ES2604454T3 - Composición para tratar inflamación del tracto gastrointestinal en mascotas - Google Patents

Composición para tratar inflamación del tracto gastrointestinal en mascotas Download PDF

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Abstract

Fibra para su uso en el tratamiento de inflamación del tracto gastrointestinal (GI) de un animal de compañía, en la que el tratamiento de inflamación comprende administrar por vía oral al animal de compañía una composición que comprende fibra, en la que el tratamiento de inflamación comprende reducir la cantidad de especies de Desulfovibrio y/o Helicobacter en el tracto GI, y en la que la fibra se selecciona del grupo que consiste en un oligosacárido, un galactano, un beta-glucano y una mezcla de los mismos.

Description

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DESCRIPCION
Composicion para tratar inflamacion del tracto gastrointestinal en mascotas Antecedentes de la invencion
Mantener el bienestar del tracto GI de un mamlfero es un objetivo muy deseable. Son particularmente relevantes los estados inflamatorios del tracto GI. Las bacterias Desulfovibrio spp. (incluyendo, pero sin limitarse a, desulfuricans, intestinalis, vulgaris, etc.) son bacterias reductoras de sulfato que producen sulfuro de hidrogeno que cuando se libera por las bacterias puede causar la inflamacion de celulas del tracto GI. Las bacterias Helicobacter (incluyendo, pero sin limitarse a, heilmannii, felix, pylori, bizzozeronii, salomonis) pueden causar ulceraciones e inflamacion de las celulas del estomago e intestino delgado. Algunos signos de inflamacion del tracto GI incluyen diarrea aguda o cronica, deposiciones blandas, sangre en las deposiciones, vomitos, escasa digestion y absorcion de nutrientes, perdida de peso y apetito escaso. Se conoce que enfermedades tales como gastritis, enteritis, enfermedad inflamatoria del intestino, ulceras, algunos tipos de cancer y otros tienen inflamacion GI como componente principal. Bacterias patogenas tales como Desulfovibrio spp., que reducen sulfato para dar sulfuro, tambien pueden causar un aumento de gas u olor de las deposiciones debido a niveles aumentados de sulfuro u otros compuestos odorlferos en las deposiciones.
Ahora se ha encontrado que los gatos con enfermedad inflamatoria del intestino (EII) tienen un numero mayor de Desulfovibrio y/o Helicobacter spp. que gatos normales, sanos. Tambien se ha encontrado que Helicobacter era detectable en todos los gatos con enfermedad inflamatoria del intestino (EII) mientras que solo 5/12 gatos normales tratados tenlan niveles detectables de Helicobacter. Tambien se ha encontrado que el 45% de los gatos con EII sometidos a prueba tenlan niveles de bifidobacterias, un grupo bacteriano beneficioso, por debajo de niveles de deteccion convencionales, mientras que el 9% de gatos normales, sanos tenlan bifidobacterias por debajo de los niveles de deteccion convencionales.
Sumario de la invencion
Segun la invencion, existe una composicion alimenticia comestible por via oral para su uso por un animal de companla que comprende una composicion alimenticia comestible en combination con un componente que reduce los niveles de Desulfovibrio y/o Helicobacter spp. en el animal de companla, tal como se define en las reivindicaciones adjuntas.
Tambien se da a conocer un metodo para reducir el nivel de Desulfovibrio y/o Helicobacter spp. en un animal de companla que comprende administrar por via oral el alimento de la invencion.
Description detallada de la invencion
Tal como se indico anteriormente, ahora se ha descubierto que los niveles de Desulfovibrio spp. son superiores en gatos con un trastorno inflamatorio del tracto GI, EII, que en los gatos normales que no tienen este trastorno. Por tanto, sera beneficioso para cualquier animal de companla que tiene un nivel superior de Desulfovibrio y/o Helicobacter spp., con o sin signos cllnicos visibles de una enfermedad o trastorno generalmente acompanado por inflamacion del tracto GI, reducir sus niveles. Tambien pueden derivarse beneficios de la prevention del aumento de Desulfovibrio y/o Helicobacter spp., es decir un efecto preventivo.
Las bacterias pueden reducirse por agentes activos. Estos incluyen materiales antibacterianos tales como antibioticos, compuestos quimioterapicos y similares. Sorprendentemente, las fibras tambien pueden reducir los niveles de Desulfovibrio y/o Helicobacter spp. Los ejemplos de fibras de ese tipo incluyen un oligosacarido, un galactano, un beta-glucano y mezclas de los mismos. Los ejemplos de oligosacaridos incluyen xilo-oligosacarido, galacto-oligosacarido, fructo-oligosacarido. Los ejemplos de un beta-glucano incluyen extracto de celulas de levadura, cebada germinada, fibra de avena, curdlano (polisacarido de fermentation microbiana). Los ejemplos de galactanos incluyen arabinogalactano. Preferiblemente tambien puede(n) estar presente(s) un(os) polifenol(es) con el agente activo, particularmente cuando el agente activo es una fibra, y mas particularmente cuando la fibra es un galactano tal como arabinogalactano. El polifenol es generalmente de una estructura que tiene al menos dos fenoles y mas preferiblemente es un flavonoide tal como una taxifolina. Las cantidades mlnimas del polifenol en la composicion son un mlnimo de aproximadamente el 0,01, el 0,05 o el 0,1% en peso tal como se mide en la dieta diaria un animal de companla. El maximo generalmente no excede aproximadamente el 2, el 1 o el 0,75% en peso tal como se mide en la dieta diaria de un animal de companla, todos los pesos en base de materia seca.
Puede emplearse una cantidad eficaz de componente frente a Desulfovibrio y/o Helicobacter spp. Un agente antibacteriano tal como un antibiotico o agente quimioterapico puede proporcionarse por via oral a la mascota a un mlnimo de aproximadamente 2 y 5 mg/kg de peso corporal. Los maximos generalmente no son de mas de aproximadamente 25, 50 mg/kg de peso corporal. Con respecto a una fibra, el mlnimo es de aproximadamente el
0. 1. el 0,5 o el 1,0% en peso y el maximo generalmente no debe exceder aproximadamente el 5, el 10 o el 20% en peso tal como se mide en la dieta diaria de un animal de companla, en base de materia seca.
