ES2634424T3 - Vector multicistrónico lentivírico - Google Patents

Vector multicistrónico lentivírico Download PDF

Info

Publication number
ES2634424T3
ES2634424T3 ES10012190.4T ES10012190T ES2634424T3 ES 2634424 T3 ES2634424 T3 ES 2634424T3 ES 10012190 T ES10012190 T ES 10012190T ES 2634424 T3 ES2634424 T3 ES 2634424T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
genome
vector
lentiviral vector
packaging
noi
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES10012190.4T
Other languages
English (en)
Inventor
Philippa Radcliffe
James E. Miskin
Fraser J. Wilkes
Kyriacos A. Mitrophanous
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Oxford Biomedica UK Ltd
Original Assignee
Oxford Biomedica UK Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB0202403A external-priority patent/GB0202403D0/en
Priority claimed from GB0212768A external-priority patent/GB0212768D0/en
Application filed by Oxford Biomedica UK Ltd filed Critical Oxford Biomedica UK Ltd
Application granted granted Critical
Publication of ES2634424T3 publication Critical patent/ES2634424T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/16011—Human Immunodeficiency Virus, HIV
    • C12N2740/16041—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2740/16043—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/001—Vector systems having a special element relevant for transcription controllable enhancer/promoter combination
    • C12N2830/002—Vector systems having a special element relevant for transcription controllable enhancer/promoter combination inducible enhancer/promoter combination, e.g. hypoxia, iron, transcription factor
    • C12N2830/003—Vector systems having a special element relevant for transcription controllable enhancer/promoter combination inducible enhancer/promoter combination, e.g. hypoxia, iron, transcription factor tet inducible
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/15—Vector systems having a special element relevant for transcription chimeric enhancer/promoter combination
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/50—Vector systems having a special element relevant for transcription regulating RNA stability, not being an intron, e.g. poly A signal
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/60—Vector systems having a special element relevant for transcription from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
    • C12N2840/20—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron
    • C12N2840/203—Vectors comprising a special translation-regulating system translation of more than one cistron having an IRES

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)

Abstract

Un genoma de vector multicistrónico derivable de un lentivirus para uso en un sistema de producción lentivírico independiente de rev para producir una partícula de vector derivada de lentivirus, comprendiendo dicho genoma una señal de empaquetamiento, un marco de lectura abierto (ORF) heterólogo en 3' de una LTR vírica y en 5' de un promotor, en el que el promotor controla la expresión de al menos un nucleótido de interés (NOI) en 3' útil en el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo, y en el que el ORF heterólogo está ligado operativamente con la LTR; en el que la secuencia de ácido nucleico que codifica el gen auxiliar rev está alterada de tal modo que dicho gen auxiliar es incapaz de codificar la proteína auxiliar funcional, o se retira del genoma del vector lentivírico, y en el que el elemento de respuesta a Rev (RRE) está alterado de tal modo que dicho RRE no es funcional, o se retira del genoma de vector lentivírico, y en el que el vector lentivírico es un vector lentivírico autoinactivante.

