ES2632241T3 - Moduladores de enzimas modificadoras de metilo, composiciones y usos de los mismos - Google Patents

Moduladores de enzimas modificadoras de metilo, composiciones y usos de los mismos Download PDF

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Andrew S. Cook
Les A. Dakin
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Jean-Christophe Harmange
Christopher G. Nasveschuk
Rishi G. Vaswani
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Abstract

Un compuesto que tiene la Fórmula estructural (II): **Fórmula** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que: A es CH o N; R1a se selecciona de entre -alquilo C1-C2 y -O-(alquilo C1-C2), en la que R1a está opcionalmente sustituido con uno o más flúor; R4a se selecciona de entre 1-haloalquil (C1-C3)-piperidin-4-ilo, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido con uno o más flúor, y tetrahidropiranilo; y R13 se selecciona de entre hidrógeno, halo, fenilo, piridinilo, y -O-(alquilo C1-C4).

Description

Moduladores de enzimas modificadoras de metilo, composiciones y usos de los mismos.
5 Esta solicitud reivindica la prioridad de la Solicitud Internacional N.º PCT/US2013/025639, presentada el 11 de febrero de 2013, la Solicitud Internacional N.º PCT/US2013/025639 reivindica la prioridad de las Solicitudes Provisionales de Estados Unidos n.º de serie 61/597.695, presentada el 10 de febrero de 2012, y 61/667.821, presentada el 3 de julio de 2012.
10 ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
La cromatina eucariótica está compuesta por complejos macromoleculares llamados nucleosomas. Un nucleosoma tiene 147 pares de bases de ADN envueltas alrededor de un octámero proteico que tiene dos subunidades de cada una de las proteínas histonas H2A, H2B, H3 y H4. Las proteínas histonas están sujetas a modificaciones 15 postraduccionales que a su vez afectan a la estructura de la cromatina y la expresión génica. Un tipo de modificación postraduccional que se encuentra en las histonas es la metilación de residuos de lisina y arginina. La metilación de histona desempeña un papel crítico en la regulación de la expresión génica en eucariotas. La metilación afecta a la estructura de la cromatina y se ha relacionado tanto con la activación como con la represión de la transcripción (Zhang y Reinberg, Genes Dev. 15: 2343-2360, 2001). Las enzimas que catalizan la unión y la eliminación de los
20 grupos metilo de las histonas están implicadas en el silenciamiento génico, el desarrollo embrionario, la proliferación celular y otros procesos. El documento WO 2011/140324 A1 desvela indoles que son útiles para tratar el cáncer. El documento WO 2012/118812 A2 se refiere a compuestos heteroarilo bicíclicos condensados 6,5 sustituidos, así como a composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos y métodos de tratamiento de cáncer mediante la
25 administración de estos compuestos y composiciones farmacéuticas a sujetos que lo necesiten. El documento US 2012/264734 A1 se refiere a compuestos benceno sustituidos con arilo o heteroarilo, así como a composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos y métodos de tratamiento de cáncer mediante la administración de estos compuestos y composiciones farmacéuticas a sujetos que lo necesiten.
30 RESUMEN DE LA INVENCIÓN
La presente divulgación incluye el reconocimiento de que las enzimas modificadoras de metilo son una diana atractiva para la modulación, dado su papel en la regulación de diversos procesos biológicos. Se ha encontrado ahora que los compuestos de esta invención, y las composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos,
35 son eficaces como agentes que estimulan la actividad de las enzimas modificadoras de histona metilada, incluyendo las histonas metilasas y las histonas desmetilasas. Dichos compuestos tienen la fórmula general II:
o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, en la que cada variable es como se define en el presente documento.
40 Los compuestos de la presente invención, y composiciones farmacéuticamente aceptables de los mismos, son útiles para tratar una diversidad de enfermedades, trastornos o afecciones, que se asocian a una enzima modificadora de metilo. Dichas enfermedades, trastornos o afecciones incluyen las descritas en el presente documento.
45 Los compuestos proporcionados por esta invención son también útiles para el estudio de enzimas modificadoras de metilo en fenómenos biológicos y patológicos; el estudio de rutas de transducción de señales intracelulares mediadas por enzimas modificadoras de metilo y la evaluación comparativa de nuevos moduladores de enzimas modificadoras de metilo.
50 BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
Figura 1. Compuestos ejemplares de Fórmula II.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE CIERTAS REALIZACIONES
1. Descripción general de compuestos de la invención
En ciertas realizaciones, la presente invención proporciona un compuesto de Fórmula II:
5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:
A es CH o N; R1a se selecciona de entre -alquilo C1-C2 y -O-(alquilo C1-C2), en la que R1a está opcionalmente sustituido con uno o más flúor;
10 R4a se selecciona de entre 1-haloalquil (C1-C3)-piperidin-4-ilo, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido con uno o más flúor, y tetrahidropiranilo; y R13 se selecciona de entre hidrógeno, halo, fenilo, piridinilo, y -O-(alquilo C1-C4).
2. Compuestos y definiciones
15 Las definiciones de grupos funcionales específicos y términos químicos se describen con más detalle a continuación. Para los fines de esta invención, los elementos químicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 75th Ed., cubierta interior, y se definen generalmente grupos funcionales específicos como se describe en el mismo. Además, los principios generales de la química
20 orgánica, así como restos funcionales específicos y la reactividad, se describen en Organic Chemistry, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999; Smith and March March's Advanced Organic Chemistry, 5ª Edición, John Wiley & Sons, Inc., Nueva York, 2001; Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, Inc., Nueva York, 1989; Carruthers, Some Modern Methods of Organic Synthesis, 3ª Edición, Cambridge University Press, Cambridge, 1987; cuyo contenido en su totalidad de cada uno se incorpora en el presente
25 documento por referencia.
A menos que se indique otra cosa, las estructuras representadas en el presente documento también pretenden incluir todas las formas isoméricas (por ejemplo, enantioméricas, diastereoméricas y geométricas (o conformacionales) de la estructura; por ejemplo, las configuraciones R y S para cada centro asimétrico, los isómeros
30 de doble enlace Z y E, y los isómeros conformacionales Z y E. Por lo tanto, los isómeros estereoquímicos individuales así como las mezclas enantioméricas, diastereoméricas y geométricas (o conformacionales) de los presentes compuestos están dentro del alcance de la invención. A menos que se indique otra cosa, todas las formas tautómeras de los compuestos de la invención están dentro del alcance de la invención. Además, a menos que se indique otra cosa, las estructuras representadas en el presente documento también pretenden incluir compuestos
35 que difieren solamente en presencia de uno o más átomos enriquecidos isotópicamente. Por ejemplo, los compuestos que tienen las presentes estructuras, incluyendo el reemplazo de hidrógeno por deuterio o tritio, o el reemplazo de un carbono por un carbono enriquecido con 13C o 14C están dentro del alcance de esta invención. Dichos compuestos son útiles, por ejemplo, como herramientas analíticas, como sondas en ensayos biológicos, o como agentes terapéuticos de acuerdo con la presente invención.
40 Cuando se prefiere un enantiómero particular, en algunas realizaciones éste puede proporcionarse sustancialmente libre del enantiómero correspondiente, y también se puede denominar como "enriquecido ópticamente". "Enriquecido ópticamente", como se usa en el presente documento, significa que el compuesto está compuesto por una proporción significativamente mayor de un enantiómero. En ciertas realizaciones, el compuesto está constituido por
45 al menos aproximadamente el 90 % en peso de un enantiómero preferido. En otras realizaciones, el compuesto está constituido por al menos aproximadamente el 95 %, 98 %, o el 99 % en peso de un enantiómero preferido. Los enantiómeros preferidos pueden aislarse a partir de mezclas racémicas por cualquier método conocido por los expertos en la técnica, incluyendo la cromatografía líquida de alta presión quiral (HPLC) y la formación y cristalización de sales quirales o preparadas por síntesis asimétricas. Véase, por ejemplo, Jacques et al.,
50 Enantiomers, Racemates and Resolutions (Wiley Interscience, New York, 1981); Wilen, et al., Tetrahedron 33: 2725 (1977); Eliel, E.L. Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962); Wilen, S.H. Tables of Resolving Agents and Optical Resolutions pág. 268 (E.L. Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN 1972).
Un enlace ondulado ( ) en un centro quiral en una estructura química se usa para representar compuestos de la 55 invención que son ópticamente puros, pero cuya rotación óptica no se ha determinado. Un enlace recto en un centro
quiral indica una mezcla racémica aunque, como se ha indicado anteriormente, la invención también incluye todas las formas isoméricas posibles del racemato.
Los términos "halo" y "halógeno" como se usa en el presente documento, se refieren a un átomo seleccionado entre 5 flúor (flúor, -F), cloro (cloro, -Cl), bromo (bromo, -Br) y yodo (yodo, -I).
El término "alquileno" se refiere a un grupo alquilo bivalente. Una "cadena alquileno" es un grupo polimetileno, es decir, -(CH2)n-, en la que n es un número entero positivo, preferiblemente de 1 a 6, de 1 a 4, de 1 a 3, de 1 a 2, o de 2 a 3. Una cadena de alquileno sustituida es un grupo polimetileno en el que uno o más átomos de hidrógeno de
10 metileno se reemplazan por un sustituyente. Los sustituyentes adecuados incluyen los descritos a continuación para un grupo alifático sustituido.
El término "alquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un radical hidrocarburo monovalente saturado de cadena lineal o ramificada obtenido a partir de un resto alifático que contiene entre uno y seis átomos de
15 carbono por eliminación de un único átomo de hidrógeno. En algunas realizaciones, el alquilo contiene 1-5 átomos de carbono. En otra realización, el alquilo contiene 1-4 átomos de carbono. Aún en otras realizaciones, el alquilo contiene 1-3 átomos de carbono. En otra realización más, el alquilo contiene 1-2 carbonos. Los ejemplos de radicales alquilo incluyen, pero sin limitación, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, secpentilo, iso-pentilo, terc-butilo, n-pentilo, neopentilo, n-hexilo, sec-hexilo, y similares.
20 Como se describe en el presente documento, los compuestos de la invención pueden contener restos "opcionalmente sustituidos". En general, el término "sustituido", ya esté o no precedido por el término "opcionalmente", significa que uno o más hidrógenos del resto designado se reemplazan por un sustituyente adecuado. A menos que se indique otra cosa, un grupo "opcionalmente sustituido" puede tener un sustituyente
25 adecuado en cada posición sustituible del grupo, y cuando más de una posición en cualquier estructura dada puede estar sustituida con más de un sustituyente seleccionado de un grupo especificado, el sustituyente puede ser igual o diferente en cada posición. Las combinaciones de sustituyentes previstas en esta invención son preferiblemente las que dan lugar a la formación de compuestos estables o químicamente factibles. El término "estable", como se usa en el presente documento, se refiere a compuestos que no se alteran sustancialmente cuando se someten a
30 condiciones para permitir su producción, detección y, en ciertas realizaciones, su recuperación, purificación y uso para uno o más de los propósitos desvelados en el presente documento.
Los sustituyentes monovalentes adecuados en un átomo de carbono sustituible de un grupo "opcionalmente sustituido" son independientemente halógeno; -(CH2)0-4R°; -(CH2)0-4OR°; -O-(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4CH(OR°)2;
35 (CH2)0-4SR°; -(CH2)0-4Ph, que puede estar sustituido con R°; -(CH2)0-4O(CH2)0-1Ph que puede estar sustituido con R°; -CH=CHPh, que puede estar sustituido con R°; -NO2; -CN;-N3; -(CH2)0-4N(R°)2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)R'; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-4N(R°)C(O)NR°2; -N(R °)C(S)NR°2; -(CH2)0-4N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°) N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)0-4C(O)OR°; -(CH2)0-4C(O)SR°; -(CH2)0-4 C(O)OSiR°3; -(CH2)0-4OC(O)R°; -OC(O)(CH2)0-4SR-; -SC(S)SR°; -(CH2)0-4SC(O)R°; -(CH2)0-4C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -SC(S)SR°;
40 -(CH2)0-4OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°) R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)0-4SSR°; -(CH2)04S(O)2R°; -(CH2)0-4S(O)2OR°; -(CH2)0-4OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -(CH2)0-4S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S (O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2; -P(O)2R°; -P(O)R°2; -OP(O)R°2; -OP(O)(OR°)2; -SiR°3; -(alquileno C1-4 lineal o ramificado)ON(R°)2; o -(alquileno C1-4 lineal o ramificado)C(O)O-N(R°)2, en los que cada R° puede estar sustituido como se define a continuación y es independientemente hidrógeno, alifático C1-6, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, o un anillo de 5-6 miembros
45 saturado, parcialmente insaturado o de arilo que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de entre nitrógeno, oxígeno, o azufre, o, a pesar de la definición anterior, dos casos independientes de R°, tomados junto con sus átomos intermedios, forman un anillo de 3-12 miembros saturado, parcialmente insaturado, o arilo mono o bicíclico que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de entre nitrógeno, oxígeno, o azufre, que pueden estar sustituidos como se define a continuación.
50 Los sustituyentes adecuados en un nitrógeno sustituible de un grupo "opcionalmente sustituido" incluyen -R†, -NR†2, -C(O)R†, -C(O)OR†, -C(O)C(O)R†, -C(O)CH2C(O)R†, -S(O)2R†, -S(O)2N R†2, -C(S)NR†2, -C(NH)NR†2, o -N(R†)S(O)2R†; en los que cada R† es independientemente hidrógeno, alifático C1-6 que puede estar sustituido como se define a continuación, -OPh sin sustituir, o un anillo sin sustituir de 5-6 miembros saturado, parcialmente
55 insaturado o de arilo que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de entre nitrógeno, oxígeno, o azufre, o, a pesar de la definición anterior, dos casos independientes de R†, tomados junto con sus átomos intermedios forman un anillo sin sustituir de 3-12 miembros saturado, parcialmente insaturado o arilo mono o bicíclico que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de entre nitrógeno, oxígeno o azufre.
60 Los sustituyentes adecuados en el grupo alifático de R† son independientemente halógeno, -R•, -(haloR•), -OH, -OR•, -O(haloR•), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR•, -NH2, -NHR•,-NR•2, o -NO2, en los que cada R• está sin sustituir o cuando está precedido por "halo", está sustituido únicamente con uno o más halógenos, y es independientemente alifático C1-4, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, o un anillo de 5-6 miembros saturado, parcialmente insaturado o de arilo que tiene 0-4 heteroátomos seleccionados independientemente de entre nitrógeno, oxígeno, o
65 azufre.
Como se usa en el presente documento, el término "inhibidor" se define como un compuesto que se une a y/o inhibe una S-adenosilmetionina (SAM) diana usando una enzima con afinidad medible. En ciertas realizaciones, un inhibidor tiene una CI50 y/o una constante de unión de menos de aproximadamente 50 µM, menos de
5 aproximadamente 1 µM, menos de aproximadamente 500 nM, menos de aproximadamente 100 nM o menos de aproximadamente 10 nM.
Las expresiones "afinidad medible" e "inhibir mensurablemente", como se usan en el presente documento, se refieren a un cambio medible en la actividad de al menos una SAM usando una enzima entre una muestra que
10 comprende un compuesto proporcionado, o una composición del mismo, y al menos una enzima dependiente de SAM, y una muestra equivalente que comprende al menos una enzima dependiente de SAM, en ausencia de dicho compuesto, o composición del mismo.
3. Descripción de compuestos ejemplares
15 En algunas realizaciones de Fórmula II, R1a se selecciona de entre -OCH3, -CH3, -OCHF2, y -CH2CH3.
R4a
En algunas realizaciones de Fórmula II, se selecciona de entre 4,4-difluorociclohexilo, ciclopropilo, tetrahidropiran-4-ilo, 1-(2-fluoroetil)-piperidin-4-ilo, 1-(2,2-difluoroetil)-piperidin-4-ilo, 1-(2,2,2-trifluoroetil)-piperidin-4
20 ilo.
En algunas realizaciones de Fórmula II, R13 se selecciona de entre hidrógeno, cloro, flúor, -OCH(CH3)2, fenilo y piridin-2-ilo.
25 Los compuestos ejemplares de Fórmula II se exponen en la figura 1. En algunos casos, dos (o más) de los compuestos de la figura 1 que tienen uno (o más) enlaces ondulados tendrán la misma estructura exacta. Debido a que el enlace ondulado representa un centro quiral de rotación óptica indeterminada, se entenderá que dichos compuestos son isómeros ópticos separados y distintos entre sí. La figura 1 se anota para indicar aquellos conjuntos de dos o más compuestos que tienen la misma estructura representada, pero son de estereoquímica diferentes.
4. Usos, formulación y administración
Composiciones farmacéuticamente aceptables
35 De acuerdo con otra realización, la presente invención proporciona una composición que comprende un compuesto de esta invención o un derivado farmacéuticamente aceptable del mismo y un portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable. La cantidad de compuesto en las composiciones de esta invención es tal que es eficaz para modular de forma medible una enzima modificadora de histona metilada, o un mutante de la misma, en una muestra biológica o en un paciente. En ciertas realizaciones, la cantidad de compuesto en las composiciones de
40 esta invención es tal que es eficaz para modular de forma medible una enzima modificadora de histona metilada, o un mutante de la misma, en una muestra biológica o en un paciente.
En ciertas realizaciones, se formula una composición de esta invención para su administración a un paciente que necesita tal composición. En algunas realizaciones, una composición de esta invención se formula para su
45 administración oral a un paciente.
El término "paciente", como se usa en el presente documento, se refiere a un animal, preferiblemente un mamífero, y mucho más preferiblemente un ser humano.
50 El término "portador, adyuvante o vehículo farmacéuticamente aceptable" se refiere a un portador, adyuvante o vehículo no tóxico que no destruye la actividad farmacológica del compuesto con el que se formula. Los portadores, adyuvantes o vehículos farmacéuticamente aceptables que pueden utilizarse en las composiciones de esta invención incluyen, pero sin limitación, intercambiadores de iones, alúmina, estearato de aluminio, lecitina, proteínas en suero, tales como albúmina sérica humana, sustancias tamponantes tales como fosfatos, glicina, ácido sórbico,
55 sorbato de potasio, mezclas parciales de glicéridos de ácidos grasos vegetales saturados, agua, sales o electrolitos, tales como sulfato de protamina, hidrogenofosfato disódico, hidrogenofosfato potásico, sales de cinc, sílice coloidal, trisilicato de magnesio, polivinilpirrolidona, sustancias a base de celulosa, polietilenglicol, carboximetilcelulosa sódica, poliacrilatos, ceras, polímeros en bloque de polietileno-polioxipropileno, polietilenglicol y grasa de lana.
60 Un "derivado farmacéuticamente aceptable" se refiere a cualquier sal, éster, sal de un éster u otro derivado no tóxico de un compuesto de esta invención que, tras la administración a un receptor, es capaz de proporcionar, directa o indirectamente, un compuesto de esta invención o un metabolito o residuo inhibitoriamente activo del mismo.
Las composiciones de la presente invención pueden administrarse por vía oral, parenteral, por pulverización por 65 inhalación, tópica, rectal, nasal, bucal, vaginal o a través de un depósito implantado. El término "parenteral" como se
usa en el presente documento, incluye técnicas de inyección o infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intrahepática, intralesional e intracraneal. Preferiblemente, las composiciones se administran por vía oral, intraperitoneal o intravenosa. Las formas inyectables estériles de las composiciones de esta invención pueden ser una suspensión acuosa u oleaginosa. Estas suspensiones se pueden 5 formular de acuerdo con técnicas conocidas en la técnica usando agentes dispersantes o humectantes y agentes de suspensión adecuados. La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o una suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico parenteralmente aceptable, por ejemplo, una solución en 1,3butano-diol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que se pueden emplear se encuentran agua, una solución de Ringer y una solución isotónica de cloruro sódico. Además, se emplean convencionalmente aceites fijos estériles
10 como medio disolvente o de suspensión.
Para este propósito, se puede emplear cualquier aceite fijo suave incluyendo mono o diglicéridos sintéticos. Los ácidos grasos, tales como el ácido oleico y sus derivados de glicéridos, son útiles en la preparación de inyectables, ya que son aceites farmacéuticamente aceptables naturales, tales como aceite de oliva o aceite de ricino,
15 especialmente en sus versiones polioxietiladas. Estas soluciones o suspensiones de aceite también pueden contener un diluyente o dispersante de alcohol de cadena larga, tal como carboximetilcelulosa o agentes dispersantes similares que se usan comúnmente en la formulación de formas de dosificación farmacéuticamente aceptables incluyendo emulsiones y suspensiones. También se puedan usar para los fines de la formulación otros tensioactivos de uso común, tales como Tweens, Spans y otros agentes emulsionantes o potenciadores de la
20 biodisponibilidad que se usan comúnmente en la fabricación de formas farmacéuticas, sólidas, líquidas u otras formas de dosificación farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se pueden administrar por vía oral en cualquier forma de dosificación aceptable por vía oral incluyendo, pero sin limitación, cápsulas, comprimidos, suspensiones o
25 soluciones acuosas. En el caso de comprimidos para uso oral, los vehículos comúnmente utilizados incluyen lactosa y almidón de maíz. También se añaden típicamente agentes lubricantes, tales como estearato de magnesio. Para la administración oral en forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y maíz desecado. Cuando se requieren suspensiones acuosas para uso oral, el principio activo se combina con agentes emulsionantes y de suspensión. Si se desea, también se pueden añadir ciertos agentes edulcorantes, saporíferos o colorantes.
30 Como alternativa, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se pueden administrar en forma de supositorios para administración rectal. Éstas se pueden preparar mezclando el agente con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y, por lo tanto, se fundirá en el recto para liberar el fármaco. Dichos materiales incluyen manteca de cacao, cera de abejas y
35 polietilenglicoles.
Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención también pueden administrarse por vía tópica, especialmente cuando la diana del tratamiento incluye áreas u órganos fácilmente accesibles por aplicación tópica, incluyendo enfermedades del ojo, la piel o el tracto intestinal inferior. Las formulaciones tópicas adecuadas se
40 preparan fácilmente para cada una de estas áreas u órganos.
La aplicación tópica para el tracto intestinal inferior puede realizarse en una formulación de supositorio rectal (véase anteriormente) o en una formulación de enema adecuada. También se pueden usar parches transdérmicos tópicos.
45 Para aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticamente aceptables proporcionadas pueden formularse en un ungüento adecuado que contiene el componente activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos. Los vehículos para la administración tópica de compuestos de esta invención incluyen, pero sin limitación, aceite mineral, vaselina líquida, vaselina blanca, propilenglicol, polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Como alternativa, las composiciones farmacéuticamente aceptables proporcionadas pueden formularse en
50 una loción o crema adecuada que contiene los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos adecuados incluyen, pero sin limitación, aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato 60, cera de ésteres cetílicos, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua.
55 Para el uso oftálmico, las composiciones farmacéuticamente aceptables proporcionadas pueden formularse como suspensiones micronizadas en solución salina estéril isotónica, con pH ajustado o, preferiblemente, como soluciones en solución salina estéril isotónica, con pH ajustado, con o sin un conservante tal como cloruro de bencilalconio. Como alternativa, para usos oftálmicos, las composiciones farmacéuticamente aceptables pueden formularse en un ungüento tal como vaselina.
