ES2470190T3

ES2470190T3 - Compuestos bic�clicos y sus usos como inhibidores duales de c-SRC/JAK

Info

Publication number: ES2470190T3
Application number: ES11709484.7T
Authority: ES
Inventors: Andr�S Mc Allister; Maximilien Murone; Saumitra Sengupta; Shankar Jayaram Shetty
Original assignee: Debiopharm International SA; Aurigene Discovery Technologies Ltd
Current assignee: Debiopharm International SA; Aurigene Oncology Ltd
Priority date: 2010-02-17
Filing date: 2011-02-17
Publication date: 2014-06-23
Anticipated expiration: 2031-02-17
Also published as: SMT201400090B; MX2012009482A; AR089641A1; DK2536722T3; TW201130838A; IL221487A; WO2011101806A1; KR20120130294A; HK1178897A1; HRP20140437T1; BR112012020639A2; CN102858770A; JP2013519725A; AU2011216895B2; PH12012501654A1; SA111320200B1; CU20120118A7; US8440679B2; PL2536722T3; EA201290757A1

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) que tiene la estructura:**Fórmula** donde R1 es H, arilo, arilo sustituido, alquilo, alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, heterociclilalquilo o heterociclilalquilo sustituido, X es CH2 o C>=O R2 es H, alquilo (C1-C6), halógeno, CF3 u O-alquilo (C1-C6) Y es -NHCO-, -CONH-, -NHSO2-, -NH-, -NCH3-CO-, -NHCH2-, O, -NHCONH- o -NHCOCH2- R3 es alquilo, alquilo sustituido, arilo o arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido o heterocicloalquilo en donde el término "alquilo" se refiere a grupos alifáticos saturados, incluyendo grupos alquilo de cadena lineal, grupos alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo (alicíclicos), grupos cicloalquilo sustituidos con alquilo y grupos alquilo sustituidos con cicloalquilo; el término "cicloalquilo" se refiere a un carbociclo saturado o parcialmente saturado, monocíclico o fusionado o espiro policíclico; el término "heterocicloalquilo" o "heterociclilo" se refiere a un sistema anular de 3 a 10 miembros no aromático, parcialmente no saturado o completamente saturado, que incluye anillos individuales de 3 a 8 átomos y sistemas anulares bi- o tri-cíclicos que pueden incluir anillos de arilo o heteroarilo aromáticos de seis miembros fusionados a un anillo no aromático; el término "sustituido" se refiere a la sustitución con uno o más o cualquier combinación de los siguientes sustituyentes: hidroxi, halógeno, carboxilo, ciano, nitro, oxo (>=O), tio (>=S), alquilo sustituido o no sustituido, haloalquilo sustituido o no sustituido, alcoxi sustituido o no sustituido, haloalcoxi sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, alquinilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquenilalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquenilo sustituido o no sustituido, amino sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, anillo de heterociclilalquilo sustituido o no sustituido, anillo de heteroarilalquilo sustituido o no sustituido, anillo heterocíclico sustituido o no sustituido, guanidina sustituida o no sustituida; o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

Description

Compuestos bic�clicos y sus usos como inhibidores duales de c-SRC/JAK

Campo de la invención

La presente invención se refiere a compuestos bic�clicos aromáticos sustituidos que contienen anillos de pirimidina y piridina, as� como también sus sales farmac�uticamente aceptables. Los compuestos de la presente invención son útiles como inhibidores de tirosina quinasa, preferiblemente inhibidores de las quinasas de la familia SRC (abreviadamente SFK, por la expresión inglesa SRC family kinases), en particular como inhibidores múltiples de las quinasas SFK/JAK e incluso preferiblemente como inhibidores duales de las quinasas c-SRC/JAK, inhibiendo por tanto la activación de STAT3 y por consiguiente el crecimiento anormal de tipos de células particulares. Notablemente, los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento o inhibición de ciertas enfermedades que son el resultado de la desregulaci�n de STAT3.

Antecedentes de la invención

La inflamación y el cáncer est�n vinculados tanto por vías oncog�nicas (intrínsecas) como ambientales (extrínsecas) (Yu et al., Nature Reviews Cancer 2009). La vía intrínseca se activa por alteraciones genéticas o epigen�ticas en células transformadas. Tales alteraciones incluyen las que causan la sobreexpresi�n o la activación persistente de receptores de factores de crecimiento con actividad de tirosina quinasa intrínseca y receptores de citoquina con tirosina quinasas de la familia Janus quinasa (JAK) asociadas. En las mutaciones oncog�nicas en miembros de la familia JAK asociados a receptores también subyacen algunos tipos de cáncer. Estos receptores, as� como también las tirosina quinasas no receptoras, tales como c-SRC, pueden ser activadas por vías extrínsecas -factores ambientales que est�n asociados con la inflamación por cáncer -que incluyen radiación ultravioleta (UV), carcinógenos químicos, infección, estr�s y humo de cigarrillos. Las tirosina quinasas activadas inducidas por vías tanto intrínsecas como extrínsecas fosforilan y activan el transductor de señales de factores de transcripción y el activador de la transcripción 3 (STAT3), que a su vez forma d�meros que se translocan al núcleo, donde directamente regulan la expresión de una batería de genes diana. Además de la sobre-regulaci�n de numerosos genes involucrados en la proliferaci�n, supervivencia, invasión y metástasis, STAT3 induce la expresión de muchas citoquinas, quimioquinas y otros mediadores, tales como interleuquina-6 y ciclooxigenasa 4 que est�n asociados con la inflamación promotora del cáncer. Lo que es más importante, los receptores para muchas de estas citoquinas, quimioquinas y mediadores es que a su vez activan además STAT3, formando as� bucles de realimentación autocrinos y paracrinos que dan como resultado un cambio estable en el programa genético y la promoción de la inflamación por cáncer.

Se sugiere que STAT3 tiene un papel crucial en la inducción y mantenimiento selectivos de un microambiente inflamatorio procarcinog�nico, tanto en la iniciación de la transformación maligna como durante la progresión del cáncer. La activación persistente de STAT3 media la propagación de la inflamación promotora de tumores y aumenta la proliferaci�n de las células tumorales, la supervivencia e invasión mientras suprime la inmunidad antitumoral. Por lo tanto, STAT3 es una diana molecular atractiva para el desarrollo de terapias novedosas contra el cáncer o para modular respuestas inmunitarias para mejorar terapias contra el cáncer.

Numerosos inhibidores constituidos por moléculas pequeñas, que bloquean eficazmente la vía de se�alizaci�n de STAT3, ya son conocidos en la técnica anterior (Deng et al., Current Cancer Drug Targets, 2007). Estos inhibidores, desde un punto de vista estructural, se dividen en cinco clases de compuestos. Estos incluyen: (1) productos naturales y derivados, tales como curcumina, resveratrol y otros, (2) tirfostinas, (3) complejos que contienen platino,

(4) peptidomim�ticos y (5) azaspiranos.

Asimismo, es también conocido por la técnica anterior que en lugar de inhibir directa y específicamente STAT3, es posible bloquear eficazmente la vía de se�alizaci�n de STAT3 inhibiendo las dianas aguas arriba. De hecho, como se ha mencionado anteriormente, el factor de transcripción de STAT3 es un efector aguas abajo de las quinasas JAK y c-SRC y se activa por fosforilaci�n de tirosina en la tirosina 705 (Y705) por estas quinasas, que es un requisito previo para la dimerizaci�n de STAT3 y la activación de la función del factor de transcripción de STAT3.

As�, c-SRC y JAK actúan aguas arriba del factor de transcripción STAT3 y su inhibición conducir� al bloqueo de la vía de se�alizaci�n de STAT3 en un subconjunto de tumores dependientes de STAT3. Se ha descrito (Johnson et al., Clin. Cancer Res, 2007 y WO 2008/077062, Board of Regents, The University of Texas System) que los inhibidores de c-SRC y JAK tienen efectos antitumorales sin�rgicos. De hecho, c-SRC puede ser inhibida en forma rápida y duradera, por ejemplo, por Dasatinib, mientras que STAT3 experimenta sólo inactivaciones transitorias. La adición de inhibidores de JAK, tales como piridona 6 o AG490, durante la incubaci�n con Dasatinib dio como resultado la inhibición sostenida de STAT3, si bien no se mostr� la activación de JAK por Dasatinib. La inhibición combinada de c-SRC y JAK dio como resultado una citotoxicidad sin�rgica causada por un aumento de la apoptosis. Por lo tanto, con el tratamiento combinado, puede obtenerse la inhibición duradera de varias vías, tales como la vía de se�alizaci�n de STAT3, que se sabe que es importante para la supervivencia y proliferaci�n de células cancerígenas.

La familia SRC de quinasas (SFK) est� compuesta por tirosina quinasas no receptoras con papeles clave en la regulaci�n de las vías de transducci�n de señales que controlan la proliferaci�n, movilidad, adhesión y supervivencia celulares. Las SFK y ciertos receptores de factores de crecimiento est�n sobre-expresados en varios c�nceres. Halpern M. S., England J. M., Kopen G. C., Christou A. A., Taylor R. L. Jr., Endogenous c-src as a Determinant of the Tumorigenicity of src Oncogenes, Proc Natl Acad Sc U S A. 1996 93(2): 824-827. Haura, E. B., Zheng, Z., Song, L., Cantor, A., Bepler, G., Activated Epidermal Growth Factor Receptor-Stat-3 Signaling Promotes Tumor Survival In Vivo in Non-Small Cell Lung Cancer, Clin. Cancer Res. 2005, 11(23): 8288-8294. La c-SRC juega un papel en las respuestas a la hipoxia regional, nutrientes limitados y efectos celulares internos para su autodestrucción. La expresión y/o actividad anómala de la c-SRC se observan en numerosos tumores sólidos y líquidos, y juegan papeles críticos en la afectación de la quimio-resistencia. Puede demostrarse que casi cualquier factor de crecimiento que conduzca a la activación de tirosina quinasas receptoras activa la c-SRC, convirtiendo la c-SRC en una diana muy atractiva para la terapia contra el cáncer. Dado que la activación y tal vez la sobre-expresión de c-SRC ha estado implicada en c�nceres, osteoporosis, ictus, infartos de miocardios y derrames vasculares, entre otros, un inhibidor constituido, por una molécula pequeña, de c-SRC puede ser beneficioso para el tratamiento de numerosos estados patológicos. Sin embargo, se ha demostrado que la inhibición de las SFK por el uso de un inhibidor de tirosina quinasa da como resultado citotoxicidad, detenimiento del ciclo celular y apoptosis en carcinomas escamosos de cabeza y cuello y en líneas celulares de cáncer de pulmón de células no pequeñas. Johnson, F. M., Saigal, B., Talpaz, M., and Donate, N. J., Dasatinib (BMS-354825) Tyrosine Kinase Inhibitor Suppresses Invasion and Induces Cell Cycle Arrest and Apoptosis of Head and Neck Squamous Cell Carcinoma and Non-small Cell Lung Cancer Cells, Clin Cancer Res, 11: 6924-6932, 2005. En carcinomas escamosos de cabeza y cuello y en líneas celulares de cáncer de pulmón de células no pequeñas, Dasatinib produce citotoxicidad, detenimiento del ciclo celular y apoptosis. Sin embargo, a pesar de la inhibición duradera de SFK y la inhibición inicial de STAT3, no se inhibe de forma duradera STAT3.

Las Janus quinasas (JAK) son quinasas celulares y consisten en cuatro miembros -JAK1, JAK2, JAK3 y TYK2. Las JAK pueden jugar un papel crucial en la regulaci�n del comportamiento celular inducido por un número de citoquinas y son componentes cruciales de diversas vías de transducci�n de señales que gobiernan la supervivencia, proliferaci�n, diferenciación y apoptosis celulares. La sobre-activación de las quinasas JAK ha estado implicada en tumorog�nesis. En 2005, se identificó una mutación recurrente en JAK2 (JAK2V6I7F) que condujo a una JAK2 constitutivamente activa en un gran número de pacientes con trastornos mieloproliferantes, que incluyen policitemia vera, trombocitemia esencial y mielofibrosis primaria.

Se han descrito numerosos inhibidores selectivos de las quinasas de la familia SRC, tales como SU6656, Dasatinib, WO 99/61444 (Warner-Lambert Company) proporcionando heterociclos bic�clicos que son útiles para tratar trastornos proliferantes celulares, tales como cáncer y restenosis, as� como angiog�nesis y ateroesclerosis o WO 2007/088014 (F. Hoffmann La Roche AG) e inhibidores selectivos de JAK, tales como piridona 6, AG490 o los descritos en WO 2009/054941 (Merck & Co., Inc), WO 2009/029998 (Cytopia Research PTY LTD) o WO/2008/157208 (Incyte Corporation). Las SFK también median vías de crecimiento de STAT en varios c�nceres. Xi, S., Zhang, Q., Dyer, K. F., Lerner, E. C, Smithgall, T. E., Gooding, W. E., Kamens, J., and Grandis, J. R., Src kinases Mediate STAT Growth Pathways in Squamous Cell Carcinoma of the Head and Neck, J Biol Chem, 278: 31574-31583, 2003. Por lo tanto, existe una necesidad importante de composiciones farmacéuticas y/o métodos de tratamiento para cáncer que inhibirán SFK y STAT.

El documento WO 2005/034869 describe inhibidores de tirosina quinasas para el tratamiento de cáncer que son derivados de 7-oxo-7,8-dihidro-pirido[2,3-d]pirimidina.

Sin embargo, existe una necesidad adicional de desarrollar un inhibidor de múltiples quinasas dianas. Un compuesto único que inhibe una combinación de varias dianas, tales como las SFK y las JAK, ofrece la ventaja de inhibir simultáneamente varias vías de transducci�n de señales clave, interfiriendo as� con numerosos procesos oncog�nicos, mientras facilita el tratamiento y mejora el confort de los pacientes. Por lo tanto, sería deseable generar moléculas pequeñas inhibidoras de quinasas capaces de inhibir simultáneamente las SFK (en particular c-SRC) y las JAK.

Por la combinación de una actividad inhibitoria dual, tales como las SFK (en particular c-SRC) y las JAK, en una sola molécula, la ventaja reside en: (i) reducir los riesgos relacionados con la toxicidad fuera de la diana encontrada cuando se administran dos inhibidores diferentes de quinasa dirigidos a las SFK (en particular c-SRC) y a las JAK;

(ii) reducir los costos de tratamiento; (iii) aumentar el cumplimiento por los pacientes; y (iv) bloquear simultáneamente vías paralelas de activación de la vía de STAT3 que conducir� a una mejor respuesta antitumoral. Además, dado que el estado de la activación de STAT3 puede monitorizarse a través de tipos tumorales, podría utilizarse un inhibidor de múltiples quinasas dianas SFK (en particular c-SRC) y JAK en varios tipos de enfermedades con base en el estado de STAT3 en tales tumores.

Por consiguiente, la presente invención pretende proporcionar compuestos que inhiban simultáneamente varias vías de transducci�n de señales claves especialmente dirigidas hacia el estado de activación de STAT3. Tales compuestos tiene la ventaja inesperada de presentar cualquiera de:

-: una inhibición para el bloqueo eficaz de STAT3 que sigue a la inhibición de c-Src y JAK2;

-: una inhibición de la fosforilaci�n de STAT3 por transferencia de Western en células, preferiblemente con una CI50 ≤ 500 nM;

-: en un modelo de xenoinjerto establecido por el uso de A431 y A549 (líneas celulares positivas a STAT3),

5 una inhibición del crecimiento (>60%) de tumores establecidos a una dosis inferior a la dosis máxima tolerada (MTD) con clara respuesta a la dosis (con la dosis más elevada próxima a MTD) y una inhibición de la fosforilaci�n de STAT3 en tumores.

Los compuestos de la invención representan compuestos que muestran un buen compromiso particular e inesperado entre estos 3 criterios.

10 Sumario de la invención

Este objetivo ha sido logrado por los Solicitantes, quienes sorprendentemente generaron nuevas moléculas pequeñas inhibidoras de las quinasas c-SRC, JAK-1, JAK-2.

La presente invención proporciona compuestos que afectan a la vía de STAT3. Los compuestos de la invención son útiles como composiciones farmacéuticas, por ejemplo cuando est� indicada la modulación de la vía de STAT3 para 15 el tratamiento de varias enfermedades humanas, tales como cáncer y/o enfermedades autoinmunitarias.

La presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I) que tiene la estructura:

R3 Y X N

N

NHN

R1

(I) donde

20 R1 es H, arilo, arilo sustituido, alquilo, alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, heterociclilalquilo o heterociclilalquilo sustituido, X es CH2 o C=O R2 es H, alquilo (C1-C6), halógeno, CF3 u O-alquilo (C1-C6) Y es -NHCO-, -CONH-, -NHSO2-, -NH-, -NCH3-CO-, -NHCH2-, O, –NHCONH-o –NHCOCH2

25 R3 es alquilo, alquilo sustituido, arilo o arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido o heterocicloalquilo

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables. Preferiblemente, la presente invención proporciona un compuesto de fórmula (II) que tiene la estructura:

R2 O

X

R3

N

H

HN

N

R1

30 (II) donde

R1 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), fenilo, fenilo sustituido, piridina o piridina sustituida, preferiblemente R1 es fenilo sustituido o piridina sustituida, X es CH2 o C=O

R2 es H, alquilo (C1-C6), halógeno u O-alquilo (C1-C6), preferiblemente R2 es H, CH3, Cl o F R3 es alquilo (C1-C6), cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, heterocicloalquilo, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido,

} CF3

} CF3 }

N N

;;;

H

y donde los sustituyentes se seleccionan del grupo que comprende alquilo de C1-C4 lineal o ramificado, alquilo de C1-C4 sustituido con halo o nitrilo, -O-alquilo (C1-C4), halógeno;

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables. Preferiblemente, R3 se selecciona del grupo que consiste en:

} CF3

} CF3 } N N

;;;H

y

fenilo sustituido, donde los sustituyentes se seleccionan del grupo que comprende Cl, F, Br y CH3.

La presente invención también abarca los compuestos de la invención para uso en terapia y para uso en un método para tratar enfermedades asociadas con la activación de la vía de STAT3, a través de la inhibición de múltiples c-SRC y JAK2 dianas.

Preferiblemente, las enfermedades asociadas con la activación de la vía de STAT3 son cáncer, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades óseas y enfermedades hematol�gicas.

Otro objeto de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica que comprenda los compuestos de la invención y al menos un excipiente, vehículo o diluyente farmac�uticamente aceptable.

Breve descripción de las figuras de los dibujos La Figura 1 muestra la actividad de inhibición de los compuestos de la invención en comparación con Taxol�. La Figura 2 muestra la actividad de inhibición de los compuestos de la invención en comparación con Taxol�. La Figura 3 muestra la inhibición del crecimiento tumoral de los compuestos de la invención en comparación con

Erlotinib. La Figura 4 muestra la inhibición de STAT fosforilada (pSTAT) en la Tirosina 705 en tumores de los compuestos de la invención.

Descripci�n detallada de la invención

A menos que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente memoria tienen el mismo significado comúnmente comprendido por los expertos en la técnica a la que pertenece el contenido de la presente invención. Como se usan en la presente memoria, las siguientes definiciones se ofrecen para facilitar la compresión de la presente invención. En caso de conflicto, primar� la presente memoria descriptiva, que incluye definiciones.

El término “comprende” se utiliza en general en el sentido de inclusión, es decir para significar que se permite la presencia de una o más características o componentes.

Como se usa en la parte descriptiva y en las reivindicaciones, la forma singular "un", "una" y "el/la" incluyen referencias plurales a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

El término "alquilo" se refiere a grupos alif�ticos saturados, incluyendo grupos alquilo de cadena lineal, grupos alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo (alic�clicos), grupos cicloalquilo sustituidos con alquilo y grupos alquilo sustituidos con cicloalquilo. En ciertas realizaciones, un alquilo de cadena lineal o ramificada tiene aproximadamente 30 o menos átomos de carbono en su cadena principal (por ejemplo, C1-C30 para cadena lineal, C3-C30 para cadena ramificada) y alternativamente, aproximadamente 20 o menos, por ejemplo, de 1 a 6 carbonos.

Asimismo, “cicloalquilo” se refiere a un carbociclo saturado o parcialmente saturado, monoc�clico o fusionado o

espiro polic�clico, que preferiblemente contiene de 3 a 10 carbonos por anillo, tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y similares, a menos que se especifique lo contrario. Incluye sistemas monoc�clicos, tales como ciclopropilo y ciclohexilo, sistemas bic�clicos, tal como decalina, y sistemas polic�clicos, tal como adamantano. El grupo puede ser un grupo terminal o un grupo de puente.

El término "alquilos sustituidos" se refiere a restos de alquilo que tienen sustituyentes que reemplazan un hidrógeno en uno o más carbonos de la cadena principal hidrocarbonada. Tales sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, un hidroxilo, un carbonilo (tal como un carboxilo, un alcoxicarbonilo, un formilo o un acilo), un tiocarbonilo (tal como un tio�ster, un tioacetato o un tioformiato), un alcoxilo, un fosforilo, un fosfonato, un fosfinato, un amino, un amido, una amidina, una imina, un ciano, un nitro, un azido, un sulfhidrilo, un alquiltio, un sulfato, un sulfonato, un sulfamoilo, un sulfonamido, un sulfonilo, un heterociclilo, un aralquilo o un resto aromático o heteroarom�tico. Los expertos en la técnica comprenderán que los restos sustituidos en la cadena hidrocarbonada pueden estar sustituidos en ellos mismos, si es apropiado. Por ejemplo, los sustituyentes de un alquilo sustituido pueden incluir formas sustituidas y no sustituidas de grupos amino, azido, imino, amido, fosforilo (incluyendo fosfonato y fosfinato), sulfonilo (incluyendo sulfato, sulfonamido, sulfamoilo y sulfonato) y sililo, as� como también �teres, alquiltios, carbonilos (incluyendo cetonas, aldeh�dos, carboxilatos y ésteres), -CN y similares. A continuación, se describen alquilos sustituidos ilustrativos. Los cicloalquilos pueden además estar sustituidos con alquilos, alquenilos, alcoxis, alquiltios, aminoalquilos, alquilos sustituidos con carbonilo, -CN y similares.

El término “heterocicloalquilo” o “heterociclilo” como se usa en la presente memoria, se refiere a un sistema anular de 3 a 10 miembros no aromático, parcialmente no saturado o completamente saturado, que incluye anillos individuales de 3 a 8 átomos y sistemas anulares bi- o tri-cíclicos que pueden incluir anillos de arilo o heteroarilo aromáticos de seis miembros fusionados a un anillo no aromático. Estos anillos heterocicloalquilo incluyen los que tienen de uno a tres hetero�tomos seleccionados independientemente de oxígeno, azufre y nitrógeno, en los cuales los hetero�tomos de nitrógeno y azufre pueden estar opcionalmente oxidados y el hetero�tomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado. El anillo heteroc�clico puede estar sustituido en una o más posiciones anulares con sustituyentes tales como alquilo, carbonilo, halógeno, alcoxi, hidroxialquilo y similares. Los heterociclos representativos incluyen, pero sin limitación, pirrolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, oxazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, tiazolidinilo, isotiazolidinilo y tetrahidrofurilo. El grupo puede ser un grupo terminal o un grupo de puente.

El término "hetero�tomo" se refiere a un átomo de cualquier elemento que no sea carbono o hidrógeno. Los hetero�tomos ilustrativos incluyen boro, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre y selenio.

El término "aralquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo arilo (por ejemplo, un grupo aromático o heteroarom�tico).

Los términos "alquenilo" y "alquinilo" se refieren a grupos alif�ticos no saturados análogos en longitud y sustitución posible a los alquilos descritos anteriormente, pero que contiene al menos un enlace doble o triple, respectivamente. El término "alquileno" se refiere a un radical orgánico formado a partir de un hidrocarburo alif�tico no saturado; "alquenileno" denota una cadena de carbono acíclica que incluye un enlace doble carbono-carbono.

El término "nitro" se refiere a -NO2.

El término "halógeno" representa cloro, fluoro, bromo o yodo.

El término "sulfhidrilo" se refiere a -SH.

El término "hidroxilo" significa -OH.

El término "sulfonilo" se refiere a -SO2.

Los términos "amina" y "amino" se refieren a aminas no sustituidas y sustituidas (-NH2). La amina sustituida puede estar sustituida en una o ambas posiciones de hidrógeno con, por ejemplo, un alquilo, un alquenilo, un arilo, un cicloalquilo, un cicloalquenilo o un heterociclo. As�, el término “alquilamina” incluye un grupo amino, de acuerdo con lo definido anteriormente, que tiene un alquilo sustituido o no sustituido unido al mismo.

El término "amido" se refiere a un carbonilo sustituido con amino (-CONH2-), donde el resto de amina puede estar sustituido en una o ambas posiciones de hidrógeno con, por ejemplo, un alquilo, un hidroxialquilo, un alquenilo, un arilo, un cicloalquilo, un cicloalquenilo, un heterocicloalquilalquilo o un heterociclo.

El término "acilamino" puede estar representado por la fórmula general:

O

N

H

donde una o ambas posiciones de hidrógeno pueden estar sustituidas con, por ejemplo, un alquilo, un alquenilo, un arilo, un cicloalquilo, un cicloalquenilo o un heterociclo.

El término "alquiltio" se refiere a un grupo alquilo, como se ha definido anteriormente, que tiene un radical de azufre unido al mismo. En ciertas realizaciones, el resto de "alquiltio" se representa por uno de -S-alquilo, -S-alquenilo o -Salquinilo. Los grupos alquiltio ilustrativos incluyen metiltio, etiltio y similares.

El término "carbonilo" se refiere a la fórmula general:

O

H

donde el átomo de hidrógeno puede estar sustituido con, por ejemplo, un alquilo, un alquenilo, un arilo, un cicloalquilo, un cicloalquenilo o un heterociclo.

El término "arilo" como se usa en la presente memoria se refiere a un sistema anular aromático mono-, bi- u otra forma multi-carboc�clica. El anillo aromático puede estar sustituido en una o más posiciones anulares con sustituyentes tales como los descritos anteriormente, por ejemplo, halógeno, azida, alquilo, aralquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, alcoxilo, amino, nitro, sulfhidrilo, imino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo, carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, alquilsulfonilo, sulfonamido, cicloalquil-sulfonamido, cetona, aldeh�do, éster, heterociclilo, heterociclil-carbonilo, heterociclil-alcoxi, heterocicloalquilalquilo, restos aromáticos o heteroarom�ticos, -CF3, -CN o similares. El término "arilo" también incluye sistemas anulares polic�clicos que tienen dos o más anillos

c�clicos en los cuales dos o más carbonos son comunes a dos anillos adyacentes (los anillos son “anillos

fusionados") donde al menos uno de los anillos es aromático, por ejemplo, los otros anillos cíclicos pueden ser cicloalquilos, heterocicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos y/o arilos. Los grupos arilo ilustrativos incluyen, pero sin limitación, fenilo, tolilo, antracenilo, fluorenilo, indenilo, azulenilo y naftilo, as� como también restos carboc�clicos o heteroc�clicos benzofusionados, tales como 5,6,7,8-tetrahidronaftilo, benzo[1,3]dioxolilo, benzo[1,4]dioxinilo.

