ES2636062T3 - Material marino derivado de estadios de desarrollo iniciales de percebes - Google Patents
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Abstract
Pienso caracterizado porque el pienso comprende huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe.
Description
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DESCRIPCION
Material marino derivado de estadios de desarrollo iniciales de percebes Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a un pienso y a su uso. La presente invencion tambien se refiere al uso de huevos y nauplio de estadio I de un percebe.
Ademas, la presente invencion se refiere a metodos para recolectar y aislar huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe maduro, sesil, fijado a una superficie. Finalmente, la presente invencion se refiere a metodos para conservar un material de percebe para un producto nutricional asf como a una composicion.
Antecedentes de la invencion
Los alimentos que contienen un alto contenido de acidos grasos insaturados marinos han demostrado ser beneficiosos para el desarrollo normal y la calidad nutricional de muchas especies acuaticas criadas usadas en el consumo para seres humanos. En la actualidad, la cna de muchas especies de peces marinos y crustaceos depende en gran medida de la alimentacion de presas vivas durante sus primeros estadios de desarrollo.
Las dietas artificiales, tales como microdietas, son en general poco satisfactorias en las primeras alimentaciones de las larvas precoces de peces marinos y crustaceos. Se han sugerido varios motivos que podnan provocar que las microdietas no sean satisfactorias en las primeras alimentaciones de larvas marinas. Aparte de tasas de alimentacion reducidas debido a una menor aceptacion, se ha sugerido que una calidad nutricional insuficiente de la dieta que no cubre los requisitos de las larvas y/o la alta carga de compuestos organicos que provoca problemas microbianos y la calidad reducida del agua que la acompana son causas de que fracasen las dietas artificiales. Otros motivos sugeridos son una digestibilidad reducida de las dietas, que se ha sugerido que es el resultado de una posible falta de enzimas en las microdietas. Este ultimo motivo se basa en el hecho de que las larvas de peces marinos carecen de estomago en la fase larvaria y, por tanto, de una digestion peptica eficaz de los alimentos. Se ha sugerido que las enzimas, incluidas de manera natural en la presa de alimentacion viva, pueden ser necesarias para una digestion eficaz de los alimentos en los estadios tempranos o como factor estimulante/activante de la excrecion endogena y smtesis de enzimas digestivas larvarias. Ademas de otros factores, la alimentacion inadecuada durante los primeros estadios de vida de larvas de peces marinos tales como el bacalao del Atlantico, halibut del Atlantico y rodaballo no solo dan como resultado un crecimiento reducido, sino tambien altas mortalidades, reduccion de la calidad de las larvas y malas pigmentaciones y malos desarrollos.
En la acuicultura, los organismos de presa mas comunes usados para alimentar larvas de peces marinos pertenecen al grupo de los rotfferos, especialmente algunas especies que pertenecen a la familia de Brachionidae y a la especie de camaron salino Artemia. Sin embargo, la composicion nutricional de ambos, rotfferos y Artemia, es mala de manera natural y no es adecuada para la alimentacion de larvas de peces marinos. Por tanto, estos organismos tienen que criarse en criaderos intensivos y deben enriquecerse con lfpidos marinos, especialmente acidos grasos omega-3 para mejorar su calidad nutricional como organismos de presa para larvas de peces marinos. Esto hace que la cna de estos organismos de presa sea laboriosa y cara. Pero, a pesar del enriquecimiento mencionado, todavfa no se encuentra que ni la Artemia ni los rotfferos sean nutricionalmente optimos para muchas especies de larvas. Esto se refleja en las tasas de mortalidad, tasas de crecimiento, malas pigmentaciones y malos desarrollos. Por tanto, existe una clara necesidad de dietas de sustitucion mas optimas para la primera alimentacion de larvas asf como para estadios de vida tempranos de muchos crustaceos de criadero que usa, por ejemplo, Artemia enriquecida como dieta.
Ademas, existe una gran necesidad de material biologico de origen marino rico en acidos grasos omega-3 que sea adecuado para su uso en el consumo por animales y seres humanos. El creciente conocimiento de los efectos beneficiosos de los acidos grasos omega-3 (vease por ejemplo el documento WO 93/11675) en sectores tales como el consumo por seres humanos, composiciones farmaceuticas y para fines de salud en seres humanos y otros animales distintos de los peces aumenta adicionalmente la demanda cuantitativa de estos acidos grasos. En la actualidad, la principal fuente de materia prima biologica marina son el aceite de pescado y las harinas de pescado. Sin embargo, debido a la pesca excesiva acompanada por una demanda creciente a nivel mundial, existe una necesidad creciente de nuevas fuentes marinas biologicas no explotadas para cubrir la demanda.
Los percebes son un organismo apenas explotado a nivel industrial. Los percebes son un tipo de artropodo que pertenecen a la infraclase Cirripedia en el subfilo Crustacea. Los percebes son exclusivamente marinos y tienden a vivir en aguas poco profundas y con mareas. Son animales que se alimentan en suspension sesiles (no moviles). Actualmente se conocen aproximadamente 1.220 especies de percebes. En los oceanos se encuentran dos tipos principales de percebes, los percebes del Cantabrico y los balanos.
Los percebes incuban sus huevos en la cavidad corporal, en la que se desarrollan adicionalmente para dar el nauplio de estadio I de un ojo. Los nauplios I se liberan del progenitor a la columna de agua en la que se desarrollan para dar nauplios de estadio II tras un breve tiempo, normalmente en el plazo de un dfa. Los nauplios de estadio II tienen una vida planctonica en la que nadan libremente, que dura varias semanas durante las cuales el nauplio II
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inicia un comportamiento de alimentacion activa. Los estadios de nauplio planctonico libres desarrollan diferentes apendices tales como cuernos frontales que ya pueden observarse en el nauplio de estadio II. Entonces se completan varios estadios de nauplios como plancton (de larvas de nauplio II a larvas de nauplio VI), hasta que se convierten en larvas cipris competentes. Cipris es el estadio planctonico final, que se adhiere a un sustrato, y posteriormente experimenta una metamorfosis para dar la forma de un especimen adulto.
Se ha propuesto una comparacion de cambios en la composicion de lfpidos durante el ciclo de vida temprano de diferentes crustaceos incluyendo percebes por Lee y Nevenzel (Lee, R. F. y Nevenzel, J. C. 1974. Lipid changes during life cycle of marine copepod Euchaeta japonica Marukawa. Lipids. vol. 9, n.° 11,1, paginas 891-898).
Dado que los percebes se fijan a estructuras construidas por el hombre, especialmente a barcos, asf como a material biologico tal como las conchas de mejillones para consumo, se reconocen principalmente, y de manera casi exclusiva, como organismos de incrustacion, teniendo su presencia consecuencias economicas negativas. Por tanto, hasta ahora los estudios sobre los percebes se han centrado principalmente en factores que influyen en la fijacion de percebes asf como en metodos de eliminacion de percebes de superficies. Algunos percebes maduros se consideran comestibles por seres humanos, especialmente los percebes del Cantabrico y percebes gigantes. Por ejemplo, los percebes del Cantabrico se cnan con este fin.
Se han criado percebes con aplicaciones comerciales y fines de investigacion con el objetivo de recolectarlos en su estadio sesil. Lopez et al. 2012 describen la cna de larvas de percebes para dar especies adultas para consumo por seres humanos (Lopez, D. A.; Lopez B. A., Pham, C. K., Isidro, E. J. 2012. Potency of barnacle in aquaculture industry. En: Aquaculture, Editor: Muchlisin, Z., ISBN 978-953-307-374-5, Intech.). Los percebes tambien se recolectan del entorno natural o bien recogiendolos en el estadio planctonico o bien mediante retirada de los organismos sesiles.
Se han filtrado larvas de percebes planctonicas que nadan libremente del agua y se han sometido a prueba como dieta para langosta juvenil (Daniel, P.C., Bayer, R. C., Chapman, S. 1985. Barnacle larvae (Balanus spp.) as a potential diet for juvenile lobster (Homarus americanus). Aquaculture 46, pags. 67-70). Tambien se mencionan pruebas llevadas a cabo con nauplios de percebes planctonicos como alimento vivo para larvas de peces (vease Wullur S., Sakakura, Y., Hagiwara, A. 2009. The minute monogonont rotifer Proales similis de Beauchamp: Culture and feeding to small mouth marine fish larvae. Aquaculture 293, pag. 67), pero no se consideraron optimos para este fin.
