuoso o no acuoso, o como una emulsión líquida de aceite en agua o
agua en aceite, o como un elixir o jarabe; y similares; cada uno
conteniendo una cantidad predeterminada de un compuesto de la
presente invención como principio activo.
Cuando están destinadas a la administración oral
en una forma de dosificación sólida (es decir, en forma de cápsulas,
tabletas, píldoras y similares), las composiciones farmacéuticas de
la invención normalmente comprenden un compuesto de la invención
como principio activo y uno o más soportes farmacéuticamente
aceptables, como el citrato sódico o fosfato dicálcico. Opcional o
alternativamente, tales formas de dosificación sólidas pueden
comprender también: (1) cargas o extendedores, tales como almidones,
lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y/o ácido silícico; (2)
aglutinantes, tales como carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina,
polivinipirrolidona, sacarosa y/o acacia; (3) humectantes, tales
como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tales como
agar-agar, carbonato cálcico, almidón de patata o
tapioca, ácido algínico, algunos silicatos y/o carbonato sódico; (5)
agentes retardadores de disolución, tales como parafina; (6)
aceleradores de absorción, tales como compuestos de amonio
cuaternario; (7) agentes humectantes, tales como alcoholo cetílico
y/o monoestearato de glicerol; (8) absorbentes, tales como caolín
y/o arcilla bentonita; (9) lubricantes, tales como talco, estearato
de calcio, estearato de magnesio, polietilenoglicoles sólidos,
laurilsulfato sódico, y/o mezclas de los mismos (10); agentes
colorantes y (11) agentes de tamponación.
En las composiciones farmacéuticas de la
invención también pueden presentarse agentes de liberación, agentes
humectantes, agentes de revestimiento, agentes edulcorantes,
aromatizantes y perfumantes, conservantes y antioxidantes. Los
ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: (1)
antioxidantes hidrosolubles, tales como ácido ascórbico,
hidrocloruro de cisteína, bisulfato sódico, metabisulfato sódico,
sulfito sódico y similares; (2) antioxidantes solubles en aceite,
tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado (BHA),
hidroxitolueno butilado (BHT), lecitina, galato de propilo,
alfa-tocoferol, y similares; y (3) agentes quelantes
de metales, tales como ácido cítrico, ácido
etilenodiaminotetraacético (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido
fosfórico, y similares. Los agentes de revestimiento para
comprimidos, cápsulas, píldoras y similares, incluyen aquellos
utilizados para revestimientos entéricos, tales como acetato ftalato
de celulosa (CAP), acetato ftalato de polivinilo (PVAP), ftalato de
hidroxipropilmetilcelulosa, copolímeros de ácido metacrílico-éster
de ácido metacrílico, acetato trimelitato de celulosa (CAT),
carboximetiletilcelulosa (CMEC), acetato succinato de
hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCAS), y similares.
Si se desea, las composiciones farmacéuticas de
la presente invención también pueden ser formuladas para
proporcionar una liberación lenta o controlada del principio activo
utilizando, a modo de ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa en
proporciones variables, o matrices de otros polímeros, liposomas y/o
microesferas.
Además, las composiciones farmacéuticas de la
invención, opcionalmente, puede contener agentes opacificantes y
pueden ser formuladas de manera que liberen el principio activo
sólo, o preferentemente, en una cierta porción del tracto
gastrointestinal, opcionalmente, de una manera retardada. Ejemplos
de composiciones de inclusión que pueden utilizarse incluyen
sustancias poliméricas y ceras. El principio activo también puede
estar en forma microencapsulada, si fuera apropiado, con uno o más
de los excipientes descritos arriba.
Las formas adecuadas de dosificación líquida
para la administración oral incluyen, a título ilustrativo,
emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, elixires y
jarabes farmacéuticamente aceptables. Tales formas de dosificación
líquidas suelen comprender el principio activo y un diluyente
inerte, tal como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes
solubilizantes y emulgentes, tales como alcohol etílico, alcohol
isopropílico, carbonato etílico, acetato etílico, alcohol bencílico,
benzoato bencílico, propilenoglicol,
1,3-butilenoglicol, aceites (por ej., aceites de
semilla de algodón, cacahuete, maíz, germen de trigo, oliva, ricino
y sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurílico, polietilenoglicoles
y ésteres de ácidos grasos de sorbitán y mezclas de los mismos. Las
suspensiones, además del principio activo, pueden contener agentes
de suspensión, tales como, por ejemplo, alcoholes isostearílicos
etoxilados, ésteres de polioxietileno sorbitol y sorbitán, celulosa
microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita,
agar-agar y tragacanto y mezclas de los mismos.
Alternativamente, las composiciones
farmacéuticas de la invención se formulan para la administración por
inhalación. Las composiciones farmacéuticas adecuadas para la
administración por inhalación estarán normalmente en forma de un
aerosol o polvo. Tales composiciones se administran generalmente
utilizando dispositivos de administración muy conocidos, tales como
un inhalador dosificador (MDI), un inhalador de polvo seco, un
nebulizador o un dispositivo de administración similar.
Cuando se administra por inhalación utilizando
un recipiente a presión, las composiciones farmacéuticas de la
invención normalmente incluyen el principio activo y un propulsor
adecuado, tal como diclorodifluorometano, triclorofluorometano,
diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas adecuado.
Además, la composición farmacéutica puede estar
en forma de cápsula o cartucho (hecho, por ejemplo, de gelatina) que
comprenda un compuesto de la invención y un polvo adecuado para usar
en un inhalador de polvo. Las bases adecuadas en polvo incluyen, a
modo de ejemplo, la lactosa o el almidón.
Los compuestos de la invención también pueden
administrarse transdérmicamente utilizando sistemas y excipientes de
administración transdérmica. Por ejemplo, se puede mezclar un
compuesto de esta invención con potenciadores de permeación, tales
como propilenoglicol, monolaurato de polietilenoglicol,
azacicloalcan-2-onas y similares, e
incorporarlos en un parche o sistema de administración similar. Se
pueden utilizar otros excipientes, incluyendo agentes gelificantes,
emulgentes y tampones en tales composiciones transdérmicas si se
desea.
Las siguientes formulaciones ilustran las
composiciones farmacéuticas representativas de la presente
invención:
Ejemplo de formulación
A
Se preparan cápsulas de gelatina dura para la
administración oral de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes cuidadosamente y se cargan en una cápsula de
gelatina dura (260 mg de composición por cápsula).
\newpage
Ejemplo de Formulación
B
Se preparan cápsulas de gelatina dura para la
administración oral de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes cuidadosamente y se pasan luego por un tamiz de
malla del nº 45 de EE.UU. y se carga en una cápsula de gelatina dura
(200 mg de composición por cápsula).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
C
Se preparan cápsulas para la administración oral
de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes cuidadosamente y se cargan en una cápsula de
gelatina dura (310 mg de composición por cápsula).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
D
Se preparan pastillas para la administración
oral de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: El
principio activo, el almidón y la celulosa se pasan por un tamiz de
malla nº 45 de EE.UU. y se mezclan bien. La solución de
polivinilpirrolidona se mezcla con el polvo resultante, y esta
mezcla se pasa por un tamiz de malla nº 14 de EE.UU.. Los gránulos
producidos de este modo se secan a 50-60ºC y se
pasan por un tamiz de malla nº 18 de EE.UU.. El carboximetilalmidón
sódico, estearato de magnesio y talco (previamente pasados por un
tamiz de malla nº 60 de EE.UU.) se añaden a los gránulos. Después de
mezclar, la mezcla se comprime en máquina de comprimir pastillas
para obtener una pastilla de 100 mg.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
E
Se preparan pastillas para la administración
oral de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes cuidadosamente y se comprimen para formar pastillas
(440 mg de composición por cápsula).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
F
Se preparan pastillas marcadas por una cara para
la administración oral de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes cuidadosamente y se comprimen para formar pastillas
marcadas por una cara (215 mg de composición por cápsula).
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
G
Se prepara una suspensión para la administración
oral de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se mezclan
los ingredientes para formar una suspensión conteniendo 10 mg de
principio activo por 10 ml de suspensión.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
H
Se prepara un polvo seco para la administración
por inhalación de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se
microniza el principio activo y luego se mezcla con lactosa.
Entonces se carga esta mezcla combinada en un cartucho de inhalación
de gelatina. Se administran los contenidos del cartucho utilizando
un inhalador de polvo.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
I
Se prepara un polvo seco para la administración
por inhalación en un inhalador dosificador de la siguiente
manera:
Procedimiento representativo: Se prepara
una suspensión conteniendo el 5% en peso de un compuesto de la
invención y 0,1% en peso de lecitina dispersando 10 g del principio
activo como partículas micronizadas con un tamaño medio inferior a
10 \mum en una solución formada por 0,2 g de lecitina disuelto en
200 ml de agua desmineralizada. Se seca la suspensión por
pulverización y se microniza el material resultante a partículas con
un diámetro medio inferior a 1,5 \mum. Se cargan las partículas en
cartuchos con
1,1,1-2-tetrafluoroetano
presurizado.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
J
Se prepara una formulación inyectable de la
siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes indicados arriba y se ajusta el pH a 4 \pm 0,5
utilizando 0,5 N de HCl ó 0,5 N de NaOH.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo de formulación
K
Se preparan cápsulas para la administración oral
de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes cuidadosamente y se cargan en una cápsula de
gelatina dura (Tamaño #1, blanca, opaca) (264 mg de composición por
cápsula).
\newpage
Ejemplo de formulación
L
Se preparan cápsulas para la administración oral
de la siguiente manera:
Procedimiento representativo: Se combinan
los ingredientes cuidadosamente y se cargan en una cápsula de
gelatina dura (Tamaño #1, blanca, opaca) (148 mg de composición por
cápsula).
Se entenderá que, en las composiciones
farmacéuticas mencionadas anteriormente, puede utilizarse cualquier
forma de los compuestos de la invención, (es decir, la base libre,
la sal farmacéutica, o solvato) que sea conveniente para el modo
particular de administración.
Los compuestos de
benzoimidazolona-carboxamida de la invención son
agonistas del receptor 5-HT_{4} y, por tanto se
espera que sean útiles para el tratamiento de enfermedades mediadas
por los receptores 5-HT_{4} o asociadas con la
actividad del receptor 5-HT_{4}, es decir,
condiciones médicas que mejoran con el tratamiento con un agonista
del receptor 5-HT_{4}. Estas condiciones médicas
incluyen, aunque no exclusivamente, el síndrome de intestino
irritable (SII), el estreñimiento crónico, la dispepsia funcional,
el retraso en el vaciamiento gástrico, la enfermedad por reflujo
gastroesofágico (ERGE), la gastroparesia, el íleo postoperatorio, la
pseudoobstrucción intestinal y el tránsito retardado inducido por
medicamentos. Además, se ha sugerido que algunos compuestos
agonistas del receptor 5-HT_{4} pueden utilizarse
en el tratamiento de desórdenes del sistema nervioso, incluyendo los
trastornos cognitivos, trastornos de conducta, trastornos del estado
de ánimo y trastornos del control de la función autonómica.
En particular, los compuestos de la invención
aumentan la motilidad del tracto gastrointestinal (GI) y por lo
tanto se espera que sean útiles para el tratamiento de los
trastornos del tracto gastrointestinal causados por la movilidad
reducida en los mamíferos, incluyendo seres humanos. Tales
trastornos de la motilidad gastrointestinal incluyen, a modo de
ejemplo, el estreñimiento crónico, el síndrome de intestino
irritable con estreñimiento predominante (IBS-C),
gastroparesia diabética e idiopática y dispepsia funcional.
En un aspecto, por lo tanto, la invención
encuentra utilidad en un método para aumentar la motilidad del
tracto gastrointestinal en un mamífero, el método comprendiendo
administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de una
composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención
y un soporte farmacéuticamente aceptable.
Cuando se usa para tratar los trastornos de la
motilidad reducida del tracto gastrointestinal u otras condiciones
mediadas por los receptores 5-HT_{4}, los
compuestos de la invención se administran normalmente por vía oral
en una dosis única diaria o en varias dosis al día, aunque se pueden
utilizar otras formas de administración. La cantidad de principio
activo administrado por dosis o la cantidad total administrada por
día la determinará normalmente un médico, a la luz de las
circunstancias pertinentes, incluida la condición que se trata, la
vía de administración elegida, el compuesto que se esté
administrando y su actividad relativa, la edad, peso, y la respuesta
de cada paciente, la gravedad de los síntomas del paciente, y
similares.
Las dosis adecuadas para el tratamiento de los
trastornos de la motilidad reducida del tracto gastrointestinal u
otros trastornos mediados por los receptores
5-HT_{4} variarán desde aproximadamente 0,0007
hasta aproximadamente 20 mg/kg/día del principio activo, incluyendo
desde aproximadamente 0,0007 hasta aproximadamente 1 mg/kg/día. Para
un humano medio de 70 kg, ascendería a desde aproximadamente 0,05
hasta aproximadamente 70 mg al día de principio activo.
En un aspecto de la invención, los compuestos de
la invención se utilizan para tratar el estreñimiento crónico.
Cuando se utilizan para tratar el estreñimiento crónico, los
compuestos de la invención se administrarán, por lo general, por vía
oral en una sola dosis diaria o en múltiples dosis al día.
Preferiblemente, la dosis para tratar el estreñimiento crónico
variará entre aproximadamente 0,05 y aproximadamente 70 mg al
día.
En otro aspecto de la invención, los compuestos
de la invención se utilizan para tratar el síndrome del intestino
irritable. Cuando se utilizan para tratar el síndrome del intestino
irritable con estreñimiento predominante, los compuestos de la
invención se administrarán, por lo general, por vía oral en una sola
dosis diaria o en múltiples dosis al día. Preferiblemente, la dosis
para tratar el síndrome del intestino irritable con estreñimiento
predominante variará entre aproximadamente 0,05 y aproximadamente 70
mg al día.
