ES2556765T3

ES2556765T3 - Soporte nutricional para prevenir o moderar la parálisis de la médula ósea o la neutropenia durante el tratamiento anticáncer

Info

Publication number: ES2556765T3
Application number: ES09792438.5T
Authority: ES
Inventors: Eduardo Schiffrin; Kevin Burke Miller; Dominique Brassart
Original assignee: Nestec SA
Current assignee: Nestec SA
Priority date: 2008-09-19
Filing date: 2009-09-11
Publication date: 2016-01-20
Anticipated expiration: 2029-09-11
Also published as: CN105876780A; MX2011002983A; EP2344148B2; WO2010033425A2; MX2011002982A; JP2015147770A; ZA201102908B; CN102164595A; US20110229447A1; CA2736747C; CA2737619A1; BRPI0919847A2; CN102215836B; JP2012502996A; AU2009293475A1; ES2556765T5; EP2344147A2; EP2344148B1; CA2736747A1; RU2011115192A

Abstract

Composición inmunonutricional que comprende: al menos un agente reforzante de la inmunidad y un soporte farmacéuticamente aceptable, donde dicho agente reforzante de la inmunidad incluye arginina, para prevenir o reducir transitoriamente el efecto tóxico en la médula ósea provocado por el tratamiento anticáncer, de manera que dicha composición inmunonutricional se usa como parte de un tratamiento neoadyuvante y se administra por vía enteral.

Description

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Tal como se usa aquí, “administraciones prolongadas” son preferiblemente administraciones continuas durante más de 6 semanas.

Tal como se usa aquí, “microorganismo” incluye bacterias, levaduras y/u hongos, un medio de cultivo celular con el microorganismo o un medio de cultivo celular en el cual ha crecido el microorganismo.

Tal como se usa aquí, un “prebiótico” es preferentemente una sustancia alimenticia que promueve el crecimiento selectivo de bacterias beneficiosas o que inhibe el crecimiento de bacterias patógenas en los intestinos. No se inactivan en el estómago y/o en el intestino delgado ni se absorben en el tracto gastrointestinal de la persona que los ingiere, pero son fermentados por la microflora gastrointestinal y/o por probióticos. Los prebióticos están definidos, por ejemplo, en Glenn R. Gibson y Marcel B. Roberfroid, Dietary Modulation of the Human Colonic Microbiota: Introducing the Concept of Prebiotics [Modulación dietética de la microbiota colónica humana: introducción del concepto de prebióticos], J. Nutr. 1995 125: 1401-1412.

Tal como se usan aquí, los microorganismos probióticos (de aquí en adelante “probióticos”) son preferentemente microorganismos (vivientes, semi-viables o atenuados y/o no replicantes), metabolitos, preparaciones de células microbianas o componentes de células microbianas que pueden beneficiar la salud del huésped cuando se administran en cantidades adecuadas, en particular, que afectan beneficiosamente a un huésped mejorando su balance microbiano intestinal y produciendo efectos en la salud o bienestar del huésped (Salminen S, Ouwehand A. Benno Y. y otros, “Probiotics: how should they be defined” [Probióticos: cómo deberían definirse] Trends Food Sci. Technol. 1999:10 107-10). En general se cree que estos microorganismos inhiben el crecimiento y/o el metabolismo de las bacterias patógenas en el tracto intestinal o influyen en él. Los probióticos también pueden activar la función inmunológica del huésped. Por esta razón ha habido muchos planteamientos distintos para incluir probióticos en productos alimenticios.

Tal como se usa aquí, “administraciones temporales” son preferiblemente administraciones continuas de menos de 6 semanas de duración.

Tal como se usa aquí, “alimentación enteral” se refiere preferentemente a productos nutricionales completos o incompletos que se administran al sistema gastrointestinal de un animal por una vía distinta de la administración oral, incluyendo sin exclusión la sonda nasogástrica, la sonda orogástrica, la sonda gástrica, la sonda yeyunostómica (sonda J), la gastrostomía endoscópica percutánea (GEP), puntos de acceso tales como un puerto torácico, que proporciona acceso al estómago, al yeyuno, y otros puertos de acceso adecuados.

Todos los intervalos de dosificación mencionados en esta solicitud de patente incluyen todos los números, enteros o fracciones, contenidos en dicho intervalo.

Tal como se usa aquí, el término “sujeto” se refiere a cualquier animal (p.ej. un mamífero), incluyendo, sin limitarse a ellos, humanos, primates no humanos, roedores y similares, destinado a ser el receptor de un tratamiento concreto. Refiriéndose a un sujeto humano, los términos “sujeto” y “paciente” son normalmente intercambiables. “Sujeto” también puede designar un paciente de cáncer que está experimentando apoptosis inducida por terapia anticáncer, ya sea durante o después de dicho tratamiento.

Tal como se usan aquí, los términos “tratamiento”, “tratar” y “aliviar” se refieren preferiblemente al tratamiento tanto profiláctico o preventivo (que evita y/o frena el desarrollo de un estado o trastorno patológico al cual va dirigido el tratamiento) como curativo, terapéutico o modificador de la enfermedad, incluyendo medidas que curan, ralentizan, reducen síntomas y/o detienen el avance de un estado o trastorno patológico diagnosticado, y al tratamiento de pacientes que tienen el riesgo de contraer una enfermedad o que supuestamente la han contraído, y de pacientes que están enfermos o que han sido diagnosticados de padecer una enfermedad o estado médico. Los términos “tratamiento”, “tratar” y “aliviar” también se refieren al mantenimiento y/o a la promoción de la salud en un individuo que no padece ninguna enfermedad, pero puede ser susceptible de desarrollar un problema de salud tal como un desequilibrio de nitrógeno o una pérdida muscular. Los términos “tratamiento”, “tratar” y “aliviar” también incluyen la potenciación o la intensificación de una o más medidas profilácticas o terapéuticas primarias.

En las reivindicaciones se usa “o” para significar “y/o”, a no ser que se indique explícitamente para referirse solo a alternativas o a las alternativas mutuamente excluyentes, aunque la revelación respalda una definición referida solamente a alternativas y a “y/o”.

A lo largo de esta solicitud de patente el término “aproximadamente” se usa para indicar que un valor comprende la desviación estándar del error del aparato o método empelado para determinar dicho valor.

Se contempla específicamente que cualquier forma de ejecución descrita en los ejemplos está incluida como forma de ejecución de la presente invención.

Los términos “uno” y “una”, utilizados junto la locución “que comprende” en las reivindicaciones o en la descripción, significan uno o más, a no ser que se mencione específicamente.

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Los agentes inmunonutricionales o inmunonutrientes son componentes dietéticos que surten efectos específicos en el sistema inmunitario o pueden aportar beneficios adicionales a los pacientes que sufren las secuelas adversas de la inanición, enfermedad o cirugía y de la apoptosis inducida por la terapia anticáncer. Es sabido que estos agentes estimulan la función inmunológica cuando se administran a los pacientes por vía enteral o parenteral y que pueden ser eficaces para mejorar los resultados durante el periodo preoperatorio o anterior al tratamiento anticáncer y para disminuir la posibilidad de infecciones postoperatorias y la estancia hospitalaria. Como ejemplos comercialmente disponibles de regímenes inmunonutricionales de administración enteral con efectos potenciadores de la inmunidad cabe mencionar: Impact® (Novartis Nutrition, Minneapolis) e Immune-Aid® (McGaw, Inc, Irvine CA), Immunex-Plex® (Victus, Inc., Miami, FL) y AlitraQ® (Laboratorios Ross, Columbus OH). Estos regímenes contienen nutrientes clave como glutamina, ácidos grasos w-3, arginina y/o ácido ribonucleico en formulaciones comercialmente disponibles con diversas composiciones cuantitativas. Los efectos de estos nutrientes principales están resumidos en la tabla 1 de Heys, S.D. y otros, Nutr. Hosp. 19:325-332, 2004. Los inmunonutrientes se pueden incorporar a formulaciones nutricionales corrientes para pacientes que han sido intervenidos de cáncer, p.ej. cirugía de cáncer gastrointestinal y cirugía de cáncer pancreático, o que han sido sometidos a terapia anticáncer o están en curso de someterse a dicha cirugía o tratamiento. Braga, M. y otros, Nutritional Therapy & Metabolism, 24:115-119, 2006; McCowen, K.C. y otros, Am. J. Clin. Nutr. 77:764-770, 2003; Słotwiński, R. y otros, Centr. Eur. J. Immunol., 32(3):147-154, 2007. Las formulaciones se administran a los pacientes de cáncer preferentemente por vía enteral. Se pueden dar antes, durante y después de la intervención o antes, durante y después del tratamiento terapéutico anticáncer, aunque los estudios han indicado que las suplementaciones preoperatorias y perioperatorias de inmunonutrientes son más efectivas que el tratamiento postoperatorio para mejorar el resultado clínico de pacientes con cáncer gastrointestinal. Cuando la inmunonutrición se facilitó en el postoperatorio los resultados fueron opuestos, probablemente porque la cantidad de substratos proporcionados a los pacientes de cáncer en los cinco primeros días tras la intervención no llegaba a alcanzar con suficiente rapidez la concentración adecuada en el tejido y en el plasma para ser activa. De hecho los inmunonutrientes tardan unos 5 días en incorporarse a los tejidos del huésped y por tanto en modular los mediadores inflamatorios y los perfiles de ácido graso. Braga, M. y otros, arriba citado; McCowen, K.C. y otros, arriba citado. Sin embargo, hasta la fecha aún no hay respuesta a las preguntas sobre los efectos inmunomoduladores de la inmunonutrición en un paciente de cáncer, administrada durante el periodo pre-, peri-o postoperatorio.

