ES2621363T3 - Método y dispositivo para disolución rápida de composición de proteína sólida - Google Patents

Abstract

Un método para la disolución de una composición de fibrinógeno sólido en un disolvente acuoso, que comprende: i) proporcionar un recipiente cerrado (12) que contiene: un volumen (14) de la composición de fibrinógeno sólido y un espacio de cabeza (16), en el que la presión dentro del espacio de cabeza es una presión inferior a la atmosférica; ii) mientras que se mantiene la presión interna en el espacio de cabeza a presión sub-atmosférica, introduciendo en el recipiente (12) un volumen del disolvente acuoso que es menor que el volumen de la composición de fibrinógeno sólido para formar una solución que comprende al menos 40 mg de fibrinógeno/ml; iii) posterior a ii), disminuyendo el tamaño del espacio de cabeza (16) en el recipiente (12), sin permitir la entrada de aire en el recipiente hasta que la presión en el espacio superior sea igual a la presión atmosférica; y iv) agitar la solución, en el que el disolvente acuoso está contenido dentro de un depósito (42), en el que el recipiente (12) y el depósito (42) están en comunicación mutua de fluido, y en el que la agitación comprende transferir repetidamente el disolvente acuoso entre el recipiente (12) y el depósito (42).

Description

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Metodo y dispositivo para disolucion rapida de composicion de proteina solida Descripcion

CAMPO DE LA INVENCION

[0001] La invencion se refiere al campo de la preparacion de composiciones farmaceuticas, y mas particularmente, a metodos y dispositivos para la disolucion de composiciones de protemas solidas, tales como composiciones solidas que comprenden fibrinogeno, en un disolvente acuoso.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION

[0002] El fibrinogeno es un componente importante en la preparacion de sellador de fibrina, que se utiliza para prevenir la fuga de fluidos, tales como sangre lfquida por ejemplo, aire y/o los tejidos. El fibrinogeno se convierte en fibrina mediante una reaccion enzimatica que implica trombina y factor XIII.

[0003] El fibrinogeno se puede convertir en una forma solida, por ejemplo por liofilizacion, antes de su almacenamiento, con el fin de reducir la degradacion de protemas. Una preparacion solida de fibrinogeno tiene la ventaja de que puede almacenarse durante un periodo de tiempo relativamente largo a una temperatura de al menos 4°C, tal como a temperatura ambiente, manteniendo al mismo tiempo su actividad biologica. Para uso terapeutico, el fibrinogeno solido se disuelve tfpicamente en un disolvente acuoso antes de su uso. A menudo se requieren soluciones con alta concentracion de fibrinogeno, por ejemplo cuando se usa el fibrinogeno como un componente de selladores de fibrina junto con un componente de trombina, puesto que tfpicamente la resistencia adhesiva es proporcional a la concentracion de fibrinogeno

[0004] El fibrinogeno esta entre las menos solubles de las protemas del plasma (The Preparation and Properties of Human Fibrinogen of Relatively High Solubility*M. W. Mosesson, Sol Sherry Biochemistry, 1966, 5 (9), pp 28292835). Por lo tanto, es diffcil y consume mucho tiempo disolver una preparacion solida de fibrinogeno para obtener una solucion con una alta concentracion de fibrinogeno, por ejemplo, al menos 40 mg de fibrinogeno/ml. El problema se complica aun mas cuando la espuma se forma y desaparece lentamente durante la disolucion de la composicion solida de fibrinogeno La presencia de espuma puede prolongar adicionalmente el tiempo de disolucion y/o afectar negativamente a la funcionalidad del fibrinogeno, y las propiedades mecanicas del sellante de fibrina preparado con la solucion de fibrinogeno.

[0005] Antecedentes de la tecnica incluyen la patente de EE.UU. N° 6.349.850.; 4.650.678; 4.909.251; y 5.96.405; Publicacion de Patente de EE.UU. N° 2004/0005310; y Publicacion de Patente Europea N° EP 2130549A1.

[0006] US 5.122.117 describe una jeringa de mezclado de componente utilizado para mezclar un componente lfquido con un componente solido antes de su uso. La jeringa incluye un barril que tiene un orificio con un embolo en un extremo y una aguja en el otro. Una barrera divide el agujero en una region lejana que contiene un componente lfquido y una region cercana que contiene un componente solido. En uso, el embolo se retira parcialmente de la region cercana para crear un vado parcial. Una via formada a traves de la barrera se abre de este modo para permitir que el lfquido se precipite en la region cercana para crear una accion de mezcla turbulenta relativamente violenta para mezclar eficazmente los dos componentes.

[0007] US 2011/0196342 describe un metodo de fabricacion de una solucion para inyeccion a partir de un disolvente y un ingrediente activo utilizando un inyector desechable que incluye una primera unidad de cilindro y piston y una segunda unidad de cilindro-piston. Un disolvente se almacena en la primera unidad cilindro-piston. En la segunda unidad cilindro-piston hay un ingrediente farmaceutico activo liofilizado. Inmediatamente antes del uso del inyector desechable, el disolvente es transportado a la segunda unidad cilindro-piston y al ingrediente farmaceutico activo, donde se forma una solucion.

[0008] US 3.405.712 describe una jeringa que comprende una carcasa para contener un componente de una carga y un embolo que comprende un segundo componente de la carga, en el que la carcasa y el embolo son operables para proporcionar una condicion de mezcla en el que los componentes se mezclan juntos dentro de la caja.

[0009] US 3.052.240 describe una jeringa hipodermica desechable que incluye camaras adaptadas para recibir por separado un medicamento seco y un disolvente para el mismo, en el que las camaras estan provistas de medios para mezclar el disolvente y el medicamento en el momento de uso.

[0010] Hay una necesidad no satisfecha de un metodo y un dispositivo que permite una rapida disolucion de fibrinogeno solido para formar una solucion de fibrinogeno altamente concentrado sin la adicion de excipientes para aumentar la solubilidad del fibrinogeno

RESUMEN DE LA INVENCION

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[0011] En el presente documento se proporcionan metodos y dispositivos para la disolucion de composiciones de protemas solidas, tales como composiciones de fibrinogeno solido, en un disolvente acuoso.

[0012] Los presentes inventores han encontrado que la disolucion de una composicion de fibrinogeno solido, tal como una "torta" liofilizada que tiene una densidad baja en protemas, en un disolvente acuoso, dio lugar a un mayor nivel de disolucion y una disolucion mas rapida, en comparacion con el uso de una densidad alta en protemas "torta". Se encontro ademas que la adicion del disolvente acuoso a la composicion solida a presion subatmosferica, seguida de un balance a presion atmosferica sin permitir la entrada de aire al recipiente en el que se llevo a cabo la solubilizacion durante el proceso de solubilizacion, minimizo o evito la presencia de la espuma.

[0013] Tal como se utiliza aqrn, el termino "composicion solida" se refiere a una composicion que tiene un contenido de agua igual a o menor que aproximadamente 5% (en peso) en agua tal como igual a o menor que 3%, basado en el peso total de la composicion solida.

[0014] Aspectos y realizaciones de la invencion se describen en la memoria descriptiva a continuacion y en las reivindicaciones adjuntas.

[0015] Segun un aspecto de algunas realizaciones de la invencion, se proporciona un metodo para disolver una composicion de fibrinogeno solido en un disolvente acuoso, que comprende las etapas de proporcionar un recipiente cerrado (12) que contiene un volumen de la composicion de fibrinogeno solido y un espacio de cabeza, en el que la presion dentro del espacio de cabeza es una presion subatmosferica; mientras se mantiene la presion interna en el espacio de cabeza a presion sub-atmosferica, introduciendo en el recipiente un volumen de un disolvente acuoso que es menor que el volumen de la composicion de fibrinogeno solido, para formar una solucion que comprende al menos 40 mg de fibrinogeno/ml; y disminuyendo posteriormente el tamano del espacio de cabeza en el recipiente hasta que la presion en el espacio de cabeza sea igual a la presion atmosferica.

[0016] En algunas realizaciones, el metodo comprende ademas la agitacion del recipiente.

[0017] El metodo descrito en la presente proporciona una solucion que comprende una concentracion elevada de fibrinogeno de al menos 40 mg fibrinogeno/ml dentro de igual o inferior a 90 segundos. En algunas realizaciones, la solucion se obtiene en aproximadamente 90, 85, 80, 75, 70, 75, 70, 65, 60, 55, 50, 45, 40 o 30 segundos. En una realizacion, se obtiene una solucion concentrada de fibrinogeno dentro de un intervalo de tiempo de aproximadamente 45 a aproximadamente 90 segundos.

[0018] Las composiciones solidas descritas en este documento comprenden una protema, tal como el fibrinogeno, en un estado solido. En algunas realizaciones, las composiciones de fibrinogeno solido descritas aqrn comprenden fibrinogeno como el ingrediente principal, pero pueden incluir ademas otros ingredientes, por ejemplo, otras protemas. El fibrinogeno en la composicion puede derivarse de la sangre o recombinante. Ejemplos de protemas distintas del fibrinogeno presentes en la composicion incluyen, pero no se limitan a, fibronectina, factor VIII, factor de von Willebrand y factor XIII. En una realizacion de la invencion, la composicion se deriva de un crioprecipitado. En una realizacion de la invencion, el plasminogeno se retira espedficamente del crioprecipitado con el fin de retrasar o detener la fibrinolisis (como se describe en las Patentes de EE.UU. N°s 5.792.835 y 7.l25.569).

[0019] En algunas realizaciones, la composicion de fibrinogeno comprende fibrinogeno humano (tambien referido aqrn como CAB, componente activo biologico). CAB puede ser un crioprecipitado inactivado vmco concentrado de plasma humano, preparado como se describe en la Patente Europea N° 534.178), que consiste principalmente en fibrinogeno (aproximadamente 85%). La composicion puede estar exenta de plasminogeno, como en la patente EP 1.390.485, en cuyo caso no se pueden incluir agentes anti-fibrinoltticos. En una realizacion de la invencion, el CAB se proporciona como una "torta" liofilizada solida .

[0020] El termino "crioprecipitado" se refiere a un componente derivado de la sangre que se obtiene de plasma congelado preparado a partir de sangre entera, plasma recuperado o de plasma de fuente que se recoge por plasmaferesis. Se puede obtener un crioprecipitado cuando el plasma congelado se descongela en frio, tfpicamente a una temperatura de 0-4°C, dando como resultado la formacion de un precipitado que contiene fibrinogeno y factor XIII. El precipitado puede recogerse, por ejemplo, por centrifugacion.

[0021] Los ejemplos no limitantes de formas de composiciones solidas que se pueden disolver utilizando los metodos y dispositivos descritos en el presente documento incluyen, pero no se limitan a, "tortas" liofilizadas, partmulas solidas, la dispersion de partmulas, polvo y copos. Se pueden producir composiciones solidas que tienen diferentes densidades de protema.

[0022] En algunas realizaciones, la composicion de fibrinogeno solido es una torta liofilizada. La densidad de fibrinogeno dentro de la "torta" liofilizada puede reducirse a aproximadamente 5 mg/cc mientras se mantiene la estabilidad del liofilizado sin ningun colapso de la "torta" (Parker et. al. "Determination of the influence of primary drying rates on the microscale structural attributes and physicochemical properties of protein containing lyophilized products J Pharm Sci. 2010; 99:4616-4629). Tfpicamente, una "torta" solida de al menos 5 mg de fibrinogeno/cc puede apoyar sustancialmente su propia estructura sin colapsar.

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[0023] En algunas realizaciones, la densidad de fibrinogeno en la composicion de fibrinogeno solido esta en el intervalo de aproximadamente 5 a inferior a aproximadamente 63 mg/cc, tal como igual a o menor que aproximadamente 6, 7, 8, 9, 10, 11 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36. 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61 o 62 mg/cc En una realizacion, la composicion de fibrinogeno solido tiene una densidad de fibrina de no mas de aproximadamente 23 mg/cc.

[0024] El solido, tal como una "torta” liofilizada, se puede preparar a partir de una solucion que contiene fibrinogeno que tiene una concentracion de fibrinogeno en el intervalo de aproximadamente 5 a inferior a aproximadamente 63 mg/ml, tal como igual a o menor que 6, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 57, 58, 59, 60, 61 y 62 mg/ml. Tfpicamente, el volumen de la "torta" resultante es igual al volumen de la solucion que contiene fibrinogeno usado para preparar la "torta".

[0025] En algunas realizaciones, la composicion de fibrinogeno solido se obtiene a partir de una solucion madre de CAB, tal como una solucion madre de CAB (por ejemplo, el componente de fibrinogeno en EVICELTM) que tiene una concentracion de fibrinogeno de aproximadamente 63 mg/ml. En algunas realizaciones, el fibrinogeno solido se obtiene por liofilizacion de la solucion madre de CAB.

[0026] En algunas realizaciones, la alta concentracion de fibrinogeno en la solucion obtenida mediante la disolucion de la composicion de fibrinogeno solido en el disolvente acuoso esta en el intervalo de aproximadamente 40 a aproximadamente 120 mg de fibrinogeno/ml, tal como, por ejemplo, alrededor de 40, 41, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115 o 120 mg de fibrinogeno/ml. En una realizacion, se obtiene una solucion concentrada de fibrinogeno que comprende fibrinogeno a una concentracion en el intervalo de aproximadamente 63 a aproximadamente 70 mg/ml. El fibrinogeno esta sustancialmente completamente disuelto.

[0027] En algunas realizaciones, el disolvente acuoso es agua para inyeccion, sustancialmente desprovisto de excipientes. En algunas realizaciones, el disolvente acuoso se desgasifica antes de su introduccion en el recipiente que comprende la composicion solida.

[0028] Con el fin de disolver la "torta" en el disolvente acuoso, una dispersion solida puede opcionalmente prepararse por aplastamiento de tipo mecanico de la "torta". La dispersion se puede introducir opcionalmente en un dispositivo de molienda para producir polvo fino como se describe en el documento WO08/053475.

[0029] El disolvente acuoso comprende agua (en algunas realizaciones, al menos el 50% de agua en volumen) y en algunas realizaciones puede comprender opcionalmente ingredientes adicionales tales como agentes tamponantes y/u otros excipientes, tales como excipientes farmaceuticamente aceptables (incluyendo, por ejemplo, uno o mas seleccionados del grupo que consiste en hidrocloruro de arginina, glicina, cloruro de sodio, citrato de sodio y cloruro de calcio). El agua puede ser, por ejemplo, BWFI (agua racteriostetica para inyeccion), SWFI (agua esteril para inyeccion) y similares.

[0030] El nivel de disolucion de protema en la solucion formada por disolucion de la composicion de fibrinogeno solido en un disolvente acuoso se puede medir como se describe a continuacion en la seccion Materiales y Metodos en "Las mediciones de nivel de disolucion de protema". La presencia de espuma puede inspeccionarse visualmente.

