ES2446352T3

ES2446352T3 - Derivados de amidas del ácido 6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

Info

Publication number: ES2446352T3
Application number: ES10720512.2T
Authority: ES
Inventors: Rene Marc Lemieux; Steven Richard Brunette; Joshua Courtney Horan; Jennifer A. Kowalski; Michael David Lawlor; Bryan Mckibben; Craig Andrew Miller; Antonio J.M. Barbosa
Original assignee: Boehringer Ingelheim International GmbH
Current assignee: Boehringer Ingelheim International GmbH
Priority date: 2009-06-02
Filing date: 2010-05-26
Publication date: 2014-03-07
Anticipated expiration: 2030-05-26
Also published as: AU2010256994A1; TW201109332A; CN102448960A; PL2445909T3; WO2010141273A1; NZ595622A; KR20120024699A; BRPI1012581A2; EP2445909B1; JP2012528859A; EP2445909A1; TWI443099B; DK2445909T3; MX2011012717A; AR076942A1; US8575360B2; IL215521A0; EA019990B1; US20120252817A1; JP5384732B2

Abstract

Un compuesto de fórmula I: **Fórmula** en donde: R1 se selecciona de -CN, -OCF3, -CF3, halógeno, heteroarilo, opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo C1-3, y fenilo, opcionalmente sustituido con halógeno; R2 es -Cl o -CF3; R3 es H o halógeno; X es un grupo**Fórmula** en la que R4 se selecciona de: (A) -H; (B) alquilo C1-3 opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de: a) cicloalquilo C3-6; b) -OR9; c) -NR9R10; d) -SOR9; e) -SO2R9; f) -C(O)NR9R10; g) -C(O)OR9; h) heteroarilo opcionalmente sustituido con alquilo C1-3; i) heterociclilo, opcionalmente sustituido con alquilo C1-3; y j) fenilo, opcionalmente sustituido con alquilo C1-3; (C) cicloalquilo C3-6; (D) heteroarilo; y (E) fenilo, opcionalmente sustituido con halógeno, -OR9, -CN o -CF3; R5 es H o alquilo C1-3; o R4 y R5, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado con 3-7 átomos de carbono y en donde un átomo de carbono en dicho anillo hidrocarbonado puede estar opcionalmente reemplazado por -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, NH-, -NCH3- o -NC(O)CH3-; Y es un grupo **Fórmula**

Description

Derivados de amidas del ácido 6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

1.CAMPO TÉCNICO

La presente invención se refiere en general a una serie de nuevos derivados de amidas de ácido 6,7-dihidro-5Himidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico, a la síntesis de estos compuestos, a su uso en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y a composiciones farmacéuticas que comprenden estos compuestos.

2. INFORMACIÓN ANTECEDENTE

Las investigaciones de la última década han ayudado a poner en claro los eventos moleculares que tienen lugar en las interacciones de una célula con otra en el organismo, especialmente aquellos eventos implicados en el movimiento y la activación de células del sistema inmunitario (véase, en general, von Andrian UH, et al. N Engl J Med 2000; 343(14):1020-1034). Las proteínas de la superficie celular, y especialmente las Moléculas de Adhesión Celular Intracelular ("ICAM") y las "Leucointegrinas", incluyendo LFA-1, MAC-1 y p150,95 (denominadas en la nomenclatura de la OMS CD18/CD11a, CD18/CD11b y CD18/CD11c, respectivamente) han sido correspondientemente objeto de investigación y desarrollo farmacéutico, teniendo como meta la intervención en los procesos de extravasación de leucocitos a los sitios de lesión y movimiento de leucocitos hacia dianas diferentes. Por ejemplo, actualmente está aceptado que antes de la extravasación de leucocitos, que es un componente obligatorio de la respuesta inflamatoria, ocurre la activación de integrinas constitutivamente expresadas en leucocitos y le sigue una firme interacción ligando/receptor entre las integrinas (p. ej., LFA-1) y una o varias moléculas de adhesión intracelular (ICAM) diferentes designadas ICAM-1, ICAM-2 o ICAM-3 que se expresan en las superficies de células endoteliales de los vasos sanguíneos y otros leucocitos. La interacción de las ICAM con las Leucointegrinas es un paso vital en el funcionamiento normal del sistema inmunitario. Los procesos inmunitarios, tales como la presentación de antígenos, la citotoxicidad mediada por células T y la extravasación de leucocitos requieren todos adhesión celular mediada por ICAM que interactúan con las Leucointegrinas. Véase, en general, Kishimoto, T. K.; Rothlein; R. R. Adv. Pharmacol. 1994, 25, 117-138 y Diamond, M.; Springer, T. Current Biology, 1994, 4, 506-532.

Se ha identificado un grupo de individuos que carecen de expresión apropiada de Leucointegrinas, una afección denominada “Deficiencia de Adhesión de Leucocitos I ” (o LAD por sus siglas en inglés) (Anderson, D. C.; et al., Fed. Proc. 1985, 44, 2671-2677 y Anderson, D. C.; et al., J. Infect. Dis. 1985, 152, 668-689). Estos individuos son incapaces de presentar una o más respuestas inflamatorias y/o inmunitarias normales debido a una incapacidad de sus células de adherirse a sustratos celulares. Estos datos demuestran que las reacciones inmunitarias se mitigan cuando los linfocitos son incapaces de adherirse en un modo normal debido a la falta de moléculas de adhesión funcionales de la familia CD18. En virtud de que los pacientes con LAD, que carecen de CD18 no pueden presentar una respuesta inflamatoria, se creía que el antagonismo de las interacciones CD18/CD11/ICAM también inhibiría la respuesta inflamatoria. La función de la LFA-1 en el tráfico y la activación de células inmunitarias está bien consolidada y sustentada por estudios con ratones deficientes en LFA-1 y en el bloqueo de anticuerpos anti-LFA-1. In vitro, los linfocitos deficientes en LFA-1 se caracterizan por defectos en la agregación y proliferación. In vivo, se observan déficits paralelos en las respuestas de hipersensibilidad de tipo demorado (DTH). En modelos animales de trasplante de órganos, los anticuerpos anti-LFA-1 han demostrado ser eficaces. Tomados en conjunto, estos estudios proporcionan un sustento para la función de LFA-1 en la iniciación y/o propagación de respuestas inflamatorias (Giblin, P.A. et al. Curr. Pharm. Design, 2006, 12: 2771-2795).

Se ha demostrado que el antagonismo de la interacción entre las ICAM y las Leucointegrinas puede ser realizado por agentes dirigidos contra cualquiera de los componentes. Específicamente, el bloqueo de las CAM, como por ejemplo la ICAM-1, o las Leucointegrinas, como por ejemplo la LFA-1, por anticuerpos dirigidos contra alguna o ambas de estas moléculas inhibe eficazmente las respuestas inflamatorias. In vitro, los modelos de inflamación y respuesta inmunitaria inhibidos por anticuerpos para las ICAM o las Leucointegrinas incluyen la proliferación de linfocitos inducida por mitógenos o antígenos, agregación homotípica de linfocitos, la citólisis mediada por células T y la tolerancia inducida específica de antígenos. La relevancia de los estudios in vitro está sustentada por los estudios in vivo con anticuerpos dirigidos contra ICAM-1 o LFA-1. En numerosos modelos de trasplante, incluyendo cardíaco, de intestino, islote y córnea, se observó la prolongación de la supervivencia del injerto después del tratamiento con anti-LFA-1, solo o en combinación con anti-ICAM-1 (véase, por ejemplo, Nakakura EK et al., Transplantation 1993; 55(2):412-417). Los anticuerpos anti-LFA-1 también han demostrado un beneficio en modelos animales de esclerosis múltiple, lupus y artritis inflamatoria (véase, por ejemplo Kobayashi Y et al., Cell Immunol 1995; 164(2):295-305). Los primeros compuestos terapéuticos dirigidos a LFA-1 que se ensayaron clínicamente fueron los anticuerpos anti-LFA-1. Odulimomab demostró eficacia en ensayos clínicos de trasplante de médula ósea (Stoppa AM et al., Transpl Int 1991; 4(1):3-7) y en ensayos clínicos de trasplante de riñón (Hourmant M et al. Transplantation 1994; 58(3):377-380). El anticuerpo anti-LFA-1 humanizado Raptiva! (anti-CD11a, hu1124, efalizumab), comercializado para la psoriasis, ha proporcionado la prueba clínica del concepto de la función de LFA-1 (Leonardi CL et al., J Am Acad Dermatol 2005; 52(3 Pt 1):425-433).

Por lo tanto, la técnica anterior ha demostrado que grandes moléculas de proteínas que antagonizan la unión de las ICAM a las Leucointegrinas tienen un potencial terapéutico en mitigar respuestas inflamatorias e inmunológicas a menudo asociadas con la patogenia de muchas enfermedades autoinmunitarias o inflamatorias. No obstante, las proteínas tienen importantes deficiencias como agentes terapéuticos, que incluyen la incapacidad de administrarse oralmente y la potencial inmunorreactividad que limita la utilidad de estas moléculas para administración crónica. Asimismo, la producción de agentes terapéuticos basados en proteínas por lo general es costosa.

Por lo tanto, moléculas pequeñas, que tengan una capacidad similar a las moléculas de proteínas grandes de antagonizar directa y selectivamente la unión de las ICAM a las Leucointegrinas, serían agentes terapéuticos preferidos.

En la bibliografía, se han descrito varias moléculas pequeñas que afectan la interacción entre las ICAM y las Leucointegrinas. Por ejemplo, las patentes estadounidenses 6.355.664 (y la correspondiente WO 98/39303), 6.710.664, 6.977.267, 7.199.125 y WO 2006065908 describen una clase de moléculas pequeñas que tienen un núcleo de hidantoína, que son inhibidoras de la interacción de LFA-1 e ICAM-1. La patente de EE.UU. 6.492.408 (y el correspondiente documento WO 01/07440 A1), la patente de EE.UU. 6.844.360, la patente de EE.UU. 6.852.748, la patente de EE.UU. 7.517.897 y la solicitud de patente publicada de EE.UU. 2006/0229287 describen todas compuestos que tienen esta misma actividad que, en su lugar, tienen un núcleo de 6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2a]imidazol e inhibidores con un núcleo de 1H-imidazo-[1,2-a]imidazol-2-ona se describen por J-P Wu, et al., J. Med Chem. 2004; 47(22) 5356-5366. Además, las patentes de EE.UU. 6.673.825 y 6.974.815, y la publicación de solicitud de patente 2006/0052434 describen moléculas pequeñas que tienen un núcleo de urazol, hexahidrobencimidazol y pirrolizina, respectivamente, que son inhibidores de la interacción entre LFA-1 e ICAM-1.

BREVE COMPENDIO DE LA INVENCIÓN

La invención comprende una nueva clase de derivados de amidas del ácido 6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3carboxílico y métodos para prepararla. Estos compuestos son útiles para el tratamiento de afecciones inflamatorias, ya que exhiben un buen efecto inhibidor tras la interacción de las ICAM con las Leucointegrinas. También se espera que tengan un perfil metabólico mejorado frente a antagonistas de LFA-1 conocidos, al tiempo que se mantiene un buen antagonismo funcional de LFA-1 en un entorno de sangre entera. Por lo tanto, la invención comprende además a estos compuestos para uso en el tratamiento de afecciones inflamatorias y composiciones farmacéuticas que los comprenden, como ingredientes activos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

Todos los términos y expresiones empleados en la presente memoria descriptiva, a menos que se especifique otra cosa, deben entenderse en su significado ordinario tal como se conoce en la técnica. Por ejemplo, “alquilo C1-4” es un radical monovalente de hidrocarburo alifático saturado que contiene 1-4 carbonos tal como metilo, etilo, n-propilo, 1-metiletilo (isopropilo), n-butilo o t-butilo. Todos los grupos alquilo se deben entender como ramificados o no ramificados, si es posible estructuralmente, a menos que se indique de otro modo. Otras definiciones más específicas son las siguientes:

La expresión “cicloalquilo C3-6” significa un radical monovalente de hidrocarburo saturado cíclico que contiene 3-6 carbonos en el anillo cíclico, tal como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

El término “heterociclo” o “heterociclilo” se refiere a un radical heterociclo estable no aromático de 4-8 miembros (pero preferentemente de 5 ó 6 miembros) monocíclico o no aromático de 8-11 miembros bicíclico que puede ser saturado o insaturado. Cada heterociclo se compone de átomos de carbono y uno o más heteroátomos, preferiblemente de 1 a 4 heteroátomos, seleccionados de nitrógeno, oxígeno y azufre. El heterociclo puede estar unido por cualquier átomo del ciclo que dé como resultado la creación de una estructura estable. Salvo que se indique otra cosa, los heterociclos incluyen, pero sin quedar limitados a éstos, por ejemplo: pirrolidinilo, pirrolidinonilo, pirrolinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, sulfóxido de tiomorfolinilo, tiomorfolinilo sulfona, dioxalanilo, piperidinilo, piperazinilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranilo, 1,3-dioxolanona, 1,3-dioxanona, 1,4dioxanilo, piperidinonilo, tetrahidropirimidonilo, sulfuro de pentametileno, 5-oxo-4,5-dihidroisoxazol-3-ilo, sulfóxido de pentametileno, sulfona de pentametileno, sulfuro de tetrametileno, sulfóxido de tetrametileno y sulfona de tetrametileno.

El término “arilo” se refiere a un anillo o anillos de hidrocarburo aromático que contienen de seis a diez átomos de carbono en el anillo (por ejemplo, un arilo C6-10). El término arilo incluye anillos monocíclicos y anillos bicíclicos, en los que al menos uno de los anillos es aromático. Ejemplos no limitantes de arilos incluyen fenilo, indanilo, indenilo, benzociclobutanilo, dihidronaftilo, tetrahidronaftilo, naftilo, benzocicloheptanilo y benzocicloheptenilo.

El término “heteroarilo” deberá entenderse como un anillo aromático de 5-8 miembros monocíclico o de 8-11 miembros bicíclico que contiene 1-4 heteroátomos tales como N,O y S. A menos que se indique otra cosa, dichos heteroarilos incluyen tienilo, furanilo, isoxazolilo, oxazolilo, tiazolilo, tiadiazolilo, oxadiazolilo, 3-hidroxi-1H-pirazol-5ilo, 5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-ilo, 5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-tiadiazol-3-ilo, 3-hidroxi-isoxazol-5-ilo, tetrazolilo,

pirazolilo, pirrolilo, imidazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, piridazinilo, piranilo, quinoxalinilo, indolilo, bencimidazolilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzotienilo, quinolinilo, quinazolinilo, naftiridinilo, indazolilo, triazolilo, pirazolo[3,4-b]pirimidinilo, purinilo, pirrolo[2,3-b]piridinilo, pirazolo[3,4-b]piridinilo, tubercidinilo, oxazo[4,5-b]piridinilo e imidazo[4,5-b]piridinilo. Cualquier heteroátomo de nitrógeno en el anillo heteroarilo puede ser un átomo de nitrógeno oxidado, p. ej., que forme un átomo de nitrógeno cuaternizado.

Tal como se emplea en la presente memoria descriptiva, el término “halógeno” debe entenderse con el significado de bromo, cloro, flúor o yodo, preferiblemente flúor o cloro.

Los compuestos de la invención son sólo aquellos considerados ‘químicamente estables’ por los especialistas en la técnica. Por ejemplo, un compuesto con una ‘valencia colgante’, o un ‘carbanión’ no son compuestos contemplados por los métodos de la invención descritos en la presente memoria.

En general, se incluyen todas las formas tautómeras e isómeras y sus mezclas, por ejemplo, los isómeros geométricos individuales, estereoisómeros, enantiómeros, diastereoisómeros, racematos, mezclas racémicas o no racémicas de estereoisómeros, mezclas de diastereoisómeros, o mezclas de cualquiera de las formas anteriores de una estructura química o compuesto representado, a menos que en el nombre o estructura del compuesto se indique específicamente la estereoquímica o la forma isómera específica. Cualquier compuesto de esta invención que contenga uno o más átomos de carbono asimétricos puede ocurrir como racemato o mezcla racémica, enantiómero simple, mezcla diastereoisomérica y diastereoisómero individual, o mezclas de cualquiera de los anteriores. Todas estas formas isoméricas de estos compuestos están incluidas expresamente en la presente invención. Cada uno de los carbonos estereogénicos puede estar en la configuración R o S, o en una combinación de configuraciones. Algunos de los compuestos de fórmula (I) pueden existir en más de una forma tautomérica. La invención incluye métodos que emplean todos estos tautómeros.

Más detalladamente, los compuestos de la invención y sus sales incluyen átomos de carbono asimétricos y, por lo tanto, pueden existir en forma de estereoisómeros individuales, racematos y en forma de mezclas de enantiómeros y diastereoisómeros. Típicamente, dichos compuestos se prepararán en forma de una mezcla racémica. Si se desea, sin embargo, dichos compuestos pueden prepararse o aislarse en forma de estereoisómeros puros, es decir, en forma de enantiómeros o diastereoisómeros individuales, o en forma de mezclas enriquecidas en estereoisómeros usando los métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, estereoisómeros individuales de los compuestos se pueden preparar por síntesis a partir de materiales de partida ópticamente activos que contienen los centros quirales deseados o por preparación de mezclas de productos enantioméricos seguida de separación o resolución, tal como conversión en una mezcla de diastereoisómeros seguido de separación o recristalización, técnicas cromatográficas, uso de agentes de resolución quiral, o separación directa de los enantiómeros o columnas cromatográficas quirales. Los compuestos de partida de estereoquímica particular están disponibles en el mercado o se fabrican por los métodos que se describen a continuación y se resuelven por técnicas bien conocidas en la técnica.

La preparación de enantiómeros puros o mezclas de exceso enantiomérico (ee) o pureza enantiomérica deseada se realiza mediante uno o más de los muchos métodos de (a) separación o resolución de enantiómeros, o (b) síntesis enantioselectiva conocida por los especialistas en la técnica, o una combinación de los mismos. Estos métodos de resolución generalmente se basan en el reconocimiento quiral e incluyen, por ejemplo, cromatografía usando fases estacionarias quirales, formación de complejos hospedante-huésped enantioselectivos, resolución o síntesis usando auxiliares quirales, síntesis enantioselectiva, resolución cinética enzimática y no enzimática, o cristalización enantioselectiva espontánea. Dichos métodos se describen, en general, en Chiral Separation Techniques: A Practical Approach (2ª Ed.), G. Subramanian (ed.), Wiley-VCH, 2000; T. E. Beesley y R. P. W. Scott, Chiral Chromatography, John Wiley & Sons, 1999; y Satinder Ahuja, Chiral Separations by Chromatography, Am. Chem. Soc., 2000, Además, existen métodos, igualmente bien conocidos, para la cuantificación del exceso enantiomérico o la pureza, por ejemplo CG, HPLC, CE o RMN, y la asignación de configuración absoluta y conformación, por ejemplo CD ORD, cristalografía por rayos X o RMN.

Se pretende que los compuestos de la invención abarquen compuestos de fórmula (I) tal como se describen en la presente memoria, como también sus sales farmacéuticamente aceptables. El término “sal” se refiere a una forma iónica del compuesto parental o el producto de la reacción entre el compuesto parental y un ácido o base adecuado para obtener la sal de ácidos o la sal de bases del compuesto parental. Sales de los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse a partir de los compuestos parentales que contienen un resto básico o ácido por métodos químicos convencionales. En general, las sales se preparan por reacción de la base libre o el compuesto parental ácido con cantidades estequiométricas o con un exceso del ácido o base orgánica o inorgánica formadora de sal deseada en un disolvente adecuado en diversas combinaciones de disolventes.

La expresión “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a una sal de un compuesto de la invención que, dentro del alcance de un criterio médico bien fundado, es adecuada para uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales inferiores sin que se produzca toxicidad indebida, irritación, respuestas alérgicas y similares, en proporción con una relación beneficio/riesgo razonable, generalmente soluble o dispersable en agua o aceite y eficaz para el uso para el que está destinada. La expresión incluye sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables y sales de adición de bases farmacéuticamente aceptables. Como los compuestos de la presente invención son útiles tanto en forma de base libre como en forma de sal, en la práctica, el uso de la forma de sal equivale al uso de la forma de base. Pueden encontrarse listas de sales adecuadas, por ejemplo, en S.M. Birge et al., J. Pharm. Sci., 1977, 66, págs. 1-19, que se incorpora en este documento como referencia en su totalidad.

Ejemplos de ácidos adecuados para preparar sales incluyen los ácidos clorhídrico, bromhídrico, carbónico, sulfúrico,

5 nítrico, perclórico, fumárico, maleico, fosfórico, glicólico, láctico, salicílico, succínico, tolueno-p-sulfónico, tartárico, acético, cítrico, metanosulfónico, fórmico, benzoico, malónico, naftaleno-2-sulfónico y bencenosulfónico. Pueden emplearse otros ácidos que en si mismos no son farmacéuticamente aceptables, tales como el ácido oxálico, en la preparación de sales útiles como intermedios en la obtención de los compuestos de esta invención y sus sales de adición de ácidos farmacéuticamente aceptables. Las sales derivadas de bases apropiadas incluyen metal alcalino

10 (p. ej., sodio), metal alcalino térreo (p. ej., magnesio), amonio y sales N-(alquilo C1-C4)4 +.

