ES2430218T3 - Diagnóstico y estratificación de riesgo mediante NT-proET-1 - Google Patents

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Abstract

Procedimiento para el diagnóstico in vitro y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas,caracterizado porque se realiza una determinación del fragmento libre 18-52 de SEQ ID nº 1 (NT-proET-1) o de unfragmento elegido de SEQ ID nº 2, SEQ ID nº 3 en una muestra de líquido corporal de un paciente a examinar.

Description

Diagnóstico y estratificación de riesgo mediante NT-proET-1
5 La presente invención se refiere a un procedimiento para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas, en el que se realiza una determinación del fragmento libre N-terminal pro-endotelina (NTproET-1; AS 18-52 del preproET, según la figura 1) o de fragmentos del mismo.
Para poder aplicar una terapia adecuada se requiere un diagnóstico precoz y la diferenciación de las enfermedades cardíacas nada más entrar en urgencias en combinación con la necesidad de tomar decisiones clínicas.
Según el estado de la técnica, se ha descrito la ET-1 madura (21 AS) para el diagnóstico junto con la proteína precursora Big-ET 1 (38AS, véase la figura 1) (Rossi GP, Seccia TM, Albertin G, Pessina AC. “Measurement of endothelin: clinical and research use” [Medición de la endotelina: uso clínico e investigación]. Ann Clin Biochem
15 2000; 37(Pt 5); 608-26.2; Aubin P, Le Brun G, Moldovan F, Villette JM, Creminon C, Dumas J, y otros. “Sandwichtype enzyme immunoassay for big endothelin-I in plasma: concentrations in healthy human subjects unaffected by sex or posture” [Inmunoensayo enzimático tipo sándwich para endotelina-I grande en plasma: concentraciones en sujetos humanos sanos independientemente de su sexo o posición]. Clin Chem 1997; 43; 64-70). Además, se conoce que por los documentos WO 00/22439 o EP 1121600 B1 de la solicitante se han dado a conocer las prohormonas de endotelina para el diagnóstico de la sepsis.
Asimismo se han descrito por el documento EP 1564558 B1 los fragmentos C-terminales pro-endotelina (CTproET1) con las secuencias de aminoácidos 93-212 ó 168-212 de la prepro-endotelina (figura 1, SEQ ID nº 1) para el diagnóstico de enfermedades cardiovasculares para la determinación indirecta del contenido en endotelina-1 o en
25 endotelina-1 grande.
Struck y otros (2005) Peptides, Vol. 26, páginas 2482-2486 dieron a conocer la medición del péptido precursor de endotelina-1 en el plasma. No obstante, esto no establece relación alguna del péptido como marcador para el diagnóstico o para la estratificación de enfermedades cardíacas. Además, se dieron a conocer anticuerpos que pueden unirse al epítopo de 18-53.
Papassotiriou Jana y otros (2006) Clinical Chemistry, Vol. 52, páginas 1144-1151 se refiere a la adecuación diagnóstica de “CT-proET-1” e informa exclusivamente de “péptidos procedentes de precursor de ET-1” para la determinación indirecta de cantidades liberadas de ET-1. No se menciona expresamente NT-proET-1. Además, se
35 explica que estos “péptidos procedentes de precursor de ET-1” son apropiados para la determinación indirecta de las cantidades liberadas de ET-1. Papassotiriou Jana y otros no describen de manera explícita que NT-proET-1, ni que NT-proET-1 desempeñen una función diagnóstica propia e independiente. Tampoco aparece indicación alguna de que mediante NT-proET-1 pueda tener lugar un diagnóstico y estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas con independencia de ET-1 y bigET-1.
Sin embargo, en los procedimientos de diagnóstico conocidos con utilización de los marcadores conocidos hasta el momento sigue siendo un inconveniente que no se consigue de forma suficiente la detección precoz y completa de pacientes de riesgo y, por lo tanto, no se realiza de un modo suficiente una estratificación de riesgo. Uno de los objetivos de la presente invención consiste, por lo tanto, en desarrollar un procedimiento para la estratificación de
45 riesgo de las enfermedades cardíacas que haga posible una detección mejorada de pacientes de riesgo.
Además, resulta un inconveniente que, según el estado de la técnica, no se consigue casi nunca una sensibilidad y/o especificidad suficiente de los marcadores.
Otro objetivo consiste, por lo tanto, en proporcionar un procedimiento para la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas en el que, como mínimo, un marcador o una combinación de marcadores presenta una sensibilidad y especificidad suficientes en un diagnóstico in vitro.
Por lo tanto, el objetivo de la presente invención consiste en dar a conocer un procedimiento para el diagnóstico y/o 55 la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas.
El objetivo propuesto se consigue mediante un procedimiento para el diagnóstico y estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas en el que tiene lugar una determinación del terminal N proendotelina (de forma simplificada: “NT-proET-1”) o fragmentos de la misma (de acuerdo con el presente procedimiento de la invención).
Es objetivo de la invención un procedimiento para el diagnóstico in vitro y/o estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas, que se caracteriza por llevar a cabo una determinación de los fragmentos libres NT-proET1 (18-52) o de fragmentos contenidos en una muestra de un fluido corporal de un paciente a investigar.
65 La invención se refiere además a la utilización del fragmento libre NT-proET-1 o fragmentos del mismo para el diagnóstico y/o estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas y opcionalmente otros marcadores.
Además, la invención se refiere a la utilización de un conjunto de elementos o kit para el diagnóstico y/o estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas que contiene agentes indicadores para la determinación del fragmento libre NT-proET-1 o de fragmentos del mismo y opcionalmente otros marcadores.
5 Sorprendentemente, las NT-proET-1 o los fragmentos y péptidos parciales de la misma presentan una alta sensibilidad y especificidad para el diagnóstico de enfermedades cardíacas (véase los ejemplos y las figuras).
