ES2613981T3 - Cultivos de células vegetales del género Centella, procedimiento de producción y usos de los mismos - Google Patents
Cultivos de células vegetales del género Centella, procedimiento de producción y usos de los mismos Download PDFInfo
- Publication number
- ES2613981T3 ES2613981T3 ES12382351.0T ES12382351T ES2613981T3 ES 2613981 T3 ES2613981 T3 ES 2613981T3 ES 12382351 T ES12382351 T ES 12382351T ES 2613981 T3 ES2613981 T3 ES 2613981T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- culture
- weight
- amount
- added
- plant
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 title abstract description 13
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 title abstract description 7
- 241000167550 Centella Species 0.000 title abstract 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title 1
- WYQVAPGDARQUBT-FGWHUCSPSA-N Madecassol Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)OC[C@H]1O[C@H]([C@@H]([C@@H](O)[C@@H]1O)O)OC(=O)[C@]12CC[C@H]([C@@H]([C@H]1C=1[C@@]([C@@]3(CC[C@H]4[C@](C)(CO)[C@@H](O)[C@H](O)C[C@]4(C)[C@H]3CC=1)C)(C)CC2)C)C)[C@@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WYQVAPGDARQUBT-FGWHUCSPSA-N 0.000 abstract description 6
- WYQVAPGDARQUBT-XCWYDTOWSA-N asiaticoside Natural products O=C(O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]2[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O[C@H]3[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O3)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@]12[C@@H]([C@@H](C)[C@H](C)CC1)C=1[C@](C)([C@@]3(C)[C@@H]([C@@]4(C)[C@H]([C@@](CO)(C)[C@@H](O)[C@H](O)C4)CC3)CC=1)CC2 WYQVAPGDARQUBT-XCWYDTOWSA-N 0.000 abstract description 6
- 229940022757 asiaticoside Drugs 0.000 abstract description 6
- QCYLIQBVLZBPNK-UHFFFAOYSA-N asiaticoside A Natural products O1C(C(=O)C(C)C)=CC(C)C(C2(C(OC(C)=O)CC34C5)C)C1CC2(C)C3CCC(C1(C)C)C45CCC1OC1OCC(O)C(O)C1O QCYLIQBVLZBPNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract description 4
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 abstract description 3
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 abstract description 2
- -1 jasmonate compound Chemical class 0.000 abstract 3
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 abstract 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 10
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 10
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 10
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 10
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 244000146462 Centella asiatica Species 0.000 description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 8
- 235000004032 Centella asiatica Nutrition 0.000 description 7
- GEWDNTWNSAZUDX-WQMVXFAESA-N (-)-methyl jasmonate Chemical compound CC\C=C/C[C@@H]1[C@@H](CC(=O)OC)CCC1=O GEWDNTWNSAZUDX-WQMVXFAESA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- GEWDNTWNSAZUDX-UHFFFAOYSA-N methyl 7-epi-jasmonate Natural products CCC=CCC1C(CC(=O)OC)CCC1=O GEWDNTWNSAZUDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 3
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 3
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 3
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 3
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 3
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 101100387924 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) DOS2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100467517 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) raf2 gene Proteins 0.000 description 1
- YIQKLZYTHXTDDT-UHFFFAOYSA-H Sirius red F3B Chemical compound C1=CC(=CC=C1N=NC2=CC(=C(C=C2)N=NC3=C(C=C4C=C(C=CC4=C3[O-])NC(=O)NC5=CC6=CC(=C(C(=C6C=C5)[O-])N=NC7=C(C=C(C=C7)N=NC8=CC=C(C=C8)S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)O)S(=O)(=O)O)S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)[O-].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+] YIQKLZYTHXTDDT-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 229940059958 centella asiatica extract Drugs 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M dihydrogenphosphate Chemical compound OP(O)([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- 238000010874 in vitro model Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000028 nontoxic concentration Toxicity 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/04—Plant cells or tissues
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Un cultivo de células vegetales de una planta del género Centella, comprendiendo dicho cultivo de células vegetales una cantidad de madecasósido comprendida del 85 % al 95 % en peso, y una cantidad de asiaticósido del 5 % al 15 % en peso, siendo el % en peso del madecasósido y el asiaticósido respecto al peso total de los centellósidos en el cultivo cellular, y obtenible por: a) cultivo mediante suspensión celular de una célula vegetal indiferenciada de una planta del género Centella en un medio de crecimiento adecuado durante un periodo comprendido de 8 a 15 días hasta que se alcanza la fase de crecimiento estacionario; para obtener un cultivo en fase estacionaria; b) adición de 3 dosis de un compuesto de jasmonato al cultivo en fase estacionaria de la etapa a), en el que cada una de las dosis añadidas corresponde a una cantidad tal de compuesto de jasmonato que la concentración final al final de cada adición es de 80 μM a 150 μM; y donde las tres dosis del compuesto de jasmonato se añaden con la pauta siguiente: (i) la primera dosis una vez que e cultivo de la etapa a) ha alcanzado la fase de crecimiento estacionaria; (ii) la segunda dosis se añade de 3 a 5 días después con respecto a la primera adición; (iii) la tercera dosis se añade de 8 a 11 días después con respecto a la primera adición.