El término “agente potenciador de la inmunidad” o “inmunonutricional” conlleva la administración de compuestos nutricionales específicos que tienen propiedades cualitativas intensificadoras, potenciadoras o aumentativas del sistema inmunitario general de los pacientes sometidos a terapia anticáncer o antitumoral o de los pacientes cuya función inmunológica está deteriorada, con el fin de alterar los efectos citotóxicos inducidos por el tumor, mejorar los resultados clínicos y además preservar e intensificar los procesos inmunológicos innatos y adaptativos del sistema inmunitario del huésped para activar la eliminación de las células tumorales como respuesta a la inducción de los determinantes inmunogénicos, tal como se ha ejemplificado arriba. Como ejemplos de compuestos nutricionales potenciadores de la inmunidad cabe mencionar aminoácidos tales como L-arginina, citrulina, cisteína, glutamina, treonina, ácidos grasos omega-3 y nucleótidos. Otros ejemplos de agentes potenciadores de la inmunidad incluyen un probiótico, una biomasa probiótica, un organismo no replicante, una fuente de proteínas, un ácido graso, un aminoácido, un ácido nucleico, potasio, ácido úrico, un oligonucleótido de cadena sencilla, un patrón molecular asociado a patógenos/microbios (PAMP/MAMP), un compuesto correlacionado de hexosa activa, carotenoides, un receptor de vitamina D, aminoácidos de cadena ramificada, teanina, vitamina E, ácidos grasos esenciales como EPA y DHA o EPA/DHA.

Las composiciones nutricionales potenciadoras de la inmunidad pueden administrarse por alimentación intragástrica.

Tal como se usa aquí, el término “periodo peri-operatorio” se refiere al tiempo correspondiente a un procedimiento quirúrgico de un paciente, que normalmente incluye la admisión, la anestesia, la cirugía y la recuperación. Perioperatorio se refiere en general a las tres fases de la intervención: preoperatorio, intraoperatorio y postoperatorio. El objetivo del cuidado peri-operatorio consiste en proporcionar mejores condiciones para los pacientes antes, durante y después de la operación, incluyendo el tratamiento neoadyuvante. Análogamente el pre-, peri-y postratamiento terapéutico anticáncer se refiere al periodo de tiempo antes, durante y después de la quimioterapia o radioterapia anticáncer.

Tal como se usa aquí, el término “neoadyuvante” o “tratamiento neoadyuvante” se refiere a un intento para que una neoplasia / tumor sea más sensible a un tratamiento más agresivo, por ejemplo centralizando el tumor (proyectos de reducción) y/o contrayéndolo, y reducir el riesgo de siembra de células cancerosas durante la eliminación quirúrgica.

Tal como se usa aquí, el término “tratamiento agresivo” hace referencia a los tratamientos quirúrgicos, incluyendo la cirugía tradicional y la radiocirugía, y a los tratamientos quimioterapéuticos, hormonales y radioterapéuticos.

De acuerdo con la presente invención el mecanismo de muerte celular o apoptosis es inducido por quimioterapia o radioterapia. La muerte celular por apoptosis inducida mediante estos tratamientos es de tipo inmunogénico porque todas las células del tumor están expuestas a estrés celular antes de morir.

El incremento transitorio de antigenicidad o inmunogenicidad tiene lugar en las células tumorales expuestas a la muerte celular inducida por terapia anticáncer. Las composiciones inmunonutricionales según la presente invención

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actúan con mayor preferencia sobre todas las células inmunitarias del sujeto para preservar su inmunocompetencia durante el estrés causado por el tratamiento, sin excluir la posibilidad de que nutrientes tales como la glutamina intensifiquen la expresión de HSP en las células tumorales estresadas, aumentando aún más su inmunogenicidad. En general la apoptosis es un tipo de muerte celular que no es eficiente para provocar una respuesta inmunológica adaptativa innata. Sin embargo en algunos casos la muerte celular apoptótica se puede comunicar con la expresión de “señales de peligro” y tener por consiguiente una capacidad estimulante del sistema inmunitario. Además la respuesta inmunológica potencialmente generada durante este momento específico puede contrarrestar la respuesta tolerogénica que el tumor induce en su propio beneficio para eludir la respuesta inmunológica.

Por lo tanto una estrategia que se emplea en inmunoterapia consiste en evitar la inmunotolerancia que puede ser iniciada por el procesamiento y presentación de antígenos tumorales por células presentadoras de antígenos no activadas, p.ej. células dendríticas. Algunos estudios han demostrado que con agonistas tales como los oligodesoxinucleótidos de CpG (ODNs) y otros nucleótidos, ARN, ADN y otras señales de peligro se puede estimular mejor la reacción inmunológica anticáncer.

Los ODNs de CpG estimulan células que expresan el receptor 9 de tipo Toll, el cual inicia una cascada de inmunomodulación que lleva a la activación de linfocitos B y T, células asesinas naturales, monocitos, macrófagos y células dendríticas. Los ODNs de CpG mejoran la capacidad de resistencia del huésped a las infecciones y la inducción de las respuestas inmunológicas innatas y adaptativas. Klinman, D.M. y otros, Expert Opin. Biol. Ther., 4(6):937-946, 2004.

Además las células dendríticas (DC) pueden ejercer una función celular inmunitaria más primitiva, es decir la capacidad de destruir células transformadas (cáncer). Esta función ha sido adscrita a un tipo de célula dendrítica mencionada por otros como célula dendrítica asesina (KDC). La KDC tiene la capacidad de matar células tumorales mediante diversos mecanismos que evitan el escape de células tumorales “resistentes” a un solo mecanismo de muerte.

La disfunción de la doble función de las DC durante el tratamiento, es decir la presentación de antígenos y la eliminación de células tumorales, se puede evitar activando la población de DC mediante intervenciones inmunonutritivas. El método combinado de un tratamiento anticáncer tal como la quimioterapia y/o la radioterapia con la inmunonutrición puede preservar una competencia inmunitaria que proporcione un beneficio potencial para hacer los ciclos más eficientes, mejorar la tolerancia a la toxicidad inmunológica de los tratamientos que pueden dañar la mucosas (mucositis) y producir una mayor incidencia de infecciones.

Las células asesinas naturales y las células asesinas naturales T también están implicadas en la destrucción celular innata de células tumorales. Su capacidad funcional se ve muy mermada durante el tratamiento anticáncer. Pero para cumplir su función estas células tienen que mantener su capacidad de ser activadas y pasar por el ciclo celular a fin de expandir su población.

Los probióticos seleccionados y otros patrones moleculares asociados a microbios (MAMPs) tienen la capacidad de estimular esta población celular y por tanto producir la eliminación de células tumorales.