El concepto de la invención “enfermedades cardíacas” comprende, en especial, el “síndrome coronario agudo” y sus diferentes fases y enfermedades coronarias que son directamente una amenaza para la vida. Esto se refiere, en especial, a la medicina de emergencias y a infartos de miocardio agudos o angina de pecho, así como muerte cardíaca súbita. Además del infarto agudo de miocardio, que se define de acuerdo con los criterios WHO (WHO (1979): Nomenclature and criteria for diagnosis of ischemic heart disease. Report of the Joint International Society and Federation of Cardiology/World Health Organization task force on standardization of clinical
15 nomenclature, Circulation 59 (3): 607-609) como dolor pectoral agudo con una duración superior a 20 minutos relacionado con aumento de ST y/o un aumento de las enzimas de miocardio, se acentuó el concepto de la Angina pectoris (AP) inestable que se debe de interpretar de acuerdo con la invención bajo el concepto “enfermedades cardíacas” (Hamm CW: Leitlinien: Akutes Koronarsyndrom (ACS) -Teil 1: (directrices: síndrome coronario agudo (ACS) – Parte 1) ACS sin aumento persistente de ST Z Kardiol (2004) 93:72-90).
Dentro del ámbito de la presente invención, se entenderá como “infarto de miocardio” (infarto cardíaco, AMI (accute myocardial infarction)) una enfermedad del corazón, de tipo agudo, con peligro para la vida por la cual tiene lugar la necrosis o la destrucción de tejidos (infarto) de partes del músculo cardíaco (miocardio), como causa de una alteración de la circulación de la sangre (isquemia), que habitualmente dura más de 20 minutos. Un síntoma
25 principal del infarto de miocardio es un súbito dolor fuerte en la zona del pecho (“chest pain”) que dura más de 20 minutos, que se radia a los hombros, brazos, mandíbula inferior y epigastrio y que eventualmente están acompañados de sudores, náuseas y eventualmente vómitos. Después de un infarto de miocardio, es posible un paro cardíaco.
El concepto “post-infarto de miocardio” significa que un paciente ha padecido ya un infarto de miocardio con anterioridad, es decir, por ejemplo, durante más de una hora, en especial 20 horas, en especial de 1 a 5 días o de 3 a 5 días, y ahora se encuentra en la fase post (“posterior”) y no ha tenido consecuencias directas de muerte, pero que, no obstante, se puede contar con una evolución posterior desfavorable, tal como otro infarto de miocardio (continuación), paro cardíaco o muerte u otros empeoramientos del paciente.
35 En el ámbito de la presente invención, se incluirá bajo el concepto de “enfermedades cardíacas” igualmente la “insuficiencia cardíaca”. “Insuficiencia cardíaca” es una incapacidad aguda o crónica del corazón en suministrar a los tejidos suficiente sangre y, por lo tanto, suficiente oxígeno para garantizar el intercambio de productos en los tejidos en reposo o bajo carga. Clínicamente, se presenta insuficiencia cardíaca cuando se presentan síntomas típicos (disnea, cansancio, retención de fluidos) cuya causa consiste en una alteración de la función cardíaca en el sentido de una alteración sistólica o diastólica. De manera correspondiente, la insuficiencia cardíaca crónica (CHF) comprende, en el ámbito de la invención (Kardiologie compact, publicado por Chrisian Mewis, Reimer Riessen y Ioakim Spyridopoulos, 2ª Edición sin modificaciones, Thieme 2006). Pueden ser causas de la insuficiencia cardíaca: lesión de válvulas cardíacas (por ejemplo, como resultado tardío de fiebre reumática), miocarditis
45 (inflamación del músculo cardíaco), alteraciones del ritmo cardíaco, infarto cardíaco además de presión sanguínea demasiado alta (hipertonía) y/o arteriosclerosis (depósitos de cal) de los vasos sanguíneos cardíacos (enfermedad cardíaca coronaria). Además, de acuerdo con la invención, se incluyen enfermedades hipertensivas con insuficiencia cardíaca (congestiva), enfermedad renal y cardíaca hipertensiva (congestiva), insuficiencia cardíaca, insuficiencia cardíaca primaria, insuficiencia cardíaca secundaria, insuficiencia cardíaca sin dolores (NYHA-Estadio I), insuficiencia cardíaca con dolores en cargas fuertes (NYHA-Estadio II), insuficiencia cardíaca con dolores para cargas ligeras (NYHA-Estadio III), insuficiencia cardíaca con dolores en reposo (NYHA-Estadio IV) y choque cardiogénico.
Todas las indicaciones mencionadas están descritas, además, por ejemplo en Pschyrembel, DeGruyter, 9ª edición, 55 Berlín 2004.
El concepto “estratificación de riesgo” comprende, según la invención, el tratamiento de pacientes, en especial, pacientes en emergencias y pacientes en riesgo, con pronóstico desfavorable, con el objeto de una actuación de diagnóstico intensivo y terapia/tratamiento de enfermedades cardíacas, en especial del síndrome coronario agudo, así como infarto de miocardio, angina pectoris y/o post-infarto de miocardio, insuficiencia cardíaca con el objetivo de posibilitar una evolución lo más favorable posible de la enfermedad. La estratificación de riesgo, según la invención, posibilita como resultado de un procedimiento de tratamiento efectivo, que se producen, por ejemplo, en caso de síndrome coronario agudo con intervenciones coronarias percutáneas y los nuevos medicamentos o para el tratamiento o terapia de insuficiencia cardíaca, tal como inhibidores de ACE, antagonistas de AT1: bloqueadores del
65 receptor de angiotensina-II (subtipo 1), bisoprolol betabloqueante, carvedilol, metoprolol y nebivolol, antagonistas de receptores de vasopresina, antagonistas de aldosterona procedente de NYHA-Estadio III, sensibilizador de calcio
(Levosimendan).
Por lo tanto, la invención se refiere asimismo a la identificación de pacientes con un elevado riesgo y/o un pronóstico desfavorable de enfermedades cardíacas, concretamente en pacientes sintomáticos y/o asintomáticos, 5 especialmente en pacientes de urgencia.
De forma muy ventajosa, se puede realizar una estratificación segura mediante el procedimiento de la invención, especialmente en casos de la medicina de urgencia y/o en la medicina intensiva. El procedimiento, según la invención, facilita por lo tanto decisiones clínicas que conducen a un rápido éxito terapéutico y a evitar muertes. Estas decisiones clínicas comprenden asimismo un tratamiento continuado mediante fármacos para el tratamiento o la terapia de enfermedades cardíacas.