En otro aspecto de la invención, los compuestos
de la invención se utilizan para tratar la gastroparesia diabética.
Cuando se utilizan para tratar la gastroparesia diabética, los
compuestos de la invención se administrarán, por lo general, por vía
oral en una sola dosis diaria o en múltiples dosis al día.
Preferiblemente, la dosis para tratar la gastroparesia diabética
variará entre aproximadamente 0,05 y aproximadamente 70 mg al
día.
En otro aspecto más de la invención, los
compuestos de la invención se utilizan para tratar la dispepsia
funcional. Cuando se utilizan para tratar la dispepsia funcional,
los compuestos de la invención se administrarán, por lo general, por
vía oral en una sola dosis diaria o en múltiples dosis al día.
Preferiblemente, la dosis para tratar la dispepsia funcional variará
entre aproximadamente 0,05 y aproximadamente 70 mg al día.
La invención también encuentra utilidad en un
método para tratar a un mamífero que tenga una enfermedad o
condición asociada con la actividad del receptor
5-HT_{4}, el método comprendiendo administrar al
mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la
invención o de una composición farmacéutica que comprenda un
compuesto de la invención.
Puesto que los compuestos de la invención son
agonistas del receptor 5-HT_{4}, estos compuestos
también son útiles como herramientas de investigación para la
investigación o el estudio de sistemas biológicos o muestras que
tengan receptores 5-HT_{4}, o para descubrir
nuevos agonistas del receptor 5-HT_{4}. Además,
como los compuestos de la invención exhiben selectividad de unión de
los receptores 5-HT_{4} en comparación con la
unión a receptores de otros subtipos de 5-HT, en
particular los receptores 5-HT_{3}, estos
compuestos son particularmente útiles para estudiar los efectos del
agonismo selectivo de los receptores 5-HT_{4} en
un sistema biológico o muestra. Se puede emplear cualquier muestra o
sistema biológico que tenga receptores 5-HT_{4} en
tales estudios, los cuales pueden realizarse in vitro o in
vivo. Las muestras o sistemas biológicos representativos
adecuados para tales estudios incluyen, pero no se limitan a,
células, extractos celulares, membranas plasmáticas, muestras de
tejidos, mamíferos (tales como ratones, ratas, cobayas, conejos,
perros, cerdos, etc.) y similares.
En este aspecto de la invención se pone en
contacto un sistema biológico o muestra comprendiendo un receptor
5-HT_{4} con una cantidad agonizante del receptor
5-HT_{4} de un compuesto de la invención. Por lo
tanto, se pueden determinar los efectos de agonizar el receptor
5-HT_{4} utilizando procedimientos y equipos
convencionales, tales como ensayos de unión de radioligandos y
ensayos funcionales. Tales ensayos funcionales incluyen cambios
mediados por ligandos en monofosfato de adenosina cíclico
intracelular (AMPc), cambios mediados por ligandos en la actividad
de la enzima adenilato ciclasa (que sintetiza el AMPc), cambios
mediados por ligandos en la incorporación de los análogos de la
guanosina trifosfato (GTP), tales como [^{35}S]GTP\gammaS
(guanosina
5'-O-(\gamma-tio)trifosfato)
o GTP-Eu, en membranas aisladas a través del
intercambio catalizado por receptores de los análogos de GTP por los
análogos de GDP, cambios mediados por ligandos en iones libres de
calcio intracelular (medido, por ejemplo, con un lector de placas de
imágenes de fluorescencia o FLIPR® de Molecular Devices, Inc.), y la
medición de la activación de la proteína quinasa activada por
mitógenos (MAPK). Un compuesto de la invención puede agonizar o
aumentar la activación de los receptores 5-HT_{4}
en cualquiera de los ensayos relacionados arriba o ensayos de
naturaleza similar. Una cantidad agonizante del receptor
5-HT_{4} de un compuesto de la invención
normalmente variará entre aproximadamente 1 nanomolar y
aproximadamente 500 nanomolar.
Además, los compuestos de la invención pueden
utilizarse como herramientas de investigación para descubrir nuevos
agonistas del receptor 5-HT_{4}. En esta
realización se comparan los datos funcionales o de unión del
receptor 5-HT_{4} de un compuesto de ensayo o un
grupo de compuestos de ensayo con los datos funcionales o de unión
del receptor 5-HT_{4} de un compuesto de la
invención para identificar los compuestos del ensayo que tienen
actividad funcional o de unión superior, si los hubiera. Este
aspecto de la invención incluye, como formas de realización
separadas, tanto la generación de datos de comparación (utilizando
los ensayos apropiados) como el análisis de los datos de prueba para
identificar los compuestos de ensayo de interés.
Por consiguiente, en otro de los aspectos de su
método, esta invención se refiere a un método de evaluación de un
compuesto de prueba en un ensayo biológico, el método comprendiendo:
(a) realizar un ensayo biológico con un compuesto de ensayo para
proporcionar un primer valor de ensayo, (b) realizar el ensayo
biológico con un compuesto de la fórmula I para proporcionar un
segundo valor de ensayo, donde el paso (a) se lleva a cabo antes,
después o al mismo tiempo que el paso (b) y (c) comparar el primer
valor de ensayo del paso (a) con el segundo valor de ensayo del paso
(b).
Entre otras propiedades, se ha descubierto que
los compuestos de la invención son potentes agonistas del receptor
5-HT_{4} y exhiben una selectividad sustancial
para el subtipo del receptor 5-HT_{4} sobre el
subtipo del receptor 5-HT3 en ensayos de unión de
radioligandos. Además, los compuestos de la invención han demostrado
mejores propiedades farmacocinéticas en un modelo de rata. Por lo
tanto se espera que los compuestos de la invención demuestren buena
biodisponibilidad tras su administración oral. Además, se ha
demostrado que los compuestos representativos no presentan un nivel
inaceptable de inhibición de la corriente de iones de potasio en un
modelo de fijación de voltaje in vitro utilizando células
completas aisladas que expresaban el canal de potasio cardíaco hERG.
El ensayo de fijación de voltaje es un método preclínico aceptado
para evaluar el potencial de los agentes farmacéuticos para cambiar
el patrón de repolarización cardiaca, específicamente para provocar
la denominada prolongación del intervalo QT que se ha asociado con
la arritmia cardíaca. (Cavero et al., Opinión on
Pharmacotherapy, 2000, 1, 947-73, Fermini et
al., Nature Reviews Drug Discovery, 2003, 2,
439-447) En consecuencia, se espera que las
composiciones farmacéuticas que comprenden compuestos de la
invención tengan un perfil cardíaco aceptable.
Estas propiedades, así como la utilidad de los
compuestos de la invención pueden demostrarse utilizando varios
ensayos in vitro e in vivo muy conocidos para los
expertos en la materia. Se describen ensayos representativos con
mayor detalle en los siguientes ejemplos.
Los siguientes ejemplos sintéticos y biológicos
se ofrecen para ilustrar la invención, y no debe interpretarse en
modo alguno como limitación del alcance de la invención. En los
ejemplos que siguen a continuación, las siguientes abreviaturas
tienen los siguientes significados, a no ser que se indique otra
cosa. Las abreviaturas que no se definen a continuación tienen su
significado generalmente aceptado.
- Boc =
- terc-butoxicarbonilo
- (Boc)_{2}O =
- dicarbonato di-terc-butílico
- DCM =
- diclorometano
- DMF =
- N,N-dimetilformamida
- DMSO =
- sulfóxido de dimetilo
- EtOAc =
- acetato de etilo
- LCMS =
- cromatografía líquida de espectrometría de masas
- mCPBA =
- ácido m-cloroperbenzoico
- MeCN =
- acetonitrilo
- MTBE =
- éter metil terc-butílico
- PyBop =
- hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirrolidino-fosfonio
- R_{f} =
- factor de retención
- RT =
- temperatura ambiente
- TFA =
- ácido trifluoroacético
- THF =
- tetrahidrofurano
Los reactivos (incluyendo las aminas
secundarias) y los solventes fueron adquiridos de proveedores
comerciales (Aldrich, Fluka, Sigma, etc), y utilizados sin
purificación adicional. Las reacciones se realizaron en atmósfera de
nitrógeno, a menos que se indique otra cosa. El progreso de las
mezclas de reacción se controló por cromatografía en capa fina
(TLC), cromatografía líquida de alto rendimiento analítica (HPLC
anal.), y espectrometría de masas, cuyos detalles se indican a
continuación y por separado en los ejemplos específicos de las
reacciones. Las mezclas de reacción se desarrollaron conforme a lo
indicado específicamente en cada reacción, se purificaron comúnmente
por extracción y otros métodos de purificación tales como
cristalización dependiente de la temperatura y del solvente y
precipitación. Además, las mezclas de reacción se purificaron de la
manera habitual por HPLC preparativa: abajo se describe un protocolo
general. La caracterización de los productos de la reacción se llevó
a cabo rutinariamente por espectrometría de masas y de
^{1}H-RMN. Para la medición de RMN se disolvieron
las muestras en disolventes deuterados (CD_{3}OD, CDCl_{3} o
DMSO-d_{6}), y los espectros de
^{1}H-RMN se adquirieron con un instrumento Varian
Gemini 2000 (300 MHz) en condiciones de observación estándares. La
identificación espectrométrica de los compuestos se realizó por un
método de ionización por electroespray (ESMS) con un instrumento
Applied Biosystems (Foster City, CA), modelo API 150 EX o un
instrumento Agilent (Palo Alto, CA) modelo 1100 LC/MSD.
Protocolo general para HPLC analítica: Se
disolvió cada uno de los compuestos crudos en 50% de MeCN/H_{2}O
(con 0,1% de TFA) a 0,5-1,0 mg/ml, y se analizó
utilizando HPLC anal.: 1) fase inversa anal. Columna: Zorbax
Bonus-RP (3,5 mm de tamaño de partícula, 2,1 x 50
mm), 2) velocidad de flujo: 0,5 ml/min, 3) 5% de MeCN/H_{2}O
conteniendo 0,1% de TFA (isocrático; 0-0,5 min), 5%
de MeCN/H_{2}O conteniendo 0,1% de TFA hasta 75% de MeCN/H_{2}O
conteniendo 0,1% de TFA (gradiente lineal; 0,5-4
min), 4) detección: 214, 254 y 280 nm. Se indican otras condiciones
utilizadas siempre que sea necesario.
Protocolo general para purificación con HPLC
preparativa: Se disolvieron los compuestos crudos en 50% de
ácido acético en agua a 50-100 mg/ml, se filtró y
fraccionó mediante HPLC preparativa: 1) columna; YMC
Pack-Pro C18 (50a x 20 mm; ID = 5 mm); 2) gradiente
lineal: 10% A/90% B hasta 50%A/50% B durante 30 min; 3) velocidad de
flujo: 40 ml/min, 4) detección: 214 nm.
A continuación se describe la preparación de
varias aminas secundarias utilizadas como intermediarias en la
síntesis de un compuesto de la fórmula (I).
Se prepararon los derivados de
N-sulfonilo de piperazina a partir de N-Boc de
piperazina por reacción con el respectivo cloruro de sulfonilo
(iPr_{2}NEt, CH_{2}Cl_{2}, 0ºC), y la desprotección del grupo
N-Boc (CF_{3}CO_{2}H, CH_{2}Cl_{2}).
1-Metanosulfonilpiperazina:
^{1}H-RMN (CDCl_{3}; neutro): \delta (ppm) 3,1
(t, 4H), 2,9 (t, 4H), 2,7 (s, 3H). También se preparó
metanosulfonilpiperazina por reacción de cloruro de metanosulfonilo
con un exceso de piperazina (más de 2 equivalentes) en agua.
Se prepararon las formas isoméricas racémicas o
con un solo centro quiral de
3-acetilaminopirrolidina tratando
N^{1}-Boc-S-aminopirrolidina
(racemato, 3R o 3S) con cloruro de acetilo (iPr_{2}NEt,
CH_{2}Cl_{2}, 0ºC), y la desprotección del grupo
N-Boc (CF_{3}CO_{2}HCH_{2}Cl_{2}).
3-(Acetamido)pirrolidina: ^{1}H-RMN
(DMSO-d_{6}; sal de TFA): \delta (ppm) 4,2
(quin, 1H), 3,3-3,1 (m, 3H), 2,9 (m, 1H), 2,0 (m,
1H), 1,8 (brs, 4H);
Se preparó
3-((R)-2-hidroxipropionamido)pirrolidina
después de la amidación de
N'-Boc-3-aminopirrolidina
(ácido L-láctico, PyBOP, DMF, RT), y la
desprotección del grupo N-Boc (CF_{3}CO_{2}H,
CH_{2}Cl_{2}). (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{7}H_{14}N_{2}O_{2}: 159,11; hallado: 159,0.
^{1}H-RMN (CD_{3}OD; sal de TFA): \delta (ppm)
4,4 (quin, 1H), 4,1 (q, 1H), 3,5-3,4 (m, 2H),
3,3-3,2 (m, 2H), 2,3 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,3 (d,
3H).
Se obtuvieron los derivados de
N^{3}-alcanosulfonilo de
(3R)-aminopirrolidina mediante el tratamiento de
N^{1}-Boc-(3R)-aminopirrolidina
con cloruro de propionilsulfonilo o cloruro de
ciclohexilmetilsulfonilo (i-Pr_{2}NEt,
CH_{2}Cl_{2}, 0ºC), y la desprotección del grupo N-Boc
(CF_{3}CO_{2}H CH_{2}Cl_{2}).
Se prepararon derivados de
tetrahidro-3-tiofenamino-1,1-dióxido
siguiendo el protocolo de Loev, B. J. Org. Chem. 1961, 26,
4394-9 por reacción de 3-sulfoleno
con una amina primaria necesaria en metanol (cat. KOH, RT).