[0031] En algunas realizaciones, la presion interna en el espacio de cabeza es inicialmente inferior a aproximadamente 500 mbar, tal como, por ejemplo, igual a o menor que aproximadamente 500, 450, 400, 350, 300, 250, 200, 150, 100, 50, 25, 20, 15, 10, 5, 1, 0,5 o 0,12 mbar. En una realizacion, la presion interna en el espacio de cabeza no es mas de aproximadamente 0,12 mbar.

[0032] En algunas realizaciones, la presion interna dentro del recipiente cerrado se lleva a una presion sub- atmosferica deseada en un dispositivo de liofilizacion programable mediante la programacion del dispositivo para alcanzar la presion interna deseada, y cerrar el recipiente cuando se alcanza la presion deseada.

[0033] En algunas realizaciones, la presion interna dentro del recipiente cerrado se lleva a una presion sub- atmosferica deseada mediante la retirada de aire desde el recipiente cerrado, por ejemplo, mediante el uso de una bomba de vacm. En algunas realizaciones, con el fin de monitorizar y/o ajustar la presion dentro del recipiente, se utiliza un manometro electronico de vacfo o manometro electronico.

[0034] En una realizacion, una composicion de fibrinogeno solido que tiene una densidad de fibrinogeno de aproximadamente 21 mg/cc se disuelve en disolvente, en el que la presion en el espacio de cabeza es aproximadamente 0,12 mbar.

[0035] En algunas realizaciones, el recipiente comprende al menos dos porciones distintas en comunicacion de fluido mutua, una primera porcion que contiene el disolvente acuoso, y una segunda parte que contiene la

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composicion de fibrinogeno solido, en el que el disolvente acuoso se introduce desde la primera porcion distinta a la segunda parte distinta del recipiente.

[0036] En algunas realizaciones, el disolvente acuoso esta contenido dentro de un deposito, en el que el recipiente y el deposito estan en comunicacion mutua de fluido, y en el que la agitacion comprende la transferencia repetida del disolvente acuoso entre el recipiente y el deposito.

[0037] En algunas realizaciones, la agitacion comprende la agitacion manual del recipiente. En alguna de estas realizaciones, se introduce al interior del envase al menos una esfera de un material solido inerte, que tiene una densidad mayor que la de la solucion (tal como un metal, por ejemplo acero inoxidable), antes de agitarse manualmente. En algunas realizaciones, la esfera comprende un cordon que tiene diametros en el intervalo de aproximadamente 3 a aproximadamente 7 mm.

[0038] En algunas realizaciones, un intervalo de tiempo de al menos 5 segundos (tal como, por ejemplo, al menos 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 o 20 segundos), se deja transcurrir entre la terminacion de la introduccion del disolvente en el recipiente y el comienzo de la disminucion del volumen del espacio de cabeza. En algunas realizaciones, el intervalo de tiempo es de al menos aproximadamente 20 segundos.

[0039] En algunas realizaciones, despues de disminuir el volumen del espacio de cabeza, se incuba la solucion en el recipiente (es decir, se deja reposar antes de su uso), por ejemplo para un penodo de tiempo de no mas de aproximadamente 2 minutos.

[0040] Los metodos descritos en este documento pueden llevarse a cabo utilizando cualquier dispositivo o recipientes adecuados incluyendo, pero no limitados a, botellas, recipientes de liofilizacion, barriles, frascos, y jeringas conocidas en la tecnica. En algunas realizaciones, los metodos se llevan a cabo utilizando los dispositivos descritos a continuacion.

[0041] Segun un aspecto de algunas realizaciones de la invencion, se proporciona un dispositivo, de acuerdo con las caractensticas de la reivindicacion 9, adecuadas para la disolucion de una composicion solida en un disolvente acuoso, comprendiendo el dispositivo un primer recipiente cerrado adecuado para mantener una primera composicion solida, incluyendo el primer recipiente cerrado una primera entrada de recipiente cerrado que tiene un estado cerrado y un estado abierto, en el que en el estado cerrado la primera entrada de recipiente cerrada esta sellada al paso de fluido y en estado abierto el primer recipiente cerrado proporciona una trayectoria para la comunicacion de fluido en el primer recipiente cerrado. El dispositivo comprende ademas un primer elemento de sellado movil dispuesto dentro del primer recipiente cerrado para sellar el primer recipiente cerrado y configurado para mantener el sellado del primer recipiente cerrado mientras se mueve dentro de el entre al menos una primera y una segunda posicion dentro del primer recipiente cerrado, para disminuir el volumen interno del primer recipiente cerrado. El dispositivo comprende ademas un elemento de retencion configurado para sujetar de forma liberable el primer elemento de junta movil en una primera posicion dentro del primer recipiente cerrado y un primer controlador para controlar el cambio de la primera entrada de recipiente cerrado entre un estado cerrado y un estado abierto.

[0042] Cuando la primera entrada de contenedor cerrado esta en un estado cerrado mientras que el primer elemento de sellado movil esta en la segunda posicion, y, posteriormente, el primer elemento de cierre movil se mueve a la primera posicion y el primer elemento de retencion sostiene el primer elemento de cierre movil, se forma un espacio de cabeza que tiene una presion subatmosferica. Alternativamente, el dispositivo esta provisto del recipiente cerrado que contiene ademas un espacio de cabeza con una presion subatmosferica; una entrada del recipiente cerrado; y sujetando el elemento de sujecion el primer elemento de obturacion movil en la primera posicion.

[0043] En algunas realizaciones, el dispositivo comprende ademas un primer deposito adecuado para contener un primer disolvente acuoso; y un segundo elemento de obturacion movil dispuesto dentro del primer deposito configurado para mantener el sellado del primer deposito, comprendiendo el primer deposito una primera salida de deposito adaptada para estar en comunicacion de fluido (directa o indirectamente) con la primera entrada de recipiente cerrada.

[0044] En algunas realizaciones, el primer recipiente cerrado es un primer barril de jeringa que tiene un extremo delantero y un extremo trasero, donde el extremo delantero comprende la primera entrada de recipiente cerrado, y en el que el primer elemento de sellado movil comprende un primer piston dispuesto dentro del primer barril de jeringa desplazable de modo deslizante desde el extremo trasero hacia el extremo delantero del primer cuerpo de jeringa y conectado a un primer vastago de piston.

[0045] En algunas realizaciones, el primer deposito comprende un segundo barril de jeringa que tiene un extremo delantero y un extremo trasero, donde el extremo delantero comprende la primera salida del deposito, y el segundo elemento de sellado movil comprende un segundo piston dispuesto dentro del segundo barril de jeringa desplazable deslizante desde el extremo trasero hacia el extremo delantero del segundo cuerpo de jeringa y conectado a un segundo vastago de piston.

[0046] En algunas formas de realizacion, en las que cuando la entrada esta en una posicion abierta y en la que

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cuando el elemento de retencion libera el primer cierre movil, el primer cierre movil se mueve desde una primera a una segunda posicion dentro del primer recipiente cerrado, disminuyendo asf el volumen interno del primer recipiente cerrado, en el que se incrementa la presion interna dentro del primer recipiente cerrado.

[0047] En algunas realizaciones, el dispositivo comprende ademas un segundo recipiente cerrado adecuado para la sujecion de una segunda composicion solida, incluyendo el segundo recipiente cerrado una segunda entrada de recipiente cerrado que tiene un estado cerrado y un estado abierto, en el que en el estado cerrado el segundo contenedor cerrado esta sellado al paso de fluido y en el estado abierto la segunda entrada de recipiente cerrada proporciona un camino para la comunicacion de fluido dentro del segundo recipiente cerrado. En tales realizaciones, el dispositivo comprende ademas un tercer elemento de sellado movil dispuesto dentro del segundo recipiente cerrado, para sellar el segundo recipiente cerrado y configurado para mantener el sellado del segundo recipiente cerrado mientras se mueve dentro de el entre al menos una primera y una segunda posicion dentro del segundo recipiente cerrado, para disminuir el volumen interno del segundo recipiente cerrado. En dichas realizaciones, el dispositivo comprende ademas un elemento de retencion configurado para sujetar de forma liberable el tercer elemento de sellado movil en una primera posicion dentro del segundo contenedor cerrado y un segundo controlador para controlar el cambio de la segunda entrada de contenedor cerrado entre un estado cerrado y un estado abierto. Opcionalmente, un unico elemento de retencion puede sujetar de forma liberable tanto el primer como el tercer elemento de sellado moviles en una primera posicion. Alternativamente, el dispositivo puede comprender ademas un segundo elemento de retencion para sujetar el tercer elemento de sellado movil. El dispositivo esta provisto del segundo contenedor cerrado que contiene ademas un espacio de cabeza con una presion subatmosferica; una entrada de recipiente cerrado; y el elemento de retencion que sostiene el tercer elemento de obturacion movil en la primera posicion o cuando la segunda entrada de contenedor cerrado esta en un estado cerrado mientras que el tercer elemento de obturacion movil esta en la segunda posicion y posteriormente el tercer elemento de obturacion movil se mueve a la primera posicion y el elemento de sujecion sostiene el tercer elemento de sellado movil, formandose un espacio de cabeza que tiene una presion subatmosferica.

[0048] En algunas realizaciones, el dispositivo comprende ademas un segundo deposito adecuado para contener un segundo disolvente acuoso y un cuarto elemento de sellado movible dispuesto dentro del segundo deposito configurado para mantener el sellado del segundo deposito, el segundo deposito que comprende una segunda salida de fluido adaptado para estar en comunicacion de fluido con la segunda entrada de recipiente cerrado.

[0049] En algunas realizaciones, el primer recipiente cerrado es un primer barril de jeringa que tiene un extremo frontal y un extremo posterior, en el que el extremo frontal del primer barril de jeringa comprende la primera entrada de recipiente cerrado y en el que el primer elemento de sello movil del primer recipiente cerrado comprende un primer piston dispuesto dentro del primer cuerpo de jeringa desplazable desde el extremo posterior hacia el extremo delantero del primer cuerpo de jeringa y conectado a un primer vastago de piston. En dichas realizaciones, el primer deposito comprende un segundo barril de jeringa que tiene un extremo delantero y un extremo trasero, en el que el extremo delantero del segundo barril de jeringa comprende la primera salida de deposito y en el que el segundo elemento de sellado movil comprende un segundo piston dispuesto dentro del segundo barril de jeringa que se desplaza deslizantemente desde el extremo trasero hacia el extremo delantero del segundo cuerpo de jeringa y conectado a un segundo vastago de piston. En dichas realizaciones, el segundo recipiente cerrado es un tercer barril de jeringa que tiene un extremo delantero y un extremo posterior, en el que el extremo delantero del tercer barril de jeringa comprende la segunda entrada de recipiente cerrado y en el que el tercer elemento de sellado movil comprende un tercer piston dispuesto dentro del tercer barril de jeringa que se desplaza deslizantemente desde el extremo trasero hacia el extremo delantero del tercer cuerpo de jeringa y conectado a un tercer vastago de piston. En dichas realizaciones, el segundo deposito comprende un cuarto barril de jeringa que tiene un extremo delantero y un extremo trasero, en el que el extremo delantero del cuarto barril de jeringa comprende la segunda salida de deposito y en el que el cuarto elemento de sellado movil comprende un cuarto piston dispuesto dentro del cuarto barril de jeringa que se desplaza deslizantemente desde el extremo trasero hacia el extremo delantero del cuarto barril de jeringa y conectado a un cuarto vastago de piston.

[0050] En algunas realizaciones, el dispositivo comprende ademas una carcasa para contener el primer y segundo recipiente cerrado y/o el primer y el segundo deposito en el mismo.

[0051] En algunas realizaciones, el dispositivo comprende ademas una primera carcasa para contener el primer y segundo recipiente cerrado y/o una segunda carcasa para contener el primer y el segundo deposito en el mismo.

[0052] En algunas realizaciones, la primera composicion solida comprende fibrinogeno solido.

[0053] En algunas realizaciones, la segunda composicion solida comprende trombina solida.

[0054] En algunas realizaciones, el primer piston esta unido a un vastago de piston que comprende al menos un rebaje, y el elemento de sujecion comprende por lo menos una protrusion/protuberancia configurada para acoplarse dentro del rebaje.

[0055] En algunas realizaciones, el dispositivo comprende ademas un accionador controlador que cuando se

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acciona, hace que el primer controlador y/o el segundo controlador se mueva desde el estado cerrado al estado abierto.

[0056] Los metodos y dispositivos descritos en este documento, en al menos algunas realizaciones, habilitan una composicion de fibrinogeno solido para que sea sustancialmente disuelta completamente dentro de un corto penodo de tiempo (por ejemplo, dentro de los 90 segundos o menos) en un disolvente acuoso, para obtener una solucion de fibrina altamente concentrada (por ejemplo, con una concentracion de fibrina de al menos 40 mg/ml). En algunas realizaciones, el metodo permite preparar la solucion de fibrinogeno en, o cerca de, el tiempo de administracion a un sujeto, por ejemplo, dentro de los 90 segundos o menos antes de la administracion al sujeto.

[0057] En al menos algunas realizaciones, la presencia de espuma en la solucion de fibrinogeno producida de acuerdo con los metodos y dispositivos descritos en este documento es minima o insignificante. En algunas realizaciones, la solucion de fibrinogeno esta sustancialmente desprovista de espuma.

[0058] En al menos algunas realizaciones, el metodo no requiere la adicion de excipientes para aumentar la solubilidad del fibrinogeno.

[0059] En al menos algunas realizaciones, el metodo no incluye una etapa de calentamiento, por ejemplo calentamiento por encima de la temperatura ambiente.

[0060] En al menos algunas realizaciones, no se admite aire en un recipiente en el que se lleva a cabo la solubilizacion.

[0061] A menos que se defina lo contrario, todos los terminos tecnicos y cientfficos usados en este documento tienen el mismo significado que comunmente se entiende por un experto en la tecnica al que pertenece la invencion. Ademas, las descripciones, materiales, metodos y ejemplos son solo ilustrativos y no pretenden ser limitativos. Pueden usarse metodos y materiales similares o equivalentes a los descritos aqrn en las practicas de la presente invencion.

[0062] Tal como se utiliza aqrn, el termino "solucion" se refiere a una mezcla homogenea que comprende al menos una sustancia (soluta) parcial o sustancialmente disuelta por completo en un disolvente lfquido. Por "sustancialmente completamente disuelto" se quiere decir que el soluto esta disuelto al menos en un 89% en el disolvente.

[0063] Tal como se utiliza aqrn, el termino "disolver" se refiere a la incorporacion de una sustancia, tal como un solido, en un disolvente lfquido para obtener una solucion. Como se usan aqrn, los terminos "disolver", "solubilizar" y "reconstituir" pueden ser intercambiables.

[0064] Tal como se utiliza aqrn, el termino "presion atmosferica" se refiere a la fuerza por unidad de area ejercida sobre una superficie por el peso del aire por encima de esa superficie en un lugar determinado. La presion atmosferica estandar del nivel del mar es 1 atmosfera, o 1000 mbar.

[0065] Tal como se utiliza aqrn, el termino "espacio de cabeza" se refiere a un volumen gaseoso por encima de un lfquido o solido en un recipiente cerrado, junto con el volumen de gas dentro del solido.

