ES2916825T3

ES2916825T3 - Procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica

Info

Publication number: ES2916825T3
Application number: ES15701164T
Authority: ES
Inventors: Xavier Payet-Burin
Original assignee: UCB Biopharma SRL
Current assignee: UCB Biopharma SRL
Priority date: 2014-01-20
Filing date: 2015-01-20
Publication date: 2022-07-06
Anticipated expiration: 2035-01-20
Also published as: MX2016009347A; EP3096743B1; CN106163501B; CL2016001801A1; RU2016133973A; JP2017505339A; US10376467B2; AU2015207464A1; WO2015107214A1; AU2015207464B2; CN106163501A; CA2936721A1; CA2936721C; SG11201605862WA; IL246619A0; KR102325240B1; BR112016016690A2; JP6397933B2; RU2016133973A3; EP3096743A1

Abstract

La invención se refiere a un proceso para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica, que comprende los siguientes pasos sucesivos: (i) proporcionar la forma sólida de la composición farmacéutica en un recipiente sellado, siendo la presión dentro del recipiente una presión inicial (pi ,) comprendida entre 0,5 Pa y 1,2x105 Pa; (ii) en un primer momento (t0) introducir el disolvente en dicho recipiente sellado y mantener la presión resultante (pr) dentro del recipiente durante un tiempo controlado Δt1; y (iii) en un segundo momento (t2) aumentar la presión dentro del recipiente hasta una presión controlada (p2) superior a dicha presión resultante (pr) hasta la completa reconstitución. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica

Campo de la invención

La invención se refiere a un procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica.

Antecedentes de la invención

Determinados tipos de principios farmacéuticamente activos no pueden administrarse por vía oral debido a posteriores alteraciones por el sistema digestivo y, de esta manera, generalmente se administran por vía parenteral, por ejemplo, por vía intravenosa o subcutánea. En dicho caso, dichos principios farmacéuticamente activos deben administrarse en forma líquida. Lo anterior es particularmente el caso para anticuerpos y otras proteínas que son moléculas grandes y complejas, así como para determinadas entidades químicas. Sin embargo, los anticuerpos y otros principios farmacéuticamente activos de gran tamaño frecuentemente presentan una baja estabilidad en medio acuoso, lo que puede reducir el tiempo de almacenamiento de la composición farmacéutica hasta un valor inaceptable.

Por lo tanto, puede resultar más ventajosa en términos de estabilidad, almacenamiento y facilidad de transporte la preparación de una forma sólida de la composición farmacéutica que pueda reconstituirse con un solvente poco después de su administración en el paciente. Las formas sólidas de composiciones farmacéuticas que deben administrarse en forma líquida, por ejemplo, mediante inyección, necesitan disolverse extemporáneamente mediante la utilización de una composición de solvente aceptable a fin de producir una solución para inyección. Entre las formas sólidas de composiciones farmacéuticas se incluyen los polvos, las composiciones secadas por congelación (o liofilizadas), secadas por pulverización, secadas por pulverización-congelación, secadas al vacío o las composiciones secadas con fluidos supercríticos.

Las etapas de reconstitución pueden ser realizadas por el paciente, un pariente, un enfermero o un profesional sanitario, según la complejidad del procedimiento de reconstitución. Típicamente resulta preferido utilizar procedimientos de reconstitución que sean relativamente simples, reproducibles y que, por lo tanto, no requieran la presencia de un profesional sanitario. Lo anterior resulta particularmente cierto en casos de tratamiento de enfermedades crónicas.

Aunque dicha reconstitución puede ser sencilla y de tan solo unos pocos segundos para algunas composiciones específicas, puede requerir hasta decenas de minutos reconstituir algunas otras composiciones. Los tiempos prolongados de reconstitución que implican series complicadas de etapas con frecuencia conducen a un menor cumplimiento de dichos protocolos, y por lo tanto finalmente pueden resultar en la administración de una dosis incorrecta e incluso afectar potencialmente al resultado del tratamiento.

Dichos sólidos duros y/o de reconstitución prolongada generalmente presentan en común una humectabilidad reducida con respecto al solvente y/o una viscosidad final elevada. Otros problemas frecuentes son la formación de espuma, de burbujas, que crean una corona sobre la superficie de la composición farmacéutica reconstituida, geles o agregados poco humectables que requieren más tiempo y atención para una reconstitución cuidadosa.

Lo anterior es particularmente el caso para las composiciones farmacéuticas que comprenden concentraciones altas de moléculas grandes, tales como, aunque sin limitación, anticuerpos monoclonales, anticuerpos policlonales, determinadas proteínas o polipéptidos recombinantes, hormonas esteroideas y algunas entidades químicas de gran tamaño, tales como antibióticos. Asimismo es el caso cuando la reconstitución se lleva a cabo con un volumen de solvente inferior al originalmente extraído durante el procesamiento para obtener una forma sólida, tal como es una práctica habitual para las formulaciones para inyección, de manera que se minimiza el volumen que debe administrarse.

A este respecto puede hacerse referencia al artículo por Pradip Hiwale et al. [1], que describe factores que afectan al tiempo de reconstitución de los polvos secos para inyección y los clasifica como parámetros intrínsecos y extrínsecos.

En cualquier caso, el procedimiento manual más convencional para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica típicamente requiere las etapas siguientes: recuperar el solvente a partir de un primer recipiente, inyectarlo en un segundo recipiente que contiene la forma sólida de la composición farmacéutica, homogeneizar el líquido en el segundo recipiente de manera que esté libre de espuma y/o agregados secos, y sacar la composición farmacéutica reconstituida del segundo recipiente para la administración.

Cada una de las etapas anteriormente indicadas puede requerir la manipulación de varios objetos, incluyendo agujas o pinchos, y la realización de un procedimiento definido.

Dependiendo de las etapas de manipulación aplicadas y de la composición farmacéutica, el procedimiento de reconstitución puede conducir a un tiempo de reconstitución prolongado, a la presencia de grumos secos o zonas de gel a los que prácticamente no puede llegar el solvente, a la presencia de burbujas de aire atrapadas o la formación de espumas, sea en el volumen completo o limitadas únicamente a un anillo en la interfase aire/líquido, y/o a grandes variaciones en los tiempos de reconstitución; cada uno de estos fenómenos puede resultar inaceptable para la reconstitución de la composición farmacéutica.

Con el fin de garantizar la reconstitución correcta y reducir las desviaciones entre usuarios respecto a la reconstitución de las composiciones farmacéuticas, los fabricantes farmacéuticos proporcionan a los usuarios un prospecto de "Instrucciones de utilización" para guiarles en el procedimiento de reconstitución.

En la mayoría de casos, el procedimiento incluye una fase común de transferencia de solventes, y para la homogeneización se llevan a cabo varias etapas intercaladas de agitación/movimientos circulares y sedimentación para humectar el sólido y observación de la rehidratación hasta conseguir la disolución completa, antes de la retirada final. Puede incluir recomendaciones de operaciones "que deben hacerse" o "que no deben hacerse".

Además, los fabricantes farmacéuticos pueden recomendar una formación para el usuario, puede ser un profesional o un paciente, o un pariente, o incluso limitar la reconstitución a profesionales.

Para algunas composiciones farmacéuticas liofilizadas, el tiempo para la reconstitución completa puede ser de hasta 30 minutos.

El documento US 2011/0155620 describe que la presión de alto vacío o de vacío intermedio (por ejemplo, 100 Pa a 6x104 Pa) en viales llenos con los polvos de una composición farmacéutica ayuda a estabilizarla durante el almacenamiento, facilita la extracción del solvente durante la reconstitución, muestra claramente la integridad del cierre del recipiente, posiblemente acelera el procedimiento de reconstitución y limita la producción de espuma.

El documento WO 00/07539 enseña que puede reducirse la producción de espuma mediante la ecualización de la presión dentro del recipiente con la presión atmosférica antes de introducir el solvente en el mismo; de esta manera, el solvente entra en el recipiente con menos fuerza y a menor velocidad.

Sin embargo, a pesar de las técnicas anteriormente indicadas, se considera que la reconstitución de composiciones farmacéuticas para la administración sigue siendo un reto, con respecto al tiempo, aunque asimismo con respecto a otras características. Por lo tanto, sigue existiendo una necesidad en la técnica de mejorar adicionalmente los procedimientos de reconstitución para las formas sólidas de composiciones farmacéuticas.

Breve descripción de la invención

Un objetivo de la invención es proporcionar un procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica que es más sencillo que los procedimientos conocidos de la técnica, que permite reconstituir en un tiempo reducido, de una manera más reproducible, y que limita la presencia de sólidos insolubles o gel, y/o burbujas, en la composición líquida después de la reconstitución.

Con ese fin, la invención proporciona un procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica, que comprende las etapas sucesivas siguientes:

(i) proporcionar la forma sólida de la composición farmacéutica en un recipiente sellado, en el que la presión dentro del recipiente es una presión inicial pi comprendida entre 0.5 Pa y 1.2x105 Pa,

(ii) en un primer punto temporal, introducir un solvente en dicho recipiente sellado de manera que la presión dentro del recipiente se incremente desde la presión inicial pi hasta una presión resultante pr, y mantener la presión resultante pr en el interior del recipiente durante un tiempo controlado At-i, en el que el tiempo controlado At¹está comprendido entre 1 segundo y 2 minutos, dependiendo de la composición farmacéutica, y se inicia a partir del final de la adición del solvente al recipiente sellado, y

(iii) en un segundo punto temporal t², incrementar la presión dentro del recipiente hasta una presión controlada superior a dicha presión resultante pr hasta la reconstitución completa.

