ES2558252T3

ES2558252T3 - Composición antimicrobiana

Info

Publication number: ES2558252T3
Application number: ES09794732.9T
Authority: ES
Inventors: Jan Faergemann
Original assignee: Ambria Dermatology AB
Current assignee: Ambria Dermatology AB
Priority date: 2008-07-07
Filing date: 2009-07-02
Publication date: 2016-02-02
Anticipated expiration: 2029-07-02
Also published as: JP2011527347A; WO2010005378A1; CA2729944C; RU2010153517A; CN102088859A; RU2500394C2; EP2312952A4; EP2312952B1; US20120004314A1; EP2312952A1; US20150105472A1; JP5535209B2; SE533425C2; SE0801639L; CA2729944A1

Abstract

Una composición antimicrobiana que comprende clorhexidina y pentano-1,5-diol, en la que la cantidad de clorhexidina es de entre un 0,000001 y 5 %p, y la cantidad de pentano-1,5-diol es de entre un 1 y 75 %p.

Description

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DESCRIPCION

Composicion antimicrobiana Campo de la invencion

Las realizaciones de la presente invencion se refieren a una composicion antimicrobiana, que comprende entre un 0,000001 y 5% de clorhexidina y entre un 1 y 75% de pentano-1,5-diol, y ademas al uso de tal composicion para combatir microorganismos.

Antecedentes

Los microorganismos se pueden combatir de diferentes maneras, dependiendo de las razones para combatirlos. La aproximacion es diferente dependiendo de si el proposito es impedir el crecimiento de microorganismos, inhibir el crecimiento adicional o reducir y eliminar el microorganismo. Ademas, la aproximacion es diferente dependiendo de donde esta localizado el microorganismo, tal como en un lfquido, sobre una superficie, dentro de un cuerpo de un mairnfero, etc.

El documento US 2004/0191274 A1 describe composiciones topicas que se pueden usar como antiseptico y/o desinfectante. La composicion topica descrita comprende al menos un alcohol C1 a C4; al menos un agente anti- microbiano, tal como clorhexidina; y al menos un emoliente, tal como polietilen glicol.

El documento CN 1130020, Tawil, G.G. et al. Alexandria Journal of Pharmaceutical Sciences, 1988, 2(1), 1 de marzo, 58-60 y Frank M. von et al. Pharmaceutische Industrie, 1991, 53(5) 512-516 describen combinaciones de clorhexidina y propilenglicol. Frank M. von et al. concluye que no se puede hallar sinergia entre clorhexidina y propilenglicol en combinacion. Al contrario, los hallazgos previos de Tawil, G.G. et al. indican que el propilenglicol debena potenciar el efecto bactericida de la clorhexidina. Se demuestra que en las composiciones antimicrobianas que comprenden acetato de clorhexidina y propilen glicol, el propilen glicol potencia el efecto antimicrobiano de la clorhexidina. Sin embargo, Tawil, G.G. et al. no presentan datos del propilenglicol al ensayarlo solo. El documento JP 2003267862 describe una combinacion de clorhexidina y 1,3-butanodiol.

El documento WO 07/063065 describe el uso de una composicion que comprende pentano-1,5-diol para reducir y/o eliminar el olor de un marnffero, tal como el olor de la orina, menstruacion, heces, lfquidos de ulceras en las piernas, ulceras de decubito, sangre y sudor. Ademas, el documento WO 07/063065 describe un producto de absorcion que comprende pentano-1,5-diol para reducir y/o eliminar el olor de un mamffero, tal como el olor de la orina, menstruacion, heces, lfquidos de ulceras de las piernas, ulceras de decubito, sangre y sudor.

Existen diversas composiciones y compuestos que se sabe que poseen propiedades anti-bacterianas.

El documento WO 97/32479 A1 describe las propiedades antimicrobianas de tipo bacteriostatico de clorobutanol. Ademas, describe que la asociacion de clorhexidina y clorobutanol en forma anhidra o de hemihidrato potencia el efecto antiseptico de los dos. Se demostro que esta potenciacion funciona tanto en bacterias gram-negativas como gram-positivas.

Un ejemplo de un compuesto que se sabe que posee propiedades anti-bacterianas es el propano-1,2-diol (propilen glicol), que es un diol usado de forma generalizada para combatir los microorganismos en dermatologfa. Aunque no se ha usado de forma tan generalizada como propilen glicol, tambien se ha usado pentano-1,5-diol para combatir los microorganismos en dermatologfa.