Los linfocitos citotóxicos CD8+ (CTL) que reconocen antígenos específicos en la diana celular se agotan durante la presentación de antígenos para iniciar la reacción inmunológica y además el tratamiento reprime su capacidad de actuación citotóxica. Los aminoácidos como la glutamina, la arginina y la citrulina son capaces de potenciar las vías metabólicas que generan las moléculas citotóxicas producidas por las CTL, contribuyendo a la eliminación de las células tumorales cuando los antígenos tumorales quedan más directamente expuestos debido a la inducción de la muerte celular durante el tratamiento.

Las composiciones inmunonutricionales según la presente invención comprenden preferiblemente al menos un probiótico o una combinación de probióticos. Los probióticos son microorganismos vivos que cuando se administran en cantidades adecuadas benefician la salud del huésped. Los probióticos se pueden obtener comercialmente o se pueden producir en general mediante un proceso de fermentación y opcionalmente secado. Las cepas específicas suelen preferir medios o substratos particulares, que la persona experimentada ya conoce. Los microorganismos pueden estar secos o por ejemplo en forma de esporas, en el caso de los microorganismos formadores de esporas. El secado de microorganismos después de producirlos por fermentación es conocido del especialista. Véase p.ej. la patente EP 0 818 529 (Société Des Produits Nestlé), en la cual se describe un proceso de secado por pulverización,

o la patente WO 0144440 (INRA). Usualmente los microorganismos bacterianos se concentran a partir de un medio y se secan por atomización, en lecho fluido, por liofilización (secado por congelación) u otro proceso apropiado de secado. Por ejemplo, los microorganismos se mezclan con un material soporte como un carbohidrato, por ejemplo sacarosa, lactosa o maltodextrina, un lípido o una proteína, por ejemplo leche en polvo, durante o antes del secado. Sin embargo no es necesario que los microorganismos estén en forma seca. También puede ser idóneo mezclarlos directamente tras la fermentación con una composición nutricional en polvo, por ejemplo, y luego opcionalmente realizar un proceso de secado, preferiblemente a temperaturas bajas (inferiores a 70ºC). Un método de este tipo se revela en la patente WO 02065840 (Société Des Produits Nestlé).

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Un probiótico seleccionado puede ser una cepa de Bifidobacterium o de Lactobacillus. Preferentemente es un Bifidobacterium lactis (colección alemana de cultivos: DSM20215), un Bifidobacterium longum (CNCM I-2170), un Lactobacillus paracasei (CNCM I-2116, CNCM I-1292), un Lactobacillus johnsonii (CNCM I-1225), un Lactobacillus salivarius, un Lactobacillus reuterii o mezclas de ellos.

El término “probiótico” también incluye bacterias probióticas no replicadas (muertas), substrato de fermentación y/o material derivado de probióticos. Las composiciones inmunonutricionales de la presente invención pueden contener probióticos muertos o matados por calor para el caso de pacientes gravemente inmunodeprimidos.

En general se supone que la activación de respuestas inmunológicas protectoras mediante células T CD8+ solo se consigue con vacunas vivas. Sin embargo se introdujeron antígenos procedentes de bacterias muertas en la vía del complejo principal de histocompatibilidad clase 1 y así fueron reconocidos por las células T CD8+. Estimulación de linfocitos protectores T CD8+ por vacunación con bacterias no vivientes. Szalay, G. y otros, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 92(26):12389-12392, 1995.

Se ha demostrado que lactobacilos tales como el Lactobacillus casei evitan infecciones intestinales y estimulan la IgA en animales malnutridos. Durante los distintos periodos de alimentación también aumentaron en el intestino grueso las células productoras de IgA y los linfocitos T (LT). El aumento de IgA indicaría que los mecanismos por los cuales los probióticos inhiben el desarrollo tumoral pueden consistir en la disminución de la respuesta inflamatoria. Por otra parte el yogurt, en forma de masa probiótica, no solo lleva los tipos de bacteria Streptoccus thermophilus y Lactobacillus bulgaricus, sino también bífido-bacterias y algunas veces Lactobacillus casei. El yogurt puede inhibir el crecimiento del carcinoma intestinal por incremento de la actividad de la IgA, de las células T y de los macrófagos. Perdigon, G. y otros, J. Dairy Sci., 78(7):1597-1606, 1995.

La dosis diaria de probióticos añadidos a las composiciones inmunonutricionales de la presente invención puede variar en el intervalo de 107 hasta 1010 UFC (unidades formadoras de colonias).

La expresión “compuesto correlacionado de hexosa activa (AHCC)” se refiere a una mezcla de polisacáridos, aminoácidos, lípidos y minerales derivada de micelios cocultivados de varias especies de hongos basidiomicetos. El AHCC ha sido relacionado con la inmunomodulación y la protección contra infecciones. El AHCC puede incrementar la vigilancia inmunitaria antitumoral regulando la respuesta inmunológica tanto innata como adaptativa (Gao, Y. y otros, Cancer Immunol. Immunother., 55(10):1258-1266, 2006; Ritz, B.W. y otros, J. Nutr. 136:2868-2873, 2006). El AHCC es suministrado comercialmente por Amino Up Chemical Co. Ltd, Japón. El AHCC puede aumentar la activación de la presentación de antígenos por los macrófagos y la inhibición de factores inmunosupresores derivados de tumores, potenciar la proliferación y activación de macrófagos, promover la diferenciación de las células Th1; incrementar la producción de IL-12 por macrófagos, aumentar la actividad de las células NK; promover la apoptosis de las células cancerosas. Se ha indicado que el AHCC incrementa el TNF-α, el interferón-γ y la interleucina-12 y disminuye la proteína acídica inmunosupresora (IAP) y el factor de crecimiento tumoral (TGF)-α. Vistos sus posibles efectos en el sistema inmunitario, el AHCC se puede usar como apoyo en el tratamiento del cáncer para mejorar algunos de los efectos secundarios negativos de la quimioterapia.

Tal como se usa aquí, el término “proteína intacta” se refiere a una proteína que preferiblemente no ha sido sometida a hidrólisis química o enzimática y se halla en una forma sustancialmente similar o idéntica a su estado natural. De acuerdo con la presente invención la “proteína intacta” se puede elegir al menos entre caseína, proteína de suero de leche, proteína de soja, colágeno o proteína de trigo.

En el contexto de la presente invención el término “fuente proteica” incluye cualquier materia proteinogénica basada en aminoácidos, tal como proteína dietética intacta o hidrolizada, así como péptidos añadidos o aminoácidos libres y mezclas de ellos, por ejemplo.

La fuente proteica puede incluir hidrolizados de proteína de alto grado de hidrólisis preparados a partir de proteínas animales y vegetales tratadas con ácido o enzimas, tales como los hidrolizados de caseína, suero de leche, caseína/ suero de leche, soja y mezclas de ellos. Por hidrolizados de proteína de “alto grado de hidrólisis” se entiende que la proteína intacta está hidrolizada en fragmentos peptídicos, la mayoría de los cuales tiene un peso molecular menor de 1000 Daltons. Preferentemente, al menos un 75% (con mayor preferencia al menos un 95%) de los fragmentos peptídicos tienen un peso molecular inferior a unos 1000 Daltons. Los aminoácidos libres y las cadenas peptídicas cortas sintéticas también pueden reemplazar los hidrolizados proteicos o añadirse a ellos como fuente de nitrógeno, siempre que la composición nutricional tenga un perfil de aminoácidos adecuado a la población a la cual va dirigida, como es conocido del especialista en el campo de las formulaciones nutricionales.

En una forma de ejecución preferida de las composiciones inmunonutricionales según la presente invención, la fuente proteica puede ser de origen animal o vegetal. Por lo tanto la fuente proteica puede incluir una combinación de proteína de suero de leche, de caseína o de soja y sus hidrolizados.

La fuente proteica de suero de leche puede proceder de suero de leche natural, suero de leche no hidrolizado intacto, concentrado de suero de leche, proteína aislada de suero de leche o proteína de suero de leche hidrolizada.

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La caseína se puede suministrar en forma libre o en forma de sal, por ejemplo de sal sódica. También es posible suministrar la caseína en forma de sal de calcio o potasio.