Otra aplicacion de materia prima de percebe se describe en el documento CN1593464, que da a conocer un producto sanitario antiinflamatorio y de alivio del dolor que se extrae de una materia prima de percebe.
El problema tecnico objetivo que va a resolverse mediante la presente invencion es proporcionar un nuevo recurso biologico para productos nutricionales tales como alimentos asf como metodos para la explotacion de un nuevo recurso biologico marino que puedan aplicarse a nivel industrial para diferentes fines. Por tanto, la presente invencion se refiere a proporcionar un nuevo recurso biologico para productos marinos y a un metodo para explotar y producir el mismo.
Un objetivo adicional es proporcionar el nuevo recurso biologico para el producto marino en una forma pura particular sin mezclarse con otro material biologico.
En particular, la presente invencion tiene el objetivo de proporcionar una dieta optimizada util para la alimentacion de animales acuaticos tales como peces y crustaceos, especialmente en sus estadios de vida tempranos asf como para especies acuaticas ornamentales.
Sumario de la invencion
Segun un primer aspecto, la presente invencion se refiere a un pienso que comprende huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe.
El pienso puede comprender ademas nauplio de estadio II de un percebe. Preferiblemente, al menos el 70% del material comprendido en el pienso es nauplio de estadio I, mas preferiblemente al menos el 80%, incluso mas preferiblemente al menos el 90%, incluso mas preferiblemente al menos el 95%, y lo mas preferiblemente al menos el 99% del material en relacion con el peso en humedo total o el numero total de organismos. Preferiblemente, el pienso tiene un contenido de huevos que es de menos del 30%, mas preferiblemente menos del 20%, incluso mas preferiblemente menos del 10% y lo mas preferiblemente menos del 5% en relacion con el peso en humedo o el numero de organismos comprendidos en el producto. Otra realizacion preferida segun la presente invencion tiene un contenido de nauplio de percebes de estadio II que es de menos del 50%, mas preferiblemente el 20%, incluso mas preferiblemente menos del 10% y lo mas preferiblemente menos del 5% en relacion con el peso en humedo o el numero de organismos comprendidos en el producto.
Tambien se prefiere que el material de percebe comprendido en el pienso solo comprenda nauplio de estadio I, o solo comprenda huevos, o solo comprenda una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II de un percebe.
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Ademas se prefiere que el pienso no comprenda estadios de desarrollo vivos de percebes.
El pienso es producto alimenticio para un animal acuatico, preferiblemente para un animal acuatico de criadero seleccionado de peces y crustaceos, para un vertebrado ornamental o para invertebrado ornamental y lo mas preferiblemente para estadios vivos tempranos de un pez o de un crustaceo, que es preferiblemente una especie seleccionada de larvas de peces marinos, un cangrejo, un camaron, una gamba y una langosta.
En otra realizacion preferida, dicho pienso comprende o consiste en un aceite derivado de huevos y/o nauplio de estadio I o una combinacion de huevos y/o nauplio de estadio I con nauplio de estadio II de un percebe.
Un segundo aspecto de la presente invencion se refiere a un uso de huevos y/o nauplio de estadio I de un percebe para consumo por animales y seres humanos, como suplemento alimenticio, producto sanitario y/o alimento funcional.
Preferiblemente, un animal acuatico de criadero, un vertebrado ornamental o un invertebrado ornamental, se alimenta con un producto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-9, o bien directamente o bien comprendido en un alimento con otros ingredientes.
Un tercer aspecto de la presente invencion se refiere a un metodo para recolectar y aislar huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe maduro, sesil, fijado a una superficie en el que los huevos y/o nauplios de estadio I se retiran directamente del percebe sesil retirando mediante lavado dichos huevos y nauplios de estadio I de los percebes maduros sesiles mediante chorros de agua, y recogiendolos posteriormente.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere a un metodo para recolectar y aislar huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe maduro, sesil, fijado a una superficie para su uso en un producto segun la reivindicacion 1 en el que los huevos y/o nauplios de estadio I:
- se retiran del percebe sesil tras haberse desprendido dicho percebe de dicha superficie mediante fuerzas mecanicas y/o chorros de agua, y se recogen los percebes maduros retirados junto con los huevos y/o nauplios de estadio I, y
- liberar opcionalmente huevos y/o nauplios de estadio I todavfa fijados al percebe tras dicho desprendimiento mediante el uso de fuerzas mecanicas y/o lavado; y
- separar los huevos y/o nauplios de los percebes maduros mediante un metodo de separacion.
Los huevos y nauplios de estadio I obtenidos pueden fraccionarse tras la liberacion de los percebes maduros en fracciones de diferente tamano o bien
- mediante un metodo de separacion mecanica, seleccionado preferiblemente de tamizado, filtracion y/o centrifugacion, o bien
- mediante aplicacion de luz que provoca una respuesta fototactica de las larvas de nauplio.
El metodo para recolectar aplicado puede comprender una etapa adicional para aumentar el contenido de nauplio de estadio I en el material tras la recoleccion mediante incubacion de los huevos y/o nauplios de estadio I vivos aislados todavfa comprendidos en la membrana de huevo durante un periodo de tiempo definido en agua de mar para la eclosion/liberacion de nauplios I que todavfa estan situados en la membrana de huevo para dar nauplios I que nadan libremente.
Preferiblemente, la temperatura de incubacion es de entre 5 y 10°C, mas preferiblemente de aproximadamente 8°C y el tiempo de incubacion es de entre 5 y 12 horas, preferiblemente de aproximadamente 10 horas.
La presente invencion tambien se refiere a un metodo para conservar un material de percebe para un producto segun de los parrafos anteriores, en el que los nauplios y/o huevos recolectados comprendidos se tratan mediante uno o varios de los metodos seleccionados de enfriamiento por debajo del punto de congelacion de los animales, tratamiento termico, secado, liofilizacion, almacenamiento en una atmosfera modificada y adicion de productos qmmicos conservantes.
Preferiblemente, el material de percebe se conserva mediante un tratamiento termico que se elige de calentamiento hasta una temperatura de entre 55°C y menos de 70°C, pasteurizacion mediante calentamiento hasta al menos 70°C, preferiblemente por encima de 75°C y esterilizacion por encima de 100°C y opcionalmente se almacena.
Preferiblemente, el material se almacena por debajo del punto de congelacion, preferiblemente a -18°C o menos, mas preferiblemente a -80°C o menos con o sin conservacion previa.
Tambien se prefiere que el material se almacene en una atmosfera modificada, preferiblemente en gas nitrogeno, mas preferiblemente almacenado en una atmosfera modificada y a una temperatura por debajo de 4°C con o sin conservacion previa.
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La presente invencion tambien se refiere a una composicion que comprende huevos y/o nauplio de estadio I de percebes o un material derivado de los mismos para su uso en un tratamiento profilactico o medico. Preferiblemente, dicha composicion se usa para mejorar el crecimiento, la supervivencia y/o mala pigmentacion de un animal, preferiblemente de un animal acuatico.
Tambien se definen realizaciones preferidas en las reivindicaciones dependientes.
Una especie particularmente preferida segun la presente invencion es el balano Semibalanus balanoides. Se sabe que los S. balanoides adultos crecen hasta 15 milfmetros de diametro, viviendo fijados a rocas y otros sustratos solidos. S. balanoides se encuentra en la zona intermareal en los oceanos del norte del planeta. Su distribucion esta limitada en el norte por el alcance de la barrera de hielo y en el sur por la temperatura creciente que impide la maduracion de gametos. S. balanoides, como la mayorfa de los demas percebes, es hermafrodita, pero no puede fecundarse a sf mismo. Pueden producirse hasta 10.000 huevos por individuo, y se almacenan en sacos dentro de la cavidad de la concha. Mientras los huevos estan desarrollandose, el percebe adulto no muda. Los huevos eclosionan para dar larvas de nauplio, que tienen tres pares de patas, un par de antenas y un unico ojo y se liberan como estadio de desarrollo de nauplio I tras lo cual se desarrollan rapidamente para dar nauplio de estadio II para coincidir con la proliferacion de algas en primavera.
