ES2602107T3 - Nanoemulsión - Google Patents

Abstract

Una nanoemulsión que comprende a) al menos un componente acuoso y b) un vehículo, que comprende i) al menos un componente lipófilo que está presente en una cantidad del 0,1% en peso al 15% en peso, ii) al menos un tensioactivo y iii) al menos un alcohol, en la que el al menos un alcohol tiene de tres a cinco átomos de carbono y en la que el diámetro medio de las partículas emulsionadas es de menos de 100 nm

Description

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DESCRIPCION

Nanoemulsion

La presente invencion se refiere a una nanoemulsion que comprende al menos un componente acuoso y un vetffculo, donde el vetffculo comprende al menos un componente lipofilo, al menos un tensioactivo y al menos un alcohol. La presente invencion se refiere adicionalmente a una composicion que comprende dicha nanoemulsion y un agente activo. En particular, la composicion se presenta como un gel y el agente activo es acido 5- aminolevuffnico (ALA), un derivado, precursor y/o metabolito del mismo. La invencion se refiere adicionalmente a la preparacion de dicha nanoemulsion y/o composicion y a su uso para el tratamiento de enfermedades dermatologicas, enfermedades asociadas a virus, asf como enfermedades asociadas con la proliferacion celular, en particular, enfermedades tumorales y/o psoriasis. La presente invencion se refiere adicionalmente al uso de dicha nanoemulsion en cosmeticos.

Las nanoemulsiones constituyen un sistema coloidal. Los sistemas coloidales incluyen micelas, liposomas, virosomas, nanosuspensiones, microemulsiones y soluciones polimericas. Las nanoemulsiones, basadas en sus caractensticas ffsicas y qmmicas, pertenecen al grupo de las microemulsiones. Las microemulsiones son dispersiones acuosas de parffculas homogeneas de tamano micrometrico compuestas de un nucleo lipfdico rodeado por monocapas de tensioactivo y cotensioactivo. Las nanoemulsiones se caracterizan por un tamano medio de parffcula (diametro medio) de menos de 200 nm, a menudo menos de 100 nm y una estrecha distribucion de tamanos de parffculas monodispersas. Ademas, las nanoemulsiones son transparente y ligeramente opalescentes. Generalmente se fabrican por fragmentacion mecanica de una fase oleosa en una fase acuosa en presencia de un tensioactivo. El tamano muy pequeno de los globulos oleosos a menudo se obtiene en virtud de al menos un pase a traves de un homogeneizador de alta presion o un sonicador. La preparacion de las nanoemulsiones aqu descritas no requiere dichos dispositivos de alto corte. El tamano pequeno de los globulos y su alta homogeneidad les confiere propiedades cosmeticamente ventajosas que los distinguen de las emulsiones convencionales: son transparentes y muestran una novedosa textura. Ademas, pueden portar agentes activos de forma mas eficaz y, por tanto, se vuelven cada vez mas importantes en el campo de la medicina y la farmacia.

El documento US 6.165.500 se refiere a transferosomas que comprenden un ffpido, un tensioactivo y una fase acuosa, que tienen parffculas o vesfculas con un diametro del orden de 100 a 10.000 nm.

El documento US 2002/155084 se refiere a una composicion que comprende una formulacion de nanoemulsion, que comprende un componente acuoso, un componente oleoso y un componente mixto tensioactivo.

El documento US 2005/0208083 y el documento WO 2005/027872 describe una composicion que comprende una nanoemulsion, que comprende una fase acuosa, una fase oleosa que comprende un aceite y un disolvente organico, y uno o mas tensioactivos.

El documento US 2005/0158389 describe una composicion que comprende al menos un tensioactivo, al menos un componente solido, un disolvente anfffilo y un compuesto, donde la composicion comprende parffculas de un tamano de menos de aproximadamente 500 nm en un medio acuoso.

Las microemulsiones, llamadas nanodispersiones, son conocidas en la tecnica, que comprenden a) una molecula de formacion de membrana, por ejemplo, lecitina de soja, a) un coemulsionante, c) un componente lipofilo, por ejemplo, triglicerido capfflico y/o caprico (Miglyol 812 o Myritol 318) y, opcionalmente, d) alcohol, en particular, etanol (documento EP 0 956 853). Estas nanodispersiones se usan en formulaciones farmaceuticas como vetffculo de transporte para agente farmaceuticamente activos.

Sin embargo, el uso de etanol en nanoemulsiones tiene varias desventajas.

En primer lugar, el uso de etanol como cotensioactivo conduce a nanoparffculas mas grandes que el uso de alcoholes con cadenas de carbono mas grandes. Las parffculas mas grandes causan una disminucion de la superficie de contacto entre la piel y la nanoemulsion, que conduce a una disminucion en la tasa de penetracion. En segundo lugar, el etanol tiene una viscosidad relativamente baja de 0,0011 Pa s (1,10 cp) que no es optima para la estabilidad de las microemulsiones. Ademas, debido a la hidrofobicidad relativamente baja del etanol, la penetracion de las nanoemulsiones a traves de las membranas fisiologicas lipofilas de la piel puede alterarse. Como resultado, la estabilidad de la nanoemulsion, asf como su biodisponibilidad, es decir, su penetracion en tejidos, se reduce. Ademas, el etanol es un alcohol muy caro en comparacion con otros tipos de alcohol, tales como alcohol isopropflico. Ademas, el etanol esta sujeto a un impuesto especial de alcohol en ciertas condiciones en varios pafses.

Por lo tanto, un objetivo de la presente invencion fue proporcionar una nanoemulsion que supere las desventajas de las mencionadas en la tecnica anterior y que, en particular, muestre las propiedades ffsicas optimas que pueden mejorar la estabilidad, asf como la penetracion en celulas y tejidos, siendo al mismo tiempo menos cara que las nanoemulsiones del estado de la tecnica.

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Este objetivo se consigue de acuerdo con la presente invencion proporcionando una nanoemulsion que comprende a) al menos un componente acuoso y b) un veldculo, que comprende i) al menos un componente lipofilo que esta presente en una cantidad el 0,1% en peso al 15% en peso, ii) al menos un tensioactivo y iii) al menos un alcohol, donde el al menos un alcohol tiene de tres a cinco atomos de carbono, y donde el diametro medio de las partfculas emulsionadas es de menos de 100 nm.

Los inventores ahora han descubierto que una nanoemulsion de acuerdo con la invencion tiene un tamano medio de partfcula optimamente inferior con una estrecha distribucion de tamanos de partfcula. La reduccion del tamano de partfcula contribuye a una estabilidad mejorada y una mejor penetracion en las celulas y tejidos de la nanoemulsion.

El componente i) del veldculo, es decir, el componente lipofilo, esta presente en una cantidad del 0,1% en peso al

15% en peso, mas preferiblemente del 1% en peso al 8% en peso y mucho mas preferiblemente del 3% en peso al

4% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion. La cantidad de componente ii) del veldculo, es decir, el tensioactivo o tensioactivos, esta preferiblemente presente en una cantidad del 1% en peso al 30% en peso, mas preferiblemente del 2% en peso al 15% en peso y mucho mas preferiblemente del 4% en peso al 6% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion. La cantidad de componente iii) del veldculo, es decir, el alcohol, esta preferiblemente presente en una cantidad del 0,1% en peso al 10% en peso, mas preferiblemente del 0,5% en peso al 5% en peso y mucho mas preferiblemente del 1% en peso al 2% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion.

El componente acuoso esta preferiblemente presente en la nanoemulsion en una cantidad del 50% en peso al 98% en peso, mas preferiblemente del 70% en peso al 95% en peso y mucho mas preferiblemente del 88% en peso al

92% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion. De forma ventajosa, esta constitucion espedfica de la

nanoemulsion conduce a una nanoemulsion que es muy tolerable para la piel y no provoca un tacto pegajoso durante la aplicacion a la piel que se debe, entre otras cosas, a la proporcion relativamente baja de tensioactivos y componentes lipofilos.

En una realizacion preferida de la presente invencion, la nanoemulsion comprende como tensioactivo un tensioactivo de formacion de membrana y un cotensioactivo de formacion de emulsion de aceite/agua. La relacion ponderal de la cantidad de tensioactivo de formacion de membrana:cotensioactivo de formacion de emulsion de aceite/agua vana de 0,1:1 a 10:1, preferiblemente de 0,2:1 a 0,8:1, mas preferiblemente de 0,4:1 a 0,6:1.

De acuerdo con la invencion, el al menos un alcohol tiene 3-5 atomos de carbono y mucho mas preferiblemente 3 atomos de carbono. Los alcoholes particularmente adecuados que tienen 5 atomos de carbono son 1-pentanol y/o 4- metil-2-pentanol. Los alcoholes adecuados que tienen 4 atomos de carbono son alcohol 1-budlico, alcohol terc- budlico (2-metil-2-propanol) y/o alcohol sec-budlico (2-butanol). Los mas preferidos son alcoholes que tienen 3 atomos de carbono, concretamente alcohol 1-propflico y alcohol isopropflico, donde se prefiere alcohol isopropflico. Usando un alcohol C3, en particular, alcohol isopropflico en la nanoemulsion de la invencion, los presentes inventores han descubierto que la nanoemulsion muestra un tamano de pardcula reducido y una distribucion mas estrecha de los tamanos de pardcula, asf como una estabilidad mejorada y una penetracion potenciada en tejidos, en comparacion con las nanoemulsiones del estado de la tecnica que usan etanol como alcohol. Esto fue sorprendente, ya que isopropanol y el etanol son muy similares en sus caractensticas fisiologicas y qrnmicas.

Cuando se usa isopropanol como alcohol en la nanoemulsion de la invencion, el tamano de las pardculas emulsionadas es mas pequeno en comparacion con el uso de etanol. Debido a la superficie de contacto aumentada resultante de la nanoemulsion con la piel, se aumentan las propiedades de penetracion. La reduccion del tamano de pardcula es tambien decisiva para una estabilidad mejorada de la nanoemulsion, ya que se sabe que la tasa de aglutinacion de pardculas que finalmente conduce a la separacion de fases aumenta con el tamano de pardcula. Los efectos ventajosos del isopropanol pueden deberse a su hidrofobicidad ligeramente mayor, que puede provocar una mejor capacidad de penetrar a traves de las membranas fisiologicas lipofilas. Ademas, el isopropanol tiene una mayor viscosidad (Pa s (cp) a 25°C de 0,00232 Pa s (2,32)) en comparacion con etanol (viscosidad/Pas (cp), 25°C, 0,0011 (1,10)). Dicha mayor viscosidad del isopropanol puede servir para un mejor mecanismo de estabilizacion en nanoemulsiones, ya que la viscosidad reduce la movilidad de las moleculas. Una ventaja adicional del isopropanol en comparacion con el etanol es que esta disponible a costes relativamente bajos, que es aproximadamente 1/3 de los costes del etanol, y esta libre de un impuesto adicional de alcohol.