La reduccion de Desulfovibrio y/o Helicobacter spp. puede ser eficaz para ayudar a controlar enfermedades y estados en un animal de companla en los que la inflamacion del tracto GI es un componente principal. Ejemplos de 5 animales de companla son perros, gatos, caballos.
Ejemplo - Mostrar la presencia de nivel aumentado de bacterias patogenas en gatos con EII.
1. Protocolo para el examen de muestras fecales de gatos:
Se recogieron muestras fecales de gatos normales sanos y de los gatos con diagnostico de EII. Se mantuvieron los gatos normales con una dieta seca Science Diet® Feline maintenance® mientras que los gatos con EII se 10 mantuvieron con una dieta gastrointestinal terapeutica. Se congelaron las muestras fecales a -70°C antes del analisis. Para el analisis, se mezclaron muestras con solucion salina tamponada con fosfato hasta una razon de 1:10 (p/p), se agitaron con vortex con perlas de vidrio y se centrifugaron para eliminar materia particulada. Se anadio una allcuota de 375 ml de muestra a un tubo que contenla 1,125 ml de paraformaldehldo al 4% y se dejo a 4°C durante 4-5 horas. Se centrifugaron las muestras y se lavaron dos veces en PBS, entonces se mezclaron con 150 ml de 15 etanol filtrado y se almacenaron a -20°C antes de analisis de hibridacion in situ fluorescente (FISH para enumeracion microbiana). Se sintetizaron sondas dirigidas a ARNr 16S especlfico de genero y se monomarcaron en el extremo 5' con tinte fluorescente para detectar las bacterias de interes en los medios de fermentacion. Se tino el acido nucleico total para obtener los recuentos de celulas totales. Los datos se expresan como log10 de celulas/g de heces. FISH permite la cuantificacion bacteriana de muestras almacenadas e incluye tanto diversidad cultivable como no 20 cultivable.
Resultados
Tabla 1. Logio de unidades formadoras de colonias de bacterias patogenas en gatos normales y con EII
Normal EII
Heces con Desulfovibrio ufc/g 7,0 ± 2,5 7,7 ± 0,6
Heces con Helicobacter ufc/g 2,9 ± 3,6 7,3 ± 0,6
Estos resultados muestran que los gatos con inflamacion del tracto GI, especlficamente EII, tenlan una cantidad aumentada de bacterias patogenas presentes en el tracto GI.
25 Ejemplo 2 - Efecto in vivo de AG sobre Desulfovibrio en gatos con EII y normales
2. Protocolo para el estudio de alimentacion
Se alimentaron once (11) gatos con EII y 10 gatos normales sanos con alimentos que contenlan el 1,0% de pulpa de
remolacha con el 0,6% de extracto de arabinogalactano del alerce occidental. El extracto tenia aproximadamente el
90% en peso de arabinogalactano y aproximadamente el 4% en peso de polifenoles, siendo el polifenol 30 predominante taxifolina, siendo el resto humedad, todo en una base de materia seca durante dos semanas. Tras esto, se cambiaron los gatos a alimento que contenia el 1,5% de pulpa de remolacha sola. Se recogieron muestras fecales en los dias 0, dia 14 y dia 28. Se prepararon las muestras de la siguiente manera para el analisis mediante FISH: Para congelar cada muestra fecal, se suspendieron 5 g de heces en solucion salina tamponada con fosfato (PBS) anaerobia a pH 7,3 en una bolsa o un recipiente de plastico esteril para dar una concentracion final del 10% 35 (45 ml para 5 g). Se homogeneizo/mezclo la suspension espesa en la bolsa para evitar contaminacion. Se uso un
recipiente diferente para cada muestra. Se mezclaron 5 ml de la suspension espesa con una cantidad igual de glicerol para dar una mezcla 50:50 que se congelo para el analisis mediante FISH.
Resultados:
Se obtuvieron trece (13) conjuntos completos de muestras fecales. Cuando los gatos recibian alimento que contenia 40 el 0,6% de extracto de AG, 4/13 gatos tenian reducciones de los niveles de Desulfovibrio spp. de 0,3 unidades log y superiores. 8/13 gatos tenian pequenas reducciones o ningun cambio en los niveles de Desulfovibrio spp. mientras que solo 1/13 gatos tenia un aumento de Desulfovibrio spp. Cuando se cambiaron los gatos a alimento sin AG, 10/13 gatos tenian aumentos de los niveles de Desulfovibrio spp. de 0,3 unidades log y superiores, 2/13 gatos no tenian cambios y solo 1/13 gatos tenia reduccion de los niveles de Desulfovibrio spp.
45 Los resultados muestran que el extracto de AG podia prevenir un aumento en los niveles de Desulfovibrio spp. en la mayoria de los gatos y tendia a reducirlos en algunos de los gatos. Esto era al nivel que se alimento en comparacion
con pulpa de remolacha, que tendla a provocar un aumento en los niveles de Desulfovibrio spp. en la mayorla de los gatos.
Ejemplo 3 - Experimento in vitro que muestra que diversas fibras reducfan los niveles de Desulfovibrio spp.
Se prepararon vasos de fermentacion que contenlan medio tamponado con fosfato anaerobio y se anadio 1 ml de 5 inoculo fecal canino (muestra fecal al 10% p/v con respecto a tampon). La composicion de los medios era tal como se describe en Sunvold GD, Hussein HS, Fahey GC, Merchen NR, y Reinhart GA (1995), In vitro fermentation of selected fiber sources by dogs fecal inoculum and in vivo digestion and metabolism of fiber supplemental diets. J. Animal Sci. 73:1099-1109 (1995). Las fermentaciones se llevaron a cabo a 39°C. Se realizaron experimentos de manera ciega con diferentes fibras. Despues de 8 horas de incubacion, se retiro 1 ml de llquido de cultivo. Se 10 preparo una allcuota de esto para FISH. Despues de 8 horas, se retiro 1 ml de llquido de cultivo y se mezclo con paraformaldehldo al 4% en PBS y se fijo para FISH. Se sintetizaron sondas dirigidas a ARNr 16S especlfico de genero y se monomarcaron en el extremo 5' con tinte fluorescente para detectar las bacterias de interes en los medios de fermentacion. Se tino el acido nucleico total para obtener los recuentos microbianos totales. Los resultados mostraron que varios tipos diferentes de fibras podlan disminuir el crecimiento de Desulfovibrio spp. en de 15 0,5 a 1,0 unidades log durante la fermentacion de 8 horas (vease la tabla 2).
Tabla 2
Numeros de Desulfovibrio spp. despues de 8 horas de incubacion (log de ufc/ml de inoculo fecal).
Log1o DE UFC A LAS 0 HORAS Log10 DE UFC A LAS 8 HORAS
Arabinogalactano
7,5 ± 0,3 6,4 ± 1,0
Xilo-oligosacarido
7,2 ± 0,4 6,8 ± 0,9
Galacto-oligosacarido
7,0 ± 1,0 6,8 ± 0,9
Fructo-oligosacarido
6,9 ± 1,0 6,3 ± 0,8
Inulina
7,3 ± 0,2 6,4 ± 1,0
Cebada germinada
6,8 ± 0,9 5,8 ± 0,0
Sumario
Por tanto, se ha mostrado tanto in vitro como in vivo que AG disminuyo el nivel de Desulfovibrio spp.