Otras especies de percebes utiles segun la presente invencion son cualquier percebe adecuado elegido de la infraclase Cirripedia. Sin limitarse a los siguientes ejemplos, son de particular interes las especies seleccionadas de los generos Semibalanus, Balanus, Austrominius, Amphibalanus, Verruca, Chirona, Notoch-thamalus, Jehlius, Chthalamus y Belanus.
Se apreciara que las caracterfsticas de la invencion descritas anteriormente pueden combinarse en cualquier combinacion sin apartarse del alcance de la invencion.
Descripcion detallada de la invencion
Ahora se describiran en detalle realizaciones de la presente invencion y se ilustraran y respaldaran adicionalmente mediante ejemplos con referencia al siguiente diagrama, en el que
la figura 1 muestra el peso medio (± DE) de larvas de Solea solea alimentadas con nauplios de percebes en combinacion con alimento vivo tradicional usado en criaderos tradicionales (grupo B) en comparacion con el control (grupo A) que solo recibio la dieta con alimento vivo.
Los percebes usados en las siguientes pruebas y experimentos segun la presente invencion fueron de la especie Semibalanus balanoides y todos se recolectaron en Noruega. S. balanoides es una especie de balano comun y extendida, que es comun sobre rocas y otros sustratos en la zona intermareal del noroeste de Europa y ambas costas de America del Norte y por tanto tambien puede recolectarse normalmente de otras ubicaciones distintas de Noruega.
Si no se da a conocer lo contrario, se uso el siguiente metodo para preparar el producto de percebe usado en los siguientes experimentos descritos: Se recogieron los organismos del entorno natural en aguas costeras noruegas mediante el metodo de retirada mecanica de animales progenitores de roca costera y retirando posteriormente los nauplios de los animales progenitores mediante trituracion mecanica y tamizado sobre filtros de acero inoxidable de 1000, 500 y 100 |im, en los que se recogieron los nauplios I entre los filtros de 100-500 |im. Se transfirieron directamente los nauplios a agua de mar a 70°C durante un mmimo de 15 minutos, y posteriormente se empaquetaron en bolsas laminadas de aluminio tratables en retorta con gas N2 y se esterilizaron en una retorta a 112°C y 1,7 bar durante 40 minutos.
I. Recoleccion de huevos de percebe, nauplios de estadio I de percebes sesiles:
Los percebes adultos maduros son sesiles y normalmente se fijan a diferentes sustratos. Dado que los huevos y nauplios de estadio I se incuban en el percebe sesil y posteriormente se liberan, un metodo de recoleccion preferido para estos estadios de vida incluye retirar el percebe sesil de los sustratos en los que esta fijado junto con los huevos y las larvas de nauplio I. Tales sustratos pueden ser normalmente superficies de materiales tales como piedras, madera, hormigon y material de plastico. Los huevos y nauplios de estadio I pueden recolectarse y aislarse de criaderos naturales o artificiales de percebes.
Los percebes sesiles se retiran normalmente mediante fuerzas mecanicas tales como raspado, rotura, trituracion, uso de presion, etc. Otro metodo preferido particular son los chorros de agua usando agua a alta presion.
El material biologico retirado que comprende huevos y nauplios de estadio I se recoge para su procesamiento adicional. Si los percebes adultos se desprenden de la superficie junto con los huevos y nauplios de estadio I, se recogen junto con los estadios de vida tempranos y se separan preferiblemente unos de otros en una etapa realizada adicionalmente.
Si los huevos y nauplios de estadio I no se liberan de los organismos adultos tras desprenderse los organismos
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sesiles de la superficie, se realiza una separacion adicional de los organismos. Normalmente se usan fuerzas mecanicas tales como rotura y trituracion. Una ventaja es que los nauplios o huevos no se destruyan o se destruyan lo menos posible. Un metodo alternativo incluye lavar con agua a alta presion (chorros de agua) para liberar los huevos y nauplios de estadio I del percebe adulto.
Posteriormente se separan los animales adultos de los huevos y nauplios de estadio I usando un metodo de separacion adecuado. Se prefiere usar un metodo de separacion mecanica tal como tamizado, filtracion y/o centrifugacion.
El tamizado puede llevarse a cabo, por ejemplo, usando filtros con un tamano de malla de 1000, 500 y 100 |im (por ejemplo, un filtro de acero inoxidable), en los que los nauplios I se recolectan entre los filtros de 100-500 |im.
Un metodo de recoleccion alternativo es un metodo en el que los percebes maduros que comprenden los huevos, nauplios de estadio I no se retiran de sus sustratos. En estos metodos, los huevos y nauplios de estadio I se retiran mediante lavado de los percebes maduros mediante chorros de agua sin desprender los organismos adultos de la superficie. Posteriormente se recogen los huevos y nauplios de estadio I para su procesamiento adicional. Opcionalmente, se separan los huevos y nauplios de estadio I aislados en fracciones de diferentes tamanos mediante un metodo de separacion mecanica, seleccionado preferiblemente de tamizado, filtracion y/o centrifugacion.
Por tanto, segun la presente invencion se realizan normalmente las siguientes etapas de metodo para recolectar y aislar huevos y nauplios de estadio I de un percebe sesil:
i. ) retirar el percebe maduro sesil de la superficie en la que esta fijado mediante fuerzas mecanicas y/o chorros de agua;
ii. ) recoger los percebes maduros retirados junto con los huevos y nauplios de estadio I para procesamiento adicional;
iii. ) si es necesario, liberar los huevos y nauplios de estadio I del percebe maduro mediante el uso de fuerzas mecanicas y/o lavado; y
iv. ) separar el material de huevos/nauplios de los percebes maduros mediante un metodo de separacion mecanica, seleccionado preferiblemente de tamizado, filtracion y centrifugacion.
De manera opcional y adicional, se lleva a cabo una separacion de los huevos y nauplios de estadio I aislados en fracciones de diferentes tamanos mediante un metodo de separacion mecanica, seleccionado preferiblemente de tamizado, filtracion y/o centrifugacion, o bien simultaneamente a la etapa iv.) o bien despues de la misma.
Alternativamente, como metodo para recolectar y aislar huevos y nauplios de estadio I a partir de un percebe sesil se llevan a cabo las siguientes etapas:
i. ) retirar mediante lavado huevos y nauplios de estadio I de los percebes maduros adultos mediante chorros de agua,
ii. ) recoger los huevos y nauplios de estadio I para su procesamiento adicional;
iii. ) opcionalmente separar los huevos y nauplios de estadio I aislados en fracciones de diferentes tamanos mediante un metodo de separacion mecanica, seleccionado preferiblemente de tamizado, filtracion y/o centrifugacion.
Los estadios de vida tempranos recolectados de percebes progenitores consisten en una amplia mayona de nauplio de estadio I. Normalmente, solo se encuentran pequenas cantidades de huevos y dependiendo de la estacion apenas se encuentran huevos en algunos casos. De esta manera, los estadios de vida tempranos recolectados solo comprenden sustancialmente nauplio de estadio I justo despues de la recoleccion. Con frecuencia, se observan algunas cantidades minoritarias de nauplio de estadio II en el material aislado. Esto esta provocado probablemente porque algunas de las larvas de nauplio en estadio I se desarrollan para dar el estadio II durante la recoleccion. La cantidad/el numero de larvas de nauplio de estadio II depende del tiempo empleado para recolectar y desde la recoleccion hasta que se conservan las muestras. Si se lleva a cabo conservacion directamente o dentro de un breve periodo de tiempo tras la recoleccion, no se encuentran nauplios de estadio II o su presencia es tan baja que es despreciable. Un producto preferido segun la presente invencion tiene una alta cantidad de larvas de nauplio de estadio I y, por tanto, se prefiere que el periodo de tiempo entre la recoleccion y conservacion sea breve con el fin de detener el desarrollo adicional del nauplio de estadio I para dar nauplio de estadio II. Lo mas preferido es una conservacion directa tras la recoleccion para detener el desarrollo adicional asf como para mantener la calidad mas optima del material recolectado.