Description
estacionaria), la suspensión celular se provocó con jasmonato de metilo (MeJA) (100 μM ) los días 12, 16 y 22 desde el inicio de la suspensión. Otros posibles días de inducción incluyen, una parte del día en el que se alcanza la fase de crecimiento estacionaria y se inicia el programa de inducción, los días comprendidos de 3 a 5 días después de la primera inducción; y los días comprendidos de 8 a 11 días después de la primera inducción.
Tras el periodo de inducción, el cultivo provocado se lisó con un homogeneizador a 10000-15000 rpm y se filtró a través de una malla de nylon con un diámetro de poro de 100 μm.
La mezcla contenía:
- -
- compuestos del medio de cultivo no consumidos por las células;
- -
- compuestos secretados por las células al medio;
- -
- compuestos intracelulares solubles; y
- -
- compuestos no solubles de membrana celular con un tamaño inferior a 100 μm.
El producto final fue un lisado de cultivo celular, con un contenido elevado de madecasósido respecto a los centellósidos totales en las células de C. asiatica.
El análisis HPLC de lisado de cultivo celular indicó que la cantidad de madecasósido fue del 90 % en peso del peso total de los centellósidos (asiaticósido, ácido asiático y ácido madecásico que representan el 10 % en peso del peso total de los centellósidos).
Las cantidades de centellósidos se determinaron como se indica en el Ejemplo 2 más adelante. Las áreas bajo las curvas (o picos, AUC) de cada centellósido del análisis HPLC se calcularon y correlacionaron con la cantidad de cada compuesto. Por último, el porcentaje en peso de cada centellósido (madecasósido, asiaticósido, ácido madecásico y ácido asiático) en relación con el peso total de centellósidos en el lisado se determinó como:
% = [( a.u.c de un centellósido específico) / (∑ a.u.c de todos los centellósidos) ] x 100
En la FIG. 2, se muestra la cantidad (mg/l) de madecasósido (M) y de asiaticósido (A) obtenida en el cultivo de suspensión celular con jasmonato de metilo (100 μM). Las barras de la izquierda de la figura muestran la cantidad determinada con una (1X) adición (o tratamiento; (T)) de jasmonato de metilo. Las barras de la derecha corresponden a las cantidades de madecasósido (M) y asiaticósido (A) obtenidas con la pauta de inducción descrita anteriormente; es decir, tres adiciones (3X) los días 12, 16 y 22 desde el inicio de la suspensión y determinadas el día 27 desde el inicio de la suspensión. Los datos representados en la FIG. 2 se corresponden con las concentraciones totales de la fracción celular y la fracción del medio líquido del cultivo.
Como se puede ver, con las tres adiciones de jasmonato de metilo la cantidad absoluta de madecasósido fue de 8 a 9 veces mayor que la cantidad de asiaticósido, concretamente 8,5 veces mayor.
Ejemplo 2. Determinación de centellósidos (HPLC).