60 Las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención también pueden administrarse mediante aerosol nasal o inhalación. Dichas composiciones se preparan de acuerdo con técnicas bien conocidas en la técnica de la formulación farmacéutica y pueden prepararse como soluciones en solución salina, empleando alcohol bencílico u otros conservantes adecuados, promotores de la absorción para aumentar la biodisponibilidad,
65 fluorocarbonos y/u otros agentes solubilizantes o dispersantes convencionales.
Más preferiblemente, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se formulan para su administración oral. Dichas formulaciones se pueden administrar con o sin alimentos. En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se administran sin alimentos. En otras
5 realizaciones, las composiciones farmacéuticamente aceptables de esta invención se administran con alimentos.
La cantidad de compuestos de la presente invención que se puede combinar con los materiales portadores para producir una composición en una forma de dosificación individual variará dependiendo del huésped tratado y del modo particular de administración. Preferiblemente, las composiciones proporcionadas deben formularse de manera
10 que se pueda administrar una dosificación entre 0,01 -100 mg/kg de peso corporal/día del inhibidor a un paciente que recibe estas composiciones.
También debe entenderse que un régimen de dosificación y tratamiento específico para cualquier paciente particular dependerá de una diversidad de factores, incluyendo la actividad del compuesto específico empleado, la edad, el
15 peso corporal, la salud general, el sexo, la dieta, el tiempo de administración, la tasa de excreción, la combinación de fármacos, y el juicio del médico tratante y la gravedad de la enfermedad particular que se está tratando. La cantidad de un compuesto de la presente invención en la composición también dependerá del compuesto particular en la composición.
20 Usos de compuestos y composiciones farmacéuticamente aceptables
Los compuestos y composiciones descritos en el presente documento son generalmente útiles para la modulación de la actividad de una o más enzimas implicadas en la regulación epigenética.
25 La epigenética es el estudio de cambios heredables en la expresión génica causados por mecanismos distintos de los cambios en la secuencia de ADN subyacente. Los mecanismos moleculares que desempeñan un papel en la regulación epigenética incluyen la metilación del ADN y modificaciones de cromatina/histona. La metilación de histona, en particular, es crítica en muchos fenómenos epigenéticos.
30 La cromatina, el ensamblaje organizado de ADN nuclear y proteínas de histona, es la base para una multitud de procesos nucleares vitales que incluyen la regulación de la transcripción, la replicación, la reparación del daño del ADN y la progresión a través del ciclo celular. Se han identificado una serie de factores, tales como las enzimas modificadoras de la cromatina, que desempeñan un papel importante en el mantenimiento del equilibrio dinámico de la cromatina (Margueron, et al. (2005) Curr. Opin. Genet. Dev. 15: 163-176).
35 Las histonas son los principales componentes proteicos de la cromatina. Estas actúan como carretes alrededor de los cuales se enrolla el ADN y desempeñan un rol en la regulación genética. Existe un total de seis clases de histonas (H1, H2A, H2B, H3, H4 y H5) organizadas en dos superclases: las histonas nucleosomales (H2A, H2B, H3 y H4) y las histonas de enlace (H1 y H5). La unidad básica de la cromatina es el nucleosoma, que consiste en
40 aproximadamente 147 pares de base de ADN enrollado alrededor del octámero de histonas, que consiste en dos copias de cada histona nucleosomal H2A, H2B, H3 y H4 (Luger, et al. (1997) Nature 389: 251-260).
Las histonas, particularmente los residuos de los extremos amino de las histonas H3 y H4 y los extremos amino y carboxilo de las histonas H2A, H2B y H1, son susceptibles a una serie de modificaciones postraduccionales que
45 incluyen la acetilación, la metilación, la fosforilación, la ribosilación, la sumoilación, la ubiquitinación, la citrulinación, la deisminación y la biotinilación. El núcleo de las histonas H2A y H3 también puede modificarse. Las modificaciones a histonas son integrales en diversos procesos biológicos tales como la regulación genética, la reparación de ADN y la condensación cromosómica.
50 La presente divulgación proporciona compuestos y composiciones para la actividad de modulación de enzimas modificadoras de histonas metiladas. Las enzimas modificadoras de histona metilada son reguladores claves de los procesos celulares y de desarrollo. Las enzimas modificadoras de histona metilada pueden caracterizarse como histona metiltransferasa o histona-desmetilasas. Las enzimas histona desmetilasa tienen módulos que median la unión a los residuos metilados. Por ejemplo, múltiples desmetilasas contienen un dominio Tudor (por ejemplo,
55 JMJD2C/GASC1) o un dominio PHD (por ejemplo, JARID1C/SMCX, PHF8).
Se han caracterizado las especificidades de lisina de muchas histona metiltransferasas. Por ejemplo SET7/9, SMYD3, y MLL1-5 son específicas para H3K4, SUV39H1, DIM-5, y G9a son específicas para H3K9, SET8 es específica para H4K20.
60 DOL1 es un ejemplo de un dominio no SET que contiene histonas metilasa. DOLT1 metila H3 en la lisina 79.
Del mismo modo que se ha demostrado que las histonas metilas regulan la actividad transcripcional, la estructura de la cromatina y el silenciamiento génico, también se han descubierto desmetilasas que afectan a la expresión génica. 65 LSD1 fue la primera histona lisina desmetilasa en caracterizarse. Esta enzima muestra homología con las aminas
oxidasas dependientes de FAD y actúa como un co-represor transcripcional de genes neuronales (Shi et al., Cell 119:941-953, 2004). Se han descubierto desmetilasas adicionales que definen familias desmetilasa separadas, incluyendo las familias JHDM1 (o KDM2), JHDM2 (o KDM3), JMJD2 (o KDM4), JARID (o KDM5), JMJD3 (o KDM6), y JMJD6 (Lan et al., Curr. Opin. Cell Biol. 20(3): 316-325, 2008).
5 Las desmetilasas actúan sobre residuos de lisina específicos dentro de secuencias de sustrato y discriminan entre el grado de metilación presente en un residuo dado. Por ejemplo, LSD1 elimina los grupos mono o dimetilo de H3K4. Los miembros de la familia JARID1A-D eliminan grupos trimetilo de H3K4. UTX y JMJD3 desmetilan H3K27, neutralizando los efectos de la actividad de la metilasa EZH2. Se han caracterizado las especificidades de sustrato
10 de otras desmetilasas (véase Shi, Nat. Rev. 8: 829-833, 2007).
Una clase de histonas metilasas se caracteriza por la presencia de un dominio SET, llamado así por proteínas que comparten el dominio, Su(var)3-9, potenciador de zeste [E(Z)] y trithorax. Un dominio SET incluye aproximadamente 130 aminoácidos. Las familias de metilasa que contienen un dominio SET incluyen las familias SUV39H1, SET1,
15 SET2, EZH2, RIZ1, SMYD3, SUV4-20H1, SET7/9, y PR-SET7/SET8 (revisadas en Dillon et al., Genome Biol. 6: 227, 2005). Los miembros de una familia típicamente incluyen motivos de secuencia similares en la proximidad de y dentro del dominio SET. El genoma humano codifica más de 50 histonas proteínas metilasas que contienen un dominio SET, cualquiera de las cuales puede usarse en un ensayo descrito en el presente documento
20 EZH2 es un ejemplo de una metilasa que contiene un dominio SET humano. EZH2 se asocia con EED (desarrollo de ectodermo embrionario) y SUZ12 (supresor del homólogo zeste 12) para formar un complejo conocido como PRC2 (complejo represivo 2 del grupo Polycomb) que tiene la capacidad de trimetilar la histona H3 en la lisina 27 (Cao y Zhang, Mol. Cell 15: 57-67, 2004). Los complejos PRC2 también pueden incluir las subunidades RBAP46 y RBAP48.
25 Las actividades oncogénicas de EZH2 se han demostrado por varios estudios. En experimentos con líneas celulares, la sobreexpresión de EZH2 induce la invasión celular, el crecimiento en agar, y la motilidad mientras que la atenuación de EZH2 inhibe la proliferación celular y la invasión celular (Kleer et al., 2003, Proc. Nat. Acad. Sci. USA
100: 11606-11611; Varambally et al., (2002), "The policomb group protein EZH2 is involved in progression of prostate cancer", Nature 419, 624-629). Se ha demostrado que EZH2 reprime la expresión de varios supresores 30 tumorales, incluyendo E-cadherina, DAB2IP y RUNX3 entre otros. En los modelos de xenoinjerto, la atenuación de EZH2 inhibe el crecimiento tumoral y la metástasis. Recientemente, se ha demostrado que la modulación descendente de EZH2 en los modelos murinos bloquea la metástasis del cáncer de próstata (Min et al., "An oncogene-tumor suppressor cascade drives metastatic prostate cancer by coordinately activating Ras and nuclear factor-kappaB", Nat Med. 2010 Mar; 16(3): 286-94). EZH2 overexpression is associated with aggressiveness of
35 certain cancers such as breast cancer (Kleer et al., Proc. Nat. Acad. Sci. USA 100: 11606-11611, 2003). Estudios recientes también sugieren que el gen de fusión oncogénico específico de cáncer de próstata TMPRSS2-ERG induce programas epigenéticos represivos a través de la activación directa de EZH2 (Yu et al., "An Integrated Network of Androgen Receptor, Polycomb, and TMPRSS2-ERG Gene Fusions in Prostate Cancer Progression", Cancer Cell. 2010 May 18; 17(5): 443-454).
40 En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención modulan la actividad de una o más enzimas implicadas en la regulación epigenética. En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención modulan la actividad de una enzima modificadora de histona metilada, o un mutante de la misma. En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención modulan la actividad de EZH2. En algunas realizaciones, los compuestos
45 de la presente invención reducen o suprimen la actividad de EZH2. En algunas realizaciones, los compuestos de la presente invención son antagonistas de la actividad de EZH2.
En algunas realizaciones, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles en el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con una enzima modificadora de la histona metilada. Por consiguiente, en
50 algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para modular una enfermedad y/o trastorno asociado con una enzima modificadora de la histona metilada. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para tratar un sujeto que padece una enfermedad y/o trastorno asociado con una enzima modificadora de histona metilada que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula
II.
55 En algunas realizaciones, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles en el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con la sobreexpresión de EZH2. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para tratar un sujeto que padece una enfermedad y/o trastorno asociado con la sobreexpresión de EZH2 que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En
60 algunas realizaciones, el método anterior comprende adicionalmente la etapa preliminar de determinar si el sujeto está sobreexpresando EZH2.
En algunas realizaciones, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles en el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con la proliferación celular. En algunas realizaciones, los compuestos y
65 composiciones de la presente invención son útiles en el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con
la regulación errónea del ciclo celular o la reparación del ADN. En algunas realizaciones, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles en el tratamiento del cáncer. Los tipos ejemplares de cáncer incluyen cáncer de mama, cáncer de próstata, cáncer de colon, carcinoma de células renales, cáncer de glioblastoma multiforme, cáncer de vejiga, melanoma, cáncer bronquial, linfoma y cáncer de hígado.
5 El estudio de deleciones de EZH2, mutaciones sin sentido y con desplazamiento del marco de lectura sugieren que EZH2 funciona como un supresor tumoral en los trastornos sanguíneos tales como síndromes mielodisplásicos (MDS) y neoplasias mieloides (Ernst et al., Nat Genet. 2010 Aug; 42(8): 722-6; Nikoloski et al., Nat Genet. 2010 Aug; 42(8): 665-7). Por consiguiente, en algunas realizaciones, los compuestos y composiciones de la presente invención
10 son útiles en el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con la presencia de una forma mutante de EZH2. En algunas realizaciones, los compuestos y composiciones de la presente invención son útiles en el tratamiento de enfermedades y/o trastornos asociados con la presencia de Y641N EZH2. En alguna realización, la enfermedad o trastorno asociado con la presencia de una forma mutante de EZH2 es un linfoma de linfocitos B humanos. En algunas realizaciones, la enfermedad y/o trastorno asociado con la presencia de Y641N EZH2 es
15 linfoma folicular o linfoma difuso de linfocitos B grandes. En algunas realizaciones, los compuestos o composiciones de la presente invención son útiles en el tratamiento de trastornos sanguíneos, tales como síndromes mielodisplásicos, leucemia, anemia y citopenia. Sneeringer et al., "Coordinated activities of wild-type plus mutant EZH2 drive tumor-associated hypertrimethylation of lysine 27 on histone H3 (H3K27) in human B-cell lymphomas", Proceedings of the National Academy of Sciences, PNAS Edición anterior publicada antes de la impresión el 15 de
20 noviembre de 2010.
En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para reducir la actividad de EZH2 en un sujeto que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para reducir la actividad de EZH2 de tipo silvestre en un sujeto que 25 comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para reducir la actividad de una forma mutante de EZH2 en un sujeto que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para reducir la actividad de una forma mutante de EZH2 en un sujeto que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II, en la que la forma mutante de EZH2 30 es Y641N EZH2. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para tratar un sujeto que padece una enfermedad y/o trastorno asociado con EZH2 que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para tratar un sujeto que padece una enfermedad y/o trastorno asociado con EZH2 de tipo silvestre que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona 35 un método para tratar un sujeto que padece una enfermedad y/o trastorno asociado con una forma mutante de EZH2 que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para tratar un sujeto que padece una enfermedad y/o trastorno asociado con una forma mutante de EZH2 que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II, en la que la forma mutante de EZH2 es Y641N EZH2. En algunas realizaciones, el método anterior comprende 40 adicionalmente la etapa preliminar de determinar si el sujeto está expresando una forma mutante de EZH2, tal como Y641N EZH2. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para reducir la actividad de una forma mutante de EZH2, tal como Y641N EZH2, en un sujeto que lo necesite que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona un método para tratar un sujeto que padece una enfermedad y/o trastorno asociado con una forma mutante de EZH2
45 que comprende la etapa de administrar un compuesto o composición de Fórmula II. En algunas realizaciones, el método anterior comprende adicionalmente la etapa preliminar de determinar si el sujeto está expresando una forma mutante de EZH2, tal como Y641N EZH2. En algunas realizaciones, esta determinación se realiza determinando si el sujeto tiene niveles aumentados de trimetilación específica de histona H3 Lys-27 (H3K27me3), en comparación con un sujeto que se sabe que no expresa una forma mutante de EZH2.
EQUIVALENTES
Los ejemplos representativos a continuación están destinados a ayudar a ilustrar la invención, y no pretenden ni deben ser interpretados como limitantes del alcance de la invención. De hecho, diversas modificaciones de la
55 invención y muchas realizaciones adicionales de la misma, además de las mostradas y descritas en el presente documento, resultarán evidentes para los expertos en la técnica a partir del contenido completo de este documento, incluyendo los ejemplos a continuación y las referencias a las publicaciones científicas y bibliografía de patentes citada en el presente documento.
60 Se apreciará que para las preparaciones de compuestos descritas en el presente documento, cuando se usa HPLC de fase inversa para purificar un compuesto, puede existir un compuesto como una sal de adición de ácidos. En algunas realizaciones, un compuesto puede existir como ácido fórmico o sal de ácido mono, di o tri-trifluoroacético.
Se apreciará además que la presente invención contempla compuestos individuales descritos en el presente 65 documento. Cuando los compuestos individuales ilustrados se aíslan y/o se caracterizan como una sal, por ejemplo,
como una sal de ácido trifluoroacético, la presente invención contempla una base libre de la sal, así como otras sales farmacéuticamente aceptables de la base libre.
Los siguientes ejemplos contienen información, ilustración y orientación adicional importante que se puede adaptar a 5 la práctica de esta invención en sus diversas realizaciones y equivalentes de las mismas.
Los procedimientos para preparar los compuestos ilustrados a continuación, así como los compuestos/intermedios adicionales en los esquemas sintéticos se pueden encontrar en la Solicitud Internacional N.º PCT/US2013/025639, cuyo contenido se incorpora en el presente documento por referencia.
Ejemplos
Como se representa en los Ejemplos a continuación, en ciertas realizaciones ejemplares, los compuestos se preparan de acuerdo con los siguientes procedimientos generales. Se apreciará que, aunque los métodos sintéticos
15 y los Esquemas representan la síntesis de ciertos compuestos de la presente invención, los siguientes métodos y otros métodos conocidos por un experto en la técnica se pueden aplicar a todos los compuestos y subclases y especies de cada uno de estos compuestos, como se describe en el presente documento.
A menos que se indique otra cosa, todos los disolventes, productos químicos y reactivos se obtuvieron 20 comercialmente y se usaron sin purificación. Los espectros de 1H RMN se obtuvieron en CDCl3, d6-DMSO, CD3OD,
o d6-acetona a 25 ºC a 300 MHz en un OXFORD (Varian) con un desplazamiento químico (δ, ppm) notificado con respecto a TMS como un patrón interno. Los cromatogramas y espectros de HPLC-MS se obtuvieron con un sistema Shimadzu LC-MS-2020. El análisis quiral y la purificación se obtuvieron con Yilite P270
25 Ejemplo 1. Síntesis de los compuestos 327 y 346 y compuestos e intermedios relacionados. Los compuestos del título de este Ejemplo y otros compuestos relacionados se prepararon de acuerdo con el siguiente esquema general. Además, cuando se indica, se desvelan modificaciones de este esquema para la síntesis de aún compuestos relacionados adicionales de la invención e intermedios de los mismos.
Etapa 1: 4-(((terc-butilsulfinil)imino)metil)piperidin-1-carboxilato de (S,E)-terc-butilo:
En un matraz de fondo redondo cargado con una barra de agitación magnética se añadieron (S)-2-metilpropano-2sulfinamida (20,46 g, 169 mmol), 4-formilpiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (30 g, 141 mmol), DCM (300 ml), y Ti(OEt)4 (59,0 ml, 281 mmol). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 3 h antes de inactivarse con salmuera (80 ml). La solución se agitó durante 30 minutos antes de la filtración. La torta de filtro se lavó con DCM y
10 el filtrado se puso en un embudo de decantación y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo en bruto solidificó para dar el compuesto del título (29 g, 92 mmol, rendimiento del 65,1 %) m/z 217,
El intermedio mostrado en la siguiente tabla se preparó de acuerdo con el procedimiento general descrito en la 15 Etapa 1 usando los materiales de partida y modificaciones apropiadas.
Etapa 2: 4-((S)-1-((R o S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)etil) piperidin-1-carboxilato de terc-butilo:
5 En un matraz de fondo redondo cargado con una barra de agitación magnética se añadió 4-((tercbutilsulfinilimino)metil)piperidin-1-carboxilato de (S,E)-terc-butilo (36,4 g, 115 mmol), DCM (400 ml), y la solución se enfrió a 0 ºC en un baño de hielo con agitación. A esta solución se le añadió MeMgBr (77 ml, 230 mmol) (3 M en éter dietílico) y la reacción se agitó durante 4 h mientras se calentaba a temperatura ambiente. La reacción se interrumpió cuidadosamente mediante la adición de NH4Cl acuoso saturado. El sólido se descompuso mediante la
10 adición de HCl 1 N. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM. La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título (29 g, >9:1 dr) que se usó sin purificación adicional en la siguiente etapa.
El intermedio mostrado en la siguiente tabla se preparó de acuerdo con el procedimiento general descrito en la 15 Etapa 2 usando los materiales de partida y modificaciones apropiadas.
Nombre
Estructura m/z
(S)-2-metil-N-((R o S)-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)propano-2-sulfinamida
234
Etapa 3: 4-(1-Aminoetil)piperidin-1-carboxilato de (R o S)-terc-butilo:
En un matraz de fondo redondo de 1 l cargado con una barra de agitación magnética se añadió 4-((S)-1-((S)-1,1dimetiletilsulfinamido)etil)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo en bruto (29 g) y se recogió en MeOH (200 ml) antes de la adición de una solución 4 N de HCl en 1,4-dioxano (24,06 ml, 96 mmol). Después, la solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h a ta. Después, el metanol se eliminó al vacío para proporcionar un aceite
25 viscoso que se trató con NaHCO3 acuoso sat. (~500 ml) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 500 ml). Esta fase orgánica se combinó, se secó con MgSO4, se filtró, y el disolvente se eliminó entonces al vacío proporcionando el compuesto del título (22 g) que se usó sin purificación adicional.
El intermedio mostrado en la siguiente tabla se preparó de acuerdo con el procedimiento general descrito en la 30 Etapa 3 usando los materiales de partida apropiados.
Nombre
Estructura m/z
(R o S)-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanamina
130
Etapa 4: 2-(2-Bromofenil)-3-oxobutanoato de metilo:
Un matraz de fondo redondo se cargó con una barra de agitación magnética y 2-(2-bromofenil)acetato de metilo (25 g, 109 mmol) y THF (50 ml). Esta solución se enfrió a -78 ºC antes de la adición gota a gota de una solución 1 M
de LiHMDS en THF (218 ml, 218 mmol). La reacción se agitó durante 30 min a -78 ºC antes de la adición de 1-(1Himidazol-1-il)etanona (14,42 g, 131 mmol) disuelta en una mezcla de THF:DMF (112 ml de THF, 24 ml de DMF). La solución se agitó durante 1 h antes de inactivarse con NH4Cl acuoso saturado (-250 ml) y dilución con EtOAc. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (~2 x 250 ml). El extracto orgánico combinado se lavó
5 con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice usando un eluyente de acetato de etilo/hexanos (10:1) para proporcionar 2-(2bromofenil)-3-oxobutanoato de metilo (32,5 g, 102 mmol, rendimiento del 93 %).
Los intermedios mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en 10 la Etapa 4 usando los materiales de partida apropiados.
Nombre
Estructura m/z
2-(2-bromo-4-clorofenil)-3-oxobutanoato de metilo
304
2-(2-bromo-4-metoxifenil)-3-oxobutanoato de metilo
302
2-(2-bromo-4-fluorofenil)-3-oxobutanoato de metilo
289
Etapa 5: 4-(1-(3-(2-Bromofenil)-4-metoxi-4-oxobut-2-en-2-ilamino)etil)piperidin-1-carboxilato de (R o S, E y Z)terc-butilo:
En un matraz de fondo redondo se añadieron 4-(1-aminoetil)piperidin-1-carboxilato de (R o S)-terc-butilo (9,35 g, 40,9 mmol), EtOH (75 ml), y 2-(2-bromofenil)-3-oxobutanoato de metilo (7,40 g, 27,3 mmol) (de la Etapa 4). A esta solución se le añadió AcOH (1,563 ml, 27,3 mmol) y la reacción se calentó durante una noche a 85 ºC antes de
20 enfriarse a temperatura ambiente y concentrarse. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (330 g, hexanos al 100 % con respecto a AE al 25 % en hexanos) para proporcionar el compuesto del título (6,45 g, 13,40 mmol, rendimiento del 49,1 %).
Los intermedios mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en 25 la Etapa 5 usando los materiales de partida apropiados.
