ES2424992T3 - Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada - Google Patents

Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada Download PDF

Info

Publication number
ES2424992T3
ES2424992T3 ES04742459T ES04742459T ES2424992T3 ES 2424992 T3 ES2424992 T3 ES 2424992T3 ES 04742459 T ES04742459 T ES 04742459T ES 04742459 T ES04742459 T ES 04742459T ES 2424992 T3 ES2424992 T3 ES 2424992T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
immunoglobulin
igg
polyclonal
compositions
liquid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES04742459T
Other languages
English (en)
Inventor
Annie Bardat
Edith Begin
Nassirah Khandoudi
Olivier Just
Sami Chtourou
Roland Schmitthaeusler
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
LFB SA
Original Assignee
LFB SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by LFB SA filed Critical LFB SA
Application granted granted Critical
Publication of ES2424992T3 publication Critical patent/ES2424992T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

Formulación estabilizadora para una composición de inmunoglobulina G policlonal, caracterizada porque estáconstituida por un azúcar alcohólico, la glicina, con una concentración comprendida entre 7 g/l y 10 g/l y undetergente no iónico con una concentración comprendida entre 20 y 50 ppm, para ser de este modo adecuada parala estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida y para la estabilización decomposiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.

Description

Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada
La invención se refiere a una formulación estabilizadora, farmacéuticamente aceptable, para la estabilización y la conservación de composiciones de inmunoglobulina G (IgG) bien en forma líquida, o bien en forma liofilizada.
Actualmente, se tratan numerosas patologías, por ejemplo de origen autoinmune, mediante concentrados de IgG, lo que ha generado una situación de escasez en Europa y en los Estados Unidos de América a lo largo de estos últimos años.
Por ello, existe la necesidad cada vez mayor de producir concentrados de IgG, habitualmente acondicionados en pH ácidos e inyectables por vía intravenosa, a partir, por ejemplo de plasma humano. Con el crecimiento de estas necesidades de IgG, la estabilización de estos concentrados de IgG inyectables por vía intravenosa (IgGIV) para su uso terapéutico y para su conservación bien en forma líquida, o bien en forma liofilizada, reviste una importancia fundamental.
Para ello, se sabe que es necesario estabilizar las IgGIV para evitar, en particular, la formación de agregados (oligómeros y polímeros) susceptibles de activar el sistema de complemento con los riesgos asociados de reacciones anafilácticas. Por otra parte, la presencia de dímeros en las IgGIV se ha correlacionado con bajadas de presión arterial in vivo (Bleeker, W. K. y otros, Blood, 95, 2000, págs. 1.856-1.861). También pueden producirse otras degradaciones fisicoquímicas durante la conservación de las IgG como, entre otras, la oxidación y la hidrólisis.
La estabilización de las formas liofilizadas o líquidas de las IgG precisa, por lo tanto, la adición de compuestos, tradicionalmente seleccionados entre los azúcares y los ácidos aminados, con el fin de obtener no solo unas composiciones de IgG no degradas adecuadas a un uso terapéutico, sino también unas composiciones de IgG que presentan una estabilidad incrementada en almacenamiento.
La estabilización de las formas liofilizadas de composiciones proteínicas y, en particular, de IgG, mediante la adición de estabilizadores específicos, ha sido objeto de muy numerosos estudios. Los que se citan en las publicaciones científicas de M. Pikal, "Freeze-Drying of Proteins, Part 2: Formulation Selection", Biopharm, 3 (9), págs. 26-30 (1990) y de Arakawa y otros, Pharm. Res., 1991, 8 (3), págs. 285-291, muestran que la adición de un excipiente en composiciones proteínicas antes de la liofilización aumenta la estabilidad durante la liofilización y/o la estabilidad del producto liofilizado durante su almacenamiento. Entre estos estabilizadores, algunos son conocidos sin embargo como agentes precipitantes de proteínas superiores a aproximadamente 100 kDa. De este modo, el uso de polietilenoglicol (PEG) 3.000-6.000 es inaceptable en la fase de congelación para la liofilización de composiciones proteínicas correspondientes. Osterberg y otros (Pharm. Res., 1997, 14 (7), págs. 892-898) ha mostrado la eficacia de una mezcla de histidina, de sacarosa, de un tensioactivo no iónico y de cloruro de sodio para la estabilización de las formas liofilizadas del factor VIII recombinante y la adición de PEG no ha mejorado su estabilidad. Por otra parte, Guo y otros (Biomacromol., 2002, 3 (4), págs. 846-849) precisan que la liofilización de la peroxidasa de rábano en presencia de PEG no permite conservar la estructura original de esta. La presencia de PEG no parece, por lo tanto, deseable.
Hay disponibles en el mercado composiciones de IgGIV liofilizadas, por ejemplo bajo los nombres comerciales Polygam™ (American Red Cross), Gammar IV™ (Armour Pharmaceutical Company) y Venoglobulin™I (Alpha) que contienen como estabilizadores glucosa al 2 %, sacarosa al 5 % y D-manitol al 2 % respectivamente.
La patente US 5 945 098 describe unas composiciones de IgG estables en almacenamiento que comprende, a título de estabilizadores, uno o varios ácidos aminados, como la glicina, un detergente no iónico, polietileno glicol (PEG) (necesariamente presente en todas estas composiciones) y eventualmente otros compuestos, como la polivinilpirrolidona (PVP), azúcares y sales.
La solicitud EP 0 196 761 describe unos compuestos que solo se pueden utilizar como estabilizadores durante la pasteurización de soluciones de IgG. Entre estos, un estabilizador principal es un azúcar (monosacárido, disacárido
o azúcar alcohólico), al que se añade un estabilizador secundario que puede ser al menos un ácido aminado neutro, una sal neutra de ácido inorgánico, una sal de ácido carboxílico y un tensioactivo.
La solicitud de patente internacional WO 97/04801 describe el efecto estabilizador de formulaciones de anticuerpos monoclonales liofilizados (de tipo inmunoglobulina G y E) que comprende unos excipientes específicos. Entre estos excipientes, la combinación glicina/manitol no se escoge por falta de eficacia frente a otras combinaciones como sacarosa/glicina y sacarosa/manitol.
No obstante, se constata que algunos estabilizadores adecuados para las formas liofilizadas de las IgGIV pueden resultar totalmente ineficaces para las composiciones de IgGIV líquidas.
Así pues, las composiciones de IgGIV líquidas, disponibles comercialmente, comprenden unos estabilizadores específicos diferentes de los que se utilizan para la forma liofilizada correspondiente. A título de ejemplo, las composiciones líquidas de IgGIV que contienen como estabilizadores maltosa al 10 %, glicina entre 0,16 y 0,24 M y
D-sorbitol al 5 % se conocen respectivamente bajo los nombres comerciales Gamimune N™, Gamimune N™ 10% (Miles Inc.) y Venoglobulin™ (Alpha).
La diferente naturaleza de los compuestos utilizados para la estabilización de las composiciones de IgG en forma líquida y en forma liofilizada ha llevado a algunos autores a buscar estabilizadores o mezclas de estabilizadores idénticos que permitan conservar las composiciones de IgG en las dos formas a la vez. A este respecto, estudios recientes han tratado sobre la estabilización de composiciones de IgGIV, Vigam-S y Vigam Liquid (nombres de comerciales de National Blood Authority, Inglaterra) líquidas y tras la liofilización (Vigam-S) que comprenden una mezcla idéntica de estabilizadores, esto es la albúmina y la sacarosa (K. Chidwick y otros, Vox Sanguinis, 77, págs. 204-209, 1999). Sin embargo, la solución Vigam Liquid se acondiciona en un pH ácido (pH 5) lo que presenta el inconveniente de transformar, por hidrólisis, la sacarosa en azúcares reductores (fructosa y glucosa) que se condensan con los residuos aminados de la lisina de las IgG y de la albúmina para dar una base de Schiff inestable que desarrolla unos productos de Maillard (empardecimiento de la solución). Es evidente que el empleo de excipientes que evolucionan a lo largo de la conservación de las IgG no resulta satisfactorio, ya que no es posible el control de la reacción, una vez iniciada esta.
Por otra parte, algunos de los estabilizadores mencionados con anterioridad, como la maltosa o la sacarosa, no se pueden utilizar sin riesgo en aquellos sujetos que presentan insuficiencia renal y/o que padecen diabetes.
Con el fin de resolver los anteriores inconvenientes, la solicitante se ha comprometido a desarrollar una formulación estabilizadora única, farmacéuticamente aceptable, que cumple con el objetivo de garantizar la estabilización de las dos formas de conservación consideradas de las IgG a la vez y conservar, e incluso mejorar, la eficacia terapéutica de estas IgG.