[0066] Tal como se utiliza aqrn, el termino "controlador" se refiere a un componente que regula la direccion y/o flujo de un ejemplo, de lfquido a traves de un pasaje o un tubo, proporcionando una entrada abierta para el flujo del lfquido. El controlador puede ser una valvula, una llave de paso o similar. Alternativamente, el controlador puede comprender un elemento de perforacion, tal como una aguja, para perforar una cubierta, por ejemplo una tapa o pared de goma del recipiente cerrado, proporcionando por lo tanto una entrada abierta.

[0067] Tal como se utiliza aqrn, el termino "liofilizacion" se refiere al proceso de congelacion de una solucion y despues la reduccion de la concentracion de agua por ejemplo, por sublimacion a niveles que no son compatibles con las reacciones biologicas o qmmicas. Tal como se utiliza en la presente memoria, el termino "torta" o "torta solida" se refiere a una composicion en forma de estructura porosa y esponjosa resultante del proceso de liofilizacion. Se observa que una "torta solida" de al menos 5 mg/cc puede soportar sustancialmente su propia estructura sin colapsarse. Tal como se utiliza en la presente memoria, el termino "colapso" con respecto a una torta se refiere al punto en el que la torta ya no puede soportar su propia estructura.

[0068] Tal como se utiliza aqrn, el termino "excipiente" se refiere a una sustancia sustancialmente inerte que se incluye en una composicion farmaceutica. Los excipientes se pueden anadir, por ejemplo, para asegurar que las sustancias activas de la composicion conservan su estabilidad qmmica y/o actividad biologica durante el almacenamiento, para ayudar al proceso de fabricacion y/o por razones esteticas, por ejemplo, color.

[0069] Tal como se utiliza aqrn, el termino "composicion farmaceutica" se refiere a una sustancia o mezcla de sustancias para la administracion a un sujeto.

[0070] Como se usa en este documento, los terminos "que comprende", "que incluye", "que tiene" y las variantes

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gramaticales de la misma deben entenderse en el sentido de especificar las caracteiisticas, numeros enteros, etapas o componentes, pero no excluyen la adicion de uno o mas caractensticas, numeros enteros, pasos, componentes o grupos adicional de los mismos. Estos terminos abarcan los terminos "consistente en" y "consistente esencialmente en".

[0071] Tal como se usa en este documento, los artfculos indefinidos "un" y "una" significa "al menos uno" o "uno o mas" a menos que el contexto dicte claramente lo contrario.

[0072] En algunas realizaciones, los metodos y dispositivos descritos en este documento opcionalmente proporcionan al menos una de las siguientes ventajas: permitir que un usuario (tal como un cirujano u otro profesional medico) para disolver rapidamente composiciones farmaceuticas solidas, incluyendo composiciones solidas para la preparacion de un sellador; permitir la formacion de una solucion que tenga una o cantidades insignificantes de espuma; permitir el uso de tortas liofilizadas altamente porosas y/o fragiles como la composicion solida; permitir la formacion rapida de una solucion de fibrinogeno altamente concentrada a partir de una composicion solida de fibrinogeno; y permiten el almacenamiento, la dilucion y el uso de composiciones solidas concentradas. En algunas realizaciones, los metodos y dispositivos descritos aqrn son particularmente utiles para almacenar y disolver rapidamente el fibrinogeno y aplicar la solucion resultante a un paciente.

BREVE DESCRIPCION DEL DIBUJO

[0073] Algunas realizaciones de la invencion se describen aqrn con referencia a las figuras adjuntas. La descripcion, junto con las figuras, pone de manifiesto para una persona con conocimientos ordinarios en la tecnica como se pueden practicar algunas realizaciones de la invencion. Las figuras son para el proposito de la discusion ilustrativa y no se intenta mostrar detalles estructurales de una realizacion con mas detalle que lo que sea necesario para una comprension fundamental de la invencion. En aras de la claridad, algunos objetos representados en las figuras no son a escala.

[0074] En las figuras:

Fig. 1A es una representacion esquematica de un dispositivo segun las ensenanzas descritas en la presente memoria, comprendiendo el dispositivo un recipiente para contener una composicion solida, con una entrada, un primer elemento de sellado movil dispuesto dentro del recipiente y un elemento de sujecion que sujeta de forma liberable el primer elemento movil sellado en un estado inicial;

Fig. 1B es una representacion esquematica del dispositivo de la Fig. 1A en un estado en el que la entrada se cambia desde el estado cerrado inicial a un estado abierto;

Fig. 1C es una representacion esquematica del dispositivo de la Fig. 1B, en el que el elemento de sellado movil se ha movido desde una posicion inicial a una segunda posicion.

Fig. 2 ilustra una vista lateral en seccion transversal de un dispositivo de acuerdo con algunas realizaciones de la presente invencion, el dispositivo comprende un recipiente para contener una composicion solida, con una entrada, un primer elemento de sellado movil dispuesto dentro del recipiente, un elemento de sujecion que sujeta de forma liberable el primer elemento de cierre movil, un primer controlador, un deposito para contener un disolvente, con una abertura de salida y un segundo elemento de sellado movil dispuesto dentro del deposito.

Fig. 3 ilustra una vista superior de un dispositivo de acuerdo con algunas realizaciones de la presente invencion. El dispositivo comprende una unidad que contiene solido y una unidad que contiene disolvente.

Fig. 4 ilustra una vista en perspectiva de las dos unidades de la Fig. 3 desconectadas una de otra.

Fig. 5 ilustra una vista despiezada de la unidad que contiene disolvente del dispositivo de la Fig. 3.

Fig. 6A ilustra una vista en perspectiva de la unidad que contiene solido de la Fig. 3.

Fig. 6B ilustra una vista despiezada de la unidad que contiene solido de la Fig. 3, que incluye una realizacion de

un elemento de sujecion.

Fig. 7A ilustra una vista en perspectiva y ampliada del elemento de sujecion de la Fig. 6B.

Fig. 7B ilustra una vista en perspectiva de los vastagos de piston de las jeringas de la unidad que contiene solido

de la Fig. 3.

Figs. 8A y B ilustran una vista en perspectiva lateral del elemento de sujecion de la Fig. 6B situado en una carcasa de sujecion de la unidad que contiene solido.

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Fig. 9A ilustra una vista en perspectiva superior del elemento de sujecion de la Fig. 6B, situado en la carcasa de sujecion de la unidad que contiene solido, en el que el elemento de sujecion esta en una posicion inicial.

Fig. 9B ilustra una vista en perspectiva inferior del elemento de sujecion de la Fig. 6B, situado en la carcasa de sujecion de la unidad que contiene solido, en el que el elemento de sujecion esta en la misma posicion inicial como en la Fig. 9A.

Fig. 9C ilustra una vista en perspectiva inferior del elemento de sujecion de la Fig. 6B, situado en la carcasa de sujecion de la unidad que contiene solido, en el que el elemento de sujecion esta en una segunda posicion.

Fig. 10 ilustra una vista lateral de una realizacion de un controlador.

Figs. 11A-C ilustran una realizacion de un dispositivo como se describe aqrn en una posicion inicial. Fig. 11A muestra una vista superior; Fig. 11B muestra una vista lateral en seccion transversal; y la Fig. 11C muestra una vista ampliada de la zona que comprende el controlador de la Fig. 11B.

Figs. 12A-C ilustran una realizacion del dispositivo como se describe aqrn en una primera etapa de funcionamiento de acuerdo con algunas realizaciones de la presente invencion. Fig. 12A muestra una vista superior; Fig. 12B- muestra una vista lateral en seccion transversal; y la Fig. 12C muestra una vista ampliada de la zona que comprende el controlador de la Fig. 12B.

Fig. 13 ilustra la unidad que contiene disolvente conectada a un sistema de conector de fluido a traves del cual composiciones disueltas pueden entregarse.

Fig. 14A ilustra un elemento espaciador configurado para posicionarse sobre un vastago de piston de acuerdo con algunas realizaciones de la presente invencion.

Fig. 14B ilustra el espaciador mostrado en la Fig. 14A colocado sobre el vastago del embolo de la jeringa de la unidad que contiene solido.

DESCRIPCION DE ALGUNAS REALIZACIONES DE LA INVENCION

[0075] Se describen aqrn metodos y dispositivos para la disolucion de composiciones solidas que comprenden fibrinogeno.

[0076] De acuerdo con un aspecto de algunas formas de realizacion, se proporciona un metodo para disolver una composicion de solido de fibrinogeno en un disolvente acuoso, que comprende la proporcion de un recipiente cerrado que contiene un volumen de la composicion de fibrinogeno solido y un espacio de cabeza, en el que la presion dentro del espacio de cabeza es una presion inferior a la atmosferica; mientras que se mantiene la presion interna en el espacio de cabeza a presion sub-atmosfera, se introduce en el recipiente un volumen de un disolvente acuoso, que es menor que el volumen de la composicion de fibrinogeno solido para formar una solucion que comprende al menos 40 mg de fibrinogeno/ml; y, posteriormente, se disminuye el tamano del espacio de cabeza en el recipiente hasta que la presion en el espacio superior sea igual a la presion atmosferica. En algunas realizaciones, el metodo comprende ademas la agitacion del recipiente. En algunas realizaciones, el metodo comprende la agitacion de la solucion parcialmente disuelta formada tras la adicion del disolvente a la composicion solida. En algunas realizaciones, la disolucion se produce dentro de no mas de 90 segundos.

[0077] De acuerdo con un aspecto de algunas formas de realizacion, se proporciona un dispositivo adecuado para la

disolucion de una composicion solida en un disolvente acuoso. El dispositivo comprende un primer recipiente cerrado adecuado para la celebracion de una primera composicion solida, el primer recipiente cerrado incluye una primera entrada de recipiente cerrado que tiene un estado cerrado y un estado abierto, en el que en el estado

cerrado de la primera entrada de contenedor cerrado esta sellada al paso de fluido y en el estado abierto la primera

entrada de recipiente cerrado proporciona una trayectoria para la comunicacion de fluido en el primer recipiente cerrado. El dispositivo comprende ademas un primer elemento de cierre movil dispuesto dentro del primer recipiente cerrado, para sellar el primer recipiente cerrado y configurado para mantener de sellado del primer recipiente

cerrado mientras se mueva en el mismo entre al menos una primera y una segunda posicion dentro del primer

recipiente cerrado, para disminuir el volumen interno del primer recipiente cerrado. La primera posicion es tal que el espacio de cabeza dentro del recipiente tiene una presion sub-atmosferica, y la segunda posicion es tal que el espacio de cabeza tiene una presion igual a la presion atmosferica. El dispositivo comprende ademas un primer elemento de sujecion configurado para mantener de manera liberable el primer elemento de cierre movil en una primera posicion dentro del primer recipiente cerrado. El dispositivo comprende ademas un primer controlador para controlar el cambio de la primera entrada de contenedor cerrado entre un estado cerrado y un estado abierto.

[0078] Cuando la primera entrada de recipiente cerrado esta en un estado cerrado y el primer elemento de cierre movil se encuentra en una primera posicion, la presion del primer recipiente cerrado es sub-atmosferica. Alternativamente, cuando la primera entrada de recipiente cerrado esta en un estado cerrado mientras que el primer

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elemento de sellado movil esta en la segunda posicion, y, posteriormente, el primer elemento de cierre movil se mueve a la primera posicion y el primer elemento de retencion sostiene el primer elemento de cierre movil, se forma un espacio de cabeza que tiene una presion sub-atmosferica.

[0079] Los principios, usos y puestas en practica de las ensenanzas en el presente documento pueden entenderse mejor con referencia a la descripcion y figuras que se acompanan. Tras la lectura de la descripcion y las figuras presentes en este documento, un experto en la tecnica es capaz de poner en practica la invencion sin esfuerzo o experimentacion indebida. En las figuras, numeros de referencia similares se refieren a partes similares.

[0080] Antes de explicar al menos una realizacion en detalle, ha de entenderse que la invencion no esta necesariamente limitada en su aplicacion a los detalles de construccion y la disposicion de los componentes y/o los metodos establecidos en la siguiente descripcion y/o ilustrados en los dibujos. La invencion es capaz de otras realizaciones o de realizarse o llevarse a cabo de diversas maneras. La fraseologfa y la terminologfa empleadas en el presente documento son para fines descriptivos y no deben considerarse como limitantes.

[0081] Con referencia ahora a las figuras 1A-1C, se muestra una representacion esquematica de un dispositivo 10 de acuerdo con las ensenanzas descritas en este documento. El dispositivo 10 comprende un recipiente cerrado 12 que contiene un volumen 14 de una composicion solida, y un espacio superior 16. El recipiente puede ser cualquier recipiente adecuado para contener la composicion solida. Los ejemplos de recipientes incluyen, pero no se limitan a, botellas, recipientes de liofilizacion, barriles, jarras, y jeringas. El recipiente esta cerrado por un primer elemento de cierre movil, por ejemplo una tapa de goma. El recipiente puede estar hecho de cualquier material adecuado tal como vidrio, plastico, metal y similares.

[0082] El envase cerrado 12 comprende una entrada 18 para controlar el paso de un disolvente acuoso en el volumen interior del recipiente cerrado 12. La entrada 18 tiene un estado cerrado, en el que el flujo de disolvente acuoso en el volumen interior del recipiente 12 esta bloqueado, y un estado abierto en el que la entrada 18 proporciona un camino para el flujo de disolvente acuoso en el volumen interior del recipiente 12. Un controlador 20 controla el cambio de la entrada 18 desde el estado abierto al estado cerrado. Alternativamente, en algunas formas de realizacion, el controlador 20 comprende un elemento de perforacion, tal como una aguja unida a una jeringa que comprende un disolvente acuoso (no mostrado), y un estado abierto de la entrada 18 se proporciona en un casquillo de recipiente cerrado 12 por la perforacion de la tapa con el elemento de perforacion.

[0083] Dispuesto dentro del recipiente 12 es un elemento de sellado movible 22, para el recipiente de sellado 12. El elemento de sellado movible 22 se puede mover dentro del recipiente 12 para cambiar el volumen del espacio de cabeza 16 dentro del recipiente 12, en el que se mueve el elemento de sellado 22 en una direccion que disminuye el volumen de espacio de cabeza 16 aumenta la presion dentro del espacio de cabeza 16. El elemento de sellado movible 22 se mantiene de manera liberable en una primera posicion dentro del recipiente 12 (directa o indirectamente) por un elemento de sujecion 24, de tal manera que cuando el elemento de sellado movible 22 esta en la primera posicion, el volumen de espacio de cabeza 16 es tal que la presion dentro del espacio de cabeza 16 es inferior a la atmosferica. El elemento de sujecion 24 esta conectado opcionalmente a un accionador de elemento de sujecion 39 (que se muestra en la Figura 6B), que acciona la liberacion de elemento de sellado movible 22 de elemento de sujecion 24.

[0084] Tras la liberacion, el elemento de sellado movible 22 se mueve a una segunda posicion, de manera que el volumen de espacio de cabeza 16 se disminuye, y la presion del espacio de cabeza 16 se incrementa a igual presion atmosferica.

