ES2562444T3 - Cuaternización del aditivo copolímero E de aminoalquilmetacrilato para la mejora de la permeabilidad y solubilidad de medicamentos - Google Patents

Abstract

Copolímero E de aminoalquilmetacrilato, caracterizado por que una fracción de grupos aminoalquilo está cuaternizada.

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6

5

10

15

20

25

30

35

Tiempo de propagación: 7 min

Medida de la resistencia eléctrica transepitelial (TEER = transepithelial electrical resistance)

La medida de TEER se efectuó con un denominado electrodo „Chopstick“ (Millicell ERS, Millipore, Bedford, USA). Para los ensayos de regeneración de transporte se utilizaron insertos de membrana de policarbonato de 24 orificios, y las células se incubaron en primer lugar 20 minutos en el lado apical con MES/DMEM 25 mM (pH 6,5), y en el lado basolateral con HEPES/DMEM 25 mM + 10 % de FBS (pH 7,4). Después se pipetearon disoluciones de polímero concentradas, de modo que la concentración final de polímeros en los medios de incubación ascendía a 0,21 µM. La TEER se siguió entonces durante una hora, tras lo cual el medio se substituyó en el lado apical por tampón fresco (MES/DMEM 25 mM (pH 6,5) + un 10 % de FBS, o bien HEPES/DMEM 25 mM (pH 7,4) + un 10 % de FBS). La regeneración de TEER se siguió después durante 6 horas.

Cálculo de Papp (permeación aparente)

Se midieron los valores de Papp por medio de la siguiente fórmula: Papp = (Va / (A * t)) * ([medicamento]aceptor/ [medicamento]inicial, donador), representando Va el volumen apical en la camara de aceptor en ml, A el área de monocapa en cm2, t el tiempo en s, [medicamento]aceptor la concentración de medicamento acumulativa en la cámara basolateral después de t segundos, y [medicamento]inicial, donador la concentración de medicamento inicial en la cámara de donador.

Resultados

De los compuestos sintetizados según el punto 1 se investigaron tres derivados con un grado de cuaternización de un 22 %, un 42 % y un 65 %, en el modelo caco-2 (J Pharm Sci., 2000, 89, 63-75).

Para la investigación de la toxicidad de los derivados cuaternizados de Eudragit E PO se llevó a cabo en primer lugar un ensayo de exclusión de azul de tripano. Como se desprende de la figura 6, los compuestos cuaternizados presentan apenas una toxicidad poco más elevada que Eudragit E PO. Además, tanto la resistencia transepitelial (TEER), como también el aumento de tranasporte de manitol en la incubación de las células con los compuestos cuaternizados eran reversibles (figuras 8 y 9). Esto muestra que el epitelio no sufre daños irreversibles debidos a las substancias, y tras eliminación de las disoluciones de polímero se regenera la función de barrera.

A pH 7,4 (apical y basolateral), Eudragit E PO en concentración equimolar respecto a los derivados cuaternizados, respecto a TEER, presenta un comportamiento comparable al control, mientras que los compuestos cuaternizados ocasionan un claro descenso de TEER (figura 10). Posiblemente, Eudragit E PO no es eficaz a pH neutro debido a su peor solubilidad.

Además del aumento de la permeabilidad de manitol (figura 7), los polímeros en el modelo de cultivo celular aumentaban también la permeabilidad de trospio (figura 11) y talinolol (figura 12). En el caso de permeabilidad de manitol y trospio se compararon cantidades equimolares de derivados cuaternizados con Eudragit E PO. En este caso se mostró que los derivados en cantidad equimolar aumentan la permeabilidad de las citadas substancias en mayor medida, en cualquier caso al menos en la misma medida que Eudragit E PO.

8

Claims (1)

1. imagen1