El término "heteroarilo" se refiere a un sistema anular aromático de 5-15 miembros mono-, bi- u otra forma multic�clica, que contiene uno o más hetero�tomos, por ejemplo uno a cuatro hetero�tomos, tales como nitrógeno, oxígeno y azufre. Los heteroarilos también pueden fusionarse a anillos no aromáticos. El anillo heteroarilo puede estar sustituido en una o más posiciones con sustituyentes tales como los descritos anteriormente, como por ejemplo, halógeno, alquilo, aralquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, hidroxilo, amino, nitro, sulfhidrilo, imino, amido, fosfonato, fosfinato, carbonilo, carboxilo, sililo, éter, alquiltio, sulfonilo, cetona, aldeh�do, éster, un heterociclilo, un resto aromático o heteroarom�tico, -CF3, -CN o similares. Los ejemplos ilustrativos de grupos heteroarilo incluyen, pero sin limitación, acridinilo, bencimidazolilo, benzofurilo, benzotiazolilo, benzotienilo, benzoxazolilo, carbazolilo, carbolinilo, cinolinilo, furazanilo, furilo, imidazolilo, indazolilo, indolizinilo, indolilo, isobenzofurilo, isoindolilo, isoquinolinilo, isotiazolilo, isoxazolilo, naftiridinilo, oxadiazolilo, oxazolilo, fenantridinilo, fenantrolinilo, fenarsazinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, pirazinilo, pirazolilo, pirazilo, piridazinilo, piridinilo, pirimidililo, pirimidilo, pirrolilo, quinolinilo, quinolizinilo, quinoxalinilo, quinoxaloilo, quinazolinilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, tiantrenilo, tiazolilo, tienilo, tiofenilo, triazinilo, (1,2,3)-y (1,2,4)-triazolilo y similares. Los grupos heteroarilo representativos incluyen, pero sin limitación, un anillo aromático monoc�clico, donde el anillo comprende 2 a 5 átomos de carbono y 1 a 3 hetero�tomos.

El término "carbociclo" es reconocido en la técnica y se refiere a un anillo aromático o no aromático donde cada átomo del anillo es carbono.

El término "cicloalquilalquilo" se refiere a un radical que contiene un anillo cíclico que tiene de 3 a aproximadamente 8 átomos de carbono directamente unidos a un grupo alquilo. El grupo cicloalquilalquilo puede estar unido a la estructura principal en cualquier átomo de carbono en el grupo alquilo que de cómo resultado la creación de una estructura estable. Los ejemplos no limitativos de tales grupos incluyen ciclopropilmetilo, ciclobutiletilo y ciclopentiletilo.

El término "alcoxi" se refiere a un radical hidrocarbonado alif�tico saturado de cadena lineal o ramificada unido a un átomo de oxígeno que est� unido a una estructura nuclear. Los ejemplos de grupos alcoxi incluyen, pero sin limitación, metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, terc-butoxi, pentoxi, 3-metil-butoxi y similares.

El término "haloalquilo" y "haloalcoxi" significa alquilo o alcoxi, según el caso, sustituido con uno o más átomos de halógeno, donde los grupos alquilo o alcoxi son como los definidos anteriormente. El término "halo" se utiliza en la presente memoria en forma intercambiable con el término "halógeno" para significar F, Cl, Br o I. Los ejemplos de "haloalquilo" incluyen, pero sin limitación, trifluorometilo, difluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, pentafluoroetilo, pentacloroetilo, 4,4,4-trifluorobutilo, 4,4-difluorociclohexilo, clorometilo, diclorometilo, triclorometilo, 1-bromoetilo y similares. Los ejemplos de "haloalcoxi" incluyen, pero sin limitación, fluorometoxi, difluorometoxi, trifluorometoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi, pentafluoroetoxi, pentacloroetoxi, clorometoxi, diclorometoxi, triclorometoxi, 1-bromoetoxi y similares.

El término "heterociclilcarbonilo" o “heterociclilalcoxi” significa carbonilo o alcoxi, según el caso, unido a un grupo

heterociclilo, donde los grupos alcoxi y heterociclilo son como los definidos anteriormente.

El término "heterociclilalquilo" o “heterocicloalquilalquilo” se refiere a un radical anular heteroc�clico directamente unido a un grupo alquilo. El radical heterociclilo o heterocicloalquilo definido anteriormente puede estar unido a la estructura principal en cualquier átomo de carbono en el grupo alquilo que de cómo resultado la creación de una estructura estable.

A menos que se especifique lo contrario, el término "sustituido" como se usa en la presente memoria se refiere a la sustitución con uno o más o cualquier combinación de los siguientes sustituyentes: hidroxi, halógeno, carboxilo, ciano, nitro, oxo (=O), tio (=S), alquilo sustituido o no sustituido, haloalquilo sustituido o no sustituido, alcoxi sustituido o no sustituido, haloalcoxi sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, alquinilo sustituido

o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquenilalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquenilo sustituido o no sustituido, amino sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, anillo de heterociclilalquilo sustituido o no sustituido, anillo de heteroarilalquilo sustituido o no sustituido, anillo heteroc�clico sustituido o no sustituido, guanidina sustituida o no sustituida.

Los términos orto, meta y para se refieren a bencenos 1,2-, 1,3- y 1,4-disustituidos, respectivamente. Por ejemplo, los nombres 1,2-dimetilbenceno y orto-dimetilbenceno son sinónimos.

R1

(I)

donde

R1 es H, arilo, arilo sustituido, alquilo, alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, heterociclilalquilo o heterociclilalquilo sustituido,

X es CH2 o C=O

R2 es H, alquilo (C1-C6), halógeno, CF3 u O-alquilo (C1-C6)

Y es -NHCO-, -CONH-, -NHSO2-, -NH-, -NCH3-CO-, -NHCH2-, O, -NHCONH-o -NHCOCH2-

R3 es alquilo, alquilo sustituido, arilo o arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido o heterocicloalquilo

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.

Preferiblemente, Y es -NHCO-.

De acuerdo con una realización particular, la invención proporciona un compuesto de fórmula (II) que tiene la estructura:

R2 O

X N

R3 H

N

HN

N

R1

(II) donde R1 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), fenilo, fenilo sustituido, piridina o piridina sustituida,

5 X es CH2 o C=O R2 es H, alquilo (C1-C6), halógeno u O-alquilo (C1-C6), R3 es alquilo (C1-C6), cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, heterocicloalquilo, arilo, arilo sustituido, heteroarilo,

heteroarilo sustituido,

} CF3

} CF3 }

N N

;

;H ;

10 y donde los sustituyentes se seleccionan del grupo que comprende alquilo de C1-C4 lineal o ramificado, alquilo de C1-C4 sustituido con halo o nitrilo, -O-alquilo (C1-C4), halógeno;

Preferiblemente, R2 es H, CH2, Cl o F. Más preferiblemente, R3 se selecciona del grupo que consiste en:

} CF3

} CF3 }

N

;

H

y fenilo sustituido, donde los sustituyentes se seleccionan del grupo que comprende Cl, F, Br, CF3 y CH3. Más preferiblemente, R1 se selecciona del grupo que consiste en:

N

O

S

N

O

O NH HN

O

N

;; ;

;

Incluso más preferiblemente, R3 se selecciona del grupo que consiste en:

Preferiblemente, la presente invención comprende un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:

10 N-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-carbonil)-fenilamino]-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometil-benzamida

N-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometil-benzamida

Ciclopropilamida del ácido 5-{6-[2-metil-5-(3-trifluorometil-benzoilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,315 d]pirimidin-2-ilamino}-piridina-2-carbox�lico

N-{3-[2-(4-Ciclopropilsulfamoil-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-4-metil-fenil}-3trifluorometil-benzamida

N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometil-benzamida

{4-Cloro-3-[2-(4-metilcarbamoil-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-fenil}-amida del ácido 4trifluorometil-piridina-2-carbox�lico

4,4,4-Trifluoro-3-metil-N-[4-metil-3-(2-{4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-etoxi]-fenilamino}-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3

d]pirimidin-6-il)-fenil]-butiramida

1-Ciclopentil-3-(4-metil-3-{2-[4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-fenilamino]-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}

fenil)-urea

N-(4-Metil-3-{5-oxo-2-[4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-fenilamino]-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3

trifluorometil-benzamida

N-{4-Cloro-3-[2-(4-(ciclopropilcarbamoilmetoxi)fenilamino)-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]

fenil}-3-trifluorometil-benzamida

N-(4-Cloro-3-{2-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}

fenil)-3-trifluorometil-benzamida

3-Bromo-N-(4-metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}

fenil)-benzamida

N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}

fenil)-3-trifluorometil-benzamida

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.

De acuerdo con otra realización particular, la presente invención proporciona un compuesto seleccionado del grupo que consiste en:

N-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3

trifluorometil-benzamida

5-{6-[2-Metil-5-(3-trifluorometil-benzoilamino)-fenil]-ciclopropilamida del ácido 5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-ilamino}-piridina-2-carbox�lico

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.

fenil)-3-trifluorometil-benzamida

N-{4-Cloro-3-[2-(4-(ciclopropilcarbamoilmetoxi)fenilamino)-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]fenil}-3-trifluorometil-benzamida

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.

Los ejemplos adicionales de los compuestos abarcados por la presente invención incluyen los compuestos de la Tabla 1. La última columna representa el número de ejemplo (Ej) utilizado para la preparación de cada compuesto que aparece en la siguiente tabla.

Tabla 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

1: N NH2N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,158,0 (m, 3H), 7,9-7,76 (m, 2H), 7,667,55 (m, 2H), 7,22-7,12 (m, 2H), 4,95 (s, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,3-3,2 (m, 2H), 2,96-2,85 (m, 2H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 428,0 (M+1) N-[3-(2-Amino-7,8dihidro-5H-pirido[4,3-d] pirimidin-6-il)-4-metilfenil]-3-trifluorometilbenzamida
1

6: N NH2N N O N H O F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,5 (s, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,32-8,29 (s ancho, 1H), 8,29-8,23 (d, 1H), 8,07,95 (m, 1H), 7,8 (t, 1H), 7,7-7,62 (m, 2H), 7,46-7,36 (s ancho, 2H), 7,347,27 (m, 1H), 4,0-3,88 (m, 1H), 3,763,66 (m, 1H), 3,18-3,04 (m, 1H), 2,782,86 (m, 1H), 2,16 (s, 3H) EM: m/z 442,2 (M+1) N-[3-(2-Amino-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il)-4-metil-fenil]-3trifluorometilbenzamida 3

7: N NHN O N N O N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,4-9,1 (s ancho, 1H), 8,95-8,85 (m, 2H), 8,28,0 (m, 2H), 7,8-7,7 (m, 1H), 7,7-7,5 (m, 5H), 7,2-7,1 (d, 1H), 6,9-6,8 (d, 2H), 4,4-4,3 (t, 2H), 4,05-3,7 (m, 4H), 3,5 (t, 2H), 3,2-3,1 (m, 2H), 3,05-2,9 (m, 2H), 2,2-2,0 (m, 4H), 1,95 (s, 3H) EM: m/z 631,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{5-oxo-2[4-(2-pirrolidin-1-iletoxi)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

8: N NH2N N O N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,74 (s, 1H), 8,29-8,18 (m, 2H), 7,94-7,87 (m, 1H), 7,83 (t, 1H), 7,78-7,7 (m, 1H), 7,68-7,62 (m, 1H), 7,44 (t, 1H), 7,23-6,96 (m, 1H), 4,05 (t, 2H), 3,1 (t, 2H) EM: m/z 428,1 (M+1) N-[3-(2-Amino-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il)-fenil]-3-trifluorometilbenzamida 3

N: N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 12,512,2 (s ancho, 1H), 11,9 (s, 1H), 8,168,12 (s ancho, 1H), 8,1-8,04 (m, 1H), 8,0-7,96 (s ancho, 1H), 7,86-7,8 (m, 1H), 7,76-7,72 (s ancho, 1H), 7,7-7,58 N-(4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3 2

9: NHN O N (m, 2H), 7,24-7,22 (s ancho, 1H), 7,16-7,1 (m, 1H), 6,9-6,86 (m, 2H), 4,4-4,3 (t, 2H), 4,1 (s, 2H), 4,0-3,7 (m, 2H), 3,55 (t, 2H), 3,3 (t, 2H), 3,2 (t, 2H), 3,1-2,9 (m, 2H), 2,3 (s, 3H), 2,22,1 (m, 4H) EM: m/z 617,2 (M+1) trifluorometilbenzamida

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

14: N N N N H O HN Cl F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,22 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 7,84-7,78 (m, 1H), 7,75-7,7 (s ancho, 1H), 7,68-7,6 (m, 3H), 7,34-7,27 (m, 2H), 7,24-7,19 (m, 1H), 7,15-7,08 (m, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,35-3,26 (m, 2H), 3,18-3,09 (m, 2H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 538,1 (M+1) N-{3-[2-(4-Clorofenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilfenil}-3-trifluorometilbenzamida 1

15: N N N N H O HN N F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,18,9 (m, 1H), 8,35-8,14 (m, 5H), 7,767,66 (m, 4H), 7,56 (t, 1H), 7,46-7,37 (m, 1H), 7,32-7,26 (m, 1H), 7,16-7,04 (m, 1H), 4,02 (s, 2H), 3,3-3,2 (m, 2H), 3,05-2,96 (m, 2H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 505,0 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(piridin4-ilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

16: N N N N H O H2N F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,34 (s, 1H), 8,32-8,22 (m, 2H), 8,11 (s, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,8 (t, 1H), 7,57,4 (s ancho, 1H), 7,3-7,15 (m, 2H), 6,85-6,76 (m, 1H), 6,41 (s, 2H), 4,21 (s, 2H), 3,58 (t, 2H), 2,75 (t, 2H) EM: m/z 414,1 (M+1) N-[3-(2-Amino-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3trifluorometilbenzamida 1

17: N N N N H O HN NO N F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,4 (s, 1H), 9,8 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,32-8,24 (m, 2H), 8,0-7,76 (m, 1H), 7,9-7,74 (m, 3H), 7,66-7,62 (m, 1H), 7,52-7,44 (m, 1H), 7,38-7,3 (m, 2H), 7,24-7,18 (m, 1H), 4,05 (s, 2H), 3,63,49 (m, 2H), 3,3-3,1 (m, 2H), 3,0-2,9 (m, 2H), 2,75-2,7 (m, 2H), 2,6-2,55 (m, 2H), 2,45-2,4 (m, 2H), 2,3 (s, 3H), 1,9 (s, 3H) EM: m/z 630,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazina-1carbonil)-fenilamino]-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 2

18: N N N N H O HN HN O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,38,16 (m, 3H), 7,94-7,86 (m, 1H), 7,647,78 (m, 2H), 7,48-7,2 (m, 4H), 6,846,92 (m, 1H), 4,1 (s, 2H), 3,4-3,3 (m, 2H), 3,1-2,9 (m, 4H), 2,6 (t, 2H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 573,1 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(2-oxo1,2,3,4-tetrahidroquinolin-6-ilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

19: N N N N H O HN F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 10,37 (s, 1H), 8,32-8,24 (m, 2H), 8,14 (s, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,8 (t, 1H), 7,487,42 (m, 1H), 7,3-7,18 (m, 2H), 6,96 (t, 1H), 6,84-6,78 (m, 1H), 4,22 (s, 2H), 3,58 (t, 2H), 3,2 (q, 2H), 2,76 (t, 2H), 1,5 (q, 2H), 0,87 (t, 3H) EM: m/z 456,1 (M+1) N-[3-(2-Propilamino-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il)-fenil]-3-trifluorometilbenzamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

20: N NHN N N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,62 (d, 2H), 8,42 (s, 1H), 8,19-8,04 (m, 3H), 7,9-7,8 (m, 2H), 7,7-7,6 (m, 2H), 7,267,14 (m, 2H), 6,92 (t, 1H), 4,14 (s, 2H), 3,38-3,28 (t, 2H), 3,14-3,04 (m, 2H), 2,34 (s, 3H) EM: m/z 506,1 (M+1) N-{4-Metil-3-[2(pirimidin-2-ilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il]-fenil}-3-trifluorometilbenzamida 2

21: N NHN N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,77 (s, 1H), 8,42 (d, 1H), 8,3-8,24 (m, 1H), 8,22 (s, 2H), 8,12 (d, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,82-7,58 (m, 4H), 7,25-7,16 (m, 2H), 6,94-6,86 (m, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,32-3,26 (t, 2H), 3,8-3,0 (t, 2H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 505,0 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(piridin2-ilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

22: N NHN N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,25 (s, 1H), 8,2 (d, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,917,86 (m,1H), 7,76-7,68 (m, 1H), 7,67,55 (m, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,24-7,18 (m, 1H), 5,5 (s, 1H), 3,97 (s, 2H), 3,36-3,32 (m, 2H), 3,28-3,24 (m, 2H), 2,9 (t, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,62 (q, 2H), 1,0-0,98 (m, 3H) EM: m/z 470,1 (M+1) N-[4-Metil-3-(2propilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3trifluorometilbenzamida 1

23: N NHN N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,88,76 (m, 1H), 8,3-8,04 (m, 6H), 7,847,78 (m, 1H), 7,68-7,6 (m, 2H), 7,327,28 (m, 1H), 7,24-7,16 (m, 2H), 4,06 (s, 2H), 3,3 (t, 2H), 3,04 (t, 2H), 2,33 (s, 3H) EM: m/z 504,7 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(piridin3-ilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

25: N NHN N Cl N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,25 (s, 1H), 8,21-8,12 (m, 3H), 8,08 (d, 1H), 7,98-7,89 (m, 2H), 7,82 (d, 1H), 7,72-7,6 (m, 2H), 7,44 (dd, 1H), 7,257,2 (m, 1H), 7,16-7,1 (m, 1H), 4,1 (s, 2H), 3,32 (t, 2H), 3,08 (t, 2H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 539,1 (M+1) N-{3-[2-(2-Cloro-piridin4-ilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilfenil}-3-trifluorometilbenzamida 2

26: N NHN N N O N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 9,14 (s, 1H), 8,6-8,5 (m, 2H), 8,48-8,39 (m, 2H), 8,3-8,16 (m, 2H), 7,94-7,83 (m, 2H), 7,78-7,7 (t, 1H), 7,6-7,52 (m, 1H), 7,42-7,34 (m, 1H), 4,3-4,1 (m, 1H), 4,08-3,9 (m, 1H), 3,58-3,36 (m, 2H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 518,6 (M+1) N-{4-Metil-3-[5-oxo-2(piridin-4-ilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 4

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

27: N NHN N N N H O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,828,74 (s ancho, 2H), 8,54 (d, 2H), 8,32 (s, 1H), 8,2-8,1 (m, 2H), 7,85-7,8 (m, 1H), 7,2-7,1 (m, 1H), 6,9-6,8 (m, 1H), 4,1 (s, 2H), 3,3 (t, 2H), 3,1 (t, 2H), 2,3 (s, 3H), 2,25-2,15 (m, 1H), 2,0-1,9 (m, 2H), 1,9-1,8 (m, 2H), 1,75-1,65 (m, 1H), 1,6-1,49 (m, 2H), 1,44-1,3 (m, 2H) EM: m/z 442,9 (M+1) {4-Metil-3-[2-(piridin-4ilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il]-fenil}-amida del ácido ciclohexanocarbox�lico 2

29: N NHN N O N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,38 (d, 1H), 8,25 (s, 2H), 8,08 (d, 1H), 7,94 (dd, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,7-7,6 (m, 2H), 7,26-7,1 (m, 3H), 6,76 (d, 1H), 4,05 (s, 2H), 3,93 (s, 3H), 3,28 (t, 2H), 3,02 (t, 2H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 535,2 (M+1) N-{3-[2-(6-Metoxipiridin-3-ilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilfenil}-3-trifluorometilbenzamida 2

30: N NHN N N N H O Cl RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,49 (s, 1H), 8,45-8,4 (m, 2H), 8,4-8,2 (s ancho, 2H), 7,78-7,82 (m, 2H), 7,697,46 (m, 3H), 7,33-7,19 (m, 2H), 4,16 (s, 2H), 3,4-3,32 (m, 2H), 3,18-3,08 (m, 2H), 2,33 (s, 3H) EM: m/z 471,0 (M+1) 3-Cloro-N-{4-metil-3-[2(piridin-4-ilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}benzamida 2

31: N NHN O O F F N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,28,12 (m, 2H), 8,06 (s, 1H), 7,88-7,78 (m, 3H), 7,7-7,6 (m, 2H), 7,26-7,1 (m, 3H), 7,03-6,96 (m, 2H), 4,06 (s, 2 H), 3,3 (t, 2H), 3,02 (t, 2H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 584,1 (M+1) N-{3-[2-(2,2-Difluorobenzo[1,3]dioxol-5ilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il]-4-metil-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

32: N NHN N N N H O F F FF RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,5 (s, 1H), 8,47-8,25 (m, 4H), 7,94-7,86 (m, 1H), 7,72-7,6 (m, 3H), 7,3-7,2 (m, 2H), 4,17 (s, 2H), 3,36 (t, 2H), 3,14 (t, 2H), 2,35 (s, 3H) EM: m/z 523,1 (M+1) 2-Fluoro-N-{4-metil-3[2-(piridin-4-ilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il]-fenil}-4-trifluorometilbenzamida 2

34: N NHN N N N H O CH3 RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,538,19 (m, 5H), 7,8-7,6 (m, 3H), 7,457,15 (m, 4H), 4,15 (s, 2H), 3,42-3,32 (m, 2H), 3,18-3,1 (m, 2H), 2,44 (s, 3H), 2,34 (s, 3H) EM: m/z 451,0 (M+1) 3-Metil-N-{4-metil-3-[2(piridin-4-ilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}benzamida 2

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

36: N NHN N N N H O F FF RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,488,42 (m, 2H), 8,25 (s, 1H), 8,04-7,92 (m, 3H), 7,81-7,62 (m, 6H), 7,25-7,2 (m, 1H), 7,15-7,08 (m, 1H), 4,1 (s, 2H), 3,32 (t, 2H), 3,08 (t, 2H), 2,33 (s, 3H) EM: m/z 505,1 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(piridin4-ilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-4trifluorometilbenzamida 2

37: N NHN N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,55 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 8,1 (d, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,76 (d, 1H), 7,64-7,52 (m, 2H), 7,26-7,12 (m, 2H), 6,66-6,58 (m, 1H), 3,75 (s, 2H), 3,3-3,4 (m, 2H), 3,22-3,08 (m, 5H), 2,86 (t, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,13-1,98 (m, 9H) EM: m/z 539,2 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(3pirrolidin-1-ilpropilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 1

38: N NHN N N N N H O O RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,16 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,7-7,38 (m, 7H), 7,2-7,1 (m, 2H), 6,95 (d, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,4-3,1 (m, 8H), 2,96-2,86 (m, 2H), 2,8 (s, 3H), 2,24 (s, 3H) EM: m/z 564,2 (M+1) 3-Metoxi-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 1

39: N NHN N N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 11,76 (s, 1H), 8,3-8,18 (s ancho, 1H), 8,168,04 (m, 3H), 7,82 (d, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,7-7,56 (m, 3H), 7,24-7,18 (m, 1H), 7,16-7,02 (m, 1H), 6,94 (d, 2H), 4,07 (s, 2H), 3,76-3,56 (m, 4H), 3,43,02 (m, 8H), 2,92 (s, 3H), 2,29 (s, 3H) EM: m/z 602,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 1

40: N NHN O O N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,288,16 (m, 3H), 7,92-7,86 (m, 1H), 7,787,7 (m, 1H), 7,61 (d, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,28-7,2 (m, 2H), 6,96 (dd, 1H), 6,81-6,76 (m, 1H), 4,3-4,2 (m, 4H), 4,05 (s, 2H), 3,3-3,26 (m, 2H), 3,052,96 (m, 2H), 2,35 (s, 3H) EM: m/z 562,2 (M+1) N-{3-[2-(2,3-Dihidrobenzo[1,4]dioxin-6ilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il]-4-metil-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

41: N NHN N N N H O N F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 9,08,92 (m, 2H), 8,53 (s, 1H), 8,46 (d, 2H), 8,4-8,3 (s ancho, 2H), 7,85 (d, 1H), 7,66 (s, 1H), 7,28-7,22 (m, 2H), 4,18 (s, 2H), 3,39-3,37 (m, 2H), 3,23,1 (m, 2H), 2,35 (s, 3H) EM: m/z 506,1 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(piridin4-ilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-4trifluorometilnicotinamida 2

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

42: N NHN N N N H O S Cl RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,45 (d, 2H), 8,25 (s, 1H), 7,72-7,56 (m, 4H), 7,4 (d, 1H), 7,32-7,28 (m, 1H), 7,22-7,18 (m, 1H), 7,06-7,0 (m, 1H), 6,97 (d, 1H), 4,08 (s, 2H), 3,3 (t, 2H), 3,07 (t, 2H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 477,0 (M+1) {4-Metil-3-[2-(piridin-4ilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]-pirimidin-6il]-fenil}-amida del ácido 5-cloro-tiofeno-2carbox�lico 2

43: N NHN N N F N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,38,16 (m, 3H), 7,93-7,86 (m, 1H), 7,827,7 (m, 2H), 7,68-7,62 (m, 1H), 7,387,2 (m, 3H), 7,05 (m, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,67-3,48 (m, 4H), 3,2-2,9 (m, 8H), 2,34 (s, 3H) EM: m/z 620,2 (M+1) N-(3-{2-[3-Fluoro-4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-4-metilfenil)-3-trifluorometilbenzamida 1

44: N NHN N N N N H O N N RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,15 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,9 (d, 2H), 7,68-7,55 (m, 3H), 7,5-7,4 (m, 3H), 7,15 (d, 1H), 6,88 (d, 2H), 3,95 (s, 2H), 3,52 (s, 3H), 3,223,16 (m, 4H), 2,92-2,86 (s, 2H), 2,452,32 (m, 9H), 2,26-2,20 (m, 6H), 2,14 (s, 3H), 1,86 (s, 10H) EM: m/z 646,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-4(4-metil-piperazin-1ilmetil)-benzamida 1

45: N NHN N N N N H OO F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,84 (s, 1H), 8,3-8,14 (m, 2H), 7,9 (d, 1H), 7,83-7,61 (m, 4H), 7,61-7,52 (dd, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,04 (d, 2H), 4,18-3,98 (m, 2H), 3,95-3,25 (m, 3H), 3,7-3,55 (m, 2H), 3,28-3,01 (m, 5H), 2,98 (s, 3H), 2,28 (s, 3H) EM: m/z 616,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

46: N NHN N N F N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,18 (s, 1H), 7,8-7,59 (m, 4H), 7,45-7,32 (m, 2H), 7,25-6,9 (m, 5H), 4,08 (s, 2H), 3,35-3,0 (m, 8H), 2,9-2,72 (s ancho, 4H), 2,6 (s, 3H), 2,5 (s, 3H), 2,34 (s, 3H) EM: m/z 634,2 (M+1) N-(3-{2-[3-Fluoro-4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-4-metilfenil)-2-metil-3trifluorometilbenzamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

47: N NHN N N F N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,15 (d, 2H), 7,95 (d, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,7-7,6 (m, 2H), 7,45 (d, 1H), 7,25-7,1 (m, 3H), 7,03-6,9 (m, 2H), 4,06 (s, 2H), 3,5 (s, 1H), 3,3 (t, 2H), 3,35-3,25 (m, 6H), 2,7-2,56 (m, 7H), 2,38 (s, 3H), 2,33 (s, 3H) EM: m/z 633,9 (M+1) N-(3-{2-[3-Fluoro-4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-4-metilfenil)-4-metil-3trifluorometilbenzamida 1

48: N NHN N N F N N H OO F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,6 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 9,9-9,7 (s ancho, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,3-8,2 (m, 1H), 8,04-7,14 (m, 5H), 7,52-7,4 (m, 2H), 7,2-7,06 (m, 2H), 4,04 (t, 2H), 3,58-3,45 (m, 4H), 3,28-3,12 (m, 4H), 3,05-2,96 (m, 2H), 2,88 (s, 3H) EM: m/z 620,1 (M+1) N-(3-{2-[3-Fluoro-4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