Tal como se usa aquí, el término “aminoácidos”, si no se indica otra cosa, se refiere a aminoácidos en forma libre y/o forma salina escogidos entre al menos uno de los aminoácidos esenciales, p.ej. isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, treonina, triptófano, valina o histidina; aminoácidos condicionalmente esenciales, p.ej. tirosina, cisteína, argentina o glutamina, o aminoácidos no esenciales, p.ej. glicina, alanina, prolina, serina, ácido glutamico, ácido aspártico, asparaginas, taurina o carnitina. El papel de los aminoácidos en la función inmunitaria está revisado por Peng Li y colegas en British J. Nutr., 98(2):237-252, 2007.

La presente invención también se refiere a composiciones inmunonutricionales que además incluyen aminoácidos de cadena ramificada (AACR), p.ej. valina, leucina, isoleucina o mezclas de ellos, en forma libre y/o en forma salina y/o en forma de proteína intacta. Los AACR pueden encontrarse en sus tres formas, como dipéptidos, tripéptidos, polipéptidos, como proteína rica en AACR y/o como proteína manipulada para enriquecer el contenido de AACR. Los dipéptidos, tripéptidos y polipéptidos pueden incluir dos o más AACR. Los productos nutricionales según la presente invención pueden incluir análogamente precursores y/o metabolitos de AACR.

Las células inmunitarias incorporan AACR a las proteínas y son capaces de oxidar AACR. La función del sistema inmunitario es proteger al huésped de los agentes infecciones patógenos y de otras agresiones perniciosas. Tras la infección hay un marcado aumento de la demanda de substratos por el sistema inmunitario; estos substratos aportan energía y son los precursores de la síntesis de células nuevas, moléculas efectoras y moléculas protectoras. Los estudios han indicado que los AACR son absolutamente esenciales para que los linfocitos sinteticen proteína, ARN y ADN, y se dividan respondiendo a la estimulación. En experimentos con ratones, la restricción de AACR en la dieta perjudica varios aspectos de la función inmunológica e incrementa la susceptibilidad a los agentes patógenos. Los pacientes postquirúrgicos o sépticos que recibieron formas intravenosas de AACR mostraron una mejor inmunidad, es decir mejores resultados. Los AACR son por tanto absolutamente esenciales para la capacidad de respuesta de los linfocitos y son necesarios para respaldar otras funciones celulares inmunológicas.

Los AACR también pueden promover la síntesis de glutamina y estimular la respuesta inmunológica Th1, un tipo de respuesta inmunológica adaptativa. El ejercicio intenso de larga duración se ha relacionado con la inmunosupresión, que a su vez afecta a células asesinas naturales, células asesinas activadas por linfocina y linfocitos. Se ha indicado que la glutamina es un alimento importante para macrófagos y linfocitos, y que posee efectos estimulantes de la inmunidad. Su aporte como suplemento oral tras el ejercicio tiene claros efectos beneficiosos en caso de infecciones subsecuentes en atletas fondistas. No obstante la concentración de glutamina en plasma disminuye tras el esfuerzo, p.ej. después de un periodo de ejercicio. Sin embargo el efecto reductor de la concentración de glutamina quedó neutralizado por la suplementación con AACR, a la cual le siguió una mayor respuesta proliferativa en las células mononucleares de la sangre periférica. La suplementación con AACR estimuló la producción de IL-2 e INF tras el ejercicio y un descenso más pronunciado de la producción de IL-4, lo cual indica una desviación hacia una respuesta inmunológica Th1. La suplementación con AACR también resultó efectiva para mantener constante la concentración de glutamina en plasma. Bassit, R. A. y otros, Nutrition, 18(5):376-379, 2002.

Además de mejorar los parámetros metabólicos, la suplementación oral enriquecida con AACR puede mejorar la morbilidad y la calidad de vida de pacientes sometidos a una resección mayor del hígado y a quimioembolización. Sin embargo el papel de los AACR como apoyo nutricional para pacientes quirúrgicos estresados y pacientes de cáncer todavía no está claramente definido, a pesar de sus propiedades biológicas potencialmente beneficiosas. Choudry, H.A. y otros, J. Nutr., 136(1 Suppl.):314S-8S, 2006.

La respuesta inmunológica requiere mayores cantidades de AACR. De hecho los linfocitos estimulados muestran una mayor absorción de AACR para la expansión celular, incluyendo leucina, isoleucina y valina. Además la leucina es un activador de la vía de señalización mTOR, que regula la síntesis y degradación proteica y también antagoniza el proceso autofágico de las células que sufren estrés o inanición. Los AACR se incorporan a las composiciones nutricionales de la presente invención en unas cantidades comprendidas aproximadamente entre 2 y 30 g diarios, preferiblemente en una cantidad aproximada de 3 g diarios.

Las composiciones nutricionales de la presente invención pueden comprender además glutamina (Gln) y/o arginina y/o citrulina y/o aminoácidos de cadena ramificada (AACR).

La glutamina es un substrato nutriente primordial para las células del sistema inmunitario. Además de ser una fuente fundamental de glutamato, la Gln regula la síntesis de glutatión y es un precursor de los nucleótidos de purina y de pirimidina necesarios para la proliferación de los linfocitos. En su papel de agente anticanceroso la Gln es capaz de incrementar la actividad citolítica innata de las NK, de las células dendríticas asesinas y de los macrófagos. La Gln también contribuye a la acción citolítica antígeno-específica de las células T CD8+ contra las células tumorales.

La glutamina puede estar en forma de un aminoácido añadido. En el contexto de la presente invención “aminoácido añadido” se refiere a un aminoácido no ligado a proteína que se incorpora aparte de las típicas fuentes dietéticas de proteína tales como leche, carne y proteínas vegetales. El aminoácido añadido puede estar presente en forma de un

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aminoácido libre y/o de un di-y/o tripéptido que comprende el aminoácido. Por ejemplo, la glutamina puede añadirse en forma de un dipéptido tal como L-alanil glutamina. La glutamina libre no es estable en un ambiente líquido; por tanto, si la composición debe venderse en forma líquida, la glutamina tendrá que añadirse como dipéptido u otra forma estable en medio líquido. En caso de tener que suministrar la composición en forma líquida, otra posibilidad sería incluir una cantidad apropiada de glutamina en polvo como módulo para mezclar con el líquido inmediatamente antes del consumo.

La cantidad de glutamina puede variar entre 5 g y 30 g diarios aproximadamente, con mayor preferencia entre 6 g y 9 g diarios aproximadamente.

Además de lo antedicho la Gln puede aumentar la expresión de HSP en células epiteliales normales del intestino. La expresión de HSP en las células tumorales durante el tratamiento anticáncer puede dar como resultado un aumento de inmunogenicidad de las células tumorales. El tratamiento anticáncer induce estrés en las células tumorales, el cual aumenta a su vez la eficacia del sistema inmunitario innato para contribuir al efecto citotóxico sobre las células transformadas y actúa conjuntamente con los fármacos en la eliminación de masa tumoral. La cantidad de Gln es preferiblemente de unos 5 g a 30 g, con mayor preferencia de unos 6 g to 9 g.

La arginina es sintetizada a partir de citrulina como precursor inmediato en muchos tejidos, pero de manera más importante en el riñón. A su vez la citrulina es sintetizada a partir de glutamina, glutamato y prolina a nivel intestinal. Los niveles de citrulina y arginina en el plasma disminuyen marcadamente durante la malnutrición, el ayuno, en distintos tipos de lesiones, cuando hay tumores, durante el tratamiento anticáncer y la sepsis. Se ha pensado que ello contribuye a la inmunodeficiencia existente en cáncer.

Las actividades biológicas de la arginina sobre la función inmunológica se podrían categorizar como directas e indirectas. Por lo tanto se puede asumir que la citrulina también producirá los mismos efectos que la arginina como resultado de su papel en la síntesis de arginina.

Muchas actividades directas sobre el sistema inmunitario están relacionadas con la función de las células T y se explican principalmente por la inducción de la expresión de uno de los componentes del receptor de células T. De hecho los niveles fisiológicos de arginina (150 µM) modulan la cadena ξ del receptor de células T necesaria para la función de las células T. De modo importante se ha demostrado que la citrulina actúa sinérgicamente con la arginina para expresar la cadena ξ de CD3, prolongando la vida media de su ARNm.