Preferiblemente, el al menos un componente lipofilo del veldculo de la nanoemulsion de la invencion es un lfpido, un aceite vegetal y/o un aceite animal. Los lfpidos adecuados de acuerdo con la presente invencion son lfpidos fisiologicamente aceptables tales como ceramida, mono-, di- y triacilglicerina (trigliceridos), en particular, triglicerido capnlico y/o caprico y/o una mezcla de los mismos, de forma particularmente preferible Miglyol (tal como Miglyol 812 o Myritol 318 disponible, por ejemplo, en Henkel). Los aceites vegetales y animales adecuados, por ejemplo, son aceite de girasol, aceite de soja, aceite de cacahuete, aceite de colza, aceite de pescado y/o cetaceo.

Un tensioactivo de formacion de membrana adecuado es un fosfolfpido, un lisofosfolfpido, una ceramida y/o una mezcla de los mismos. Preferiblemente, el fosfolfpido es lecitina o cefalina de granos de soja o huevos de gallina,

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mas preferiblemente la lecitina es lecitina de soja.

Preferiblemente, la lecitina tiene un contenido de fosfatidilcolina de al menos un 80% en peso, mas preferiblemente de al menos un 90% en peso y mucho mas preferiblemente de al menos un 94% en peso. Los inventores han descubierto que la calidad de la lecitina, concretamente su contenido de fosfatidilcolina, desempena un papel crucial para el tamano de las partfculas de la nanoemulsion. Cuanto mayor sea el contenido de fosfatidilcolina de la lecitina, mas pequeno sera el tamano de las partfculas de la nanoemulsion.

Como cotensioactivo de formacion de emulsion de aceite/agua, los tensioactivos anionicos, no ionicos, cationicos y/o anfoteros son adecuados, asf como copolfmeros de bloque. Los tensioactivos anionicos adecuados son jabones, sulfonatos de alquilbenceno, sulfonatos de alcano, alquilsulfatos y/o eter sulfatos de alquilo. Los tensioactivos cationicos adecuados son compuestos de amonio cuaternario, preferiblemente que tienen uno o dos grupos hidrofobos (por ejemplo, bromuro de cetiltrimetilamonio y cloruro de cetiltrimetilamonio) y/o sales de aminas primarias de cadena larga. Un tensioactivo anfotero adecuado es N-(acilamidoalquil)betama, N-alquil-p- aminopropionato y/o amina-N-oxido. Un copolfmero de bloque adecuado, por ejemplo, es oxido de propileno. En el alcance de la presente invencion, un tensioactivo no ionico es particularmente preferido como cotensioactivo de formacion de emulsion de aceite/agua. Un tensioactivo no ionico adecuado se selecciona del grupo que consiste en poliglicoleter de alcohol graso, poliglicoleter de alquilfenol, alquilpoliglucosido, glucamida de acido graso, poliglicoleter de acido graso, polfmero de bloque de oxido de etileno-oxido de propileno, ester de acido graso de poliglicerol, alcanolamida de acido graso y ester de acido graso de sorbitan (etoxilado) (sorbitan). Un ester de acido graso de sorbitan etoxilado particularmente preferido es monooleato de polioxietilen sorbitan, mucho mas preferiblemente Polisorbato 80.

El componente acuoso de la nanoemulsion de la presente invencion preferiblemente comprende un sistema tamponante debil con bajo contenido salino, mas preferiblemente un tampon fosfato 5 mM a 30 mM y mucho mas preferiblemente tampon fosfato 10 mM. El valor de pH del tampon fosfato preferiblemente vana de pH 4 a pH 8, mas preferiblemente de pH 5 a pH 7 y es mucho mas preferiblemente de pH 5,5 a pH 6,5. El agua usada para preparar el tampon fosfato es preferiblemente agua desionizada esteril y/o agua para inyecciones, mas preferiblemente agua para inyecciones.

El diametro medio de las partfculas emulsionadas en la nanoemulsion (nanosomas) es de 5 nm a menos de 100 nm, preferiblemente de 10 nm a menos de 100 nm, mas preferiblemente de menos de 100 nm, particularmente, hasta 90 nm, preferiblemente hasta 70 nm, aun mas preferiblemente de 10 nm a 50 nm y mucho mas preferiblemente de 15 nm a 35 nm. La distribucion de tamanos de las nanopartfculas es preferiblemente monodisperso y sigue la distribucion gaussiana. El diametro de las partfculas emulsionadas de la invencion se determina mediante la distribucion de tamanos de partfculas, que se mide por el metodo de dispersion de luz dinamica (DLS) (tambien llamada espectroscopfa de correlacion de fotones (PCS)). El analisis estadfstico de la distribucion de las partfculas se realiza por un metodo llamado distribucion ponderada en numero de partfculas de acuerdo con la presente invencion.

Un asunto adicional de la presente invencion es un proceso para la preparacion de la nanoemulsion de acuerdo con la invencion, que comprende las siguientes etapas: a) proporcionar un componente acuoso, b) proporcionar un vehfculo que comprende al menos un componente lipofilo, al menos un tensioactivo y al menos un alcohol, donde el al menos un alcohol tiene al menos tres atomos de carbono y c) mezclar el componente acuoso de la etapa a) con el vetnculo de la etapa b). En la preparacion de la nanoemulsion, los componentes del vetnculo se proporcionan en el componente acuoso y la mezcla se convierte en una nanoemulsion por homogeneizacion intensiva o suave. La homogeneizacion puede realizarse, por ejemplo, por homogeneizadores disponibles en el mercado. Despues de la preparacion de la nanoemulsion, pueden anadirse aditivos y excipientes adicionales, cuya presencia no es apropiada durante la homogeneizacion.

El proceso para la preparacion de una nanoemulsion preferiblemente se realiza en condiciones asepticas, por ejemplo, usando una campana de flujo laminar.

Los inventores descubrieron que, ademas de la composicion, algunas etapas del proceso de preparacion son decisivas para el tamano final y la distribucion de tamanos de partfcula de las partfculas emulsionadas en la nanoemulsion. Particularmente, la temperatura y las condiciones de homogeneizacion durante la etapa c desempenan un papel principal. La etapa c se realiza a una temperatura entre 50 a 60°C. Todos los ingredientes se calientan previamente hasta esta temperatura. El recipiente y la mezcladora tambien deben optimizarse para conseguir una mezcla homogenea muy rapida de los componentes (en segundos) evitando la formacion de espuma. Vease el Ejemplo 1 para una ilustracion de dicho procedimiento. Como alternativa, la homogeneizacion no requiere dispositivos de alto corte tales como sonicadores o homogeneizadores de alta presion.

Un aspecto adicional de la presente invencion es una composicion farmaceutica y/o cosmetica que comprende la nanoemulsion de la invencion. La nanoemulsion de la invencion es adecuada en el campo de cosmetica, por ejemplo, como agente antienvejecimiento, ya que proporciona un vetnculo elegante, translucido y transparente que puede usarse para una diversidad de tipos diferentes de producto. La nanoemulsion proporciona un sistema en

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equilibrio muy delicado, que tiene niveles relativamente bajos de emulsionantes que se consideran irritantes. La nanoemulsion de la invencion retiene la transparencia o translucidez deseable, es capaz de acomodar una cantidad razonable de aditivos tales como fragancias o hidratantes, permaneciendo al mismo tiempo estables, suaves y delicados sobre la piel del usuario debido al bajo nivel de emulsionante. Para el uso pretendido del producto final en el caso de cosmeticos, es posible anadir agentes no terapeuticos o no activos tales como emolientes, aromas, colorantes, fragancias, gelificantes, espesantes, protectores solares y similares, que potencian el uso final de un producto, particularmente con fines cosmeticos topicos, y se tiene cuidado previsto para evitar elegir componentes que interferiran con la calidad del producto. El producto final puede adoptar la forma de una leche, crema, locion, gel, suero o pulverizacion lfquida, entre otras. En el caso de protectores solares, las nanoemulsiones de la invencion pueden incorporar uno o mas agentes protectores solares tales como benzofenonas, avobenzonas, cinamatos, salicilatos y similares.

Las nanoemulsiones tambien pueden emplearse en composiciones farmaceuticas, en particular, pueden usarse para la fabricacion de un medicamento topico para el tratamiento de enfermedades dermatologicas tales como neurodermatitis, psoriasis, queratosis, en particular, queratosis actmica y enfermedades asociadas con la proliferacion celular, tales como enfermedades tumorales. Preferiblemente, la enfermedad tumoral se selecciona del grupo que consiste en carcinoma basocelular, carcinoma escamocelular, Morbus Bowen, neoplasia intraepitelial vulvar (VIN) o una enfermedad cancerosa nodular o subcutanea. Ademas, la nanoemulsion es adecuada para el tratamiento de enfermedades asociadas a virus causadas por un virus del papiloma humano tal como condiloma acuminado. Incorporando el componente lipofilo de la nanoemulsion, la perdida transepidermica de agua puede verse influida ventajosamente, es decir, la funcion de barrera de la piel puede potenciarse y, por tanto, pueden verse afectadas ventajosamente enfermedades dermatologicas tales como neurodermatitis.

Un aspecto adicional de la presente invencion se refiere a una composicion que comprende la nanoemulsion de la invencion y un agente activo. A este respecto, la composicion es particularmente util como composicion farmaceutica y/o cosmetica, por ejemplo, para la aplicacion a la piel o el cabello. Las nanoemulsiones de la invencion comprendidas en dichas composiciones proporcionar un sistema de suministro muy eficaz para una amplia diversidad de agentes activos. Ejemplos de agentes activos que pueden ser utiles incluyen agentes para la erradicacion de manchas de envejecimiento, queratosis y arrugas, analgesicos, anestesicos, agentes antiacne, antibacterianos, agentes antilevaduras, agentes antifungicos, agentes antivmcos, agentes anticaspa, agentes antidermatitis, agentes antiprunticos, antiemeticos, agentes antimareos, agentes antiinflamatorios, agentes antihiperqueratolfticos, agentes antixerosis de la piel, desodorantes, agentes antipsoriasicos, agentes antiseborreicos, acondicionadores del cabello y agentes de tratamiento del cabello, agentes antienvejecimiento, agentes antiarrugas, agentes antiasmaticos y broncodilatadores, agentes protectores solares, agentes antihistammicos, agentes de aclaramiento de la piel, agentes de despigmentacion, vitaminas, corticosteroides, hormonas, retinoides tales como acido retinoico y retinol, agentes cardiovasculares topicos, clotrimazol, cetoconazol, miconazol, griseofulvina, hidroxizina, difenhidramina, pramoxina, lidocama, procama, mepivacama, monobenzona, eritromicina, tetraciclina, clindamicina, kanamicina, meclocilina, hidroquinona, minociclina, naproxeno, ibuprofeno, teofilina, cromolina, albuterol, esteroides topicos tales como hidrocortisona, 21-acetato de hidrocortisona, 17-valerato de hidrocortisona y 17-butirato de hidrocortisona, valerato de betametasona, dipropionato de betametasona, acetonida de triamcinolona, fluocinonida, propionato de clobetasol, peroxido de benzoilo, crotamiton, propranolol, prometazina, palmitato de vitamina A, acetato de vitamina E y mezclas de los mismos.