En una realización, se proporciona un compuesto de fórmula I

R3

NH

Y

Z

R8 I

en donde:

R1 se selecciona de -CN, -OCF3, –CF3, halógeno, heteroarilo, opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo C1-3, y

fenilo, opcionalmente sustituido con halógeno;

R2 es –Cl o –CF3; 20 R3 es H o halógeno;

X es un grupo

R5

en la que

R4 se selecciona de: 25 (A) -H;

(B) alquilo C1-3 opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de: a) cicloalquilo C3-6; b) -OR9; c) -NR9R10;

30 d) -SOR9;

e) -SO2R9;

f) -C(O)NR9R10;

g) -C(O)OR9;

h) heteroarilo opcionalmente sustituido con alquilo C1-3;

35 i) heterociclilo, opcionalmente sustituido con alquilo C1-3; y j) fenilo, opcionalmente sustituido con alquilo C1-3;

(C) cicloalquilo C3-6;

(D) heteroarilo; y

(E) fenilo, opcionalmente sustituido con halógeno, -OR9, -CN o -CF3; 40 R5 es H o alquilo C1-3; o R4 y R5, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado con 3-7 átomos de carbono y en donde un átomo de carbono en dicho anillo hidrocarbonado puede estar opcionalmente reemplazado por -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, NH-, -NCH3- o -NC(O)CH3-; Y es un grupo

R7

R6 5

en la que

R6 es H o alquilo C1-3; R7 es H o alquilo C1-3; o R6 y R7, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado con 3-7 átomos de

10 carbono, en donde un átomo de carbono en dicho anillo hidrocarbonado puede estar opcionalmente reemplazado por -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, NH-, -NCH3- o -NC(O)CH3-; Z es arilo o heteroarilo; R8 se selecciona de:

(A): arilo, opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de: 15 (a) alquilo C1-3, opcionalmente sustituido con –OR9, –NR9R10 o -NR9SO2R10;

(b): cicloalquilo C3-7, opcionalmente sustituido con –OR9 o –NR9R10;

(c): –OR9;

(d): halógeno;

(e): -C(O)NR9R10; 20 (f) –SO2NR9R10;

(g): –NR9(CO)R10;

(h): –SO2R9;

(i): –NR9R10;

(j): –CN; 25 (k) -C(O)OR9;

(l): –NR9SO2R10; y

(m): –C(O)R9;

(B) heteroarilo, opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de:

(a): alquilo C1-3, opcionalmente sustituido con –OR9, –NR9R10 o halógeno; 30 (b) cicloalquilo C3-7, opcionalmente sustituido con –OR9, –NR9R10;

(c): –OR9;

(d): halógeno;

(e): -C(O)NR9R10;

(f): –SO2NR9R10; 35 (g) –NR9(CO)R10;

(h): –SO2R9;

(i): –NR9R10; y

(j): –CN;

R9 se selecciona de H, alquilo C1-5 o cicloalquilo C3-7; 40 R10 se selecciona de H, alquilo C1-5 o cicloalquilo C3-7;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

En otra realización, hay un compuesto de la fórmula I, en la que: R1 se selecciona de –CN, –OCF3, –Br, –Cl o –CF3;

45 R2 es –Cl o –CF3; R3 es -F o H; X es un grupo

R5

R4

en la que

50 R4 se selecciona de:

(A): alquilo C1-2, opcionalmente sustituido con –OH;

(B): (1-metil-1H-imidazol-5-il)metilo; y

(C): (1-metil-1H-imidazol-4-il)metilo; R5 es H o -CH3; o

55 R4 y R5, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos; Y es un grupo en la que

R6 es H o -CH3; R7 es H o -CH3; o 5 R6 y R7, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos; Z se selecciona de:

(A): piridinilo;

(B): pirimidinilo;

(C): naftiridinilo; 10 (D) piridazinilo; y

(E): oxadiazolilo; R8 se selecciona de:

(A): fenilo, opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de:

(a): –OR9; 15 (b) –CH2OR9;

(c): –C(O)OH;

(d): -C(O)NR9R10;

(e): –SO2CH3;

(f): –NHSO2CH3; 20 (g) –SO2NR9R10;

(h): –F;

(i): –NHC(O)CH3;

(j): –CH2NHSO2CH3;

(k): –C(O)CH3; 25 (l) –Cl;

(m): –CN;

(n): –CH3;

(o): –CH2N(CH3)2; y

(p): 1-hidroxiciclopropilo;

30 (B) piridinilo, opcionalmente mono- o di-sustituido con –CH3, –CH2OH, –NH2, –OH, –Cl, –F, –CN, –CF3 o ciclopropilo;

(C): 1H-pirazolilo, opcionalmente mono- o di-sustituido con –CH3 o ciclopropilo;

(D): pirimidinilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(E): isoxazolilo, opcionalmente sustituido con –CH3; 35 (F) imidazo[1,2-a]piridinilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(G): 1H-pirrolo[2,3-b]piridinilo;

(H): tiazolilo, opcionalmente mono-o di-sustituido con –CH3 o –Cl;

(I): oxadiazolilo, opcionalmente sustituido con ciclopropilo;

(J): furanilo; 40 (K) quinolinilo;

(L): 1H-imidazolilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(M): 1H-triazolilo;

(N): 1H-pirrolilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(O): oxazolilo; 45 y

(Q): 1H-indolilo; R9 es H o -CH3; R10 es H o -CH3;

: o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

50 En otra realización, hay un compuesto de la fórmula I, en la que: R1 se selecciona de –CN, –OCF3, –Br, –Cl o –CF3; R2 es –Cl o –CF3; R3 es -Fo -H;

55 X es un grupo

R5

R4 en la que

R4 se selecciona de:

(A) –CH3;

(B) –CH2OH; 5 (C) –CH(OH)CH3;

(D): (1-metil-1H-imidazol-5-il)metilo; y

(E): (1-metil-1H-imidazol-4-il)metilo; R5 es H o -CH3; o R4 y R5, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos;

10 Y es un grupo

en la que

R6 es –CH3; R7 es H o -CH3; o

15 R6 y R7, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos; Z se selecciona de:

N

O

N

, , , , y

20 R8 se selecciona de:

(A): fenilo sustituido con un grupo seleccionado de:

(a): –OH;

(b): –CH2OR9; 25 (c) –C(O)OH;

(d): -C(O)NR9R10;

(e): –SO2CH3;

(f): –NHSO2CH3;

(g): –SO2NH2; 30 (h) –F;

(i): –NHC(O)CH3;

(j): –CH2NHSO2CH3; y

(k): –C(O)CH3;

(B): piridinilo, opcionalmente sustituido con –CH3, –CH2OH, –NH2, –OH, –Cl, –F; –CN o ciclopropilo; 35(C) 1H-pirazolil-4-ilo, opcionalmente mono- o di-sustituido con –CH3 o ciclopropilo;

(D): pirimidin-5-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(E): isoxazol-4-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(F): 2-imidazo[1,2-a]piridin-6-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(G): 1H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-ilo; 40(H) 1H-pirazol-3-ilo;

(l): tiazol-5-ilo, opcionalmente sustituido con -CH3,

(J): tiazol-4-ilo;

(K): 2-ciclopropil-1,3,4-oxadiazol-5-ilo;

(L): furan-3-ilo; 45 (M) quinolin-3-ilo;

(N): 1H-imidazol-2-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(O): 1-metil-1H-imidazol-5-ilo;

(P): 1H-imidazolilo; y

(Q): 1H-1,2,4-triazolilo;

50 R9 es H o -CH3; R10 es H o -CH3;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

Todavía en una realización adicional, hay un compuesto de la fórmula I, en la que: R1 se selecciona de -CN, -OCF3 o -Br; R2 es –Cl o –CF3;

5 R3 es -F o H; X es un grupo

R5

R4 en la que

R4 se selecciona de: 10 (A) –CH3;

(B): –CH2OH; y

(C): –CH(OH)CH3; R5 es H; o R4 y R5, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos;

15 Y es un grupo

en la que

R6 es –CH3; R7 es H; o 20 R6 y R7, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos; Z se selecciona de:

N

N N

N

N ,, , y;

25 R8 se selecciona de:

(A): fenilo sustituido con un grupo seleccionado de:

(a): –OH;

(b): –CH2OH;

(c): –C(O)OH; 30 (d) -C(O)NR9R10;

(e): –SO2CH3;

(f): –NHSO2CH3; y

(g): –SO2NH2;

(B): piridinilo, opcionalmente sustituido con –CH3, –CH2OH, –NH2, –OH, –Cl, –F; 35(C) 1H-pirazolil-4-ilo, opcionalmente mono- o di-sustituido con –CH3 o ciclopropilo;

(D): 2-metil-pirimidin-5-ilo;

(E): isoxazol-4-ilo;

(F): imidazo[1,2-a]piridin-6-ilo; y

(G): 1H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-ilo;

40 R9 es H o -CH3; R10 es H o -CH3;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

Todavía en una realización adicional, hay un compuesto de la fórmula I, en la

45 que: R1 se selecciona de -CN y -OCF3; R2 es –Cl; R3 es –F; X es un grupo

R5

R4 en la que

R4 es –CH3 o –CH(OH)CH3; R5 es H; o 5 R4 y R5, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos; Y es un grupo

en la que

R6 es –CH3;

10 R7 es H; o R6 y R7, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos; Z se selecciona de:

N

NN

N

,, y;

15 R8 se selecciona de:

(A): fenilo sustituido con un grupo seleccionado de:

(a): –OH; y

(b): –CH2OH;

(B) piridin-3-ilo, sustituido en la posición 6 con –CH3 o –CH2OH; y 20(C) 1H-pirazol-4-ilo, opcionalmente mono- o di-sustituido con –CH3;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

Los siguientes son compuestos representativos de la invención, que se pueden

preparar por los métodos descritos en los esquemas sintéticos generales, los ejemplos sintéticos y métodos 25 conocidos en la técnica.

30 Tabla 1

R3

R2

Cl

N

ON

N HN O

R1O

X

NHY Z R8

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

1: CN Cl F N NN

2: CN Cl F N OH

3: CN Cl F N N

4: OCF3 Cl F N N NN

5: CN Cl F N N NN

6: CN Cl F OH N N NN

7: OCF3 Cl F OH N N NN

8: OCF3 Cl F N NN

9: CN Cl H N N H N

10: CN Cl F N N N H N

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

11: CN Cl F N N H N

12: OCF3 Cl F N N H N

13: CN Cl F N NN

14: CN Cl F N NN

15: CN Cl F N N NN

16: CN Cl F N N N

17: OCF3 Cl F N N N NN

18: CN Cl F N N

19: CN Cl F N N N

20: OCF3 Cl F N N NH2

21: CN Cl F N NN

22: CN Cl H N ON

23: CN Cl F N S H2N O O

24: OCF3 Cl H N O NN

25: CN Cl F N N FF F

26: CF3 Cl H N NN

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

27: CN Cl F N N N

28: OCF3 Cl F N NN

29: CN Cl F N N N HO

30: CN Cl F OH N N

31: CN Cl F N N NN

32: CN Cl F N N HO

33: CN Cl F N N N H N

34: CN Cl F N N OH

35: CN Cl F N N NN

36: CN Cl F N N F

37: CN Cl F N N HO

38: CN Cl F N NN

39: OCF3 Cl F N N HO

40: OCF3 Cl F N N NN

41: OCF3 Cl F N N HO

42: OCF3 Cl F N N N H N

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

43: CN Cl F N N HO

44: CN Cl F N N N H N

45: CN Cl F OH N N N H N

46: OCF3 Cl F N N N H N

47: OCF3 Cl F OH N N N H N

48: OCF3 Cl F N N N N N H N

49: OCF3 Cl F N N HO

50: CN Cl F N N HO

51: CN CF3 H N NN

52: CN Cl H N OH O

53: CN Cl H N O

54: CN Cl H N N

55: CN Cl H N N F

56: CN Cl H N N O

57: CN Cl H N N

58: CN Cl H N N F

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

59: CN Cl H N O NH

60: CN Cl H N N H N

61: CN Cl H N N Cl

62: CN Cl H N N

63: CN Cl H N N F

64: CN Cl F N N H N

65: CN Cl F N N HO

6: CN Cl H N NH2 O

67: CN Cl H N O

68: CN Cl F N N

69: CN Cl F N N

70: CN Cl F N NH2 O

71: CN Cl H N N N

72: CN Cl F N O NH2

73: CN Cl F N N

74: CN Cl F N N N

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

75: Br Cl H N NN

76: Cl Cl H N NN

77: CN Cl F O N N NN

78: CN Cl F N N N HO

79: CN Cl H N NHN

80: CN Cl H N NN

81: CN Cl H N N N N

82: CN Cl H N N N

83: CN Cl H N N N

84: CN Cl H N N N

85: CN Cl F N N S Cl

86: OCF3 Cl F N NO

87: CN Cl F N HO

88: CN Cl F N NN

89: OCF3 Cl F N N HO

90: CN Cl F N N HO

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

91: CN Cl H N N S

92: CN Cl H N S N

93: CN Cl F N N H N

94: CN Cl F N N

95: CN Cl F N N S

96: CN Cl F N N HO

97: OCF3 Cl H N N NO

98: CN Cl H N N NO

99: OCF3 Cl F N N H N

100: CN Cl F N HO

101: CN Cl F N NN

102: CN Cl F N HO

103: OCF3 Cl H N HN O

104: OCF3 Cl F OH N NN

105: CN Cl F N HN O

106: CN Cl F N N HO

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

107: CN Cl F N NN

108: OCF3 Cl F N HN O

109: CN Cl F N N N HO

110: OCF3 Cl F N N N HO

111: CN Cl F N N NN

112: CN Cl F N N N

113: CN Cl F N N H N

114: CN Cl F N N O

115: CN Cl F N S NH2 O O

116: OCF3 Cl F N N HO

117: CN Cl F N N HO

118: OCF3 Cl F N N HO

119: CN Cl F OH N N HO

120: OCF3 Cl F OH N N HO

121: CN Cl F OH N NN

122: CN Cl F N NN

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

123: CN Cl F N NN

124: CN Cl H N N H N

125: OCF3 Cl F OH N N N HO

126: CN Cl H N N

127: CN Cl H N ON

128: CN Cl H N N

129: CN Cl H N N H N

130: CN Cl H N Cl

131: CN Cl H N H2N O

132: CN Cl H N S H2N O O

133: CN Cl H N NH S O O

134: CN Cl H N S O O

135: CN Cl H N OH

136: CN Cl H N HO

137: CN Cl H N N

138: CN Cl H N S NH2 O O

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

139: CN Cl H N HN O

140: CN Cl H N NH SO O

141: CN Cl H N S O O

142: CN Cl H N OH

143: CN Cl H N OH

144: CN Cl H N HN S O O

145: CN Cl F OH N N NN

146: CN Cl H N N N H

147: CN Cl H N N H

148: CN Cl H N

149: CN Cl H N NN

150: OCF3 Cl F N NN

151: CN Cl F OH N NN

152: CN Cl F OH N NN

153: OCF3 Cl F OH N NN

154: CN Cl F OH N NN

Compuesto: R1 R2 R3 X y Z R8

155: CN Cl F OH N NN

156: CN Cl F N NN

157: CN Cl F N N H N

158: CN Cl F N S O O

159: CN Cl F OH N N NN

160: CN Cl F N N HO

En otra realización, la invención se refiere a un compuesto seleccionado entre los compuestos descritos en la Tabla 1, o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

5 En otra realización, la invención se refiere a un compuesto seleccionado de los compuestos 1, 2, 4-8, 10-16, 18, 20, 21, 23, 27, 28, 30-35, 37-47, 49-52, 54, 56, 58, 60-62, 64-66, 68-70, 72, 75, 78, 87-90, 93, 96, 100, 101, 103-106, 108-112, 115-121, 123, 125, 127, 129, 131-136, 138, 141-143, 145, 146 y 149-160 en la Tabla 1, o sus sales farmacéuticamente aceptables.

10 Métodos de síntesis generales

Los compuestos de la invención se pueden preparar por los métodos descritos a continuación. En el esquema que figura más abajo, los grupos R1 – R8, Y y Z son como se define antes para la fórmula general I, a menos que se indique otra cosa. Las condiciones de reacción y los tiempos de reacción óptimos pueden variar dependiendo de los reaccionantes particulares empleados. A menos que se especifique otra cosa, los disolventes, temperaturas, 15 presiones y otras condiciones de reacción pueden seleccionarse fácilmente por un experto en la materia. En la sección "Ejemplos de Síntesis" se proporcionan procedimientos específicos. Típicamente, el progreso de la reacción se puede controlar por medio de cromatografía en capa fina (TLC) o HPLC-MS, si se desea. Los compuestos intermedios y los productos se pueden purificar por cromatografía sobre gel de sílice, recristalización y/o HPLC de fase inversa. Los métodos de purificación por HPLC se utilizaron en algún punto de 0-100% acetonitrilo en agua que

20 contiene ácido fórmico al 0,1% o TFA al 0,1% y se usó una de las siguientes columnas:

a) Columna Waters Sunfire OBD C18 5 m 30x150 mm

b) Columna Waters XBridge OBD C18 5 m 30x150 mm 25 c) Columna Waters ODB C8 5 m 19x150 mm

d) Columna Waters Atlantis ODB C18 5 m 19x50 mm

30 e) Columna Waters Atlantis T3 OBD 5 m 30x100 mm

f) Columna Phenomenex Gemini Axia C18 5 m 30x100 mm

Los materiales y reactivos de partida se comercializan o pueden prepararse por el experto en la técnica usando los 35 métodos descritos en la bibliografía química.

Los compuestos de fórmula I se pueden preparar a partir del compuesto intermedio II, como se ilustra en el Esquema I. La síntesis del compuesto intermedio II se describe en las siguientes patentes estadounidenses: 6.492.408, 6.414.161, 6.844.360 y 6.852.748 y también en las publicaciones de solicitud de EE.UU. 2006/0025447 y 40 2007/0173517. El R1 deseado en los compuestos de fórmula II se puede obtener por selección de los reactivos

apropiadamente sustituidos, como lo describen Wu et al., patente estadounidense Nº 6.492.408 y Frutos et al., documento U.S. 6.414.161.

La síntesis de los compuestos de fórmula I a partir del compuesto intermedio II se ilustra en el Esquema I. 5

Esquema I

15 Como se ilustró anteriormente, II se transforma en III bajo condiciones Grignard y atrapando con CO2 o por carboxilación catalizada con Pd. El ácido carboxílico III proporciona I mediante la formación de amida con un compuesto intermedio V adecuadamente funcionalizado, o un proceso en dos etapas que forma el producto intermedio IV antes de la reacción final de la formación de amida con el compuesto intermedio VII o la elaboración

20 de IV para dar IX mediante la formación de amida, seguido de acoplamiento cruzado. Los compuestos intermedios (V, VI, VII y VIII) están comercialmente disponibles o se preparan fácilmente a partir de materiales de partida, por métodos conocidos en la técnica o descritos en este documento. El producto inicial de fórmula I puede además modificarse por métodos conocidos en la técnica para proporcionar compuestos adicionales de la invención. Se proporcionan varios ejemplos en la sección de Ejemplos de Síntesis.

Ejemplos de Síntesis

Síntesis de Compuestos Intermedios

Proceso General – Síntesis de ciclopropilamina heterocíclica Sal del ácido 1-(6-bromo-piridin-3-il)-ciclopropilamina-bistrifluoroacético

N

NH2 HOO

OO

NO

F NH2

Mg

HO

F

Br

F

HO

OOO

F

O

F

O

NN

O

F

O O

HO

Br

Br Ti

F

Br BrF

O

Un matraz de 2 L de fondo redondo se secó en vacío y se barrió con Ar. Este matraz se equipó luego con un agitador mecánico y se mantuvo bajo una corriente de Ar. A este matraz se añadió THF anhidro (750 mL) seguido de Ti(Oi-Pr)4 (72,8 mL, 246 mmol). La solución se purgó bajo Ar y se calentó hasta 50 oC. 6-bromo-nicotinonitrilo (30 g, 164 mmol) se añadió a la mezcla, seguido de la adición, gota a gota (a lo largo de 40 minutos) de bromuro de etilmagnesio 1M en THF (410 mL, 410 mmol). La reacción se dejó agitar a 50 °C. Después de 3 h, la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se añadió HCl 3 M (aprox. 350 mL). La mezcla se transfirió a un embudo de separación y se lavó con éter (3 x 500 mL). La capa acuosa se dejó agitar durante una noche. La capa acuosa se basificó después (pH 10) con NaOH 2 M. La solución heterogénea espesa se diluyó EtOAc (500 mL) y la solución resultante se agitó vigorosamente durante 5 minutos. La solución heterogénea se dejó reposar al tiempo que las capas se separaron lentamente. La capa orgánica se decantó y se repitió el mismo procedimiento de extracción (2 veces). Las capas orgánicas se reunieron, se lavaron con salmuera (1 x 50 mL), se secaron sobre MgSO4 y se concentraron en vacío para proporcionar 17 g de un aceite rojo-anaranjado oscuro. 16,1 g de aceite bruto se purificaron a través de cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (340 g de sílice, MeOH al 0-10% en CH2Cl2) para proporcionar 5,94 g de 1-(6-bromo-piridin-3-il)-ciclopropilamina en forma de un aceite naranja que se cristalizó lentamente, m/z 213,3 / 215,3.

1-(6-bromo-piridin-3-il)-ciclopropilamina (1,16 g, 4,6 mmol) se disolvió en CH2Cl2 (20 mL). Se añadieron secuencialmente Et3N (0,78 mL, 5,6 mmol) y Boc2O (1,11 g, 5,1 mmol). La reaccion se agitó a temperatura ambiente. Después de 20 h, la reacción se diluyó con CH2Cl2 (20 mL) y agua (20 mL). La mezcla se sacudió y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (1 x 100 mL). La capa en CH2Cl2 heterogénea se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para proporcionar 1,4 g de éster terc.-butílico del ácido [1-(6-bromo-piridin-3-il)-ciclopropil]-carbámico en forma de un sólido naranja.

Se disolvió éster terc-butílico del ácido [1-(6-bromo-piridin-3-il)-ciclopropil]-carbámico (800 mg, 2,55 mmol) en CH2Cl2 (10 mL). Se añadió gota a gota TFA (5 mL). Después de 4 h, la reacción se concentró en vacío para proporcionar 1,5 g del compuesto del título en forma de un aceite pardo, m/z 213,1 / 215,1.

Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a los descritos anteriormente:

Sal del ácido 1-(6-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilamina-bistrifluoroacético Sal del ácido 1-(5-yodo-piridin-2-il)ciclopropilamina-bistrifluoroacético Sal del ácido 1-(4-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilamina-bistrifluoroacético

Éster terc-butílico del ácido (1-furan-2-il-ciclopropil)-carbámico

3-ciclopropil-1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol

O

NaOAc

+

O

N

NH2NH2 N N

N

Br2

BrO

Li

B

+

O NN

N

OB

NN

O

Una mezcla de ciclopropil-metil-cetona (7,0 mL, 70,7 mmol) y dimetoximetil-dimetil-amina (18,7 mL, 141,5 mmol, 2 eq.) se calentó a 100 oC durante 16 h. La mezcla se concentró bajo alto vacío durante 1 h para dar (E)-1-ciclopropil5 3-dimetilamino-propenona en forma de un aceite amarillo (2,7 g, 28 %) que se utilizó para la siguiente etapa sin purificación adicional.

A la mezcla de (E)-1-ciclopropil-3-dimetilamino-propenona (1,5 g, 10,8 mmol) y NaOAc (1,3 g, 16,2 mmol) en etanol (10 mL) se añadió una solución de hidrazina (0,6 mL, 11,9 mmol), y la solución se mantuvo a 70 oC durante una noche. La mezcla se concentró, el sólido se filtró, se lavó con CH2Cl2, y el filtrado se concentró a presión reducida

10 para dar una mezcla de 5-ciclopropil-1-metil-1H-pirazol y 3-ciclopropil-1-metil-1H-pirazol en forma de un sólido amarillo (950 mg, 72%). El material bruto se utilizó para la siguiente etapa sin purificación adicional.

A una mezcla de pirazoles (3,9 g, 31,9 mmol) en CHCl3 (10 mL) a la temperatura ambiente se añadió, gota a gota, bromo puro (1,2 mL, 23,4 mmol) y la mezcla se agitó durante 1 h a la temperatura ambiente. La reacción se vertió en 2 mL de NaHCO3 acuoso saturado. La capa orgánica se diluyó con CH2Cl2 (10 mL), se lavó con salmuera, se secó

15 sobre MgSO4 y se concentró para dar el producto bruto (4,2 g, 66%). El residuo se purificó mediante cromatografía en columna (EtOAc al 15%/hexanos) para proporcionar cada uno de los regioisómeros puros (860 mg, 27% y 560 mg, 18%, respectivamente). El experimento por RMN NOE determinó, de forma inequívoca, la regioquímica.

A una solución agitada de 4-bromo-3-ciclopropil-1-metil-1H-pirazol (500 mg, 2,5 mmol) en THF (10 mL) se añadió, gota a gota, una solución 2,5 M de n-BuLi (1,4 mL, 3,5 mmol) a -78 °C, y la solución amarilla pálida resultante se 20 agitó durante 30 min. A la mezcla se añadió una solución de 2-isopropoxi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,1 mL, 5,5 mmol) en THF (1 mL), y la mezcla se calentó hasta la temperatura ambiente a lo largo de 30 min. La reacción se enfrió bruscamente con solución de NH4Cl acuosa saturada. La mezcla se extrajo con EtOAc (50 mL), se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (MeOH-CH2Cl2 al 5%, Rf = 0,35)

25 para proporcionar 3-ciclopropil-1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (294 mg, 48%) en forma de un aceite amarillo.

El siguiente compuesto se preparó usando procedimientos similares a los descritos anteriormente:

5-ciclopropil-1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol

Dihidrocloruro de 1-[5-(2-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina

NH2

O

NH

O

N HCl

HCl

O

Pd(dppf)Cl2

O

HCl

NH

N

+

Cl +

BO

N

N NH2

N NI N

Una mezcla de 122 mg (0,55 mmol) de 2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina y 49 μL (0,62 mmol) de cloroacetona en 0,6 mL de EtOH se calentó hasta 150°C en un microondas durante 30 min. Se añadieron 5 1,2 mL de DME, seguido de 150 mg (0,42 mmol) de éster terc.-butílico del ácido 1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil]carbámico, 34 mg (0,042 mmol) de complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano y 1,3 mL de K3PO4 1 M en agua. La mezcla se calentó hasta 110 °C en el microondas durante 10 min. La mezcla se enfrió y la fase orgánica parda se separó, se diluyó con EtOAc y se filtró a través de tierra de diatomeas. El filtrado se concentró y purificó mediante HPLC de fase inversa (MeCN al 10-40%/agua + TFA al 0,1%) para proporcionar 61 mg (40% de rendimeinto) de

10 éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(2-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico en forma de un polvo pardo pálido.

Éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(2-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico (21 mg, 0,06 mmol) se disolvió en 0,5 mL de CH2Cl2 y se añadió 1 mL de HCl 4 M en dioxano. La suspensión resultante se agitó durante 1 h. La mezcla se concentró para proporcionar dihidrocloruro de 1-[5-(2-metil-imidazo[1,2-a]piridin-6-il)

15 piridin-2-il]-ciclopropilamina bruto. El material se usó en reacciones subsiguientes sin purificación.

{1-[(R)-1-(6-bromo-piridin-3-il)-etilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

O

S

OO

NH2SNO

NH

110oC

S +O

O+ NH2 Ti N

N

O O 2 h, 66% 74%

N -78oC, THF, 70% Br

N Br

Br Br

F Cl

Cl

F NCl

Cl O

N N

NH2 N

O

HN O + N

O N

N

DMF, 97%

N NH

Br

HN O O

N OH N Br

A una solución de 2-bromo-5-isopropil-piridina (2,0 g, 9,99 mmol) en dicloroetano (15 mL) se añadió amida del ácido 20 (S)-(-)-2-metil-propano-2-sulfínico (1,45 g, 11,72 mmol) y etóxido de titanio(IV) (4,15 mL, 19,99 mmol). La mezcla se

calentó a 110 °C en un microondas. Después de 2 h, la mezcla se diluyó con éter (20 mL) y agua (6 mL). La mezcla se agitó durante 10 minutos. Las capas se separaron y la capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para proporcionar un residuo. El residuo bruto se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice utilizando acetato de etilo-diclorometano (0-40%) para proporcionar [1-(6bromo-piridin-3-il)-et-(E)-ilideno]-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico (2,0 g, 66%).

A una solución, enfriada rápidamente (-78 °C), de [1-(6-bromo-piridin-3-il)-et-(E)-ilideno]-amida del ácido 2-metilpropano-2-sulfínico (1,0 g, 3,30 mmol) en THF (25 mL) se añadió gota a gota solución de borohidruro de tri-secbutilo-litio en THF (L-Selectride, 3,30 mL, 3,30 mmol). La mezcla oscureció de color tras la adición de este reactivo. Después de 3 horas, la mezcla se enfrió bruscamente con cloruro de amonio acuoso saturado (30 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 mL). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con salmuera (3 x 30 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron. El material bruto se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice, eluyendo con acetato de etilo-diclorometano (0-100%) para proporcionar [(R)-1-(6-bromo-piridin-3-il)-etil]-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico (700 mg, 70%) en forma de un sólido ligeramente amarillo.

A una solución de [(R)-1-(6-bromo-piridin-3-il)-etil]-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico (650 mg, 2,13 mmol) en MeOH (5 mL) se añadió HCl 4,0 M en dioxano (5,32 mL, 21,30 mmol). La mezcla de reacción transparente se agitó a la temperatura ambiente durante 2,5 h. La mezcla de reacción se volvió turbia durante este tiempo. Se añadió éter (20 mL) y la mezcla se agitó durante 10 min y luego se filtró, se lavó con éter (20 mL) para proporcionar sal HCl de (R)-1-(6-bromo-piridin-3-il)-etilamina (500 mg, 87%) en forma de un sólido blanco.

A una solución de la sal HCl de (R)-1-(6-bromo-piridin-3-il)-etilamina anterior (500 mg, 1,82 mmol) en DMF (10 mL) se añadió ácido 1-{[(R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2α]imidazol-3-carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico (900 mg, 1,66 mmol) y diisopropiletilamina (1,45 mL, 8,30 mmol). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 5 min. Se añadió HATU (694 mg, 1,83 mmol) a la mezcla y la mezcla amarilla transparente se agitó durante 17 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo (35 mL) y se lavó con agua (8 mL). La fase orgánica se lavó con solución de NaCl acuosa al 5% (2 × 10 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para formar un aceite amarillo pálido. El aceite bruto se purificó mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice, eluyendo con MeOH/CH2Cl2 al 1-6%, para proporcionar 1,3 g del compuesto del título en forma de una espuma amarilla.

Hidrocloruro de 1-[5-(5-ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-3-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina

Un vial de 8 mL se cargó con ácido ciclopropanocarboxílico (78,5 μL, 0,99 mmol) y DMF (1,0 mL). Al vial se añadió carbonildiimidazol (176 mg, 1,09 mmol) a la temperatura ambiente. La mezcla de reacción transparente se agitó durante 2 h y luego se añadió a otro vial de 8 mL que contenía éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(Nhidroxicarbamimidoil)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico (430 mg, 1,47 mmol) en 1,0 mL de DMF. La mezcla de reacción de color amarillo pálido resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min y luego se calentó a 100 ºC durante 16 h. La mezcla de reacción naranja pálida transparente se enfrió bruscamente con agua (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 20 mL). Los componentes orgánicos se lavaron con agua (2 x 15 mL) y salmuera (15 mL), se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para formar un aceite bruto. El aceite bruto se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice, eluyendo con EtOAc al 035%/hexanos, para dar éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(5-ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-3-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}carbámico (86 mg, 26%) en forma de un sólido blanco.

A la solución de éster terc-butílico del ácido {1-[5-(5-ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-3-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico

5 (80 mg, 0,23 mmol) en CH2Cl2 (10 mL) se añadió HCl 4 M en dioxano (2 mL, 8 mmol). Después de agitar durante una noche, se añadió más HCl 4 M (0,1 mL, 0,4 mmol). Después de un total de 42 h, se añadió dietil- éter (10 mL) a la mezcla de reacción y la agitación continuó durante 10 min. La suspensión de reacción se filtró y el sólido se lavó con éter (10 mL) para proporcionar sal HCl de 1-[5-(5-ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-3-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina (40 mg) en forma de un sólido blanco.

10 Dihidrocloruro de 1-[5-(1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclobutilamina

En un matraz seco bajo argón, se disolvieron 2-fluoro-5-yodo-piridina (3,85 g, 17,3 mmol) y ciclobutanocarbonitrilo

15 (1,40 g, 17 mmol) en tolueno seco (15 mL). La solución se enfrió hasta 0°C y se añadió, gota a gota, bis(trimetilsilil)amida de sodio (1,0 M, 19 mL, 19 mmol) a lo largo de 15 min. Al cabo de 1 h, se dejó que la solución se calentara hasta temperatura ambiente y se agitó durante 26 h. La reacción se diluyo con NH4Cl acuoso saturado (10 mL) y CH2Cl2 (10 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 10 mL). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron en vacío para proporcionar 4,0 g de 1

20 (5-yodo-piridin-2-il)-ciclobutanocarbonitrilo como un aceite pardo claro y viscoso, m/z 285,4 [M + H]+.

1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclobutanocarbonitrilo (4,0 g, 14 mmol) se reunió con agua (5,0 mL), AcOH glacial (5,0 mL) y ácido sulfúrico concentrado (5,0 mL). La solución homogénea se calentó a reflujo (baño externo: 115 oC). Después de 5 h, la solución se enfrió hasta temperatura ambiente y se vertió en agua (10 mL) y Et2O (15 mL). Las capas se separaron y la capa de Et2O se desechó. La capa acuosa se ajustó a pH 4,5-5 mediante la adición de NaOH ac. 2 M

25 y luego se extrajo con CH2Cl2 (3 x 50 mL). Las capas en CH2Cl2 reunidas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y concentraron para proporcionar 3,92 g de ácido 1-(5-yodo-piridin-2-il)ciclobutanocarboxílico, m/z 304,4 [M + H]+.

1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclobutanocarboxílico (3,92 g, 12,9 mmol) con terc.-BuOH (6,1 mL, 65 mmol), Et3N (9,0 mL, 65 mmol) y DPPA (3,1 mL, 14 mmol). La reacción se calentó a reflujo (baño externo: 85 oC) durante 1,5 h. Los componentes volátiles se separaron en vacío y la mezcla de reacción bruta se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (EtOAc/hexanos al 5 80%) para dar 1,1 g de éster terc.-butílico del ácido [1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclobutil]-carbámico en forma de un sólido, m/z 375,4 [M + H]+.

A una mezcla de éster terc.-butílico del ácido [1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclobutil]-carbámico (0,46 g, 1,23 mmol), éster terc.-butílico del ácido 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-pirazol-1-carboxílico (0,4 g, 1,35 mmol) y complejo de PdCl2(dppf)Cl2·diclorometano (0,2 g, 0,25 mmol) en DME/H2O/EtOH (4 mL, 7:3:2) en un tubo microondas sellable se añadió K3PO4 1 M (1,5 mL, 1,5 mmol). El tubo se selló y se calentó en un microondas a 100 °C durante 10 minutos y luego a 120 °C durante 20 minutos. Se añadió NaOH 2 M (2 mL) y se agitó durante 10 minutos. La solución se extrajo con EtOAc (100 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró a través de tierra de diatomeas y se concentró. El aceite bruto se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice,eluyendo con MeOH/CH2Cl2 al 0 – 6%, para proporcionar éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclobutil}-carbámico (0,40 g) en forma de un sólido pardo, m/z 315,5 [M + H]+.

A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[5-(1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclobutil}-carbámico (300 mg, 0,96 mmol) en CH2Cl2 (5 mL) se le añadió TFA (0,37 mL, 4,8 mmol). Al cabo de 15 h, se añadió HCl 4 M en dioxano (1,2 mL, 4,8 mmol). Después de 1 h, la reacción se concentró en vacío para proporcionar 303 mg del compuesto del título, m/z 215,4 [M + H]+.

Dihidrocloruro de {5-[6-(1-amino-1-metil-etil)-piridazin-3-il]-piridin-2-il}-metanol

1)

B(OH)2N

HCl

HO

HCl

O N PdCl2(dppf) CH2Cl2

SN

NH2

N N H N

2) HClN

Cl HO

Una solución de 6-cloro-piridazina-3-carbonitrilo (preparada de acuerdo con MacDonald et al., documento WO/2008/068277) (100 mg, 0,71 mmol) en THF seco (3,6 mL) se enfrió hasta -50 °C en un baño de hielo seco/acetona. Bromuro de metilmagnesio (1,0 M en MePh/THF, 0,54 mL, 0,75 mmol) se añadió a través de una jeringa en una porción. El baño frío se retiró y la reacción se agitó durante 1,5 h. A la mezcla de reacción se añadió NH4Cl acuoso saturado y esta mezcla se extrajo con EtOAc (3 veces). Los extractos orgánicos reunidos se secaron sobre MgSO4 y se concentraron. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía de resolución rápida (sílice, MeOH/CH2Cl2 al 0→4%) para dar 34 mg de 1-(6-cloro-piridazin-3-il)-etanona en forma de un semi-sólido pardo, m/z 157,3 [M + H]+.

A una solución de 1-(6-cloro-piridazin-3-il)-etanona (34 mg, 0,22 mmol) en THF seco (1,0 mL) se añadió amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico (29 mg, 0,24 mmol). Se añadió Ti(OEt)4 (0,090 mL, 0,43 mmol) en una porción y la reacción se calentó hasta 60 °C durante 1 h. A la mezcla de reacción se añadió agua y la suspensión resultante se filtró a través de una almohadilla de tierra de diatomeas. El filtrado se secó sobre Na2SO4 y se concentró para

proporcionar [1-(6-cloro-piridazin-3-il)-et-(E)-iliden]-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico en forma de un residuo bruto que se utilizó sin purificación, m/z 260,5 [M + H]+.

[1-(6-cloro-piridazin-3-il)-et-(E)-iliden]-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico bruta (56 mg, 0,22 mmol) se disolvió en THF seco (2,2 mL) y se enfrió hasta -20 °C bajo una atmósfera de gas inerte. Bromuro de metilmagnesio (1,0 M en MePh/THF, 0,26 mL, 0,26 mmol) se añadió en una porción a través de una jeringa y la reacción se agitó a -20 °C durante 1,5 h. A la mezcla de reacción se añadió NH4Cl acuoso saturado (4 mL) y EtOAc (7 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 mL). Las capas orgánica reunidas se secaron sobre Na2SO4, se concentraron y luego se purificaron por cromatografía de resolución rápida (sílice, MeOH/CH2Cl2 al 0→4%). 15 mg de [1-(6-cloro-piridazin-3-il)-1-metil-etil]-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico impura se aislaron en forma de un sólido pardo claro. Este material se usó sin purificación adicional.

1-(6-cloro-piridazin-3-il)-1-metil-etil]-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico impura (15 mg, 0,054 mmol) se combinó con complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (4,7 mg, 0,006 mmol), K3PO4 1 M (0,07 mL, 0,07 mmol) y ácido 2-(hidroximetil)piridina-5-borónico (18 mg, 0,12 mmol) en un vial de microondas. Se añadió una mezcla 7:3:2 de DME/H2O/EtOH (1 mL). El vial se barrió con argón y se selló. Este vial se calentó luego en el reactor de microondas durante 15 min a 140° C. La mezcla de reacción se diluyó con 2 mL de agua y se extrajo con 4 x 4 mL con EtOAc. Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron. La purificación a través de cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 0→4%) proporcionó 4 mg de {1-[6-(6-hidroximetil-piridin-3-il)-piridazin-3-il]-1-metil-etil}-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico en forma de un sólido pardo.

1-[6-(6-hidroximetil-piridin-3-il)-piridazin-3-il]-1-metil-etil}-amida del ácido 2-metil-propano-2-sulfínico (4 mg, 0,011 mmol) se disolvió en CH2Cl2 (0,25 mL) y se añadió HCl 4 M en dioxano (2 mL, 8 mmol). Al cabo de 45 minutos, el disolvente se separó bajo una corriente de N2 para dar dihidrocloruro de {5-[6-(1-amino-1-metil-etil)-piridazin-3-il]piridin-2-il}-metanol en forma de un residuo sólido pardo claro, bruto. Este se usó sin purificación adicional.

3-dimetilamino-2-yodo-propenal

OO

A una solución de 3-dimetilamino-propenal (1,5 mL, 15 mmol) en CH2Cl2 (60 mL) se añadió, a la temperatura ambiente, N-yodosuccinimida (3,38 g, 15 mmol) en forma de un sólido en una sola porción. La reacción se agitó durante 1 h, seguido de la adición de CH2Cl2 (25 mL). La mezcla de reacción se lavó con Na2S2O3 acuoso sat. (1 x 75 mL) y agua (2 x 50 mL). La fase orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar un sólido negro. Se recristalizó en EtOAc/hexanos para dar 1,27 g del compuesto del título en forma de cristales rojizos, m/z 226,3 [M + H]+.

3-dimetilamino-2-bromo-propenal

OO

N

H

H Br

3-dimetilamino-propenal (50 mL, 500 mmol) se disolvió en CHCl3 (400 mL) a la temperatura ambiente. Se añadió bromo (25,7 mL, 500 mmol) puro a través de una jeringa a lo largo de 5 min. Después de 30 min, la reacción se vertió en 200 mL de Na2S2O3 acuoso saturado y 200 mL de NaHCO3 sat. Esta mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3 x 100 mL). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron para dar sólidos de color oscuro. Estos sólidos se disolvieron en EtOAc (200 mL) y los materiales insolubles se separaron mediante filtración. El filtrado se concentró en vacío y los sólidos resultantes se lavaron con EtOAc al 50%/hexanos para dar 50,0 g del compuesto del título en forma de un sólido amarillo pálido, m/z 178,28 [M + H]+.

{1-[1-(5-yodo-pirimidin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

HCl O O

O H NH3

NH2

HH

N

ON O N

O

H2N

NN H

HO N HNaOMeO

O

O O N

NHHATU

H F

I Cl

Cl O

H N N

ON

O

NN H ONN I

HN O O

N NH

N N

I

A una suspensión del ácido 1-[(terc.-butoxicarbonil)amino]-ciclopropanocarboxílico (1,7 g, 8,43 mmol), HATU (3,5 g, 9,3 mmol) e hidrocloruro de 1-aminociclopropanocarbonitrilo (1,0 g, 8,43 mmol) en THF (34 mL) se añadió trietilamina (3,5 mL, 25,3 mmol). La suspensión amarilla se agitó a temperatura ambiente durante 18 h y luego se separó la mayor parte del THF en vacío. La suspensión restante se diluyó con 150 mL de Na2CO3 al 10% (p/p) acuoso y 150 mL de EtOAc. Las capas se separaron y la fase orgánica se lavó con Na2CO3 al 10% (p/p) acuoso (2 x 100 mL). La fase orgánica se lavó con salmuera (1 x 75 mL), se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar un sólido naranja claro, bruto. Este sólido se trituró con Et2O y el sólido blanco se separó mediante filtración utilizando Et2O para el aclarado, para proporcionar 1,8 g de éster terc.-butílico del ácido [1-(1-cianociclopropilcarbamoil)-ciclopropil]-carbámico en forma de un sólido blancuzco, m/z 266,5 [M + H]+.

A una solución de éster terc.-butílico del ácido [1-(1-ciano-ciclopropilcarbamoil)-ciclopropil]-carbámico (250 mg, 0,942 mmol) en EtOH anhidro (2,4 mL) se añadió NaOEt (al 21 % en peso en EtOH, 0,70 mL, 1,9 mmol) a través de una jeringa en una porción. La reacciòn naranja se agitó durante 1 h. A la solución naranja se añadió NH4Cl sólido (202 mg, 3,77 mmol) y NH3 (7 M en MeOH, 0,14 mL, 0,94 mmol). El vial de reacción se selló y se agitó a la temperatura ambiente durante 15 h. La suspensión resultante se filtró, aclarando con EtOH. El filtrado se concentró y los sólidos resultantes se trituraron con EtOAc para dar 182 mg de hidrocloruro de éster terc.-butílico del ácido [1-(1carbamimidoil-ciclopropilcarbamoil)-ciclopropil]-carbámico en forma de un sólido blanco, m/z 283,6 [M + H]+.