Un pienso preferido segun la presente invencion tiene una composicion inicial (lo que significa una composicion antes de la adicion opcional de cualquier ingrediente adicional) en la que al menos el 70% del material aislado es nauplio de estadio I, mas preferiblemente al menos el 80%, incluso mas preferiblemente al menos el 90%, incluso
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mas preferiblemente al menos el 95%, y lo mas preferiblemente al menos el 99% del material aislado es nauplio de estadio I en relacion con el peso total o numero total de organismos comprendidos en el producto.
Ademas, un pienso preferido segun la presente invencion para su uso como alimentacion para estadios de vida iniciales de animales acuaticos tales como larvas de peces marinos tiene una baja cantidad de huevos. El motivo para esto es que se encuentra que los huevos de percebes son menos digeribles que las larvas de nauplio I en pruebas de alimentacion llevadas a cabo con larvas de peces marinos en el contexto de la presente invencion. Sin limitarse a ninguna teona, se supone que particularmente la cascara/membrana de huevo es diffcil de digerir para un pez marino precoz. Por tanto, se prefiere que un producto alimenticio, especialmente para su uso por larvas de peces marinos, segun la presente invencion tenga una cantidad de huevos que sea de menos del 30%, mas preferiblemente menos del 20%, incluso mas preferiblemente menos del 10% y lo mas preferiblemente menos del 5% en relacion con el peso o numero de organismos comprendidos en el producto.
Ademas, un pienso preferido segun la presente invencion para su uso como alimento para estadios de vida iniciales de animales acuaticos tales como larvas de peces marinos tiene una baja cantidad de larvas de nauplio de estadio
II. La forma exterior del nauplio de estadio II, que ha desarrollado cuernos frontales y otros apendices como los estadios de nauplio posteriores, puede ser menos adecuada como partfculas de alimentacion en comparacion con los primeros estadios sin cuernos ni otros apendices.
En casos en los que los estadios vivos tempranos retirados de percebes se mantienen vivos y se incuban en agua en condiciones adecuadas (por ejemplo, se mantienen en agua de mar, y se almacenan en la oscuridad y en frio) hasta que tiene lugar el procesamiento durante un periodo de tiempo tras la recoleccion, el desarrollo de huevos y larvas de nauplio I aislados de la cavidad de los percebes maduros avanza fuera del progenitor. Por tanto, los nauplios de primer estadio pueden posiblemente eclosionar de los huevos y los nauplios de estadio I se desarrollan adicionalmente para dar nauplios de estadio II durante tal incubacion. Al incubar los animales durante un tiempo definido en condiciones adecuadas, es posible por tanto influir en la composicion del producto conservado posteriormente en cuanto a la cantidad de huevos y nauplios de estadio I o II. Por tanto, si es deseable, tambien es posible obtener un producto nutricional con una alta cantidad de nauplios de estadio II. Dado que la conservacion detendra el desarrollo adicional, es posible controlar la composicion segun la duracion de la incubacion tras la recoleccion. En el contexto de la presente invencion, se mostro que los nauplios de estadio I recolectados y fraccionados, que se incubaron en agua de mar a 8°C, dieron como resultado una cantidad del 92% de estadio II tras 12 horas de incubacion.
En casos en los que hay una mezcla de diferentes estadios de nauplios y/o huevos, puede realizarse una etapa de separacion opcional de los huevos, nauplios de estadio I y nauplios de estadio II aislados en fracciones de diferentes tamanos mediante un metodo de separacion mecanica, seleccionado preferiblemente de tamizado, filtracion y/o centrifugacion.
Alternativamente, puede usarse luz para separar larvas de nauplio de huevos, ya que se sabe que las larvas de nauplio de los percebes son fototacticas. Se encuentra que longitudes de onda en el intervalo de 520 a 530 nm son optimas en la atraccion de nauplios cinipedos de dos especies diferentes, pero tambien se encontro que otras longitudes de onda eran eficaces (Barnes, H.; Klepal, W. 1972. Phototaxis in stage I nauplius larvae of two cirripedes. J. Exp. Mar. Biol. And Ecol. vol. 10 (3), pags. 267-273).
Los metodos descritos para recolectar tienen la gran ventaja de que el material obtenido esta libre de cualquier otra especie planctonica. Los metodos de recoleccion que incluyen tomas de plancton de organismos que nadan libremente a partir del entorno natural siempre tendran otras especies de la misma fraccion y, por tanto, un producto no puro. Usando los metodos de la presente invencion, esto puede evitarse. Ademas, es posible obtener y recolectar solo los estadios de desarrollo mas tempranos de percebes mediante estos metodos de aislamiento directo a partir de los percebes maduros.
II. Conservacion de huevos, nauplios de estadio I y/o nauplios de estadio II de percebes
Se prefiere ademas que el material biologico aislado obtenido que comprende o consiste sustancialmente en huevos y/o nauplios de estadio I de percebes, o en combinacion con nauplio de estadio II, se conserve para su almacenamiento adicional. Los metodos segun la presente invencion incluyen preferiblemente uno o varios metodos elegidos de enfriamiento y/o congelacion de los animales, tratamiento termico, uso de una atmosfera de gas modificada o controlada, secado, irradiacion, conservacion a alta presion y tratamiento con productos qmmicos conservantes. Preferiblemente, se combinan varios metodos entre sf para obtener una estabilidad en almacenamiento y conservacion optima del producto. El metodo aplicado depende del uso posterior del material, los requisitos en cuanto a su calidad asf como la duracion del periodo de tiempo para el almacenamiento y las condiciones de almacenamiento en general.
Dependiendo del tiempo de almacenamiento, se usa enfriamiento por debajo de la temperatura ambiente, preferiblemente a 4°C o menos. Una realizacion preferida incluye el almacenamiento del producto por debajo del punto de congelacion de los animales, mas preferiblemente hasta una temperatura de -18°C o menos y lo mas preferiblemente hasta una temperatura de -80°C o menos. Si se desea un almacenamiento estable particular puede
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usarse incluso nitrogeno Ifquido para el almacenamiento. La congelacion del material por debajo del punto de congelacion, preferiblemente a o por debajo de -80°C, directamente o poco despues de la recoleccion es un metodo de conservacion sencillo y eficaz que da como resultado una calidad suficiente del material conservado tambien despues del almacenamiento a largo plazo de 6 meses para muchas aplicaciones posteriores. Sin embargo, la estabilidad en almacenamiento del producto puede aumentarse si se combina el enfriamiento/congelacion con otros metodos de conservacion. Se prefiere si se proporciona una calidad y estabilidad muy altas del producto final. Por tanto, en una realizacion preferida el material biologico conservado mediante enfriamiento se somete a tratamiento termico antes del enfriamiento o la congelacion. Tambien puede combinarse el enfriamiento con almacenamiento bajo una atmosfera de gas controlada o modificada.
El almacenamiento en una atmosfera de gas modificada incluye preferiblemente almacenamiento bajo una atmosfera de nitrogeno, por ejemplo en un recipiente estanco a los gases tal como un envase de plastico. En una realizacion preferida, el tratamiento en atmosfera controlada se combina con una temperatura reducida tal como se describio anteriormente. Alternativamente, puede usarse envasado a vado.
Metodos de conservacion preferidos que comprenden tratamiento termico pueden ser, por ejemplo, calentamiento del material hasta menos de 70°C, un tratamiento de pasteurizacion mediante tratamiento termico a al menos 70- 75°C, o esterilizacion mediante al menos 100°C, preferiblemente mediante 112°C o mas durante un periodo de tiempo predefinido. El metodo preferido elegido dependera del uso posterior del material asf como del periodo de almacenamiento previsto.
Un metodo de conservacion preferido particular segun la presente invencion es la pasteurizacion a una temperatura de al menos 70°C durante, preferiblemente, al menos 15 minutos, preferiblemente al menos a 75°C. Posteriormente, el material preferiblemente se congela y se almacena a -80°C o menos. Pruebas han mostrado que se encuentran altas calidades del material obtenido si se almacena hasta 6 meses en esas condiciones. Ventajas con el metodo son que se destruyen todas las enzimas autoltticas y se destruyen los estadios vegetativos de microorganismos lo que contribuye a un producto mas estable. El procedimiento puede adaptarse segun el tipo de producto, pH, contenido en sales, contenido en agua, contenido en protemas, etc.