Hay varios tipos de tumores que expresan arginasa o inducen la expresión de arginasa en las células tumorales, dando como resultado uno de los mecanismos fundamentales de la inmunodeficiencia normalmente observada en la interacción huésped-tumor. La inmunodeficiencia afecta a la función citotóxica antígeno-específica de CD8 y también a la citotoxicidad innata de las NK y los macrófagos para las células transformadas. Los macrófagos asociados al tumor tienen una participación directa en el proceso inmunosupresor al producir arginasa y expresar además un fenotipo capaz de inducir células T reguladoras que impiden la acción citotóxica del sistema inmunitario. Todas estas observaciones respaldan la afirmación de que la administración simultánea de citrulina y arginina puede compensar la inmunodeficiencia durante la actividad antitumoral.

El metabolismo de L-arginina en células supresoras mieloides es crítico para inhibir la activación de las células T (Bronte, V. y otros, Nat. Rev. Immunol., 5:641-654, 2005). Se han descrito diferentes vías metabólicas en las MSC que explican el mayor consumo de arginina y la privación de este aminoácido para las células T, un requisito previo para la activación de las células T. Alternativamente los macrófagos activados se caracterizan por un incremento de la expresión de arginasa, un enzima responsable de la disminución de arginina.

La dosis diaria de arginina incluida en las composiciones inmunonutricionales de la presente invención puede variar aproximadamente entre 5 g y 30 g diarios, preferiblemente en un intervalo de concentración aproximado de 10 g hasta 15 g diarios.

La dosis diaria de citrulina incluida en las composiciones inmunonutricionales de la presente invención puede variar aproximadamente entre 1 g y 30 g diarios, preferiblemente en un intervalo de concentración aproximado de 2 g hasta 15 g diarios.

En varias aplicaciones clínicas de suplementación con citrulina se ha demostrado la eficacia de una dosis de tres a cuatro gramos tomados dos veces al día. Tras la administración los resultados suelen producirse durante un periodo de 3 -5 días. Volviendo ahora a parte del estado técnico anterior, la patente U.S. nº 5,576,351 describe en general el tratamiento de una respuesta inmunológica deficiente mediante la administración de arginina u ornitina o mezclas de las mismas a humanos que padecen o tienen el riesgo de padecer una respuesta inmunológica defectuosa. Sin embargo no hay ninguna revelación de que se obtenga algún beneficio en cuanto a mitigar o aliviar los efectos de dichas condiciones mediante la administración de arginina.

La patente WO/2007/114903 ofrece un método y una formulación para el tratamiento o el mantenimiento de unas condiciones que se beneficiarían del aumento o conservación de los niveles de arginina en la sangre y que tienen

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Por lo que respecta a la vitamina E, se ha indicado que el tratamiento de pacientes de cáncer con altas dosis diarias de vitamina E a corto plazo puede potenciar la acción de las células NK. La cantidad de vitamina E administrada a los pacientes de cáncer fue de unos 750 mg diarios durante dos semanas. Hanson, M.G. y otros, Cancer Immunol. Immunother., 56(7): 973-984, 2007. El tratamiento a corto plazo con vitamina E mejoró significativamente la acción citolítica de las células NK. La mayor actividad de las células NK entre las células mononucleares de la sangre periférica de los pacientes no se debió a un aumento del número de células NK o del porcentaje de la subpoblación de células NK CD56(dim). Asimismo, el tratamiento con vitamina E se relacionó con una inducción pequeña pero constante de la expresión de NKG2D entre todos los pacientes estudiados. La supresión inmunitaria inducida por tumores no está limitada al sistema de células T adaptativas y a los defectos funcionales de las células dendríticas (DC) y NK. La vitamina E tiene la capacidad de aumentar la producción de las citocinas IL-2 e IFN-gamma por Th1 e incrementar la actividad de las NK mediante un mecanismo probablemente muy distinto del de la histamina. Hanson,

M.G. y otros, arriba citado.

Las proteínas son proteínas lácteas (suero de leche o proteína de suero de leche en combinación con caseína) y aminoácidos que aportan aproximadamente un 20-40% del contenido energético del producto, preferiblemente cerca de un 30% del contenido energético del producto. Entre las proteínas también se pueden incluir las de soja, caseína y los hidrolizados.

La fuente de lípidos puede comprender ácidos grasos saturados (AGS), ácidos grasos monoinsaturados (AGMI) y/o ácidos grasos poliinsaturados (AGPI). Los AGS pueden hallarse en parte como triglicéridos de cadena media (TCM). Tal como se tratan aquí, los TCM hacen referencia a triglicéridos que comprenden ácidos grasos C6-C12. Todos los ácidos grasos de la fuente de lípidos pueden hallarse en forma de ácidos grasos n-3. El ácido graso n-3 se escoge preferiblemente entre ácido α-linolénico (18:3n-3), ácido eicosapentanoico (AEP, 20:5n-3), ácido docosapentanoico (ADP, 22:5n-3) y ácido docosahexaenoico (ADH, 22:6n-3) y mezclas de ellos.

Los lípidos pueden proporcionar un 25 -40% del contenido energético del producto, preferiblemente un 30% de la energía total del producto, el 50% del cual está constituido por triglicéridos de cadena media. Los ácidos grasos poliinsaturados (p.ej. ácido eicosapentanoico (AEP) y ácido docosapentanoico (ADP)) son de aceites vegetales o de aceite de pescado, con un intervalo de relación n6:n3 inferior a 6, con preferencia igual a 2-3 aproximadamente.

Se ha visto que los ácidos grasos esenciales (AGE) intervienen en la modulación de la reactividad de los linfocitos y en la destrucción de varias células tumorales in vitro. Purasiri, P. y otros, Eur. J. Surg. Oncol., 21(3):254-260. En la suplementación oral a corto plazo (15 días) con ácidos grasos esenciales (AGE), los AGE no alteraron de manera significativa la actividad citotóxica de las células NK y LAK en pacientes con cáncer localizado. Sin embargo en el grupo con la enfermedad avanzada la reducción de la actividad citotóxica de las células NK y LAK ocurrió el día 15 y disminuyó de manera continua, llegando a niveles mínimos 6 meses después de la suplementación. En el grupo con cáncer avanzado no hubo ningún cambio en la actividad citotóxica de las NK y LAK. No obstante la suplementación a largo plazo puede tener efectos perjudiciales para los mecanismos citotóxicos naturales anticáncer en pacientes con enfermedad maligna. Purasiri, P. y otros, arriba citado.

Como ejemplos de ácidos grasos ω-3 cabe citar AEP y ADH. Tanto el AEP como el ADH dan lugar respectivamente a eicosanoides y docosanoides, que pueden tener propiedades diferentes de los eicosanoides derivados de ácido araquidónico. El AEP y el ADH dan lugar a la formación de resolvinas. Calder, P.C. y otros, Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids, 77(5-6):327-335, 2007. Por otra parte se sabe que las resolvinas reducen la inflamación celular al inhibir la producción y el transporte de células y sustancias químicas inflamatorias a los sitios de inflamación. Las resolvinas tienen un papel inmunológico en los riñones como remedio contra el fallo renal agudo. Serhan, C. N. y otros, J. Exp. Med., 196(8):1025-37, 2002.

La mayor incorporación de AEP a los fosfolípidos de las células inmunitarias puede incrementar la producción de eicosanoides derivados de AEP tales como la prostaglandina E3 (PGE3) y los leucotrienos (LTs) de la serie 5, ya que el AEP puede servir de substrato para los enzimas ciclooxigenasa y lipooxigenasa. Se ha comprobado una mayor generación de LTs de la serie 5 empleando macrófagos procedentes de ratones alimentados con aceite de pescado, neutrófilos procedentes de sujetos humanos infundidos durante varios días con emulsiones de lípidos que contienen aceite de pescado, y neutrófilos procedentes de humanos suplementados durante varias semanas con aceite de pescado por vía oral.