Por lo tanto, la invención se refiere asimismo a un procedimiento para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo de pacientes con enfermedades cardíacas para llevar a cabo decisiones clínicas tales como el tratamientos y la
15 terapia continuados mediante fármacos, preferentemente en la medicina intensiva y la medicina de urgencia que son críticas en el tiempo, incluyendo la decisión de hospitalizar al paciente.
Según otra realización preferente, el procedimiento de la invención se refiere, por lo tanto, al control de la terapia de enfermedades cardíacas.
Según otra realización preferente del procedimiento de la invención, el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo se realiza para el pronóstico, para la detección precoz y la detección del diagnóstico diferencial, para la evaluación de la gravedad y para la evaluación del desarrollo concomitante a la terapia.
25 Según otra realización preferente, la invención se refiere a un procedimiento para el diagnóstico in vitro para el diagnóstico precoz o diferencial o el pronóstico de enfermedades cardíacas, en el que se lleva a cabo una determinación del marcador NT-pro-ET-1 o de fragmentos o péptidos parciales del mismo en un paciente a examinar.
Según una realización del procedimiento, según la invención, se extrae líquido corporal al paciente a examinar, preferentemente sangre, ya sea sangre total o suero o el plasma que se obtiene, y el diagnóstico se realiza in vitro/ex vivo, es decir al exterior del cuerpo humano o animal. Debido a la determinación del marcador NT-proET-1 o de fragmentos y péptidos parciales del mismo, se consigue una alta sensibilidad y especificidad (véanse los ejemplos y figuras) y, por medio de las cantidades disponibles en, como mínimo, una muestra del paciente, se puede
35 llevar a cabo el diagnóstico o la estratificación de riesgo.
En el marco de esta invención, con “NT-proET-1” se entenderá una proteína humana o un polipéptido humano que se puede obtener a partir de la preproendotelina, y la preproendotelina (SEQ ID nº1 y figura 1) comprende los fragmentos libres con los aminoácidos 18-52 y los fragmentos APETAVLGAELSAV (SEQ ID nº 2) pos. 18-31 de preproET-1 (SEQ ID nº 1 y figura 1) y GENGGEKPTPSPPWRLRRSKR (SEQ ID nº 3) pos. 32-52 de preproET-1 (SEQ ID nº 1 y figura 1). Además, estos polipéptidos de la invención pueden presentar modificaciones posttranslacionales tales como la glicolización, la lipidización o derivatizaciones.
Según otra realización, la determinación de NT-proET-1 o fragmentos y péptidos parciales de la misma puede
45 realizarse adicionalmente con otros marcadores y, en concreto, preferentemente con aquellos que ya señalan enfermedades coronarias, en especial, enfermedades cardíacas.
Por lo tanto, la presente invención se refiere a una realización del procedimiento, según la invención, en la que la determinación se lleva a cabo adicionalmente con, como mínimo, un marcador adicional elegido entre el grupo de los marcadores inflamatorios, los marcadores cardiovasculares, los marcadores neurohormonales o los marcadores isquémicos, en un paciente a examinar.
De acuerdo con la invención, el marcador inflamatorio puede elegirse entre, como mínimo, un marcador del grupo de la proteína C reactiva (PCR), las citosinas tales como, por ejemplo, TNF-alfa, las interleucinas tales como, por 55 ejemplo IL-6, la procalcitonina (1-116, 3-116) y moléculas de adhesión tales como VCAM o ICAM, así como el marcador cardiovascular, en especial un marcador que indica la necrosis de tejido cardíaco y un marcador que influye en la presión sanguínea entre, como mínimo, un marcador del grupo de la creatinquinasa, la mioglobina, la mieloperoxidasa, la proteína natriurética, en especial ANP (o ANF), proANP, NT-proANP, BNP, proBNP, NT-proBNP
o una secuencia parcial de las mismas respectivamente, troponina cardíaca, CRP. Además, con ello se entenderán también (pro)hormonas reguladoras de la circulación, en especial como el propéptido liberador de gastrina (proGRP), proendotelina-2, proendotelina-3, proleptina, proneuropéptido-Y, prosomatostatina, proneuropéptido-YY, proopiomelanocortina, proadrenomedulina (proADM), provasopresina (proAVP) o una secuencia parcial de las mismas, respectivamente.
65 El marcador isquémico puede elegirse entre, como mínimo, un marcador del grupo troponina I y T, CK-MB. Además, el marcador neurohormonal puede ser, como mínimo, otra proteína natriurética, en especial ANP (o ANF), pro ANP,
NT-proANP, BNP, proBNP o una secuencia parcial de las mismas, respectivamente.
Según otra realización de la invención, el procedimiento, según la invención, puede llevarse a cabo en el marco de un diagnóstico in vitro mediante determinaciones paralelas o simultáneas de los marcadores (por ejemplo, placas de 5 microtitulación con 96 o más cavidades), realizándose las determinaciones en, como mínimo, una muestra de paciente.
Además, el procedimiento, según la invención, y sus determinaciones pueden llevarse a cabo en un dispositivo diagnóstico por medio de un autómata de análisis, en especial mediante un encriptador (http://www.kryptor.net/).
Según otra realización, el procedimiento de la invención y sus determinaciones pueden realizarse mediante una prueba rápida (por ejemplo, prueba de flujo lateral (lateral flow) o punto de cuidado (point of care)), ya sea en determinaciones de parámetros individuales o múltiples. Según una realización muy preferente se trata de una autoprueba o de un dispositivo adecuado para el diagnóstico de urgencia.
15 Además, la invención se refiere a la utilización de NT-proET-1 o fragmentos de la misma, para la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas y/o para el diagnóstico in vitro para el diagnóstico precoz o diferencial o para el pronóstico de enfermedades cardíacas.
Otro objetivo consiste en la utilización de un dispositivo diagnóstico adecuado para llevar a cabo el procedimiento, según la invención.
En el marco de la presente invención, con un dispositivo diagnóstico de este tipo se entenderá especialmente un “array” o conjunto, o un “assay” o prueba (por ejemplo, un inmunoensayo, ELISA, etc.), y en el más amplio sentido,
25 un dispositivo para llevar a cabo el procedimiento, según la invención.