Otro metodo de conservacion preferido incluye el calentamiento del material hasta una temperatura de menos de 70°C durante al menos 15 minutos, seguido por congelacion y posterior almacenamiento a -80°C o menos. Preferiblemente, la temperatura debe ser de al menos 55-60°C, preferiblemente 60°C o mas, con el fin de desactivar la mayor parte de las enzimas inherentes. Pruebas han mostrado que se encuentran altas calidades del material obtenido si se almacena hasta 6 meses en esas condiciones. Una ventaja del metodo es que el producto se vuelve mas estable frente a la descomposicion y autolisis. Sin embargo, algunos grupos de enzimas autolfticas todavfa permaneceran intactas y no se destruiran necesariamente todos los estadios vegetativos de microorganismos. El hecho de que todavfa estan presentes al menos algunas de las enzimas puede ser una ventaja si se usa como alimento para larvas de peces marinos en sus estadios de vida iniciales. Estas pueden requerir enzimas intactas que vienen con el alimento para poder digerirlo.
Sin limitarse a lo siguiente, ejemplos tfpicos para metodos de conservacion y tiempo de almacenamiento combinados segun la presente invencion son:
- Semipasteurizacion mediante calentamiento a entre 55 y menos de 70°C durante al menos 15 minutos, seguido por congelacion y posterior almacenamiento a -80°C o menos durante hasta seis meses.
- Pasteurizacion a 70°C o mas durante 20 minutos y despues congelacion y almacenamiento a -80°C o menos durante hasta seis meses.
- Congelacion y almacenamiento a -80°C o menos durante hasta seis meses con o sin conservacion anterior. Para aumentar adicionalmente la estabilidad en almacenamiento, las temperaturas elegidas para el almacenamiento pueden ser incluso inferiores. Preferiblemente, la temperatura usada para el almacenamiento puede ser de -86°C o menos, mas preferiblemente -160°C o menos, lo mas preferiblemente -196°C.
- Pasteurizacion a una temperatura de al menos 70°C durante 20 minutos y despues esterilizacion a 112°C durante 40 minutos, almacenamiento durante hasta 6 meses a temperatura ambiente con aire o gas N2 dentro del material de envasado.
El material biologico, que comprende o que comprende sustancialmente huevos y nauplios de estadio I de percebes, tambien puede conservarse mediante adicion de productos qmmicos conservantes. Normalmente, estos productos qmmicos pueden incluir benzoato de sodio, sorbato de potasio, sulfitos, etc. Estos se anaden preferiblemente en bajas cantidades para inhibir y/o estancar el crecimiento bacteriano en la materia prima.
Hacer que la materia prima sea alcalina, es decir ajustar a un pH de mas de 9 mediante la adicion de un producto qmmico alcalino, impedira que muchas especies bacterianas se desarrollen para dar estadios vegetativos. Alternativamente, acidificar el material por debajo de pH 4,6 tambien impedira que la mayona de las bacterias, incluyendo Clostridium botulinum, se desarrollen a partir de esporas para dar estadios vegetativos.
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El material biologico recolectado tambien puede conservarse mediante secado, mas preferiblemente mediante liofilizacion. El secado o la liofilizacion pueden llevarse a cabo directamente o despues de uno de los metodos de conservacion descritos anteriormente.
III. Composicion bioquimica
Los huevos y nauplios de estadio I son ricos en acidos grasos altamente insaturados, especialmente de DHA y EPA (vease la tabla 2 para un material que consiste sustancialmente en nauplio de estadio I, es decir, mas del 90% en numero de individuos), lo que hace que sean adecuados y beneficiosos para el consumo por seres humanos y animales.
Los nauplios I de percebes comprenden hasta aproximadamente el 70% de fosfatidilcolina en sus lfpidos polares. Se reconoce que la fosfatidilcolina es beneficiosa para el crecimiento y la supervivencia de larvas de peces marinos.
En la presente invencion, se encontro sorprendentemente que los huevos y nauplios de estadio I de percebes, que tampoco son un alimento natural para estadios de vida tempranos de peces y crustaceos, son adecuados como alimento para estas especies.
En una realizacion preferida segun la presente invencion, se extrae un producto lipfdico tal como un aceite de una materia prima que comprende principalmente huevos y/o nauplios de estadio I. Este producto lipfdico puede usarse, por ejemplo, en aplicaciones en las que se usan actualmente otros aceites marinos tales como de pescado, kril, copepodos o mairnferos marinos.
Composicion tras el tratamiento de conservacion y el almacenamiento:
Se recolectaron nauplios de percebes de estadio I de S. balanoides y posteriormente se trataron mediante diferentes metodos para la conservacion y el almacenamiento. Tras la conservacion y el almacenamiento, se analizo la composicion de lfpidos. Se extrajeron lfpidos segun el metodo de Blight y Dyer 1959 (Blight, E. G. y Dyer, W.J. 1959. A rapid method of total lipid extraction and purification. Cand. J. Biochem. Physiol. 37: 911-917) y se analizo el contenido en lfpidos total mediante gravimetna. La cantidad total de lfpidos con respecto al peso en seco estaba en el intervalo del 10-12%.
Se analizaron las clases de lfpidos basandose en Reynold Homan, Maureen K. Anderson, Journal of Chrom. B. 708 (1998) 21-26 y Robert A. Moreau, Lipids, vol. 41, n.° 7 (2006). Se realizaron analisis cuantitativos de acidos grasos segun el metodo oficial de la AOCS Ce 1b-89.
Se usaron los siguientes tratamientos experimentales para la conservacion y el almacenamiento:
A) Pasteurizacion a 70°C durante 20 min y despues congelacion y almacenamiento a -80°C durante seis meses.
B) Congelacion y almacenamiento a -80°C durante seis meses.
C) Pasteurizacion a 70°C durante 20 min y despues esterilizacion a 112°C durante 40 min, almacenamiento durante 6 meses a temperatura ambiente con aire dentro del material de envasado.
D) Pasteurizacion a 70°C durante 20 min y despues esterilizacion a 112°C durante 40 min, almacenamiento durante 6 meses a temperatura ambiente con gas nitrogeno dentro del material de envasado.
Tabla 1. Porcentaje de lfpidos polares y neutros y acidos grasos de nauplio I de S. balanoides usando diferentes metodos de conservacion; A) Pasteurizacion a 70°C durante 20 min y despues congelacion y almacenamiento a -80°C durante seis meses; B) Congelacion y almacenamiento a -80°C durante seis meses; C) Pasteurizacion a 70°C durante 20 min y despues esterilizacion a 112°C durante 40 min, almacenamiento durante 6 meses con aire dentro del material de envasado a temperatura ambiente; D) Pasteurizacion a 70°C durante 20 min y despues esterilizacion a 112°C durante 40 min, almacenamiento durante 6 meses con gas nitrogeno dentro del material de envasado a temperatura ambiente.
- % de grasa total
- Conservacion y metodo de almacenamiento
- > CD o D
- Lfpidos polares
- 71 52 71 66
- Lfpidos neutros
- 29 48 29 34
- - acidos grasos libres
- 1 18 3 3
- % de acidos grasos totales (analizados en el tratamiento A)
- DHA
- 24
- EPA
- 27
- Suma de acidos grasos poliinsaturados (n-3)
- 53
El porcentaje de acidos grasos omega-3 poliinsaturados (acidos grasos n-3) fue alto en todas las muestras analizadas (tabla 1), principalmente debido al alto contenido en acido docosahexanoico (DHA, 22:6n-3) y acido eicosapentanoico (EPA, 20:5n-3). Se reconoce que estos dos acidos grasos son particularmente importantes durante el desarrollo temprano de animales marinos, especialmente de larvas de peces marinos. Pero tambien se 5 encuentra que son beneficiosos en el desarrollo y la nutricion de otros animales, incluyendo seres humanos.