49: N HN N N N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,368,2 (m, 3H), 7,98-7,66 (m, 5H), 7,457,35 (m, 2H), 7,28-7,12 (m, 2H), 4,12 (s, 4H), 3,54-3,46 (m, 4H), 3,41-3,36 (m, 5H), 3,31-3,21 (m, 4H), 3,1-3,02 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H) EM: m/z 616,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[3-(4metil-piperazin-1ilmetil)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 1

50: N NHN N N F N N H OCl O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,9 (s, 1H), 8,3-8,2 (m, 2H), 8,0-7,9 (m, 2H), 7,82-7,72 (m, 3H), 7,62-7,58 (m, 1H), 7,42-7,36 (m, 1H), 7,1-7,0 (m, 1H), 4,1-3,9 (m, 4H), 3,2-3,0 (m, 4H), 2,82,6 (m, 4H), 2,4 (s, 3H) EM: m/z 653,9 (M+1) N-(4-Cloro-3-{2-[3fluoro-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

51: N NHN N N N N H O RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 9,77 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,22 (s, 1H),7,6 (d, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,3-7,04 (m, 2H), 6,49 (d, 2H), 3,92 (s, 2H), 3,23,02 (m, 7H), 2,95-2,65 (m, 7H), 2,352,12 (m, 6H), 1,91 (s, 2H), 1,85-1,45 (m, 6H), 1,03-1,01 (m, 2H) EM: m/z 540,3 (M+1) 2-Ciclopentil-N-(4-metil3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)acetamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

52: N NHN N H O N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,4 (s, 1H), 9,84 (s, 1H), 8,4-8,2 (m, 3H), 8,02-7,7 (m, 6H), 7,63 (s, 1H), 7,52-7,44 (d, 1H), 7,25-7,16 (d, 1H), 4,05 (s, 2H), 3,2-3,1 (m, 2H), 3,0 (s, 2H), 2,76 (s, 3H), 2,3 (s, 3H), 1,88 (s, 1H) EM: m/z 561,0 (M+1) N-{3-[2-(4-(Metilaminocarbonil)-fenilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il]-4-metil-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

53: N NHN N N N N H O O O RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,2-9,6 (m, 2H), 9,35 (s, 1H), 8,4-8,2 (m, 2H), 7,75-7,4 (m, 6H), 7,2-7,1 (m, 1H), 7,02-6,9 (m, 3H), 4,3 (s, 4H), 3,98 (s, 2H), 3,28-3,1 (m, 5H), 3,0-2,8 (m, 7H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 591,3 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 2,3dihidrobenzo[1,4] dioxina-6-carbox�lico 1

54: N NHN N N N N H OO F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,85 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 8,1 (d, 1H), 7,87,7 (m, 1H), 7,2-7,54 (m, 4H), 7,38 (d, 1H), 7,04 (d, 1H), 4,18-4,02 (m, 1H), 3,95-3,82 (m, 1H), 3,3-3,2 (m, 4H), 3,2-3,1 (m, 2H), 2,82-2,7 (m, 4H), 2,6 (s, 3H), 2,48 (s, 3H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 630,1 (M+1) 4-Metil-N-(4-metil-3-{2[4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 3

55: N NHN N N N N H OO F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,82 (s, 1H), 7,85-7,42 (m, 7H), 7,4-7,28 (m, 1H), 7,02 (d, 2H), 4,1-3,95 (m, 1H), 3,9-3,7 (m, 3H), 3,7-3,5 (m, 2H), 3,3-2,9 (m, 9H), 2,5 (s, 3H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 630,2 (M+1) 2-Metil-N-(4-metil-3-{2[4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 3

56: N NHN N N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,358,12 (m, 3H), 7,96-7,83 (m, 1H), 7,787,61 (m, 2H), 7,58-7,42 (m, 2H), 7,387,29 (m, 1H), 7,26-7,19 (m, 1H), 7,147,04 (m, 1H), 4,07 (s, 2H), 3,6-3,55 (m, 2H), 3,4 (t, 2H), 3,12-2,95 (m, 8H), 2,95 (s, 3H), 2,35 (s, 6H) EM: m/z 616,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[3-metil4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

57: N NHN N N N H O N F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,38,15 (m, 3H), 7,9-7,8 (m, 1H), 7,757,65 (t, 1H), 7,6 (s, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,4-7,3 (m, 1H), 7,25-7,1 (m, 3H), 6,76,55 (m, 1H), 4,1-4,05 (s, 2H), 3,353,2 (m, 6H), 3,05-2,95 (m, 2H), 2,72,6 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 601,9 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[3-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 1

58: N NHN N N N N H OO Br RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,82 (s, 1H), 8,12-8,08 (t, 1H), 7,94-7,86 (m, 1H), 7,78-7,68 (m, 2H), 7,64-7,54 (m, 3H), 7,5-7,4 (m, 1H), 7,38-7,3 (m, 1H), 7,04-6,94 (m, 2H), 4,15-4,0 (m, 1H), 3,8-3,7 (m, 1H), 3,25-3,15 (m, 4H), 3,05-2,95 (m, 2H), 2,75-2,65 (m, 4H), 2,25 (s, 3H), 2,15 (s, 3H) EM: m/z 625,8 (M+1) 3-Bromo-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-benzamida 3

59: N NHN N N N N H O S RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,43 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,12-7,98 (m, 2H), 7,69-7,44 (m, 6H), 7,25-7,15 (d, 1H), 6,86 (d, 2H), 4,12 (q, 1H), 4,0 (s, 2H), 3,25-3,15 (m, 5H), 3,1-3,02 (m, 4H), 2,96-2,88 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,22 (s, 3H) EM: m/z 590,2 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido benzo[b]tiofeno-2carbox�lico 1

60: N NHN N N N N H O Br RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,13 (s, 1H), 8,06-7,98 (s ancho, 1H), 7,927,78 (m, 2H), 7,72-7,48 (m, 4H), 7,447,32 (m, 2H), 7,24-7,06 (m, 3H), 7,06,9 (m, 2H), 4,02 (s, 2H), 3,36-3,16 (m, 6H), 3,06-2,95 (m, 3H), 2,76-2,62 (m, 4H), 2,5-2,25 (d, 7H) EM: m/z 612,1 (M+1) 3-Bromo-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 1

61: N NHN N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,33 (d, 1H), 8,26-8,05 (m, 4H), 7,85-7,75 (m, 1H), 7,7-7,58 (m, 2H), 7,52-7,4 (m, 2H), 7,3-7,15 (m, 3H), 4,06 (s, 2H), 3,4-3,22 (m, 2H), 3,14-2,98 (m, 2H), 2,52 (s, 3H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 518,8 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(2-metilpiridin-4-ilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

62: N N N N H O HN N N F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,38 (m, 3H), 7,94-7,62 (m, 5H), 7,42-7,3 (m, 2H), 7,28-7,2 (m, 1H), 7,14-7,05 (m, 1H), 4,05 (d, 4H), 3,2-3,0 (m, 7H), 2,9 (s, 3H), 2,34 (s, 3H) EM: m/z 616,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1ilmetil)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 1

63: N N N N H O HN N N O F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,2 (s, 1H), 8,4-8,18 (m, 4H), 8,047,74 (m, 5H), 7,68-7,42 (m, 2H), 7,267,16 (m, 1H), 6,7-6,6 (m, 1H), 6,546,44 (m, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,82 (s, 5H), 3,22-3,1 (m, 8H), 2,94-2,84 (m, 3H), 2,32-2,22 (m, 9H) EM: m/z 632,0 (M+1) N-(3-{2-[2-Metoxi-4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-4-metilfenil)-3-trifluorometilbenzamida 1

64: N N N N H O HN N N O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,76 (s, 1H), 8,23-8,06 (m, 3H), 7,84-7,59 (m, 3H), 7,56-7,41 (m, 3H), 7,3-7,2 (m, 1H), 6,98 (d, 1H), 4,04-3,92 (m, 1H), 3,8-3,7 (m, 1H), 3,11-2,94 (m, 9H), 2,64 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,18 (s, 3H) EM: m/z 629,8 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[3-metil4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 3

65: N N N N H O HN N N O RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,15-10,0 (d, 2H), 8,75 (s, 1H), 7,77,55 (m, 3H), 7,5-7,4 (m, 1H), 7,257,15 (m, 1H), 7,05-6,95 (d, 2H), 4,03,9 (m, 1H), 3,75-3,65 (m, 1H), 3,23,1 (m, 4H), 3,3-3,1 (m, 4H), 3,1-2,95 (m, 2H), 2,75-2,65 (m, 4H), 2,3-2,2 (m, 2H), 2,1 (s, 3H), 1,8-1,4 (m, 9H), 1,3-1,1 (m, 4H) EM: m/z 554,2 (M+1) 2-Ciclopentil-N-(4-metil3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)acetamida 3

66: N N N N H O HN N N Cl Cl RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,32 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,3-8,2 (m, 2H), 8,0-7,78 (m, 2H), 7,65-7,4 (m, 4H), 7,18 (d, 1H), 6,88 (d, 2H), 3,98 (s, 2H), 3,24-3,18 (m, 2H), 3,143,06 (m, 4H), 2,94-2,86 (m, 3H), 2,382,22 (m, 8H) EM: m/z 602,1 (M+1) 3,4-Dicloro-N-(4-metil3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

67: N N N N H O HN NHO N F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,46 (s, 1H), 9,9 (s, 1H), 8,5-8,2 (m, 3H), 8,05-7,7 (m, 5H), 7,68-7,42 (m, 2H), 7,25-7,15 (d, 1H), 4,05-4,0 (s ancho, 2H), 3,35-3,15 (m, 4H), 3,052,95 (s ancho, 2H), 2,28 (s, 2H), 2,01,6 (m, 13H) EM: m/z 658,2 (M+1) N-{3-[2-(4-(3-Pirrolidin1-ilpropilaminocarbonil)fenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilfenil}-3-trifluorometilbenzamida 2

68: N N N N H O HN O N N N RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,28,05 (m, 2H), 7,66-7,49 (m, 3H), 7,46,8 (m, 6H), 4,4-4,2 (m, 2H), 3,98 (s, 2H), 3,7-3,6 (m, 2H), 3,35-3,15 (m, 6H), 3,05-2,85 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,2-1,9 (m, 12H) EM: m/z 619,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-2pirrolidin-1-ilisonicotinamida 2

OO: F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,5 (d, 2H), 8,4-8,2 (m, 3H), 8,0-7,6 N-[4-Metil-3-(5-oxo-2(4-metilaminocarbonil)-

N N N N H HN: F (m, 9H), 7,4-7,2 (d, 1H), 4,1-3,9 (m, 1H), 3,9-3,7 (m, 1H), 3,2-3,1 (m, 1H), 2,8-2,7 (m, 4H), 2,2-2,1 (s, 3H) fenilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3 4

69: NHO EM: m/z 575,1 (M+1) trifluorometilbenzamida

70: N N N N H F O HN N O N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,2-8,8 (d, 2H), 8,3-7,9 (m, 2H), 7,9-7,3 (m, 7H), 7,2-6,8 (m, 3H), 4,1-3,8 (t, 2H), 3,4-3,2 (m, 4H), 3,2-3,0 (t, 2H), 2,92,6 (m, 4H), 2,4 (s, 3H) EM: m/z 620,1 (M+1) N-(4-Fluoro-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

71: N N N N H O HN N N S RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,1 (s, 1H), 7,6-7,36 (m, 4H), 7,3-7,03 (m, 4H), 7,02-6,92 (d, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,7 (s, 2H), 3,3-3,2 (m, 2H), 3,2-3,1 (m, 4H), 3,0-2,9 (m, 2H), 2,8-2,6 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 554,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-2tiofen-3-il-acetamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

72: N N N N H O HN N O N N RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,82 (s, 1H), 8,15-8,04 (m, 1H), 7,96-7,48 (m, 7H), 7,4-7,3 (m, 1H), 7,0 (d, 2H), 4,15-3,96 (m, 1H), 3,94-3,8 (m, 1H), 3,26-3,1 (m, 6H), 2,8-2,6 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,8 (s, 6H) EM: m/z 615,3 (M+1) 3-(Ciano-dimetil-metil)N-(4-metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 3

73: N N N N H O HN N N N N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,62 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,6 (d, 2H), 7,44 (s, 1H), 7,12 (s, 2H), 6,9 (d, 3H), 6,09 (s, 1H), 3,99 (s, 2H), 3,78-3,52 (m, 4H), 3,38-3,02 (m, 8H), 2,86 (s, 4H), 2,42 (d, 7H), 2,22 (s, 3H) EM: m/z 566,1 (M+1) 2-(3,5-Dimetil-pirazol-1il)-N-(4-metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)acetamida 1

75: N N N N H O HN O F NO N F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,9 (s, 1H), 8,25-8,4 (m, 2H), 7,82-7,9 (m, 3H), 7,6-7,8 (m, 3H), 7,25-7,35 (dd, 3H), 4,05-4,15 (m, 2H), 3,6-3,92 (m, 6H), 2,5 (m, 4H), 2,2-2,4(m, 6H) EM: m/z 644,1 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1carbonil)-fenilamino]-5oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 4

76: N N N N H O HN O F N O N F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,1 (d, 2H), 8,1-8,3 (m, 2H), 7,5-7,9 (m, 5H), 7,0-7,5 (m, 5H), 3,3-4,2 (m, 6H), 3,03,3 (d, 2H), 2,1-2,45 (m, 7H), 1,7-1,8 (s, 4H), EM: m/z 658,0 (M+1) N-[4-Metil-3-(2-{4-[2-(4metil-piperazin-1-il)-2oxo-etil]-fenilamino}-5oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il)-fenil]-3trifluorometilbenzamida 4

77: N N N N H O HN O O NH N F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,92 (s, 1H), 8,36-8,12 (m, 2H), 8,05-7,66 (m, 9H), 7,66-7,50 (m, 1H), 7,45-7,22 (m, 1H), 4,1-4,0 (m, 3H), 3,6-3,4 (s ancho, 3H), 2,4-2,2 (s, 4H), 2,2-1,8 (m, 11H) EM: m/z 672,1 (M+1) N-(4-Metil-3-(5-oxo-2(4-(3-(pirrolidin-1il)propilcarbamoil)fenila mino)-7,8dihidropirido[4,3-d]pirimidin-6(5H)il)fenil)-3(trifluorometil)benzamid a 4

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

78: N NHN O N N N H OO Br RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 9,028,70 (s ancho, 1H), 8,26-8,02 (m, 1H), 8,02-7,18 (m, 8H), 7,18-6,80 (m, 2H), 4,4-4,2 (s ancho, 2H), 4,1-4,0 (s ancho, 2H), 3,62-3,42 (s ancho, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,1-1,9 (m, 9H) EM: m/z 642,9 (M+2) 3-Bromo-N-(4-metil-3{5-oxo-2-[4-(2-pirrolidin1-il-etoxi)-fenilamino]-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-benzamida 3

79: N NHN N N N N H OO F F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,958,65 (s ancho, 1H), 8,2-7,9 (m, 2H), 7,8-7,5 (m, 5H), 7,45-7,25 (d, 1H), 7,15-6,90 (d, 2H), 4,2-3,8 (m, 2H), 3,3-3,1 (m, 6H), 2,75-2,6 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 634,1 (M+1) 3-Fluoro-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-5-trifluorometilbenzamida 3

OO: F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,28 (s, 1H), 9,0 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,15 4-Cloro-N-(4-metil-3-{2[4-(4-metil-piperazin-1

80: N NHN N N N N H F Cl 7,95 (m, 1H), 7,65-7,45 (m, 4H), 7,457,36 (m, 2H), 7,1-6,9 (m, 3H), 4,003,82 (m, 1H), 3,82-3,65 (m, 1H), 3,43,0 (m, 6H), 2,7-2,5 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 1,76 (s, 3H) EM: m/z 650,1 (M+1) il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 3

81: N NHN O N N N H OO F F F Cl RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,308,82 (m, 2H), 8,2 (s, 1H), 8,10-7,88 (m, 1H), 7,7-7,3 (m, 6H), 7,08-6,74 (m, 3H), 4,25-3,99 (m, 2H), 3,99-3,52 (m, 2H), 3,3-2,8 (m, 4H), 2,80-2,52 (s ancho, 3H), 1,85-1,7 (m, 8H) EM: m/z 664,9 (M+1) 4-Cloro-N-(4-metil-3-{5oxo-2-[4-(2-pirrolidin-1il-etoxi)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

82: N NHN N N N N H OO F F F Cl RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,85 (s, 1H), 8,6-8,4 (m, 1H), 8,0 (s, 1H), 7,78-7,48 (m, 4H), 7,38-7,18 (m, 4H), 7,18-6,88 (m, 2H), 4,08-3,90 (m, 1H), 3,86-3,70 (m, 1H), 3,35-3,05 (m, 6H), 2,72-2,52 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,12 (s, 3H) EM: m/z 650,1 (M+1) 2-Cloro-N-(4-metil-3-{2[4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-5-trifluorometilbenzamida 3

83: N NHN N N H O N N H F F F O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,72 (s, 1H), 8,48-8,32 (m, 1H), 8,3-8,02 (m, 3H), 8,0-7,54 (m, 5H), 7,4-7,05 (s, 4H), 4,1 (s, 2H), 3,43-3,21 (m, 2H), 3,18-2,95 (m, 5H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 562,1 (M+1) Metilamida del ácido 5{6-[2-metil-5-(3trifluorometilbenzoilamino)-fenil]5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2ilamino}-piridina-2carbox�lico 2

84: N NHN N N N N H OO N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,0 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,53 (d, 2H), 7,45-7,09 (m, 5H), 6,96 (d, 2H), 6,82 (s, 1H), 4,1-3,82 (m, 1H), 3,82-3,68 (m, 1H), 3,42-3,0 (m, 8H), 2,6 (s, 3H), 2,35 (s, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,1-1,89 (m, 7H) EM: m/z 685,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3pirrolidin-1-il-5trifluorometilbenzamida 3

85: N NHN N N N N H F F F O Br O RMN 1H (300 MHz, DMSO) δ 10,59 (s, 1H), 9,99 (s, 1H), 8,79 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,25 (d, 2H), 7,79-7,51 (m, 4H), 7,3 (d, 1H), 6,9 (d, 2H), 4,13,9 (s, 2H), 3,8-3,6 (m, 2H), 3,2-2,9 (m, 8H), 2,24-2,0 (m, 6H) EM: m/z 693,9 (M+1) 3-Bromo-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-5-trifluorometilbenzamida 3

86: N NHN N N N N H OO RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,21 (s, 1H), 9,9 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,9-7,1 (m, 8H), 7,1-6,76 (m, 2H), 4,82-4,12 (m, 2H), 4,05-3,6 (m, 2H), 3,2-2,9 (s, 6H), 2,2 (d, 8H), 1,7-1,1 (s, 9H) EM: m/z 604,2 (M+1) terc-Butil-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-benzamida 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

87: N NHN N N N N H OO F F F F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 10,009,65 (s ancho, 1H), 9,25-8,85 (s ancho, 1H), 8,7-8,3 (s ancho, 2H), 8,1-7,8 (s ancho, 1H), 7,7-7,3 (m, 5H), 7,15-6,85 (m, 3H), 4,0-3,4 (m, 2H), 3,4-3,0 (m, 6H), 2,8-2,6 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 1,5 (s, 3H) EM: m/z 684,1 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)3,5-bis-trifluorometilbenzamida 3

88: N NHN N N N N H OO O O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,99 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,8-6,8 (m, 10H), 6,6 (s, 1H), 4,08-3,90 (m, 1H), 3,9-3,6 (m, 7H), 3,35-3,05 (m, 6H), 2,92-2,75 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,17 (s, 3H) EM: m/z 608,2 (M+1) 3,5-Dimetoxi-N-(4metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 3

89: N NHN N N N N H OO Br F RMN 1H (300 MHz, DMSO) δ 8,75 (s, 1H), 8,49-8,2 (m, 1H), 8,19-7,82 (m, 1H), 7,81-7,4 (m, 5H), 7,4-7,19 (m, 1H), 7,1-6,8 (m, 2H), 4,08-3,90 (m, 1H), 3,86-3,70 (m, 1H), 3,35-3,05 (m, 6H), 2,92-2,75 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,17 (s, 3H) EM: m/z 646,0 (M+3) 3-Bromo-4-fluoro-N-(4metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 3

90: N NHN N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,307,05 (m, 9H), 5,0 (s, 1H), 4,0 (s, 2H), 3,4-3,15 (m, 2H), 3,15-2,80 (m, 5H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 442,4 (M+1) N-[4-Metil-3-(2metilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3trifluorometilbenzamida 1

91: N NHN N N H O F F F F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,56 (s, 2H), 8,4-7,94 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 7,5-7,04 (m, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,3-3,2 (m, 2H), 2,92 (s, 5H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 510,0 (M+1) N-[4-Metil-3-(2metilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]3,5-bis-trifluorometilbenzamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

O: F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,47,56 (m, 10H), 7,4-7,1 (m, 2H), 4,0 (s, 3-(2-Amino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3

92: N NHN NHO N N N H F 2H), 3,1-3,0 (m, 2H), 2,8-2,5 (m, 5H), 2,3 (s, 3H), 2,2-2,0 (m, 3H), 1,9-1,6 (m, 2H), 1,5-1,1 (m, 4H) EM: m/z 644,0 (M+1) d]pirimidin-6-il)-4-metilN-fenil-benzamida 2

93: N NHN N N N N H OO F F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO) δ 10,5 (s, 1H), 9,98 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,58,25 (m, 2H), 7,8-7,5 (m, 5H), 7,32 (d, 1H), 6,9 (d, 2H), 4,10-3,82 (m, 1H), 3,8-3,6 (m, 1H), 3,15-2,98 (m, 6H), 2,4-2,5 (m, 4H), 2,35 (s, 3H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 634,0 (M+1) 4-Fluoro-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 3

94: N NHN N N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,12 (s, 2H), 8,88 (s, 1H), 8,30-8,02 (m, 2H), 7,97-7,55 (m, 4H), 7,33-7,00 (m, 4H), 4,09 (s, 2H), 3,3 (t, 2H), 3,02 (t, 2H), 2,31 (s, 3H) EM: m/z 506,1 (M+1) N-{4-Metil-3-[2(pirimidin-5-ilamino)-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il]-fenil}-3-trifluorometilbenzamida 2

95: N NHN N N N N H OO S F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,8 (s, 1H), 8,05-7,4 (m, 6H), 7,3 (d, 1H), 6,95 (d, 2H), 4,12-3,7 (m, 2H), 3,4-3,0 (m, 6H), 2,8-2,5 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 622,1 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 5trifluorometil-tiofeno-2carbox�lico 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

96: N NHN O N N N H O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 11,4 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,8-7,5 (m, 3H), 7,45-6,70 (m, 4H), 4,32 (s, 2H), 4,183,80 (m, 4H), 3,72-2,90 (m, 9H), 2,49-2,00 (m, 8H), 1,4-1,0 (m, 9H) EM: m/z 543,2 (M+1) 3,3-Dimetil-N-(4-metil3-{2-[4-(2-pirrolidin-1-iletoxi)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 1

97: N NH2N N N H O F F F F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,54 (s, 2H), 8,3-7,96 (m, 2H), 7,6 (s, 1H), 7,6-7,16 (m, 2H), 3,98 (s, 2H), 3,2-3,1 (t, 2H), 2,9 (t, 2H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 496,0 (M+1) N-[3-(2-Amino-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-4-metilfenil]-3,5-bistrifluorometilbenzamida 1

98: N NHN OHN OH N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,48,08 (m, 3H), 8,0-7,66 (m, 6H), 7,57,06 (m, 3H), 4,03 (s, 2H), 3,7 (t, 2H), 3,5 (t, 2H), 3,3-3,2 (t, 2H), 3,12-2,9 (m, 2H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 591,1 (M+1) N-(2-Amino-3-{2-[4hidroxifenil-amino]-5oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 2

99: N NHN ON N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,5 (s, 1H), 8,4-7,00 (m, 13H), 3,9 (s, 2H), 3,7-3,4 (s ancho, 4H), 3,4-2,9 (m, 4H), 2,3 (s, 3H), 2,0-1,8 (s ancho, 4H) EM: m/z 601,1 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4(pirrolidina-1-carbonil)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 2

100: N NHN N N H O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,08 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,86-7,56 (m, 4H), 7,48-7,38 (m, 1H), 7,24-7,06 (m, 2H), 5,0 (s, 1H), 4,0 (s, 2H), 3,35-3,30 (m, 2H), 3,1-2,9 (m, 5H), 2,3 (s, 3H), 1,4 (s, 9H) EM: m/z 430,1 (M+1) 3-terc-Butil-N-[4-metil3-(2-metilamino-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]benzamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

101: N NHN N N N N H OO O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,0 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,1 (s, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,69 (s,1H), 7,62-7,40 (m, 6H), 7,12 (d, 1H), 6,94 (d, 2H), 4,05-3,9 (m, 1H), 3,80-3,69 (m, 1H), 3,3-3,0 (m, 6H), 2,75-2,55 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 2,0 (s, 3H) EM: m/z 602,2 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 3metil-benzofurano-5carbox�lico 3

102: N NHN N N N N H OO N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,95 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,72-7,44 (m, 4H), 7,38-7,10 (m, 3H), 7,09-6,90 (m, 4H), 6,7-6,6 (m, 1H), 4,05-3,84 (m, 1H), 3,80-3,62 (m, 1H), 3,36-3,28 (m, 9H), 3,15-2,96 (m, 2H), 2,78-2,56 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,13 (s, 3H), 2,05-1,95 (m, 3H) EM: m/z 617,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3pirrolidin-1-ilbenzamida 3

103: N NHN N N H O Cl F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,347,84 (m, 3H), 7,54-7,40 (m, 2H), 7,397,04 (m, 3H), 5,2-4,9 (s ancho, 1H), 4,10-3,82 (s, 2H), 3,22-3,10 (m, 2H), 3,09-2,80 (m, 5H), 2,47-2,12 (s, 3H) EM: m/z 476,0 (M+1) 4-Cloro-N-[4-metil-3-(2metilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3trifluorometilbenzamida 1

104: N NHN N N H NO RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,99 (s, 1H), 8,12-6,82 (m, 15H), 4,12-3,66 (m, 2H), 3,42-3,00 (m, 6H), 2,75-2,48 (m, 4H), 2,35 (s, 3H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 571,2 (M+1) 6-[5-(Isoquinolin-1ilamino)-2-metil-fenil]-2[4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-7,8dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona 11

N N

105: N NHN O N N N H O N S RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,0 (s, 1H), 8,1 (s, 1H), 7,6-7,4 (m, 3H), 7,15-7,05 (d, 1H), 7,0-6,85 (m, 5H), 4,20-4,05 (m, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,8 (s, 2H), 3,30-3,15 (m, 2H), 3,00-2,85 (m, 4H), 2,75 (s, 3H), 2,72-2,60 (s ancho, 4H), 2,25 (s, 3H), 1,85-1,75 (s ancho, 4H) EM: m/z 584,1 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-2(2-metil-tiazol-4-il)acetamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

106: N NHN O N N N H O S F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,12 (s, 1H), 7,8 (s, 1H), 7,60-7,42 (m, 5H), 7,2 (d, 1H), 7,1 (d, 1H), 6,96-6,84 (m, 3H), 4,15-3,95 (m, 4H), 3,26 (t, 2H), 3,05-2,85 (m, 4H), 2,7-2,6 (m, 4H), 2,3 (s, 3H), 2,0-1,65 (m, 4H) EM: m/z 622,8 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 5trifluorometil-tiofeno-2carbox�lico 1

107: N NHN N N H O N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,11 (s, 1H), 7,60-7,32 (m, 3H), 7,28-7,02 (m, 1H), 7,00-6,72 (m, 4H), 6,31 (s, 1H), 4,28-3,85 (m, 4H), 3,56-2,82 (m, 10H), 2,75-2,50 (m, 4H), 2,26 (s, 3H), 1,90-1,75 (m, 4H), 1,7-1,6 (m, 4H), 1,25 (s, 2H) (4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido piperidina-1-carbox�lico 1