Basándose en lo anterior, los ácidos grasos cumplen una serie de funciones en las células inmunitarias. Pueden constituir una reserva para la generación de energía, pueden actuar como componentes de los fosfolípidos de la membrana celular contribuyendo a las propiedades físicas y funcionales de esas membranas, como modificadores covalentes de la estructura proteica con influencia sobre la localización y la función celular de las proteínas, como reguladores de la expresión genética por efecto en la actividad de los receptores, en los procesos de señalización intracelular o en la activación de factores de transcripción, y como precursores para la síntesis de mediadores lípidos bioactivos como las prostaglandinas (PGs), los leucotrienos (LTs), las lipoxinas y las resolvinas.

Los cambios en la composición de ácidos grasos de los fosfolípidos de membrana puede influir en la actividad de las células inmunitarias, tal como se ilustra abajo, incluyendo las siguientes etapas: (1) alteraciones de las propiedades

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físicas de la membrana tales como su orden y dominio estructural; (2) efectos alterados en las vías de señalización celular, bien por un cambio en la expresión, actividad o avidez de los receptores de membrana o por modificación de los mecanismos de transducción de las señales intracelulares; y (3) alteraciones del patrón de los mediadores lípidos (PGE2). Como resultado de estos distintos cambios se altera la activación del factor de transcripción y se modifica la expresión genética. Distintos mediadores pueden producir diferentes actividades y potencias biológicas. Calder, P.C. y otros, arriba citado.

Figura 1

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Los hidratos de carbono pueden proporcionar un contenido energético comprendido en el intervalo del 30 al 50% del producto aproximadamente, con preferencia del 40% aproximadamente.

La fuente de hidratos de carbono puede consistir en cualquier carbohidrato o mezcla de carbohidratos adecuados y digeribles. Por ejemplo, la fuente de hidratos de carbono puede ser de maltodextrina, almidón de tapioca natural o modificado, maíz, arroz, de otros cereales, de patata, o de almidón de alto contenido de amilosa, sacarosa, glucosa, fructosa y/o mezclas de ellos.

Las composiciones inmunonutricionales según la presente invención pueden estar clínicamente exentas de lactosa. En el contexto de la presente invención, la expresión “clínicamente exentas de lactosa” se refiere a composiciones inmunonutricionales que tienen un máximo de 0,2 g de lactosa por 100 kcal de la composición. La composición tiene preferiblemente menos de 0,2, con mayor preferencia menos de 0,17 g de lactosa por 100 kcal de la composición.

Las composiciones inmunonutricionales según la presente invención también pueden estar exentas de gluten.

Las composiciones inmunonutricionales según la presente invención también pueden llevar otros suplementos nutricionales, por ejemplo vitaminas, minerales, oligoelementos, así como fuente adicionales de nitrógeno, hidratos de carbono y ácidos grasos. Se pueden añadir a la ingesta oral del paciente o suministrarlos en forma de una sola formulación nutricional completa que aporte todas las cantidades básicas diarias de vitaminas, minerales, hidratos de carbono, ácidos grasos y otros ingredientes necesarios.

Las composiciones inmunonutricionales según la presente invención se pueden formular de forma adecuada para la administración enteral. Son especialmente apropiadas para uso enteral, tal como administración oral y/o por sonda. Estas composiciones se administran convenientemente en forma de líquido acuoso. Las composiciones según la

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presente invención que son adecuadas para la aplicación enteral están por tanto en forma acuosa o de un polvo que debe mezclarse con agua antes del uso. En caso de alimentación por sonda la cantidad de agua añadida dependerá de la necesidad de líquido y del estado del paciente.

La expresión “sal farmacéuticamente aceptable” se refiere a las sales que, dentro del alcance del juicio médico razonable, son adecuadas para usar en contacto con el tejido humano sin provocar una inapropiada respuesta de tipo tóxico, irritante, alérgico y similar, y tienen una relación beneficio/riesgo razonable.

Tal como se aplican aquí, los intervalos numéricos pretenden incluir cualquier número y subgrupo de números contenidos en el intervalo, tanto si están específicamente revelados como si no. Además estos intervalos numéricos deben interpretarse como base para una reivindicación dirigida a cualquier número y subgrupo de números en este intervalo. Por ejemplo, una revelación de 1 a 10 debe interpretarse como un intervalo que incluye límites de 2 a 8, de 3 hasta 5, 6, 7, de 1 a 9, de 3,6 a 4,6, de 3,5 a 9,9, y así sucesivamente.

Todas las referencias a características o limitaciones particulares de la presente invención incluyen la respectiva característica o limitación plural y viceversa, a no ser que se especifique otra cosa o el contexto en el cual se hace la referencia implique claramente lo contrario.

Tal como se usan aquí, todas las combinaciones de etapas del método o proceso se pueden realizar en cualquier orden, a no ser que se especifique otra cosa o el contexto en el cual se hace referencia a la combinación implique claramente lo contrario.

Tal como se usan aquí, todos los porcentajes, partes y proporciones se refieren al peso respecto a la composición total, a no ser que se especifique otra cosa. Como todos los pesos de los ingredientes enumerados se basan en su nivel activo, no incluyen los disolventes o productos secundarios que pueden estar contenidos en los materiales comercialmente disponibles, a no ser que se especifique otra cosa.

Las composiciones y métodos de la presente invención pueden comprender, constar de o constar esencialmente de los elementos básicos y las limitaciones de la presente invención aquí descritas, así como cualquier ingrediente, componente o limitación adicional u opcional aquí descrita o que pueda resultar útil en composiciones y métodos del tipo general aquí descrito.

“Tratamiento” se refiere a la administración de medicinas o composiciones o formulaciones o a la realización de los procedimientos médicos respecto a un mamífero, incluyendo un humano, para la profilaxis (prevención), curación, mejora o normalización de la dolencia, enfermedad o insuficiencia del paciente aquejado o deficiente.

“Paciente” o “sujeto” se refiere a un mamífero humano o no humano que se puede beneficiar de la composición nutritiva y del método que se describen en la presente solicitud de patente.

Una “cantidad terapéuticamente efectiva” o una “cantidad nutricionalmente efectiva” es una cantidad de un agente, composición o formulación que es suficiente para lograr el efecto deseado del tratamiento.

“Parenteral” se refiere a la ruta de materiales a través o básicamente a través de las capas epidérmicas del cuerpo humano, usualmente por medios intravenosos (IV), intramusculares (IM) o subcutáneos (SC).

Tal como se usa aquí, el término “enteral” se refiere a la administración a través del tracto alimentario. El especialista sabe que esta administración puede tener lugar en el intestino, que es el conducto que va del estómago hacia el ano y se divide en intestino delgado e intestino grueso, a través de la boca, a través de un tubo nasogástrico hacia el estómago y por otros medios conocidos en el estado técnico.

“Farmacéuticamente aceptable” significa aprobado por una agencia normativa del gobierno federal o de un gobierno estatal, o listado en la farmacopea U.S. o en otra farmacopea generalmente reconocida, para usar en animales y más concretamente en humanos.

“Vehículo” se refiere a un diluyente, adyuvante, excipiente o soporte con el cual se administra el agente terapéutico. Estos vehículos farmacéuticos pueden ser líquidos estériles como agua y aceites, incluyendo los de petróleo y los de origen animal, vegetal o sintético, por ejemplo de cacahuete, de soja, aceite mineral, aceite de sésamo y análogos. Las soluciones salinas y las soluciones acuosas de dextrosa y glicerina también se pueden usar como vehículos líquidos, en particular para soluciones inyectables. Como excipientes farmacéuticos adecuados cabe citar almidón, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, malta, arroz, harina, creta, gel de sílice, estearato sódico, monostearato de glicerilo, talco, cloruro sódico, leche descremada en polvo, glicerina, propileno, glicol, agua, etanol y similares.

Tal como se usa aquí, el término “terapia del cáncer” se refiere a quimioterapia, cirugía, radiación, terapia genética, inmunoterapia, terapia biológica, agentes diferenciadores, agentes quimiopreventivos o una combinación de ellos. En algunas formas de ejecución la quimioterapia se refiere a fármacos o agentes citotóxicos.