La invención se refiere además a la utilización de un kit para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas, que contiene agentes reactivos de detección para determinar NT-proET-1 o fragmentos de las mismas, en su caso, otros marcadores mencionados anteriormente. Estos reactivos de detección comprenden, por ejemplo, anticuerpos, etc.
Los siguientes ejemplos y figuras sirven para explicar más detalladamente la invención, pero sin limitar la invención a estos ejemplos y figuras.
35 Ejemplos y figuras:
Inmunoensayo
Se ha utilizado un inmunoensayo tipo sándwich para la medición de NT-proET-1, tal como se describe en Struck y otros (Struck J, Morgenthaler NG, Bergmann A. “Proteolytic processing pattern of the endothelin-1 precursor in vivo” [Procesamiento proteolítico de muestras de la precursora de endotelina-1 in vivo]. Péptidos 2005; 26; 2482-6).
Síntesis de péptidos:
45 Derivado de la conocida secuencia de aminoácidos de preproET-1 (figura 1) se eligieron dos regiones (pos. 18-31, 32-52).
Las regiones fueron sintetizadas químicamente como péptidos solubles de acuerdo con un procedimiento estándar, en un caso complementadas por un resto de cisteína N-terminal, luego fueron depuradas, controladas en cuanto a su calidad mediante espectrometría de masas y HPLC de fase inversa y liofilizadas en alícuotas (firma JPT, Berlín, Alemania). Las secuencias de aminoácidos de los péptidos son los siguientes:
PAV15 CAPETAVLGAELSAV pos. 18-31 de preproET-1 (figura 1) MPGC22 GENGGEKPTPSPPWRLRRSKRC pos. 32-52 de preproET-1 (figura 1).
55 Asimismo, se ha sintetizado un péptido que comprende la región pos. 18-52 de preproET-1 (PAR35 APETAVLGAELSAVGENGGEKPTPSPPWRLRRSKR).
Conjugación e inmunización
Mediante MBS (éster m-maleimidobenzoil-N-hidroxi-succinimida) fueron conjugados los péptidos PAV15 y MPGC22 en la proteína portadora KLH (hemocianina Keyhole limpet) (véanse las instrucciones de trabajo “NHS-Esters-Maleimide Crosslinkers”, firma PIERCE, Rockford, IL, EEUU). Con estos conjugados fueron inmunizados corderos según el siguiente esquema: Cada cordero recibió inicialmente 100 μg de conjugado (indicación de masas referida a
65 la porción de péptido del conjugado) y, a continuación, cada 4 semanas 50 μg de conjugado (indicación de masas referida a la porción de péptido del conjugado). Empezando con el cuarto mes después del inicio de la inmunización fueron extraídos cada 4 semanas 700 ml de sangre a cada cordero y mediante centrifugación se obtuvo, a partir de la misma, un antisuero. Las conjugaciones, las inmunizaciones y la obtención de antisueros fueron llevadas a cabo por la firma MicroPharm, Carmarthenshire, Reino Unido.
5 Depuración de los anticuerpos
En un procedimiento de 1 etapa, a partir de los antisueros, que se habían obtenido empezando en el cuarto mes tras la inmunización, se prepararon los anticuerpos específicos para los péptidos. A tal efecto, primero los péptidos PAV15 y MPGC22 fueron acoplados al gel SulfoLink (véanse las instrucciones de trabajo “SulfoLink Kit” firma PIERCE, Rockford, IL, EEUU). Para el acoplamiento se ofrecieron 5 mg de péptido por 5 ml de gel, respectivamente.
La depuración de afinidad de anticuerpos específicos para péptidos a partir de antisueros de cordero contra los péptidos se realizó de la siguiente manera:
15 Las columnas de péptido fueron, en primer lugar, lavadas alternativamente tres veces con 10 ml de tampón de elución respectivamente (ácido cítrico 50 mM, pH 2,2) y tampón de fijación (fosfato sódico 100 mM, Tween al 0,1%, pH 6,8). 100 ml de los antisueros fueron filtrados a través de 0,2 1m y mezclados con el material de columna existente. A tal efecto, el gel fue barrido cuantitativamente de la columna con 10 ml de tampón de fijación. La incubación se realizó durante la noche a temperatura ambiente con agitación. Las preparaciones se pasaron cuantitativamente a columnas vacías (NAP 25, Pharmacia, vaciadas). Se desecharon los filtrados. A continuación se realizó el lavado con 250 ml de tampón de fijación libre de proteína (contenido de proteína del eluido de lavado < 0,02 A280 nm). Se aportó tampón de elución a las columnas lavadas, y se recogieron fracciones de 1 ml.
Se determinó el contenido de proteína de cada fracción mediante el método BCA (véanse las instrucciones de
25 trabajo de la firma PIERCE, Rockford, IL, EEUU). Fueron reunidas las fracciones con concentraciones de proteína > 0,8 mg/ml. Tras determinación de la proteína del “pool” mediante el método BCA, se obtuvieron unas producciones de 27 mg para el anticuerpo anti-PAV15 y de 35 mg para el anticuerpo anti-MPGC22.
Marcado
Por medio de una columna de filtración en gel NAP-5 (Pharmacia), 500 1l del anticuerpo anti-MPGC22 purificado (véase lo indicado anteriormente) se pasaron a 1 ml de tampón de fosfato de potasio 100 mM (pH 8,0) según las instrucciones de trabajo. Las concentraciones de proteína de la solución de anticuerpos se ajustaron a un valor de 1,5 mg/ml mediante el tampón de fosfato de potasio 100 mM (pH 8,0).