N-Metil-3-tetrahidrotiofeno-amino-1,1-dióxido
(sal de TFA): ^{1}H-RMN
(DMSO-d_{6}): \delta (ppm) 9,4 (br s, 2H),
4,0-3,8 (quin, 1H), 3,6-3,5 (dd,
1H), 3,4-3,3 (m, 1H), 3,2-3,1 (m,
2H), 2,5 (s, 3H), 2,4 (m, 1H), 2,1 (m, 1H).
Se preparó
(S)-1,1-dioxo-tetrahidro-1\lambda^{6}-tiofen-3-ilamina
de la siguiente manera:
- 1)
- Protección de N-Boc de (S)-3-tetrahidrotiofenamina (Dehmlow, EV; Westerheide, R. Síntesis 1992, 10, 947-9) por tratamiento con (Boc)_{2}O en metanol a temperatura ambiente durante aproximadamente 12 horas, 2) oxidación por tratamiento con mCPBA en diclorometano a (S)-1,1-dioxo-tetrahidro-1,6-tiofeno-3-ilamina protegida con N-Boc a 0ºC durante 5 h (lavado varias veces con una solución de sulfito de sodio saturado para extinguir las trazas de peróxidos), y 3) desprotección de N-Boc del derivado de sulfona con TFA en diclorometano a temperatura ambiente durante 1 hora a la amina libre que fue aislada como una sal de TFA. Se preparó (R)-1,1-dioxo-tetrahidro-1,6-tiofeno-3-ilamina utilizando el mismo método, pero sustituyendo la (S)-3-tetrahidrotiofenamina con (R)-3-tetrahidrotiofenamina.
Se preparó
N-metil-tetrahidro-2H-tiopiran-4-amino-1,1-dióxido
a partir de
tetrahidro-4H-tiopiran-4-ona:
i) MeNH_{2}, NaBH_{4}, ii) (Boc)_{2}O, MeOH; iii) mCPBA, CH_{2}Cl_{2}, 0ºC (lavado varias veces con una solución de sulfito de sodio saturado para extinguir las trazas de peróxidos), iv) CF_{3}CO_{2}H, CH_{2}Cl_{2} (m/z): [M+H]^{+} calculado para C_{6}H_{13}N_{2}S: 164,07; hallado: 164,9. ^{1}HRMN (CD_{3}OD; sal de TFA): \delta (ppm) 3,4-3,1 (m, 5H), 2,7 (s, 3H), 2,4 (brd, 2H), 2,1 (brm, 2H).
i) MeNH_{2}, NaBH_{4}, ii) (Boc)_{2}O, MeOH; iii) mCPBA, CH_{2}Cl_{2}, 0ºC (lavado varias veces con una solución de sulfito de sodio saturado para extinguir las trazas de peróxidos), iv) CF_{3}CO_{2}H, CH_{2}Cl_{2} (m/z): [M+H]^{+} calculado para C_{6}H_{13}N_{2}S: 164,07; hallado: 164,9. ^{1}HRMN (CD_{3}OD; sal de TFA): \delta (ppm) 3,4-3,1 (m, 5H), 2,7 (s, 3H), 2,4 (brd, 2H), 2,1 (brm, 2H).
\newpage
A una solución fría de
2-fluoro-nitrobenceno (31,8 g, 0,225
mol) en etanol (300 ml) enfriada en un baño de hielo se añadió
isopropilamina (54,0 ml, 0,634 mol), seguido de la adición de una
solución de carbonato de potasio (31,1 g, 0,225 mol) en agua (120
ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante 1 h, a continuación, a reflujo
durante 6 h. La reacción se extinguió enfriando la mezcla a
temperatura ambiente y evaporándola bajo presión reducida dando un
residuo naranja. El residuo se repartió entre éter de etilo (800 ml)
y una solución de salmuera (300 ml). La capa orgánica se secó y se
filtró para proporcionar el intermediario del título (39 g) como un
líquido naranja. ^{1}H-RMN (CDCl_{3}, 300 MHz):
\delta (ppm) 8,06 (d, 1H), 7,30 (t, 1H), 6,74 (d, 1H), 6,48 (t,
1H), 3,73 (hept, 1H), 1,20 (d, 6H).
A una mezcla de etanol (600 ml) y 2 M de
solución de hidróxido de sodio (320 ml) enfriada en un baño de hielo
se añadió polvo de zinc (59,5 g) lentamente. Mientras se agitaba la
mezcla de Zn se añadió
N-isopropil-N-(2-nitrofenil)amina
(41 g, 0,228 mol) disuelto en etanol (50 ml). La mezcla se agitó a
0ºC durante 30 min, luego se calentó a 85ºC. La mezcla se agitó a
85ºC durante 12 h hasta que el reflujo de la solución de la mezcla
se convirtió en una solución incolora. La mezcla se enfrió a 0ºC y
se filtró. El sólido recogido se lavó con acetato de etilo (200 ml).
La solución filtrada y lavada se combinó y se evaporó al vacío para
eliminar el exceso de solventes volátiles. Durante la concentración,
la mezcla se volvió marrón pálido/amarilla. El concentrado acuoso se
extrajo con acetato de etilo (800 ml). La solución orgánica se
concentró hasta secarse para proporcionar el intermediario del
título (33 g) como un aceite de color marrón-rosado
que se utilizó en el paso siguiente sin ningún 3,55 (hept, 1H), 1,2
(d, 6H). tratamiento adicional. ^{1}H=RMN (CDCl_{3}, 300 MHz):
\delta (ppm) 6,73-6,5 (m, 4H),
3,58-3,55 (hept, 1H), 1,2 (d, 6H).
A una solución del producto del paso (b),
N-(2-aminofenil)-N-isopropilamina (34
g, 0,226 mol), en tetrahidrofurano (500 ml) se añadió
carbonildiimidazol (36,7 g, 0,226 mol) como un sólido. La mezcla se
agitó bajo una atmósfera de gas nitrógeno a temperatura ambiente
durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío, y un residuo
resultante de color marrón oscuro se distribuyó entre acetato de
etilo (700 ml) y solución de salmuera (300 ml). La capa orgánica se
lavó con 1 M de ácido fosfórico varias veces (\sim 3 x 300 ml)
hasta que el color de la capa orgánica se volvió de color marrón
oscuro a amarillo pálido. La solución orgánica se evaporó hasta
secarse para dar el intermediario del título (34 g) como un aceite
de color amarillo pálido que se solidificó poco en reposo. La pureza
del material fue evaluado por ^{1}H-RMN que no
indicó ninguna impureza detectable: ^{1}H-RMN
(CD_{3}OD, 300 MHz): \delta (ppm) 7,2 (m, 1H), 7,0 (m, 3H), 4,6
(hept, 1H), 1,46 (d, 6H). (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{10}H_{12}N_{2}O: 177,09; hallado: 177,2.
HPLC anal.: tiempo de retención = 2,7 min (99%
de pureza): 1) columna: Zorbax, Bonus-RP, tamaño de
partícula de 3,5 mm, 2,1 x 50 mm; 2) velocidad de flujo: 0,5 ml/min,
3) condición isocrática (10% de disolvente B/90% de disolvente A) de
0 a 0,5 min, y luego gradiente lineal hasta 50% de disolvente B/50%
de disolvente A durante 5 minutos (disolvente A = 98% de agua/2% de
MeCN/0,1% de TFA, disolvente B = 90% de MeCN/10% de agua/0,1% de
TFA). Análisis de TLC (placa de gel de sílice): R_{f} = 0,5
(CH_{2}Cl_{2}). (m/z): [M + H]^{+} calculado para
C10H12N2O: 177,09, hallado: 177,3.
Se añadió ácido clorhídrico concentrado (30 ml)
a una solución heterogénea de
2,5-dimetoxi-tetrahidrofurano (82,2
g, 0,622 mol) en agua (170 ml) mientras se agitaba. En un frasco
separado enfriado a 0ºC (baño de hielo), se añadió ácido clorhídrico
concentrado (92 ml) lentamente a una solución de bencilamina (100 g,
0,933 mol) en agua (350 ml). La solución de
2,5-dimetoxitetrahidrofurano se agitó durante unos
20 minutos, se diluyó con agua (250 ml), y entonces se añadió la
solución de bencilamina, seguido de la adición de una solución de
ácido 1,3-acetonadicarboxílico (100 g, 0,684 mol) en
agua (400 ml) y la adición de fosfato de hidrógeno de sodio (44 g,
0,31 mol) en agua (200 ml). El pH se ajustó de pH 1 a pH \sim 4,5
utilizando NaOH al 40%. La solución resultante se agitó durante la
noche. La solución se acidificó a pH 3 de pH 7,5 con 50% de ácido
clorhídrico, se calentó a 85ºC y se agitó durante 2 horas. La
solución se enfrió a temperatura ambiente, se basificó a pH 12 con
NaOH al 40%, y se extrajo con DCM (3 x 500 ml). Las capas orgánicas
combinadas se lavaron con salmuera, se secaron, se filtraron y se
concentraron a presión reducida para producir el intermediario crudo
del título como un aceite viscoso marrón (52 g).
A una solución del intermediario crudo en
metanol (1000 ml) se añadió dicarbonato
di-terc-butílico (74,6 g, 0,342 mol)
a 0ºC. La solución se dejó a temperatura ambiente y se agitó durante
la noche. El metanol se eliminó a presión reducida y el aceite
resultante se disolvió en diclorometano (1000 ml). El intermediario
se extrajo en 1M de H_{3}PO_{4} (1000 ml) y se lavó con
diclorometano (3 x 250 ml). La capa acuosa se basificó a pH 12
utilizando NaOH acuoso y se extrajo con diclorometano (3 x 500 ml).
Las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron y se
concentraron a presión reducida para dar el intermediario del título
como un aceite viscoso, de color marrón claro. ^{1}H RMN
(CDCl_{3}) \delta (ppm) de 7,5 a 7,2 (m, 5H, C_{6}H_{5}),
(s, 2H, CH_{2}Ph) 3,7, 3,45 (s amplio, 2H,
CH-NBN), 2,7-2,6 (dd, 2H,
CH_{2}CO), 2,2-2,1 (dd, 2H, CH_{2}CO),
2,1-2,0 (m, 2H, CH_{2}CH_{2}), 1,6 (m, 2H,
CH_{2}CH_{2}). (m/z): [M + H]^{+} Calculado para
C_{14}H_{17}NO: 216,14, hallado: 216,0.
A una solución de
8-bencil-8-azabiciclo[3.2.1]octan-3-ona
(75 g, 0,348 mol) en EtOAc (300 ml) se añadió una solución de
dicarbonato di-terc-butílico (83,6
g, 0,383 mol, 1,1 eq) en EtOAc (300 ml). La solución resultante y de
lavado (100 ml de EtOAc) se introdujo en un recipiente de 1 litro de
hidrogenación Parr conteniendo 23 g de hidróxido de paladio (20% en
peso de paladio, base seca, sobre carbón, \sim 50% humedecido con
agua; por ejemplo catalizador Pearlman) en una corriente de
nitrógeno. El recipiente de reacción fue desgasificado (alternancia
de vacío y N_{2} cinco veces) y presurizado a 60 psi de gas
H_{2}. La solución de reacción se agitó durante dos días y se
recargó con H_{2} según la necesidad para mantener la presión de
H_{2} a 60 psi hasta que la reacción se completó según se controló
por cromatografía en capa fina de sílice. La solución negra se
filtró a través de una capa de Celite® y se concentró a presión
reducida para dar el intermediario del título como un aceite viscoso
amarillo a naranja que se utilizó en el paso siguiente sin ningún
tratamiento adicional. ^{1}H RMN (CDCl_{3}) \delta (ppm) 4,5
(amplio, 2H, CH-NBoc), 2,7 (amplio, 2H, CH_{2}CO),
2,4-2,3 (dd, 2H, CH_{2}CH_{2}), 2,1 (m amplio,
2H, CH_{2}CO), 1,7-1,6 (dd, 2H, CH_{2}CH_{2}),
1,5 (s, 9H,
(CH_{3})_{3}COCON)).
(CH_{3})_{3}COCON)).
A una solución del producto del paso anterior
(75,4 g, 0,335 mol) en metanol (1L) se añadió formiato de amonio
(422,5 g, 6,7 mol), agua (115 ml) y 65 g de paladio en carbón activo
(10% en base seca, \sim 50% humedecido con agua; Degussa tipo
E101NE/W) bajo una corriente de N_{2} mientras se agitaba a través
del agitador mecánico. Después de 24 y 48 horas, se añadieron
porciones adicionales de formiato de amonio (132 g, 2,1 mol). Una
vez que la progresión de la reacción cesó, según se verificó por
HPLC anal., se añadió Celite® (> 500 g) y la suspensión espesa
resultante se filtró y a continuación el sólido recogido se lavó con
metanol (\sim 500 ml). Los filtrados se combinaron y se
concentraron bajo presión reducida. La solución turbia bifásica
resultante se diluyó entonces con 1M de ácido fosfórico hasta un
volumen final de \sim 1,5 a 2,0 l a pH 2 y se lavó con
diclorometano (3 x 700 ml). La capa acuosa se basificó a pH 12
utilizando 40% de NaOH acuoso, y se extrajo con diclorometano (3 x
700 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron y
se concentraron por evaporación giratoria y después alto vacío para
dar el intermediario del título (52 g), comúnmente
N-Boc-endo-3-aminotropano,
como un sólido entre blanco y amarillo pálido. La proporción de
isómeros de endo a exo amina del producto fue > 99:1 basada en el
análisis de ^{1}H-RMN (pureza> 96% por HPLC
analítica). ^{1}H = RMN (CDCl_{3}) \delta (ppm)
4,2-4,0 (d amplio, 2H, CHNBoc), 3,25 (t, 1H,
CHNH_{2}), 2,1-2,05 (m, 4H), 1,9 (m, 2H), 1,4 (s,
9H, (CH_{3})_{3}OCON), 1,2-1,1 (amplio,
2H). (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{12}N_{22}N_{2}O_{2}: 227,18; hallado: 227,2. HPLC
analítica (método isocrático; 2,98 (A:B) a 90:10 (A:B) durante 5
min): tiempo de retención = 3,68 min.