[0085] El recipiente 12 puede estar opcionalmente sujeto dentro de una carcasa 64 (mostrada, por ejemplo, en la Fig. 3).

[0086] El dispositivo 10 puede comprender ademas un deposito 42 (mostrado, por ejemplo, en la Figura 2) para contener el disolvente acuoso.

[0087] En un estado inicial, como se muestra en la Figura 1A, la entrada 18 esta en el estado cerrado, el elemento de sujecion 24 mantiene el elemento de junta movil 22 en una primera posicion, y la presion en el espacio de cabeza 16 es inferior a la atmosferica.

[0088] La Figura 1B muestra el uso del dispositivo 10, cuando la entrada 18 se cambia desde el estado cerrado inicial al estado abierto, de tal manera que se permite que el disolvente acuoso fluya en el volumen interior del recipiente 12, mientras que el elemento de sellado movible 22 se mantiene en su una primera posicion dentro del recipiente 12 por el elemento de sujecion 24, de tal manera que la presion tal en el espacio de cabeza 16 se mantenga a un nivel subatmosferico. El volumen ocupado por el disolvente acuoso es menor que el volumen ocupado por la composicion solida.

[0089] Como se muestra en la Figura 1C, despues de que el disolvente acuoso se haya permitido fluir en el volumen interior del recipiente 12, el elemento de sellado movible 22 se libera del elemento de sujecion 24, y se mueve dentro

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del recipiente 12 a una segunda posicion tal que el volumen de espacio de cabeza 16 se reduzca y la presion dentro del espacio de cabeza 16 se aumente proporcionalmente, hasta que se alcance la presion atmosferica.

[0090] De acuerdo con algunas realizaciones, el recipiente cerrado 12 comprende un barril de jeringa, y el elemento de sellado movible 22 comprende un embolo encerrado al menos parcialmente dentro del barril. En algunas de tales formas de realizacion, un elemento de sujecion 24 sujeta de forma liberable el embolo en una primera posicion antes de su uso.

[0091] Con referencia ahora a la Figura 2, se muestra una vista lateral en seccion transversal de un ejemplo de dispositivo 30, un primer barril de jeringa 32 que tiene un extremo frontal 34 que tiene una entrada 18 y un extremo posterior 36, un primer elemento de sellado movible 22a dispuesto dentro del primer barril de jeringa 32, un elemento de sujecion 24 para sujetar de manera liberable el primer elemento de sellado movible 22a, y un controlador 20 para cambiar de entrada 18 desde un estado cerrado a un estado abierto. El controlador 20 esta indirectamente o directamente conectado a un accionador controlador 38, que, cuando se accione provoca que el controlador 20 cambie de entrada 18 desde un estado cerrado a un estado abierto.

[0092] El primer elemento de sellado movil (Fig. 2) 22a comprende un primer piston de forma deslizante desplazable que tiene un primer vastago de piston 40a que se extiende fuera del extremo posterior del barril de jeringa 32 para el funcionamiento del primer piston.

[0093] En algunas realizaciones, el elemento de sujecion 24 comprende un separador colocado entre un extremo posterior del vastago del piston 40a y el extremo posterior 36 de primer barril de jeringa 32, evitando que el vastago de piston 40a se mueva hacia delante en primer barril de jeringa 32. El elemento de sujecion 24 es opcionalmente conectado a un actuador (no mostrado), que, cuando se acciona, hace que el elemento de sujecion 24 libere el primer elemento de sellado movible 22a.

[0094] En algunas realizaciones, un rebaje esta dispuesto en el vastago de piston 40a, y el elemento de sujecion 24 comprende al menos un saliente 72 (como se muestra en las Figs. 6B y 7A) configurado para acoplarse de forma reversible dentro de la cavidad 70 (como se muestra en la figura 7B).

[0095] En algunas realizaciones, el dispositivo 30 (por ejemplo, Fig. 2) comprende ademas un deposito 42 que comprende un segundo barril de jeringa 44, para contener un disolvente acuoso antes de su uso, y un segundo elemento de sellado movible 22b dispuesto dentro del cilindro 44 para el deposito sellado 42. Dispuesto dentro del cilindro 44 es un segundo elemento de cierre movil 22b, que comprende un segundo piston de forma deslizante desplazable que tiene un segundo vastago de piston 40b que se extiende fuera del extremo posterior del barril de jeringa 44 para el funcionamiento del segundo piston.

[0096] El deposito 42 comprende una salida 46 directa o indirectamente conectada a la entrada 18. En algunas realizaciones, el recipiente cerrado 12 y el deposito 42 estan configurados para permitir la agitacion del disolvente acuoso despues de la adicion a la composicion solida, para facilitar la disolucion de la composicion solida en el disolvente. En algunas realizaciones, los recipiente cerrados 12 y el deposito 42 estan configurados para permitir la agitacion por transferencia repetida del disolvente acuoso (y de una suspension que comprende una solucion disuelta parcialmente formada despues de la adicion del disolvente acuoso a la composicion solida) entre el deposito 42 y el recipiente 12.

[0097] El controlador 20 se encuentra opcionalmente entre la entrada 18 y la salida 46.

[0098] La Figura 3 ilustra una vista superior de un dispositivo 50 de acuerdo con algunas realizaciones de la presente invencion, en el que el dispositivo 50 comprende una unidad que contiene solido 52 para contener las composiciones solidas y una unidad que contiene disolvente 54 para contener disolventes.

[0099] La unidad que contiene solido 52 comprende dos recipientes cerrados 12a, 12b, comprendiendo cada uno un barril de jeringa 32a, 32b, que tiene una entrada 18a, 18b, configurandose cada barril de jeringa 32a, 32b para contener una composicion solida diferente (por ejemplo, la trombina y fibrinogeno, respectivamente). Disolventes que contienen la unidad 54 comprenden dos depositos, conteniendo cada uno un barril de jeringa 44a, 44b, que tiene una salida 46a, 46b, configurandose cada barril de jeringa 44a, 44b para contener un disolvente para disolver las composiciones solidas contenidas en barriles de jeringas 32a, 32b, respectivamente. Barriles de jeringa 44a, 44b pueden contener los mismos o diferentes disolventes acuosos.

[0100] Los barriles de jeringaes 32a, 32b, 44a, 44b tienen cada uno un elemento de sellado movible 22a, 22c, 22b, 22d (no mostrado), respectivamente, dispuesto en su interior, y un elemento de sujecion 24, para sujetar de manera liberable al menos uno de elementos de sello movible 22a, 22c, y al menos un controlador 20 para cambiar al menos una primera de las entradas 18a, 18b de un estado cerrado a un estado abierto. En algunas realizaciones, el controlador 20 cambia las dos entradas 18a, 18b de un estado cerrado a un estado abierto. El dispositivo 50 puede comprender opcionalmente un segundo controlador 20b para cambiar una segunda de entradas 18a, 18b de un estado cerrado a un estado abierto. Los controladores 20a, 20b (mostrados en la Fig. 6B) estan opcionalmente situados entre la entrada 18a y la salida 46a, y entre la entrada 18b y la salida 46b, respectivamente.

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[0101] El dispositivo 50 comprende una carcasa 64 para la celebracion de solido que contiene la unidad 52, y una carcasa 66 para la celebracion de disolventes que contiene la unidad 54. Alternativamente, la unidad que contiene solido 52 y la unidad de disolvente que contiene 54 pueden ambos llevarse a cabo dentro de una unica carcasa (no mostrada). Ademas, como alternativa, al menos una de la unidad que contiene solido 52 y la unidad que contiene disolvente 54 se puede proporcionar sin una carcasa. El elemento de sujecion 24 se encuentra opcionalmente dentro de/en la carcasa 64. Los controladores 20a y/o 20b se encuentran opcionalmente dentro de la carcasa 64.

[0102] En algunas realizaciones, el controlador 20 esta conectado a un accionador controlador 38, que, cuando se acciona causa que el controlador 20 cambie al menos una primera de las entradas 18a, 18b de un estado cerrado a un estado abierto. Alternativamente, en algunas formas de realizacion, que comprenden un primer controlador 20a y un segundo controlador 20b, cada controlador 20a, 20b comprende o esta conectado a un accionador controlador 38a, 38b, respectivamente, y los controladores 20a, 20b estan colocados opcionalmente debajo de actuadores controladores 38a, 38b. Alternativamente, en algunas realizaciones, un solo accionador controlador 38 esta conectado a y controla tanto el primer controlador 20a como el segundo controlador 20b como se muestra en las Figuras 6A y 6B.

[0103] Cuando el dispositivo 50 esta en un estado inicial, antes de la activacion de al menos actuadores del controlador 38, y la actuacion de los controladores 20a, 20b, las entradas 18a, 18b se cierran, impidiendo el flujo de disolvente acuoso en barriles de jeringa 32a, 32b. Tras la activacion del accionador controlador 38, al menos uno de los controladores 20a, 20b es accionado, de tal manera que al menos una de las entradas 18a, 18b se cambia de una posicion cerrada a una posicion abierta, permitiendo el flujo de disolvente acuoso en al menos uno de los barriles de jeringa 32a, 32b.

[0104] Cada elemento sellado movible 22a, 22b, 22c, 22d comprende un piston desplazable de forma deslizante que tiene un vastago de piston 40a, 40b, 40c, 40d, respectivamente, que se extiende fuera del extremo posterior del respectivo barril de jeringa 32a, 44a, 32b, 44b para el funcionamiento del piston.

[0105] Opcionalmente, los vastagos de piston 40a, 40c de la unidad que contiene solido 52 estan conectados mecanicamente a traves de un elemento de acoplamiento 56, y barras de piston 40b, 40d de la unidad que contiene disolvente 54 estan conectados mecanicamente a traves de un elemento de acoplamiento 58, de modo que el par de vastagos de piston en cada unidad puede moverse conjuntamente.

[0106] Los barriles de jeringas 32a, 32b de la unidad que contiene solido 52 estan conectados de forma reversible en comunicacion de fluido con barriles de jeringas 44a, 44b, respectivamente, de la unidad que contiene disolvente 54, a traves de conectores de fluido 60, 62. Los conectores de fluido pueden ser, por ejemplo, adaptadores luer. Por ejemplo, la unidad que contiene solido 52 puede incluir un conector de fluido 60 que comprende dos adaptadores luer macho y la unidad que contiene disolvente 52 puede incluir un conector de fluido 62 que comprende dos adaptadores luer hembra. Los barriles de jeringas 32a, 32b estan colocados enfrente de barriles de jeringa 44a, 44b, respectivamente, y conectados por accesorios leur que proporcionan comunicacion de fluido.

[0107] Cuando el dispositivo 50 esta en una posicion inicial, la presion en el espacio de cabeza 16 dentro de cada barril de jeringa 32a, 32b es inferior a la atmosferica, las entradas 18a, 18b estan en un estado cerrado, y el elemento de sujecion 24 sostiene vastagos de piston 40a, 40c en una primera posicion en la que la presion en el espacio de cabeza 16 se mantiene a un nivel sub-atmosferico.

[0108] En algunas realizaciones, las etapas de la apertura de las entradas 18a, 18b y por lo tanto permitir que el disolvente fluya en barriles de jeringa 32a, 32b resulta en un aumento de la presion dentro del espacio de cabeza 16. La presion en el espacio de cabeza 16 se mantiene ventajosamente a presion sub-atmosferica durante la etapa de entrada de disolvente en barriles de jeringa 32a, 32b. Por ejemplo, tortas altamente porosas con gran superficie se pueden utilizar para acortar el tiempo de disolucion, dado que se previene el colapso de tales tortas por el embolo en el barril de jeringa 32, antes de la introduccion del disolvente en barril de jeringa 32.

[0109] En algunas realizaciones, el mantenimiento de una diferencia de presion entre la presion en el espacio de cabeza 16 en barriles de jeringas 32a, 32b y la presion dentro de barriles de jeringa 44a, 44b mientras que se abre las entradas 18a, 18b, permite que el disolvente se introduzca espontaneamente en la jeringa de barriles 32a, 32b.

[0110] De acuerdo con algunas formas de realizacion, cuando el dispositivo 50 comprende dos barriles de jeringas 32a, 32b cada uno con una composicion solida, se permite la disolucion de las dos composiciones solidas y una administracion inmediata y simultanea de las dos composiciones solidas disueltas (por ejemplo, una solucion de fibrinogeno que comprende la solucion y una solucion de trombina que comprende la solucion).

[0111] La Figura 4 ilustra una vista en perspectiva del dispositivo 50 de la Figura 3, que muestra la unidad 52 que contiene solidos y la unidad 54 que contiene disolventes de la Figura 3 desconectadas la una de la otra por el desprendimiento del conector de fluido 60 comprendiendo accesorios leur masculinos de conector de fluido 62 comprendiendo accesorios leur femeninos.

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[0112] La Figura 5 ilustra una vista despiezada de una realizacion de la unidad que contiene disolvente 54 de las Figuras 3 y 4, que comprende barriles de jeringas 44a, 44b, un piston que tiene un vastago de piston 40b, 40d, respectivamente, que se encuentra dentro de cada barril de jeringa 44a, 44b. Cada barril de jeringa 44a, 44b, tiene una salida 46a, 46b, respectivamente. Los barriles de jeringa 44a, 44b, estan configurados para contener un disolvente. Cada uno de barril de jeringa 44a, 44b pueden comprender los mismos o diferentes disolventes.

[0113] La Figura 6A ilustra una vista en perspectiva de una realizacion de unidad 52 que contiene solido de las Figuras 3 y 4, contenidas dentro de una carcasa 64 y que incluye un elemento de sujecion 24, opcionalmente posicionado en la carcasa 64, y opcionalmente en su lugar por dos componentes 25 en forma de "U" (que se muestran en la Figura 6B), que forman estructuras similares a un canal. La unidad 52 que contiene solido comprende dos barriles de jeringas 32a, 32b, cada uno configurado para la sujecion de una composicion solida. Cada barril de jeringa 32a, 32b puede ser el mismo, o una composicion solida diferente. En una realizacion, el barril de jeringa 32a comprende una composicion solida que comprende fibrinogeno y el barril de jeringa 32b comprende una composicion solida que comprende trombina. El dispositivo 50 comprende ademas un accionador controlador 38.

[0114] La Figura 6B ilustra una vista despiezada de la unidad 52 que contiene solido de la Figura 6A, en el que los vastagos de piston 40a, 40c comprenden al menos un rebajo 70 y el elemento de sujecion 24 (opcionalmente posicionado directamente o indirectamente en el extremo posterior de la unidad 52 que contiene solido o en la carcasa 64) comprende al menos un saliente, tal como al menos una protuberancia 72, en la que el rebaje 70 esta configurado para acoplarse de forma reversible la protuberancia 72, de tal manera que cuando el dispositivo 50 en la posicion inicial, la protuberancia 72 se acopla dentro del rebaje 70 y elemento de sujecion 24 tiene al menos un elemento de sellado movible 22a, 22c en una posicion fija para mantener la presion sub-atmosferica dentro del barril de jeringa 32a, 32b de la unidad 52 que contiene solido. La ubicacion del receso 70 esta determinada de acuerdo con el requerido volumen de espacio de cabeza 16 dentro de barriles 32a, 32b para mantener la presion deseada dentro del espacio de cabeza 16.