Nombre
Estructura m/z
2-(2-bromofenil)-3-((1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)but-2-enoato de (R o S,Z)-metilo
383
2-(2-bromo-4-clorofenil)-3-((1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)but-2-enoato de (R o S,Z)-metilo
417
2-(2-bromo-4-clorofenil)-3-((1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)but-2-enoato de (R o S,Z)-metilo
417
2-(2-bromo-4-fluorofenil)-3-((1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)amino)but-2-enoato de (R o S,Z)-metilo
401
Etapa 6: 1-(1-(1-(terc-Butoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo:
5 Un matraz de fondo redondo de 250 ml se cargó con una barra de agitación magnética, 4-(1-(3-(2-bromofenil)-4metoxi-4-oxobut-2-en-2-ilamino)etil)piperidin-1-carboxilato de (R o S,Z)-terc-butilo (3,33 g, 6,92 mmol), precatalizador II RuPhos (Metanosulfonato(2-diciclohexilfosfino-2',6'-di-i-propoxi-1,1'-bifenil)(2-amino-1,1'-bifenil-2-il) paladio (II)) (0,463 g, 0,553 mmol), diciclohexil(2',6'-diisopropoxibifenil-2-il)fosfina (0,387 g, 0,830 mmol), 1,4-dioxano anhidro (27,7 ml, 6,92 mmol), y metóxido sódico (0,561 g, 10,38 mmol). La mezcla de reacción se purgó, se rellenó con
10 nitrógeno y se calentó a 100 ºC con agitación durante una noche antes de dejarse enfriara a ta. La reacción se diluyó con acetato de etilo (~100 ml) y la mezcla se filtró a través de un lecho de tierra de diatomeas. El filtrado se preabsorbió sobre gel de sílice (~30 g) y se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (120 g) usando acetato de etilo/hexanos (1:1) como eluyente para proporcionar el compuesto del título (2,01 g, 4,77 mmol, rendimiento del 68,9 %).
15 Los intermedios mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en la Etapa 6 usando los materiales de partida apropiados.
Nombre
Estructura m/z
2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo
302
6-cloro-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo
337
6-metoxi-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)metilo
332
6-fluoro-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo
320
Etapa 7: Ácido (R o S)-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxílico:
5 Un matraz de fondo redondo de 1 l se cargó con una barra de agitación magnética, 2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo (11,60 g, 38,5 mmol), etanol (96 ml, 38,5 mmol), y NaOH acuoso 6 N (64,1 ml, 385 mmol). El matraz se equipó con un condensador de reflujo y se calentó a reflujo durante 6 h antes de dejarse enfriar a ta. Los volátiles se retiraron al vacío y la mezcla resultante se vertió en HCl al 10 % (~300 ml). Se formó un precipitado que se recogió a través de filtración al vacío en un embudo Buchner. La torta de filtro se
10 aclaró con una porción más de agua (-200 ml), se recogió y se secó al vacío para proporcionar el compuesto del título (10,87 g, 35,9 mmol, rendimiento del 93 %) en forma de un sólido de color blanquecino.
Los intermedios mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en la Etapa 7 usando los materiales de partida apropiados.
Nombre
Estructura m/z
Ácido (R o S)-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxílico
287
Ácido (R o S)-6-cloro-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxílico
321
Ácido (R o S)-6-metoxi-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxílico
317
Ácido (R o S)-6-fluoro-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxílico
306
Ácido (R o S)-2-metil-6-(piridin-3-il)-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxílico
365
Etapa 8: 4-(1-(3-((4-Metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metilcarbamoil)-2-metil-1H-indol-1il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R o S)-terc-butilo (Compuesto 327).
5 Un matraz de fondo redondo de 250 ml se cargó con una barra de agitación magnética, ácido (R o S)-1-(1-(1-(tercbutoxicarbonil)piperidin-4-il)etil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxílico (1,950 g, 5,05 mmol), clorhidrato de 3-(aminometil)-4-metoxi-6-metilpiridin-2(1H)-ona (2,065 g, 10,09 mmol), DMF (25,2 ml, 5,05 mmol), base de Hunig (3,52 ml, 20,18 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a 0 ºC y se añadió COMU (2,16 g, 5,05 mmol). La reacción se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con
10 EtOAc. El extracto orgánico combinado se lavó con salmuera, se secó con MgSO4, se filtró y se concentró al vacío para proporcionar el material en bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (120 g) usando MeOH/acetato de etilo (1:5) como eluyente para proporcionar el compuesto del título (1,86 g, 3,29 mmol, rendimiento del 65,3 %). LCMS 537 (M+1)+ 1H RMN (400 MHz ,DMSO-d6) δ = 11,83 -11,71 (m, 1 H), 7,80 (s a, 1 H), 7,73 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,06 (td, J = 7,1, 14,4 Hz, 2 H), 6,21 (s, 1 H), 4,32 (s a, 2 H), 4,16 (s a, 1 H),
15 4,02 (s a, 1 H), 3,85 (s, 3 H), 3,75 (s a, 1 H), 2,70 (s a, 1 H), 2,58 (s, 3 H), 2,37 (s a, 1 H), 2,21 (s, 3 H), 1,90 (d, J = 12,9 Hz, 1 H), 1,53 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,35 (s, 10 H), 1,21 (s a, 1 H), 0,89 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 0,67 (d, J = 11,8 Hz, 1 H).
Los compuestos mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en 20 la Etapa 8 usando los materiales de partida apropiados. Las estructuras de los compuestos se muestran en la figura
1.
Compuesto Número
Nombre 1H RMN m/z
435
4-(1-(3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)carbamoil)2-metil-1H-indol-1-il)etil)piperidin1-carboxilato de (R o S)-terc-butilo 521
436
4-(1-(3-(((4-(difluorometoxi)-6metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)carbamoil)-2-metil-1Hindol-1-il)etil)piperidin-1carboxilato de (R o S)-terc-butilo 573
437
4-(1-(3-(((4-etil-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)carbamoil)2-metil-1H-indol-1-il)etil)piperidin1-carboxilato de (R o S)-terc-butilo 535
298
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,60 (s, 1H), 7,73-7,62 (m, 3H), 7,60 (d, 2H) 7,07-7,05 (m, 2H), 6,15 (s, 1H) 4,33 (s, 1H), 4,21-4,11 (m, 1H), 3,92 (d a, 1H), 3,65 (d, 1H), 3,34-3,32 (m, 1H), 3,02 (t, 1H), 2,61 (s, 3H), 2,48-2,44 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 1,84-1,81 (m, 1H), 1,54 (d, 3H), 1,40-1,38 (m,12H), 1,25-1,22 (m, 1H), 1,08-1,04 (m, 1H), 0,86 (s a, 1H), 0,58 (d a, 1H) 438
300
(R o S)-6-fluoro-N-((4-metoxi-6metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1-(1-(tetrahidro2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,57 (s a, 1 H), 7,75 -7,67 (m, 2 H), 7,48 (d, J = 10,7 Hz, 1 H), 6,90 (t, J = 8,5 Hz, 1 H), 6,13 (s, 1 H), 4,29 (d, J = 4,5 Hz, 2 H), 4,12 (s a, 1 H), 3,94 -3,87 (m, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 3,64 (dd, J = 3,6, 10,9 Hz, 1 H), 3,35 (s a, 1 H), 3,05 (s a, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 2,45-2,37 (m, 1 H), 2,18 (s, 3 H), 1,81 (d, J = 12,7 Hz, 1 H), 1,50 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,40 -1,29 (m, 1 H), 1,11 0,99 (m, 1 H), 0,61 (s a, 1 H) 456
314
(R o S)-6-cloro-N-((4-metoxi-6metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1-(1-(tetrahidro2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,57 (s, 1 H), 7,75 (s, 2 H), 7,66 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 7,08 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 6,14 (s, 1 H), 4,30 (d, J = 4,5 Hz, 2 H), 4,21 -4,05 (m, 2 H), 3,91 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 3,85 (s, 3 H), 3,65 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 3,02 (t, J = 11,3 Hz, 1 H), 2,58 (s, 3 H), 2,46 -2,31 (m, 1 H), 2,19 (s, 3 H), 1,82 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), 1,59 -1,45 (m, 4 H), 1,44 -1,29 (m, 1 H), 0,57 (d, J = 12,9 Hz, 1 H) 472
321
(R o S)-6-metoxi-N-((4-metoxi-6metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1-(1-(tetrahidro2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,59 (s, 1 H), 7,67 -7,59 (m, 2 H), 7,03 (s, 1 H), 6,75 -6,68 (m, 1 H), 6,14 (s, 1 H), 4,30 (d, J = 5,1 Hz, 2 H), 4,10 (dd, J = 7,5, 10,4 Hz, 1 H), 3,91 (dd, J = 3,0, 11,3 Hz, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 3,80 -3,76 (m, 3 H), 3,68 -3,60 (m, 1 H), 3,38 -3,32 (m, 1 H), 3,10 -3,00 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 2,19 (s, 3 H), 1,83 (d, J = 12,7 Hz, 1 H), 1,55 -1,43 (m, 4 H), 1,34 (s a, 1 H), 1,10 -0,96 (m, 1 H), 0,62 (d, J = 13,4 Hz, 1 H) 468
335
(R o S)-N-((4-(difluorometoxi)-6metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1-(1-(tetrahidro2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxamida 474
394
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)1H-indolo-3-carboxamida 422
442
(R o S)-6-cloro-N-((4,6-dimetil-2oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida 456
Etapa 9: Clorhidrato de (R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(piperidin4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (Compuesto 326).
Un matraz de fondo redondo de 250 ml se cargó con una barra de agitación magnética, 4-(1-(3-((4-metoxi-6-metil-2oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metilcarbamoil)-2-metil-1H-indol-1-il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R o S)-terc-butilo (Compuesto 327) (1,850 g, 3,45 mmol), MeOH (13,79 ml, 3,45 mmol), y HCl (2,59 ml, 10,34 mmol) (4 N en dioxano). La reacción se dejó en agitación a ta durante 6 h antes de concentrarse al vacío para proporcionar el compuesto del
10 título (1,65 g, 3,14 mmol, rendimiento del 91 %). LCMS 437 (M+1)+.
El compuesto mostrado en la siguiente tabla se preparó de acuerdo con el procedimiento general descrito en la Etapa 9 usando los materiales de partida apropiados. La estructura de este compuesto se muestra en la figura 1.
Compuesto Número
Nombre 1H RMN m/z
376
Clorhidrato de (R o S)-1-(1-(1(azetidin-3-il)piperidin-4-il)etil)N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2metil-1H-indolo-3carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 12,27 -12,10 (m, 1 H), 11,96 -11,72 (m, 1 H), 9,80 (s a, 1 H), 9,19 (s a, 2 H), 7,89 -7,67 (m, 2 H), 7,62 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,09 (quin, J = 6,6 Hz, 2 H), 5,99 (s, 1 H), 4,59 -4,36 (m, 3 H), 4,24 -3,95 (m, 2 H), 3,48 (d, J = 13,2 Hz, 1 H), 3,17 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), 2,87 (s a, 1 H), 2,70 (s a, 2 H), 2,58 (s, 3 H), 2,34 -2,25 (m, 3 H), 2,19 -2,10 (m, 3 H), 1,75 (d, J = 12,3 Hz, 1 H), 1,57 (d, J = 6,7 Hz, 3 H), 1,47 (d, J = 12,7 Hz, 2 H), 1,33 -1,21 (m,2 H), 0,85 (d, J = 13,6 Hz, 1 H) 476

Etapa 10: 4-(1-(3-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metilcarbamoil)-2-metil-1H-indol-1il)etil)piperidin-1-carboxilato de (R o S)-isopropilo (Compuesto 346).
Un matraz de fondo redondo de 250 ml se cargó con una barra de agitación magnética, clorhidrato de (R o S)-N-((4metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (0,467 g, 0,987 mmol), DMF (2,468 ml, 0,987 mmol), THF (2,468 ml, 0,987 mmol), y N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,638 g, 5 4,94 mmol). La reacción se enfrió a 0 ºC y se añadió gota a gota carbonocloridato de isopropilo (0,160 ml, 1,086 mmol) mediante una jeringa. La reacción se dejó en agitación durante 2 h a ta y después se trató con LiOH 5 N durante 1 h para retirar cualquiera piridona acilada. Este material se extrajo con acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó con MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El material resultante se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (50 g) usando acetato de etilo/MeOH (5:1) como eluyente para proporcionar el compuesto del 10 título puro en forma de un sólido de color amarillo pálido (0,300 g, 0,545 mmol, rendimiento del 55,2 %). LCMS 523 (M+1)+; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,59 (s a, 1 H), 7,74 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,69 (t, J = 4,9 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,13 -7,01 (m, 2 H), 6,15 (s, 1 H), 4,78 -4,67 (m, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,23 -4,12 (m, 1 H), 4,12 -4,02 (m, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,82 -3,74 (m, 1 H), 2,79 -2,66 (m, 1 H), 2,58 (s, 3 H), 2,46 -2,34 (m, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 1,96 -1,88 (m, 1 H), 1,58 -1,46 (m, 4 H), 1,15 (d, J = 6,0 Hz, 6 H), 0,95 -0,89 (m, 1 H), 0,74 -0,65 (m,
15 1H).
Los compuestos mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en la Etapa 10 usando los materiales de partida apropiados. Las estructuras de los compuestos se muestran en la figura 1.
Compuesto Número
Nombre 1H RMN m/z
(400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,59 (s, 1 H), 7,78
7,66 (m, 2 H), 7,64 -7,57 (m, 1 H), 7,06 (s, 2 H),
336
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(1(metilsulfonil)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo3-carboxamida 6,14 (s, 1 H), 4,31 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,25 -4,15 (m, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 3,63 (s, 1 H), 3,40 -3,33 (m, 1 H), 2,79 (s, 3 H), 2,75 -2,65 (m, 1 H), 2,60 (s, 3 H), 2,45 -2,27 (m, 1 H), 2,19 (s, 3 H), 2,06 1,98 (m, 1 H), 1,55 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,45 515
1,36 (m, 1 H), 1,28 -1,18 (m, 1 H), 1,14 -1,03
(m, 1 H), 0,83 -0,74 (m, 1 H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,58 (s a, 1 H), 7,77
7,67 (m, 2 H), 7,66 -7,60 (m, 1 H), 7,06 (s, 2 H),
(R o S)-1-(1-(1-(2-hidroxi-2
6,14 (s, 1 H), 5,32 -5,23 (m, 1 H), 4,31 (d, J = 4,5
337
metilpropanoil)piperidin-4-il)etil)-N-((4metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3- Hz, 2 H), 4,19 -4,10 (m, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 2,75 2,62 (m, 2 H), 2,58 (s, 3 H), 2,19 (s, 4 H), 2,00 523
il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida
1,90 (m, 2 H), 1,54 (d, J = 6,7 Hz, 3 H), 1,32
1,18 (m, 8 H), 0,87 -0,78 (m, 1 H), 0,77 -0,67
(m, 1 H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,59 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,72 -7,67 (m, 1 H), 7,64 (d, J =
342
(R o S)-1-(1-(1-isobutirilpiperidin-4-il)etil)N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo3-carboxamida 8,0 Hz, 1 H), 7,14 -7,01 (m, 2 H), 6,15 (s, 1 H), 4,58 -4,46 (m, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,09 -3,99 (m, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,81 -3,72 (m, 1 H), 3,08 -2,97 (m, 1 H), 2,92 -2,81 (m, 1 H), 2,78 -2,65 (m, 3 H), 2,59 (s a, 3 H), 2,20 (s, 3 H), 2,03 -1,90 (m, 1 H), 1,59 -1,47 (m, 4 H), 1,02 0,86 (m, 6 H), 0,78 -0,69 (m, 1 H) 507
(400 MHz, DMSO-d6) δ 12,02 -11,95 (m, 1 H),
7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,66 -7,57 (m, 2 H),
7,11 -7,00 (m, 2 H), 6,08 (s, 1 H), 4,32 (d, J = 4,5
(R o S)-N-((4-(difluorometoxi)-6-metil-2-
Hz, 2 H), 4,18 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 3,64 (d, J =
344
oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)etil)-1H 12,3 Hz, 1 H), 3,36 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), 2,79 (s, 3 H), 2,75 -2,65 (m, 2 H), 2,58 (s, 3 H), 2,45 551
indolo-3-carboxamida
2,27 (m, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 2,07 -1,98 (m, 1 H),
1,55 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,40 (d, J = 8,2 Hz, 1
H), 1,10 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 0,79 (d, J = 12,5 Hz,
1 H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,57 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,69 (t, J = 5,0 Hz, 1 H), 7,62 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,06 (d, J = 7,1 Hz, 2 H), 6,15 (s,
345
(R o S)-1-(1-(1-(etilsulfonil)piperidin-4il)etil)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo3-carboxamida 1 H), 4,32 (d, J = 5,1 Hz, 2 H), 4,25 -4,15 (m, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,73 -3,65 (m, 1 H), 3,45 -3,36 (m, 1 H), 3,02 -2,93 (m, J = 7,8 Hz, 2 H), 2,87 2,77 (m, 1 H), 2,75 -2,66 (m, 1 H), 2,60 (s, 3 H), 2,42 -2,30 (m, 1 H), 2,20 (s, 3 H), 2,06 -1,97 (m, 1H), 1,58 -1,48 (m, 4 H), 1,42-1,31 (m, 1 H), 1,17 (t, J = 7,5 Hz, 3 H), 1,13 -1,00 (m, 1 H), 0,83 0,73 (m, 1 H) 529
355
(R o S)-1-(1-(4(isopropilsulfonil)ciclohexil)etil)-N-((4metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,59 (s, 1H), 7,76-7,69 (m, 2H), 7,62 (d, 1H), 7,10-7,03 (m, 2H), 6,15 (s, 1H), 4,32 (d, 2H), 4,29-4,26 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,72 (d a, 1H), 3,45 (d a, 1H), 3,26 (tt, 1 H), 2,91 (dt, 1 H), 2,60 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,97 (d a, 1H), 1,54 (d, 3H), 1,35-1,24 (m, 2H), 1,18(d, 3H), 1,16(d, 3H), 1,05-0,78 (m, 2H) 543
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,60 (s a, 1H), 7,75-7,60
4-(1-(3-(((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2
(m, 3H), 7,10-7,03 (m, 2H), 6,15 (s, 1H) 4,33 (d,
357
dihidropiridin-3-il)metil)carbamoil)-2-metil1H-indo 1-1-il)etil)piperidin-1-carboxilato 1H), 4,13-4,06 (m, 1 H), 3,84 (s, 3H), 3,74 (d, 1H), 2,80-2,60 (m, 3H), 2,58 (s, 1H), 2,50-2,42 537
de (R o S)-isobutilo
(m, 2H), 1,96-1,90 (m, 1H), 1,54 (d, 3H), 1,25
1,22 (m, 1H), 0,98-0,72 (m, 6H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,59 (s, 1H), 7,78 -7,71
(m, 1 H), 7,66 -7,57 (m, 2 H), 7,07 (s, 2 H), 5,89
368
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1-(1(etilsulfonil)piperidin-4-il)etil)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (s, 1 H), 4,32 (s, 2 H), 4,25-4,15 (m, 1 H), 3,65 3,59 (m, 1 H), 3,19 -3,10 (m, 1 H), 2,98 (d, J = 7,4 Hz, 2 H), 2,87 -2,77 (m, 1 H), 2,72 -2,65 (m, 1 H), 2,58 (s, 3 H), 2,27 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 1,55 (d, J = 6,9 Hz, 4 H), 1,42 -1,33 (m, 2 H), 513
1,17 (t, J = 7,4 Hz, 3 H), 1,12-1,00 (m, 1 H), 0,84
-0,74 (m, 1 H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,60 (s, 1 H), 7,75 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,65 -7,58 (m, 2 H), 7,12-7,02 (m,
382
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(1(metilsulfonil)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo3-carboxamida 2 H), 5,89 (s, 1 H), 4,38 -4,25 (m, 2 H), 4,20 (dd, J = 7,0, 10,6 Hz, 1 H), 2,80 (s, 3 H), 2,76 -2,67 (m, 2 H), 2,59 (s, 3 H), 2,46 -2,31 (m, 2 H), 2,27 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 1,55 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,51 (s a, 1 H), 1,47 -1,34 (m, 1 H), 1,29-1,21 (m, 1 H), 1,17-1,04 (m, 1 H), 0,80 (d, J = 12,9 Hz, 1 H) 499
Ejemplo de referencia 2. Síntesis de (R o S)-1-(1-(1-isopropilpiperidin-4-il)etil)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida (Compuesto 358)
Un vial de 25 ml se cargó con una barra de agitación magnética, clorhidrato de (R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida, THF (2,114 ml, 0,211 mmol), propan-2-ona (0,061 g, 1,057 mmol), y triacetoxiborohidruro sódico (0,224 g, 1,057 mmol). La reacción se dejó en agitación a ta durante 12 h. La reacción se interrumpió a la inversa sobre NaHCO3 acuoso sat., se extrajo con
10 acetato de etilo y se concentró al vacío. El material resultante se trató con 10 ml de amoniaco 7 N en MeOH y se concentró al vacío para producir material que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (10 g usando DCM/MeOH/NH4OH (90:1:0,1) como eluyente para proporcionar 33 mg, (0,065 mmol, rendimiento del 31,0 %) del compuesto del título en forma de un sólido de color blanco). LCMS 479 (M+1)+; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,59 (s., 1H), 7,64 -7,82 (m, 2H), 7,59 (d, 1H), 6,95 -7,17 (m, 2H), 6,15 (s, 1H), 4,32 (d, 2H), 4,04 -4,24 (m, 1H),
15 3,84 (□, 3H), 2,77 -2,93 (□, 2H), 2,68 (□, 1H), 2,60 (□, 3H), 2, 20 (□, 3H), 2,08 -2,15 (□, 1H), 1,92 (□, 1H), 1,83 (□p.
□., 1H), 1,54 (□, 3H), 1,27 -1,43 (□, 2H), 0,91 (□, 6H), 0,71-0,67 (□, 2H).
Los compuestos mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en este Ejemplo usando los materiales de partida apropiados. Las estructuras de los compuestos se muestran en la figura 1.