La cuantificación de los cuatro centellósidos (asiaticósido, madecasósido, ácido asiático y ácido madecásico) se llevó a cabo mediante cromatografía de líquido de alto rendimiento (HPLC).
Para la extracción celular, 1 g del polvo fino (liofilizado) se sonicó primero en metanol:agua (9:1, v/v; 2 × 25 ml) durante 2 horas a temperatura ambiente y se filtró a través de un filtro de 0,45 μm (Waters Millipore). El filtrado se evaporó hasta sequedad. El extracto seco se disolvió en 1 ml de metanol y se filtró a través de un filtro de 0,45 μm (Waters Millipore) y el filtrado transparente se usó para análisis HPLC.
El análisis HPLC-UV se realizó a temperatura ambiente con una columna Spherisorb 5 μm DOS2 4,6x250 mm (Waters, Milford, MA, EE.UU.) usando una elución por gradiente, cieno los eluyentes acetonitrilo (A) y agua con dihidrógenofosfato amónico 10 mM (pH 2,5 con ácido ortofosfórico) (B) de acuerdo con el siguiente perfil: 0–15 min, 80% de A; 15–30 min, 62 % de A; 30–37 min, 30 % de A; 37–40 min, 80 % de A. El caudal fue 1 ml min-1 y el detector se fijó en 214 nm.
Ejemplo 3. Ensayo comparativo en un modelo in vitro
Con el fin de ilustrar los ventajosos efectos del cultivo de células vegetales de la invención, después se divulga un ensayo con composiciones diferentes que comprenden un lisado de cultivos celulares de Centella asiatica de acuerdo con la invención. La capacidad de las composiciones para inducir síntesis de colágeno de este lisado de cultivos celulares se analiza en un cultivo de fibroblastos dérmicos humanos. La Tabla 1 muestra las características de las composiciones analizadas.
10
Tabla 1- Productos analizados
- Materia prima
- Concentración (% en peso)
- PR/52/A
- PR/53/A PR/54/A PR/55/A
- Lisado de cultivo celular de Centella asiatica
- 10,000 5,000 1,000 0
- Extracto de Centella asiatica con un 90 % en peso de madecasósido respecto a todos los centellósidos (de Guangxi Changzhou Natural products Development (China); extracto en polvo de la planta entera desecada)
- 0 0 0 0,500
- Excipientes (disolventes, emolientes, tampones del pH, agentes de gelificación, antioxidantes y agentes conservantes).
- csp 100 *
* “c.s.p” significa “necesario para”.
5 El objetivo de este ensayo era ver el efecto de las formulaciones enumeradas en la Tabla 1. Tres de ellas (PR/52/A; PR/53/A; and PR/54/A) contenían un lisado de cultivo celular de Centella asiatica preparado como se expone en el Ejemplo 1. Contenían una cantidad de madecasósido comprendida del8 % al 95 %, es decir 90 % en peso respecto del peso total de centellósidos, obtenidos tras el tratamiento con el agente de inducción jasmonato de metilo. La otra
10 formulación (PR/55/A) contenía una cantidad de un extracto de Centella asiatica.
La prueba consistió en la evaluación del efecto en la síntesis de colágeno en fibroblastos de dermis humanos tras 24 horas de tratamiento con estas formulaciones, cada una aplicada a diferentes concentraciones no tóxicas (100, 250 y 500 µg/ml) previamente determinadas.
15 El colágeno se determinó con un ensayo colorimétrico usando el agente colorante Sirius Red (Direct red 80), que se une específicamente a una secuencia de triple hélice del colágeno nativo. Como control positivo (Control +) se usó el factor beta transformante de crecimiento (TGF-β). Como control negativo (Control -) se usó medio de cultivo.
20 Las células se cultivaron a 37 ºC durante 24 horas (50 x103 células/cm2). La formulación analizada se preparó y añadió a las células a las tres concentraciones indicadas anteriormente y se incubó a 37 ºC durante 24 horas adicionales. Para cada concentración analizada se realizaron las determinaciones siguientes: a) cuantificación de colágeno, y b) cuantificación de células (tripsina: 0,2 % p/v).