Esta formulación estabilizadora presenta, en particular, la ventaja de precisar la aplicación de una única formulación lo que facilita el control de las materias primas y conlleva una reducción de los costes de fabricación asociados a la simplificación de los esquemas de producción.
Para ello, partiendo del hecho de que se utilizan azúcares y ácidos aminados como estabilizadores, la solicitante ha mostrado, sobre la base de ensayos preliminares, que algunos de estos aportaban a las composiciones de IgG líquidas unas propiedades protectoras frente a las desnaturalizaciones térmica y por agitación provocadas, pero con unos resultados variables según la naturaleza del azúcar y del ácido aminado seleccionados, y que, además, los efectos estabilizadores de una mezcla, por ejemplo de dos componentes, no se podrían inferir del efecto estabilizador que se obtiene con cada componente considerado de forma individual. Además, entre los azúcares probados, algunos de estos no eran estables en pH ácidos que corresponden al medio de acondicionamiento óptimo de las composiciones de IgG líquidas.
Por otra parte, los estabilizadores escogidos tras los ensayos previos no permitían minimizar la inestabilidad de las composiciones de IgG líquidas frente a la oxidación provocada. La solicitante ha añadido entonces un detergente no iónico como el Tween® 80 o el Triton® X 100 y ha obtenido resultados satisfactorios.
La invención se refiere a una formulación estabilizadora para una composición de inmunoglobulina G policlonal, caracterizada porque está constituida por un azúcar alcohólico, la glicina, con una concentración comprendida entre 7 g/l y 10 g/l, y un detergente no iónico con una concentración comprendida entre 20 y 50 ppm, para ser de este modo adecuada para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida y para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.
La formulación de acuerdo con la invención está constituida por dichos azúcar alcohólico, glicina y detergente no iónico. Dicha formulación estabilizadora constituida exclusivamente por estos tres compuestos de acuerdo con la invención, presenta la ventaja de ofrecer una estabilización conjunta de las composiciones de IgG liofilizadas y no liofilizadas, y una reducción de los tiempos y de los costes de preparación a escala industrial gracias a la presencia de un número mínimo eficaz de estabilizadores.
En el marco de la invención, las composiciones de IgG líquidas significan tanto unas soluciones acuosas de concentrados de IgG policlonal, directamente obtenidas mediante el fraccionamiento de plasma humano, como las reconstituidas en un medio acuoso adecuado tras la liofilización de las anteriores. El medio acuoso de reconstitución es agua para preparación inyectable (agua PPI) que puede contener unos excipientes farmacéuticamente aceptables y compatibles con la IgG. Estas composiciones de IgG pueden experimentar a continuación unas etapas específicas de inactivación/eliminación de virus. De preferencia, los métodos de fraccionamiento del plasma son los que describen Cohn y otros (J. Am. Chem. Soc., 68, pág. 459, 1946), Kistler y otros (Vox Sang., 7, 1962, págs. 414424), Steinbuch y otros (Rev. Franç. Et. Clin. et Biol., XIV, pág. 1.054, 1969) y en la solicitud de patente WO 94/9334.
Entre los azúcares considerados, los azúcares alcohólicos los ha seleccionado la solicitante basándose en criterios de estabilidad en pH ácidos de acondicionamiento de las composiciones de IgG, lo que evita las reacciones de Maillard en la inmunoglobulina G, de compatibilidad farmacéutica, y en criterios relativos a su acción estabilizadora únicamente de composiciones líquidas de IgG o bien de las liofilizadas. En efecto, se ha observado que un azúcar alcohólico dado utilizado como único estabilizador solo podía corresponder a una forma líquida.
Entre los azúcares alcohólicos, los que se utilizan de preferencia de acuerdo con la invención son el manitol, el sorbitol o sus isómeros, y, de manera aun más preferente, el manitol.
La glicina, presente en la formulación estabilizadora de la invención, es conocida por ser adecuada para la estabilización de composiciones de IgG, pero en forma líquida únicamente.
La adición de un detergente no iónico ha mejorado, por sinergia, de forma inesperada, el efecto protector de la formulación. Los detergentes no iónicos adecuados se seleccionan de manera ventajosa dentro del grupo constituido por el Tween®80 (polioxietilenosorbitano-monooleato), el Tween®20 (polioxietilenosorbitanomonolaurato), el Triton® X 100 (octoxinol 10) y el Pluronic®F68 (glicol de polietileno polipropileno). De preferencia, se han utilizado el Tween®80 y el Triton® X 100.
Las concentraciones de estos compuestos las seleccionará el experto en la materia de tal modo que se obtenga el efecto estabilizador deseado de las composiciones de IgG liofilizadas y no liofilizadas.
De preferencia, las concentraciones de manitol están comprendidas entre 30 g/l y 50 g/l.
La invención también se refiere a las composiciones de IgG en forma líquida y/o en forma liofilizada que comprenden la formulación estabilizadora de la invención, pudiendo además ser para uso terapéutico y, en particular, inyectables por vía intravenosa. Estas composiciones de IgG, en forma líquida y/o en forma liofilizada, gracias a la presencia de la formulación estabilizadora de la invención, presentan una tasa de dímeros inferior al 7 %, tras un almacenamiento durante un periodo de 24 meses a 4 ºC. Se observa que el almacenamiento de las composiciones de IgG en forma líquida durante 6 meses a temperatura ambiente genera una tasa de polímeros muy por debajo de las normas fijadas por la Farmacopea Europea (3 %), esto es menos de un 0,3 % aproximadamente. Las composiciones de IgG en forma liofilizada presentan una tasa de polímero aproximadamente 10 veces menor a la permitida, tras su almacenamiento durante 12 meses a temperatura ambiente o durante 6 meses a 40 ºC.
La invención se refiere, además, al uso de una formulación estabilizadora de acuerdo con la invención, para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida directamente obtenidas por fraccionamiento de plasma humano, en forma liofilizada y de las obtenidas tras la reconstitución en un medio acuoso adecuado de las formas liofilizadas.
Los siguientes ejemplos ilustran la invención sin por ello limitar su alcance, en referencia a la figura 1 que representa un gráfico de las variaciones de la presión arterial en ratas en función del tiempo, tras la inyección de diferentes composiciones de inmunoglobulina G mencionadas con anterioridad.
Ejemplo 1: Elaboración de la formulación estabilizadora.
Se utiliza como composición de IgG un concentrado obtenido de acuerdo con el método desarrollado por la solicitante en la solicitud de patente internacional WO 02/092632. Este concentrado, que contiene alrededor de 50 g/l de IgG, se ajusta a un pH comprendido entre 4,6 y 4,8, y se somete a un tratamiento térmico de 2 horas a 56 ºC para eliminar las impurezas termolábiles.
A este concentrado de IgG, se le añade el manitol, la glicina y el Tween®80 o el Triton® X 100, solos o mezclados, (soluciones de prueba) con las concentraciones que se detallan en la tabla 1.
Tabla 1: Características de las soluciones de prueba 10
Solución de prueba
Manitol (50 g/l) Glicina (10 g/l) Detergente (50 ppm)
A (de control)
0 0 0
B
1 0 0
C
0 1 0
D
1 1 0
E
0 0 1 (Triton® X 100)
F
0 0 1 (Tween®80)
G
1 0 1 (Triton® X 100)
H
1 0 1 (Tween®80)
I
1 1 1 (Triton® X 100)
J
1 1 1 (Tween®80)
0 : Ausencia del compuesto considerado 1 : Presencia del compuesto considerado
Las soluciones de prueba se someten a continuación a diferentes pruebas de estrés térmico, de agitación y de oxidación con el fin de determinar su grado de desnaturalización mediante la observación de la presencia eventual de residuos (partículas, agregados).
La prueba de estrés térmico se realiza de acuerdo con la publicación de P. Fernandes y otros, Vox Sanguinis, 1980, 39, págs. 101-112. De forma resumida, unas muestras de 5 ml de solución de prueba se colocan dentro de unos recipientes de cristal de 10 ml de capacidad y se calientan a continuación al baño maría a 57 ºC durante 4 horas. La influencia del calentamiento en las soluciones de prueba se determina mediante la medición de la diferencia de turbidez después y antes de la prueba de estrés térmico. Cuanto más bajos son los valores de turbidez más estables son las soluciones de IgG frente al estrés térmico aplicado.
Los ensayos de estrés de agitación se llevan a cabo tal y como se describe en la publicación de H. Levine y otros, Journal of Parental Science & technology, 1991, vol. 45, nº. 3, págs. 160-165. Así pues, se colocan unas muestras de 5 ml de solución de prueba dentro de unos tubos de cristal de 10 ml de capacidad protegidos de la luz, a continuación se pone cada tubo en posición tumbada sobre un agitador IKA Vibrax VXR (de la marca Fisher Scientific, Francia), y se agitan a continuación a 150 vueltas por minutos durante 18 horas a temperatura ambiente. Los resultados de la prueba de estrés de agitación se determinan mediante la comparación de los aspectos visuales de las soluciones de prueba antes y después de la prueba de estrés aplicada. Para ello, se define una escala con los siguientes valores arbitrarios:
0,25: solución clara con una o dos partículas en suspensión;
0,50: solución clara con algunas partículas finas en suspensión;
0,75: solución clara con unas pocas partículas más en suspensión que para la de 0,50;
2,0: aspecto visual ligeramente modificado con más partículas en suspensión;
5,0: numerosos filamentos o partículas en suspensión;
10,0: partículas más gruesas y agregados, e incluso coagulados.
La prueba de estrés de oxidación se realiza sobre unas muestras de 5 ml de solución de prueba situadas dentro de unos recipientes de cristal de 10 ml. La superficie del líquido se pone en presencia de una atmósfera rica en oxígeno (O2 > 21 %) durante entre 3 y 4 s. Tras el cierre y la agitación de los recipientes, estos se enfrían a una temperatura de 5 ºC durante 15 minutos. Los resultados se determinan mediante la comparación de los aspectos visuales de las soluciones de prueba antes y después de la prueba de estrés de oxidación aplicada. Los resultados se pueden cuantificar de acuerdo con una escala de valores idéntica a la definida para la prueba de estrés de agitación.
Los diferentes resultados de medición que se obtienen tras la aplicación de las diferentes pruebas de estrés anteriores, se presentan en la tabla 2.
Tabla 2
Solución de prueba
Turbidez (NTU*) Antes de la prueba de estrés Tras prueba de estrés de agitación Tras prueba de estrés de oxidación
A
0,73 0,5 5,0 2,0
B
0,21 0,5 3,5 2,0
C
0,63 0,5 0,5 3,5
D
0,42 0,25 10,0 2,0
E
0,84 0,5 1,25 1,25
F
0,36 0,5 1,25 2,0
G
0,45 0,25 0,75 0,5
H
0,16 0,25 0,5 1,25
I
0,41 0,25 0,5 0,75
J
0,39 0,25 0,5 1,25
*NTU: Normalized Turbidity Units
Los resultados obtenidos muestran, en primer lugar, que la adición de un único estabilizador a una solución de concentrado de IgG (soluciones B, C, E, F) con respecto a la solución de control A que no comprende estabilizador, permite mejorar la protección frente a dos de las tres pruebas de estrés aplicadas. Por otra parte, la presencia conjunta de manitol y de glicina (solución D) no es deseable, siendo los resultados de la prueba de estrés de agitación claramente inferiores a los que se obtienen con el manitol y la glicina solos (soluciones B o C) o incluso con respecto a la solución de control A. Este resultado indica la importancia de la elección de los componentes para la elaboración de la formulación estabilizadora de acuerdo con la invención que no se puede inferir, en
consecuencia, únicamente de los efectos de los estabilizadores considerados de forma individual. En cambio, los ensayos llevados a cabo sobre las soluciones de prueba muestran que las formulaciones específicas de los estabilizadores considerados I y J ofrecen una protección muy satisfactoria frente a la desnaturalización vinculada a las tres pruebas de estrés aplicadas con respecto a la solución de control A que no comprende estabilizador. Las soluciones de prueba G y H que contienen las formulaciones estabilizadoras que no son de acuerdo con la invención, dan no obstante también unos resultados satisfactorios en esta etapa.
Ejemplo 2
Con el fin de determinar de una forma cuantitativa la tasa de polímeros y, en particular, de dímeros presentes en las soluciones de prueba G, H, I y J que han experimentado la prueba de estrés de agitación de acuerdo con el ejemplo 1, estas se someten a una cromatografía de exclusión estérica de acuerdo con el modo operativo que se describe en el Método de la Farmacopea Europea (Farmacopea Europea, cuarta edición, capítulo "Inmunoglobulina humana normal para administración par vía intravenosa", método 2.2.29).
La tabla 3 presenta los porcentajes obtenidos de dímeros y polímeros.
Tabla 3
Solución de prueba
Dímeros (%) Polímeros (%)
G
5,90 3,30
H
7,11 3,37
I
4,98 2,17
J
3,50 1,80
Los porcentajes más bajos de polímeros se obtienen con las soluciones de prueba I y J. Estos resultados confirman que las formulaciones específicas de los estabilizadores considerados I y J ofrecen una protección muy satisfactoria frente a la desnaturalización vinculada a la prueba de estrés de agitación aplicada, tal y como se describe en el ejemplo 1.
Tras la selección de las fórmulas I y J, sólo se escoge la solución de prueba J para el siguiente ejemplo, ya que esta contiene un detergente no iónico farmacéuticamente aceptable, esto es el Tween®80.
Ejemplo 3
La solución J en forma líquida (denominada de aquí en adelante “IgG líquida”) se somete a unos ensayos de estabilidad en función del tiempo de almacenamiento en unas condiciones habituales de temperatura (4 ºC). Se procede a unos ensayos idénticos para la solución J liofilizada (duración de la liofilización de 45 ± 3 h), denominada de aquí en adelante “IgG liofilizada”. Estos ensayos de estabilidad se llevan a cabo sobre las soluciones J líquidas, reconstituidas llegado el caso con agua para preparación inyectable. Estos consisten en el seguimiento en un periodo de tiempo de 24 meses, de la evolución de los cuatro parámetros que se definen a continuación, tres de los cuales se determinan en referencia los métodos que se indican en la Farmacopea Europea, cuarta edición, capítulo "Inmunoglobulina humana normal para administración por vía intravenosa":
(a)
Evolución de la tasa de dímeros determinada mediante cromatografía de exclusión estérica (método 2.2.29);
(b)
Evolución de la actividad anticomplementaria (método 2.6.17); y
(c)
Evolución del grado de anticuerpos específicos contra el virus de la hepatitis B, anti HBs (método 2.7.1).
El cuarto parámetro (d) define la evolución de las tasas de IgG3 mediante una dosificación nefelemétrica conocida por el experto en la materia, en presencia de anti IgG3 específicas (DADE-Behring: kit anti IgG3).
Las mediciones se llevan a cabo respectivamente tras un periodo de almacenamiento de 12 meses y de 24 meses después de la preparación de la solución J líquida (t0).
Los resultados de las mediciones obtenidos para cada ensayo se presentan en las siguientes tablas y los valores que se ofrecen representan los valores medios de los tres ensayos.
(a) Tasa de dímeros: tabla 4
t0 (%)
t12 meses (%) t24 meses (%)
IgG líquida
3,2 ± 0 5,0 ± 1,0 5,5 ± 1,1
IgG liofilizada
3,2 ± 0 3,5 ± 0,7 5,0 ± 1,0
El aumento de la tasa de dímeros a lo largo del tiempo de almacenamiento se mantiene dentro de los límites de precisión de los ensayos y no es lo suficientemente significativo como para que se pueda constatar una degradación cuantitativa de las composiciones consideradas.
(b) Actividad anticomplementaria: tabla 5
t0 (%)
t12 meses (%) t24 meses (%)
IgG líquida
35 ± 0 30 ± 6 28 ± 5
IgG liofilizada
31 ± 0 31 ± 4 31 ± 7
También se observa un ligero descenso de la actividad anticomplementaria para las composiciones de IgG líquidas, mientras que la relativa a las composiciones de IgG liofilizadas no varía. Esta disminución no tiene una repercusión clínica, únicamente un aumento de esta actividad sería desfavorable en términos de uso.
(c) Dosificación anti HBs: tabla 6
t0 (Ul/ml)
t12 meses (Ul/ml) t24 meses (Ul/ml)
IgG líquida
12,0 ± 0 11,5 ± 2,5 11,0 ± 2,0
IgG liofilizada
10,0 ± 0 10,0 ± 2,2 10,5 ± 2,4
Aunque parece producirse un muy ligero descenso en las composiciones de IgG líquidas, no se observa ninguna variación importante, en particular para las composiciones de IgG liofilizadas.
(d) Tasa de IgG3: tabla 7
t0 (g/l)
t12 meses (g/l) t24 meses (g/l)
IgG líquida
1,1 1,0 ± 0,2 1,1 ± 0,1
IgG liofilizada
1,1 0,9 ± 0,1 1,1 ± 0,1
Las variaciones observadas se inscriben en el margen de incertidumbre de los valores de las tasas de IgG3. Estas no son, por lo tanto, significativas.
Los cuatro parámetros analizados anteriormente demuestran que la formulación de la presente invención es especialmente adecuada para la estabilización de composiciones de IgG ya sea en forma líquida, o en forma liofilizada durante 24 meses a una temperatura de 4 ºC sin una evolución importante de estas, lo que se traduciría, en el caso contrario, en una degradación del producto y por tanto no permitiría su uso clínico.
Ejemplo 4
Se utiliza como composición de IgG, la definida en el ejemplo 1. A este concentrado de IgG se le añade manitol, glicina y Tween®80 de acuerdo con unas concentraciones respectivas de 32 g/l, 7 g/l y 50 ppm. La solución K en forma líquida obtenida de este modo (denominada de aquí en adelante “IgG líquida”) se somete a unos ensayos de estabilidad en función del tiempo de almacenamiento a 4 ºC, a temperatura ambiente y a 40 ºC. Se procede a unos ensayos idénticos para la solución K liofilizada (duración de la liofilización de 45 ± 3h), denominada de aquí en adelante “IgG liofilizada”. Estos ensayos de estabilidad se llevan a cabo sobre las soluciones K líquidas, reconstituidas llegado el caso con agua para preparación inyectable. Estos consisten en el seguimiento durante un periodo de tiempo de 12 meses de la evolución de la tasa de polímeros determinada mediante cromatografía de exclusión estérica en referencia al método 2.2.29 indicado en la Farmacopea Europea, detallado en el ejemplo 3. De acuerdo con las normas fijadas por la Farmacopea Europea, el umbral máximo permitido es del 3 %.