El metodo de conservacion afecto a la cantidad de lfpidos neutros y polares en el material almacenado. El metodo de conservacion sin tratamiento termico (tratamiento B), que solo inclrna congelacion del material, dio como resultado un porcentaje reducido de lfpidos polares y una cantidad aumentada de lfpidos neutros en relacion con los lfpidos totales. Ademas, se aumento la cantidad de material graso libre cuando solo se uso congelacion. Esto puede 10 indicar una actividad lipolftica en estas muestras, mientras que enzimas sensibles al calor tales como las lipasas parecen inactivarse por calor en los demas tratamientos. Aunque el tratamiento termico dio como resultado un producto mas estable durante el almacenamiento en cuanto a la composicion de lfpidos, puede usarse solo congelacion en aplicaciones en las que la calidad obtenida es suficiente para el proposito seleccionado ya que todavfa dio como resultado una composicion aceptable incluso despues del almacenamiento durante 6 meses. Por 15 tanto, dependiendo de la aplicacion posterior y de la calidad requerida, puede usarse congelacion como metodo alternativo y mas sencillo para la conservacion en comparacion con los metodos en los que se combina la congelacion/enfriamiento con tratamiento termico.
Tabla 2. % de composicion de acidos grasos de acidos grasos totales en nauplio I de S. balanoides de tratamiento A, analizado mediante el laboratorio noruego de analisis NOFIMA Biolab. AGPI son acidos grasos poliinsaturados.
- Acidos grasos
- % de acidos grasos totales
- 14:0
- 1,5
- 16:0
- 15,6
- 18:0
- 3,4
- 20:0
- <0,2
- 22:0
- <0,2
- 16:1 n-7
- 2,4
- 18:1 (n-9)+ (n-7)+ (n-5)
- 15,1
- 20:1 (n-9)+ (n-7)
- 4,5
- 22:1 (n-11)+ (n-9)+ (n-7)
- 1,1
- 24:1 n-9
- 0,2
- 16:2 n-4
- 0,2
- 16:3 n-4
- <0,2
- 18:2 n-6
- 0,8
- 18:3 n-6
- 0,2
- 20:2 n-6
- 0,6
- 20:3 n-6
- <0,2
- 20:4 n-6
- 1,1
- 22:4 n-6
- <0,2
- 18:3 n-3
- 0,4
- 18:4 n-3
- 0,9
- 20:3 n-3
- <0,2
- 20:4 n-3
- 0,2
- 20:5 n-3
- 27
- 21:5 n-3
- 0,4
- 22:5 n-3
- 0,2
- 22:6 n-6
- 24
- Suma de acidos grasos saturados
- 20,5
- Suma de acidos grasos monoinsaturados
- 23,4
- Suma de acidos grasos AGPI (n-6)
- 2,6
- Suma de acidos grasos AGPI (n-3)
- 53,3
- Suma de acidos grasos AGPI en total
- 56,1
20 IV. Ensayos de alimentacion usando nauplio de percebes I conservados segun la presente invencion
Se sometio a prueba un alimento que consistfa principalmente en nauplios de percebes de estadio I de Semibalanus balanoides en experimentos de cna semiintensa e intensa con larvas de crustaceos y peces marinos. La materia prima conservada usada como alimentacion se preparo tal como se describio anteriormente al comienzo de la seccion de descripcion detallada. La alimentacion tema una composicion de al menos el 90% en numero de 25 individuos de nauplios I y entre el 0-10% de nauplios de estadio II.
Experimento 1: Ensayo con lenguado comun, Solea solea
Se dividieron larvas en dos grupos experimentales cada uno de 500 ± 10 individuos (tres tanques de repeticion para
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cada grupo de dieta) a una concentracion de 10 ind/l. A los grupos de experimento se les alimento de la siguiente manera:
Grupo A (control): alimentado con una dieta de rotiferos enriquecidos (6 ind/ml) desde los d^as 3-9 tras la eclosion (ph), seguido por una dieta de rotfferos (3 ind/ml) en combinacion con nauplios de Artemia (2 ind/ml, respectivamente) desde los dfas 9-12 y finalmente seguido por una dieta que consistfa unicamente en nauplios de Artemia (4 ind/ml) desde el dfa 12 hasta el final del experimento.
Grupo B: alimentado con el 50% de rotfferos (3 ind/ml) mas el 50% de nauplios de percebes (3 ind/ml), anteriormente conservados, desde los dfas 3-9, seguido por el 50% de Artemia (3 ind/ml) mas el 50% de nauplios de percebes (3 ind/ml) los dfas 9-14.
Se realizaron tomas de muestras de larvas en los dfas 6 ph (estadio de rotffero temprano), 9 ph (estadio de rotifero tardfo), 12 ph (estadio de rot'\feros/Artemia mixtos) y 14 ph (comienzo del estadio de Artemia).
Se enriquecieron nauplios de rotfferos y Artemia con Algamac 3000 (Aquafauna Bio-Marine, Inc., Hawthorne, CA, EE.UU.) usando 0,5 g/millon de rotiferos y 0,2 g/100.000 nauplios de Artemia antes de la alimentacion.
El crecimiento fue mayor en el grupo alimentado con nauplios de percebes I que en el grupo alimentado con la dieta de control (figura 1). El peso medio de las larvas de peces a los que se les ofrecieron nauplios de percebes (grupo B) fue un 21% mayor que en el control (grupo A) en el dfa 14, y la longitud media de las larvas fue un 14% mas larga en el grupo B que en el grupo de control. La supervivencia fue significativamente mayor en el grupo B (el 69% ±2) en comparacion con el control (65% ±2). Adicionalmente, se redujeron larvas de lenguado con mala pigmentacion desde el 5% en el control hasta el 3% en las larvas de peces a las que se les ofrecieron nauplios I de S. balanoides.
Experimento 2: Ensayo con camarones, L. vannamei
Se realizo un ensayo con camarones en un criadero comercial y se comparo con regfmenes de alimentacion viva tradicionales comunmente usados que incluyen plancton vivo, que son nauplios de Artemia. Se ofrecieron nauplios de percebes I como sustituto de nauplios de Artemia (grupo A). El grupo de control recibio nauplios de Artemia (grupo B).
Cuando se completo el ensayo de alimentacion, el peso de camarones en tanques de criadero a los que se les ofrecieron nauplios de percebes I (grupo A) fue un 16% mayor que en el grupo de control sin percebes. Esto se debe tanto a una tasa de crecimiento como a una supervivencia superior de los camarones.
Experimento 3. Ensayo comercial con lenguado senegales (Solea senegalensis)
Se realizo un ensayo comercial con lenguado senegales en tanques de criadero de 2,7 m3, usando los nauplios I de S. balanoides en uno de los tanques de criadero y nauplios I de Artemia vivos enriquecidos de manera convencional, tal como se usan comunmente en criaderos comerciales, en varios de los otros tanques de criadero. Las larvas de peces a las que se les ofrecieron nauplios I de S. balanoides no teman mala pigmentacion, mientras que el 5% de los tanques de control presentaron tal deformacion. Ademas, S. senegalensis a los que se les ofrecieron nauplios de estadio I de S. balanoides teman una dispersion de tamano significativamente mas homogenea que los del control.
Experimento 4. Ensayos de alimentacion con larvas de halibut del Atlantico, de bacalao del Atlantico y de maragota
Se realizaron tres ensayos de alimentacion industriales usando los nauplios I de S. balanoides conservados mencionados anteriormente en tanques de criadero de 5 a 6,6 m3 que conteman larvas de halibut del Atlantico, de bacalao del Atlantico y de maragota, respectivamente. El objetivo del estudio era observar la velocidad de decantacion de la dieta que era nauplios de S. balanoides, y el apetito de las larvas de peces a las que se les ofrecio la nueva dieta. Tras una hora, se tomaron muestras del agua de superficie, y se observo una decantacion despreciable en ambos tanques de criadero. Cuando se tomaron muestras 4 horas tras la adicion de la dieta, el 25% de los nauplios de S. balanoides todavfa estaban en la capa de agua superior y estaba disponible para las larvas de peces. Se tomaron como muestras 25 larvas de maragota tras una hora, y se encontraron 3-20 nauplios de S. balanoides en los intestinos excepto por dos peces que no conteman nada de alimento. Se observaron directamente las larvas de halibut en los tanques de criadero y se alimentaron activamente con nauplios I de S. balanoides. Para el bacalao del Atlantico, se estudiaron el crecimiento y la supervivencia ademas de las velocidades de decantacion. El criadero de bacalao del Atlantico comercial experimento una tasa de crecimiento un 47% superior en cuanto al peso en comparacion con el control al que se le alimentaron rotfferos enriquecidos. Estas tasas de supervivencia obtenidas fueron las mas altas jamas alcanzadas en este criadero de bacalao.