En una realizacion preferida de la presente invencion, el agente activo se selecciona del grupo que consiste en acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo. "Derivado" debe entenderse como que es, en particular, una esterificacion del grupo amino de acido 5-aminolevulmico sustituido con uno o dos grupos alquilo, de forma particularmente preferible con un grupo metilo. El derivado mas preferido es acido metilaminolevulmico. La derivatizacion puede entenderse tambien como complejos de sales y compuestos de adicion, asf como compuestos alquilados. "Precursor" y "metabolito" deben entenderse como sustancias convertidas en una celula en protoporfirina IX. El agente activo acido 5-aminolevulmico o un derivado del mismo es especialmente preferido.

El acido 5-aminolevulmico se usa como profarmaco en el campo de terapia fotodinamica. La terapia fotodinamica es un metodo prometedor para el tratamiento de diferentes enfermedades premalignas y malignas que estan asociadas con la proliferacion celular (Taylor EL y Brown SB, 2002, Journal of Dermatological treatment, 13, Supl. 1, S3-11 y Peng Q. et al., 1997, Cancer, 79, S2282-2308). El principio de la terapia fotodinamica se basa en la introduccion de un llamado agente fotosensibilizante en el tejido lesionado y posterior radiacion con luz de la longitud de onda apropiada para transformar el agente en un agente citotoxicamente activo que, a su vez, causa la destruccion de la celula. La selectividad de este metodo se debe a la concentracion potenciada del agente sensibilizante en celulas de proliferacion rapida o lesionadas en comparacion con tejido normal. Ademas, la irradiacion del fotosensibilizador da lugar a una radiacion de fluorescencia caractenstica que puede usarse con fines de diagnostico, por ejemplo, para detectar celulas en proliferacion.

El acido 5-aminolevulmico es una sustancia endogena que se sintetiza a partir de glicina y succinil-CoA dentro de las celulas. Dentro del ambito de la biosmtesis de hemo, la protoporfirina IX, que es fotoactiva hasta un alto grado, se forma a partir de acido 5-aminolevulmico (5-ALA) y despues se convierte en hemo. Este mecanismo de control se esquiva administrando de forma exogena acido 5-aminolevulmico preparado de forma sintetica, dando lugar de ese

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modo a una produccion aumentada de protoporfirina IX. Como la degradacion de la protoporfirina IX se inhibe adicionalmente por el mecanismo de control natural, este compuesto queda concentrado en las celulas. Cuando se irradia con luz, la protoporfirina IX es capaz de experimentar una reaccion de oxidacion fotoqmmica y por consiguiente actua como un fotosensibilizador para la terapia fotodinamica.

Las aplicaciones sistemicas del acido 5-aminolevulmico esta asociadas con varios efectos secundarios que puede esquivarse con la aplicacion topica del farmaco. Se conocen de la tecnica anterior varias investigaciones usando que usan composiciones aplicables de forma topica de acido 5-aminolevulmico. Aunque estas investigaciones tienen la caractenstica en comun de que el acido 5-aminolevulmico empleado esta en forma de una emulsion de aceite en agua, existen diferencias con respecto a otros parametros tales como el periodo de penetracion, el periodo de tratamiento, el tipo de luz empleada y la dosis de luz empleada.

B. Thiele et al. (H+G, Vol. 69, n.° 3, pag. 161-164 (1994)) describen investigaciones que implican usar acido 5- aminolevulmico al 20% en forma de una emulsion de aceite en agua, con un periodo de penetracion de 5 a 6 h, y posteriormente irradiar con un laser de color bombeado con iones argon (pico de emision 630 nm) que da una dosis total cumulativa de 50 a 100 J/cm2

Wolf et al. (Journal of the American Academy of Dermatology, Vol. 28, pag. 17-21, 1993) describen investigaciones que implican usar acido 5-aminolevulmico al 20% en forma de una emulsion de aceite en agua, con un periodo de penetracion de 4, 6 u 8 h, e irradiar con luz no filtrada o luz roja, dando una dosis de luz de 30 J/cm2 a 100 J/cm2.

Aunque las investigaciones descritas en la tecnica anterior demuestran claramente el potencial prometedor de la terapia fotodinamica usando acido 5-aminolevulmico, las emulsiones de aceite en agua conocidas hasta ahora tienen varias desventajas.

Por ejemplo, M. Novo Rodriguez et al. (SPIE, Vol. 2371, pag. 204-209) demostraron que, en las concentraciones de luz requeridas para una aplicacion clmica, el acido aminolevulmico es inestable en soluciones acuosas en un intervalo de pH neutro a basico. Durante el periodo de investigacion de 25 h, se obtuvieron resultados satisfactorios solamente a una concentracion del 3% y a un pH de 5, que se especifican como las condiciones optimas para soluciones acuosas de acido 5-aminolevulmico. Para uso clmico, sin embargo, en general sera necesario proporcionar tambien composiciones en un intervalo de concentracion mayor; ademas, para usarse de forma comercial, las soluciones de 5-ALA deben ser estables durante un periodo que este en la dimension de semanas o meses.

V. von Arx et al. (J. Pharm. Pharmacol. 49: 652-656, 1997) describen investigaciones relacionadas con la aplicacion topica de acido 5-aminolevulmico en una diversidad de geles. Esta publicacion establece que la mejor formulacion para mantener la estabilidad del acido 5-aminolevulmico es una combinacion con Novion AA-1, un acido poliacnlico, a un pH < 6.

Hurlimann et al. (Dermatology, Vol. 197, n.° 3, 1998, pag. 248-254) describen lociones nanocoloides que contienen acido 5-aminolevulmico, asf como el uso de las mismas en terapia fotodinamica, sin especificar adicionalmente la emulsion.

El documento WO 00/28971 describe composiciones que comprenden una nanoemulsion y acido 5-aminolevulmico, donde la nanoemulsion consiste en lecitina de huevo (83% de fosfatidilcolina), Miglyol 812 (triglicerido) y polisorbato 80 en tampon fosfato 20 mM (vease el Ejemplo 1 del documento WO 00/28971), pero no se usa alcohol como disolvente. Las formulaciones nanocoloides que contienen lecitina de huevo como emulsionante, sin embargo, tienen la desventaja de que estan notablemente mas coloreadas que las nanoemulsiones de acido 5-aminolevulmico que contienen lecitina de soja como emulsionante. El cambio de color en la formulacion se correlaciona con la formacion de un producto de degradacion del agente activo acido 5-aminolevulmico. Debe concluirse a partir de ello que las formulaciones de nanoemulsion que contienen lecitina de huevo implican una estabilizacion considerablemente reducida de acido 5-aminolevulmico en comparacion con formulaciones que contienen lecitina de soja como emulsionante.

Otra desventaja de las emulsiones conocidas de aceite en agua en combinacion con acido 5-aminolevulmico es que la profundidad de penetracion del fotosensibilizador en el tejido danado no es optima. Como resultado, el tejido enfermo es susceptible a terapia fotodinamica solamente en sus capas superiores, aunque la profundidad de penetracion de la luz usada para activar el fotosensibilizador tambien permitina el tratamiento de capas que descansan mas profundamente.

Por lo tanto, un objetivo adicional de la presente invencion fue proporcionar composiciones que comprenden acido 5- aminolevulmico, que superan, al menos parcialmente, las desventajas conocidas del estado de la tecnica.

De acuerdo con la presente invencion, este objetivo se consigue proporcionando una composicion que comprende la nanoemulsion de la invencion y acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo como agente activo. En estas composiciones, las propiedades ventajosas mencionadas anteriormente con respecto a la

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estabilidad, penetracion en los tejidos, as^ como los costes inferiores de las nanoemulsiones de la invencion pueden utilizarse para transportar un acido 5-aminolevulmico a sitios diana de tejidos.

Se ha descubierto una interaccion espedfica entre el acido aminolevulmico y las nanopartmulas de la emulsion. En particular, el acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo, se fija al exterior de la monocapa de las nanopartmulas de la nanoemulsion. Por tanto, el acido aminolevulmico se transporta por las partmulas mientras no esta contenido dentro del nucleo de las partmulas. En su lugar, el acido aminolevulmico se localiza fuera del nucleo de las partmulas debido a interacciones entre el acido aminolevulmico y la otra monocapa. En nanoemulsiones convencionales. En contraste con esto, el farmaco esta contenido dentro del nucleo lipfdico de las partmulas de la nanoemulsion.

Sorprendentemente, se ha descubierto que la estabilidad del acido 5-aminolevulmico puede aumentarse considerablemente cuando el acido 5-aminolevulmico se formula con la nanoemulsion de la invencion que comprende al menos un alcohol que tiene de tres a cinco atomos de carbono. Aunque las razones para esto no son conocidas, parece que un microentorno creado por nanosomas tiene un efecto particularmente favorable sobre la estabilidad del acido 5-aminolevulmico.

Tambien ha resultado que, sorprendentemente, puede conseguirse una penetracion celular y tisular mejorada con las nanoemulsiones de acuerdo con la invencion, provocando que enfermedades que descansan mas profundamente y/o enfermedades con grosor de capa mayor queden accesibles al tratamiento. Las mayores profundidades de penetracion fueron sorprendentes especialmente porque se habfa asumido previamente que, debido a su pequeno tamano, el acido 5-aminolevulmico sena en cualquier caso facilmente capaz de penetrar a traves de una epidermis danada que esta presente, por ejemplo, en tejido asociado con inflamaciones, fases precancerosas y tumores.

Una tercera ventaja sorprendente es que, cuando se formula con nanosomas de acuerdo con la invencion, el acido 5-aminolevulmico se capta evidentemente de forma muy eficaz desde las celulas. Esto, en primer lugar, mejora el direccionamiento; en segundo lugar, significa que el periodo de penetracion, es decir, el tiempo entre la aplicacion de la composicion y la irradiacion del tejido enfermo con luz, puede reducirse, lo que significa un alivio distinto para el paciente. Como puede deducirse del Ejemplo 4, Fig. 5, la captacion de acido 5-aminolevulmico en celulas cultivadas y la conversion de acido aminolevulmico en PplX dentro de las celulas se potencia con concentraciones crecientes de la nanoemulsion de la invencion con concentracion constante de acido aminolevulmico.

La estabilidad en almacenamiento, ademas, puede mejorarse mediante las nanoemulsiones de la invencion que comprenden un alcohol que tiene de 3 a 5 atomos de carbono como un disolvente en el vehmulo.

De acuerdo con la invencion, la composicion preferiblemente comprende un agente activo que se selecciona de acido 5-aminolevulmico o un derivado, un precursor y/o un metabolito del mismo. "Derivativo" debe entenderse como que es, en particular, una esterificacion del grupo amino del acido 5-aminolevulmico sustituido con uno o dos grupos alquilo, de forma particularmente preferible con un grupo metilo. Es mucho mas preferido el acido 5-aminolevulmico o acido 5-metilaminolevulmico. La derivatizacion puede entenderse tambien como complejos de sales y compuestos adicionales, asf como compuestos alquilados.

"Precursor" y "metabolito" deben entenderse como sustancias convertidas en una celula en protoporfirina IX. El agente activo acido 5-aminolevulmico o un derivado del mismo es especialmente preferido.