Las mediciones se llevan a cabo respectivamente tras un periodo de almacenamiento de 3, 6 y 12 meses después de la preparación de la solución K líquida (t0).
Los resultados obtenidos de las mediciones para cada ensayo, en las tres temperaturas de almacenamiento anteriores, se presentan respectivamente en las siguientes tablas 8, 9 y 10, y los valores que se ofrecen representan los valores medios de los tres ensayos.
Tabla 8 5
T: 4 ºC
t0 (%) t3 meses (%) t6 meses (%) t12 meses (%)
IgG líquida
0,057 ± 0,003 0,02 ± 0,005 0,2 ± 0,03 -
IgG liofilizada
0,23 ± 0,05 0,2 ± 0,08 0,23 ± 0,09 0,18 ± 0,07
Tabla 9
T: ambiente
t0 (%) t3 meses (%) t6 meses (%) t12 meses (%)
IgG líquida
0,057 ± 0,003 0,02 ± 0,01 0,19 ± 0,03 -
IgG liofilizada
0,23 ± 0,05 0,24 ± 0,08 0,20 ± 0,1 0,20 ± 0,01
Tabla 10
T: 40 ºC
t0 (%) t3 meses (%) t6 meses (%) t12 meses (%)
IgG líquida
0,057 ± 0,003 1,20 ± 0,08 6,23 ± 0,03 -
IgG liofilizada
0,47 ± 0,3 0,55 ± 0,1 0,20 ± 0,1 -
El tiempo de almacenamiento de las composiciones de IgG líquidas es de 3 meses a 40 ºC. Al término de 6 meses de almacenamiento de estas a 4 ºC y a temperatura ambiente, la tasa de polímeros observada está muy por debajo de las normas fijadas por la Farmacopea Europea. Para la composiciones de IgG liofilizadas, el almacenamiento durante 12 meses a 4 ºC y a temperatura ambiente genera una tasa de polímero 10 veces menor que la permitida. Se observa la misma tasa tras un almacenamiento de 6 meses a 40 ºC.
Ejemplo 5
Este ejemplo está destinado a confirmar que las soluciones de la invención, que presentan una tasa de dímeros inferior al 7 %, no inducen efectos hipotensores tras su inyección in vivo. Según Bleeker W. K. y otros (Blood, 95, 2000, págs. 1.856-1.861), los dímeros de inmunoglobulina G tienen unas propiedades hipotensivas in vivo más importantes cuanto más alto es su contenido en la muestra de IgG que hay que inyectar. El tratamiento de enfermedades auto-inmunes que precisan la inyección de dosis masivas de IgG puede presentar, por lo tanto, riesgos en aquellos pacientes que padecen hipotensión si no se controla el contenido de los dímeros de IgG.
El objetivo de los estudios presentados en este ejemplo es evaluar y comparar los efectos hemodinámicos de dos soluciones de IgG en forma líquida, que son respectivamente una solución de IgG clásica (solución T - IgG: 50 g/l; sacarosa: 100 g/l; NaCl: 3 g/l; pH: 6,5), que presenta una tasa de dímeros del 11,50 %, y la solución K del ejemplo anterior que presenta una tasa de dímeros del 6,3 %, en ratas anestesiadas preparadas.
Modo operativo
Se anestesian unas ratas macho adultas Sprague-Dawley (IFFA-Credo: Francia) de 180-200 g mediante una inyección intraperitoneal de pentobarbital (Sanofi - Francia) a razón de 60 mg/kg. La rata anestesiada se tumba sobre la espalda en un colchón termostatizado a 37 ºC. Un catéter colocado en la carótida, unido a un sensor de presión y a un registrador clásicos, permite medir de forma continua la presión arterial. Una cánula traqueal permite despejar las vías respiratorias. Las inyecciones intravenosas de IgG (soluciones K y T) se realizan a través de un catéter situado en la vena yugular del animal, a razón de 2,66 ml/120 min.
Se miden las variaciones de la presión arterial (mm Hg) de tres grupos de 6 ratas cada uno, en función del tiempo:
-
un grupo de control, que recibe suero fisiológico;
-
un grupo tratado, que recibe la solución T a razón de 0,65 g/kg; y
-
un grupo tratado, que recibe la solución K a razón de 0,65 g/kg.
Los ensayos comienzan con una fase previa de estabilización de 20 min. El registro de forma continua de la presión arterial empieza en t0-10 min (t0 = inyección).
Los resultados de estos estudios se infieren del gráfico de la figura 1, en la cual cada punto del gráfico representa un valor medio, con la desviación-tipo, de 6 ensayos. El análisis estadístico se realiza mediante el análisis de la varianza seguido de la prueba de Scheffé conocida por el experto en la materia.
Estos resultados muestran que los valores de la presión arterial, previamente a la inyección de las IgG, son estables y comparables en los tres grupos de ratas. En t0+10 min, se observa una caída de la presión arterial que alcanza su mínimo aproximadamente en t0+15 min con un valor inferior al 50 % del valor inicial antes de la inyección (que pasa de alrededor de 100 mm Hg a alrededor de 50 mm Hg), seguida de un retorno progresivo a los valores iniciales de presión que se alcanzan entre 50 y 60 minutos tras el inicio de la inyección.
Ejemplo 6
Este ejemplo está destinado a verificar que la solución J en forma líquida contribuye a la reducción de la viscosidad sanguínea, con respecto a unas soluciones que comprenden proteínas y diferentes excipientes. A este título, se han llevado a cabo dos ensayos de sedimentación de glóbulos rojos por gravedad de acuerdo con los métodos conocidos por el experto en la materia, a temperatura ambiente y a T = 37 ºC.
Modo operativo
Se lavan unos glóbulos rojos humanos de grupo O+ en presencia de una solución anticoagulante de citrato trisódico 0,2 M (1/9, v/v) tres veces con una solución salina de PBS en la concentración habitual, pH 7,4. Se preparan unas 5 soluciones acuosas de proteínas en excipientes diferentes, entre los que está la solución J que se ajusta a NaCl 0,15 M y pH 7. Las proteínas y los excipientes, así como sus concentraciones respectivas, se indican en la tabla 11. Se extraen 4,5 ml de cada una de las soluciones proteínicas que se colocan dentro de un tubo graduado de cristal de 10 ml. A continuación se añaden a cada solución 0,5 ml de glóbulos rojos lavados. Las mezclas obtenidas de este modo se homogeneízan volteando 3-4 veces los tubos tapados. Al final de la homogeneización, los tubos se
10 ponen en reposo en un expositor y se mide el tiempo necesario para que aparezca una línea clara de decantación de los glóbulos rojos tangente al menisco transparente, que refleja la velocidad de sedimentación. Los resultados de los ensayos a temperatura ambiente se muestran en la tabla 11.
Tabla 11: Ensayos a T ambiente
Proteína (s)
Solución Tiempo de sedimentación en el menisco (min.) Observaciones
-
PBS 22,70 De control (sin proteína)
Albúmina (5%)
NaCl: 2 g/l 35,90 Proteína oncótica
Plasma humano
NaCl: 2 g/l Citrato trisódico: 0,02 M 28,42 Todas las proteínas presentes
IgG (50 g/l)
Sacarosa: 100 g/l NaCl: 3 g/l 31,25 Formulación de la técnica anterior
Solución J
+ NaCl: 0,15 M 9,25 Formulación de la invención
Fibrinógeno (15 g/l)
Arginina: 40 g/l Citrato trisódico: 2,5 g/l Lisina: 2 g/l 12,60 Presencia de aglutinados
Los resultados obtenidos muestran que los glóbulos rojos considerados, en presencia de IgG de la solución J de la
15 invención, sedimentan muy rápido, lo que se acomoda a una reducción de la viscosidad de la mezcla estudiada, lo que permite por tanto una mejor fluidez de la sangre.
Se han llevado a cabo otros ensayos considerando las mezclas anteriores (4,5 ml de soluciones proteínicas y 0,5 ml de glóbulos rojos lavados) colocadas dentro de unos tubos graduados de cristal de 10 ml y homogeneizadas volteando 3-4 veces los tubos. Una vez acabada esta operación, estos se colocan de tal forma que su contenido
20 sedimente durante un intervalo de tiempo de 1 hora en un ángulo de 45 º, a una temperatura de 37 ºC y se mide el volumen del sobrenadante para las mezclas consideradas. Los resultados de los ensayos a T = 37 ºC se muestran en la tabla 12.
Tabla 12: Ensayos de T = 37 ºC
Proteína(s)
Solución Volumen de sobrenadante tras 1 hora (ml)
-
PBS 2,5
Albúmina (5 %)
NaCl: 2 g/l 2,5
Plasma humano
NaCl: 2 g/l Citrato trisódico: 0,02 M 4
IgG (50 g/l)
Sacarosa: 100 g/l NaCl: 3 g/l 1*
Solución J
+ NaCl: 0,15 M 2,5
*: sobrenadante que presenta signos de hemólisis
El análisis de los resultados de la tabla 12 muestra que:
-
al ser el volumen de sobrenadante para la mezcla de plasma el más elevado de las mezclas estudiadas, esta presenta por lo tanto la viscosidad correspondiente más baja; las mezclas de albúmina y de solución J de la invención presentan una velocidad de sedimentación idéntica
5 (mismo volumen de sobrenadante);
-
la mezcla de IgG de la técnica anterior, es decir la que comprende sacarosa y NaCl, conduce al volumen de sobrenadante más bajo, lo que significa que los glóbulos rojos sedimentan más lentamente que en la mezcla J de la invención, así como en las otras mezclas estudiadas más arriba, siendo además el sobrenadante de color rosado debido a su discreta hemólisis.