Según una forma de realización, el procedimiento comprende, después de la etapa (ii) y/o después de la etapa (iii), mezclar el solvente y la composición farmacéutica.

Según una forma de realización, dicha mezcla se lleva a cabo mediante recirculación de fluidos del solvente y la composición farmacéutica y/o mediante mezcla mecánica.

Según una forma de realización, dicha mezcla mecánica del solvente y la composición farmacéutica se lleva a cabo haciendo girar el recipiente con el recipiente inclinado con respecto a la posición vertical.

Antes de la etapa (i), puede ajustarse la presión dentro del recipiente a dicha presión inicial pi.

Según una forma de realización, la presión inicial pi en el recipiente es de entre 0.5 Pa y 5x104 Pa.

Según una forma de realización, la presión p²fijada en el recipiente en la etapa (iii) es de entre 1*104 Pa y 1.5*10® Pa.

Según una forma de realización, la forma sólida de la composición farmacéutica es una forma liofilizada de la composición farmacéutica.

Alternativamente, la forma sólida de la composición farmacéutica pueden ser unos polvos.

Según una forma de realización, se introduce el solvente en el recipiente en forma de un chorro dirigido a la forma sólida de la composición farmacéutica.

El procedimiento puede comprender, además, una etapa adicional (iv) en la que, tras alcanzar la presión controlada p²en la etapa (iii), la presión dentro del recipiente se incrementa adicionalmente antes de una reconstitución completa.

El procedimiento puede comprender además una etapa adicional (v) en la que, tras alcanzar la presión controlada p²en la etapa (iii), el recipiente se somete a múltiples ciclos de presión antes de una reconstitución completa. Según una forma de realización, la presión inicial (pi) dentro del recipiente en la etapa (i) es de entre 0 y 6*104 Pa y el tiempo controlado Ati en la etapa (ii) es de entre 10 segundos y 2 minutos. El procedimiento comprende, después de la etapa (iii), una etapa de mezcla del solvente y la composición farmacéutica mediante recirculación de fluidos y/o mezcla mecánica.

Breve descripción de los dibujos

Otras características y ventajas de la invención resultarán evidentes a partir de la descripción detallada a continuación, basada en los dibujos adjuntos, en los que:

• las figuras 1A a 1C ilustran esquemáticamente la configuración utilizada para producir los resultados del ejemplo 1.

• Las figuras 2A a 2D ilustran diferentes formas de realización del procedimiento según la presente invención, en las que el eje x representa el tiempo y el eje y representa la presión dentro del recipiente que comprende la composición farmacéutica. Debe señalarse que, aunque dichos gráficos se dibujan con segmentos lineales, la variación de la presión puede ser no lineal, especialmente durante las transiciones entre las diferentes presiones durante la reconstitución.

o La figura 2A ilustra un ejemplo de marco temporal para un procedimiento de reconstitución según una forma de realización de la invención.

El procedimiento de reconstitución se considera que se inicia en el tiempo tü, que corresponde al inicio de la adición del solvente al recipiente.

Inmediatamente antes de la introducción del solvente, la presión dentro del recipiente es la presión inicial pi.

Dicha presión puede ser la presión dentro del recipiente durante su almacenamiento previo, denominada presión de almacenamiento pa.

Alternativamente, tal como se ilustra en la figura 2B, la presión dentro del recipiente durante el almacenamiento puede ser una presión pa diferente (superior o inferior) a pi, y la presión se fija en pi un corto tiempo antes de iniciar el procedimiento de reconstitución.

La introducción del solvente en el recipiente presenta el efecto de modificar ligeramente la presión; de esta manera, la presión resultante se denomina pn

Dicha presión resultante no necesita cuantificarse con precisión; sin embargo, la presión resultante pr debe mantenerse durante un tiempo predefinido At|.

En un tiempo definido t²que corresponde a to At-i, que es un tiempo en que todavía no se ha completado la reconstitución, la presión dentro del recipiente se incrementa hasta una presión p²que es superior a pi y pn

La presión dentro del recipiente se mantiene a la presión p²hasta que se observa una reconstitución completa (tiempo trec). Después del tiempo trec, la composición reconstituida puede recuperarse a partir del recipiente.

o La figura 2B ilustra un ejemplo de marco temporal para un procedimiento de reconstitución según otra forma de realización de la invención.

En comparación con el procedimiento de la figura 2A, el procedimiento de la figura 2B comprende una etapa adicional de incremento adicional de la presión dentro del recipiente hasta una presión p³, después de un tiempo definido a p²y antes de que se observe una reconstitución completa de la composición farmacéutica.

o La figura 2C ilustra un ejemplo de un marco temporal para un procedimiento de reconstitución que comprende, después de aplicar la presión p²y antes de aplicar la presión p³, ciclos de presión que comprenden sucesivos incrementos y decrementos de la presión.

o La figura 2D ilustra una variación del marco temporal mostrado en la figura 2C que comprende únicamente una reducción de la presión desde la presión p²seguido de un incremento de la presión hasta la presión p³.

• La figura 3 ilustra los tiempos de reconstitución de una formulación liofilizada de un fragmento PEGilado de un anticuerpo (certolizumab pegol) con agua para inyectables (API) como función del tiempo durante el que se mantiene la presión resultante en el recipiente después de la adición de API.

• Las figuras 4A a 4E ilustran, para diferentes presiones iniciales dentro del recipiente, los tiempos de reconstitución de una formulación liofilizada de un fragmento PEGilado de un anticuerpo (certolizumab pegol) con API como función del tiempo durante el que se mantiene la presión resultante en el recipiente después de la adición de API.

• La figura 5 ilustra una comparación entre el tiempo de reconstitución de una formulación liofilizada de un fragmento PEGilado de un anticuerpo (certolizumab pegol) con API:

(a) un procedimiento de reconstitución según la invención se describe en el ejemplo 3,

(b) un procedimiento de reconstitución en el que se mantiene el vacío resultante durante la adición del solvente y la agitación mediante movimientos circulares que la reconstitución es completa, según el documento US 2011/155620,

(c) un procedimiento de reconstitución de acuerdo con las instrucciones de utilización proporcionadas en el envase.

• La figura 6A muestra los tres viales de certolizumab pegol (Cimzia®) antes de la reconstitución. A continuación, se reconstituyeron los viales de acuerdo con los tres procedimientos de reconstitución descritos en la figura 5: (a) -vial izquierdo-, (b) -vial central-, (c) -vial derecho-.

• Las figuras 6B, 6D, 6D, 6E y 6F ilustran los aspectos visuales del contenido de los viales en diferentes tiempos durante el procedimiento de reconstitución según el procedimiento (a) -vial izquierdo-, (b) -vial central- y (c) -vial derecho- tal como se indica en la figura 5.

Descripción detallada de la invención

Los problemas identificados en la sección de antecedentes han sido resueltos en la presente memoria mediante la provisión de un nuevo procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica.

De esta manera, en una primera forma de realización, la presente invención se refiere a un procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica, que comprende las etapas sucesivas siguientes:

(ii) en un primer punto temporal, añadir un solvente a dicho recipiente sellado de manera que la presión dentro del recipiente se incremente desde la presión inicial pi hasta una presión resultante pr, y mantener la presión resultante pr en el interior del recipiente durante un tiempo controlado At-i, en el que el tiempo controlado Ati está comprendido entre 1 segundo y 2 minutos, dependiendo de la composición farmacéutica, y se inicia a partir del final de la adición del solvente en el recipiente sellado, y

(iii) en un segundo punto temporal t², incrementar la presión dentro del recipiente hasta una presión controlada p²superior a dicha presión resultante pr hasta una reconstitución completa.

Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "reconstitución" o "reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica" se refiere a convertir la forma sólida de la composición farmacéutica en un estado líquido mediante la adición de un solvente.

Tal como se utiliza en la presente memoria, "tiempo de reconstitución" se refiere al tiempo requerido para que la composición farmacéutica experimente la reconstitución con el solvente, tal como se ha definido anteriormente.

Tal como se utiliza en la presente memoria, la expresión "forma sólida" de una composición farmacéutica es: unos polvos, una composición secada por pulverización o una composición liofilizada (o secada por congelación).

Tal como se utiliza en la presente memoria, "reconstitución completa" se refiere a un estado en el que el 90%, o alternativamente 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5% o 99.9% de la composición farmacéutica en el recipiente se encuentra en estado líquido.

Tal como se utiliza en la presente memoria, "recipiente" se refiere a un elemento utilizado para contener, almacenar, transportar o de otro modo desechar la composición farmacéutica. Un tipo de recipiente ampliamente utilizado en la industria farmacéutica es un vial, aunque el experto en la materia podrá proporcionar otros medios adecuados para dichos fines.

Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "solvente" es una sustancia que disuelve un soluto, dando como resultado una solución. Entre los solventes adecuados se incluyen, por ejemplo, agua para inyectables (API), que es ampliamente utilizada para reconstituir composiciones farmacéuticas. Sin embargo, el solvente puede comprender soluciones tamponadas adecuadas que se utilizan habitualmente para soluciones inyectables, tales como, aunque sin limitarse a ellas, tampones de fosfato, histidina, acetato, citrato, succinato o lactato. En otros casos, puede no resultar necesario un tampón, y asimismo son solventes habituales en la técnica, solución salina, o por ejemplo, solución de dextrosa al 5%, solución salina normal y agua bacteriostática.

Generalmente, el recipiente que contiene la forma sólida de una composición farmacéutica está cerrado herméticamente para mantener la esterilidad de la composición farmacéutica durante el almacenamiento o el transporte. Por ejemplo, un vial con frecuencia se cierra con un septo y se sella con un engaste. En una forma de realización de la invención, el solvente para reconstituir la composición farmacéutica se inyecta con una aguja o pincho que perfora el septo. Alternativamente, asimismo puede utilizarse cualquier otra manera de añadir el solvente sin afectar sustancialmente a la presión dentro del recipiente, tal como adaptadores de viales y/o adaptadores de jeringa combinados, incluyendo llaves de paso o válvulas apropiadas, u otros medios conocidos por el experto en la materia.

Según una forma de realización particular, la presión inicial pi es de entre 0.5 Pa y 1.2*105 Pa. Alternativamente, pi es una presión de entre 5*103 Pa y 1*105 Pa, de entre 1*104 Pa y 8*104 Pa, de entre 2*104 Pa y 7*104 Pa, de entre 3*104 Pa y 6*104 Pa o de entre 4*104 Pa y 5*104 Pa. Por ejemplo, en el caso de que la forma sólida sea una composición liofilizada, puede obtenerse mediante liofilización y la presión dentro del recipiente puede haberse fijado a una presión dada en vista del almacenamiento de la composición liofilizada. Dicha presión puede resultar adecuada para iniciar el procedimiento de la invención. Por lo tanto, en una forma de realización particular de la invención, pi está comprendida entre 0.5 Pa y 2*104 Pa, alternativamente entre 0.5 Pa y 1*104 Pa, entre 10 Pa y 1*104 Pa, entre 100 Pa y 1*104 Pa, entre 100 Pa y 1*103 Pa, entre 100 Pa y 5*103 Pa o entre 2*103 Pa y 1*104 Pa o entre 5*103 Pa y 1*104 Pa. En otras ocasiones, el recipiente puede configurarse a una presión más alta o más baja, por lo tanto, en otra forma de realización pi es una presión de entre 3*104 Pa y 6*104 Pa, alternativamente de entre 4*104 Pa y 5.5*104 Pa, o de entre 4.75*104 Pa y 5.5*104 Pa.

Alternativamente, la presión pa dentro del recipiente durante su almacenamiento puede ser diferente de la presión inicial pi deseada para la primera etapa del procedimiento de reconstitución. Por lo tanto, en una forma de realización adicional de la invención, la presión dentro del recipiente se fija en la presión inicial pi, antes de iniciar el procedimiento de reconstitución. La presión dentro del recipiente puede fijarse, por ejemplo, mediante succión o mediante inyección de un volumen de aire en el recipiente.

La invención no se encuentra limitada a una presión inicial pi que sea inferior a la presión atmosférica (es decir, aproximadamente 1x105 Pa), sino que asimismo puede aplicarse a una composición farmacéutica sólida en un recipiente en el que la presión inicial es la atmosférica o superior a 1x105 Pa.

Como resultado de la introducción de un determinado volumen de solvente en el recipiente, la presión dentro del recipiente puede variar ligeramente. En particular, debido a que se reduce el volumen de gas, la presión resultante pr tiende a incrementarse con respecto a pi y la desgasificación potencial de dicho solvente introducido puede ella misma incrementar adicionalmente la presión resultante con respecto a pi.

Dicha presión resultante pr se mantiene dentro del recipiente durante un tiempo determinado At-i.

Lo anterior requiere mantener un sellado hermético del recipiente durante la introducción del solvente.

Según una forma de realización particular, se añade el solvente al recipiente en forma de un chorro dirigido a la forma sólida de la composición farmacéutica.

Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "chorro" se refiere a una corriente rápida de líquido forzada hacia el exterior de una pequeña abertura, tal como, aunque sin limitación, una abertura para aguja o pincho. Según otra forma de realización particular, se añade el solvente en forma de un chorro dirigido a la pared del recipiente.

La presión resultante pr se mantiene durante un tiempo definido Ati después de la introducción del solvente, según cada composición farmacéutica.

En una forma de realización específica de la invención, Ati es de entre 1 segundo y 2 minutos, alternativamente de entre 2 segundos y 1.5 minutos o de entre 1 segundo y 1 minuto, alternativamente de entre 1 segundo y 50 segundos, alternativamente de entre 15 y 45 segundos, alternativamente de entre 20 y 40 segundos, o de entre 20 y 30 segundos.

Existe un tiempo óptimo At¹, que depende de la composición farmacéutica, que permite llevar solvente a las partes del sólido que todavía están secas y/o reducir el volumen de aire atrapado, incluyendo burbujas debidas al incremento de la presión relativa.

Por lo tanto, en una forma de realización particular del procedimiento de la invención, el tiempo controlado Ati de la etapa (ii) se determina que corresponde al mínimo de una curva que representa el tiempo total de reconstitución trec en función del tiempo At¹durante el que se mantiene la presión resultante en el recipiente por la introducción del solvente.

Una ventaja del procedimiento de reconstitución según la invención es que, al contrario que los procedimientos de reconstitución conocidos de la técnica, permanece una corona reducida o nula de burbujas en la superficie de la composición farmacéutica después de la reconstitución. Dicha reducción de las burbujas y/o espuma resulta en una recuperación incrementada de composición utilizable a partir del recipiente, requiriendo de esta manera cantidades iniciales inferiores de la composición farmacéutica en forma sólida en el recipiente en el momento de la producción para un objetivo dado de recuperación/dosis.

Después de este tiempo At¹, la presión dentro del recipiente se incrementa hasta una presión p²que es superior a la presión resultante anteriormente indicada pr.

Por ejemplo, en el caso de que la presión pr interna del recipiente tras la adición del solvente sea inferior a la presión atmosférica, la presión p²entonces puede fijarse en la presión atmosférica.

En una forma de realización particular de la presente invención, p²es por lo menos 1.5*p¡.

Por ejemplo, en el caso de que la presión inicial ^p¡ sea en términos generales ligeramente inferior a la presión atmosférica, tal como 0.98*105 Pa, y p²sea 1.5*105 Pa, una sobrepresión muy ligera obtenible con una jeringa, entonces p²excede de 1.5*p¡en la mayoría de situaciones en el paciente (es decir, suponiendo una presión atmosférica local de aproximadamente 1*105 Pa). Alternativamente, en el caso de que la presión inicial ^p¡ sea 0.3*105 Pa y p²sea la presión atmosférica, entonces p²excede de 3*p¡ en la mayoría de situaciones en el paciente (es decir, suponiendo una presión atmosférica local de aproximadamente 1*105 Pa). En otro ejemplo, en el caso de que la presión inicial ^p¡ sea de 100 Pa y p²sea la presión atmosférica, entonces p²es aproximadamente igual a 1000xp¡en la mayoría de situaciones en el paciente (es decir, suponiendo una presión atmosférica local de aproximadamente 1*105 Pa). En todavía otro ejemplo, en el caso de que la presión inicial p¡ sea de 10 Pa, lo que se consigue fácilmente con los recipientes liofilizados farmacéuticos habituales, y p²sea la presión atmosférica, entonces p²excede de 1*104 x p¡ en la mayoría de situaciones en el paciente (es decir, suponiendo una presión atmosférica local de aproximadamente 1*105 Pa).

Dicha presión incrementada p²se mantiene hasta que se consigue una reconstitución completa de la composición farmacéutica en forma sólida.

A continuación, la composición reconstituida puede utilizarse inmediatamente o almacenarse durante un tiempo corto bajo condiciones adecuadas.

Opcionalmente, en otra forma de realización de la invención el procedimiento de reconstitución incluye una etapa adicional de mezcla del solvente y la composición farmacéutica.

Dicha mezcla puede fomentar la reconstitución de la composición farmacéutica con el solvente y puede resultar además en la rotura de burbujas adicionales. Por lo tanto, dicha etapa adicional puede resultar en una reducción adicional del tiempo de reconstitución y/o en la reducción del anillo espumoso en la parte superior y/o en la reducción de las burbujas.

En una forma de realización particular de la invención, dicha mezcla puede llevarse a cabo mediante una recirculación fluídica del solvente y la composición farmacéutica. Dicha recirculación fluídica implica el desplazamiento de fluido mediante succión y descarga de la mezcla en el interior del recipiente. Dicha manera de mezcla resulta eficiente si la viscosidad de la mezcla es baja, tal como inferior a 150 centipoises, inferior a 100 centipoises, inferior a 90 centipoises, inferior a 80, 70 o 60 centipoises, preferentemente inferior a 50 centipoises y/o si las formas sólidas no obstruyen el sistema de recirculación fluídica.