Compuesto Número
Nombre 1H RMN m/z
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,58 (s, 1 H), 7,76 -7,65 (m, 2
H), 7,59 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,10 -6,99 (m, 2 H), 6,14 (s,
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo
1 H), 4,49 (t, J = 6,4 Hz, 1 H), 4,43 (t, J = 6,5 Hz, 1 H),
341
1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil1-(1-(1-(oxetan-3-il)piperidin-4 4,37 (t, J = 6,1 Hz, 1 H), 4,34 -4,28 (m, 3 H), 4,21 -4,10 (m, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 3,30 -3,23 (m, 1 H), 2,75 (s a, 1 493
il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida
H), 2,71 -2,64 (m, 1 H), 2,60 (s, 3 H), 2,19 (s, 4 H), 1,90
(s a, 1 H), 1,75 (s a, 1 H), 1,53 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,42
(s a, 2 H), 1,11 -0,98 (m, 1 H), 0,72 -0,63 (m, 1 H)
343
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(1-metilpiperidin-4-il)etil)-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,58 (s, 1 H), 7,76 -7,65 (m, 2 H), 7,59 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,11 -6,99 (m, 2 H), 6,14 (s, 1 H), 4,31 (d, J = 5,1 Hz, 2 H), 4,13 (s a, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 2,83 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,61 -2,52 (m, 5 H), 2,19 (s, 3 H), 2,09 (s, 4 H), 1,88 (d, J = 10,7 Hz, 2 H), 1,53 (d, J = 6,7 Hz, 3 H), 1,34 (s a, 1 H), 1,02 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 0,66 (s a, 1 H) 451
(400 MHz ,DMSO-d6) δ 11,59 (s, 1 H), 7,77 -7,66 (m, 2 H), 7,60 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,12 -7,01 (m, 2 H), 6,15 (s,
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo
1 H), 4,32 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,13 (d, J = 7,1 Hz, 1 H),
359
1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1-(1(2-metoxietil)piperidin-4-il)etil)-2 3,85 (s, 3 H), 3,36 (t, J = 5,9 Hz, 2 H), 3,19 (s, 3 H), 2,94 (d, J = 10,5 Hz, 1 H), 2,71 -2,56 (m, 5 H), 2,43 -2,32 (m, 495
metil-1H-indolo-3-carboxamida
2 H), 2,24 -2,12 (m, 4 H), 1,54 (d, J = 6,9 Hz, 4 H), 1,39 1,27 (m, 2H), 1,02 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 0,65 (d, J = 12,7 Hz, 1 H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,79 -11,45 (m, 1 H), 7,78 7,65 (m, 2 H), 7,59 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,14 -6,99 (m, 2
(R o S)-1-(1-(1-etilpiperidin-4-
H), 6,15 (s, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,20 -4,08 (m,
360
il)etil)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil 1 H), 3,84 (s, 3 H), 2,98 -2,89 (m, 1 H), 2,71 -2,61 (m, 2 H), 2,59 (s, 3 H), 2,27 -2,21 (m, 2 H), 2,20 (s, 3 H), 1,94 465
1H-indolo-3-carboxamida
-1,80 (m, 2 H), 1,54 (s, 4 H), 1,38 -1,28 (m, 1 H), 1,06 0,98 (m, 1 H), 0,93 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 0,71 -0,63 (m, 1 H)
363
2-(4-(1-(3-(((4-metoxi-6-metil-2oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)carbamoil)-2-metil-1H-indol1-il)etil)piperidin-1-il)acetato de (R o S)-etilo (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,59 (s a, 1 H), 7,81 -7,65 (m, 2 H), 7,60 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,16 -6,98 (m, 2 H), 6,15 (s, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,23 -4,11 (m, 1 H), 4,04 (c, J = 7,0 Hz, 2 H), 3,84 (s, 3 H), 2,95 -2,86 (m, 1 H), 2,60 (s, 5 H), 2,20 (s, 4 H), 1,94 -1,79 (m, 2 H), 1,54 (d, J = 6,9 Hz, 4 H), 1,41 -1,32 (m, 1 H), 1,15 (t, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,04 (d, J = 6,0 Hz, 2 H), 0,71 -0,61 (m, 1 H) 523
366
(R o S)-N-((4-etil-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-metilpiperidin-4-il)etil)-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,63 (s, 1 H), 7,74 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,65 -7,56 (m, 2 H), 7,12 -7,01 (m, 2 H), 5,94 (s, 1 H), 4,34 (t, J = 5,1 Hz, 2 H), 4,19 -4,09 (m, 1 H), 2,88 (s a, 1 H), 2,71 -2,56 (m, 6 H), 2,14 (s, 7 H), 1,91 (d, J = 12,5 Hz, 1 H), 1,54 (d, J = 6,9 Hz, 4 H), 1,41 1,31 (m, 2 H), 1,14 (t, J = 7,6 Hz, 3 H), 1,05 (d, J = 9,1 Hz, 1 H), 0,68 (d, J = 12,7 Hz, 1 H) 449
367
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-metilpiperidin-4-il)etil)-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,59 (s, 1 H), 7,74 (d, J = 6,9 Hz, 1 H), 7,65 -7,56 (m, 2 H), 7,12 -7,01 (m, 2 H), 5,89 (s, 1 H), 4,38 -4,25 (m, 2 H), 4,20 -4,09 (m, 1 H), 2,95 (s a, 1 H), 2,68 (s a, 2 H), 2,58 (s, 3 H), 2,27 (s, 3 H), 2,21 (s a, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 1,94 (d, J = 13,8 Hz, 1 H), 1,54 (d, J = 6,9 Hz, 4 H), 1,44 -1,31 (m, 2 H), 1,07 (d, J = 12,5 Hz, 1 H), 0,71 (d, J = 13,2 Hz, 1 H) 435
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,59 (s a, 1 H), 7,73 (d, J = 7,6
Hz, 1 H), 7,65 -7,55 (m, 2 H), 7,12 -7,00 (m, 2 H), 5,89
375
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)etil)1H-indolo-3-carboxamida (s, 1 H), 4,53 -4,48 (m, 1 H), 4,47 -4,42 (m, 1 H), 4,38 (s, 1 H), 4,31 (t, J = 5,2 Hz, 3 H), 4,21 -4,10 (m, 1 H), 3,31 -3,24 (m, 2 H), 2,81 -2,64 (m, 2 H), 2,59 (s, 3 H), 2,26 (s, 3 H), 2,23 -2,16 (m, 1 H), 2,12 (s, 3 H), 1,98 1,85 (m, 1 H), 1,81 -1,70 (m, 1 H), 1,54 (d, J = 6,9 Hz, 3 477
H), 1,51 -1,22 (m, 1 H), 1,12 -0,96 (m, 2 H), 0,73 -0,64
(m, 1 H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,63 (s a, 1 H), 7,74 (d, J = 7,36 Hz, 1 H), 7,60 (d, J = 8,47 Hz, 2 H), 7,06 (quin, J = 7,13 Hz, 3 H), 5,94 (s, 1 H), 4,51 (t, J = 6,47 Hz, 1 H), 4,46 (t,
380
(R o S)-N-((4-etil-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)etil)1H-indolo-3-carboxamida J = 6,35 Hz, 1 H), 4,40 (t, J = 6,13 Hz, 1 H), 4,37 -4,30 (m, 2 H), 4,28 -4,11 (m, 1 H), 3,57 (s, 1 H), 3,34 (s a, 2 H), 2,81 (d, J = 10,70 Hz, 1 H), 2,67 (d, J = 14,94 Hz, 1 H), 2,64 -2,57 (m, 4 H), 2,21 (d, J = 10,93 Hz, 1 H), 2,14 (s, 3 H), 1,93 (d, J = 12,49 Hz, 1 H), 1,83 (t, J = 11,37 Hz, 1 H), 1,54 (d, J = 6,91 Hz, 3 H), 1,37 (d, J = 10,48 Hz, 1 H), 1,25 (c, J = 6,91 Hz, 1 H), 1,14 (t, J = 7,58 Hz, 3 H), 1,06 (d, J = 9,81 Hz, 1 H), 0,70 (d, J = 12,49 Hz, 1 H) 491
381
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4il)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3carboxamida 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,60 (s a, 1 H), 7,74 (d, J = 7,13 Hz, 1 H), 7,66 -7,50 (m, 2 H), 7,15 -6,99 (m, 2 H), 5,89 (s, 1 H), 4,40 -4,24 (m, 2 H), 4,21 -4,07 (m, 1 H), 3,95 -3,78 (m, 2 H), 3,57 (s, 1 H), 3,32 -3,17 (m, 3 H), 2,68 (s a, 1 H), 2,58 (s, 3 H), 2,33 (s a, 2 H), 2,27 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 2,00 -1,88 (m, 2 H), 1,75 (d, J = 12,04 Hz, 1 H), 1,62 (s a, 2 H), 1,54 (d, J = 6,91 Hz, 3 H), 1,46 -1,30 (m, 2 H), 1,01 (s a, 1 H), 0,72 (s a, 1 H) 505
440
3-(4-(1-(3-(((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)carbamoil)2-metil-1H-indol-1-il)etil)piperidin1-il)azetidin-1-carboxilato de (R o S)-terc-butilo 576
(400 MHz, DMSO-d6) δ 11,63 -11,56 (m, 1 H), 7,76
7,70 (m, 1 H), 7,64 -7,55 (m, 2 H), 7,05 (s, 2 H), 5,89 (s,
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2
1 H), 4,56 (s, 4 H), 4,31 (s, 2 H), 4,19 -4,09 (m, 1 H),
377
dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-(1-metilazetidin-3-il)piperidin 3,36 (d, J = 4,9 Hz, 1 H), 2,77 -2,56 (m, 5 H), 2,26 (s, 3 H), 2,18 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 1,94 -1,85 (m, 1 H), 1,78 490
4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida
-1,67 (m, 1 H), 1,53 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,50 -1,45 (m,
1 H), 1,44 -1,22 (m, 2 H), 1,07 -0,93 (m, 1 H), 0,71
0,61 (m, 1 H)
Ejemplo 3. Síntesis de (R o S)-1-(1-(1-(2-fluoroetil)piperidin-4-il)etil)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida (Compuesto 356):
Un vial de 25 ml se cargó con una barra de agitación magnética, clorhidrato de (R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (0,062 g, 0,131 mmol), K2CO3 (0,072 g, 0,524 mmol), MeCN (0,655 ml, 0,131 mmol), DMF (0,262 ml, 0,131 mmol) y 1-bromo-2-fluoroetano (0,020 ml, 0,262 mmol). La reacción se tapó y se calentó a 82 ºC con agitación durante 4 h. La reacción se dejó 10 enfriar a ta, se filtró, y el filtrado se pre-adsorbió sobre gel de sílice (12 g). El material se purificó a través de cromatografía sobre SiO2 (25 g) usando DCM/MeOH/Et3N (85:15:0,5) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un sólido de color blanquecino (30 mg, 0,059 mmol, rendimiento del 45,1 %). LCMS 483 (M+1)+; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,59 (s, 1H), 7,75-7,68 (m, 2H), 7,60 (d, 1 H) 7,09-7,03 (m, 2H), 6,15 (s, 1H) 4,53-4,51 (m, 1H), 4,42-4,39 (m, 1H), 4,32 (d, 2H), 4,24-4,2 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 2,98 (d a, 1 H), 2,70-2,49
15 (m, 4H), 2,60 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 2,01 (dt, 1H), 1,92-1,90 (m, 1H), 1,75-1,71 (m, 1H), 1,54 (d, 3H), 1,38-1,36 (m, 1H), 1,02-0,98 (m, 1H), 0,7-0,66 (d a, 1H).
Los compuestos mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en este Ejemplo usando los materiales de partida apropiados. Las estructuras de los compuestos se muestran en la 20 figura 1.
Compuesto Número
Nombre 1H RMN m/z
(400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,60 (s a, 1 H), 7,77 -7,66
(R o S)-1-(1-(1-(2,2
(m, 2 H), 7,60 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,14 -7,00 (m, 2 H),
difluoroetil)piperidin-4-il)etil)-N-((4
6,15 (s, 1 H), 6,06 (t, J = 55,7 Hz, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9
362
metoxi-6-metil-2-oxo-1,2- Hz, 2 H), 4,15 (s a, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,03 -2,93 (m, 2 501
dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-
H), 2,73 -2,62 (m, 3 H), 2,60 (s, 3 H), 2,26 -2,10 (m, 4
indolo-3-carboxamida
H), 1,93 -1,79 (m, 1 H), 1,59 -1,46 (m, 4 H), 1,41
1,29 (m, 1 H), 1,11 -0,97 (m, 1 H), 0,67 (s a, 1 H)
(400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,60 (s a, 1 H), 7,78 -7,66
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo
(m, 2 H), 7,60 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,13 -7,00 (m, 2 H),
1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil
6,15 (s, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,22 -4,09 (m, 1
378
1-(1-(1-(3,3,3- H), 3,84 (s, 3 H), 3,03 -2,91 (m, 1 H), 2,73 -2,64 (m, 1 533
trifluoropropil)piperidin-4-il)etil)-1H-
H), 2,60 (s, 3 H), 2,48 -2,31 (m, 5 H), 2,20 (s, 3 H),
indolo-3-carboxamida
2,01 -1,85 (m, 2 H), 1,58 -1,46 (m, 4 H), 1,36 -1,29
(m, 1 H), 1,08 -0,98 (m, 1 H), 0,73 -0,62 (m, 1 H)
(500 MHz, DMSO-d6) δ = 11,59 (s, 1 H), 7,74 (d, J =
7,6 Hz, 1 H), 7,71 -7,66 (m, 1 H), 7,61 (d, J = 7,8 Hz, 1
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-
H), 7,13 -7,01 (m, 2 H), 6,15 (s, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9
365
1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil1-(1-(1-(2,2,2-tritluoroetil)piperidin-4- Hz, 2 H), 4,22 -4,12 (m, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,15 -2,95 (m, 3 H), 2,75 -2,66 (m, 1 H), 2,60 (s, 3 H), 2,39 -2,31 519
il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida
(m, 1 H), 2,20 (s, 3 H), 2,05 -1,98 (m, 1 H), 1,92 -1,84
(m, 1 H), 1,56 -1,46 (m, 4 H), 1,42 -1,32 (m, 1 H), 1,11
-1,01 (m, 1 H), 0,69 -0,62 (m, 1 H)
441
(R o S)-1-(1-(1-(2,2difluoroetil)piperidin-4-il)etil)-N-((4,6dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1H-indolo-3carboxamida (400 MHz ,DMSO-d6) δ = 11,59 (s, 1 H), 7,73 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,65 -7,55 (m, 2 H), 7,12 -7,00 (m, 2 H), 6,22 -5,90 (m, 1 H), 5,89 (s, 1 H), 4,36 -4,25 (m, 2 H), 4,20 -4,09 (m, 1 H), 3,01 -2,93 (m, 1 H), 2,72 -2,59 (m, 3 H), 2,58 (s, 3 H), 2,26 (s, 3 H), 2,21 -2,13 (m, 2 H), 2,12 (s, 3 H), 1,92 -1,79 (m, 2 H), 1,53 (s, 4 H), 1,41 -1,29 (m, 1 H), 1,10 -0,97 (m, 1 H), 0,70 -0,59 (m, 1 H) 485
Ejemplo de referencia 4. Síntesis de (R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1(1-(1-(pirimidin-2-il)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (Compuesto 361).
En un vial resellable se añadieron 2-cloropirimidina (185 mg, 1,611 mmol), clorhidrato de (R o S)-N-((4-metoxi-6metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (508 mg, 1,074 mmol), y EtOH (8 ml). A esta solución se le añadió Et3N (449 µl, 3,22 mmol). El vial se cerró herméticamente y 10 se calentó a 100 ºC durante una noche. La solución se dejó enfriar a temperatura ambiente y se concentró al vacío. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (hexanos: (3:2 de DCM:IPA)) para proporcionar el compuesto del título en forma de un sólido (357 mg, 0,694 mmol, rendimiento del 64,6 %). LCMS 515 (M+1)+; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ 11,60 (s, 1 H), 8,30 (d, J = 4,7 Hz, 2 H), 7,76 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 7,73 -7,64 (m, 2 H), 7,14 -7,01 (m, 2 H), 6,55 (t, J = 4,7 Hz, 1 H), 6,15 (s, 1 H), 4,84 -4,75 (m, 1 H), 4,57 -4,47 (m, 1 H), 4,33 (d, J = 4,2
15 Hz, 2 H), 4,22 -4,11 (m, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 2,92 -2,81 (m, 1 H), 2,63 -2,52 (m, 4 H), 2,20 (s, 3 H), 2,05 -1,94 (m, 1 H), 1,61 -1,49 (m, 4 H), 1,34 -1,21 (m, 1 H), 1,04 -0,91 (m, 1 H), 0,83 -0,75 (m, 1 H).
El compuesto mostrado en la siguiente tabla se preparó de acuerdo con el procedimiento general descrito en este Ejemplo usando los materiales de partida apropiados. La estructura del compuesto se muestra en la figura 1.
Compuesto Número
Nombre 1H RMN m/z
373
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1-(1-(1(piridin-2-il)piperidin-4-il)etil)1H-indolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,60 (s a, 1 H), 8,06 (d, J = 3,6 Hz, 1 H), 7,82 -7,62 (m, 3 H), 7,51 -7,39 (m, 1 H), 7,17 -6,98 (m, 2 H), 6,75 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 6,61 -6,49 (m, 1 H), 6,15 (s, 1 H), 4,49 -4,38 (m, 1 H), 4,33 (d, J = 3,8 Hz, 2 H), 4,24 -4,03 (m, 2 H), 3,85 (s, 3 H), 2,90 -2,70 (m, 2 H), 2,58 (s, 3 H), 2,20 (s, 3 H), 2,06 -1,91 (m, 1 H), 1,63 -1,47 (m, 4 H), 1,40 -1,27 (m, 1 H), 1,07 -0,94 (m, 1 H), 0,82 -0,72 (m, 1 H) 514
Ejemplo de referencia 5. Síntesis de (R o S)-1-(1-(1-(2-hidroxietil)piperidin-4-il)etil)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida (Compuesto 347).
En un tubo cerrado herméticamente cargado con una barra de agitación magnética se añadió (R o S)-N-((4-metoxi6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (0,1 g, 0,229 mmol) y DCM (3 ml) y la reacción se enfrió a 0 ºC. A la mezcla de reacción enfriada se le añadió oxirano que se condensó en el vial de reacción (~1 ml). La reacción se dejó en agitación a ta durante 4 h y después se concentró 10 al vacío para proporcionar el material en bruto que se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (12 g) usando acetato de etilo/MeOH (4:1) como eluyente para proporcionar el compuesto del título en forma de un sólido de color blanco (50 mg). LCMS 481 (M+1)+; 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) δ) δ 11,58 (s, 1 H), 7,77 -7,65 (m, 2 H), 7,59 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,11 -6,99 (m, 2 H), 6,14 (s, 1 H), 4,54 -4,44 (m, 1 H), 4,31 (d, J = 5 .1 Hz, 3 H), 4,13 (dd, J = 7,1, 10,3 Hz, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 3,42 (c, J = 6,0 Hz, 2 H), 2,93 (s a, 1 H), 2,71 -2,56 (m, 4 H), 2,31 (s a, 2 H), 2,19 (s, 3
15 H), 2,03 -1,83 (m, 2 H), 1,64 (s a, 1 H), 1,53 (d, J = 6,9 Hz, 3 H), 1,32 (d, J = 11,1 Hz, 1 H), 1,02 (d, J = 10,3 Hz, 1 H), 0,65 (d, J = 11,8 Hz, 1 H).
Los compuestos mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en este Ejemplo usando los materiales de partida apropiados. Las estructuras de los compuestos se muestran en la 20 figura 1.
Compuesto Número
Nombre 1H RMN m/z
352
(R o S)-1-(1-(1-(2-hidroxi-2metilpropil)piperidin-4-il)etil)-N-((4metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,58 (s a, 1 H), 7,76 7,65 (m, 2 H), 7,58 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,10 -6,99 (m, 2 H), 6,14 (s, 1 H), 4,31 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,14 (s a, 1 H), 3,94 (s, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 3,56 (s, 2 H), 3,01 (d, J = 11,4 Hz, 1 H), 2,73 -2,64 (m, 1 H), 2,59 (s, 3 H), 2,19 (s, 3 H), 2,16 -2,03 (m, 2 H), 1,52 (d, J = 6,9 Hz, 4 H), 1,34 (s a, 2 H), 1,02 (d, J = 4,5 Hz, 7 H), 0,66 -0,58 (m, 1 H) 509
369
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1-(1-(2hidroxi-2-metilpropil)piperidin-4il)etil)-2-metil-1H-indolo-3carboxamida (400 MHz ,DMSO-d6) δ 11,59 (s a, 1 H), 7,77 -7,69 (m, 1 H), 7,60 (s a, 2 H), 7,06 (s a, 2 H), 5,89 (s, 1 H), 4,31 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 4,20 -4,09 (m, 1 H), 4,00 -3,92 (m, 1 H), 3,58 -3,55 (m, 2 H), 3,19 -3,10 (m, 1 H), 3,07 -2,95 (m, 1 H), 2,74 -2,63 (m, 1 H), 2,59 (s a, 3 H), 2,27 (s, 3 H), 2,12 (s, 3 H), 1,89 -1,72 (m, 1 H), 1,54 (s a, 4 H), 1,30 -1,14 (m, 2 H), 1,03 (s a, 6 H), 0,84 -0,57 (m, 2 H) 493
Ejemplo 6. Síntesis de (R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-6-fenil-1-(1(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida (Compuesto 374).
Un tubo de reacción de 25 ml se cargó con una barra de agitación magnética, ácido fenilborónico (72,6 mg, 0,596 mmol), K3PO4 (103 mg, 0,447 mmol), pre-catalizador X-Phos (Cloro(2-diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropil1,1'-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil)]paladio (II)) (4,92 mg, 5,96 µmol), y el vial se cerró herméticamente. El vial se 30 evacuó/rellenó con nitrógeno (3 x) antes de la adición de 6-cloro-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo3-carboxilato de metilo (Compuesto 314) (100 mg, 0,298 mmol) en forma de una solución en 1,4-dioxano (1 ml). Después, el vial se calentó a 100 ºC durante una noche con agitación. Después, el vial se dejó enfriar a temperatura ambiente y la reacción se concentró al vacío. El residuo en bruto se purificó a través de cromatografía sobre SiO2 (10 g) usando un eluyente de acetato de etilo/hexanos (4:1) el compuesto del título en forma de un sólido de color
35 blanco (106 mg, 0,281 mmol, rendimiento del 94 %). LCMS 514 (M+1)+; 1H RMN 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,59 (s, 1 H), 7,98 -7,84 (m, 2 H), 7,75 -7,67 (m, 3 H), 7,47 (t, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,39 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,35 -7,27 (m, 1 H), 6,15 (s, 1 H), 4,35 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,25 -4,12 (m, 1 H), 3,93 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 3,86 -3,77 (m, 3 H), 3,67 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 3,39 -3,32 (m, 1 H), 3,10 -3,00 (m, 1 H), 2,62 (s, 3 H), 2,21 (s, 3 H), 1,85 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 1,63 -1,49 (m, 4 H), 1,45 -1,33 (m, 1 H), 1,20 -0,99 (m, 1 H), 0,66 (d, J = 12,0 Hz, 1 H).
Ejemplo de referencia 7. Síntesis de ácido (R o S)-2-(4-(1-(3-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metilcarbamoil)-2-metil-1H-indol-1-il)etil)piperidin-1-il)acético (Compuesto 364).
En un matraz de fondo redondo cargada con una barra de agitación magnética se añadieron 2-(4-(1-(3-((4-metoxi-6metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metilcarbamoil)-2-metil-1H-indol-1-il)etil)piperidin-1-il)acetato de (R o S)-etilo (Compuesto 363) (69 mg, 0,132 mmol), THF (1,5 ml), MeOH (1,5 ml), y agua (0,75 ml). A esta solución se le añadió hidróxido de litio monohidrato (5,54 mg, 0,132 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Los 10 extractos orgánicos se retiraron a presión reducida y la solución acuosa resultante se purificó a través de HPLC de fase inversa (agua/MeCN) 0 → 95 % para proporcionar el compuesto del título (66 mg, 0,108 mmol, rendimiento del 82 %). LCMS 514 (M+1)+1H RMN (400 MHz ,DMSO-d6) δ = 11,67 (s, 1 H), 9,65 (s, 1 H), 7,84 -7,68 (m, 2 H), 7,63 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,14 -7,03 (m, 2 H), 6,18 (s, 1 H), 4,33 (d, J = 3,6 Hz, 2 H), 4,27 -4,15 (m, 1 H), 4,04 (s a, 2 H), 3,85 (s, 3 H), 3,57 (s, 1 H), 3,35 -3,23 (m, 1 H), 3,14 -2,99 (m, 1 H), 2,86 -2,74 (m, 1 H), 2,62 (s, 3 H), 2,21 (s, 3 H),
15 2,18 -2,08 (m, 1 H), 1,75 (s, 1 H), 1,60 -1,49 (m, 4 H), 1,46 -1,33 (m, 1 H), 0,92-0,81 (m, 1 H).
Ejemplo 8. Síntesis de 2-metil-6-(piridin-3-il)-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo. Este intermedio se usó como un material de partida alternativo en la Etapa 7 expuesta en el Ejemplo 1 para la síntesis de otros compuestos de la invención.