O: EM: m/z 556,2 (M+1)

N

108: N NHN O N N N H O RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,1 (s, 1H), 7,6-7,4 (m, 3H), 7,25-7,05 (m, 2H), 6,95-6,80 (d, 2H), 4,2-4,1 (t, 2H), 3,95 (s, 2H), 3,3-3,2 (t, 2H), 3,05-2,85 (m, 5H), 2,85-2,65 (m, 4H), 2,4-2,2 (m, 6H), 1,95-1,50 (m, 11H) EM: m/z 555,2 (M+1) 2-Ciclopentil-N-(4-metil3-{2-[4-(2-pirrolidin-1-iletoxi)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)acetamida 1

109: N NHN N N H O N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,45 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,427,02 (m, 4H), 6,85 (s, 1H), 5,1-4,83 (s ancho, 1H), 4,0 (s, 2H), 3,59-3,16 (m, 4H), 3,15-2,82 (m, 3H), 2,3 (s, 3H), 2,23-2,12 (m, 4H), 2,11-1,98 (m, 4H) EM: m/z 510,9 (M+1) N-[4-Metil-3-(2metilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3pirrolidin-1-il-5trifluorometilbenzamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

110: N NHN O N N N H N O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,21 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,68-7,44 (m, 2H), 7,21-7,10 (m, 1H), 7,08-6,82 (m, 4H), 4,23-4,08 (t, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,3 (t, 2H), 3,1 (s, 2H), 3,0-2,9 (m, 4H), 2,82,7 (s ancho, 4H), 2,5-2,6 (m, 4H), 2,3 (s, 3H), 1,9-1,8 (m, 6H), 1,7-1,6 (m, 4H) EM: m/z 570,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-2piperidin-1-il-acetamida 1

111: N NHN O N N H O RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,1 (s, 1H), 7,65-6,80 (m, 9H), 4,12 (t, 2H), 3,98 (s, 2H), 3,45 (s, 3H), 3,2 (t, 1H), 3,1-2,9 (m, 4H), 2,89-2,70 (s ancho, 3H), 2,40-2,22 (m, 5H), 1,97-1,70 (m, 5H), 1,10-0,92 (t, 3H) EM: m/z 515,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 1

N

112: N NHN O N N N H O RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,15 (s, 1H), 7,65-7,45 (m, 3H), 7,15 (s, 2H), 7,05-6,90 (d, 2H), 4,3-4,2 (d, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,60-3,45 (d, 2H), 3,4-3,3 (m, 2H), 3,3-3,2 (t, 2H), 3,32,9 (t, 2H), 2,50-2,25 (m, 5H), 2,152,00 (m, 4H), 1,7-1,5 (m, 3H), 1,4-1,3 (m, 2H), 1,05-0,90 (d, 6H) EM: m/z 543,2 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 4metil-pentanoico 1

113: N NHN O N N H O RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,15 (s, 1H), 7,65-7,45 (m, 3H), 7,1 (s, 2H), 7,05-6,90 (d, 2H), 4,3-4,2 (t, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,4-3,3 (t, 2H), 3,3-3,1 (m, 4H), 3,0-2,9 (t, 2H), 2,60-2,45 (m, 1H), 2,3 (s, 3H), 2,1-1,5 (m, 18H) EM: m/z 569,3 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido cicloheptanocarbox�lico 1

N

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

114: N NHN N N N N H OO S RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,2 (s, 2H), 7,96 (s, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,8-7,6 (m, 2H), 7,60-7,45 (m, 3H), 7,45-7,30 (m, 2H), 7,3-7,15 (m, 1H), 7,1 (d, 1H), 7,05-6,90 (m, 2H), 4,0-3,8 (m, 1H), 3,80-3,65 (m, 1H), 3,3-3,0 (m, 6H), 2,7-2,5 (m, 4H), 2,34 (s, 3H), 1,9 (s, 3H) EM: m/z 604,1 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido benzo[b]tiofeno-2carbox�lico 3

115: N NHN N N H O Cl F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,187,97 (m, 3H), 7,81 (d, 2H), 7,54 (s, 1H), 7,38-7,05 (m, 2H), 5,1-4,9 (s ancho, 1H), 4,15-3,90 (m, 2H), 3,403,15 (m, 2H), 3,15-2,75 (m, 5H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 476,1 (M+1) 3-Cloro-N-[4-metil-3-(2metilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-5trifluorometilbenzamida 1

116: N NHN N N N N H OO N Cl RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,85 (s, 1H), 9,0 (s, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,86 (t, 1H), 7,82-7,76 (m, 1H), 7,65-7,46 (m, 4H), 7,43-7,30 (m, 2H), 6,95 (d, 2H), 4,19-3,95 (m, 1H), 3,89-3,70 (m, 1H), 3,34-3,00 (m, 6H), 2,68-2,55 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 583,2 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 6cloro-piridina-2carbox�lico 3

117: N NHN N NHO N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,7 (d, 1H), 8,42-8,3 (m, 1H), 8,3-8,02 (m, 4H), 8,00-7,76 (m, 3H), 7,74-7,54 (m, 2H), 7,40-7,02 (m, 4H), 4,1 (s, 2H), 3,4-3,2 (m, 2H), 3,15-3,00 (m, 2H), 3,0-2,9 (m, 1H), 2,35 (s, 3H), 0,9-0,8 (m, 2H), 0,7-0,6 (m, 2H) EM: m/z 588,0 (M+1) Ciclopropilamida del ácido 5-{6-[2-metil-5-(3trifluorometilbenzoilamino)-fenil]5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2ilamino}-piridina-2carbox�lico 2

118: N NHN N N N N H OO N N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,97 (d, 2H), 8,2 (s, 1H), 8,08-7,32 (m, 11H), 7,2-6,8 (m, 3H), 6,42 (s, 1H), 4,103,52 (m, 2H), 3,40-2,88 (m, 6H), 2,82,5 (m, 4H), 2,38 (s, 3H), 1,9 (s, 3H) EM: m/z 614,0 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3pirazol-1-il-benzamida 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

119: N N N HN N H O N NH2O F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,42 (s, 1H), 10,15 (s, 1H), 9,0 (s, 1H), 8,51-8,12 (m, 4H), 8,20-7,61 (m, 4H), 7,61 (s, 1H), 7,60-7,32 (m, 2H), 7,2 (d, 1H), 4,05 (s, 2H), 3,08-2,93 (m, 2H), 2,61-2,52 (m, 2H), 2,28 (s, 3H) EM: m/z 548,1 (M+1) Amida del ácido 5-{6[2-metil-5-(3trifluorometilbenzoilamino)-fenil]5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2ilamino}-piridina-2carbox�lico 2

120: N N N HN N H O N N O Cl F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,39 (s, 1H), 9,11-9,00 (m, 1H), 8,13 (d, 2H), 7,7 (s, 1H), 7,65-7,30 (m, 5H), 7,1-6,86 (m, 3H), 4,10-3,52 (m, 2H), 3,40-2,88 (m, 6H), 2,8-2,5 (m, 4H), 2,38 (s, 3H), 1,9 (s, 3H) EM: m/z 650,1 (M+1) 3-Cloro-N-(4-metil-3-{2[4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-5-trifluorometilbenzamida 3

O F F: RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,58 (s, 1H), 8,2-8,0 (m, 3H), 7,88-7,78 (m, N-(4-Metil-3-{2-[2-(4metil-piperazin-1-il)

121: N N N HN N H N N N F N 2H), 7,72-7,58 (m, 2H), 7,26-7,08 (m, 3H), 6,61 (s, 1H), 4,02 (s, 2H), 3,923,72 (m, 4H), 3,36-3,21 (m, 2H), 3,052,88 (m, 2H), 2,60-2,48 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 604,2 (M+1) pirimidin-5-ilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 2

122: N N N HN N H O N N O N S RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,1 (s, 1H), 9,0 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 8,6 (s, 1H), 8,25-8,1 (d, 1H), 8,1-8,0 (m, 1H), 7,8-7,65 (m, 1H), 7,6-7,5 (m, 2H), 7,45-7,30 (m, 2H), 7,20-7,05 (m, 2H), 7,05-6,90 (m, 2H), 4,00-3,85 (m, 1H), 3,80-3,65 (m, 1H), 3,5 (s, 1H), 3,3-3,0 (m, 6H), 2,70-2,55 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 1,9 (s, 3H) EM: m/z 604,9 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido benzotiazol-6carbox�lico 3

123: N N N HN N H O N N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,12 (s, 1H), 7,56-7,46 (m, 2H), 7,32-7,12 (m, 3H), 7,06-6,89 (m, 4H), 4,0 (s, 2H), 3,3-3,1 (m, 6H), 3,05-2,90 (m, 3H), 2,85-2,70 (m, 1H), 2,65-2,60 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,3 (s, 3H), 1,3 (s, 3H) EM: m/z 568,2 (M+1) 4,4,4-Trifluoro-3-metilN-(4-metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

124: N N N HN N H O N N O N N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,2 (s, 1H), 8,95 (s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,9-7,8 (m, 2H), 7,65-7,34 (m, 7H), 7,10-7,01 (m, 2H), 7,00-6,89 (m, 2H), 4,0-3,8 (m, 1H), 3,8-3,6 (m, 1H), 3,3-2,9 (m, 6H), 2,7-2,5 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,25 (s, 3H), 1,85 (s, 3H) EM: m/z 628,1 (M+1) 3-(4-Metil-imidazol-1-il)N-(4-metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 3

125: N N N N H O HN N N O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,88 (s, 1H), 8,38-8,08 (m, 3H), 7,92-7,80 (m, 1H), 7,80-7,50 (m, 6H), 7,43-7,20 (m, 2H), 7,15-6,95 (d, 1H), 4,3-3,7 (m, 4H), 3,6 (s, 2H), 3,0-2,6 (m, 8H), 2,45 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 630,0 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[3-(4metil-piperazin-1ilmetil)-fenilamino]-5oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 3

126: N N N HN N H O N N O N N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,0 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 7,65 (d, 1H), 7,6-7,4 (m, 6H), 7,3-7,15 (m, 2H), 7,1-6,9 (m, 3H), 4,1-3,9 (m, 1H), 3,85-3,65 (m, 1H), 3,3-3,0 (m, 10H), 2,7-2,5 (m, 8H), 2,4-2,3 (m, 6H), 2,15 (s, 3H) EM: m/z 646,0 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3(4-metil-piperazin-1-il)benzamida 3

127: N N N HN N H O N N N RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,7 (s, 1H), 9,48 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,7 (s, 1H), 8,4-8,2 (m, 3H), 8,0-7,5 (m, 6H), 7,2 (d, 1H), 6,89 (d, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,25 (t, 2H), 3,1-3,0 (m, 4H), 2,9 (t, 2H), 2,5-2,4 (m, 4H), 2,3 (s, 3H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 585,1 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido isoquinolina-3carbox�lico 1

128: N N N HN N H O N N O N RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 9,37 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,22 (d, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,96-7,69 (m, 4H), 7,6 (d, 2H), 7,45-7,32 (m, 1H), 7,0 (d, 2H), 4,25-4,0 (m, 1H), 3,95-3,75 (m, 1H), 3,25-3,1 (m, 6H), 2,8-2,65 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 599,1 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido isoquinolina-3carbox�lico 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

129: N N N HN N H O N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,05 (s, 1H), 7,76-7,60 (m, 2H), 7,44-6,88 (m, 6H), 6,82-6,58 (m, 1H), 5,12-4,82 (m, 1H), 4,01 (s, 2H), 3,49-2,82 (m, 10H), 2,31 (s, 3H), 2,05 (s, 3H) EM: m/z 442,9 (M+1) N-[4-Metil-3-(2metilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3pirrolidin-1-ilbenzamida 1

131: N N N HN N H O N N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,11 (s, 1H), 7,54-7,42 (m, 3H), 7,24-7,12 (m, 2H), 7,04-6,86 (m, 4H), 4,0 (s, 2H), 3,3-3,1 (m, 6H), 3,02-2,90 (m, 2H), 2,7-2,5 (m, 8H), 2,35 (s, 3H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 554,2 (M+1) 4,4,4-Trifluoro-N-(4metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 1

132: N N N HN N H O N NO N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,858,64 (m, 1H), 8,40-7,96 (m, 5H), 7,907,50 (m, 4H), 7,48-7,00 (m, 3H), 4,05 (s, 2H), 3,94-3,60 (m, 4H), 3,4-3,1 (m, 2H), 3,1-2,9 (m, 2H), 2,60-2,15 (m, 10H) EM: m/z 631,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[6-(4metil-piperazin-1carbonil)-piridin-3ilamino]-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 2

133: N N N HN N H OO N N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,95 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,55-7,45 (m, 2H), 7,4-7,3 (m, 2H), 7,20-7,15 (m, 2H), 7,0-6,9 (m, 2H), 4,05-3,90 (m, 1H), 3,85-3,70 (m, 1H), 3,7-3,1 (m, 6H), 2,7-2,6 (m, 4H), 2,55-2,45 (m, 4H), 2,4 (s, 3H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 568,1 (M+1) 4,4,4-Trifluoro-N-(4metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 3

134: N N N HN N H OO N O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,05 (s, 1H), 8,85-8,75 (s ancho, 1H), 8,2 (s, 1H), 8,15-8,05 (m, 1H), 7,7-7,5 (m, 5H), 7,45-7,35 (m, 2H), 7,2-7,1 (m, 1H), 7,0-6,9 (m, 2H), 4,05-3,85 (m, 5H), 3,80-3,65 (m, 1H), 3,20-3,05 (m, 6H), 2,15 (s, 3H) EM: m/z 602,9 (M+1) N-{4-Metil-3-[2-(4morfolin-4-ilfenilamino)-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

135: N N N H2N NH NN F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,1 (s, 1H), 8,8-8,74 (m, 1H), 8,06-8,0 (s ancho, 1H), 7,68-7,6 (s ancho, 1H), 7,4-7,08 (m, 3H), 6,5-6,38 (s ancho, 2H), 3,9 (s, 2H), 3,2-3,1 (m, 2H), 2,84-2,7 (m, 2H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 402,1 (M+1) 6-[2-Metil-5-(4trifluorometil-pirimidin2-ilamino)-fenil]-5,6,7,8tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-ilamina 6

136: N N N HN NH NN F F F N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,658,55 (m, 3H), 8,5-8,4 (s ancho, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,2-8,1 (m, 2H), 7,857,75 (s ancho, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,257,15 (m, 1H), 7,1-7,0 (m, 2H), 4,2 (s, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,15 (t, 2H), 2,3 (s, 3H) EM: m/z 478,9 (M+1) {6-[2-Metil-5-(4trifluorometil-pirimidin2-ilamino)-fenil]-5,6,7,8tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-il}-piridin4-il-amina 6

N N N H F F FO: RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,368,2 (m, 3H), 7,98-7,66 (m, 5H), 7,457,35 (m, 2H), 7,28-7,12 (m, 2H), 4,12 N-(4-Metil-3-{2-[3-(4metil-piperazin-1ilmetil)-fenilamino]-7,8

137: NHN N N (s, 2H), 3,54-3,46 (m, 2H), 3,41-3,36 (m, 5H), 3,31-3,21 (m, 4H), 3,1-3,02 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 (s, 3H) EM: m/z 616,2 (M+1) dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 1

138: N N N HN N H O N N O N RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,7 (s, 1H), 8,8 (s, 1H), 7,7-7,0 (m, 10H), 6,95-6,85 (d, 2H), 4,1-3,95 (m, 1H), 3,85-8,7 (m, 1H), 3,3-3,0 (m, 6H), 2,52,4 (m, 4H), 2,24 (s, 3H), 2,15 (s, 3H) EM: m/z 561,2 (M+1) 6-[5-(Benzoxazol-2ilamino)-2-metil-fenil]-2[4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-7,8dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona 10

139: N N N HN N N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,12 (s, 1H), 7,7-7,45 (m, 7H), 7,15 (s, 2H), 6,96 (d, 2H), 3,98 (s, 2H), 3,77 (s, 2H), 3,25-3,15 (m, 6H), 2,99-2,75 (m, 6H), 2,5 (s, 3H), 2,28 (s, 3H) EM: m/z 615,9 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-2(4-trifluorometil-fenil)acetamida 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

140: N NHN N N H O N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,16 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 7,84 (s, 1H), 7,7-7,4 (m, 3H), 7,25-6,8 (m, 4H), 4,02 (s, 2H), 3,4-3,14 (m, 7H), 3,08-2,92 (m, 2H), 2,85-2,65 (s ancho, 7H), 2,52-2,2 (d, 6H), 2,06 (s, 3H), 1,95-1,8 (s ancho, 3H) N-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-2pirrolidin-1-il-acetamida 1

N N: EM: m/z 541,2 (M+1)

141: N NHN N N N N H O N H F O F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,0 (s, 1H), 7,7-6,6 (m, 11H), 8,2-7,7 (m, 3H), 4,2-3,7 (m, 2H), 3,5-2,8 (m, 10H), 2,2-1,9 (m, 6H) EM: m/z 631,2 (M+1) 1-(4-Metil-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3(3-trifluorometil-fenil)urea 8

145: N NHN N N N N N H OO F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,15 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,45-8,37 (s ancho, 1H), 8,23-8,08 (m, 2H), 7,85 (dd, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,66-7,52 (m, 2H), 7,407,30 (m, 2H), 7,06 (d, 1H), 6,72 (d, 1H), 4,00-3,88 (m, 1H), 3,70-3,67 (m, 1H), 3,55 (t, 4H), 3,15-3,05 (m, 2H), 2,55 (t, 4H), 2,36 (s, 3H), 1,75 (s, 3H) EM: m/z 617,1 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[6-(4metil-piperazin-1-il)piridin-3-ilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-3-trifluorometilbenzamida 3

146: N NHN N N N N H O N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,9 (s, 1H), 8,83 (d, 1H), 8,56 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,8-7,7 (m, 2H), 7,50 (d, 2H), 7,0-6,9 (m, 5H), 4,08 (s, 2H), 3,372,98 (m, 8H), 2,65-2,58 (m, 4H), 2,36 (s, 3H), 2,32 (s, 3H) EM: m/z 603,1 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 4trifluorometil-piridina-2carbox�lico 1

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

147: N N N HN O N H O N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,13 (s, 1H), 7,55-7,45 (m, 3H), 7,22-7,13 (m, 2H), 7,00-6,90 (m, 4H), 4,14 (t, 2H), 4,00 (s, 2H), 3,25 (t, 2H), 3,00-2,90 (m, 4H), 2,70-2,60 (m, 8H), 2,30 (s, 3H), 1,90-1,80 (m, 4H) EM: m/z 569,2 (M+1) 4,4,4-Trifluoro-N-(4metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 1

148: N N N HN N N H O F OHN F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,75 (s, 1H), 8,40-7,95 (m, 6H), 7,90-7,50 (m, 4H), 7,40-7,10 (m, 3H), 4,12-3,90 (m, 3H), 3,35-3,25 (m, 2H), 3,15-3,00 (m, 2H), 2,90-2,76 (m, 2H), 2,40-1,95 (m, 12H) EM: m/z 645,2 (M+1) (1-Metil-piperidin-4-il)amida del ácido 5-{6-[2metil-5-(3-trifluorometilbenzoilamino)-fenil]5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2ilamino}-piridina-2carbox�lico 2

N

149: N N N HN N N H S OO N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,15 (s, 1H), 7,50 (d, 2H), 7,19 (d, 1H), 7,006,80 (m, 5H), 6,60-6,40 (m, 1H), 4,00 (s, 2H), 3,30-2,95 (m, 10H), 2,60 (t, 4H), 2,38 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,851,75 (m, 2H), 1,50-1,36 (m, 2H), 1,25 (s, 2H) EM: m/z 550,2 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido butano-1-sulf�nico 9

150: N N N HN O N N H O F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,58,4 (t, 3H), 8,35-8,25 (s ancho, 1H), 7,7-7,3 (m, 5H), 7,2-7,1 (d, 1H), 6,956,8 (m, 2H), 3,9 (s, 2H), 3,7 (s, 3H), 3,15-3,05 (m, 2H), 3,05-2,95 (m, 2H) EM: m/z 521,5 (M+1) N-{4-Metoxi-3-[2(piridin-4-ilamino)-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 2

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

153: N N N HN N H O N O N H RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 8,11 (s, 1H), 7,50 (d, 2H), 7,23 (d, 1H), 7,13 (d, 1H), 6,98-6,88 (m, 3H), 6,82 (dd, 1H), 6,54 (s, 1H), 4,73 (d, 1H), 4,204,10 (m, 2H), 3,99 (s, 2H), 3,24 (t, 2H), 2,98 (t, 2H), 2,75-2,67 (s ancho, 4H), 2,29 (s, 3H), 2,06-1,95 (m, 2H), 1,90-1,80 (m, 4H),1,8-1,5 (m,10H) 1-Ciclopentil-3-(4-metil3-{2-[4-(2-pirrolidin-1-iletoxi)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)urea 7

154: N N N HN N H O F OH2N F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,4 (s, 1H), 9,84 (s, 1H), 8,42-8,24 (m, 3H), 8,02-7,72 (m, 5H), 7,62 (s, 1H), 7,52-7,44 (m, 1H), 7,28-7,10 (m, 4H), 4,0 (s, 2H), 3,3-3,2 (t,2H), 3,05-2,95 (t, 2H), 2,4 (s, 3H) EM: m/z 547,1 (M+1) 4-{6-[2-Metil-5-(3trifluorometilbenzoilamino)-fenil]5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2ilamino}-benzamida 2

155: N N N HN N H O N O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,13 (s, 1H), 7,52-7,46 (m, 3H), 7,20-7,12 (m, 2H), 7,04-6,86 (m, 4H), 4,12 (t, 2H), 4,0 (s, 2H), 3,27 (t, 2H), 3,05-2,89 (m, 4H), 2,7-2,6 (m, 3H), 2,32-2,28 (m, 4H), 1,85-1,80 (m, 3H), 1,3-1,2 (m, 6H) EM: m/z 583,2 (M+1) 4,4,4-Trifluoro-3-metilN-(4-metil-3-{2-[4-(2pirrolidin-1-il-etoxi)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 1

156: N N N HN N H N N O N H N Br RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,58,3(s ancho, 1H), 7,8-7,6 (m, 3H), 7,5-6,94 (m, 7H), 3,9-3,5 (m, 8H), 3,3-3,2 (m,4H), 3,1 (s, 3H), 2,3 (s, 3H) 6-[5-(5-Bromo-1Hbenzoimidazol-2ilamino)-2-metil-fenil]-2[4-(4-metil-piperazin-1il)-fenilamino]-7,8dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona 10

157: N N N HN N H O N H F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 7,98 (s, 1H), 7,6-7,06 (m, 8H), 6,84 (d, 1H), 5,1-5,0 (m, 1H), 3,85 (s, 2H), 3,2-2,8 (m, 7H), 2,22 (s, 3H) EM: m/z 457,1 (M+1) 1-[4-Metil-3-(2metilamino-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-3(3-trifluorometil-fenil)urea 7

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

158: N N N HN N H O N F O N F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 11 (s, 1H), 10,0 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 8,00 (s, 2H), 8,04 (s, 1H), 7,82 (t, 2H), 7,72-7,55 (m, 2H), 7,3 (d, 1H), 6,92 (d, 2H), 4,05-3,90 (m, 1H), 3,80-3,69 (m, 1H), 3,3-3,0 (m, 6H), 2,5-2,4 (m, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,17 (s, 3H) 2-Fluoro-N-(4-metil-3{2-[4-(4-metil-piperazin1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-fenil)-5-trifluorometilbenzamida 3

O: F F RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,43 (s, 1H), 10,2 (s, 1H), 8,42 (s, N-{3-[2-(4-Metanosulfonil

159: N N N HN N H S O O F 1H), 8,32-8,24 (m, 2H), 8,06-7,94 (m, 3H), 7,82-7,76 (m, 3H), 7,66-7,62 (m, 1H), 7,48 (dd, 1H), 7,21 (d, 1H), 4,05 (s, 2H), 3,26 (t, 2H), 3,14 (s, 3H), 3,00 (t, 2H), 2,27 (s, 3H) fenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilfenil}-3-trifluorometilbenzamida 2

160: N N N HN N H O O N N F F F RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,16 (s, 1H), 7,58-7,52 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,20-7,14 (m, 2H), 6,94-6,89 (m, 2H), 4,15 (t, 2H), 4,00 (s, 2H), 3,29 (t, 2H), 2,96 (t, 2H), 2,84 (t, 2H), 2,72 (dd, 2H), 2,7-2,5 (m,8H), 2,45-2,35 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 1,2 (d, 3H) 4,4,4-Trifluoro-3-metilN-[4-metil-3-(2-{4-[2-(4metil-piperazin-1-il)etoxi]-fenilamino}-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]butiramida 1

161: N N N HN N H O N N O F Br RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,45 (s, 1H), 10,0 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 8,32 (s, 2H), 8,04 (s, 1H), 7,82 (t, 2H), 7,72-7,55 (m, 3H), 7,3 (d, 1H), 6,92 (d, 2H), 4,05-3,92 (m, 1H), 3,803,69 (m, 1H), 3,3-3,0 (m, 6H), 2,5-2,4 (m, 4H), 2,23 (s, 3H), 2,17 (s, 3H) EM: m/z 644,0 (M+1) 3-Bromo-5-fluoro-N-(4metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)benzamida 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

162: N N N HN Cl N H O N N O F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,7 (s, 1H), 10,09 (s, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,34-8,24 (m, 2H), 8,04-7,93 (m, 2H), 7,86-7,76 (m, 2H), 7,66-7,56 (m, 3H), 6,92 (d, 2H), 4,00-3,78 (m, 2H), 3,153,00 (m, 6H), 2,5-2,4 (m, 4H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 635,7 (M+1) N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

163: N N N HN N H O S O O O F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,75 (s, 1H), 10,55 (s, 1H), 8,92 (s, 1H), 8,35-8,25 (m, 2H), 8,1 (d, 2H), 8,05-7,63 (m, 6H), 7,35 (d, 1H), 4,144,00 (m, 1H), 3,88-3,76 (m, 1H), 3,23,1 (m, 5H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 596,0 (M+1) N-{3-[2-(4-Metanosulfonilfenilamino)-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilfenil}-3-trifluorometilbenzamida 4

164: N N N HN N H O O N N F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,16 (s, 1H), 7,76-7,64 (m, 3H), 7,46-7,32 (m, 3H), 7,22-7,08 (m, 3H), 3,92 (s, 2H), 3,7-3,6 (m, 5H), 3,2 (t, 2H), 3,0 (t, 2H), 2,75-2,55 (m, 4H), 2,54-2,13 (m, 10H) EM: m/z 582,2 (M+1) 4,4,4-Trifluoro-N-(4metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)butiramida 2

165: N N N HN N H O SHN O O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,25 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 8,1 (d, 1H), 7,957,80 (m, 7H), 7,75-7,60 (m, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,28-7,12 (m, 2H), 4,88 (s, 1H), 4,1 (s, 2H), 3,3 (t, 2H), 3,08 (t, 2H), 2,32 (s, 3H), 0,70-0,55 (m, 4H) EM: m/z 623,1 (M+1) N-{3-[2-(4-Ciclopropilsulfamoilfenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilfenil}-3-trifluorometilbenzamida 1