Usar dietas de alimentacion no viva como la descrita en el presente documento siempre supone un desaffo, porque la velocidad de decantacion es con frecuencia demasiado alta, y las larvas de peces muestran muy poco apetito por una presa que no se mueve. En estos tres ensayos industriales se documenta que este problema se ha superado usando los nauplios I de S. balanoides como presa.
Los experimentos descritos mostraron altas tasas de supervivencia asf como un buen crecimiento y calidad de
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larvas cuando se usaron nauplios de percebes como dieta. Los huevos y nauplios I de percebes tienen intervalos de tamanos tipicos de desde 100 hasta 500 |im, y por tanto, cubren el espectro de tamano de la alimentacion viva actual en acuicultura marina (rotiferos de 100 - 300 |im y nauplios de Artemia normalmente de entre 350 - 800 |im).
Los resultados de los experimentos de alimentacion inicial llevados a cabo indican que los nauplios de percebes de estadio I son particularmente adecuados como primera alimentacion para larvas/juveniles de animales acuaticos en acuicultura. El material tambien puede usarse para animales ornamentales en general (vertebrados e invertebrados ornamentales). Usandolos como alimentacion o como suplemento alimenticio pueden superarse muchos de los problemas conocidos en la alimentacion inicial de larvas de peces, especialmente de larvas de peces marinos precoces. Las tasas de crecimiento, calidad de larvas y supervivencia mejoradas mostradas indican claramente esto.
Otros ensayos de alimentacion en los que el material tambien incluyo huevos y nauplios de estadio I que aun no habfan eclosionado completamente, sino que todavfa estaban rodeados por la cascara/membrana de huevo, indicaron que estos no eran tan adecuados en la alimentacion inicial de larvas de peces marinos ya que su digestibilidad en el intestino parece limitada. Esto puede deberse a que la cascara/membrana de huevo es mas diffcil de digerir.
Ademas, se supone que los nauplios de estadio I son mas adecuados para la primera alimentacion que nauplios de estadio II o incluso estadios de nauplios mas avanzados ya que estas ultimas han desarrollado cuernos y otros apendices que pueden reducir su ingestibilidad. Es probable que estos cuernos/apendices puedan servir como defensa frente a depredadores al menos para larvas de peces marinos en los estadios de vida iniciales. Por tanto, los cuernos en nauplios de estadio II pueden hacer que sean menos atractivos y adecuados como dieta para las larvas en comparacion con nauplios de estadio I.
Los resultados experimentales dados a conocer indican que puede usarse una alimentacion que comprende nauplios de estadio I de percebes o un material derivado de los mismos, como composicion farmaceutica, es decir, medicamento, en particular para curar y/o prevenir malos desarrollos asf como enfermedades que conducen a un crecimiento reducido y mortalidades superiores. Los resultados obtenidos dados a conocer en la cna de peces y camarones indican claramente que una composicion de este tipo mejora el crecimiento y la supervivencia de un animal tal como una larva de pez marino (experimentos 1 y 3) o un crustaceo (experimento 2).
Ademas, demuestra que el uso de esta composicion dio como resultado una reduccion de la mala pigmentacion en peces (experimentos 1 y 3). Especialmente en los peces planos, el desarrollo de anomalfas tales como migracion incompleta del ojo, mala pigmentacion y deformaciones del esqueleto son desaffos principales, observados y experimentados con frecuencia en la produccion intensa. Puede usarse una composicion segun la presente invencion para reducir estos efectos negativos y anomalfas en el desarrollo temprano.
El alimento natural para larvas de peces de especies marinas tales como bacalao, rodaballo y halibut consiste normalmente y en gran medida en especies pequenas y estadios jovenes de copepodos marinos, que estan presentes en las aguas costeras. Los huevos y nauplios de percebes que estan comprendidos dentro de los percebes maduros no estan disponibles para las larvas de peces y, por tanto, no sirven como alimentacion natural tipica para estadios de vida tempranos de peces.
En general, todos los percebes que incuban huevos y nauplios I en el animal progenitor son de interes en el contexto de la presente invencion. Una de las aplicaciones preferidas de la invencion descrita es util como primera alimentacion para larvas/juveniles de animales acuaticos en acuicultura o para animales ornamentales en general.
Pueden usarse huevos y nauplios de percebes como artfculos/ingredientes alimenticios para larvas de peces. Sin embargo, el material biologico aislado tambien puede usarse para otros fines de alimentacion tales como para alimentacion para vertebrados ornamentales (por ejemplo, peces) e invertebrados o crustaceos.
Un metodo para la alimentacion de animales acuaticos de criadero y/u organismos acuaticos ornamentales comprende preferiblemente las etapas de preparar un alimento que comprende nauplios de estadio I como ingrediente principal y opcionalmente otros ingredientes alimenticios convencionales. El alimento puede comprender adicionalmente huevos de percebes y nauplio de estadio II de percebe. Alternativamente, se usan directamente nauplio de estadio I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o estadio II nauplio como alimento sin aditivos adicionales. En una realizacion preferida, la alimentacion del material aislado de percebe (huevos/nauplios) especialmente para estadios vivos tempranos de peces y crustaceos, se combina con alimentacion de otro alimento vivo tal como rotfferos o Artemia. La dieta que comprende nauplios I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II de percebes tambien puede usarse en combinacion con dietas artificiales tales como microdietas, especialmente en el periodo de transicion de alimentacion con presa viva a alimentacion con alimento seco. El material que comprende nauplios I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II puede usarse como sustitucion parcial o total de alimento vivo durante la alimentacion inicial de larvas de peces marinos.
En una realizacion preferida, el pienso segun la presente invencion, especialmente el producto alimenticio, comprende sustancialmente solo material de percebe que consiste en nauplios I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II de dicho percebe.
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En otra realizacion preferida, el pienso segun la invencion consiste sustancialmente solo en material biologico derivado de nauplios I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II de un percebe y ningun otro ingrediente anadido.
Un metodo tipico para la alimentacion de animales acuaticos de criadero y/o vertebrados o invertebrados ornamentales (por ejemplo, segun las presentes invenciones) comprende las siguientes etapas:
i. ) preparar un alimento que comprende nauplio de estadio I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II y otros ingredientes de alimentos convencionales; o
ii. ) usar nauplios de estadio I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II directamente como alimento sin aditivos adicionales, y
iii. ) anadir el alimento a la unidad que comprende el animal que va a alimentarse mediante alimentacion manual o mediante medios de alimentacion automatica.
Por tanto, el alimento que comprende nauplios de percebes de estadio I o una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II puede anadirse a la unidad que comprende el animal que va a alimentarse mediante alimentacion manual o mediante medios de alimentacion automatica. La alimentacion puede llevarse a cabo de una manera discontinua o continua dependiendo de la aplicacion. Puede anadirse directamente tras la recoleccion o tras la conservacion y opcionalmente almacenamiento. Si se almacena a bajas temperaturas, puede anadirse, por ejemplo, tras descongelarse, descongelarse parcialmente o en un estado congelado.
En una realizacion preferida, el alimento se usa para larvas de peces marinos tales como larvas de bacalao del Atlantico, rodaballo, lubina, besugo, halibut.
En otra realizacion preferida, el alimento segun la presente invencion se usa para especies de criadero de crustaceos incluyendo especies que pertenecen al grupo de gambas, langosta, camaron, cangrejos, etc.
Por tanto, en la presente invencion se ha inventado un nuevo alimento para animales acuaticos, especialmente animales acuaticos de criadero en sus estadios vivos tempranos. En otra realizacion preferida, el alimento segun la presente invencion se usa para vertebrados ornamentales tales como peces asf como invertebrados tales como corales, anemonas, erizos de mar.