2-Metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indolo-3-carboxilato
de (R o S)-metilo
25 En un matraz de fondo redondo se añadieron Pd(OAc)2 (10,03 mg, 0,045 mmol), acetato potásico (219 mg, 2,233 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(1,3,2-dioxaborolano) (567 mg, 2,233 mmol), y 2-diciclohexilfosfino2',4',6' -triisopropilbifenilo (XPhos) (85 mg, 0,179 mmol), y el vial se cerró herméticamente. En este recipiente se añadió 6-cloro-2-metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo (Etapa 6) (500 mg, 1,489 mmol) disuelto en dioxano (3,4 ml) y la reacción se evacuó/rellenó con N2 (3 x) antes del calentamiento a
30 100 ºC durante una noche. Después, la reacción se dejó enfriar a ta y se diluyó con EtOAc. La reacción se filtró a través de tierra de diatomeas y el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título que se usó en reacciones posteriores sin purificación adicional. LCMS 428 (M+1)+.
2-Metil-6-(piridin-3-il)-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o S)-metilo:
En un vial resellable se añadieron K2CO3 (206 mg, 1,488 mmol), un aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (60,8 mg, 0,074 mmol), y el vial se cerró herméticamente. Este vial se evacuó/rellenó con N2 (3 x) antes de la adición de 2metil-1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-indolo-3-carboxilato de (R o
40 S)-metilo (318 mg, 0,744 mmol) disuelto en 1,4-dioxano (4 ml), 3-bromopiridina (71,7 µl, 0,744 mmol), y agua (400 µl). La reacción se evacuó/rellenó con N2 (3 x) antes de calentarse 100 ºC. La solución se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con EtOAc. La solución se filtró y se concentró al vacío. El residuo en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (10 g, EtOAc/hex (1:1)) para proporcionar el compuesto del título (101 mg, 0,267 mmol, rendimiento del 35,9 %). LCMS 379 (M+1)+.
45 Ejemplo 9. Otros intermedios de carboxilato de alquilo. Los siguientes intermedios de carboxilato de alquilo se sintetizaron de una manera análoga a la expuesta en la Etapa 2 del Ejemplo 1, usando un material de partida y reactivo apropiados.
Nombre
Estructura m/z
5-fluoro-1-(1-metoxipropan-2-il)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de (±)-etilo
294
6-fluoro-1-(1-metoxipropan-2-il)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de (±)-etilo
294
1-(1-metoxipropan-2-il)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de (±)-etilo
276
1-(1-metoxipropan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de (±)-tercbutilo
305
1-(1-etoxipropan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de (±)-terc-butilo
319
1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo
319
1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil-6-(metilsulfonil)-1H-indolo-3-carboxilato de etilo
368
1-(3-metoxipentan-2-il)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de (±)-etilo
304
Ejemplo 10. Otros compuestos de la invención producidos a partir de intermedios de ácido carboxílico. Los siguientes compuestos se sintetizaron de una manera análoga a la expuesta en la Etapa 4 del Ejemplo 1, usando un 5 material de partida apropiado. Las estructuras de estos compuestos se exponen en la figura 1.
Compuesto
Nombre 1H RMN m/z
304
(±)-1-(1-(4,4-difluorociclohexil)etil)N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (CDCl3, 400 MHz) δ 12,63-12,64 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 7,84(s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,42-7,40 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 7,06-7,00 (m, 2H), 5,90-5,89 (d, J = 3,6 Hz 1H), 4,66-4,62 (t, J = 14 Hz, 2H), 4,11-4,08 (m, 1H), 3,88-3,87 (d, J = 3,6 Hz, 3H), 2,99-2,76 (m, 3H), 2,36 (s,1H), 2,25 (s, 3H), 2,17-2,16 (d, J = 3,2 Hz, 2H), 2,08-2,05 (m, 2H), 1,841,70 (m, 2H), 1,61 (s, 1H), 1,51-1,47 (m, 2H) 427
230
(±)-5-fluoro-N-((4-metoxi-6-metil-2oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1(1-metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, CD3OD) δ 7,59-7,55 (m, 1H), 7,42-7,39 (m, 1H), 6,95-6,90 (m, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,12 (s, 3H), 3,993,94 (m, 1H), 3,72-3,65 (m, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,64(s, 3H), 2,54 (s, 3H), 1,59-1,57(d, 3H) 416
231
(±)-6-fluoro-N-((4-metoxi-6-metil-2oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1(1-metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, CD3OD) δ 7,70-7,66 (m, 1H), 7,36-7,33 (m, 1H), 6,94-6,89 (m, 2H), 4,56 (s, 2H), 4,11 (s, 3H), 3,973,92 (m, 1H), 3,71-3,67 (m, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,62(s, 3H), 2,53 (s, 3H), 1,58-1,56(d, 3H) 416
218
(±)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, CD3OD) δ 7,69 (d, J = 7,2 Hz,1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz,1H), 7,12 (m, 2H), 6,26 (s,1H), 4,80(m,1H), 4,52 (s,2H), 3,99 (m, 4H),3,75 (m, 1H),3,20 (s, 3H), 2,62 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,59 (d, J = 7,2 Hz, 3H) 398
183
(±)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, CD3OD) δ 7,74 (m, 1H), 7,57 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,15 (m, 2H), 6,14 (s,1H), 4,86 (m, 1H), 4,55(s, 2H), 4,02 (m, 1H),3,77 (m, 1H),3,22 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,62 (d, J = 7,2 Hz, 3H) 382
204
(±)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (400 MHz, CDCl3) δ 13,23 (s, 1H), 8,16-8,17 (m, 1H), 8,11-8,13 (m, 1H), 7,57-7,60 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 6,93-6,96 (m, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,82-4,83 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,654,66 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,81-3,85 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,79 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,64-1,66 (d, J = 8,0 Hz, 3H) 399
211
(±)-1-(1-ciclopropiletil)-N-((4,6dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1H-pirrolo[2,3b]piridin-3-carboxamida 379
212
(±)-1-(1-etoxipropan-2-il)-N-((4metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (400 MHz, CDCl3) δ 8,173-8,189 (m, 1H), 8,13-8,153 (m, 1H), 7,563(s, 1H), 6,977-7,008 (m, 1H), 5,938 (s, 1H), 4,652-4,667 (d, 2H), 4,177(s, 1H), 3,309-3,454 (m, 2H), 3,94-3,98(m, 1H), 2,806 (s , 3H), 2,212 (s, 3H), 1,6651,682 (d, 3H), 1,044 (t, 3H) 413
235
(±)-N-((4-etoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (400 MHz, CDCl3) δ 12,5 (s, 1H), 8,11-8,18 (m, 2H), 7,60 (s, 1H), 6,95-6,98 (m, 1H), 5,90 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,10-4,21 (m, 3H), 3,82-3,83 (m, 1H), 3,23 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,65-1,66 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 1,44-1,47 (t, J = 7,2 Hz , 3H). 413
241
N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3metoxibutan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (400 MHz, CD3OD): δ 8,67-8,65 (d, 1H), 8,45-8,44 (d, 1H), 7,59-7,55(m, 1H), 6,70 (s, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,61 (s, 2H), 4,07 (s, 1H), 3,32 (s, 3H), 2,75(s, 3H), 2,56 (s, 3H), 2,42(s, 3H), 1,68-1,66(d, 3H), 1,16-1,15(d, 3H). 397
280
(±)-N-((6-etil-4-metoxi-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 8,25-8,29 (m, 2H). δ 7,287,31 (m, 1H). 6,89 (s, 1H), 4,93-4,95 (a, 1H), 4,58 (s, 2H), 4,2-4,25 (m, 1H),4,13 (s, 3H), 3,77-3,81 (m, 1H), 3,24 (s, 3H), 2,79-2,84 (c, 1H), 2,72 (s, 3H), 1,66-1,68 (d, J = 7,2 Hz, 3H) 1,32-1,36 (t, 3H) 413
288
(R o S)-N-((4-Metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil1-(1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3carboxamida (400 MHz, d6-DMSO) δ 11,57 -11,65 (m, 1H), 8,18 8,23 (m, 1H), 8,07 -8,12 (m, 1H), 7,83 -7,91 (m, 1H), 7,07 -7,15 (m, 1H), 6,15 s (s,1 H), 4,31 (d, J = 4,46 Hz, 1H), 4,04 -4,20 (m, 1H), 3,88 -3,97 (m, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,59 -3,70 (m, 1H), 2,97 -3,10 (m, 1H), 2,79 -2,93 (m, 1H), 2,67 (s a, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,78 -1,88 (m, 1H), 1,53 -1,68 (m, 3H), 1,28 -1,41 (m, 2H), 0,97 -1,13 (m, 2H), 0,56 -0,68 (m, 1H) 439
306
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,73 -11,56 (m, 1 H), 8,19 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 8,06 (dd, J = 1,4, 7,9 Hz, 1 H), 7,82 (s a, 1 H), 7,10 (dd, J = 4,7, 7,8 Hz, 1 H), 5,91 (s, 1 H), 4,30 (s a, 2 H), 4,19 -4,02 (m, 1 H), 3,90 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 3,63 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 3,29 (s, 1 H), 3,06 (s, 1 H), 2,92 -2,74 (m, 1 H), 2,64 (s a, 3 H), 2,25 (s, 3 H), 2,11 (s, 3 H), 1,80 (s a, 1 H), 1,59 (s a, 3 H), 1,41-1,24 (m, 1H), 1,09 (s, 2 H), 0,67 -0,52 (m, 1 H) 423
277
(±)-1-(3-metoxi-3-metilbutan-2-il)-N((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz ,DMSO-d6) δ = 12,01 -11,82 (m, 1 H), 7,91 7,82 (m, 2 H), 7,71 -7,64 (m, 1 H), 7,06 -6,96 (m, 2 H), 6,25 (s, 1H), 4,43 (c, J = 7,1 Hz, 1 H), 4,33 (s a, 2 H), 3,86 (s, 3 H), 3,14 -3,09 (m, 3 H), 2,61 (s, 3 H), 2,23 (s, 3 H), 1,58 -1,52 (m, 3 H), 1,27 (s, 3 H), 0,88 (s, 3 H) 426
275
(±)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3metoxipentan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida 410
294
(±)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-indolo3-carboxamida (CDCl3, 400 M Hz) δ 7,85 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,45 (s, 2H), 7,08-7,03 (m, 2H), 5,93 (s, 1H), 4,71-4,61 (m, 2H), 4,36 (s, 1H), 3,90 (s, 4H), 2,95 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,57 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,23 (d, J = 6,0 Hz, 3H) 412
290
(±)-1-(3-etoxibutan-2-il)-N-((4metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,60 (s a, 1 H), 7,72 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 5,1 Hz, 2 H), 7,09 -6,98 (m, 2 H), 6,14 (s, 1 H), 4,41 -4,35 (m, 1 H), 4,32 (d, J = 4,9 Hz, 2 H), 4,03 -3,93 (m, 1 H), 3,83 (s, 3 H), 3,25 (d, J = 9,4 Hz, 1 H), 2,82 -2,72 (m, 1 H), 2,62 (s a, 3 H), 2,19 (s, 3 H), 1,52 (d, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,15 (d, J = 6,0 Hz, 3 H), 0,68 (t, J = 6,9 Hz, 3 H) 426
293
N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1, 2dihidropiridin-3-il) metil)-1-(3metoxipentan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo [2, 3-b] piridin-3carboxamida (400 MHz, CDCl3): δ 8,19-8,13 (m, 2H), 7,57-7,55 (t, 1H), 6,99-6,96 (m, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,67-4,65 (m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,16 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,80 (s, 3H), 2,77 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,87-1,81 (m, 1H), 1,67-1,65 (m,3H), 1,53-1,45 (m,3H), 1,02-0,99 (m, 3H) 427
299
N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3metoxipentan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida (400 MHz, CDCl3) δ 7,87-7,86 (d, 1H), 7,52-7,45 (m, 2H), 7,10-7,02 (m, 2H), 4,72-4,64 (dd, 2H), 4,45-4,42 (s 1H), 3,9 (s, 3H), 3,73 (s, 1H), 2,8-2,7 (d, 6H), 2,17 (s, 3H), 1,80-1,75 (m,1H), 1,58 (s, 3H), 1,25 (m,1H), 1,03-0,99 (t, 3H) 425
Ejemplo de referencia 11. Síntesis de 1-(1-(1,4-dioxan-2-il)etil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de metilo. El compuesto del título se usó como un material de partida de carboxilato de alquilo alternativo en la Etapa 3 del Ejemplo 1.
Etapa 1: 1-(1,4-dioxan-2-il)etanona:
10 A una solución de peróxido benzoico (20 g, 141 mmol) en 200 ml de 1,4-dioxano a temperatura ambiente en una atmósfera de nitrógeno se le añadió biacetilo (24,3 g, 282 mmol). Después de la adición, la mezcla se calentó a reflujo y se agitó durante 24 horas. La mezcla de reacción se enfrió a 0 ºC. El pH se ajustó a aproximadamente 9 añadiendo progresivamente hidróxido sódico 2 N por debajo de 0 ºC, se extrajo con 2-metoxi-2-metilpropano (10 ml x 3), y se concentró para dar 1-(1,4-dioxan-2-il)etanona (13 g, 36 %) en forma de un aceite de color amarillo que se
15 usó directamente en la siguiente etapa sin purificación.
Etapa 2: 1-(1,4-dioxan-2-il)etanamina:
20 A una solución de 1-(1,4-dioxan-2-il)etanona (12 g, 92,2 mmol) en 1,2-dicloroetano (100 ml) se le añadió (4metoxifenil)metanamina (25 g, 184,4 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se dejó en agitación durante 3 horas, y después se añadió triacetoxiborohidruro sódico (39 g, 184,4 mmol). La mezcla resultante se dejó en agitación durante 48 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se inactivó añadiendo agua y se extrajo con diclorometano (100 ml x 3). La fase orgánica combinada se secó mediante sulfato sódico anhidro y después se
25 filtró. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluato: diclorometano/metanol 100:1 → 50:1 → 20:1) para dar 1-(1,4-dioxan-2-il)-N-(4-metoxibencil)etanamina (16,4 g,
71 %) en forma de un sólido de color amarillo. LCMS (M + H+) m/z: calc. 251,15, observado 251,9. A una solución de 1-(1,4-dioxan-2-il)-N-(4-metoxibencil)etanamina (5 g, 19,9 mmol) en metanol anhidro (100 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (240 mg, 2 mmol), después se purgó con hidrógeno (30 psi (206,84 kPa)), y la mezcla se dejó en agitación durante una noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró, y el filtrado se concentró
5 para proporcionar el compuesto del título (2,5 g, 96 %) en forma de un sólido de color pardo.
Los intermedios amina mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito anteriormente usando los materiales de partida y modificaciones apropiadas.
Nombre
Estructura m/z
3-(1-aminoetil)piperidin e-1-carboxilato de terc-butilo
228
(±)-1-(4,4-difluorociclohexil)etanamina
164
(±)-1-(1-(metilsulfonil)azetidin-3-il)etanamina
179
4-(4-(1-aminoetil)47yridin e-2-il)piperazin-1-carboxilato de (±)-terc-butilo
307
Etapa 3: 3-((1-(1,4-dioxan-2-il)etil)imino)-2-(2-bromofenil)butanoato de (E)-metilo:
A una solución de 1-(1,4-dioxan-2-il)etanamina (2,5 g, 19 mmol) en metanol (100 ml) se le añadieron 2-(2
15 bromofenil)-3-oxobutanoato de metilo (5,4 g, 20 mmol) y ácido acético (1,8 g, 30 mmol). El sistema de reacción resultante se calentó a reflujo y se dejó agitar durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluida: diclorometano/metanol, 50:1 → 20:1 → 5:1) el compuesto del título (1 g, 14 %) en forma de un sólido de color pardo. LCMS (M + H+) m/z: calc. 383,07, observado 384,9.
20 Los intermedios imino-bromo mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito anteriormente usando los materiales de partida (por ejemplo, una de las aminas expuestas en la tabla en la Etapa 2 de este ejemplo) y modificaciones apropiadas.
Nombre
Estructura m/z
3-(1-((3-(2-bromofenil)-4-metoxi-4-oxobutan-2-ilideno)amino)etil)piperidin-1carboxilato de (E)-terc-butilo
482
2-(2-bromofenil)-3-((1-(4,4-difluorociclohexil)etil)imino)butanoato de (±)-(E)metilo
417
4-((3-(2-bromofenil)-4-metoxi-4-oxobutan-2-ilideno)amino)piperidin-1carboxilato de (E)-terc-butilo
454
2-(2-bromofenil)-3-(quinolin-5-ilamino)but-2-enoato de (Z)-metilo
398
2-(2-bromofenil)-3-(ciclopentilimino)butanoato de (E)-metilo
339
2-(2-bromofenil)-3-((6-metilquinolin-5-il)imino)butanoato de (E)-metilo
412
2-(2-bromofenil)-3-((1-(1-(metilsulfonil)azetidin-3-il)etil)imino)butanoato de (±)-(E)-metilo
432
4-(4-((3-(2-bromofenil)-4-metoxi-4-oxobutan-2-ilideno)amino)piridin-2il)piperazin-1-carboxilato de (±)-(E)-terc-butilo
559
2-(2-bromofenil)-3-((2,5-dimetilfenil)amino)but-2-enoato de (E)-metilo
375
2-(2-bromofenil)-3-((2,3-dimetilfenil)amino)but-2-enoato de (E)-metilo
375
2-(2-bromofenil)-3-(quinolin-6-ilimino)butanoato de (E)-metilo
398
Etapa 4: 1-(1-(1,4-Dioxan-2-il)etil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de metilo:
5 A una solución de 3-((1-(1,4-dioxan-2-il)etil)imino)-2-(2-bromofenil)butanoato de (E)-metilo (400 mg, 1,1 mmol) en dioxano (3 ml) se le añadieron Cloro[2-(diciclohexilfosfino)-3,6-dimetoxi-2',4',6'-triisopropilbifenil][2-(2aminoetil)fenil]Pd(II) (160 mg, 0,2 mmol), 2-Diciclohexifosfino-2',6'-diisopropoxibifenilo (93 mg, 0,2 mmol) y tercbutóxido sódico (192 mg, 2 mmol). La mezcla de reacción resultante se calentó a 120 ºC con agitación durante 30 min en un microondas. La mezcla de reacción se inactivó añadiendo agua y se extrajo con acetato de etilo (25 ml
10 x 3). La fase orgánica combinada se secó mediante sulfato sódico anhidro y después se filtró. El filtrado se concentró y se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluida: éter de petróleo/éster acético, 10:1 → 5:1 → 2:1) para proporcionar el compuesto del título (282 mg, 89 %) en forma de un sólido de color amarillo. LCMS (M + H+) m/z: calc. 303,15, observado 303,9.
15 El compuesto mostrado en la siguiente tabla se preparó de acuerdo con el procedimiento general descrito anteriormente usando los materiales de partida (por ejemplo, uno de los intermedios imino-bromo mostrados en la tabla en la Etapa 3 de este ejemplo) y modificaciones apropiadas.
Nombre
Estructura m/z
1-(1-(4,4-difluorociclohexil)etil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxilato de (±)-metilo
336
20 Estos carboxilatos de alquilo se usaron también como material de partida en la Etapa 3 del Ejemplo 1 en la síntesis de ciertos compuestos de la invención.
Ejemplo 12. Separación quiral del Compuesto 219 para proporcionar los Compuestos 223 y 224. Se sometió N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1-metoxipropan-2-il)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida
25 (200 mg) (Compuesto 219) a cromatografía quiral a través de cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) (A:C2H5OH, B:NH3·H2O. A:B = 55:45, columna AD) para proporcionar los enantiómeros separados 223 (Pico 1) y 224 (Pico 2) (60 mg cada uno) LCMS 398 (M+1)+ 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ 7,69 (d, J = 7,2 Hz,1H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz,1H), 7,12 (m, 2H), 6,26(s,1H), 4,80(m,1H), 4,52(s,2H), 3,99 (m, 4H),3,75 (m, 1H),3,20 (s, 3H), 2,62 (s, 3H), 2,31 (s, 3H), 1,59 (d, J = 7,2 Hz, 3H). La rotación óptica de cada enantiómero no se determinó.
30 Los compuestos mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento de cromatografía quiral general descrito anteriormente. La rotación óptica de los enantiómeros separados no se determinó, pero se indica el pico de elución ("Pico 1" o "Pico 2"). Las estructuras de cada compuesto se muestran en la figura 1.
Compuesto
Nombre 1H RMN m/z
217
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida-PICO 1 (400 MHz, CD3OD) δ 7,74 (m, 1H), 7,57 (d, J = 7,6 Hz,1H), 7,15 (m, 2H), 6,14 (s,1H), 4,86 (m,1H), 4,55 (s,2H), 4,02 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,62 (d, J = 7,2 Hz, 3H) 382
218
(R o S)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hindolo-3-carboxamida-PICO 2 (400 MHz, CD3OD) δ 7,74 (m, 1H), 7,57 (d, J = 7,6 Hz,1H), 7,15 (m, 2H), 6,14(s,1H), 4,86(m,1H), 4,55(s,2H), 4,02 (m, 1H),3,77 (m, 1H),3,22 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,62 (d, J = 7,2 Hz, 3H) 382
252
(R o S)-(±)-1-(1-ciclopropiletil)-N((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida PICO 1 RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,32-8,34 (d, 1H), 8,18-8,2 (d, 1H), 7,27-7,30(m, 1H), 6,70 (s, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,943,95 (d, 1H), 2,61 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,29-2,30 (s, 3H), 1,57-1,59 (d, 3H), 0,63-0,64 (t, 1H), 0,27-0,64 (m, 2H), 0,02-0,04 (t, 1H) 379
253
(R o S)-(±)-1-(1-ciclopropiletil)-N((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida PICO 2 RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,32-8,34 (d, 1H), 8,18-8,2 (d, 1H), 7,27-7,30(m, 1H), 6,70 (s, 1H), 4,47 (s, 2H), 3,943,95 (d, 1H), 2,61 (s, 3H), 2,43 (s, 3H), 2,29-2,30 (s, 3H), 1,57-1,59 (d, 3H), 0,63-0,64 (t, 1H), 0,27-0,64 (m, 2H), 0,02-0,04 (t, 1H) 379
256
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida PICO 1 (400 MHz, CDCl3) δ 13,23 (s, 1H), 8,16-8,17 (m, 1H), 8,11-8,13 (m, 1H), 7,57-7,60 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 6,93-6,96 (m, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,82-4,83 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,654,66 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,81-3,85 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,79 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,64-1,66 (d, J = 8,0 Hz, 3H) 399
257
(R o S)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida PICO 2 (400 MHz, CDCl3) δ 13,23 (s, 1H), 8,16-8,17 (m, 1H), 8,11-8,13 (m, 1H), 7,57-7,60 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 6,93-6,96 (m, 1H), 5,92 (s, 1H), 4,82-4,83 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,654,66 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,89 (s, 3H), 3,81-3,85 (m, 1H), 3,22 (s, 3H), 2,79 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,64-1,66 (d, J = 8,0 Hz, 3H) 399
307
Trans-(R o S, R o S)-N-((4-metoxi6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-1-(3-metoxibutan-2-il)-2metil-1H-indolo-3-carboxamida PICO 1 (CDCl3, 400 M Hz) δ 7,85 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,45 (s, 2H), 7,08-7,03 (m, 2H), 5,93 (s, 1H), 4,71-4,61 (m, 2H), 4,36 (s, 1H), 3,90 (s, 4H), 2,95 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,57 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,23 (d, J = 6,0 Hz, 3H) 412
308
Trans-(R o S, R o S)-N-((4-metoxi6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-1-(3-metoxibutan-2-il)-2metil-1H-indolo-3-carboxamida PICO 2 (CDCl3, 400 M Hz) δ 7,85 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,45 (s, 2H), 7,08-7,03 (m, 2H), 5,93 (s, 1H), 4,71-4,61 (m, 2H), 4,36 (s, 1H), 3,90 (s, 4H), 2,95 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 2,17 (s, 3H), 1,57 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,23 (d, J = 6,0 Hz, 3H) 412
Ejemplo 1. Síntesis de 1-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de tercbutilo. El compuesto del título como material de partida en la Etapa 3 del Ejemplo 36 en la síntesis de ciertos compuestos de la invención.