166: N N N HN N H O N N N O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,1 (s, 1H), 9 (s,1H), 8,45-8,35 (s, 1H), 8,2 (s, 1H), 8,15-8,05 (d, 1H), 7,9-7,5 (m, 4H), 7,45-7,25 (m, 2H), 7,15-7,0 (d, 1H), 6,75-6,65 (d, 1H), 4,1-3,85 (m, 1H), 3,8-3,65 (m, 1H), 3,15-3 (m, 2H), 2,6-2,5 (t, 4H), 2,35 (s, 3H), 1,75 (s, 3H) EM: m/z 617,4 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 4trifluorometil-piridina-2carbox�lico 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

167: N N N HN N H O N F F F O N N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,9 (s, 1H), 8,82 (d, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,75-7,68 (m, 3H), 7,46-7,38 (m, 2H), 7,32-7,20 (m, 3H), 4,11 (s, 2H), 3,85-3,50 (m, 4H), 3,34 (t, 2H), 3,06 (t, 2H), 2,52-2,20 (m, 10H) EM: m/z 631,3 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 4trifluorometil-piridina-2carbox�lico 2

168: N N N HN N N H O F F F O NH O RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,7 (s, 1H), 10,58 (s, 1H), 9,06 (d, 1H), 8,91 (s, 1H), 8,6 (d, 1H), 8,42 (dd, 1H), 8,15 (d, 2H), 8,04-7,9 (m, 3H), 7,79-7,75 (m, 1H), 7,54 (dd, 1H), 7,32 (d, 1H), 4,11-3,98 (m, 1H), 3,85-3,72 (m, 1H), 3,22-3,10 (m, 1H), 2,95-2,82 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 0,25-0,10 (m, 5H) EM: m/z 602,2 (M+1) Ciclopropilamida del ácido 5-{6-[2-metil-5-(3trifluorometilbenzoilamino)-fenil]-5oxo-5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2ilamino}-piridina-2carbox�lico 4

169: N N N HN N H O F F F NN O RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,9 (s, 1H), 8,30-8,20 (m, 2H), 7,99 (s, 1H), 7,91 (d, 1H), 7,84-7,72 (m, 5H), 7,62 (dd, 1H), 7,54 (d, 2H), 7,36 (d, 1H), 4,23 (q, 2H), 4,15-4,05 (m, 1H), 3,933,85 (m, 1H), 3,23-3,13 (m, 2H), 2,30 (s, 3H), 1,50 (t, 3H) N-(3-{2-[4-(1-Etil-1Hpirazol-4-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il}-4-metil-fenil)-3trifluorometilbenzamida 4

170: N N N HN N H O N F F F O N O N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,99 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,82 (d, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,84 (d, 1H), 7,79-7,70 (m, 3H), 7,64-7,54 (m, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,34 (d, 1H), 4,15-4,04 (m, 1H), 3,903,80 (m, 5H), 3,35-3,10 (m, 2H), 2,502,25 (m, 10H) EM: m/z 645,2 (M+1) (4-Metil-3-{2-[4-(4-metilpiperazina-1-carbonil)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)amida del ácido 4trifluorometil-piridina-2carbox�lico 4

171: N N N HN Cl N H O F F F O N N RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,65 (s, 1H), 9,08 (s, 1H), 8,26-8,10 (m, 2H), 7,9-7,7 (m, 2H), 7,65-7,45 (m, 3H), 7,23 (d, 1H), 7,1 (d, 1H), 4,0-3,8 (m, 2H), 3,40-3,05 (m, 10H), 2,9 (s, 3H), 2,34 (s, 3H) EM: m/z 650,3 (M+1) N-(4-Cloro-3-{2-[3metil-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

172: N N N HN Cl N H OO N N F F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,7 (s, 1H), 9,1 (s, 1H), 8,26-8,10 (m, 2H), 7,9-7,7 (m, 3H), 7,65-7,45 (m, 3H), 7,23 (d, 1H), 7,1 (d, 1H), 4,0-3,8 (m, 2H), 3,40-3,05 (m, 10H), 2,34 (s, 3H) EM: m/z 655,2 (M+1) N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3fluoro-5-trifluorometilbenzamida 3

173: N N N HN N H O N O N N O F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 10,1 (s, 1H), 9,5 (s, 1H), 8,9 (d, 1H), 8,52 (s, 1H), 7,84 (d, 1H), 7,79-7,70 (m, 3H), 7,64-7,54 (m, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,34 (d, 1H), 4,15-4,04 (m, 1H), 3,90-3,80 (m, 5H), 3,35-3,10 (m, 2H), 2,50-2,25 (m, 10H) N-(4-Metil-3-{2-[6-(4metil-piperazina-1carbonil)-piridin-3ilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 4

174: N N N HN Cl N H O N N F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,38,18 (m, 3H), 8,0-7,88 (d, 1H), 7,8-7,7 (m, 2H), 7,6-7,4 (m, 4H), 7,1-6,9 (m, 2H), 4,18 (s, 2H), 3,5-3,4 (t, 2H), 3,23,14 (t, 4H), 3,05-2,95 (t, 2H), 2,7-2,6 (t, 4H), 2,38 (s, 3H) EM: m/z 623,2 (M+1) N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1-il)fenilamino]-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 1

175: N N N HN N H O N N OH O F F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,75 (s, 1H), 8,34-8,24 (m, 2H), 8,0 (d, 1H), 7,83-7,56 (m, 5H), 7,32 (d, 1H), 6,92 (d, 2H), 4,45 (t, 2H), 4,05-3,92 (m, 1H), 3,8-3,7 (m, 1H), 3,53 (q, 2H), 3,12-3,04 (m, 6H), 2,5-2,4 (m, 4H), 2,2 (s, 3H) EM: m/z 646,1 (M+1) N-[3-(2-{4-[4-(2-Hidroxietil)-piperazin-1-il]fenilamino}-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-4-metilfenil]-3-trifluorometilbenzamida 3

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

176: N N N HN Cl N H O F O NH F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,48,18 (m, 3H), 7,94-7,7 (m, 7H), 7,57,4 (m, 2H), 4,22 (s, 2H), 3,5 (t, 2H), 3,12-3,04 (t, 2H), 2,92 (s, 3H) EM: m/z 581,2 (M+1) N-{4-Cloro-3-[2-(4metilcarbamoilfenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-5trifluorometilbenzamida 2

177: N N N HN Cl N H O F O NH F F F RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 10,6 (s, 1H), 9,9 (s, 1H), 8,4 (s, 1H), 8,37,94 (m, 4H), 7,9-7,7 (m, 5H), 7,6-7,4 (m, 2H), 4,22 (s, 2H), 3,4 (t, 2H), 3,0 (t, 2H), 2,8-2,7 (d, 3H) EM: m/z 599,1 (M+1) N-{4-Cloro-3-[2-(4metilcarbamoilfenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3fluoro-5-trifluorometilbenzamida 2

178: N N N HN N H O F N O N H F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,15 (s, 1H), 9,04 (s, 1H), 8,25-8,10 (m, 2H), 7,73 (d, 1H), 7,65-7,50 (m, 4H), 7,427,33 (m, 2H), 7,0 (dd, 3H), 4,00-3,87 (m, 1H), 3,80-3,67 (m, 1H), 3,2-3,0 (m, 11H), 1,75 (s, 3H) EM: m/z 602,2 (M+1) N-{4-Metil-3-[5-oxo-2(4-piperazin-1-ilfenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 3

179: N N N HN Cl N H O N F O NH F F RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 11,0 (s, 1H), 8,9 (s, 1H), 9,05 (d, 1H), 8,42-8,36 (m, 2H), 8,25 (d, 1H), 8,158,10 (m, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,90-7,82 (m, 2H), 7,80-7,72 (m, 3H), 7,48 (d, 1H), 4,17 (s, 2H), 3,04-2,96 (m, 2H), 2,76 (d, 3H), 2,5 (s, 3H) EM: m/z 582,0 (M+1) {4-Cloro-3-[2-(4metilcarbamoilfenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-fenil}amida del ácido 4trifluorometil-piridina-2carbox�lico 2

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

180: N NHN O N N N N H OO F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,139,00 (m, 2H), 8,22-8,10 (m, 2H), 7,75 (d, 1H), 7,65-7,50 (m, 4H), 7,42-7,35 (m, 2H), 7,08 (d, 1H), 6,94 (d, 2H), 4,04 (t, 3H), 3,80-3,68 (m, 1H), 3,163,10 (m, 2H), 2,6-2,4 (m, 10H), 2,3 (s, 3H), 2,05-1,92 (m, 2H),1,8 (s, 3H) EM: m/z 674,3 (M+1) N-[4-Metil-3-(2-{4-[3-(4metil-piperazin-1-il)propoxi]-fenilamino}-5oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin-6il)-fenil]-3-trifluorometilbenzamida 3

181: N NHN O N N Cl N H OO F F F RMN 1H (400 MHz, CD3OD) δ 8,9 (s, 1H), 8,30-8,20 (m, 2H), 8,05-7,95 (d, 2H), 7,95-7,9 (m, 1H), 7,8-7,65 (m, 4H), 7,65-7,55 (m, 1H), 7,1-7,00 (m, 2H), 4,35 (t, 2H), 4,1-3,9 (s, 2H), 3,73,6 (t, 2H), 3,5-3,4 (s ancho, 4H), 3,33,1 (m, 2H), 2,2-2,1 (m, 4H) N-(4-Cloro-3-{5-oxo-2[4-(2-pirrolidin-1-iletoxi)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

182: N NHN O N O N N H OO F F F RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,19,00 (m, 2H), 8,3-8,10 (m, 2H), 7,75 (d, 1H), 7,65-7,50 (m, 4H), 7,42-7,35 (m, 2H), 7,08 (d, 1H), 6,94 (d, 2H), 4,04 (t, 3H), 3,80-3,68 (m, 1H), 3,163,10 (m, 2H), 2,6-2,4 (m, 6H), 2,3 (s, 3H), 2,05-1,92 (m, 2H) EM: m/z 661,2 (M+1) N-(4-Metil-3-{2-[4-(3morfolin-4-il-propoxi)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

183: N NHN Cl N H N O CF3 RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,26 (s, 1H), 8,19-8,12 (m, 1H), 7,98-7,92 (m, 1H), 7,79-7,74 (m, 1H), 7,72-7,61 (m, 3H), 7,55 (t, 1H), 7,45-7,36 (m, 2H), 7,34-7,25 (m, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,4-3,32 (m, 2H), 3,05 (t, 2H), 2,42 (s, 3H) EM: Calculado: m/z 538,1 (M+1)+ 3-[2-(4-Clorofenilamino)-7,8-dihidro5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il]-4-metilN-(3-trifluorometil-fenil)benzamida 5

N�: Estructura Datos físicos [RMN 1H y/o EM] Nombre IUPAC Ej.

184: N NHN N N O O HN HN CF3 RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,0 (s, 1H), 9,1 (s, 1H), 8,8 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,7-7,45 (m, 6H), 7,35-7,25 (m, 3H), 6,95-6,85 (d, 2H), 4-3,9 (t, 2H), 3,22-3,0 (m, 6H), 2,6-2,5 (m, 4H), 2,25 (s, 3H) EM: m/z 617,2 (M+1) 1-(4-{2-[4-(4-Metilpiperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il}-fenil)-3(3-trifluorometil-fenil)urea 8

N

185: RMN 1H (400 MHz, CDCl3) δ 9,6-9,4 (s, 1H), 9,2-9,0 (s, 1H), 8,3-8,04 (m, 2H), 7,96-7,84 (s ancho, 1H), 7,84-7,7 (d, 1H), 7,7-7,5 (m, 3H), 7,5-7,38 (m, 2H), 7,28-7,2 (d, 1H), 7,04-6,88 (d, 2H), 6,74-6,6 (s ancho, 1H), 4,5 (s, 2H), 4-3,75 (m, 2H), 3,35-3 (m, 2H), 2,9-2,7 (m, 1H), 0,95-0,8 (m, 2H), 0,70,55 (m, 2H) Masa: 651,00 = [M+1] + N-{4-Cloro-3-[2-(4(ciclopropilcarbamoil metoxi)fenilamino)-5oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin6-il]-fenil}-3trifluorometilbenzamida 3

186: RMN 1H (400 MHz, DMOS-d6) δ 10,7 (s, 1H), 10,2 (s, 1H), 8,82 (s, 1H), 8,38-8,24 (m, 2H), 8,04-7,92 (m, 2H), 7,88-7,78 (m, 2H), 7,78-7,7 (m, 2H), 7,68-7,58 (d, 1H), 7,3-7,2 (d, 2H), 4,05-3,8 (m, 2H), 3,4 (s, 2H), 3,253,05 (m, 2H), 2,45-2,1 (m, 11H) Masa: 650,00 = [M+1] + N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4metil-piperazin-1ilmetil)-fenilamino]-5oxo-7,8-dihidro-5Hpirido[4,3-d]pirimidin6-il}-fenil)-3trifluorometilbenzamida 3

De acuerdo con la presente invención, se producen sales farmac�uticamente aceptables a partir de compuestos ácidos inorgánicos u orgánicos, o compuestos alcalinos inorgánicos u orgánicos. Como se usa en la presente memoria, la frase "sal farmac�uticamente aceptable" se refiere a una sal que retiene la eficacia biológica de los

5 ácidos y bases libres de un compuesto especificado y que no es indeseable biol�gicamente o de otro modo.

Una sal deseada puede prepararse por cualquier método adecuado conocido en la técnica, incluyendo el tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico, ácido bromh�drico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosf�rico y similares, o con un ácido orgánico, tal como ácido f�rmico, ácido acético, ácido maleico, ácido succ�nico, ácido mand�lico, ácido maleico, ácido fum�rico, ácido mal�nico, ácido pir�vico, ácido ox�lico, ácido

10 glic�lico, ácido salicílico; un ácido piranosid�lico, tal como ácido glucur�nico o ácido galactur�nico; un alfahidroxi�cido, tal como ácido cítrico o ácido tartárico; un amino�cido, tal como ácido asp�rtico o ácido glut�mico; un ácido aromático, tal como ácido benzoico o ácido cin�mico; un ácido sulf�nico, tal como ácido metanosulf�nico, ácido p-toluenosulf�nico o ácido etanosulf�nico; o similares.

En general, las sales se preparan haciendo reaccionar la base libre con cantidades estequiom�tricas o con un

15 exceso del ácido inorgánico u orgánico formando la sal deseada en un disolvente adecuado o varias combinaciones de disolventes. Por ejemplo, la base libre puede disolverse en una solución acuosa mixta del ácido adecuado y la sal recuperada por técnicas estándares, por ejemplo, por evaporación de la solución. Alternativamente, la base libre puede ser cargada en un disolvente orgánico, tal como un alcanol inferior, �teres simétricos o asimétricos que contienen de 2 a 10 átomos de carbono, un éster de alquilo o sus mezclas y similares, y después tratada con el ácido adecuado para formar la sal correspondiente. La sal se recupera por técnicas de recuperación estándares, por ejemplo, por filtración de la sal deseada de la mezcla, o se puede precipitar por la adición de un disolvente en el que la sal sea insoluble y del que se pueda recuperar.

Los ejemplos de disolventes inorgánicos y orgánicos para llevar a cabo las varias reacciones incluyen cualquier disolvente inorgánico u orgánico que no afecte adversamente a los reaccionantes o al producto resultante, incluyendo disolventes halogenados, tales como cloruro de metileno, cloroformo, disolventes de éter, tales como éter diet�lico y otros disolventes, tales como tetrahidrofurano, dioxano, diglima, ciclooctano, benceno o tolueno, heptano, ciclohexano, disolventes hidrocarbonados alif�ticos as� como también cicloalif�ticos y aromáticos, agua, soluciones acuosas acidificadas, soluciones orgánicas e inorgánicas mixtas, acetato de etilo, acetato de propilo y sus mezclas.

Tambi�n se pueden utilizar sales alcalinas de amino�cidos. El término "amino�cidos" designa, de acuerdo con la invención, en particular los [alfa]-amino�cidos de origen natural, pero además también incluye sus homólogos, isómeros y derivados. Se pueden mencionar enanti�meros como un ejemplo de isómeros. Los derivados pueden ser, por ejemplo, amino�cidos provistos con grupos protectores. Los amino�cidos alcalinos preferidos son: arginina, ornitina, ácido diaminobut�rico, lisina o hidroxi-lisina y especialmente L-arginina, L-lisina o L-hidroxi-lisina; un dip�ptido alcalino o un derivado de amino�cido alcalino farmac�uticamente aceptable.

Los compuestos de la presente invención contienen al menos un centro quiral y por lo tanto pueden existir en diferentes formas enanti�meras. Si bien en particular los compuestos preferidos son enantiom�ricamente puros, se pretende que el alcance de la presente invención cubra ambos enanti�meros per se, as� como también sus mezclas en cualquier proporción, tal como mezclas rac�micas.

Tambi�n se pueden obtener compuestos enantiom�ricamente puros de la presente invención a partir de sus racematos por cristalización de sus sales de adición con ácidos quirales (D.L. Minor et al. J. Med. Chem. 37 (1994) 4317-4328; Patente de Estados Unidos 4349472), o alternativamente se pueden aislar por HPLC preparativa usando fases quirales comercialmente disponibles. Otras vías para obtener los enanti�meros puros de compuestos de la presente invención son el uso de síntesis asimétrica (M.J. Munchhof et al. J. Org. Chem. 60(1995) 7086-7087; R.P. Polniaszek et al. Tetrahedron Letters 28 (1987) 4511-4514), la hidrogenación por transferencia asimétrica de las iminas (II) o sales de iminio (III) intermedias (N. Uematsu et al. J. Am. Chem. Soc. 118 (1996) 4916-4917; G. Meuzelaar et al. Eur. J. Org. Chem. 1999, 2315-2321) o la resolución de sus derivados diastereois�meros, como es conocido por los expertos en la técnica.

La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende el compuesto de la presente invención y al menos un excipiente, vehículo o diluyente farmac�uticamente aceptable.

Una composición farmacéutica de la invención se formula para ser compatible con su vía de administración pretendida, que es preferiblemente la administración oral. Por ejemplo, las composiciones farmacéuticas de la invención pueden formularse para administración por inhalaci�n, tal como aerosoles o polvos secos; para administración oral, tal como en forma de comprimidos, cápsulas, geles, jarabes, suspensiones, soluciones, polvos o gránulos; para administración rectal o vaginal, tal como supositorios; o para inyección parenteral (incluyendo intravenosa, subcutánea, intramuscular, intravascular o infusión), tal como una solución, suspensión o emulsión estéril.

Los compuestos de la presente invención y sus sales farmac�uticamente aceptables, cuando sean aplicables, pueden administrarse en forma de una composición farmacéutica en la que est�n en asociación con un excipiente, vehículo o diluyente farmac�uticamente aceptable, para tratar cualquier trastorno inducido por STAT3. En cuanto a los excipientes, vehículos o diluyentes adecuados se puede hacer referencia a la bibliografía estándar que los describe, por ejemplo al capítulo 25.2 del Vol. 5 de "Comprehensive Medicinal Chemistry", Pergamon Press 1990 y a "Lexikon der Hilfsstoffe f�r Pharmazie, Kosmetik und angrenzende Gebiete", de H.P. Fiedler, Editio Cantor, 2002 (en alemán).

Los compuestos de la presente invención también pueden ser atrapados en microc�psulas preparadas, por ejemplo, por técnicas de coacervaci�n o por polimerizaci�n interfacial, por ejemplo, hidroximetilcelulosa o microc�psulas de gelatina y microc�psulas de poli(metacrilato de metilo), respectivamente, en sistemas de administración de fármacos coloidales (por ejemplo, liposomas, microesferas de albúmina, microemulsiones, nanopart�culas y nanoc�psulas) o en macroemulsiones. Tales técnicas est�n descritas en Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).

Se pueden preparar preparaciones de liberación prolongada. Los ejemplos de preparaciones de liberación prolongada incluyen matrices semipermeables de pol�meros hidrófobos sólidos que contienen los compuestos de la presente invención, estando dichas matrices en forma de artículos conformados, por ejemplo, películas o microc�psulas. Los ejemplos de matrices de liberación prolongada incluyen poli�steres, hidrogeles (por ejemplo, poli(metacrilato de 2-hidroxietilo) o poli(alcohol vin�lico)), polilactidas (Patente de Estados Unidos N� 3.773.919), copol�meros de ácido L-glut�mico y [gamma] L-glutamato de etilo, copol�meros de etileno-acetato de vinilo no degradables, copol�meros de ácido l�ctico-ácido glic�lico degradables, tal como LUPRON DEPOT(TM) (microesferas inyectables compuestas de copol�mero de ácido l�ctico-ácido glic�lico y acetato de leuprolida) y ácido poli-D-(-)-3hidroxibut�rico.

Las composiciones farmacéuticas de la invención comprenderán preferiblemente de 0,001 a 50% en peso del compuesto de la presente invención.

La dosis diaria de los compuestos de la presente invención variar� necesariamente dependiendo del hospedante tratado, la vía de administración particular y la gravedad y tipo de la enfermedad bajo tratamiento. Por consiguiente, la dosis óptima puede ser determinada por el profesional a cargo del tratamiento del paciente particular.

Las composiciones farmacéuticas pueden incluirse en un envase, paquete o dispensador, junto con instrucciones para su administración.

Los compuestos de la presente invención tiene la ventaja inesperada de presentar cualquiera de:

-: una inhibición de la fosforilaci�n de STAT3 por transferencia de Western en células que tiene preferiblemente una CI50 ≤ 500 nM, más preferiblemente ≤ 400 nM e incluso más preferiblemente ≤ 300 nM;

-: en un modelo de xenoinjerto establecido por el uso de A431 y A549 (líneas celulares positivas a STAT3), una inhibición del crecimiento (>60%) de tumores establecidos a una dosis inferior a MTD con clara respuesta a la dosis (con la dosis más elevada próxima a MTD) y una inhibición de la fosforilaci�n de STAT3 en tumores.

Los compuestos de la invención representan compuestos que muestran un compromiso sorprendentemente bueno entre estos tres criterios. Los compuestos preferidos de la invención son compuestos que cumplen al menos uno, preferiblemente al menos dos e idealmente los tres criterios enumerados anteriormente.

Otra ventaja de los compuestos de la presente invención es su baja selectividad e inhibición para JAK3 y/o TYK2. Preferiblemente, la inhibición de JAK3 y/o TYK2 es 200 veces menor en comparación con la inhibición para c-SRC, JAK2 y/o JAK1.

La familia Src de quinasas (“SFK”) tiene múltiples sustratos que conducen a diversos efectos biológicos que incluyen cambios en la proliferaci�n, motilidad, invasión, supervivencia y angiog�nesis. El papel de SFK en la iniciación y/o progresión del cáncer se ha demostrado en cáncer de colon, cáncer de páncreas, cáncer de mama, cáncer de pulmón de células no pequeñas (NSCLC), carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (HNSCC), cáncer de pr�stata, otros tumores sólidos, numerosas neoplasias malignas hematol�gicas, cáncer hepático, ciertas leucemias y linfomas de linfocitos B. Talamonti et al., J. Clin. Invest., 91, 53 (1993); Lutz et al., Biochem. Biophys. Res. 243, 503 (1998); Rosen et al., J. Biol. Chem., 261, 13754 (1986); Bolen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 2251 (1987); Masaki et al., Hepatology, 27, 1257 (1998); Biscardi et al., Adv. Cancer Res., 76, 61 (1999); y Lynch et al., Leukemia, 7, 1416 (1993). Los métodos y composiciones descritos en la presente memoria pueden utilizarse en uno o más c�nceres o trastornos de carcinoma.

Una “tirosina quinasa” es una enzima que transfiere un grupo fosfato desde ATP a un residuo de tirosina en una proteína. Las tirosina quinasas son un subgrupo de la clase más extensa de proteína quinasas. Fundamentalmente, una proteína quinasa es una enzima que modifica una proteína por la adición química de grupos fosfato a un grupo funcional hidroxilo o fen�lico. Tal modificación da como resultado frecuentemente un cambio funcional en la proteína

o sustrato diana alterando la estructura, actividad, localización o asociación celular de la enzima con otras proteínas. Químicamente, la quinasa retira un grupo fosfato de ATP y lo une covalentemente a uno de los tres amino�cidos (serina, treonina o tirosina) que tienen un grupo hidroxilo libre. Muchas quinasas actúan tanto sobre serina como treonina y algunas otras sobre tirosina. También existe un número de quinasas que actúan sobre estos tres amino�cidos.

Las tirosina quinasas se dividen en dos grupos: proteínas citopl�smicas y quinasas receptoras transmembranales. En seres humanos, existen 32 tirosina quinasas de proteínas citopl�smicas y 48 tirosina quinasas de proteínas unidas a receptores.

En general, las tirosina quinasas juegan papeles críticos en la se�alizaci�n entre células. Básicamente, la activación de receptores de superficie celular (por ejemplo, el receptor del factor de crecimiento epid�rmico (EGF)) por ligandos extracelulares da como resultado la activación de tirosina quinasas. Luego, la tirosina quinasa genera residuos de fosfotirosina en la célula. El residuo de fosfotirosina actúa como una "baliza" y atrae proteínas de se�alizaci�n al receptor vía los dominios SH2. Por lo tanto, un aspecto importante del mecanismo de se�alizaci�n de una tirosina quinasa es el reconocimiento de la fosfotirosina por los dominios SH2 (también denominados en la presente memoria dominio de homología 2 a Src u homología-2 a Src).

En general, las quinasas son enzimas que se sabe que regulan la mayoría de las vías celulares, en especial las vías involucradas en la transducci�n de señales o en la trasmisión de señales dentro de una célula. Dado que las proteína quinasas tienen un efecto profundo sobre una célula, la actividad de quinasas est� altamente regulada. Las quinasas pueden activarse o desactivarse por fosforilaci�n (algunas veces por la cis-fosforilaci�n/autofosforilaci�n de la quinasa propiamente dicha) y por la unión a proteínas activadoras, proteínas inhibidoras o moléculas pequeñas.

La actividad desregulada de las quinasas es una causa frecuente de enfermedad, en particular de cáncer donde las quinasas regulan muchos aspectos que controlan el crecimiento, movimiento y la muerte celular. Por ejemplo, la transformación neopl�sica en la que han estado implicados en el desarrollo de leucemia múltiples defectos genéticos, tales como translocaci�n, mutaciones dentro de onc�genos y similares. Muchos de estos defectos genéticos se han identificado como componentes clave de las vías de se�alizaci�n responsables de la proliferaci�n y diferenciación. La familia Src de quinasas, las "SFK", también se denominan gen transformante (inductor de sarcoma) del virus del sarcoma de Rous. Las SFK son proteínas citopl�smicas con actividad de proteína quinasa de específica de tirosina que se asocian con la cara citopl�smica de la membrana plasm�tica. Silverman L., Sigal C. T., Resh M. D., Binding of pp[delta]Ov-src to Membranes: Evidence for Multiple Membrane Interactions, Biochem Cell Biol 1992 70(10-11):1187-92. Existen 9 quinasas Src en el genoma humano: v-Src, c-Src, Fyn, Yes, Fgr, Lyn, Hck, Lck y BIk. Estas proteínas est�n estrechamente relacionadas entre s� y comparten el mismo mecanismo regulador. Brickell, P. M, The p60c-src Family of Protein-Tyrosine Kinases: Structure, Regulation, and Function, Crit Rev Oncog. 1992; 3(4):401-46. Más específicamente, las quinasas Src son proteínas de 52-62 kD que tienen seis dominios funcionales distintos: SH4 (homología 4 a scr), un dominio único, SH3, SH2, SH1 y una región reguladora Cterminal. Brown, M. T., Cooper, J. A., Regulations, Substrates, and Functions of Src, Biochim. Biophys. Acta. 1996, 1287(2-3): 121-49.