Description

imagen1
imagen2
imagen3
imagen4
imagen5
imagen6
5
15
25
35
45
55
65
produce una línea celular estable a la que se hace referencia como la línea celular de empaquetamiento. La línea celular de empaquetamiento produce las proteínas necesarias para empaquetar ARN retrovírico, pero no pude causar la encapsidación debido a la falta de una región psi. Sin embargo, cuando se introduce un genoma de vector según el primer aspecto de la invención (que tiene una región psi) en la línea celular de empaquetamiento, las proteínas auxiliares pueden empaquetar el ARN del vector recombinante positivo de psi, produciendo una provisión de virus recombinante. Esta puede usarse para transducir el NOI en células receptoras. El virus recombinante cuyo genoma carece de todos los genes necesarios para preparar proteínas víricas puede infectar solo una vez y no puede propagarse. Por tanto, se introduce el NOI en el genoma de la célula hospedadora sin generación de retrovirus potencialmente dañinos. Se presenta un resumen de las líneas de empaquetamiento disponibles en "Retroviruses" (1997, Cold Spring Harbour Laboratory Press Eds: JM Coffin, SM Hughes, HE Varmus, pág. 449).
La presente invención proporciona también una línea celular de empaquetamiento que comprende un genoma de vector vírico del primer aspecto de la invención. Por ejemplo, la línea celular de empaquetamiento puede transducirse con un sistema de vector vírico que comprende el genoma o transfectarse con un plásmido portador de un constructo de ADN capaz de codificar el genoma de ARN. La presente invención puede proporcionar también una partícula de vector lentivírico producida por dicha célula.
El segundo enfoque es introducir las tres diferentes secuencias de ADN que son necesarias para producir una partícula de vector retrovírico, concretamente la secuencia de codificación de env, la secuencia de codificación de gag-pol y el genoma retrovírico defectivo que contiene uno o más NOI en la célula al mismo tiempo mediante transfección transitoria, y se hace referencia al procedimiento como transfección transitoria triple (Landau y Littman 1992; Pear et al. 1993). El procedimiento de transfección triple se ha optimizado (Soneoka et al. 1995; Finer et al. 1994). El documento WO 94/29438 describe la producción de células productoras in vitro usando este procedimiento de transfección transitoria múltiple de ADN.
Los componentes del sistema vírico que son necesarios para complementar el genoma de vector pueden estar presentes en uno o más “plásmidos productores” para transfectar en células.
La presente invención proporciona también un sistema de vector que comprende:
(i)
un genoma vírico según el primer aspecto de la invención;
(ii)
una secuencia nucleotídica que codifica las proteínas gag y pol lentivíricas;
(iii) secuencias nucleotídicas que codifican otros componentes de empaquetamiento víricos esenciales no codificados por la secuencia nucleotídica de ii). En una realización preferida, la secuencia nucleotídica de (iii) es capaz de codificar una proteína env. La presente invención proporciona también una célula transfectada con dicho sistema de vector y una partícula de vector lentivírico producida por dicha célula. Preferiblemente, la secuencia de gag-pol tiene optimización de codones para uso en la célula productora particular (véase a continuación).
La proteína env codificada por la secuencia nucleotídica de (iii) puede ser una proteína env retrovírica o lentivírica homóloga. Como alternativa, puede ser una env heteróloga o una env de un no retrovirus ni lentivirus (véase a continuación “seudotipado”).