Claims (8)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Formulación estabilizadora para una composición de inmunoglobulina G policlonal, caracterizada porque está constituida por un azúcar alcohólico, la glicina, con una concentración comprendida entre 7 g/l y 10 g/l y un detergente no iónico con una concentración comprendida entre 20 y 50 ppm, para ser de este modo adecuada para
    5 la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida y para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.
  2. 2.
    Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque el azúcar alcohólico es el manitol.
  3. 3.
    Formulación de acuerdo con la reivindicación 2, caracterizada porque la concentración de manitol está comprendida entre 30 g/l y 50 g/l.
    10 4. Composición de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida que comprende, como estabilizador, la formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.
  4. 5. Composición de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada, obtenida mediante la liofilización de una composición de inmunoglobulina G policlonal y de la formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.
    15 6. Composición de inmunoglobulina G policlonal de acuerdo con la reivindicación 4, caracterizada porque presenta una tasa de polímeros inferior al 0,3 % tras un almacenamiento de 6 meses a temperatura ambiente.
  5. 7. Composición de inmunoglobulina G policlonal de acuerdo con la reivindicación 5, caracterizada porque presenta una tasa de polímeros inferior al 0,3 % tras un almacenamiento de 12 meses a temperatura ambiente o de 6 meses a 40 ºC.
    20 8. Composición de inmunoglobulina G policlonal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 7, caracterizada porque presenta una tasa de dímeros inferior al 7 % tras un almacenamiento durante un periodo de 24 meses a 4 ºC.
  6. 9. Uso de una formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, como
    estabilizador de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida directamente obtenidas por el 25 fraccionamiento de plasma humano.
  7. 10.
    Uso de una formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.
  8. 11.
    Uso de una formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la
    estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida obtenidas mediante la 30 reconstitución en un medio acuoso adecuado de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.
ES04742459T 2003-04-09 2004-04-08 Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada Expired - Lifetime ES2424992T3 (es)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0304388A FR2853551B1 (fr) 2003-04-09 2003-04-09 Formulation stabilisante pour compositions d'immunoglobulines g sous forme liquide et sous forme lyophilisee
FR0304388 2003-04-09
PCT/FR2004/000871 WO2004091656A2 (fr) 2003-04-09 2004-04-08 Formulation stabilisante pour compositions d'immunoglobulines G sous forme liquide et sous forme lyophilisEe