Las “quinasas Src” (en la presente memoria también denominadas: “familia Src de quinasas”, “proteínas Src” y las “SFK”) normalmente se mantienen desactivadas por interacción autoinhibidora entre el módulo de unión a

fosfotirosina (SH2) que est� localizado dentro de la proteína antes del dominio catalítico de quinasa y su fosfotirosina del C-terminal (Tyr 527).

De las numerosas vías STAT, se ha identificado la STAT3 como una proliferaci�n de células mediadoras. La inhibición de las SFK no inhibe duraderamente STAT3. Si bien el inhibidor de SFK puede inhibir inicialmente STAT3, en un período de tiempo breve, STAT3 luego se reactiva y se expresa. Johnson, F.M., Saigal, B., Talpaz, M. and Donate, N.J., Dasatin[iota]b (BMS-354825) Tyrosine Kinase Inhibitor Suppresses Invasion and Induces Cell Cycle Arrest and Apoptosis of Head and Neck Squamous Cell Carcinoma and Non-Small Cell Lung Cancer Cells, Clin. Cancer Res. 11:6924-6932, 2005.

Las proteínas STAT (transductoras de señales y activadoras de la transcripción) son factores de transcripción específicamente activados para regular la transcripción de genes cuando las células encuentran citoquinas y factores de crecimiento. Las proteínas STAT actúan como transductoras de señales en el citoplasma y como activadoras de la transcripción en el núcleo. Kisseleva T., Bhattacharya S., Braunstein J., Schindler C. W., Signaling Through the JAKJSTAT Pathway, Recent Advances and Future Challenges, Gene 285: 1-24 (2002). Las proteínas STAT regulan muchos aspectos del crecimiento, supervivencia y diferenciación celular. Quadros, M. R., Peruzzi, F., Kari, C., and Rodeck, U., Complex Regulation of Signal Transducers and Activators of Transcription 3 Activation in Normal and Malignant Keratinocytes, Cancer Res, 64: 3934-3939, 2004. Los siete miembros de la familia STAT de mamíferos identificados son: STAT1, STAT2, STAT3, STAT4, STAT5a, STAT5b y STAT6.

STAT3 puede activarse por receptores de factores de crecimiento, receptores de citoquinas y tirosina quinasas no receptoras (familia de quinasas Src o JAK). Como se ha descrito, la activación de STAT3 es mediada por EGFR, EPO-R e IL-6 R vía c-Src o JAK2.

La vía JAK-STAT est� regulada negativamente en múltiples niveles. Las tirosina fosfatasas prote�nicas eliminan fosfatos de receptores de citoquina as� como también las STAT activadas, Hebenstreit D. et al., (2005) Drug News Perspect. Vol. 18 (4), pp. 243-249. Más recientemente, se identificaron Supresores de la Se�alizaci�n de Citoquinas (SOCS) que inhiben la fosforilaci�n de STAT por la unión e inhibición de las JAK o por la competición con las STAT por sitios de unión a fosfotirosina sobre receptores de citoquina. Krebs, L. et al., (2001) Stem Cells Vol. 19, pp. 378

387. Las STAT también est�n reguladas negativamente por Inhibidores de Proteína de las STAT Activadas (PIAS), que actúan en el núcleo por medio de varios mecanismos. Shuai, K. (2006) Vol. 16 (2), pp. 196-202. Por ejemplo, PIAS1 y PIAS3 inhiben la activación transcripcional por STAT1 y STAT3 respectivamente por la unión y bloqueo del acceso a las secuencias de DNA que reconocen.

La vía de se�alizaci�n JAK-STAT participa en la regulaci�n de respuestas celulares a citoquinas y factores de crecimiento. Por el empleo de Janus quinasas (JAK) y Transductores de Señales y Activadores de Transcripción (STAT), la vía transduce la señal llevada por estos polip�ptidos extracelulares al núcleo celular, donde las proteínas STAT activadas modifican la expresión de los genes. Si bien las STAT originalmente se descubrieron como dianas de las Janus quinasas, en la actualidad se describe que ciertos estímulos pueden activarlas independientemente de las JAK. D W Leaman, S Pisharody, T W Flickinger, M A Commane, J Schlessinger, I M Kerr, D E Levy, and G R Stark Roles of JAKs in Activation of STATs and Stimulation of c-fos Gene Expression by Epidermal Growth Factor, MoI Cell Biol. 1996 16(1): 369-375. Esta vía juega un papel central en las decisiones del destino de las células principales, regulando los procesos de proliferaci�n, diferenciación y apoptosis celular.

Sin vincularse a ninguna teoría, se encontr� que los compuestos de la presente invención bloquean la vía de se�alizaci�n de STAT3 por la inhibición de los activadores aguas arriba c-SRC y JAK2 involucrados en la activación de STAT3 por la fosforilaci�n del residuo Tirosina 705 de STAT3. También se encontr� que los compuestos de la presente invención eran inhibidores eficaces de JAK1.

Por lo tanto, la presente invención proporciona compuesto que inhiben simultáneamente c-SRC, JAK2 y JAK1. Los compuestos de la presente invención son inhibidores de múltiples dianas de c-SRC, JAK2 y JAK1, y más preferiblemente, inhibidores duales de c-SRC y JAK2.

Se sugiere que la vía de STAT3 tiene un papel crucial en la inducción selectiva y el mantenimiento de un microambiente inflamatorio procarcinog�nico, tanto en el inicio de la transformación maligna como durante la progresión del cáncer. La activación persistente de STAT3 media la propagación de la inflamación promotora de tumores y aumenta la proliferaci�n, supervivencia e invasión de las células tumorales mientras suprime la inmunidad antitumoral (Hua Yu et al.; Nature Reviews, Cancer, Volume 9, Nov. 2009, p.798).

La presente memoria abarca los compuestos de la invención para uso en terapia. Preferiblemente, los compuestos de la invención se utilizan en un método para tratar enfermedades asociadas con la activación de la vía STAT3, por medio de la inhibición de múltiples dianas de c-SRC, JAK2 y JAK1, preferiblemente por medio de la inhibición de múltiples dianas de c-SRC y JAK2.

Otro objeto de la invención es el uso del compuesto o la composición farmacéutica de la invención en la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir enfermedades asociadas con la activación de la vía de STAT3, por medio de la inhibición de múltiples dianas de c-SRC, JAK2 y JAK1, preferiblemente por medio de la inhibición de múltiples dianas de c-SRC y JAK2.

La presente invención proporciona además un método para tratar enfermedades asociadas con la activación de la vía de STAT3, por medio de la inhibición de múltiples dianas de c-SRC, JAK2 y JAK1, preferiblemente por medio de la inhibición de múltiples dianas de c-SRC y JAK2, que comprende administrar a un sujeto que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la invención y/o la composición farmacéutica de la invención.

Preferiblemente, la administración es oral, transd�rmica o parenteral.

Preferiblemente, las enfermedades asociadas con la activación de la vía de STAT3 son cáncer, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades óseas y hematol�gicas.

El cáncer se refiere a tumores sanguíneos o tumores sólidos. Los tumores sanguíneos son mieloma múltiple, leucemias (dependiente de HTLV-1, Eritroleucemia, leucemia miel�gena aguda (AML), leucemia miel�gena crónica (CML), leucemia de linfocitos granulares grandes (LGL)), neoplasias mieloproliferantes y linfomas (relacionado con EBV/de Burkitt, micosis fungoides, linfoma cut�neo de linfocitos T, linfoma no Hodgkin (NHL), linfoma anapl�sico de células grandes (ALCL)). Los tumores sólidos son cáncer de mama, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de páncreas, cáncer de colon, cáncer uterino, cáncer gástrico, cáncer renal, cáncer de vejiga, cáncer de hígado y cáncer de pr�stata.

Alternativamente, las enfermedades est�n asociadas con la activación de c-SRC y/o la activación de JAK1 y/o JAK2.

De acuerdo con otra realización particular de la presente invención, cuando el cáncer es cáncer de mama, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de páncreas, cáncer de colon, cáncer uterino, cáncer gástrico, cáncer renal, cáncer de vejiga, cáncer de hígado y cáncer de pr�stata, el compuesto preferido utilizado en el método para tratar dichas enfermedades se selecciona del grupo que comprende:

trifluorometil-benzamida

Ciclopropilamida del ácido 5-{6-[2-Metil-5-(3-trifluorometil-benzoilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-ilamino}-piridina-2-carbox�lico

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.

De acuerdo con una realización particular de la presente invención, cuando el cáncer es mieloma múltiple, leucemias, neoplasias mieloproliferantes y linfomas, el compuesto preferido utilizado en el método para tratar dichas enfermedades se selecciona del grupo que comprende:

fenil)-3-trifluorometil-benzamida N-{4-Cloro-3-[2-(4-ciclopropilcarbamoilmetoxi-fenilamino)-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]

fenil}-3-trifluorometil-benzamida

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.

Los compuestos antes citados tienen un volumen de distribución muy bajo (Vd en mL/kg) y por lo tanto son más adecuados para tratar tumores sanguíneos, dado que dichos compuestos no penetran o penetran débilmente en los órganos y tejidos.

“Tratamiento” o “tratar” se refieren tanto a tratamiento terapéutico y profiláctico como a medidas preventivas. Los pacientes que necesiten tratamiento incluyen los que ya sufren el trastorno as� como también aquellos a los que hay que prevenir del mismo. Por lo tanto, el sujeto a tratar en la presente invención puede haber sido diagnosticado como portador del trastorno o puede estar predispuesto o ser susceptible al trastorno.

Como se usa en la presente memoria los términos "sujeto" o "paciente" est�n bien reconocidos en la técnica y se utilizan en forma intercambiable en la presente memoria para hacer referencia a un mamífero, incluye perros, gatos, ratas, ratones, monos, vacas, caballos, cabras, ovejas, cerdos, camellos y más preferiblemente seres humanos. En algunas realizaciones, el sujeto es uno que necesita tratamiento o uno afectado de una enfermedad o trastorno. Sin embargo, en otras realizaciones, el sujeto puede ser uno normal o uno que ya haya experimentado una terapia estándar contra el cáncer, tal como quimioterapia estándar, radioterapia estándar, terapia o cirugía dirigidas. El término no denota edad ni sexo particular. Por lo tanto, se pretende que cubra sujetos adultos y recién nacidos, machos y hembras.

El término “cantidad terapéuticamente eficaz” se refiere a una cantidad de un fármaco eficaz para tratar una

enfermedad o trastorno en un sujeto. En el caso de cáncer, la cantidad terapéuticamente eficaz del fármaco puede reducir el número de células cancerosas; reducir el tamaño del tumor; inhibir (es decir, desacelerar en cierta medida y preferiblemente detener) la infiltración de las células cancerosas en los órganos periféricos; inhibir (es decir, desacelerar en cierta medida y preferiblemente detener) la metástasis tumoral; inhibir, en cierta medida, el crecimiento tumoral; inhibir, en cierta medida, la angiog�nesis tumoral; inhibir, en cierta medida, en el caso de un tumor de origen epitelial (carcinoma) la transición epitelial a mesenquimal; inhibir, en cierta medida, el crecimiento de las células madre cancerosas; aumentar, en cierta medida, la respuesta inmunitaria contra el tumor; y/o aliviar, en cierta medida, uno o más de los síntomas asociados con el cáncer. En la medida en que el fármaco pueda prevenir el crecimiento y/o eliminar las células cancerosas existentes, puede ser citost�tico y/o citot�xico. La frase “cantidad terapéuticamente eficaz” se utiliza en la presente memoria para significar una cantidad suficiente para prevenir, o

preferiblemente reducir en al menos aproximadamente 30%, preferiblemente en al menos 50%, preferiblemente en al menos 70%, preferiblemente en al menos 80%, preferiblemente en al menos 90%, un cambio cl�nicamente significativo en el crecimiento o progresión o en la actividad mit�tica de una masa celular diana, grupo de células cancerosas o tumor, u otra característica patológica.

Opcionalmente, los compuestos de la presente invención pueden utilizarse contra enfermedades proliferantes de células en combinación con tratamientos convencionales, tales como irradiación y/o uno o más agentes quimioterap�uticos, tales como Actinomicina, Altretamina, Bleomicina, Busulf�n, Capecitabina, Carboplatino, Carmustina, Clorambucilo, Cisplatino, Cladribina, Crisantaspasa, Ciclofosfamida, Citarabina, Dacarbazina, Daunorubicina, Doxorubicina, Epirubicina, Etop�sido, Fludarabina, Fluorouracilo, Gemcitabina, Idarubicina, Ifosfamida, Irinotec�n, Lomustina, Melfal�n, Mercaptopurina, Metotrexato, Mitomicina, Mitoxantrona, Oxaliplatino, Pentostatina, Procarbazina, Estreptozocina, Taxol, Temozolomida, Tiotepa, Tioguanina, Topotec�n, Treosulf�n, Vinblastina, Vincristina, Vindesina o Vinorelbina.

Opcionalmente, los compuestos de la presente invención pueden utilizarse contra enfermedades proliferantes de células en combinación con otras terapias dirigidas, incluyendo otros inhibidores de quinasas.

Adem�s, los materiales, métodos y ejemplos son solamente ilustrativos y no se pretende que sean limitativos.

La descripción precedente se comprender� más completamente con referencia a los siguientes Ejemplos. Sin embargo, tales Ejemplos son representativos de métodos de práctica de la presente invención y no se pretende que limiten el alcance de la invención.

Ejemplos

La presente invención es ejemplificada además, pero no limitada, por los siguientes ejemplos que ilustran la preparación de compuestos de acuerdo con la invención.

Los siguientes compuestos sirven como bloques de construcción comunes para los esquemas generales de síntesis:

1)

3-Dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)piperidin-4-ona [4]

Una mezcla de 2,2’-bis(difenilfosfino)1,1’-binaftilo [BINAP] (54,35 mg, 0,085 mmol) y acetato de paladio(II) [Pd(OAc)2] (6,95 mg, 0,028 mmol) en tolueno seco (3 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. A esto, se añadieron 14-dioxa-8-aza-espiro[4.5]-decano (100 mg, 0,699 mmol), 2-bromo-1-metil-4-nitro-benceno (181,29 mg, 0,839 mmol) y carbonato de cesio seco (683,5 mg, 2,097 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y se reunieron los dos extractos orgánicos. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente proporcion� 8-(2-metil-5-nitro-fenil)-1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]decano [2] en forma de un sólido amarillo [Rendimiento: 193 mg, 82,7%].

A una solución de 8-(2-metil-5-nitro-fenil)-1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]decano [50 mg, 0,179 mmol] en THF (1 mL) se a�adi� 1 mL de H2SO4 al 10% (acuoso). La mezcla de reacción se calentó a 60�C durante 6 horas y luego se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa acuosa se extrajo dos veces más con acetato de etilo y las fracciones orgánicas reunidas se lavaron con agua, salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio) y se filtraron. El filtrado se concentr� para dar el compuesto deseado, es decir, 1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidin-4-ona [3] en forma de un líquido viscoso pardo. [Rendimiento: 37,5 mg, 89,2%]. El compuesto obtenido se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional.

Una solución de 1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidin-4-ona [100 mg, 0,426 mmol] en acetal dimet�lico de N,Ndimetilformamida (DMA.DMF) [1 mL] se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentr� a vacío. El producto en bruto pardo oscuro obtenido se purificó adicionalmente por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 30-60%/hexano como eluyente para obtener el producto deseado puro, es decir, 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidin-4-ona [4] en forma de un sólido anaranjado [Rendimiento: 76,2 mg, 62,02%].

RMN 1H (300 MHz, CDCl3): δ 7,9 (m, 1H), 7,8 (d, 1H), 7,6 (s,1H), 7,3 (s,1H), 4,2 ( s, 2H), 3,2 (t, 2H), 3,1 (s, 6H), 2,6 (t, 2H), 2,4 (s, 3H)

2)

3-Dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidin-2,4-diona [9]

Una mezcla de 2,2’-bis(difenilfosfino)1,1’-binaftilo [BINAP] (54,35 mg, 0,085 mmol) y acetato de paladio(II) [Pd(OAc)2] (6,95 mg, 0,028 mmol) en tolueno seco (3 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. A esto, se añadieron éster met�lico del ácido 3-amino-propi�nico (72,00 mg, 0,699 mmol), 2-bromo-1-metil-4-nitrobenceno (181,29 mg, 0,839 mmol) y carbonato de cesio seco (683,5 mg, 2,097 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y se reunieron los dos extractos orgánicos. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente proporcion� éster met�lico del ácido 3-(2-metil-5-nitrofenilamino)propi�nico [5] en forma de un sólido amarillo [Rendimiento: 149,00 mg, 74,7%].

Una solución de éster met�lico del ácido 3-(2-metil-5-nitro-fenilamino)propi�nico (100 mg, 0,419 mmol) en 3 mL de disolvente mixto [THF/agua/metanol 1:0,3:0,5] se trat� con hidróxido de litio [15,00 mg, 0,628 mmol]. La mezcla se agit� a temperatura ambiente durante 6 horas, se concentr� y se acidific� [pH=2] con HCl 2M. El precipitado obtenido se filtr�, se lav� con agua y se secó a vacío. El material en bruto se lav� con éter, se secó al aire durante la noche para dar el producto deseado, es decir, ácido 3-(2-metil-5-nitro-fenilamino)-propi�nico [6] en forma de un sólido coloreado de amarillo. Basándose en la recuperación de masa (91,2 mg) se supuso que el rendimiento fue cuantitativo.

A una solución de ácido 3-(2-metil-5-nitro-fenilamino)-propi�nico [2,95 mg, 13,2 mmol], 2,2-dimetil-1,3-dioxano-4,6diona (ácido de Meldrum (2,08 mg, 14,5 mmol) y 4-dimetilaminopiridina (DMAP) [2,42 mg, 198 mmol] en diclorometano anhidro (70 mL) a 0�C se a�adi� hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC.HCl) [3,04 mg, 158 mmol) y la solución resultante se agit� durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se lav� (50 mL x 4) con bisulfato de potasio (acuoso) al 5%. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtr� y se concentr� a vacío, dando 2,2-dimetil-5-[3-(2-metil-5-nitro-fenilamino)propionil][1,3]dioxano-4,6-diona en bruto [7], que se disolvió en 60 mL de acetato de etilo y se calentó a reflujo durante 4 horas. La mezcla de reacción se enfri� hasta la temperatura ambiente y se concentr� a vacío. El producto en bruto obtenido se purificó adicionalmente por cromatograf�a en columna en gel de sílice (eluyente: metanol al 2% en cloroformo) para dar el producto deseado, es decir, 1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidina-2,4-diona [8] en forma de un sólido amarillo [Rendimiento: 1,91 mg, 58,6%].

Una solución de 1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidina-2,4-diona [100 mg, 0,402 mmol] en acetal dimet�lico de N,Ndimetilformamida (DMA.DMF) [1 mL] se calentó a reflujo durante 3 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentr� a vacío. El producto en bruto obtenido se purificó adicionalmente por cromatograf�a en columna en gel de sílice usando acetato de etilo al 30-60%/hexano como eluyente para obtener el producto deseado puro, es decir, 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidina-2,4-diona [9] en forma de un sólido rojo oscuro [Rendimiento: 79,02 mg, 65,02%].

RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,2-7,9 (m, 3H), 7,5-7,34 (d, 1H), 4,0-3,8 (m, 1H), 3,7-3,5 (m,1H), 3,35 ( s, 3H), 3,2 (s, 3H), 2,85-2,65 (m, 2H), 2,35 (s, 3H)

3)

�cido 3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-benzoico [12]

Una mezcla de 2,2’-bis(difenilfosfino)1,1’-binaftilo [BINAP] (54,35 mg, 0,085 mmol) y acetato de paladio(II) [Pd(OAc)2] (6,95 mg, 0,028 mmol) en tolueno seco (3 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. A esto, se añadieron 1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]-decano (100 mg, 0,699 mmol), éster met�lico del ácido 3-bromo-4-metil-benzoico (192,1 mg, 0,839 mmol) y carbonato de cesio seco (683,5 mg, 2,09 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los dos extractos orgánicos se reunieron. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente proporcion� éster met�lico del ácido 3-(1,4-dioxa-8aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-benzoico [11] en forma de un sólido amarillo [150,5 mg, 61,7%].

Una solución de éster met�lico del ácido 3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-benzoico (100 mg, 0,343 mmol) en 3 mL de disolvente mixto [THF/agua/metanol 1:0,3:0,5] se trat� con hidróxido de litio (12,25 mg, 0,514 mmol). La mezcla de reacción se agit� a temperatura ambiente durante 6 horas, se concentr� y se acidific� [pH=4] con HCl 2M. El precipitado obtenido se filtr�, se lav� con agua y se secó a vacío. El material en bruto se lav� con éter, se secó al aire durante la noche para dar el producto deseado, es decir, ácido 3-(1,4-dioxa-8-azaespiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-benzoico [12] en forma de un sólido coloreado de amarillo. Basándose en la recuperación de masa (93,2 mg) se supuso que el rendimiento fue cuantitativo.

RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 12,8 (s, 1H), 7,58-7,50 (m, 2H), 7,3-7,24 (m, 1H), 3,92 (s, 4H), 2,96-2,86 (t, 4H), 2,3 (s, 3H), 1,82-1,74 (m, 2H).

Los compuestos de la presente invención se prepararon por vías generales de síntesis tipificadas por los ejemplos 1

10. En la Tabla 1, cada compuesto lleva un número de ejemplo correspondiente a la vía de síntesis particular por la que se prepar�.

Ejemplo 1

N-{3-[2-(4-Cloro-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-4-metil-fenil}-3-trifluorometil-benzamida

[13]

A una solución de 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidin-4-ona (12,06 mg, 41,7 mmol) [preparada como en la referencia 1] en etanol (250 mL) se añadieron N-(4-cloro-fenil)-guanidina (28,32 mg, 167 mmol) y acetato de sodio (27,32 mg, 334 mmol) y la solución se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó [sulfato de sodio] y se concentr� a vacío. El producto en bruto obtenido se purificó adicionalmente por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 5-10%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro [11], es decir, (4-cloro-fenil)-[6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2il]-amina en forma de un sólido amarillo. [Rendimiento: 2,50 mg, 15,2%].

A una solución de (4-cloro-fenil)-[6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-amina (100 mg, 0,25 mmol) en el disolvente mixto de THF (5 mL) y metanol (5 mL) se a�adi� Pd al10%/C, and la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-il]-(4-cloro-fenil)amina [12] en forma de un sólido blancuzco [Rendimiento: 81,5 mg, 88,2%].

A una solución de [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-(4-cloro-fenil)amina (54,87 mg, 0,15 mmol), ácido 3-trifluorometilbenzoico (28,51 mg, 0,15 mmol) y diisopropiletilamina (DIPEA) (78 ÉL, 0,45 mmol) en DMF (7,5 mL) se a�adi� hexafluorofosfato de 2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (HATU) (59 mg, 0,15 mmol) y la mezcla de reacción se agit� durante 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lav� con solución acuosa al 5% de bisulfato de sodio, solución saturada acuosa de bicarbonato de sodio y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� a presión reducida. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en columna (SiO2, metanol al 2-10% en cloroformo para dar N-{3-[2-(4-clorofenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-4-metil-fenil}-3-trifluorometilbenzamida [13] en forma de un sólido amarillo claro. [Rendimiento: 60,6 mg, 75,2%].

RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,22 (s, 1H), 8,13 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 7,84-7,78 (m, 1H), 7,75-7,7 (s ancho, 1H), 7,68-7,6 (m, 3H), 7,34-7,27 (m, 2H), 7,24-7,19 (m, 1H), 7,15-7,08 (m, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,35-3,26 (m, 2H), 3,18-3,09 (m, 2H), 2,3 (s, 3H)

Espectro de masas (EM): m/z 538,1 (M+1)+

Ejemplo 2

N-{4-Metil-3-[2-(pirimidin-5-ilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-fenil}-3-trifluorometilbenzamida

[17]

A una solución de 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidin-4-ona (12,06 mg, 41,7 mmol) [preparada como en la referencia 1] en etanol (250 mL) se añadieron carbonato de guanidina (30,17 mg, 167 mmol) y acetato de sodio (27,40 mg, 334 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó [sulfato de sodio] y se evapor�. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 2-5%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro, es decir, 6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2-ilamina [14] en forma de un sólido amarillo. [Rendimiento: 3,00 mg, 25,2%].

Una mezcla de 4,5-bis(difenil-fosfino)-9,9-dimetilxanteno [xantof�s] (8,6 mg, 0,01488 mmol) y tris(dibencilidenacetona)di-paladio(0) [Pd2(dba)3] (6,81 mg, 0,00744 mmol) en 1,4-dioxano seco (5 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. Se añadieron 5-bromopirimidina (19,7 mg, 0,1247 mmol), 6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-ilamina (35,57 mg, 0,1247 mmol) y carbonato de cesio seco (100 mg, 0,31 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los dos extractos orgánicos se reunieron. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vacío. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente proporcion� [6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-pirimidin-5-il-amina [15] en forma de un sólido amarillo [Rendimiento: 9,75 mg, 21,7%].

A una solución de [6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-pirimidin-5-il-amina (100 mg, 0,275 mmol) en el disolvente mixto de THF (3 mL) y metanol (3 mL) se a�adi� Pd al 10%/C, y la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-il]-pirimidin-5-il-amina [16] [Rendimiento: 84,2 mg, 92,2%] en forma de un sólido blancuzco.

A una solución de [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-pirimidin-5-il-amina (50,0 mg, 0,15 mmol), ácido 3-trifluorometilbenzoico (28,5 mg, 0,15 mmol) y DIPEA (78 ÉL, 0,45 mmol) en DMF se a�adi� HATU (59 mg, 0,15 mmol) y la mezcla de reacción se agit� durante 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lav� con solución acuosa al 5% de bisulfato de sodio, solución saturada acuosa de bicarbonato de sodio y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� a presión reducida. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en columna (SiO2, metanol al 2-10% en cloroformo) para dar 49,75 mg (65,6%) de N-{4-metil-3-[2-(pirimidin-5-ilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6

il]-fenil}-3-trifluorometil-benzamida [17] en forma de un sólido amarillo claro.

RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,2-9,0 (m, 2H), 8,9 (s, 1H), 8,3-8 (m, 2H), 7,95-7,5 (m, 4H), 7,3-77 (m, 4H), 4,1 (s, 2H), 3,4-3,2 (t, 2H), 3,15-2,95 (t, 2H), 2,3 (s, 3H). EM: m/z 506,4 (M+1)+

Ejemplo 3

N-(4-Metil-3-{2-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}fenil)-3-trifluorometil-benzamida [20]

A una solución de 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidina-2,4-diona [9] (12,6 mg, 41,7 mmol) [preparada como en la referencia 2] en etanol (250 mL) se añadieron N-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]guanidina (43,9 mg 167 mmol) y acetato de sodio (27,38 mg, 334 mmol) y la solución se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se evapor�. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 5-10%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro, es decir, 2-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-6-(2-metil-5-nitro-fenil)7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [18] en forma de un sólido. [Rendimiento: 3,09 mg, 14,8%].

A una solución de 2-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-6-(2-metil-5-nitro-fenil)-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona (100 mg, 0,198 mmol) en el disolvente mixto de THF (5 mL) y metanol (5 mL) se a�adi� Pd al10%/C, y la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar 6-(5-amino-2-metil-fenil)-2-[3metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [19] [Rendimiento: 81,72 mg, 86,9%] en forma de un sólido blancuzco.

A una solución de 6-(5-amino-2-metil-fenil)-2-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona (71,0 mg, 0,15 mmol), ácido 3-trifluoro-metilbenzoico (28,5 mg, 0,15 mmol) y DIPEA (78 ÉL, 0,45 mmol) en DMF se a�adi� HATU (59 mg, 0,15 mmol) y la mezcla de reacción se agit� durante 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lav� con solución acuosa al 5% de bisulfato de sodio, solución saturada acuosa de bicarbonato de sodio y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� a presión reducida. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en columna (SiO2, metanol al 2-10% en cloroformo) para dar 71,7 mg (74,2%) de N-(3-{2-[4-(2-metoxi-4-metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-4-metil-fenil)-3-trifluorometil-benzamida [20] en forma de un sólido amarillo pálido.

RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,76 (s, 1H), 8,25-8,04 (m, 3H), 8,06 (d, 1H), 7,82-7,6 (m, 3H), 7,56-7,4 (m, 3H), 7,2

7,35 (d, 1H), 7,05-6,92 (d, 1H), 4,1-3,92 (m, 1H), 3,1-2,9 (m, 6H), 2,6 (s, 3H), 2,25 (s,3H), 2,15 (s,3H) EM: m/z 630,5 (M+1)+

Ejemplo 4

N-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazina-1-carbonil)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}fenil)-3-trifluorometilbenzamida [24]

A una solución de 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidina-2,4-diona (12,6 mg, 41,7 mmol) [preparada como en la referencia 2] en etanol (250 mL) se añadieron carbonato de guanidina (30,17 mg, 167 mmol) y acetato de sodio (27,40 mg, 334 mmol) y la solución se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar

10 hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó [sulfato de sodio] y se evapor�. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 2-5%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro, es decir, 2-amino-6-(2-metil-5-nitro-fenil)-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [21] en forma de un sólido. [Rendimiento: 2,63 mg, 21,2%].

15 Una mezcla de 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (xantof�s) (8,6 mg, 0,0148 mmol) y tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) [Pd2(dba)3] (6,81 mg, 0,0074 mmol) en 1,4-dioxano seco (5 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. Se a�adi� (4-yodo-fenil)-(4metil-piperazin-1-il)-metanona (41,1 mg, 0,1247 mmol), 2-amino-6-(2-metil-5-nitro-fenil)-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona (37,3 mg, 0,1247 mmol) y carbonato de cesio seco (100 mg, 0,31 mmol). Se burbuje� nitrógeno

20 durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� calentar a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los dos extractos orgánicos se reunieron. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron. La cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente proporcion� 6-(2-metil-5-nitro-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazina-1-carbonil)fenilamino]-7,8-dihidro-6H

25 pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [22] en forma de un sólido amarillo [Rendimiento: 12,3 mg, 19,7%].

A una solución de 6-(2-metil-5-nitro-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazina-1-carbonil)fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3

d]pirimidin-5-ona (100 mg, 0,199 mmol) en el disolvente mixto de THF (3 mL) y metanol (3 mL) se a�adi� Pd al 10%/C, y la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar 6-(5-amino-2-metil-fenil)-2-[4-(4metil-piperazina-1-carbonil)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [23] en forma de un sólido blancuzco [Rendimiento: 83,0 mg, 88,3%].

A una solución de 6-(5-amino-2-metil-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazina-1-carbonil)fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona (70,7 mg, 0,15 mmol), ácido 3-trifluorometil-benzoico (28,5 mg, 0,15 mmol) y DIPEA (78 ÉL, 0,45 mmol) en DMF se a�adi� HATU (59 mg, 0,15 mmol) y la mezcla de reacción se agit� durante 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lav� con solución acuoso al 5% de bisulfato de sodio, solución saturada acuosa de bicarbonato de sodio y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� a presión reducida. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en columna (SiO2, metanol al 2-10% en cloroformo) para dar 69,8 mg (72,3%) de N-(4-metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazina-1carbonil)fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3-trifluorometil-benzamida [24] en forma de un sólido amarillo claro.

RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ 8,9 (s, 1H), 8,25-8,4 (m, 2H), 8,06 (d, 1H), 7,82-7,9 (m, 3H), 7,6-7,8 (m, 3H), 7,257,35 (dd, 3H), 4,05-4,15 (m, 2H), 3,6-3,92 (m, 6H), 2,5 (m, 4H), 2,2-2,4 (m, 6H).

EM: m/z 644,30 (M+1)+

Ejemplo 5

3-[2-(4-Cloro-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-4-metil-N-(3-trifluorometilfenil)benzamida

[28]

A una solución de 3-trifluorometil-fenilamina (24,1 mg, 0,15 mmol), ácido 3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4metil-benzoico [preparado como en la referencia 3] (41,5 mg, 0,15 mmol) y DIPEA (78 ÉL, 0,45 mmol) en DMF se a�adi� HATU (59 mg, 0,15 mmol) y la mezcla de reacción se agit� durante 3 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lav� con solución acuosa al 5% de bisulfato de sodio, solución saturada acuosa de bicarbonato de sodio y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� a presión reducida. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en columna (SiO2, metanol al 2-10% en cloroformo) para dar 43,1 mg (68,6%) de 3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-N-(3trifluorometil-fenil)-benzamida [25] en forma de un sólido amarillo claro.

A una solución de 3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-N-(3-trifluorometil-fenil)-benzamida [100 mg, 0,237 mmol] en THF (2 mL) se añadieron 3 mL de H2SO4 acuoso al 10%. La mezcla de reacción se calentó a 60oC durante 6 horas, después se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa acuosa se extrajo dos veces más con acetato de etilo y las fracciones orgánicas reunidas se lavaron con agua, salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y concentraron para dar el compuesto deseado, es decir, 4-metil-3-(4-oxo-piperidin-1-il)-N-(3-trifluorometilfenil)-benzamida [26] en forma de un líquido viscoso pardo. [Rendimiento: 76,6 mg, 85,6%]. El compuesto obtenido se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional.

Una solución de 4-metil-3-(4-oxo-piperidin-1-il)-N-(3-trifluorometil-fenil)-benzamida [100 mg, 0,2656 mmol] en DMA.DMF [1 mL] se calentó a reflujo durante 3 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentr� a vacío para dar el producto en bruto. El producto en bruto obtenido se purificó

5 adicionalmente por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 30-60%/hexano como eluyente para obtener el producto deseado puro, es decir, 3-(3-dimetilaminometilen-4-oxo-piperidin-1-il)-4-metil-N-(3-trifluorometilfenil)-benzamida [27] en forma de un sólido pardo [Rendimiento: 13,7 mg, 12,02%].

A una solución de 3-(3-dimetilaminometilen-4-oxo-piperidin-1-il)-4-metil-N-(3-trifluorometil-fenil)benzamida (17,9 mg, 41,7 mmol) en etanol (250 mL) se añadieron N-(4-cloro-fenil)-guanidina (28,32 mg, 167 mmol) y acetato de sodio 10 (27,32 mg, 334 mmol) y la solución se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó [sulfato de sodio] y se evapor�. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 5-10%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro, es decir, 3-[2-(4cloro-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-4-metil-N-(3-trifluorometil-fenil)benzamida [28] en forma de

15 un sólido blancuzco. [Rendimiento: 1,83 mg, 8.2%].

RMN 1H (300 MHz, CD3OD) δ: 8,26 (s, 1H), 8,19-8,12 (m, 1H), 7,98-7,92 (m, 1H), 7,79-7,74 (m, 1H), 7,72-7,61 (m, 3H), 7,55 (t, 1H), 7,45-7,36 (m, 2H), 7,34-7,25 (m, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,4-3,32 (m, 2H), 3,05 (t, 2H), 2,42 (s, 3H)

EM: Calculado: m/z 538,1 (M+1)+

Ejemplo 6

20 {6-[2-Metil-5-(4-trifluorometilpirimidin-2-ilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2-il}-piridin-4-ilamina [34]

Una mezcla de 2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftilo [BINAP] (54,35 mg, 0,085 mmol) y acetato de paladio(II) [Pd(OAc)2] (6,95 mg, 0,028 mmol) en tolueno seco (3 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través 25 de la suspensión durante 30 minutos. A esto se añadieron 14-dioxa-8-aza-espiro[4.5]-decano (100 mg, 0,699 mmol), 2-bromo-1-metil-4-nitro-benceno (181,29 mg, 0,839 mmol) y carbonato de cesio seco (683,5 mg, 2,097 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los dos extractos orgánicos se reunieron. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron (sulfato de

sodio), se filtraron y se concentraron. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente proporcion� 8-(2-metil-5-nitro-fenil)-1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]decano [2] en forma de un sólido amarillo [Rendimiento: 193 mg, 82,7%].

A una solución de 8-(2-metil-5-nitro-fenil)-1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]decano (100 mg, 0,278 mmol) en el disolvente mixto de THF (3 mL) y metanol (3 mL) se a�adi� Pd al 10%/C y la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar 3-(1,4-dioxa-8-aza-spiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-fenilamina [29] [Rendimiento: 84,9 mg, 95,2%] en forma de un sólido blancuzco.

Una mezcla de 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno [xantof�s] (8,6 mg, 0,01488 mmol) y tris(dibencilidenacetona)di-paladio(0) [Pd2(dba)3] (6,81 mg, 0,00744 mmol) en 1,4-dioxano seco (5 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. Se añadieron 5-bromopirimidina (19,7 mg, 0,1247 mmol), 3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-fenilamina (30,96 mg, 0,1247 mmol) y carbonato de cesio seco (100 mg, 0,31 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los dos extractos orgánicos se reunieron. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vacío. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente dio [3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-fenil]-(4-trifluorometil-pirimidin-2-il)-amina [30] en forma de un sólido amarillo claro [Rendimiento: 4,05 mg, 29,8%].

A una solución de [3-(1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-il)-4-metil-fenil]-(4-trifluorometil-pirimidin-2-il)-amina [50 mg, 0,126 mmol] en THF (1 mL) se a�adi� 1 mL de H2SO4 al 10% (acuoso). La mezcla de reacción se calentó a 60�C durante 6 horas y luego se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa acuosa se extrajo dos veces más con acetato de etilo y las fracciones orgánicas reunidas se lavaron con agua, salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio) y se filtraron. El filtrado se concentr� para dar el compuesto deseado, es decir, 1-[2-metil-5-(4-trifluorometilpirimidin-2-ilamino)-fenil]-piperidin-4-ona [31] en forma de un líquido viscoso. [Rendimiento: 40,9 mg, 92,2%]. El compuesto obtenido se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional.

Una solución de 1-[2-metil-5-(4-trifluorometil-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-piperidin-4-ona [100 mg, 0,285 mmol] en acetal dimet�lico de N,N-dimetilformamida (DMA.DMF) [1 mL] se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentr� a vacío. El producto en bruto pardo oscuro obtenido se purificó adicionalmente por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 3060%/hexano como eluyente para obtener el producto deseado puro, es decir, 3-dimetil-aminometileno-1-[2-metil-5(4-trifluorometil-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-piperidin-4-ona [32] en forma de un sólido anaranjado [Rendimiento: 78,2 mg, 68,02%].

A una solución de 3-dimetil-aminometileno-1-[2-metil-5-(4-trifluorometil-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-piperidin-4-ona (16,90 mg, 41,7 mmol) en etanol (250 mL) se añadieron carbonato de guanidina (30,17 mg, 167 mmol) y acetato de sodio (27,40 mg, 334 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó [sulfato de sodio] y se evapor�. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 2-5%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro, es decir, 6-[2-metil-5-(4-trifluorometil-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-ilamina [33] en forma de un sólido amarillo claro. [Rendimiento: 5,00 mg, 30,6%].

Una mezcla de 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno [xantof�s] (8,6 mg, 0,01488 mmol) y tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) [Pd2(dba)3] (6,81 mg, 0,00744 mmol) en 1,4-dioxano seco (5 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. Se añadieron 5-bromo-piridina (19,7 mg, 0,1247 mmol), 6-[2-metil-5-(4-trifluorometil-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-ilamina (50,02 mg, 0,1247 mmol) y carbonato de cesio seco (100 mg, 0,31 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los dos extractos orgánicos se reunieron. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron a vacío. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/hexano como eluyente dio {6-[2-metil-5-(4-trifluorometil-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2-il}-piridin-4-il-amina [34] en forma de un sólido amarillo claro [Rendimiento: 17,75 mg, 29,8%].

RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,65-8,55 (m, 3H), 8,5-8,4 (s ancho, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,2-8,1 (m, 2H), 7,85-7,75 (s ancho, 1H), 7,4 (s, 1H), 7,25-7,15 (m, 1H), 7,1-7,0 (m, 2H), 4,2 (s, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,15 (t, 2H), 2,3 (s, 3H)

EM: m/z 478,9 (M+1)

Ejemplo 7

1-[4-Metil-3-(2-metilamino-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il)-fenil]-3-(3-trifluorometil-fenil)-urea [43]

A una solución de 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitrofenil)piperidin-4-ona (12,06 mg, 41,7 mmol) [preparada como en la referencia 1] en etanol (250 mL) se añadieron N-metil-guanidina (12,20 mg, 167 mmol) y acetato de sodio (27,32 mg, 334 mmol) y la solución se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó [sulfato de sodio] y se concentr� a vacío. El producto en bruto obtenido se purificó adicionalmente por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 5-10%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro [41], es decir, metil-[6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-amina en forma de un sólido amarillo. [Rendimiento: 2,47 mg, 19,8%].

A una solución de metil-[6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-amina (100 mg, 0,33 mmol) en el disolvente mixto de THF (5 mL) y metanol (5 mL) se a�adi� Pd al 10%/C y la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2il]-metil-amina [42] en forma de un sólido blancuzco [Rendimiento: 84,0 mg, 93,4%].

A una solución transparente agitada de [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-metilamina (75 mg, 0,278 mmol) en THF (1,5 mL) se a�adi�, todo de una vez, 1-isocianato-3-trifluorometilbenceno (57,3 mg, 0,306 mmol) y la mezcla de reacción se dej� agitar durante 3 horas a temperatura ambiente. Después de 3 horas, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� hasta sequedad para obtener una masa pegajosa que se lav� con hexano para obtener 83,4 mg de 1-[4-metil-3-(2-metilamino-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il)-fenil]3-(3-trifluorometil-fenil)-urea [43] [Rendimiento 65,6%] en forma de un sólido pardo claro.

RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 7,98 (s, 1H), 7,6-7,06 (m, 8H), 6,84 (d, 1H), 5,1-5,0 (m, 1H), 3,85 (s, 2H), 3,2-2,8 (m, 7H), 2,22 (s, 3H)

EM: m/z 457,1 (M+1)

Ejemplo 8

1-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3-(3trifluorometilfenil)urea [46]

A una solución de 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitro-fenil)-piperidina-2,4-diona (12,6 mg, 41,7 mmol) [preparada como en la referencia 2] en etanol (250 mL) se añadieron N-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]-guanidina (38,9 mg, 167 mmol) y acetato de sodio (27,38 mg, 334 mmol) y la solución se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se evapor�. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 5-10%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro, es decir, 6-(2-metil-5-nitro-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [44] en forma de un sólido.[Rendimiento: 4,30 mg, 21,9%].

A una solución de 6-(2-metil-5-nitro-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin5-ona (100 mg, 0,211 mmol) en el disolvente mixto de THF (5 mL) y metanol (5 mL) se a�adi� Pd al 10%/C y la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar 6-(5-amino-2-metil-fenil)-2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [45] [Rendimiento: 86,45 mg, 92,3%] en forma de un sólido blanco.

A una solución transparente agitada de 6-(5-amino-2-metil-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona (75 mg, 0,169 mmol) en THF (1,5 mL) se a�adi�, todo de una vez, 1-isocianato-3trifluoro-metil-benceno (34,7 mg, 0,186 mmol) y la mezcla de reacción se dej� agitar durante 3 horas a temperatura ambiente. Después de 3 horas, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� hasta sequedad para obtener una masa pegajosa que se lav� con hexano para obtener 56,7 mg de 1-(4-metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3-(3-trifluorometil-fenil)-urea [Rendimiento 53,2%] en forma de un sólido pardo claro.

RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 9,0 (s, 1H), 7,7-6,6 (m, 11H), 8,2-7,7 (m, 3H), 4,2-3,7 (m, 2H), 3,5-2,8 (m, 10H), 2,2-1,9 (m, 6H)

EM: m/z 631,2 (M+1)

Ejemplo 9

(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}fenil)amida del ácido butano-1-sulf�nico [49]

A una solución de 3-dimetilaminometilen-1-(2-metil-5-nitrofenil)-piperidin-4-ona (12,06 mg, 41,7 mmol) [preparada como en la referencia 1] en etanol (250 mL) se añadieron N-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]-guanidina (38,9 mg, 167 mmol) y acetato de sodio (27,32 mg, 334 mmol) y la solución se calentó a reflujo durante 12 horas. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó [sulfato de sodio] y se concentr� a vacío. El producto en bruto obtenido se purificó adicionalmente por cromatograf�a en gel de sílice usando metanol al 5-10%/cloroformo como eluyente para dar el producto deseado puro [47], es decir, [6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il][4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]-amina en forma de un sólido amarillo. [Rendimiento: 3,65 mg, 19,0%].

A una solución de [6-(2-metil-5-nitro-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]amina (100 mg, 0,217 mmol) en el disolvente mixto de THF (5 mL) y metanol (5 mL) se a�adi� Pd al 10%/C y la mezcla de reacción se agit� durante 12 horas a temperatura ambiente bajo la presión de una botella de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtr� y el filtrado se concentr� a vacío para dar [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidropirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]-amina [48] en forma de un sólido blancuzco [Rendimiento: 83,7 mg, 89,6%].

A una solución de [6-(5-amino-2-metil-fenil)-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3-d]pirimidin-2-il]-[4-(4-metil-piperazin-1-il)fenil]-amina (50,0 mg, 0,116 mmol) en piridina (1 mL) a 0�C se a�adi�, gota a gota, cloruro de butano-1-sulfonilo (21,3 mg, 0,139 mmol). La mezcla de reacción se agit� durante 15 minutos a 0oC y luego se le dej� alcanzar la temperatura ambiente. Luego, se dej� agitar durante 3 horas más a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentr� a vacío. Luego, la masa de reacción se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano. La capa de diclorometano se lav� con agua y luego con solución de salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� a presión reducida. El producto en bruto obtenido se purificó por cromatograf�a en columna (SiO2, metanol al 2-10% en cloroformo) para dar 50,4 mg (78,9%) de (4-metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-amida del ácido butano-1-sulf�nico [49] en forma de un sólido blancuzco.

RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,15 (s, 1H), 7,50 (d, 2H), 7,19 (d, 1H), 7,00-6,80 (m, 5H), 6,60-6,40 (m, 1H), 4,00 (s, 2H), 3,30-2,95 (m, 10H), 2,60 (t, 4H), 2,38 (s, 3H), 2,30 (s, 3H), 1,85-1,75 (m, 2H), 1,50-1,36 (m, 2H), 1,25 (s, 2H)

EM: m/z 550,2 (M+1)

Ejemplo 10

6-[5-(Benzoxazol-2-ilamino)-2-metilfenil]-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona [54]

A una solución transparente de 6-(5-amino-2-metil-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6Hpirido[4,3-d]pirimidin-5-ona (75 mg, 0,169 mmol) en DCM (5 mL) se a�adi�, todo de una vez, di(2piridil)tionocarbonato (47 mg, 0,203 mmol) y la mezcla de reacción se dej� agitar durante 3 horas a temperatura

5 ambiente. Después de 3 horas, la mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se lav� con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentr� hasta sequedad para obtener una masa pegajosa que se lav� con hexano para obtener 70,3 mg de 6-(5-isotiocianato-2-metil-fenil)-2-[4-(4-metilpiperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona [53] [Rendimiento: 85,6%] en forma de un producto de color pardo claro.

10 A una solución de 6-(5-isotiocianato-2-metil-fenil)-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3d]pirimidin-5-ona (50,0 mg, 0,089 mmol) y 2-amino-fenol (9,73 mg, 0,089 mmol) en THF (5 mL) se a�adi� EDC.HCl (25,6 mg, 0,133 mmol) y la mezcla de reacción se dej� a reflujo durante 12 horas bajo una atmósfera de nitrógeno. Después de 12 horas, la masa de reacción se concentr� hasta sequedad para obtener un compuesto en bruto. El compuesto en bruto obtenido se sometió a HPLC preparativa. El compuesto deseado, es decir, 6-[5-(benzoxazol-2

15 ilamino)-2-metil-fenil]-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-7,8-dihidro-6H-pirido[4,3-d]pirimidin-5-ona se obtuvo en forma de un sólido pardo [54] [Rendimiento: 57,7 mg , 63,2%].

RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) δ 10,7 (s, 1H), 8,8 (s, 1H), 7,7-7,0 (m, 10H), 6,95-6,85 (d, 2H), 4,1-3,95 (m, 1H), 3,858,7 (m, 1H), 3,3-3,0 (m, 6H), 2,5-2,4 (m, 4H), 2,24 (s, 3H), 2,15 (s, 3H)

EM: m/z 561,2 (M+1)

20 Ejemplo 11

6-(5-(Isoquinolin-1-ilamino)-2-metilfenil)-2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino)-7,8-dihidropirido[4,3

d]pirimidin-5(6H)-ona

Una mezcla de 2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftilo [BINAP] (28,00 mg, 0,0451 mmol) y acetato de paladio(II) [Pd(OAc)2] (5,00 mg, 0,022 mmol) en tolueno seco (3 mL) se agit� vigorosamente y se burbuje� nitrógeno a través de la suspensión durante 30 minutos. A esto se añadieron 6-(5-amino-2-metilfenil)-2-(4-(4-metilpiperazin-1il)fenilamino)-7,8-dihidropirido[4,3-d]pirimidin-5(6H)-ona [45] (200 mg, 0,451 mmol), 1-bromo-isoquinolina (112,60 mg, 0,541 mmol) y carbonato de cesio seco (443,0 mg, 1,352 mmol). Se burbuje� nitrógeno durante otros 30 minutos; la mezcla se dej� a reflujo durante la noche. La mezcla se enfri�, se diluyó con acetato de etilo, se a�adi� agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los dos extractos orgánicos se reunieron. Los extractos orgánicos se lavaron con salmuera, luego se secaron (sulfato de sodio), se filtraron y se concentraron. La purificación adicional por cromatograf�a en gel de sílice usando acetato de etilo al 5-10%/ hexano como eluyente proporcion� 6-(5-(isoquinolin-1-ilamino)-2-metilfenil)-2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenilamino)-7,8dihidropirido[4,3-d]pirimidin-5(6H)-ona [60] en forma de un sólido amarillo [Rendimiento: 223 mg, 87,0%].

Ejemplo 12 - Datos farmacol�gicos

Ensayos de las quinasas c-Src y Jak 2:

Se cribaron compuestos en el ensayo TR-FRET para la inhibición de las quinasas JAK2 y c-Src. Como sustrato para JAK2 y c-Src se utilizó Ultra light poly GT (Perkin Elmer) con una concentración de ATP de 10 �M y 50 �M, respectivamente. El anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con Eu (Perkin Elmer) se a�adi� a 1 nM y se midió la emisión de fluorescencia a 615 nm y 665 nm con una longitud de onda de excitación de 340 nm. La relación entre 665 y 615 nm es proporcional a la fosforilaci�n del sustrato y a la actividad de la quinasa. El ajuste de la curva de dosis-respuesta se llev� a cabo usando el programa inform�tico GraphPad Prism.

Ensayo de transferencia de Western en células para pStat3 (ICW):

Se sembraron células A431 en una microplaca de 96 pocillos. Después de privarlas de suero durante una noche, las células se incubaron con los compuestos durante 2 horas. Las células se fijaron con paraformaldeh�do al 4% en PBS y luego se permeabilizaron con Triton X-100 al 0,1% en PBS (PBST). Las células se bloquearon con BSA al 5% en PBST durante 2 horas, seguido por incubaci�n durante una noche con anticuerpo para fosfo Stat3. Las células se lavaron e incubaron con anticuerpo secundario anti-conejo marcado con europio durante 2 horas. Después de lavado, se a�adi� a los pocillos solución mejoradora. La microplaca se leyó con el instrumento Victor en el ajuste de europio. Se utilizaron lecturas Hoechst para normalizar el número de células. Se calcularon los valores de la CI50 con los valores normalizados de europio usando el programa GraphPad Prism.

Ensayo de viabilidad celular (ensayo XTT):

Se sembraron células Mda-Mb-231 o A549 en una microplaca de 96 pocillos. Al día siguiente se añadieron los compuestos a las células y se incubaron durante 72 horas. El tratamiento con los compuestos se realizó por triplicado. Después de 72 horas se aspiraron los medios de cultivo celular de los pocillos y se a�adi� una solución de trabajo de XTT y las placas se incubaron durante 2-5 horas. La absorbancia de las muestras se midió con un espectrofotómetro a una longitud de onda de 465 nM. Los valores de la CE50 se calcularon usando del programa GraphPad Prism. Las líneas celulares tumorales utilizadas en los ejemplos de la presente invención se obtuvieron de ATCC. La descripción de las líneas celulares se incluye en la siguiente tabla:

L�nea celular: Origen Fuente y enlace a detalles

B16F10: Melanoma de ratón ATCC

A549: Carcinoma de pulmón humano ATCC

A431: Carcinoma epidermoide humano ATCC

Abreviaturas:

IP: : Intraperitoneal(mente)

IV: : Intravenosa(mente)

MTV: : Volumen Tumoral Medio

N�: : Número de

NS: : No significativo

S: : Significativo

SA: : Sacrificado

SC: : Subcutánea(mente)

V: : Volumen

Vs: : Versus

HPC: : Hidroxipropilciclodextrina

PBS: : Solución salina tamponada con fosfato

MPK: : mg por Kg de peso corporal

MTD: : Dosis Máxima Tolerada

TGI: : Inhibición del crecimiento tumoral

PD: : Farmacodin�mica

ATD: : Dosis de Toxicidad Aguda

N/D: : No determinado

Resultados

5 Las Tablas 2 y 4 ponen de manifiesto que los compuestos de la presente invención presentan una actividad de inhibición dual contra las quinasas c-SRC y JAK (JAK2 y JAK1) y que, por lo tanto, cumplen los requisitos de la presente invención. La Tabla 2 también muestra la actividad de inhibición in vitro del crecimiento celular en las líneas celulares cancerígenas A431, A549 y MDA-MB-231, as� como también una actividad de inhibición de la fosforilaci�n de STAT3 en la línea celular cancerígena A431.

10 La Tabla 3 muestra la actividad de Dasatinib (un inhibidor de c-SRC) y TG101348 (un inhibidor de JAK2 altamente selectivo). Puede llegarse a la conclusión que estos compuestos no son inhibidores duales. Además, la actividad inhibidora de la fosforilaci�n de STAT3 es menos eficaz con estos compuestos en comparación con los compuestos de acuerdo con la presente invención.