A una suspensión fría de hidruro de sodio (9,25
g, 231,4 mmol, 60% de dispersión en aceite mineral) en THF seco
(1000 l) en un baño de hielo se añadió
1-isopropil-1,3-dihidro-2H-benzimidazol-2-ona
(27,2 g, 154,2 mmol) en THF (50 ml) bajo atmósfera de nitrógeno. La
mezcla se agitó a \sim 0-5ºC durante 30 minutos, a
continuación se añadió cloroformiato de
4-nitrofenilo (34,2 g, 170 mmol) en THF (50 ml). La
mezcla se agitó durante la noche mientras se dejaba calentar la
mezcla gradualmente a la temperatura ambiente. Al éster activado
formado se añadió a continuación éster terc-butílico
del ácido
(1S,3R,5R)-3-amino-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico
(36,7 g, 162 mmol) en THF (50 ml). La mezcla se agitó a temperatura
ambiente durante aproximadamente 12 h, y a cerca de 75ºC durante
unas 3 h, momento en el que un LCMS de la muestra de reacción indicó
la finalización de la reacción de acoplamiento. La mezcla se
concentró al vacío, se disolvió en diclorometano (1 l), y se lavó
primero con 1M de H_{3}PO_{4} y luego con una solución saturada
de NaHCO_{3}. Después del secado, la solución orgánica se evaporó
para proporcionar el intermediario del título como un residuo de
color amarillo pálido que se utilizó en el paso siguiente sin ningún
tratamiento adicional.
A una solución fría de éster
terc-butílico del ácido
(1S,3R,5R)-3-[(3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzo-imidazol-1-carbonil)amino]-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8-carboxílico
en 200 ml de diclorometano en un baño de hielo se añadió ácido
trifluoroacético (200 ml). La mezcla se agitó durante unos 30
minutos a \sim 5ºC, y a temperatura ambiente durante 1 h. Después
de la evaporación de la mezcla se añadió éter etílico, (\sim 500
ml) al residuo aceitoso, causando la solidificación de los residuos.
Se recogió el precipitado, se enjuagó con abundante cantidad de éter
etílico y se secó al vacío para proporcionar el intermediario del
título (47 g) como una sal de TFA. Al intermediario del título
también se le conoce comúnmente como
endo-N-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazol-1-carboxamida.
A una solución de
(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amida
del ácido
N-[(1S,3R,5R)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
(0,884 g, 2 mmol, sal de TFA) en etanol (10 ml) se añadió primero
N,N-diisopropiletilamina (0,348 ml, 2 mmol) seguido de
epibromohidrina (0,274 g, 4 mmol). La mezcla se agitó a temperatura
ambiente durante la noche y el producto de espiro se precipitó,
recogió por filtración, se lavó con etanol frío y se utilizó en el
próximo paso sin ningún tratamiento adicional.
A una solución de
3-hidroxi-3'-{[3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazolil-carbonil]amino}espiro[azetidina-1,8'-(1S,3R,5R)-8-azabiciclo[3.2.1]octano]
(0,135 g, 0,35 mmol) en etanol (10 ml) se le añadió
N,N-diisopropiletila-
mina (0,24 ml, 1,4 mmol) y N-metilsulfonilpiperazina/sal de TFA (0,195 g, 0,7 mmol). La mezcla se agitó a 80ºC durante 12 h, y se concentró al vacío, obteniéndose un residuo aceitoso amarillo pálido. El producto crudo se disolvió en solución acuosa de ácido acético al 50%, luego se purificó por cromatografía líquida de alto rendimiento preparativa para proporcionar el compuesto del título (30,1 mg) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+} calculado para C_{26}H_{40}N_{6}O_{5}S: 549,28; hallado: 549,2. Tiempo de retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O durante 6 min) = 2,13 min.
mina (0,24 ml, 1,4 mmol) y N-metilsulfonilpiperazina/sal de TFA (0,195 g, 0,7 mmol). La mezcla se agitó a 80ºC durante 12 h, y se concentró al vacío, obteniéndose un residuo aceitoso amarillo pálido. El producto crudo se disolvió en solución acuosa de ácido acético al 50%, luego se purificó por cromatografía líquida de alto rendimiento preparativa para proporcionar el compuesto del título (30,1 mg) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+} calculado para C_{26}H_{40}N_{6}O_{5}S: 549,28; hallado: 549,2. Tiempo de retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O durante 6 min) = 2,13 min.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
1, excepto en el paso (j) que sustituye la
N-metilsulfonilpiperazina con
N-(tetrahidro-2-furoil)piperazina,
se preparó el compuesto del título (23,7 mg) como una sal de TFA.
(m/z):
[M+H]^{+} calculado para C_{30}H_{44}N_{6}O_{5}: 569,34; hallado: 569,4. Tiempo de retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O durante 6 min) = 2,19 min.
[M+H]^{+} calculado para C_{30}H_{44}N_{6}O_{5}: 569,34; hallado: 569,4. Tiempo de retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O durante 6 min) = 2,19 min.
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\vskip1.000000\baselineskip
Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
1, excepto en el paso (j) que substituye la
N-metilsulfonilpiperazina con N-acetilpiperazina, se
preparó el compuesto del título (23,1 mg) como una sal de TFA.
(m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{27}H_{40}N_{6}O_{4}: 513,31; hallado: 513,2. Tiempo de
retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O durante
6 min) = 2,12 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
1, excepto en el paso (j) que sustituye la
N-metilsulfonilpiperazina con
N-metiltetrahidro-3-tiofenamino-1,1-dióxido,
se preparó el compuesto del título (16,3 mg) como una sal de TFA.
(m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{26}H_{39}N_{5}O_{5}S: 534,27; hallado: 534,2. Tiempo de
retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O durante
6 min) = 2,18 min.
\vskip1.000000\baselineskip
El compuesto del título se preparó haciendo
reaccionar la N-metilsulfonilpiperazina/sal de TFA
(0,6 g, 2.16 mmol) con epibromohidrina (0.591 g, 4.31 mmol) en
etanol (9 ml) conteniendo N,N-diisopropiletilamina
(0,375 ml, 2,16 mmol) a temperatura ambiente durante 12 h. El
precipitado,
2-hidroxi-7-metilsulfonil-7-aza-4-azoniaespiro[3.5]nonano,
se hizo reaccionar luego con
endo-N-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazol-1-carboxamida
(preparado como se describe en el Ejemplo 1, paso (h)), en etanol a
80ºC durante 12 h, para dar el compuesto del título como una sal de
TFA. El análisis por LCMS y por HPLC anal, del producto indicó que
el compuesto preparado por este proceso era idéntico al compuesto
preparado en el Ejemplo 1 por el Esquema A.
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Se añadió
(S)-epiclorhidrina (48,0 ml, 0.612 mol) a una
solución agitada de N-metilsulfonamida de piperazina (87,3 g,
0,532 mol) en etanol (1,33 l) a temperatura ambiente. La mezcla de
reacción se agitó durante 18 horas y el precipitado sólido blanco
que se formó se recogió por filtración y se lavó con etanol para
proporcionar el intermediario del título (107,7 g) como un sólido
blanco que se utilizó sin purificación adicional, (m/z):
[M+H]^{+} calculado para C_{8}H_{17}CIN_{2}O_{3}S:
257,07; hallado: 257,2. ^{1}H-RMN (DMSO): \delta
(ppm) 5,09 (d, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,65 (dd, 1H), 3,55 (dd, 1H), 3,09
(m, 4H), 2,37 (dd, 1H), 2,86 (s, 3H), 2,50-2,58 (m,
4H), 2,45 (dd, 1H).
Se añadió hidróxido de sodio (22,15 g, 0,534
mol) a una solución bien agitada del producto del paso anterior
(118,13 g, 0,461 mol) en 80% de THF en agua (1500 ml) a 0ºC. La
mezcla de reacción se agitó durante 90 minutos y se separaron las
capas. La capa orgánica se concentró al vacío, se diluyó con
diclorometano (1500 ml), y se lavó con una mezcla de la capa acuosa
previamente separada y 1M de NaOH (500 ml). La capa orgánica se lavó
adicionalmente con 1M de NaOH (500 ml) y salmuera (500 ml), se secó,
filtró y concentró al vacío para proporcionar un sólido cristalino
blanco (90,8 g). El sólido cristalino se recristalizó en una mezcla
caliente 1:01 de EtOAc y hexano (800 ml) para obtener 43,33 g del
intermediario del título, (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{8}H_{16}N_{2}O_{3}S: 221,10; hallado: 221,3.
^{1}H-RMN (DMSO-d_{6}): \delta
(ppm) 3,11 (m, 4H), 3,02 (m, 1H), 2,87 (s, 3H),
2,69-2,75 (m, 2H), 2,45-2,60 (m,
5H), 2,22 (dd, 1H).
A una solución de
endo-N-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazol-1-carboxamida
(preparado como se describe en el Ejemplo 1, paso (h)), (0,3 g,
0,914 mmol) en tolueno (3 ml) se añadió
(S)-1-metilsulfonil-4-(oxiranilmetil)-piperazina
(0,201 g, 0,913 mmol). La mezcla se agitó a 100ºC durante 18 h, y se
concentró al vacío, obteniéndose un residuo aceitoso. El residuo se
disolvió en solución acuosa de ácido acético al 50%, y se purificó
por HPLC preparativa, para proporcionar el compuesto del título
(0,135 g) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+} calculado
para C_{26}H_{40}N_{6}O_{5}S: 549,28; hallado: 549,2. Tiempo
de retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O
durante 6 min) = 2,13 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
6, excepto por la sustitución de
(S)-1-metilsulfonil-4-(oxiranilme-
til)-piperazina con (R)-1-metilsulfonil-4-(oxiranilmetill)-piperazina, se preparó el compuesto del título (0,110 g) como una sal de TFA. Los perfiles del LCMS y de la HPLC analítica del isómero (S) y (R) de los compuestos del Ejemplo 6 y 7 eran idénticos.
til)-piperazina con (R)-1-metilsulfonil-4-(oxiranilmetill)-piperazina, se preparó el compuesto del título (0,110 g) como una sal de TFA. Los perfiles del LCMS y de la HPLC analítica del isómero (S) y (R) de los compuestos del Ejemplo 6 y 7 eran idénticos.
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A una solución de
endo-N-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazol-1-carboxamida
(preparado como se describe en el Ejemplo 1, paso (h)), (0,658 g,
2,0 mmol) en etanol (10 ml) se añadió
(S)-1-acetil-4-(oxiranilmetil)-piperazina
(0,407 g, 2,21 mmol). La mezcla se agitó a 80ºC durante 18 h, y se
concentró al vacío, obteniéndose un residuo aceitoso. Éste se
disolvió en solución acuosa de ácido acético al 50%, y se purificó
por HPLC preparativa, para proporcionar el compuesto del título
(0,675 g) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+} calculado
para C_{27}H_{40}N_{6}O_{4}: 513,31; hallado: 513,2. Tiempo
de retención (HPLC anal.: 10-40% MeCN/H_{2}O
durante 6 min) = 2,12 min.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
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Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
8, excepto por la sustitución de
(S)-1-acetil-4-(oxiranilmetil)-piperazina
con
(R)-1-acetil-4-(oxiranilmetill)-piperazina,
se preparó el compuesto del título (0,604 g) como una sal de TFA.
Los perfiles del LCMS y de la HPLC analítica de los isómeros
(S) y (R) de los Ejemplo 8 y 9 fueron idénticos.
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A una solución de ácido
(R)-tetrahidro-2-furóico
(5 g, 43,06 mmol) en tolueno (75 ml) se añadió cloruro de tionilo
(7,68 g, 64,6 mmol). La mezcla se agitó a 90ºC durante 2 h, luego,
lentamente, se enfrió a 0ºC. En un matraz separado se cargó una
solución de piperazina N-Boc (8,02 g, 43,06 mmol) en tolueno
(40 ml), e hidróxido de sodio acuoso (10,3 g, 258 mmol) en agua (80
ml). Esta solución bifásica se enfrió en un baño de hielo, seguido
por la adición del cloruro de ácido frío preparado anteriormente. La
mezcla se agitó vigorosamente durante 2 h. Se recogió la fase
orgánica y se lavó con 1M de H_{3}PO_{4}, se secó y evaporó para
proporcionar el intermediario del título (9,87 g).
Se disolvió
1-[(R)-tetrahidro-2-furoil]-4-Boc-piperazina
en 100 ml de diclorometano, se enfrió en un baño de hielo y se
añadió ácido trifluoroacético (50 ml). La mezcla se agitó durante 2
h, luego se concentró para proporcionar el intermediario del título
como una sal de TFA. La sal de TFA se convirtió en una base libre
por un procedimiento de extracción utilizando diclorometano y 1M de
una solución de hidróxido de sodio.
A una solución de
1-[(R)-tetrahidro-2-furoil]piperazina
(1,89 g, 10,26 mmol) en etanol (25 ml) se añadió epiclorohidrina
(1,09 g, 11,8 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente
durante la noche y se concentró al vacío, obteniéndose un aceite
amarillo pálido. El aceite se disolvió en diclorometano (100 ml), y
se lavó con 1M de H_{3}PO_{4}, se secó y se evaporó para
proporcionar el intermediario del título.
A una solución fría de
(S)-1-cloro-3-(4-[(R)-tetrahidro-2-furoil]-1-piperazinil)-2-propanol
(2,4 g, 8,67 mmol) en THF (25 ml) en un baño de hielo se añadió agua
(7 ml) y luego hidróxido de sodio (0,416 g, 10,41 mmol) en forma de
gránulos sólidos. La mezcla se agitó vigorosamente a la misma
temperatura durante 1 h y se diluyó con diclorometano (200 ml). La
mezcla se lavó con 1M de hidróxido de sodio y solución de salmuera,
después se secó y se concentró para proporcionar el intermediario
del título.