El término “sistema de vector vírico” se usa generalmente para indicar un kit de piezas que puede usarse combinado con otros componentes necesarios para la producción de partículas víricas para producir partículas víricas en células hospedadoras. Por ejemplo, el genoma de vector retrovírico puede carecer de uno o más de los genes necesarios para replicación vírica. Este puede combinarse en un kit con una secuencia o secuencias nucleotídicas complementarias adicionales, por ejemplo en uno o más plásmidos productores. Mediante la cotransfección del genoma junto con el plásmido o plásmidos productores, deberían proporcionarse los componentes necesarios para la producción de partículas víricas infecciosas.
Como alternativa, la secuencia o secuencias nucleotídicas complementarias pueden estar presentes establemente en una línea celular de empaquetamiento que se incluye en el kit.
La presente invención se refiere también un sistema de vector lentivírico que es capaz de suministrar un genoma de ARN a una célula receptora, como se define en las reivindicaciones, en las que el genoma es más largo que el genoma de tipo silvestre del retrovirus. El sistema de vector puede ser, por ejemplo, un sistema de vector de ELAV.
Preferiblemente, el genoma de ARN del sistema de vector tiene hasta un 5%, más preferiblemente hasta un 10% más bases que el genoma de tipo silvestre. Preferiblemente, el genoma de ARN es aproximadamente un 10% más largo que el genoma de tipo silvestre. Por ejemplo, el EIAV de tipo silvestre comprende un genoma de ARN de aproximadamente 8 kb. Un sistema de vector de EIAV de la presente invención puede tener un genoma de ARN de hasta (preferiblemente aproximadamente) 8,8 kb.
El sistema de vector lentivírico de la presente invención es un sistema de vector autoinactivante (SIN).
8
imagen7
5
15
25
35
45
55
65
Preferiblemente, las secuencias de proteína de cubierta y secuencias de nucleocápsida están todas integradas establemente en la célula productora y/o de empaquetamiento. Sin embargo, una o más de estas secuencias podría existir también en forma episómica y podría ocurrir expresión génica a partir del episoma.
Como se usa en la presente memoria, el término “célula de empaquetamiento” hace referencia a una célula que contiene aquellos elementos necesarios para la producción de un virus recombinante infeccioso de los que carece el genoma de ARN. Típicamente, dichas células de empaquetamiento contienen uno o más plásmidos productores que son capaces de expresar proteínas estructurales víricas (tales como gag-pol y env con optimización de codones) pero no contienen una señal de empaquetamiento.
El término “señal de empaquetamiento”, al que se hace referencia intercambiablemente como “secuencia de empaquetamiento” o “psi”, se usa con referencia a la secuencia no codificante de acción en cis requerida para la encapsidación de hebras de ARN retrovírico durante la formación de partículas víricas. En HIV-1, esta secuencia se ha cartografiado en loci que se extienden en 5’ del sitio donante de corte y empalme principal (SD) hasta al menos el codón de inicio de gag.
Pueden prepararse fácilmente líneas celulares de empaquetamiento adecuadas para uso con los constructos de vector descritos anteriormente (véase también el documento WO 92/05266), y utilizarse para crear líneas celulares productoras para la producción de partículas de vector retrovírico. Como ya se ha mencionado, se presenta un resumen de las líneas de empaquetamiento disponibles en "Retrovirus" (como anteriormente).
Como también se discute anteriormente, se ha encontrado que las líneas celulares de empaquetamiento sencillas, que comprenden un provirus en que se ha eliminado la señal de empaquetamiento, conducen a la rápida producción de virus competentes de replicación indeseables mediante recombinación. Para mejorar la seguridad, se han producido líneas celulares de segunda generación en las que se elimina la 3’ LTR del provirus. En dichas células, serían necesarias dos recombinaciones para producir un virus de tipo silvestre. Una mejora adicional implica la introducción de los genes gag-pol y el gen env en constructos separados en las llamadas líneas celulares de empaquetamiento de tercera generación. Estos constructos se introducen secuencialmente para evitar la recombinación durante la transfección.