35 Para el marcado por quimioluminiscencia se siguió tratando el anticuerpo de la siguiente manera: 67 1l de la solución de anticuerpos fueron mezclados con 10 1l de éster MA70-acridinio-NHS (1 mg/ml; firma HOECHST Behring) y se incubaron durante 15 minutos a temperatura ambiente. Luego fueron añadidos 423 1l de glicina 1 M y se prosiguió la incubación por espacio de otros 10 minutos. Por medio de una columna de filtración en gel NAP-5 (Pharmacia), la preparación de marcado se pasó a continuación a 1 ml de eluyente A (fosfato de potasio 50 mM, NaCl 100 mM, pH 7,4) según las instrucciones de trabajo, y fue además liberada de componentes de bajo peso molecular. Para la separación de los últimos residuos de etiquetas no fijadas a anticuerpos fue efectuada una HPLC por filtración en gel (columna: Waters Protein Pak SW300). La muestra fue aplicada y cromatografiada con eluyente A con un caudal de 1 ml/min. Con un fotómetro de flujo fueron medidas las longitudes de onda de 280 nm y 368 nm.
45 La relación de absorción de 368 nm/280 nm como medida para el grado de marcado del anticuerpo fue en el pico de 0,10 +/- 0,01. Las fracciones con contenido de anticuerpos monómeros (tiempo de retención 8-10 min) fueron recogidas y reunidas en 3 ml de fosfato sódico 100 mM, NaCl 150 mM, albúmina de suero bovino al 5%, azida sódica al 0,1%, pH 7,4.
Acoplamiento
Tubos de poliestireno de 5 ml irradiados (firma Greiner) fueron recubiertos de anticuerpo anti-PAV15 purificado de la siguiente manera: el anticuerpo fue diluido en Tris 50 mM, NaCl 100 mM, pH 7,8, hasta una concentración de 6,6 1g/ml. Se pipetearon al interior de cada tubo 300 1l de esta solución. Los tubos fueron incubados durante 20 horas a
55 22º C. Se aspiró la solución. Entonces se llenó cada tubo con 4,2 ml de fosfato sódico 10 mM, Karion FP al 2%, albúmina de suero bovino al 0,3%, pH 6,5. Tras 20 horas se aspiró la solución. Los tubos fueron finalmente secados en un secador al vacío.
Realización y evaluación del inmunoensayo
Sirvió de material patrón el péptido PAR35 que fue diluido en serie en suero normal de caballo (firma SIGMA). A los patrones así fabricados les fueron atribuidas concentraciones de acuerdo con la pesada de péptidos.
El inmunoensayo tipo sándwich se preparó de la siguiente manera: en los respectivos tubos de ensayo recubiertos
65 de anticuerpos se pipetearon 50 μl de patrones o muestras, así como 200 μl de tampón de ensayo (fosfato sódico 100 mM, NaCl 150 mM, albúmina de suero bovino al 5%, IgG no específica de cordero al 0,1%, azida sódica al 0,1%, pH 7,4) que contenía 1 millón de RLU (unidades relativas de luz) del anticuerpo marcado con MA70. Se procedió a incubación durante 2 horas a 22º C con sacudidas. Luego se procedió 4 veces al lavado con 1 ml de solución de lavado (Tween 20 al 0,1%) por tubo, dejando escurrir cada vez y procediendo a la medición de la quimioluminiscencia fijada al tubo en un luminómetro (firma BERTHOLD, LB952T; reactivos básicos de BRAHMS
5 AG). Utilizando el software MultiCalc (Spline Fit) se procedió a la lectura de la concentración de NT-proET-1 de las muestras en la curva patrón.
El analito que puede ser medido con el ensayo descrito se denomina proendotelina-1 N-terminal (NT-proET-1).
10 Evaluación clínica (los ejemplos que se refieren a los pacientes con enfermedades de las vías respiratorias y/o pulmones sirven de referencia).
Rango normal
15 Las concentraciones de NT-proET-1 fueron determinadas en muestras de personas de control sanas (n=200). La mediana se situó en 30,5 pmol/L, el valor medido más pequeño estuvo en 2,0, al más grande en 53 pmol/L, los percentiles 95% en 16,3 o 47,2 pmol/L, respectivamente.
Insuficiencia cardíaca / Gravedad
20 Se midieron las concentraciones de NT-proET-1 en pacientes con insuficiencia cardíaca crónica o aguda descompensada. Las concentraciones NT-proET-1 estaban asociadas a la gravedad de la insuficiencia cardíaca, en especial con la gravedad aumentada: las medianas de las concentraciones de NT-proET-1 en las cuatro categorías de gravedad NYHA I-IV eran: 35,4, 37,3, 45,5 ó 83,9 pmol/L, respectivamente (véase la figura 2).
25 Insuficiencia cardíaca crónica / Diagnóstico
De un colectivo de 316 pacientes con insuficiencia cardíaca crónica, así como 200 controles sanos se determinaron los valores NT-proET-1. El análisis de las características del operador receptor arrojó una AUC de 0,72. Con un valor
30 de corte de 49,7 pmol/L la sensibilidad era del 34,3% con una especificidad del 98%. Con un valor de corte de 47,2 pmol/L, la sensibilidad era del 38,5% con una especificidad del 95%.
Insuficiencia cardíaca crónica / Pronóstico
35 Se determinaron los valores NT-proET-1 de un colectivo de 316 pacientes con insuficiencia cardíaca crónica. Los pacientes fueron observados durante un período de tiempo medio de 360 días. En este período murieron 42 pacientes, 274 sobrevivieron. Mediante el análisis de las características del operador receptor se detectó el mejor valor de corte (definido como el mayor producto de sensibilidad y especificidad) para el pronóstico de la mortalidad: 51,3 pmol/L. Con este valor de corte la sensibilidad del pronóstico era del 71,4%, la especificidad era del 74,5%. La
40 relación de probabilidad (likelihood ratio) de morir con un valor de corte de 51,3 pmol/L era: 2,8.
<51,3 pmol/L
>51,3 pmol/L
Sobrevivientes
204 70
Muertos
12 30
Insuficiencia cardíaca aguda / Diagnóstico
45 Se determinaron los valores NT-proET-1 de un colectivo de 125 pacientes con insuficiencia respiratoria aguda. De los 125 pacientes 69 pacientes también tenían insuficiencia cardíaca. El análisis de las características del operador receptor para el diagnóstico diferencial de la insuficiencia cardíaca arrojó una AUC de 0,72. Con un valor de corte de 111 pmol/L la sensibilidad era del 10,2% con una especificidad del 98%. Con un valor de corte de 90,5 pmol/L la sensibilidad era del 17,5% con una especificidad del 95%.