El tamano de las partmulas emulsionadas en la nanoemulsion (nanosomas) es como se ha dado anteriormente. El tamano de partmula en cada caso depende de forma optima de parametros adicionales tales como la viscosidad de la composicion. Por ejemplo, se obtuvieron buenos resultados con una nanoemulsion que tiene una viscosidad de 1 a 10 mPas a un diametro de partmula promedio de menos de 100 nm.

La cantidad de agente activo, preferiblemente acido 5-aminolevulmico, en la composicion depende esencialmente de la aplicacion pretendida. En una realizacion preferida, esta presente de aproximadamente un 1 a un 30% en peso del agente activo, basado en el peso total de la composicion. Tambien son adecuadas, sin embargo, dosis mayores o inferiores. Una cantidad de preferiblemente un 3 a un 15% en peso, ha demostrado ser adecuada para aplicaciones en relacion con terapia fotodinamica.

La composicion de la invencion preferiblemente puede comprender adicionalmente al menos un conservante y al menos un disolvente.

En una realizacion particularmente preferida, la composicion se formular como un gel. Los agentes formadores de gel contenidos son agentes formadores de matriz, preferiblemente goma xantana. Aunque el tamano de partmula de la nanoemulsion en forma de un gel tambien es de menos de 100 nm, la viscosidad es considerablemente mayor, por ejemplo, de 500 a 2000 mPas.

Un aspecto adicional de la presente invencion es una composicion farmaceutica, cosmetica y/o de diagnostico que

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comprende la composicion de la invencion. En este caso, la composicion puede comprender adicionalmente aditivos y/o excipientes cosmetica y/o farmaceuticamente aceptables, en particular, sustancias habitualmente usadas en cosmetica o farmacia. Ejemplos de dichas sustancias son tampones, estabilizantes, emulsionantes adicionales, espesantes, etc. Ademas, la composicion esta libre de constituyentes que no son farmaceutica o diagnosticamente aceptables y preferiblemente libre de constituyentes que, por ejemplo, provocan irritacion y/o distorsionan el diagnostico. Ademas de las sustancias de vehmulo que ya se han mencionado, la preparacion farmaceutica y/o de diagnostico puede contener adyuvantes o/y aditivos adicionales que sean aceptables y preferiblemente bien tolerados.

Preferiblemente, la composicion esta presente como lfquido o semisolido. Los lfquidos adecuados dentro del alcance de la presente invencion se seleccionan del grupo que consiste en una solucion, preferiblemente gotas, una pulverizacion, un aerosol, una emulsion o una locion. Los semisolidos adecuados dentro del alcance de la presente invencion se seleccionan del grupo que consiste en una pomada, una crema (emulsion de aceite/agua), una crema grasa (emulsion de agua/aceite), un gel, una locion, una espuma, una pasta y/o una suspension.

Para aplicaciones dermatologicas y ginecologicas, la preparacion esta preferiblemente en una forma que es adecuada para administracion topica, especialmente en forma de gel. La preparacion posee propiedades, por ejemplo, viscosidad y reologfa, que son favorables para la forma respectiva de aplicacion deseada para asegurar que, despues de haber administrado la preparacion, los nanosomas cargados con acido 5-aminolevulmico penetren en un grado adecuado en el tejido diana. Dichas propiedades de viscosidad y reologfa pueden ajustarse anadiendo espesantes tales como eteres esteanlicos de polietilenglicol, estearatos de polietilenglicol y/o polisacaridos tales como polisacarido B-1459, por ejemplo.

En una realizacion particularmente preferida, la composicion de la invencion es un gel. Los geles muestran propiedades galenicas mejoradas en comparacion con las formulaciones mencionadas anteriormente. La formulacion de gel de la invencion muestra mejor adhesividad, estabilidad, liberacion de agente activo y tolerancia sobre la piel y sobre membranas mucosas. El gel de la invencion preferiblemente comprende de un 0,01% en peso a un 50% en peso, mas preferiblemente de un 0,5% en peso a un 30% en peso y mucho mas preferiblemente de un 1% en peso a un 20% en peso del agente activo, de un 1% en peso a un 60% en peso, mas preferiblemente de un 15% en peso a un 50% en peso, mucho mas preferiblemente de un 10% en peso a un 30% en peso de la nanoemulsion, de un 0,01% en peso a un 4% en peso, mas preferiblemente de un 1% en peso a un 3% en peso del al menos un agente de carga, de un 1% en peso a un 3% en peso de al menos un conservante, basado en el peso total de la composicion y haciendo el equilibrio el al menos un disolvente.

Un aspecto adicional de la presente invencion es un proceso para la preparacion de la composicion de la invencion, que comprende las siguientes etapas:

a) proporcionar un componente acuoso,

b) proporcionar un vehmulo que comprende al menos un componente lipofilo, al menos un tensioactivo y al menos un alcohol, donde el al menos un alcohol tiene al menos de tres a cinco atomos de carbono,

c) mezclar el componente acuoso de la etapa a) con el vehmulo de la etapa b), para formar una nanoemulsion,

d) anadir el agente activo antes y/o despues de la formacion de dicha nanoemulsion de la etapa c), y

e) opcionalmente anadir aditivos y/o excipientes adicionales a la etapa d).

De forma particularmente preferible, el agente activo en la etapa d) se anade despues de la formacion de dicha nanoemulsion de la etapa c).

El proceso se realiza preferiblemente en condiciones asepticas, por ejemplo, usando una campana de flujo laminar. El componente acuoso, el vehmulo y el agente activo que se emplean en el proceso mencionado anteriormente tienen los mismos significados preferidos y adecuados mencionados anteriormente. La mezcla del componente acuoso con el vehmulo se realiza preferiblemente por homogeneizacion intensiva. El acido 5-aminolevulmico y opcionalmente los presentes aditivos y/o excipientes pueden anadirse antes y/o despues de la homogeneizacion, preferiblemente despues de la homogeneizacion.

Preferiblemente, se excluye el aire mientras se realiza el proceso, por ejemplo, mediante la aplicacion de un vacfo y/o una atmosfera de gas protectora. Ademas, se prefiere implementar el proceso excluyendo al mismo tiempo la luz.

El proceso se realiza a una temperatura a la que la nanoemulsion deseada puede formarse como se ha mencionado anteriormente y, para las ultimas etapas, los constituyentes, en particular, la sustancia activa, es adecuadamente estable. En general, se ha descubierto que un intervalo de temperatura de aproximadamente 5 a 30°C es adecuado. Sin embargo, el procesamiento de aditivos y/o excipientes que, por ejemplo, se mezclan primero y se homogeneizan cuando sea apropiado, en una mezcla diferente, y solamente despues de anadirse a la composicion, tambien puede realizarse a temperaturas mayores, por ejemplo, hasta aproximadamente 70°C. Especialmente para aplicacion farmaceutica, se tiene cuidado de asegurar que el producto resultante sea esteril, por ejemplo, usando materiales de partida esteriles y manteniendo las condiciones del proceso esteriles o/y mediante una etapa de esterilizacion

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despues de la preparacion.

En el campo de la cosmetica, la composicion de la invencion se usa preferiblemente como agente antienvejecimiento, por ejemplo, para la erradicacion de manchas de envejecimiento, arrugas y/o contra la piel seca.

Un area importante de uso para las composiciones de acuerdo con la invencion es en el campo de terapia fotodinamica, dandose particular preferencia a la aplicacion de la nanoemulsion de forma topica. La nanoemulsion de acuerdo con la invencion puede emplearse en el caso de todas las enfermedades cuyo control comprende inhibir la proliferacion o destruir celulas o tejidos fotoactivando un sensibilizador que se forma a partir de acido 5- aminolevulmico. Las enfermedades, en particular, incluyen enfermedades asociadas a virus, seleccionandose el virus preferiblemente del grupo de virus del papiloma humano (HPV). Mas preferiblemente, la enfermedad asociada a virus es condiloma acuminado. El condiloma acuminado se define como epiteliomas benignos de genesis vmca que se localizan casi exclusivamente de forma genitoanal, cuyo patogeno es virus del papiloma humano (HPV) de tipo 6, 11 y 42. En el curso de la enfermedad, papulas del tamano de una cabeza de alfiler desarrollan proliferaciones papilares de tipo coliflor y cresta de gallo.

Las composiciones de la invencion tambien son adecuadas para tratar enfermedades dermatologicas tales como enfermedades asociadas con queratosis, siendo la queratosis actmica especialmente preferida. La queratosis actmica es un carcinoma escamocelular de epidermis in situ. La queratosis actmica es una proliferacion de queratinocitos transformados que se limita a la epidermis. La queratosis actmica se induce predominantemente por exposicion cronica a radiacion ultravioleta, especialmente la luz del sol (tambien llamada queratosis solar). La queratosis actmica se manifiesta en sf mismo como maculas escamosas gruesas, papulas o placas de aproximadamente 1 mm a aproximadamente 2 cm de diametro.

Ademas, las composiciones de la invencion estan pretendidas preferiblemente para el tratamiento de enfermedades asociadas con proliferacion celular aumentada ya que, en ese caso, el fotosensibilizador se concentra hasta un grado particularmente alto por el metabolismo celular aumentado en celulas enfermas.

Las composiciones de acuerdo con la invencion, por consiguiente, son adecuadas para tratar enfermedades tumorales tales como adenoma basocelular, carcinoma escamocelular. Morbus Bowen, neoplasia intraepitelial vulvar (VIN) y/o enfermedades cancerosas nodular y/o subcutaneas. La psoriasis es un ejemplo de una enfermedad no tumoral asociada con proliferacion celular aumentada.

Las composiciones de la invencion son especialmente preferidas para el tratamiento de adenoma basocelular. El adenoma basocelular se caracteriza como un tumor epitelial que crece invasiva y destructivamente de forma local, sin embargo, metastatiza solamente muy pocas veces y, por lo tanto, se considera como semimaligno. Esta principalmente localizado (el 80%) en la region de la cabeza y el cuello, especialmente en la region de la frente, la esquina del ojo y la nariz. En el caso de progresion desfavorable, se produce destruccion tisular e incluso muerte, por ejemplo, por erosion del hueso y vascular y hemorragia asociada con ello, asf como por invasion en el SNC. El adenoma basocelular se origina a partir de celulas degenerativas de la capa germinal (capa basocelular) de la epidermis y/o la vaina radicular exterior de los folmulos capilares. En contraste con las celulas basales sanas que normalmente pierden su capacidad de division cuando pasan a traves de la epidermis, se descomponen y reforman la capa cornea, las celulas del basalioma mantienen su capacidad de division y ya no son capaces de formar la capa cornea.

La invencion se refiere adicionalmente al uso de la nanoemulsion de acuerdo con la invencion para la fabricacion de un medicamento en terapia fotodinamica.