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2424992T3 true ES2424992T3 (es) 2013-10-10

Family

ID=33041731

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES04742459T Expired - Lifetime ES2424992T3 (es) 2003-04-09 2004-04-08 Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada

Country Status (12)

Country Link
US (2) US8388954B2 (es)
EP (1) EP1610819B1 (es)
JP (2) JP5357391B2 (es)
AU (1) AU2004229205B2 (es)
BR (1) BRPI0409249A (es)
CA (1) CA2521909C (es)
DK (1) DK1610819T3 (es)
ES (1) ES2424992T3 (es)
FR (1) FR2853551B1 (es)
IL (1) IL171123A (es)
PL (1) PL1610819T3 (es)
WO (1) WO2004091656A2 (es)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040002451A1 (en) * 2002-06-20 2004-01-01 Bruce Kerwin Compositions of pegylated soluble tumor necrosis factor receptors and methods of preparing
FR2853551B1 (fr) * 2003-04-09 2006-08-04 Lab Francais Du Fractionnement Formulation stabilisante pour compositions d'immunoglobulines g sous forme liquide et sous forme lyophilisee
FR2895263B1 (fr) 2005-12-26 2008-05-30 Lab Francais Du Fractionnement Concentre d'immunoglobines g (lg) appauvri en anticorps anti-a et anti-b, et en igg polyreactives
FR2899112B1 (fr) 2006-03-31 2010-09-03 Lab Francais Du Fractionnement Concentre d'immunoglobulines et de fragments f (ab)'2 et/ou fab specifiques d'un arbovirus en tant que medicament.
KR101140483B1 (ko) * 2007-05-02 2012-07-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 단백질을 안정화시키는 방법
EP2170268A2 (en) 2007-06-25 2010-04-07 Amgen, Inc. Compositions of specific binding agents to hepatocyte growth factor
US8420081B2 (en) * 2007-11-30 2013-04-16 Abbvie, Inc. Antibody formulations and methods of making same
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
FR2939667B1 (fr) 2008-12-17 2012-01-27 Fractionnement Et Des Biotechonologies Lab Franc Composition d'immunoglobine g comme medicament pour le traitement de l'ictere neonatal par incompatibilite foetomaternelle dans le systeme abo
FR2940617B1 (fr) * 2008-12-30 2012-04-20 Fractionnement Et Des Biotechonologies Lab Franc Composition d'immunoglobulines g
WO2010111255A1 (en) * 2009-03-23 2010-09-30 Hememics Biotechnologies, Inc. Desiccated biologics and methods of preparing the same
US20100278822A1 (en) * 2009-05-04 2010-11-04 Abbott Biotechnology, Ltd. Stable high protein concentration formulations of human anti-tnf-alpha-antibodies
FR2952826B1 (fr) 2009-11-20 2012-04-06 Lab Francais Du Fractionnement Utilisation d'immunoglobulines polyvalentes pour traiter une cirrhose hepatique alcoolique ou metabolique
FR2961107B1 (fr) * 2010-06-15 2012-07-27 Lab Francais Du Fractionnement Composition d'immunoglobulines humaines stabilisee
FR2962650B1 (fr) * 2010-07-19 2013-04-05 Lab Francais Du Fractionnement Composition d'immunoglobulines humaines concentrees
US8821865B2 (en) 2010-11-11 2014-09-02 Abbvie Biotechnology Ltd. High concentration anti-TNFα antibody liquid formulations
FR2974301B1 (fr) 2011-04-20 2013-08-23 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation d'un produit plasmatique deplete en un ou plusieurs facteurs thrombogenes
FR2977893B1 (fr) 2011-07-11 2015-02-20 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation d'un concentre d'immunoglobulines polyvalentes
PE20150964A1 (es) 2012-09-07 2015-07-25 Coherus Biosciences Inc Formulaciones acuosas estables de adalimumab
JP2014202667A (ja) * 2013-04-08 2014-10-27 株式会社島津製作所 抗体医薬用粒子径分布測定装置及び抗体医薬の粒子径分布測定方法
US11229702B1 (en) 2015-10-28 2022-01-25 Coherus Biosciences, Inc. High concentration formulations of adalimumab
US11071782B2 (en) 2016-04-20 2021-07-27 Coherus Biosciences, Inc. Method of filling a container with no headspace
JP7110360B2 (ja) 2017-10-09 2022-08-01 テルモ ビーシーティー バイオテクノロジーズ，エルエルシー 凍結乾燥方法
FR3081328B1 (fr) * 2018-05-24 2021-01-01 Lab Francais Du Fractionnement Composition d'immunoglobulines humaines concentrees
CN113597532B (zh) 2019-03-14 2023-02-17 泰尔茂比司特生物技术有限公司 冻干容器填充固定装置、系统及使用方法
CN112878994A (zh) * 2021-03-26 2021-06-01 中石油煤层气有限责任公司 一种模拟井筒与地层物质交流的实验装置