Segun el documento WO 04/112765, se cree que el efecto antibacteriano de pentano-1,5-diol lo comparten otros dioles alifaticos de bajo peso molecular. Ademas, se describe que el uso de pentano-1,5-diol tiene efecto contra cepas multirresistentes de bacterias.

La clorhexidina es un antiseptico qmmico. Es bactericida para microbios tanto gram-positivos como gram-negativos. Ademas, es bacteriostatico. Se cree que el mecanismo de accion es la ruptura de la membrana, y no la inactivacion de ATPasas como se crefa antes. La clorhexidina se usa para la limpieza general de la piel, tal como en lavados quirurgicos para el tratamiento preoperatorio de la piel. Tiene una larga duracion de la accion y una baja toxicidad. Se ha informado de la sensibilidad cutanea a clorhexidina. Ademas, la clorhexidina puede ser neurotoxica a niveles elevados, por lo que sena beneficioso disminuir el nivel de clorhexidina a la vez que se mantiene su efecto.

La multirresistencia de las bacterias a los antibioticos se esta haciendo mas y mas habitual. Actualmente existe una preocupacion creciente en el sector sanitario en todo el mundo con respecto al uso futuro de los antimicrobianos tradicionales. Se tienen que usar metodos y aproximaciones alternativas para fabricar agentes antimicrobianos eficaces.

Por lo tanto, existe una necesidad medica creciente de identificar composiciones antimicrobianas nuevas que se puedan usar de manera eficaz para inactivar microorganismos. En particular, existe una lista creciente de microorganismos, tales como bacterias, virus y hongos, que se hacen resistentes a los antibioticos. Ademas, existe una poblacion creciente de individuos que se hacen alergicos hacia una diversidad de antibioticos o componentes

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conservantes usados en las preparaciones de antibioticos, que conduce a la necesidad de composiciones nuevas que se puedan usar como alternativas a las tecnicas convencionales.

Ademas de descubrir antibioticos nuevos, tambien sena muy deseable identificar mezclas sinergicas nuevas de compuestos antimicrobianos conocidos. Varios antibioticos conocidos pueden dar lugar a efectos secundarios adversos a las dosis aplicadas cuando se administran solos.

Sumario

Por lo tanto, la presente invencion busca mitigar, aliviar, evitar o eliminar una o mas de las deficiencias anteriormente identificadas proporcionando una composicion que comprende entre un 0,000001 y 5 %p de clorhexidina y entre un 1 y 75 %p de pentano-1,5-diol. Ademas, diversas realizaciones de la presente invencion se refieren al uso de dicha composicion para inactivar microorganismos seleccionados del grupo que consiste en bacterias gram-positivas y gram-negativas, hongos, que incluyen levaduras, mohos y dermatofitos y virus, y especialmente Staphylococcus aureus y P. acnes.

Las caractensticas ventajosas de la invencion se definen en las reivindicaciones dependientes.

Descripcion detallada de las realizaciones ejemplares

En el contexto de la presente descripcion y las reivindicaciones adjuntas, clorhexidina pretende incluir las diversas formas de clorhexidina. Tales formas incluyen, pero sin limitacion, clorhexidina en su forma libre, sales de clorhexidina, tales como el dihidrocloruro, el diacetato o el D-digluconato, solvatos de clorhexidina y sales solvatadas de clorhexidina.

La presente invencion se refiere a una composicion, tal como una composicion farmaceutica, que comprende entre un 0,000001 y 5% de clorhexidina y entre un 1 y 75% de pentano-1,5-diol

El presente inventor previo que se consigue un efecto antimicrobiano sinergico cuando se combina clorhexidina con pentano-1,5-diol. Asf, se previo que una composicion, que comprende tanto clorhexidina como pentano-1,5-diol, tiene un efecto antimicrobiano mayor que las composiciones que comprenden las mismas concentraciones de clorhexidina o pentano-1,5-diol.

De manera espedfica, se muestra el efecto sinergico entre clorhexidina y pentano-1,5-diol en los ejemplos mas adelante. Aunque el documento WO 07/063065 describe que pentano-1,5-diol, cuando se usa para reducir el olor de un mairnfero, se puede combinar con un agente antiseptico, no se pronuncia sobre ningun posible efecto sinergico. Ademas, el documento WO 07/063065 no se pronuncia sobre las concentraciones adecuadas de dichos componentes a usar en una composicion farmaceutica. Segun el documento WO 07/063065, se debena emplear al menos un 0,1 %p de pentano-1,5-diol. Sin embargo, como se describe en la presente memoria, tal concentracion es demasiado baja para tener efecto sinergico cuando se combina con clorhexidina.