Sin embargo, en el caso de que la viscosidad de la mezcla sea elevada o si existen agregados secos de la forma sólida que dificultan la implementación de dicha recirculación fluídica, por el contrario, puede llevarse a cabo la mezcla de manera eficiente mediante mezcla mecánica, de manera que la mezcla es movida y sometida a cizalla dentro del recipiente por la fuerza de la gravedad, la aceleración o el movimiento de un objeto foráneo introducido dentro del recipiente. Por lo tanto, en una forma de realización alternativa adicional de la invención, la etapa de mezcla de la composición farmacéutica en el solvente se lleva a cabo mediante la mezcla mecánica.

Por ejemplo, la rotación del recipiente en un ángulo inclinado respecto a la posición vertical, o la agitación con movimientos circulares del recipiente, son métodos de mezcla mecánica. La rotación puede ser continua o discontinua.

En una forma de realización adicional de la invención, la etapa de mezcla del solvente y la composición farmacéutica combina la recirculación fluídica y la mezcla mecánica, en la que dicha combinación se lleva a cabo simultáneamente y/o por separado en cualquier orden.

En una forma de realización particular, dicha etapa de mezcla puede llevarse a cabo después de añadir el solvente al recipiente, antes de incrementar la presión a p²dentro del recipiente. Alternativamente, la etapa de mezcla puede llevarse a cabo después de incrementar la presión dentro del recipiente a p². En todavía otra forma de realización particular, la etapa de mezcla puede llevarse a cabo antes y después de incrementar la presión a p².

Tal como apreciará el experto en la materia, las etapas del procedimiento según la invención pueden llevarse a cabo manualmente, o alternativamente el procedimiento asimismo puede llevarse a cabo con ayuda de un dispositivo o sistema automatizado.

En una forma de realización adicional, el procedimiento según cualquiera de las formas de realización de la invención comprende la etapa adicional de incremento adicional de la presión dentro del recipiente hasta una presión p³, después de un tiempo definido a p²y antes de una reconstitución completa de la composición farmacéutica.

En una forma de realización, en el caso de que pi y pr sean inferiores a la presión atmosférica, es decir, 1*105 Pa, y p²sea igual a la presión atmosférica, p³puede ser de entre 1.5*105 Pa y 1.5*10® Pa.

En una forma de realización particular de la presente invención, p³es por lo menos 1.5*p2.

En una forma de realización adicional de la invención, en el procedimiento según cualquiera de las formas de realización de la invención, se aplican ciclos de presión que comprenden sucesivos incrementos y decrementos de presión después de elevar la presión a p²y antes de elevar la presión a p³. Dichos ciclos adicionales de presión permiten la eliminación de la mayor parte de las burbujas y/o espuma remanente.

En una forma de realización adicional de la invención, dichos ciclos de presión se aplican simultáneamente y/o alternativamente con la mezcla. En efecto, las variaciones de presión y la mezcla favorecen la coalescencia y eliminación de las burbujas.

Para ayudar adicionalmente a la comprensión de las diferentes formas de realización del procedimiento según la presente invención, se han incluido las figuras 2A a 2D. Tal como entenderá el experto en la materia, son posibles otros marcos temporales, con la condición de que la presión que resulta de la adición del solvente se mantenga durante un tiempo definido Ati y después se incremente.

En una forma de realización particular de la invención, la composición farmacéutica en forma sólida que debe reconstituirse es una composición liofilizada.

En otra forma de realización, dicha composición farmacéutica en forma sólida comprende una fracción biológica, tal como una proteína recombinante, un anticuerpo o una hormona esteroidea. En una forma de realización particular adicional, dicha fracción biológica comprende un anticuerpo monoclonal, un anticuerpo policlonal o un fragmento de unión a antígeno del mismo.

El término "anticuerpo", o "anticuerpos", tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a anticuerpos monoclonales o policlonales. El término "anticuerpo" o "anticuerpos" tal como se utiliza en la presente memoria incluye, aunque sin limitación, anticuerpos recombinantes que se generan mediante tecnologías recombinantes conocidas de la técnica. El término "anticuerpo" o "anticuerpos" incluye anticuerpos de cualquier especie, en particular de especies de mamífero, tales como anticuerpos humanos de cualquier isotipo, incluyendo IgA1, IgA2, IgD, IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgG4 IgE e IgM, y variantes modificadas de los mismos, anticuerpos de primate no humano, por ejemplo, de chimpancé, babuino, mono Rhesus o mono Cynomolgus; anticuerpos de roedor, por ejemplo de ratón, rata o conejo; anticuerpos de cabra o de caballo; y anticuerpos de camélido (por ejemplo de camellos o llamas, tales como Nanobodies TM) y derivados de los mismos, o de especies de ave, tales como anticuerpos de pollo o de especies de peces, tales como anticuerpos de tiburón. El término "anticuerpo" o "anticuerpos" asimismo se refiere a anticuerpos "quiméricos", en los que una primera parte de por lo menos una secuencia de anticuerpo de cadena pesada y/o ligera es de una primera especie y una segunda parte de la secuencia de anticuerpo de la cadena pesada y/o ligera es de una segunda especie. Entre los anticuerpos quiméricos de interés en la presente memoria se incluyen anticuerpos "primatizados" que comprenden secuencias de unión a antígeno de dominio variable derivadas de un primate no humano (por ejemplo, monos del Viejo Mundo, tales como babuinos, monos Rhesus o monos Cynomolgus) y secuencias de región constante humanas. Los anticuerpos "humanizados" son anticuerpos quiméricos que contienen una secuencia derivada de anticuerpos no humanos. En su mayor parte, los anticuerpos humanizados son anticuerpos humanos (anticuerpo receptor) en los que los residuos de una región hipervariable del receptor se han sustituido por residuos de una región hipervariable [o región determinante de complementariedad (CDR)] de una especie no humano (anticuerpo donante), tal como ratón, rata, conejo, pollo o primate no humano, que presenta la especificidad, afinidad y actividad deseadas. En la mayoría de casos, los residuos del anticuerpo humano (receptor) fuera de la CDR, es decir, en la región marco (FR), se sustituyen adicionalmente por residuos no humanos correspondientes. Además, los anticuerpos humanizados pueden comprender residuos que no se encuentran en el anticuerpo receptor o en el anticuerpo donante. Dichas modificaciones se realizan para refinar adicionalmente el rendimiento del anticuerpo. La humanización reduce la inmunogenicidad de los anticuerpos no humanos en los seres humanos, facilitando de esta manera la aplicación de anticuerpos en el tratamiento de enfermedades humanas. Los anticuerpos humanizados y varias tecnologías diferentes para generarlos son bien conocidos en la técnica. El término "anticuerpo", o "anticuerpos", asimismo se refiere a anticuerpos humanos, los cuales pueden generarse como una alternativa a la humanización. Por ejemplo, es posible producir animales transgénicos (por ejemplo, ratones) que son capaces, tras la inmunización, de producir un repertorio completo de anticuerpos humanos en ausencia de producción de anticuerpos murinos endógenos. Por ejemplo, se ha descrito que la deleción homocigótica del gen de la región de unión (JH) de la cadena pesada del anticuerpo en ratones quiméricos y mutantes de la línea germinal resulta en la inhibición total de la producción endógena de anticuerpos. La transferencia de la matriz génica de inmunoglobulina de línea germinal humana en dichos ratones mutantes de la línea germinal dará como resultado la producción de anticuerpos humanos con especificidad contra un antígeno particular tras la inmunización del animal transgénico portador de los genes de inmunoglobulina de línea germinal humana con dicho antígeno. Las tecnologías para producir dichos animales transgénicos y las tecnologías para aislar y producir los anticuerpos humanos a partir de dichos animales transgénicos son conocidos en la técnica. Alternativamente, en el animal transgénico, por ejemplo, el ratón, solo los genes de inmunoglobulina codificantes de las regiones variables del anticuerpo de ratón son sustituidos por las secuencias génicas de inmunoglobulina variables humanas correspondientes. Los genes de inmunoglobulina de línea germinal de ratón codificantes para las regiones constantes de anticuerpos se mantienen sin cambios. De esta manera, las funciones efectoras de anticuerpo en el sistema inmunitario del ratón transgénico y, en consecuencia, el desarrollo de células B, se mantiene esencialmente sin cambios, lo que puede conducir a una respuesta de anticuerpos mejorada con el reto antigénico in vivo. Una vez han sido aislados los genes codificantes de un anticuerpo particular de interés a partir de dichos animales transgénicos, los genes codificantes de las regiones constantes pueden sustituirse por genes de región constante humana con el fin de obtener un anticuerpo totalmente humano. Otros métodos para obtener anticuerpos/fragmentos de anticuerpo humanos se basan en tecnologías de expresión, tales como la expresión fágica o la tecnología de expresión ribosómica, en las que se utilizan bibliotecas de ADN recombinante que se generan por lo menos en parte artificialmente o a partir de repertorios génicos de dominio variable (V) de inmunoglobulina de donantes. Las técnicas de expresión fágica y ribosómica para generar anticuerpos humanos son bien conocidas en la técnica. Los anticuerpos humanos asimismo pueden generarse a partir de células B humanas aisladas que se inmunizan ex vivo con un antígeno de interés y posteriormente se fusionan para generar hibridomas que a continuación pueden cribarse para la actividad óptima de anticuerpo humano. El término "anticuerpo", o "anticuerpos", tal como se utiliza en la presente memoria se refiere además a un anticuerpo aglucosilado.