[0115] En algunas realizaciones, cada vastago de piston 40a, 40c comprende un rebaje 70a, 70b, respectivamente, y el elemento de sujecion 24 comprende dos protuberancias 72a, 72b, estando cada uno de los cuales configurado para engancharse en uno de rebajes 70a y 70b, tales que los sellos movibles 22a, 22c son retenidos por el elemento de sujecion 24, y el volumen de espacio de cabeza 16 en cada uno de los barriles 32a, 32b se mantiene a un nivel que proporcione presion sub-atmosferica en el espacio de cabeza 16.

[0116] Alternativamente, solo un primer vastago de piston 40a comprende un rebaje 70 configurado para acoplarse a una protuberancia 72 del elemento de sujecion 24. En tales realizaciones, el vastago de piston 40c esta conectado opcionalmente al vastago de piston 40a de manera que ambos vastagos de piston 40a, 40c se mantienen inicialmente en una primera posicion por el elemento de sujecion 24 de tal manera que una presion sub-atmosferica se mantenga en el espacio de cabeza 16 dentro de cada barril de jeringa 32a, 32b. Alternativamente, los vastagos de piston 40a, 40c pueden estar separados, de modo que la presion sub-atmosferica se mantenga solo en el espacio de cabeza 16 de barril de jeringa 32a.

[0117] Ademas, opcionalmente, uno o mas de los vastagos de piston 40a, 40c puede comprender mas de un rebaje 70, situado en diferentes posiciones a lo largo de los vastagos de piston 40a y/o 40c, para proporcionar diferentes niveles de presion opcional dentro del espacio de cabeza 16.

[0118] Como se muestra ademas en la Figura 6B, los controladores 20a, 20b estan conectados a un accionador controlador 38, que, cuando se acciona (por ejemplo, presionado hacia abajo por el usuario en una primera etapa de funcionamiento del dispositivo 50), provoca que el primer controlador 20a cambie de entrada 18a de un estado cerrado a un estado abierto, que permite el flujo de disolvente al barril de jeringa 32a de la unidad 52 que contiene solido, y provoca que el segundo controlador 20b cambie de entrada 18b de un estado cerrado a un estado abierto, que permite el flujo de disolvente en barril de jeringa 32b. Opcionalmente, un unico controlador 20 cambia simultaneamente entradas 18a y 18b desde una posicion cerrada a una posicion abierta.

[0119] El elemento de sujecion 24 comprende opcionalmente o esta conectado a un accionador de elemento de sujecion 39, que cuando se activa (por ejemplo, se presiona hacia abajo por el usuario en una segunda etapa de funcionamiento del dispositivo 50), hace que al menos uno de los elementos moviles de sellado 22a, 22c, se liberen desde el elemento de sujecion 24, lo que permite que al menos un elemento movil de sellado 22a, 22c, se mueva dentro del recipiente. Opcionalmente, cada uno de los elementos moviles de sellado 22a, 22c, se libera simultaneamente de elemento de sujecion 24. Alternativamente, el dispositivo 50 puede comprender elementos de sujecion 24a, 24b, para sujetar individualmente cada uno de los elementos moviles de sellado 22a, 22c, respectivamente. El elemento de sujecion actuador 39 activa opcionalmente el elemento de sujecion unico 24 para liberar de forma simultanea cada uno de los elementos moviles de sellado 22a, 22c. Alternativamente, el dispositivo 50 puede comprender actuadores de elemento de sujecion individuales 39a, 39b, para el accionamiento de elementos de sujecion 24a, 24b, respectivamente.

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[0120] En algunas realizaciones, en una posicion inicial del dispositivo 50, cada uno de los barriles de jeringa 32a, 32b, que contiene una composicion solida, tiene una presion sub-atmosferica en el espacio de cabeza 16, el controlador 20 (o controladores 20a, 20b) esta cerrado, y vastagos de piston 40a, 40c se llevan a cabo en una primera posicion por el elemento de sujecion 24 para mantener la presion sub-atmosferica en el espacio de cabeza 16 de barriles de jeringas 32a, 32b, y para evitar la succion de los vastagos de piston 40a, 40c en barriles de jeringa 32a, 32b debido a la diferencia de presion entre la presion atmosferica del medio ambiente y la presion sub- atmosferica dentro del espacio de cabeza 16 de barriles 32a, 32b.

[0121] La Figura 7A ilustra una vista en perspectiva y ampliada de una realizacion de un elemento de sujecion 24, que comprende dos protuberancias 72a, 72b, y un accionador de elemento de sujecion 39. El elemento de sujecion

24 comprende una parte de base estrecha 74 y una porcion mas ancha superior 76. En tales realizaciones, se evita que el elemento de sujecion 24 se empuje hacia abajo en la estructura similar a un canal formada por componentes

25 en forma de "U" (que se muestran en la Figura 6B), debido a la anchura de la porcion superior 76.

[0122] La Figura 7B ilustra una vista en perspectiva de una realizacion de vastagos de piston 40a, 40c de barriles de jeringa 32a, 32b de la unidad 52 que contiene solido de acuerdo con algunas realizaciones descritas en este documento. Los rebajes 70a, 70b estan configurados para activar protuberancias 72a, 72b, respectivamente.

[0123] Las Figuras 8A y 8B ilustran una vista en perspectiva de una realizacion del elemento de sujecion 24 que comprende protuberancias 72a, 72b, situadas en un extremo proximal de la carcasa 64 que mantiene unidos barriles de jeringa 32a, 32b de la unidad que contiene solido 52. En la Figura 8A, el elemento de sujecion 24 esta en una primera posicion 78, antes del accionamiento, en el que las protuberancias 72a, 72b se acoplan dentro de los rebajes 70a, 70b, respectivamente. En la Figura 8B, despues del accionamiento mediante la sujecion del actuador de elemento 39, y desacoplamiento de protuberancias 72a, 72b de rebajes 70a, 70b, el elemento de sujecion 24 se mueve a una segunda posicion 80 en la carcasa 64.

[0124] La Figura 9A ilustra una vista en perspectiva superior de una realizacion de elemento de sujecion 24, en una primera posicion 78, antes de la activacion, con dos protuberancias 72a, 72b de elemento de sujecion 24 acoplado dentro de dos rebajes 70a, 70b situado en una posicion fija a lo largo de los vastagos de piston 40a, 40c, de tal manera que los vastagos de piston 40a, 40c se retienen en una primera posicion.

[0125] La Figura 9B ilustra una vista en perspectiva desde abajo de una realizacion de elemento de sujecion 24 en la misma posicion que en la Figura 9A.

[0126] La Figura 9C ilustra una vista en perspectiva desde abajo de una realizacion de elemento de sujecion 24, en una segunda posicion 80, despues del accionamiento mediante la sujecion del actuador de elemento 39, en el que las protuberancias 72a, 72b se desenganchan de rebaje 70a, 70b, liberando de este modo el elemento de retencion 24 de vastagos de piston 40a, 40c, de tal manera que los vastagos de piston 40a, 40c son libres de moverse dentro de barriles de jeringas 32a, 32b, respectivamente.

[0127] La Figura 10 ilustra una vista lateral de una realizacion del controlador 20, que tiene una porcion sustancialmente cilmdrica 82 y una porcion inferior de concava mas amplia 84. Antes del accionamiento del controlador 20, porcion mas ancha 84 se encuentra en una trayectoria de flujo entre barriles de jeringa 32a, 32b que comprenden la composicion solida y barriles de jeringas 44a, 44b comprenden el disolvente acuoso, tal que el flujo de disolvente a partir de barriles de jeringa 44a, 44b a barriles de jeringa 32a, 32b se bloquea ffsicamente. Cuando el accionador controlador 38 acciona el controlador 20, el controlador 20 se mueve de tal manera que la parte cilmdrica 82 se encuentra en la trayectoria de flujo y el flujo de disolvente a partir de barriles de jeringa 44a, 44b a los barriles de jeringa 32a 32b puede ocurrir alrededor de la porcion cilmdrica 82. En una realizacion, tras el accionamiento del controlador 20, la trayectoria de flujo permanece abierta.

[0128] Las Figuras 11A-C ilustran el dispositivo 50 en un estado inicial, en el que el disolvente esta contenido dentro de barriles de jeringas 44a, 44b, las entradas 18a, 18b estan en una posicion cerrada como se mantiene por el controlador 20. La Figura 11A muestra una vista superior; la Figura 11B muestra una vista lateral en seccion transversal; y la Figura 11C muestra una vista ampliada de la zona que comprende el controlador 20. En esta figura, los vastagos de piston 40a, 40c estan en una posicion inicial para mantener el volumen de espacio de cabeza 16 de tal manera que la presion en el espacio de cabeza 16 se mantenga a una presion sub-atmosferica. Posteriormente, el accionador controlador 38 se activa de modo que el controlador 20 cambie las entradas 18a, 18b desde una posicion cerrada a una posicion abierta, tal como por eliminacion de una porcion inferior de concava mas amplia 84 de controlador 20 de la trayectoria de flujo. Los vastagos de piston 40b, 40d de la unidad que contiene el disolvente 54 se introducen en barriles de jeringa 44a, 44b debido a la diferencia de presion entre la presion atmosferica del entorno circundante y la presion sub-atmosferica en el espacio de cabeza 16 dentro de las jeringas 32a, 32b, de tal manera que el disolvente fluye a partir de barriles de jeringa 44a, 44b a los barriles de jeringa 32a, 32b, respectivamente.

[0129] Las Figuras 12A-C ilustran el dispositivo 50 despues de la transferencia del disolvente de la jeringa de barriles 44a, 44b a los barriles de jeringa 32a, 32b. La Figura 12A muestra una vista superior; la Figura 12B muestra

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una vista en seccion transversal; y la Figura 12C muestra una vista ampliada de la zona que comprende el controlador 20. Durante este paso, la parte sustancialmente cilmdrica 82 de controlador 20 esta situada en la trayectoria de flujo de fluido.

[0130] La Figura 13 ilustra la unidad 54 que contiene disolvente, desconectada de la unidad 52 que contiene solido y conectada a un sistema de conector de fluido 86 incluyendo conectores de fluido 60, 62 que comprenden adaptadores luer a traves de los cuales las soluciones formadas a partir de la disolucion de las dos composiciones solidas en el disolvente pueden administrate a un sujeto. El sistema de conector de fluido 86 puede comprender opcionalmente un cateter que tiene multiples lumenes para proporcionar multiples canales de flujo.

[0131] La Figura 14A ilustra una realizacion del elemento de sujecion 24 que comprende un espaciador 88 que tiene una estructura en forma de tunel 90, que comprende opcionalmente un material ngido, y se configura para posicionarse sobre vastagos de piston 40a, 40c de la unidad 52 que contiene solido, opcionalmente entre un extremo posterior de los vastagos de piston 40a, 40c y de barril de jeringa 32 que contiene las composiciones solidas.

[0132] La Figura 14B ilustra el espaciador 88 posicionado en el vastago de piston 40 de un barril de jeringa 32 de la unidad que contiene solido 52. En tal realizacion, el espaciador 88 evita que el vastago de piston 40 se introduzca en el barril de jeringa 32. Tras la retirada del espaciador 88 del vastago de piston 40, el vastago de piston 40 se libera y se introduce en el barril de jeringa 32. La longitud y la posicion del espaciador 88 se determina de acuerdo con el volumen de espacio de cabeza 16 que se requiere dentro del barril de jeringa 32 con el fin de proporcionar una presion requerida dentro del espacio de cabeza 16.

[0133] En algunas realizaciones, la secuencia de funcionamiento de dispositivo 50 incluye los siguientes pasos:

En una posicion inicial, la unidad 52 que contiene solido y la unidad 54 que contiene lfquido/disolvente estan conectadas la una a la otra (por ejemplo, a traves de conectores de fluido 60, 62 comprendiendo adaptadores luer) configuradas para proporcionar comunicacion de fluido entre barriles de jeringas 44a, 44b de disolvente que contiene la unidad 54, y la jeringa de barriles 32a, 32b de la unidad 52 que contiene solido. En esta etapa, las entradas 18a, 18b estan cerradas, impidiendo el flujo de fluido desde barriles de jeringa 44a, 44b a los barriles de jeringa 32a, 32b. El volumen ocupado por el disolvente en barriles de jeringa 44a, 44b, es menor que el volumen ocupado por las composiciones solidas en barriles de jeringa 32a, 32b. La presion en el espacio de cabeza 16 dentro de barriles de jeringa 32a, 32b es inferior a la atmosferica. La presion dentro de un espacio de cabeza en barriles de jeringa 44a, 44b es igual a la presion ambiental, por ejemplo la presion atmosferica. Los vastagos de piston 40a, 40c de las jeringas de la unidad 52 que contiene solido se retienen en su posicion inicial cerrado parcialmente dentro de sus correspondientes barriles usando un elemento de sujecion 24 como se detalla anteriormente.

[0134] En un primer paso, el usuario activa el accionador controlador 38, por ejemplo presionando hacia abajo, accionando de este modo los controladores 20a, 20b y la apertura de las entradas 18a, 18b y las salidas 46a, 46b, permitiendo con ello el flujo de disolvente a partir del tubo de la jeringa 44a al barril de jeringa 32a, y del barril de jeringa 44b para el barril de jeringa 32b. Cuando el disolvente fluye en barriles de jeringa 32a, 32b la presion dentro del espacio de cabeza 16 en barriles 32a, 32b se mantiene en un nivel sub-atmosferico.

[0135] En una realizacion, despues de activar el accionador controlador 38, la conexion de fluido permanece abierta.

[0136] En una segunda etapa, despues de que todo el disolvente se introduzca en barriles de jeringa 32a, 32b, el usuario activa la sujecion del actuador del elemento 39 (que es opcionalmente una parte de elemento de sujecion 24), lo que resulta en la liberacion de los vastagos de piston 40a, 40c de la unidad 52 que contiene solido. Posteriormente, los vastagos de piston 40a, 40c se introducen en sus correspondientes barriles de jeringa 32a, 32b en virtud de la presion mas baja en barriles de jeringa 32a, 32b con respecto a la presion atmosferica del medio ambiente, lo que resulta en un aumento de la presion dentro del espacio de cabeza 16 de barriles 32a, 32b hasta que la presion dentro del espacio de cabeza 16 sea igual a la presion atmosferica.

[0137] De acuerdo con los principios descritos en este documento, el aumento de la presion se consigue mediante la disminucion del espacio de cabeza en barriles de jeringa 32a, 32b sin la introduccion de gas en las jeringas. Ventajosamente, el cambio en el nivel de presion dentro del espacio de cabeza 16 elimina sustancialmente o reduce al mmimo la formacion de espuma y permite la agitacion de la suspension de la composicion solida en el disolvente en una ausencia casi completa de la espuma.