Sin embargo, no es improbable que tambien se obtenga un efecto sinergico mediante la combinacion de clorhexidina y otro alcanodiol distinto de pentano-1,5-diol, pero se prefiere pentano-1,5-diol ya que es muy conocido con un perfil toxicologico preferible, un riesgo bajo de sensibilidad y de irritacion cutanea. Debido al efecto antimicrobiano sinergico, puede ser posible usar menos de cada componente, y aun asf obtener el efecto deseado. Ademas, mediante el uso de menos cantidad de cada componente, cada componente puede dar lugar a menos efectos secundarios y menos efectos secundarios graves que al usarlos solos. Una composicion que comprende tanto clorhexidina como pentano-1,5-diol es mas eficaz para combatir los microorganismos que una composicion que comprende solamente un componente activo.

Sin limitarse a ninguna teona, se puede suponer que el mecanismo de accion de clorhexidina, es decir, la ruptura de la membrana lipfdica, se acelera por la hidrofobicidad espedfica de pentan-1,5-diol, que parece ser significativamente adecuado a este respecto. Ademas, las propiedades de solubilizacion de pentan-1,5-diol pueden ser importantes en este contexto. De manera alternativa, el efecto antimicrobiano de pentan-1,5-diol se mejora mediante la ruptura simultanea de la membrana lipfdica provocada por clorhexidina. Otra teona es que el mecanismo de accion del efecto antimicrobiano de pentan-1,5-diol es la disolucion de las membranas lipfdicas, por lo que se incrementa la capacidad de la clorhexidina de romper dicha membrana lipfdica, y viceversa. Quizas, el efecto de disolucion y la hidrofobicidad de pentano-1,5-diol cooperan con la clorhexidina de una manera que maximiza el efecto sinergico entre ellos.

Se puede usar una composicion farmaceutica que comprende clorhexidina y pentano-1,5-diol en terapia. Cuando se usa en terapia, se puede administrar de manera topica. Tal composicion administrada de manera topica se puede usar para tratar diversas infecciones, tales como las infecciones que afectan a la piel o las membranas mucosas. Los ejemplos de tales infecciones cutaneas incluyen impetigo, dermatitis atopica infectada secundaria y otras dermatosis con infecciones secundarias. Tambien se puede usar clorhexidina y pentano-1,5-diol para tratar las infecciones fungicas de la piel y de las membranas mucosas, tales como tina del pie, tina corporal, tina ungueal, infecciones de la piel y de las membranas mucosas por Candida, etc., e infecciones virales tales como infecciones por herpes (p.ej. herpes labial), papilomas e infecciones pustulosas de la piel o de las membranas mucosas.

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Tambien se puede usar una composicion farmaceutica, que comprende clorhexidina y pentano-1,5-diol, para inactivar microorganismos seleccionados del grupo que consiste en bacterias gram-positivas y gram-negativas, hongos, que incluyen levaduras, mohos y dermatofitos y virus. Los ejemplos de tales microorganismos incluyen, pero sin limitacion, Staphylococcus aureus, P. acnes, Streptococci, bacilos gram-negativos, Candida albicans, Candida glabrata, Malassezia, el moho Aspergillus fumigatus y el dermatofito Trichophyton rubrum, T. mentagrophytes, Epidermophyton floccusum, Microsporum canis, papilomavirus, herpesvirus y poxvirus. Se ha demostrado que una composicion, que comprende clorhexidina y pentano-1,5-diol, es especialmente eficaz para afectar, es decir destruir, combatir o prevenir, Staphylococcus aureus y P. acnes, tal como se describe en los ejemplos mas adelante.

Una composicion para administracion topica puede tomar la forma de - o estar integrada en - una preparacion desinfectante lfquida, semi-lfquida o solida, una disolucion bacteriostatica o bactericida, locion, crema, jabon, champu, pomada, pasta, toalla humeda, disco higienico, parche, panal o dispositivo similar de proteccion higienica personal.