El término "anticuerpo", o "anticuerpos", tal como se utiliza en la presente memoria se refiere además a un fragmento de anticuerpo. Un fragmento de un anticuerpo comprende por lo menos un dominio de inmunoglobulina de cadena pesada o ligera tal como se conoce de la técnica y se une a un antígeno. Entre los ejemplos de fragmentos de anticuerpo según la invención se incluyen los fragmentos Fab, Fab', F(ab')², Fv y scFv, así como diacuerpos, triacuerpos, tetracuerpos, minicuerpos, anticuerpos de dominio (dAb), tales como sdAb, fragmentos VH y VNAR, anticuerpos de cadena sencilla, anticuerpos biespecíficos, triespecíficos, tetraespecíficos o multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticuerpos o anticuerpos, incluyendo, aunque sin limitarse a ellos, constructos Fab-Fv o Fab-Fv-Fv. Los fragmentos de anticuerpos tal como se han definido anteriormente son conocidos en la técnica.

En determinadas formas de realización de la presente invención, los anticuerpos son anticuerpos que se modifican mediante unión covalente de fracciones funcionales, tales como polímeros solubles en agua, tales como poli(etilenglicol), copolímeros de poli(etilenglicol) y poli(propilenglicol), carboximetilcelulosa, dextrano, poli(alcohol vinílico), poli(vinilpirrolidona) o poli(prolina), la totalidad de los cuales es conocido que muestra semividas sustancialmente más prolongadas en sangre tras la inyección intravenosa que las proteínas no modificadas correspondientes.

En algunas formas de realización, los anticuerpos de la presente invención son anticuerpos unidos a fracciones funcionales, tal como a fracciones poli(etilenglicol) (PEG). En una forma de realización particular, el anticuerpo es un fragmento de anticuerpo y las moléculas de PEG pueden unirse mediante cualquier cadena lateral de aminoácido disponible o grupo funcional de aminoácido terminal situado en el fragmento de anticuerpo, por ejemplo, cualquier grupo amino, imino, tiol, hidroxilo o carboxilo libre. Dichos aminoácidos pueden encontrarse naturalmente en el fragmento de anticuerpo o pueden introducirse artificialmente en el fragmento mediante la utilización de métodos de ADN recombinante (ver, por ejemplo, los documentos las patentes US n° 5.219.996, US n° 5.667.425 y el documeto WO 98/25971). En otras formas de realización, se modifica un fragmento Fab de la presente invención mediante la adición al extremo C-terminal de su cadena pesada de uno o más aminoácidos para permitir la unión de una fracción funcional. Preferentemente, los aminoácidos adicionales forman una región bisagra modificada que contiene uno o más residuos de cisteína a los que puede unirse la fracción funcional. Pueden utilizarse múltiples sitios para unir dos o más moléculas de PEG.

En determinados aspectos de la presente invención, se unen moléculas de PEG covalentemente mediante un grupo tiol de por lo menos un residuo de cisteína situado en un fragmento de anticuerpo de la presente invención. Cada molécula de PEG unida al fragmento de anticuerpo modificado puede unirse covalentemente al átomo de azufre de un residuo de cisteína situado en el fragmento. El enlace covalente generalmente será un enlace disulfuro o, en particular, un enlace azufre-carbono. En el caso de que se utilice un grupo tiol como el punto de unión, pueden utilizarse fracciones funcionales apropiadamente activadas, por ejemplo, derivados selectivos para tiol, tales como maleimidas y derivados de cisteína. Puede utilizarse un PEG activado como el material de partida en la preparación de fragmentos de anticuerpo modificados con PEG tal como se ha indicado anteriormente. El PEG activado puede ser cualquier PEG que contenga un grupo reactivo tiol, tal como un ácido o éster a-halocarboxílico, por ejemplo, yodoacetamida, una imida, por ejemplo maleimida, una vinilsulfona o un disulfuro. En determinadas formas de realización, un conjugado de anticuerpo puede comprender dos moléculas de PEG con dos moléculas de maleimida. Pueden obtenerse materiales de partida comercialmente o pueden prepararse a partir de materiales de partida disponibles comercialmente mediante la utilización de procedimientos químicos convencionales. Entre las moléculas de PEG particulares se incluyen metoxi-PEG-amina 20 K y M-PEG-SPA.

En una forma de realización preferida, un anticuerpo de la invención es un fragmento Fab modificado que se PEGila, es decir, presenta PEG (poli(etilenglicol)) unido covalentemente al mismo, por ejemplo según el método dado a conocer en el documento EP 0948544. En un ejemplo, se une PEG a una cisteína en la región bisagra. En otro ejemplo, un fragmento Fab modificado con PEG presenta un grupo maleimida unido covalentemente a un único grupo tiol en una región bisagra modificada. Un residuo de lisina puede unirse covalentemente al grupo maleimida y a cada uno de los grupos amina en el residuo de lisina puede unirse a un polímero metoxipoli(etilenglicol) que presenta un peso molecular de aproximadamente 20,000 Da. El peso molecular total del PEG unido al fragmento Fab, por lo tanto, puede ser de aproximadamente 40,000 Da.

En otra forma de realización, la fracción funcional es PEG y se une mediante la utilización de los métodos descritos en los documentos WO 98/25971 y WO 04/72116, de manera que se une un grupo lisil-maleimida al residuo de cisteína en el extremo C-terminal de la cadena pesada, y cada grupo amino del residuo lisilo presenta unido covalentemente al mismo un residuo metoxipoli(etilenglicol) que presenta un peso molecular de aproximadamente 20,000 Da. El peso molecular total del PEG unido al anticuerpo es, por lo tanto, de aproximadamente 40,000 Da.

En otra forma de realización, la fracción funcional es PEG y se une a un fragmento F(ab⁾²mediante la utilización de los métodos descritos en los documentos WO 98/25971 y WO 04/072116, de manera que se une un grupo lisilmaleimida al residuo de cisteína en el extremo C-terminal de cada cadena pesada de Fab, y cada grupo amino del residuo lisilo presenta unido covalentemente al mismo un residuo metoxipoli(etilenglicol) que presenta un peso molecular de aproximadamente 20,000 Da. El peso molecular total del PEG unido al anticuerpo F(ab)², por lo tanto, es de aproximadamente 40,000 Da.

En determinadas formas de realización de la presente invención, el anticuerpo de la presente invención es un fragmento de anticuerpo Fab', que puede ser totalmente humano o humanizado, y se encuentra PEGilado en la cadena pesada, en la cadena ligera, o en ambas. En otras formas de realización, el fragmento de anticuerpo, que puede ser totalmente humano o humanizado, se encuentra PEGilado en una o ambas cadenas pesadas, o en una o ambas cadenas ligeras, o en tanto las cadenas pesadas como las cadenas ligeras.

De acuerdo con lo anterior, en determinadas formas de realización, un anticuerpo es un anticuerpo unido mediante PEG (por ejemplo, un anticuerpo humano unido mediante PEG) en el que el PEG se une al anticuerpo en un residuo de cisteína o un residuo de lisina. En determinadas formas de realización, el anticuerpo PEGilado presenta un tamaño hidrodinámico de por lo menos 24 kD. En otras formas de realización, el PEG puede variar en tamaño entre 20 y 60 kD (ambos incluidos). En formas de realización adicionales, el anticuerpo unido a PEG presenta un tamaño hidrodinámico de por lo menos 200 kD. En formas de realización de la presente invención en las que el anticuerpo se encuentra unido a una fracción PEG, el anticuerpo PEGilado puede presentar una semivida in vivo incrementada respecto a un anticuerpo que no presenta la fracción PEG.

El término "pegilación", "polietilenglicol" o "PEG" incluye un compuesto polialquilenglicol o un derivado del mismo, con o sin agentes de acoplamiento o la derivatización con fracciones de acoplamiento o activadoras (por ejemplo, con tiol, triflato, tresilato, aziridina, oxirano o, preferentemente, con una fracción maleimida, por ejemplo, p EG-maleimida). Entre otros compuestos de polialquilenglicol apropiados se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, PEG-polipropilenglicol activado con maleimido-monometoxi PEG, aunque asimismo polímeros con carga o neutros de los tipos siguientes: dextrano, ácidos colomínicos, u otros polímeros basados en carbohidratos, polímeros de aminoácidos y biotina, y otros derivados de reactivo de afinidad.

Entre otras fracciones funcionales que pueden resultar útiles para mejorar la integridad y longevidad de los anticuerpos de la presente invención in vivo se incluyen polipéptidos. Por ejemplo, los anticuerpos o fragmentos de anticuerpo de la presente invención pueden modificarse para incluir un polipéptido de albúmina sérica humana (HSA). Dicho conjugado de anticuerpo puede mostrar una estabilización incrementada y una semivida en suero incrementada en comparación con un anticuerpo, o fragmento de unión a anticuerpo, no conjugado. Por ejemplo, en determinadas formas de realización, un anticuerpo conjugado con HSA puede mostrar una semivida in vivo incrementada respecto a un anticuerpo no conjugado. La semivida (semivida ta o tp) del anticuerpo conjugado con HSA puede incrementarse en 10%, 20%, 30%, 40%, 50% o más. La semivida ta puede encontrarse comprendida en el intervalo de entre 0.25 minutos y 12 horas, por ejemplo, mientras que la semivida tp puede encontrarse comprendida entre 12 y 48 horas, por ejemplo. La semivida ta o tp puede ser preferentemente de por lo menos 3 días, por lo menos 7 días, por lo menos 14 días, por lo menos 21 días, por lo menos 28 días, por lo menos 1 mes o más.