Por tanto, el tratamiento de las enfermedades mencionadas anteriormente se logra, por ejemplo, aplicando de forma

topica una nanoemulsion que contiene el agente activo, por ejemplo, acido 5-aminolevulmico, y posteriormente

incubando para permitir que una cantidad adecuada del acido 5-aminolevulmico penetre en el tejido que se esta

tratando. Durante la incubacion, la irradiacion del area tratada con luz se evita preferiblemente, por ejemplo,

cubriendola, para prevenir cualquier activacion prematura indeseable. Despues de que el periodo de incubacion, que

es generalmente de aproximadamente 1 a 8 h y habitualmente de 4 h, haya cumplido, el tejido se irradia con una

dosis adecuada de radiacion usando una fuente de luz. Las fuentes adecuadas de luz incluyen lamparas que emiten

luz blanca y tambien fuentes de luz monocromatica. Las dosis de radiacion normalmente estan en un intervalo de J 2 2 aproximadamente 20 J/cm a varios 100 J/cm por aplicacion.

Otro campo de aplicacion del acido gel de 5-aminolevulmico de acuerdo con la invencion se refiere a la deteccion de la presencia de celulas en proliferacion en una muestra, por ejemplo, en una muestra tisular. La deteccion se basa en concentrar de forma selectiva un fotosensibilizador, que se produce por metabolismo del agente activo, en celulas en proliferacion en comparacion con celulas normales. Preferiblemente, el agente activo es acido 5-aminolevulmico y el fotosensibilizador es protoporfirina IX. El grado al que el fotosensibilizador se ha concentrado puede determinarse mediante metodos de fotodiagnostico, por ejemplo, irradiando con luz que tiene una longitud de onda de 405 nm y midiendo la radiacion de fluorescencia generada por el fotosensibilizador. Las nanoemulsiones de acuerdo con la invencion son particularmente adecuadas para su uso en diagnostico de tumores.

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Ademas, la invencion se refiere a un kit que comprende una composicion de acuerdo con la invencion, que comprende las nanoemulsiones de la invencion y acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo, que es adecuado para aplicarse de forma topica, y una o mas sustancias auxiliares. Ejemplos de estas sustancias auxiliares son un material de cobertura fotorresistente esencial tal como una pelmula de plastico que se aplica al sitio a tratarse despues de haber aplicado la nanoemulsion a dicho sitio para prevenir la activacion prematura por luz, y un medio para fijar el material de cobertura o un medio distinto para aplicar la nanoemulsion al sitio a tratarse.

Ademas, la invencion se refiere al uso de una nanoemulsion y/o una composicion como se describe en este documento para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad asociada a virus, una enfermedad dermatologica y/o una enfermedad asociada con proliferacion celular. Preferiblemente, la composicion es para su administracion a un mairnfero, mas preferiblemente a un ser humano.

Ademas, la invencion se refiere a una composicion que comprende las nanoemulsiones como se describe en este documento para su uso para el tratamiento de enfermedades dermatologicas, para su uso para el tratamiento de una enfermedad asociada con proliferacion celular, para su uso en la terapia fotodinamica, para su uso para la deteccion de celulas en proliferacion y para su uso para el diagnostico de enfermedades dermatologicas y/o tumorales.

Ademas, la invencion se refiere a una composicion que comprende la nanoemulsion como se describe en este documento y un agente activo para su uso para el tratamiento de una enfermedad asociada a virus, para su uso para el tratamiento de enfermedades dermatologicas, para su uso para el tratamiento de una enfermedad asociada con proliferacion celular, para su uso en la terapia fotodinamica, para su uso para la deteccion de celulas en proliferacion y para su uso para el diagnostico de enfermedades dermatologicas y/o tumorales.

Se describe adicionalmente una composicion que comprende un agente activo seleccionado del grupo que consiste en acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo, y una nanoemulsion, donde las nanoemulsiones comprenden un alcohol.

Preferiblemente, la composicion y, en particular, la nanoemulsion comprende adicionalmente al menos un componente acuoso, preferiblemente agua, y al menos un componente lipofilo y/o al menos un tensioactivo.

Se usa el acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo que es adecuado para aplicarse de forma topica. "Derivado" debe entenderse como que es, en particular, una esterificacion del grupo amino del acido 5-aminolevulmico con uno o dos grupos alquilo, de forma particularmente preferible con un grupo metilo. Lo mas preferido es el acido 5-aminolevulmico o acido 5-metilaminolevulmico. La derivatizacion puede entenderse tambien como complejos de sales y compuestos de adicion, asf como compuestos alquilados. "Precursor" y "metabolito" deben entenderse como sustancias convertidas en una celula en protoporfirina IX. El agente activo acido 5-aminolevulmico o un derivado del mismo es especialmente preferido.

Como alcohol, se usa un alcohol C3 a C5, y el isopropanol y/o alcohol 1-propflico es mas preferido por las razones dadas anteriormente.

Preferiblemente, el acido aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo se fija a la monocapa exterior de las partmulas de la nanoemulsion. El acido aminolevulmico por tanto se localiza fuera del nucleo de las partmulas que se debe a interacciones entre el acido aminolevulmico y la monocapa exterior.

Preferiblemente, el al menos un componente lipofilo es Miglyol, el al menos un tensioactivo es lecitina, preferiblemente lecitina de soja y/o un tensioactivo de tipo polioxietileno, preferiblemente Polisorbato 80.

Un aspecto adicional de la invencion se refiere a una composicion farmaceutica y/o de diagnostico que comprende la composicion mencionada anteriormente.

Un aspecto adicional de la presente invencion se refiere al uso de dicha nanoemulsion en composiciones farmaceuticas, en particular, para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades dermatologicas tales como psoriasis, queratosis y, en particular, queratosis actmica. Ademas, la composicion es adecuada para enfermedades asociadas con proliferacion celular, tales como enfermedades tumorales, por ejemplo, carcinoma basocelular, carcinoma escamocelular, Morbus Bowen, neoplasia intraepitelial vulvar (VIN) o enfermedad cancerosa nodular y/o subcutanea. Ademas, la composicion es adecuada para el tratamiento de enfermedades asociadas a virus tales como condiloma acuminado.

Se describe adicionalmente una composicion que comprende una nanoemulsion y un agente activo, donde el agente activo se fija a la monocapa exterior de las partmulas de la nanoemulsion. Esto es particularmente util para potenciar las propiedades qmmicas (por ejemplo, estabilidad) y propiedades farmaceuticas (por ejemplo, profundidad de penetracion en la piel y biodisponibilidad) del agente activo.

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Preferiblemente, la nanoemulsion y/o el agente activo se definen como para la composicion descrita anteriormente (vease la pagina 9 ff de la descripcion).

Se describe adicionalmente una composicion farmaceutica y/o cosmetica que comprende la composicion, donde el agente activo se fija a la monocapa exterior de las parffculas de la nanoemulsion.

Se describe adicionalmente tambien el uso de una composicion que comprende una nanoemulsion y un agente activo, donde el agente activo se fija a la monocapa exterior de las parffculas de la nanoemulsion para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad asociada a virus, dermatologica, asociada con la proliferacion celular y/o en la terapia fotodinamica. Las realizaciones preferidas de dichas enfermedades y la terapia fotodinamica son como se ha mencionado anteriormente.

Las Figuras y los siguientes Ejemplos pretenden ilustrar adicionalmente la invencion.

La Fig. 1 muestra la distribucion de tamanos de parffcula de un lote representativo de Nanoemulsion BF-200 medida por espectroscopfa de correlacion de fotones.

La Fig. 2 muestra micrograffas electronicas de fractura por congelacion de Nanoemulsion B-200 (A) Aumento 1.200.000 veces, (B) Aumento 250.000 veces.

La Fig. 3 muestra micrograffas electronicas de tincion negativa de Nanoemulsion BF-200 (A) Aumento 1.200.000 veces, (B) Aumento 250.000 veces.

Fig. 4 muestra la fluorescencia de PplX inducida por UV medida en celulas Hela incubadas durante tres horas con ALA y diferentes concentraciones de BF-200. La fluorescencia se midio dos horas despues de retirar por lavado los medios.

La Fig. 5 muestra micrograffas electronicas de fractura por congelacion del gel de acido aminolevulmico con un aumento de 50.000 veces.

La Fig. 6 muestra micrograffas electronicas de fractura por congelacion del gel de acido aminolevulmico

(A) aumento 250.000 veces (b) aumento 1.200.000 veces

Ejemplos

Ejemplo 1: Preparacion de Nanoemulsion BF200

La composicion cualitativa y cuantitativa de la nanoemulsion BF200 se da en la siguiente tabla.

Tabla 1. Composicion de nanoemulsion BF200

Ingrediente

% (p/p) Funcion Calidad

Lecitina de soja

1,73 Tensioactivo > 94% de fosfatidilcolina, para uso farmaceutico, USP

Polisorbato 80 (monooleato de polioxietilen sorbitol)

3,40 Cotensioactivo Ph. Eur.

Trigliceridos capfflicos/caprico

3,45 Nucleo lipfdico Ph. Eur.

Alcohol isopropflico

1,42 Disolvente Ph. Eur.

Tampon fosfato 10 mM, pH 6

hasta 100,00 Disolvente Agua para inyeccion: Ph. Eur Fosfato disodico e hidrogenofosfato sodico: Ph. Eur.

El proceso de fabricacion para la emulsion BF200 consiste en las siguientes etapas:

Etapa 1: Preparacion de un tampon fosfato 10 mM, pH 6 (componente acuoso).

Etapa 2: Preparacion de un vehmulo que contiene el componente lipofilo, los tensioactivos y el alcohol.

Etapa 3: Fabricacion de la nanoemulsion mezclando el componente acuoso de la Etapa 1 y el vehmulo de la Etapa 2.

Etapa 4: Esterilizacion con filtro y llenado de la nanoemulsion BF200 en frascos esteriles de vidrio en campana de flujo laminar.

Descripcion del proceso de fabricacion para un tamano ffpico de lote:

Etapa 1: Se preparo el tampon fosfato 10 mM (1000 g), pH 6, y el tampon fosfato se esterilizo por filtracion a traves de un filtro esteril de 0,2 pm.

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Etapa 2: Preparacion de un vehnculo que contiene el componente lipofilo, los tensioactivos y el alcohol.

Tabla 2. Vehculo

Ingredientes

Peso (g)

Lecitina de soja

17,30

Polisorbato 80

34,00

Triglicerido capnlico, caprico

34,50

Alcohol isopropflico

14,20

Se peso la lecitina de soja (17,30 g) en un recipiente adecuado. Se anadio el alcohol isopropflico (14,20 g) y el recipiente se cubrio para evitar la evaporacion del alcohol. Se disolvio la lecitina de soja en agitacion continua con un agitador adecuado a temperatura ambiente. Se pesaron los trigliceridos capnlicos/capricos (34,50 g) y el Polisorbato 80 (34,00 g) y se anadieron a la solucion de lecitina de soja. La mezcla se agito con un agitador adecuado a temperatura ambiente hasta que se obtuvo una solucion transparente homogenea. Esta solucion es el concentrado que contiene todos los emulsionantes y componentes lipfdicos de Nanoemulsion BF200.

Etapa 3: Fabricacion de una emulsion mezclando 900 g de tampon fosfato (de la Etapa 1) y 100 g de vehfculo (de la Etapa 2).