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Tal como se usa aquí, el término “quimioterapia” se refiere a un proceso de eliminación de células proliferantes mediante un agente citotóxico. La expresión “durante la quimioterapia” se refiere al periodo de duración del efecto del agente citotóxico administrado. Por otra parte la expresión “tras la quimioterapia” quiere decir que se cubren todas las situaciones en que una composición se administra después de un agente citotóxico, independientemente de cualquier administración anterior del mismo y también independientemente de la persistencia del efecto del agente citotóxico administrado.

Si el método de la presente invención se aplica a la quimioterapia, al menos una composición inmunonutricional se puede administrar antes, durante o después de la quimioterapia (es decir antes, durante o después de administrar un agente citotóxico). Por ejemplo, las composiciones inmunonutricionales de la presente invención se pueden dar al sujeto diez a tres días antes de un ciclo de quimioterapia (prequimioterapia o antes de la quimioterapia) hasta diez a siete días después del ciclo (postquimioterapia o tras la quimioterapia).

Como ejemplos de edulcorante cabe citar, sin limitarse a ellos, sacarina sódica, aspartamo, esteviósido, extracto de estevia, aldehído para-metoxicinámico, neoesperidina dihidrocalcona, perilla rutina y similares.

Como formas usuales de dosificación de productos farmacéuticos cabe citar, sin limitarse a ellas, las preparaciones orales (preparados líquidos tales como extractos, elixires, jarabes, tinturas y limonadas; preparados sólidos tales como cápsulas, granulados, píldoras, polvos y tabletas), inyecciones, infusiones, gotas nasales, gotas oculares, supositorios, aerosoles y formas de dosificación para administración percutánea tales como ungüentos y parches.

De acuerdo con la presente invención, las composiciones según la misma se pueden ofrecer en forma de productos dietéticos, p.ej. como suplementos o en forma de una formulación nutricional, p.ej. un producto medicinal para comer

o beber, p.ej. en forma de una comida completa o parcial, como aditivo alimentario o polvo para disolver, o en forma de una formulación farmacéutica, p.ej. en forma de tableta, píldora, sobre o cápsula.

En otro aspecto la presente invención proporciona producto medicinal para comer o beber, un suplemento dietético o nutricional o una formulación farmacéutica que comprende las composiciones inmunonutricionales de la presente invención.

Las composiciones de la presente invención en forma de productos dietéticos, p.ej. suplementos o formulaciones farmacéuticas, pueden constar exclusivamente de las composiciones de la presente invención y opcionalmente vehículos farmacéutica o nutricionalmente aceptables.

Las composiciones de la presente invención pueden hallarse en forma de productos medicinales para comer o beber, p.ej. en forma de polvos para disolver. El polvo se puede combinar con un líquido, p.ej. agua u otro líquido como leche o zumo de fruta, p.ej. en una proporción 1 a 5 de polvo a líquido aproximadamente, para obtener una composición lista para beber o una bebida instantánea.

Opcionalmente las composiciones de la presente invención pueden ser nutricionalmente completas, es decir pueden incluir vitaminas, minerales, oligoelementos, así como fuentes de nitrógeno, hidratos de carbono y grasas y/o ácidos grasos, de manera que se puedan usar como fuente única de nutrición que aporte básicamente todas las cantidades diarias indispensables de vitaminas, minerales, hidratos de carbono, grasas y/o ácidos grasos, proteínas y similares. Por consiguiente las composiciones según la presente invención se pueden suministrar en forma de una comida completa nutricionalmente equilibrada, adecuada p.ej. para la alimentación oral o por sonda, p.ej. mediante tubos nasogástricos, nasoduodenales, traqueoesofágicos, gastrostómicos o yeyunostómicos, o para la nutrición periférica

o parenteral total. Las composiciones de la presente invención son preferentemente para administración oral.

La presente invención proporciona medios para ayudar al sistema inmunitario durante el tratamiento anticáncer por quimio o radioterapia.

La presente invención proporciona métodos para aprovechar el aumento de expresión celular tumoral de las células estresadas (“señal de peligro”) induciendo el reconocimiento y eliminación de estas células por células inmunitarias innatas como las células asesinas naturales (NK), las células asesinas naturales T (NKT), los macrófagos (Macs) y las células dendríticas asesinas (KDC). Las células inmunitarias innatas se activan fuertemente al encontrar “señales de peligro” en las células tumorales durante el tratamiento anticáncer.

Los siguientes ejemplos describen la presencia de células inmunitarias supresoras y la actividad inmunológica de los animales que tienen tumores y sufren un deterioro de su respuesta inmunológica innata y adaptativa, sometidos o no a quimioterapia. Además se proporciona un ejemplo que describe los efectos beneficiosos de la inmunonutrición en ratones que tienen tumores y se someten a terapia antitumoral. Más adelante se ofrecen también cinco ejemplos de composiciones inmunonutricionales, que varían de una a otra por el tipo y la cantidad de agentes potenciadores de la inmunidad que hay en ellas.

Ejemplo 1

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La linfopenia transitoria incluyó CD3 y CD 19 (células B), NKs; (subgrupos de linfocitos); la sangre periférica lleva una minoría de células dendríticas y monocitos.

El crecimiento del tumor se pudo observar 5-6 días después de la implantación s.c. de las células. El tamaño del

5 tumor no muestra un cambio significativo tras la quimioterapia, pero de nuevo se observa crecimiento a partir de los 8-10 días posteriores a la quimioterapia. Luego el aumento del tumor prosigue hasta el sacrificio. En los ratones de control, que tenían tumor pero no se trataron con quimioterapia, el ritmo de crecimiento es mayor hasta el final de los ensayos (sacrificio de los animales).

10 La figura 2 ilustra cómo la respuesta inmunitaria adaptativa es estimulada por la inmunogenicidad promovida por el tratamiento quimioterapéutico. La quimioterapia daña las células cancerosas y por tanto aumenta su susceptibilidad al sistema inmunitario. En la figura 2 la divergencia al día 14 de los dos grupos de tratamiento (oxa-10; oxa-12,5) con respecto al grupo de control se relaciona con la respuesta inmunológica potenciada. Aunque el tumor continúa creciendo, lo hace a una velocidad más lenta que el grupo de control (sin quimioterapia).

15 Figura 2. Efecto antitumoral del oxaliplatino en un modelo murino implantado con tumor frente al control

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20 Ejemplo 2

Presencia de mecanismos celulares inmunosupresores en animales que tienen tumores y están sometidos a quimioterapia -estado de la respuesta inmunológica innata y adaptativa

25 Ratones. En los ensayos se usaron ratones endogámicos C57BL/6 (H-2b) de ocho semanas de edad. Los animales se distribuyeron en 7 grupos dietéticos distintos. Hubo un grupo de control que recibió la dieta AIN 93 para roedores adultos (mantenimiento). Las dietas de ensayo se administraron en dosis apropiadas al modelo animal: (a) la dieta de control fue suplementada con 1% (p/p) de L-arginina, (b) un 25% de la proteína se sustituyó por glutamina, (c) 1% (p/p) de L-citrulina, (d) 1 g/Kg de peso corporal con compuesto correlacionado de hexosa activa, (e) 20 mg/día de

30 nucleótidos de ARN y (f) 25 mg/día de lactoferrina. Una semana más tarde los ratones fueron inoculados por vía subcutánea (s.c.) en el flanco izquierdo con 1x106 células tumorales y el crecimiento tumoral se controló cada 2 días midiéndolo con un calibre. Pasados 6 días desde la inoculación tumoral, los animales se trataron con oxaliplatino o doxorrubicina. El crecimiento tumoral se controló cada dos días tras el tratamiento quimioterapéutico y los ratones se sacrificaron dos semanas después de dicho tratamiento. Los animales de control sin tratamiento quimioterapéutico

35 se probaron en paralelo con todas las dietas ensayadas. El peso corporal se determinó cada dos días. Se tomaron muestras de sangre los días 2, 4 y 10 después del tratamiento quimioterapéutico y el día del sacrificio (14 o 28 días). Se realizó una autopsia y se evaluó la masa tumoral.