En algunas formas de realización de la presente invención, los anticuerpos de la presente invención son anticuerpos modificados con una fracción funcional mediante marcaje con un marcador detectable, por ejemplo, un isótopo radiactivo, enzima, pigmento o biotina, u otro reactivo de afinidad.

En algunas formas de realización de la presente invención, los anticuerpos de la presente invención son anticuerpos modificados con una fracción funcional mediante la conjugación con un agente terapéutico, por ejemplo, un isótopo radiactivo o un radionucleido (por ejemplo, 111In o 90Y), fracción toxina (por ejemplo, toxoide tetánico o ricina), toxoide o agente quimioterapéutico (patente US n° 6.307.026).

En algunas formas de realización de la presente invención, los anticuerpos de la presente invención son anticuerpos modificados mediante la conjugación con un agente para la captación de imágenes. Entre los agentes de captación de imágenes pueden incluirse, por ejemplo, una fracción de marcaje (por ejemplo, biotina, fracciones fluorescentes, fracciones radioactivas, una etiqueta de histidina o myc, u otras etiquetas peptídicas) para un fácil aislamiento o detección.

Entre los ejemplos adicionales de fracciones funcionales para la modificación o conjugación de anticuerpos de la invención pueden incluirse serotoxinas o agentes citotóxicos, incluyendo cualquier agente que resulte perjudicial para las células (por ejemplo, que las destruya). Entre los ejemplos se incluyen combrestatinas, dolastatinas, epotilones, estaurosporina, maitansinoides, espongistatinas, rizoxina, halicondrinas, roridinas, hemiasterlinas, taxol, citocalasina B, gramicidina B, bromuro de etidio, emetina, mitomicina, etopósido, tenopósido, vincristina, vinblastina, colchicina, doxorrubicina, daunorrubicina, dihidroxiantracina diona, mitoxantrona, mitramicina, actinomicina D, 1-deshidrotestosterona, glucocorticoides, procaína, tetracaína, lidocaína, propranolol y puromicina, y análogos u homólogos de los mismos.

Entre las fracciones funcionales que resultan útiles en la conjugación se incluyen, aunque sin limitarse a ellas, antifolatos (por ejemplo, aminopterina y metotrexato), antimetabolitos (por ejemplo, metotrexato, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, citarabina, 5-fluorouracildecarbazina), agentes alquilantes (por ejemplo, mecloretamina, tioepa clorambucilo, melfalán, carmustina (BSNU) y lomustina (CCNU), ciclofosfamida, busulfán, dibromomanitol, estreptozotocina, mitomicina C y cis-diclorodiamina platino (II) (DDP) cisplatino), antraciclinas (por ejemplo, daunorrubicina (anteriormente, daunomicina) y doxorrubicina), antibióticos (por ejemplo, dactinomicina (anteriormente, actinomicina), bleomicina, mitramicina, antramicina (AMC), caliqueamicinas o duocarmicinas, CC-1065, enedienos, neocarzinostatina), y agentes antitmitóticos (por ejemplo, vincristina y vinblastina).

Entre otras fracciones funcionales pueden incluirse radionucleidos quelados, tales como 131I, 111ln y 90Y, Lu177, bismuto-213, californio-252, iridio-192 y tungsteno-188/renio-188, astatina-211, o fármacos tales como, aunque sin limitación, alquilfosfocolinas, inhibidores de topoisomerasa I, taxoides y suramina.

Entre las fracciones funcionales adicionales se incluyen proteínas, péptidos y enzimas. Entre los enzimas de interés se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, enzimas proteolíticos, hidrolasas, liasas, isomerasas y transferasas. Entre las proteínas, polipéptidos y péptidos de interés se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, inmunoglobulinas, toxinas, tales como abrina, ricina A, exotoxina de Pseudomonas o toxina diftérica, un maitansinoide (por ejemplo, aunque sin limitación, DM1), una proteína, tal como insulina, factor de necrosis tumoral, interferón a, interferón p, factor de crecimiento nervioso, factor de crecimiento derivado de plaquetas o activador de plasminógeno tisular, un agente trombótico o un agente antiangiogénico, por ejemplo, angiostatina o endostatina, angiogenina, gelonina, dolstatinas, ligantes de surco menor, mostaza bis-yodofenol, o un modificador de la respuesta biológica, tal como una linfocina, interleucina-1 (IL-1), interleucina-2 (IL-2), interleucina-6 (IL-6), factor estimulante de colonias de granulocitos-macrófagos (GM-CSF), factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF), factor de crecimiento nervioso (NGF) u otro factor de crecimiento.

Entre otras fracciones funcionales pueden incluirse sustancias detectables útiles, por ejemplo, en el diagnóstico. Entre los ejemplos de sustancias detectables se incluyen diversos enzimas, grupos prostéticos, materiales fluorescentes, materiales luminiscentes, materiales bioluminiscentes, nucleidos radioactivos, metales emisores de positrones (para la utilización en tomografía de emisión de positrones) e iones metálicos paramagnéticos no radioactivos. Ver, generalmente, la patente US n° 4.741.900 para iones metálicos que pueden conjugarse con anticuerpos para la utilización como diagnósticos. Entre los enzimas adecuados se incluyen peroxidasa de rábano picante, fosfatasa alcalina, beta-galactosidasa o acetilcolinesterasa; entre los grupos prostéticos adecuados se incluyen estreptavidina, avidina y biotina; entre los materiales fluorescentes adecuados se incluyen umbeliferona, fluoresceína, isotiocianato de fluoresceína, rodamina, diclorotriazinilamina fluoresceína, cloruro de dansilo y ficoeritrina; entre los materiales luminiscentes adecuados se incluyen luminol; entre los materiales bioluminiscentes adecuados se incluyen luciferasa, luciferina y ecuorina; y entre los nucleidos radioactivos adecuados se incluyen 125I, 131I, 111In y 99Tc.

Tal como muestran los resultados experimentales descritos posteriormente, el procedimiento para la reconstitución según la invención es significativamente más rápido que otros procedimientos conocidos en la técnica.

En efecto, en el ejemplo específico, el procedimiento para la reconstitución según la invención conduce a un tiempo de reconstitución de aproximadamente 10 minutos o inferior, mientras que otros procedimientos conocidos conducen a un tiempo de reconstitución superior a 20 minutos.

Resultados experimentales

Ejemplo 1

Las figuras 1A-1C ejemplifican una forma de realización particular de la invención en la que la composición farmacéutica en forma sólida está contenida en un vial 1 sellado con un septo 11 y un engaste metálico 10. En este caso, tal como se muestra en la figura 1A, a continuación, se añade el solvente mediante la utilización de una jeringa 2 con una aguja de calibre 20 unida a la misma, en la que la aguja 20 pasa a través del septo 11 con el recipiente 1 en posición vertical.

En el ejemplo de la figura 1A indicado anteriormente, el solvente asimismo puede inyectarse en forma de un chorro adecuado, que se obtiene mediante la inserción de la aguja de la jeringa que contiene el solvente directa y profundamente a través del septo en proximidad al sólido e impartiendo al solvente una presión elevada para transferirlo por la aguja al recipiente a una velocidad elevada. A continuación, puede observarse el sólido humectado durante la inyección del solvente como un sólido en forma de anillo o sólido desagregado.

En el presente ejemplo, tanto la presión inicial pi como la presión resultante pr después de la inyección del solvente son inferiores a la presión atmosférica. En el presente ejemplo, después de la inyección del solvente, la aguja y la jeringa se mantienen en el vial para evitar cualquier fuga y la entrada de aire atmosférico, a fin de mantener la presión resultante pr. Por lo tanto, tal como se ilustra en la figura 1B, la fijación de p²en el recipiente a la presión atmosférica puede llevarse a cabo simplemente mediante perforación del septo del recipiente 1 con una aguja hueca 3 conectada a la presión atmosférica.

En la figura 1C, el procedimiento según una de las formas de realización de la presente invención comprende la etapa adicional de la mezcla mecánica del solvente con la composición farmacéutica en forma sólida. En dicho caso, el recipiente 1 se inclina a aproximadamente 45° y se hace girar en torno a su eje longitudinal. El ángulo permite una mezcla de baja cizalla de la mezcla y el desprendimiento de la solución húmeda sobre las adherencias secas de formas sólidas sobre las paredes del recipiente, recuperando de esta manera más forma seca y, en consecuencia, mejorando la recuperación global.

Ejemplo 2

En dicho caso particular, se utilizó el procedimiento de la invención para reconstituir certolizumab pegol liofilizado, un fragmento PEGilado de un anticuerpo (Fab').