Si se destina a la aplicacion a la piel o las membranas mucosas, la composicion segun las realizaciones de la invencion puede comprender uno o varios agentes de ajuste de la tonicidad o agentes humectantes, tales como cloruro sodico, urea y acido lactico, agente absorbente UV, colorante, tal como carbonato calcico y oxido de zinc, y agente aromatizante, tal como un aceite etereo. La composicion de la invencion puede comprender ademas un detergente cationico, neutro o anionico, en particular una sal de un acido graso.

Preferiblemente, una composicion que comprende clorhexidina y pentano-1,5-diol comprende ademas un vetuculo. El vehfculo puede ser un vehfculo acuoso o un vehfculo lipfdico, que ademas puede comprender un agente espesante. Tales agentes espesantes se pueden seleccionar de derivados de celulosa, en particular metil celulosa, hidroximetil celulosa, hidroximetil-propil celulosa. Segun una realizacion adicional de la invencion, el vehfculo comprende una sal de un acido graso.

Otra realizacion de la invencion se refiere a composiciones farmaceuticas como las descritas anteriormente, que incluyen ademas uno o mas adyuvantes o excipientes farmaceuticamente aceptables. Tales composiciones farmaceuticas se pueden preparar de una manera conocida en la tecnica, y son lo suficientemente estables en el almacenamiento y adecuadas para la administracion a seres humanos y animales.

Una composicion farmaceutica como la descrita en la presente memoria para ser administrada de manera topica puede tomar la forma de pomadas, lociones, pastas, cremas, geles, talco, aerosoles, soluciones y emulsiones, como entiende facilmente un experto en la tecnica. Tales pomadas, lociones, cremas y geles pueden comprender excipientes, tales como grasas animales y vegetales, ceras, parafinas, almidon, goma de tragacanto, derivados de celulosa, polietilen glicoles, siliconas, bentonitas, acido silfcico, talco y oxido de zinc o mezclas de estas sustancias. El talco y los aerosoles pueden comprender excipientes, tales como lactosa, talco, acido silfcico, hidroxido de aluminio, silicato calcico y polvos de poliamida o mezclas de los mismos. Los aerosoles tambien pueden comprender propelentes tales como clorofluorohidrocarburos. Las soluciones y emulsiones pueden comprender excipientes, tales como disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes tales como agua, alcohol etflico, alcohol isopropflico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bendlico, benzoato bendlico, propilen alcohol, dimetilformamida, aceites tales como aceite de semilla de algodon, aceite de cacahuete, aceite de mafz, aceite de oliva, aceite de ricino y aceite de sesamo, glicerol, glicerol formal, alcohol tetrahidrofurfunlico, polietilen glicoles y esteres de acidos grasos tales como sorbitan o mezclas de los mismos.

Una composicion farmaceutica tal como se describe en la presente memoria se puede administrar a un paciente a una dosis farmaceuticamente eficaz. "Dosis farmaceuticamente eficaz" quiere decir una dosis que es suficiente para producir los efectos deseados con relacion a la afeccion para la que se administra. La dosis exacta depende de la actividad del compuesto, la manera de administracion, la naturaleza y gravedad del trastorno, la edad y el peso corporal del paciente, y pueden ser necesarias dosis diferentes. La administracion de la dosis se puede llevar a cabo mediante administracion individual en forma de una unidad de dosis individual o mediante varias unidades de dosis mas pequenas o mediante multiples administraciones de dosis subdivididas a intervalos espedficos.

El "paciente", para los propositos de la presente invencion, incluye tanto seres humanos como otros mamfferos. Asf, los metodos son aplicables a la terapia humana y a aplicaciones veterinarias.

Una realizacion adicional de la presente invencion se refiere a una composicion, tal como una composicion farmaceutica, que comprende al menos un 0,000001 %p, tal como al menos un 0,00005 %p de clorhexidina y al menos un 1 %p de pentano-1,5-diol.

Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion, tal como una composicion farmaceutica, que comprende un 0,000001 %p a 5 %p, tal como 0,00005 a 5 %p o 0,00005 a 1 %p, de clorhexidina y un 1 a 75 %p, tal como 1 a 25 %p, 2 a 15 %p, o 3 a 15 %p, de pentano-1,5-diol.

Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion, tal como una composicion farmaceutica, que comprende al menos un 0,00001 %p de clorhexidina y al menos un 3 %p de pentano-1,5-diol. Aunque se pueden usar concentraciones inferiores, el efecto antimicrobiano es mas pronunciado a o por encima de estas concentraciones.