Preferiblemente, las líneas celulares de empaquetamiento son líneas celulares de empaquetamiento de segunda generación.
Preferiblemente, las líneas celulares de empaquetamiento son líneas celulares de empaquetamiento de tercera generación.
En estas líneas celulares de tercera generación de constructo escindido, puede conseguirse una reducción adicional de la recombinación cambiando los codones. Esta técnica, basada en la redundancia del código genético, se orienta a reducir la homología entre los constructos separados, por ejemplo entre las regiones de superposición en los marcos de lectura abiertos de gag-pol y env.
Las líneas celulares de empaquetamiento son útiles para proporcionar los productos génicos necesarios para encapsidar y proporcionar una proteína de membrana para la producción de partículas de vector de alto título. La célula de empaquetamiento puede ser una célula cultivada in vitro tal como una línea celular de cultivo de tejido. Las líneas celulares adecuadas incluyen, pero sin limitación, células de mamífero tales como líneas celulares derivadas de fibroblasto de murino o líneas celulares humanas. Preferiblemente, la línea celular de empaquetamiento es una línea celular humana tal como, por ejemplo: HEK293, 293-T, TE671, HT1080.
Como alternativa, la célula de empaquetamiento puede ser una célula derivada del individuo para tratar tal como un monocito, macrófago, célula sanguínea o fibroblasto. La célula puede aislarse del individuo y administrarse los componentes de empaquetamiento y de vector ex vivo seguidos de la readministración de las células de empaquetamiento autólogas.
Con más detalle, la célula de empaquetamiento puede ser una célula de empaquetamiento in vivo en el cuerpo del individuo para tratar o puede ser una célula cultivada in vitro tal como una línea celular de cultivo de tejido. Las líneas celulares adecuadas incluyen células de mamífero tales como líneas celulares derivadas de fibroblasto de murino o líneas celulares humanas. Preferiblemente, la línea celular de empaquetamiento es una línea celular humana, tal como por ejemplo una línea celular 293, HEK293, 293-T, TE671, HT1080.
Como alternativa, la célula de empaquetamiento puede ser una célula derivada del individuo para tratar tal como un monocito, macrófago, citoblasto, célula sanguínea o fibroblasto. La célula puede aislarse del individuo y administrarse los componentes de empaquetamiento y de vector ex vivo seguidos de la readministración de las células de empaquetamiento antólogas. Como alternativa, los componentes de empaquetamiento y de vector pueden administrarse a la célula de empaquetamiento in vivo. Los procedimientos para introducir componentes de empaquetamiento lentivírico y de vector en células de un individuo son conocidos en la materia. Por ejemplo, es un enfoque introducir las diferentes secuencias de ADN que se requieren para producir una partícula de vector
10
imagen8
imagen9
imagen10
imagen11
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
empalme, deleciones de gag y env. Se ha encontrado sorprendentemente que una deleción de todo menos los 360
o así nucleótidos N-terminales de gag conduce a un aumento del título de vector. Por tanto, preferiblemente, el genoma de vector retrovírico incluye una secuencia de gag que comprende una o más deleciones, más preferiblemente la secuencia de gag comprende aproximadamente 360 nucleótidos derivables del extremo N.
La secuencia de TetR puede someterse útilmente a optimización de codones usando los codones mostrados en la figura 21.
NOI