Claims (6)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Fibra para su uso en el tratamiento de inflamacion del tracto gastrointestinal (GI) de un animal de companla, en la que el tratamiento de inflamacion comprende administrar por via oral al animal de companla una composicion que comprende fibra,
    5 en la que el tratamiento de inflamacion comprende reducir la cantidad de especies de Desulfovibrio y/o Helicobacter en el tracto GI, y
    en la que la fibra se selecciona del grupo que consiste en un oligosacarido, un galactano, un beta-glucano y una mezcla de los mismos.
  2. 2. Fibra para su uso segun la reivindicacion 1, en la que el animal de companla necesita dicha administracion.
    10 3. Fibra para su uso segun la reivindicacion 2, en la que el animal de companla es un perro o gato.
  3. 4. Fibra para su uso segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la fibra se selecciona del grupo que consiste en arabinogalactano, xilo-oligosacarido, galacto-oligosacarido, fructo-oligosacarido, inulina, cebada germinada y una mezcla de los mismos.
  4. 5. Fibra para su uso segun cualquier reivindicacion anterior, en la que la composicion comprende fibra en una
    15 cantidad del 0,1%, el 0,5%, el 1%, el 5%, el 10% o el 20% en una base de materia seca.
  5. 6. Fibra para su uso segun cualquier reivindicacion anterior, en la que la composicion comprende ademas un polifenol.
  6. 7. Fibra para su uso segun cualquier reivindicacion anterior, que ademas comprende reducir el olor de los gases intestinales y/o el olor de las deposiciones.
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