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Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion, tal como una composicion farmaceutica, que comprende al menos un 0,0001 %p de clorhexidina y al menos un 5 %p de pentano-1,5-diol.

Debido a que las concentraciones mayores pueden incrementar el riesgo de efectos secundarios, otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion, tal como una composicion farmaceutica, que comprende entre un 0,0001 y 5 %p, tal como 0,001 y 2,5 %p de clorhexidina, y entre un 3 y 25 %p, tal como entre 5 y 15 %p, de pentano-1,5-diol.

Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende al menos un 0,001 %p de clorhexidina y pentano-1,5-diol.

Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende clorhexidina y al menos un 2 %p de pentano-1,5-diol.

Otra realizacion de la presente invencion se refiere a una composicion farmaceutica que comprende clorhexidina y al menos un 5 %p de pentano-1,5-diol.

Cuando se combinan, clorhexidina y pentano-1,5-diol dan lugar a efectos antibacterianos sinergicos, como se demuestra en los ejemplos mas adelante. Estos efectos sinergicos hacen posible el uso de cantidades inferiores de los respectivos compuestos, a la vez que se obtiene el efecto deseado. Una combinacion de clorhexidina y pentano- 1,5-diol es eficaz para impedir el crecimiento de diversos microorganismos. Tales microorganismos incluyen bacterias, hongos y virus. Tales bacterias incluyen, pero sin limitacion, S. aureus y P. acnes.

De forma similar a clorhexidina, tambien se puede usar una composicion que comprende clorhexidina y pentan-1,5- diol para la limpieza general de la piel, tal como en lavados quirurgicos para el tratamiento preoperatorio de la piel. La desinfeccion alcanzada mediante el uso de tal composicion sera mas eficaz que si se usa solamente clorhexidina. Ademas, el efecto de union al agua bien conocido de los dioles los hace hidratantes perfectos para la piel, y por lo tanto hara tal tratamiento menos aspero al aplicarlo a la piel.

Ademas, se puede usar una composicion que comprende clorhexidina y pentan-1,5-diol en otros tipos de desinfecciones y lavados. Sin limitaciones, tales desinfecciones pueden incluir el tratamiento de diversas superficies, tales como suelos, paredes, tableros de mesa, encimeras de laboratorio, hojas de mesa e instrumentos quirurgicos. Tales desinfecciones tambien se pueden combinar con el tratamiento en autoclave o incluso lo pueden sustituir. En una realizacion, tales desinfecciones incluyen la desinfeccion de la piel, pero otra realizacion relacionada con la desinfeccion excluye las desinfecciones de partes de un cuerpo humano o animal. Tales desinfecciones que excluyen las desinfecciones de partes de un cuerpo humano o animal se deben distinguir de un metodo terapeutico.

En una realizacion en la que se usa una composicion que comprende clorhexidina y pentan-1,5-diol para desinfectar y/o limpiar una superficie que no es parte de un cuerpo animal o humano, el contenido de pentan-1,5-diol puede ser de un 1-75 %p y el contenido de clorhexidina de un 0,000001 % a 5 %p.

Aunque la presente invencion se ha descrito anteriormente con referencia a realizaciones ilustrativas espedficas, no se debe considerar limitada a la forma espedfica expuesta en la presente memoria. En su lugar, la invencion esta limitada solamente por las reivindicaciones adjuntas, y son igualmente posibles otras realizaciones distintas de las espedficas anteriores dentro del alcance de estas reivindicaciones adjuntas.

En las reivindicaciones, la expresion "comprende/que comprende" no excluye la presencia de otras especies o etapas. Ademas, aunque se pueden incluir caractensticas individuales en las diferentes reivindicaciones, estas posiblemente se pueden combinar de manera ventajosa, y la inclusion en las diferentes reivindicaciones no implica que una combinacion de caractensticas no sea viable y/o ventajosa. Ademas, las referencias singulares no excluyen una pluralidad. Las expresiones "un", "uno", "primero", "segundo" etc. no excluyen una pluralidad.

Ejemplos

Los ejemplos proporcionados mas adelante pretenden solamente ilustrar adicionalmente la invencion.

Ejemplo 1, CIM de pentano-1,5-diol y clorhexidina contra S. aureus

Se determino la concentracion inhibitoria minima (CIM) de pentano-1,5-diol y clorhexidina contra S. aureus mediante el uso de concentraciones de bacterias de 6 x 106 (20 pl aplicados en placas de DST-agar). Los resultados se representan mas adelante en la Tabla 1 y 2.