Líneas celulares cancerosas. La línea celular de sarcoma inducido por metilcolantreno (MCA) que expresa el

40 antígeno exógeno de la ovoalbúmina (OVA) se cultivó en medio DMEM o RPMI 1640 suplementado con L-glutamina 2 mM, HEPES 10 mM, 2-mercaptoetanol 20 µM, 150 U/ml de estreptomicina, 200 U/ml de penicilina y SBF al 10% inactivado por calor. Se inyectaron 1x106 células tumorales en el flanco de los ratones 6 días antes del tratamiento quimioterapéutico.

45 Evaluación hematológica. Los días 2, 4, 10, 14 y 28 se llevaron a cabo los recuentos de glóbulos rojos, hemoglobina

y hematocrito.

Los recuentos de glóbulos blancos y la formula diferencial leucocitaria se examinaron en los mismos momentos. Las muestras de sangre también se usaron para determinar las poblaciones de células inmunitarias.

5 Análisis de flujo citométrico. Se realizó el análisis de los subgrupos celulares CD11c+, CD11b+Gr-1+ y CD11b+Gr-1-, CD14+, CD19+, CD16+, CD56+, CD3+, CD8+, CD4+. La batería de anticuerpos empleada permitió el estudio de los subgrupos de células B y T, NK, células NKT, macrófagos, células dendríticas, granulocitos.

10 Evaluación del crecimiento tumoral. El crecimiento de los tumores se controló cada 2 días usando calibres y el volumen tumoral se calculó aplicando la fórmula longitud x anchura x anchura x 0,52 mm3.

Resultados

15 Todas las dietas ensayadas originaron una curva similar de ganancia de peso durante los 8 días anteriores a la transferencia tumoral. Tras la inoculación s.c. de células tumorales en los ratones, los tumores necesitan 5 a 6 días para empezar a crecer, tal como se aprecian con el calibre. Después de la implantación de las células tumorales y antes de la quimioterapia no se observó ningún cambio en el peso del tumor. Los animales perdieron peso durante los primeros días después de la quimioterapia. La máxima pérdida de peso se alcanzó entre los días 4 y 10 después

20 de la quimioterapia y luego los animales permanecieron con peso estable o incluso empezaron a recuperar peso corporal. No se observaron diferencias entre las distintas dietas.

La máxima pérdida de peso fue alrededor del 10 por ciento para todas las dosis ensayadas de doxorrubicina (2,5, 5, 7,5 y 10 mg/kg) y alrededor del 15 por ciento para la dosis máxima de oxaliplatino (10 mg/kg. Otras dosis ensayadas 25 fueron 5 y 7,5 mg/kg).

La toxicidad para los glóbulos rojos evaluada por el número de eritrocitos, los niveles de hemoglobina y hematocrito mostraron un patrón distinto. Ambos agentes quimioterapéuticos indujeron un descenso de glóbulos rojos que llegó a los niveles más bajos entre los días 6 y 10 tras la quimioterapia y no alcanzó niveles estables hasta el día 16. La

30 dieta suplementada con arginina evitó la marcada caída de eritrocitos observada entre los días 6 y 10 (figura 3). Este grupo fue diferente del de control y también de los otros tratamientos. Además la combinación de arginina con el tratamiento quimioterapéutico redujo aún más el tamaño del tumor en comparación con la quimioterapia aplicada sin más (figura 4).

35 Figura 3. Efecto de la suplementación dietética de arginina en la reducción de la toxicidad sobre la médula ósea, en comparación con la dieta de control

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40 Figura 4. La arginina en la dieta junto con la terapia del cáncer reduce el tamaño del tumor en comparación con la dieta de control

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Los recuentos de glóbulos blancos disminuyeron en la primera semana después de la quimioterapia. Antes del

5 décimo día los recuentos de glóbulos blancos empiezan a recuperarse y superan la línea base original después del día diez y tienden a permanecer altos hasta el final del experimento. Los animales de control no tratados con los agentes quimioterapéuticos tienen un nivel más estable de glóbulos blancos durante el experimento, que tiende a subir después del día 15 (figura 5). En los animales tratados con oxaliplatino el aumento leucocitario tendió a ser superior al del grupo que recibió la dieta suplementada con lactoferrina.

10 Figura 5. Efecto del oxaliplatino en la población de glóbulos blancos

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15 Los estudios de citometría de flujo de los leucocitos y de los subgrupos de células inmunitarias demostraron que la disminución global de linfocitos era provocada por la quimioterapia unos 10 días después del tratamiento. La pérdida de células CD3+ fue parcialmente modulada en los animales que recibieron la dieta suplementada con arginina. La población global de linfocitos disminuyó menos tras la quimioterapia en los grupos que recibieron los aminoácidos glutamina y citrulina, así como lactoferrina. En el grupo de tratamiento que recibió nucleótidos dietéticos se observó

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hasta el día 55 en que los animales son sacrificados. Se estudiaron las células de la sangre periférica 10 días después del primer y segundo ciclo y antes del sacrificio. Los recuentos de neutrófilos dan el 43% de los valores promedio registrados el día antes de empezar la quimioterapia en el grupo de control y el 70% en los animales que reciben la dieta de ensayo suplementada con los inmunonutrientes. No se observan diferencias de regresión tumoral entre los dos grupos dietéticos. En ambos se mide una reducción de masa tumoral. El estudio histológico de las lesiones tumorales restantes y de las lesiones displásicas muestra una actividad mitótica similar de las células que pasan por el ciclo celular (índice de marcaje con PCNA),

Tratamiento de los efectos tóxicos causados tanto por la terapia del cáncer como por el tumor en la médula ósea y en los compartimentos inmunitarios

El mantenimiento de la inmunocompetencia durante el tratamiento del cáncer aumenta la capacidad corporal para identificar y destruir células cancerosas en el cuerpo. Como resultado, cualquier ataque a los compartimentos que intervienen en la maduración o en el mantenimiento del sistema inmunitario aumenta el peligro de progresión del cáncer. El tratamiento con productos químicos o radiología está diseñado para destruir células cancerosas y alguno de ellos es muy efectivo para reducir la velocidad de crecimiento de los tumores (figura 8).

Figura 8. Efecto antitumoral del oxaliplatino en un modelo murino implantado con tumor

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La desaceleración del crecimiento del tumor, o incluso la reducción de su tamaño, mediante el empleo agresivo de quimio-y/o radioterapias es parte de la estrategia neoadyuvante previa a la intervención quirúrgica. Sin embargo las terapias anticáncer afectan de modo igualmente negativo a otras células de división rápida que produce por ejemplo la médula ósea y que sirven para destruir células cancerosas.

Como la médula ósea es el lugar donde se forman las células sanguíneas, la toxicidad (por cualquier razón) causa una deficiencia de glóbulos. Un resultado de este efecto tóxico en la médula ósea puede ser una infección que amenace la vida, porque el cuerpo no pueda producir leucocitos como respuesta a las bacterias y virus invasores. Además la toxicidad produce anemia por el bajo número de glóbulos rojos e incluso hemorragias graves causadas por una carencia de plaquetas.

Tal como se ha descrito anteriormente, las células cancerosas dañadas por el tratamiento neoadyuvante pueden expresar componentes reconocidos por el sistema inmunitario, pero el cuerpo solo puede organizar una defensa cuando el sistema inmunitario no está tan seriamente menguado por la propia terapia anticáncer. Por consiguiente hay que mantener la inmunocompetencia, reduciendo la toxicidad sobre la médula ósea, para aumentar la eficacia del tratamiento. El “intervalo de oportunidad” para que el sistema inmunitario recupere el control de las células transformadas y suprima las células tumorales restantes se presenta en los días siguientes a la quimioterapia. Para aprovechar este periodo de mayor expresión antigénica o inmunogénica, la presente invención describe métodos (nutricionales y otros) que pueden potenciar la respuesta inmunológica innata y la respuesta inmunológica antitumoral. El uso selectivo de la nutrición (pero también de compuestos farmacéuticos) para acondicionar el sistema inmunitario antes, durante y después de los ciclos de tratamiento quimio-y radioterapéutico puede corregir los efectos de la toxicidad inmunitaria aguda inducida por estas terapias del cáncer.

Nuestros datos demuestran que la terapia del cáncer crea un ataque inicial a la médula ósea y por lo tanto también a

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Claims

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