Se redujo el tiempo de reconstitución a aproximadamente 10 minutos al llevar a cabo el procedimiento siguiente:

• provisión de 200 mg de certolizumab pegol en una forma liofilizada, disponible a partir de fabricantes farmacéuticos en un vial a aproximadamente 600 Pa;

• introducción rápida de agua para inyectables (API) a partir de una jeringa con una aguja de calibre 20 en el vial en posición vertical, con el chorro dirigido hacia el centro de la torta liofilizada, sin liberar la presión de vacío parcial resultante;

• reposo en posición vertical;

• liberación de la presión dentro del vial hasta la presión atmosférica después de 20 a 30 segundos desde el inicio de la adición de API;

• espera a la reconstitución completa con el vial en posición vertical.

El término "torta" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a un sólido obtenido a partir de un procedimiento de liofilización en un recipiente.

Ejemplo 3

Se redujo el tiempo de reconstitución hasta una media de 8 minutos y hasta un valor mínimo de 6 minutos al llevar a cabo el procedimiento siguiente:

• introducción rápida de 1 ml de agua para inyectables (API) a partir de una jeringa de 1 pulgada con una aguja de calibre 20 en el vial en posición vertical, con el chorro dirigido hacia el centro de la torta liofilizada, sin liberar la presión de vacío parcial resultante;

• espera en posición vertical;

• espera durante 20 segundos con el vial en posición vertical;

• hacer girar el vial inclinado 45° a 1 a 2 rev/s hasta una reconstitución completa.

Se consideró que la composición farmacéutica se había reconstituido una vez era totalmente transparente a opalescente o amarillo pálido, esencialmente libre de sólido o porción poco humectada o de gel o partículas en suspensión, y se llevó a cabo un seguimiento mediante inspección visual a través del vial sin magnificación.

Para el presente ejemplo de reconstitución de certolizumab pegol, una vez se había añadido API al vial, se utilizaron diferentes tiempos At¹antes de incrementar la presión hasta niveles atmosféricos, para determinar el tiempo óptimo At¹tal como se indica posteriormente. De acuerdo con lo anterior, el tiempo At-i=0 corresponde a una liberación de vacío inmediatamente después de la adición de solvente. El solicitante ha advertido que el tiempo de reconstitución en el presente caso es sustancialmente igual al caso en que se libera el vacío antes de la adición del solvente (ver el ejemplo 4), aunque en este último caso, permanezcan burbujas más estables al final del procedimiento de reconstitución, dando como resultado una menor calidad de la reconstitución.

La figura 3 representa la determinación del tiempo óptimo Ati durante el que la presión pr que resulta de la adición del solvente debe mantenerse a fin de minimizar el tiempo de reconstitución trec del certolizumab pegol.

Tal como se pone de manifiesto en la figura 3, el tiempo de reconstitución varía en función del tiempo Ati describiendo una curva en forma de U.

El mínimo de dicha curva en forma de U define el tiempo óptimo Ati. Aunque no se muestra en la presente memoria en aras de la claridad, Ati experimentó poco impacto por los diferentes escenarios de mezcla. Sin embargo, se determinó que, en lugar de incrementar la presión estrictamente en dicho tiempo óptimo, podría incrementarse la presión después de un tiempo Ati comprendido entre 80% y 120% de dicho tiempo óptimo sin deteriorar significativamente el tiempo de reconstitución.

Ejemplo 4

Se llevó a cabo el procedimiento siguiente:

• provisión de 200 mg de certolizumab pegol en una forma liofilizada, disponible a partir de fabricantes farmacéuticos en un vial a diversos niveles de presión iniciales;

• introducción rápida de i ml de agua para inyectables (API) a partir de una jeringa de i pulgada con una aguja de calibre 20 en el vial en posición vertical, con el chorro dirigido hacia el centro de la torta liofilizada, sin liberar la presión de vacío parcial resultante; se midió la referencia temporal t=0 inmediatamente después de la adición del API al vial;

• tras la adición de la API al vial, se utilizaron diferentes tiempos Ati antes de incrementar la presión hasta niveles atmosféricos, para determinar el tiempo óptimo Ati tal como se indica posteriormente;

• haciendo girar el vial suavemente en un ángulo de 45° (aproximadamente 30 revoluciones, manualmente) durante i minuto de manera que el API hiciese contacto completo con la torta sólida;

• mantener el vial en posición vertical estacionaria sobre una superficie de trabajo hasta transcurridos 2 minutos desde t=0;

• recoger el vial y hacerlo girar suavemente de nuevo en un ángulo de 45° (aproximadamente 30 revoluciones, manualmente) asegurándose de que el API hace contacto completo con el material sólido;

• mantener el vial en posición vertical estacionaria sobre una superficie de trabajo hasta transcurridos 4 minutos desde t=0;

• recoger el vial y hacerlo girar suavemente durante i minuto de nuevo en un ángulo de 45° (aproximadamente 30 revoluciones, manualmente) asegurándose de que el API hace contacto con el material sólido, invirtiendo lentamente el vial dos veces (por ejemplo, de parte superior a inferior, repitiendo la operación dos veces);

• mantener el vial en posición vertical estacionaria sobre una superficie de trabajo;

• una vez han transcurrido i0 minutos desde t=0, recoger el vial y hacerlo girar suavemente durante i minuto de nuevo en un ángulo de 45° (aproximadamente 30 revoluciones, manualmente) asegurándose de que el API hace contacto con el material sólido, invirtiendo lentamente el vial dos veces (por ejemplo, de parte superior a inferior, repitiendo la operación dos veces);

• observar el vial para determinar si se ha conseguido la reconstitución completa.

Se consideró que la composición farmacéutica se había reconstituido una vez era totalmente transparente a opalescente o de color amarillo pálido, esencialmente libre de sólido o porción poco humectada o de gel, o partículas en suspensión, y se llevó a cabo un seguimiento mediante inspección visual a través del vial sin magnificación. Se anotó el tiempo cuando se alcanzaba la reconstitución completa como trec.

i4

En el caso de que en t=15 minutos no se hubiese conseguido una reconstitución completa, se recogió el vial y se hizo girar suavemente durante 1 minuto en un ángulo de 45° (aproximadamente 30 revoluciones por segundo, manualmente), asegurándose de que el API hacía contacto con el material sólido, y se invirtió lentamente dos veces (por ejemplo, parte superior a inferior, repitiendo esta operación dos veces); a continuación, se mantuvo el vial en posición vertical estacionaria sobre una superficie de trabajo y se observó para determinar si se había conseguido una reconstitución completa. En caso necesario, se llevó a cabo la rotación e inversión adicionalmente cada 5 minutos hasta conseguir una reconstitución completa.

Las figuras 4A a 4E muestran la determinación del tiempo óptimo Ati durante el que la presión pr que resulta de la adición del solvente debe mantenerse a fin de minimizar el tiempo de reconstitución trec del certolizumab pegol, para la presión inicial siguiente en el vial: 3.5 Pa, 650 Pa, 10,000 Pa, 25,000 Pa y 50,000 Pa, respectivamente.

Tal como se pone de manifiesto en las figuras 4A a 4E, el tiempo de reconstitución variaba en función del tiempo Ati describiendo una curva en forma de U para una presión inicial inferior a 25,000 Pa. Puede observarse además que la curva en forma de U deviene más plana y que el tiempo de reconstitución trec se incrementa a medida que se incrementa la presión inicial en el vial. Sin embargo, en el presente ejemplo, al contrario que en la figura 3, los puntos de datos en Ati=0 representados gráficamente en las figuras 4A a 4E corresponden a una situación en la que el vial en primer se equilibra en la presión atmosférica inmediatamente antes de la adición de solvente.

La figura 5 representa el tiempo de reconstitución trec resultante para certolizumab pegol para:

(a) un procedimiento de reconstitución tal como se ha indicado anteriormente en el ejemplo 3 según una forma de realización de la invención,

(b) un procedimiento de reconstitución conocido en la técnica en el que el vial se fija a una presión inicial de aproximadamente 600 Pa y sin ningún incremento de la presión dentro del recipiente después de la inyección de solvente y hasta una reconstitución completa. Con ese fin, la aguja y la jeringa se mantuvieron dentro del vial a fin de evitar cualquier fuga antes de una reconstitución completa, y

(c) un procedimiento de reconstitución según las presentes instrucciones de utilización proporcionadas por el fabricante con certolizumab pegol, en el que la reconstitución se lleva a cabo a la presión resultante obtenida al añadir el solvente al vial contra las paredes del mismo y la presión inicial baja se pierde parcialmente con la retirada de la aguja respecto al septo antes de las operaciones de agitación con movimientos circulares.

En aras de una mayor claridad, el prospecto proporcionado en el envase de dicha composición farmacéutica liofilizada comprende las instrucciones siguientes que deben ejecutarse con los componentes proporcionados dentro del envase entregado (un vial de agua estéril para inyección, USP (1 ml), una jeringa de plástico monouso, una aguja de reconstitución de calibre 20) mediante la utilización de una "técnica aséptica apropiada":

• reconstituir el vial liofilizado de Cimzia® con 1 ml de agua estéril para inyectables (API) con una aguja de calibre 20 nueva. El API estéril debe dirigirse a las paredes del vial en lugar de directamente sobre Cimzia®,

• hacer girar con movimientos circulares suaves el material de Cimzia® durante aproximadamente un minuto sin agitar, asegurándose de que la totalidad de los polvos entran en contacto con el API estéril. La mezcla con movimientos circulares debe ser tan suave como resulte posible a fin de evitar la creación de un efecto de espumación,

• continuar la mezcla con movimientos circulares cada 5 minutos mientras se observen partículas no disueltas. El tiempo de reconstitución completa puede ser de hasta 30 minutos. La solución reconstituida final debe ser un líquido transparente a opalescente, incolora a amarillo pálido y encontrarse esencialmente libre de partículas.