2-Metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo:
10 En un matraz de fondo redondo de 500 ml que contiene N-acetil-N-(3-bromopiridin-2-il)acetamida (14,815 g, 57,6 mmol), se añadieron yoduro de cobre (I) (1,098 g, 5,76 mmol), L-prolina (1,327 g, 11,53 mmol), carbonato de cesio (28,2 g, 86 mmol), después acetoacetato de t-butilo (11,47 ml, 69,2 mmol) y dioxano (100 ml). La reacción se evacuó/purgó 3 veces con N2, después se equipó con un tapón y una entrada de N2 y se calentó durante una noche a 70 ºC. Los sólidos inorgánicos se retiraron por filtración sobre celite y la torta se lavó con 100 ml de EtOAc. Esta
15 solución se concentró y el residuo se repartió entre 250 ml de salmuera y 250 ml de EtOAc. La capa ac. se extrajo adicionalmente con EtOAc (2 x 250 ml) y la capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró, se concentró y se purificó por CC usando 1:1 de EtOAc:Hex como eluyente para proporcionar (2,7 g, 20,2 %) de 2-metil-1Hpirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo. LRMS (M + H+) m/z: calc. 233,28; observado 233,1.
20 1-(2,3-Dihidro-1H-inden-1-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo:
Una solución de terc-butil 2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de etilo (100 mg, 0,74 mmol), 2,3-dihidro-1H
inden-1-ol (176 mg, 0,74 mmol), PPh3 (195 mg, 1,49 mmol) se agitó en THF seco (10 ml) a 0 ºC en una atmósfera de nitrógeno. A esta mezcla se le añadió gota a gota DIAD (150 mg , 1,48 mmol) durante un periodo de 5 min, y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla se lavó con salmuera, se secó y se concentró para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (éter de
5 petróleo/acetato de etilo = 5:1) para proporcionar el 1-(2,3-dihidro-1H-inden-1-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3carboxilato de terc-butilo (150 mg, 60 %).
El compuesto mostrado en la siguiente tabla se preparó de acuerdo con el procedimiento general descrito anteriormente usando los materiales de partida apropiados y modificaciones apropiadas.
Nombre
Estructura m/z
1-(1-ciclopropiletil)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de (±)-terc-butilo
301
Cada uno de los carboxilatos de alquilo anteriores se usó como material de partida en la Etapa 3 del Ejemplo 1 en la síntesis de ciertos compuestos de la invención.
15 Ejemplo 13. Síntesis de diastereómeros aislados de N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1((2R o 2S, 3R o 3S)-3-metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (Compuestos 261, 266, 267 y 302).
Etapa 1: 2-Metil-1-(3-oxobutan-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo:
A una solución de 2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo (5,0 g, 21,53 mmol) en CH3CN (50 ml) se le añadieron Cs2CO3 (21,0 g, 64,58 mmol), yoduro potásico (3,57 g, 21,53 mmol). La mezcla se agitó a 27 ºC durante 30 minutos. Después, se añadió 3-clorobutan-2-ona (2,75 g, 25,83 mmol) y la mezcla se agitó a 70 ºC
25 durante 12 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se purificó por columna (eluato: éter de petróleo: acetato de etilo = 50:1) para dar 2-metil-1-(3-oxobutan-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de tercbutilo en forma de un aceite de color amarillo-verde (3,23 g, rendimiento del 50 %) LCMS (M + H+) m/z: calc. 303,37; observado 302,9, 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,32-8,30 (m, 1H), 8,25-8,23 (m, 1H), 7,17-7,14 (m, 1H), 5,50-5,44 (m, 1H), 2,71(s, 3H), 1,96 (s, 3H), 1,65-1,67 (d,3H), 1,64 (s, 9H).
Etapa 2: 1-(3-Hidroxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo:
A la solución de 2-metil-1-(3-oxobutan-2-il)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo (3,1 g, 10,25 mmol) en
35 metanol (30 ml) se le añadió borohidruro sódico (0,30 g, 8,2 mmol) a 0 ºC. Después de 30 minutos, se añadió otro lote de borohidruro sódico (0,30 g, 8,2 mmol) a 0 ºC. Después de la finalización de la reacción aproximadamente 2 h más tarde, se añadió gota a gota agua (30 ml) muy cuidadosamente para interrumpir la reacción. La mezcla se extrajo con CH2Cl2. La extracción se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para dar 1-(3-hidroxibutan2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo en forma de un sólido de color amarillo. (3,0 g,
40 rendimiento del 96 %) LCMS (M + H+) m/z: calc. 305,38; observado 304,9, 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,31-8,29 (m, 1H), 8,13-8,12 (m, 1H), 7,11-7,07 (m, 1H), 4,46-4,43 (m, 1H), 4,12 (m, 1H), 2,73 (s, 3H), 1,58 (s, 9H), 1,51-1,49 (d, 3H), 0,92-0,91 (d, 3H).
Etapa 3: 1-(3-Metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo:
A THF seco (20 ml) se le añadieron NaH (al 60 % en aceite mineral, 2,37 g, 59,14 mmol). Después, la mezcla se agitó a 27 ºC durante 20 minutos, y después se añadió 1-(3-hidroxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3carboxilato de terc-butilo (3,0 g, 9,86 mmol). La mezcla se agitó a 27 ºC durante 1 hora, después se añadió CH3I
5 (13,99 g, 98,6 mmol). La mezcla se agitó durante 12 horas a 27 ºC y después se enfrió a 0 ºC. Se añadió NH4Cl sat. y se extrajo con CH2Cl2. La extracción se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró para dar 1-(3metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de terc-butilo en forma de un aceite de color amarillo. (3,2 g, rendimiento del 100 %) LCMS (M + H+) m/z: calc. 319,41; observado 318,9.
10 Etapa 4: Ácido 1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxílico:
A la solución enfriada previamente de 1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxilato de tercbutilo (3,0 g, 9,42 mmol) en CH2Cl2 (20 ml) se le añadió gota a gota ácido trifluoroacético (20 ml). La solución se
15 agitó a 27 ºC durante 1,5 horas. El disolvente se retiró al vacío a 27 ºC. El residuo se usó en la siguiente etapa sin purificar. LCMS (M + H+) m/z: calc. 263,30; observado 262,9.
Etapa 5: N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3b]piridin-3-carboxamida:
A una solución de ácido 1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxílico (2,4 g, 9,15 mmol) en DMF (30 ml) se le añadieron TEA (4,2 g, 41,50 mmol), clorhidrato de 3-(aminometil)-4-metoxi-6-metilpiridin-2(1H)ona (2,1 g, 12,81 mmol). Después de agitarse durante 10 minutos a 27 ºC, la mezcla se enfrió y se añadió HATU 25 (5,56 g, 14,64 mmol). La mezcla se agitó a 27 ºC durante 72 horas y quedó el 30 % del M.P. Después, la mezcla se calentó a 80 ºC durante 5 horas. La solución se diluyó con salmuera (100 ml) y se extrajo con CH2Cl2 (100 ml x 3). Las extracciones se combinaron y se secaron sobre Na2SO4. El disolvente se evaporó al vacío y el residuo se purificó por columna ultrarrápida (eluyente: diclorometano:metanol = 95:5) para dar N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida. (3,6 g, rendimiento del
30 95%)
Etapa 6: Separación de N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3-metoxibutan-2-il)-2-metil1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida: Isómeros (Compuestos 261, 266, 267 y 302):
La mezcla de isómeros de la Etapa 5, N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-(3-metoxibutan-2-il)2-metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida se purificó por HPLC prep. (Condición: Columna: SHIMADZU LC-8A, 250 x 50 mm x 10 um; Fase móvil A: agua con ácido fórmico al 0,2 %; Fase móvil B: MeCN; temperatura de la
5 columna: 30 ºC; Gradiente: B en A al 10~50 %) para dar un par isomérico principal (Compuesto 261 y Compuesto 266 combinados) (1,0 g, pureza del 98,8 %) y un par isomérico secundario (Compuesto 267 y Compuesto 302 combinados) (180 mg, pureza del 63 %). Los pares isoméricos resultantes se separaron individualmente por SFC (Condición: Columna: Chiralpak AD 250 x 30 mm x 5 um; Fase móvil A: CO2 supercrítico; Fase móvil B: IPA + NH3·H2O; Gradiente: B/A: 75:25) para dar los siguientes compuestos únicos individuales:
10 Compuesto 261, N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-((2R o 2S, 3R o 3S)-3-metoxibutan-2-il)-2metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (Par isomérico principal; Pico 1): 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,1738,157 (m, 1H), 8,140-8,116 (m, 1H), 7,582-7,555 (m, 1H), 6,968-6,936 (m, 1H), 5,927 (s, 1H), 4,707-4,609 (m, 2H), 4,348 (s, 1H), 3,892 (s, 3H), 2,869 (s, 3H), 2,788 (s, 3H), 2,173 (s, 3H), 1,644-1,627 (d, 3H), 1,263-1,249 (d, 3H).
15 Compuesto 266, N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-((2R o 2S, 3R o 3S)-3-metoxibutan-2-il)-2metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (Par isomérico principal; Pico 2): 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,1798,163 (m, 1H), 8,143-8,120 (m, 1H), 7,558-7,531 (m, 1H), 6,986-6,954 (m, 1H), 5,931 (s, 1H), 4,702-4,605 (m, 2H), 3,897 (s, 3H), 2,892 (s, 3H), 2,789 (s, 3H), 2,189 (s, 3H), 1,647-1,629 (d, 3H), 1,267-1,252 (d, 3H).
20 Compuesto 267, N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-((2R o 2S, 3R o 3S)-3-metoxibutan-2-il)-2metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (Par isomérico secundario; Pico 1): 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,1748,162 (d, 1H), 8,111-8,094 (d, 1H), 7,551-7,526 (m, 1H), 6,993-6,961 (m, 1H), 5,935 (s, 1H), 4,683-4,579 (m, 2H), 3,887 (s, 3H), 3,442 (s, 3H), 2,753 (s, 3H), 2,194 (s, 3H), 1,695-1,678 (d, 3H), 0,781-0,768 (d, 3H).
25 Compuesto 302, N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-1-((2R o 2S, 3R o 3S)-3-metoxibutan-2-il)-2metil-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-3-carboxamida (Par isomérico secundario; Pico 2): 1H RMN (400 MHz, CDCl3): δ 8,1778,166 (d, 1H), 8,122-8,104 (d, 1H), 7,587-7,562 (m, 1H), 6,984-6,952 (m, 1H), 5,933 (s, 1H), 4,698-4,591 (m, 2H), 4,426 (s, 2H), 3,983 (s, 3H), 3,448 (s, 3H), 2,764 (s, 3H), 2,180 (s, 3H), 1,701-1,684 (d, 3H), 0,786-0,772 (d, 3H).
Ejemplo 14. Síntesis de (±)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-feniletil)-1Hpirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxamida
Etapa 1: 1-(3-metoxifenil)etanol:
A una solución agitada de 3-Amino-4-picolina (7 g, 64,8 mmol) en THF anhidro (200 ml) se le añadió gota a gota sec-BuLi (150 ml, 1,3 M en ciclohexano, 194 mmol) durante 20 minutos a -78 ºC. La solución se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas. Se añadió gota a gota acetato de etilo (2,3 g, 25,9 mmol) en la reacción a 40 78 ºC y la mezcla se agitó a la misma temperatura durante 2 horas. Se añadió gota a gota metanol (50 ml) en la reacción durante 10 minutos. La mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. Se añadió NH4Cl semisaturado (250 ml). La mezcla se extrajo con AE. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron y se concentraron para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (éter de petróleo/acetato de etilo = 10:1) para proporcionar 2-metil-1H-pirrolo[2,3
c]piridina (2,5 g, 73,5 %).
Etapa 2: 2,2,2-tricloro-1-(2-metil-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)etanona:
5 A una solución agitada de 2-metil-1H-pirrolo[2,3-c]piridina (2,5 g, 18,9 mmol) y cloruro de aluminio (5 g, 37,8 mmol) en DCM (100 ml), se le añadió gota a gota cloruro de tricloroacetilo (4,1 g, 22,7 mmol) en la reacción durante 0,5 horas a temperatura ambiente. Después de agitar 2 horas, la reacción se enfrió a 0 ºC y se interrumpió con agua (100 ml). El precipitado resultante se aisló por filtración para proporcionar 2,2,2-tricloro-1-(2-metil-1H-pirrolo[2,310 c]piridin-3-il)etanona que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. Se asumió un rendimiento del 100 %. (5,24 g).
Etapa 3: 2-Metil-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxilato de metilo:
15 Una mezcla de 2,2,2-tricloro-1-(2-metil-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-il)etanona (5,24 g, 18,9 mmol) y KOH (1,2 g, 20,9 mmol) en MeOH (100 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. La mezcla de reacción se concentró para retirar MeOH, el residuo se repartió entre AE y agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó y se concentró para proporcionar 2-metil-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxilato de metilo (3 g, 83 %).
20 Etapa 4: Metil 2-metil-1-(1-feniletil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxilato de metilo:
Una mezcla de 2-metil-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxilato de metilo (550 mg, 2,89 mmol) y hidruro sódico (200 mg,
25 4,34 mmol) en N,N-dimetilformamida (3,0 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 hora, y después se añadió (1-bromoetil)benceno (589 mg, 3,18 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se vertió en NH4Cl saturado y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas se combinaron y se concentraron para dar un residuo. El residuo se purificó por cromatografía (éter de petróleo/acetato de etilo = 5:1) para dar 2-metil-1-(1-feniletil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxilato de metilo (800 mg, 94 %).
Etapa 5: Ácido 2-metil-1-(1-feniletil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxílico:
35 A una mezcla de 2-metil-1-(1-feniletil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxilato de metilo (800 mg, 2,72 mmol) y KOH (1,5 g, 27,2 mmol) en (15 ml) y agua (5 ml) se calentó a reflujo durante 2 horas. La mezcla se ajustó a un pH de 2 mediante HCl al 10 % y se extrajo con AE. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron y se concentraron para proporcionar el producto en bruto. El producto en bruto se usó en la siguiente etapa sin más purificación. Rendimiento del 100 %. (760 mg).
Etapa 6: (±)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-feniletil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3carboxamida (Compuesto 203):
45 A una mezcla de ácido 2-metil-1-(1-feniletil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxílico (280 mg, 1,0 mmol) se le añadieron HATU (456 mg, 1,2 mmol), TEA (1 g, 10 mmol) y 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-ona (182 mg, 1,2 mmol) en diclorometano anhidro (30 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. A la mezcla de reacción se le añadió agua (10 ml) y se extrajo con diclorometano (30 ml x 2). Las capas orgánicas se combinaron y se
concentraron para dar un residuo. El residuo se recristalizó en MeCN para proporcionar el compuesto N-((4,6dimetil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-feniletil)-1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3-carboxamida en forma de un sólido de color blanquecino (80 mg, 21,6 %). LRMS (M+H+) m/z: calc. 414,21; observado 414, 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) δ: 8,84 (s, 1H), 8,16 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,44-7,37 (m, 5H), 6,09 (s, 1H), 6,01
5 5,99 (m, 1H), 4,49 (s, 2H), 2,73 (s, 3H), 2,38 (s, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,06 (d, J = 7,2 Hz, 3H).
Los compuestos mostrados en la siguiente tabla se prepararon de acuerdo con el procedimiento general descrito en este ejemplo usando los materiales de partida apropiados y modificaciones apropiadas. Las estructuras se muestran en la figura 1.
Compuesto
Nombre RMN m/z
240
(±)-N-((4,6-dimetil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-1-(1metoxipropan-2-il)-2-metil-1Hpirrolo[2,3-c]piridin-3carboxamida (400 MHz, CLOROFORMO-d) δ ppm 1,63 (s a, 3 H) 2,21 (s, 3 H) 2,41 (s, 3 H) 2,73 (s, 3 H) 3,24 (s, 3 H) 3,72 (dd, J = 9,81, 5,40 Hz, 1 H) 3,80 -3,88 (m, 1 H) 4,60 (d, J = 5,95 Hz, 2 H) 4,71 (dd, J = 13,23, 7,06 Hz, 1 H) 5,92 (s, 1 H) 7,31 (d, J = 5,73 Hz, 1 H) 7,38 (s a, 1 H) 8,26 (d, J = 5,29 Hz, 1 H) 9,09 (s a, 1 H) 11,07 (s a, 1 H) 383
243
(±)-N-((4-metoxi-6-metil-2oxo-1,2-dihidropiridin-3il)metil)-2-metil-1-(1-feniletil)1H-pirrolo[2,3-c]piridin-3carboxamida (400 MHz, CLOROFORMO) δ ppm 1,62 (s a, 3 H) 2,26 (s, 3 H) 2,75 (s, 3 H) 3,25 (s, 3 H) 3,72 (dd, J = 9,81, 5,40 Hz, 1 H) 3,80 -3,87 (m, 1 H) 3,90 (s, 3 H) 4,65 (d, J = 5,29 Hz, 2 H) 4,71 (dd, J = 13,78, 6,95 Hz, 1 H) 5,93 (s, 1 H) 7,32 (s a, 1 H) 7,50 (s a, 1 H) 8,25 (s a, 1 H) 9,11 (s a, 1 H) 431

Ejemplo 15. Procedimiento general para sintetizar otros compuestos de la invención Procedimiento General A: Alquilación de indol
A una solución enfriada (0 ºC) de NH indol éster (1 equivalente) en N,N-dimetilformamida (volumen para hacer la concentración 0,4 M) se le añadió hidruro sódico (60 % p/p, 1,1 equivalentes con respecto al indol). La mezcla resultante se agitó durante 15 minutos. Después, se añadió RX (2 equivalentes) y la reacción se dejó calentar a
20 temperatura ambiente. La reacción se mantuvo a temperatura ambiente durante 12 horas. La mezcla de reacción se vertió en una solución saturada de cloruro de amonio (100 ml) con agitación. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (200 ml x 2) y la fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, éter de petróleo/acetato de etilo = 20:1) para proporcionar el producto de éster de indol alquilado deseado.
Procedimiento General B: Saponificación del éster de indol alquilado
A una solución de éster de indol alquilado (1 equivalente) en tetrahidrofurano:metanol:agua (2,5:5:1, volumen para
30 hacer la concentración 0,05 M) se le añadió hidróxido de litio (4 equivalentes). La mezcla de reacción resultante se agitó a 60 ºC durante 48 horas. La mezcla se concentró al vacío. Después, el residuo se diluyó con agua (40 ml) y se acidificó lentamente con hidrogenocloruro 1 N a pH = 4-5. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (100 ml x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron para dar ácido indol en bruto, que se usó en la etapa posterior sin purificación adicional.
Procedimiento General C: Formación de enlace amida
A una solución de ácido indol (1 equivalente) en diclorometano (volumen para hacer la concentración 0,05 M) se le añadieron 1-hidroxibenzotriazol (1,5 equivalentes), clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (1,5 equiv.) y trietilamina (3 equiv.). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Después,
5 se añadió piridona amina (1,2 equiv.) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. A la mezcla se le añadió agua (50 ml). La mezcla se extrajo con diclorometano (100 ml x 2). La capa orgánica se concentró al vacío para proporcionar el producto en bruto que se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, diclorometano/metanol = 20:1) para proporcionar el compuesto diana.
10 Procedimiento General D: Cromatografía quiral
La separación de compuestos quirales se realizó mediante HPLC de fase normal o SFC (cromatografía de fluidos supercríticos de dióxido de carbono). Los compuestos separados eran típicamente >95 % de e.e. No se determinó la configuración absoluta de los centros quirales.
Procedimiento General L: Sulfonilación
A una solución de amina quiral (1 equiv.) en diclorometano (volumen para hacer la concentración 0,1 M) se le añadió
20 trietilamina (4 equiv.) a 18 ºC en una atmósfera de N2. La reacción se enfrió a 0 ºC y se añadió cloruro de metanosulfonilo (1,5 equiv.). La reacción se agitó a 0 ºC durante 1 h. Después, la mezcla se concentró al vacío y se añadieron metanol y carbonato potásico, y la reacción se agitó durante 1 h más. La mezcla se filtró y el producto en bruto se purificó por HPLC preparativa.
25 La siguiente tabla enumera compuestos de la invención y cuál de los métodos generales anteriores se usó en su síntesis. Las estructuras de estos compuestos se exponen en la figura 1.
Compuesto
Métodos generales usados y notas Nombre Datos de RMN m/z
370
Procedimiento general L en (±)-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-6etil-7-(1-(piperidin-4-il)etil)-7Hpirrolo[2,3-d]pirimidin-5carboxamida 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) δ 12,12 (s, 1H), 9,20 (s, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,68 (s, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,70-4,58 (m, 2H), 3,91 (s, 4H), 3,62 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 2,76-2,67 (m, 7H), 2,45 (dd, J1 = 2,0 Hz, J2 = 11,6 Hz, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,10 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 1,67 (d, J = 6,8 Hz, 4H), 1,48-1,40 (m, 1H), 1,37-1,29 (m, 1H), 1,27-1,19 (m, 1H), 0,9-0,78 (m, 1H). 517

Ejemplo 16. Mediciones de CI50 para inhibidores usando EZH2.
30 Ensayo de EZH2: Los ensayos se realizaron mezclando rPRC2 junto con sustratos de oligonucleosomas biotinilados en presencia del cofactor enzimático radiomarcado, S-adenosil-L-metionina (3H SAM) (Perkin Elmer) y controlando la transferencia mediada enzimáticamente de grupos metilo tritiados de 3H SAM con respecto a residuos de histona lisina. La cantidad de producto de histona de metilo tritiado resultante se midió capturando primero los
35 oligonucleosomas biotinilados en FlashPlates recubiertas con estreptavidina (SAK) (Perkin Elmer), seguido de una etapa de lavado para eliminar la 3H SAM sin reaccionar, y después contando con un contador de centelleo de placas de 384 TopCount NXT (Perkin Elmer). Las condiciones de ensayo finales para EZH2 fueron las siguientes: tampón Tris 50 mM pH 8,5, DTT 1 mM, detergente Brij-35 69 mM, MgCl2 5,0 mM, BSA 0,1 mg/ml, 3H SAM 0,2 µM, oligonucleosomas biotinilados 0,2 µM, péptido H3K27me3 3,6 µM y EZH2 2 nM.