A una solución de
endo-N-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazol-1-carboxamida
(preparado como se describe en el Ejemplo 1, paso (h)), (0,37 g,
1,128 mmol) en etanol (6 ml) se añadió
1-[(R)-tetrahidro-2-furoil]-4-((S)-oxiranilmetil)-piperazina
(0,298 g, 1,241 mmol). La mezcla se agitó a 80ºC durante 18 h, y se
concentró al vacío, obteniéndose un residuo aceitoso. El residuo se
disolvió en solución acuosa de ácido acético al 50%, luego se
purificó por HPLC preparativa, para proporcionar el compuesto del
título (0,15 g) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+}
calculado para C_{30}H_{44}N_{6}O_{5}: 569,34; hallado:
569,4. Tiempo de retención (HPLC anal.: 10-40%
MeCN/H_{2}O durante 6 min) = 2,19 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
10, excepto en el paso (a) que substituye el reactivo de ácido
(R)-tetrahidro-2-furóico
con ácido
(S)-tetrahidro-2-furóico,
se preparó el compuesto del título (0,133 g) como una sal de TFA.
Los perfiles del LCMS y de la HPLC analítica de los isómeros (S) y
(R) de los Ejemplo 10 y 11 fueron idénticos.
\vskip1.000000\baselineskip
A una suspensión de sal de TFA
endo-N-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazol-1-carboxamida,
(preparado como se ha descrito en el Ejemplo 1, paso (h)), (15 g,
33,9 mmol) en diclorometano (500 ml) se añadió agua (500 ml) y
bastante N,N-diisopropiletilamina (\sim 20 ml) para
llevar la capa acuosa a un pH de 9,8. Se separaron las capas,
conservando la capa orgánica. La capa acuosa se extrajo luego una
segunda vez con diclorometano (100 ml). Las dos capas orgánicas se
combinaron y se lavaron con salmuera. El secado y la evaporación de
la fase orgánica proporcionó la base libre del intermediario del
título (9,7 g, 87% de rendimiento) en forma de polvo amarillo,
(m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{18}H_{24}N_{4}O_{2}: 329,20; hallado: 329,2. Tiempo de
retención (HPLC anal.: 2-50% MeCN/H_{2}O durante 6
min) = 3,67 min. ^{1}H RMN (DMSO-d_{6}): 9,31
(d, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,21 (m, 2H), 4,69 (septeto,
1H), 4,07 (m, 1H), 3,53 (m, 2H), 1,40-2,00 (m, 8H),
1,48 (d, 6H).
Se añadió (S)-epiclorhidrina (10
ml, 127 mmol) a una solución de N-bencilmetilamina (16,4 ml,
127 mmol) en hexano (60 ml). Se agitó la mezcla durante 16 h a
temperatura ambiente. Los volátiles se retiraron dando un residuo
aceitoso. El producto se recuperó mediante cromatografía de columna
utilizando metanol SiO_{2}/diclorometano (10:90) con el último
eluyendo el producto al máximo. Después del secado y filtración, se
eliminó el disolvente para proporcionar el intermediario del título
(19,2 g, 71% de rendimiento) como un aceite incoloro, (m/z): [M +
H]^{+} Calculado para C_{11}H_{16}CINO: 214,10,
hallado: 214,2.
Se disolvió
(S)-1-(bencilmetilamino)-3-cloropropan-2-ol
(9,1 g, 47,2 mmol) en acetato de etilo (75 ml). Luego se añadió
anhídrido de Boc (10,1 g, 51,9 mmol), seguido de 10% de
Pd(OH)_{2} en carbón y se puso la mezcla bajo
hidrógeno a 60 psi durante 16 h. La mezcla se filtró a través de
celita y se eliminaron los volátiles produciendo un residuo
aceitoso. El producto se recuperó mediante cromatografía en columna.
Después del secado y filtración, se eliminó el disolvente para
proporcionar el intermediario del título (8,3 g, 87% de rendimiento)
como un aceite incoloro.
Se disolvió éster terc-butílico
del ácido
((S)-3-cloro-2-hidroxipropill)metil-carbámico
(3,23 g, 14,4 mmol) en 40 ml de una mezcla de THF/H_{2}O (4:1).
Se añadió hidróxido de sodio (0,700 g, 17,3 mmol) como una solución
de 10 ml en agua y la reacción se agitó durante 16 h a temperatura
ambiente. El producto se recogió en acetato de etilo (200 ml), se
lavó con salmuera (2 x 100 ml), se secó y se filtró para
proporcionar el intermediario del título (2,5 g, 94% de rendimiento)
de un aceite incoloro, (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{9}H_{17}NO_{3}: 188,03; hallado: 210,2. Tiempo de retención
(HPLC anal.: 2-50% MeCN/H_{2}O durante 6 min) =
4,18 min. ^{1}H RMN (d_{6}-DMSO): 3,43 (m, 1H),
3,14 (m, 1H), 2,83 (m, 1H), 2,82 (s, 3H), 2,72 (m, 1H), 2,50 (m,
1H), 1,40 (s, 12H).
Se disolvieron éster
terc-butílico del ácido
metil-(S)-1-oxiranilmetil-carbámico
(3,1 g, 20,1 mmol) y
endo-N-(8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)-3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzimidazol-1-carboxamida
(preparado como se describe en el ejemplo 12, paso (a)), (2,2 g, 6,7
mmol) en etanol seco (100 ml) y se calentó a 80ºC durante 16 h. Los
volátiles se retiraron dando un residuo aceitoso. El producto se
recuperó mediante cromatografía en columna para proporcionar el
intermediario del título (3,0 g, 87% de rendimiento) como un sólido
amarillo claro, (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{27}H_{41}N_{5}O_{5}: 516,32; hallado: 516,5. Tiempo de
retención (HPLC anal.: 20-50% MeCN/H_{2}O durante
6 min) = 4,66 min.
Se disolvió éster terc-butílico
del ácido
((R)-2-hidroxi-3-{(1S,3R,5R)-3-[(3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carbonil)amino]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-8-il)propil)metil-carbámico
(3,0 g, 5,8 mmol) en diclorometano (30 ml) a temperatura ambiente y
se añadió ácido trifluoroacético (25 ml) gota a gota. Después de
unos 20 minutos la reacción se completó, todos los volátiles fueron
eliminados y el residuo aceitoso se trituró con éter etílico. Los
sólidos de color blanquecino se recogieron por filtración y se
secaron para proporcionar el intermediario del título (3,1 g, 84% de
rendimiento) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+}
calculado para C_{22}H_{33}N_{5}O_{3}: 416,27; hallado:
416,6. Tiempo de retención (HPLC anal.: 20-50%
MeCN/H_{2}O durante 6 min) = 3,17 min.
Se suspendió
[(1S,3R,5R)-8-((S)-2-hidroxi-3-metilaminopropil)-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il]amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
en diclorometano (10 ml) y se enfrió a 0ºC. Se añadió
N,N-diisopropiletilamina (2,84 ml, 16,3 mmol), seguido
de cloruro de acetilo (284 ml, 3,9 mmol). La reacción se dejó a
temperatura ambiente y se completó al cabo de 1 h. La mezcla de
reacción cruda se evaporó para dar un sólido amarillo. Se realizó
una purificación adicional a través de HPLC preparatoria (fase
inversa) en un gradiente de 5-10-60%
(5-10% durante 10 minutos, 10-60%
durante 50 min); velocidad de flujo de 15 ml/min; detección a 280
nm. Las fracciones purificadas se liofilizaron para proporcionar el
compuesto del título en forma de una sal de TFA. Entonces se añadió
una mezcla de 1:1 de 1N de hidróxido de sodio y diclorometano (200
ml) a la sal de TFA liofilizada. La capa orgánica se secó, se filtró
y se evaporó, y se liofilizó para proporcionar el compuesto del
título (1,05 g, 57% de rendimiento) como una base libre, (m/z):
[M+H]^{+} calculado para C_{24}H_{35}N_{5}O_{4}:
458,28; hallado: 458,5. Tiempo de retención (HPLC anal.:
2-50% MeCN/H_{2}O durante 6 min) = 3,72 min.
^{1}H RMN (d_{6}-DMSO): 9,28 (d, 1H), 8,08 (d,
1H), 7,45 (d, 1H), 7,17 (m, 2H), 4,50-4,90 (m, 2H),
4,01 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,40-3,60 (m, 1H), 3,33
(s,1H), 3,23 (m, 2H), 3,02 (s, 2H), 2,83 (s, 2H), 2,24 (m, 2H), 2,11
(m, 2H), 2,03 (s, 3H), 1,80-2,00 (m, 4H), 1,63 (m,
2H), 1,48 (d, 6H).
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Se suspendió la sal de TFA de
((1S,3R,5R)-8-((S)-2-hidroxi-3-metilaminopropil)-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
(preparado como se describe en el Ejemplo 12, paso (f)), (0,050 g,
0,078 mmol) en dimetilformamida (5 ml) y se enfrió a 0ºC. Se añadió
N,N-diisopropiletilamina (0,43 ml, 24,6 mmol), seguido
de cloruro de sulfonilo de
1-metil-1-H-imidazol
(0,017 g, 0,094 mmol). La reacción se dejó a temperatura ambiente y
se consideró que se había completado al cabo de 1 hora. La reacción
se paró con ácido acético y agua (1:1). Los volátiles fueron
retirados y se realizó la purificación por HPLC preparatoria (fase
inversa) en un gradiente de 15-45% durante 50 min,
velocidad de flujo de 20 ml/min, para proporcionar el compuesto del
título (0,030 g, 56%) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+}
calculado para C_{26}H_{37}N_{7}O_{5}S: 560,27; hallado:
560,5. Tiempo de retención (HPLC anal.: 2-50%
MeCN/H_{2}O durante 4 min) = 4,05 min. ^{1}H RMN
(DMSO-d_{6}): 9,28 (d, 1H), 8,08 (d, 1H), 7,79 (d,
2H), 7,45 (d, 1H), 7,21 (m, 2H), 4,75 (br m, 2H), 4,01 (m, 1H), 3,71
(br s, 4H), 3,23 (m, 3H), 2,88 (m, 1H), 2,77 (s, 2H), 2,29 (m, 2H),
2,08 (m, 2H), 1,93 (m, 4H), 1,59 (m, 2H), 1,48 (d, 6H).
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Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
13, excepto por la sustitución de cloruro de sulfonilo de
1-metil-1-H-imidazol
con isocianato de trimetilsililo (0,011 g, 0,094 mmol), se preparó
el compuesto del título (0,025 g, 56%) como una sal de TFA. (m/z):
[M+H]^{+} calculado para C_{23}H_{34}N_{6}O_{4}:
459,27; hallado: 459,1. Tiempo de retención (HPLC anal.:
10-75% MeCN/H_{2}O durante 4 min) = 2,38 min.
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Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
12, pasos (a)-(f) y Ejemplo 13, excepto en el Ejemplo 12, fase (b)
sustituyendo (S)-epiclorohidrina con
epiclorohidrina racémica, se preparó el compuesto del título (0,060
g) como una sal de TFA. (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{26}H_{37}N_{7}O_{5}S: 560,27; hallado: 560,2. Tiempo de
retención (HPLC anal.: 2-65% MeCN/H_{2}O durante 4
min) = 2,76 min.
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Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
12, pasos (a)-(f) y Ejemplo 14, excepto en el Ejemplo 12, fase (b)
sustituyendo (5)-epiclorohidrina con epiclorohidrina
racémica, se preparó el compuesto del título (0,027 g) como una sal
de TFA. (m/z): [M+H]^{+} calculado para
C_{23}H_{34}N_{6}O_{4}: 459,27; hallado: 459,2. Tiempo de
retención (HPLC anal.: 10-75% MeCN/H_{2}O durante
4 min) = 2,38 min.
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Utilizando los procesos descritos en el Ejemplo
12, pasos (a)-(f), salvo la sustitución de
(S)-epiclorhidrina con una mezcla racémica de
epiclorhidrina en el Ejemplo 12, paso (a), se preparó
[(1S,3R,5R)-8-(-2-hidroxi-3-metilaminopropil)-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il]amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
como un sal de TFA.
Entonces se suspendió la
[(1S,3R,5R)-8-(-2-hidroxi-3-metilaminopropil)-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il]amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
(0,050 g, 0,078 mmol) en dimetil-formamida (10 ml) y
se añadió N,N-diisopropiletilamina (0,43 ml, 24,6
mmol). Se añadió un exceso de formato de etilo (0,59 g, 7,8 mmol) y
la mezcla se calentó a 80ºC durante 16 h. Los volátiles fueron
retirados y se realizó la purificación a través de HPLC preparatoria
(fase inversa) en un gradiente de 15-45% durante 50
min, velocidad de flujo 20 ml/min para proporcionar el compuesto del
título (0,027 g, 61% de rendimiento) como una sal de TFA (m/z):
[M+H]^{+} calculado para C_{23}H_{33}N_{5}O_{4}:
444,26; hallado: 444,2. Tiempo de retención (HPLC anal.:
10-75% MeCN/H_{2}O durante 4 min) = 2,38 min.
\vskip1.000000\baselineskip
Ejemplo
18-1
A una mezcla de
{(1S,3R,5R)-8-[(R)3-(acetilmetil-amino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
liofilizado, producto del Ejemplo 12 (20 mg) dispersos en 1 ml de
agua desionizada, se le añadió 4 ml de ácido clorhídrico
concentrado. La mezcla se calentó a 50ºC y se añadió 180 \mul de
metanol (hasta su completa disolución). La solución se filtró con un
filtro de jeringa de 0,2 micras, se tapó en un vial limpio y se
enfrió a 4ºC. Se dejó equilibrar el vial a temperatura ambiente y
destapado para evaporar lentamente el exceso de solvente durante la
noche. A la mañana siguiente se recuperaron grupos de cristales
grandes en forma de aguja y de estrellas reventadas.