[0138] La suspension se puede agitar mediante vastagos de piston 40a, 40b, 40c, 40d, mediante la transferencia de la suspension entre barriles de jeringa 44a y 32a, y entre cilindros de jeringa 44b y 32b varias veces para facilitar la disolucion completa y formar una solucion en la que la composicion solida se disuelve completamente en el disolvente. Despues de completar la disolucion o reconstitucion, el usuario puede desconectar la unidad 52 de la unidad 54 y administrar la solucion reconstituida a una ubicacion deseada, por ejemplo, mediante la conexion de un

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sistema de conector de fluido 86, a traves del cual se puede administrar los dos soluciones reconstituidas.

[0139] Se aprecia que ciertas caractensticas de la invencion, que son, para mayor claridad, descritas en el contexto de realizaciones separadas, tambien pueden proporcionarse en combinacion en una unica realizacion.

[0140] A la inversa, diversas caractensticas de la invencion, que se describen, por brevedad, en el contexto de una unica realizacion, tambien pueden proporcionarse por separado o en cualquier subcombinacion adecuada o como adecuada en cualquier otra forma de realizacion descrita de la invencion. Ciertas caractensticas que se describen en el contexto de diversas realizaciones no han de considerarse caractensticas esenciales de estas formas de realizacion, a menos que la forma de realizacion sea inoperante sin esos elementos.

[0141] Aunque la invencion se ha descrito junto con realizaciones espedficas de la misma, es evidente que muchas alternativas, modificaciones y variaciones seran evidentes para los expertos en la tecnica. En consecuencia, se pretende abarcar todas estas alternativas, modificaciones y variaciones que caen dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.

[0142] La cita o identificacion de cualquier referencia en esta solicitud no se interpretara como una admision de que tal referencia esta disponible como tecnica anterior a la invencion.

EJEMPLOS

Materiales y metodos:

Liofiiizacion.

[0143] La liofilizacion se llevo a cabo de acuerdo con el ciclo mostrado en la Tabla 1 utilizando un liofilizador Cristo Epsilon 2-8D. La liofilizacion se llevo a cabo en viales o vasos cilmdricos, que se sellaron al finalizar el proceso de liofilizacion. El procedimiento de liofilizacion produjo una "torta" solida, de fibrinogeno tridimensional.

Tabla 1

Seccion (Mbar)

Fase Tiempo (h: m) Temp (°C) Vaco

1

Valores de inicio --:-- 4 APAGADO

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Congelacion 1:00 -30 APAGADO

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Congelacion 1:00 -50 APAGADO

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Congelacion 5:40 -50 APAGADO

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Preparacion 0:20 -45 APAGADO

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Sublimacion 0:15 -42 0,2

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Sublimacion 0:15 -25 0,2

8

Sublimacion 25:00 -25 0,2

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Sublimacion 1:00 -15 0,2

10

Sublimacion 12:00 -15 0,2

11

Segundo secado 2:00 20 0,2

12

Segundo secado 5:00 20 0,2

13

Segundo secado 18:30 25 0,12

[0144] Opcionalmente, una presion de mas de 0,12 mbar puede proporcionarse mediante el incremento de la presion en el vial de liofilizacion a la presion deseada despues de la etapa 13, antes de sellar el vial de liofilizacion.

Metodo de tiempo de coaguiacion Ciauss.

[0145] Este metodo mide la concentracion de fibrinogeno coagulable en una muestra de acuerdo con su tiempo de

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coagulacion en presencia de una cantidad constante de trombina utilizando una maquina de tiempo de coagulacion (Diagnostica Stago Inc., EE.UU.). El tiempo de coagulacion medido para la muestra se compara con el obtenido con una curva de calibracion producida con un estandar de fibrinogeno. El metodo utilizado es una modificacion del ensayo Eur. Farm. 0903/1997 segun se detalla en: European Pharmatazaiea, Fibrin sealant kit. 1997; 0903: 858; and Clauss A. Gerinnungsphysiologische Schnellmethode zur Bestimmung des Fibrinogens. Acta Haematol. 1957; 17: 237-246.

Preparation de agua destilada desgasificada doble (DDW desgasificado).

[0146] Agua destilada doble (DDW) se agito bajo vacfo hasta que ninguna burbuja de aire adicional salfa por encima de la superficie del agua.

Soluciones madre de fibrinogeno.

[0147] Una solucion de componente activo biologico (CAB) como en EVICEL® Fibrine Sealant (Omrix Biopharmaceuticals Ltd.) que tiene una concentracion de fibrinogeno coagulable de 55-85 mg/ml se uso como una solucion madre de fibrinogeno en todos los experimentos descritos a continuacion.

Mediciones de nivel de disolucion de prote^na.

[0148] Se midio la densidad optica (DO) para soluciones de ensayo de fibrinogeno despues de la liofilizacion y disolucion, y para la solucion de control que comprende solucion madre de fibrinogeno CAB que no se sometio a liofilizacion y disolucion.

[0149] Una muestra de 150 pl de cada solucion de ensayo fibrinogeno se diluyo 1: 400 con DDW, y DO se midio a 280-320 nm frente a un blanco DDW. La medicion se llevo a cabo en cubetas acnlicas (Sarstedt, Alemania; numero de Cat. 67.740) usando un espectrofotometro ULTRASPEC 2100pro (Amersham Pharmacia Biotech, Suecia).

[0150] Se considero que DO de la solucion de control era 100%. Los calculos se realizaron de acuerdo con la siguiente formula, expresandose los resultados en porcentaje:

Nivel de disolucion de protema = Solucion de ensayo DO280-DO320_______x100

Solucion de control DO280-DO320

Ejemplo 1: La disolucion de fibrinogeno solido para obtener soluciones de fibrinogeno concentradas.

[0151] Se examino el efecto de la densidad de fibrinogeno de una "torta" de baja densidad de fibrinogeno solido tridimensional obtenida por liofilizacion como se describio anteriormente en el nivel de la disolucion de protema en disolvente acuoso. La densidad de protema en una "torta" obtenida a partir de una solucion de protema despues de la liofilizacion, como se expresa en mg/cc, es sustancialmente equivalente a la concentracion de protema en la solucion en mg/ml antes de la liofilizacion. Por lo tanto, la dilucion de una solucion madre antes de liofilizacion resulta en una "torta" de densidad mas baja que la de una "torta" obtenida por liofilizacion de la solucion madre sin diluir. El volumen de la "torta" es sustancialmente igual al volumen de la solucion de la que se preparo la "torta". Por lo tanto, la disolucion de la "torta" en un volumen que es igual al volumen de la "torta" resulta en una solucion con una concentracion equivalente a la de la solucion de la que se preparo la "torta", mientras que la disolucion de la "torta" en un volumen que es menor que el volumen de la "torta" solida resulta en una solucion que tiene una concentracion mayor que la de la solucion de la que se preparo la “torta”.

[0152] Para la preparacion de "tortas" de baja densidad con diferentes densidades de fibrinogeno, que comprende solucion madre de fibrinogeno 63 mg/ml de fibrinogeno (como se describe en la seccion de Materiales y Metodos anterior) se diluyo con DDW para obtener soluciones de fibrinogeno que tienen concentraciones en el intervalo de 21-42 mg/ml. Las soluciones diluidas y una muestra de control que comprende solucion madre de fibrinogeno no diluida se liofilizaron, produciendo "tortas" que tienen diferentes densidades de fibrinogeno. Las "tortas" se disolvieron en disolvente acuoso y el nivel de la disolucion de protemas se midio como se describe a continuacion.

[0153] Mas espedficamente, se diluyeron 5 ml de la solucion madre con DDW para producir soluciones diluidas con concentraciones de fibrinogeno coagulable de 42, 32, y 21 mg/ml y volumenes finales de 7,5, 10 y 15 ml, respectivamente. En el siguiente paso, 5 ml de una solucion de fibrinogeno de la muestra, que comprende el control y los volumenes finales de soluciones diluidas se transfirieron cada una a vasos cilmdricos de vidrio (diametro: 30 mm/altura: 25 mm), disenados para producir tortas capaces de encajar dentro de una jeringa, y se sometio a liofilizacion de acuerdo con el ciclo descrito en la seccion Materiales y Metodos. En este experimento, los vasos de vidrio cilmdricos no se taparon.

[0154] Al final del ciclo de liofilizacion, se obtuvieron "tortas" secas liofilizadas que tienen densidades de fibrinogeno de 63 (a partir de muestra de control), 42, 32, y 21 mg/cc (a partir de muestras de ensayo diluidas). Cada "torta" se retiro del vaso de vidrio cilmdrico y equipado en el barril de una jeringa de 50 ml (PIC Indolor, Italia) mediante la

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retirada del embolo de la jeringa, la insercion de la "torta" en el barril de jeringa, y despues se reemplaza el embolo en el barril. La jeringa de 50 ml se conecto a un primer punto de conexion de una llave de paso de tres vfas (Medipharm, Reino Unido), una jeringa de 5 ml (TERUMO, Belgica) que contema 5 ml de DDW desgasificado (preparado como se ha descrito anteriormente) se conecto al segundo punto de conexion de la llave de paso, y un filtro de 20 pm (MDI, India; numero de Cat. SYPP0611MNXX104) se conecto al tercer punto de conexion.

[0155] Cada una de las "tortas" de baja densidad obtenidas a partir de las soluciones diluidas se disolvio en 5 ml de DDW a una temperatura de 22 + 2°C con el fin de obtener soluciones que tienen una concentracion final de fibrinogeno de 63 mg/ml (similares a la concentracion de la solucion de fibrinogeno de la que se utiliza entre otras cosas como una pinza hemostatica) en uno de los metodos siguientes:

Metodo 1: La llave de paso de tres vfas se establecio para permitir la comunicacion de fluido entre la jeringa de 5 ml que contiene DDW desgasificado y la jeringa de 50 ml que contiene la "torta" de baja densidad y el DDW desgasificado se introdujo en la jeringa de 50 ml. Despues de la introduccion del DDW desgasificado en la jeringa de 50 ml, la solucion que comprende fibrinogeno parcialmente disuelto asf formado se transfiere de una jeringa a las otras tres veces moviendo los embolos de las jeringas de ida y vuelta, con el fin de mejorar la disolucion del fibrinogeno. El conjunto de jeringa se incubo a temperatura ambiente durante dos minutos para obtener una solucion que comprende fibrinogeno sustancialmente completamente disuelto. El tiempo total de la introduccion del DDW desgasificado hasta el final de la incubacion era de aproximadamente 150 segundos. Posteriormente, la llave de paso de tres vfas se establecio para permitir el flujo de la solucion de fibrinogeno a traves del filtro 20 pm con el fin de eliminar las partmulas no disueltas de la solucion.

Metodo 2: La disolucion se llevo a cabo de una manera similar a la descrita anteriormente en el Metodo 1, pero con la solucion que comprende fibrinogeno parcialmente disuelto que transfiere una jeringa a las otras cinco veces y la solucion resultante se filtro inmediatamente sin ningun periodo de incubacion. El tiempo desde la introduccion del DDW desgasificado hasta el final de la quinta transferencia de la solucion entre las dos jeringas era de unos 30 segundos.

[0156] El porcentaje de protema disuelta en la solucion se midio como se describe anteriormente en la seccion Materiales y Metodos en "Mediciones de nivel de disolucion de protema". Los resultados se muestran en la Tabla 2 a continuacion.

Tabla 2

Densidad de fibrinogeno dentro de la "torta” liofilizada (mg/cc)

Disolucion de protema + SD (%)

Por metodo 1 Mezclado 3 veces e incubado

Por Metodo 2 Mezclado 5 veces sin incubacion

63

12,3+4,6 15,3+7

42

28,1+7,4 25+9,9

32

51,6+7,5 29,8+5,2

21

81,8+8,2 43+2,3

* Las mediciones se llevaron a cabo por triplicado

[0157] Se observo que la disolucion de una "torta" de menor densidad de protema en agua resulto en un aumento del porcentaje de disolucion de protema en comparacion con la obtenida con una "torta" de mayor densidad de protemas en ambos metodos de disolucion. En este experimento, se obtuvo una optima disolucion de protemas, mientras que la disolucion de una "torta” liofilizada que tiene una densidad de fibrinogeno de 21 mg/cc utilizando el metodo 1, que incluye la incubacion y dura 150 segundos. Los resultados muestran que la incubacion y mezcla o agitacion es importante y que se requiere un penodo de tiempo relativamente largo para disolver la preparacion de fibrinogeno solido. Se ha de notar que la densidad de fibrinogeno dentro de la "torta” liofilizada se puede disminuir a 5 mg/cc mientras que se mantenga la estabilidad del liofilizado sin colapso de la "torta" (Parker et. Al. "Determination of the influence of primary drying rates on the microscale structural attributes and physicochemical properties of protein containing lyophilized products". J Pharm Sci. 2010;99:4616-4629).

[0158] Una inspeccion visual de la solucion revelo que la disolucion de las "tortas" liofilizadas en la manera descrita anteriormente resulto en la formacion de una solucion espumosa.

Ejemplo 2: El efecto de la presion sobre la tasa de desaparicion de la espuma durante la disolucion.

[0159] Se estudio el efecto de la presion sobre la velocidad de desaparicion de espuma formada durante la disolucion de "torta" de fibrinogeno liofilizado de baja densidad, utilizando condiciones de presion sub-atmosferica, seguido de equilibrado a la presion atmosferica (1000 mbar).

5

10

15

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30

35

40

45

50

55

60

65

[0160] Para este proposito, se prepararon "tortas" que tienen una densidad de fibrinogeno de 21 mg/cc. Ocho soluciones de prueba, cada una de volumen de 15 ml y que tienen una concentracion de fibrinogeno coagulable de 21 mg/ml, se prepararon mediante la dilucion de 5 ml de solucion madre que tiene una concentracion de fibrinogeno de 63 mg/ml, como se ha descrito anteriormente, con 10 ml de DDW. Las soluciones se liofilizaron cada una en un vial de vidrio de 50 ml. Los ocho viales de liofilizacion se cubrieron parcialmente con tapones de goma, y se liofilizaron como se describe en la Tabla 1 en la seccion de Materiales y Metodos. Al final del ciclo de liofilizacion, se obtuvieron "tortas" secas que tienen una densidad de fibrinogeno de 21 mg/cc. Las "tortas" se sometieron a las siguientes presiones sub-atmosfericas: 0,12, 100, 250, o 500 mbar. Para este proposito, los viales de vidrio que contienen "tortas" se sellaron y se taparon mediante el ajuste de la presion dentro del liofilizador a la presion requerida y la bajada de la bandeja del liofilizador en los tapones de goma. Las muestras para pruebas a cada presion se proporcionaron por duplicado.