En primer lugar, el componente acuoso que comprende el tampon fosfato se calento hasta aproximadamente 55°C en un recipiente adecuado. Despues, el vehfculo (concentrado) de la etapa 2 se calento hasta aproximadamente 55°C. Posteriormente, el vehfculo se vertio al tampon fosfato en agitacion continua con una mezcladora de helice (700 rpm). La nanoemulsion resultante se agita durante 15 min. La temperatura se mantuvo a aproximadamente 55°C durante el procedimiento completo. Finalmente, la nanoemulsion se enfrio hasta temperatura ambiente en un bano de agua.

Etapa 4: La nanoemulsion se esterilizo por filtracion a traves de un filtro esteril de 0,2 pm y se lleno en frascos esteriles de vidrio de 100 ml en campana de flujo laminar.

Ejemplo 2: Preparacion de geles de acido aminolevulinico al 1%, 3% y 10% y placebo

La composicion cualitativa y cuantitativa del gel de placebo y los geles de acido aminolevulinico al 1%, 3%, 10% se dan en la siguiente tabla.

Tabla 3. Composicion de gel de placebo

Ingrediente

Cantidad por gramo de gel Funcion Calidad

Goma xantana

20,375 mg Agente de carga Ph.Eur.

Nanoemulsion BF200

175,0 mg Vehfculo Propio

Propilenglicol

9,0 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de metilo

0,7 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de propilo

0,3 mg Conservante Ph.Eur.

Agua para inyeccion

794,625 mg Disolvente Ph.Eur.

Tabla 4. Composicion de gel de acido aminolevulinico al 1%

Composicion

Cantidad por gramo de gel Funcion Calidad

Clorhidrato del acido aminolevulinico

10,0 mg Sustancia de farmaco Propio

Goma xantana

20,125 mg Agente de carga Ph.Eur.

Nanoemulsion BF200

175,0 mg Vehfculo Propio

Propilenglicol

9,0 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de metilo

0,7 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de propilo

0,3 mg Conservante Ph.Eur.

Agua para inyeccion

784,875 mg Disolvente Ph.Eur.

Tabla 5: Composicion de gel de acido aminolevulinico al 3%

Ingrediente

Cantidad por gramo de gel Funcion Calidad

Clorhidrato del acido aminolevulinico

30,0 mg Sustancia de farmaco Propio

Goma xantana

19,625 mg Agente de carga Ph.Eur.

Nanoemulsion BF200

175,0 mg Vehfculo Propio

Propilenglicol

9,0 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de metilo

0,7 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de propilo

0,3 mg Conservante Ph.Eur.

Agua para inyeccion

765,375 mg Disolvente Ph.Eur.

Tabla 6: Composicion de gel de acido aminolevulmico al 10%

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Ingrediente

Cantidad por gramo de gel Funcion Calidad

Clorhidrato del acido aminolevulmico

100,0 mg Sustancia de farmaco Propio

Goma xantana

17,875 mg Agente de carga Ph.Eur.

Nanoemulsion BF200

175,0 mg Vehmulo Propio

Propilenglicol

9,0 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de metilo

0,7 mg Conservante Ph.Eur.

Parahidroxibenzoato de propilo

0,3 mg Conservante Ph.Eur.

Agua para inyeccion

697,125 mg Disolvente Ph.Eur.

El proceso de fabricacion para el gel de placebo o acido aminolevulmico consiste en las siguientes etapas:

- Etapa 1: Fabricacion de la base del gel mediante la adicion de goma xantana a agua para inyeccion, mezcla y esterilizacion por vapor

- Etapa 2: Preparacion de una solucion concentrada de conservantes de parahidroxibenzoato de metilo y parahidroxibenzoato de propilo en propilenglicol

- Etapa 3, para placebo: Preparacion de la formulacion de gel final mediante la adicion de la solucion concentrada de conservantes a la base del gel, adicion de Nanoemulsion BF200 a la base del gel y homogeneizacion del gel.

- Etapa 3, para geles de acido aminolevulmico: Preparacion de la formulacion de gel final mediante la adicion de la solucion concentrada de conservantes a la base del gel. Preparacion de una solucion de clorhidrato del acido aminolevulmico en Nanoemulsion BF200. Adicion de la solucion de clorhidrato del acido aminolevulmico en Nanoemulsion BF200 a la base del gel y homogeneizacion del gel.

Descripcion del proceso de fabricacion:

Etapa 1: Preparacion de base del gel con goma xantana

Se desinfecto un recipiente Stephan con isopropanol al 70%. Se puso agua para inyeccion (cantidad de 97,50 unidades) en el recipiente y despues se extendio goma xantana (cantidad de 2,5 unidades) sobre el mismo. La mezcla se disperso al vacm a una presion de aproximadamente 10.000 Pa (100 mbar) por minuto a 600 revoluciones durante 90 min. El gel base resultante se lleno en matraces Schott de 200 ml que se habfan aclarado antes con agua para inyeccion (llenados 1/3 como mucho). El gel base en los matraces despues se esterilizo con vapor en un autoclave durante 20 min a 121°C.

Etapa 2: Preparacion de parabeni conc.

Se pesaron acido metilparahidroxibenzoico (7,0 partes) y acido propilparahidroxibenzoico (3,0 partes) en un recipiente adecuado. Se mezclo propilenglicol (90 partes) con esto y los parahidroxibenzoatos se disolvieron en propilenglicol. La mezcla se calento en una placa de calentamiento mientras se agitaba con un agitador magnetico hasta que la mezcla se disolvio (70°C) y se obtiene una solucion transparente.

Etapa 3, parte 1: Preparacion de gel de placebo

Tabla 7. Preparacion de gel de placebo a partir del gel base y parabeni conc.

Componentes Cantidad en unidades

A

Base del gel 81,50

B

Nanoemulsion BF200 17,50

D

Parabeni conc. FH 1,0

Total 100,0

Todas las siguientes etapas se realizaron en un flujo de aire laminar en condiciones asepticas. Se anadio una cantidad de 1 unidad de parabeni conc. (D) y una cantidad de 81,5 unidades de gel base (A) a un recipiente adecuado. Se filtra una cantidad de 17,5 unidades de nanoemulsion (B) a traves de un filtro esteril de 0,2 pm y se anade al gel base. La mezcla se agita durante 10 min. Posteriormente, se llena una cantidad de 2 unidades del gel en cada tubo de aluminio laminado.

Etapa 3, parte 2: Preparacion de gel de acido aminolevulmico al 1%

Tabla 8. Preparacion de gel de acido aminolevulmico al 1%

Componentes Cantidad en unidades

A

Gel base 80,50

B

Nanoemulsion BF200 17,50

C

5 ALA (clorhidrato del acido aminolevulmico) 1,00

D

Parabeni conc. FH 1,0

Total 100,0

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Todas las siguientes operaciones se realizaron en flujo de aire laminar en condiciones asepticas. Se proporciono una cantidad de 1 unidad de parabeni conc. (D) y una cantidad de 80,5 unidades de gel base (A) en un recipiente adecuado. Se disolvio una cantidad de 1 unidad de ALA (C) en cantidades 17,5 unidades de nanoemulsion (B) por agitacion suave hasta que se obtiene una solucion. Dicha solucion se filtra a traves de un filtro esteril de 0,2 pm y se anade al gel base. La mezcla se agita durante 10 min para obtener un gel homogeneo. Posteriormente, se llenaron 2 g del gel en cada tubo de aluminio laminado.

Etapa 3, parte 3: Preparacion de gel de acido aminolevulrnico al 3% y 10%

Se preparo un gel al 3% y uno al 10% de la misma manera que la descrita para el gel al 1%, sin embargo, usando una cantidad de 78,50 unidades de gel base y una cantidad de 3 unidades de ALA o una cantidad de 71,50 unidades de gel base y una cantidad de 10 unidades de ALA, respectivamente.

Ejemplo 3: Tamano de particula de Nanoemulsion BF-200

El tamano medio de partfcula de la nanoemulsion fabricada, evaluado por espectroscopfa de correlacion de fotones, PCS (tambien llamada dispersion dinamica de luz laser, DLS) es de menos de 100 nm. Ademas, la nanoemulsion se caracteriza por una distribucion muy estrecha de tamanos de partfcula (vease la Figura 1 a continuacion).

La nanoemulsion es estable en un amplio intervalo de temperaturas, pero puede destruirse por congelacion y autoclave. Las nanoemulsiones son relativamente insensibles a cambios en el pH y la fuerza ionica y a causa de su pequeno tamano, pueden esterilizarse por filtracion a traves de un filtro de 0,2 pm. Las nanoemulsiones tienen el potencial de mejorar el suministro de sustancias activas en la piel, amplificando, por tanto, la eficacia de farmacos aplicados de forma topica.

La Nanoemulsion BF-200 se fabrica usando tecnologfa de baja energfa; es decir, la preparacion de la nanoemulsion no requiere dispositivos de alto corte, tales como sonicadores u homogeneizadores de alta presion.

La investigacion de las nanopartfculas en Nanoemulsion BF-200 se realizo por espectroscopfa de correlacion de fotones y con dos tecnicas de microscopfa electronica: EM de fractura por congelacion y tincion negativa.

La espectroscopfa de correlacion de fotones confirmo que BF-200 produce una nanoemulsion con un tamano muy constante y fiable de partfculas y una estrecha distribucion de partfculas. Estas caractensticas son estables sobre un largo periodo de tiempo y diferentes temperaturas (vease la Tabla 9 a continuacion).

Tabla 9: Resultas de un estudio de estabilidad de Nanoemulsion BF-200

Punto temporal Mes

Condicion de almacenamiento Aspecto pH Viscosidad 20°C Tamano medio de nanopartfcula Distribucion de tamano de nanopartfculas

Especificacion

Lfquido ligeramente opalescente 5,5-6,5 mPas informativo <100 nm 90% <200 nm

Resultado

Des. tfpica

0

- > opalescente 6,2 n.t. 15 90% < 21 nm 4,7

1

25°C/60% h.r. > opalescente 6,2 n.t. 16 90% < 22 nm 4,6

40°C/75% h.r.

> opalescente 6,2 n.t. 15 90% < 22 nm 5,7

2

5°C > opalescente 6,2 1 12 90% < 17 nm 4,2

25°C/60% h.r.

> opalescente 6,2 1 15 90% < 21 nm 4,7

3

5°C > opalescente 6,2 6 14 90% < 20 nm 4,7

25°C/60 %h.r.

> opalescente 6,1 1 14 90% < 20 nm 4,8

6

5°C > opalescente 6,3 6 17 90% < 23 nm 5,0

25°C/60% h.r.

> opalescente 6,3 6 14 90% < 20 nm 5,2

12

5°C > opalescente 6,2 2 9 90% <12 nm -

25°C/60% h.r.

> opalescente 6,1 2 11 90% < 15 nm -

18

5°C > opalescente 6,2 10 13 90% < 18 nm -

25°C/60% h.r.

> opalescente 6,0 8 11 90% < 15 nm -

En resumen, todos los resultados estan dentro de los lfmites especificados despues de hasta 12 meses de almacenamiento en diferentes condiciones de almacenamiento.