Tabla 2

N� de Compuesto: JAK2 JAK2 c-SRC c-SRC MDA-MB-231 A549 A431 Inhibición de pSTAT3

% de inhibición a: CI50 % de inhibición a CI50 CE50 CE50 CE50

100 nM: 1 μM (nM) 100 nM 1 μM (nM) (μM) (μM) (μM) (nM)

83: 32 4 0,305 - 0,240 240

76: 61 30 2,15 - 0,135 130

86: 45 28 0,53 0,078 0,57 580

92: 7 2 0,005 - 0,026 26

94: 19 2 0,05 - 0,180 160

98: 7 1 0,05 - 0,061 60

99: 14 6 0,12 - 0,29 300

106: 85 98 18 99 100 2 0,31 - 0,22 220

107: 72 94 40 93 98 1 0,61 - 0,12 120

108: 89 98 12 98 100 1 2,6 - -

75: 94 97 19 4,67 1,06

117: 18 80 96 0,66 0,025 0,33 340

119: 8 95 98 0,38 280

120: 36 94 95 2,5

123: 9 3 0,83 190

131: 40 74 90 0,88 - -

132: 3 5 0,041 0,047 - 480

146: 5 6 0,37 350

147: 88 93 21 67 90 - 0,72 - -

148: 94 96 5 99 99 2,4 0,034 - - 270

155: 18 2 1,2 - -

162: 92 97 6 73 81 27 1,38 1,14 0,60 350

164: 68 91 46 70 79 26

165: 74 93 54 93 98 16 0,44 - 0,32 257

166: 74 93 48 60 87 27

167: 95 97 5,3 97 98 27 283

170: 64 93 70 26 58 -

171: 92 97 19 74 87 20 1,30 2,10 - 471

172: 94 97 9 66 72 1,84 - -

174: 94 97 8,8 95 98 - 161

176: 89 94 15 87 96 13 0,33 - -

177: 84 94 10 86 96 20 0,12 - - 290

178: 91 92 7 77 90 17 1,75 - - 150

179: 81 92 6,4 79 93 15 0,90 - - 280

180: 67 91 66 87 1,62 1,48 1,07 140

181: 85 93 53 77 3,34 2,54 1,3

182: 55 85 51 80 2,76 1,08 5,07

7: 83 16 3,60 3,40 1,45 450

17: 3 2 0,044 0,01 0,092 150

45: 15 10 1,83 1,07 1,4 220

137: 28 7 0,074 0,426 0,67 670

Tabla 3

58: 44 19 3,82 - -

77: 80 96 17 4,92 - 0,512 510

153: 4 98 99 0,61

160: 15 66

Compuesto: JAK2 JAK2 c-SRC c-SRC MDA-MB-231 A549 A431 Inhibición de pSTAT3

% de inhibición a: CI50 % de inhibición a CI50 CE50 CE50 CI50

100 nM: 1 μM (nM) 100 nM 1 μM (nM) (μM) (μM) (μM) (nM)

Dasatinib: 55 5 0,044 >10 1057

TG101348: 2 77 0,68 1,2 >10000

Tabla 4

N� de Compuesto: JAK1 JAK1

% de inhibición a: CI50

100 nM: 1 μM (nM)

179: 12

171: 61 84

117: 24

45: 56 82 116

17: 85 89

15: 49 73

18: 82 89

23: 84 88

25: 58 96

26: 57 79

28: 66 79

9: 58 85

Actividad antitumoral en un modelo de metástasis de B16F10 y supervivencia:

Inyecci�n IV de 0,1x106 células tumorales B16F10 en la vena de la cola de 60 ratones C57B16 machos. Un día

5 después de la inyección de las células tumorales, los ratones se dividieron aleatoriamente en 4 grupos de 15. De los 15, se sacrificaron 6 ratones el día 14 para contar los focos metast�sicos en los pulmones. A los 9 restantes se les dosific� continuamente hasta su morbilidad/mortalidad para registrar la supervivencia.

Formulaci�n: HPC al 20%, solución de etanol al 2% en PBS para el compuesto N� 45 Solución salina normal para Taxol�

10 Vía de dosificación: oral para el compuesto N� 45 e i.p. para Taxol� Volumen de dosis: 10 mL/Kg de peso corporal Programa de dosificación: una vez al día durante 14 días consecutivos (Q1Dx14) para el estudio de metástasis y

una vez al día continuamente hasta su morbilidad/mortalidad para el estudio de supervivencia Dosificación:

15 Grupo 1: vehículo de control - 0 MPK (mg/kg) del compuesto N� 45 Grupo 2: 5 MPK de Taxol� Grupo 3: 30 MPK del compuesto N� 45 Grupo 4: 100 MPK del compuesto N� 45

Registro diario del peso corporal de los animales

20 Observación dos veces al día de los signos cl�nicos, morbilidad y mortalidad Sacrificio de los ratones a Tmax (0,75 horas) el día de la última dosis Se contaron los focos metast�sicos en los pulmones Observaciones durante la necropsia: patología macroscópica de órganos internos, tales como pulmón, hígado, ri��n,

bazo e intestinos y en caso de patología macroscópica se observa la histopatolog�a de estos órganos. Se recogió plasma para la estimación de la concentración del fármaco y se us� sangre completa para aislar las células mononucleares de sangre periférica (PBMC) para determinar la inhibición de pStat3 por citometr�a de flujo como una lectura de PD.

Se llev� a cabo un estudio similar con los compuestos N� 117 y N� 179.

Resultados:

Las Figuras 1 y 2 muestran una mejor actividad de inhibición de los compuestos de la presente invención en comparación con Taxol� (paclitaxel; un fármaco estándar utilizado en el modelo B16-F10). Si bien paclitaxel no tiene actividad de inhibición de las quinasas c-SRC o JAK, paclitaxel modula la actividad de STAT3 por la pérdida de la fosforilaci�n de STAT3 (paclitaxel interrumpe la interacción de STAT3 con tubulina).

Actividad antitumoral en el modelo de xenoinjerto A549: Experimento 1

Inyecci�n subcutánea (SC) de 5x106 células tumorales A549 en el lomo izquierdo de 48 ratones atómicos hembras. Después de 14 días de la inyección de las células tumorales, los ratones se dividieron aleatoriamente en 6 grupos de 8 cada uno, con un volumen tumoral medio de 134�5 mm3.

Formulaci�n: HPC al 20%, solución de etanol al 2% en PBS para los compuestos N� 45, 117 y 179.

Soluci�n salina normal para Erlotinib� Vía de dosificación: oral para los compuestos N� 45, 117 y 179, y Erlotinib� Volumen de dosis: 10 mL/Kg de peso de corporal Programa de dosificación: una vez al día durante 14 días consecutivos (Q1Dx14) Dosificación:

Grupo 1. Vehículo de control Grupo 2. Erlotinib� - 100 MPK Grupo 3. Compuesto N� 45 – 10 MPK Grupo 4. Compuesto N� 45 – 30 MPK Grupo 5. Compuesto N� 45 – 100 MPK Grupo 6. Compuesto N� 117 – 30 MPK Grupo 7. Compuesto N� 117 – 100 MPK Grupo 8. Compuesto N� 179 – 10 MPK Grupo 9. Compuesto N� 179 – 30 MPK

Registro diario del peso corporal de los animales Volúmenes tumorales registrados tres veces a la semana Observación dos veces al día de los signos cl�nicos, morbilidad y mortalidad Sacrificio de los ratones a Tmax (0,75 horas) el día de la última dosis Observaciones durante la necropsia: patología macroscópica en órganos internos, tales como pulmón, hígado, ri��n,

bazo e intestinos y en caso de patología macroscópica se observa la histopatolog�a de estos órganos. Se recogió plasma para la estimación de la concentración del fármaco y se us� sangre completa para aislar las PBMC (células mononucleares de sangre periférica) para determinar la inhibición de pStat3 por citometr�a de flujo como una lectura de PD. Los tumores se congelaron instantáneamente en nitrógeno líquido y se conservaron a -80�C para estimar pStat3 por citometr�a de flujo como una lectura de PD.

Experimento 2

Inyecci�n subcutánea (SC) de 5x106 células tumorales A549 en el lomo izquierdo de 24 ratones atómicos hembras.

Despu�s de 14 días de la inyección de las células tumorales, los ratones se dividieron aleatoriamente en 3 grupos de 8 cada uno, con un volumen tumoral medio de 75�7 mm3. Formulación: HPC al 20%, solución de etanol al 2% en PBS para el compuesto N� 45. Solución salina normal para Erlotinib� Vía de dosificación: oral para el compuesto N� 45 y Erlotinib� Volumen de dosis: 10 mL/Kg de peso de corporal Programa de dosificación: una vez al día durante 14 días consecutivos (Q1Dx14) Dosificación: Grupo 1. Vehículo de control Grupo 2. Compuesto N� 45 – 150 MPK Grupo 3. Erlotinib� - 100 MPK Registro diario del peso corporal de los animales Volúmenes tumorales registrados tres veces a la semana Observación dos veces al día de los signos cl�nicos, morbilidad y mortalidad

Sacrificio de los ratones a Tmax (0,75 horas) el día de la última dosis Observaciones durante la necropsia: patología macroscópica en órganos internos, tales como pulmón, hígado, ri��n, bazo e intestinos y en caso de patología macroscópica se observa la histopatolog�a de estos órganos. Se recogió plasma para la estimación de la concentración del fármaco y se us� sangre completa para aislar las PBMC (células mononucleares de sangre periférica) para determinar la inhibición de pStat3 por citometr�a de flujo como una lectura de PD. Los tumores se congelaron instantáneamente en nitrógeno líquido y se conservaron a -80�C para estimar pStat3 por citometr�a de flujo como una lectura de PD.

Resultados:

La Figura 3 muestra que los compuestos de la presente invención tienen una inhibición igual o mejor del crecimiento tumoral en comparación con Erlotinib, un inhibidor específico de la tirosina quinasa EGFR, lo que sugiere que la combinación de los compuestos con un inhibidor fuerte de la tirosina quinasa EGFR podría conducir a efectos sin�rgicos por la inhibición combinada de las vías STAT3 y EGFR.

Actividad antitumoral en el modelo de xenoinjerto A431: Inyección subcutánea (SC) de 5x106 células tumorales A431 con Matrigel� en el lomo izquierdo de 24 ratones

at�micos hembras. Después de 14 días de la inyección de las células tumorales, los ratones se dividieron aleatoriamente en 3 grupos de 8 cada uno, con un volumen tumoral medio de 90�1 mm3. Formulación: HPC al 20%, solución de etanol al 2% en PBS para el compuesto N� 45.

Soluci�n salina normal para Gefitinib� Vía de dosificación: oral para el compuesto N� 45 y Gefitinib� Volumen de dosis: 10 mL/Kg de peso de corporal Programa de dosificación: una vez al día durante 14 días consecutivos (Q1Dx14) Experimento PK-PD en el modelo A431: Se dej� que los tumores crecieran hasta un tamaño de 250 mm3. Los compuestos se dosificaron una vez y se

recogieron las PBMC y los tumores a Tmax para la estimación de pStat3. También se recogió plasma para estimar la concentración del fármaco. Experimento de eficacia en el modelo A431: Dosificación: Grupo 1. Vehículo de control

Grupo 2. Compuesto N� 45 – 150 MPK

Grupo 3. Gefitinib� - 100 MPK

Registro diario del peso corporal de los animales

Vol�menes tumorales registrados tres veces a la semana

Observaci�n dos veces al día de los signos cl�nicos, morbilidad y mortalidad

Sacrificio de los ratones a Tmax (0,75 horas) el día de la última dosis

Observaciones durante la necropsia: patología macroscópica en órganos internos, tales como pulmón, hígado, ri��n, bazo e intestinos y en caso de patología macroscópica se observa la histopatolog�a de estos órganos. Se recogió plasma para la estimación de la concentración del fármaco y se us� sangre completa para aislar las PBMC para determinar la inhibición de pStat3 por citometr�a de flujo como una lectura de PD. Los tumores se congelaron instantáneamente en nitrógeno líquido y se conservaron a -80�C para estimar pStat3 por citometr�a de flujo como una lectura de PD.

Determinaci�n de la concentración del fármaco en plasma:

Se trataron muestras de plasma con acetonitrilo y se centrifugaron. El líquido sobrenadante se evapor� hasta sequedad, se reconstituyó con la fase móvil y luego se analizó para la concentración del fármaco por CL-EM/EM en modo MRM. Las muestras tumorales se homogeneizaron y luego se sometieron al mismo procedimiento que el plasma. Se utilizó un conjunto de patrones de calibración y muestras para control de calidad tanto para las muestras de plasma como de tumores.

Cuantificaci�n de pStat3 en las PBMC y tumores:

Extracci�n de sangre y tratamiento de los compuestos

Se extrajo sangre venosa de la vena retro-orbital y se pas� a un tubo de ensayo Vacutainer BD (tampón de citrato de Na 0,109 M, 3,2%) BD Franklin (N� 8019827) y se transfirió a una placa de 6 pocillos (Costar N� 3516). La fosforilaci�n de Stat3 se estimul� por la adición de hIL6 (10 �g/mL) durante 30 minutos a 37�C. La sangre se fij� con formaldeh�do (2% v/v final) durante 10 minutos a 37�C.

Separaciones de las PBMC

Se colocó sangre sobre el medio Histopaque templado (Sigma N� de catalogo 10771, proporción de 1:2, 3,5 mL de sangre + 7,5 mL de Histopaque). Se centrifug� (Eppendorf N� 5810R, rotor A-4-62) a 1500 rpm durante 30 minutos a temperatura ambiente (con desaceleraci�n cero). La capa leucoc�tica (PBMC) se separ� aspirando la capa translúcida con una pipeta y se lav� dos veces con PBS -1�

Permeabilizaci�n

Las PBMC pre-enfriadas se permeabilizaron añadiendo metanol enfriado con hielo, mientras se agitaban con v�rtice moderadamente (volumen final, MeOH al 90% v/v) y se incubaron durante 30 minutos en hielo.

Tinci�n utilizando anticuerpos (Ab) primarios y anticuerpos secundarios conjugados no marcados.

Las PBMC permeabilizadas se lavaron una vez con PBS. Las PBMC se volvieron a poner en suspensión hasta 2�106 células en 200 ÉL de tampón de incubaci�n durante 10 minutos a temperatura ambiente (TA). Se a�adi� Ab primario (dilución 1:100) y se incub� durante 45 minutos a TA. Se lavaron como antes (dos veces) y se volvieron a poner en suspensión en Ab secundario conjugado con fluorocromo (dilución 1:500) y se incubaron a TA a oscuras durante 30 minutos. Se lavaron y volvieron a poner en suspensión en 500 ÉL de PBS.

An�lisis de pStat3 por FACS

Se midió pStat3 usando una máquina calibradora FACS (BD). Se utilizaron las PBMC no teñidas para los ajustes de citometr�a. Las PBMC teñidas con Ab primario (anticuerpo policlonal de conejo para pSTAT3-phosphor Y705-Abcam N� ab30646) y Ab secundario (anticuerpo anti-conejo de cabra IgG-Zymed 81-6111) [tratados como control (pico M1)], y las células estimuladas solo con IL-6 teñidas con isotipos de control se trataron como control positivo [desplazamientos de los picos hacia el lado derecho (M2)]. Se observaron picos de células tratadas con compuesto/inhibidor más IL6 [desplazamientos hacia el lado izquierdo]. Se representaron gráficamente los histogramas (número de células V/s FL1-H). Se calcul� el porcentaje de células que se fosforilaron por estimulaci�n con IL6 (población M2) y la inhibición de la fosforilaci�n por inhibidor (disminución de la población M2) sobre el histograma por los picos de marcado, M1 y M2.

Tumores:

Se separ� el tumor y se trituraron 200 mg del mismo (45 mg por mL) usando IKA 10 a velocidad N� 4 durante 10 segundos. Se tamizó el extracto de tumor por un tamiz de 100 �, se centrifug� a 900 g durante 10 minutos. Las células se volvieron a poner en suspensión brevemente en 0,5-1 mL de PBS. Se a�adi� formaldeh�do a una concentración final de formaldeh�do de 2-4%. Se fijaron durante 10 minutos a 37�C. Los tubos se enfriaron con hielo

5 durante 1 minuto.

Permeabilizaci�n

Se permeabilizaron las células añadiendo lentamente metanol al 100% enfriado con hielo a células pre-enfriadas, mientras se agitaban moderadamente con v�rtice, hasta una concentración final de metanol del 90%. Alternativamente, para eliminar la fijación previa a la permeabilizaci�n, se sedimentaron las células por 10 centrifugaci�n y se pusieron de nuevo en suspensión en metanol al 90%. Se incubaron durante 30 minutos en hielo. A continuación las células se tiñeron o se conservaron a –20�C en metanol al 90%. Se tomaron partes alícuotas de 0,5-1x106 células en cada tubo de ensayo (en volumen). Se añadieron a cada tubo 2-3 mL de tampón de incubaci�n y se lavaron por centrifugaci�n. Se repitieron las operaciones anteriores. Las células se volvieron a poner en suspensión en 100 μL de tampón de incubaci�n por tubo de ensayo. Se analizaron por citometr�a de flujo como las

15 PBMC.

Resultados:

Tabla 5

Modelo:: Modelo B16F10 Modelo de xenoinjerto A549

Compuesto: Dosis Inhibición de la metástasis % de inhibición de pStat3 en las PBMC %de TGI (inhibición del crecimiento tumoral) % de inhibición de pStat3 en las PBMC % de inhibición de pStat3 en tumores

45: 10 MPK n/d n/d 28,90 55,61 44,46

30 MPK: 73% 66 55,62 60,66 48,92

100 MPK: 75% 73 63,86 65,28 61,51

150 MPK: n/d n/d 53,74 76,56 57,08

Taxol: 5 MPK 32% 25 n/a n/a n/a

Erlotinib: 100 MPK n/a n/a 59,55 44,43 28,14

Vinorelbina: 8 MPK n/a n/a 51,89 28,8 25,2

Gefitinib: 100 MPK n/a n/a n/a n/a n/a

Modelo:: Modelo de xenoinjerto A431

Compuesto: Dosis % de TGI % de inhibición de pStat3 en las PBMC % de inhibición de pStat3 en tumores

45: 10 MPK n/d n/d n/d

30 MPK: n/d n/d n/d

100 MPK: 52,55 56,32 44,3

150 MPK: n/d n/d n/d

Taxol: 5 MPK n/a n/a n/a

Erlotinib: 100 MPK n/a n/a n/a

Vinorelbina: 8 MPK n/a n/a n/a

Modelo:: Modelo de xenoinjerto A431

Gefitinib: 100 MPK 94,25 54,1 45,44

1.: El compuesto N� 45 mostr� buena tolerancia (hasta 250 MPK) en ratones atómicos.

2.: El compuesto N� 45 no causa efectos de toxicidad pronunciada sobre los órganos principales tras un

tratamiento de una vez al día durante 14 días en ratones atómicos con la excepción de desviaciones 5 menores en el tracto gastrointestinal.

3.: En el modelo de metástasis B16F10, el compuesto N� 45 mostr� buena actividad antitumoral. El compuesto N� 45 a 100 MPK caus� una reducción del 75% en recuentos metast�sicos en pulmones cuando se administr� Q1Dx14.

4.: La actividad antitumoral del compuesto N� 45 en el modelo de supervivencia B16F10 dio como resultado

10 una ventaja de supervivencia del 37,5% que es significativa para un modelo tan agresivo (dosificación: Q1Dx14).

5. En el modelo de xenoinjerto A549 el compuesto N� 45 a 100 MPK (Q1Dx14) mostr� una inhibición del crecimiento tumoral del 64%. Una dosis mayor que 150 MPK dio como resultado una TGI de 54, si bien no estadísticamente significativa a partir del resultado para 100 MPK.

15 6. No se observaron grandes efectos de toxicidad relaciona con compuestos hasta 150 MPK del compuesto N� 45 durante el estudio de eficacia en A549.

Se muestran resultados adicionales, obtenidos con los compuestos N� 117 y 179, en la Tabla 6 y en la Figura 4.

Tabla 6

Ensayos: Compuesto N� 45 Compuesto N� 117 Compuesto N� 179

MTD (MPK): 250 100 30

% de inhibición de pSTAT3 en las PBMC (estudio MTD): 84% a 100 MPK 83% a 100 MPK 65% a 30 MPK

Eficacia – B16F10 a 100 MPK Ventaja de supervivencia % de inhibición de metástasis: 9 días 75% 1 día 26% 4 días 47%

Eficacia – A549 a 100 MPK TGI % de inhibición de pSTAT3 (tumor): 64% a 100 MPK 62% a 100 MPK 56% a 100 MPK 47% a 100 MPK 68% a 30 MPK 79% a 30 MPK

Eficacia – A431 a 100 MPK TGI % de inhibición de pSTAT3 (tumor): 48% 45% 54% 10% 67% 54%

20 Distribución de volumen

Un elevado volumen de distribución de un compuesto indica que el compuesto penetra en órganos y tejidos, siendo adecuado para el tratamiento de tumores sólidos, mientras que un bajo volumen de distribución indica que el compuesto presente una menor capacidad de penetrar en órganos y tejidos y que, por lo tanto, permanece en la circulación sanguínea. Por lo tanto, los compuestos con un volumen de distribución débil como el compuesto N� 171 son más adecuados para el tratamiento de tumores sanguíneos (hematol�gicos). La Tabla 8 proporciona algunos valores de distribución de volumen de los compuestos de la presente invención.

Tabla 8

N� del compuesto: Vd (mL/kg)

45: 5894

171: 794

185: 583,2

17: 7700

162: 3350

155: 11807

131: 7141

147: 20606

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I) que tiene la estructura:

R3 Y

X N

N

NHN

R1

(I)

5 donde

R1 es H, arilo, arilo sustituido, alquilo, alquilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, heterociclilo, heterociclilo sustituido, heterociclilalquilo o heterociclilalquilo sustituido,

X es CH2 o C=O

R2 es H, alquilo (C1-C6), halógeno, CF3 u O-alquilo (C1-C6)

10 Y es -NHCO-, -CONH-, -NHSO2-, -NH-, -NCH3-CO-, -NHCH2-, O, –NHCONH-o –NHCOCH2-

R3 es alquilo, alquilo sustituido, arilo o arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido, cicloalquilo, cicloalquilo sustituido o heterocicloalquilo

en donde el término "alquilo" se refiere a grupos alif�ticos saturados, incluyendo grupos alquilo de cadena lineal, grupos alquilo de cadena ramificada, grupos cicloalquilo (alic�clicos), grupos cicloalquilo sustituidos con alquilo y

15 grupos alquilo sustituidos con cicloalquilo;

el término “cicloalquilo” se refiere a un carbociclo saturado o parcialmente saturado, monoc�clico o fusionado o espiro polic�clico;

el término “heterocicloalquilo” o “heterociclilo” se refiere a un sistema anular de 3 a 10 miembros no aromático,

parcialmente no saturado o completamente saturado, que incluye anillos individuales de 3 a 8 átomos y sistemas

20 anulares bi- o tri-cíclicos que pueden incluir anillos de arilo o heteroarilo aromáticos de seis miembros fusionados a un anillo no aromático;

el término "sustituido" se refiere a la sustitución con uno o más o cualquier combinación de los siguientes sustituyentes: hidroxi, halógeno, carboxilo, ciano, nitro, oxo (=O), tio (=S), alquilo sustituido o no sustituido, haloalquilo sustituido o no sustituido, alcoxi sustituido o no sustituido, haloalcoxi sustituido o no sustituido, alquenilo

25 sustituido o no sustituido, alquinilo sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, arilalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquenilalquilo sustituido o no sustituido, cicloalquenilo sustituido o no sustituido, amino sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, anillo de heterociclilalquilo sustituido o no sustituido, anillo de heteroarilalquilo sustituido o no sustituido, anillo heteroc�clico sustituido o no sustituido, guanidina sustituida o no sustituida;

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.
2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, de fórmula (II) que tiene la estructura:

R2 O

X

R3

N

N

N

H

N

HN

R1

(II)

donde

R1 es hidrógeno, alquilo (C1-C4), fenilo, fenilo sustituido, piridina o piridina sustituida,

X es CH2 o C=O

R2 es H, alquilo (C1-C6), halógeno u O-alquilo (C1-C6),

5 R3 es alquilo (C1-C6), cicloalquilo, cicloalquilo sustituido, heterocicloalquilo, arilo, arilo sustituido, heteroarilo, heteroarilo sustituido,

} CF3

} CF3 }

N N

;;;

H

y donde los sustituyentes se seleccionan del grupo que comprende alquilo de C1-C4 lineal o ramificado, 10 alquilo de C1-C4 sustituido con halo o nitrilo, -O-alquilo (C1-C4), halógeno;

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.
3.

El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, donde R3 se selecciona del grupo que consiste en:
4.

El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde R1 es fenilo sustituido o piridina sustituida, X es CH2 o C=O R2 es H, CH3, Cl o F R3 se selecciona del grupo que consiste en:

} CF3

} CF3 }

N

N

;;

;H

y fenilo sustituido, donde los sustituyentes se seleccionan del grupo que comprende Cl, F, Br CF3 y CH3.
5. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde R1 se selecciona del grupo que consiste en:

N

O

S

N

O

O NH HN

O

N

N

;;;

;

O

N

O NH N

N

;;

N

5y R3 se selecciona del grupo que consiste en:
6. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, seleccionado del grupo que consiste en: N-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazina-1-carbonil)-fenilamino]-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-310 trifluorometil-benzamida

N-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometil-benzamida Ciclopropilamida del ácido 5-{6-[2-metil-5-(3-trifluorometil-benzoilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3

d]pirimidin-2-ilamino}-piridina-2-carbox�lico

15 N-{3-[2-(4-Ciclopropilsulfamoil-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-4-metil-fenil}-3trifluorometil-benzamida N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3

trifluorometil-benzamida {4-Cloro-3-[2-(4-metilcarbamoil-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-fenil}-amida del ácido 4

20 trifluorometil-piridina-2-carbox�lico

4,4,4-Trifluoro-3-metil-N-[4-metil-3-(2-{4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-etoxi]-fenilamino}-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3d]pirimidin-6-il)-fenil]-butiramida 1-Ciclopentil-3-(4-metil-3-{2-[4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-fenilamino]-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}

fenil)-urea

25 N-(4-Metil-3-{5-oxo-2-[4-(2-pirrolidin-1-il-etoxi)-fenilamino]-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometil-benzamida N-{4-Cloro-3-[2-(4-ciclopropilcarbamoilmetoxi-fenilamino)-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]fenil}-3-trifluorometil-benzamida

N-(4-Cloro-3-{2-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}fenil)-3-trifluorometil-benzamida

3-Bromo-N-(4-metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}fenil)-benzamida

N-(4-Cloro-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-ilmetil)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}fenil)-3-trifluorometil-benzamida

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.
7. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, seleccionado del grupo que consiste en:

N-(4-Metil-3-{2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}-fenil)-3trifluorometil-benzamida

Ciclopropilamida del ácido 5-{6-[2-metil-5-(3-trifluorometil-benzoilamino)-fenil]-5,6,7,8-tetrahidro-pirido[4,3d]pirimidin-2-ilamino}-piridina-2-carbox�lico

{4-Cloro-3-[2-(4-metilcarbamoil-fenilamino)-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]-fenil}-amida del ácido 4trifluorometil-piridina-2-carbox�lico

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.
8. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, seleccionado del grupo que consiste en:

N-(4-Cloro-3-{2-[3-metil-4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenilamino]-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il}fenil)-3-trifluorometil-benzamida

N-{4-Cloro-3-[2-(4-ciclopropilcarbamoilmetoxi-fenilamino)-5-oxo-7,8-dihidro-5H-pirido[4,3-d]pirimidin-6-il]fenil}-3-trifluorometil-benzamida

o una de sus sales farmac�uticamente aceptables.
9. El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, para uso en terapia.
10.

Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, y al menos un excipiente, vehículo o diluyente farmac�uticamente aceptable.
11.

El compuesto de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, para uso en un método para tratar enfermedades asociadas a la activación de la vía STAT3, por inhibición de múltiples dianas de c-SRC y JAK2.
12.

El compuesto de la reivindicación 11, donde dicha enfermedad es cáncer, enfermedades autoinmunitarias, enfermedades óseas y enfermedades hematol�gicas.
13.

El compuesto de la reivindicación 12, donde dicho cáncer es cáncer de mama, cáncer de cabeza y cuello, melanoma, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, cáncer de páncreas, cáncer de colon, cáncer uterino, cáncer gástrico, cáncer renal, cáncer de vejiga, cáncer de hígado y cáncer de pr�stata, y donde dicho compuesto es cualquiera de los compuestos de la reivindicación 7.
14.

El compuesto de la reivindicación 12, donde dicho cáncer es mieloma múltiple, leucemias, neoplasias mieloproliferantes y linfomas, y donde dicho compuesto es cualquiera de los compuestos de la reivindicación 8.