En la presente invención, el término NOI (secuencia nucleotídica de interés) se refiere a secuencias nucleotídicas útiles en el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo. También se divulga cualquier secuencia nucleotídica adecuada que no tiene que ser necesariamente una secuencia de ADN o ARN de origen natural completa. Por tanto, el NOI puede ser, por ejemplo, una secuencia de ARN/ADN sintética, una secuencia de ARN/ADN recombinante (concretamente, preparada mediante el uso de técnicas de ADN recombinante), una secuencia de ADNc o una secuencia de ADN genómico parcial, incluyendo combinaciones de las mismas. La secuencia no tiene que ser una región de codificación. Si es una región de codificación, no tiene que ser una región de codificación entera. Además, la secuencia de ARN/ADN puede estar en orientación codificante o en orientación anticodificante. Preferiblemente, está en orientación codificante. Preferiblemente, la secuencia es de, o se transcribe a partir de, ADNc.
Los NOI, a los que también se hace referencia como “secuencias heterólogas”, “genes heterólogos” o “transgenes” pueden ser uno cualquiera o más de, por ejemplo, uno o varios genes de selección, genes marcadores o genes terapéuticos.
El NOI puede ser un gen candidato que es de significación potencial en un proceso patológico. Por tanto, el sistema de vector de la presente invención puede usarse, por ejemplo, con fines de validación de diana.
El NOI tiene una aplicación terapéutica. Los NOI adecuados incluyen, pero sin limitación: secuencias que codifican enzimas, citocinas, quimiocinas, hormonas, anticuerpos, moléculas antioxidantes, moléculas de tipo inmunoglobulina genomanipuladas, un anticuerpo monocatenario, proteínas de fusión, moléculas coestimuladoras inmunitarias, moléculas inmunomoduladoras, un ARN anticodificante, un mutante negativo transdominante de una proteína diana, una toxina, una toxina condicional, un antígeno, una proteína y factores de crecimiento supresores tumorales, proteínas de membrana, proteínas y péptidos vasoactivos, proteínas y ribozimas antivíricas y derivados de los mismos (tales como con un grupo informador asociado). Los NOI pueden codificar también enzimas activadoras de profármacos.
La secuencia de codificación de NOI puede codificar un segmento de una secuencia de codificación.
El NOI es útil en el tratamiento de un trastorno neurodegenerativo.
Preferiblemente, el NOI es útil en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
El NOI puede codificar una enzima involucrada en la síntesis de la dopamina. Por ejemplo, la enzima puede ser una de las siguientes: tirosina hidroxilasa, GTP-ciclohidrolasa 1 y/o aminoácido aromático DOPA-descarboxilasa. Las secuencias de los tres genes están disponibles en los números de orden: X05290, U19523 y M76180, respectivamente.
Alternativamente, el NOI puede codificar el transportador vesicular de monoaminas de tipo 2 (VMAT2). En una realización preferente, el genoma vírico comprende un NOI que codifica el aminoácido aromático DOPAdescarboxilasa y un NOI que codifica el VMAT2. Tal genoma puede utilizarse en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson, en particular, junto con la administración periférica de la L-DOPA.
Alternativamente, el NOI puede codificar un factor capaz de bloquear o inhibir la degeneración del sistema nigroestriatal. Un ejemplo de tal factor es un factor neurotrófico. Por ejemplo, el NOI puede codificar el factor neurotrófico obtenido de la línea celular glial (GDNF) o el factor neurotrófico obtenido del cerebro (BDNF).
Como alternativa, el NOI puede codificar un factor neuroprotector. En particular, los NOI pueden codificar moléculas que evitan que las neuronas positivas de TH mueran o que estimulan la regeneración y recuperación funcional en el sistema nigroestriado dañado.
El NOI puede codificar toda o parte de la proteína de interés (“POI”) o un mutante, homólogo o variante de la misma. Por ejemplo, el NOI puede codificar un fragmento de la POI que es capaz de funcionar in vivo de manera análoga a la proteína de tipo silvestre.
15
imagen12
imagen13
imagen14
imagen15
imagen16
imagen17
imagen18
imagen19
imagen20
imagen21
imagen22
imagen23
imagen24
imagen25
imagen26
imagen27