Se muestran micrograffas electronicas de fractura por congelacion de Nanoemulsion BF-200 con un aumento de 1.200.000 veces y 250.000 en la Figura 2 a continuacion. Las caractensticas mas prominentes en las micrograffas son una gran cantidad de vesfculas esfericas muy pequenas con un diametro que vana entre 15 a 50 nm. Estos valores se correlacionan bien con los medidos por espectroscopfa de correlacion de fotones (vease la Tabla 9 anteriormente). Las vesfculas son muy probablemente unilamelares ya que el grosor de la membrana de la vesfcula

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es de 3 - 4 nm. Esto corresponde con la longitud de una molecula de fosfatidilcolina, que es un componente principal de lecitina, el tensioactivo en la nanoemulsion. Los liposomas y otras vesmulas de dos capas tienen un grosor de membrana por encima de 7 nm.

La estructura de las vesmulas podna tambien observarse en micrograffas electronicas generadas por tincion negativa. Las nanopartmulas en Nanoemulsion BF-200 son esfericas, de aproximadamente 20 nm de diametro, con una cuenca de aproximadamente 3 a 4 nm de grosor y llenada con un material amorfo (vease la Figura 3 a continuacion). No se encontraron partmulas huecas.

La investigacion de nanopartmulas en gel de acido aminolevulmico se realizo con microscop^a electronica usando tecnicas de fractura por congelacion y tincion negativa.

Las micrograffas electronicas de fractura por congelacion de gel de acido aminolevulmico confirman que las nanopartmulas presentes en el gel tienen un tamano similar a las de Nanoemulsion BF-200 pura. La micrograffa ilustra partmulas individuales, asf como conglomerados (Fig. 5). La morfologfa y tamano de las nanopartmulas en el gel no estan influenciados por las condiciones de almacenamiento. El examen de BF-200 ALA (10% de gel despues de 4 meses de almacenamiento a 25°C (60% h.r.) por microscopfa electronica de fractura por congelacion revelo partmulas con tamano y forma similar a los encontrados en gel recien fabricado. El estudio de estabilidad disenado con los lotes de BF-200 gel ALA (10% de acido aminolevulmico) y placebo respecto a BF-200 gel ALA a usarse en el estudio clmico en Fase III en paralelo con el estudio clmico incluira el examen del tamano de partmulas por microscopfa electronica en puntos temporales posteriores.

La Fig. 6 muestra micrograffas electronicas de fractura por congelacion del gel generado con un mayor aumento. La superficie de fractura muestra predominantemente la envuelta de las partmulas cubiertas. La fractura a traves de la propia partmula sucede muy raramente. Las vesmulas parecen estar rodeadas por una capa de material que se interpreta que representa acido aminolevulmico. Esto genera una imagen de tipo huevo frito (marcada con cabezas de flecha en la Parte B de la Fig. 6).

Las micrograffas electronicas producidas por tincion negativa de gel de acido aminolevulmico al 10% presentaban nanopartmulas con una estructura superficial difusa borrosa que puede confirmar la estratificacion de material sobre las nanopartmulas observadas en las micrograffas electronicas de fractura por congelacion.

Ejemplo 4: Absorcion en celulas de mamifero: estudios de cultivo celular in vitro sobre la captacion de ALA: Estudios de cultivo celular:

La captacion de ALA y la conversion en protoporfirina IX (PplX) en celulas cultivadas puede controlarse midiendo la fluorescencia de PplX inducida por UV. Los experimentos de cultivo celular se realizaron con varias lmeas celulares neoplasicas: HELP, HepG2 y CCD 106 KERTr (una lmea celular de queratinocitos epiteliales humanos). Las celulas se incubaron en medios acuosos con Metil-ALA (MAL), ALA o BF-200 con ALA durante un maximo de 3 horas. En las concentraciones seleccionadas de farmaco, los tres medios de incubacion tuvieron un valor de pH similar. Despues de incubacion, las celulas se lavaron suavemente y se anadieron medios frescos. La produccion de PplX se midio en diferentes puntos temporales cuantificando la fluorescencia. La Figura 5 muestra los resultados obtenidos para celulas hElA.

El efecto de concentraciones crecientes de la nanoemulsion BF-200 (a concentracion constante de ALA) sobre la smtesis de PpIX se muestra en la Fig. 5. La fluorescencia de PplX en las celulas fue mayor con concentracion creciente de BF200 y alcanzo un maximo al 3% de BF200.

Ejemplo 5

La eficacia de la formulacion de nanoemulsion de 5-ALA para la terapia fotodinamica de la queratosis actmica se ha demostrado en un estudio clmico de determinacion de la dosis en Fase II que comenzo en otono de 2006 y estuvo patrocinado por Biofrontera Bioscience GmbH. El estudio controlado con placebo, aleatorizado y de doble enmascaramiento se realizo en 13 centro clmicos en Alemania bajo la direccion medica del Prof. Dr. Rolf-Markus Szeimies, University Clinics of Regensburg. Se usaron tres dosis activas (1, 3 y 10% de ALA) y placebo. Para verificar la eficacia del compuesto, se trataron 105 pacientes una vez por terapia fotodinamica con una de tres concentraciones diferentes de ALA o placebo.

Se incluyeron pacientes con 3 a 10 lesiones de queratosis actmica en la cara o en el cuero cabelludo. Cada paciente recibio un tratamiento (1%, 3% o 10% de acido 5-aminolevulmico (ALA) o placebo) de todas sus lesiones. Se aplico luz roja despues de 3 horas de incubacion. Despues de la sesion de tratamiento, los sujetos volvieron a la clmica despues de 3 semanas, 8 semanas y 12 semanas para controlar el resultado clmico y el proceso de curacion. Cada vez, el investigador evaluo el area tratada de la lesion de queratosis actmica (Ak) para evidencias de areas restantes con signos de AK y smtomas clmicos. La variable principal de eficacia fue la tasa de eliminacion total de todas las lesiones AK en la visita de la semana 12, definida como la cantidad de lesiones que muestran remision completa (las lesiones se han eliminado completamente y ya no son visibles placas escamosas adherentes de AK).

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Tambien se controlo la aparicion de dolor durante la irradiacion despues de la aplicacion de BF-200 ALA.

Resultados: Se descubrio que el pretratamiento con ALA al 10% precediendo PDT era la mas eficaz de las tres concentraciones ensayadas en eliminar las lesiones AK (superior de forma estadfsticamente significativa al placebo). Cuando los pacientes se evaluaron 12 semanas despues de un unico tratamiento con BF-200 ALA, al menos el 6070% de las lesiones tratadas se curaron completamente, dependiendo de la ponderacion de los centros clmicos y el area de la cabeza. Las tasas de eliminacion en el grupo de placebo fueron de aproximadamente el 5-15% de las lesiones tratadas, dependiendo de la ponderacion de los centros clmicos. La tasa de eliminacion correspondfa bien con los resultados publicados de estudios de ALA-PDT con un diseno similar del estudio, pero con mayores concentraciones de las sustancias activas 5-ALA o Metil ALA. Los resultados cosmeticos fueron excelentes. Solamente el 6% de los pacientes se quejaron acerca de dolor fuerte. No sucedieron efectos secundarios relevantes durante el estudio, los resultados cosmeticos fueron excelentes. No hubo preocupaciones de seguridad respecto a ninguno de los cuatro grupos durante PDT y durante un periodo de 12 semanas despues de PDT.

Como medida adicional de seguridad, esta parte de determinacion de la dosis comprendfa evaluaciones farmacocineticas. Se midieron los niveles sistemicos en plasma y orina de ALA y su metabolito protoporfirina IX. Las concentraciones en plasma y orina de estos compuestos en pacientes tratados con ALA no estuvieron aumentadas en comparacion con los valores fisiologicos de origen natural en los mismos individuos.

La invencion, en particular, se refiere a los siguientes puntos:

Punto 1. Una nanoemulsion que comprende a) al menos un componente acuoso y b) un vehmulo, que comprende i) al menos un componente lipofilo que esta presente en una cantidad del 0,1% en peso al 15% en peso, ii) al menos un tensioactivo y iii) al menos un alcohol,

donde el al menos un alcohol tiene al menos tres atomos de carbono, y donde el diametro medio de las partmulas emulsionadas es de menos de 100 nm.

Punto 2. La nanoemulsion del punto 1, donde el vehmulo esta presente en el componente acuoso.

Punto 3. La nanoemulsion del punto 1 o 2, donde el tensioactivo esta presente en una cantidad del 1% en peso al 30% en peso y el alcohol esta presente en una cantidad del 0,1% en peso al 10% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion.

Punto 4. La nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos precedentes, donde el componente acuoso esta presente en una cantidad del 50% en peso al 98% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion.

Punto 5. La nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos precedentes, donde el al menos un alcohol es alcohol isopropflico y/o alcohol 1-propflico.

Punto 6. La nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos precedentes, donde el al menos un componente lipofilo es trigliceridos y/o una mezcla de los mismos.

Punto 7. La nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos precedentes, donde el al menos un tensioactivo es lecitina y/o un tensioactivo de tipo polioxietileno.

Punto 8. La nanoemulsion del punto 7, donde la lecitina es lecitina de soja y el tensioactivo de tipo polioxietileno es Polisorbato 80.

Punto 9. La nanoemulsion del punto 8, donde la lecitina de soja tiene un contenido de fosfatidilcolina de al menos un 80% en peso.

Punto 10. La nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos precedentes, donde el diametro medio de las partmulas emulsionadas vana de 10 a 50 nm.

Punto 11. Un proceso para la preparacion de la nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos precedentes, que comprende las siguientes etapas:

a) proporcionar un componente acuoso,

b) proporcionar un vehmulo que comprende al menos un componente lipofilo, al menos un tensioactivo y al menos un alcohol, donde el al menos un alcohol tiene al menos tres atomos de carbono, y

c) mezclar el componente acuoso de la etapa a) con el vehmulo de la etapa b).

Punto 12. Composicion farmaceutica y/o cosmetica que comprende la nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos 1 a 10.

Punto 13. Una composicion que comprende una nanoemulsion como se define en uno cualquiera de los puntos

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precedentes y un agente activo.

Punto 14. La composicion del punto 13, donde el agente activo se selecciona del grupo que consiste en acido 5- aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo.

Punto 15. La composicion del punto 14, donde el acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo se fija a la monocapa exterior de las partfculas de la nanoemulsion.

Punto 16. Composicion farmaceutica, cosmetica y/o de diagnostico que comprende la composicion de uno cualquiera de los puntos 13 a 15.

Punto 17. La composicion de uno cualquiera de los puntos 13 to 16, donde la composicion esta presente como un gel y comprende de un 0,01% en peso a un 50% en peso del agente activo, de un 1% en peso a un 60% en peso de la nanoemulsion, de un 0,01% en peso a un 4% en peso del al menos un agente de carga, de un 1% en peso a un 3% en peso del al menos un conservante, basado en el peso total de la composicion, y haciendo el equilibrio el al menos un disolvente.