A una solución de hidrocloruro de éster terc.-butílico del ácido [1-(1-carbamimidoil-ciclopropilcarbamoil)-ciclopropil]carbámico (1,65 g, 5,2 mmol) en EtOH anhidro (21 mL) se añadió 3-dimetilamino-2-yodo-propenal (1,3 g, 5,63 mmol) y dimetilamina 2 M en THF (3,36 mL, 6,7 mmol). El recipiente se tapó y se calentó a 70ºC durante una noche. Después de 18 h, EtOH se separó en vacío y el residuo naranja oscuro se trituró con iPrOH al 5% en EtOAc. Un sólido amarillo se separó mediante filtración. El filtrado se concentró en vacío y se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 0 5%) para proporcionar un aceite negro. Este aceite se trató con Et2O para precipitar un sólido blanco. El sólido se separó mediante filtración y el filtrado se reprocesó para dar otra cosecha de sólidos ligeramente más oscuros. Se aisló un total de 426 mg de éster terc.butílico del ácido {1-[1-(5-yodo-pirimidin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-carbámico, m/z 445,5 [M + H]+.

Éster terc.-butílico del ácido {1-[1-(5-yodo-pirimidin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-carbámico (426 mg, 0,96 mmol) se disolvió en CH2Cl2 (2 mL) y se añadió HCl 4 M en dioxano (3 mL, 6 mmol). Después de 90 minutos, los componentes volátiles se separaron a 60 °C bajo una corriente de N2. El sólido blanco resultante se secó en vacío durante una noche para proporcionar 400 mg de dihidrocloruro de [1-(5-yodo-pirimidin-2-il)-ciclopropil]-amida del ácido 1-amino-ciclopropanocarboxílico bruto. Este material se usó sin purificación adicional.

A dihidrocloruro de [1-(5-yodo-pirimidin-2-il)-ciclopropil]-amida del ácido 1-amino-ciclopropanocarboxílico (400 mg, 0,96 mmol) se añadió 1 mL de THF seco y trietilamina (0,71 ml, 3,98 mmol). Cloruro de (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonilo bruto (476 mg, 1,0 mmol) se disolvió en 2 mL de THF seco y se transfirió al matraz de reacción. Después de 2 h, el disolvente se separó a 55 °C bajo una corriente de N2. La suspensión resultante se diluyó con EtOAc (75 mL) y se lavó con ácido cítrico ac. al 10% (75 mL) y NaHCO3 ac,saturado (75 mL). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar una espuma naranja clara. Este sólido se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 1→3%) para dar 767 mg del compuesto del título en forma de un polvo de color canela, m/z 785,5.

Dihidrocloruro de 1-(5-bromo-pirimidin-2-il)-ciclopropilamina

O HCl

N

H

O

HClO

HCl

Br

N

HClH2N NH2ONON HH N

N

NH BrBr

Hidrocloruro de éster terc.-butílico del ácido [1-(1-carbamimidoil-ciclopropilcarbamoil)-ciclopropil]-carbámico (1,0 g, 4,2 mmol) (preparado a partir de éster terc.-butílico del ácido (1-ciano-ciclopropil)-carbámico utilizando un proceso similar al de éster terc.-butílico del ácido [1-(1-carbamimidoil-ciclopropil-carbamoil)-ciclopropil]-carbámico) y 2-bromo3-dimetilamino-acroleína (1,1 g, 6,36 mmol) se reunieron en EtOH (2 mL) en un tubo sellado. La reacción se tapó y la mezcla se calentó a 80 oC durante 24 horas. La mezcla negra resultante se dejó enfriar hasta la temperatura ambiente. Metanol (20 mL) se añadió luego a la solución de reacción. Los sólidos se filtraron y la solución resultante se secó a presión reducida. El residuo se diluyó con 50 mL de CH2Cl2 y los sólidos se separaron. La solución se concentró y se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (EtOAc en hexanos al 0 50%) para dar 800 mg de éster terc.-butílico del ácido [1-(5-bromo-pirimidin-2-il)-ciclopropil]-carbámico en forma de un sólido blancuzco.

Se disolvió éster terc-butílico del ácido [1-(5-bromo-pirimidin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (1,18 g, 3,76 mmol) en CH2Cl2 (5 mL) a la temperatura ambiente. Se añadió HCl 4M en dioxano (9,4 mL, 37,6 mmol). Después de 2 h, los disolventes se separaron mediante una corriente de N2 para dar el compuesto del título en forma de un sólido, m/z = 216,3. El material bruto se usó en etapas subsiguientes sin purificación.

Procedimiento General: Reacción de Suzuki / desprotecciòn de Boc

Dihidrocloruro de 1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina

OO

O

OO

B NH

NH2 NH NN

HCl

N N

HCl

N K2CO3 PdCl2(dppf) I NN NN

A una mezcla de éster terc.-butílico del ácido [1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (500 mg, 1,39 mmol), 1metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol 433 mg, 2,1 mmol) y complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (113 mg, 0,14 mmol) en 1,5 mL de DME/H2O/EtOH (7:3:2) en un tubo de microondas sellable se añadió solución de K3PO4 1 M acuosa (2,1 mL). El tubo se selló y se calentó en un microondas a 100 °C durante 10 min. La reacción bruta se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice, se lavó con MeOH y se concentró. El residuo se repartió entre 30 mL de EtOAc y 10 mL de agua. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para dar un aceite. Este material se purificó mediante cromatografía de

5 resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 0 3,5%) para dar 0,55 g de éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico en forma de un sólido pardo. El compuesto se usó en etapas subsiguientes sin purificación ulterior.

A una solución de éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico (1,1 g, 3,5 mmol) en CH2Cl2 (15 mL), se añadió HCl 4,0 M en dioxano (4,35 mL, 17,5 mmol). Después de agitar durante una 10 noche, se añadió a la solución más HCl 4,0 M en dioxano (4,35 mL, 17,5 mmol). Después de otras 12 horas, la solución se concentró en vacío para proporcionar 800 mg del compuesto del título. Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a los descritos anteriormente: 1-[5-(6-metil-piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropilamina {5-[2-(1-amino-ciclopropil)-pirimidin-5-il]-piridin-2-il}-metanol 15 1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropilamina 1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropilamina 1-[5-(4-metanosulfonil-fenil)-piridin-2-il]-ciclopropilamina {4-[6-(1-amino-ciclopropil)-piridin-3-il]-fenil}-metanol [5-(1-amino-ciclopropil)-[2,3']bipiridinil-6'-il]-metanol 20 1-(6'-metil-[2,3']bipiridinil-5-il)-ciclopropilamina 1-[5-(1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina 1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)-ciclopropilamina 1-[5-(1,3,5-trimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina {4-[2-(1-amino-ciclopropil)-pirimidin-5-il]-fenil}-metanol 25 1-[6-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-3-il]-ciclopropilamina 1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-3-il]-ciclopropilamina 1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina 1-[5-(1-ciclopropil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina 1-[5-(3-ciclopropil-1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina 30 1-[5-(5-ciclopropil-1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina [6-(1-amino-ciclopropil)-[3,3']bipiridinil-6'-il]-metanol

1-[6-(1H-pirazol-4-il)-1,8-naftiridin-2-il]-ciclobutilamina

1-ciclopropil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol

O

OH

HO

O

N

+ H2N

N

NH

O

N

Br2

O

B

BrN NO NaOAc

N N

Oxalato de ciclopropilhidrazina (162 mg, 1,00 mmol) y NaOAc (82 mg, 1,0 mmol) se reunieron en EtOH (muestra

5 200, 1,5 mL) y se añadió 3-dimetilamino-propenal (0,10 mL, 1,0 mmol) en una porción a través de una jeringa. La suspensión se agitó a 70ºC durante 16 h, y después se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. La reacción se diluyó con NaHCO3 ac. sat. (3 mL) y se extrajo con EtOAc (4 x 5 mL). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron en un evaporador rotatorio sin calentar la muestra para dar 1-ciclopropil-1H-pirazol en forma de un líquido volátil, el cual se utilizó sin purificación ulterior, m/z 109,4 [M + H]+.

10 A una solución de 1-ciclopropil-1H-pirazol bruto (108 mg, 1,00 mmol) en CHCl3 (4 mL) a temperatura ambiente se añadió Br2 (51 uL, 1,0 mmol) a través de una jeringa. La solución naranja se agitó durante 1 h. La reacción se diluyó con Na2S2O3 acuosa saturada (3 mL) y NaHCO3 acuoso saturado (3 mL). La mezcla se extrajo con CH2Cl2 (3 x 5 mL). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron en un evaporador rotatorio sin calentar la muestra para dar 4-bromo-1-ciclopropil-1H-pirazol en forma de un líquido amarillo claro, volátil, el cual se

15 utilizó sin purificación ulterior, m/z 187,3 [M + H]+.

Bis(pinacolato)diboro (330 mg, 1,3 mmol), NaOAc (262 mg, 3,2 mmol) y complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (89 mg, 0,11mmol) se reunieron en un vial de microondas. Se añadieron 4-bromo-1-ciclopropil-1H-pirazol y DMF (4 mL) y el vial se barrió con argón y se selló. La mezcla de reacción se calentó en un microondas durante 60 min a 150° C. La reacción se diluyó con 10 mL de agua y se extrajo 3 x 10 mL con EtOAc. Las capas orgánicas reunidas se

20 secaron sobre Na2SO4 y se concentraron para proporcionar 120 mg del compuesto del título en forma de un aceite oscuro, m/z 235,4 [M + H]+.

Dihidrocloruro de 1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropilamina

O N

B H

N O N

H HNIS IO

ON N

ONO O

N O O

O O

NBS

NH2NH2

O N

HCl

N N

O

N NH2 HCl

N H

HCl

N

N NN

A una solución de éster terc.-butílico del ácido (1-furan-2-il-ciclopropil)-carbámico (4,30 g, 19,3 mmol) en DMF anhidra (77 mL) a temperatura ambiente se añadió, en una porción, N-yodosuccinimida (4,77 g, 21,2 mmol) en forma de un sólido. La reacción se agitó durante 2,5 h, tiempo a lo largo del cual se desarrolló un intenso color rojo. La reacción se diluyó con Na2S2O3 ac. sat. (75 mL) y agua (75 mL) y dietiléter (100 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con dietiléter (2 x 100 mL). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. Los sólidos resultantes se trituraron con hexanos para dar 4,9 g de éster terc.-butílico del ácido [1-(5yodo-furan-2-il)-ciclopropil]-carbámico en forma de un polvo amarillo claro, m/z 350,5 [M + H]+.

Éster terc.-butílico del ácido [1-(5-yodo-furan-2-il)-ciclopropil]-carbámico (200 mg, 0,57 mmol), complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (46 mg, 0,057 mmol), K3PO4 (145 mg, 0,69 mmol) y 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2dioxaborolan)-1H-pirazol (179 mg, 0,86 mmol) se colocaron todos en un vial de microondas. Se añadieron DME (1,5 mL), agua (0,6 mL), EtOH (0,5 mL) y el vial se barrió con argón y luego se selló. La mezcla de reacción se calentó en el microondas a 100ºC durante 10 minutos. La reacción se diluyó con agua (5 mL) y se extrajo con EtOAc (3 x 5 mL). La fase orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró para dar un residuo negro. La purificación mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 0→4,5%) proporcionó 226 mg de éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-furan-2-il]-ciclopropil}-carbámico, m/z 304,6 [M + H]+, en forma de un residuo semisólido rojo.

En un matraz de fondo redondo, éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-furan-2-il]-ciclopropil}carbámico (226 mg, 0,745 mmol) se disolvió en una mezcla de THF (12,4 mL) y agua (1,3 mL). El matraz se enfrió hasta -35 °C en un baño de hielo seco/acetona (la mezcla se convierte en una suspensión espesa) y luego se añadió N-bromosuccinimida (146 mg, 0,819 mmol) en forma de un sólido en una porción. La reacción se volvió inmediatamente de color amarillo brillante. La reacción se agitó durante 15 min a esta temperatura, tiempo después del cual se añadió hidrazina anhidra (0,21 mL, 6.7 mmol) en una porción con jeringa. El baño de hielo se retiró y se dejó que la reacción se agitara a la temperatura ambiente durante 20 h. Los componenetes volátiles se separaron a 50 °C bajo una corriente de N2. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía de resolución rápida (sílice, EtOAc/hexanos al 90 100%) para dar 51 mg de éster terc.-butílico del ácido {1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazin3-il]-ciclopropil}-carbámico en forma de un sólido amarillo brillante, m/z 316,6 [M + H]+.

Éster terc.-butílico del ácido {1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropil}-carbámico (51 mg, 0,16 mmol) se disolvió en CH2Cl2 (1 mL) y se añadió HCl 4 M en dioxano (2 mL, 4 mmol). Después de 2 h, los disolventes se separaron bajo una corriente de N2 para dar el compuesto del título en forma de un sólido naranja, m/z = 216,4 [M + H]+.

Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a los descritos anteriormente: Dihidrocloruro de 1-[6-(4-fluoro-fenil)-piridazin-3-il]-ciclopropilamina, m/z 230,4 [M + H]+.

{4-[6-(1-amino-ciclopropil)-piridazin-3-il]-fenil}-metanol, m/z 242,3 [M + H]+.

Dihidrocloruro de 1-[6-(1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropilamina, m/z 202,4 [M + H]+. Dihidrocloruro de 1-[6-(3-ciclopropil-1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropilamina, m/z 216,4 [M + H]+.

Procedimiento General: Secuencia de acoplamiento de la amida / desprotección de Boc:

Dihidrocloruro de (S)-2-amino-N-{1-[6-(1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropil}-propionamida

HCl

NH2

O

H O

HCl

N N

O

HATU N

N N

HN

HO

+

O Et3N HN

HO

O N

NN H

HCl

A una solución de la N-Boc-alanina (89 mg, 0,48 mmol), HATU (199 mg, 0,52 mmol) y dihidrocloruro de 1-[6-(1Hpirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropilamina (130 mg, 0,48 mmol) en CH2Cl2 (1,9 mL) se añadió diisopropiletilamina 10 (0,33 mL, 1,9 mmol). La mezcla parda se agitó durante 2 h, luego se añadió Na2CO3 acuoso al 10% (p/p) (5 mL) y la agitación continuó durante 20 min. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 5 mL). Los extractos orgánicos reunidos se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar un aceite pardo. Esto se purificó mediante cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 1 20 %) para proporcionar 79 mg de éster terc.-butílico del ácido ((S)-1-{1-[6-(1H-pirazol-4-il)

15 piridazin-3-il]-ciclopropilcarbamoil}-etil)-carbámico, m/z 373,7 [M + H]+.

Éster terc.-butílico del ácido ((S)-1-{1-[6-(1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropilcarbamoil}-etil)-carbámico se disolvió en CH2Cl2 (1,0 mL) y se añadió HCl 4 M en dioxano (2 mL, 8 mmol). Después de 1,5 h, los disolventes se separaron a 50 °C bajo una corriente de N2. Este material se secó en vacío para proporcionar 73 mg del compuesto del título, m/z 273,5 [M + H]+.

20 Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a los descritos anteriormente:

Dihidrocloruro de (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-{1-[6-(1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropil}-butiramida

Dihidrocloruro de (S)-2-amino-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)-N-{1-[6-(1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropil}propionamida

Dihidrocloruro de (S)-2-amino-N-[1-(6'-hidroximetil-[3,3']bipiridinil-6-il)-ciclopropil]-propionamida Dihidrocloruro de (S)-2-amino-N-{1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropil}-propionamida Dihidrocloruro de (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-{1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropil}-butiramida Dihidrocloruro de (S)-2-amino-3-(3-metil-3H-imidazol-4-il)-N-{1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridazin-3-il]-ciclopropil}

5 propionamida

Dihidrocloruro de (S)-2-amino-3-(3-metil-3H-imidazol-4-il)-N-{1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}propionamida (S)-2-amino-N-{1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-propionamida (S)-2-amino-N-{1-[5-(6-hidroximetil-piridin-3-il]-pirimidin-2-il-ciclopropil}-propionamida

10 (S)-2-amino-N-{1-[5-(4-hidroximetil-fenil)-piridin-2-il]-ciclopropil}-propionamida (S)-2-amino-N-[1-(6'-hidroximetil-[2,3']bipiridinil-5-il)-ciclopropil]-propionamida (S)-2-amino-N-{1-[5-(1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-propionamida Dihidrocloruro de (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-{1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-butiramida (S)-2-amino-N-{1-[6-(4-hidroximetil-fenil)-piridazin-3-il]-ciclopropil}-propionamida

15 (R)-2-amino-N-{1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-propionamida (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-{1-[5-(6-hidroximetil-piridin-3-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropil}-butiramida {1-[6-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-3-il]-ciclopropil}-amida del ácido 1-amino-ciclopropanocarboxílico (2S,3R)-2-amino-N-{1-[6-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-3-il]-ciclopropil}-3-hidroxi-butiramida (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-{1-[6-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-3-il]-ciclopropil}-butiramida

20 (S)-2-amino-3-hidroxi-N-{1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-propionamida (S)-2-amino-N-{1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-3-hidroxi-propionamida (2S,3R)-2-amino-N-{1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-3-hidroxi-butiramida (2S,3R)-2-amino-N-{1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropil}-3-hidroxi-butiramida

Dihidrocloruro de (R)-1-(5-bromo-piridin-2-il)-etilamina

O

S CuSO4 N O

NH2

N + S

CH2Cl2 N

O Br

Br

O

S

NH2• 2 HCl

NH

CH3MgBr, CH2Cl2 HCl

N –50 °C N MeOH

Br Br

A una solución de (R)-(+)-2-metil-2-propanosulfinamida (2,60 g, 21,5 mmol) en 100 mL de CH2Cl2, a temperatura ambiente, se añadió CuSO4 (7,53 g, 47,2 mmol) y 5-bromo-piridina-2-carbaldehído (4,39 g, 23,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 21 h y luego se filtró a través de tierra de diatomeas, lavando

5 con CH2Cl2. Los filtrados se concentraron para dar un aceite pardo pálido que se purificó mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice, eluyendo con EtOAc al 10-25% en hexanos, para proporcionar 6,04 g (97%) de 1-(5-bromo-piridin-2-il)-met-(E)-iliden-amida de ácido (R)-2-metil-propano-2-sulfínico en forma de un sólido amarillo pálido.

Una solución de 1-(5-bromo-piridin-2-il)-met-(E)-iliden-amida del ácido (R)-2-metil-propano-2-sulfínico (6,04 g, 20,9

10 mmol) en 100 mL de CH2Cl2 se enfrió hasta -50 °C. MeMgBr (10,4 mL, 31,3 mmol, 3 M en Et2O) se añadió lentamente, gota a gota, a través de una bomba de jeringa a lo largo de 1 h. La mezcla de reacción se agitó a -50 °C durante 30 min y luego se enfrió bruscamente mediante la adición de 100 mL de dicha solución acuosa de NH4Cl. La mezcla se repartió entre 200 mL de CH2Cl2 y 150 mL de agua. La fase orgánica se lavó con 150 mL de salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel de

15 sílice, eluyendo con EtOAc al 50-90% en hexanos, para proporcionar 5,38 g (84%) de [(R)-1-(5-bromo-piridin-2-il)etil]-amida del ácido (R)-2-metil-propano-2-sulfínico en forma de un sólido blanco.

A una solución de [(R)-1-(5-bromo-piridin-2-il)-etil]-amida del ácido (R)-2-metil-propano-2-sulfínico (500 mg, 1,64 mmol) en 5 mL de MeOH se añadió HCl (4,10 mL, 16,4 mmol, 4 M en dioxano). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 h, tiempo durante el cual se formó un precipitado blanco. Se añadieron 20 mL de

20 Et2O. Después de agitar durante 20 min adicionales, la mezcla de reacción se filtró, lavando con 10 mL de Et2O. 454 mg (99%) del compuesto del título se aislaron en forma de un sólido blanco después de secar bajo alto vacío.

Procedimiento General: Secuencia de acoplamiento de la amida:

{1-[(R)-1-(5-bromo-piridin-2-il)-etilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluorofenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

F

F Cl

ClClCl N

NH2• 2 HCl N N OO

N HATU, DIPEA N

N

+N

CH2Cl2

HN O

HN O O

O Br

N

N NHOH N

Br

5 Una suspensión de ácido 1-{[(R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5Himidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonil]-amino}-ciclopropano-carboxílico (500 mg, 0,92 mmol), dihidrocloruro de (R)-1-(5bromo-piridin-2-il)-etilamina (303 mg, 1,11 mmol) y diisopropiletilamina (0,640 mL, 3,69 mmol) en 4 mL de DMF se agitó a la temperatura ambiente durante 10 min. Se añadió HATU (386 mg, 1,01 mmol) y la mezcla amarilla transparente se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se repartió entre 75 mL de acetato

10 de etilo y 25 mL de agua. La fase orgánica se lavó con 2 x 25 mL de solución de NaCl acuosa al 5% y 25 mL de salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró en vacío. El residuo se purificó por cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice, eluyendo con MeOH al 0-3% en CH2Cl2 para proporcionar 653 mg (98%) del compuesto del título en forma de una espuma amarilla, m/z 726,4 [M + 1]+.