Family Cites Families (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154600B (nl) 1971-02-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen.
NL154598B (nl) 1970-11-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking.
NL154599B (nl) 1970-12-28 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen, alsmede testverpakking.
US3901654A (en) 1971-06-21 1975-08-26 Biological Developments Receptor assays of biologically active compounds employing biologically specific receptors
US3853987A (en) 1971-09-01 1974-12-10 W Dreyer Immunological reagent and radioimmuno assay
US3867517A (en) 1971-12-21 1975-02-18 Abbott Lab Direct radioimmunoassay for antigens and their antibodies
NL171930C (nl) 1972-05-11 1983-06-01 Akzo Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van haptenen, alsmede testverpakkingen.
US3850578A (en) 1973-03-12 1974-11-26 H Mcconnell Process for assaying for biologically active molecules
US3935074A (en) 1973-12-17 1976-01-27 Syva Company Antibody steric hindrance immunoassay with two antibodies
US3996345A (en) 1974-08-12 1976-12-07 Syva Company Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays
US4034074A (en) 1974-09-19 1977-07-05 The Board Of Trustees Of Leland Stanford Junior University Universal reagent 2-site immunoradiometric assay using labelled anti (IgG)
US3984533A (en) 1975-11-13 1976-10-05 General Electric Company Electrophoretic method of detecting antigen-antibody reaction
US4098876A (en) 1976-10-26 1978-07-04 Corning Glass Works Reverse sandwich immunoassay
US4879219A (en) 1980-09-19 1989-11-07 General Hospital Corporation Immunoassay utilizing monoclonal high affinity IgM antibodies
US4588585A (en) 1982-10-19 1986-05-13 Cetus Corporation Human recombinant cysteine depleted interferon-β muteins
US4737462A (en) 1982-10-19 1988-04-12 Cetus Corporation Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β
US4518584A (en) 1983-04-15 1985-05-21 Cetus Corporation Human recombinant interleukin-2 muteins
US5011771A (en) 1984-04-12 1991-04-30 The General Hospital Corporation Multiepitopic immunometric assay
US4666828A (en) 1984-08-15 1987-05-19 The General Hospital Corporation Test for Huntington's disease
US4959314A (en) 1984-11-09 1990-09-25 Cetus Corporation Cysteine-depleted muteins of biologically active proteins
US4597966A (en) * 1985-01-09 1986-07-01 Ortho Diagnostic Systems, Inc. Histidine stabilized immunoglobulin and method of preparation
US5116943A (en) 1985-01-18 1992-05-26 Cetus Corporation Oxidation-resistant muteins of Il-2 and other protein
JPH0825902B2 (ja) 1985-02-21 1996-03-13 株式会社ミドリ十字 γ−グロブリンの加熱処理方法
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4801531A (en) 1985-04-17 1989-01-31 Biotechnology Research Partners, Ltd. Apo AI/CIII genomic polymorphisms predictive of atherosclerosis
US4586585A (en) 1985-08-15 1986-05-06 Zaner Leonard A Longitudinally extensible stringer and stairway
US5017691A (en) 1986-07-03 1991-05-21 Schering Corporation Mammalian interleukin-4
DE122007000007I2 (de) 1986-04-09 2010-12-30 Genzyme Corp Genetisch transformierte Tiere, die ein gewünschtes Protein in Milch absondern
US4879111A (en) 1986-04-17 1989-11-07 Cetus Corporation Treatment of infections with lymphokines
JPS6388197A (ja) * 1986-09-30 1988-04-19 Tosoh Corp モノクロナル抗体の安定化方法
US4873316A (en) 1987-06-23 1989-10-10 Biogen, Inc. Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals
US4965195A (en) 1987-10-26 1990-10-23 Immunex Corp. Interleukin-7
US4904584A (en) 1987-12-23 1990-02-27 Genetics Institute, Inc. Site-specific homogeneous modification of polypeptides
US5272057A (en) 1988-10-14 1993-12-21 Georgetown University Method of detecting a predisposition to cancer by the use of restriction fragment length polymorphism of the gene for human poly (ADP-ribose) polymerase
HUT54308A (en) * 1989-04-04 1991-02-28 Lilly Co Eli Process for producing immunoglobulin conjugates and medicaments comprising same
US5192659A (en) 1989-08-25 1993-03-09 Genetype Ag Intron sequence analysis method for detection of adjacent and remote locus alleles as haplotypes
US5945098A (en) * 1990-02-01 1999-08-31 Baxter International Inc. Stable intravenously-administrable immune globulin preparation
US6326198B1 (en) 1990-06-14 2001-12-04 Regents Of The University Of Michigan Methods and compositions for the ex vivo replication of stem cells, for the optimization of hematopoietic progenitor cell cultures, and for increasing the metabolism, GM-CSF secretion and/or IL-6 secretion of human stromal cells
US5486359A (en) 1990-11-16 1996-01-23 Osiris Therapeutics, Inc. Human mesenchymal stem cells
JP2966592B2 (ja) 1991-07-20 1999-10-25 萩原 義秀 安定化されたヒトモノクローナル抗体製剤
JP3395181B2 (ja) 1991-07-26 2003-04-07 東レ株式会社 造血幹細胞増加剤
US5281521A (en) 1992-07-20 1994-01-25 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Modified avidin-biotin technique
US6447766B1 (en) 1993-06-08 2002-09-10 Smithkline Beecham Corporation Method of mobilizing hematopoietic stem cells
FR2708467B1 (fr) 1993-07-30 1995-10-20 Pasteur Merieux Serums Vacc Préparations d'immunoglobulines stabilisées et procédé pour leur préparation.
US5591625A (en) 1993-11-24 1997-01-07 Case Western Reserve University Transduced mesenchymal stem cells
IT1271088B (it) 1994-11-24 1997-05-26 Dompe Spa Uso di fattore di crescita degli epatociti per indurre la proliferazione e differenziazione di cellule emopoietiche
US5843780A (en) 1995-01-20 1998-12-01 Wisconsin Alumni Research Foundation Primate embryonic stem cells
US6143292A (en) 1995-05-25 2000-11-07 Baxter International Inc. Allogeneic cell therapy for cancer following allogeneic stem cell transplantation
ES2434840T3 (es) 1995-07-27 2013-12-17 Genentech, Inc. Formulación de proteína liofilizada isotónica estable
US6267958B1 (en) * 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
DE19549232C2 (de) 1995-12-20 1998-05-20 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von G-CSF in Kombination mit einem Chemotherapeutikum bei der Behandlung von Erkrankungen, die eine periphere Stammzelltransplantation erfordern
US5928638A (en) 1996-06-17 1999-07-27 Systemix, Inc. Methods for gene transfer
US6090622A (en) 1997-03-31 2000-07-18 The Johns Hopkins School Of Medicine Human embryonic pluripotent germ cells
AU6914998A (en) * 1997-04-07 1998-10-30 Cangene Corporation Intravenous immune globulin formulation containing a non-ionic surface active agent with improved pharmacokinetic properties
US6511958B1 (en) 1997-08-14 2003-01-28 Sulzer Biologics, Inc. Compositions for regeneration and repair of cartilage lesions
ATE357509T1 (de) 1997-09-29 2007-04-15 Point Therapeutics Inc Stimulierung von hämatopoietischen zellen im vitro
US6132708A (en) 1997-10-10 2000-10-17 Oregon Health Sciences University Liver regeneration using pancreas cells
US6248587B1 (en) 1997-11-26 2001-06-19 University Of Southern Cailfornia Method for promoting mesenchymal stem and lineage-specific cell proliferation
WO1999048524A1 (en) 1998-03-03 1999-09-30 University Of Southern California Use of cytokines and mitogens to inhibit graft versus host disease
US6383481B1 (en) 1998-03-30 2002-05-07 Japan Immunoresearch Laboratories Co., Ltd. Method for transplantation of hemopoietic stem cells
US6541623B1 (en) 1998-04-03 2003-04-01 Hyseq, Inc. Interleukin—1 receptor antagonist and uses thereof
US6184035B1 (en) 1998-11-18 2001-02-06 California Institute Of Technology Methods for isolation and activation of, and control of differentiation from, skeletal muscle stem or progenitor cells
US6280718B1 (en) 1999-11-08 2001-08-28 Wisconsin Alumni Reasearch Foundation Hematopoietic differentiation of human pluripotent embryonic stem cells
US6436704B1 (en) 2000-04-10 2002-08-20 Raven Biotechnologies, Inc. Human pancreatic epithelial progenitor cells and methods of isolation and use thereof
JP5485489B2 (ja) 2000-08-11 2014-05-07 中外製薬株式会社 抗体含有安定化製剤
FR2824568B1 (fr) 2001-05-11 2004-04-09 Lab Francais Du Fractionnement Procede de preparation de concentres d'immunoglobulines humaines a usage therapeutique
MXPA04000747A (es) * 2001-07-25 2004-07-08 Protein Desing Labs Inc Formulacion farmaceutica liofilizada estable de anticuerpos igg.
JP5025058B2 (ja) 2001-09-28 2012-09-12 株式会社カネカ バルーンカテーテル
JP2005532395A (ja) * 2002-07-02 2005-10-27 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 新規な安定処方
FR2853551B1 (fr) * 2003-04-09 2006-08-04 Lab Francais Du Fractionnement Formulation stabilisante pour compositions d'immunoglobulines g sous forme liquide et sous forme lyophilisee