25 Los resultados del ensayo se representan en la FIG. 1, en la que la cantidad de colágeno en términos de µg/106 de fibroblastos humanos se indica en forma de barras para cada concentración (100, 250, y 500 µg/ml) analizada para cada formulación. Cuando se muestran tres barras para una formulación determinada, la barra de la izquierda muestra el resultado a una concentración final en el cultivo de 100 µg/ml; la barra del medio muestra los resultados a 250 µg/ml; y la barra de la derecha muestra los resultados a 500 µg/ml. Las líneas verticales muestran la desviación
30 estándar de los resultados.
El crecimiento celular fue similar en el control negativo y en los cultivos tratados con las formulaciones, de modo que se confirma que las concentraciones analizadas (o dosis seleccionadas) de 100, 250 y 500 µg/ml eran no citotóxicas.
35 Como se puede deducir de esta FIG. 1, la formulación que contiene 10 % en peso del lisado de cultivo celular de Centella asiatica de la invención (PR/52/A) pudo estimular la secreción de colágeno en el medio de cultivo de 100 a 500 µg/ml, siendo máxima a 250 µg/ml. Esto significa 42 % más respecto al control negativo. La estimulación representó, a su vez, el 80 % de la estimulación del control positivo (TGF-β).
40 Por otro lado, la formulación que contiene 5 % en peso del lisado de cultivo celular de Centella asiatica de la invención (PR/53/A) estimuló la secreción de colágeno (síntesis) entre 100 y 500 µg/ml, siendo también máxima a 250 µg/ml. Esto representó un 65 % más respecto al control negativo. La estimulación fue un sobresaliente 127 % en relación con la inducción por el control positivo.
45 La formulación que contiene el 1 % en peso del lisado de cultivo celular de Centella asiatica de la invención (PR/54/A) estimuló la secreción de colágeno (síntesis) entre 100 y 250 µg/ml, siendo también máxima a 250 µg/ml. La cantidad de colágeno secretado representó un incremento del 31 % respecto al control negativo.
11
Claims (1)
-
imagen1
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP12382351.0A EP2708596B1 (en) | 2012-09-14 | 2012-09-14 | Centella genus plant cell cultures, method of production and uses thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2613981T3 true ES2613981T3 (es) | 2017-05-29 |
Family
ID=47010464
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES12382351.0T Active ES2613981T3 (es) | 2012-09-14 | 2012-09-14 | Cultivos de células vegetales del género Centella, procedimiento de producción y usos de los mismos |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP2708596B1 (es) |
| ES (1) | ES2613981T3 (es) |
| PL (1) | PL2708596T3 (es) |
| PT (1) | PT2708596T (es) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2018512440A (ja) | 2015-04-14 | 2018-05-17 | バイチュラス バイオテック，ソシエダ リミタダ | 皮膚細胞に対する若返り活性および／または創傷治癒活性を有する無細胞植物細胞培養懸濁液上清 |
| KR20180088629A (ko) | 2015-07-02 | 2018-08-06 | 메디카고 인코포레이티드 | 자스몬산 경로 활성화제 |
| JP7118425B2 (ja) | 2016-04-11 | 2022-08-16 | バイチュラス バイオテック，ソシエダ リミタダ | 脱毛の予防及び／又は治療のためのペプチド及び医薬組成物、栄養補助組成物、又は獣医学組成物 |