[0161] Las "tortas" de las muestras de ensayo se disolvieron despues en DDW a temperatura ambiente (22 + 2°C) para proporcionar soluciones que tienen una concentracion de fibrinogeno de 63 mg/ml de la siguiente manera. En primer lugar, 4,4 ml de DDW desgasificado se inyecta a traves de la tapa de goma en el vial que contiene la "torta", utilizando una jeringa de 5 ml (Terumo, Belgica) conectada a una aguja de 23G (Medi plus, China), mientras que se mantiene la presion en el vial a la presion sub-atmosferica especificada. Se permitio que la aguja permaneciera dentro de la tapa de goma despues de la inyeccion. Veinte segundos despues de la inyeccion del DDW desgasificado en el vial, la presion en el vial se igualo a la presion atmosferica mediante la desconexion de la jeringa de la aguja y se dejo que el aire de la zona circundante entrara en el vial a traves de la aguja. Una de las muestras en cada nivel de presion se disolvio de esta manera. La disolucion de las "tortas" de la segunda muestra (control) en cada nivel de presion se llevo a cabo mediante la inyeccion de DDW desgasificado a una temperatura de 22+29C, a presion atmosferica, de la siguiente manera: En primer lugar, la tapa del vial se abrio ligeramente en con el fin de llevar la presion dentro del vial a la presion atmosferica, y despues 4,4 ml de DDW desgasificado se anadio al vial para lograr una concentracion de 63 mg/ml de fibrinogeno coagulable (como para la de solucion madre). El tiempo requerido para que la espuma desapareciera se midio desde el momento de la adicion del DDW desgasificado a la "torta" liofilizada de baja densidad hasta el momento en que un tercio de la superficie de la solucion disuelta era visible desde arriba. Los resultados se muestran en la Tabla 3 a continuacion.

Tabla 3

Metodo de disolucion

Nivel de presion dentro del vial en el momento de la inyeccion de DDW y despues de hasta 20 segundos (mbar) Nivel de presion dentro del vial 20 segundos despues de la inyeccion DDW *** (mbar) Tiempo de desaparicion de espuma+ SD (seg) **

Disolucion a baja presion, seguido de equilibrado a la presion atmosferica*

0,12 1000 30,50+6,95

100

1000 160,70+203,0

250

1000 622,25+158,51

500

1000 801,25+428,54

Control*

1000 1000 5235+2533,48

* Las mediciones se llevaron a cabo por triplicado.

** Desde la introduccion del DDW desgasificado hasta el punto en el que un tercio de la superficie de la solucion disuelta era visible desde arriba.

*** El aumento de nivel de presion de 1000 mbar es acompanado por aumento de aire dentro del vial.

[0162] Se observo que la disolucion de la "torta" de fibrinogeno liofilizada a presion sub-atmosferica seguido de equilibrado a la tasa de desaparicion de espuma mejorada de la presion atmosferica en comparacion con el grupo de control (inyeccion de DDW desgasificado bajo presion atmosferica). Se demostro que el nivel de presion dentro del vial durante la adicion del DDW desgasificado se correlacionaba directamente con el tiempo de desaparicion de espuma (es decir, baja presion dentro del vial durante la adicion del DDW desgasificado dio lugar a un tiempo de desaparicion de espuma corto). En este experimento, los resultados optimos se observaron mediante la adicion de DDW a "torta" de baja densidad a una presion de 0,12 mbar, incubando durante 20 segundos, seguido de equilibrado a la presion atmosferica.

[0163] Estos resultados muestran que con el fin de minimizar la presencia de espuma durante la disolucion de "torta" de fibrinogeno liofilizada, se anade ventajosamente el disolvente a presion sub-atmosferica, seguido de equilibrado a

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

la presion atmosferica.

Ejemplo 3: El efecto de la agitacion de la solucion en la formacion de espuma, el nivel de disolucion de proteina y la velocidad de disolucion.

[0164] El experimento anterior muestra que la disolucion de "torta" liofilizada de baja densidad a presion sub- atmosferica seguido por la introduccion de aire en el vial y equilibrando la presion en el vial de liofilizacion a presion atmosferica resulto en un tiempo de desaparicion de espuma mas corto. La agitacion de una mezcla es deseable para acortar el tiempo de disolucion y para obtener una solucion homogenea. En los siguientes experimented, el equilibrio a la presion atmosferica se llevo a cabo mecanicamente sin introducir aire en el vial y entonces se examino el efecto de la agitacion de la solucion en el nivel de la disolucion de protemas, velocidad de disolucion, y la desaparicion de la espuma. La agitacion de la solucion se llevo a cabo por dos metodos diferentes: A- mediante el uso de dos jeringas conectadas y la transferencia de la solucion de una jeringa a la otra (es decir, utilizando un dispositivo de mezcla alternativo); o B- mediante la agitacion manual del recipiente que contiene la solucion. En ambos experimentos, la disolucion se llevo a cabo a temperatura ambiente (22+2°C) y la DDW anadida estaba a una temperatura de 22+2°C.

A. Mediante la agitacion de la solucion por un dispositivo de mezcla de movimiento alternativo

[0165] "Tortas" de baja densidad se prepararon de la siguiente manera. 4 ml de solucion madre de fibrinogeno con 63 mg/ml de fibrinogeno coagulable se diluyo con DDW para obtener soluciones que tienen una concentracion de fibrinogeno coagulable de 48, 32 y 21 mg/ml. Volumenes finales de 6, 8, y 12 ml, respectivamente, se obtuvieron despues de la etapa de dilucion. En el siguiente paso, se liofilizaron 4 ml de cada uno de una solucion madre de fibrinogeno no diluida, y el volumen final de las soluciones diluidas de acuerdo con el ciclo descrito en la seccion Materiales y Metodos. El procedimiento de liofilizacion se llevo a cabo en tazas de vidrio cilmdricas especialmente disenadas (diametro: 23 mm/altura: 25 mm).

[0166] En los casos en los que el volumen final de la solucion diluida era mayor que el volumen de la taza de vidrio (5 ml), la solucion diluida se liofilizo en mas de un vaso de vidrio (es decir, 63 mg/ml- 1 taza, 48 mg/ml- 2 tazas, 32 mg/ml- 2 tazas, 21 mg/ml- 3 tazas). En este experimento, las tazas de vidrio cilmdricas no se taparon o ni se sellaron en condiciones de presion sub-atmosferica en el final del ciclo de liofilizacion. La liofilizacion de las cuatro soluciones de fibrinogeno diferentes produjo "tortas" liofilizadas de fibrinogeno que tienen densidades de 63 48, 32, y 21 mg/cc. A continuacion, cada "torta" liofilizada obtenida se introdujo en una jeringa de 12 ml mediante la retirada del embolo de la jeringa, la insercion de la "torta" en el barril de jeringa, y la devolucion del embolo al barril. En los casos en que se utilizo mas de una taza para la liofilizacion, todas las tortas obtenidas se insertaron en el mismo barril. La jeringa de 12 ml se conecto a un primer punto de conexion de una llave de paso de tres vfas (Medipharm, Reino Unido), un segundo 12 ml que contiene aproximadamente 3,6 ml de DDW desgasificado (preparado como se describe en la seccion Materiales y Metodos) se conecto al segundo punto de conexion de la llave de paso, y una bomba de vacte (KNF Neuberger, Alemania) se conecto con un manometro de vacte (Fisher Scientific, Ee.UU.) para el tercer punto de conexion. Las "tortas" de baja densidad se sometieron entonces a los niveles de presion sub-atmosferica. Para este proposito, la llave de paso de tres vfas se establecio para permitir la comunicacion de fluido entre la bomba de vacte y la jeringa de 12 ml sosteniendo la "torta" liofilizada; y el embolo de la jeringa de 12 ml que contema la "torta" liofilizada se retuvo en la parte superior del barril de jeringa por un espaciador de aluminio para mantener el embolo en su lugar y evitar que se introduzca en el barril de jeringa durante la etapa de someter las "tortas" de baja densidad a presion sub-atmosferica. Despues al aire se extrae de la jeringa de 12 ml conteniendo la "torta" liofilizada por la bomba de vacte para proporcionar una presion predeterminada de 25, 200 o 500 mbar.

[0167] En otro grupo examinado, el aire no se extrajo fuera del barril de la jeringa, de manera que la presion dentro de la jeringa era 1,000 mbar.

[0168] Se disolvieron las "tortas" liofilizadas en DDW para proporcionar una solucion que tiene una concentracion de fibrinogeno de 63 mg/ml (como en la solucion madre no diluida) usando el siguiente metodo: En primer lugar, la llave de paso de tres vfas se establece para permitir la comunicacion de fluido entre la jeringa de 12 ml que contiene el DDW desgasificado (3,6 ml) y la jeringa de 12 ml que contiene la "torta" liofilizada, lo que resulta en el flujo del DDW desgasificado en la jeringa que contiene la "torta" liofilizada y proporcionar una solucion que comprende fibrinogeno parcialmente disuelto, mientras que se mantiene una presion sub-atmosferica. En este paso, la presion dentro de la jeringa que contiene la solucion que comprende fibrinogeno parcialmente disuelto se aumento con respecto a la presion durante el paso anterior, pero todavfa era inferior a la presion atmosferica. Entonces, la presion dentro de la jeringa se equilibro a la presion atmosferica, en ausencia de aire quitando el separador de aluminio desde el embolo, y dejando que el embolo se introduzca en el barril o presionando el embolo. El equilibrado de la presion se realizo por lo tanto de forma mecanica y sin la introduccion de aire o gas, en contraposicion con el Ejemplo 2, en donde el equilibrado con la presion atmosferica se llevo a cabo mediante la introduccion de aire de la zona circundante en el vial. A continuacion, el conjunto de jeringa se dejo reposar con la solucion que comprende el fibrinogeno parcialmente disuelto durante 30 segundos y al mismo tiempo la bomba de vacte se desconecto de la llave de paso de tres vfas. En la siguiente etapa, la solucion que comprende fibrinogeno parcialmente disuelto se agita mediante la transferencia de la solucion de una jeringa a las otras 10 veces a una velocidad de 3,8 cm/seg mediante el uso de

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

una maquina de disolucion medida, para obtener una solucion que comprende fibrinogeno sustancialmente completamente disuelto. Brevemente, la maquina de disolucion personalizada comprende dos bombas de jeringa una frente a la otra, cada una con una jeringa. Las jeringas de las dos bombas de jeringa estan conectadas entre sf con un elemento de conexion que contiene una valvula para controlar el paso de agua y mantener el vado dentro de la jeringa que contiene solido. Las dos bombas de jeringa trabajan en sincronizacion tal que cuando la primera bomba de jeringa empuja el embolo de la primera jeringa, la segunda bomba de jeringa empuja el embolo de la segunda jeringa y viceversa.

[0169] Despues, la jeringa que contiene la solucion que comprende fibrinogeno sustancialmente completamente disuelto se desconecto de la llave de paso de tres vfas, y la solucion se filtro a traves de un filtro de 20 pm para separar cualquier material de la solucion sin disolver.

[0170] La disolucion de "tortas" de baja densidad liofilizadas bajo presion atmosferica se llevo a cabo de la misma manera descrita anteriormente, excepto que no se utilizo un espaciador de aluminio y la presion durante toda la etapa de disolucion era igual a la presion atmosferica. El tiempo desde la introduccion del dDw desgasificado hasta el final de la decima vez que la solucion se transfirio entre las dos jeringas era de 45 segundos.

[0171] Para evaluar la capacidad de las protemas solidas para disolverse en las condiciones descritas anteriormente, el nivel de disolucion de protema dentro de la solucion disuelta se midio como se describe anteriormente en la seccion Materiales y Metodos en "Mediciones de nivel de disolucion de protema". Se inspecciono visualmente la presencia de espuma.

[0172] Los resultados se muestran en la Tabla 4 a continuacion.

Tabla 4

Densidad de fibrinogeno •n la ’•torta" liofilizada (mg/cc]

Nivel de moment presion dentro die vial en el o de adicidn DDW (mbar)

1000

500 200 25

4J 71 11 49

«

1) 46 IT

39

Bloqueado 60 12

63

Bloqueado Bloqueado Bloqueado 71

Bloqueado

Bloqueado

Bloqueado

S4

61*2

71:8 52±7 91 80±7 97

70 77

71

■ 77 13

ID

81 IQ T4

41

Bloqueado Bloqueado Bloqueado 96

Bloqueado

Bloqueado

Bloqueado

90

74 U

79*2 82*7 88*10

Jl

96 7! 17 19

77

II 92 103

n

91 102

ii

91 (7 107

Bloqueado

SI 17 94

83 ±5

86*5 88*2 99*7

21

$4 96 ■ 92

so

91 « too

87

9} IT 102

46

93 95 100

40

91 19 104

91*3

94:2 90*4 100*5

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

*Bloqueado significa que la maquina de disolucion no pudo mover los embolos debido al bloqueo de las jeringas por particulas no disueltas.

**Cada experimento se llevo a cabo en 5 repeticiones

[0173] Los resultados muestran que la disolucion de "torta” liofilizada que tiene una densidad de fibrinogeno menor que 42 mg/cc, por ejemplo 32 mg/cc o 21 mg/cc a una presion inferior a 200 mbar, por ejemplo, 25 mbar, seguido por equilibracion a la presion atmosferica sin introduccion de aire, y agitando la solucion (por ejemplo, por el movimiento alternativo de la solucion entre dos jeringas) resulto en 100% de disolucion de protema dentro de un corto penodo de tiempo de 45 segundos. Ninguna cantidad significativa de espuma se observo despues de la disolucion a una presion de 25 mbar, mientras que los niveles de presion mas altos dieron como resultado la formacion de espuma significativa.

B- Agitacion mediante la agitacion manual del recipiente que contiene la solucion.

[0174] La agitacion se llevo a cabo mediante la agitacion manual de la jeringa que contiene la solucion en la presencia de esferas de acero inoxidable.

[0175] Para examinar el efecto de agitacion manual, "tortas" liofilizadas que tienen densidades de fibrinogeno de 23, 35, 47, y 70 mg/cc se prepararon a partir de soluciones de fibrinogeno que tienen una concentracion de fibrinogeno de 23, 35, 47, y 70 mg/ml, respectivamente, en la manera descrita anteriormente. Brevemente, 4 ml de fibrinogeno de la solucion se diluyo a una concentracion de fibrinogeno de 23, 35, 47 mg/ml con DDW, como se describe anteriormente. El volumen total de cada solucion de fibrinogeno diluido y una muestra de 4 ml de solucion madre de fibrinogeno no diluida se liofilizaron de acuerdo con el ciclo de liofilizacion descrito en la Tabla 1. Los viales que contienen "tortas" liofilizadas no se taparon ni se sellaron en condiciones de baja presion al final del ciclo de liofilizacion. Las "tortas" de baja densidad obtenidas se insertaron en el barril de una jeringa de 12 ml como se ha descrito anteriormente junto con 4 esferas de acero inoxidable. Dos esferas de acero inoxidable diferentes se utilizaron en este experimento: una esfera de 4 mm de diametro (con un peso de 260 mg) y un diametro de 6,4 mm.

[0176] La jeringa de 12 ml se conecto a un primer punto de conexion de una llave de paso de tres vfas (Medipharm, Reino Unido), una jeringa de 5 ml (TERUMO, Belgica) que contema 4,35 ml de DDW desgasificado (preparado como se ha descrito anteriormente) se conecto al segundo punto de conexion de la llave de paso, y una bomba de vacm (KNF Neuberger, Alemania) se conecto con un manometro de vacfo (Fisher Scientific, EE.UU.) para el tercer punto de conexion.