Claims (1)

  1. imagen1
    imagen2
ES10012190.4T 2002-02-01 2003-02-03 Vector multicistrónico lentivírico Expired - Lifetime ES2634424T3 (es)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0202403A GB0202403D0 (en) 2002-02-01 2002-02-01 Method
GB0202403 2002-02-01
GB0212768 2002-05-31
GB0212768A GB0212768D0 (en) 2002-05-31 2002-05-31 Method

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2634424T3 true ES2634424T3 (es) 2017-09-27

Family

ID=27665368

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES10012190.4T Expired - Lifetime ES2634424T3 (es) 2002-02-01 2003-02-03 Vector multicistrónico lentivírico
ES03734767T Expired - Lifetime ES2411981T3 (es) 2002-02-01 2003-02-03 Vector lentivírico

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES03734767T Expired - Lifetime ES2411981T3 (es) 2002-02-01 2003-02-03 Vector lentivírico

Country Status (9)

Country Link
EP (2) EP2348119B1 (es)
JP (2) JP4598398B2 (es)
AU (1) AU2003238456A1 (es)
CY (1) CY1114192T1 (es)
DK (2) DK2348119T3 (es)
ES (2) ES2634424T3 (es)
PT (1) PT1504108E (es)
SI (1) SI1504108T1 (es)
WO (1) WO2003064665A2 (es)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK2348119T3 (en) * 2002-02-01 2017-08-21 Oxford Biomedica (Uk) Ltd Polycistronic lentiviral vector
DK2002003T3 (en) 2005-05-27 2016-03-21 Ospedale San Raffaele Srl Gene vector comprising miRNA
WO2007014363A2 (en) * 2005-07-27 2007-02-01 Genentech, Inc. Vectors for inducible expression of hairpin rna and use thereof
US8765146B2 (en) 2005-08-31 2014-07-01 Genvec, Inc. Adenoviral vector-based malaria vaccines
GB0526210D0 (en) 2005-12-22 2006-02-01 Oxford Biomedica Ltd Vectors
JP5559185B2 (ja) * 2008-11-11 2014-07-23 オックスフォード バイオメディカ（ユーケー）リミテッド 方法
GB201118636D0 (en) 2011-10-28 2011-12-07 Oxford Biomedica Ltd Nucleotide sequence
GB201318804D0 (en) * 2013-10-24 2013-12-11 Adaptimmune Ltd Vectors for transgene expression
GB201322798D0 (en) 2013-12-20 2014-02-05 Oxford Biomedica Ltd Production system
EP3215191B1 (en) 2014-11-05 2024-08-14 Voyager Therapeutics, Inc. Aadc polynucleotides for the treatment of parkinson's disease
KR20230145206A (ko) 2014-11-14 2023-10-17 보이저 테라퓨틱스, 인크. 조절성 폴리뉴클레오티드
GB2540786A (en) * 2015-07-28 2017-02-01 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Codon optimised tet repressor proteins
ES2987957T3 (es) 2015-11-23 2024-11-18 Novartis Ag Vectores de transferencia lentivirales optimizados y usos de los mismos
KR102067352B1 (ko) 2015-11-24 2020-01-16 글락소스미스클라인 인털렉츄얼 프로퍼티 디벨로프먼트 리미티드 레트로바이러스 생산을 위한 일시적인 형질감염 방법
FR3044016A1 (fr) * 2015-11-24 2017-05-26 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Lignees cellulaires stables pour la production retrovirale
US10584337B2 (en) 2016-05-18 2020-03-10 Voyager Therapeutics, Inc. Modulatory polynucleotides
EP3595705A1 (en) 2017-03-15 2020-01-22 Oxford BioMedica (UK) Limited Method
JOP20190269A1 (ar) 2017-06-15 2019-11-20 Voyager Therapeutics Inc بولي نوكليوتيدات aadc لعلاج مرض باركنسون
FI3633040T3 (fi) 2017-12-22 2023-08-03 Oxford Biomedica Ltd Retrovirusvektori
CN112424359A (zh) 2018-05-15 2021-02-26 沃雅戈治疗公司 用于治疗帕金森氏病的组合物和方法
JP2021533831A (ja) * 2018-08-16 2021-12-09 スペースクラフト セブン リミテッド ライアビリティ カンパニー ウイルスベクターのための生成方法
US20220033848A1 (en) * 2018-11-19 2022-02-03 Board Of Regents, The University Of Texas System A modular, polycistronic vector for car and tcr transduction
CN115835887A (zh) 2019-03-10 2023-03-21 牛津生物医学（英国）有限公司 用于治疗帕金森病的基因治疗组合物和方法
WO2021094752A1 (en) 2019-11-12 2021-05-20 Oxford Biomedica (Uk) Limited Production system
US20240052366A1 (en) 2020-02-13 2024-02-15 Oxford Biomedica (Uk) Limited Production of Lentiviral Vectors
WO2021181108A1 (en) 2020-03-13 2021-09-16 Oxford Biomedica (Uk) Limited Lentiviral vectors
EP4143326A1 (en) 2020-04-27 2023-03-08 University of Iowa Research Foundation Compositions and methods for the treatment of cystic fibrosis
GB202007199D0 (en) 2020-05-15 2020-07-01 Oxford Biomedica Ltd Viral vector production
KR20230043181A (ko) * 2020-08-03 2023-03-30 프리베일 테라퓨틱스, 인크. 파킨을 코딩하는 aav 벡터 및 그의 용도
GB202017725D0 (en) 2020-11-10 2020-12-23 Oxford Biomedica Ltd Method
GB202114529D0 (en) 2021-10-12 2021-11-24 Oxford Biomedica Ltd Lentiviral vectors
GB202114532D0 (en) 2021-10-12 2021-11-24 Oxford Biomedica Ltd Lentiviral Vectors
GB202114534D0 (en) 2021-10-12 2021-11-24 Oxford Biomedica Ltd Novel viral regulatory elements
GB202114530D0 (en) 2021-10-12 2021-11-24 Oxford Biomedica Ltd Retroviral vectors
GB202114528D0 (en) 2021-10-12 2021-11-24 Oxford Biomedica Ltd Lentiviral vectors
GB202117844D0 (en) 2021-12-09 2022-01-26 Oxford Biomedica Ltd Purification method
GB202211935D0 (en) 2022-08-16 2022-09-28 Oxford Biomedica Ltd envelope proteins
WO2024259299A1 (en) 2023-06-14 2024-12-19 The Broad Institute, Inc. Compositions and methods for identification of vhh antibodies that bind a target antigen
EP4777613A1 (en) 2023-09-13 2026-07-22 Medizinische Universität Graz Method for providing antigen-reactive lymphocytes