50 Insuficiencia cardíaca aguda / Pronóstico
Se determinaron los valores NT-proET-1 de un colectivo de 69 pacientes con insuficiencia cardíaca aguda decompensada. Los pacientes fueron observados durante un período de tiempo de 360 días. Durante este período
55 de tiempo murieren 21 pacientes, 48 sobrevivieron. Mediante un análisis de las características del operador receptor se detectó el mejor valor de corte (definido como el mayor producto de sensibilidad y especificidad) para el pronóstico de la mortalidad: 64 pmol/L. Con este valor de corte la sensibilidad del pronóstico era del 66,6%, la especificidad era del 68,7%. La relación de probabilidad (likelihood ratio) de morir con un valor de corte de 64 pmol/L era: 2,0.
<64 pmol/L
>64 pmol/L
Sobrevivientes
33 15
Muertos
7 14
Infarto de miocardio / Pronóstico
5 Se obtuvieron muestras de 246 pacientes con un infarto de miocardio agudo tres días después de sufrir el infarto cardíaco y se midieron los valores NT-proET-1. Los pacientes fueron observados durante un período de tiempo de 60 días. Durante este período de tiempo 220 pacientes no sufrieron ninguna adversidad, 26 murieren o fueron rehospitalizados debido a una insuficiencia cardíaca. Mediante un análisis de las características del operador receptor (AUC = 0,70) se detectó el mejor valor de corte (definido como el mayor producto de sensibilidad y
10 especificidad) para el pronóstico de la mortalidad o la rehospitalización por insuficiencia cardíaca: 63,9 pmol/L. Con este valor de corte la sensibilidad del pronóstico era del 65,4%, la especificidad era del 73,6%. La relación de probabilidad (likelihood ratio) de morir con un valor de corte de 63,9 pmol/L era: 2,5.
<63,9 pmol/L
>63,9 pmol/L
Ninguna adversidad
162 58
Muerte/insuficiencia cardíaca
9 17
15 Neumonía / Gravedad y pronóstico
Se obtuvieron en el hospital muestras de 142 pacientes con neumonía adquirida en la comunidad y se midieron los
valores NT-proET-1. Los pacientes fueron observados durante un período de tiempo de 70 días. En este período de
tiempo murieron 10 pacientes. Las concentraciones de NT-proET-1 aumentaron con el PSI (índice de gravedad de la 20 neumonía), una puntuación para la gravedad de la enfermedad (figura 3), y eran elevadas en la mediana, con 53
pmol/L con respecto a controles sanos (30,5 pmol/L). Para el pronóstico de la mortalidad el análisis de las
características de operador-receptor arrojó una AUC de 0,89. Mediante el análisis de las características de operador
receptor se detectó el mejor valor de corte (definido como el mayor producto de sensibilidad y especificidad) para el
pronóstico de la mortalidad: 77 pmol/L. Con este valor de corte, la sensibilidad del pronóstico era del 100%, la 25 especificidad era del 81,2%. La relación de probabilidad (likelihood ratio) de morir con un valor de corte de 77 pmol/L
era: 5,5.
<77 pmol/L
>77 pmol/L
Ninguna adversidad
108 24
Muerte
0 10
EPOC exacerbada
30 Se midieron los valores NT-proET-1 de 53 pacientes con enfermedades pulmonares obstructivas crónicas e infección simultánea de las vías respiratorias inferiores. Con 47 pmol/L en la mediana estos pacientes presentaban valores superiores a los de los controles sanos (30,5 pmol/L), pero inferiores a los de los pacientes con neumonía (véase arriba, 53 pmol/L).
35 Tabla: Clasificación de la Asociación del Corazón de Nueva York (NYHA)
NYHA I Ninguna limitación a la actividad física. La actividad física cotidiana no produce ningún agotamiento inadecuado, arritmias, insuficiencia respiratoria o angina de pecho (angina pectoris). 40 NYHA II Ligera limitación de la actividad física. Ninguna molestia en reposo. Agotamiento, arritmias, insuficiencia respiratoria o angina de pecho al realizar actividades físicas cotidianas.
NYHA III Marcada limitación del rendimiento físico al realizar actividades habituales. Ninguna molestia en 45 reposo. Agotamiento, arritmias, insuficiencia respiratoria o angina de pecho al realizar actividades físicas menores.
NYHA IV Molestias al realizar cualquier actividad física y en reposo. Postración en cama.
50 Descripción de las figuras:
En la figura 1 se muestra la secuencia de aminoácidos (AS) de preproendotelina-1 con los segmentos 1-17 péptido de señal, 18-52 NT-proET-1, 53-73 ET-1 maduro, 53-90 ET-1 grande (ó 74-90).
55 En la figura 2 se muestran concentraciones de NT-proET-1 en función de la gravedad de la insuficiencia cardíaca. Se representan los valores medios (+SEM) de controles sanos (n=200), así como de pacientes con insuficiencia cardíaca agrupados según la gravedad NYHA (NYHA I: n=22, NYHA II: n=126, NYHA III: n=132, NYHA IV: n=17).
En la figura 3 se muestran concentraciones de NT-proET-1 en función de la gravedad de la neumonía. Se representan los valores medio (+SEM) de controles sanos (n=200), así como de pacientes con neumonía agrupados 5 según el índice de gravedad de la neumonía (PSI I: n=36, PSI II: n=44, PSI III: n=25, PSI IV: n=19, PSI V: n=18).