El patrón de difracción de rayos x del polvo del
producto, que se muestra en la Figura 1 se obtuvo con un
difractómetro Rigaku utilizando radiación de Cu K\alpha (30,0 kV,
15,0 mA). El análisis se realizó con el goniómetro funcionando en
modo de escaneo continuo de 2º por minuto con un tamaño de paso de
0,03º en un rango de 2 a 40º. Las muestras se prepararon en muestras
de cuarzo como una capa fina de material en polvo. El instrumento
fue calibrado con un estándar de metal de silicio.
Como se muestra en la Figura 1, el espectro
comprende picos prominentes en valores 2\theta de 6,17; 15,68;
17,1; 18,68; 21,86; 25,01; 28,16; 31,48 y 37,97 grados.
\newpage
Ejemplo
18-2
Se compuso polvo amorfo de
{(1S,3R,5R)-8-[(R)3-(acetilmetil-amino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico,
producto del ejemplo 12, (20 mg) dispersos en metanol (1 ml), como
una solución de base libre (Solución A, 0,044M), y se filtró a
través de un filtro de jeringa de 0,2 micras.
Se preparó una solución madre (Solución B,
concentración de 0,046 M) a partir de ácido clorhídrico concentrado
(40 \mul) y metanol (10 ml).
La detección de cristalización se realizó
mezclando una gota de 20 \mul de la solución A con diferentes
volúmenes de la solución B (0, 10, 20 y 40 \mul, correspondientes
respectivamente a 0, 0,5, 1,0 y 2,0 equivalentes mol de ácido) y
dejando que cada mezcla se evapore lentamente en un vial abierto
durante la noche. Al día siguiente, los sólidos restantes en la
pared o la base de cada vial se observaron mediante microscopia de
luz polarizada (un microscopio estereoscópico Olympus SZX con
filtros polarizadores cruzados).
Se observaron partículas birrefringentes, sobre
todo cristales en forma de aguja o grupos policristalinos, en los
sólidos que residían en las paredes o la base de los viales de
vidrio de los viales de 0,5 y 2,0 equivalentes mol de ácido
hidroclorhídrico.
El vial de prueba con 0 ml de solución B fue un
experimento de control para determinar la cristalinidad de la base
libre. No se observó ningún sólido de base libre cristalino o
birrefringente en los sólidos que residían en las paredes o la base
del vial de vidrio de base libre, incluso después de un período de
varias semanas.
Ejemplo 18-3 a
18-6
Siguiendo el procedimiento del Ejemplo
18-2, se prepararon formas cristalinas de las sales
de
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-3-(acetilmetilamino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico
utilizando los equivalentes de ácido indicados:
Ejemplo 18-3 ácido bromhídrico
(0,5, 1,0 y 1,5 M);
Ejemplo 18-4 ácido fosfórico
(0,25, 0,75 y 1,5 M);
Ejemplo 18-5 ácido sulfúrico
(0,25, 0,75 y 1,5 M), y
Ejemplo 18-6 ácido nítrico (0,5,
1,0 y 2,0 M).
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Ejemplos
19-37
Utilizando procesos similares a los descritos
anteriormente se prepararon los compuestos de los ejemplos
19-37.
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\newpage
(Continuación)
\newpage
(Continuación)
Ensayo
1
Se cultivaron células HEK-293
(riñón embrionario humano) establemente transfectadas con ADNc del
receptor 5-HT_{4(c)} humano (Bmax = \sim
6,0 pmol/mg de proteína, según lo determinado utilizando un ensayo
de unión de radioligandos de membrana
[^{3}H]-GR113808) en frascos T-225
de medio Eagles modificado de Dulbecco (DMEM) conteniendo 4.500 mg/l
de D-glucosa e hidrocloruro de piridoxina
(GIBCO-Invitrogen Corp., Carlsbad CA: Cat # 11965)
suplementado con suero fetal bovino al 10% (SFB)
(Gibco-Invitrogen Corp.: Cat # 10437), 2 mM de
L-glutamina y (100 unidades) penicilina (100 mg)
estreptomicina/ml (Gibco-Invitrogen Corp.: Cat #
15140) en una incubadora humidificada con C02 al 5% a 37ºC. Las
células fueron cultivadas bajo presión de selección continua por la
adición de 800 mg/ml de geneticina (GIBCO-Invitrogen
Corp.: Cat # 10131) al medio.
Las células fueron cultivadas hasta la
confluencia alrededor de 60-80% (<35 pasajes de
subcultivo). A las 20-22 horas antes de la cosecha,
las células se lavaron dos veces y se alimentaron con DMEM sin
suero. Todos los pasos para la preparación de membranas se
realizaron en hielo. La monocapa celular se suprimió por agitación
mecánica suave y trituración con una pipeta de 25 ml. Las células se
recogieron por centrifugación a 1000 rpm (5 minutos).
Para la preparación de la membrana, se
resuspendieron los sedimentos celulares en 50 mM de ácido
4-(2-hidroxietil)-1-piperazinoetanosulfónico
(HEPES) enfriado en hielo, pH 7,4 (tampón de preparación de
membranas) (40 ml/célula total produjo de 30-40
frascos T225) y se homogeneizó utilizando un disruptor politrón
(configurado a 19,2 x 10 s) en hielo. Los homogeneizados resultantes
se centrifugaron a 1200 g durante 5 min a 4ºC. El sedimento se
desechó y el sobrenadante se centrifugó a 40.000 g (20 min). El
sedimento se lavó una vez por resuspensión con el tampón de
preparación de membranas y centrifugación a 40.000 g (20 min). El
sedimento final se resuspendió en 50 mM de HEPES, pH 7,4 (tampón de
ensayo) (equivalente a 1 frasco T225/1 ml). La concentración de
proteínas de la suspensión de membranas se determinó por el método
de Bradford (Bradford, 1976). Las membranas fueron congeladas en
alícuotas a -80ºC.
Se realizaron ensayos de unión de radioligandos
en placas de ensayo de polipropileno de 96 pocillos con una
profundidad de 1,1 ml (Axygen) en un volumen total del ensayo de 400
\mul conteniendo 2 \mug de proteína de membrana en 50 mM de
HEPES, pH 7,4, conteniendo albúmina de suero bobino (BSA) al 0,025%.
Los estudios de unión de saturación para la determinación de los
valores K_{d} del radioligando se realizaron utilizando
[^{3}H]-GR113808 (Amersham Inc., Bucks, Reino
Unido: Cat # TRK944; actividad específica \sim 82 Ci/mmol) a las
8-12 concentraciones diferentes que van desde 0,001
nM-5,0 nM. Se realizaron ensayos de desplazamiento
para la determinación de los valores pK_{i} de los compuestos con
[^{3}H]-GR113808 a 0,15 nM y once concentraciones
diferentes de compuestos que van desde 10 pM-100
\muM.
\global\parskip0.900000\baselineskip
Los compuestos de ensayo fueron recibidos como
10 mM de soluciones madre en DMSO y diluidos a 400 \muM en 50 mM
de HEPES, pH 7,4 a 25ºC, conteniendo BSA al 0,1%, y se hicieron
diluciones en serie (1:5) en el mismo tampón. La unión no específica
se determinó en presencia de 1 \muM de GR113808 sin etiqueta. Los
ensayos se incubaron durante 60 min a temperatura ambiente y luego
se determinaron las reacciones de unión por radiofiltración en
placas de filtración de 96 pocillos GF/B de fibra de vidrio (Packard
BioScience Co., Meriden, CT) previamente mojadas en polietilenimina
al 0,3%. Las placas de filtración se lavaron tres veces con tampón
de filtración (50 mM de HEPES enfriado en hielo, pH 7,4) para
eliminar la radioctividad no unida. Las placas se secaron, se añadió
35 \mul de líquido de centelleo Microscint-20
(Packard BioScience Co., Meriden, CT) a cada pocillo y se contaron
las placas en un contador de centelleo líquido Packard Topcount
(Packard BioScience Co., Meriden, CT).
Se analizaron los datos de unión por análisis de
regresión no lineal con el paquete GraphPad Prism Software (GraphPad
Software, Inc., San Diego, CA) utilizando el modelo de 3 parámetros
para la competencia de un sitio. Se estableció el valor inferior
(mínimo de la curva) en el valor de la unión no específica
determinada en presencia de 1 \muM de GR113808. Se calcularon los
valores K_{i} para los compuestos de ensayo en Prism de los
valores IC_{50} que mejor se ajustaban, y el valor K_{d} del
radioligando, usando la ecuación de Cheng-Prusoff
(Cheng y Prusoff, Biochemical Pharmacology, 1973, 22,
3099-108): K_{i} = IC_{50}/(1 + [L /K_{d})
donde [L] = concentración de [^{3}H]-GR113808. Los
resultados se expresan como el logaritmo negativo decimal de los
valores K_{i}, PK_{i}.
Los compuestos de ensayo que tienen un valor más
alto de PK_{i} en este ensayo tienen una mayor afinidad para el
receptor 5-HT_{4}. Los compuestos de la invención
que se analizaron en este ensayo tenían un valor pK_{i} que
variaba entre aproximadamente 6,7 hasta aproximadamente 8,3,
variando por lo general desde aproximadamente 7,0 hasta
aproximadamente 8,0.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo
2
Se obtuvieron células HEK-293
(riñón embrionario humano) establemente transfectadas con ADNc del
receptor 5-HT_{3A} humano del Dr. Michael Bruess
(Universidad de Bonn, República Democrática Alemana) (Bmax = \sim
9,0 pmol/mg de proteína, determinado utilizando ensayo de unión de
radioligandos a la membrana con [^{3}H]-GR65630).
Se cultivaron las células en frascos T-225 o
fábricas de células en medio Eagles modificado de Dulbecco al 50%
(DMEM) (Gibco, Invitrogen Corp., Carlsbad, CA: Cat # 11965) y medio
de Ham F12 al 50% (Gibco-Invitrogen Corp.: Cat #
11765) suplementado con suero fetal bovino inactivado por calor al
10% (FBS) (Hyclone, Logan, UT: Cat #SH30070.03), y (50 unidades)
penicilina (50 mg) estreptomicina/ml
(Gibco-Invitrogen Corp.: Cat # 15140) en una
incubadora humidificada con CO_{2} al 5% a 37ºC.
Las células fueron cultivadas hasta la
confluencia alrededor de 70-80% (<35 pasajes de
subcultivo). Todos los pasos para la preparación de membranas se
realizaron en hielo. Para cosechar las células, se aspiraron los
medios y se enjuagaron las células con Ca^{2}+, Mg^{2}+ solución
salina tamponada con fosfato libre de Dulbecco (DPBS). La monocapa
celular se eliminó por agitación mecánica suave. Las células se
recogieron por centrifugación a 1000 rpm (5 minutos). Los pasos
siguientes para la preparación de membranas siguió el protocolo
descrito anteriormente para las membranas que expresan receptores
5-HT_{4(c)}.
Se realizaron ensayos de unión de radioligandos
en placas de ensayo de polipropileno de 96 pocillos en un volumen
total del ensayo de 200 \mul conteniendo 1,5-2
\mug de proteína de membrana en 50 mM de HEPES, pH 7,4,
conteniendo tampón de ensayo BSA al 0,025%. Los estudios de unión
por saturación para la determinación de los valores K_{d} del
radioligando se realizaron utilizando
[^{3}H]-G65630 (PerkinElmer Life Sciences Inc.,
Boston, MA: Cat# NET1011; actividad específica \sim 85 Ci/mmol) a
doce concentraciones diferentes que van desde 0,005 nM a 20 nM. Se
realizaron ensayos de desplazamiento para la determinación de los
valores pK_{i} de los compuestos con
[^{3}H]-GRGR65630 a 0,50 nM y once concentraciones
diferentes de compuestos que van desde 10 pM a 100 \muM. Los
compuestos fueron recibidos como 10 mM de soluciones madre en DMSO
(ver sección 3.1), diluidos a 400 \muM en 50 mM de HEPES, pH 7,4 a
25ºC, conteniendo BSA al 0,1% y entonces se hicieron diluciones en
serie (01:05) en el mismo tampón. La unión no específica se
determinó en presencia de 10 \muM de MDL72222 sin etiqueta. Los
ensayos se incubaron durante 60 min a temperatura ambiente y luego
se determinaron las reacciones de unión por radiofiltración en
placas de filtración de 96 pocillos GF/B de fibra de vidrio (Packard
BioScience Co., Meriden, CT) previamente mojadas en polietilenimina
al 0,3%. Las placas de filtración se lavaron tres veces con tampón
de filtración (50 mM de HEPES enfriado en hielo, pH 7,4) para
eliminar la radioctividad no unida. Las placas se secaron, se añadió
35 \mul de líquido de centelleo Microscint-20
(Packard BioScience Co., Meriden, CT) a cada pocillo y se contaron
las placas en un contador de centelleo líquido Packard Topcount
(Packard BioScience Co., Meriden, CT).
Los datos de unión se analizaron utilizando el
procedimiento de regresión no lineal descrito anteriormente para
determinar los valores K_{i}. Se estableció el valor inferior
(mínimo de la curva) en el valor de la unión no específica
determinada en presencia de 10 \muM de MDL72222. La cantidad [L]
en la ecuación de Cheng-Prusoff se definió como la
concentración de [^{3}H]-GR65630.
\global\parskip1.000000\baselineskip
La selectividad para el subtipo de receptor
5-HT_{4} en relación con el subtipo de receptor
5-HT_{3} se calculó como la relación K_{i}
(5-HT_{3A})/K_{i}
(5-HT_{4(c)}). Los compuestos de la
invención que se analizaron en este ensayo tuvieron una selectividad
del subtipo de receptor
5-HT_{4}/5-HT_{3} que variaba
entre aproximadamente 20 hasta aproximadamente 5600, variando por lo
general desde aproximadamente 100 hasta aproximadamente 1700.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo
3
En este ensayo se determinó la potencia
funcional de un compuesto de prueba midiendo la cantidad de AMP
cíclico producido cuando las células HEK-293 que
expresan receptores 5-HT_{4} se pusieron en
contacto con diferentes concentraciones del compuesto de prueba.