| CN108277197B (zh) * | 2017-01-24 | 2020-03-24 | 桂林莱茵生物科技股份有限公司 | 一种提高罗汉果悬浮细胞中罗汉果甜甙ⅴ含量的方法 |
| US11473117B2 (en) | 2018-07-24 | 2022-10-18 | Rinati Skin, Llc | System and method for the production, formulation and use of conditioned media, cultured cells and the factors included therein |
| US12569537B2 (en) | 2018-07-24 | 2026-03-10 | Rinati Skin, Llc | System and method for the production, formulation and use of conditioned media, cultured cells and the factors included therein |
| CN109879926B (zh) * | 2019-02-27 | 2021-07-23 | 江西省药品检验检测研究院 | 连钱草中的三萜苷类化合物及其提取分离方法 |
| CN114732937B (zh) * | 2022-05-20 | 2022-09-09 | 斯贝福（北京）生物技术有限公司 | 一种用于动物耳软骨支撑材料的敷料及其制备方法和应用 |
| CN118178250A (zh) * | 2024-05-15 | 2024-06-14 | 珠海安和生化科技有限公司 | 一种皮肤剥脱后修复组合物及其应用 |
| CN120060118A (zh) * | 2024-06-26 | 2025-05-30 | 广州青囊生物科技有限公司 | 一种高产羟基积雪草苷的积雪草干细胞制备方法及用途 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100228873B1 (ko) | 1997-03-24 | 1999-11-01 | 강재헌 | 센텔라아시아티카에서 분리한 아시아티코사이드와 마테카소 사이드의 수용성 추출물을 함유한 간세포 및 항간섬유화 치료제 |
-
2012
- 2012-09-14 EP EP12382351.0A patent/EP2708596B1/en active Active
- 2012-09-14 PL PL12382351T patent/PL2708596T3/pl unknown
- 2012-09-14 ES ES12382351.0T patent/ES2613981T3/es active Active
- 2012-09-14 PT PT123823510T patent/PT2708596T/pt unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2708596B1 (en) | 2016-11-09 |
| PT2708596T (pt) | 2017-02-14 |
| PL2708596T3 (pl) | 2017-04-28 |
| EP2708596A1 (en) | 2014-03-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2613981T3 (es) | Cultivos de células vegetales del género Centella, procedimiento de producción y usos de los mismos | |
| JP2010526799A5 (es) | ||
| WO2018184522A1 (zh) | 一种减少紫外线损伤的植物萃取物组合物 | |
| CN107809998A (zh) | 柔毛肖乳香的水醇提取物、包含其的化妆品组合物及其美容用途 | |
| CN101155576A (zh) | 抗皱剂 | |
| KR102066568B1 (ko) | 올리브나무 잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 trpv1 유전자 발현 억제 및 안티폴루션 효과를 가지는 화장료 조성물 | |
| Li et al. | Stimulative activity of Drynaria fortunei (Kunze) J. Sm. extracts and two of its flavonoids on the proliferation of osteoblastic like cells | |
| JP2009298787A (ja) | サバイビン発現の刺激による抗老化美容ケアの方法 | |
| WO2012081370A1 (ja) | エンドセリン作用抑制剤及び美白剤 | |
| KR20120083895A (ko) | 필란투스 니루리의 추출물 | |
| CN105188711A (zh) | 含有人参皂苷rh4的皮肤外用剂组合物 | |
| KR101853338B1 (ko) | 지황, 황기, 당귀 및 황금 추출물을 유효성분으로 포함하는 보습용 화장료 조성물 | |
| JP6200713B2 (ja) | 幹細胞由来成長因子産生促進剤 | |
| ES2614455T3 (es) | Composición que comprende un cultivo de células vegetales del género Centella | |
| KR20170109705A (ko) | 마돈나 백합 식물 세포 배양 방법 및 마돈나 백합 식물 세포 배양 추출물을 함유한 기능성 피부 외용제 조성물 | |
| WO2015078397A1 (zh) | 一种用于紫外损伤修复和促进能量代谢的中草药及其在化妆品中的应用 | |
| JP2007320970A (ja) | 化粧料 | |
| TW201601774A (zh) | 含天然植物萃取物的組成物、含有其的皮膚外用製劑、含有其的化妝品製劑及含有其的藥物製劑 | |
| JP2008266173A (ja) | 育毛促進組成物 | |
| JP7556508B2 (ja) | Ｇｌｕｔ１発現促進剤 | |
| KR20190099754A (ko) | 아토피성 피부염 방지를 위한 화장품 조성물 및 그 제조방법 | |
| KR20180059318A (ko) | 자감초, 향부자 및 강황의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물 | |
| RU2822745C1 (ru) | Способ получения экзосом резуховидки Таля | |
| RU2839436C1 (ru) | Способ получения экзосом табака обыкновенного | |
| CN105287474A (zh) | 茴香酸对羟基苯乙酯的应用 |