LISTADO DE SECUENCIAS
<110> Brahms Aktiengesellschaft 10
<120> Diagnóstico y estratificación de riesgo mediante NT-proET-1
<130> 03/07 BRA35WOEP-02 15
<140> PCT/DE2008/000781
<141> 2008-05-08
<150> 10 2007 041 443.1 20 <151> 2007-05-08
<160> 6
<170> Patente versión 3.3 25
<210> 1
<211> 212
<212> PRT
<213> Humano 30
<400> 1
<210> 2 5 <211> 14
<212> PRT
<213> Humano
<400> 2 10
<210> 3
<211> 21
<212> PRT
<213> Humano
<400> 3
10
<210> 4
<211> 15
<212> PRT
<213> Artificial
15
<220>
<223> derivado sintético
<400> 4
20
<210> 5
<211> 22 25 <212> PRT
<213> artificial
<220>
<223> derivado sintético 30
<400> 5
35 <210> 6
<211> 35
<212> PRT
<213> Humano
40 <400> 6

Claims (17)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Procedimiento para el diagnóstico in vitro y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas,
    5 caracterizado porque se realiza una determinación del fragmento libre 18-52 de SEQ ID nº 1 (NT-proET-1) o de un fragmento elegido de SEQ ID nº 2, SEQ ID nº 3 en una muestra de líquido corporal de un paciente a examinar.
  2. 2.
    Procedimiento para el diagnóstico in vitro y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas, según la reivindicación 1, caracterizado porque las enfermedades cardíacas son seleccionadas entre síndrome coronario agudo, post-infarto de miocardio, insuficiencia cardíaca.
  3. 3.
    Procedimiento para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo, según una de las reivindicaciones anteriores, para la identificación de pacientes con un riesgo elevado y/o un pronóstico desfavorable de enfermedades cardíacas.
  4. 4.
    Procedimiento para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo, según una de las reivindicaciones anteriores, en el que el paciente es un paciente sintomático y/o un paciente asintomático, en especial un paciente de urgencia.
  5. 5.
    Procedimiento para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo, según una de las reivindicaciones anteriores, para el control de la terapia de enfermedades cardíacas, especialmente en la medicina intensiva o en la medicina de urgencia.
  6. 6.
    Procedimiento para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas, según una de las reivindicaciones anteriores, para llevar a cabo decisiones clínicas, especialmente el tratamiento continuado y
    25 terapias con fármacos, especialmente en la medicina intensiva o en la medicina de urgencia, incluyendo la decisión de hospitalizar a un paciente.
  7. 7.
    Procedimiento para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas, según una de las reivindicaciones anteriores, para el pronóstico, para la detección precoz y la detección del diagnóstico diferencial, para la evaluación de la gravedad y para la evaluación del desarrollo concomitante a la terapia.
  8. 8.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque adicionalmente se lleva a cabo la determinación de, como mínimo, otro marcador elegido entre el grupo de marcadores inflamatorios, marcadores cardiovasculares, marcadores neurohormonales o marcadores isquémicos.
  9. 9.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el marcador inflamatorio está elegido entre, como mínimo, un marcador del grupo de la proteína C reactiva (PCR), las citosinas tales como, por ejemplo, TNF-alfa, las interleucinas tales como, por ejemplo IL-6, la procalcitonina (1-116, 3-116) y moléculas de adhesión tales como VCAM ó ICAM.
  10. 10.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el marcador cardiovascular está elegido entre, como mínimo, un marcador del grupo de la creatinquinasa, la mioglobina, la mieloperoxidasa, la proteína natriurética, en especial ANP (ó ANF), proANP, NT-proANP, BNP, proBNP, NT-proBNP o una secuencia parcial de las mismas respectivamente, troponina cardíaca, CRP, así como (pro)hormonas reguladoras de la
    45 circulación tales como el propéptido liberador de gastrina (proGRP), proendotelina-2, proendotelina-3, proleptina, proneuropéptido-Y, prosomatostatina, proneuropéptido-YY, por-opiomelanocortina, proadrenomedulina (proADM), provasopresina (proAVP) o una secuencia parcial de las mismas, respectivamente.
  11. 11.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el marcador isquémico está elegido entre, como mínimo, un marcador del grupo troponina I y T, CK-MB.
  12. 12.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el marcador neurohormonal es, como mínimo, una proteína natriurética, en especial ANP (ó ANF), proANP, NT-proANP, BNP, proBNP, NTproBNP o una secuencia parcial de las mismas.
  13. 13.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque se llevan a cabo determinaciones paralelas o simultáneas de los marcadores.
  14. 14.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las determinaciones se llevan a cabo en, como mínimo, una muestra de paciente.
  15. 15.
    Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las determinaciones son llevadas a cabo en un aparato automático de análisis, en especial mediante un Kriptor.
    65 16. Procedimiento, según una de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque las determinaciones se realizan mediante una prueba rápida, en especial mediante determinaciones de parámetros individuales o múltiples.
  16. 17. Utilización del fragmento libre 18-52 de SEQ ID nº 1 (NT-proET-1) o de un fragmento elegido de SEQ ID nº 2, SEQ ID nº 3, para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas y, en su caso, de otros marcadores, según una de las reivindicaciones 8 a 12.
  17. 18. Utilización de un kit para el diagnóstico y/o la estratificación de riesgo de enfermedades cardíacas que contiene reactivos de detección para determinar el fragmento libre 18-52 de SEQ ID nº 1 (NT-proET-1) o un fragmento elegido entre SEQ ID nº 2, SEQ ID nº 3 y, en su caso, otros marcadores según una des las reivindicaciones 8 a 12 y coadyuvantes.