15 {1-[1-(6-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

{1-[1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

{1-[1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-420 fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

{1-[1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-(4trifluorometoxi-bencil)-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

{1-[1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6oxo-5-(4-trifluorometoxi-bencil)-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

25 {1-[1-(4-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

Procedimiento General: Secuencia de Reacción de Suzuki / Desprotección de Sulfinamida (2 etapas) o Secuencia de Reacción de Suzuki / Desprotección de Sulfinamida / Acoplamiento con amida / Desprotección de Boc (4 etapas):

Sal trihidrocloruro de (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-[(R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etil]-butiramida

HO OH

Br

HCl

A una mezcla de [(R)-1-(5-bromo-piridin-2-il)-etil]-amida del ácido (R)-2-metil-propano-2-sulfínico (500 mg, 1,64 mmol), ácido 2-metilpiridina-5-borónico hidrato (305 mg, 2,0 mmol), K3PO4 (417 mg, 2,0 mmol) y complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (133 mg, 0,16 mmol) en un vial de microondas se añadieron 3,3 mL de DME/H2O/EtOH (7:3:2). El vial se barrió con Ar, se selló y se calentó en el microondas a 110 °C durante 20 min. La reacción se diluyó con 30 mL de agua y 30 mL de EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 mL). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron para dar un aceite negro. La purificación mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 0→5%) proporcionó 368 mg de [(R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etil]-amida del ácido 2-metil-propano-2-(R)-sulfínico, en forma de un sólido cristalino pardo, m/z 318,7 [M + H]+.

A una solución de la [(R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etil]-amida del ácido 2-metil-propano-2-(R)-sulfínico (370 mg, 1,17 mmol) en CH2Cl2 (2 mL) se añadió HCl 4 M en dioxano (3 mL, 12 mmol). Después de 1,5 h, los disolventes se separaron bajo una corriente de N2 para dar dihidrocloruro de (R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etilamina en forma de un polvo sólido de color canela, claro, m/z 214,5 [M + H]+.

A una mezcla de N-Boc-(L)-treonina (0,13 g, 0,61 mmol), dihidrocloruro de (R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)etilamina (0,16 g, 0,56 mmol) y HATU (0,23 g, 0,61 mmol) se añadió THF (1 mL) seguido de diisopropiletilamina (0,48 mL, 2,8 mmol). Después de 2 h, los componentes volátiles se separaron bajo una corriente de N2 y el aceite resultante se purificó mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice (MeOH/CH2Cl2 al 0→5%) proporcionando 250 mg de éster terc.-butílico del ácido {(1S,2R)-2-hidroxi-1-[(R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)etilcarbamoil]-propil}-carbámico en forma de un sólido de color canela, m/z 415,8 [M + H]+.

Éster terc.-butílico del ácido {(1S,2R)-2-hidroxi-1-[(R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etilcarbamoil]-propil}-carbámico (0,23 g, 0,45 mmol) se disolvió en CH2Cl2 (2 mL) y se añadió HCl 4 M en dioxano (2 mL, 4 mmol). Al cabo de 1,5 horas, los componentes volátiles se separaron bajo una corriente de N2 para dar 300 mg de sal trihidrocloruro de (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-[(R)-1-(6'-metil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etil]-butiramida en forma de un polvo de color canela, m/z 315,7 [M + H]+.

Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a aquellos anteriormente descritos, usando la secuencia de 2 etapas o de 4 etapas:

[6-((R)-1-amino-etil)-[3,3']bipiridinil-6'-il]-metanol

(S)-2-amino-N-[(R)-1-(6'-hidroximetil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etil]-propionamida (2S,3R)-2-amino-3-hidroxi-N-[(R)-1-(6'-hidroximetil-[3,3']bipiridinil-6-il)-etil]-butiramida (2S,3R)-2-amino-N-{(R)-1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-etil}-3-hidroxi-butiramida (S)-1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-etilamina [6’-((R)-1-amino-etil)-[3,3']bipiridinil-6-il]-metanol (R)-1-[5-(1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-etilamina (R)-1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-etilamina

Sal del ácido 1-(5-1,2,4-triazol-1-il-piridin-2-il)-ciclopropilamina-bistrifluoroacético

O

F

H

NH

I

N

N HON

F N CuI,H N

N F O

N

TFA

NH

N

O N

N

FH

N

HO

N

N OO

FK3PO4 DMF, 100oC FNH2O

10 Éster terc.-butílico del ácido [1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (100 mg, 0,28 mmol), CuI (11 mg, 0,06 mmol), 1,2,4-triazol (29 mg, 0,42 mmol) y K3PO4 (118 mg, 0,556 mmol) se mezclaron en un vial de microondas de 8 mL. (1R,2R)-N,N'-dimetil-ciclohexano-1,2-diamina (18 ∀L, 0,11 mmol) se añadió a la mezcla bajo argón, seguido de DMF (2 mL). La reacción se calentó a 100ºC durante una noche. La reacción se enfrió luego a temperatura ambiente y se diluyó con agua (50 mL) y EtOAc (50 mL). La capa orgánica se recogió y secó sobre MgSO4. El residuo se

15 purificó mediante cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice (EtOAc al 20% /Hex a EtOAc al 100%) para dar éster terc.-butílico del ácido [1-(5-[1,2,4]triazol-1-il-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (40 mg, 0,13 mmol, 48%) en forma de un semi-sólido.

Éster terc.-butílico del ácido [1-(5-[1,2,4]triazol-1-il-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (40 mg, 0,13 mmol) se disolvió

20 en CH2Cl2 (0,6 mL) y luego se añadió TFA (0,1 mL). Al cabo de 18 h, la solución de reacción se concentró en vacío para proporcionar 27 mg de sal del ácido 1-(5-1,2,4-triazol-1-il-piridin-2-il)-ciclopropilamina-bistrifluoroacético bruta. El material se usó en las reacciones subsiguientes sin purificaciones adicionales.

Sal del ácido 1-(5-pirazol-1-il-piridin-2-il)-ciclopropilamina-bistrifluoroacético

25 Sal del ácido 1-(5-imidazol-1-il-piridin-2-il)-ciclopropilamina-bistrifluoroacético

Sal del ácido 6'-(1-amino-ciclopropil)-[1,3']bipiridinil-2-ona-bistrifluoroacético

Procedimiento General – Formación de Amidina: 3,N-dihidroxi-butiramidina:

HO

OH

NN

+ H2N

ClOH H OHH2N

A una suspensión de 3-hidroxibutironitrilo (1,00 g, 11,8 mmol) y K2CO3 (3,25 g, 23,5 mmol) en 15 mL de EtOH se le añadió hidrocloruro de hidroxilamina (1,63 g, 23,5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 20 h y

5 luego se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró, lavando con 40 mL de EtOH. Los filtrados se concentraron hasta un sólido blanco oleoso que se trató con 30 mL de EtOH. El precipitado se filtró, lavando con 30 mL de EtOH, y los filtrados se concentraron hasta un sólido oleoso de color amarillo. El producto bruto se trituró con 30 mL de 10% MeOH/diclorometano y se filtró, lavando con 10 mL de 10% MeOH/diclorometano. Los filtrados se concentraron para dar 1,32 g del producto como un aceite amarillo pálido.

N-hidroxi-1-metil-1H-pirazol-4-carboxamidina

Procedimiento General - formación de [1,2,4]oxadiazol-5-il)-ciclopropilamina: Hidrocloruro de 1-(3-metil-[1,2,4]oxadiazol-5-il)-ciclopropilamina: 15 O

OHO

CDI

N

HCl

N

NHO + N O NH2 HClN O HNH2H

O

N

NOO

A una solución de ácido N-boc-amino-ciclopropanocarboxílico (1,01 g, 5,00 mmol) en 2 mL de DMF se le añadió carbonildiimidazol (0,812 g, 5,01 mmol). Esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. Se

20 añadió N-hidroxi-acetamidina (0,374 g, 5,05 mmol). Esta mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, después se calentó a 100 ºC durante 16 h. Después de enfriar hasta temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua. El precipitado resultante se recogió por filtración, se lavó con acetonitrilo y agua y se secó al aire para dar 1,05 g de éster terc-butílico del ácido [1-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)-ciclopropil]-carbámico en forma de un sólido blanco, m/z 240 [M + 1]+.

25 Se disolvió éster terc-butílico del ácido [1-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)-ciclopropil]-carbámico (80 mg, 0,33 mmol) en HCl en 1,4-dioxano (4,0 M, 1,0 mL, 4,0 mmol). Después de reposar a temperatura ambiente durante 1 h, el disolvente se eliminó por corriente de nitrógeno. El compuesto del título se aisló y utilizó sin purificación adicional.

30 1-[3-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-ciclopropilamina

Sal de ácido de 1-[5-(3-ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina-bistrifluroacético

OO

O

Pd(OAc)2

O

N

O

N

H

N

O

iPr2NEt,

HO

H

NaHCO2

I

O

OH

HN

CDI

NH

O

F O

O

HOO

F

HO

N

F

NO

N NH2 F

HO

H

F

O

F

O

N

A una solución de anhídrido ácido (0,89 mL, 9,4 mmol) en DMF (10 mL) en un tubo de presión se añadió formiato de sodio (0,96 g, 14,2 mmol) y base de Hünig (1,6 mL, 9,4 mmol). El tubo de presión se selló y la mezcla se dejó agitar a temperatura ambiente durante 45 minutos. El tubo se abrió y se añadió una solución de éster terc.-butílico del 5 ácido [1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (1,7 g, 4,7 mmol) en DMF (3 mL) seguido de LiCl (0,60 g, 14,2 mmol) y Pd(OAc)2 (0,11 g, 0,47 mmol). El recipiente de reacción se selló y la mezcla se calentó a 80 °C durante 20

h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y se retiró lentamente la tapa, permitiendo la liberación de gas. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Los extractos reunidos se lavaron con agua, HCl 1 N, salmuera y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró y se concentró para dar ácido 6

10 (1-terc.-butoxicarbonilamino-ciclopropil)-nicotínico (0,51 g, 1,8 mmol) en forma de un sólido amarillo, m/z 279,6.

A una solución de ácido 6-(1-terc.-butoxicarbonilamino-ciclopropil)-nicotínico (0,10 g, 0,10 mmol) en DMF (5 mL) se le añadió CDI (0,16 g, 0,10 mmol). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 3 h. Luego se añadió Nhidroxi-ciclopropanocarboxamidina (0,28 g, 0,10 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 24 h. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Los

15 extractos reunidos se lavaron con agua, dicho NaHCO3 acuoso sat., salmuera y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró y se concentró para dar éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(3-ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)-piridin-2-il]ciclopropil}-carbámico (0,13 g, 0,38 mmol) en forma de un aceite amarillo, m/z 343,7 [M + H]+.

A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[5-(3-ciclopropil-1,2,4-oxadiazol-5-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}carbámico (0,13 g, 0,38 mmol) en CH2Cl2 (1 mL) se le añadió TFA (1 mL). La reacción se dejó agitar agitar a la

20 temperatura ambiente durante 2 h. El disolvente y TFA en exceso se separaron a presión reducida para dar el compuesto del título (0,14 g, 0,41 mmol), m/z 243,6 [M+H]+.

Sal de ácido de 1-[5-(5-ciclopropil-1,3,4-oxadiazol-2-il)-piridin-2-il]-ciclopropilamina-bistrifluroacético

A una solución de ácido 6-(1-terc.-butoxicarbonilamino-ciclopropil)-nicotínico (0,50 g, 1,8 mmol) en DMF (3 mL) se añadió HATU (0,68 g, 1,8 mmol), Et3N (0,25 mL, 1,8 mmol) y la mezcla se dejó agitar a la temperatura ambiente durante 20 min. Luego se añadió monohidrato de hidrazina (0,09 mL, 1,8 mmol) y la reacción se agitó durante 1 h.

5 La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Los extractos reunidos se lavaron con agua, salmuera, y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró y se concentró para dar éster terc.-butílico del ácido [1-(5hidrazinocarbonil-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (0,51 g, 1,7 mmol) en forma de un sólido amarillo, m/z 293,7 [M + H]+.

A una solución de ácido ciclopropilcarboxílico (0,20 g, 0,68 mmol) en DMF (2 mL) se añadió HATU (0,26 g, 0,68

10 mmol), Et3N (0,10 mL, 0,75 mmol) y la mezcla de reacción se dejó agitar a la temperatura ambiente durante 20 min. Se añadió éster terc.-butílico del ácido [1-(5-hidrazinocarbonil-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (0,20 g, 0,68 mmol) en DMF (1 mL) y la reacción se dejó agitar a la temperatura ambiente durante 21 h. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 100 mL). Los extractos reunidos se lavaron con NaHCO3 sat., salmuera, y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró y se concentró para dar éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(N'-ciclopropano-carbonil

15 hidrazinocarbonil)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico (0,23 g, 0,64 mmol) en forma de un sólido pardo claro, m/z 361,7 [M + H]+.

Éster terc.-butílico del ácido 1-[5-(N'-ciclopropanocarbonil-hidrazinocarbonil)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico (0,23 g, 0,64 mmol) se disolvió en THF (2 mL) y a esto se añadió reactivo de Burgess (0,30 g, 1,3 mmol). La mezcla se calentó a 150 °C en un microondas durante 30 min. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 50

20 mL). Los extractos reunidos se lavaron con agua, salmuera, y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró, se concentró y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (MeCN/H2O) para dar éster terc.-butílico del ácido {1-[5-(5-ciclopropil-1,3,4-oxadiazol-2-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}-carbámico (0,045 g, 0,13 mmol) en forma de un sólido pardo, m/z 343,7 [M + H]+.

A una solución de éster terc-butílico del ácido {1-[5-(5-ciclopropil-1,3,4-oxadiazol-2-il)-piridin-2-il]-ciclopropil}

25 carbámico (40 mg, 0,12 mmol) en CH2Cl2 (0,2 mL) se le añadió TFA (1 mL). La reacción se dejó agitar agitar a la temperatura ambiente durante 4 h. El disolvente y TFA en exceso se separaron a presión reducida para dar el compuesto del título (0,041g), m/z 243,6 [M+H]+.

Sal del ácido 1-{4-[6-(1-amino-ciclopropil)-piridin-3-il]-fenil}-ciclopropanol-bistrifluoroacético

OH

B OH

O

O N N

O

N H

O H

I N

O

O EtMgBr Ti(iOPr)4O

F O

HO

F FF O

OHO

F

HO

NN

F

F N

O HNH2 F

HO

A una solución de éster terc.-butílico del ácido [1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (1,5 g, 4,2 mmol) en DME (4 mL) se añadió complejo de PdCl2(dppf)·diclorometano (0,34 g, 0,42 mmol). La solución se transfirió a un vial de microondas que contenía ácido (4-metoxi-carbonilfenil)-borónico (0,90 g, 5,0 mmol). Luego se añadió K3PO4 (1,1

5 g, 5,4 mmol) seguido de agua (1 mL) y EtOH (1 mL). La reacción se calentó en un microondas a 100 °C durante 10 min. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL). Los extractos reunidos se lavaron con agua, salmuera, y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró, se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (EtOAc al 0-100% en hexanos) para dar éster metílico del ácido 4-[6-(1-terc.-butoxicarbonilaminociclopropil)-piridin-3-il]-benzoico (0,75 g, 2,0 mmol) en forma de un sólido amarillo, m/z 369,7 [M + H]+.

10 A una solución de éster metílico del ácido 4-[6-(1-terc.-butoxicarbonilamino-ciclopropil)-piridin-3-il]-benzoico (0,68 g, 1,8 mmol) en THF (20 mL) se añadió Ti(Oi-Pr)4 (0,54 mL, 1,8 mmol). A esta mezcla se añadió, lentamente, EtMgBr (3 M en Et2O, 1,2 mL, 3,7 mmol) a lo largo de 30 minutos. La reacción se dejó agitar a la temperatura ambiente durante 1 h. Ti(Oi-Pr)4 (1,1 mL, 3,2 mmol) y EtMgBr (3 M en Et2O, 1,2 mL, 3,7 mmol) se añadieron de nuevo a la solución y la reacción se agitó durante 30 minutos. La mezcla se enfrió bruscamente con agua y se extrajo con

15 EtOAc (3 x 100 mL). Los extractos reunidos se lavaron con agua, salmuera, y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró, se concentró y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa para dar éster terc.-butílico del ácido (1{5-[4-(1-hidroxi-ciclopropil)-fenil]-piridin-2-il}-ciclopropil)-carbámico (0,05 g, 1,4 mmol) en forma de un sólido pardo, m/z 367,7 [M + H]+.

A una solución de éster terc-butílico del ácido (1-{5-[4-(1-hidroxi-ciclopropil)-fenil]-piridin-2-il}-ciclopropil)-carbámico

20 (50 mg, 0,14 mmol) en CH2Cl2 (1 mL) se le añadió TFA (3 mL). La reacción se dejó agitar a la temperatura ambiente durante 1 h. El disolvente y TFA en exceso se separaron a presión reducida para dar el compuesto del título (50 mg, 0,14 mmol), m/z 267,6 [M+H]+.

Sal del ácido 6'-(1-amino-ciclopropil)-1H-[3,3']bipiridinil-6-ona-bistrifluoroacético

OH

O B

N

OH

N N

O

H

O

N

N N

O H

O

PdCl2dppfI Pd(OH)2

O

H2F F

HOO

O

F F

F

F N

F

HO

N

O NH2

N HO HF

F HN HN

O O

A una solución de éster terc.-butílico del ácido [1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil]-carbámico (0,25 g, 0,69 mmol) en DME (1 mL) se añadió complejo de PdCl2(dppf)·diclorometano (57 mg, 0,07 mmol). Esta solución se transfirió a un vial de microondas que contenía ácido 2-benciloxipiridina-5-borónico (0,17 g, 0,76 mmol) y K3PO4 (1 M, 0,90 mL, 0,90 mmol). Se añadieron agua (0,4 mL) y EtOH (0,3 mL) y la mezcla se calentó en un microondas a 100 °C durante 10 minutos. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 50 mL). Los extractos reunidos se lavaron con agua, salmuera, y se secaron con MgSO4. La mezcla se filtró y se concentró para dar éster terc.-butílico del ácido [1(6'-benciloxi-[3,3']bipiridinil-6-il)-ciclopropil]-carbámico (0,24 g, 0,58 mmol) en forma de un sólido pardo, m/z 418,8 [M

+ H]+.

A una solución de éster terc-butílico del ácido 1-[(6'-benciloxi-[3,3']bipiridinil-6-il)-ciclopropil]-carbámico (0,20 g, 0,48 mmol) en MeOH (10 mL) se le añadió Pd(OH)2 (0,2 g). El matraz se purgó con gas H2 y luego se hizo pasar gas H2 sobre la solución durante 4 h. La mezcla se filtró a través de tierra de diatomeas y el filtrado se concentró a presión reducida para dar éster terc.-butílico del ácido [1-(6'-oxo-1',6'-dihidro-[3,3']bipiridinil-6-il)-ciclopropil]-carbámico (0,16 g, 0,50 mmol), m/z 328,8 [M + H]+.

A una solución de éster terc.-butílico del ácido [1-(6'-oxo-1',6'-dihidro-[3,3']bipiridinil-6-il)-ciclopropil]-carbámico (0,15 g, 0,44 mmol) en CH2Cl2 (1 mL) se añadió TFA (1 mL) y la mezcla se dejó agitar a la temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente y TFA en exceso se separaron a presión reducida para dar el compuesto del título (0,23 g, 0,50 mmol).

Éster terc.-butílico del ácido [1-(6-yodo-[1,8]naftiridin-2-il)-ciclobutil]-carbámico

N NH2

OO

O OI

H

HN(CH3)OCH3 H

H

NN

CH3MgBr

O

ON OO N N

O NHO N

O O

H

HATU O O NaOH/EtOH I

Se reunieron ácido Boc-1-aminociclobutano-1-carboxílico (10,0 g, 45,1 mmol), HATU (20,5 g, 54,1 mmol) e hidrocloruro de N,O-dimetilhidroxilamina (4,93 g, 49,6 mmol) en DMF (100 mL). A esta solución se le añadió diisopropiletilamina (31,4 mL, 180,3 mmol). La reacción se agitó durante 2 h, se diluyó con EtOAc y se vertió en H2O. La fase acuosa se separó y se extrajo dos veces más con EtOAc. Las capas orgánicas se reunieron y se lavaron con salmuera, se secaron (Na2SO4), se decantaron y se concentraron a vacío. El sólido resultante se purificó a través de cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (EtOAc al 10-50%-heptano) para proporcionar éster terc.-butílico del ácido [1-(metoxi-metil-carbamoil)-ciclobutil]-carbámico en forma de un sólido blanco (11,5 g, 99%).

A una solución de éster terc.-butílico del ácido [1-(metoxi-metil-carbamoil)-ciclobutil]-carbámico (11,5 g, 44,6 mmol) en THF (150 mL) a 0 °C se añadió lentamente bromuro de metilmagnesio en forma de una solución 3,0 M en éster (37,2 mL, 111 mmol). La reacción se dejó calentar lentamente hasta 25° C y se agitó durante 24 h, luego se enfrió bruscamente por adición de NH4Cl saturado acuoso (100 mL). Se añadió EtOAc (200 mL) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo dos veces más con EtOAc. Las capas orgánicas se reunieron, se lavaron con salmuera,

se secaron (Na2SO4), se decantaron y se concentraron para proporcionar un sólido. El sólido se purificó a través de cromatografía de resolución rápida en fase normal sobre gel de sílice (EtOAc al 10-50%-heptano) para proporcionar éster terc.-butílico del ácido 1-(acetil-ciclobutil)-carbámico en forma de un sólido blanco (6,02 g, 63%).

Se disolvió NaOH recién molido (0,32 g, 7,9 mmol) en EtOH absoluto (25 mL). A esta solución se añadió éster terc.butílico del ácido (1-acetil-ciclobutil)-carbámico (0,84 g, 3,95 mmol) y 5-yodo-2-aminopiridina-3-carboxaldehído (0,932 g, 3,76 mmol) simultáneamente en forma de una solución en EtOH (25 mL). La reacción se dejó agitar durante 72 h y los componentes volátiles se eliminaron a vacío. Este residuo bruto se diluyó con CH2Cl2, se absorbió sobre SiO2 mediante la separación de disolvente en vacío y se purificó a través de cromatografía de resolución rápida en SiO2 (EtOAc al 20-75%-hexano) para proporcionar el compuesto del título en forma de un sólido blanco (1,34 g, 84%), m/z = 366,4.