Dicho prospecto de Cimzia® estipula que los polvos liofilizados deberían ser preparados por un profesional sanitario.

Resulta evidente a partir de la comparación de los tiempos de reconstitución en la figura 5 que el procedimiento de reconstitución (a) según la invención proporciona el tiempo de reconstitución más corto.

Además, la variabilidad en el tiempo de reconstitución se redujo significativamente en el procedimiento (a).

Las figuras 6A-6F representan unas imágenes del aspecto visual de tres viales utilizados en el presente ejemplo de diferentes tiempos del procedimiento de reconstitución, en el que se preparó el vial izquierdo según el procedimiento (a), se preparó el vial central según el procedimiento (b) y se preparó el vial derecho según el procedimiento (c) tal como se ha indicado anteriormente.

Se observó una humectación eficiente cuando el nivel de la mezcla dentro del recipiente, que era elevado inmediatamente después de añadir el solvente (el volumen de la mezcla en este caso se considera que es la suma del volumen del sólido y el volumen del solvente), descendió rápidamente. En efecto, la caída del nivel muestra que el sólido ha sido humectado por el solvente, sustituyendo el solvente los huecos entre las partículas de sólido. La solución resultante asimismo puede adquirir rápidamente la apariencia de un gel lechoso o con burbujas, en lugar de un agregado grande torta seca en el solvente.

La escala de la imagen en la figura 6A en comparación con las figuras 6B, 6C, 6D, 6E y 6F se ha ajustado de manera que se observen los viales en su totalidad.

La figura 6A representa los tres viales inmediatamente antes de la adición del solvente (tü).

En la totalidad de los tres casos, el contenido del vial presentaba un color blanco opaco.

La figura 6B representa los tres viales 1 minuto después de la adición del solvente (to+1 minuto).

En el caso del vial (a) (procedimiento según la invención), la presión dentro del vial se liberó en At-i=30s.

Al final de dicha etapa, se observó una diferencia significativa entre la apariencia visual del vial (a) y la de los viales (b) y (c). En el vial (a), la solución ya presentaba una apariencia translúcida, sin espumas, mientras que en los viales (b) y (c), se observó una gran cantidad de espuma. En los viales (b) y (c), aparte de la espuma, puede observarse que una gran parte de la torta liofilizada original se mantiene sin humectar.

La figura 6C representa los tres viales 4 minutos después de la adición del solvente (to+4 minutos).

La solución en el vial (a) era sustancialmente transparente y homogénea en volumen, con solo unas cuantas burbujas de tamaño intermedio y grande en la superficie de la solución en contacto con las paredes del vial. Se consideró que la reconstitución se había completado en su mayor parte.

En los viales (b) y (c), la solución era mayoritariamente translúcida, con una cantidad significativa de burbujas en la superficie de la solución en contacto con las paredes del vial, y grandes porciones de agregados poco humectados.

La figura 6D representa los tres viales 10 minutos después de la adición del solvente (tü+1ü minutos).

La solución en el vial (a) era transparente y homogénea en volumen, con solo unas cuantas burbujas en la superficie de la solución en contacto con las paredes del vial. Se consideró que la reconstitución se había completado en tü+8 min, momento en que cesaron las manipulaciones del vial, tales como la rotación o la mezcla mediante movimientos circulares. Las imágenes para este punto temporal no se incluyen.

En los viales (b) y (c), la solución era mayoritariamente transparente, aunque con agregados translúcidos en suspensión dentro de la solución; además, todavía había una cantidad significativa de burbujas en la superficie de la solución en contacto con las paredes del vial. El vial (c) todavía mostraba lo que se considera un anillo de espumado.

La figura 6E representa los tres viales 20 minutos después de la adición del solvente (tü+2ü minutos).

La solución en el vial (a) era similar a la de la figura 6D a los 10 minutos de añadir el solvente.

En el vial (b), la solución era mayoritariamente transparente, aunque podían observarse agregados translúcidos (de tamaño inferior a las observadas en la figura 6D) en suspensión dentro de la solución y asimismo se observaron geles en el fondo del vial.

En el vial (c), la solución era mayoritariamente transparente, aunque podían observarse agregados translúcidos en el fondo del vial; además, todavía existía una cantidad significativa de burbujas pequeñas en la superficie de la solución en contacto con las paredes del vial, pasando de un anillo de espumado a burbujas pequeñas. Con magnificación, se observó que el volumen principal de la solución asimismo contenía algunas burbujas pequeñas y geles en el fondo del vial.

La figura 6F representa los tres viales 25 minutos después de la adición del solvente (tü+25 minutos).

La solución en el vial (a) presentaba una apariencia similar a la de la figura 6E.

En el vial (b), la solución era mayoritariamente transparente, aunque seguía siendo visible un pequeño agregado translúcido en el fondo del vial.

En el vial (c), la solución era mayoritariamente transparente, aunque podía observarse un pequeño agregado translúcido en el fondo del vial. Además, se observó una cantidad significativa de pequeñas burbujas en la superficie de la solución en contacto con las paredes del vial.

Resulta interesante que asimismo puede observarse que, en todos los procedimientos, (a) a (c), el volumen de solvente añadido al recipiente era inferior al volumen de solvente extraído de la forma líquida de la composición farmacéutica durante el procedimiento de liofilización.

Bibliografía

[1] Variables Affecting Reconstitution Time of Dry Powder for Injection, Pradip Huwale et al, Pharmaceutical Technology, 2 de julio de 2008.

[2] US 2011/0155620

[3] US 5.219.996;

[4] US 5.667.425;

[5] WO 98/25971

[6] EP 0948544

[7] WO 98/25971

[8] WO 04/72116

[9] US 6.307.026

[10] US 4.741.900

Claims

REIVINDICACIONES

1. Procedimiento para la reconstitución de una forma sólida de una composición farmacéutica, que comprende las etapas sucesivas siguientes:

(i) proporcionar la forma sólida de la composición farmacéutica en un recipiente sellado, siendo la presión dentro del recipiente una presión inicial (pi) comprendida entre 0.5 Pa y 1.2x105 Pa;

(ii) en un primer punto temporal (fe) introducir un solvente en dicho recipiente sellado de manera que la presión dentro del recipiente aumenta desde la presión inicial (pi) hasta una presión resultante (pr) y mantener la presión resultante (pr) dentro del recipiente durante un tiempo controlado (Afe), en el que el tiempo controlado (Afe) está comprendido entre 1 segundo y 2 minutos dependiendo de la composición farmacéutica y se inicia a partir del final de la introducción del solvente en el recipiente sellado; y (iii) en un segundo punto temporal (fe) aumentar la presión dentro del recipiente hasta una presión controlada (p²) superior a dicha presión resultante (pr) hasta una reconstitución completa.

2. Procedimiento según la reivindicación 1, que comprende además después de la etapa (ii) y/o después de la etapa (iii), mezclar el solvente y la composición farmacéutica.

3. Procedimiento según la reivindicación 2, en el que dicha mezcla se lleva a cabo mediante recirculación fluídica del solvente y la composición farmacéutica y/o mediante mezcla mecánica.

4. Procedimiento según la reivindicación 3, en el que la mezcla mecánica del solvente y la composición farmacéutica se lleva a cabo haciendo girar el recipiente mientras el recipiente está inclinado con respecto a la posición vertical.

5. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 4, en el que antes de la etapa (i) la presión dentro del recipiente se ajusta a dicha presión inicial (pi).

6. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 5, en el que la presión inicial (pi) en el recipiente es desde 0.5 Pa a 5x104 Pa.

7. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 6, en el que la presión controlada (p²) establecida en el recipiente en la etapa (iii) es desde 1*104 Pa a 1.5*10® Pa.

8. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 7, en el que la forma sólida de la composición farmacéutica es una forma liofilizada de la composición farmacéutica.

9. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 7, en el que la forma sólida de la composición farmacéutica es un polvo.

10. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 9, en el que el solvente se introduce en el recipiente como un chorro dirigido a la forma sólida de la composición farmacéutica.

11. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 10, que comprende además una etapa adicional (iv) en el que después de alcanzar la presión controlada (p²), la presión dentro del recipiente es aumentada adicionalmente antes de una reconstitución completa.

12. Procedimiento según una de las reivindicaciones 1 a 11 que comprende además una etapa adicional (v) en el que después de alcanzar la presión controlada (p²), el recipiente se somete a ciclos de presión múltiples antes de una reconstitución completa.

13. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la presión inicial dentro del recipiente (pi) en la etapa (i) es desde 0 a 6*104 Pa y el tiempo controlado (Afe) en la etapa (ii) es desde 10 segundos a 2 minutos.

14. Procedimiento según la reivindicación 13, que comprende además después de la etapa (iii) una etapa de mezclar el solvente y la composición farmacéutica mediante recirculación fluídica y/o mezcla mecánica.