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Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8906857B2 (en) * 2005-12-01 2014-12-09 B.R.A.H.M.S. Gmbh Methods for the diagnosis and treatment of critically ill patients with endothelin, endothelin agonists and adrenomedullin antagonists
US7838250B1 (en) 2006-04-04 2010-11-23 Singulex, Inc. Highly sensitive system and methods for analysis of troponin
JP5308328B2 (ja) 2006-04-04 2013-10-09 シングレックス，インコーポレイテッド トロポニンの分析のための高感度のシステムおよび方法
DE102006046996A1 (de) * 2006-10-01 2008-04-03 Brahms Aktiengesellschaft Diagnose von Infektionen oder Entzündungserkrankungen der Atemwege und Lunge assoziiert mit Herzinsuffizienz
EP2084543B1 (de) 2006-10-26 2017-10-18 B.R.A.H.M.S GmbH Risikostratifizierung des akuten koronarsyndroms mittels fragmenten / teilpeptiden des provasopressins, insbesondere copeptin oder neurophysin ii
DE102006053442A1 (de) * 2006-11-12 2008-05-15 Brahms Aktiengesellschaft Diagnose und Risikostratifizierung von Infektionen und chronischen Erkrankungen der Atemwege und Lunge mittels proVasopressin, insbesondere Copeptin oder Neurophysin II
DE102006060112A1 (de) 2006-12-20 2008-06-26 Brahms Aktiengesellschaft Diagnose und Risikostratifizierung mittels dem neuen Marker CT-proADM
DE102007021443A1 (de) * 2007-05-08 2008-11-13 Brahms Aktiengesellschaft Diagnose und Risikostratifizierung mittels NT-proET-1
JP5753159B2 (ja) * 2009-05-05 2015-07-22 ベー．エル．アー．ハー．エム．エス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 内皮性機能／機能不全に関連した疾患に罹患している患者の血管作動性ホルモンに基づいた層化
WO2010144358A1 (en) 2009-06-08 2010-12-16 Singulex, Inc. Highly sensitive biomarker panels
EP2635904A1 (en) * 2010-11-01 2013-09-11 B.R.A.H.M.S GmbH Prognosis and risk assessment of patients with non-specific complaints
EP2637023A1 (en) * 2012-03-08 2013-09-11 B.R.A.H.M.S GmbH Prediction of outcome in patients with chronic obstructive pulmonary disease
KR101531835B1 (ko) * 2013-10-16 2015-06-29 한국표준과학연구원 화학적 동위원소 치환법을 이용한 혈액 내 뇌성 나트륨 이뇨 펩타이드 질량분석법
CN106370856B (zh) * 2016-08-16 2019-04-02 北京师范大学 肺纤维化的尿液蛋白标志物及其在诊断和预后中的用途
US11931207B2 (en) 2018-12-11 2024-03-19 Eko.Ai Pte. Ltd. Artificial intelligence (AI) recognition of echocardiogram images to enhance a mobile ultrasound device
US12400762B2 (en) 2018-12-11 2025-08-26 Eko.Ai Pte. Ltd. Automatic clinical workflow that recognizes and analyzes 2D and doppler modality echocardiogram images for automated cardiac measurements and diagnosis of cardiac amyloidosis and hypertrophic cardiomyopathy
US11446009B2 (en) 2018-12-11 2022-09-20 Eko.Ai Pte. Ltd. Clinical workflow to diagnose heart disease based on cardiac biomarker measurements and AI recognition of 2D and doppler modality echocardiogram images
US12001939B2 (en) 2018-12-11 2024-06-04 Eko.Ai Pte. Ltd. Artificial intelligence (AI)-based guidance for an ultrasound device to improve capture of echo image views
US12322100B2 (en) 2018-12-11 2025-06-03 Eko.Ai Pte. Ltd. Automatic clinical workflow that recognizes and analyzes 2D and doppler modality echocardiogram images for automated cardiac measurements and grading of aortic stenosis severity

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3519139B2 (ja) * 1993-10-19 2004-04-12 武田薬品工業株式会社 エンドセリン拮抗阻害剤スクリーニング用キット及びスクリーニング方法
DE19847690A1 (de) * 1998-10-15 2000-04-20 Brahms Diagnostica Gmbh Verfahren und Substanzen für die Diagnose und Therapie von Sepsis und sepsisähnlichen systemischen Infektionen
MXPA01008870A (es) * 1999-03-05 2004-08-12 Epigenesis Pharmaceuticals Inc Metodo para validar y/o invalidar blancos y rutas.
AUPR005600A0 (en) * 2000-09-12 2000-10-05 University Of Sydney, The Diagnostic assay
US7713705B2 (en) * 2002-12-24 2010-05-11 Biosite, Inc. Markers for differential diagnosis and methods of use thereof
JP5179011B2 (ja) * 2002-10-09 2013-04-10 ディーエムアイ バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 胎盤虚血および多臓器不全のモニタリング
CA2536293A1 (en) * 2003-08-22 2005-03-03 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating copd and pulmonary hypertension
DE502004000540D1 (de) * 2004-02-13 2006-06-14 Brahms Ag Verfahren zur Bestimmung der Bildung von Endothelinen zu Zwecken der medizinischen Diagnostik, sowie Antikörper und Kits für die Durchführung eines solchen Verfahrens
US20050244839A1 (en) * 2004-04-29 2005-11-03 Cheung Siu T Granulin-epithelin precursor (GEP) overexpression as a target for diagnosis, prognosis and treatment of hepatocellular carcinoma (HCC)
ES2300681T3 (es) * 2004-07-22 2008-06-16 Brahms Aktiengesellschaft Procedimiento para el diagnostico y tratamiento de pacientes criticos con endotelina, agonistas de endotelina y antagonistas de adrenomedulina.
DE102004051847B4 (de) * 2004-10-25 2008-09-18 Dade Behring Marburg Gmbh Verhältnis von PIGF und Flt-1 als prognostischer Parameter bei kardio-vaskulären Erkrankungen
CN101160528A (zh) * 2005-02-14 2008-04-09 惠氏公司 Il17-f在诊断和治疗气道炎症中的用途
JP2006292623A (ja) * 2005-04-13 2006-10-26 Univ Of Dundee 心不全における突然死のマーカー
UA11822U (en) * 2005-06-21 2006-01-16 L T Malaia Inst Of Therapy Of Method for determining the risk of the development and progressing of chronic obstructive pulmonary disease
US20080221033A1 (en) * 2005-07-29 2008-09-11 Koninklijke Philips Electronics N. V. Monitoring of Cardiac Natriuretic Peptides During Diagnosis, Management, and Treatment of Cardiac Diseases
DE102006046996A1 (de) * 2006-10-01 2008-04-03 Brahms Aktiengesellschaft Diagnose von Infektionen oder Entzündungserkrankungen der Atemwege und Lunge assoziiert mit Herzinsuffizienz
DE102006060835A1 (de) * 2006-12-22 2008-06-26 Brahms Aktiengesellschaft Diagnose und Risikostratifizierung des akuten Koronarsyndroms mittels CT-proET-1 in Kombination mit NT-proBNP
DE102007021443A1 (de) * 2007-05-08 2008-11-13 Brahms Aktiengesellschaft Diagnose und Risikostratifizierung mittels NT-proET-1

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