Punto 18. Un proceso para la preparacion de una composicion como se define en uno cualquiera de los puntos 13 a 17, que comprende las siguientes etapas:

a) proporcionar un componente acuoso,

b) proporcionar un vehfculo que comprende al menos un componente lipofilo, al menos un tensioactivo y al menos un alcohol,

donde el al menos un alcohol tiene al menos tres atomos de carbono,

c) mezclar el componente acuoso de la etapa a) con el vehfculo de la etapa b), para formar una nanoemulsion,

d) anadir el agente activo antes y/o despues de la formacion de dicha nanoemulsion de la etapa c), y

e) opcionalmente anadir aditivos y/o excipientes adicionales a la etapa d).

Punto 19. El proceso del punto 18, donde el agente activo en la etapa d) se anade despues de la formacion de dicha nanoemulsion de la etapa c).

Punto 20 Uso cosmetico de una nanoemulsion de cualquiera de los puntos 1 a 10 o de una composicion de uno cualquiera de los puntos 12 a 17 como agente antienvejecimiento.

Punto 21. Uso de una nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos 1 a 10 y/o una composicion de uno cualquiera de los puntos 12 a 17 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad asociada a virus.

Punto 22. El uso del punto 21, donde la enfermedad asociada a virus esta causada por un virus del papiloma humano (HPV).

Punto 23. El uso del punto 22, donde la enfermedad asociada a virus es condiloma acuminado.

Punto 24. Uso de una nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos 1 a 10 y/o una composicion de uno cualquiera de los puntos 12 a 17 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades dermatologicas.

Punto 25. El uso del punto 24, donde el trastorno se selecciona del grupo que consiste en neurodermatitis.

Punto 26. El uso del punto 25, donde la enfermedad dermatologica es acne y/o una enfermedad asociada con queratosis.

Punto 27. Uso del punto 26, donde la queratosis es queratosis actmica.

Punto 28. Uso de una nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos 1 a 10 y/o de la composicion de uno cualquiera de los puntos 12 a 17 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad asociada con proliferacion celular.

Punto 29. El uso del punto 28, donde la enfermedad asociada con proliferacion celular es enfermedad tumoral.

Punto 30. El uso del punto 29, donde la enfermedad tumoral se selecciona del grupo que consiste en adenoma basocelular, carcinoma escamocelular, Morbus Bowen, neoplasia intraepitelial vulvar (VlN) y/o una enfermedad cancerosa nodular y/o subcutanea.

Punto 31. El uso del punto 24 o 28, donde la enfermedad es psoriasis.

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Punto 32. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 14 a 17 para la fabricacion de un medicamento en la terapia fotodinamica.

Punto 33. El uso del punto 32, donde dicha composicion se administra a un paciente en una cantidad eficaz y se incuba durante un periodo de time adecuado para proporcionar una cantidad suficiente del agente activo en el tejido a tratarse, y donde el tejido se somete a radiacion de luz.

Punto 34. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 14 a 17 para la deteccion de celulas en proliferacion.

Punto 35. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 14 a 17 para el diagnostico de enfermedades dermatologicas y/o tumorales.

Punto 36. Kit, que comprende una composicion de uno cualquiera de los puntos 14 a 17 y al menos un componente, seleccionado de

a) una cobertura fotorresistente

b) un medio para fijar dicha cobertura a un sitio de aplicacion, y

c) un medio para aplicar dicha composicion a un sitio de aplicacion.

Punto 37. Metodo de tratamiento de una enfermedad asociada a virus, una enfermedad dermatologica y/o una enfermedad asociada con proliferacion celular, que comprende administrar una cantidad farmaceuticamente eficaz de una nanoemulsion de uno cualquiera de los puntos 1 a 10 y/o de una composicion como se define en uno cualquiera de los puntos 12 a 17 a un sujeto que lo necesita.

Punto 38. Una composicion que comprende un agente activo seleccionado del grupo que consiste en acido 5- aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo, y una nanoemulsion, donde la nanoemulsion comprende un alcohol.

Punto 39. La composicion del punto 38, que comprende adicionalmente al menos un componente acuoso, preferiblemente agua, al menos un componente lipofilo y/o al menos un tensioactivo.

Punto 40. La composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 39, donde el alcohol es un alcohol C2 a Ca, en particular, un alcohol C3 a Ca.

Punto 41. La composicion del punto 40, donde el alcohol es alcohol isopropflico y/o alcohol 1-propflico.

Punto 42. La composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 41, donde el acido 5-aminolevulmico, un derivado, precursor y/o metabolito del mismo se fija en la monocapa exterior de la nanoemulsion.

Punto 43. La composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 41, donde el al menos un componente lipofilo es Miglyol, el al menos un tensioactivo es lecitina, preferiblemente lecitina de soja y/o un tensioactivo de tipo polioxietileno, preferiblemente Polisorbato 80.

Punto 44. Composicion farmaceutica y/o de diagnostico que comprende la composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 43.

Punto 45. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 43 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad asociada a virus.

Punto 46. El uso del punto 45, donde la enfermedad asociada a virus esta causada por un virus del papiloma humano (HPV).

Punto 47. El uso del punto 46, donde la enfermedad asociada a virus es condiloma acuminado.

Punto 48. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 43 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de enfermedades dermatologicas.

Punto 49. El uso del punto 48, donde la enfermedad dermatologica es acne y/o una enfermedad asociada con queratosis.

Punto 50. Uso del punto 43, donde la queratosis es queratosis actmica.

Punto 51. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 43 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad asociada con proliferacion celular.

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Punto 52. El uso del punto 51, donde la enfermedad asociada con proliferacion celular es enfermedad tumoral.

Punto 53. El uso del punto 52, donde la enfermedad tumoral se selecciona del grupo que consiste en adenoma basocelular, carcinoma escamocelular, Morbus Bowen, neoplasia intraepitelial vulvar (VIN) y/o una enfermedad cancerosa nodular y/o subcutanea.

Punto 54. El uso del punto 48 o 51, donde la enfermedad es psoriasis.

Punto 55. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 43 para la fabricacion de un medicamento en la terapia fotodinamica.

Punto 56. El uso del punto 55, donde dicha composicion se administra a un paciente en una cantidad eficaz y se incuba durante un periodo de tiempo adecuado para proporcionar una cantidad suficiente del agente activo en el tejido a tratarse, y donde el tejido se somete a radiacion de luz.

Punto 57. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 43 para la deteccion de celulas en proliferacion.

Punto 58. Uso de una composicion de uno cualquiera de los puntos 38 a 43 para el diagnostico de enfermedades dermatologicas y/o tumorales.

Punto 59. Una composicion que comprende una nanoemulsion y un agente activo, donde el agente activo se fija a la monocapa exterior de las partfcuias de la nanoemulsion.

Punto 60. La composicion del punto 59, donde la nanoemulsion y/o el agente activo se define como en uno cualquiera de los puntos 38 a 43.

Punto 61. Composicion farmaceutica y/o cosmetica que comprende la composicion del punto 59 o 60.

Punto 62. Uso de una composicion del punto 59 o 60 para la fabricacion de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad asociada a virus, dermatologica, asociada con la proliferacion celular y/o en la terapia fotodinamica.

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   REIVINDICACIONES

   1. Una nanoemulsion que comprende a) al menos un componente acuoso y b) un vehnculo, que comprende i) al menos un componente lipofilo que esta presente en una cantidad del 0,1% en peso al 15% en peso, ii) al menos un tensioactivo y iii) al menos un alcohol,

   en la que el al menos un alcohol tiene de tres a cinco atomos de carbono y

   en la que el diametro medio de las partfculas emulsionadas es de menos de 100 nm.
2. 2. Las nanoemulsiones de la reivindicacion 1, en las que el vehfculo esta presente en el componente acuoso y/o

   en las que el tensioactivo esta presente en una cantidad del 1% en peso al 30% en peso y el alcohol esta presente en una cantidad del 0,1% en peso al 10% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion, y/o en las que el componente acuoso esta presente en una cantidad del 50% en peso al 98% en peso, basado en el peso total de la nanoemulsion, y/o

   en las que el al menos un alcohol es alcohol isopropflico y/o alcohol 1-propflico y/o en las que el al menos un componente lipofilo es trigliceridos y/o una mezcla de los mismos, y/o en las que el al menos un tensioactivo es lecitina y/o un tensioactivo de tipo polioxietileno, y/o en las que el diametro medio de las partfculas emulsionadas vana de 10 a 50 nm.
3. 3. Un proceso para la preparacion de la nanoemulsion de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende las siguientes etapas:

   a) proporcionar un componente acuoso,

   b) proporcionar un vehfculo que comprende al menos un componente lipofilo, al menos un tensioactivo y al menos un alcohol, en el que el al menos un alcohol tiene de tres a cinco atomos de carbono, y

   c) mezclar el componente acuoso de la etapa a) con el vehfculo de la etapa b).
4. 4. Composicion farmaceutica, cosmetica o de diagnostico que comprende la nanoemulsion de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2.
5. 5. Una composicion de acuerdo con la reivindicacion 4, que comprende un agente activo.
6. 6. Un proceso para la preparacion de una composicion como se define en la reivindicacion 5, que comprende las siguientes etapas:

   a) proporcionar un componente acuoso,

   b) proporcionar un vehfculo que comprende al menos un componente lipofilo, al menos un tensioactivo y al menos un alcohol, en el que el al menos un alcohol tiene de tres a cinco atomos de carbono,

   c) mezclar el componente acuoso de la etapa a) con el vehfculo de la etapa b), para formar una nanoemulsion,

   d) anadir el agente activo antes y/o despues de la formacion de dicha nanoemulsion de la etapa c).
7. 7. El proceso de acuerdo con la reivindicacion 6, que comprende adicionalmente la etapa e) anadir aditivos y/o excipientes adicionales a la etapa d).
8. 8. Uso cosmetico de una nanoemulsion de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 o de una composicion de la reivindicacion 4 como vehfculo.
9. 9. Uso cosmetico de una nanoemulsion de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 o de una composicion de la reivindicacion 5 como agente antienvejecimiento.
10. 10. Composicion de la reivindicacion 5 para su uso para el tratamiento de una enfermedad asociada a virus.
11. 11. Nanoemulsion de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 y/o composicion de una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 5 para su uso para el tratamiento de enfermedades dermatologicas.
12. 12. Nanoemulsion de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2 y/o composicion de una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 5 para su uso para el tratamiento de una enfermedad asociada con proliferacion celular.
13. 13. Composicion de una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 5 para su uso en la terapia fotodinamica.
14. 14. Composicion de una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 5 para su uso para la deteccion de celulas en proliferacion.
15. 15. Composicion de una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 5 para su uso para el diagnostico de enfermedades dermatologicas y/o tumorales.
16. 16. Kit, que comprende una composicion de la reivindicacion 5 y al menos un componente, seleccionado de

    a) una cobertura fotorresistente

    b) un medio para fijar dicha cobertura a un sitio de aplicacion, y

    c) un medio para aplicar dicha composicion a un sitio de aplicacion.

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17. 17. La composicion de la reivindicacion 5, en la que el agente activo es acido 5-aminolevulmico.
18. 18. Composicion de la reivindicacion 5 para su uso para el tratamiento de queratosis, preferiblemente queratosis actmica.

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