40 Las mediciones de CI50 de los compuestos se obtuvieron como se indica a continuación: Los compuestos se disolvieron primero en DMSO al 100 % en forma de soluciones madre 10 mM. Se generaron curvas de respuesta a la dosis de diez puntos dispensando cantidades variables de la solución de compuesto 10 mM en 10 pocillos de la placa de 384 pocillos (Echo; Labcyte), después se utilizó DMSO puro para rellenar los pocillos para asegurar que
todos los pocillos tenían la misma cantidad de DMSO. Se añadió un volumen de 12,5 µl de la enzima HMT, péptido H3K27me3 y sustrato de oligonucleosoma en tampón de ensayo a cada pocillo de la placa de ensayo usando un Multidrop Combi (ThermoFisher). Los compuestos se preincubaron con la enzima durante 20 min seguido de la iniciación de la reacción de metiltransferasa mediante la adición de 12,5 µl de 3H SAM en tampón de ensayo 5 (volumen final = 25 µl). Las concentraciones finales de compuestos variaron desde una concentración por defecto superior de 80 µM hasta 0,16 µM en diez etapas de dilución de 2 veces. Las reacciones se realizaron durante 60 minutos y se interrumpieron con 20 µl por pocillo de SAH 1,96 mM, Tris 50 mM pH 8,5, EDTA 200 mM. Las reacciones detenidas se transfirieron a Flashplates revestidas con SAV (Perkin Elmer), se incubaron durante 120 min, se lavaron con un lavador de placas y después se leyeron en el TopCount NXT (1,0 min/pocillo) para medir 10 la cantidad de producto de histona de metilo formado durante la reacción. La cantidad de producto de histona de metilo se comparó con la cantidad de producto formado en los pocillos de control del 0 % y el 100 % de inhibición permitiendo el cálculo del % de inhibición en presencia de los compuestos individuales a diversas concentraciones. Las CI50 se calcularon usando un paquete de software de ajuste de curvas no lineales de ajuste de 4 parámetros (XLFIT, parte del paquete de base de datos, ActivityBase (IDBS)) donde los cuatro parámetros fueron CI50,
15 pendiente de Hill, valor inicial pre-transicional (0 % de INH) y valor inicial post-transicional (100 % de INH); fijándose los dos últimos parámetros fijados a cero y el 100 %, respectivamente, por defecto.
El ensayo para Y641N EZH2 se realizó como anteriormente usando oligonucleosomas H3K27Me2 reconstituidos como sustrato.
20 La tabla 2 muestra la actividad de compuestos seleccionados de esta invención en el ensayo de inhibición de la actividad de EZH2 y Y641N EZH2. Los valores de CI50 se notifican como se indica a continuación: "A" indica un valor de CI50 de menos de 100 nM; "B" indica un valor de CI50 de 100 nM a 1 µM; "C" indica un valor de CI50 de más de 1 µM y menos de 10 µM para cada enzima; "D" indica un valor de CI50 de más de 10 µM para cada enzima; y "*(X
25 µM)" indica que no se observó inhibición a la concentración más alta (es decir, X µM) del compuesto ensayado.
Tabla 2. Valores de CI50 para los Compuestos de Fórmula I contra las enzimas mutantes EZH2 e Y641N EZH2.
Compuesto n.º
CI50 de EZH2 CI50 de Y641N EZH2
183
A A
204
A B
211
A B
212
A B
217
B B
218
A A
219
A A
223
A B
224
A A
229
C D
230
A B
231
A B
234
C D
235
B C
236
*(0,5 µM) *(10 µM)
240
A B
241
A B
243
A B
252
A B
253
A B
256
A B
257
B C
261
A A
266
B B
267
A B
273
A A
275
A A
277
A A
280
B C
284
A B
288
A A
290
A B
293
A B
294
A A
298
A A
Compuesto n.º
CI50 de EZH2 CI50 de Y641N EZH2
299
A A
300
A A
302
B C
304
A A
306
A A
307
A A
308
B B
310
A A
313
A A
314
A A
316
A A
317
A A
321
A A
327
A A
335
A A
336
A A
337
A A
341
A A
342
A A
343
A A
344
A A
345
A A
346
A A
347
A A
352
A A
355
A A
356
A A
357
A A
358
A A
359
A A
360
A A
362
A A
363
A A
364
A B
365
A A
366
A A
367
A A
368
A A
369
A A
370
A A
373
A A
375
A A
376
A A
377
A A

Ejemplo 17. Mediciones de CE50 para los inhibidores en ensayo de células HeLa.
Ensayo de Hela de H3K27me3 MSD. Las células HeLa tripsinizadas se contaron y se diluyeron en DMEM al 10 %
5 (Life Technologies, Cat. n.º 10569) a 5000 células/75 µl. Se colocaron setenta y cinco µl de células en cada pocillo de una placa de fondo plano de 96 pocillos y se incubaron a 37 ºC durante 4 horas. Se añadieron 25 µl de compuesto de ensayo (a diversas concentraciones) a las células y la incubación continuó a 37 ºC durante 96 horas. El medio se eliminó entonces y las células se aclararon una vez con PBS enfriado con hielo. Se añadieron cuarenta 40 µl de tampón MSD enfriado con hielo (HEPES 10 mM, pH 7,9, MgCl2 5 mM, sacarosa 0,25 M, Benzonasa
10 (1:10000), Triton X-100 al 1 % complementado con cóctel de inhibidor de Proteasa 1 x y se añadió clorhidrato de fluoruro de 2-amino-etil)bencenosulfonilo (AEBSF)) 1 mM a cada pocillo y las placas se pusieron en hielo durante 30 minutos. Después se añadieron diez µl de NaCl 5 M a cada pocillo y la incubación sobre hielo continuó durante otros 15 minutos. El material en cada pocillo se suspendió pipeteando hacia arriba y hacia abajo y luego se transfirió a una nueva placa de 96 pocillos. Los pocillos vacíos se aclararon con 150 µl de Tris 20 mM enfriado con hielo a pH
15 7,5, EDTA 1 mM, EGTA 1 mM, complementado con un cóctel de inhibidor de proteasa 1 x recién preparado y AEBSF 1 mM (tampón sin detergente y sin sal) y se transfirieron a los respectivos pocillos en la nueva placa. A continuación, se añadieron trescientos µl de tampón sin detergente y sin sal a cada pocillo de lisados y las placas se congelaron a -80 ºC.
El mismo día, se recubrió un número apropiado de placas de 96 pocillos de unión estándar de MSD con 30 µl/pocillo de anticuerpo de captura H3 total (Millipore, Cat. n.º MAB3422) a una concentración de 1 µg/ml en PBS. La solución de anticuerpo se distribuyó uniformemente primero golpeando suavemente los lados de las placas y luego agitando
5 las placas durante unos minutos a 1000 rpm. Las placas recubiertas con anticuerpo se almacenaron a 4 ºC durante la noche.
Al día siguiente los lisados se descongelan a TA. Las placas MSD recubiertas con anticuerpo se lavan 3 veces con TBS-T (solución salina tamponada con Tris (Fisher Scientific, Cat. n.º BP2471-1) + Tween-20 al 0,2 %). Se añaden a 10 cada pocillo ciento cincuenta µl de bloqueador A al 5 % en TBS-T. Los pocillos se cubren y se agitan en un agitador a TA durante una hora. La etapa del bloqueador A se repite una segunda vez. Después de eliminar el bloqueador, se transfieren 25 µl de lisado celular en cada pocillo recubierto con anticuerpo. Las placas se agitan durante 2 horas a TA, el lisado se elimina y las placas se lavan de nuevo con el Bloqueador A en TBS-T. Se añaden veinticinco µl de la mezcla de anticuerpos recién preparada apropiada (incluyendo anticuerpos tanto primarios como secundarios) a
15 cada pocillo y las placas se agitan durante 1 hora a TA. La mezcla de anticuerpos usada fue una (o ambas) de las indicadas en la tabla siguiente:
Ab
Concentración (µg/ml) Ab primario (µl) Ab de detección anti-conejo (µl) Bloqueador A al 1 % (µl)
H3K27me3
33 37,88 5,00 5000
H3
12 52,08 5,00 5000
Ambos anticuerpos H3 se obtuvieron a partir de Cell Signalling (Cat. n.º 4499 y 9733). El anticuerpo de cabra anti20 ratón se obtuvo a partir de Meso-Scale Discovery (Cat. n.º R32AB-1).
Después, se eliminó la mezcla de anticuerpos y se lavaron los pocillos con el Bloqueador A. Se añadieron entonces ciento cincuenta µl de tampón de lectura MSD 1X recién preparado (Meso-Scale Discovery; Cat. n.º R927C-2) a cada pocillo y las placas se leyeron en un lector de placas MSD Sector 2400.
25 Los datos se analizaron usando la plantilla de asistente de ensayo (producto interno de Constellation Pharmaceuticals) y de base de actividades (IDBS Ltd, Surrey, Reino Unido). Los archivos de datos se importaron al asistente de ensayo y se especificaron las condiciones del ensayo. Se creó un único ID de análisis y se exportaron los archivos de datos a la base de actividades. Se creó una plantilla de análisis en la base de actividades para medir
30 la inhibición dependiente de la dosis de la marca H3K27me3 y la viabilidad celular, respectivamente. Se usaron lecturas de pocillos de DMSO para normalizar los datos. Las curvas resultantes se ajustaron utilizando el software de base de actividades Modelo 205 (IDBS Ltd, Surrey, Reino Unido). Los datos se verificaron para determinar la calidad, validarse e integrarse en el formato Excel usando SARview (IDBS Ltd, Surrey, Reino Unido).
35 Ensayo de Hela H3K27me3 Alpha (AlphaLISA). Se pusieron en placas diez dosis diferentes de cada compuesto de ensayo (en una serie de diluciones de 3 veces) en placas tratadas con cultivo tisular de 384 pocillos por duplicado (Catálogo n.º 781080; Greiner Bio One; Monroe, North Carolina). Las células Hela cultivadas en el cultivo se tripsinizaron y se contaron usando un contador celular Countess® (Catálogo n.º C10281; Life Technologies, Grand Island, NY). Las células se diluyeron en 67.000 células por ml en 10 DMEM (Catálogo n.º 10569-010 Life
40 Technologies, Grand Island, NY) y 15 µl (1.000 células) se pusieron en placas en cada pocillo usando el dispensador de selección Biotek MicroFlo™ (BioTek Instruments, Inc. Vermont, Estados Unidos) de la placa de 384 pocillos. Las placas se incubaron a 37 ºC/CO2 al 5 % durante 72 h. Una de las placas duplicadas se procesó para el ensayo HeLa y la otra para determinar la viabilidad.
45 A la placa procesado para AlphaLISA se le añadieron 5 µl por pocillo de tampón de lisis de histona celular (1 x) (Catálogo n.º AL009F1 Perkin Elmer; Waltham, MA) y la placa se incubó a TA durante 30 minutos en un agitador de placas con baja velocidad (Modelo n.º 4625-Q Thermo Scientific; Waltham, MA). Después, se añadieron 10 µl por pocillo de tampón de extracción de histona (catálogo n.º AL009F2; Perkin Elmer; Waltham, MA) y la placa se incubó adicionalmente a TA durante 20 min en un agitador de placas con baja velocidad. Después, a cada pocillo se le
50 añadieron 10 µl por pocillo de una mezcla 5 x de perlas aceptoras anti-K27me3 más anticuerpo biotinilado anti-Histona H3 (C-ter) (diluido en final 3 nM) (Catálogo n.º AL118 Perkin Elmer; Waltham, MA). La dilución de las perlas aceptoras y después anti-Histona H3 fue con un tampón de detección de histona 1 x (Catálogo n.º AL009F3 Perkin Elmer; Waltham, MA) que se produjo diluido a partir de la solución madre 10 x proporcionada. La placa se cerró herméticamente con un sellador de placas de aluminio y se incubó a 23 ºC durante 60 min. Después, se añadieron
55 10 µl de una solución 5 x de perlas donantes de estreptavidina (Catálogo n.º 6760002 Perkin Elmer; Waltham, MA) (20 µg/ml de final en tampón de detección de histona 1 x), se selló la placa con el sellador de placas de aluminio y se incubó a 23 ºC durante 30 min. Después, las placas se leyeron usando un EnVision-Alpha (modelo n.º 2104 Perkin Elmer; Waltham, MA).
60 La viabilidad celular se ensayó añadiendo 15 µl de Cell Titer Glo ((Catálogo n.º G7571 Promega Madison, WI) a cada pocillo con células con medio. Las placas se incubaron a TA durante 15 -20 minutos en un agitador de placas
a baja velocidad. Después, las placas se leyeron usando un lector EnVision-Alpha (modelo n.º 2104 Perkin Elmer; Waltham, MA).
Los datos de ambos ensayos se analizaron usando la plantilla de asistente de ensayo (producto interno de
5 Constellation Pharmaceuticals) y de base de actividades (IDBS Ltd, Surrey, Reino Unido). Los archivos de datos se importaron al asistente de ensayo y se especificaron las condiciones del ensayo. Se creó un único ID de análisis y se exportaron los archivos de datos a la base de actividades. Se creó una plantilla de análisis en la base de actividades para medir la inhibición dependiente de la dosis de la marca H3K27me3 y la viabilidad celular, respectivamente. Se usaron lecturas de pocillos de DMSO para normalizar los datos. Las curvas resultantes se ajustaron utilizando el
10 software de base de actividades Modelo 205 (IDBS Ltd, Surrey, Reino Unido). Los datos se verificaron para determinar la calidad, validarse e integrarse en el formato Excel usando SARview (IDBS Ltd, Surrey, Reino Unido).
La Tabla 3 muestra la actividad de compuestos seleccionados de esta invención en los dos ensayos de células HeLa diferentes descritos anteriormente. Los valores de CE50 se notifican como se indica a continuación: "A" indica un
15 valor de CE50 de menos de 400 nM; "B" indica un valor de CE50 de 400 nM a 2 µM; "C" indica un valor de CE50 de más de 2 µM y menos de 10 µM para cada enzima; "D" indica un valor de CE50 de más de 10 µM para cada enzima; y "*(X µM)" indica que no se observó inhibición a la concentración más alta (es decir, X µM) del compuesto ensayado.
20 Tabla 3. Valores de CE50 para los compuestos seleccionados de la invención en células Hela que expresan mutante de H3k27 EZH2.
Compuesto n.º
H3K27me3 _Alpha_ HeLa (CE50) H3K27me3 _MSD_ HeLa_ (CE50)
204
B
211
B
212
B
218
A
219
B
224
A A
230
B
240
C
241
B
243
C
253
A
256
B
261
A A
273
A
284
B
288
A B
294
A A
298
A A
300
A A
304
A A
310
A A
313
A A
314
A
315
D
316
B
317
A
321
A
327
A
335
A
336
A
337
A
341
A
342
A
343
B
344
A
345
A
346
A
347
B
352
B
355
A
356
A
Compuesto n.º
H3K27me3 _Alpha_ HeLa (CE50) H3K27me3 _MSD_ HeLa_ (CE50)
357
A
358
B
359
B
360
C
362
A
363
A
364
*(3,33 µM)
365
A
366
B
367
A
368
A
369
A
370
*(3,33 µM)
373
A
374
A
375
A
376
NaN
377
B

Ejemplo 18. Análisis de inhibición del crecimiento tumoral
La eficacia anti-tumoral del Compuesto 362 y 365 en el modelo de xenoinjerto de linfoma humano Karpas422 5 subcutáneo en ratones CB-17 SCID hembra fue como se indica a continuación.
Animales
Especie: Mus Musculus
10 Cepa: Ratones CB-17 SCID Edad: 6-8 semanas Sexo: hembra Peso corporal: 18-22 g Número de animales: 50 ratones más reserva
15 Proveedor de animales: Shanghai SLAC Laboratory Animal Co., LTD.
Cultivo celular
Las células tumorales Karpas422 se mantuvieron in vitro como un cultivo de suspensión en medio RPMI1640
20 complementado con suero fetal de ternero inactivo por calor al 10 % a 37 ºC en una atmósfera de CO2 al 5 % en aire. Las células tumorales se subcultivaron rutinariamente dos veces por semana. Las células que crecen en una fase de crecimiento exponencial se cosecharon y se contaron para la inoculación tumoral.
Inoculación Tumoral
25 Cada ratón se inoculó por vía subcutánea en el costado derecho con las células tumorales Karpas422 (5 x 106) en 0,2 ml de PBS con Matrigel (1:1) para el desarrollo tumoral. El día 23 después de la inoculación del tumor fue como el día 0 después del inicio del tratamiento cuando el tamaño tumoral medio alcanzó aproximadamente 300 mm3. Cada grupo consistía en 10 ratones con tumor.
Mediciones tumorales
El tamaño tumoral se midió tres veces por semana en dos dimensiones usando un calibre, y el volumen se expresó en mm 3 usando la fórmula: V = 0,536 a x b2 donde a y b son los diámetros largo y corto del tumor, respectivamente. 35 El tamaño del tumor se utilizó entonces para los cálculos de los valores T/C. El valor T/C (en porcentaje) es una indicación de la eficacia antitumoral; T y C son los volúmenes medios de los grupos tratado y de control, respectivamente, en un día determinado. TGI se calculó para cada grupo usando la fórmula: TGI (%) = [1-(Ti-T0)/ (Vi-V0)] x 100; Ti es el volumen tumoral medio de un grupo de tratamiento en un día determinado, T0 es el volumen tumoral medio del grupo de tratamiento el día del inicio del tratamiento, Vi es el volumen tumoral medio del grupo de
40 control de vehículo el mismo día con Ti, y V0 es el volumen tumoral promedio del grupo de vehículo en el día del inicio del tratamiento.
Criterio de valoración experimental y recogida de muestras
45 1). El plasma, el tumor y el músculo en el grupo EPZ-6438 se recogieron el día 16 después del inicio del tratamiento
a las 6 h después de la dosificación. El plasma, el tumor y el músculo en los grupos CPI-524369, CPI-524416 y CPI591780 de vehículo se recogieron el día 25 después del inicio del tratamiento 1 h después de la dosificación. 2). Se extrajo toda la sangre de cada animal con EDTA-K2 como anticoagulante. El plasma se dividió en dos partes. La primera parte fue para análisis de PK; la segunda parte se congeló para la copia de reserva. 3). El tumor se dividió
5 en tres partes. La primera parte se congeló instatáneamente para PK; la segunda parte se congeló instatáneamente para el análisis de PD; la tercera parte se congeló para las copias de reserva. 4). El músculo se dividió en dos partes. La primera parte se congeló instantáneamente para PK; la segunda parte se congeló para la copia de reserva.
10 Análisis de inhibición del crecimiento tumoral
Tabla 4. Cálculo de la inhibición del crecimiento tumoral para los Compuestos 362 y 365 en el modelo de xenoinjerto karpass422 calculado en base a las mediciones del volumen tumoral el día 25 o el día 16 después del inicio del tratamiento
Tamaño tumoral (mm3)a el
Tratamiento T/Cb (%) TGI (%) Significaciónd
día 25
Vehículo
1704 ± 123 - - --
Compuesto 362 (160 mg/kg)
385 ± 66 22,59 92,75 ***
Compuesto 365 (160 mg/kg)
319 ± 67 18,72 97,25 ***
Nota: a. Media ± SEM.
b. La inhibición del crecimiento tumoral se calcula dividiendo el volumen tumoral medio del grupo para el grupo tratado por el volumen tumoral medio del grupo para el grupo de control (T/C). Para que un artículo de prueba se considere que tiene actividad antitumoral, T/C debe ser 0,5 o menos. d. Diferencia estadísticamente significativa (ANOVA unidireccional), frente a vehículo: ***p<0,001.
En lo sucesivo en el presente documento se describen realizaciones preferidas adicionales de la invención:
1. Un compuesto que tiene la Fórmula estructural (II):
20 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:
A es CH o N; R1a se selecciona de entre -alquilo C1-C2 y -O-(alquilo C1-C2), en la que R1a está opcionalmente sustituido con uno o más flúor;
R4a
25 se selecciona de entre 1-haloalquil (C1-C3)-piperidin-4-ilo, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido con uno o más flúor, y tetrahidropiranilo; y R13 se selecciona de entre hidrógeno, halo, fenilo, piridinilo, y -O-(alquilo C1-C4).
2. El compuesto de la realización 1, en el que R1a se selecciona 30 de entre -OCH3, -CH3, -OCHF2 y -CH2CH3.
3. El compuesto de una cualquiera de las realizaciones 1 o 2, en el que R4a se selecciona de entre 4,4difluorociclohexilo, ciclopropilo, tetrahidropiran-4-ilo, 1-(t-butoxicarbonil)-piperidin-4-ilo, 1-(isobutoxicarbonil)piperidin-4-ilo, 1-(isopropoxicarbonil)-piperidin-4-ilo, 1-(2-fluoroetil)-piperidin-4-ilo, 1-(2,2-difluoroetil)piperidin-4-ilo, 1-(2,2,2-trifluoroetil)-piperidin-4-ilo, 1-(2-hidroxiisobutil)-piperidin-4-ilo, 1
35 (hidroxiisopropilcarbonil)-piperidin-4-ilo, 1-(etoxicarbonilmetil)-piperidin-4-ilo, 1-(isopropilcarbonil)-piperidin-4ilo, 1-metilpiperidin-4-ilo, 1-(metilsulfonil)-piperidin-4-ilo, 1-(etilsulfonil)-piperidin-4-ilo, 1-(isopropilsulfonil)piperidin-4-ilo, 1-(fenil)-piperidin-4-ilo, 1-(oxetan-3-il)piperidin-4-ilo, 1-(piridin-2-il)-piperidin-4-ilo, y 1(pirimidin-2-il)-piperidin-4-ilo.
4.
El compuesto de una cualquiera de las realizaciones 1 a 3, en el que R13 se selecciona de entre 40 hidrógeno, cloro, flúor, -OCH(CH3)2, fenilo, y piridin-2-ilo.
5. El compuesto de la realización 1, en el que el compuesto es N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin3-il)metil)-2-metil-1-(1-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
6.
El compuesto de la realización 5, en el que el compuesto es R-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,245 dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida, o una
sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
7. El compuesto de la realización 1, en el que el compuesto es 1-(1-(1-(2,2-difluoroetil)piperidin-4-il)etil)-N((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
5 8. El compuesto de la realización 7, en el que el compuesto es R-1-(1-(1-(2,2-difluoroetil)piperidin-4-il)etil)N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
9. El compuesto de la realización 1, en el que el compuesto es 1-(1-(1-etilpiperidin-4-il)etil)-N-((4-metoxi-6
metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente 10 aceptable de la misma.
10. El compuesto de la realización 9, en el que el compuesto es R-1-(1-(1-etilpiperidin-4-il)etil)-N-((4-metoxi6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
11. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las realizaciones 1 15 a 10, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
12.
Un compuesto de una cualquiera de las realizaciones 1 a 10, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado a la proliferación celualr.
13.
El compuesto para su uso de la realización 12, en el que la enfermedad es cáncer.
14.
El compuesto para su uso de la realización 13, en el que el cáncer se selecciona de entre cáncer de
20 mama, cáncer de próstata, colon cáncer, carcinoma de células renales, glioblastoma cáncer multiforme, cáncer de vejiga, melanoma, cáncer bronquial, linfoma, y cáncer de hígado.

Claims (9)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Un compuesto que tiene la Fórmula estructural (II):
    5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:
    A es CH o N; R1a se selecciona de entre -alquilo C1-C2 y -O-(alquilo C1-C2), en la que R1a está opcionalmente sustituido con uno o más flúor;
    10 R4a se selecciona de entre 1-haloalquil (C1-C3)-piperidin-4-ilo, cicloalquilo C3-C6 opcionalmente sustituido con uno o más flúor, y tetrahidropiranilo; y R13 se selecciona de entre hidrógeno, halo, fenilo, piridinilo, y -O-(alquilo C1-C4).