[0177] Despues, las "tortas" de baja densidad se sometieron a un nivel de presion de 25 mbar. Para ello, la llave de paso de tres vfas se establecio para permitir la comunicacion de fluido entre la jeringa de la celebracion de la "torta” liofilizada y la bomba de vacm, y el embolo de la jeringa que sostiene la "torta" se fija en su lugar en la parte superior del barril de jeringa por un espaciador como se describe anteriormente. Despues el aire se extrae de la jeringa que sostiene la "torta" liofilizada por la bomba de vacm hasta que se alcanzo una presion de 25 mbar. Tras la extraccion del aire, la llave de paso de tres vfas se establecio para permitir la comunicacion de fluido desde la jeringa que contiene el DDW desgasificado a la jeringa que contiene la "torta" liofilizada para obtener una solucion que comprende fibrinogeno parcialmente disuelto. El espaciador de aluminio se retiro, dando como resultado el equilibrio de la presion dentro de la jeringa que contiene la solucion con la presion atmosferica sin introducir aire en la jeringa. Treinta segundos despues de la introduccion del DDW desgasificado a la "torta", la jeringa que contiene la solucion que comprende fibrinogeno parcialmente disuelto se desconecto del conjunto de jeringa junto con la llave de paso de tres vfas y se agito manualmente durante 60 segundos que conducen al movimiento de las esferas de acero inoxidable dentro del barril, y proporcionar una solucion que comprende fibrinogeno sustancialmente completamente disuelto. El tiempo desde la introduccion del DDW desgasificado hasta el final de la etapa de agitacion manual era de unos 90 segundos.

[0178] A continuacion, la llave de paso de tres vfas se conecto a un filtro de 20 pm, y la solucion que comprende fibrinogeno sustancialmente completamente disuelto se filtro para separar cualquier material sin disolver de la solucion. Se determino el porcentaje de disolucion de protema como se describio anteriormente. Se inspecciono visualmente la presencia de espuma.

[0179] El experimento se llevo a cabo por triplicado para cada grupo de prueba. Los resultados se muestran en la Tabla 5.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Tabla 5

Disolucion de protema +SD (%)

Densidad de fibrinogeno dentro de la "torta” liofilizada

Diametro de la esfera (mm)

(mg/cc)

4 6,4

70

58+8 65+18

47

90+4 100+3

35

83+3 103+3

23

92+5 97+3

[0180] Se puede ver que se obtuvo la disolucion completa de la protema dentro de un corto peiiodo de tiempo de 90 segundos mediante la disolucion de una "torta” liofilizada que tiene una densidad baja de fibrinogeno (por ejemplo, igual o inferior a 47 mg/cc) a una presion baja de 25 mbar, seguido de equilibrado a la presion atmosferica y sin introduccion de aire, y mediante la agitacion manual de la solucion con grandes esferas por ejemplo, que tiene un diametro de 6,4 mm. No se observo ninguna cantidad significativa de espuma en cualquiera de los grupos examinados.

[0181] En comparacion, en el Ejemplo 1 que examina el efecto de la densidad de protemas dentro de la "torta” liofilizada en el nivel de la disolucion de protema, la disolucion completa de protemas (97,4+9,8%) se obtuvo dentro de los 150 segundos que es alrededor de 1,7-3,4 veces mas largo que el tiempo requerido para la disolucion completa en estos experimentos (45 o 90 segundos).

Claims (18)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   50

   55

   60

   65

   Reivindicaciones

   1. Un metodo para la disolucion de una composicion de fibrinogeno solido en un disolvente acuoso, que comprende:

   i) proporcionar un recipiente cerrado (12) que contiene: un volumen (14) de la composicion de fibrinogeno solido y un espacio de cabeza (16), en el que la presion dentro del espacio de cabeza es una presion inferior a la atmosferica;

   ii) mientras que se mantiene la presion interna en el espacio de cabeza a presion sub-atmosferica, introduciendo en el recipiente (12) un volumen del disolvente acuoso que es menor que el volumen de la composicion de fibrinogeno solido para formar una solucion que comprende al menos 40 mg de fibrinogeno/ml;

   iii) posterior a ii), disminuyendo el tamano del espacio de cabeza (16) en el recipiente (12), sin permitir la entrada de aire en el recipiente hasta que la presion en el espacio superior sea igual a la presion atmosferica; y

   iv) agitar la solucion,

   en el que el disolvente acuoso esta contenido dentro de un deposito (42), en el que el recipiente (12) y el deposito (42) estan en comunicacion mutua de fluido, y en el que la agitacion comprende transferir repetidamente el disolvente acuoso entre el recipiente (12) y el deposito (42).
2. 2. El metodo segun la reivindicacion 1, en el que la composicion de fibrinogeno solido es una torta liofilizada.
3. 3. El metodo segun la reivindicacion 1 o 2, en el que la densidad de fibrinogeno en la composicion de fibrinogeno solido esta en el intervalo de al menos 5 a menor que 63 mg/cc, preferiblemente en el que la densidad de fibrinogeno es no mas de 23 mg/cc.
4. 4. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la concentracion de fibrinogeno en la solucion obtenida es de 40 mg/ml a 120 mg/ml.
5. 5. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el disolvente acuoso es un disolvente acuoso desgasificado.
6. 6. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que la presion interna en el espacio de cabeza (16) en la etapa i) es no mas de 500 mbar, preferiblemente no mas de 0,12 mbar.
7. 7. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, cuando se permite que discurra un intervalo de tiempo de al menos 5 segundos, preferiblemente al menos 20 segundos, entre la finalizacion de la etapa ii) y el inicio de la etapa iii).
8. 8. El metodo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, que comprende ademas la incubacion de la solucion en el recipiente (12), preferiblemente en el que la incubacion se lleva a cabo durante no mas de 2 minutos.
9. 9. Un dispositivo (10, 30, 50) adecuado para la disolucion de una composicion solida en un disolvente acuoso, comprendiendo el dispositivo:

   un primer recipiente cerrado (12a) adecuado para la sujecion de una primera composicion solida, incluyendo el primer recipiente cerrado una primera entrada de recipiente cerrado (18a) que tiene un estado cerrado y un estado abierto, en el que en el estado cerrado la primera entrada de recipiente cerrado se sella al paso de fluido y en el estado abierto la primera entrada de recipiente cerrado proporciona una trayectoria para la comunicacion de fluido en el primer recipiente cerrado;

   un primer elemento de cierre movil (22a) dispuesto dentro del primer recipiente cerrado, para sellar el primer recipiente cerrado y configurado para mantener el sellado del primer recipiente cerrado mientras que se mueve en el mismo entre al menos una primera y una segunda posicion dentro del primer recipiente cerrado, para disminuir el volumen interno del primer recipiente cerrado; un elemento de sujecion (24) configurado para sostener de forma liberable el primer elemento de cierre movil en una primera posicion dentro del primer recipiente cerrado;

   un primer controlador (20a) para controlar el cambio de la primera entrada de recipiente cerrado entre un estado cerrado y un estado abierto;

   un primer deposito (42a) adecuado para contener un primer disolvente acuoso, el primer deposito que comprende una primera salida de deposito (46a) adaptada para estar en comunicacion de fluido con la primera entrada de recipiente cerrado; y

   un segundo elemento de sellado movil (22b) dispuesto dentro del primer deposito configurado para mantener el sellado del primer deposito,

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   en el que cuando la primera entrada de recipiente cerrado esta en un estado cerrado mientras que el primer elemento de sellado movil esta en la segunda posicion, y, posteriormente, el primer elemento de cierre movil se mueve a la primera posicion y el primer elemento de retencion sostiene el primer elemento de cierre movil, un espacio de cabeza (l6) que tiene una presion sub-atmosferica; o

   en el que el dispositivo esta provisto con el recipiente cerrado que contiene, ademas, un espacio de cabeza (16) con una presion inferior a la atmosferica; una entrada de recipiente cerrado; y el elemento de sujecion que sostiene el primer elemento de cierre movil en la primera posicion, en el que el primer recipiente cerrado (12a) y el primer deposito (42a) estan configurados para permitir la agitacion por transferencia repetida del disolvente acuoso entre el primer deposito y el primer recipiente cerrado,

   caracterizado porque el dispositivo esta configurado de tal manera que la presion en el espacio de cabeza (16) se mantiene a un nivel subatmosferico despues de permitir que el disolvente acuoso fluya en el volumen interior del primer recipiente cerrado (12a).
10. 10. El dispositivo segun la reivindicacion 9, en el que la primera entrada de recipiente cerrado (18a) esta en una posicion abierta y en el que cuando el elemento de retencion (24) libera el primer elemento de sellado movil (22a), el primer elemento movil de sellado se mueve desde una primera a una segunda posicion dentro del primer recipiente cerrado (12a), disminuyendo asf el volumen interno del primer recipiente cerrado, en el que se aumenta la presion interna dentro del primer recipiente cerrado.
11. 11. El dispositivo segun la reivindicacion 9 o 10, en el que el primer recipiente cerrado (12a) comprende un primer barril de jeringa (32a) que tiene un extremo anterior (34) y un extremo posterior (36), donde el extremo anterior comprende la primera entrada de recipiente cerrado, y en el que el primer elemento de sellado movil (22a) comprende un primer piston dispuesto dentro del primer barril de jeringa de manera deslizante desplazable desde el extremo posterior hacia el extremo anterior del primer barril de jeringa y conectado a un primer vastago de piston (40a); y opcionalmente en el que el primer deposito comprende un segundo barril de jeringa (44a) que tiene un extremo anterior (34) y un extremo posterior (36), en el que el extremo anterior comprende la primera salida de deposito (46a) y el segundo elemento de sellado movil (22b) comprende un segundo piston dispuesto dentro del segundo barril de jeringa de manera deslizante desplazable desde el extremo posterior hacia el extremo anterior del segundo barril de jeringa y conectado a un segundo vastago de piston (40b).
12. 12. El dispositivo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 9 a 11, que comprende ademas:

    un segundo recipiente cerrado (12b) adecuado para la sujecion de una segunda composicion solida, el segundo recipiente cerrado que incluye una segunda entrada de recipiente cerrado (18b) que tiene un estado cerrado y un estado abierto, en el que en el estado cerrado el segundo recipiente cerrado se sella al paso de fluido y en el estado abierto de la segunda entrada de recipiente cerrado proporciona una trayectoria para la comunicacion de fluido en el segundo recipiente cerrado;

    un tercer elemento de cierre movil (22c) dispuesto dentro del segundo recipiente cerrado, para sellar el segundo recipiente cerrado y configurado para mantener el sellado del segundo recipiente cerrado mientras que se mueve en el mismo entre al menos una primera y una segunda posicion dentro del segundo recipiente cerrado, para disminuir el volumen interno del segundo recipiente cerrado;

    un elemento de sujecion (24) configurado para sostener de forma liberable el tercer elemento de estanqueidad movil en una primera posicion dentro del segundo recipiente cerrado;

    un segundo controlador (20b) para controlar el cambio de la segunda entrada de recipiente cerrado entre un estado cerrado y un estado abierto; y

    opcionalmente que comprende ademas un segundo deposito (42b) adecuado para contener un segundo disolvente acuoso y un cuarto elemento de sellado movil (22d) dispuesto dentro del segundo deposito configurado para mantener el sellado del segundo deposito, el segundo deposito que comprende una segunda salida de deposito (46b) adaptada para estar en comunicacion fluida con la segunda entrada de recipiente cerrado (18b),

    en el que el dispositivo esta provisto del segundo recipiente cerrado que contiene, ademas, un espacio de cabeza (16) con una presion subatmosferica; una entrada de recipiente cerrado (18b); y el elemento de sujecion que sostiene el tercer elemento de cierre movil en la primera posicion; o cuando la segunda entrada de recipiente cerrado esta en un estado cerrado mientras que el tercer elemento de estanqueidad movil esta en la segunda posicion, y, posteriormente, el tercer elemento de cierre movil se mueve a la primera posicion y el elemento de sujecion mantiene el tercer elemento de cierre movil, formandose un espacio de cabeza (16) que tiene una presion sub-atmosferica.
13. 13. El dispositivo segun la reivindicacion 12, en donde:

    el primer recipiente cerrado (12a) es un primer barril de jeringa (32a) que tiene un extremo anterior (34) y un extremo posterior (36), en el que el extremo anterior del primer barril de jeringa comprende la primera entrada de recipiente cerrado (18a) y en donde el primer elemento de sellado movil (22a) del primer recipiente cerrado comprende un primer piston dispuesto dentro del primer barril de jeringa de manera deslizante desplazable

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    desde el extremo posterior hacia el extremo anterior del primer barril de jeringa;

    en el que el primer deposito (42a) comprende un segundo barril de jeringa (44a) que tiene un extremo anterior y un extremo posterior, en el que el extremo anterior del segundo barril de jeringa comprende la primera salida de deposito (46a) y en el que el segundo elemento de sellado movil comprende un segundo piston dispuesto dentro del segundo barril de jeringa de manera deslizante desplazable desde el extremo posterior hacia el extremo anterior del segundo barril de jeringa;

    en el que el segundo recipiente cerrado (12b) es un tercer barril de jeringa (32b) que tiene un extremo anterior y un extremo posterior, en el que el extremo anterior del tercer barril de jeringa comprende la segunda entrada de recipiente cerrado (18b) y en el que el tercer elemento de sellado movible (22c) comprende un tercer embolo dispuesto dentro del tercer barril de jeringa de manera deslizante desplazable desde el extremo posterior hacia el extremo anterior del tercer barril de jeringa y conectado a un vastago de tercer piston (40c); y en el que el segundo deposito (42b) comprende un cuarto barril de jeringa (44b) que tiene un extremo anterior y un extremo posterior, en el que el extremo anterior del cuarto barril de jeringa comprende la segunda salida del deposito (46b) y en el que el cuarto elemento de sellado movil (22d) comprende un cuarto piston dispuesto dentro del cuarto barril de jeringa de manera deslizante desplazable desde el extremo posterior hacia el extremo anterior del cuarto barril de jeringa y conectado a un cuarto vastago de piston (40d).
14. 14. El dispositivo segun la reivindicacion 12 o 13, que comprende ademas una carcasa (64, 66) para contener el primer y el segundo recipiente cerrado y/o el primero y el segundo deposito.
15. 15. El dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 14, en el que el primer recipiente cerrado contiene una composicion solida que comprende fibrinogeno solido.
16. 16. El dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 12 a 15, en el que el segundo recipiente cerrado contiene una composicion solida que comprende trombina solida.
17. 17. El dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 11 a 16, en el que el primer piston esta unido a un vastago de piston que tiene al menos un rebaje (70), y el elemento de sujecion (24) comprende al menos un saliente (72) configurado para acoplarse dentro del rebaje.
18. 18. El dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 9 a 17, comprendiendo ademas un actuador controlador (38), el cual, cuando se actue, hace que el primer controlador (20a) se mueva desde el estado cerrado al estado abierto.