Also Published As

Publication number Publication date
FR2853551A1 (fr) 2004-10-15
WO2004091656A2 (fr) 2004-10-28
BRPI0409249A (pt) 2006-04-18
EP1610819B1 (fr) 2013-06-19
AU2004229205B2 (en) 2008-11-13
US20130202585A1 (en) 2013-08-08
CA2521909C (fr) 2012-11-06
WO2004091656A3 (fr) 2005-01-27
IL171123A (en) 2010-02-17
US20070036779A1 (en) 2007-02-15
JP2011184454A (ja) 2011-09-22
JP2006522780A (ja) 2006-10-05
JP5357391B2 (ja) 2013-12-04
US9463241B2 (en) 2016-10-11
PL1610819T3 (pl) 2013-10-31
AU2004229205A1 (en) 2004-10-28
US8388954B2 (en) 2013-03-05
FR2853551B1 (fr) 2006-08-04
EP1610819A2 (fr) 2006-01-04
CA2521909A1 (fr) 2004-10-28
DK1610819T3 (da) 2013-09-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2424992T3 (es) Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada
ES2580778T3 (es) Preparaciones de inmunoglobulina que tienen mayor estabilidad
CA2272245C (en) Stable lyophilized pharmaceutical preparations of monoclonal or polyclonal antibodies
JP4879104B2 (ja) 高度に濃縮された、凍結乾燥された、および液体の、因子ｉｘ処方
JP5719266B2 (ja) ウイルス不活性化熱処理へ供するための血漿タンパク質の寒冷沈降物を安定化する方法
ES2289742T3 (es) Uso de hgf para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de fibrosis pulmonar.
BR112012012080B1 (pt) Formulações de histidina-trealose do anticorpo t1h
KR20070122554A (ko) 안정화된 항-ｂ형 간염 바이러스 (ｈｂｖ) 항체 제형
US20160030563A1 (en) Concentrated human immunoglobulin composition
WO2000072873A1 (fr) Preparations lyophilisees de hgf
ES2762181T3 (es) Composición de inmunoglobulinas humanas estabilizada
HUP0401046A2 (en) Liquid formulation comprising cetuximab and a fatty acid ester of polyoxyethylene sorbitan
ES2363738T3 (es) Formulación de aviptadil.
US20110318332A1 (en) Immunoglobulin g composition
JPH04346934A (ja) γ−グロブリンの液状製剤
US5340574A (en) Stabilized non-glycosylated recombinant human IL2 in reduced form compositions
JPWO2017164349A1 (ja) ＰＥＧ化抗ヒトＮＧＦ抗体Ｆａｂ’フラグメント含有医薬組成物
ES3061616T3 (en) Method for producing human plasma-derived factor viii / von willebrand factor and composition obtained
EA044682B1 (ru) Фармацевтическая композиция, содержащая ромиплостим
PT1689437E (pt) Formulação de eritropoietina em solução
Eijkhout et al. Blood, blood components, plasma, and plasma products
BR102016022107B1 (pt) Processo para preparação de uma solução de imunoglobulinas
BR102016022107A2 (pt) Processo de preparação de imunoglobulinas