3,5-dicloro-4-fluoro-fenilamina:

A una solución de 1,3-dicloro-2-fluoro-5-nitro-benceno (71,4 g, 340 mmol) en metanol (1,5 L) se le añadió una solución de formiato de amonio (180,2 g, 2,86 mol) en agua (300 mL). Se le añadió después polvo de cinc (93,4 g, 1,43 mol) en cuatro porciones iguales durante 20 min. La reacción se agitó durante 1 h y luego se dejó enfriar hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró a través de tierra diatomácea y el filtrado se concentró a vacío. Se añadieron acetato de etilo (300 mL) y agua (300 mL), y la mezcla se filtró nuevamente a través de tierra diatomácea. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con acetato de etilo (350 mL). Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con 500 mL de salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar 56,4 g del compuesto del título como un sólido pardo, m/z 180,2 [M+H]+. Este material se usó sin ninguna purificación adicional.

Éster terc-butílico del ácido [(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenilcarbamoil)-etil]-carbámico:

O

H

O NF

OH Cl Cl

Cl O

F

ONMM, i-BuOCOCl H

O N

Cl THF

N

HNH2 O

A una solución enfriada (−20 °C) de ácido (R)-2-terc-butoxicarbonilamino-propiónico (57,2 g, 302 mmol) en THF anhidro (582 mL) se le añadió N-metil-morfolina (34,9 mL, 317 mmol) a un índice tal como para mantener la temperatura interna a −15 °C. Se añadió entonces cloroformiato de isobutilo (42,0 mL, 317 mmol) durante un período de 20 min y la mezcla resultante se agitó durante 30 min. Se añadió luego una solución de 3,5-dicloro-4-fluorofenilamina (54,4 g, 302 mmol) en THF (160 mL) durante 40 min. La mezcla de reacción se calentó hasta 20 °C y se agitó durante 20 h. La mezcla de reacción se filtró y concentró a vacío. Al aceite resultante se le añadió MeOH (200 mL) y la solución se concentró para proporcionar el compuesto del título como un sólido de color canela, m/z 295,3 [M−t-Bu]+. Este material se usó sin purificación adicional.

Éster terc-butílico del ácido [(R)-1-(3-cloro-5-trifluorometil-fenilcarbamoil)-etil]-carbámico

(R)-2-amino-N-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-propionamida:

40 Cl Cl

F

HCl

O

H

O N

H2N

Cl MeOH / H2O

Cl

N

H

O

A una solución de ácido clorhídrico (12 M, 266 mL, 3,19 mol) en agua (272 mL) y MeOH (135 mL) se le añadió una solución de éster terc-butílico del ácido [(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenilcarbamoil)-etil]-carbámico bruto (208,6 g, 594 mmol) en MeOH (600 mL) con un embudo de adición durante 30 min. Se añadió entonces CH2Cl2 (300 mL) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. Se añadió una porción adicional de HCl (12 M, 100 mL) y se siguió agitando durante otras 20 h. Los disolventes volátiles se eliminaron a vacío y la mezcla acuosa restante se enfrió hasta -15 a -20 °C. Se añadió tolueno (400 mL) seguido de adición de solución de NaOH (50% acuoso, 300 mL), que se añadió a un índice tal como para mantener la temperatura interna por debajo de 25 °C. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con tolueno (2 x 1 L). Las capas orgánicas reunidas se secaron con Na2SO4 y se concentraron para dar 158,3 g del compuesto del título como un aceite pardo oscuro que se solidifica lentamente en el congelador, m/z 251,1 [M+H]+. Este material bruto se usó sin ninguna purificación adicional.

(R)-2-amino-N-(3-cloro-5-trifluorometil-fenil)-propionamida

(2S,5R)-2-terc-butil-3-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-1-(2,2,2-trifluoro-acetil)-imidazolidin-4-ona:

A una solución de (R)-2-amino-N-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-propionamida (149,1 g bruta, máx 594 mmol) en tolueno (743 mL), a 40 °C, se le añadió pivalaldehído (67,1 mL, 618 mmol) en una porción. La reacción se agitó a 50°C durante 22 h y luego todos los componentes volátiles se separaron a vacío para proporcionar un aceite pardo viscoso. Se añadió hexano (500 mL) y la suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se filtró y los sólidos se enjuagaron con hexano frío. El filtrado se concentró a vacío y se reprocesó en un modo similar para obtener precipitado adicional. El resto del filtrado se diluyó con hexano hasta que se separó un aceite negro de la solución. La capa en hexano se decantó de este aceite negro y se concentró a vacío. El residuo se redisolvió en éter dietílico caliente (300 mL) y se conservó en el refrigerador durante 1,5 h, tiempo durante el cual se observó un desarrollo de cristales. Los sólidos se filtraron, y el filtrado se reprocesó en un modo similar para obtener cristales adicionales. Todos los sólidos recogidos se combinaron para dar 112,2 g de (2S,5R)-2-terc-butil-3(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-imidazolidin-4-ona como un sólido de color canela. A una solución de este sólido en tolueno (639 mL), a 0 °C, se le añadió trietilamina (73,5 mL, 527 mmol) en una porción. Se añadió anhídrido trifluoroacético (58,6 mL, 422 mmol) a la mezcla de reacción durante 1 h a un índice tal como para mantener la temperatura interna por debajo de 5 °C. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 h y luego se calentó hasta 20 °C durante 1 h. La mezcla se enfrió luego hasta 10 °C y se añadió agua (1,2 L). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua (1,2 L y luego 0,6 L). Las capas acuosas reunidas se extrajeron con tolueno (0,6 L). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a vacío para dar 149,4 g del compuesto del título como un sólido de color canela, m/z 456,4 [M+MeCN+H]+.

(2S,5R)-2-terc-butil-3-(3-cloro-5-trifluorometil-fenil)-5-metil-1-(2,2,2-trifluoro-acetil)-imidazolidin-4-ona

4-[(2R,4R)-2-terc-butil-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-4-metil-5-oxo-3-(2,2,2-trifluoro-acetil)-imidazolidin-4ilmetil]-benzonitrilo:

FF Cl

Cl Br

Cl Cl

CN N O LiHMDS N O N N THF N OO

FF FF FF

A una solución de (2S,5R)-2-terc-butil-3-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-1-(2,2,2-trifluoro-acetil)-imidazolidin-4-ona (158,4 g, 0,382 mol) en THF anhidro (382 mL) bajo una atmósfera de nitrógeno a -20 °C se le añadió una solución de LiHMDS (1,0 M en THF, 401 mL, 0,401 mol) durante 50 min. La temperatura interna aumentó hasta -5 °C durante el curso de esta adición. Se siguió agitando a esta temperatura durante una hora más. La reacción se enfrió hasta 10 °C y se añadió una solución de bromuro de 4-cianobencilo (78,5 g, 401 mmol) en THF anhidro (400 mL) durante 50 min. La temperatura de reacción había aumentado hasta 0 °C durante el curso de la adición. Se siguió agitando durante 2 h, mientras la reacción se dejó calentar hasta 10 °C. A la mezcla de reacción se le añadieron NH4Cl saturado acuoso (200 mL), agua (800 mL) y EtOAc (1 L). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (1 l). Las capas orgánicas reunidas se secaron con MgSO4 y se concentraron a vacío para dar 214,2 g del compuesto del título como un sólido de color canela/pardo, m/z 571,3 [M+MeCN+H]+.

4-[(2S,4R)-3-acetil-2-terc.-butil-1-(3-cloro-5-trifluorometil-fenil)-4-metil-5-oxo-imidazolidin-4-ilmetil]-benzonitrilo

(2R,5R)-2-terc.-butil-3-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-1-(2,2,2-trifluoro-acetil)-5-(4-trifluorometoxi-bencil)imidazolidin-4-ona

Tolueno-4-sulfonato de (R)-2-(4-ciano-fenil)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenilcarbamoil)-1-metil-etil-amonio:

A una solución de 4-[(2R,4R)-2-terc-butil-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-4-metil-5-oxo-3-(2,2,2-trifluoro-acetil)imidazolidin-4-ilmetil]-benzonitrilo (121,3 g, 228,7 mmol) en THF (457 mL), a 0 °C, se le añadió solución acuosa de BnMe3NOH (40% en peso en agua, 135,3 mL, 343,1 mmol) durante 30 min, seguidos de NaOH acuoso (50% en peso, 21,5 mL, 407 mmol). Se añadieron ambos reactivos a un índice suficiente para mantener la temperatura interna a 0 °C. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 6,5 h. Se añadió luego solución de HCl (6 N, 234 mL, 1,40 mol) a la mezcla de reacción a un índice suficiente para mantener la temperatura interna por debajo de 15 °C. La reacción se calentó hasta 50 °C y se agitó a esta temperatura durante 1,5 h. Se eliminó una porción del disolvente (~350 mL) a vacío y se añadió CH2Cl2 (300 mL). La mezcla se enfrió en un baño de hielo y se añadió una solución de NaOH (2N) a un índice suficiente como para mantener la temperatura interna por debajo de 20 °C hasta que el pH de la capa acuosa llegó a 14. La mezcla se transfirió a un embudo separado usando CH2Cl2 y H2O para asegurar la transferencia de todo el material sólido. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH2Cl2 (2 x 500 mL). Las capas orgánicas reunidas se lavaron una vez con salmuera (300 mL), se secaron con Na2SO4 y se concentraron a vacío para dar 83,8 g de un aceite viscoso rojo/negro. Este material se disolvió en MeCN (600 mL) y se calentó hasta 60 °C con agitación. Se añadió ácido p-toluenosulfónico monohidratado (50,1 g, 263 mmol) a la solución, generando la formación de un precipitado. Se añadió más MeCN (200 mL) y la mezcla se filtró para

recoger los sólidos. La torta de filtración se lavó con 600 mL de MeCN y se secó para dar 106 g del compuesto del título como un sólido blanco, m/z 366,6 [M]+. Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a los descritos anteriormente: Sal tolueno-4-sulfonato de (R)-1-(3-cloro-5-trifluorometil-fenilcarbamoil)-2-(4-ciano-fenil)-1-metil-etil-amonio Sal tolueno-4-sulfonato de (R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenilcarbamoil)-1-metil-2-(4-trifluorometoxi-fenil)-etil-amonio (R)-3-(4-ciano-fenil)-N-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-2-[3-(2,2-dimetoxi-etil)-ureido]-2-metil-propionamida:

A una solución de tolueno-4-sulfonato de (R)-2-(4-ciano-fenil)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenilcarbamoil)-1-metil-etil

10 amonio (87,7 g, 162,9 mmol) y éster fenílico del ácido (2,2-dimetoxi-etil)-carbámico (40,4 g, 179 mmol) en DMSO (162 mL) se le añadió Na3PO4 (29,4 g, 179 mmol) y N-metilmorfolina (3,04 mL, 27,7 mmol). La solución se calentó hasta 65 °C y se agitó durante 6 h. La solución se enfrió hasta 20 °C y se transfirió a un embudo separador con Na2CO3 acuoso (3% en peso, 500 mL) y EtOAc (500 mL), formando un sistema trifásico después de agitar. Se separó el fondo de las dos capas. La capa orgánica superior se lavó con NaCl acuoso al 3% (500 mL), se secó con

15 Na2SO4 y se concentró a vacío, manteniendo la temperatura interna inferior a 40 °C. Se añadió una mezcla de heptano y EtOAc (10:1 heptano:EtOAc, 20 mL) y la suspensión resultante se agitó a 22 °C durante 16 h. La suspensión se filtró y los sólidos se lavaron con una mezcla 10:1 de heptano/EtOAc (2 x 100 mL) para dar 61,6 g del compuesto del título como un sólido blanco, m/z 497,7 [M+H]+.

20 (R)-N-(3-cloro-5-trifluorometil-fenil)-3-(4-ciano-fenil)-2-[3-(2,2-dimetoxi-etil)-ureido]-2-metil-propionamida

(R)-N-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-2-[3-(2,2-dimetoxi-etil)-ureido]-2-metil-3-(4-trifluorometoxi-fenil)-propionamida

4-[(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-ilmetil]-benzonitrilo:

F

Cl

Cl i) PPh3, CCl4, Et3N MeCN

HN O

N

N O

H

N

ii) p-TsOH, 70 °C

H

N

NO O

O

A una suspensión, a temperatura ambiente, de (R)-3-(4-ciano-fenil)-N-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-2-[3-(2,2-dimetoxietil)-ureido]-2-metil-propionamida (62,6 g, 125,9 mmol), PPh3 (51,98 g, 198,17 mmol) y Et3N (29,35 mL, 210,6 mmol) en MeCN (250 mL) se le añadió CCl4 (20,3 mL, 210,6 mmol) en una porción. La reacción se agitó durante 2 h y luego se enfrió hasta 0°C. A esta solución se le añadió ácido p-toluenosulfónico monohidratado (37,7 g, 198,2 mmol) y la reacción se calentó a 70 °C durante 2 h. Los componentes volátiles se evaporaron a vacío, y el residuo se diluyó con acetato de isopropilo (i-PrOAc) (500 mL) y agua (500 mL). La capa de agua se separó y la capa orgánica se lavó con Na2CO3 acuoso (5% en peso, 500 mL) y luego NaCl acuoso (3% en peso, 500 mL). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró a vacío para dar un semi-sólido. Se añadió una mezcla de Heptano/i-PrOAc (150 mL,

80:20 heptano:i-PrOAc) causando la precipitación de un sólido. La suspensión resultante se agitó durante una noche y después se filtró. El filtrado se evaporó a vacío para dar un aceite pardo. El aceite se reprocesó usando las mismas condiciones 3 veces más. El aceite pardo restante del filtrado se purificó luego por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (EtOAc al 20-50%/hexanos) para dar 48,0 g de los compuestos del título como un sólido blanco, m/z 415,7 [M+H]+.

4-[(R)-1-(3-cloro-5-trifluorometil-fenil)-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-ilmetil]-benzonitrilo

(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-3-metil-3-(4-trifluorometoxi-bencil)-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-2-ona

4-[(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-yodo-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-ilmetil]benzonitrilo:

F

Cl

N

I

Un matraz cubierto con papel de aluminio, que contenía una solución de 4-[(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-3-metil-2oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-ilmetil]-benzonitrilo (48,8 g, 117,5 mmol) en CH2Cl2 (900 mL), se sumergió parcialmente en un baño de agua con hielo. A esta solución se le añadió una mezcla sólida de Nyodosuccinimida (29,1 g, 129 mmol) y p-toluenosulfonato de piridinio (2,95 g, 11,7 mmol) en cuatro porciones separadas durante un período de 30 min. La reacción se dejó en agitación en el baño de congelación y deshielo durante 1 h y luego se retiró el baño. La agitación continuó durante una noche. Se añadió Na2S2O3 saturado, acuoso (300 mL) a la reacción y la mezcla se transfirió a un embudo separador, usando CH2Cl2 (200 mL) y agua (1 L). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con CH2Cl2 (2 x 500 mL) y EtOAc (500 mL). Las capas orgánicas reunidas se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a vacío para dar un aceite amarillo. Este aceite se purificó por cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice (EtOAc al 0-2,5%/tolueno) para dar 52 g del compuesto del título como un sólido blanco, m/z 541,3 [M+H]+.

4-[(R)-1-(3-cloro-5-trifluorometil-fenil)-5-yodo-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-ilmetil]benzonitrilo

(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-yodo-3-metil-3-(4-trifluorometoxi-bencil)-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-2-ona

Ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol3-carboxílico:

F

Cl

Cl Cl

NaHCO2, Ac2O

Pd(OAc)2, LiCl

N O

N

DIPEA, DMF, 80 °C

N N

N

I HO

O

Se suspendieron anhídrido acético (14,0 mL, 148 mmol), formiato de sodio (15,1 g, 222 mmol) y base de Hünig (25,8

5 mL, 148 mmol) en DMF anhidra (50 mL) en un recipiente de vidrio a presión con tapa a rosca de 1000 mL. Se selló con la tapa roscada y se dejó agitar durante 45 min a temperatura ambiente. A esta mezcla se le añadió una solución de 4-[(R)-1-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-yodo-3-metil-2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-ilmetil]benzonitrilo (40,0 g, 73,9 mmol) en DMF anhidra (200 mL) seguida de Pd(OAc)2 (830 mg, 3,70 mmol) y LiCl anhidro (9,40 g, 221 mmol). El recipiente se tapó de forma hermética y se dejó agitar a 80 °C durante 20 h. En una campana

10 de extracción bien ventilada, la reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y la tapa roscada se quitó lentamente para la liberación de gas. La reacción se transfirió a un embudo separador que contenía una solución de HCl acuoso (2N, 1 L), usando EtOAc (1L). Las capas se separaron y la fase orgánica se lavó con HCl 2N acuoso (1 L). Se extrajo la fase acuosa reunida con EtOAc (2 X 1 L). La fase orgánica combinada se secó con MgSO4 y se concentró a vacío. Se añadió tolueno al residuo de color oscuro, causando la precipitación de un sólido. El sólido se filtró y se

15 lavó con 1:1 tolueno:hexanos seguido de hexanos. El filtrado se concentró y reprocesó en un modo similar para dar sólidos adicionales. Se obtuvo un total de 29,4 g del compuesto del título como un sólido blanquecino, m/z. 459,4 [M+H]+.

20 Ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico Ácido (R)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-(4-trifluorometoxi-bencil)-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3carboxílico

Ácido (R)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-(4-trifluorometoxi-bencil)-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,225 a]imidazol-3-carboxílico

Ácido (R)-5-(4-bromo-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico

Ácido (R)-7-(3-cloro-5-trifluorometil-fenil)-5-(4-ciano-bencil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3carboxílico

Cloruro de (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,230 a]imidazol-3-carbonilo

FF Cl

Cl Cl

Cl O

Cl

Cl O

N N

N O

NN

NN N

HO

O ClO

Se disolvió ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2a]imidazol-3-carboxílico (44 g, 95,8 mmol) en CH2Cl2 (600 mL). A esta solución se añadió cloruro de oxalilo (16,7 g) seguido de DMF (0,3 mL). Al cabo de 2 h, los componentes volátiles se separaron y el residuo resultante se colocó

35 bajo alto vacío durante 18 h para proporcionar el compuesto del título. El compuesto del título se utilizó sin purificación.

Ácido 1-{[(R)-5-(4-bromo-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico

A una suspensión de ácido (R)-5-(4-bromo-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2

5 a]imidazol-3-carboxílico (1,00 g, 2,02 mmol) e hidrocloruro de éster alílico del ácido 1-amino-ciclopropanocarboxílico (430 mg, 2,42 mmol) en 6 mL de DMF, a temperatura ambiente, se le añadió diisopropiletilamina (1,05 mL, 6,06 mmol), y la mezcla de reacción se agitó durante 10 min. Se añadió luego HATU (845 mg, 2,22 mmol) y la mezcla de reacción amarilla, clara se agitó a temperatura ambiente durante 21 h. La mezcla de reacción se repartió entre 150 mL de acetato de etilo y 50 mL de HCl 1 M. La fase orgánica se lavó con solución sat. de NaHCO3, agua (2 veces) y

10 salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y concentró. El residuo se purificó por cromatografía de resolución rápida sobre gel de sílice (EtOAc al 10-30% en hexanos), para proporcionar 1,16 g de éster alílico del ácido 1-{[(R)-5-(4bromo-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonil]-amino}ciclopropanocarboxílico (93%) como una espuma incolora.

A una solución de éster alílico del ácido 1-{[(R)-5-(4-bromo-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H

15 imidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico (200 mg, 0,32 mmol) y morfolina (0,282 mL, 3,24 mmol) en 2 mL de THF se añadió Pd(Ph3P)4 (19 mg, 0,016 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó luego con 30 mL de EtOAc y se lavó cada vez con 10 mL de solución de HCl al 10%, agua y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se aplicó a un cartucho precargado de SiliaBond Carbonate (2 g, 0,7 mmol/g, Silicycle). La columna se eluyó con 30 mL de MeOH

20 al 10% en CH2Cl2, seguido de 200 mL de 0,1:1:9 TFA/MeOH/CH2Cl2 para proporcionar 142 mg (76%) del compuesto del título en forma de una espuma incolora, m/z 579,4 [M + 1]+.

Ácido 1-{[(R)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-(4-trifluorometil-bencil)-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico

25 Ácido 1-{[(R)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-(4-trifluorometoxi-bencil)-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2a]imidazol-3-carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico

Ácido 1-{[(R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico

Ácido 1-{[(R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonil]30 amino}-ciclopropanocarboxílico

Ácido 1-{[(R)-5-(4-cloro-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico

Se cargó un vial para microondas con éster alílico del ácido 1-{[(R)-5-(4-bromo-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6

5 oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico (400 mg, 0,647 mmol), NiCl2•6H2O (231 mg, 1,22 mmol) y 1,5 mL de DMF. El vial se selló y calentó en el microondas a 170 °C durante 40 min y luego durante 1 h. La mezcla de reacción bruta se diluyó con 30 mL de EtOAc y 15 mL de agua (los sólidos no fueron solubles). La fase acuosa se extrajo con 10 mL de EtOAc. Los extractos orgánicos reunidos se lavaron con solución de NaCl al 5% (2 × 15 mL) y salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron para

10 proporcionar 299 mg de un aceite verde turbio aislado como una mezcla ~1:1 del bromuro de arilo y del cloruro de arilo.

A una solución de los ésteres alílicos brutos (299 mg, ~0,25 mmol) y morfolina (0,436 mL, 5,0 mmol) en 3 mL de THF se le añadió Pd(Ph3P)4 (29 mg, 0,0259 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla de reacción se diluyó luego con 30 mL de EtOAc y se lavó cada vez con 10 mL de solución de HCl al

15 10%, agua y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se aisló como una mezcla ~1:1 de ácidos de cloro a bromo y se llevó a la etapa siguiente sin purificación adicional.