Tabla 1. CIM de pentano-1,5-diol contra S. aureus y P. acnes Pentano-1,5-diol (%p) CIM (S. aureus)

5: +++

6: ++

7: ++

8: +

9: -

10: -

20: -

30: -

Control (sin pentano-1,5-diol) +++

a: +++: Mismo crecimiento que en la placa de control sin clorhexidina y/o pentano-1,5-diol ++: Crecimiento reducido comparado con el control +: Crecimiento muy escaso 5 -: Sin crecimiento

Tabla 2. CIM de digluconato de clorhexidina contra S. aureus Clorhexidina (%p) CIM

0,00001 +++

0,00005 ++

0,0001 -

0,0005 -

0,001 -

0,005 -

0,01 -

0,02 -

0,05 -

0,1 -

0,5 -

1- Control (sin clorhexidina) +++

Ejemplo 2, CIM de pentano-1,5-diol en combinacion con clorhexidina contra S. aureus

10 Se determino la concentracion inhibitoria mmima (CIM) de pentano-1,5-diol combinado con clorhexidina contra S. aureus mediante el uso de concentraciones de bacterias de 6 x 106 (20 pl aplicados en placas de DST-agar). Los resultados se representan en la Tabla 3 a continuacion:

Tabla 3. CIM de pentano-1,5-diol combinado con digluconato de clorhexidina contra S. aureus

Clorhexidina 0,0001% y CIM Clorhexidina 0,00005% y CIM Clorhexidina 0,00001% y CIM

9%: Pentano-1,5-diol - 9% Pentano-1,5-diol - 9% Pentano-1,5-diol -

8%: Pentano-1,5-diol - 8% Pentano-1,5-diol - 8% Pentano-1,5-diol -

7%: Pentano-1,5-diol - 7% Pentano-1,5-diol - 7% Pentano-1,5-diol +

6%: Pentano-1,5-diol - 6% Pentano-1,5-diol - 6% Pentano-1,5-diol ++

5%: Pentano-1,5-diol - 5% Pentano-1,5-diol - 5% Pentano-1,5-diol +++

Como se observa a partir de la Tabla 1-3, existe claramente un efecto antibacteriano sinergico al combinar pentano- 1,5-diol con digluconato de clorhexidina. Aunque ni clorhexidina en concentraciones de o por debajo de un 0,00005% 5 ni pentano-1,5-diol en concentraciones de o por debajo de un 8% son eficaces contra S. aureus, sf lo es una combinacion de un 0,00005% de clorhexidina con un 5% o mas de pentano-1,5-diol. Ademas, incluso concentraciones tan bajas de clorhexidina y pentano-1,5-diol como un 0,00001% y 7 %, respectivamente, son eficaces cuando estan combinadas.

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Ejemplo 3, CIM de pentano-1,5-diol y clorhexidina contra P. acnes

Se determino la concentracion inhibitoria mmima (CIM) de pentano-1 el uso de concentraciones de bacterias de 6 x 106 (20 pl aplicados representan mas adelante en la Tabla 4 y 5.

Tabla 4. CIM de pentano-1,5-diol contra P. acnes

Pentano-1,5-diol (%p) CIM

1: + + +

3: ++

5: +

6: -

7: -

10: -

20: -

30: -

Control (sin pentano-1,5-diol) +++

Tabla 5. CIM de digluconato de clorhexidina contra P. acnes Clorhexidina (%p) CIM

0,00001 +++

0,00005 ++

0,0001 -

0,0005 -

0,001 -

0,005 -

0,01 -

,5-diol y clorhexidina contra P. acnes mediante en placas de agar sangre). Los resultados se

0,02 -

0,05 -

0,1 -

0,5 -

1- Control (sin clorhexidina) +++

Ejemplo 4, CIM de pentano-1,5-diol en combinacion con clorhexidina contra P. acnes

Se determino la concentracion inhibitoria mmima (CIM) de pentano-1,5-diol combinado con clorhexidina contra P. acnes mediante el uso de concentraciones de bacterias de 6 x 106 (20 jl aplicados en placas de agar sangre). Los 5 resultados se representan en la Tabla 6 a continuacion:

Tabla 6. CIM de pentano-1,5-diol combinado con digluconato de clorhexidina contra P. acnes

Clorhexidina 0,0001% y: CIM Clorhexidina 0,00005% y CIM Clorhexidina 0,00001% y CIM