Basandose en su composicion bioqmmica, son posibles otras aplicaciones tales como para productos sanitarios, consumo por seres humanos, aditivos y suplementos alimenticios, productos medicinales, alimento funcional. Existe una necesidad de fuentes nuevas y alternativas de aceites marinos con un alto contenido en acidos grasos omega-3. Un material o aceite derivado/extrafdo de huevos y/o nauplios de percebes segun la invencion puede servir como tal nuevo recurso.
Se apreciara que las caractensticas de la invencion descritas anteriormente pueden modificarse sin apartarse del alcance de la invencion.
Definiciones de terminos:
Percebe: Por percebe quiere decirse un tipo de artropodo que pertenece a la infraclase Cirripedia en el subfilo Crustacea.
Percebe sesil: Percebe no movil fijado a una superficie.
Alimento funcional: Por alimento funcional quiere decirse un alimento que proporciona otras ventajas, no solo simplemente efectos nutricionales, sino tambien efectos tales como efectos para la salud, estimulacion de la respuesta inmunitaria, prevencion del riesgo de enfermedades, etc.
Pasteurizacion: Por pasteurizacion quiere decirse un procedimiento de calentamiento de un material mediante el cual se ralentiza la degradacion del material tratado al reducir el numero de microorganismos viables y/o inhibir el crecimiento de microorganismos en el producto pasteurizado.
Esterilizacion: Un procedimiento mediante el cual se destruye o se elimina toda la vida microbiana en el producto, incluyendo agentes transmisibles tales como hongos, bacterias, virus, esporas, etc.
Conservacion: Por conservacion del material biologico quiere decirse un procedimiento de tratamiento y manipulacion del material para detener o ralentizar la degradacion (por ejemplo, por microorganismos), perdida de calidad (por ejemplo, mediante oxidacion, rancidez), deterioro visual, actividades enzimaticas inertes, etc.) y/o valor nutricional y, por tanto, permite un almacenamiento del alimento mas duradero.
Producto nutricional: Por el termino producto nutricional quiere decirse cualquier producto nutricional que puede usarse/consumirse por seres humanos y/o animales, que comprende productos tales como un alimento, un producto sanitario, un suplemento alimenticio y/o un alimento funcional.
Claims (19)
1.
2.
5 3.
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5.
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20 7.
8.
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10.
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12.
40 13.
45
14.
REIVINDICACIONES
Pienso caracterizado porque el pienso comprende huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe.
Pienso segun la reivindicacion 1, en el que el pienso comprende ademas nauplio de estadio II de un percebe.
Pienso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que al menos el 70% del material comprendido es nauplio de estadio I, mas preferiblemente al menos el 80%, incluso mas preferiblemente al menos el 90%, incluso mas preferiblemente al menos el 95%, y lo mas preferiblemente al menos el 99% del material en relacion con el peso en humedo total o el numero total de organismos.
Pienso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el contenido de huevos es de menos del 30%, mas preferiblemente menos del 20%, incluso mas preferiblemente menos del 10% y lo mas preferiblemente menos del 5% en relacion con el peso en humedo o el numero de organismos comprendidos en el producto.
Pienso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el contenido de nauplio de percebes de estadio II es de menos del 50%, mas preferiblemente el 20%, incluso mas preferiblemente menos del 10% y lo mas preferiblemente menos del 5% en relacion con el peso en humedo o el numero de organismos comprendidos en el producto.
Pienso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores en el que el material de percebe comprendido en el pienso solo comprende nauplio de estadio I, o solo comprende huevos, o solo comprende una combinacion de nauplio de estadio I con huevos y/o nauplio de estadio II de un percebe.
Pienso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el material no comprende estadios de desarrollo vivos de percebes.
Pienso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque dicho pienso es un producto alimenticio para un animal acuatico, preferiblemente para un animal acuatico de criadero seleccionado de peces y crustaceos, para un vertebrado ornamental o para invertebrado ornamental y lo mas preferiblemente para estadios vivos tempranos de un pez o de un crustaceo, que es preferiblemente una especie seleccionada de una larva de pez marino, un cangrejo, un camaron, una gamba y una langosta.
Pienso segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque dicho pienso comprende o consiste en un aceite derivado de huevos y/o nauplio de estadio I o una combinacion de huevos y/o nauplio de estadio I con nauplio de estadio II de un percebe.
Uso de huevos y/o nauplio de estadio I de un percebe para consumo por animales y seres humanos, como suplemento alimenticio, producto sanitario y/o alimento funcional.
Uso segun la reivindicacion 10, mediante el cual un animal acuatico de criadero, un vertebrado ornamental o un invertebrado ornamental, se alimenta con un producto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-9, o bien directamente o bien comprendido en un alimento con otros ingredientes.
Metodo para recolectar y aislar huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe maduro, sesil, fijado a una superficie, caracterizado porque los huevos y/o nauplios de estadio I se retiran directamente del percebe sesil mediante lavado dichos huevos y nauplios de estadio I de los percebes maduros sesiles mediante chorros de agua, y recogiendolos posteriormente.
Metodo para recolectar y aislar huevos y/o nauplios de estadio I de un percebe maduro, sesil, fijado a una superficie para su uso en un producto segun la reivindicacion 1, caracterizado porque los huevos y/o nauplios de estadio I:
- se retiran del percebe sesil tras haberse desprendido dicho percebe de dicha superficie mediante fuerzas mecanicas y/o chorros de agua, y los percebes maduros retirados se recogen junto con los huevos y/o nauplios de estadio I, y
- liberar opcionalmente huevos y/o nauplios de estadio I todavfa fijados al percebe tras dicho desprendimiento mediante el uso de fuerzas mecanicas y/o lavado; y
- separar los huevos y/o nauplios de los percebes maduros mediante un metodo de separacion.
Metodo segun la reivindicacion 12 o 13, en el que los huevos y nauplios de estadio I obtenidos se fraccionan tras la liberacion de los percebes maduros en fracciones de diferentes tamanos o bien
- mediante un metodo de separacion mecanica, seleccionado preferiblemente de tamizado, filtracion y/o
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20
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centrifugacion, o bien
- mediante aplicacion de luz que provoca una respuesta fototactica de las larvas de nauplio.
15. Metodo segun cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el metodo comprende una etapa adicional para aumentar el contenido de nauplios de estadio I en el material tras la recoleccion mediante incubacion de los huevos y/o nauplios de estadio I vivos aislados todavfa comprendidos en la membrana de huevo durante un periodo de tiempo definido en agua de mar para la eclosion/liberacion de nauplios I que todavfa estan situados en la membrana de huevo para dar nauplios I que nadan libremente.
16. Metodo segun la reivindicacion 15, en el que la temperatura de incubacion es de entre 5 y 10°C, mas preferiblemente de aproximadamente 8°C y el tiempo de incubacion es de entre 5 y 12 horas, preferiblemente de aproximadamente 10 horas.
17. Metodo para conservar un material de percebe para un producto segun cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en el que los nauplios y/o huevos recolectados comprendidos se tratan mediante uno o varios de los metodos seleccionados de enfriamiento por debajo del punto de congelacion de los animales, tratamiento termico, secado, liofilizacion, almacenamiento en una atmosfera modificada y adicion de productos qmmicos conservantes.
18. Metodo segun la reivindicacion 17, en el que el material de percebe se conserva mediante un tratamiento termico que se elige de calentamiento hasta una temperatura de entre 55°C y menos de 70°C, pasteurizacion mediante calentamiento hasta al menos 70°C, preferiblemente por encima de 75°C y esterilizacion por encima de 100°C y opcionalmente se almacena.
19. Metodo segun la reivindicacion 17 o 18, en el que el material se almacena por debajo del punto de congelacion, preferiblemente a -18°C o menos, mas preferiblemente a -80°C o menos con o sin conservacion previa.
20. Metodo segun la reivindicacion 17 o 18, en el que el material se almacena en una atmosfera modificada, preferiblemente en gas nitrogeno, mas preferiblemente se almacena en una atmosfera modificada y a una temperatura por debajo de 4°C con o sin conservacion previa.
21. Composicion que comprende huevos y/o nauplio de estadio I de percebes para su uso en un tratamiento profilactico o medico.
22. Composicion segun la reivindicacion 21, para la mejora del crecimiento, la supervivencia y/o mala pigmentacion de un animal, preferiblemente de un animal acuatico.
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