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU6075190A (en) 1989-06-30 1991-01-17 Regents Of The University Of California, The Retrovirus detection
EP0549723A1 (en) 1990-09-21 1993-07-07 Chiron Corporation Packaging cells
DE4228458A1 (de) * 1992-08-27 1994-06-01 Beiersdorf Ag Multicistronische Expressionseinheiten und deren Verwendung
US5834256A (en) 1993-06-11 1998-11-10 Cell Genesys, Inc. Method for production of high titer virus and high efficiency retroviral mediated transduction of mammalian cells
ES2243937T3 (es) 1994-04-29 2005-12-01 Baxter Healthcare S.A. Poxvirus recombinados en regiones esenciales con la ayuda de polinucleotidos extraños.
AU3635695A (en) 1994-09-19 1996-04-09 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods for genetically modifying hematopoietic stem cells
FI972225L (fi) 1994-11-28 1997-07-16 Genetic Therapy Inc Vektorit kudosspesifistä replikaatiota varten
GB9510272D0 (en) * 1995-05-22 1995-07-19 Isis Innovation Retroviral vectors
WO1997014809A2 (en) 1995-10-16 1997-04-24 Dana-Farber Cancer Institute Novel expression vectors and methods of use
EP0859856A2 (en) 1995-11-08 1998-08-26 Whitehead Institute For Biomedical Research Stable packaging cell line producing pseudotyped retroviruses
US6133027A (en) 1996-08-07 2000-10-17 City Of Hope Inducible expression system
US5739018A (en) 1996-08-07 1998-04-14 The Regents Of The University Of California Packaging cell lines for pseudotyped retroviral vectors
US6126939A (en) 1996-09-03 2000-10-03 Yeda Research And Development Co. Ltd. Anti-inflammatory dipeptide and pharmaceutical composition thereof
PT904392E (pt) 1996-10-17 2001-06-29 Oxford Biomedica Ltd Vectores retrovirais
GB9621680D0 (en) 1996-10-17 1996-12-11 Oxford Biomedica Ltd Lentiviral vectors
WO1999032646A1 (en) * 1997-12-22 1999-07-01 Oxford Biomedica (Uk) Limited Equine infectious anaemia virus (eiav) based
GB9710809D0 (en) 1997-05-23 1997-07-23 Medical Res Council Nucleic acid binding proteins
GB9710807D0 (en) 1997-05-23 1997-07-23 Medical Res Council Nucleic acid binding proteins
GB9720465D0 (en) 1997-09-25 1997-11-26 Oxford Biomedica Ltd Dual-virus vectors
WO1999040930A1 (en) 1998-02-12 1999-08-19 Center For Blood Research, Inc. Specific inhibitors of nfat activation by calcineurin and their use in treating immune-related diseases
GB9803351D0 (en) 1998-02-17 1998-04-15 Oxford Biomedica Ltd Anti-viral vectors
CN1357048A (zh) 1998-03-06 2002-07-03 牛津生物医学（英国）有限公司 增强前体药物活化
DE69941049D1 (de) 1998-05-22 2009-08-13 Oxford Biomedica Ltd Retrovirales verabreichungssystem
ATE407206T1 (de) 1998-11-10 2008-09-15 Univ Rochester Methoden zu herstellung von genbanken
EP2042598A1 (en) 1998-11-18 2009-04-01 Oxford Biomedica (UK) Limited 5T4 tumour-associated antigen for use in tumour immunotherapy
GB9912965D0 (en) 1999-06-03 1999-08-04 Oxford Biomedica Ltd In vivo selection method
GB0009760D0 (en) * 2000-04-19 2000-06-07 Oxford Biomedica Ltd Method
GB0024550D0 (es) * 2000-10-06 2000-11-22 Oxford Biomedica Ltd
DK2348119T3 (en) * 2002-02-01 2017-08-21 Oxford Biomedica (Uk) Ltd Polycistronic lentiviral vector