Se prepararon células HEK-293
(riñón embrionario humano) establemente transfectadas con ADNc de
receptor 5-HT_{4(c)} humano clonado que
expresaban el receptor con dos densidades diferentes: (1) con una
densidad de alrededor de 0,5-0,6 pmol/mg de
proteína, determinado utilizando un ensayo de unión de radioligandos
de membrana [^{3}H]-GR113808, y (2) con una
densidad de aproximadamente 6,0 pmol/mg de proteína. Las células
fueron cultivadas en frascos T-225 en medio Eagles
modificado de Dulbecco (DMEM) conteniendo 4.500 mg/L de
D-glucosa (GIBCO-Invitrogen Corp.:
Cat # 11965) suplementado con suero fetal bovino al 10% (SFB)
(Gibco-Invitrogen Corp.: Cat #10437), y (100
unidades) penicilina (100 mg) estreptomicina/ml
(Gibco-Invitrogen Corp.: Cat # 15140) en una
incubadora humidificada con CO_{2} al 5% a 37ºC. Las células
fueron cultivadas bajo presión de selección continua por la adición
de geneticina (800 mg/ml: GIBCO-Invitrogen Corp.:
Cat #10131) al medio.
Las células fueron cultivadas hasta la
confluencia alrededor de 60-80%. De veinte a
veintidós horas antes del ensayo, las células se lavaron dos veces,
y se alimentaron con DMEM libre de suero conteniendo 4.500 mg/l de
D-glucosa (GIBCO-Invitrogen Corp.:
Cat #11965). Para cosechar las células se aspiraron los medios y se
añadió 10 ml de Versene (GIBCO-Invitrogen Corp.: Cat
# 15040) a cada frasco T-225. Las células fueron
incubadas durante 5 min a temperatura ambiente y luego desprendidas
del frasco por agitación mecánica. La suspensión celular se
transfirió a un tubo de centrífuga conteniendo un volumen igual de
dPBS previamente calentado (37ºC) y se centrifugó durante 5 min a
1000 rpm. Se desechó el sobrenadante y el sedimento se resuspendió
en tampón de estimulación previamente calentado (37ºC) (equivalente
de 10 ml por 2-3 frascos T-225). Se
anotó este tiempo y se marcó como tiempo cero. Las células se
contaron con un contador Coulter (recuento de más de 8 \mum, el
rendimiento del frasco fue de 1-2 x 10^{7}
células/frasco). Las células fueron resuspendidas a una
concentración de 5 x 10^{5} células/ml en tampón de estimulación
previamente calentado (37ºC) (conforme a lo dispuesto en el kit
flashplate) y previamente incubadas a 37ºC durante 10 min.
Se realizaron los ensayos con AMPc en un formato
de radioinmunoensayo utilizando el sistema de ensayo de activación
de la adenilil ciclasa en placas Flashplate con
^{125}I-AMPc (SMP004B, PerkinElmer Life Sciences
Inc., Boston, MA), según las instrucciones del fabricante.
Las células se cultivaron y prepararon como se
ha descrito anteriormente. Las concentraciones finales de células en
el ensayo fueron de 25 x 10^{3} células/pocillo y el volumen de
ensayo final de 100 \mul. Los compuestos de ensayo fueron
recibidos como 10 mM de soluciones madre en DMSO, diluidos a 400
\muM en 50 mM de HEPES, pH 7,4 a 25ºC, conteniendo BSA al 0,1% y
entonces se hicieron diluciones consecutivas (1:5) en el mismo
tampón. Se realizaron los ensayos de acumulación con AMP cíclico con
11 concentraciones diferentes de compuesto que van desde 10 pM hasta
100 \muM (concentración final del ensayo). Se incluyó una curva de
concentración-respuesta de 5-HT (10
pM a 100 \muM) en cada placa. Las células se incubaron con
agitación a 37ºC durante 15 min y la reacción se extinguió por la
adición de 100 \mul de tampón de detección enfriado en hielo
(según lo dispuesto en el kit flashplate) a cada pocillo. Las placas
se sellaron y se incubaron a 4ºC durante la noche. La radiactividad
de unión fue cuantificada por espectroscopia de proximidad con
centelleo utilizando el Topcount (Packard BioScience Co., Meriden,
CT).
La cantidad de AMPc producido por ml de la
reacción se extrapoló a partir de la curva estándar de AMPc, según
las instrucciones proporcionadas en el manual de usuario del
fabricante. Los datos fueron analizados mediante análisis de
regresión no lineal con el paquete de software GraphPad Prism
utilizando el modelo sigmoidal de 3 parámetros de
dosis-respuesta (pendiente limitada a la unidad).
Los datos de potencia se indican como valores pEC_{50}, el
logaritmo decimal negativo del valor EC_{50}, donde EC_{50}, es
la concentración efectiva para una respuesta máxima del 50%.
Los compuestos de prueba que exhiben un valor
pEC_{50} más alto en este ensayo tienen una mayor potencia para
agonizar el receptor 5-HT_{4}. Los compuestos de
la invención que se analizaron en este ensayo, por ejemplo en la
línea celular (1) que tenían una densidad de aproximadamente
0,5-0,6 pmol/mg de proteína, tuvieron un valor
pEC_{50} que variaba desde aproximadamente 7,5 hasta
aproximadamente 9,0, variando por lo general desde aproximadamente
7,7 hasta aproximadamente 8,5.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo
4
Se obtuvieron células CHO-K1
transfectadas establemente con ADNc de hERG de Gail Robertson de la
Universidad de Wisconsin. Se mantuvieron las células en conservación
criogénica hasta que se necesitaron. Las células se expandieron y
pasaron en medio Eagles modificado de Dulbecco/F12 suplementado con
suero fetal bovino al 10% y 200 \mug/ml de geneticina. Las células
fueron sembradas en cubreobjetos de vidrio recubiertos con
poli-D-lisina (100 \mug/ml), en
platos de 35 mm^{2} (conteniendo 2 ml de medio) con una densidad
que permitió seleccionar las células aisladas para los estudios de
fijación de voltaje de células enteras: Los platos se mantuvieron en
un ambiente humedecido, C02 al 5% a 37ºC.
Se preparó solución extracelular por lo menos
cada 7 días y se conservó a 4ºC cuando no se usaba. La solución
extracelular contenía (mM): NaCl (137), KCl (4), CaCl_{2} (1,8),
MgCl_{2} (1), glucosa (10), ácido
4-(2-hidroxietil)-1-piperazinoetanosulfónico
(HEPES) (10), pH 7,4 con NaOH. La solución extracelular, en ausencia
o presencia de un compuesto de prueba, estaba contenida en
depósitos, de los que fluía en la cámara de registro a
aproximadamente 0,5 ml/min. La solución intracelular se preparó, se
dividió en partes alícuotas y se conservó a -20ºC hasta el día de
uso. La solución intracelular contenía (mM): KCl (130), MgCl_{2}
(1), sal de ácido de etilenoglicol-bis(éter
beta-aminoetílico)N,N,N';N'-tetra-acético
(EGTA) (5), MgATP (5), ácido
4-(2-hidroxietil)-1-piperazinoetanosulfónico
(HEPES) (10), pH 7,2 con KOH. Todos los experimentos se realizaron a
temperatura ambiente (20-22ºC).
Los cubreobjetos sobre los que se sembraron las
semillas fueron transferidos a una cámara de registro y perfundidos
continuamente. Se formaron sellos de gigaohmios entre la célula y el
electrodo de conexión. Una vez conseguida una conexión estable,
comenzó el registro en el modo de fijación de voltaje, con el
potencial de mantenimiento inicial a -80 mV. Después de conseguir
una corriente estable de células enteras, se expusieron las células
al compuesto de ensayo. El protocolo de voltaje estándar fue: pasar
del potencial de mantenimiento de -80 mV a +20 mV durante 4,8 seg,
repolarizar a -50 mV durante 5 segundos y luego volver al potencial
de mantenimiento original (-80 mV). Este protocolo de voltaje se
ejecutó una vez cada 15 seg (0,067 Hz). Las amplitudes pico de
corriente durante la fase de repolarización se determinaron
utilizando el software pCLAMP. Los compuestos de ensayo a una
concentración de 3 \muM fueron perfundidos sobre las células
durante 5 minutos, seguido de un período de lavado de 5 minutos en
ausencia del compuesto. Por último se añadió un control positivo
(cisaprida, 20 nM) a la perfusión para probar la función de la
célula. El paso de -80 mV a +20 mV activa el canal hERG, dando lugar
a una corriente hacia el exterior. El paso de vuelta a -50 mV
produce una corriente de cola hacia el exterior, pues el canal se
recupera de la inactivación y se desactiva.
Las amplitudes pico de corriente durante la fase
de repolarización se determinaron utilizando el software pCLAMP. Los
artículos de control y de ensayo fueron exportados a Origin® (Origin
Corp., Northampton MA), donde las amplitudes de corriente
individuales se normalizaron a la amplitud de corriente inicial en
ausencia del compuesto. Se calcularon las medias de las corrientes
normalizadas y los errores estándares para cada condición y se
representaron en un gráfico en función del transcurso de tiempo del
experimento.
Se realizaron comparaciones entre las
inhibiciones de corriente K^{+} observadas después de la
exposición de cinco minutos para controlar bien el artículo de
ensayo o bien un vehículo de control (generalmente 0,3% DMSO). Las
comparaciones estadísticas entre los grupos experimentales se
realizaron utilizando una prueba t independiente con dos poblaciones
(Microcal Origin v. 6.0). Las diferencias se consideraron
significativas con p <0,05.
Cuanto menor es el porcentaje de inhibición de
la corriente de iones de potasio en este ensayo, menor será el
potencial de los compuestos de ensayo de cambiar el patrón de
repolarización cardíaca en su uso como agentes terapéuticos. Los
compuestos de la invención que se analizaron en este ensayo a una
concentración de 3 \muM normalmente exhibieron una inhibición de
la corriente de iones de potasio de menos de aproximadamente 20%,
más generalmente, menos de aproximadamente 15%.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo
5
El ensayo de permeabilidad
Caco-2 se llevó a cabo para formar un modelo de la
capacidad de los compuestos de ensayo para pasar a través del
intestino y entrar en la corriente sanguínea después de la
administración oral. Se determinó la velocidad a la que los
compuestos de prueba en solución penetraban en una monocapa celular
diseñada para imitar la unión estrecha de las monocapas del
intestino delgado humano.
Se obtuvieron células de Caco-2
(adenocarcinoma de colon humano) de la ATCC (American Type Culture
Collection, Rockville, MD). Para el estudio de permeabilidad, las
células se sembraron con una densidad de 63.000 células/cm^{2} en
filtros de policarbonato Transwell previamente humedecidos (Costar,
Cambridge, MA). Se formó una monocapa celular después de 21 días de
cultivo. Después del cultivo celular en la placa Transwell, se
separó la membrana que contenía la monocapa celular de la placa
Transwell y se introdujo en la cámara de difusión (Costar,
Cambridge, MA). La cámara de difusión se introdujo en el bloque de
calentamiento al que se le suministró agua con circulación externa
regulada termostáticamente a 37ºC para el control de la temperatura.
El colector de aire emitió 95% de 02/5% de CO_{2} a cada mitad de
una cámara de difusión y creó un patrón de flujo laminar a través de
la monocapa celular que fue eficaz en la reducción de la capa límite
no agitada.
El estudio de permeabilidad se realizó con
concentraciones del compuesto de ensayo de 100 \muM y con
^{14}C-manitol para controlar la integridad de la
monocapa. Todos los experimentos se realizaron a 37ºC durante 60
min. Se tomaron muestras a los 0, 30 y 60 minutos de ambos lados,
del donante y del receptor, de la cámara. Las muestras se analizaron
por HPLC o recuento de centelleo líquido para el compuesto de ensayo
y las concentraciones de manitol. Se calculó el coeficiente de
permeabilidad (K_{p}) en cm/seg.
En este ensayo, un valor K_{p} mayor de
aproximadamente 10 x 10^{-6} cm/seg se considera indicativo de
biodisponibilidad favorable. Los compuestos de la invención que se
analizaron en este ensayo exhibieron por lo general valores Kp de
entre cerca de 5 x 10^{-6} cm/seg y 55 x 10^{-6} cm/seg, más
generalmente entre cerca de 20 x 10^{-6} cm/seg y 40 x 10^{-6}
cm/seg.
\vskip1.000000\baselineskip
Ensayo
6
Se prepararon formulaciones en solución acuosa
de los compuestos de prueba de ácido láctico al 0,1% a un pH de
entre aproximadamente 5 y aproximadamente 6. Se trataron unas ratas
Sprague-Dawley (variedad CD, Charles River
Laboratories, Wilmington, MA) con los compuestos de prueba con
administración intravenosa (IV) con una dosis de 2,5 mg/kg o por
sonda oral (PO) con una dosis de 5 mg/kg. El volumen de dosificación
fue de 1 ml/kg para la IV y 2 ml/kg para la administración por vía
oral. Se tomaron muestras consecutivas de sangre de los animales
antes de la dosis, y a los 2 (IV solamente), 5, 15 y 30 minutos, y a
las 1, 2, 4, 8 y 24 horas posteriores a la dosis. Se determinaron
las concentraciones de los compuestos de prueba en el plasma
sanguíneo mediante análisis de espectrometría y cromatografía
líquida de masas (LC-MS/MS) (MDS SCIEX, API 4000,
Applied Biosystems, Foster City, CA) con un límite inferior de
cuantificación de 1 ng/ml.