La mezcla ácida bromo/cloro bruta (~0,25 mmol) se concentró en un vial para microondas. A esta mezcla se le añadió ácido 3-piridil-borónico (45 mg, 0,37 mmol), complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (20 mg, 0,024 mmol), 4 mL de DME/H2O/EtOH (7/3/2) y solución de K3PO4 acuosa (0,73 mL, 1 M, 0,73 mmol). El vial se selló y calentó en el 20 microondas a 100 °C durante 15 min, seguido de calentamiento a 130 °C durante otros 30 min. La mezcla de reacción luego se filtró a través de un tapón de gel de sílice, lavando con 10 mL de MeOH y se concentró. El residuo se diluyó con 30 mL de EtOAc y se lavó cada vez con 10 mL de solución de HCl al 10%, agua y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El aceite bruto se disolvió en DMSO/CH3CN/H2O (1:2:1, 1,2 mL) y se purificó por HPLC de fase inversa (40-95% CH3CN/H2O, TFA al 0,1%). La concentración de las fracciones de producto

25 proporcionó 52 mg (~40%) de ácido 1-{[(R)-5-(4-cloro-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5Himidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonil]-amino}-ciclopropano-carboxílico.

Síntesis de los compuestos finales:

Ejemplo 1. (1-{1-[4-(1H-pirazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilcarbamoil}-ciclopropil)-amida del ácido (R)-5-(4ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico sal del ácido trifluoroacético (Compuesto 124)

Cl Cl

Cl

N

ON

N ON

O

N N

N

B O

N +

OHN

N

OOHN

HO O

F

HO

F NH NH

F N N NH

I

{1-[1-(4-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil-carbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico (40 mg, 0,052 mmol) se disolvió en DME (1,0 mL) y se añadió complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (4 mg, 0,005 mmol). Esta solución se añadió a un tubo de reacción

10 de microondas que contenía 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-pirazol (15 mg, 0,08 mmol) y solución de K3PO4 1 M (0,06 mL, 0,06 mmol), agua (0,4 mL) y EtOH (0,3 mL). El tubo de reacción se selló y se calentó en un microondas a 100ºC durante 10 minutos. Luego, la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice, lavando con metanol al 10% en CH2Cl2 (3 x 1 mL). El filtrado se concentró y el sólido resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa para proporcionar 23 mg del compuesto del título, m/z 706,3.

15 Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a aquellos anteriormente descritos, usando los productos intermedios apropiados:

Compuesto m/z

1 738.9 2 750.6 3 785.7 8 797.8 9 706,3 11 724.6 12 783.8 13 778.7 14 778.8 16 774.4 18 749.7 20 809.6 21 740.8 23 813.8 25 803.9

27: 750.8

31: 739.6

32: 765.7

33: 725.7

34: 751.4

38: 764.8

39: 824.8

41: 824.8

43: 765.8

52: 760,3

53: 758,3

54: 731,3

55: 735,3

56: 787,3

57: 731,3

58: 735,3

59: 773,3

60: 734.3

61: 753,2

62: 731,3

63: 735,3

64: 712.8

65: 753.4

6: 759.7

67: 706.7

68: 735.7

69: 735.7

70: 777.7

71: 742.7

72: 777.9

73: 775.9

74: 760.9

95: 769.8

96: 765.6

99: 783.7

100: 764.7

101: 766.7

109: 766.8

110: 825.6

111: 753.7

112 750.7 114 779.7 115 813.6 123 752.8 126 773.4 127 707,2 128 719,3 129 706,3 130 750.3 131 759,3 132 795,3 133 809,3 134 794,3 135 732,3 136 746,3 137 741,3 138 795,3 139 773,3 140 809,3 141 794,3 142 732,3 143 746,3 144 823,3 146 756,3 147 755.3 148 730,3 149 720,3 156 752.8 157 752.6 158 812.7 160 753.4

Ejemplo 2. (1-{1-[5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropilcarbamoil}-ciclopropil)-amida del ácido (R)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-(4-trifluorometoxi-bencil)-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2a]imidazol-3-carboxílico (Compuesto 40)

F Cl Cl

F

N OCl

Cl N N

NH2

F F

N HNO

N N ON O FHATU, DIPEA O+

N DMF NH HN O NN

NN

O O FOH F F NN

A una solución de ácido 1-{[(R)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-5-(4-trifluorometoxi-bencil)-6,7-dihidro-5Himidazo[1,2-a]imidazol-3-carbonil]-amino}-ciclopropanocarboxílico (130 mg, 0,22 mmol) e hidrocloruro de 1-[5-(1metil-1H-pirazol-4-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropilamina (75 mg, 0,26 mmol) en DMF (1 mL) se añadió diisopropiletilamina (0,15 mL, 0,87 mmol) y HATU (990 mg, 0,24 mmol). Al cabo de 1 h, la mezcla de reacción se purificó mediante MPLC de fase inversa (C18, 30 g, fase móvil: CH3CN (TFA al 0,1%), agua (TFA al 0,1%), gradiente: 70% de agua a 10% de agua). Las fracciones puras se reunieron y se concentraron en vacío para separar la mayor parte del CH3CN y luego se repartieron entre 50 mL de CH2Cl2, 20 mL de agua y 10 mL de solución acuosa saturada de NaHCO3. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar 146 mg del compuesto del título en forma de una espuma blanca, m/z = 798,8.

Los siguientes compuestos se prepararon usando procedimientos similares a aquellos anteriormente descritos, usando los productos intermedios apropiados:

Compuesto M/z

4 798.8 10 789.7 15 779.7 19 788.6 24 807.8 26 763.9 29 768.7 35 739.6 36 753.7 37 765.6 42 784.7

51 754.8 75 775.5 76 729.7 77 729.7 81 707.7 82 706.6

83 706.6 86 810.8 89 824.8 97 807.6 98 748,6 102 790.8 103 792.8 105 751.8 108 810.6 113 738.8

116 812.7 122 726 150 811.7

Ejemplo 3. (1-{1-[5-(1-metil-1H-imidazol-2-il)-piridin-2-il]-ciclopropilcarbamoil}-ciclopropil)-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico sal del ácido bistrifluoroacético (Compuesto 80)

OClCl

ClClF

O F

HO

FF HON

FO

N

FN O

Pd(OAc)2, CuI

N

N N

N +

N H

N

DMF, 140oC N

NN

H N O

N N

N OH HO ON

N

{1-[1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropil-carbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico (50 mg, 0,07 mmol), 1-metil-1H-imidazol (10,3 μL, 0,13 mmol), Pd(OAc)2 (2,9 mg, 0,013 mmol) y CuI (24,8 mg, 0,13 mmol) se mezclaron juntos en un tubo de microondas y luego se añadió DMF (0,5 mL). Se burbujeó argón a través de la mezcla durante 15 min y, después, la reacción se calentó a 140 °C durante 24 h. La reacción se diluyó con 10 mL de MeOH y se filtró a través una almohadilla de sílice. El residuo se purificó por HPLC de fase inversa para dar el compuesto del título (18 mg, 0,025 mmol, 38%) en forma de un semi-sólido, m/z = 720,7 [M + H]+.

Compuesto M/z

79 706.6 94 735.8

Ejemplo 4. (1-{1-[5-(3-metil-3H-imidazol-4-il)-piridin-2-il]-ciclopropilcarbamoil}-ciclopropil)-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico sal del ácido bistrifluoroacético (Compuesto 84)

O FHOO

F Cl

Cl Cl FHO FF

NN

N

O

O Sn

N N NN +

N N NI

N H

N

H N

N N O

N O H

HOO

NN

{1-[1-(5-yodo-piridin-2-il)-ciclopropilcarbamoil]-ciclopropil}-amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo-[1,2-a]imidazol-3-carboxílico (50 mg, 0,07 mmol), 1-metil-5

10 tributilestannanil-1H-imidazol (48 mg, 0,13 mmol) y THF (2 mL) se reunieron y se burbujeó argón a través de la mezcla de reacción durante 15 minutos. Luego se añadió complejo de Pd(dppf)Cl2·diclorometano (11 mg, 0,013 mmol) a la solución y la desgasificación continuó durante 10 minutos. La reacción se calentó luego a 80ºC. Después de 18 h, el disolvente se evaporó. El residuo sólido se disolvió en DMSO (1 mL) y se purificó por HPLC de fase inversa, proporcionando 36 mg del compuesto del título como un sólido blanco, m/z = 720,7 [M + H]+.

Compuesto M/z

22 735.8

85 777.7

91 723.6

92 723.7

Ejemplo 5. ((1S,2R)-1-{1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropilcarbamoil}-2-hidroxi-propil)amida del ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-imidazo[1,2

20 a]imidazol-3-carboxílico (Compuesto 145)

NH2

F O

Cl NH OH HCl

Cl

NN N

OF

N Cl

Cl N

NN

HN O

N

O O

N

N .ret. TBTU, Et3N, THF

NH OH

HO O

NN

N

NN

A un matraz se añadió ácido (R)-5-(4-ciano-bencil)-7-(3,5-dicloro-4-fluoro-fenil)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5Himidazo[1,2-a]imidazol-3-carboxílico (0,80 g, 2,18 mmol), TBTU (0,73 g, 2,28 mmol) y Et3N (0,91 mL, 6,54 mmol) y

THF (10 mL). La mezcla se dejó agitar a TA durante 30 min. La mezcla se transfirió a un matraz separado que contenía hidrocloruro de (2S,3R)-2-amino-N-{1-[5-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-pirimidin-2-il]-ciclopropil}-3-hidroxibutiramida (1,0 g, 2,18 mmol) en THF (30 mL). La mezcla se agitó a TA durante 24 h. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice para proporcionar 1,45 g del compuesto del título en forma de un

5 sólido blanco, después de la separación del disolvente, m/z = 771,8 [M + H]+.

Compuesto m/z

5 727.8 6 757.9 7 816.8 17 865.6 28 785.9 30 755.7 44 713.8 45 743.8 46 772.8 47 802.8 48 852.8 49 812.8 50 753.8 78 754.6 87 752.8 88 726,7 90 753.7

93 712,7 104 815.8 106 753.8 107 726.8 117 741.8 118 800.8 119 771.8 120 830.8 121 758.7 125 843.7 151 770.7 152 756.7 153 801.9 154 756.7 155 770.8

159 760,7

DESCRIPCIÓN DE PROPIEDADES BIOLÓGICAS

5 Las propiedades biológicas de compuestos representativos de la fórmula I se investigaron mediante el protocolo experimental que se describe a continuación.

Ensayo para determinar la inhibición de unión de LFA-1 a ICAM-1

10 Propósito del ensayo:

Este protocolo de ensayo está diseñado para estudiar el antagonismo directo, por un compuesto de ensayo, de la interacción de ICAM-1 con la Leucointegrina CD18/CD11a (LFA-1).

15 Descripción del protocolo de ensayo:

El ensayo molecular de LFA-1/biotina-sICAM-1 mide la capacidad de compuestos de ensayo de inhibir la unión de LFA-1 a sICAM biotinilada, utilizando la tecnología AlphaScreen (Ref: Wilson, J, Rossi, CP, Carboni, S, Fremaux, C, Perrin, D, Soto, C, Kosco-Vilbois, M, y Scheer, A: A Homogeneous 384-Well High-Throughput Binding Assay for a 20 TNF Receptor Using Alphascreen Technology. J Biomol Screen 2003;8:522-532) que utiliza perlas de aceptor AlphaLisa conjugadas a TS2/4(anti-LFA-1)-custom y perlas de donante revestidas con estreptavidina de PerkinElmer. El ensayo se realizó en OptiPlates-384 blancas en un volumen de 60 μL utilizando tampón de ensayo (PBS de Dulbecco que contiene calcio y magnesio, MgCl2 2 mM, PMSF 0,1 mM, BSA al 0,1%, pH 7,1). A cada pocillo se añadió biotina-sICAM, seguido de LFA-1 purificado (en tampón de trietilamina 50 mM, NaCl 150 mM, beta25 octilglucósido al 1%, MgCl2 2 mM neutralizado hasta pH con Tris-HCl 1 M, pH 7,5). Para el ensayo del compuesto, éste se añadió en una cantidad de 5 uL a lo anterior en una cantidad de 25 uL. LFA-1 y biotina-sICAM-1 se utilizaron a concentraciones que proporcionaran una relación de señal a fondo de 8-10. La concentración más elevada de compuesto era 1 μM en DMSO al 1%. Los controles positivos eran pocillos sin compuesto que contenía LFA-1, mientras que las muestras en blanco eran pocillos tanto sin compuesto como LFA-1. Las placas se mezclaron e 30 incubaron a 37°C durante 90 minutos. A esto le siguió la adición de 15 μL/pocillo de perlas de aceptor conjugadas con TS2/4, diluidas en PBS que contenía BSA al 0,1% para una concentración final de 10 μg/mL. Las placas se mezclaron e incubaron en la oscuridad durante 30 minutos a la temperatura ambiente, seguido de la adición de 15 μL/pocillo de perlas de donante revestidas con estreptavidina, diluidas en PBS que contenía BSA al 0,1% a una concentración fnal de 15 μg/mL. Las placas se mezclaron e incubaron en la oscuridad durante 60 minutos a la

35 temperatura ambiente y luego se leyeron en un lector EnVision Multilabel Reader utilizando el protocolo OptiPlate AlphaScreen de 384 pocillos.

Los compuestos preparados en los ejemplos de arriba se ensayaron en este ensayo y se halló que cada uno tiene una CI50 < 1 μM. En la tabla que figura a continuación se proporcionan datos de este ensayo: 40

Com-puesto nº: Alpha-screen CI50 (nM) Compuesto nº Alphascreen CI50 (nM) Compuesto nº Alphascreen CI50 (nM)

1: 0,88 47 1,2 112 0,54

2: 1,1 49 1.3 115 1,8

4: 1,5 50 1.3 116 1.3

5: 1,2 51 1,2 117 0,58

6: 0,44 52 0,72 118 0,86

7: 1,4 54 0.53 119 0,85

8: 1.3 56 0,67 120 0

10: 1 58 0,71 121 1,1

11: 1,2 60 0,96 123 1,4

12: 1,1 61 1 125 0

13: 1,8 62 1,1 127 0,34

14: 1,1 64 0.61 129 0,22

15: 1,6 65 0.53 131 0,99

16: 1 6 1.3 132 0,72

18: 1,4 68 0,6 133 1,5

20: 1,5 69 0,99 134 0.64

21: 0,51 70 0,8 135 0.64

23: 0,8 72 0,83 136 0,56

27: 1,5 75 1,2 138 0.64

28: 2,9 78 1,2 141 0.53

30: 0.61 87 1,9 142 1.7

31: 0,51 88 0,89 143 1,9

32: 1,4 89 0,58 145 0

33: 0,57 90 0,28 146 1,6

34: 1 93 0,7 149 0.33

35: 0,48 96 0,97 150 0.68

37: 0,89 100 1.3 151 1,2

38: 1.7 101 1,1 152 1,1

39: 1,8 103 1.3 153 0,93

40: 1.7 104 1,2 154 0.76

41: 1,2 105 0.68 155 0,56

42: 1.3 106 1,1 156 0.77

43: 0,62 108 1,1 157 0,91

44: 0.53 109 1,4 158 1.3

45: 0,38 110 0,65 159 0,44

46: 0.77 111 1,6 160 0.59

Ensayo para determinar la inhibición de la producción de IL-2 en sangre completa

Propósito del ensayo:

Este protocolo de ensayo está diseñado para estudiar el antagonismo funcional, por un compuesto de ensayo, de la interacción de ICAM-1 con la Leucointegrina CD18/CD11a (LFA-1).

Descripción del protocolo de ensayo:

Los compuestos se evaluaron en cuanto a su capacidad de inhibir la producción de IL-2 por parte de células presentes en sangre entera humana heparinizada, recientemente extraída, después de la estimulación ex vivo mediante la enterotoxina B de estafilococos (SEB - siglas en inglés). Los compuestos se diluyeron en suero AB humano hasta 11 veces su concentración de ensayo final. Tras la dilución adicional para las curvas de concentración-respuesta en suero AB humano que contenía DMSO al 1,12%, se añadió a los compuestos sangre entera humana. Tras incubación durante 30 minutos de sangre y compuesto, se añadió entonces SEB para proporcionar una concentración final de 600 ng/mL de SEB y una concentración final de DMSO de 0,1%. Después de incubación durante una noche (incubadora de CO2 humidificada a 37 ºC), se tomaron muestras de plasma y se analizaron en cuanto a la presencia de IL-2 utilizando un protocolo de electroquimioluminiscencia. Para este ensayo se emplearon un anticuerpo de IL-2 anti-humano biotinilado (R&D Systems BAF202), un anticuerpo monoclonal de IL-2 anti-humano marcado con MSD Sulfo-TAG (MSD R91AN-2) (R&D Systems MAB602) y placas patrón de avidina MSD para medir la IL-2 en muestras de plasma.

Compuestos representativos, preparados en los ejemplos de arriba, se ensayaron en este ensayo y se halló que la mayoría tiene una CI50 < 10 μM.

Ensayo para determinar la estabilidad metabólica por parte de microsomas del hígado humano

Propósito del ensayo:

Este protocolo de ensayo está diseñado para estudiar la estabilidad de un compuesto de ensayo frente a la oxidación metabólica por parte de microsomas del hígado humano.

Descripción del protocolo de ensayo:

Los compuestos se incubaron en microsomas del hígado humano para estimar la t1/2 de desaparición del compuesto parental. El ensayo se realizó en tampón fosfato de potasio 50 mM, pH 7,4 y NADPH 2,5 mM. Los compuestos se ensayaron a una concentración final del ensayo de 1 μM. La concentración de proteinas era 1 mg/mL. La reacción se pre-incubó a 37 C durante 5 min, y las reacciones metabólicas se iniciaron mediante la adición de NADPH. Se separaron partes alícuotas a los 0, 5 y 30 minutos y se precipitaron con un patrón interno que contenía acetonitrilo. Las muestras se filtraron a través de placas de filtro de fibra de vidrio de 0,25 mm y el material sobrenadante se analizó mediante LC/MS/MS. El porcentaje de pérdida del compuesto parental se calculó a partir de la relación área pico (compuesto/patrón interno) en cada instante en comparación con la relación área pico de la muestra de minuto cero para determinar la t1/2 en minutos. La semivida en minutos utilizando 1 mg de proteína microsomal se convirtió en el aclaramiento intrínseco (CLint) mediante el aumento en escala de los datos para mg de proteína microsomal/g de hígado y para g de hígado/kg de peso corporal utilizando lo siguiente:

CLint (en mL/min/kg) = 0,693/T1/2 * mL/1 mg * 45 mg LM/g de hígado * 25,7 g de hígado/kg en peso.

Clint se aumentó luego en escala para estimar un aclaramiento del cuerpo completo utilizando el modelo, bien agitado, utilizando lo siguiente:

CLH (en mL/min/kg) = QH* CLint / (QH + CLint)

en que QH es el flujo de sangre hepático, 20,7 mL/min/kg en un ser humano. CLH se puede entonces expresar como un porcentaje de QH (% de QH).

Compuestos representativos hechos en los ejemplos anteriores se testaron en este ensayo y se halló que la mayoría de los compuestos se metabolizaban a una tasa de baja a moderada de <75% de QH.

DESCRIPCIÓN DE USO TERAPÉUTICO

Las nuevas moléculas pequeñas de fórmula I provistas por la invención inhiben la agregación homotípica dependiente de ICAM-1/LFA-1 de linfocitos humanos y adherencia de linfocitos humanos a ICAM-1. Estos compuestos tienen utilidad terapéutica en la modulación de la activación/proliferación de células inmunitarias, p. ej., como inhibidores competitivos de reacciones de unión intercelular ligando/receptor que implican CAMs y Leucointegrinas. Para ser más específicos, los compuestos de la invención se pueden utilizar para tratar determinadas afecciones inflamatorias que incluyen afecciones provocadas por una respuesta del sistema inmunitario específico en un mamífero (p. ej., asma, psoriasis, rechazo de trasplante de órgano/tejido, reacciones injerto frente a hospedante y enfermedades autoinmunitarias que incluyen síndrome de Raynaud, tiroiditis autoinmunitaria, dermatitis, esclerosis múltiple, artritis reumatoidea, diabetes mellitus insulino-dependiente, uveítis, enfermedad inflamatoria de los intestinos, que incluye enfermedad de Crohn y colitis ulcerosa, y lupus eritematoso sistémico) y afecciones provocadas por una respuesta del sistema inmunitario no específico en un mamífero (p. ej., síndrome de dificultad respiratoria aguda, choque, toxicidad por oxígeno, síndrome de lesiones multiorgánicas secundario a septicemia, síndrome de lesiones multiorgánicas secundario a traumatismo, lesión por reperfusión de tejido debida a bypass cardiopulmonar, infarto de miocardio, glomerulonefritis aguda, vasculitis, artritis reactiva, dermatosis con componentes inflamatorios agudos, accidente cerebrovascular, lesión térmica, hemodiálisis, leucaféresis, enterocolitis necrotizante y síndrome asociado a la transfusión de granulocitos). Preferiblemente, los compuestos de la invención se pueden usar para tratar psoriasis y esclerosis múltiple.

Por lo tanto, otro aspecto de la invención se refiere a un compuesto de fórmula I para uso como un medicamento y, en un aspecto particular, para uso como un medicamento para el tratamiento de la inflamación o de una afección inflamatoria. En otro aspecto particular, la invención se refiere a un compuesto de fórmula I para uso como medicamento para el tratamiento de cualquiera de las enfermedades o afecciones mencionadas en el párrafo anterior. En otro aspecto, la invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula I para la elaboración de un medicamento para el tratamiento de las enfermedades o afecciones mencionadas en el párrafo anterior.

Por lo tanto, otro aspecto de la invención es la provisión de un método para el tratamiento o la profilaxis de las afecciones anteriormente mencionadas a través de la administración de cantidades terapéuticas o profilácticas de uno o más compuestos de la fórmula I.