6% Pentano-1,5-diol: - 6% Pentano-1,5-diol - 6% Pentano-1,5-diol +

5% Pentano-1,5-diol: - 5% Pentano-1,5-diol - 5% Pentano-1,5-diol ++

3% Pentano-1,5-diol: - 3% Pentano-1,5-diol - 3% Pentano-1,5-diol +++

1% Pentano-1,5-diol: - 1% Pentano-1,5-diol ++ 1% Pentano-1,5-diol +++

Como se observa a partir de la Tabla 4-6, existe claramente un efecto antibacteriano sinergico al combinar pentano- 1,5-diol con digluconato de clorhexidina. Aunque ni clorhexidina en concentraciones de o por debajo de un 0,00005% 10 ni pentano-1,5-diol en concentraciones de o por debajo de un 5% son eficaces contra P. acnes, sf lo es una combinacion de un 0,00005% de clorhexidina con un 3% o mas de pentano-1,5-diol.

Ejemplo 5, CIM de pentano-1,5-diol en combinacion con clorhexidina contra S. pyogenes A CCUG 4208

Se determino la concentracion inhibitoria minima (CIM) de pentano-1,5-diol combinado con clorhexidina contra S. pyogenes A CCUG 4208 mediante el uso de concentraciones de bacterias de 6 x 107 (20 jl aplicados en placas de 15 agar sangre). Los resultados se representan mas adelante en la Tabla 7 y 8.

Tabla 7. CIM de digluconato de clorhexidina y 1,5-pentanodiol contra S. pyogenes

1,5-pentanodiol (%): CIM Digluconato de clorhexidina (%) CIM

2: + + + 0,00001 +++

4: ++ 0,00005 +++

6: + 0,0001 +

7: - 0,0005 -

8: - 0,001 -

9: - 0,005 -

10: - 0,01 -

15: - 0,05 -


: 0,1 -


: 0,5 -

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El control positivo (placa de agar sin sustancia) mostro un valor de CIM correspondiente a +++. Tabla 8. CIM de pentano-1,5-diol combinado con digluconato de clorhexidina contra S. pyogenes

1,5-pentanodiol (2%) CIM

n°1 Digluconato de clorhexidina: 0,00001% + +

n°2 Digluconato de clorhexidina: 0,00005% +

n°3 Digluconato de clorhexidina: 0,0001% -

1,5-pentanodiol (4%): CIM

n°4 Digluconato de clorhexidina: 0,00001% +

n°5 Digluconato de clorhexidina: 0,00005% -

n°6 Digluconato de clorhexidina: 0,0001% -

1,5-pentanodiol (6%): CIM

n°7 Digluconato de clorhexidina: 0,00001% -

n°8 Digluconato de clorhexidina: 0,00005% -

n°9 Digluconato de clorhexidina: 0,0001% -

Como se observa a partir de la Tabla 7 y 8, existe claramente un efecto antibacteriano sinergico al combinar pentano-1,5-diol con digluconato de clorhexidina. Aunque ni clorhexidina en concentraciones de o por debajo de un 0,0005% ni pentano-1,5-diol en concentraciones de o por debajo de un 6% son eficaces contra S. pyogenes, sf lo es una combinacion de un 0,00001% de clorhexidina con un 4% o mas de pentano-1,5-diol.

Ejemplo 6 CIM de pentano-1,5-diol en combinacion con clorhexidina

Se uso una disolucion de digluconato de clorhexidina (CHG), 20% en agua, C9394-25ML, (Sigma, St. Louis, EE.UU.) y PD, (BASF AG, Ludwigshafen, Alemania) en el estudio, y se ensayaron las cepas de referencia siguientes; C. albicans (CCUG 5594), S. aureus (CCUG 17621) y P. acnes (CCUG 1794).

Se determino la concentracion inhibitoria minima de CHG y pentano-1,5-diol (PD) mediante ensayo de dilucion en agar. Se preparo una serie de diluciones de cada compuesto en medio de agar sangre para P. acnes, y en agar para ensayo de sensibilidad diagnostica (DST) (Oxoid, Basingstoke, R.U.) para C. albicans y S. aureus. Se hicieron series de diluciones con cada agente con agar recien preparado a 48-50 °C. Los intervalos de concentraciones finales fueron como sigue: Disolucion de CHG, 0,00001 a 1% (p/v) y PD, 1-30% (v/v). Las placas preparadas se solidificaron y se usaron inmediatamente.