Se evaluaron los parámetros farmacocinéticos
estándares mediante un análisis no compartimental (Modelo 201 para
IV y Modelo 200 para PO) con WinNonlin (Versión 4.0.1, Pharsight,
Mountain View, CA). El máximo en la curva de concentración de los
compuestos de ensayo en el plasma sanguíneo en función del tiempo se
denomina C. El área bajo la curva de concentración en función del
máximo de la curva de tiempo desde el momento de la dosificación
hasta la última concentración mensurable
(AUC(0-t)) se calculó por la regla
trapezoidal lineal. La biodisponibilidad oral (F(%)), es decir, la
relación de dosis normalizada de AUC(0-t)
para la administración PO a AUC(0-t) para la
administración IV, se puede calcular como:
F(%)=
AUC_{PO}AUC_{IV} x Dosis_{IV}/Dosis_{PO} x
100%
Es de esperar que los compuestos de ensayo que
exhibieron los valores mayores de los parámetros C_{max},
AUC(0-t) y F(%) en este ensayo tengan una
mayor biodisponibilidad cuando se administran por vía oral. Los
compuestos de la invención que se probaron en este ensayo tuvieron
valores C_{max} que van por lo general desde aproximadamente 0,05
hasta aproximadamente 0,47 \mug/ml y valores
AUC(0-t) que van por lo general desde
aproximadamente 0,1 hasta aproximadamente 1,2 \mug por h/ml. A
modo de ejemplo, el compuesto del Ejemplo 2 tenía un valor C_{max}
de 0,11 \mug/ml y un valor AUC(0-t) de 0,54
\mug por h/ml.
\vskip1.000000\baselineskip
Esta lista de referencias citadas por el
solicitante sirve sólo como ayuda al lector. No forma parte del
documento de patente europea. Aunque se ha prestado mucha atención
en la compilación de las mismas, no se puede evitar incurrir en
errores u omisiones declinando la OEP toda responsabilidad a este
respecto.
\bullet EP 908459 A [0004]
\bulletLanglois; Fischmeister.
J. Med. Chem., 2003, vol. 46, 319-344
[0003]
\bullet T.W. Greene; G.M. Wuts.
Protecting Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1999
[0059]
\bullet T. W. Greene; G. M.
Wuts. Protecting Groups in Organic Synthesis. Wiley,
1999 [0062]
\bullet Remington: The Science and Practice of
Pharmacy. Lippincott Williams & White, 2000
[0110]
\bullet H.C. Ansel et al.
Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Lippincott
Williams & White, 1999 [0110]
\bulletCavero et al. Opinión on
Pharmacotherapy, 2000, vol. 1, 947-73
[0164]
\bulletFermini et al. Nature
Reviews Drug Discovery, 2003, vol. 2,
439-447 [0164]
\bulletDehmlow, E. V.;
Westerheide, R. Synthesis, 1992, vol. 10,
947-9 [0176]
\bulletCheng; Prusoff.
Biochemical Pharmacology, 1973, vol. 22,
3099-108 [0250]
Claims (21)
1. Compuesto de la fórmula (I):
donde:
- R^{1} es hidrógeno o alquilo C_{1-3};
- R^{2} es hidrógeno o alquilo C_{1-3};
- R^{3} es alquilo C_{1-3};
- R^{4} es -C(O)R5, -S(O)2R6,
- o R^{3} y R^{4} junto con el átomo de nitrógeno al que se unen forman
- R^{5} es hidrógeno, alquilo C_{1-3}, -NH_{2}, o piridinilo, donde el alquilo C_{1-3} es opcionalmente sustituido con hidroxi;
- R^{6} es alquilo C_{1-3}, -NH_{2}, o imidazolilo, donde el imidazolilo es opcionalmente sustituido con alquilo C_{1-3};
- R^{7} es -NR^{9}S(O)_{2}alquilo C_{1-3}, -NR^{10}C(O)R^{11}, o
- R^{8} es -S(O)_{2}alquilo C_{1-3} o C(O)R^{12};
- R^{9}, R^{10} y R^{11} son cada uno independientemente alquilo C_{1-3} y
- R^{12} es hidrógeno, alquilo C_{1-3} o tetrahidrofuranilo, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato o estereoisómero del mismo.
\vskip1.000000\baselineskip
2. Compuesto de la reivindicación 1, donde
R^{1} es etilo o isopropilo y R^{2} es hidrógeno.
3. Compuesto de la reivindicación 1 o 2, donde
R^{3} es metilo.
4. Compuesto de cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, donde R^{4} es
-C(O)R^{5}.
5. Compuesto de la reivindicación 4, donde
R^{5} es hidrógeno o alquilo C_{1-3}.
6. Compuesto de cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, donde R^{4} es
-S(O)2R^{6}.
7. Compuesto de la reivindicación 6, donde
R^{6} es metilo o
1-metilimidazol-4-ilo.
8. Compuesto de cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, donde R^{4} es
9. Compuesto de la reivindicación 1 o 2, donde
R^{3} y R^{4} junto con el átomo de nitrógeno al cual están
unidos forman
10. Compuesto de la reivindicación 9, donde
R^{8} es -S(O)_{2}CH3,
-C(O)CH_{3}, o
-C(O)-tetrahidrofuran-2-ilo.
11. Compuesto de la reivindicación 1, donde el
compuesto se selecciona de:
{(1S,3R,5R)-8-[2-hidroxi-3-(4-metanosulfonilpiperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{2-hidroxi-3-[4-(tetrahidrofuran-2-carbonil)piperazin-1-il]propil}-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[3-(4-acetilpiperazin-1-il)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{3-[(1,1-dioxotetrahidro-1.6-tiofen-3-il)metilamino]-2-hidroxipropil}-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
amida del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(S)-2-hidroxi-3-(4-metanosulfonilpiperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-2-hidroxi-3-(4-metanosulfonilpiperazin-1-il)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(S)-3-(4-acetilpiperazin-1-il)2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-3-(4-acetilpiperazin-1-il)2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-((S)-2-hidroxi-3-[4((R)-tetrahidrofuran-2-carbonil)piperazin-1-il]propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{(S)-2-hidroxi-3-[4((S)-tetrahidrofuran-2-carbonil)piperazin-1-il]propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-3-(acetilmetilamino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{(R)-2-hidroxi-3-[metil-1H-imidazol-4-sulfonil}amino)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amida
del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
del ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-2-hidroxi-3-(1-metilureido)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
((1S,3R,5R)-8-{2-hidroxi-3-[metil-1H-imidazol-4-sulfonil}amino)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il)amida
del
ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
ácido 3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
{(1S,3R,5R)-8-[2-hidroxi-3-(1-metilureido)propil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico;
y
{(1S,3R,5R)-8-[3-(formilmetilamino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo-[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico.
\vskip1.000000\baselineskip
12. Compuesto de la reivindicación 1, donde el
compuesto es
{(1S,3R,5R)-8-[(R)-3-(acetilmetilamino)-2-hidroxipropil]-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-il}amida
del ácido
3-isopropil-2-oxo-2,3-dihidrobenzoimidazol-1-carboxílico.
13. Composición farmacéutica que comprende una
cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 12 y un soporte farmacéuticamente
aceptable.
14. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 12 para su uso en terapia.
15. Compuesto según la reivindicación 14, para
su uso en el tratamiento de una condición médica en un mamífero
asociada con la actividad del receptor
5-HT_{4}.
16. Compuesto según la reivindicación 15, donde
la condición es un trastorno de motilidad reducida del tracto
gastrointestinal.
17. Compuesto según la reivindicación 15, donde
la condición médica se selecciona entre el síndrome del intestino
irritable, estreñimiento crónico, dispepsia funcional, retraso en el
vaciamiento gástrico, enfermedad por reflujo gastroesofágico,
gastroparesia, íleo postoperatorio, pseudoobstrucción intestinal y
tránsito retardado inducido por fármacos.
18. Uso de un compuesto de cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 12 para la fabricación de un medicamento para
el tratamiento de una condición médica en un mamífero asociada con
la actividad del receptor 5-HT_{4}.
19. Proceso para preparar un compuesto según
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, el proceso
comprendiendo:
- (a)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (III):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
- \quad
- con un compuesto de la fórmula (IV):
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
- (b)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (V):
\vskip1.000000\baselineskip
\newpage
- \quad
- con un compuesto de la fórmula (VI):
- (c)
- hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VIII):
- \quad
- con un compuesto de la fórmula (IX):
(IX)L^{1}-R^{4}
- \quad
- donde L^{1} es un grupo saliente y R^{4} es como se define en esta memoria;
- (d)
- hacer reaccionar un compuesto de fórmula (VIII) con O=C=NP^{1}, donde P^{1} es un grupo protector de amino, y luego quitar los grupos protectores de amino Ps^{1};
- (e)
- cuando R^{2} es hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de la fórmula (VII):
- \quad
- o
- (f)
- cuando R2 es hidrógeno, hacer reaccionar un compuesto de la fórmula (VI) con un compuesto de fórmula (VII'):
- \quad
- donde L^{2} es un grupo saliente.
\newpage
20. Compuesto de la fórmula (VIII):
- donde
- R^{1} es hidrógeno o alquilo C_{1-3};
- R^{2} es hidrógeno o alquilo C_{1-3} y
- R^{3} es alquilo C_{1-3}
- o una sal o un estereoisómero o un derivado protegido del mismo.
\vskip1.000000\baselineskip
21. Método de estudio de un sistema biológico o
muestra in vitro que comprende un receptor
5-HT_{4}, el método comprendiendo:
- (a)
- poner en contacto el sistema biológico o la muestra in vitro con un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 y
- (b)
- determinar el efecto causado por el compuesto en el sistema biológico o muestra.
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|---|---|---|---|---|
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| BRPI0608392A2 (pt) * | 2005-03-02 | 2009-12-29 | Theravance Inc | compostos de quinolinona como agonistas do receptor 5-ht4 |
| MY143574A (en) * | 2005-11-22 | 2011-05-31 | Theravance Inc | Carbamate compounds as 5-ht4 receptor agonists |
| JPWO2009101917A1 (ja) * | 2008-02-13 | 2011-06-09 | エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 | ビシクロアミン誘導体 |
| US8349852B2 (en) | 2009-01-13 | 2013-01-08 | Novartis Ag | Quinazolinone derivatives useful as vanilloid antagonists |
| CN102762572A (zh) | 2010-02-01 | 2012-10-31 | 诺瓦提斯公司 | 作为CRF-1受体拮抗剂的吡唑并[5,1b]*唑衍生物 |
| AR080056A1 (es) | 2010-02-01 | 2012-03-07 | Novartis Ag | Derivados de ciclohexil-amida como antagonistas de los receptores de crf |
| EP2531490B1 (en) | 2010-02-02 | 2014-10-15 | Novartis AG | Cyclohexyl amide derivatives as crf receptor antagonists |
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| CN111225915B (zh) | 2017-10-18 | 2023-03-07 | 朱比兰特埃皮帕德有限公司 | 作为pad抑制剂的咪唑并吡啶化合物 |
| US11629135B2 (en) | 2017-11-06 | 2023-04-18 | Jubilant Prodell Llc | Pyrimidine derivatives as inhibitors of PD1/PD-L1 activation |
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| CN115073311B (zh) * | 2022-03-23 | 2023-05-23 | 河南大学 | 一种高效制备n,n′-二（2羟乙基）苯胺的合成方法 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5223511A (en) | 1987-09-23 | 1993-06-29 | Boehringer Ingelheim Italia S.P.A. | Benzimidazoline-2-oxo-1-carboxylic acid compounds useful as 5-HT receptor antagonists |
| IT1231413B (it) | 1987-09-23 | 1991-12-04 | Angeli Inst Spa | Derivati dell'acido benzimidazolin-2-osso-1-carbossilico utili come antagonisti dei recettori 5-ht |
| JP3829879B2 (ja) | 1994-05-18 | 2006-10-04 | 大正製薬株式会社 | キノリンカルボン酸誘導体 |
| IT1275903B1 (it) | 1995-03-14 | 1997-10-24 | Boehringer Ingelheim Italia | Esteri e ammidi della 1,4-piperidina disostituita |
| US6069152A (en) | 1997-10-07 | 2000-05-30 | Eli Lilly And Company | 5-HT4 agonists and antagonists |
| GB9721139D0 (en) * | 1997-10-07 | 1997-12-03 | Glaxo Group Ltd | Medicaments |
| IT1298271B1 (it) | 1998-02-18 | 1999-12-20 | Boehringer Ingelheim Italia | Esteri ed ammidi dell'acido 2-oxo-2,3-diidro-benzimidazol-1- carbossilico |
| WO2000064441A2 (en) | 1999-04-28 | 2000-11-02 | Respiratorius Ab | Compound for use as a medicament for treatment of disorders involving bronchocontraction |
| CN1355698A (zh) | 1999-06-15 | 2002-06-26 | 呼吸器有限公司 | 可用作治疗有关支气管收缩的机能障碍的药物的化合物 |
| IT1313625B1 (it) | 1999-09-22 | 2002-09-09 | Boehringer Ingelheim Italia | Derivati benzimidazolonici aventi affinita' mista per i recettori diserotonina e dopamina. |
| PL1664036T3 (pl) | 2003-09-03 | 2012-04-30 | Pfizer | Związki benzimidazolonu wykazujące działanie agonistyczne względem receptora 5-ht4 |
| TW200533348A (en) | 2004-02-18 | 2005-10-16 | Theravance Inc | Indazole-carboxamide compounds as 5-ht4 receptor agonists |
| TWI351282B (en) | 2004-04-07 | 2011-11-01 | Theravance Inc | Quinolinone-carboxamide compounds as 5-ht4 recepto |
| DE602005016446D1 (de) | 2004-11-05 | 2009-10-15 | Theravance Inc | 5-HT4-Rezeptoragonistenverbindungen |
| DE602005014566D1 (de) | 2004-11-05 | 2009-07-02 | Theravance Inc | Chinolinon-carboxamid-verbindungen |
| ATE469897T1 (de) | 2004-12-22 | 2010-06-15 | Theravance Inc | Indazolcarbonsäureamidverbindungen |
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