  2. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en el que R1a se selecciona de entre -OCH3, -CH3, -OCHF2, y -CH2CH3. 15
  3. 3. El compuesto de la reivindicación 1 o 2, en el que R4a se selecciona de entre 4,4-difluorociclohexilo, ciclopropilo, tetrahidropiran-4-ilo, 1-(2-fluoroetil)-piperidin-4-ilo, 1-(2,2-difluoroetil)-piperidin-4-ilo, 1-(2,2,2trifluoroetil)-piperidin-4-ilo.
    20 4. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que R13 se selecciona de entre hidrógeno, cloro, flúor, -OCH(CH3)2, fenilo, y piridin-2-ilo.
  4. 5. El compuesto de la reivindicación 1, en el que el compuesto es N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin
    3-il)metil)-2-metil-1-(1-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal 25 farmacéuticamente aceptable de la misma.
  5. 6. El compuesto de la reivindicación 5, en el que el compuesto es R-N-((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1-(1-(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)etil)-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
  6. 7. El compuesto de la reivindicación 1, en el que el compuesto es 1-(1-(1-(2,2-difluoroetil)piperidii 4-il)etil)-N-((4metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
    35 8. El compuesto de la reivindicación 7, en el que el compuesto es R-1-(1-(1-(2,2-difluoroetil)piperidin-4-il)etil)-N((4-metoxi-6-metil-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-metil-1H-indolo-3-carboxamida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
  7. 9. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, 40 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo; y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
  8. 10. Un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno asociado a la proliferación celular.
    45 11. El compuesto para su uso de la reivindicación 10, en el que la enfermedad es cáncer.
  9. 12. El compuesto para su uso de la reivindicación 11, en el que el cáncer se selecciona de entre cáncer de mama, cáncer de próstata, colon cáncer, carcinoma de células renales, glioblastoma cáncer multiforme, cáncer de vejiga, melanoma, cáncer bronquial, linfoma, y cáncer de hígado.
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Families Citing this family (69)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2841142C (en) 2010-06-23 2020-12-15 Ryan D. Morin Biomarkers for non-hodgkin lymphomas and uses thereof
WO2013075084A1 (en) 2011-11-18 2013-05-23 Constellation Pharmaceuticals Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
US9085583B2 (en) * 2012-02-10 2015-07-21 Constellation—Pharmaceuticals, Inc. Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
KR20190105669A (ko) 2012-10-15 2019-09-17 에피자임, 인코포레이티드 암을 치료하는 방법
PL2953941T3 (pl) * 2013-02-11 2017-11-30 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Modulatory enzymów modyfikujących metyl, ich kompozycje i zastosowania
US9745305B2 (en) 2013-03-15 2017-08-29 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
HK1214815A1 (zh) 2013-04-30 2016-08-05 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Zeste增强子同源物2的抑制剂
CA2917463A1 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited Enhancer of zeste homolog 2 inhibitors
TWI636047B (zh) 2013-08-14 2018-09-21 英商卡爾維斯塔製藥有限公司 雜環衍生物
US9969716B2 (en) 2013-08-15 2018-05-15 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Indole derivatives as modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
WO2015078417A1 (zh) * 2013-11-29 2015-06-04 四川好医生药业集团有限公司 吡咯并嘧啶化合物及其在制备降血糖药物中的用途
EP3160940A4 (en) * 2014-06-25 2018-05-02 Epizyme, Inc. Substituted benzene and 6,5-fused bicyclic heteroaryl compounds
MA40848A (fr) * 2014-10-28 2021-05-05 Glaxosmithkline Ip No 2 Ltd Inhibiteurs d'ezh2 (enhancer of zeste homolog 2)
GB201421083D0 (en) 2014-11-27 2015-01-14 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Enzyme inhibitors
GB201421085D0 (en) 2014-11-27 2015-01-14 Kalvista Pharmaceuticals Ltd New enzyme inhibitors
TW201636344A (zh) 2014-12-05 2016-10-16 美國禮來大藥廠 Ｅｚｈ２抑制劑
US20180037568A1 (en) * 2015-02-13 2018-02-08 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
TW201708210A (zh) * 2015-06-30 2017-03-01 葛蘭素史克智慧財產（第二）有限公司 Ｚｅｓｔｅ同源物２增強子之抑制劑
US20180214519A1 (en) 2015-07-24 2018-08-02 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies for modulation of histone methyl modifying enzymes
CA2994394A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Ezh2 inhibitors and modulation of regulatory t-cell function
WO2017025493A1 (en) * 2015-08-12 2017-02-16 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Quinoline ezh2 inhibitors
WO2017035234A1 (en) 2015-08-24 2017-03-02 Epizyme, Inc. Method for treating cancer
TW201718598A (zh) 2015-08-27 2017-06-01 美國禮來大藥廠 Ｅｚｈ２抑制劑
WO2017040190A1 (en) 2015-08-28 2017-03-09 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of (r)-n-((4-methoxy-6-methyl-2-oxo-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl)-2-methyl-1-(1-(1-(2,2,2-trifluoroethyl)piperidin-4-yl)ethyl)-1h-indole-3-carboxamide
WO2017062495A2 (en) 2015-10-06 2017-04-13 Epizyme, Inc. Method of treating medulloblastoma with an ezh2 inhibitor
EP3371601A1 (en) 2015-11-05 2018-09-12 Epizyme Inc Flow cytometry for monitoring histone h3 methylation status
US11951108B2 (en) 2016-01-29 2024-04-09 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
CN120661674A (zh) 2016-03-15 2025-09-19 奥莱松基因组股份有限公司 用于治疗实体瘤的lsd1抑制剂的组合
ME03794B (me) 2016-05-31 2021-04-20 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Derivati pirazola kao inhibitori kalikreina plazme
GB201609603D0 (en) 2016-06-01 2016-07-13 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Polymorphs of N-[(6-cyano-2-fluoro-3-methoxyphenyl)Methyl]-3-(methoxymethyl)-1-({4-[(2-ox opyridin-1-YL)Methyl]phenyl}methyl)pyrazole-4-carboxamide
GB201609607D0 (en) 2016-06-01 2016-07-13 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Polymorphs of N-(3-Fluoro-4-methoxypyridin-2-yl)methyl)-3-(methoxymethyl)-1-({4-((2-oxopy ridin-1-yl)methyl)phenyl}methyl)pyrazole-4-carboxamide and salts
US11147819B2 (en) 2016-06-17 2021-10-19 Epizyme, Inc. EZH2 inhibitors for treating cancer
WO2018075598A1 (en) 2016-10-19 2018-04-26 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Synthesis of inhibitors of ezh2
WO2018102687A2 (en) 2016-12-02 2018-06-07 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
US20190381025A1 (en) * 2017-01-20 2019-12-19 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Solid dispersions of (r)-n-((4-methoxy-6-methyl-2-oxo-1,2-dihydropyridin-3-yl)methyl)-2-methyl-1-(1-(1-(2,2,2-trifluoroethyl)piperidin-4-yl)ethyl)-1h-indole-3-carboxamide
US10266542B2 (en) 2017-03-15 2019-04-23 Mirati Therapeutics, Inc. EZH2 inhibitors
WO2018183885A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
US20230201212A1 (en) 2017-06-13 2023-06-29 Epizyme, Inc. Inhibitors of ezh2 and methods of use thereof
US20210161883A1 (en) 2017-07-10 2021-06-03 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Ezh2 inhibitor-induced gene expression
WO2019094552A1 (en) 2017-11-09 2019-05-16 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
US11529344B2 (en) 2017-11-14 2022-12-20 Pfizer Inc. EZH2 inhibitor combination therapies
GB201719881D0 (en) 2017-11-29 2018-01-10 Kalvista Pharmaceuticals Ltd Solid forms of plasma kallikrein inhibitor and salts thereof
PL3716952T3 (pl) 2017-11-29 2022-05-02 Kalvista Pharmaceuticals Limited Postacie dawkowania zawierające inhibitor kalikreiny osoczowej
CN111757734A (zh) 2017-12-28 2020-10-09 星座制药公司 通过组合疗法的ezh2抑制剂的药代动力学增强
DK3746446T3 (da) 2018-01-31 2022-06-27 Mirati Therapeutics Inc PRC2-inhibitorer
EP3765458B1 (en) 2018-03-14 2023-01-11 Biogen MA Inc. O-glycoprotein-2-acetamido-2-deoxy-3-d-glycopyranosidase inhibitors
MX2020010999A (es) * 2018-04-18 2021-01-20 Constellation Pharmaceuticals Inc Moduladores de enzimas modificadoras de metilo, composiciones y usos de estos.
WO2020011607A1 (en) 2018-07-09 2020-01-16 Fondation Asile Des Aveugles Inhibition of prc2 subunits to treat eye disorders
CN113166137B (zh) 2018-09-19 2024-08-16 比奥根Ma公司 O-糖蛋白-2-乙酰氨基-2-脱氧-3-d-吡喃葡萄糖苷酶抑制剂
US20200131156A1 (en) * 2018-10-30 2020-04-30 H. Lundbeck A/S ARYLSULFONYLPYROLECARBOXAMIDE DERIVATIVES AS Kv3 POTASSIUM CHANNEL ACTIVATORS
EP4327814A3 (en) 2018-12-05 2024-04-24 Biogen MA Inc. Morpholinyl, piperazinyl, oxazepanyl and diazepanyl o-glycoprotein-2-acetamido-2-deoxy-3-d-glucopyranosidase inhibitors
WO2020139339A1 (en) 2018-12-27 2020-07-02 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Ezh2 and androgen receptor signaling inhibitors as tools for targeting prostate cancer
CN110357840B (zh) * 2019-01-22 2022-04-12 石家庄和中科技有限公司 4-糠硫基戊酮-2的制备方法
AR117989A1 (es) 2019-02-04 2021-09-08 Biogen Ma Inc Inhibidores de o-glucoproteína-2-acetamido-2-desoxi-3-d-glucopiranosidasa de éter bicíclico
US12421224B2 (en) 2019-03-08 2025-09-23 Biogen Ma Inc. Azetidinyl O-glycoprotein-2-acetamido-2-deoxy-3-D-glucopyranosidase inhibitors
US12421228B2 (en) 2019-04-22 2025-09-23 Mirati Therapeutics, Inc. Naphthyridine derivatives as PRC2 inhibitors
CN114269748A (zh) 2019-06-05 2022-04-01 米拉蒂医疗股份有限公司 作为用于治疗癌症的PRC2抑制剂的咪唑并[1,2-c]嘧啶衍生物
PE20220562A1 (es) 2019-07-24 2022-04-13 Constellation Pharmaceuticals Inc Formas cristalinas de 7-cloro-2-(4-(3-metoxiazetidin-1-il)ciclohexil)-2,4-dimetil-n-((6-metil-4-(metiltio)-2-oxo-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzo[d][1,3]dioxol-5-carboxamida
KR20220041130A (ko) * 2019-07-24 2022-03-31 콘스텔레이션 파마슈티칼스, 인크. 암 치료를 위한 병용 요법에서의 ezh2 억제
WO2021028645A1 (en) 2019-08-09 2021-02-18 Kalvista Pharmaceuticals Limited Plasma kallikrein inhibitors
KR20220066892A (ko) 2019-08-22 2022-05-24 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 Ｔ 세포 요법 및 제스트 동족체 2의 인핸서 (ｅｚｈ2) 억제제의 병용 요법 및 관련 방법
TW202130643A (zh) 2019-10-29 2021-08-16 美商百健Ｍａ公司 螺環o-醣蛋白-2-乙醯胺基-2-去氧-3-d-葡萄哌喃糖苷酶抑制劑
AR123132A1 (es) 2020-08-03 2022-11-02 Biogen Ma Inc Formas cristalinas de un inhibidor de la o-glucoproteína-2-acetamido-2-desoxi-3-d-glucopiranosidasa
WO2022150962A1 (en) 2021-01-12 2022-07-21 Westlake Pharmaceutical (Hangzhou) Co., Ltd. Protease inhibitors, preparation, and uses thereof
JP7717816B2 (ja) 2021-01-21 2025-08-04 バイオフロント セラピューティクス （ベイジン） カンパニー リミテッド Ｆｐｒ１のモジュレーター及びそれを使用する方法
JP2024517504A (ja) 2021-05-20 2024-04-22 シロナックス リミテッド． アゼチジン環状尿素を含めたｒｉｐ１調節物質、その調製、及び使用
CN118451061A (zh) * 2021-12-20 2024-08-06 费尔黑文制药公司 Oxer1拮抗剂和其用途
JP2025510009A (ja) 2022-02-28 2025-04-14 シロナックス リミテッド． Ｒｉｐ１調節物質、その調製、及び使用
CN118026860A (zh) * 2024-02-05 2024-05-14 福建福瑞明德药业有限公司 一种3-[1-(二甲基氨基)乙基]苯酚的制备方法

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IE52670B1 (en) 1981-03-03 1988-01-20 Leo Ab Heterocyclic carboxamides,compositions containing such compounds,and processes for their preparation
US5308854A (en) 1990-06-18 1994-05-03 Merck & Co., Inc. Inhibitors of HIV reverse transcriptase
EP0867183B1 (en) 1996-07-22 2004-10-06 Daiichi Suntory Pharma Co., Ltd. Arylpiperidinol and arylpiperidine derivatives and drugs containing the same
UY27427A1 (es) 2001-09-04 2003-03-31 Boehringer Ingelheim Pharma Nuevas dihidro-pteridinonas, procedimientos para su preparación y su utilización como medicamentos
US6897220B2 (en) 2001-09-14 2005-05-24 Methylgene, Inc. Inhibitors of histone deacetylase
MXPA03000145A (es) * 2002-01-07 2003-07-15 Pfizer Compuestos de oxo u oxi-piridina como moduladores de receptores 5-ht4.
AU2003220401A1 (en) 2002-03-18 2003-10-08 Bristol-Myers Squibb Company Uracil derivatives as inhibitors of tnf-alpha converting enzyme (tace) and matrix metalloproteinases
TWI319387B (en) 2002-04-05 2010-01-11 Astrazeneca Ab Benzamide derivatives
TW200500341A (en) 2002-11-12 2005-01-01 Astrazeneca Ab Novel compounds
AU2005211349A1 (en) 2004-01-30 2005-08-18 Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.P.A. N-benzyl-3,4-dihyroxypyridine-2-carboxamide and N-benzyl-2,3-dihydroxypyridine-4-carboxamide compounds useful as HIV integrase inhibitors
MXPA06012333A (es) 2004-04-30 2007-01-17 Takeda Pharmaceutical Compuesto de amida heterociclico y uso del mismo como un inhibidor mmp-13.
JP5160885B2 (ja) 2004-06-01 2013-03-13 ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・ノース・キャロライナ・アト・チャペル・ヒル 再構成ヒストンメチルトランスフェラーゼ複合体及びそのモジュレーターの識別方法
CA2615105A1 (en) * 2005-07-14 2007-01-25 Takeda San Diego, Inc. Histone deacetylase inhibitors
WO2007014838A1 (en) 2005-08-03 2007-02-08 Boehringer Ingelheim International Gmbh Dihydropteridinones in the treatment of respiratory diseases
WO2007067968A2 (en) 2005-12-08 2007-06-14 Novartis Ag Effects of inhibitors of fgfr3 on gene transcription
JP5277171B2 (ja) 2006-11-03 2013-08-28 コリア リサーチ インスティテュート オブ ケミカル テクノロジーズ ヒストン脱アセチル化酵素阻害活性を有するナフタレニルオキシプロペニル誘導体およびこれを含む薬学組成物
AU2008206168B2 (en) 2007-01-19 2012-01-19 The Regents Of The University Of Michigan ADRB2 cancer markers
CA2676173A1 (en) 2007-02-16 2008-08-28 Amgen Inc. Nitrogen-containing heterocyclyl ketones and their use as c-met inhibitors
US8030344B2 (en) 2007-03-13 2011-10-04 Methylgene Inc. Inhibitors of histone deacetylase
WO2009006577A2 (en) 2007-07-03 2009-01-08 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for inhibiting ezh2
WO2009015203A1 (en) 2007-07-23 2009-01-29 Syndax Pharmaceuticals, Inc. Novel compounds and methods of using them
FR2922209B1 (fr) 2007-10-12 2010-06-11 Sanofi Aventis 5,6-DIARYLES PYRIDINES SUBSTITUES EN POSITION 2 et 3, LEUR PREPARATION ET LEUR APPLICATION EN THERAPEUTIQUE.
WO2009073772A1 (en) 2007-12-06 2009-06-11 Smithkline Beecham Corporation Novel seh inhibitors and their use
US20090270361A1 (en) 2008-03-26 2009-10-29 Takeda Pharmaceutical Company Limited Substituted pyrazole derivatives and use thereof
EP2307378A1 (en) 2008-06-18 2011-04-13 Pfizer Limited Nicotinamide derivatives
EP2365749A4 (en) 2008-11-13 2012-05-30 Merck Sharp & Dohme Quinolone NEURO PEPTIDE-S-Receptor Antagonists
WO2011055270A1 (en) * 2009-11-04 2011-05-12 Wyeth Llc Indole based receptor crth2 antagonists
US8468343B2 (en) 2010-01-13 2013-06-18 Futurewei Technologies, Inc. System and method for securing wireless transmissions
KR20130043104A (ko) 2010-04-06 2013-04-29 카리스 라이프 사이언스 룩셈부르크 홀딩스 질병용 순환 생물학적 지표들
US8575203B2 (en) 2010-04-21 2013-11-05 Boehringer Ingelheim International Gmbh Chemical compounds
US8846935B2 (en) 2010-05-07 2014-09-30 Glaxosmithkline Llc Indazoles
MX2012012966A (es) * 2010-05-07 2013-01-22 Glaxosmithkline Llc Indoles.
WO2012005805A1 (en) 2010-05-07 2012-01-12 Glaxosmithkline Llc Azaindazoles
WO2012024543A1 (en) 2010-08-18 2012-02-23 Caris Life Sciences Luxembourg Holdings Circulating biomarkers for disease
BR112013005806B1 (pt) * 2010-09-10 2022-05-10 Epizyme, Inc Métodos para detectar se um indivíduo é um candidato para o tratamento com ou responsivo a um inibidor de ezh2 e usos terapêuticos do dito inibidor de ezh2
US9175331B2 (en) 2010-09-10 2015-11-03 Epizyme, Inc. Inhibitors of human EZH2, and methods of use thereof
WO2012051492A2 (en) 2010-10-14 2012-04-19 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Compounds and methods for inhibiting hiv latency
WO2012068589A2 (en) 2010-11-19 2012-05-24 Constellation Pharmaceuticals Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
EP2646020B1 (en) * 2010-12-01 2016-09-21 Glaxosmithkline LLC Indoles
JP2014507160A (ja) 2011-02-22 2014-03-27 カリス ライフ サイエンシズ ルクセンブルク ホールディングス エス．アー．エール．エル． 循環バイオマーカー
WO2012118812A2 (en) 2011-02-28 2012-09-07 Epizyme, Inc. Substituted 6,5-fused bicyclic heteroaryl compounds
TW201733984A (zh) * 2011-04-13 2017-10-01 雅酶股份有限公司 經取代之苯化合物
JO3363B1 (ar) 2011-04-13 2019-03-13 Epizyme Inc مركبات بنزين مستبدلة بأريل أو أريل غير متجانس
US9073924B2 (en) 2011-09-13 2015-07-07 Glaxosmithkline Llc Azaindazoles
US9730925B2 (en) 2011-09-30 2017-08-15 Glaxomithkline Llc Methods of treating cancer
WO2013067300A1 (en) * 2011-11-04 2013-05-10 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Method of treatment
AU2012332297B2 (en) * 2011-11-04 2016-01-07 Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited Method of treatment
WO2013067302A1 (en) 2011-11-04 2013-05-10 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Method of treatment
US9206128B2 (en) 2011-11-18 2015-12-08 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
WO2013075084A1 (en) 2011-11-18 2013-05-23 Constellation Pharmaceuticals Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
WO2013078320A1 (en) 2011-11-21 2013-05-30 Constellation Pharmaceuticals Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
US20130230511A1 (en) 2012-02-03 2013-09-05 Board Of Regents, The University Of Texas System Biomarkers for response to tyrosine kinase pathway inhibitors in cancer
US9085583B2 (en) * 2012-02-10 2015-07-21 Constellation—Pharmaceuticals, Inc. Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
CA3177515A1 (en) 2012-03-12 2013-09-19 Epizyme, Inc. Inhibitors of human ezh2, and methods of use thereof
ES2617379T3 (es) 2012-04-13 2017-06-16 Epizyme, Inc. Forma de sal de un inhibidor de histona metiltransferasa EZH2 humana
EP2836216B1 (en) 2012-04-13 2022-06-08 Epizyme, Inc. Combination therapy for treating cancer
US9562041B2 (en) 2012-05-16 2017-02-07 Glaxosmithkline Llc Enhancer of zeste homolog 2 inhibitors
JP6254169B2 (ja) * 2012-09-28 2017-12-27 ファイザー・インク ベンズアミドおよびヘテロベンズアミド化合物
KR20190105669A (ko) 2012-10-15 2019-09-17 에피자임, 인코포레이티드 암을 치료하는 방법
BR112015008480A2 (pt) * 2012-10-15 2017-07-04 Epizyme Inc compostos de benzeno substituído
CN103794728A (zh) 2012-10-30 2014-05-14 中国科学院长春光学精密机械与物理研究所 高导电性有机透明导电薄膜的制备方法
RU2702908C2 (ru) 2012-11-01 2019-10-14 Инфинити Фармасьютикалз, Инк. Лечение злокачественных опухолей с использованием модуляторов изоформ pi3-киназы
WO2014077784A1 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Agency For Science, Technology And Research Method of treating cancer
US20150292030A1 (en) 2012-11-27 2015-10-15 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods of characterizing and treating molecular subset of muscle-invasive bladder cancer
WO2014092905A1 (en) 2012-12-10 2014-06-19 Children's Medical Center Corporation Methods and assays for combination treatment of cancer
EP2934531A4 (en) 2012-12-19 2016-06-15 Glaxosmithkline Llc COMBINATION
UA111305C2 (uk) 2012-12-21 2016-04-11 Пфайзер Інк. Конденсовані лактами арилу та гетероарилу
PL2953941T3 (pl) 2013-02-11 2017-11-30 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Modulatory enzymów modyfikujących metyl, ich kompozycje i zastosowania
US9745305B2 (en) 2013-03-15 2017-08-29 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
HK1214815A1 (zh) * 2013-04-30 2016-08-05 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Zeste增强子同源物2的抑制剂
US9624205B2 (en) * 2013-07-19 2017-04-18 Epizyme, Inc. Substituted 6,5-fused bicyclic heteroaryl compounds
US9969716B2 (en) 2013-08-15 2018-05-15 Constellation Pharmaceuticals, Inc. Indole derivatives as modulators of methyl modifying enzymes, compositions and uses thereof
US9374093B2 (en) 2014-01-10 2016-06-21 Freescale Semiconductor, Inc. Capacitively coupled input buffer
EP3160940A4 (en) * 2014-06-25 2018-05-02 Epizyme, Inc. Substituted benzene and 6,5-fused bicyclic heteroaryl compounds

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