Para cada organismo se preparo un inoculo cultivando los organismos en agar sangre. Las colonias se suspendieron en solucion salina tamponada con fosfato (PBS) y las suspensiones se ajustaron a aproximadamente 6x106 UFC/ml para C. albicans y P. acnes y 6x105 UFC/mL para S. aureus. Las placas se inocularon con puntos de 20 pl y se incubaron durante un dfa para C. albicans y S. aureus y tres dfas para P. acnes. Despues se determinaron las CIMs como la concentracion mas baja del compuesto que inhibe el crecimiento de los aislamientos.

Primero, se determinaron las CIMs de CHG y PD, respectivamente, para cada microorganismo. Despues, se ensayo un intervalo de concentraciones de CHG y PD combinados con cada microorganismo para determinar si hubo actividad sinergica. La definicion de efecto sinergico es: "Un efecto que es mayor que la suma de los efectos de los dos farmacos, tal como la ecuacion: 1 + 1...". Cada aislamiento se ensayo dos veces.

CHG fue eficaz contra todos los microorganismos (Tabla 9). Las CIMs de CHG fueron 0,0005 (% p/v) contra C. albicans y 0,0001 (% p/v) contra S. aureus y P. acnes.

PD demostro una actividad contra C. albicans, S. aureus y P. acnes de 5, 9 y 6, % v/v, respectivamente. La CIM de CHG fue mucho menor que PD, con un factor de 1x10-4 para C. albicans, 6x10-5 para S. aureus y 9x10-5 para P. acnes (Tabla 9).

Cuando CHG y PD se combinaron, en concentraciones inferiores a sus CIMs respectivas, su actividad antimicrobiana se incremento. Las CIMs de CHG se redujeron del 0,0005 al 0,00005 (%, p/v) y las CIMs de PD del 5 al 3 (%, v/v) para impedir totalmente el crecimiento de C. albicans. Las CIMs de CHG se redujeron del 0,0001 al 0,00001 (%, p/v) y las CIMs de PD del 9 al 8 (%, v/v) para S. aureus. Las CIMs de CHG se redujeron del 0,0001 al 5 0,00005 (%, p/v) y las CIMs de PD del 6 al 3 (%, v/v) para impedir totalmente el crecimiento de P. acnes (Tabla 9).

Tabla 9. Concentracion inhibitoria minima (CIM) de digluconato de clorhexidina (CHG) (p/v %) y pentano-1,5-diol (PD) (v/v %) solos y en combinacion contra C. albicans, S. aureus y P. acnes mediante el metodo de dilucion en agar. La proporcion indica la reduccion de la CIM de CHG y PD solos y en combinacion.

Cepas: CIM solo CIM combinado Proporcion (solo/combinado)

: CHG PD CHG PD CHG/CHG+PD PD/PD+CHG

C. albicans: 0,0005 5 0,00005 3 10 2

CCUG5594

S. aureus: 0,0001 9 0,00001 8 10 1

CCUG17621

P. acnes: 0,0001 6 0,00005 3 2 2

CCUG1794

Claims

10

15

REIVINDICACIONES

1. Una composicion antimicrobiana que comprende clorhexidina y pentano-1,5-diol, en la que la cantidad de clorhexidina es de entre un 0,000001 y 5 %p, y la cantidad de pentano-1,5-diol es de entre un 1 y 75 %p.
2. La composicion segun la reivindicacion 1, en la que la cantidad de clorhexidina es de entre un 0,00001 y 5 %p, y la cantidad de pentano-1,5-diol es de entre un 3 y 25 %p.
3. La composicion segun la reivindicacion 2, en la que la cantidad de clorhexidina es de entre un 0,001 y 2,5 %p, y la cantidad de pentano-1,5-diol es de entre un 5 y 15 %p.
4. La composicion segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que dicha composicion es una composicion farmaceutica.
5. La composicion segun la reivindicacion 4, en la que dicha composicion es para administracion topica.
6. La composicion segun la reivindicacion 4 o 5, en la que dicha composicion comprende un vehuculo y un agente

espesante.
7. La composicion segun cualquiera de las reivindicaciones precedentes para el uso en terapia.
8. El uso de una composicion segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en la desinfeccion no terapeutica.
9. La composicion segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para el uso para tratar infecciones.
10. La composicion para el uso segun la reivindicacion 9, en la que dicha infeccion es una infeccion que afecta a la

piel.