Also Published As

Publication number Publication date
AU2003238456A1 (en) 2003-09-02
PT1504108E (pt) 2013-06-12
EP1504108A2 (en) 2005-02-09
JP2010263904A (ja) 2010-11-25
DK1504108T3 (da) 2013-06-10
EP2348119A2 (en) 2011-07-27
JP2005515783A (ja) 2005-06-02
JP5601898B2 (ja) 2014-10-08
ES2411981T3 (es) 2013-07-09
EP2348119B1 (en) 2017-04-26
SI1504108T1 (sl) 2013-07-31
WO2003064665A3 (en) 2004-12-02
WO2003064665A2 (en) 2003-08-07
EP2348119A3 (en) 2011-11-02
CY1114192T1 (el) 2016-08-31
EP1504108B1 (en) 2013-04-17
JP4598398B2 (ja) 2010-12-15
DK2348119T3 (en) 2017-08-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2618508T3 (es) Células que comprenden partículas lentivíricas con codones optimizados
CN1840204B (zh) 用于制备免疫治疗性组合物的慢病毒载体
Cronin et al. Altering the tropism of lentiviral vectors through pseudotyping
JP2022091989A (ja) ウイルスベクター産生系
JP4640742B2 (ja) 高力価で安全な組換えレンチウイルスベクター作成の方法及び手段
JP4224295B2 (ja) ベクターシステム
Naldini et al. Efficient transfer, integration, and sustained long-term expression of the transgene in adult rat brains injected with a lentiviral vector.
US20060177934A1 (en) Lentiviral LTR-deleted vector
CN111315761A (zh) 用于选择性转导靶细胞的基于衔接子的逆转录病毒载体系统
JP2006524051A (ja) 両方向性合成プロモーターを備えたレンチウイルスベクターおよびその使用
CN104745533A (zh) 产生非节段负链rna 病毒的细胞和方法
CN107523581A (zh) 构建体
CA2307933A1 (en) Replicating or semi-replicating viral constructs, preparation and uses for gene delivery
US20040202642A1 (en) Lentiviral-mediated growth factor gene therapy for nerodegenerative diseases
JP2008303215A (ja) ベクターシステム
ES2744448T5 (es) Vectores para la expresión transgénica
US20050079616A1 (en) Method of transducing ES cells
JP4708661B2 (ja) 増強された３’転写終結構造を含む、レトロウイルスベクター
US20220228169A1 (en) Small ruminant lentivirus vector
JP2001501815A (ja) 非分裂細胞への形質導入が可能なレトロウイルスベクター
US8309071B2 (en) Foamy viral envelope genes
EP2138584B1 (en) Foamy viral envelope genes
EP1059356A1 (en) Replicating or semi-replicating retroviral constructs, preparation and uses for gene delivery
ES2236888T3 (es) Expresion de una proteina modificada de la envoltura del virus espumoso.
Schambach et al. Retroviral vectors for cell and gene therapy