De acuerdo con el método provisto por la invención, los nuevos compuestos de fórmula I se pueden administrar para fines profilácticos o terapéuticos, o bien solos o combinados con otros agentes inmunosupresores o antiinflamatorios. Cuando se proveen para profilaxis, el o los compuestos inmunosupresores se proveen antes de cualquier respuesta o síntoma inflamatorio (por ejemplo, antes, durante o brevemente después del tiempo de relapso en la esclerosis múltiple). La administración profiláctica de un compuesto de fórmula I sirve para prevenir o atenuar cualquier respuesta inflamatoria subsiguiente (como, por ejemplo, un relapso en la esclerosis múltiple). La administración terapéutica de un compuesto de la fórmula I sirve para atenuar cualquier inflamación real (como, por ejemplo, un relapso en la esclerosis múltiple). Por lo tanto, de acuerdo con la invención, un compuesto de la fórmula I se puede administrar o bien antes del inicio de la inflamación (como para suprimir la inflamación anticipada) o después del comienzo de la inflamación.

Los nuevos compuestos de la fórmula I pueden, de acuerdo con la invención, administrarse en dosis únicas o divididas mediante las vías oral, parenteral o tópica. Una dosis oral adecuada para un compuesto de fórmula I estaría en el intervalo de aproximadamente 0,1 mg a 10 g por día, preferiblemente en el intervalo de 1 mg a 100 mg por día. En las formulaciones parenterales, una unidad de dosis adecuada puede contener de 0,1 a 250 mg de dichos compuestos, mientras que para la administración tópica se prefieren las formas farmacéuticas que contienen de 0,01% a 1% del ingrediente activo. Se ha de entender, no obstante, que la administración de la dosis variará de un paciente a otro y que la dosis para un paciente particular dependerá del juicio del médico, quien hará uso de criterios para determinar una dosis adecuada según el tamaño y la afección del paciente, como también la respuesta del paciente al fármaco.

Cuando los compuestos de la presente invención se administren por vía oral, se pueden administrar como medicamentos en forma de preparaciones farmacéuticas que los contengan en asociación con un material vehículo farmacéuticamente compatible. Dicho material vehículo puede ser un material vehículo inerte orgánico o inorgánico para la administración oral. Ejemplos de dichos materiales vehículo son agua, gelatina, talco, almidón, estearato de magnesio, goma arábiga, aceites vegetales, polialquilenglicoles, vaselina y similares.

Las preparaciones farmacéuticas se pueden preparar de la manera convencional y las formas de dosificación finales pueden ser formas de dosificación sólidas, por ejemplo comprimidos, grageas, cápsulas y similares, o formas de dosificación líquidas, por ejemplo soluciones, suspensiones, emulsiones y similares. Las preparaciones farmacéuticas se pueden someter a operaciones farmacéuticas convencionales tales como esterilización. Asimismo, las preparaciones farmacéuticas pueden contener adyuvantes convencionales tales como conservantes, estabilizadores, emulsionantes, mejoradores del sabor, agentes humectantes, tampones, sales para variar la presión osmótica y similares. El material excipiente sólido que se puede usar incluye, por ejemplo, almidón, lactosa, manitol, celulosa metílica, celulosa microcristalina, talco, sílice, fosfato de calcio dibásico y polímeros de gran masa molecular (tales como el polietilenglicol).

Para uso parenteral, un compuesto de la fórmula I se puede administrar en disolución, suspensión o emulsión acuosa o no acuosa en un aceite farmacéuticamente aceptable o una mezcla de líquidos, que puede contener agentes bacteriostáticos, antioxidantes, conservantes, tampones u otros solutos para tornar la disolución isotónica con la sangre, agentes espesantes, agentes de suspensión u otros aditivos farmacéuticamente aceptables. Aditivos de este tipo incluyen, por ejemplo, tampones tartrato, citrato y acetato, etanol, propilenglicol, polietilenglicol, quelantes (tales como EDTA), antioxidantes (tales como bisulfito de sodio, metabisulfito de sodio y ácido ascórbico), polímeros de gran peso molecular (tales como óxidos de polietileno líquidos) para regular la viscosidad y derivados del polietileno de anhídridos de sorbitol. Si es necesario, también se pueden añadir conservantes, tales como ácido benzoico, metilparabén o propilparabén, cloruro de benzalconio y otros compuestos de amonio cuaternario.

Los compuestos de esta invención también se pueden administrar como disoluciones de aplicación nasal y pueden contener, además de los compuestos de esta invención, tampones adecuados, ajustadores del tono, conservantes microbianos, antioxidantes y aumentadores de la viscosidad en un vehículo acuoso. Ejemplos de agentes utilizados para aumentar la viscosidad son poli(alcohol vinílico), derivados de celulosa, polivinilpirrolidona, polisorbatos o glicerina. Conservantes microbianos añadidos pueden incluir cloruro de benzalconio, tiomerosal, clorobutanol o alcohol feniletílico.

Además, los compuestos provistos por la invención se pueden administrar en forma tópica o como supositorios.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula I:

R3

R2

Cl

N

O

N N

HN O R1O

X

NHY Z R8

5 I

en donde: R1 se selecciona de -CN, -OCF3, –CF3, halógeno, heteroarilo, opcionalmente sustituido con halógeno o alquilo C1-3, y

10 fenilo, opcionalmente sustituido con halógeno; R2 es –Cl o –CF3; R3 es H o halógeno; X es un grupo

R5

R4 en la que 15 R4 se selecciona de:

(A)

-H;

(B)

alquilo C1-3 opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de: a) cicloalquilo C3-6;

20 b) -OR9; c) -NR9R10; d) -SOR9; e) -SO2R9; f) -C(O)NR9R10;

25 g) -C(O)OR9; h) heteroarilo opcionalmente sustituido con alquilo C1-3; i) heterociclilo, opcionalmente sustituido con alquilo C1-3; y j) fenilo, opcionalmente sustituido con alquilo C1-3;

(C) cicloalquilo C3-6; 30 (D) heteroarilo; y

(E) fenilo, opcionalmente sustituido con halógeno, -OR9, -CN o -CF3; R5 es H o alquilo C1-3; o R4 y R5, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado con 3-7 átomos de carbono y en donde un átomo de carbono en dicho anillo hidrocarbonado puede estar opcionalmente reemplazado

35 por -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, NH-, -NCH3- o -NC(O)CH3-; Y es un grupo

en la que

R6 es H o alquilo C1-3; 40 R7 es H o alquilo C1-3; o

R6 y R7, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado con 3-7 átomos de carbono, en donde un átomo de carbono en dicho anillo hidrocarbonado puede estar opcionalmente reemplazado por -O-, -S-, -S(O)-, -SO2-, NH-, -NCH3- o -NC(O)CH3-; Z es arilo o heteroarilo;

5 R8 se selecciona de:

(A) arilo, opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de:

(a)

alquilo C1-3, opcionalmente sustituido con –OR9, –NR9R10 o –NR9SO2R10;

(b)

cicloalquilo C3-7, opcionalmente sustituido con –OR9 o –NR9R10;

(c)

–OR9; 10 (d) halógeno;

(e)

-C(O)NR9R10;

(f)

–SO2NR9R10;

(g)

–NR9(CO)R10;

(h)

–SO2R9; 15 (i) –NR9R10;

(j)

–CN;

(k)

-C(O)OR9;

(l)

–NR9SO2R10; y

(m)

–C(O)R9; 20 (B) heteroarilo, opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de:

(a)

alquilo C1-3, opcionalmente sustituido con –OR9, –NR9R10 o halógeno;

(b)

cicloalquilo C3-7, opcionalmente sustituido con –OR9, –NR9R10;

(c)

–OR9;

(d)

halógeno; 25 (e) -C(O)NR9R10;

(f)

–SO2NR9R10;

(g)

–NR9(CO)R10;

(h)

–SO2R9;

(i)

–NR9R10; y

30 (j) –CN; R9 se selecciona de H, alquilo C1-5 o cicloalquilo C3-7; R10 se selecciona de H, alquilo C1-5 o cicloalquilo C3-7;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

35 2. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, en el que:

R1 se selecciona de –CN, –OCF3, –Br, –Cl o –CF3; R2 es –Cl o –CF3; R3 es -F o H;

40 X es un grupo

R5

R4 en la que

R4 se selecciona de:

(A) alquilo C1-2, opcionalmente sustituido con –OH; 45 (B) (1-metil-1H-imidazol-5-il)metilo; y

(C) (1-metil-1H-imidazol-4-il)metilo; R5 es H o -CH3; o R4 y R5, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos; Y es un grupo

R6 50 en la que

R6 es H o -CH3; R7 es H o -CH3; o R6 y R7, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos;

55 Z se selecciona de:

(A)

piridinilo;

(B)

pirimidinilo;

(C)

naftiridinilo;

(D)

piridazinilo; y

(E)

oxadiazolilo; R8 se selecciona de:

(A)

fenilo, opcionalmente sustituido con uno o dos grupos seleccionados de: 5 (a) –OR9;

(b)

–CH2OR9;

(c)

–C(O)OH;

(d)

-C(O)NR9R10;

(e)

–SO2CH3;

(f)

–NHSO2CH3;

(g)

–SO2NR9R10;

(h)

–F;

(i)

–NHC(O)CH3;

(j)

–CH2NHSO2CH3; 15 (k) –C(O)CH3;

(l)

–Cl;

(m)

–CN;

(n)

–CH3;

(o)

–CH2N(CH3)2; y

(p)

1-hidroxiciclopropilo;

(B)

piridinilo, opcionalmente mono- o di-sustituido con –CH3, –CH2OH, –NH2, –OH, –Cl, –F, –CN, –CF3 o ciclopropilo;

(C)

1H-pirazolilo, opcionalmente mono-, d-i o tri-sustituido con –CH3 o ciclopropilo;

(D)

pirimidinilo, opcionalmente sustituido con –CH3; 25 (E) isoxazolilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(F)

imidazo[1,2-a]piridinilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(G)

1H-pirrolo[2,3-b]piridinilo;

(H)

tiazolilo, opcionalmente mono-o di-sustituido con –CH3 o –Cl;

(I)

oxadiazolilo, opcionalmente sustituido con ciclopropilo;

(J)

furanilo;

(K)

quinolinilo;

(L)

1H-imidazolilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(M)

1H-triazolilo;

(N)

1H-pirrolilo, opcionalmente sustituido con –CH3; 35 (O) oxazolilo; y

(Q)

1H-indolilo; R9 es H o -CH3; R10 es H o -CH3;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.
3. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, en el que: R1 se selecciona de –CN, –OCF3, –Br, –Cl o –CF3; R2 es –Cl o –CF3; R3 es -Fo -H;

45 X es un grupo

R5

R4

en la que

R4 se selecciona de:

(A)

–CH3;

(B)

–CH2OH;

(C)

–CH(OH)CH3;

(D)

(1-metil-1H-imidazol-5-il)metilo; y

(E)

(1-metil-1H-imidazol-4-il)metilo; R5 es H o -CH3; o

55 R4 y R5, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos; Y es un grupo

en la que

R6 es –CH3; R7 es H o -CH3; o

R6 y R7, junto con el carbono a los que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos; Z se selecciona de:

N

N

N

NN

O

N

N

N

N

N

5 y

R8 se selecciona de:

(A) fenilo sustituido con un grupo seleccionado de:

(a)

–OH; 10 (b) –CH2OR9;

(c)

–C(O)OH;

(d)

-C(O)NR9R10;

(e)

–SO2CH3;

(f)

–NHSO2CH3; 15 (g) –SO2NH2;

(h)

–F;

(i)

–NHC(O)CH3;

(j)

–CH2NHSO2CH3; y

(k)

–C(O)CH3; 20 (B) piridinilo, opcionalmente sustituido con –CH3, –CH2OH, –NH2, –OH, –Cl, –F; –CN o ciclopropilo;

(C)

1H-pirazolil-4-ilo, opcionalmente mono-, d-i o tri-sustituido con –CH3 o ciclopropilo;

(D)

pirimidin-5-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(E)

isoxazol-4-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(F)

2-imidazo[1,2-a]piridin-6-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3; 25(G) 1H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-ilo;

(H)

1H-pirazol-3-ilo;

(l)

tiazol-5-ilo, opcionalmente sustituido con -CH3,

(J)

tiazol-4-ilo;

(K)

2-ciclopropil-1,3,4-oxadiazol-5-ilo; 30 (L) furan-3-ilo;

(M)

quinolin-3-ilo;

(N)

1H-imidazol-2-ilo, opcionalmente sustituido con –CH3;

(O)

1-metil-1H-imidazol-5-ilo;

(P)

1H-imidazolilo; y

35 (Q) 1H-1,2,4-triazolilo; R9 es H o -CH3; R10 es H o -CH3;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.

40 4. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, en el que:

R1 se selecciona de -CN, -OCF3 o -Br; R2 es –Cl o –CF3; R3 es -F o H;

45 X es un grupo

R5

en la que

R4 se selecciona de:

(A) –CH3; 50 (B) –CH2OH; y

(C) –CH(OH)CH3; R5 es H; o R4 y R5, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos; Y es un grupo en la que

R6 es –CH3; R7 es H; o R6 y R7, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos; Z se selecciona de:

N

NN NN

N

N

N ,, , y;

10 R8 se selecciona de:

(A) fenilo sustituido con un grupo seleccionado de:

(a)

–OH;

(b)

–CH2OH;

(c)

–C(O)OH; 15 (d) -C(O)NR9R10;

(e)

–SO2CH3;

(f)

–NHSO2CH3; y

(g)

–SO2NH2;

(B)

piridinilo, opcionalmente sustituido con –CH3, –CH2OH, –NH2, –OH, –Cl, –F; 20(C) 1H-pirazolil-4-ilo, opcionalmente mono-, d-i o tri-sustituido con –CH3 o ciclopropilo;

(D)

2-metil-pirimidin-5-ilo;

(E)

isoxazol-4-ilo;

(F)

imidazo[1,2-a]piridin-6-ilo; y

(G)

1H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-ilo;

25 R9 es H o -CH3; R10 es H o -CH3;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.
5. Un compuesto de fórmula I de acuerdo con la reivindicación 1, en el que:

30 R1 se selecciona de -CN y -OCF3; R2 es –Cl; R3 es –F; X es un grupo

R5

en la que

35 R4 es –CH3 o –CH(OH)CH3; R5 es H; o R4 y R5, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 átomos; Y es un grupo

R6 40 en la que

R6 es –CH3; R7 es H; o R6 y R7, junto con el carbono al que están unidos, forman un anillo hidrocarbonado saturado de 3 ó 4 átomos;

45 Z se selecciona de:

N

N

NN

N

N

,,y ;

R8 se selecciona de:

(A)

fenilo sustituido con un grupo seleccionado de: 5 (a) –OH; y

(b) –CH2OH;

(B)

piridin-3-ilo, sustituido en la posición 6 con –CH3 o –CH2OH; y

(C)

1H-pirazol-4-ilo, opcionalmente mono- o di-sustituido con –CH3;

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable. 10
6. Un compuesto, seleccionado de los compuestos en la siguiente Tabla 1:

Tabla 1 15 R3 R2

Cl

N

ON

N HN O

R1O

X

NHY Z R8

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

1

CN Cl F N NN

2

CN Cl F N OH

3

CN Cl F N N

4

OCF3 Cl F N N NN

5

CN Cl F N N NN

6

CN Cl F OH N N NN

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

7

OCF3 Cl F OH N N NN

8

OCF3 Cl F N NN

9

CN Cl H N N H N

10

CN Cl F N N N H N

11

CN Cl F N N H N

12

OCF3 Cl F N N H N

13

CN Cl F N NN

14

CN Cl F N NN

15

CN Cl F N N NN

16

CN Cl F N N N

17

OCF3 Cl F N N N NN

18

CN Cl F N N

19

CN Cl F N N N

20

OCF3 Cl F N N NH2

21

CN Cl F N NN

22

CN Cl H N ON

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

23

CN Cl F N S H2N O O

24

OCF3 Cl H N O NN

25

CN Cl F N N FF F

26

CF3 Cl H N NN

27

CN Cl F N N N

28

OCF3 Cl F N NN

29

CN Cl F N N N HO

30

CN Cl F OH N N

31

CN Cl F N N NN

32

CN Cl F N N HO

33

CN Cl F N N N H N

34

CN Cl F N N OH

35

CN Cl F N N NN

36

CN Cl F N N F

37

CN Cl F N N HO

38

CN Cl F N NN

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

39

OCF3 Cl F N N HO

40

OCF3 Cl F N N NN

41

OCF3 Cl F N N HO

42

OCF3 Cl F N N N H N

43

CN Cl F N N HO

44

CN Cl F N N N H N

45

CN Cl F OH N N N H N

46

OCF3 Cl F N N N H N

47

OCF3 Cl F OH N N N H N

48

OCF3 Cl F N N N N N H N

49

OCF3 Cl F N N HO

50

CN Cl F N N HO

51

CN CF3 H N NN

52

CN Cl H N OH O

53

CN Cl H N O

54

CN Cl H N N

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

55

CN Cl H N N F

56

CN Cl H N N O

57

CN Cl H N N

58

CN Cl H N N F

59

CN Cl H N O NH

60

CN Cl H N N H N

61

CN Cl H N N Cl

62

CN Cl H N N

63

CN Cl H N N F

64

CN Cl F N N H N

65

CN Cl F N N HO

6

CN Cl H N NH2 O

67

CN Cl H N O

68

CN Cl F N N

69

CN Cl F N N

70

CN Cl F N NH2 O

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

71

CN Cl H N N N

72

CN Cl F N O NH2

73

CN Cl F N N

74

CN Cl F N N N

75

Br Cl H N NN

76

Cl Cl H N NN

77

CN Cl F O N N NN

78

CN Cl F N N N HO

79

CN Cl H N NHN

80

CN Cl H N NN

81

CN Cl H N N N N

82

CN Cl H N N N

83

CN Cl H N N N

84

CN Cl H N N N

85

CN Cl F N N S Cl

86

OCF3 Cl F N NO

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

87

CN Cl F N HO

88

CN Cl F N NN

89

OCF3 Cl F N N HO

90

CN Cl F N N HO

91

CN Cl H N N S

92

CN Cl H N S N

93

CN Cl F N N H N

94

CN Cl F N N

95

CN Cl F N N S

96

CN Cl F N N HO

97

OCF3 Cl H N N NO

98

CN Cl H N N NO

99

OCF3 Cl F N N H N

100

CN Cl F N HO

101

CN Cl F N NN

102

CN Cl F N HO

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

103

OCF3 Cl H N HN O

104

OCF3 Cl F OH N NN

105

CN Cl F N HN O

106

CN Cl F N N HO

107

CN Cl F N NN

108

OCF3 Cl F N HN O

109

CN Cl F N N N HO

110

OCF3 Cl F N N N HO

111

CN Cl F N N NN

112

CN Cl F N N N

113

CN Cl F N N H N

114

CN Cl F N N O

115

CN Cl F N S NH2 O O

116

OCF3 Cl F N N HO

117

CN Cl F N N HO

118

OCF3 Cl F N N HO

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

119

CN Cl F OH N N HO

120

OCF3 Cl F OH N N HO

121

CN Cl F OH N NN

122

CN Cl F N NN

123

CN Cl F N NN

124

CN Cl H N N H N

125

OCF3 Cl F OH N N N HO

126

CN Cl H N N

127

CN Cl H N ON

128

CN Cl H N N

129

CN Cl H N N H N

130

CN Cl H N Cl

131

CN Cl H N H2N O

132

CN Cl H N S H2N O O

133

CN Cl H N NH S O O

134

CN Cl H N S O O

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

135

CN Cl H N OH

136

CN Cl H N HO

137

CN Cl H N N

138

CN Cl H N S NH2 O O

139

CN Cl H N HN O

140

CN Cl H N NH SO O

141

CN Cl H N S O O

142

CN Cl H N OH

143

CN Cl H N OH

144

CN Cl H N HN S O O

145

CN Cl F OH N N NN

146

CN Cl H N N N H

147

CN Cl H N N H

148

CN Cl H N

149

CN Cl H N NN

150

OCF3 Cl F N NN

Compuesto

R1 R2 R3 X y Z R8

151

CN Cl F OH N NN

152

CN Cl F OH N NN

153

OCF3 Cl F OH N NN

154

CN Cl F OH N NN

155

CN Cl F OH N NN

156

CN Cl F N NN

157

CN Cl F N N H N

158

CN Cl F N S O O

159

CN Cl F OH N N NN

160

CN Cl F N N HO

o una de sus sales farmacéuticamente aceptable.
7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 6, seleccionado de los compuestos 1, 2, 4-8, 10-16, 18, 20,

5 21, 23, 27, 28, 30-35, 37-47, 49-52, 54, 56, 58, 60-62, 64-66, 68-70, 72, 75, 78, 87-90, 93, 96, 100, 101, 103-106, 108-112, 115-121, 123, 125, 127, 129, 131-136, 138, 141-143, 145, 146 y 149-160, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.
8.

Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, o una sal 10 farmacéuticamente aceptable del mismo, y al menos un soporte o adyuvante farmacéuticamente aceptable.
9. Un compuesto según la reivindicación 1 para uso como medicamento.
10.

Un compuesto según la reivindicación 1 para uso como medicamento para el tratamiento de la inflamación 15 o de una afección inflamatoria.
11.

Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 para uso como medicamento para el tratamiento de síndrome de dificultad respiratoria aguda, choque, toxicidad por oxígeno, síndrome de lesión multiorgánica secundario a septicemia, síndrome de lesión multiorgánica secundario a traumatismo, lesión por reperfusión de 20 tejido debida a bypass cardiopulmonar, infarto de miocardio, glomerulonefritis aguda, vasculitis, artritis reactiva, dermatosis con componentes inflamatorios agudos, accidente cerebrovascular, lesión térmica, hemodiálisis, leucaféresis, enterocolitis necrotizante o síndrome asociado a la transfusión de granulocitos, psoriasis, rechazo de trasplante de órgano/tejido, reacción injerto contra hospedante, enfermedad autoinmunitaria, síndrome de Raynaud, tiroiditis autoinmunitaria, dermatitis, esclerosis múltiple, artritis reumatoidea, diabetes mellitus insulino-dependiente,

25 uveítis, enfermedad inflamatoria de los intestinos, enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa o lupus eritematoso sistémico o asma.